慢性乙型肝炎患者血清HBV-DNA与e抗原含量的关系

373例乙型肝炎患者HBV-DNA定量与乙型肝炎病毒核心抗原及肝脏酶学指标的相关性分析

373例乙型肝炎患者HBV-DNA定量与乙型肝炎病毒核心抗原及肝脏 酶学指标的相关性分析 目的探讨HBV-DNA定量和乙型肝炎病毒核心抗原在诊断乙型肝炎和评价病情中的意义。方法收集373例乙型肝炎患者的HBV-DNA定量、HBeAg 与丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（AST）、谷氨酰转移酶（GGT）等实验室诊断指标，进行相关性分析。结果（1）HBV-DNA定量与HBeAg具有相关性（P 0.05）。结论（1）HBeAg一定程度上反映了病毒在体内的复制情况，但HBV-DNA定量是评价体内病毒复制更直接的指标。（2）HBV-DNA定量结果与肝功能受损情况相关，高病毒载量是肝功能受损的危险因素。 [Abstract] Objective To explore the significance of quantitative HBV-DNA and HBeAg in the diagnosis of hepatitis B and in the evaluation of disease. Methods Three hundred and seventy-three cases of hepatitis B patients with HBV-DNA quantitative, HBeAg, ALT, AST and GGT laboratory diagnostic indicators were collected, and the correlation analysis was conducted. Results (1)There was correlation between HBV-DNA quantitative and HBeAg (P 0.05). Conclusion (1)HBeAg reflects the replication of the virus in the body to a certain extent. However, HBV-DNA quantitative is a more direct indicator to evaluate the viral replication in vivo. (2)HBV-DNA quantitative relates to the liver function impairment, and high viral load is a risk factor for liver function impairment. [Key words] Hepatitis B; Laboratory diagnosis; HBV-DNA; HBeAg; ALT; AST; GGT 乙型病毒性肝炎仍严重威胁着人类健康。据世界卫生组织统计，全球约有3.5亿慢性HBV感染者，每年直接或间接导致约100万人死亡[1]。最新流行病学调查数据显示，我国1～59岁一般人群HBsAg携带率为7.18%[2]。据此估计，我国现有慢性HBV感染者约9 300万人，其中慢性乙型肝炎患者约2 000万例[3]。 酶联免疫吸附法检测乙型肝炎病毒（HBV）的相关血清学标志物，是临床诊断乙型肝炎的重要指标，不同的血清学标志物也具有不同的临床意义。近年来研发的荧光定量聚合酶链反应检测HBV-DNA技术日益成熟，并逐渐推广，目前也已成为临床诊断乙型肝炎的重要标准[4]。此外，在临床诊断时，肝功能酶学指标也常同时检测，以反映肝脏的损伤程度。笔者收集了373例乙型肝炎患者的实验室诊断数据，对HBV-DNA定量、HBeAg与丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（AST）、谷氨酰转移酶（GGT）等指标进行了相关性分析，探讨这些指标在疾病诊断及判断患者病情中的作用。 1 资料与方法 1.1 研究对象 373例乙型肝炎患者数据选自本院门诊及住院的乙型肝炎患者，其中，男性282例，女性91例，年龄13～77岁，平均39.5岁。 1.2 方法 1.2.1 样本入选及剔除入选的样本均同时检测了HBV-DNA、HBeAg、ALT、AST、GGT等项目；并排除了肝癌、血液病等其他疾病对肝功能的影响。1.2.2 HBV-DNA定量检测采用ABI公司7500荧光定量PCR仪检测，试剂由深圳凯

乙型肝炎病毒前S1抗原的结果解释

乙型肝炎病毒前S1抗原的结果解释 乙型肝炎病毒（HBV）外膜蛋白包括S、前S2和前S1三种成分。前S1蛋白在病毒侵入肝细胞过程中起重要作用。含有前S1的蛋白主要存在于Dane颗粒和管型颗料上。前S1蛋白在病毒感染、装配、复制和刺激机体产生免疫反应等方面起有十分重要作用。乙肝病毒前S1抗原酶免测定试剂盒的正式推向临床以及近两年在北京、四川、浙江、河南、深圳、海南等近百家医院与乙肝“两对半”检测的联合应用，充分显示了该试剂在病毒性乙型肝炎的临床诊断，指导治疗等方面的重要价值。前S1抗原（Pre-S1Ag）检测是对乙肝“两对半”尤其是e抗原和HBV-DNA测定的重要补充和加强。前S1抗原与HBV-DNA检出率两者符合，前S1抗原仅在HBV-DNA阳性血清中检出。前S1蛋白随HBeAg消失而消失，且与阴转时间呈正相关，这样，前S1抗原可作为病毒清除与病毒转阴的指标。前S1抗原阳性的乙型肝炎患者传播乙型肝炎病毒比前S1抗原阴性和无症状HbsAg携带者的危险性更大，因而说明前S1抗原可反映乙型肝炎病毒复制和传染性的指标。如果前S1抗原持续阳性，指示AHB向慢性转变。比较急性乙型肝炎、慢性乙型肝炎、和HBsAg阳性的患者血清中前S1蛋白，前S1抗原阴转愈早，AHB患者的疗程愈短，预后也愈好。说明前S1抗原及其抗体的检测是急性乙型肝炎的临床诊断，疗效观察和判数据预后的良好指标。 前S1蛋白的分子生物学特性1．乙肝病毒（HBV）的基因结构HBV为嗜肝DNA病毒，由一个不完全双链DNA组成，约3200个氨基酸。长链L含4个开放读码框架，为病毒蛋白的编码区：S区、C区、P区、X区。短链S相当于长链的50%-100%，其不固定端可被内原性DNA多聚酶延长，使病毒成为完整的双链。2．HBV基因组编码HBV抗原，所有四个功能性读码框架位于DNA负链，P基因编码DNA聚合酶。C基因编码HbcAg。S 基因编码S抗原，前S1抗原和前S2抗原。X基因编码X产物。

乙型肝炎表面抗原(HBsAg)

乙型肝炎表面抗原（HBsAg） 1、原理：采用抗-HBs包被反应板，加入待测样本，经孵育后，加入抗-HBs-HRP,当样本中存在HBsAg时，该HBsAg与包被抗-HBs结合并与抗- HBs-HRP结合形成抗-HBs-HBsAg-抗-HBs-HRP复合物，加入TMB底物产生显色反应，反之则无显色反应。 2、标本采集与处理? 2.1 受检者准备：对于体检对象抽血前保持平时的饮食习惯，采血前应禁食4-6小时。 2.2静脉采血：除非是卧床病人，一般在采血时取坐位。体位影响水分在血管内外的分布，因此影响测定水平。故在采血前至少应静坐５分钟。一般从肘静脉取血，使用止血带的时间不超过１分钟，穿刺成功后立即松开止血带。 2.3采血管：一般采用血清做检验，可以用一般洁净的塑料管或玻璃试管作为容器。 2.4标本处理：血清：采血后，室温下自然放置1-2小时，待血液凝固、血块收缩后，在于3000转每分钟离心15分钟，吸出血清待用。血浆：采血后，样本和抗凝剂轻轻颠倒混匀6-8次后，充分离心，将血浆与血细胞分离后，吸出血浆待用。 2.5标本接收：接收标本时应检查标本是否符合要求(要求密封、无溶血、无杂物)、所用试管是否正确、试管是否填写完整、并问讯采血日期，对不合格标本应退回重采，并填写记录。

2.6标本储存：一般该标本应随到随做，血清和血浆标本在2-8o c 保存。如需长期保存，可在-20℃保存，并避免反复冻融。 3、试剂与仪器： 3.1测定试剂： 3.1.1生产厂商：英科新创（厦门）科技有限公司 3.1.2批准文号：国药准字S1******* 3.1.3包装：48T×1、96T×1 3.1.3试剂配置： 25倍浓缩稀释液 40ml×1瓶 HBsAg微孔反应板 96孔 HBsAg酶结合物 6.2 ml×1瓶 HBsAg阳性对照 1.0 ml×1瓶 HBsAg阴性对照 1.0 ml×1瓶 显色液A、B液各8.0 ml×1瓶 终止液 7 ml×1瓶 封板纸 5片 说明书 1份3．2测定仪器： 3.2.1酶标仪：上海安泰 MODEL MT-858 3.2.2洗扳机： ANALYTECH828 4、操作步骤： 4．1配液：配制工作浓度洗涤液（以纯化水做25倍稀释）

乙型肝炎病毒e抗原、e抗体检测试剂注册技术审查指导原则(2020年)

附件2 乙型肝炎病毒e抗原、e抗体检测试剂注册 技术审查指导原则 本指导原则旨在指导注册申请人对乙型肝炎病毒e抗原、e 抗体检测试剂注册申报资料的准备及撰写，同时也为技术审评部门审评注册申报资料提供参考。 本指导原则是针对乙型肝炎病毒e抗原、e抗体检测试剂的一般要求，申请人应依据产品的具体特性确定其中内容是否适用，若不适用，需具体阐述理由及相应的科学依据，并依据产品的具体特性对注册申报资料的内容进行充实和细化。 本指导原则是供申请人和审查人员使用的指导性文件，不涉及注册审批等行政事项，亦不作为法规强制执行，如有能够满足法规要求的其他方法，也可以采用，但应提供详细的研究资料和验证资料。应在遵循相关法规的前提下使用本指导原则。 本指导原则是在现行法规、标准体系及当前认知水平下制定的，随着法规、标准的不断完善和科学技术的不断发展，本指导原则相关内容也将适时进行调整。 一、适用范围 （一）背景简介 乙型肝炎病毒（hepatitis B virus，HBV）属嗜肝DNA 病毒科，是乙型病毒性肝炎的病原体。HBV 主要经血（如不安全注 —1 —

射等）、母婴及性接触传播。HBV 感染呈世界性流行，但不同地区HBV感染的流行强度差异很大。据世界卫生组织报道，全球约20亿人曾感染HBV，其中2.4 亿人为慢性HBV感染者，每年约有65万人死于HBV感染所致的肝功能衰竭、肝硬化和肝细胞癌（HCC）。 通过免疫学方法检测HBV标志物是临床最常用的HBV感染的病原学诊断方法。HBV具有三个抗原系统，如：乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）与乙型肝炎病毒表面抗体（抗-HBs）、乙型肝炎病毒e抗原（HBeAg）与乙型肝炎病毒e抗体（抗-HBe）、乙型肝炎病毒核心抗体（抗-HBc）及抗-HBc-IgM。HBV抗原与抗体的血清学标志物与临床关系复杂，必须对几项标志物综合分析，方有助于临床诊疗。 HBeAg是从病毒C基因的第一个起始密码子开始翻译产生的包含Pre C及C序列的蛋白，该蛋白经细胞内蛋白酶切除其N 端19个氨基酸及C端34个氨基酸后成为可分泌的e抗原。HBeAg为可溶性蛋白质，产生后分泌入血，在患者症状出现后大约1周出现，通常在几周后消失，但在HBV慢性感染者体内可能持续存在。 血清HBeAg与HBV复制及疾病传染性相关，HBV感染患者的血清中存在HBeAg是病毒活跃复制的指标。在HBsAg阳性人群中，HBeAg的消失以及抗-HBe的出现是血清学转换的标志，表示病毒复制活跃程度的下降。但是，临床上存在病毒复制活跃的患者血清中HBeAg为阴性的情况，如：HBV基因组前C区 —2 —

乙型肝炎核心抗体定量检测

乙型肝炎核心抗体定量检测（Antibody to Hepatitis B Virus Core Antigen，anti-HBc/CORE） 1、检验目的 检测HBcAb主要是用于乙型肝炎的的诊断、了解乙肝病毒感染者的感染状况，另外还用于乙型肝炎的流行病学调查。 2、方法原理 采用了美国雅培公司的专利技术—微粒子酶免疫分析（MEIA），即以HBcAg包被微粒子（M-Ag）与标本中的HBcAb形成M-Ag-Ab 复合物，当复合物被转移到纤维杯上时，微粒子就不可逆地结合到纤维杯表面的玻璃纤维上，并与加入的碱性磷酸酶标记HBcAb 结合，洗去未结合的游离物质，加入底物—四甲基伞形酮磷酸盐，碱性磷酸酶脱去底物的磷酸基而发出荧光，通过MEIA光路元件检测而得到定量结果。 3、性能指标 MEIA定量检测HBcAb不精密度CVs为5.8-10.4%，检出限<1.0 PEI unit/ml），灵敏度1.0 PEI unit/ml，特异性对99.9%。 4、标本收集 4．1标本类型：静脉血或动脉血的血清或血浆标本均可作为检测标本（抗凝剂可用肝素钠、枸橼酸钠、ACD、CPDA-1或EDTA，抗凝剂的质量应符合化试药品要求——化学纯或分析纯，使用的比例以厂家推荐为准）；其他体液如尿液、唾液、精液、羊水、胸水、腹水、乳汁等体液可以作为检测标本，但加热灭活的血清和血库的库存血则不宜作为检测标本。

4．2标本留取：以空腹为宜，收到标本后最好立即离心留取血清或血浆（凝固血应待其充分凝固后收集血清），不能有残留的红细胞、纤维蛋白丝，使用肝素治疗的病人宜在肝素治疗前抽血。4．3标本保存：留取的标本最好在3小时内检测，不能立即检测的应放臵于2-8℃最长达14天（可以含有凝块但要密闭以防蒸发），或者-10℃最长达14天（不能反复冻融也不能含有凝块和红细胞）。 4．4标本容器：盛放标本的容器必须为洁净的一次性真空采血管、玻璃试管、一次性的不同规格的塑料离心管 4．5标本外送：如涉及到需要外送的标本，必须以规定的容器（0.5ml塑料离心管）存放并密封，并根据邮寄规则和要求进行包装，运送时还要放入冰袋（2-8℃）或干冰（-10℃）由专人运送至指定地点指定接收人。 4．6拒收标本：凡与4.1-4.5所述内容不符的标本，检验人员应向临床或就诊者说明拒收标本的原因，并提出解决的方案或建议。 5、分析系统 5．1分析仪器：为美国雅培公司提供的AXSYM全自动免疫分析仪，仪器校准请参见仪器操作规程。 5．2分析试剂：为美国雅培公司提供的配套的HBcAb试剂盒，规格为100test/盒，2-8℃贮存，有效期6个月；在效期内使用试剂。 5．3定标试剂：为美国雅培公司提供的配套的HBcAb试剂盒中所附带，2-8℃贮存，有效期6个月；每换一次不同批号试剂均应进行重新定标。 5．4质控试剂：为美国雅培公司提供的配套的质控品，分为高、低二个浓度，2-8℃贮存，有效期6个月；每天随常规工作

乙型肝炎表面抗原携带者不能录取的专业

乙型肝炎表面抗原携带者不能录取的专业： 学前教育、航海技术、飞行技术等。专科专业：面点工艺、西餐工艺、烹饪与营养、烹饪工艺、食品科学与工程等。 一般学校对乙肝学生是不能有歧视的,只要你自律,自强,自尊,自爱,自信,大学生活一定会十分美好的. 搜集了一些以前的相关资料,可能会有所帮助. 北京林业大学：食品科学与工程专业不录取乙肝表面抗原携带者。 北京中医药大学：建议肝功能异常和澳抗（乙肝病毒表面抗原）阳性者慎报医药类专业；护理学专业限招女生，报考学生须备有肝功能化验单。 江南大学：建议有肝炎等传染病及病史的考生不要报考生命科学与技术基地班的生物工程、制药工程、食品科学与工程、食品质量与安全专业。 南京农业大学：旅游管理、生物工程、食品科学与工程、食品质量与安全专业要求考生作肝功能检查，澳抗阳性者不得报考以上专业。 华中科技大学：报考医学类专业的考生必须检验肝功能及澳抗。肝功能异常或澳抗阳性的考生不宜就读医学类专业。 武汉理工大学：航海技术、轮机工程二专业限招男生，要求肝功能正常，澳抗阴性。 北京大学医学部：要求报考考生必须检验肝功能及澳抗，建议肝功能异常或澳抗阳性者不要填报医学类专业。考生高考档案中应有肝功能及澳抗检查合格化验单。 国际关系学院：要求报考考生肝功能正常，无甲肝、乙肝、澳抗阳性。 中国刑事警察学院：要求报考考生肝功能化验指标必须在正常范围内，无甲肝、乙肝、澳抗阳性。 上海海关高等专科学校：要求报考考生无慢性疾病（慢性肝炎、HbsAg阳性不能报考）。 中国民用航空飞行学院：要求报考考生澳抗阴性；交通运输专业限招男生，要求肝功能正常。 南京森林公安高等专科学校：要求报考考生肝功能正常，无甲肝、乙肝、澳抗阳性。 中国防卫科技学院：对转氨酶高、澳抗阳性者一律不予录取。 北京经济技术职业学院：肝炎病原携带者不能报考旅游与酒店管理专业。

乙肝表面抗原检测操作规程

乙型肝炎病毒表面抗原检测（ELISA） 1原理： 在微孔板上预包被被纯化的乙肝表面抗体（HBsAb），配以酶标记抗体（HbsAb-HRP）及TMB等其它试剂，采用夹心法原理检测人血清（或血浆）中乙肝表面抗原（HBsAg）。2试剂： 2.1试剂名称：乙型肝炎病毒表面抗原诊断试剂盒（酶联免疫法） 2.2试剂生产厂家：英科新创（厦门）科技有限公司 2.3包装规格：96Test/Kit 2.4试剂盒组成：HbsAb预包被微孔板（包被HbsAb），HbsAg 酶标抗体（含HRP标记HbsAb）, HbsAg阳性对照（含基因工程HbsAg），HbsAg阴性对照（正常人血清），HbsAg样品稀释液（含BSA缓冲液），浓缩洗涤液（PBS-T缓冲液），底物A（含H2O2），底物B（含TMB），终止液（含H2SO4），封板膜，自封袋，说明书。 2.5试剂储存条件及有效期：2~8℃避光保存，有效12个月。 3样本采集： 取静脉血3-4ml于干净容器中分离出血清或血浆标本，如不及时测定可置于4℃冰箱保存，如长期保存需置于-15至-20℃冻存，并避免样本反复冻融。高脂血、高胆红素及溶血样本可能会影响试验结果的准确性，建议不使用。 4所需仪器

4.1全自动酶免分析仪 4.2新鲜蒸馏水或去离子水 4.3酶标仪（单波长450nm或双波长450nm/630nm） 4.4微量移液器 4.5 37℃恒温箱或水浴箱 4.6洗板机或洗瓶 5检验方法 5.1平衡：将试剂盒各组分从盒中取出，平衡至室温（18~25℃），微孔板板开封后，余者即时以自封袋封存。 5.2配液：浓缩洗涤液配置前充分摇匀（如有晶体应充分溶解），浓缩洗涤液和蒸馏水去离子水按1：19稀释后使用。 5.3编号：取所需数量微孔条固定于支架，按序编号。 5.4稀释：每孔加入20ul样品稀释液。 5.5加样：分别在相应孔中加入100ul阴、阳性对照血清或待测样本。 5.6温育：置37℃温育60min。 5.7加酶：分别在每孔中加入酶标记抗体50ul。 5.8温育：置37℃温育30min。 5.9洗涤：用洗涤液充分洗涤5次、洗涤后扣干（每次应保持30~60s的浸泡时间）。 5.10显色：每孔加入底物A、B各50ul，轻拍混匀，37℃暗置30min。 5.11终止：每孔加入终止液50ul，混匀。 5.12测定：用酶标仪单波长450nm或双波长450nm/630nm

慢性乙型病毒性肝炎(B18.1)汇总

慢性乙型病毒性肝炎 归属于病毒性肝炎 (B15-B19) B18 中慢性病毒性肝炎之B18.1 慢性乙型病毒性肝炎，没有丁型肝炎病毒、慢性（病毒）性乙型肝炎 病毒性肝炎（viralhepatitis）是由多种不同肝炎病毒引起的一组以肝脏害为主的传染病，根据病原学诊断，肝炎病毒至少有5种，即甲、乙、丙、丁、戊型肝炎病毒，分别引起甲、乙、丙、丁、戊型病毒性肝炎，即甲型肝炎（hepatitis A）、乙型肝炎（hepatitis B）、丙型肝炎(hepatitis C)、丁型肝炎(hepatitis D)及戊型肝炎（hepatitis E）。另外一种称为庚型病毒性肝炎，较少见。 乙型病毒性肝炎(Hepatitis B)又称血清性肝炎，简称乙肝、乙型肝炎。乙型病毒性肝炎在台湾又称为B 型肝炎（简称B肝）。乙肝是一种由乙型肝炎病毒（HBV）引起的、以肝脏损害为主的传染病。乙型肝炎病毒通过受感染者的血液或其它体液传播。 乙肝的发病原因 乙型肝炎是由于患者感染乙型肝炎病毒（英文为hepatitis B virus，缩写HBV）引起的。乙型肝炎病毒是一种嗜肝病毒，主要存在于肝细胞内并损害肝细胞，引起肝细胞炎症、坏死、纤维化。根据目前所知，乙型肝炎病毒就只对人和猩猩有易感性，引发乙型病毒性肝炎疾病。 乙型肝炎病毒（HBV） 是一种DNA病毒，属嗜肝DNA病毒科（hepadnavividae），是直径42nm的球形颗粒。又名Dane颗粒，有外壳和核心两部分。外壳厚7-8nm，有表面抗原（HBsAg），核心直径27nm，含有部分双链，部分单链的环状DNA，DNA聚合酶，核心抗原及e抗原。HBVDNA的基因组约含3200个碱基对。长链的长度固定，有一缺口（nick）此处为DAN聚合酶；短链的长度不定。当HVB复制时，内源性DNA聚合酶修补短链，使之成为完整的双链结构，然后进行转录。HBV DNA的长链有4个开放性读框（ORF），即S 区、C区、P区和X区。S区包括前S1前S2和S区基因，编码前S1、前S2和S三种外壳蛋白；C区以包括前C区，C区基因编码HBcAg蛋白，前C区编码一个信号肽，在组装和分泌病毒颗粒以及在HBeAg 的分泌中起重要作用；P基因编码DNA聚合酶；X基因的产物是X蛋白，其功能尚不清楚。HBVDNA的短链不含开放读框，因此不能编码蛋白。 乙型肝炎患者血清在显微镜的观察下可查见3种颗粒：①直径22nm的小球形颗粒；②管状颗粒，长约100～700nm，宽约22nm;③直径为42nm的大球形颗粒。小球形颗粒。小球形颗粒及管状颗粒均为过剩的病毒外壳，含表面抗原，大球形颗粒即病毒颗粒，有实心与空心两种，空心颗粒缺乏核酸。 1．乙型肝炎表面抗原(HBsAg)和表面抗体(抗—HBs)HBsAg存在于病毒颗粒的外壳以及小球形颗粒和管状颗粒。于感染后2-12周，丙氨酸转氨酶(ALT)升高前，即可由血内测到，一般持续4～12周，至恢复期消失，但感染持续者可长期存在。HBsAg无感染性而有抗原性，能刺激机体产生抗-HBs。在HBsAg自血中消失后不久或数星期或数月，可自血中测到抗—HBs，抗HBs出现后其滴度逐渐上升，并可持续存在多年。抗-HBs对同型感染具有保护作用。近期感染者所产生的抗-HBs属IgM，而长期存在血中的为抗-HBsIgG。 2．乙型肝炎核心抗原（HBcAg）和核心抗体（抗-HBc） HBcAg主要存在于受染的肝细胞核内，复制后被释至胞浆中，由胞浆中形成的HBsAg包裹，装配成完整的病毒颗粒后释放入血。血液中一般不能查到游离的HBcAg。血中的Dane颗粒经去垢剂处理后可以查到其核心部分的HBcAg和DNA聚合酶。 HBVDNA聚合酶存在于Dane颗粒核心内，是一种依赖于DNA的DNA聚合酶，其功能与修补及延伸双链DNA的短链有关。患者血清中HBVDNA聚合酶活性增高常伴有HBV增殖。在急性乙肝的潜伏期内，血清ALT升高之前，血清DNA聚合酶活力即已升高，因此，DNA聚合酶活力测定具有早期诊断意义。急性肝炎患者在发病1个月后若HBVDNA聚合酶活力仍持续升高，是肝炎转为慢性的征兆。 3．乙型肝炎e抗原（HBeAg）和e抗体-（HBe） HBeAg是以隐蔽形式存在HBV核心中的一种可溶性蛋白，其编码基因相互重叠，是HBcAg的亚成分。在感染HBV后，HBeAg可与HBsAg同时或稍后出现于血中，其消失则稍早于HBsAg。HBsAg仅存在于HBsAg阳性者的血液中，通常伴有肝内HBVDNA的复制，血中存在较多Dane颗粒和HBVDNA聚

人乙型肝炎病毒X抗原(HBxAg)试剂盒使用方法

人乙型肝炎病毒X抗原(HBxAg)试剂盒使用方法 检测范围：96T 2 IU/L -48 IU/L 使用目的： 本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中乙型肝炎病毒X抗原(HBxAg)含量。实验原理 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人乙型肝炎病毒X抗原(HBxAg)水平。用纯化的抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入乙型肝炎病毒X抗原(HBxAg)，再与HRP标记的抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的乙型肝炎病毒X抗原(HBxAg)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人乙型肝炎病毒X抗原(HBxAg)浓度。 试剂盒组成 1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融 2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。 操作步骤 1.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀 2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、 待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。 3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。 4.配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用 5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此 重复5次，拍干。

乙型肝炎培训课件

乙型肝炎 根据卫生部重点传染病培训光盘整理 一、诊断 乙型肝炎是由乙型肝炎病毒引起的，以肝脏炎性损伤为主的一种传染病；他在我国广泛流行，危害严重，我国有1.2亿人口是慢性乙型肝炎携带者或者是感染者，相当于我国10个人当中就有一个是慢性乙肝感染者，这其中有1/3的人有可能将来会发生慢性乙型肝炎，极少数可以转变成肝硬化或者肝癌。 乙型肝炎病毒是一个很小的病毒，他属于嗜肝脱氧核糖核酸病毒，也就是DNA病毒；它是由它的表面抗原和病毒的内核组成，病毒的内核包含着有e抗原，核心抗原和病毒的基因DNA，还有DNA聚合酶，由于乙肝病毒的表面抗原最早是在澳大利亚土著人血清中发现的，所以过去人们习惯把它称为澳大利亚抗原，人们经常说澳抗阳性就是由此而来。 乙肝病毒的抗原成分主要有三种：表面抗原（HBsAg）、e抗原（HBeAg）、核心抗原（HBcAg）这三种抗原进入人体后，分别可以刺激机体产生三种抗体，也就是表面抗体（HBsAb）、e抗体（HBeAb）、核心抗体（HBcAb）这样就是三对抗原——抗体。其中核心抗原用一般方法在血清中是很难查出来的，所以常规不做核心抗原的检查，称为乙肝病毒两对半检查或乙肝五项检查。 大三阳是指：乙肝表面抗原、e抗原、核心抗体共同呈阳性。往往意味着病毒复制活跃，传染性相对较强。 小三阳是指：乙肝表面抗原、e抗体、核心抗体共同呈阳性。往往表示乙肝病毒复制比较弱，是乙肝病毒的中立期，只是传染性较弱，病情相对稳定。 乙肝五项指标中抗原是病毒的成分，抗体是机体的免疫系统对抗原产生了一种反应，乙肝表面抗体是由表面抗原刺激而产生的，它是一种中和抗体，能够中和乙肝病毒，对抗乙肝病毒的感染来抵御乙肝病毒的侵入，我们注射乙肝疫苗，也是刺激机体产生表面抗体，用来预防乙型肝炎病毒的感染。e抗体是由e抗原刺激而产生的，e抗体的存在提示着病毒是处于抑制状态，病毒是不活跃的；核心抗体它是一种比较弱的抗体，它不能够抵御病毒的侵入，也对病毒的复制没有抑制作用。但是核心抗体它只是提示目前或者是曾经被乙肝病毒感染过，单纯一个核心抗体阳性，不能提示他就有乙肝病毒，还要结合有没有抗原存在，所以不能错误的把抗体阳性误认为是体内有乙肝病毒。 乙肝病毒感染后，临床上分为三期，即免疫耐受期、慢性肝炎期、病毒抑制期。

乙型肝炎病毒表面抗原研究新进展

乙型肝炎病毒表面抗原研究新进展 发表时间：2018-01-06T13:35:26.403Z 来源：《医药前沿》2017年12月第34期作者：张华清1 尹华发2（审校） [导读] 血清HBsAg水平分析作为一种非侵入性的诊断参数，在CHB患者抗病毒治疗中，HBsAg水平可帮助确定疗程优化和管理。（1中南大学湘雅医学院公共卫生学院湖南长沙 410083） （2安徽医科大学第一附属医院感染科安徽合肥 230022） 【摘要】乙型肝炎病毒是在全球导致肝硬化和肝癌的病因。血清乙肝表面抗原水平检测是非侵入性的血清诊断参数，临床上可以监测HBV感染及相关疾病的进程，提高核苷（酸）类似物抗病毒治疗的疗程优化和管理。 【关键词】乙型肝炎病毒；乙肝表面抗原；核苷（酸）类似物 【中图分类号】R512.6+2 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2017）34-0005-01 【Abstract】Hepatitis B virus is the cause of cirrhosis and liver cancer worldwide. Detection of serum hepatitis B surface antigen level is a non-invasive diagnosis of serum parameters, in clinical practice, it can monitor HBV infection and related disease process, improve the nucleoside (acid) treatment optimization and management of analogs antiviral therapy. 【Key words】Hepatitis B virus;Hepatitis B surface antigen;Nucleoside (acid) analogue 1.前言 乙型肝炎病毒(hepatitis B virus，HBV)感染严重危害人体健康，全球约20亿人曾感染过HBV，其中3.5亿人为慢性HBV感染者，相当于世界人口的5%，每年约有50多万人死于HBV感染所致的肝硬化(liver cirrhosis，LC)和肝细胞癌（hepatocellular crcinoma，HCC），约 40%亚裔慢性乙型肝炎（chronic hepatitis B，CHB）患者最终死于HBV-LC并发症或HCC[1]。 2.乙肝病毒HBsAg的合成和检测 2.1 乙肝病毒HBsAg的合成 HBV基因组包含S、C、P、和X四个重叠的开放阅读编码区，S区基因由S基因、Pre S1基因和Pre S2基因组成，编码相应蛋白，HBV的表面蛋白有三种，乙肝病毒大蛋白(LHBs)，包括HBsAg、Pre S2和Pre S1；中S蛋白(MHBs)，包括HBsAg和 Pre S2；小S(SHBs)即HBsAg[2]。 2.2 检测 HBsAg已被用于诊断HBV感染，其动态监测在病程和疗效监测中具有重要意义。目前主要的2种HBsAg定量检测试剂，即罗氏公司的电化学发光法和雅培公司的微粒子化学发光法，对于脂血、黄疸和溶血等干扰物，抗干扰能力相同，检测限均为0.05 IU/mL，对于高浓度超过线性的标本，通过稀释都可检测报告，检测结果方面具有良好的相关性[4]。 2.3 HBsAg在抗病毒治疗中的作用 2017年EASL定义治疗CHB目标是HBsAg消失，伴或不伴有血清学转换，和持续HBV DNA的长期抑制，其与疾病的自然过程有着密切相关，以及与患者良好的生存与防止HBV相关的LC和HCC等并发症及预防密切相关。达到HBsAg消失所需的关键环节是持续的病毒免疫控制[4]。临床上常用药物治疗CHB有聚乙二醇干扰素（PEGylated interferon，PEG-IFN）和5种核苷（酸）类似物（Nucleoside acid analog，NA）。HBsAg水平可以监测HBV感染的临床不同阶段及相关肝脏疾病的进程，以及预测抗病毒治疗效果，其水平的变化可以预测患者抗病毒治疗的应答率和HBsAg的清除率。血清HBsAg水平分析作为一种非侵入性的诊断参数，以预测HBV抗病毒治疗中的效果。不同病程阶段的HBV感染状态下，HBsAg水平有明显差异，临床诊断及治疗方案应结合临床相关不同指标的动态变化合理调整[4]。NA治疗能够持久抑制病毒可以改善肝脏组织学，CHB应用替诺福韦酯治疗5年是安全有效的，HBV长期的抑制甚至可以逆转肝硬化和肝纤维化，患者如果对NA治疗有效，且没有耐药性发生，使用NA的长期治疗还可以减少肝癌的发生率[6]。临床上使用NA治疗效果多数是不确定的，NA治疗抗HBe血清转换12个月后停药也可能复发，且症状隐匿。与使用干扰素治疗的患者相比，使用NA治疗的患者HBsAg的下降幅度较低，但NA治疗的患者有HBV DNA水平显著下降，其原因在于NA的作用机制，NA治疗影响的病毒基因组RNA的反转录，但不影响其与HBsAg水平相关联的cccDNA和亚基因组RNA的转录。PEG-IFN联合应用恩替卡韦(ETV)或替诺福韦酯（TDF）治疗更有利于CHB患者的HBsAg水平下降、e抗原血清学转换和持续病毒学反应率：PEG-IFN与阿德福韦酯联合治疗48周，HBeAg阳性CHB和HBeAg阴性CHB在治疗后2年后HBsAg水平的下降率分别为11%和17%，表明在HBeAg阴性患者中，低基线HBsAg水平是HBsAg消失的强预测因子[7]。同样国内学者也报道[8]，长期被NA完全抑制HBeAg阴性CHB患者加用PEG-IFN可以有效提高HBsAg阴转率，HBsAg血清含量降低明显。 3.总结与展望 HBV是导致LC和HCC的主要病因，目前临床完全治愈慢性HBV感染是需解决难题。血清HBsAg水平分析作为一种非侵入性的诊断参数，在CHB患者抗病毒治疗中，HBsAg水平可帮助确定疗程优化和管理。 【参考文献】 [1]魏来,李兰娟,侯金林,等.2014 年中国慢性乙型肝炎防治指南( 科普版)[M].北京:人民卫生出版社,2014. [2] Glebe D,Bremer C M.The molecular virology of hepatitis B virus[J].Seminars in Liver Disease,2013, 33(2):103. [3]盛欢,胡晓波,许洁.两种方法检测HBsAg定量结果的临床互认研究[J].检验医学,2013,28(09):828-834. [4] Lampertico P,Agarwal K,Berg T,et al.EASL 2017 Clinical Practice Guidelines on the management of hepatitis B virus infection. [J].Journal of Hepatology, 2017,67(2):370-398. [5]陈仁，廖金瑶，罗晓丹，等.慢性乙肝患者HBsAg水平与HBV-DNA相关性研究[J].中华疾病控制杂志，2016，20(08):856-859. [6]丁荣蓉，施光峰，张占卿，等.替诺福韦酯和恩替卡韦对慢性乙型肝炎初治患者疗效的荟萃分析[J].肝脏，2017，22(5):400-403. [7]余佳平，侯炜.聚乙二醇干扰素α-2a联合阿德福韦酯治疗HBeAg阳性慢性乙型肝炎疗效预测因素分析[J].实用肝脏病杂志，2015，18(5):476-481. [8]范彩仙，李小芳，詹一飞，等.长期被核苷酸类似物完全抑制e抗原阴性CHB患者加用干扰素α-2b的疗效[J].世界华人消化杂志，2017(11):983-988.

乙型肝炎病毒标志物表面抗原、表面抗体、e抗原、e抗体、核心抗体检测试剂盒(胶体金法)

血清乙型肝炎病毒HBsAg、抗HBs、HBeAg、抗HBe、抗HBc检测作业指导书 1.目的：建立乙型肝炎病毒HBsAg、抗HBs、HBeAg、抗HBe、抗HBc定性检测标 准操作规程，确保检测结果的准确。 2.范围：适用于检验科免疫实验室。 3.规程： 3.1标本的收集与准备： 3.2用未加抗凝剂的真空抽血管抽取静脉血2ml。 3.3标本完全凝固后才能离心，并分离血清。 3.4如试验8小时内不能完成，血清标本放2~8℃保存。 3..5标本拒收标准：严重脂血、溶血、黄疸。 4、测定原理： 本试剂盒采用胶体金标记免疫层析技术，将HBsAg、抗HBs、HBeAg、抗HBe、抗HBc单项胶体金标记免疫层析检测条组装成联合检测卡。样品加到检测卡各项加样孔后,再借助毛细作用移行至层析区,于检测区和对照区,胶体金标记颗粒由于抗原抗体反应形成富聚,形成或不形成肉眼可见的胶体金颗粒反应带,从而实现对HBsAg、抗HBs、HBeAg、抗HBe、抗HBc的检测，并作出存在与否的判定。 HBsAg用双抗体夹心法检测，胶体金标记抗HBs(鼠单抗)与样品中的HBsAg结合形成复合物,再借助毛细作用复合物沿层析条向前移行,与检测线区预包被的抗HBs(鼠单抗)形成“Au-抗HBs(鼠单抗)-HBsAg-抗HBs(鼠单抗)-固相材料”夹心物而凝聚显色。游离胶体金标记抗HBs(鼠单抗)则在对照线处与羊抗鼠IgG抗体结合而富集显色。阴性标本则仅在对照线处显色。结果于30分钟内判定。 抗HBs用双抗原夹心法检测胶体金标记HBsAg与样品中的抗HBs结合形成复合物,再借助毛细作用复合物沿层析条向前移行,与检测线区预包被的HBsAg形成“Au-HBsAg-抗HBs-HBsAg-固相材料”夹心物而凝聚显色。游离胶体金标记HBsAg则在对照线处与羊抗HBs结合而富集显色。阴性标本则仅在对照线处显色。结果于30分钟内判定。 HBeAg用双抗体夹心法检测胶体金标记抗HBe(鼠单抗)与样品中的

乙型肝炎抗原

乙型肝炎抗原 乙型肝炎抗原检查目的 乙肝表面抗原检查用于判断是否感染了乙肝病毒。 1、乙肝表面抗原阳性是感染乙肝病毒的指标，乙肝表面抗原本身具有抗原性，无传染性。 2、其他肝功能正常而仅仅乙肝表面抗原阳性者，称为乙肝病毒携带者。 3、乙肝表面抗原的滴度高低可判断患者的传染性，HBsAg的滴度越高，HBsAg及乙肝病毒DNA阳性的可能性越大，传染性也就越大。 4、大三阳：是指在乙肝两对半检测中，乙肝表面抗原（HBsAg）、E抗原（HBeAg）和核心抗体（HBcAb）检测均是阳性，提示乙肝病毒感染病毒复制活跃，有传染性，并不能提示病情是否严重。 5、小三阳：是指在乙肝两对半检测中，乙肝表面抗原（HBsAg）、E抗体（HBeAb）和核心抗体（HBcAb）检测均是阳性提示：（1）大多数情况下表示乙肝病毒复制减少，仍然有传染性。（2）由大三阳转向小三阳并不意味着乙肝病毒复制完全停止。少数小三阳病人其血清HBV-DNA持续阳性，病毒复制活跃，病情较严重，病情进展迅速。 乙型肝炎抗原检查内容 乙肝表面抗原（HBsAg）是乙肝病毒的外壳蛋白，本身不具有传染性，但它的出现常伴随乙肝病毒的存在，所以它是已感染乙肝病毒的标志。它可存在于患者的血液、唾液、乳汁、汗液、泪水、鼻咽分泌物、精液及阴道分泌物中。在感染乙肝病毒后2～6个月，当丙氨酸氨基转移酶升高前2～8周时，可在血清中测到阳性结果。急性乙型肝炎患者大部分可在病程早期转阴，慢性乙型肝炎患者该指标可持续阳性。 乙型肝炎表面抗原检查是最常用的检验乙型肝炎病原体的试验。 乙型肝炎抗原检查注意事项 首次检出乙肝表面抗原阳性者应在1/2～2周后复查1次，同时查血清转氨酶、乙肝核心抗体免疫球蛋白M、核心抗体、e抗原、e抗体及表面抗体。如果有条件，还可检测乙肝病毒去氧核糖核酸、去氧核糖核酸聚合酶等。如转氨酶明显增高者应住院治疗。无转氨酸增高而其它指标有不同程度增高或阳性时应请医生对自己的转归和传染性作出初步评价。必要时应配合医生做肝活检，了解肝脏是否存在病理变化，有病理阳性发现者应按现症乙型肝炎处理。 查出表面抗原和e抗原双阳性者，每3个月应复查1次。单纯乙肝表面抗原阳性无e 抗原阳性，且无症状者，可6个月至1年复查1次。因为表面抗原阳性者转变为肝炎的机会比一般人多好几倍。

乙肝表面抗原阳性是什么意思

乙肝表面抗原阳性是什么意思 *导读：乙肝表面抗原阳性是很多人经常听到却不了解的病症，其实，如果一个人被检测出乙肝表面抗原阳性，证明其已经感染乙肝病毒。乙肝表面抗原常存在于乙肝患者的血液、唾液、乳汁、汗液等体液中，感染乙肝病毒6个月内一般可检测出阳性。 乙肝表面抗原阳性是很多人经常听到却不了解的词句，其实，如果一个人被检测出乙肝表面抗原阳性，证明其已经感染乙肝病毒。乙肝表面抗原常存在于乙肝患者的血液、唾液、乳汁、汗液等体液中，感染乙肝病毒6个月内一般可检测出阳性。 那么，当乙肝表面抗原呈阳性的时候，是否代表此人患上了乙肝呢？许多人在体检中被查出乙肝表面抗原阳性时，会误以为自己患上了乙肝，陷进忧虑和低落的情绪中，也害怕将乙肝传染给他人。其实当乙肝表面抗原呈阳性时，不一定是患上了乙肝，可能是以下几种情况：1.进入乙肝潜伏期。患者在乙肝发病前3周左右，乙肝表面抗原会呈阳性。2.乙肝表面抗原阳性可能意味者此人为乙肝病毒携带者，有些人发现乙肝表面抗原阳性时肝功能已经恢复正常，就不需要进行治疗。3.慢性乙肝，此类患者通常具有乙肝的症状的体征，此时患者体内的病毒正在繁殖，并且

损伤肝脏，必须及时进行治疗。 如果检查发现乙肝表面抗原阳性该怎么办？此时患者不必过于惊慌和忧郁，因为不一定意味着已经患上乙肝。所以这时应该首先到医院进行详细复查，进行肝功能和乙肝两对半等相关的五项指标检查，如果结果都为阴性，则并没有患上乙肝，此时可通过接种乙肝疫苗进一步预防乙肝的发生。若复查结果中某些指标呈阳性，可能说明患上了乙肝。同时，患者要经过检查，确定自己是属于乙型肝炎发病状态还是仅为乙肝病毒携带者。若检查结论为患上了乙肝，则需要用药治疗。常见的治疗方法为注射干扰素或服用核苷酸类药物，但是此类方法副作用大，很容易损伤身体。患者应根据医生指导进行进一步治疗。 若检测得出乙肝表面抗原阳性，不要过于惊慌，应调整饮食并保持良好的心态，在医生指导下进行进一步的检查与治疗。

乙型肝炎病毒e抗原、e抗体检测试剂注册技术审查指导原则

乙型肝炎病毒e抗原、e抗体检测试剂注册 技术审查指导原则 （征求意见稿） 本指导原则旨在指导注册申请人对乙型肝炎病毒e抗原、e抗体检测试剂注册申报资料的准备及撰写，同时也为技术审评部门审评注册申报资料提供参考。 本指导原则是针对乙型肝炎病毒e抗原、e抗体检测试剂的一般要求，申请人应依据产品的具体特性确定其中内容是否适用，若不适用，需具体阐述理由及相应的科学依据，并依据产品的具体特性对注册申报资料的内容进行充实和细化。 本指导原则是供申请人和审查人员使用的指导性文件，不涉及注册审批等行政事项，亦不作为法规强制执行，如有能够满足法规要求的其他方法，也可以采用，但应提供详细的研究资料和验证资料。应在遵循相关法规的前提下使用本指导原则。 本指导原则是在现行法规、标准体系及当前认知水平下制定的，随着法规、标准的不断完善和科学技术的不断发展，本指导原则相关内容也将适时进行调整。 一、范围 （一）背景简介 乙型肝炎病毒（hepatitis B virus，HBV）属嗜肝DNA 病毒科，是乙型病毒性肝炎的病原体。HBV 主要经血（如不安全注射等）、母婴及性接触传播。HBV 感染呈世界性流行，

但不同地区HBV感染的流行强度差异很大。据世界卫生组织报道，全球约20亿人曾感染HBV，其中2.4 亿人为慢性HBV 感染者，每年约有65万人死于HBV感染所致的肝功能衰竭、肝硬化和肝细胞癌（HCC）。 通过免疫学方法检测HBV标志物是临床最常用的HBV 感染的病原学诊断方法。HBV具有三个抗原系统，如：HBsAg 与抗-HBs、HBeAg与抗-HBe、抗-HBc及其抗-HBc-IgM检测等。HBV抗原与抗体的血清学标志物与临床关系复杂，必须对几项标志物综合分析，方有助于临床诊疗。 乙型肝炎病毒e抗原是从病毒C基因的第一个起始密码子开始翻译产生的包含Pre C及C序列的蛋白，该蛋白经细胞内蛋白酶切除其N端19个氨基酸及C端34个氨基酸后成为可分泌的e抗原。HBeAg为可溶性蛋白质，产生后分泌入血。它是在症状出现后大约1周出现，通常在几周后消失，但HBV慢性感染者可能持续存在。血清HBeAg与HBV复制及疾病传染性相关，在HBsAg阳性人群中，HBeAg的消失以及抗-HBe的出现是血清学转换的标志，这与HBV复制和传染性相对减弱相关。e抗原的血清学转换在临床治疗、预后判断过程中具有重要的意义。 近年来发现在一部分感染者中，HBV发生了在Pre C区的基因突变，导致HBeAg不能合成或合成量降低，从而出现了患者血清HBeAg检测结果为阴性，但HBV DNA仍在显著复制的情况。 （二）本指导原则适用范围