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2010年版中国药典品种盐酸多西环素及其制剂含量和有关物质测定用HPLC法的建立

2010年版中国药典品种盐酸多西环素及其制剂含量和有关物质测定用HPLC法的建立
2010年版中国药典品种盐酸多西环素及其制剂含量和有关物质测定用HPLC法的建立

2010年版中国药典品种盐酸多西环素及其制剂

含量和有关物质测定用HPLC法的建立

袁耀佐1*;张玫1;钱文1;杨志明2;赵恂1

(1 江苏省食品药品检验所,南京 210008 ;2 常州制药厂有限公司,常州 213018)

摘要目的:建立先进的盐酸多西环素及其制剂含量和有关物质测定方法,用于2010年版中国药典。方法:用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂(pH值适用范围应大于9);以醋酸盐缓冲液[0.25mol/L醋酸铵-0.1mol/L乙二胺四醋酸二钠-三乙胺(100:10:1),用冰醋酸或氨水调节pH值至8.8]-乙腈(85:15)为流动相;柱温35℃;检测波长为280nm,流速:1.0ml/min;进样体积:20μl。结果:新色谱条件中用醋酸铵代替草酸铵,解决了《中国药典》2005年版流动相中容易结晶析出堵塞系统管路的问题;通过调整流动相pH值提高了柱效,通过添加EDTA钠和三乙胺改善色谱峰的对称性,使部分原来色谱条件无法有效分离杂质C和杂质F在新系统中能与相邻峰完全分离。代表性样品色谱图中检出6个主要杂质峰,用杂质对照品对杂质A(?-多西环素)、B(美他环素)、E(土霉素)进行了定位;用文献方法制备含已知杂质的溶液对杂质C(4-表多西环素)、D(4-表-6-表多西环素)进行了定位;用制备薄层色谱制得杂质F(2-乙酰-2-脱碳酰胺多西环素)溶液(纯度大于99%),用LC-ESI-IP-MS2对主成分的结构进行了鉴定,用该溶液对杂质F 进行了定位,土霉素、美他环素、?-多西环素相对于多西环素的相对响应因子(relative response factor,RRF)分别为0.95、1.29、0.77。建立的方法在0.07~122.556μg/ml范围内线性良好(r=1.0),检测限和定量限分别约为0.016、0.063μg/ml,多西环素及已知杂质的检测精密度良好,片剂和胶囊的回收率分别为99.2%(n=9)、99.4%(n=9)(RSD%均为0.2%),主成分在0.01mol/L的溶剂中可以稳定24小时。微调该色谱条件,可用于土霉素、四环素、金霉素、米诺环素和美他环素的含量和有关物质的测定。结论:建立的方法优于CP2005、USP31/NF26、BP2008、Ph.Eur 6.0、JPⅩⅤ中同品种方法,被2010年版中国药典采用。

关键词盐酸多西环素;高效液相色谱法;含量测定;有关物质;中国药典2010版

The Establishment of Chromatographic Analysis Method of Doxycycline Hyclate and Its Preparations for Pharmacopoeia of the People’s Republic of China 2010

Yuan Yao-zuo1, Zhang Mei1,Qian Wen1,Yang Zhi-ming2 and Zhao Xun1

(1.Jiangsu Institute for drug control, Nanjing 210008; 2.Changzhou Pharmaceutical factory Changzhou 213018) Abstract Objectives To establish a better chromatographic analysis method of doxycycline hyclate and its preparations for Pharmacopoeia of the People’s Republic of China 2010 . Methods Carry out the method for high performance liquid chromatogram, using a column packed with octadecysilane bonded silica gel and a mixture of a buffer solution which consist

of 100 volumes of 0.25 mol/L ammonium acetate solution, 10 volumes of 0.1 mol/L ethyldiaminetetraacetic acid disodium

salt solution and 1 volume of triethyamine adjusting pH to 8.8 with glacial acetic acid –acetonitrile (85:15) as the mobile phase, maintain the column temerature at 35℃, detection wavelength is 280nm, flow rate is 1 mL·min-1, injection volume is

20μl.Results The chromaotograhic mobile phase of doxycycline hyclate and its preparations used in CP2005 was changed completely, substituting ammonium acetate for ammonium oxalate as buffer salt to avoid the tunnel block of chromatographic system, substituting acetonitrile for dimethylformamide and tetrahydrofuran, the adjustment of pH value of mobile phase improves the separation ability, the addition of triethyamine and ethyldiaminetetraacetic acid disodium improves the symmetry of peaks. Impurity C and impurity F which can’t be separated effectively with their neighboring components in

CP2005 chromatographic system can be separated completely under the new chromatographic system. Impurity A

(6-epidoxycycline), B(metacycline), E(oxytetracycline) were located in the chromatogram by impurity standards. Impurity C (4-epidoxycycline), D(4-epi-6-epi-doxycycline) were located in the chromatogram by impurity solutions prepared according as literature methods, impurity F was located by the solution of impurity F which prepared by a preparative TLC method, and identified by LC-ESI-IP-MS2, the relative response factors of oxytetracycline, metacycline and 6-epidoxycycline were 0.95, 1.29 and 0.77 respectively. The linear range was 0.07~122.556μg/ml (r=1.0). The precision of method is good.The average recovery of the tablet method was 99.2%(n=9) and RSD% 0.2%, the average recovery of the capsule method was 99.4%(n=9) and RSD% 0.2%. Doxycycline can be stable in a 0.01 mol/L hydrochloric acid solution for 24hours. This chromatographic system can be applied to the determination of oxytetracycline, tetracycline, chlorotetracycline, minocycline and metacycline

by adjusting the mobile phase ratio of acetate buffer and acetonitrile. Conclusions the established method was better than the corresponding methods of CP2005,USP31/NF26,BP2008,Ph.Eur 6.0 and JPⅩⅤ and was used in CP2010.

Key words Doxycycline hyclate High performance liquid chromatography Assay Related substances Pharmacopoeia of the People’s Republic of China 2010

*袁耀佐,男,1968.03.10,博士,副主任药师,主要从事抗生素药物质量分析。

引言盐酸多西环素(Doxycycline Hyclate)是以土霉素为原料制得的半合成广谱四环类抗生素[1],其含半分子乙醇和半分子结晶水的盐酸盐在临床上有着广泛的应用,盐酸多西环素及其片剂、胶囊剂在USP31/NF26、BP2008、Ph.Eur 6.0、JPⅩⅤ和中国药典2005年版等标准中均有收载[2~7],Ph.Eur 6.0提供了其6个潜在杂质的化学结构,分别命名为杂质A、B、C、D、E、F,多西环素及其潜在杂质的化学结构如图1所示[4]。

1

4

R1R2R3R4R5多西环素(doxycycline) NH2H N(CH3) 2H CH3杂质A(?-多西环素,6-表多西环素6-epidoxycycline) NH2H N(CH3) 2CH3H 杂质B(美他环素,metacycline)NH2H N(CH3) 2R4+R5 =CH2

杂质C(4-表多西环素, 4-epidoxycycline)NH2N(CH3) 2H H CH3杂质D(4-表-6-表多西环素, 4-epi-6-epidoxycline)NH2N(CH3) 2H CH3H 杂质E(土霉素, oxytetracycline) NH2H N(CH3) 2OH CH3杂质F(2-乙酰-2-脱碳酰胺多西环素,

CH3H N(CH3) 2H CH3 2-acetyl-2-decarbamoyldoxycline)

图1. 多西环素及有关物质的结构式

Figure 1. the structures of doxycycline and it’s related substances

盐酸多西环素及其制剂含量和有关物质测定方法报道很多,主要以HPLC方法为主,因多西环素为两性化合物,文献中有采用高氯酸溶液[8]或冰醋酸[9]调节pH的偏酸性流动相(pH值<2),但法定标准中均采用偏碱性的流动相(pH值≥8)[2~7],从色谱柱的耐用性考虑,CP2005采用耐碱的C18柱,而USP、BP、Ph.Eur、JP均采用耐酸碱的聚乙烯-二乙烯基苯(styrene-divinylbenzene)色谱柱,标准研究前期,作者对这几种方法均进行了考察,结果表明,CP2005的方法在柱效、分离能力及色谱柱的通用性方面均优于国外现行的药典方法(聚合物柱),但主峰仍然很宽(大于2分钟),无法使主峰与后相邻峰(杂质F)有效分离,调研结果显示,各单位均反映CP2005流动相溶液堵塞色谱系统,分析原因可能是草酸铵容易结晶析出,加之CP2005流动相中的二甲基甲酰胺容易吸附在管路和检测池中,会导致后续检测品种尤其是低波长检测品种基线严重不稳。

为此,我们以宽pH范围的C18填料为固定相,对多西环素色谱行为主要影响因素进行了系统地研究,对流动相中缓冲盐的种类和浓度、pH值的变化、有机溶剂的种类和比例、金属离子螯合剂和扫尾剂的添加与否等方面进行考察,以多西环素及其主要有关物质与相邻色谱峰之间的分离度、峰宽、拖尾因子等为评价指标,同时兼顾方法的重复性、耐用性等方面的综合因素,最终确定了多西环素及其制剂的含量和有关物质测定的色谱条件,与《中国药典》2005年版的色谱条件相比,现有条件在流动相上有重大改变:用常规的醋酸铵替代容易结晶析出的草酸铵,用乙腈代替不太常用的N,N-二甲基甲酰胺和四氢呋喃,由于四环类抗生素容易与一些重金属离子络合造成色谱峰拖尾,在流动相中还添加了少量的EDTA,同时将流动相的pH值由原来8.0±0.2调整为8.8,新系统的分离效果明显优于原来的条件:色谱峰明显变窄,分离能力增强,原来色谱条件无法分离与相邻峰有效分离的杂质C及杂质F在现有条件均能得到完全分离,作者还采用多种现代分析手段对典型样品中检出的主要杂质进行了结构鉴定,并测定了部分有对照品的杂质与主成分之间的相对响应因子(relative

ⅪⅩ《药品质量标准分析方法验证指导response factor,RRF),建立的方法按2005年版二部附录 A

原则》中的要求进行了系统验证。本方法明显优于CP2005、USP31/NF26、BP2008、Ph.Eur 6.0、JPⅩⅤ中同品种方法,已被2010年版中国药典采用。该色谱条件经微调后,可以应用在其他常见的四环类抗生素,具有一定的通用性,2010版药典中除金霉素外,其余所有四环类品种的色谱分离用流动相均是以本文方法为基础优化得到的,现报道如下。

1、实验材料与方法

1.1 主要仪器与试药

液相色谱仪:Waters2695-2996(Waters公司,美国),分析天平Mettler Toledo XS205(Mettler Toledo公司,瑞士),Agilent 1100 LC /MSD Trap液质联用仪(美国Agilent 公司)。

色谱柱1:美国菲罗门Phenomenex Gemini C18(250×4.6mm, 5μm);

色谱柱2:美国菲罗门Phenomenex luna C18(150×4.6mm , 5μm);

色谱柱3:日本资生堂SHISEIDO CAPCELL PAK MG II C18 (4.6mm×150mm, 5μm);

色谱柱4:日本资生堂SHISEIDO CAPCELL PAK MG C18(4.6mm×150mm ,5μm);

色谱柱5:美国安捷伦Agilent ZORBAX Extend-C18(3.0×250mm,5μm);

色谱柱6:美国安捷伦Agilent ZORBAX Extend-C18(4.6×150mm ,5μm);

色谱柱7(styrene-divinylbenzene填料):美国菲罗门Phenomenex polymerx (4.6mm×250mm, 5μm ) ;

色谱柱8(styrene-divinylbenzene填料):Polymer Labotatories PLRP-S (250×4.6mm,8μm,1000A).

多西环素、?-多西环素(6-epidoxycycline)、土霉素、美他环素等对照品均来自中国药品生物制品检定所;盐酸多西环素、盐酸多西环素片、盐酸多西环素胶囊分别由多家企业提供。

醋酸铵、EDTA钠盐、磷酸氢二钠、三乙胺、冰醋酸、硫酸四丁基氢氧化铵均为分析纯;N,N-二甲基甲酰胺、四氢呋喃、乙腈、叔丁醇均为色谱纯,

1.2 色谱条件及质谱条件

1.2.1 色谱条件1(优化条件)

色谱柱:C18柱,流动相:醋酸盐缓冲液[0.25mol/L醋酸铵-0.1mol/LEDTA钠盐-三乙胺(100:10:1)用冰醋酸调节pH值至8.8]:乙腈=85:15;柱温:35℃;检测波长:280 nm;流速:1.0ml/min;进样体积:20μl。

1.2.2色谱条件2(CP2005方法):

色谱柱:C18,流动相:0.05mol/L草酸铵-二甲基甲酰胺-0.2mol/L磷酸氢二铵(65:30:5),用氨试液调节pH至8.0±0.2;等度洗脱,柱温:35℃;流速:1ml/min;检测波长280nm,进样体积:20μl。

1.2.3色谱条件3(USP31/NF26、BP2008、JPⅩⅤ方法)

色谱柱:聚苯乙烯-二乙烯基苯(styrene-divinylbenzene)柱;流动相:分别取2.72g磷酸氢二钾,0.74g氢氧化钠,0.50g 硫酸四丁基氢氧化铵,0.4gEDTA至1000量瓶中,加850ml水,加60g叔丁醇(借助适量的水),用水稀释至刻度,用1N氢氧化钠调节pH至8.0±0.1;等度洗脱,柱温:60±1℃;流速:1ml/min,检测波长270nm,进样体积:20μl。

1.2.4杂质F结构确证的质谱条件:ESI离子源;离子源温度:350℃;雾化室压力:35psi;干燥气流速:8 L /min;离子扫描范围: 50~650m / z;正离子检测方式。

1.3 溶液的制备:

1.3.1色谱条件优化用溶液:

(1)4-表多西环素(4-epidoxycycline)溶液:参考USP31/NF26同品种分离度测定溶液制备方法,称

取多西环素对照品适量,用0.01mol/L的盐酸溶解并稀释制成0.4mg/ml的溶液,至水浴中加热60min,放冷至室温,按USP31/NF26的色谱条件进行分析,记录的色谱图中(图略),除多西环素峰外,另有一主要杂质峰,应为4-表多西环素峰。

(2)4-表-6-表多西环素(4-epi-6-epi-doxycycline)溶液:参考文献制备方法[10],称取6-表多西环素(?-多西环素)对照品适量,用0.01mol/L的盐酸溶解并稀释制成0.4mg/ml的溶液,至水浴中加热60min,放冷至室温,按USP31/NF26的色谱条件进行分析,记录的色谱图中(图略),除6-表多西环素峰外,另有一主要杂质峰,应为4-表-6-表多西环素峰。

(3)色谱条件优化用溶液 1 (2005年版方法中系统适用性考察用溶液):分别称取?-多西环素(6-epidoxycycline)、土霉素、美他环素约10mg,用0.01mol/L的盐酸溶解并稀释制成每1ml中分别含0.2mg的溶液,供色谱条件优化用。

(4)色谱条件优化用溶液2:分别称取?-多西环素(6-epidoxycycline)、土霉素、美他环素约10mg,先用4-表多西环素溶液溶解25ml溶解,再用4-表-6-表多西环素溶液稀释至50ml,供色谱条件优化用。

(5)杂质F(2-乙酰-2-脱碳酰胺多西环素, 2-acetyl-2-decarbamoyldoxycline)溶液的制备

称取盐酸多西环素(后相邻峰含量约为1%)适量,用0.01N盐酸溶解并制成约为1g/ml的溶液,作为供试品溶液,吸取5μl,点于硅胶60H薄层板上,以二氯甲烷-甲醇-水(35:59:6)为展开剂,展开后,晾干,置365nm波长的紫外灯下观察,多西环素斑点前有一杂质斑点(应为反相色谱条件下的后杂峰斑点),将收集分离的后杂峰斑点用甲醇溶解,过滤后取滤液,用HPLC-ESI-IP-MS n对溶液中主成分结构进行鉴定,并在优化得到的色谱条件中进行色谱峰定位(详细数据见2.2.3)。

1.3.2对照品溶液的制备

(1)含量测定对照品溶液精密称定约10mg盐酸多西环素对照品,置于一100ml量瓶中,加0.01mol/L盐酸溶液溶解,并稀释至刻度,摇匀,平行配制2份。

(2)有关物质测定用对照溶液(2%)精密吸取有关物质供试品液1ml置于一50ml量瓶中,加流动相稀释至刻度,摇匀。

1.3.3 供试品溶液的制备

(1)含量测定用供试品溶液精密称定约10mg样品,置于一100ml量瓶中,加0.01mol/l盐酸溶液溶解,并稀释至刻度,摇匀,滤过,取续滤液测定。盐酸多西环素片或胶囊,精密称取片重差异或装量差异下样品,相当于多西环素10mg,其余同原料操作。

(2)有关物质测定用供试品溶液精密称定约20mg样品,置于一100ml量瓶中,加1ml 0.01mol/l 盐酸溶解,用流动相稀释至刻度,摇匀,滤过,取续滤液测定。盐酸多西环素片或胶囊,精密称取片重差异或装量差异下样品,相当于多西环素20mg,其余同原料操作。

2 实验结果

2.1、色谱条件的建立

2.1.1流动相组成的选择和优化

以色谱条件优化用溶液1中多西环素及部分已知有关物质之间的分离度、拖尾因子、峰宽作为指标,考察流动相缓冲盐的种类和浓度、pH值、有机溶剂及其它改性剂如三乙胺、EDTA等添加的对色谱分离和峰型等色谱行为的影响。

2.1.1.1 流动相中缓冲盐种类对色谱分离和峰形的影响

分别配制了0.05mol/ml的醋酸铵、磷酸氢二铵和磷酸二氢钠代替2005版药典流动相中的草酸铵和磷酸氢二铵,其余组成、浓度、pH值等同1.2.1中的色谱条件1,考察缓冲溶液中盐的离子种类对

多西环素及其有关物质的色谱行为的影响,结果显示:浓度相同的醋酸铵、磷酸氢二铵对色谱分离无明显差别,均能将色谱条件优化用溶液中几个主要物质有效分离,并且峰型良好,而磷酸二氢钠流动相体系中多西环素及其有关物质的峰形很差,典型的色谱分离图如图2(a)、(b)、(c)所示,提示:流动相中缓冲盐阳离子的改变会显著影响其色谱行为,流动相中铵离子的存在可以改善色谱峰型,但阴离子的改变对多西环素与其有关物质的色谱分离及峰形影响不大,表明中国药典2005版色谱条件容易结晶析出的草酸铵的添加不是决定色谱分离和峰型的关键因素,完全可以用其他缓冲盐如醋酸铵等替代。

图2. 不同缓冲盐系统中多西环素与有关物质的典型色谱分离图

(a)0.05mo/L醋酸铵;(b)0.05mo/L磷酸氢二铵(c)0.05mo/L磷酸氢二钠Figure 2. the typical chromatograms of doxycycline and its related substances in different buffer solutions of mobile phase

(a) 0.05mo/L ammonium acetate(b)0.05mo/L ammonium dibasic phosphate (c) 0.05mo/L disodium hydrogen phosphate

2.1.1.2 有机溶剂的选择

出于通用性方面的考虑,尝试用甲醇和乙腈替代CP2005流动相中N,N二甲基甲酰胺和四氢呋喃,流动相0.05mol/L醋酸铵-乙腈(用冰醋酸调节pH值至8.2)(80:20)可以将多西环素及部分有关物质与相邻杂质之间有效分离(图3),表明乙腈完全可以可代替N,N二甲基甲酰胺和四氢呋喃。

2.1.1.3 三乙胺及EDTA二钠的添加对色谱分离和峰形的影响

2.1.1.2的色谱条件下的多西环素有前拖尾现象( 图3),且与?-多西环素之间未达到基线分离,按常规应在碱性流动相中添加适量三乙胺作为扫尾剂改善分离,另外据文献报道[11],四环类抗生素抗生素能与很多高价金属离子形成螯合物,为此在流动相中添加适量的EDTA二钠,竞争性地与硅胶载体裸露在外面的残留重金属进行螯合,达到改善峰形和色谱分离的目的,图4为多西环素及其有关物质在流动相醋酸盐缓冲液(0.05mol/L醋酸铵-0.1mol/LEDTA钠盐-三乙胺=100:10:1,用冰醋酸调节pH值至8.2):乙腈=85:15(其余条件同色谱条件1)中的典型色谱分离图;结果显示,添加适量EDTA二钠和三乙胺后的流动相可使多西环素及其有关物质的色谱峰变锐,分离改善。

图3. 用乙腈代替N,N-二甲基甲酰胺典型的的色谱图图4. 添加EDTA二钠与三乙胺的流动相的典型色谱图

Figure 3. the typical chromatogram of doxycycline and its related substances in mobile phase substituting acetonitrile for

dimethylformamide Figure 4. the typical chromatogram of doxycycline and its related substances in mobile phase adding triethyamine and ethyldiaminetetraacetic acid disodium

2.1.1.4 缓冲盐浓度的优化

在2.1.1.3流动相的基础上,分别考察了0.05mol/L、0.1mol/L、0.2mol/L和0.25mol/L浓度的醋酸铵对多西环素、美他环素、?-多西环素及土霉素的拖尾因子、峰宽及与相邻峰之间的分离度的影响,

结果显示,在醋酸铵溶液在0.05~0.25mol/L 浓度范围内,随浓度的增加,混合溶液中主成分多西环素与相邻杂质的分离度有所增加,色谱峰的峰宽和拖尾因子变化不大, 考虑盐浓度太高对色谱柱会影响色谱柱的使用,未对考察更高浓度醋酸铵溶液对多西环素及其杂质色谱行为的影响,故选择醋酸铵浓度为0.25mol/L。

2.1.1.5 流动相pH值的优化

预实验结果显示,碱性流动相条件下,pH值增加有利于四环类抗生素分离,但影响色谱柱中硅胶载体填料寿命,为此,用冰醋酸将流动相中的水相部分即“流动相A:0.25mol/L醋酸铵-0.1mol/LEDTA钠盐-三乙胺(100:10:1)”分别调节至pH7.5、8.0、8.5,其余条件同1.2.1,用色谱条件优化用溶液1考察流动相的pH值对多西环素及其有关物质色谱行为的影响,结果显示,在pH7.5与pH8.0时,美他环素和土霉素未有效分离,在pH8.5时,各组分良好的分离,且具有适宜的峰宽与拖尾因子(图略),但pH8.5的流动相条件下4-表多西环素的峰形很差(图5),且无法与相邻杂质有效分离,为此,用优化用溶液2(混有4-差向多西环素的混合溶液)对流动相的pH值在8.5~9.0的范围内进一步优化,结果显示,当流动相的pH值达到8.8后,优化用溶液2中各组分的峰形、分离度及拖尾因子均有明显改善,满足常规的分析要求,优化后的典型色谱分离图见图6,详细的优化结果见图7-1、7-2、7-3,结果表明,随流动相溶液pH增加,多西环素、4-差向多西环素与相邻杂质峰之间的分离度均有增加,而色谱峰变窄,当流动相大于pH8.7,4-差向多西环素峰形良好,综合平衡色谱峰形、分离能力及流动相pH值对色谱柱填料影响之间的利弊,选择流动相pH值为8.8。

图5. 4-差向多西环素溶液在pH 8.5的流动相中的色谱分

离图图6.多西环素及有关物质混合溶液在pH8.8的流动相中的色谱分离图

Figure 5. the typical chromatogram of 4-epidoxycycline in a pH 8.5 mobile phase Figure 6. the typical chromatogram of doxycycline and its related substances in pH 8.8 mobile phase

图7-1. pH值对各组分峰分离度的影响图7-2. pH值对各组分峰拖尾因子的影响图7-3. pH值对各组分峰峰宽的影响

Figure 7-1. the effects of mobile phase pH value on the resolutions of doxycycline and its related substances Figure 7-2. the effects of mobile phase

pH value on the tailing factors of

doxycycline and its related substances

Figure 7-3. the effects of mobile phase

pH value on the peak width of

doxycycline and its related substances

2.1.2、柱温对色谱行为的影响

柱温的改变,对四环类抗生素色谱峰的展宽、分离度等有明显的影响,随柱温升高,各色谱峰尤其是多西环素峰明显变窄,分离度增加,考虑到温度升高影响色谱柱寿命,本色谱条件中规定柱温为35℃。

2.1.3、进样体积对色谱行为的影响

分别考察10、15、20、25、30μl进样量(0.2mg/ml的样品溶液)条件下的色谱峰型及分离情况,在10~30μl进样体积下,各色谱峰型及分离度无显著差异,考虑到定量环的普适性,进样量选择为20μl。

2.1.4、色谱条件的确定

根据上述实验结果,最终确立了多西环素及其制剂的色谱条件:色谱柱:C18(耐碱柱),流动相为[ 0.25mol/L醋酸铵-0.1mol/LEDTA钠盐-三乙胺(100:10:1),用冰醋酸调节pH至8.8]-乙腈(85:15);等度洗脱;检测波长:280nm;柱温:35℃;流速:1ml/min,进样量20μl。

2.2、新色谱系统中主要杂质的定位

2.2.1、有杂质对照品色谱峰定位(杂质A、杂质B和杂质E)

按建立的色谱条件,检查多批原料药中的有关物质,代表性色谱图如图8所示,检出6个主要杂质,目前可以得到的杂质对照品有土霉素、美他环素和?-多西环素,用已知杂质色谱保留时间进行定位的方法,确定图8中t R=11.67min的为?-多西环素(杂质A 或6-表多西环素)、t R=9.518min的为美他环素(杂质B)、t R=5.892min的为土霉素(杂质E)。

图8 商品化样品中盐酸多西环素及主要杂质的典型色谱图

Figure 8. the typical chromatogram of commercial doxycycline hyclate

2.2.2、有杂质对照溶液制备方法的色谱峰鉴定(杂质C和杂质D)

由文献【2】可知,1.3.1(1) 溶液中主要杂质为4-表多西环素,由文献【10】可知,1.3.1(2)溶液中主要杂质为4-表-6-表多西环素,采用色谱保留时间定位方法,确定图8中t R=8.582min为4-表多西环素(杂质C)的色谱峰、t R=7.212min的为4-表-6-表多西环素(杂质D)的色谱峰。

2.2.3、后相邻峰(杂质F)的结构鉴定

用已知杂质对照品法(2.2.1)和直接制备杂质对照溶液方法(2.2.2)对图8中主要6个杂质中的5个进行了定位,推测t R=18.031min处的杂质峰为杂质F,即2-乙酰-2-脱碳酰胺多西环素(2-acetyl-2-decarbamoyldoxycline)。为了验证推测结果,作者参考Phr.Eu4.0中多西环素鉴别用TLC 方法[12],以商品化样品为原料,制备了部分杂质F溶液,用建立的色谱条件对其纯度进行分析,色谱如图9所示,其色谱保留时间为18.022min,与样品中检出的后相邻峰色谱保留时间一致,采用流动注射的方法,用ESI-IP-MS n采集其主成分的一级和二级质谱,其准分子离子的[M+H]+为444,与2-乙酰-2-脱碳酰胺多西环素的分子量(MW443)吻合,二级质谱碎片离子为m/z426、400、320、315、302(图10),按杂质F的结构解析,其裂解途径如图11所示,各碎片离子均能得到合理解释,证明制备得到的溶液中主成分为2-乙酰-2-脱碳酰胺多西环素,图8中多西环素的后相邻峰即为杂质F。

图9.杂质F制备溶液纯度测定的色谱图图10. 杂质F的二级质谱图Figure 9. the chromatogram of impurity F

solution prepared by TLC

Figure 10. MS2 of impurity F

3

N

3

3

H+

[M-O

H

2

]+m/z426

m/z444

m/z320

N

3

CH

3

H N

3

3

3

N

3

3

m/z400

+

3

m/z315

m/z302

F

杂质

图11. 杂质F的二级质谱裂解途径

Figure 11. the MS2 fragmentation paths of impurity F

2.3、方法的验证

2.3.1专属性考察

2.3.1.1 辅料干扰实验

分别按盐酸多西环素片及胶囊的处方配制混合辅料溶液,在优化后的色谱系统中进样,结果显示,片剂及胶囊剂中的各组分在280nm检测波长下均未检出,不干扰样品的测定(图略)。

2.3.1.2 破坏实验

分别取盐酸多西环素、盐酸多西环素片和盐酸多西环素胶囊经酸(0.1mol/L盐酸溶液,24hr)、碱(0.1mol/L氢氧化钠溶液,24hr)、光照(4500Lx,24hr)、氧化(双氧水溶液)、干热(60℃,48hr)、高湿(RH92.5%,48hr)等破坏实验,结果表明,经碱和氧化破坏后,盐酸多西环素及其两种制剂的含量降幅程度大,而酸、光照、干热和高湿破坏后,含量降幅不大,但所有破坏实验均会使样品有关物质个数增多,杂质总数增加,优化后的色谱条件能使这些样品中的主成分、主要有关物质与相邻杂质有效分离。典型的盐酸多西环素原料色谱分离图如图12(a)~(f)所示。

图12. 盐酸多西环素不同条件下破坏后的典型色谱分离图

(a) 双氧水氧化 (b) 0.1mol/L 氢氧化钠 (c)光照24hr ;(d)0.1mol/L 盐酸 (e) 60℃加热48hrs(f) RH92.5%环境中放置48hrs

Figure 12. the typical chromatograms of doxycycline hyclate degradated in different conditions

(a) hydrogen peroxide solution (b) 0.1mol/L sodium hydroxide solution (c)light (d) 0.1mol/ L hydrochloric acid

(e)heated at 60 for 48hrs ℃ (f) RH92.5% for 48hrs

2.3.2标准曲线的绘制

配制盐酸多西环素对照贮备液(约1mg/mL ),精密量取对照贮备液配制成各浓度分别为0.07、0.1751、0.3502、0.7003、1.4006、2.8013、3.5016、4.2019、8.754、17.508、35.016、52.524、70.032、87.540、105.048、122.556 μg/ml 的溶液,分别进样20μl ,测定峰面积。以峰面积Y 对浓度X 进行线性回归,得出回归方程:Y=3.73E+04X-3.04E+03,R =1.0,结果表明:在0.07~122.556μg/ml 浓度范围内线性关系良好。

2.3.3 多西环素及部分已知杂质的检测限和定量限

分别取多西环素、?-多西环素、土霉素、美他环素对照品适量,精密称定,用0.01mol/L 的盐酸溶液溶解并稀释制成约0.1mg/ml 的溶液,并逐级稀释,考察多西环素及已知杂质对照品的检测限(S/N=3)和定量限(S/N=10), 结果如表1所示。

表1. 多西环素及已知杂质的检测限和定量限

Table1. the limit of detection and the limit of quantity of doxycycine and some known impurites

多西环素 doxycycline ?-多西环素 ?- doxycycline 土霉素 oxytetracycline 美他环素 metacycline

检测限(μg/ml ) limit of detection

0.016 0.015 0.00285 0.0036 定量限(μg/ml ) limit of quantity

0.063 0.039 0.0092 0.0012

2.3.4 片剂及胶囊的回收率实验

分别用盐酸多西环素对照品与片剂或胶囊剂辅料,分别定量配制成相对含量约为80%、100%、120%三种溶液(共9份),进行回收率测定,盐酸多西环素片回收率为99.2% ,RSD 为0.2%;盐酸多西环素胶囊回收率为99.4% ,RSD 为0.2%。

2.3.5精密度实验

(1)进样精密度:分别取含量测定用对照溶液及有关物质测定用对照溶液,分别连续6针进样,峰面积的RSD 均为0.1%。 (a) (b) (c) (d) (e) (f)

(2)重复性:分别选择一批有代表性的原料、片剂和胶囊,分别独立测定含量6次,原料及制剂含量的6份测定结果的RSD%均小于0.5%,有关物质6份测定结果的的最大绝对差值(B)均小于0.1%。(3)中间精密度:分别选择一批有代表性的原料、片剂和胶囊,采用不同的分析人员和不同分析仪器和不同的时间(以天为基础)测定其含量和有关物质,结果表明,不同人不同仪器不同天测同一批样品所得结果,多西环素含量的RSD均小于2.0%,有关物质之差绝对值(B)均小于0.1%。

(4) 重现性:分别选取3批有代表性的原料、片剂和胶囊剂,供天津药检所进行复核,结果显示,原料和制剂的含量测定结果的最大绝对差值(B)均在1%以内;有关物质测定结果相对误差小于10%。

2.3.6 供试品溶液溶剂的选择及溶液稳定性实验

本品含量和有关物质测定用溶液是采用0.01mol/L的盐酸进行配制,而未采用常规的流动相溶解,主要是因为四环类抗生素在碱性水溶液特别容易氧化,颜色很快变深,形成色素,在酸性溶液中较稳定的缘故。

分别制备一批原料、制剂的供试品溶液,分别在0时(初始点),24小时测试,结果表明,样品溶液在24小时内是稳定的。

2.3.7 耐用性实验

制备系统适用性溶液,在正常流动相的基础上,分别在较小范围内改变流动相的pH、有机相比例、柱流速、柱温、波长等参数,并更换不同厂家、不同柱长的色谱柱,每次只改变一个参数,记录各已知峰的保留时间RT、理论塔板数N、拖尾因子T及分离度R等,实验结果表明,不同厂家不同柱效的色谱柱对多西环素的色谱保留及其分离度有一定影响,但均能满足分离要求。

表2. 不同色谱柱系统适用性考察结果

Table2.the test results of chromatographic system suitability in different C18 columns

色谱柱信息column 流动相比例(A:B)

Ratio of mobile phase

保留时间(min)

Retention time

理论板数

theoretical

number of plates

分离度

Resolution

拖尾因子

Tailing factor

1号柱85:15 25.072 4312 5.7 0.93

2号柱85:15 19.641 3850 4.6 1.06

3号柱85:15 13.228 4086 6.2 0.98

4号柱85:15 14.429 3677 5.8 1.08

5号柱87:13 14.898 2333 5.0 1.17

6号柱87:13 13.03 2353 5.3 1.06

备注1:表2中的流动相比例指流动相A(0.25mol/L醋酸铵-0.1mol/LEDTA钠盐-三乙胺(100:10:1),用磷酸调节pH至8.8)与流动相B(乙腈)之间的比例。 

备注2:表2中分离度指:多西环素与β-多西环素之间的分离度;理论板数和拖尾因子均为多西环素色谱峰的。 2.3.8、已知杂质与多西环素之间相对响应因子的考察及有关物质计算方法的确定

为考察2005年版药典中有关物质计算方法(不加校正因子的主成分自身对照法)的合理性,分别制备已知浓度(约0.1mg/mL)多西环素、土霉素、美他环素、?-多西环素混合溶液,连续进样6次,根据相应峰面积与浓度,计算各杂质相对于多西环素的相对响应因子(RRF),结果表明,土霉素RRF=0.95,美他环素RRF=1.29,?-多西环素RRF=0.77,该检测条件下,土霉素与多西环素的吸收系数一致,可以互相替代,而美他环素的吸收系数大于多西环素,?-多西环素的吸收系数又小于多西环素,根据2005年版附录《药品杂质分析指导原则》中不加校正因子的主成分自身对照法要求杂质与主成分之间的校正因子在0.9~1.1范围内的要求,建议采用加校正因子的主成分自身对照法,但考虑到质量标准的延续性,同时考虑到某些对照品只是供定位使用,其含量的可靠性需要考察,可能会影响上述RRF测定结果的准确性,故本次拟定的标准中仍采用不加校正因子的主成分自身对照法进行有关物质的计算。

2.3.9 测定结果

用建立的方法分别对来源于不同企业(具体企业的名称略)的9批原料、18批片剂、1批胶囊(只征集到一批)中的含量和有关物质测定,测定结果分别见表3。

表3. 盐酸多西环素及其制剂的含量和有关物质测定结果

Table3. the results of assay and related substances of doxycycline hyclate and its preparations

检测项目 test

有关物质related substances (%) 批号 batches 土霉素 oxytetracy cline 美他环素metacycline ?-多西环素?- doxycycline 最大单个未知杂质 The maximum unknown impurity 总有关物质 Total impurity

含量 Assay (%) 200710013 0.01 1.88 0.80 2.90 91.4 200710014 0.05 1.42 0.70 2.31

93.1 200710015 0.01 1.89 0.80 2.93 91.0 20080112 0.86 1.41 0.62 3.01 89.6 20080113 0.63 1.99 0.77 3.55 90.9 20080114 0.47 1.85 0.64 3.16

91.1 CB1201 0.03 1.55 0.62 2.44

91.3 原料药 Material drug CB1202 未检出 No detected 0.04 1.40 0.57 2.14

91.1 080201 0.06 2.02 0.88 3.57

90.1 060702 0.24 1.88 0.92 4.15

94.4 070901 0.11 1.93 0.79 3.31

90.1 070902 0.11 1.94 0.80 3.31

89.8 070401 0.02 1.45 1.52 3.53

96.4 070902 0.02 1.50 1.29 4.17

91.4 080101 0.29 0.69 1.06 2.74

97.8 20070701 0.11 1.80 0.64 3.15

102.2 0603312 0.47 1.80 0.78 3.48

92.5 050501 0.19 1.89 0.81 3.33

95.1 050502 0.19 1.90 0.82 3.39

95.9 050503 0.19 1.90 0.82 3.40

96.5 0606091 0.40 2.01 2.55 6.17

96.5 0706221 0.06 1.57 3.14 6.10

95.4 0709011 0.01 1.46 1.04 3.52

97.1 07121015 0.18 0.51 0.40 1.64

98.5 片剂 tablets 080101 未检出 No detected 0.01 2.01 0.91 3.46

96.1 胶囊 capsule

0801201 未检出

No detected 0.01 1.92 0.62 2.69 95.7 3、讨论

3.1、新建立HPLC 方法明显优于CP2005及EP 、USP 和JP 现行的药典方法:

(1) 分离能力强:EP 、USP 和JP 现行药典方法可以使多西环素与6-表多西环素有效分离,但不能同时分离土霉素、美他环素、6-表多西环素和多西环素,且色谱峰很宽,CP2005方法无法使4-差向多西环素(EP 中impurity C )、2-乙酰-2-脱碳酰胺多西环素(EP 中impurity F )与相邻峰良好分离;新建立的系统完全可以使上述杂质之间及与多西环素之间完全分离,并且峰型对称尖锐。

(2)适用性好:与CP2005方法相比,色谱流动相中更换掉了容易堵塞色谱系统的草酸铵,并且采用更常用的乙腈替代了N,N-二甲基甲酰胺和四氢呋喃,流动相比国外药典方法更简单。

3.2、建立的方法不仅适用于多西环素,也适用于常见的其他四环类抗生素,如土霉素、四环素、米诺环素、美他环素、金霉素等品种,2010年中国药典收载的四环类抗生素中,除金霉素外,其余品种的色谱分离条件均是本文建立的色谱条件基础上优化得到的。

表4. 常见四环类抗生素的色谱条件

Table4. the chromatographic system of the familiar tetracycline antibiotics

土霉素oxytetracycline

四环素

tetracycline

金霉素

chlorotetracycline

美他环素

metacycline

米诺环素

minocycline

流动相比例(A:B)

Ratio of mobile phase

90:10 82:18 82:18 85:15 75:25 流动相pH值

pH value of mobile phase

8.0 8.3 8.3 8.3 8.3

柱温(℃)

Column temperature

35 35 50 35 35

注:上表中A为不同pH值的醋酸盐缓冲液(见1.2.1); B为乙腈

图13.常见四环类抗生素的色谱分离图

(a)土霉素;(b)四环素;(c)米诺环素;(d)金霉素;(e)美他环素

Figure 13. the chromatograms of the familiar tetracycline antibiotics

(a) oxytetracycline (b) tetracycline (c) minocycline (d) chlorotetracycline (e) metacycline

3.3本文提示:药物质量质量控制方法“只有更好,没有最好”,部分老品种的“成熟”方法及国外先进国家质量标准中方法均可能有提高的空间,这对现阶段国家标准提高计划具有一定提示和借鉴意义。

致谢:中国药科大学2008级研究生孙德助同学参与了部分实验工作,在此表示感谢! 

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2010年版中国药典品种盐酸多西环素及其制剂含量和有关物质测定用

HPLC法的建立

作者:袁耀佐, 张玫, 钱文, 杨志明, 赵恂

作者单位:袁耀佐,张玫,钱文,赵恂(江苏省食品药品检验所,南京 210008), 杨志明(常州制药厂有限公司,常州213018)

本文链接:https://www.wendangku.net/doc/043982172.html,/Conference_7207454.aspx

2015年版中国药典四部凡例

总则 一、《中华人民共和国药典》简称《中国药典》,依据《中华人民共和国药品管理法》组织制定和颁布实施。《中国药典》一经颁布实施,其同品种的上版标准或其原国家标准即同时停止使用。 《中国药典》由一部、二部、三部、四部及其增补本组成。一部收载中药,二部收载化学药品,三部收载生物制品,四部收载通则和药用辅料。 本部为《中国药典》四部。 二、国家药品标准由凡例与正文及其引用的通则共同构成。药典收载的凡例与通则对未载入本版药典但经国务院药品监督管理部门颁布的其他中药标准具同等效力。 三、凡例是正确使用《中国药典》进行药品质量检定的基本原则,是对《中国药典》正文、通则及与质量检定有关的共性问题的统一规定。 四、正文中引用的药品系指本版药典收载的品种,其质量应符合相应的规定。 五、正文所设各项规定是针对符合《药品生产质量管理规范》(Good Manufacturing Practices,GMP)的产品而言。任何违反GMP或有未经批准添加物质所生产的药品,即使符合《中国药典》或按照《中国药典》没有检出其添加物质或相关杂质,亦不能认为其符合规定。 六、《中国药典》的英文名称为Pharmacopoeia of The People's Republic of China;英文简称为Chinese Pharmacopoeia;英文缩写为ChP。 七、《中国药典》各品种项下收载的内容统称为标准正文,正文系根据药物自身的理化与生物学特性,按照批准的来源、处方、制法和贮藏、运输等条件所制定的、用以检测药品质量是否达到用药要求并衡量其质量是否稳定均一的技术规定。 正文 八、《中国药典》各品种项下收载的内容统称为标准正文,正文系根据药物自身的理化与生物学特性,按照批准的来源、处方、制法和贮藏、运输等条件所制定的、用以检测药品质量是否达到用药要求并衡量其质量是否稳定均一的技术规定。 九、药用辅料标准正文内容一般包括:(1)品名(包括中文名、汉语拼音与英文名);(2)有机物的结构式; (3)分子式、分子量与CAS编号;(4)来源;(5)制法;(6)性状;(7)鉴别;(8)理化检查;(9)含量测定;(10)类别;(11)贮藏;(12)标示等。 通则 十、通则主要收载制剂通则、通用检测方法和指导原则。制剂通则系按照药物剂型分类,针对剂型特点所规定的基本技术要求;通用检测方法系各正文品种进行相同检查项目的检测时所应采用的统一的设备、程序、方法及限度等;指导原则系为执行药典、考察药品质量、起草与复核药品标准等所制定的指导性规定。 名称及编排 十一、正文收载的药品中文名称通常按照《中国药品通用名称》收载的名称及其命名原则命名,《中国药典》收载的药品中文名称均为法定名称;本版药典收载的原料药英文名除另有规定外,均采用国际非专利药名(International Nonproprietary Names,INN)。 有机药物的化学名称系根据中国化学会编撰的《有机化学命名原则》命名,母体的选定与国际纯粹与应用化学联合会(International Union of Pure and Applied Chemistry,IUPAC)的命名系统一致。 十二、药品化学结构式按照世界卫生组织(World Health Organization,WHO)推荐的“药品化学结构式书写指南”书写。 十三、正文按药品中文名称笔画顺序排列,同笔画数的字按起笔笔形一丨丿丶乛的顺序排列;通则包括制剂通则、通用检测方法和指导原则,按分类编码;索引分按汉语拼音顺序排序的中文索引以及英文名和中文名

2015版中国药典制剂通则-片剂习题

药典制剂通则-片剂试题 (每空4分,共100分) 1、系指用于制剂制备的活性物质,包括中药、化学药、生物制品原料药物。 2、化学药原料药物系指、或来源于天然物质或采用生物技术获得的有效成分(即原料药); 3、制剂通则中各剂型、亚剂型并不适用于所有原料药物,而应取决于原料药物特性、临床给药需求以及药品的和稳定性等。 4、除另有规定外,生物制品应于℃避光贮存和运输。 5、片剂系指原料药物或与适宜的辅料制成的制剂。 6、含片中的原料药物一般是的,主要起局部消炎、杀菌、收敛、止痛或局部麻醉等作用。 7、分散片中的原料药物应是的。分散片可加水分散后口服,也可将分散片含于口中吮服或吞服。分散片应进行溶出度(通则0931)和检查。 8、泡腾片系指含有碳酸氢钠和有机酸,遇水可产生而呈泡腾状的片剂。泡腾片中的原料药物应是易溶性的,加水产生气泡后应能溶解。有机酸一般用枸橼酸、酒石酸、富马酸等。 9、分为防止原料药物在胃内分解失效、对胃的刺激或控制原料药物在肠道内定位释放,可对片剂;为治疗结肠部位疾病等,可对片剂。 10、凡属挥发性或对光、热不稳定的原料药物,在制片过程 中应采取等适宜方法、以避免成分损失或失效。 11、为增加稳定性、掩盖原料药物不良臭味、改善片剂外观等,可对制成的药片。对一些遇胃液易破坏、刺激胃粘膜或需要在肠道内释放的口服药片,可包肠溶衣。必要时,薄膜包衣片剂应检查。 12、片剂外观应完整光洁,,有适宜的硬度和耐磨性,以免包装、运输过程中发生磨损或破碎,除另有规定外,非包衣片应符合片剂(通则0923)的要求。 13、根据原料药物和制剂的特性,除来源于动、植物多组分且难以建立测定方法的片剂外,溶出度、等应符合要求。 14、除另有规定外,片剂应贮存。生物制品原液、半成品和成品的生产及质量控制应符合相关品种要求。 15、重量差异指按规定称量方法测得每片的重量与之间的差异程度。凡规定检查的片剂,一般不再进行重量差异检查。 16、凡规定检查的片剂,一般不再进行崩解时限检查。 17、分散均匀性照崩解时限检查法(通则0921)检查,不锈钢丝网的筛孔内径为710μm,水温为℃;取供试品6片,应在内全部崩解并通过筛网。 18、以动物、植物、矿物来源的非单体成分制成的片剂,生物制品片剂,以及黏膜或皮肤炎症或腔道等局部用片剂(如口腔贴片、外用可溶片、阴道片、

2015年版中国药典四部凡例

《中国药典》2015年版四部 凡例 总则 一、《中华人民共和国药典》简称《中国药典》,依据《中华人民共和国药 品管理法》组织制定和颁布实施。《中国药典》一经颁布实施,其同品种的上版 标准或其原国家标准即同时停止使用。 《中国药典》由一部、二部、三部、四部及其增补本组成。一部收载中药, 二部收载化学药品,三部收载生物制品,四部收载通则和药用辅料。除特别注明 版次外,《中国药典》均指现行版《中国药典》。 本部为《中国药典》四部。 二、国家药品标准由凡例与正文及其引用的通则共同构成。本部药典收载的 凡例与通则对未载入本部药典的其他药品标准具同等效力。 三、凡例是为正确使用《中国药典》进行药品质量检定的基本原则,是对《中国药典》正文、通则与药品质量检定有关的共性问题的统一规定。 四、凡例和通则中采用“除另有规定外”这一用语,表示存在与凡例或通则 有关规定不一致的情况时,则在正文中另作规定,并按此规定执行。 五、正文中引用的药品系指本版药典收载的品种,其质量应符合相应的规定。 六、正文所设各项规定是针对符合《药品生产质量管理规范》Good Manufacturing Practices,GMP)的产品而言。任何违反GMP或有未经批准添加物质所生产的药品,即使符合《中国药典》或按照《中国药典》没有检出其添加 物质或相关杂质,亦不能认为其符合规定。 七、《中国药典》的英文名称为Pharmacopoeia of the People’s Republic of China;英文简称为Chinese Pharmacopoeia;英文缩写为 ChP。 正文

八、《中国药典》各品种项下收载的内容为标准正文。正文系根据药物自身 的理化与生物学特性,按照批准的处方来源、生产工艺、贮藏运输条件等所制定的、用以检测药品质量是否达到用药要求并衡量其质量是否稳定均一的技术规 定。 九、药用辅料标准正文内容一般包括:(1)品名(包括中文名、汉语拼音 与英文名);(2)有机物的结构式;(3)分子式、分子量与CAS编号;(4)来源;(5)制法;(6)性状;(7)鉴别;(8)理化检查;(9)含量测定;(10)类别;(11)贮藏;(12)标示等。 通则 十、通则主要收载制剂通则、通用检测方法和指导原则。制剂通则系按照药 物剂型分类,针对剂型特点所规定的基本技术要求;通用检测方法系各正文品种 进行相同检查项目的检测时所应釆用的统一的设备、程序、方法及限度等;指导 原则系为执行药典、考察药品质量、起草与复核药品标准等所制定的指导性规定。 名称与编排 十一、正文收载的药品中文名称通常按照《中国药品通用名称》收载的名称及其命名原则命名,《中国药典》收载的药品中文名称均为法定名称;本版药典 收载的原料药英文名除另有规定外,均采用国际非专利药名(International Nonproprietary Names,INN)。 有机药物的化学名称系根据中国化学会编撰的《有机化学命名原则》命名,母体的选定与国际纯粹与应用化学联合会(International Union of Pure and Applied Chemistry,IUPAC)的命名系统一致。 十二、药品化学结构式按照世界卫生组织(World Health Organization,WHO)推荐的“药品化学结构式书写指南”书写。

澄清度检查法规定-2015版中国药典

澄清度检查法规定-2015版中国药典 澄清度检查介绍; 澄度检查法系将药品溶液与规定的浊度标准液相比较,用以检查溶液的澄清程度。除另有规定外,应采用法进行检测。品种项下规定的“澄清”,系指供试品溶液的澄清度与所用溶剂相同,或不超过0.5号浊度标准液的浊度。“几乎澄清”,系指供试品溶液的浊度介于0.5号至1号浊度标准液的浊度之间。 2015版药典澄清度检查法目视法 本法系在室温条件下,将用水稀释至一定浓度的供试品溶液与等量的浊度标准液分别置于配对的比浊用玻璃管(内径15~16mm,平底,具塞,以无色、透明、中性硬质玻璃制成)中,在浊度标准液制备5分钟后,在暗室内垂直同置于伞棚灯下,照度为1000lx,从水平方向观察、比较;用以检查溶液的澄清度或其浑浊程度。除另有规定外,供试品溶解后应立即检视。品种项下规定的“澄清”,系指供试品溶液的澄清度相同于所用溶剂,或未超过0.5号浊度标准液。“几乎澄清”则指供试品溶液的浊度介于0.5号至1号浊度标准液的浊度之间。 浊度标准贮备液的制备 称取于105℃干燥至恒重的硫酸肼1.00g,置100ml量瓶中,加水适量使溶解,必要时可在40℃的水浴中温热溶解,并用水稀释至刻度,摇匀,放置4~6小时;取此溶液与等容量的10%乌洛托品溶液混合,摇匀,于25℃避光静置24小时,即得。本液置冷处避光保存,可在两个月内使用,用前摇匀。 浊度标准原液的制备 取浊度标准贮备液15.0ml,置1000ml量瓶中,加水稀释至刻度,摇匀,取适量,置1cm 吸收池中,照紫外-可见分光光度法(附录ⅣA),在550nm的波长处测定,其吸光度应在0.12~0.15范围内。本液应在48小时内使用,用前摇匀。 浊度标准液的制备取浊度标准原液与水,按下表配制,即得。本液应临用时制备,使用前充分摇匀。

无菌检查法-中国药典2010第三部-附录XIIA

附录XII A 无菌检查法 无菌检查法系用于检查药典要求无菌的生物制品、医疗器具、原料、辅料及其他品种是否无菌的一种方法。若供试品符合无菌检查法的规定,仅表明了供试品在该检验条件下未发现微生物污染。 无菌检查应在洁净度万级下的局部洁净度百级的单向流空气区域内或隔离系统中进行,其全过程应严格遵守无菌操作,防止微生物污染,防止污染的措施不得影响供试品中微生物的检出。单向流空气区、工作台面及环境应定期按《医药工业洁净室(区)悬浮粒子、浮游菌和沉降菌的测试方法》的现行国家标准进行洁净度验证。隔离系统应按相关的要求进行验证,其内部环境的洁净度须符合无菌检查的要求。日常检验还需对试验环境进行监控。 无菌检查人员必须具备微生物专业知识,并经过无菌技术的培训。 培养基 培养基的制备:培养基按以下处方制备,亦可用按该处方生产的符合规定的脱水培养基。配制后应采用验证合格的灭菌程序灭菌。制备好的培养基应保存在2~25℃避光的环境,若保存于非密闭容器中,一般可在3周内使用;若保存于密闭容器中,一般可在1年内使用。 1、硫乙醇酸盐流体培养基 酪胨(胰酶水解)15.0g 酵母浸出粉 5.0g 葡萄糖 5.0g 氯化钠 2.5g L-胱氨酸0.5g 新配制的0.1%刃天青溶液 1.0mL 硫乙醇酸钠0.5g (或硫乙醇酸0.3mL) 琼脂0.75g 水1000mL 除葡萄糖和刃天青溶液外,取上述成分混合,微温溶解,调pH值为弱碱性,煮沸,滤清,加入水葡萄糖和刃天青溶液,摇匀,调pH值使灭菌后为7.1±0.2。分装至适宜的容器中,其装量与容器高度的比例应符合培养结束后培养基氧化层(粉红色)不超过培养基深度的1/2,灭菌。在供试品接种前,培养基氧化层的高度不得超过培养基深度的1/5,否则,须经1000℃水浴加热至粉红色消失(不超过20分钟)后,迅速冷却,只限加热一次,并防止被污染。 2、改良马丁培养基 胨 5.0g 磷酸氢二钾 1.0g 酵母浸出粉 2.0g 硫酸镁0.5g 葡萄糖20.0g 水1000mL 除葡萄糖外,取上述成分混合,微温溶解,调pH值约为6.8,煮沸;加入putaotang 溶解后,摇匀,滤清,调pH值使灭菌后为6.4±0.2,分装,灭菌。 3、选择性培养基 按上述硫乙醇盐流体培养基或改良马丁培养基的处方及制法,在培养基灭菌或使用前加入适宜的中和剂、灭活剂或表面活性剂,其用量同方法验证试验。 4、营养肉汤培养基 胨10.0g 氯化钠 5.0g 牛肉浸出粉 3.0g 水1000mL 取上述成分混合,微温溶解,调pH值为弱碱性,煮沸,滤清,调pH值使灭菌后为7.2±0.2,分装,灭菌。 5、营养琼脂培养基 按上述营养肉汤培养基的处方及制法,加入14.0g琼脂,调pH值使灭菌后为7.2±0.2,分装,灭菌。

2015版《中国药典》及相关法规试题

制药企业产品检测理论试题 一、单选题 1下列哪项不属于2015版《中国药典》一部正文收载内容?(C) 2 A.药材和饮片B.成方制剂和单味制剂C.药用辅料D.提取物E.植物油脂 3下列收录在2015年版中国药典第四部中的是(B) 4 A.化学药品B.药用辅料C.生物制品D.中药 5下列哪些不是2015年版中国药典首次收载的指导原则(B) 6 A. 7 C. 8 9 A. 10 11 12 13 A. 14 15 A. 16 C. 17 18 A. 19 B. 20 C. 21 D. 222015版《中国药典》规定,细粉系指能全部通过五号筛,并含能通过六号筛不少于的粉末。(D)23 A.80%B.85%C.90%D.95% 24“能全部通过六号筛,并含能通过七号筛不少于95%的粉末”是(B) 25 A.细粉B.最细粉C.极细粉D.中粉 26铵盐检查所用的水必须是(C) 27 A.超纯水B.纯化水C.无氨水D.注射用水E.新沸冷水 28氯化物杂质检查的条件是(A)

29 A.硝酸酸性下B.醋酸酸性下C.硫酸酸性下D.盐酸酸性下 302015年版《中国药典》旋光度测定法中,一般应在样品溶液配置后内进行测定。(D) 31 A.10分钟B.15分钟C.20分钟D.30分钟E.1小时 32水的电导率与有关。(C) 33 A.水的纯度、pH和温度B.水的纯度、是否含有离子杂质、温度 34 C.水的纯度、是否含含有离子杂质、pH和温度D.水是否含有离子杂质、pH和温度 352015版《中国药典》可见异物检查法中,5瓶注射用无菌冻干粉制剂如检出微细可见异物,每瓶中检出微 36 A.1 37 38 39 40 41 42 43 A. 44 C. 45 46 47 C. 48 49 A. 502015年版中国药典中黏度测定法第二法(乌氏毛细管黏度计法)测定温度应为(A) 51 A.25℃±0.1℃B.20℃±0.05℃C.20℃±0.1℃D.25℃±0.05℃ 52下列不属于临用新配的试液是(A)。 53 A.浊度标准原液B.浊度标准液C.碘化钾试液D.淀粉指示液 54颗粒剂溶化性检查时,加热水,搅拌5分钟,立即观察,该热水温度为(C) 55 A.50~60℃B.60~70℃C.70~80℃D.80~90℃ 56药物干燥失重的测定方法不包括(C) 57 A.减压干燥器干燥法B.恒温减压干燥法C.费休式法

(医疗药品管理)中国药典年版一部附录(三)

附录ⅨG干燥失重测定法 取供试品,混合均匀(如为较大的结晶,应先迅速捣碎使成2mm以下的小粒),取约1g或各品种项下规定的重量,置与供试品相同条件下干燥至恒重的扁形称量瓶中满密称定,除另有规定外,在105℃干燥至恒重。由减失的重量和取样量计算供试品的干燥失重。 供试品干燥时,应平铺在扁形称量瓶中,厚度不可超过5mm,如为疏松物质,厚度不可超过10mm。放入烘箱或干燥器进行干燥时,应将瓶盖取下,置称量瓶旁,或将瓶盖半开进行干燥;取出时,须将称量瓶盖好。置烘箱内干燥的供试品,应在干燥后取出置干燥器中放冷,然后称定重量。 供试品如未达规定的干燥温度即融化时,除另有规定外,应先将供试品在低于熔点5~10℃的温度下干燥至大部分水分除去后,再按规定条件干燥。 当用减压干燥器(通常为室温)或恒温减压干燥器(温度应按各品种项下的规定设置)时,除另有规定外,压力应在2.67kPa(20mmHg)以下。干燥器中常用的干燥剂为五氧化二磷、无水氯化钙或硅胶;恒温减压干燥器中常用的干燥剂为五氧化二磷。干燥剂应及时更换。 附录ⅨH水分测定法 测定用的供试品,一般先破碎成直径不超过3mm的颗粒或碎片;直径和长度在3mm以下的可不破碎;减压干燥法需通过二号筛。 第一法(烘干法)本法适用于不含或少含挥发性成分的药品。 测定法取供试品2~5g,平铺于干燥至恒重的扁形称量瓶中,厚度不超过5mm;疏松供试品不超过10mm;精密称定,打开瓶盖在100~105℃干燥5小时,将瓶盖盖好,移置干燥器中,冷却30分钟,精密称定,再在上述温度干

燥1小时,冷却,称重,至连续两次称重的差异不超过5mg为止。根据减失的重量,计算供试品中含水量(%)。 第二法(甲苯法)本法适用于含挥发性成分的药品。 仪器装置如图。A为500ml的短颈圆底烧瓶;B为水分测定管;C为直形冷凝管,外管长40cm。使用前,全部仪器应清洁,并置烘箱中烘干。 测定法取供试品适量(约相当于含水量1~4ml),精密称定,置A瓶中,加甲苯约200ml,必要时加入干燥、洁净的沸石或玻璃珠数粒,将仪器各部分连接,自冷凝管顶端加入甲苯,至充满B管的狭细部分。将A瓶置电热套中或用其他适宜方法缓缓加热,待甲苯开始沸腾时,调节温度,使每秒钟馏出2滴。待水分完全馏出,即测定管刻度部分的水量不再增加时,将冷凝管内部先用甲苯冲洗,再用饱蘸甲苯的长刷或其他适宜的方法,将管壁上附着的甲苯推下,继续蒸馏5分钟,放冷至室温,拆卸装置,如有水黏附在B管的管壁上,可用蘸甲苯的铜丝推下,放置,使水分与甲苯完全分离(可加亚甲蓝粉末少量,使水染成蓝色,以便分离观察)。检读水量,并计算供试品中的含水量(%)。 【附注】用化学纯甲苯直接测定,必要时甲苯可先加水少量,充分振摇后放置,将水层分离弃去,经蒸馏后使用。 第三法(减压干燥法)本法适用于含有挥发性成分的贵重药品。 减压干燥器取直径12cm左右的培养皿,加入五氧化二磷干燥剂适量,使铺成0.5~1cm的厚度,放入直径30cm的减压干燥器中。 测定法取供试品2~4g,混合均匀,分取约0.5~1g,置已在供试品同样条件下干燥并称重的称量瓶中,精密称定,打开瓶盖,放入上述减压干燥器中,减压至2.67kPa(20mmHg)以下持续半小时,室温放置24小时。在减压干燥器

中国药典》2015年版通则目录及增修订内容

《中国药典》2015年版通则目录及增修订内容 0100 制剂通则 0101 片剂 0102 注射剂 0103 胶囊剂 0104 颗粒剂 0105 眼用制剂 0106 鼻用制剂 0107 栓剂 0108 软膏剂 0109 乳膏剂 0110 糊剂 0111 吸入制剂 0112 喷雾剂 0113 气雾剂 0114 凝胶剂 0115 散剂 0116 滴丸剂 0117 糖丸 0118 糖浆剂

0120 涂剂 0121 涂膜剂 0122 酊剂 0123 贴剂 0124 贴膏剂 0125 口服溶液剂口服混悬剂口服乳剂 0126 植入剂 0127 膜剂 0128 耳用制剂 0129 洗剂 0130 冲洗剂 0131 灌肠剂 0181 丸剂 0182 合剂 0183 锭剂 0184 煎膏剂(膏滋) 0185 胶剂 0186 酒剂 0187 流浸膏剂与浸膏剂

0189 露剂 0190 茶剂 0200 其他通则 0211 药材和饮片取样法(未修订) 0212 药材和饮片检定通则(第二增补本) 0213 炮制通则(未修订) 0251 药用辅料通则 0261 制药用水 0271 药包材通则(待定) 0272 玻璃容器(待定) 0291 国家药品标准物质通则(第二增补本) 0300 0301 一般鉴别试验(第二增补本) 0400 光谱法 0401 紫外-可见分光光度法 0402 红外分光光度法 0405 荧光分光光度法 0406 原子吸收分光光度法 0407 火焰光度法 0411 电感耦合等离子体原子发射光谱法 0412 电感耦合等离子体质谱法(增订) 0421 拉曼光谱法(新增) 0431 质谱法 0441 核磁共振波谱法

无菌检查法-2015版中国药典

无菌检查法-2015版中国药典 无菌检查法系用于检查药典要求无菌的药品、生物制品、医疗器具、原料、辅料、及其他品种是否无菌的一种方法。若供试品符合无菌检查法的规定,仅表明了供试品在该检验条件下未发现微生物污染。 无菌检查应在环境洁净度B 级背景下的局部A 级洁净度的单向流空气区域内或隔离系统中进行,其全过程应严格遵守无菌操作,防止微生物污染,防止污染的措施不得影响供试品中微生物的检出。单向流空气区、工作台面及环境应定期按《医药工业洁净室(区)悬浮粒子、浮游菌和沉降菌的测试方法》的现行国家标准进行洁净度确认。隔离系统应定期按相关的要求进行验证,其内部环境的洁净度须符合无菌检查的要求。日常检验还需对试验环境进行监控。 无菌检查人员必须具备微生物专业知识,并经过无菌技术的培训。 培养基 硫乙醇酸盐流体培养基主要用于厌氧菌的培养,也可用于需气菌培养;胰酪大豆胨液体培养基适用于真菌和需气菌的培养。培养基的制备及培养条件培养基可按以下处方制备,亦可使用按该处方生产的符合规定的脱水培养基。配制后应采用验证合格的灭菌程序灭菌。制备好的培养基应保存在2~25℃、避光的环境,若保存于非密闭容器中,一般在3周内使用;若保存于密闭容器中,一般可在一年内使用。 1. 硫乙醇酸盐流体培养基 酪胨(胰酶水解) 15.0g 酵母浸出粉 5.0g 葡萄糖 5.0g 氯化钠 2.5g L-胱氨酸0.5g 新配制的0.1% 刃天青溶液1.0ml 硫乙醇酸钠0.5g 琼脂0.75g (或硫乙醇酸) (0.3 ml) 纯化水1000ml 除葡萄糖和刃天青溶液外,取上述成分混合,微温溶解,调节pH 为弱碱性,煮沸,滤清,加入葡萄糖和刃天青溶液,摇匀,调节pH 值使灭菌后为7.1±0.2。分装至适宜的容器中,其装量与容器高度的比例应符合培养结束后培2养基氧化层(粉红色)不超过培养基深度的1/2。灭菌。在供试品接种前,培养基氧化层的高度不得超过培养基深度的1/5,否则,须经100℃水浴加热至粉红色消失(不超过20 分钟),迅速冷却,只限加热一次,并防止被污染。除另有规定外,硫乙醇酸盐流体培养基置30~35℃培养。 2. 胰酪大豆胨液体培养基 胰酪胨17.0g 氯化钠 5.0g 大豆木瓜蛋白酶消化物 3.0g 磷酸氢二钾2.5g 葡萄糖(一水合/无水)2.5g (2.3g)纯化水1000mL 除葡萄糖外,取上述成分,混合,微温溶解,滤过,调节pH 值使灭菌后在25℃的pH 值为7.3±0.2,加入葡萄

药典三部2015版凡例

《中国药典》三部2015版 凡例 总则 一、《中华人民共和国药典》简称《中国药典》,依据《中华人民共和国药品管理法》组织制定和颁布实施。《中国药典》一经颁布实施,其相关内容的上版标准或其原国家标准即同时停止使用。 《中国药典》由一部、二部、三部、四部及其增补本组成,药典一部收载药材和饮片、植物油脂和提取物、成方制剂和单味制剂等;药典二部收载化学药品、抗生素、生化药品、放射性药品等;药典三部收载生物制品;各部内容分别包括凡例、正文(各论)和通则。本版药典新增第四部,集中收载药典通则和药用辅料,为便于药典使用,对部分正文(各论)品种常用的通则亦列于各部之后。除特别注明版次外,《中国药典》均指现行版《中国药典》。 本部为《中国药典》三部。 二、国家生物制品标准由凡例、生物制品通则、总论与正文(各论)及其引用的检测方法通则(简称通则)共同构成。本部药典收载的凡例、生物制品通则、总论、通则对未载入本版药典但经国务院药品监督管理部门颁布的其他生物制品国家标准具同等效力。 三、凡例是为正确使用《中国药典》进行质量检定的基本原则,是对《中国药典》正文(各论)、生物制品通则、总论、通则及与质量检定有关的共性问题的统一规定。 生物制品通则是对各论生产和质量管理规范的原则性要求。 总论是对某一类别生物制品生产及质量控制的通用性技术要求。 四、凡例、生物制品通则、总论和通则中采用“除另有规定外”这一用语,表示存在与凡例、生物制品通则、正文(总论) 或通则有关规定不一致的情况时,则在正文(各论)中另作规定,并按此规定执行。 五、正文(各论)所设各项规定是针对符合中国现行《药品生产质量管理规范》(Good manufacture Practices, GMP ) 的产品而言。任何违反GMP或有未经批准添加物质所生产的药品,即使符合《中国药典》或按照《中国药典》没有检出其添加物质或相关杂质,亦不能认为其符合规定。 六、《中国药典》的英文名称为Pharmacopoeia of The People’s Republic of China;英文简称为 Chinese Pharmacopoeia;英文缩写为Ch. P . 。 正文(各论) 七、药典各品种项下收载的内容为标准正文(各论)。正文(各论)系根据生物制品自身的理化与生物学特性,按照批准的原材料、生产工艺、贮藏、运输条件等所制定的,用以检测生物制品质量是否达到用药要求并衡量其质量是否稳定均一的技术规定。 八、正文(各论)内容根据品种和剂型的不同,按顺序可分别列有:(1)品名(包括中文通用名称、汉语拼音与 英文名称(2)定义、组成及用途;(3)基本要求;(4)制造;(5)检定(原液、半成品、成品)(6)保存、运输及有效期;(7)使用说明(预防类制品)。 通则 九、通则主要收载制剂通则、通用检测方法和指导原则。制剂通则系按照生物制品剂型分类,针对剂型特点所规定的统一技术要求;通用检测方法系各论品种进行相同检查项目的检测时所应采用的统一的设备、程序及方法等;指导原则系为执行药典、考察生物制品质量、起草与复核生物制品标准所制定的指导性规定。

2015版中国药典微生物检验规程

微生物检验规程 1.实验注意事项 1.1无菌操作要求 1.1.1 接种细菌时必须穿工作服、戴工作帽。 1.1.2专用的工作服、帽及拖鞋,应放在无菌室缓冲间,工作前经紫外线消毒后使用。 1.1.3 接种样品时,应在进无菌室前用肥皂洗手,然后用75%酒精棉球将手擦干净。 1.1.4 进行接种所用的吸管,平皿及培养基等必须经消毒灭菌,打开包装未使用完的器皿,不能放置后再使用,金属用具应高压灭菌或用95%酒精点燃烧灼三次后使用。 1.1.5 从包装中取出吸管时,吸管尖部不能触及外露部位,使用吸管接种于试管或平皿时,吸管尖不得触及试管或平皿边。 1.1.6 接种样品、转种细菌必须在酒精灯旁操作,接种细菌或样品时,吸管从包装中取出后及打开试管塞(即硅氟胶塞)都要通过火焰消毒。 1.1.7 接种环和针在接种细菌前应经火焰烧灼全部金属丝,必要时还要烧到环和针与杆的连接处。 1.1.8 吸管吸取菌液或样品时,应用相应的橡皮头吸取,不得直接用口吸。1.2无菌间使用要求 1.2.1 无菌间内应保持清洁,工作后用消毒溶液消毒,擦拭工作台面,不得存放与实验无关的物品。 1.2.2无菌间使用前后应将门关紧,打开紫外灯,照射时间不少于30min,使用紫外灯,应注意不得直接在紫外线下操作,以免引起损伤,灯管每隔两周需用酒精棉球轻轻擦拭,除去上面灰尘和油垢,以减少紫外线穿透的影响。 1.2.3处理和接种样品时,进入无菌间操作,不得随意出入,如需要传递物品,可通过小窗传递。 1.3消毒灭菌要求 1.3.1灭菌前准备 (1)所有需要灭菌的物品首先应清洗晾干,玻璃器皿用纸包装严密,如用金属筒应将上面通气孔打开。 (2)装培养基的三角瓶,内容物不应超过总体积的2/3(例如500mL的三角瓶最好装300~350mL培养基,以防再次加热融化时爆沸)。 (3)无菌室内使用的毛巾、脱脂棉球用纸包裹,进行湿热灭菌。

《中国药典》二部凡例和附录习题word版本

《中国药典》二部凡例和附录习题

中国药典(二部)凡例附录试题 姓名:成绩: 一. 填空 1. 自建国以来共出版9版药典,现行版为2010年版,实行日期为2010年7 月1号________________ 。 2. 《中国药典》现行版由一部、二部、三部及其增补本组 成,内容分别包括凡例、正文、附录,《中国药典》英文缩写为Ch.p。 3?附录主要收载制剂通则、通用检测方法、指导原则。 4. 对于生产过程中引入的杂质,应在后续的生产环节中有效去除。 5. 任何违反GMP或有未经批准添加物质所生产的药品,即使符合《中国药典》或按照《中国药典》没有检出其添加物质或相关杂质,亦不能认为其符合规 ^定。 6. 除另有规定外,贮藏项下未规定贮藏温度的一般系指常温。 7. HPLC法测定有关物质,在保证灵敏度的前提下,一般以等度洗脱为主;必 要时可采用梯度洗脱方式。 8. HPLC法流动相宜选用甲醇-水流动相,尽量不加缓冲盐。 9. “精密称定”系指称取重量应准确至所取重量的千分之一;“称定”系指称取重量应准确至所取重量的百分之一:取用量为“约”若干时,系指取用量不得超过规定量的10%;含量测定时,取供试品约0.2g,精密称定,应称取 0.2XXXg 。 10. 溶出度指活性药物从片剂、胶囊剂或颗粒剂等制剂在规定条件下溶出的速率和程度。 11. 溶出度测定法量取溶出介质实际量取的体积与规定体积的偏差不超过 ±1%,实际取样时间与规定时间的差异不得过±2%,溶出介质温度控制在37°±0.5 °C。 12. 常用的波长范围,200-400nm 为紫外光区,400-760nm为可见光区, 2.5- 25^n为中红外光区,其皆符合朗伯比尔定律,其关系表达式为A=lg1/T=Ecl ______________ 。 13. 微生物限度检查中细菌及控制菌的培养温度为30-35 °C C,细菌培养时 间为2—天,霉菌和酵母菌的培养时间为3天,必要时可延长至5-7天。 14. 本版药典中附录电导率检查中,影响只要用水电导率的因素主要 有:-------------、------------------ 、----------- 等。 15. 试验中规定“按干燥品(或无水物,或无溶剂)计算”时,除另有规定外,应

《中国药典》二部凡例和附录习题

中国药典(二部)凡例附录试题 姓名:成绩: 一.填空 1.自建国以来共出版9版药典,现行版为2010年版,实行日期为 2010年7月1号。 2.《中国药典》现行版由一部、二部、三部及其增补本组成,内容分别包括凡例、正文、附录,《中国药典》英文缩写为 Ch.p 。 3.附录主要收载制剂通则、通用检测方法、指导原则。 4.对于生产过程中引入的杂质,应在后续的生产环节中有效去除。 5.任何违反GMP或有未经批准添加物质所生产的药品,即使符合《中国药典》或按照《中国药典》没有检出其添加物质或相关杂质,亦不能认为其符合规定。 6.除另有规定外,贮藏项下未规定贮藏温度的一般系指常温。 7.HPLC法测定有关物质,在保证灵敏度的前提下,一般以等度洗脱为主;必要时可采用梯度洗脱方式。 8.HPLC法流动相宜选用甲醇-水流动相,尽量不加 缓冲盐。 9.“精密称定”系指称取重量应准确至所取重量的千分之一;“称定”系指称取重量应准确至所取重量的百分之一;取用量为“约”若干时,系指取用量不得超过规定量的 10%;含量测定时,取供试品约0.2g,精密称定,应称取 0.2XXXg 。 10.溶出度指活性药物从片剂、胶囊剂或颗粒剂等制剂在规定条件下溶出的速率和程度。 11.溶出度测定法量取溶出介质实际量取的体积与规定体积的偏差不超过±1% ,实际取样时间与规定时间的差异不得过±2% ,溶出介质温度控制在

37°C±0.5°C 。 12.常用的波长范围, 200-400nm 为紫外光区,400-760nm 为可见光区,2.5-25μm为中红外光区,其皆符合朗伯比尔定律,其关系表达式为 A=lg1/T=Ecl 。 13.微生物限度检查中细菌及控制菌的培养温度为30-35°C ℃,细菌培养时间为 2 天,霉菌和酵母菌的培养时间为 3 天,必要时可延长至 5-7天。14.本版药典中附录电导率检查中,影响只要用水电导率的因素主要有:、、等。 15.试验中规定“按干燥品(或无水物,或无溶剂)计算”时,除另有规定外,应取未经干燥(或未去水、或未去溶剂)的供试品进行试验,并将计算中取用量按检查项下测得的干燥失重(或水分、或试剂)扣除。 16.试验中的“空白试验”,系指在不加供试品或以等量溶剂替代供试液的情况下,按同法操作所耗滴定液的量(ml)与空白试验中所耗滴定液量(ml)之差进行计算。 17.某品种重金属规定,取供试品4.0g,依法检查重金属不得过百万分十,应取标准铅溶液 4 ml。18.标准溶液必须规定有效期,除特殊情况另有规定外,一般规定为 3 个月。标准缓冲液一般可保存 2-3 个月,但发现有浑浊、发霉等现象,不得继续使用。 19.0.01805取三位有效数字是: 0.0180 ,PH=2.464取两位有效数字是 2.46 ,10.1583+1.1+0.208经数据处理后的值为 10.4 ,(2.1064×74.4)/2经数据处理后的值为 78.4 。 20.天平的称量操作方法可分为直接法和减量法,需称取准确重量的供试品常采用减量法。

2020版药典一部凡例

一部凡例 总则 一、《中华人民共和国药典》简称《中国药典》,依据《中华人民共和国药品管理法》组织制定和颁布实施。《中国药典》一经颁布实施,其所载同品种或相关内容的上版药典标准或原国家药品标准即停止使用。 《中国药典》由一部、二部、三部、四部及其增补本组成。一部收载中药,二部收载化学药品,三部收载生物制品及相关通用技术要求,四部收载通用技术要求和药用辅料。除特别注明版次外,《中国药典》均指现行版。 本部为《中国药典》一部。 二、《中国药典》主要由凡例、通用技术要求和品种正文构成。 凡例是为正确使用《中国药典》,对品种正文、通用技术要求以及药品质量检验和检定中有关共性问题的统一规定和基本要求。 通用技术要求包括《中国药典》收载的通则、指导原则以及生物制品通则和相关总论等。 《中国药典》各品种项下收载的内容为品种正文。 三、药品标准由品种正文及其引用的凡例、通用技术要求共同构成。 本版药典收载的凡例、通则/生物制品通则、总论的要求对未载入本版药典的其他药品标准具同等效力。 四、凡例和通用技术要求中采用“除另有规定外”这一用语,表示存在与凡例或通用技术要求有关规定不一致的情况时,则在品种正文中另作规定,并据此执行。 五、品种正文所设各项规定是针对符合《药品生产质量管理规范》(Good Manufacturing Practices , GMP)的产品而言。任何违反GMP 或有未经批准添加物质所生产的药品,即使符合《中国药典》或按照《中国药典》未检出其添加物质或相关杂质,亦不能认为其符合规定。 六、《中国药典》的英文名称为Pharmacopoeia of the People's Republic of China;英文简称为Chinese Pharmacopoeia; 英文缩写为ChP。 通用技术要求 七、通则主要包括制剂通则、其他通则、通用检测方法。制剂通则系为按照药物剂型分类,针对剂型特点所规定的基本技术要求。通用检测方法系为各品种进行相同项目检验时所应采用的统一规定的设备、程序、方法及限度等。 指导原则系为规范药典执行,指导药品标准制定和修订,提高药品质量控制水平所规定的非强制性、推荐性技术要求。 生物制品通则是对生物制品生产和质量控制的基本要求,总论是对某一类生物制品生产和质量控制的相关技术要求。 品种正文 八、品种正文系根据药物自身的理化与生物学特性,按照批准的来源、处方、制法和贮藏、运输等条件所制定的、用以检测药品质量是否达到用药要求并衡量其质量是否稳定均一的技术规定。 九、品种正文项下根据品种和剂型不同,可分别列有:(1)品名;(2) 来源;(3) 处方;(4) 制法;(5) 性状;(6) 鉴别;(7) 检查;(8) 浸出物;(9) 特征图谱或指纹图谱;(10) 含量测定;(11) 炮制;(12) 性味与归经;(13) 功能与主治;(14) 用法与用量;(15) 注意;(16) 规格;(17) 贮藏;(18) 制剂;(19) 附注等。 名称及编排

中国药典 2010 年版一部附录

中国药典2010 年版一部附录 附录Ⅰ A 丸剂丸剂系指饮片细粉或提取物加适宜的黏合 剂或其他辅料制成的球形或类球形制剂,分为蜜丸、水蜜丸、水丸、糊丸、蜡丸和浓缩丸等类型。蜜丸系指饮片细粉以蜂蜜为黏合剂制成的丸剂。其中每丸重量在0.5g(含0.5g)以上的称大蜜丸,每丸重量在0.5g 以下的称小蜜丸。水蜜丸系指饮片细粉以蜂蜜和水为黏合剂制成的丸剂。水丸 系指饮片细粉以水(或根据制法用黄酒、醋、稀药汁、糖液等)为黏合剂制成的丸剂。糊丸系指饮片细粉以米粉、米糊或面糊等为黏合剂制成的丸剂。蜡丸系指饮片细粉以蜂蜡为黏合剂制成的丸剂。浓缩丸系指饮片或部分饮片提取浓缩后,与适宜的辅料或其余饮片细粉,以水、蜂蜜或蜂蜜和水为勤合剂制成的丸剂。根据所用黏合剂的不同,分为浓缩水丸、浓缩蜜丸和浓缩水蜜丸。丸剂在生产与贮藏期间应符合下列有关规定。一、除另有规定外,供制丸剂用的药粉应为细粉或最细粉。二、蜜丸所用蜂蜜须经炼制后使用,按炼蜜程度分为嫩蜜、中蜜和老蜜,制备蜜丸时可根据品种、气像等具体情况选用。除另有规定外,用塑制法制备蜜丸时,炼蜜应雄热加入药粉中,混合均匀;处方中有树脂类、胶类及含挥发性成分的药味时,炼蜜应在60℃左右加入;用泛制法制备水蜜丸时,炼蜜应用沸水稀释后使用。三、浓缩丸所用提取物应按制法规定,采用一定的方法提取浓缩

制成。四、除另有规定外,水蜜丸、水丸、浓缩水蜜丸和浓缩水丸均应在80℃以下干燥;含挥发性成分或淀粉较多的丸剂(包括糊丸)应在60℃以下干燥;不宜加热干燥的应采用其他适宜的方法干燥。五、制备蜡丸所用的蜂蜡应符合本版药典该饮片项下的规定。制备时,将蜂蜡加热熔化,待冷却至60℃左右按比例加入药粉,棍合均匀,趁热按塑制法制丸,并注意保温。六、凡需包衣和打光的丸剂,应使用各品种制法项下规定的包衣材料进行包衣和打光。七、丸剂外观应圆整均匀、色泽一致。蜜丸应细腻滋润,软硬适中。蜡丸表面应光滑无裂纹,丸内不得有蜡点和颗粒。八、除另有规定外,丸剂应密封贮存。蜡丸应密封并置阴凉干燥处贮存。除另有规定外,丸剂应进行以下相应检查。【水分】照水分测定法(附录ⅨH测定。除另有规定外,蜜丸和浓缩蜜丸中所含水分不得过15.0%,水蜜丸和浓缩水蜜丸不得过12.0;水丸、糊丸和浓缩水丸不得过9.0%。蜡丸不检查水分。【重量差异】除另有规定外,丸剂照下述方法检查,应符合规定。检查法以10 丸为1 份(丸重1. 5g 及1. 5g 以上的以1 丸为 1 份),取供试品10 份,分别称定重量,再与每份标示重量(每丸标示量×称取丸数)相比较(无标示重量的丸剂,与平均重量比较),按表 1 的规定,超出重量差异限度的不得多于 2 份,并不得有1 份超出限度 1 倍。表1 标示重量(或平均重重量差异限度

中国药典2015版4部 可见异物检查法

0904 可见异物检查法 可见异物系指存在于注射剂、眼用液体制剂和无菌原料药中,在规定条件下目视可以观测到的不溶性物质,其粒径或长度通常大于50μm。 注射剂、眼用液体制剂应在符合药品生产质量管理规范(GMP)的条件下生产,产品在出厂前应采用适宜的方法逐一检查并同时剔除不合格产品。临用前,需在自然光下目视检查(避免阳光直射),如有可见异物,不得使用。 可见异物检查法有灯检法和光散射法。一般常用灯检法,也可采用光散射法。灯检法不适用的品种,如用深色透明容器包装或液体色泽较深(一般深于各标准比色液7号)的品种可选用光散射法;混悬型、乳状液型注射液和滴眼液不能使用光散射法。 实验室检测时应避免引人可见异物。当制备注射用无菌粉末和无菌原料药供试品溶液时,或供试品的容器不适于检查(如透明度不够、不规则形状容器等),需转移至适宜容器中时,均应在B级的洁净环境(如层流净化台)中进行。 用于本试验的供试品,必须按规定随机抽样。 第一法(灯检法) 灯检法应在暗室中进行。

A B C D 检查装置如下图所示。 图灯检法示意 A.带有遮光板的日光灯光源(光照度可在1000~4000lx范围内调节); B.不反光的黑色背景; C.不反光的白色背景和底部(供检査有色异物); D.反光的白色背景(指遮光板内侧)。 检查人员条件远距离和近距离视力测验,均应为4.9及以上(矫正后视力应为5.0 及以上);应无色盲。 检査法 按以下各类供试品的要求,取规定量供试品,除去容器标签,擦净容器外壁,必要时将药液转移至洁净透明的适宜容器内,将供试品置遮光板边缘处,在明视距离(指供试品至人眼的清晰观测距离,通常为25cm),手持容器颈部,轻轻旋转和翻转容器(但应避免产生气泡),使药液中可能存在的可见异物悬浮,分别在黑色和白色背景下目视检查,重复观察,总检查时限为20秒。供试品装量每支(瓶)在10ml及10ml以下的,每次检查可手持2支(瓶)。50ml或50ml以上大容量注射液按直、横、倒三步法旋转检视。供试品溶液中有大

中国药典2005版一部标准凡例

凡例(2005年版一部) 凡例 《中华人民共和国药典》简称《中国药典》是国家监督管理药品质量的法 定技术标准。《中国药典》一经国务院药品监督管理部门颁布实施,同品种 的上版标准或其原国家标准即同时停止使用。除特别注明版次外,《中国药 典》均指现行版《中华人民共和国药典》 “凡例”是解释和使用《中国药典》正确进行质量检定的基本指导原则,并把与正文、附录及质量检定有关的共性问题加以规定,避免在全书中重 复说明。“凡例”中的有关规定具有法定的约束力。 凡例和附录中采用“除另有规定外”这一修饰语,表示存在与凡例或附录有关规定未能概括的情况时,在正文各论中另作规定,并按此规定执行。 药典中引用的药品系指本版药典收载的并符合规定的品种。 附录中收载的指导原则,是为执行药典、考察药品质量、起草与复核药品标准所制定的指导性规定。 名称及编排 一、本部正文分三部分排列:药材及饮片;植物油脂和提取物;成方制剂 和单味制剂。 二、正文品种中文名称按笔画数顺序排列,同笔画数的字按起笔笔形─ 丨ノ丶フ顺序排列;单列的饮片排在相应药材的后面,制剂中同一品种凡因规 格不同而臻主标准内容不可须单列者,在其名称后加括号注明规格;附录包括 制剂通则、通用检测方法和指导原则,按分类编码;索引分别按中文索引、汉 语拼音索引、拉丁名索引和拉丁学名索引顺序排列。 三、每一品种项下根据品种和剂型不同,按顺序可分别列有: ⑴中文名称(必要时用括号加注副名),汉语拼音名与拉丁名;⑵来源; ⑶处方;⑷制法;⑸性状;⑹鉴别;⑺检查;⑻浸出物;⑼含量测定;⑽性 味与归经;⑾功能与主治;⑿用法与用量;⒀注意;⒁规格;⒂贮藏;⒃制 剂等。 项目与要求 四、药材的质量标准,一般按干品规定,特殊需用鲜品者,同时规定鲜 品的标准,并规定鲜品用法与用量。 五、药材原植(动)物的科名、植(动)物名、学名、药用部位(矿物 药注明类、族、矿石名或岩石名、主要成分)及采收季节和产地加工等,均 属各该药材的来源范畴。 药用部位一般系指已除去非药用部分的商品药材。采收(采挖等)和产 地加工即对药用部位而言。 六、药材产地加工及炮制规定的干燥方法如下:(1) 烘干、晒干、阴干均 可的,用“干燥”;(2) 不宜用较高温度烘干的,则用“晒干”或“低温干燥”(一般不超过60℃);(3) 烘干、晒干均不适宜的,用“阴干”或“晾干”;(4) 少数药材需

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