复合膜过滤法采样检测空气中的微生物
复合膜过滤法采样检测空气中的微生物
陈延京,张 林,黄金星,程丽华,陈欢林
(浙江大学材料与化学工程学院生物工程研究所,浙江杭州 310027)
摘 要:以无机膜为支撑膜,以壳聚糖醋酸溶液为涂层溶液制成壳聚糖复合膜,用以采样和检测空气中的微生物。通过空气中细菌采样以及大肠杆菌噬菌体模拟采样实验来表征壳聚糖复合膜作为采样用膜的特性。通过和其他方法的对比实验表明,壳聚糖复合膜具有良好的截留微生物气溶胶的能力,复合过滤法是一种较准确的采样检测空气中微生物的方法。
关键词
:复合膜;采样器;微生物气溶胶;壳聚糖
中图分类号:X 835 文献标识码:A 文章编号:100226002(2005)0420014204
S ample and detect airborne microorganisms by composite membrane filtration method
CHE N Y an 2jing ,et al (Department of Biochemical Engneering ,Zhejiang University ,Hangzhou 310027,China )
Abstract :C om posite membrane prepared by using inorganic membrane for supportting membrane and chitosan s olution for coat is used to detect the microbe in air.The property of the com posite membranes characterized by sam pling and detecting airborne microorganism and E.coli phag ocyte in simulation room.C om paring with other methods with which to detect microbe in air ,the results of experiment show that these com posite membranes can be classified as high efficiency air filter.K ey w ords :com posite membrane ;sam pler ;bioaeros ol ;chitosan
收稿日期:2004206227;修订日期:2005204221
作者简介:陈延京(1980-),男,浙江杭州人,硕士研究生.
空气中的微生物主要以微生物气溶胶形式存在,微生物气溶胶是气溶胶的重要组成部分。微生物气溶胶对人类健康和环境的负面影响取决于
这些粒子的颗粒大小和性质[1,2]
。研究表明,空气
动力学直径为215～10μm 的颗粒能进入人体的上
呼吸道,而空气动力学直径小于215μm 的颗粒能
进入人体的肺泡[3]
。这些颗粒中的微生物如致病
菌一旦进入人体将严重影响人体的健康[4]
。由于最近几年气溶胶引起的呼吸道传染病不断爆发,对空气微生物状况的研究日益增多,同时也总结出了一些影响空气微生物状况的因素,例如采样地点的周边环境、季节的变化、温度、湿度等,如果
是室内采样还要考虑室内通风状况等条件[5,6]
。
为了检测气溶胶中固态颗粒物性质同时去除这些颗粒物,使用高效的气溶胶采样方法是十分
重要的[7]
。气溶胶采样方法包括自然沉降法、撞
击式采样法、离心式采样法、过滤式采样法等[8,9]
。过滤式采样法是最常用的气溶胶采样方法,也是最经济最简单实效的采样方法,滤膜是过滤式采样器最重要的组件,滤膜的性能往往决定了过滤式采样器的性能。常用的滤膜材料如微孔膜因为
孔径较大,不但较小的颗粒难以截留,且检测误差也较大,另外许多滤膜材料有抑制或杀灭微生物的作用,不能反映气溶胶中的真实生物量。为了更好的将过滤式采样器应用于空气中微生物的采样和检测,本实验针对现有滤膜的缺陷研制并对
这种复合膜的过滤特性进行了研究[10,11]
,同时通过对大气中细菌采样以及大肠杆菌噬菌体模拟采样实验验证壳聚糖复合膜的性能。
1 实验部分
111 材料与仪器
壳聚糖(脱乙酰度8614%,粘度1300厘泊),大肠杆菌噬菌体液,营养琼脂培养基(牛肉膏,蛋
白胨,氯化钠,琼脂,蒸馏水),醋酸(011wt %)。
Z WC 2100中流量大气采样器,Z ATESIZER 粒径分布仪,402型超声波雾化器,恒温培养箱,X L302ESE M 环境扫描电镜。112 壳聚糖复合膜截留颗粒粒径分布测试
将所制备的壳聚糖复合膜安装于Z WC 2100中流量大气采样器中,并串连一节安装支撑膜的采样头去除大颗粒。将采样后富集在复合膜上的
第21卷 第4期2005年8月
中 国 环 境 监 测
Environmental M onitoring in China V ol.21 N o.4
Aug.2005
颗粒用超净水洗下,应用Z ATESIZER粒径分布仪进行粒径分布测试。
113 大肠杆菌噬菌体模拟采样检测[12]
将稀释噬菌体溶液(浓度为106pfuΠml)通过超声波雾化器将其雾化到模拟室内,稳定15～30min 后用装有壳聚糖复合膜的Z WC2100中流量大气采样器进行采样。采样流量为10LΠmin,采样时间5min,采样时将尾气直接富集在琼脂营养培养基上,用大肠杆菌和50℃液状半固体培养基覆盖。采样后用019%生理盐水浸泡壳聚糖复合膜,冲洗下复合膜上富集的噬菌体,取011ml洗液于琼脂培养基平板上,然后用大肠杆菌和50℃液状半固体培养基覆盖,摇匀,在30℃培养箱中培养24h,然后计数噬菌斑。同时实验中将没加噬菌体溶液的琼脂营养培养基和富集尾气的培养基和上述实验的培养基进行平行对比。
114 复合膜过滤法与其他方法对比[13]
将壳聚糖复合膜安装于Z WC2100中流量大气采样器,采样15min后,用10ml019%的生理盐水反复冲洗该复合膜,取其中2ml均匀涂于营养琼脂培养基表面,在37℃培养箱内培养48h,对细菌菌落数计数,同时与自然沉降法、撞击法、微孔膜过滤法进行平行对比实验。
2 结果与讨论
211 复合膜的制备和特性
制备复合膜采用0175wt%的壳聚糖溶液作为涂层液,涂层厚度控制在500nm左右。在20K Pa 真空度下,对本支撑膜和不同浓度涂层溶液制得 的复合膜的通量进行了测定(图1)。
复合膜的平均通量为500m3
Πh.m2(
标准状态下),从图2可以看出壳聚糖复合膜的通量具有相当好的稳定性,适合一般采样器通量要求。
图3为壳聚糖复合膜截留气溶胶中小颗粒的粒径分布图,其中右边较对称的曲线是NaCl溶液的标准曲线,左边是实验采样后,冲洗复合膜后洗液浓缩后的颗粒分布曲线。
图1 不同浓度涂层复合膜的通量
图2 壳聚糖复合膜稳定性测定结果
图3 空气中采集物的颗粒分布与标准颗粒分布的比较
从图3可以得出结论:壳聚糖复合膜作为空气采样膜时,最小可以截留到60nm的颗粒;壳聚糖复合膜的平均孔径可以达到纳米级。该复合膜可用于直径大于60nm的病毒,如S ARS病毒的采集检测。
在采样过程中,气溶胶中的颗粒物会堵塞孔道,如果孔径不均匀,孔道比较弯曲就会使通量大幅度下降。从图4可以看出,本实验的复合膜在
陈延京等:复合膜过滤法采样检测空气中的微生物15
8小时内通量变化较小,对采样造成的影响较小。
同时也用其他滤膜做了对比实验,其它膜在相同采样条件下,相同时间内通量下降的比率大于该复合膜。随采样时间的增加滤膜的通透性减少是滤膜法本身存在的缺点
。
图4 不同膜通量随时间变化
212 大肠杆菌噬菌体模拟采样检测结果
没加噬菌体的营养琼脂培养基以及富集了尾
气的营养琼脂培养基恒温30℃培养后都没有发现噬菌斑,而加了洗液的培养基出现了大量噬菌斑。
从实验可以得出,对于大肠杆菌噬菌体壳聚糖复合膜的采样效率接近100%。同时我们可以根据以上公式得到模拟室内的噬菌体数。
每升空气中噬菌体数(pfu ΠL )
=采样器捕获的噬菌体总数(pfu )Π采样流量(L Πmin )×采样时间(min )通过计算得到模拟室内单位空气中噬菌体数为30pfu ΠL 。213 复合膜过滤法与其他方法对比
为了证明复合膜过滤法检测空气中微生物有较好的重复性,同时证明该方法有较高的准确性。本实验将复合膜法和自然沉降法、撞击法、微孔膜过滤法进行了平行对比实验。
单位空气中的细菌总数计算公式:
细菌总数(cfu Πm 3
)=培养皿上细菌菌落数(cfu )×稀释倍数Π[采样器流量(L Πmin )×采样时
间(min )]×1000
[7]
表1 不同采样地点自然沉降法和复合膜过滤法检测的空气中细菌总数
不同采样地单位体积空气菌落数(cfu Πm 3)自然沉降法
复合膜过滤法
123平均
123平均
某小型火车站候车厅11371300142512874235486054684854某乡镇医院输液大厅3275364360253980125614301222某乡镇医院输液大厅33245226702818264779608976100008979某学校办公室15481676185016914658497758005145某学校操场
768
823
1040
877
2547
2817
3200
2854
注:3消毒液消毒后30分钟,33消毒液消毒后3小时
自然沉降法是最经典的检测空气微生物的方
法,最主要的特点是稳定性好,但该方法一般只能检测到吸附在大颗粒上的微生物而基本不能检测到悬浮在空气中的微生物。从实验数据可以得到复合膜过滤法不仅能截留大颗粒上的微生物而且
能捕集悬浮于空气的微生物。同时从表1中得
出,一般的消毒只能暂时减少空气中的微生物数量,随着空气的流动和消毒液的挥发,空气的微生物很快恢复到较高值。
表2 不同采样地点撞击法和复合膜过滤法检测的空气中细菌总数
不同采样地单位体积空气菌落数(cfu Πm 3)撞击法
复合膜过滤法
123平均
123平均
杭州市植物园环境检测站256228232239217234215222杭州市余杭区空气检测站
683
755
677
705
692
778
690
720
撞击法是公认的比较准确的空气微生物检测
方法,具有灵敏度高,采样效率高和采集粒谱范围宽的优点。撞击法实验数据由浙江省疾病防治与控制中心提供。从实验数据可以得出复合膜过滤法和撞击法的准确度相当,复合膜过滤法的实验结果能反映采样地的空气微生物状况。
16 中 国 环 境 监 测第21卷 第4期 2005年8月
表3 不同采样地点撞击法和复合膜过滤法检测的空气中细菌总数
不同采样地单位体积空气菌落数(cfuΠm3)
微孔膜过滤法复合膜过滤法
123平均123平均
杭州市植物园环境检测站75838882217234215222杭州市余杭区空气检测站243268250253692778690720浙江大学玉泉校区正门215224195211596625610610浙江大学玉泉校区教学楼118136142132420458432437
微孔膜是过滤法常用的过滤材料,由于其孔径一般在10μm左右,一部分微生物从膜孔中漏过而未被截留。从表3中可以得出,在采样条件相同情况下,复合膜过滤法所检测到的微生物量明显大于微孔膜过滤法所检测到的微生物量。复合膜过滤法能更真实地反映空气微生物的量。
3 结论
(1)根据本实验提出的复合膜制备方法,可根据截留物分子的大小需要,制得不同孔径的复合膜,而且具有比普通滤膜较大的通透性。通过对截留微粒的粒径分布分析可知,本实验研制的复合膜可用于截留分子直径≥60nm的微粒,由此可推知,用此膜可截留空气中的大部分微生物。
(2)随采样时间的增加,滤膜的通透性减少是滤膜法本身存在的缺点,这是滤膜法过滤机理决定的。因此采用滤膜法作为空气采样方法,采样时间不宜过长。当然也可以增加流量计数次数,通过积分的方法来计算总流量以减少采样过程中因流量减少引起的误差。
(3)平行采样检测结果表明,复合膜过滤法具有撞击法(标准采样方法)的高灵敏度和准确度,同时弥补了自然沉降法和微孔膜过滤法的不足。参考文献:
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-5361
陈延京等:复合膜过滤法采样检测空气中的微生物17
最新空气培养的采样方法合集
医院常规空气细菌培养（自然沉降法）采样方法 一、采样时间 选择消毒处理后与进行医疗活动之前采样。 二、采样高度 与地面垂直高度80-150厘米。 三、布点方法 1.面积≤30 m2，设一条对角线取三点，即中间一点，两端各距墙1米处各取一点（图1） 2．室内面积>30m2，设两条对角线，东，西，南，北，中取五点，其中东，西，南，北距墙均1米（图2） 四、采样方法 用9厘米直径普通琼脂平皿，打开盖后面朝下斜扣到底盘，在采样点准确暴露5分钟后，送检培养。 五、结果分析 I类区域：<10 cfu/m3 II类区域：<200 cfu/m3 III类区域：<500 cfu/m3 六、附录 Ⅰ类区域：层流洁净手术室、层流洁净病房（参照洁净室空气培养方法与标准）。Ⅱ类区域：普通手术室、产房、婴儿室、早产儿室、普通保护性隔离室、供应室无菌区、烧伤病房、重症监护病房。 Ⅲ类区域：儿科病房、妇产科检查室、注射室、换药室、治疗室供应室清洁区、急诊室、化验室、各类普通病房和房间。 Ⅳ类区域：传染病科及病房。
洁净室空气细菌培养监测布点与标准 一、局部百级，周围千级： 共放13个培养皿，其中手术区域5点，周边区8点。采样布置点示意图： 二、局部千级，周围万级： 共放9个培养皿，其中手术区域3点，周边区6点。采样布置点示意图： 三、局部万级，周围十万级： 共放7个培养皿，其中手术区域3点，周边区域4点。采样布置点示意图：
四、三十万级：面积>30m2布放4点，面积≤30 m2布放2点。 五、要求： 1.送风口集中布置时，应对手术区和周边区分别检测；如送风口分散布置时，全室统一检测，测点可均布，不应布置在送风门正下方； 2.采样点可布置在地面上或不高于地面0.8m的任意高度上，手术区域放置在四角的平皿应离手术区边缘0.12m，培养皿放置30分钟； 3.采样后的培养皿，应立即置于37度条件下培养48小时； 4.然后计数生长的菌落数，菌落数的平均值均四舍五入进位到小数点后１位。 5.放置培养皿示意图： 盖面朝下斜扣到底盘A边 上 六、洁净室空气细菌菌落总数标准
微生物采样方案
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微生物限量采样方案 采样方案分为二级和三级方案，二级采样方案设有n、c、m值，三级采样方案设有n、c、m和M值。 n：同一批次产品应采集的样品件数 c：最大可允许超出m值的样品数 m：微生物指标可接受水平的限量值 M：微生物指标的最高安全限量值 例：n=5,c=2,m=100cfu/g,M=1000cfu/g,即从一批产品中采集5个样品，若5个样品的检测结果均小于或等于m值（≤100cfu/g），则这种情况是允许的，若≤2个样品的结果（X）位于m值和M值之间（100cfu/g≤X≤1000cfu/g），则这种情况也是允许的；若有3个及以上样品的检验结果位于m和M之间，则这种情况是不允许的；若有任一样品的检验结果大于M（>1000cfu/g），则这种情况也是不允许的。 0/25g a，标准限量，就是每25g样品不得检出。a通常为5次。 挥发性盐基氮：代表动物蛋白受微生物的作用程度，是动物蛋白新鲜度的代表。 MPN：基于泊松分布的一种间接计数方法，most probable number GB 7718,直接向消费者提供的预包装食品标签，标示应包括食品名称、配料表、净含量和规格。生产者和经销商的名称、地址和联系方式、生产日期和保质期、贮存条件、食品生产许可证编号、产品标准代号及其他需要标识的内容。 ADI：每日允许摄入量 acceptable daily intake。 净含量字体高度≥4mm。 下列预包装食品豁免强制标示营养标签 1、生鲜食品如包装的生肉、生鱼、生蔬菜和水果、禽蛋等 2、乙醇含量≥%的饮料酒类 3、包装总面积≤100cm3或最大表面面积≤20cm3的食品 4、现制现售的食品 5、包装的饮用水 6、每日食用量≤10g或10mL的预包装食品 7、其他法律法规标准规定可以不标识营养标签的预包装食品
大学校园空气微生物污染调查
大学校园空气微生物污染调查 了解校园四季空气中微生物含量变化趋势与污染情况。方法采用撞击式采样器，在人员负荷最重、活动最频繁时，对某大学校园空气中细菌粒子和霉菌粒子含量进行检测。结果校园空气微生物含量在季节间有很大不同，细菌含量在夏季最高，霉菌含量高峰在夏秋两季。细菌浓度比较高的功能区有道路、寝室、食堂、超市、体育馆、微机室和教室。可吸入霉菌粒子占霉菌粒子总数的比例高于细菌粒子。结论校园空气微生物含量在多种因素的综合影响下，季节间和不同功能区之间均表现出明显的差异，存在一过性污染情况。 空气中的微生物往往吸附在颗粒物上形成生物粒子，随风飘荡，其中小粒径的生物粒子在疾病传播方面具有更大意义。研究表明，空气中微生物数量的多少与环境、清洁卫生状况、人员密度和活动情况、空气流通程度等因素有关[1，2]。高校校园是师生集中生活和学习的地方，普遍存在空气微生物污染问题[3，4]。加强对高校校园空气微生物的监测，对于了解校园卫生状况，加强环境卫生管理有着非常重要的参考意义。采用空气中生物粒子数(菌落总数，cfu)这一指示微生物指标对校园主要功能区空气质量进行生物学评价。 1.材料与方法 1.1 校园概况沈阳市内某高校，2001年新迁校址，主要建筑物距离城市南北向主干道约150～1000m。 1.2采样为全面反映校园内师生主要活动区域空气微生物状况，按功能不同将校园分成12个不同的功能区，即操场、道路、绿地、食堂、宿舍、教室、图书馆、微机室、实验室、超市、体育馆和办公室。参照《公共场所卫生监测技术规范》(GB/T 17220-1998)，共设采样点126个。于2008-12，2009-03、2009-06、2009-09采样，分别代表冬、春、夏和秋四季，在各功能区人员负荷最重、活动最频繁时采样。参照《公共场所空气微生物检验方法》(GB/T18204.1-2000)，采用撞击式采样。JWL-2型采样器有上、下两级，上级收集粒径 及以上的微生物粒子，下面级收集以下粒径的可吸入微生物粒子。采样高度为1.2～1.5m，采样时间1min，采样流量28.3L/min。细菌在37℃培养48h，霉菌在26℃培养72h 后，分别计数两级采样皿中的细菌菌落数和霉菌菌落数(cfu)，也即捕获在采样皿中的空气细菌粒子数和霉菌粒子数。全年共采样2016份。 1.3培养基营养琼脂培养基和高盐查氏培养基购自北京奥博星生物技术有限责任公司。按使用说明配置、灭菌。使用Φ9cm平皿，每平皿倾注20ml培养基，冷却备用。 1.4主要仪器JWL-2 两级筛孔型撞击式空气微生物采样器，北京检测仪器有限公司；DXC-280B型不锈钢手提式灭菌器，上海申安医疗器械厂；YLN-30A菌落计数器，北京市亚力恩机电技术研究所；SHP-250型生化培养箱和MJP-250型霉菌培养箱，上海精宏实验设备有限公司；DB-4A控温电热板，金坛市天竟实验仪器厂，环境温度在零度以下采样时使用。 1.5 统计分析菌落计数后，按照公式n=N×1000/(Q×t)计算受检空气中微生物含量。式中：N—平皿菌落计数，个；Q—空气流量，L/min；t—采样时间，min。 1.6质量评价我国《室内空气质量标准》(GB/T18883-2002)规定，室内细菌菌落总数≤2500cfu/m3为合格。 2.结果 2.1空气中细菌粒子浓度及其变化趋势结果见表1，图1。 由表2可见，同样在冬季，室外空气中霉菌粒子含量明显低于其它三个季节，而在室内
手术室空气采样方法
手术室空气采样方法 TYYGROUP system office room 【TYYUA16H-TYY-TYYYUA8Q8-
1、采样时间：消毒后、操作前进行采样。 2、采样方法：（1）布点：室内面积≤30 m2，设内、中、外对角线3点，内外点距墙1m；室内面积 >30 m2，设四角及中央5点，四角点距墙1m。（2）平板暴露法平板直径9c m、采样高度，暴露5m i n。 3、检验方法平板37℃培养48h。计数菌落数并分离致病菌。 4、平板暴露法结果计算50000N 细菌总数（c f u/m3）=A×T A为平板面积（c m2）；T为暴露时间（m i n）；N为平均菌落数（c f u） 5、结果判定（1）I、II类区域，细菌总数≤10cfu/cm3，并未检出致病菌为消毒合格。（2）I II类区域，细菌总数≤200c f u/c m3，并未检出致病菌为消毒合格。（3）I V类区域，细菌总数≤500c f u/c m2，并未检出致病菌为消毒合格。 6、注意事项：采样前关好门窗，在无人走动的情况下，静止10min 进行采样 层流手术室空气日常监测方法： 要求日常实行动态监测，必测项目为平板采样法（沉降法）或采样器法(浮游菌法)检测细菌菌落总数。 （1）回风口动态平板采样法：应在手术开始、手术2小时、手术结束前抽检3-4次。每个回风口中部摆放3个倾斜30℃，Φ90 培养皿，暴露30分钟后，37°C培养24小时。 标准：每皿菌落计数平均值应符合表4标准要求。单皿最大值不应超过平均值3 倍。 （2）动态采样器法：浮游菌菌落检测应在手术进行如切皮、缝合、连台手术之 间、手术进行4小时等，选择不少于3个程序，测定细菌菌落总数。
公共用品微生物的采样方法
公共用品微生物的采样方法： 涂抹是公共用品微生物样品采集的常用方法之一 样品包括（六类不同公共用品的采样）：茶具、餐具；毛巾和枕巾、枕套；床单和被罩 等卧具；脸盆、脚盆和浴盆；拖鞋、理发用具。 采样所需设备：灭菌试管（内装10ml生理盐水）、100ml无菌烧瓶（内装50ml生理盐 水）、250ml无菌烧瓶（内装125ml生理盐水）、无菌棉拭子、灭菌剪刀、灭菌5cm X 5cm规格板、酒精灯、酒精棉球、工作服/白大衣、口罩、帽子、记号笔、灭菌镊子、采样记录单 采集样品前的准备： 1 穿好白大衣、戴好帽子及口罩 2 点燃酒精灯 3手消毒 一茶（餐）具微生物的采样方法 1 打开试管盖，用酒精灯烧灼试管口 2 随机抽取清洗消毒后准备使用的茶具或餐具，用灭菌生理盐水湿润棉拭子，在茶具或餐具与口唇接触处，1-1.5cm高度的内外缘各涂抹一周 3 用灭菌剪刀，剪去棉签与手接触部分，将棉拭子放入10ml生理盐水中 4 用酒精灯烧灼试管口，盖好试管盖 5 试管上标明样品编号 二毛巾、枕巾（套）微生物的采样方法 1 打开试管盖，用酒精灯烧灼试管口 2 随机抽取清洗消毒后准备使用的毛巾、枕巾（套），用灭菌生理盐水湿润棉拭子，在毛巾、枕巾（套）对折后两面的中央，各25cm2面积上，在灭菌规格板里用力均匀涂抹5次 3 用灭菌剪刀，剪去棉签与手接触部分，将棉拭子放入10ml生理盐水中 4 用酒精灯烧灼试管口，盖好试管盖 5 试管上标明样品编号 三床单和被罩等卧具微生物的采样方法 1 打开试管盖，用酒精灯烧灼试管口 2 随机抽取清洗消毒后准备使用的床单和被罩等用品，用灭菌生理盐水湿润棉拭子，分别在床单或被罩两端的中间，25cm2面积处以及床单或被罩中央部位25cm2面积上，在灭菌规格板里用力均匀涂抹5次 3 用灭菌剪刀，剪去棉签与手接触部分，将棉拭子放入10ml生理盐水中 4 用酒精灯烧灼试管口，盖好试管盖
微生物检测标准
微生物取样方法、微生物检测标准 举例一： 一、空气采样及检验方法 1培养基：普通营养琼脂平板，按GB4789.28中3.7条配制 2采样（空气沉降法） 2.1布点：面积小于30平方米的车间，设一对角线，在线上取3点，即中心一点，两端在距墙1米处各取一点；面积大于30平方米的车间，设东、西、南、北、中5个点，其中东、西、南、北点均距墙1米。 2.2采样高度：与地面垂直高度80-150厘米。 2.3采样方法；用直径为9厘米的普通营养琼脂平板在采样点上暴露20分钟盖上送检培养。 3培养：于37℃培养24小时。 4检测频率：每周 空气质量标准： 生车间、熟车间、成品车间：低于100个 半成品库、成品库：低于10个 二、设备的采样与检验方法 根据生产过程所要求的重点卫生部位，实验室对其进行涂抹采样，进行细菌总数检验。 1采样方法 1.1涂抹法（适用于表面平坦的设备和工器具产品接触面） 取经过灭菌的铝片框（框内面积为50平方厘米）放在需检查的部位上，用无菌棉球蘸上无菌生理盐水擦拭铝片中间方框部分，擦完后立即将棉球投入盛有10毫升无菌生理盐水的试管中，此液每毫升代表5平方厘米。 1.2贴纸法（适用于表面不平坦的设备和工器具接处面） 将无菌规格纸（5×5厘米，纸质要薄而软）用无菌生理盐水泡湿后，于需测部分分别贴上两张，两张纸面积共50平方厘米，然后取下放入盛有10毫升无菌生理盐水的试管中，此液每毫升代表5平方厘米。 2检验方法 2.1细菌总数的检验 将上述样液充分振摇，根据卫生情况，相应地做10倍递增稀释，选择其中2-3个合适的稀释度作平皿倾注培养，培养基用普通营养琼脂，每个稀释度作2个平皿，每个平皿注入1毫升样液，于37℃培养24小时后计菌落数。 结果计算 表面细菌总数（cfu/cm2）=平皿上菌落的平均数×样液稀释倍数/30×2 2.2致病菌的检验 沙门氏菌，参照GB4789.4进行 金黄色葡球菌，参照GB7918.5进行 4.检验合格标准：细菌总数10－100个∕cm2， 5.关键点：细菌总数≤10个∕cm2 一般区域：细菌总数≤100个∕cm2 三、人员手表面细菌污染情况的检验
LWC-1型空气微生物采样器
LWC-1型空气微生物采样器 中国建筑科学院空调所，解放军三0二医院和辽阳市康洁仪器研究所联合研制出LWC-1型空气微生物采样器，由辽阳市康洁仪器研究所生产。经医院、疾病预防控制、科研单位使用，结果满意。被卫生部《公共场所卫生监督监测条例，医院内感染及其管理》推荐使用。并装备了部队。获辽宁省科学技术进步奖，产品畅销全国26个省、市、自治区，产生了一定的经济效益和社会效益。 平皿沉降法是靠带菌尘埃的自然沉降，因而测得的菌落数不但受气流、风力、气溶胶粒度分布等因素影响，很不稳定。而该产品则弥补了上述不足，由于它的工作原理是连续、强制采样，它几乎不受外界因素的影响，性能稳定，加上该仪器基于冲击原理，能定量地收集空气中的微生物，还能采到物体表面上的微生物。是代替平皿沉降法的理想仪器。该产品具有体积小、重量轻（500克）、噪音低（＜52分贝）、捕获率高、性能稳定、操作简单、便于携带、应用范围广泛等优点，在使用方面有六条突出特点：1、不同环境交替采样，不会造成交叉污染。即两次采样之间不必更换、消毒涡壳和叶轮。2、不仅能采到空气中的，还能采到固、液体表面上的微生物（如某医院从小儿痢疾病房的床垫表面上采到沙门氏菌，在烧伤病房卡片上采到绿脓杆菌）。3、采样方向灵活。可以任意方向采样（如某医院将采样器伸到空调系统内采到致病菌）。4、交、直流两用（用1号电池四节，也可用6V稳压电源）5、噪音低。在手术室、危重病房采样无干扰。6、采样时间短（最短半分钟）。适应于医院、公共场所、生物制品、制药行业、环境保护及室内空气质量等部门监测使用。 该产品使用方便，首先把普通琼脂培养基条插入采样器头部的涡壳内，启动采样，自动定时采样完毕后将培养基条放入恒温箱中进行培养，然后计数，最后根据公式计算。 ●提供德国进口琼脂培养基条（有效期六个月），用户不必自行加注琼脂，避 免在加注琼脂过程中的污染，也减少了准备工作的麻烦。 ●提供一次性基条（有效期二年）,一次性基条经环氧乙烷灭菌，无菌、无毒。 使用前往基条内加注普通琼脂培养基即可。
空气中微生物检测
空气中微生物检测 空气中微生物的检测 1。实验目的 本实验中使用的灭菌培养皿在空气中取样并培养一段时间以测定空气中的微生物。其实验意义在于: (1)了解空气中微生物的分布 (2)比较了普通实验室和无菌室空气中存在的微生物的数量和类型 (3)验证微生物实验中无菌操作的重要性二。实验原理 空气是人类维持正常活动的物质条件，与人类健康有着非常密切的关系。随着社会进入信息时代，空气微生物的采样和检测也得到了迅速发展。已经开发了各种快速、灵敏、特异和高度自动化的仪器。为了保持高质量的空气环境，应该使用正确和先进的空气监测方法。在我们周围环境中有大量的微生物空气也不例外。尽管空气不是微生物的良好栖息地然而，由于气流、灰尘和水滴的流动、人类和动物活动等原因，仍然存在相当数量的微生物。 中空气微生物的采集方法很多，主要采用空气微生物采样器采样监测，自然沉降采样法采样。本文介绍了各种采样方法的性能，以便正确选择各种采样方法。空气微生物采样主要涉及四个方面:采样器、采样介质、采样方法和检测程度。空气微生物采样器主要包括:冲击采样器、过滤空气采样器、离心空气采样器、旋风采样器、静电沉降采样器等 当空气中的单个微生物落在适合其生长和繁殖的固体培养基表面
时，在适当温度下培养一段时间后，每个分散的菌体或孢子将形成一个肉眼可见的细胞群体或菌落。通过观察不同大小和形状的菌落，可以大致识别空气中存在的微生物类型。本实验通过检测普通实验室和无菌间空气中存在的微生物，来判断无菌间的消毒效果，了解空气中常见的微生物群。三。实验装置和仪器 1。实验仪器 (1)无菌板，组数(2)酒精灯，恒温箱数×1 (3)，数量×2 (4)高压釜(5)干热灭菌器(6)冰箱 (7)板(直径9厘米)(8)量筒(9)烧瓶(10)酸度计2。实验所需试剂 (1)蛋白胨，量10g (2)牛肉膏，量3g (3)氯化钠5g (4)琼脂15-20g (5)蒸馏水1000毫升 4，实验步骤 1。琼脂培养基制备方法:将蛋白胨、牛肉膏、氯化钠、琼脂和蒸馏水混合，加热溶解 ，调至7.4，过滤分装，高压灭菌121℃和20min，用自然沉降法测定时，将约15mL倒入灭菌板中，制成营养琼脂板2.倒置板:培养基按常规方法制备，分成三角瓶，高压灭菌备用使用 前，将培养基融化，冷却至50℃左右，倒入几个盘子备用。 3。检测:首先打开无菌室内的紫外线灯，照射15分钟后关闭。打开上面浓缩了 的无菌平板的皿盖，将皿盖暴露在无菌室空间和普通实验室空间中，分别不移动5min和30min后盖上皿盖每个培养基的平板要求在每个
空气培养采样方法
空气培养采样方法 Jenny was compiled in January 2021
医院常规空气细菌培养（自然沉降法）采样方法 一、采样时间 选择消毒处理后与进行医疗活动之前采样。 二、采样高度 与地面垂直高度80-150厘米。 三、布点方法 1.面积≤30 m2，设一条对角线取三点，即中间一点，两端各距墙1米处各取一点（图1） 图1 2．室内面积>30m2，设两条对角线，东，西，南，北，中取五点，其中东，西，南，北距墙均1米（图2） 图2 四、采样方法 用9厘米直径普通琼脂平皿，打开后盖面朝下斜扣到底盘，在采样点准确暴露5分钟后，送检培养。 五、结果分析 I类区域：<10 cfu/m3 II类区域：<200 cfu/m3 III类区域：<500 cfu/m3 六、附录 Ⅰ类区域：层流洁净手术室、层流洁净病房（参照洁净室空气培养方法与标准）。 Ⅱ类区域：普通手术室、产房、婴儿室、早产儿室、普通保护性隔离室、供应室无菌区、烧伤病房、重症监护病房。 Ⅲ类区域：儿科病房、妇产科检查室、注射室、换药室、治疗室供应室清洁区、急诊室、化验室、各类普通病房和房间。 Ⅳ类区域：传染病科及病房。
洁净室空气细菌培养监测布点与标准 一、局部百级，周围千级： 共放13个培养皿，其中手术区域5点，周边区8点。 采样布置点示意图： 二、局部千级，周围万级： 共放9个培养皿，其中手术区域3点，周边区6点。 采样布置点示意图： 三、局部万级，周围十万级： 共放7个培养皿，其中手术区域3点，周边区域4点。 2 1. 2.采样点可布置在地面上或不高于地面0.8m的任意高度上，手术区域放置在四角的平皿应离手术区边缘0.12m，培养皿放置30分钟； 3.采样后的培养皿，应立即置于37度条件下培养24小时； 4.然后计数生长的菌落数，菌落数的平均值均四舍五入进位到小数点后１位。 5.放置培养皿示意图： 盖面朝下斜扣到底盘A边上 培养底盘A 六、洁净室空气细菌菌落总数标准
空气微生物监测使用设备参数
倍默产品 MAT-100空气微生物监测系统 MAT-100空气微生物监测系统集多项优点于一身，“多点”、“远程”、“在线”监测空气浮游菌的首选！ 产品特点： ★仪器适用于多种环境中的空气微生物采样，一机可同时满足单点或多点监测，远程监测，无需再增加任何装置和辅助设备，经济节约； ★仪器具有变频调节流量功能，具有高、中及低三种监测流量模式，可任意选择切换； ★采样器上491个精密筛孔均匀分布，最大限度的捕获微生物，并减少菌落重叠的风险；而检测过程中，无需将检测空气引出至外部环境，不会造成二次污染；★仪器具有流量校准功能； ★仪器具有故障自我诊断与报警提示功能； ★每一采样器具有唯一编码，监测信息可追溯，可进行位置编号、过程记录、查询及打印功能； ★采样器部分采用316L不锈钢制造，体积小巧，可任意放置于采样位置，不占用空间； ★灭菌：带有原位灭菌功能，采样头部分可进行在线灭菌；采样筛孔盖也可采用湿热灭菌；
★引入隔离装置内采用密封连接器； ★单手快速连接及开启筛孔盖及放置培养皿，方便操作； ★时间实时显示，并实时记录采样参数，包括开始时间、结束时间，采样流量，并具有预约时间取样功能； ★采样数据存储、查询和打印功能； ★采用90mm直径标准培养皿，易购、低使用成本； ★提供完整的IQ、OQ验证文件，符合GMP要求。 技术参数： 1.电源：220V，50Hz 2.基本尺寸 主机：330mm（L）×220mm（W）×150mm（H） 采样器：105mm（Φ）×150 mm（H） 3.重量：采样单元约2kg 主机约1.5kg 4.适应介质温度：0℃～40℃ 5.检测流量低流量：28.3L/min 中流量：50L/min 高流量：100L/min 6.采样时间设定范围：1~120min 7.预约时间设定范围：0~120 min 8.流量精度：±5% 9.控制线长度（L）：3m，特殊长度可订制 10.采样点：每台主机可连接1~4个采样器，可分别或同时监测1~4个位置； 11.显示：7英寸触摸式彩色显示屏 12.报警方式：蜂鸣器鸣叫提示 13.培养皿规格：Ф90mm标准培养皿 14.存储数据：100组/每个采样点 15.打印：热敏式打印 16.连接方式：主机与采样器连接采用REMO连接器 REMO连接器可用于隔离器（Isolator），手套箱和密闭式屏障系统（C-RABS）密闭空间的连接。
手术室空气采样的方法
五月培训内容：手术室空气采样方法 1、采样时间：消毒后、操作前进行采样。 2、采样方法： （1）布点： 室内面积≤30 m2，设内、中、外对角线3点，内外点距墙1m；室内面积>30 m2，设四角及中央5点，四角点距墙1m。 （2）平板暴露法 平板直径9cm、采样高度1.5m，暴露5min。 3、检验方法 平板37℃培养48h。计数菌落数并分离致病菌。 4、平板暴露法结果计算 50000N 细菌总数（cfu/m3）=A×T A为平板面积（cm2）；T 为暴露时间（min）；N 为平均菌落数（cfu） 5、结果判定 （1）I、II类区域，细菌总数≤10cfu/cm3，并未检出致病菌为消毒合格。 （2）III类区域，细菌总数≤200cfu/cm3，并未检出致病菌为消毒合格。 （3）IV类区域，细菌总数≤500cfu/cm2，并未检出致病菌为消毒合格。
6、注意事项：采样前关好门窗，在无人走动的情况下，静止10min 进行采样 层流手术室空气日常监测方法： 要求日常实行动态监测，必测项目为平板采样法（沉降法）或采样器法(浮游菌法)检测细菌菌落总数。 （1）回风口动态平板采样法：应在手术开始、手术2小时、手术结束前抽检3-4次。每个回风口中部摆放3个倾斜30℃，Φ90 培养皿，暴露30分钟后，37°C培养24小时。标准：每皿菌落计数平均值应符合表4标准要求。单皿最大值不应超过平均值3倍。 （2）动态采样器法：浮游菌菌落检测应在手术进行如切皮、缝合、连台手术之间、手术进行4小时等，选择不少于3个程序，测定细菌菌落总数。 标准：I级<30cfu/m3 ；II级<150 cfu/m3；III级<450 cfu/m3；IV级<500 cfu/m3。 （3）其他洁净用房在当天上午10时和下午4时各测1次，在每个回风口中部摆放3个Φ90培养皿，沉降0.5h后在37℃下培养24h。 标准：同回风口动态平板采样法标准。 层流手术室静态（空态）时空气采样方法： 1、采样方法： （1）当送风口集中布置时，应对手术区和周边区分别检测；当送风口分散布置时，按全室统一布点方法检测。
微生物无菌取样方法
微生物无菌取样方法文件编码（GHTU-UITID-GGBKT-POIU-WUUI-8968）
在讨论无菌取样的原因和采集方法之前，必须要理解“无菌的”的这一术语，“无菌”一般用于取样中，意味着取样过程中，避免操作引起污染。一个无菌样品的采集，应该通过这样一种方式，即：在收集过程中，本身应避免污染，然后放入消毒容器中。一、包装无菌取样的工具： 拥有正确的采取产品或加工过程的无菌取样器械工具是至关重要的的。除非使用合适的采集工具，否则样品的完整性会被怀疑，甚至样品毫无意义。为了避免没有合适的取样工具，建议建立一个无菌取样的分析清单，来收集取样工具。如果可能盛样品的容器在最初进入加工区之前应当被预先标识，像样品号、取样日期、取样人等。这样可以使在不同的工厂条件下的样品取样更为方便一些。附加样品号码一般在样品采集中被正式确定下来，因此不用预先标明。 人员的工具设施，像工作服、发网或消毒处理过的清洁的鞋靴必须具备有助于证明采集者没有污染到食物产品或样品。 二、采样前准备 1. 干冰或冰袋：如果使样品在贮运过程中保持冷却，一些种类的制冷剂是必需的。 检查观看干冰袋子是否有接触，如果泄漏可能污染样品，你也可以用湿冰，湿冰可以由工厂提供，然而取样前必须清楚这一点，如果想保持样品冷冻，干冰应在检验前获得。
2. 灭菌容器及器具：无菌采样袋，袋子必须购买灭菌的，使用时只需撕掉封头，用 提供的地方法张开袋子，将样品放入，然后将袋子顶端卷起，并封口；必要时，取样用镊子，剪子等要灭菌处理。 3. 无菌手套：灭菌手套在采样中并非必须启用，如果一个产品在样品收集过程中必 须被接触，那么最好让工人来做（加工处理产品的工人），将样品放入收集容器中，既然工人在生产过程中处理接触产品，那么我们就不能认为他们对产品又有附加的污染。当用手套时必须用一种避免污染的方式戴上，手套的大小必须适合工作的需要。 4. 75%酒精棉球以及75%酒精喷壶，一次性帽子，口罩以及白大褂。 当采集无菌样品时，一条最重要的规则是：千万别污染样品。 三、采样 抽样必须遵循无菌操作程序，抽样工具如整套不锈钢勺子、镊子、剪刀等应当高压灭菌，防止一切可能的外来污染。容器必需清洁、干燥、防漏、广口、灭菌，大小适合盛放检样。抽样全过程中，应采取必要的措施防止食品中固有微生物的数量和生长能力发生变化。确定检验批，应注意产品的均质性和来源，确保检样的代表性。常见的抽样方法有： 1．直接食用的小包装食品： 尽可能取原包装，直到检验前不要开封，以防污染。 2．桶装或大容器包装的液体食品： （1）．抽样前摇动或用灭菌棒搅拌液体，尽量使其达到均质；
微生物采样方案
微生物限量采样方案 采样方案分为二级和三级方案，二级采样方案设有n、c、m值，三级采样方案设有n、c、m和M值。 n：同一批次产品应采集的样品件数 c：最大可允许超出m值的样品数 m：微生物指标可接受水平的限量值 M：微生物指标的最高安全限量值 例：n=5,c=2,m=100cfu/g,M=1000cfu/g,即从一批产品中采集5个样品，若5个样品的检测结果均小于或等于m值（≤100cfu/g），则这种情况是允许的，若≤2个样品的结果（X）位于m值和M值之间（100cfu/g≤X≤1000cfu/g），则这种情况也是允许的；若有3个及以上样品的检验结果位于m和M之间，则这种情况是不允许的；若有任一样品的检验结果大于M（>1000cfu/g），则这种情况也是不允许的。 0/25g a，标准限量，就是每25g样品不得检出。a通常为5次。 挥发性盐基氮：代表动物蛋白受微生物的作用程度，是动物蛋白新鲜度的代表。 MPN：基于泊松分布的一种间接计数方法，most probable number GB 7718,直接向消费者提供的预包装食品标签，标示应包括食品名称、配料表、净含量和规格。生产者和经销商的名称、地址和联系方式、生产日期和保质期、贮存条件、食品生产许可证编号、产品标准代号及其他需要标识的内容。 ADI：每日允许摄入量 acceptable daily intake。 净含量字体高度≥4mm。 下列预包装食品豁免强制标示营养标签 1、生鲜食品如包装的生肉、生鱼、生蔬菜和水果、禽蛋等 2、乙醇含量≥0.5%的饮料酒类 3、包装总面积≤100cm3或最大表面面积≤20cm3的食品 4、现制现售的食品 5、包装的饮用水
空气采样及检验方法
空气采样及检验方法 1培养基：普通营养琼脂平板， 2采样（空气沉降法） 2.1布点：面积小于30平方米的车间，设一对角线，在线上取3点，即中心一点，两端在距墙1米处各取一点；面积大于30平方米的车间，设东、西、南、北、中5个点，其中东、西、南、北点均距墙1米。 2.2采样高度：与地面垂直高度80-150厘米。 2.3采样方法；用直径为9厘米的普通营养琼脂平板在采样点上暴露20分钟盖上送检培养。 3培养：于37℃培养24小时。 4检测频率：每周 1采样方法 1.1涂抹法（适用于表面平坦的设备和空桶内壁接触面） 取经过灭菌的铝片框（框内面积为50平方厘米）放在需检查的部位上，用无菌棉球蘸上无菌生理盐水擦拭铝片中间方框部分，擦完后立即将棉球投入盛有10毫升无菌生理盐水的试管中，此液每毫升代表5平方厘米。 2检验方法 2.1细菌总数的检验 将上述样液充分振摇，根据卫生情况，相应地做10倍递增稀释，选择其中2-3个合适的稀释度作平皿倾注培养，培养基用普通营养琼脂，每个稀释度作2个平皿，每个平皿注入1毫升样液，于37℃培养24小时后计菌落数。
结果计算 表面细菌总数（cfu/cm2）=平皿上菌落的平均数×样液稀释倍数/30×2 三、人员手表面细菌污染情况的检验 1.采样方法：用一支蘸有无菌生理盐水的棉拭子涂擦被检对象手的全部，反复两次，涂擦的时候棉拭子要相应地转动，擦完后，将手接触部分剪去，将棉拭子放入装有10毫升无菌生理盐水的试管内送检培养。 2. 检验方法：同工器具表面细菌总数检验方法。 3. 结果计算：每只手表面的细菌总数（cfu/只手）=平皿上菌落的平均数×样液稀释倍数 四、消毒液药效的微生物学鉴定法 1采样对象：正常使用的消毒液，和已知配制好备用的消毒液 2采样及检验方法 在无菌条件下，用无菌吸管吸取1毫升样液，加入9毫升稀释液中混匀， 将注入了样液的稀释液充分摇匀，取1毫升注入平皿，随之倒入普通营养琼脂，待琼脂凝固后，翻转平皿，将平皿于37℃条件下培养24小时后计平板上生长的菌落数。 3结果分析 平板上有菌生长，表明被检样液中有残存活菌，若每个平板菌落数在10个以下，仍可用于消毒，若每个平板菌落数超过10个，说明每毫升被检样液含菌量已超过100个，即不宜在用于消毒。
环境微生物检测——采样方法 剧本
《环境微生物检测——采样方法》场景剧本题目：环境微生物检测——采样方法 主题曲、插曲待定 影片主要角色： 男1号梁总，25岁，业务主管（西装革履） 男或女2号小李，20岁，采样组组长（休闲） 女3号小黄，20岁，前台靓女（时尚的靓女） 男3号** 客户，25岁，（带领的衣服）（演成搞笑的土豪人物） 男或女4号：小王，19岁，某学校的顶岗实习生 第一场： 场景：公司前台（汇标公司的前台，甲在埋头做报表，乙在打电话和客户沟通，前台靓女在接水） 时间：上午 人物：前台靓女、客户，前台靓女以及同事两三个。 从门外来了一个大约25岁男性在张望。前台靓女赶紧走出来打开门。 前台靓女：您好。 客户：这里是汇标检测公司吗？ 前台靓女：是啊，有什么可以帮到您？ 客户：我是来自大中国建筑集团有限公司的××。最近我们一个大楼要竣工验收，需要对水质进行检测，你们能做吗？我们不差钱。 前台靓女指引客户坐下，倒一杯水。 前台靓女：这些业务我们做过很多。我们是第三方检测公司，有对该项目进行检测的资质，严格按照国家标准做的。 客户：对水质都监测什么呀？ 前台靓女：《建筑给水排水及采暖工程施工质量验收规范》GB50242-2002中明文规定：
“4.2.3 生活给水系统管道在交付使用前必须冲洗和消毒，并经有关部门取样检验，符合国家《生活饮用水标准检验方法》方可使用。 生活饮用水标准检验方法GB/T5750 – 2006，具体包括13个分项。包括水样采集和保存、感官性状和物理指标、有机物指标、消毒副产品指标、金属指标和微生物指标等等。 对建筑工程竣工验收水质检测，我们一般取pH、色度、浑浊度、臭味、肉眼可见物、总游离氯、耗氧量、菌落总数、大肠菌群等指标。 客户：听起来很专业，好！我信赖你们公司。 前台靓女：那麻烦您去我们主管办公室对签订合同有关事宜进行协商。 第二场： 场景：办公室 时间：某上午 人物：业务主管梁总、采样组组长小李 梁总：小李，这里刚接和大中国建筑集团有限公司签了一个合同。这可是一个大客户，你们要认真对待。你赶紧安排人过去采样吧。 小李：好的。我会尽快安排人过去采样。您放心吧。 第三场： 场景：公司走廊 时间：某上午 人物：采样组组长小李，实习生小王 小李：小王，我们明天要去广州海珠区琶洲那边对一个大楼的自来水进行采样，你准备一下。 小王：好的。我会马上去做。 第四场： 场景：实验室 时间：任意 人物：小李
空气样品的采集方法和采样仪器
空气样品的采集方法和采样仪器 一、直接采样法当空气中的被测组分浓度较高，或者监测方法灵敏度高时，直接采集少量气样即可满足监测分析要求。(一)注射器采样常用l00mL注射器采集有机蒸气样品。采样时，先用现场气体抽洗23次，再充满样气，夹封进气口，带回尽快分析。 (三)采气管采样采气管是两端具有旋塞的管式玻璃容器，其容积为100∽500mL。采样时，打开两端旋塞，将二联球或抽气泵接在管的一端，迅速抽进比采气管容积大6—10倍的欲采气体，使采气管中原有气体被完全置换出，关上两端旋塞，采气体积即为采气管的容积。 (四)真空瓶采样 二、富集(浓缩)采样法空气中的污染物质浓度一般都比较低(10-6～10-9数量级)，直接采样法往往不能满足分析方法检测限的要求，故需要用富集采样法对大气中的污染物进行浓缩。富集采样时间一般比较长，测得结果代表采样时段的平均浓度，更能反映大气污染的真实情况。这类采样方法有：(一)溶液吸收法溶液吸收法的吸收效率主要决定于吸收速度和样气与吸收液的接触面积。 欲提高吸收速度，必须根据被吸收污染物的性质选择效能好的吸收液。吸收液的选择原则是：(1)与被采集的污染物质发生化学反应快或对其溶解度大。(2)污染物质被吸收液吸收后，要有足
够的稳定时间，以满足分析测定所需时间的要求。(3)污染物质被吸收后，应有利于下一步分析测定，最好能直接用于测定。(4)吸收液毒性小、价格低、易于购买，且尽可能回收利用。增大被采气体与吸收液接触面积的有效措施是选用结构适宜的吸收管(瓶)。几种常用吸收管：1、气泡吸收管2、冲击式吸收管3、多孔筛板吸收管(瓶)(二)填充柱阻留法填充柱是用一根长6～l0cm、内径3～5mm的玻璃管或塑料管，内装颗粒状或纤维状填充剂制成。采样时，让气样以一定流速通过填充柱，则欲测组分因吸附、溶解或化学反应等作用被阻留在填充剂上，达到浓缩采样的目的。采样后，通过解吸或溶剂洗脱，使被测组分从填充剂上释放出来进行测定。根护填充剂阻留作用的原理，可分为吸附型、分配型和反应型三种类型。(三)滤料阻留法该方法是将过滤材料(滤纸、滤膜等)放在采样夹上，用抽气装置抽气，则空气中的颗粒物被阻留在过滤材料上，称量过滤材料上富集的颗粒物质量，根据采样体积，即可计算出空气中颗粒物的浓度。(一) 低温冷凝法 (五)静电沉降法 (六)扩散(或渗透)法 (二) (七)自然积集法 (八)综合采样法 三、采样仪器 (一)组成部分空气污染物监测多采用动力采样法，其采样器主要由收集器、流量计和采样动力三部分组成。1、收集器：收
微生物取样方法
微生物取样方法 举例一： 一、空气采样及检验方法 1培养基：普通营养琼脂平板，按中条配制 2采样（空气沉降法） 布点：面积小于30平方米的车间，设一对角线，在线上取3点，即中心一点，两端在距墙1米处各取一点；面积大于30平方米的车间，设东、西、南、北、中5个点，其中东、西、南、北点均距墙1米。 采样高度：与地面垂直高度80-150厘米。 采样方法；用直径为9厘米的普通营养琼脂平板在采样点上暴露20分钟盖上送检培养。 3培养：于37℃培养24小时。 4检测频率：每周 空气质量标准： 生车间、熟车间、成品车间：低于100个 半成品库、成品库：低于10个 二、设备的采样与检验方法 根据生产过程所要求的重点卫生部位，实验室对其进行涂抹采样，进行细菌总数检验。 1采样方法 涂抹法（适用于表面平坦的设备和工器具产品接触面） 取经过灭菌的铝片框（框内面积为50平方厘米）放在需检查的部位上，用无菌棉球蘸上无菌生理盐水擦拭铝片中间方框部分，擦完后立即将棉球投入盛有10毫升无菌生理盐水的试管中，此液每毫升代表5平方厘米。 贴纸法（适用于表面不平坦的设备和工器具接处面） 将无菌规格纸（5×5厘米，纸质要薄而软）用无菌生理盐水泡湿后，于需测部分分别贴上两张，两张纸面积共50平方厘米，然后取下放入盛有10毫升无菌生理盐水的试管中，此液每毫升代表5平方厘米。 2检验方法 细菌总数的检验 将上述样液充分振摇，根据卫生情况，相应地做10倍递增稀释，选择其中2-3个合适的稀释度作平皿倾注培养，培养基用普通营养琼脂，每个稀释度作2个平皿，每个平皿注入1毫升样液，于37℃培养24小时后计菌落数。 结果计算 表面细菌总数（cfu/cm2）=平皿上菌落的平均数×样液稀释倍数/30×2 致病菌的检验 沙门氏菌，参照进行 金黄色葡球菌，参照进行 4.检验合格标准：细菌总数10－100个∕cm2， 5.关键点：细菌总数≤10个∕cm2 一般区域：细菌总数≤100个∕cm2 三、人员手表面细菌污染情况的检验 1. 采样方法：用一支蘸有无菌生理盐水的棉拭子涂擦被检对象手的全部，反复两次，涂擦的时候棉拭子要相应地转动，擦完后，将手接触部分剪去，将棉拭子放入装有10毫升无菌生理盐水的试管内送检培养。 2. 检验方法：同工器具表面细菌总数检验方法。 3. 结果计算：每只手表面的细菌总数（cfu/只手）=平皿上菌落的平均数×样液稀释倍数 四、消毒液药效的微生物学鉴定法
微生物样品的取样方法及取样要求
微生物样品的取样方法及取样要求 样品取样的要求 1）在取样之前应确认货、证是否相符。2）取样过程中应避免与水等环境的不良因素影响，防止样品被污染。3）取样用具（如注射器、采血管、试管、探子、铲子、匙、取样器、剪子、样品袋等）必须是经过灭菌的。4）对采集的样品一般要求随机取样。若怀疑最有可能受病原体污染或者带有病原体的样品，可以进行选择取样。5）根据样品种类（如盒装、袋装、瓶装和罐装），应取完整密封的样品。如果样品很大，则需用无菌取样器取样；若样品是粉末，应边取边混合；若样品是液体的，通过振摇即可混匀；若样品是冷冻的，应保持冷冻状态（可放在冰内、冰箱的冷盒内或低温冰箱内保存），而非冷冻动物产品须保持在0℃~5℃中保存。6）取样前或取样后应在盛装样品的容器或样品袋上立即贴上标签，每件样品必须标记清除（包括品名、来源、数量、取样地点、取样人及取样日期）。7）获取有关取样产品的信息：如样品名称、批量大小、包装类型、包装容器体积、生产线、产品编号或控制号、批量号、标签内容、包装破损状况、产品存放地点或建筑物的基本情况等。8）当客户对所规定的取样程序有偏离、添加或删节的要求时，应详细记录这些要求和相关的取样资料，并记入包含检测结果的所有文件中，同时告知相关人员。9）当取样作为检测一部分时，实验室应有程序记录与取样有关的资料和操作。这些纪录应包括所用的取样程序、取样人的识别、环境条件（如果相关）、必要时有抽样地点的图示或其他等效方法，如果合适，还应包括取样程序所依据的统计方法。 食品微生物学的取样点
食品微生物的取样计划中常包括以下取样点：原料、生产线（半成品、环境）、成品、库存样品、零售商店、或批发市场、进口或出口口岸。原料的取样包括食品生产所用的原始材料、添加剂、辅助材料及生产用水等。生产线样品是指食品生产过程中不同加工环节所取的样品，包括半成品、加工台面、与被加工食品接触的仪器面以及操作器具等。对生产线样品的采集能够确定细菌污染的来源，可用于食品加工企业对产品加工过程卫生状况的了解和控制，同时能够用于特定产品生产环节关键控制点的确定和HACCP的验证工作。另外还可以配合生产加工，在生产前后或生产过程中对环境样品（如地面、墙壁、天花板以及空气等）取样进行检验，以检测加工环境的卫生状况。库存样品的取样检验可以测定产品在保质期内微生物的变化情况，同时也可以间接对产品的保质期是否合理进行验证。零售商店或批发市场的样品的检测结果，能够反映产品在流通过程中微生物的变化情况，能够对改进产品的加工工艺起到反馈作用。进口或出口样品通常是按照进出口商所签订的合同进行取样和检测的。但要特别注意的事，进出口食品的微生物指标除满足进出口合同或信用证条款的要求外，还必须符合进口国的相关法律规定，如世界上很多国家禁止含有致病菌的食品进口。不同样品的取样方法（1）包装食品①直接食用的小包装食品：尽可能取原包装，直到检验前不要开封，以防污染。②桶装或大容器包装的液体食品：取样前应摇动或用灭菌棒搅拌液体，尽量使其达到均质；取样时应将取样用具浸入液体内略加漂洗，然后再取所需量的样品，装入灭菌容器的量不应超过其容量的四分之三，以便于检验前将样品摇匀；取完样品后，应用消毒的温度计插入液体内测量食品的温度，并作记录。尽可能不用水银温度计测量，以防温度计破碎后水银污染食品；如为非冷藏易腐食品，应迅速将所取样品冷却至0℃~4℃。③桶装或大容器包装的
远程自动空气微生物采样机器人
１０．３９６９／ｊ ．ｉｓｓｎ． １００８－５５４８．２０１３．０３．０１８ 远程自动空气微生物采样机器人 占礼葵１，生甡２，王华２，赵四清２，吴慧云２，黄志松２，孙振海２ １．中国科学院合肥物质科学研究院，安徽合肥２３００３１２．军事医学科学院科技部，北京１０００７１ 摘要：为了研制一种全自动远程控制、可连续采样的空气微生物采样机 器人系统，以适应空气微生物采样自动化、网络化、智能化的发展需求， 通过论证、测试－验证，完成系统的总体设计，以及室内远程控制组件、 圆周－升降运动、手爪张合、样品刻字、气流控制、防盗安全、信息保存 等功能模块的设计，并进行样机集成和基本性能测试。结果表明，研制 的空气微生物采样机器人系统适用于多种作业环境，达到了设计要求。 空气微生物采样；远程控制；圆周－升降运动；智能 ＴＰ２４Ａ １００８－５５４８（２０１３）０３－００７１－０３ Ｒｅｍｏｔｅ Ａｕｔｏｍａｔｉｃ Ａｉｒ Ｍｉｃｒｏｏｒｇａｎｉｓｍ Ｓａｍｐｌｉｎｇ Ｒｏｂｏｔ ＺＨＡＮ Ｌｉｋｕｉ１，ＳＨＥＮＧ Ｓｈｅｎｇ２，ＷＡＮＧ Ｈｕａ２， ＺＨＡＯ Ｓｉｑｉｎｇ２，ＷＵ Ｈｕｉｙｕｎ２，ＨＵＡＮＧ Ｚｈｉｓｏｎｇ２， ＳＵＮ Ｚｈｅｎｈａｉ２ １． Ｈｅｆｅｉ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ Ｐｈｙｓｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ， Ｃｈｉｎｅｓｅ Ａｃａｄｅｍｙ ｏｆ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ， Ｈｅｆｅｉ ２３００３１ ； ２． Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ， Ａｃａｄｅｍｙ ｏｆ Ｍｉｌｉｔａｒｙ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ， Ｂｅｉｊｉｎｇ １００８５０， Ｃｈｉｎａ Ａｂｓｔｒａｃｔ： Ｔｏ ｄｅｖｅｌｏｐ ａ ｒｅｍｏｔｅ ａｕｔｏｍａｔｉｃ ａｎｄ ｃｏｎｔｉｎｕｏｕｓ ｓａｍｐｌｉｎｇ ａｉｒ ｍｉｃｒｏｏｒｇａｎｉｓｍ ｒｏｂｏｔ ｓｙｓｔｅｍ，ｗｈｉｃｈ ｃｏｕｌｄ ｓａｔｉｓｆｙ ｔｈｅ ｎｅｅｄｓ ｏｆ ｔｈｅ ａｉｒ ｍｉｃｒｏｏｒｇａｎｉｓｍ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ ａｕｔｏｍａｔｉｃ ｓａｍｐｌｉｎｇ ｏｆ ａｉｒ ｇｅｒｍｓ， ｎｅｔｗｏｒｋｉｎｇ ａｎｄ ｉｎｔｅｌｌｉｇｅｎｃｅ， ｔｈｅ ｏｖｅｒａｌｌ ｄｅｓｉｇｎ ｏｆ ｔｈｅ ｓｙｓｔｅｍ ｗａｓ ｃｏｍｐｌｅｔｅｄ ｂａｓｅｄ ｏｎ ｔｈｅ ｄｅｍｏｎｓｔｒａｔｉｏｎ， ｔｅｓｔ－ｖａｌｉｄａｔｉｏｎ． Ｔｈｅ ｈａｒｄｗａｒｅ ａｎｄ ｓｏｆｔｗａｒｅ ｏｆ ｔｈｅ ｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓ ｉｎ ｔｈｅ ｓｙｓｔｅｍ ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ ｉｎｄｏｏｒ ｒｅｍｏｔｅ ｃｏｎｔｒｏｌ ｕｎｉｔ，ｔｈｅ ｍｏｄｕｌｅ ｏｆ ｔｈｒｅｅ－ｄｉｍｅｎｓｉｏｎａｌ ｍｏｔｉｏｎ ｃｏｎｔｒｏｌ ，ｐａｗ ｃｏｎｔｒｏｌ， ｓａｍｐｌｅ ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ， ａｉｒ ｆｌｏｗ ｃｏｎｔｒｏｌ ａｎｄ ｓｅｃｕｒｉｔｙ ｍｏｎｉｔｏｒｉｎｇ ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ ｓｔｏｒａｇｅ ｍｏｄｕｌｅ ａｎｄ ｌｉｇｈｔ ｖｅｈｉｃｌｅ ｒｅｆｒｉｇｅｒａｔｏｒ ｗｅｒｅ ｄｅｖｅｌｏｐｅｄ． Ａ ｐｒｏｔｏｔｙｐｅ ｓｙｓｔｅｍ ｗａｓ ｉｎｔｅｇｒａｔｅｄ ａｎｄ ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ ｏｆ ｔｈｅ ｐｒｏｔｏｔｙｐｅ ｗａｓ ｔｅｓｔｅｄ． Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗ ｔｈａｔ ｔｈｅ ａｉｒ ｍｉｃｒｏｏｒｇａｎｉｓｍ ｒｏｂｏｔ ｓｙｓｔｅｍ ｈａｓ ａｃｈｉｅｖｅｄ ｔｈｅ ｄｅｓｉｇｎ ｒｅｑｕｉｒｅｍｅｎｔｓ，ｗｈｉｃｈ ｃａｎ ｂｅ ｕｓｅｄ ｉｎ ａ ｖａｒｉｅｔｙ ｏｆ ｏｐｅｒａｔｉｎｇ ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔｓ． Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ： ａｉｒ ｍｉｃｒｏｏｒｇａｎｉｓｍ ｓａｍｐｌｉｎｇ；ｒｅｍｏｔｅ ｃｏｎｔｒｏｌ； ｔｈｅｅ－ｄｉｍｅｎｓｉｏｎａｌ ｍｏｔｉｏｎ； ａｕｔｏｍａｔｉｃ ２０１２－０５－１０２０１２－１０－０８ 第一作者简介：占礼葵（１９６７－），男，高级工程师，主要从事机电一体化技 术研究与装备研发工作。Ｅ－ｍａｉｌ： ｚｌｋ＠ｉｉｍ．ａｃ．ｃｎ。 孙振海（１９７１－），男，博士，研究员，主要从事气溶胶采样、扩散 与危害评估及生物安全方面的研究工作。Ｅ－ｍａｉｌ： ｓｕｎｚｈｅｎｈ＠ｔｏｍ．ｃｏｍ。 万方数据