M7(R1)： 评估和控制药物中 DNA 反应性(致突变)杂质以限制潜在的致癌风险(中文版：征求意见稿)
人用药品注册技术要求国际协调会议(ICH)
ICH 协调指南
M7 评估和控制药物中DNA 反应性（致突变）杂质以限制潜在的致癌风险
（中文版：征求意见稿）
当前版本为第4步版本
日期2017年3月31日
根据ICH 进程，本指南由人用药物注册技术要求国际协调会（ICH）的专家组制定，并已提交给各监管当局征询意见。在ICH 进程的第 4 阶段，最后的草案被推荐给ICH辖区的监管机构采纳。
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当前版本为第4步版本
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评估和控制药物中DNA 反应性（致突变）杂质以限制潜在的致癌风险
M7(R1)
ICH行业指南
已于2017年5月31日在ICH大会会议上达到ICH进程第4步，建议将此指南用于ICH的监管机构。
目录
1.介绍 (5)
2.指南的范围 (5)
3.总则 (6)
4.已上市药品的注意事项 (7)
4.1原料药化学、生产和控制的批准后变更 (7)
4.2制剂化学、生产和控制的批准后变更 (8)
4.3已上市药品的临床用途变更 (8)
4.4已上市药品的其他注意事项 (8)
5.原料药和制剂杂质评估 (8)
5.1 合成杂质 (9)
5.2降解产物 (9)
5.3临床研发的注意事项 (10)
6.危害评估要素 (10)
7.风险表征 (11)
7.1 基于TTC 的可接受摄入量 (11)
7.2基于化合物特异性风险评估的可接受摄入量 (11)
7.2.1具有阳性致癌性数据的致突变杂质 (11)
7.2.2有实际阈值证据的致突变杂质 (12)
7.3 与LTL 暴露相关的可接受摄入量 (12)
7.3.1 临床研发阶段 (13)
7.3.2已上市药品 (13)
7.4多个致突变杂质的可接受摄入量 (13)
7.5特例和方法灵活性 (14)
8.控制 (14)
8.1工艺相关杂质的控制 (15)
8.2控制方法的注意事项 (16)
8.3定期检测的注意事项 (16)
8.4降解产物的控制 (17)
8.5生命周期管理 (17)
8.6临床研发的注意事项 (18)
9.文件 (18)
9.1临床试验申请 (18)
9.2通用技术文件(上市申请) (19)
注解 (19)
术语 (24)
附件 (26)
附录1：ICH M7 指南应用范围 (26)
附录2：举例说明可以采用潜在的控制方法 (27)
附录3: ICH M7 附录 (30)
评估和控制药物中DNA 反应性（致突变）杂质以限制潜在的致癌风险
M7(R1)
1.介绍
原料药的合成包括活性化学物质、试剂、溶剂、催化剂和其它加工助剂的使用。化学合成或之后的降解使得所有的原料药及相关制剂中都存在杂质。虽然ICH Q3A 新原料药中的杂质(R2)Q3A 和Q3B(R2)新制剂中的杂质（参考文献1、2）为大多数杂质的定性和控制提供了指导，但其为DNA 反应性杂质提供的指导很有限。本指南旨在提供一个可用于致突变杂质的鉴别、分类、界定和控制的可行性框架，以限制潜在的致癌风险。本指南意在补充ICH Q3A(R2)、Q3B(R2)（注释1）和M3(R2)支持开展人类临床试验和药品上市许可的非临床安全性研究（参考文献3）。
本指南强调在确立可忽略致癌风险的致突变杂质水平时要兼顾安全性和质量风险管理两方面。指南在考虑药物在人用的条件下，概述了对最终原料药或制剂中残留或可能残留的致突变杂质进行评估和控制的建议。
2.指南的范围
本指南旨在为新原料药和新制剂在临床研发和后续上市申报期间提供指导。它也适用于已上市药物的批准后申请，以及含已上市药品中的原料药的产品的新上市申请—上述两种申请仅在以下情形时才适用：
?原料药合成的变更导致产生新杂质或已有杂质可接受标准提高；
?处方、组分或生产工艺的变更导致产生新的降解产物或已有降解产物可接受标准提高；
?适应症或给药方案的变更严重影响可接受的癌症风险水平。
本指南中描述的对杂质潜在致突变的评估不适用于以下类型的原料药和制剂：生物/生物技术制品、肽类、寡核苷酸、放射性药物、发酵产品、草药和动物或植物来源的粗制品。
本指南不适用于ICH S9（参考文献4）范围定义的用于晚期癌症适应症的原料药和制剂。另外，可能会有某些情况，用于其它适应症的原料药本身在治疗浓度下就具有遗传毒性，且预计可能与癌症风险增加有关。在这些情况下，暴露在致突变杂质下不会显著增加原料药的癌症风险。因此，杂质可以被控制在非致突变性杂质的可接受水平。
在本指南中描述的对杂质潜在致突变的评估不适用于已上市药物中使用的辅料、调味剂、着色剂和香料。本指南不适用于与药物包材相关的可浸出物，但如有必要，可使用指南中概述的限制潜在致癌风险的安全风险评估原则。如有必要，药品中首次使用且为化学合成的辅料中的杂质可使用本指南的安全风险评估原则。
3.总则
本指南关注的焦点为，在较低水平时也有可能直接引起DNA 损伤，导致DNA 突变，可能引发癌症的DNA 反应性物质。这类致突变致癌物常通过细菌回复突变（致突变性）试验检测。其它类型的无致突变性的遗传毒性物质通常有阈值机制，这类杂质以杂质水平存在时通常不会对人类造成致癌风险。因此，为了限制与潜在致突变杂质暴露相关的潜在人类患癌风险，我们使用细菌突变试验来评估致突变的可能性及控制的必要性。基于结构进行的评估有助于人们根据已有知识来预测细菌突变试验的结果。实施该评估的方法有很多，包括综述已有文献资料和/或计算机模拟的毒性评估。
开发毒理学关注阈值（TTC）概念，用以确定所有未经研究的化学物质的、无致癌性或其他毒性作用的风险的可接受的摄入量。基于TTC 的方法通常被认为是非常保守的，因为它们涉及从50%肿瘤发生率（TD50）的剂量简单线性外推到十万分之一发生率的剂量，且采用的TD50数据来自于最敏感物种和肿瘤发生的最敏感部位。在使用TTC 评估原料药和制剂中致突变杂质的可接爱限度时，1.5μg/天的量是合理的，其对应的理论上的寿命患癌风险为十万分之一。有些结构基团被确定为具有较高的致癌性，即使摄入量低于TTC 水平，理论上仍会有潜在的显著致癌风险。这类高效致突变致癌物，被称为“关注队列”，包括黄曲霉素类、N-亚硝基化合物，以及烷基-氧化偶氮基化合物。
在临床研发期间，在早期阶段整体研发经验有限，预期控制策略和控制方法的水平可能会不完善。本指南是在已建立的风险评估策略的基础上，制订致突变杂质的可接受摄入量。在早期研发阶段，可接受风险设立在患癌率约为百万分之一的理论计算水平上。对于研发后期及已上市产品，增加的可接受癌症风险设立在患癌率约为十万分之一的理论计算水平上。与人类寿命罹患各类癌症的发生率（大于三分之一）相比，这两个不同的风险水平代表了理论上风险稍有增加。需注意的是，已确立的癌症风险评估是基于寿命的暴露量。在研发和上市期间短于寿命（LTL）的暴露量可以有更高的可接受的杂质摄入量，并仍保持相当的风险水平。使用量化的患癌风险值（十万分之一），并将其转化为基于风险的剂量（TTC）是一个高度假设性的概念，不应被视为实际风险的现实表明。
然而，TTC概念提供了任何致突变性化合物安全暴露的估计。考虑到在推导TTC值时采用的保守假设，所以超出TTC 值并不一定会增加患癌风险。癌症发生率的增加实际远低于十万分之一。另外，如果致突变化合物在啮齿动物生物测定中显示为非致癌物，则致癌风险预计不会增加。基于上述这些原因，任何暴露在一个后来被鉴定为致突变的杂质下的情况，不一定与已暴露于该杂质的患者的患癌风险增加相关。应进行风险评估来决定是否需要采取进一步措施。
如果一个杂质被鉴定为具有潜在风险，则需要根据对工艺的理解和/或分析控制开发一个适当的控制策略，以保证致突变杂质处于或低于可接受的癌症风险水平。
可能存在一些情况，杂质是药物的代谢产物。在这种情况下，对代谢产物的致突变风险评估可以界定该杂质。
4.已上市药品的注意事项
本指南不适用于回顾性分析（如本指南采纳前已上市的药物）。但是，有些类型的批准后变更需要重新评估致突变杂质相关的安全性。本节内容适用于在本指南被采纳前或后已上市药品的该类批准后的变更。8.5节（生命周期管理）包括了对本指南采纳后的已上市药品的其它建议。
4.1原料药化学、生产和控制的批准后变更
涉及原料药的研发、生产和控制的批准后申报应包括起始物料后的合成路线、试剂、溶剂或工艺条件变更对致突变杂质的潜在风险影响的评估。具体来说，应对变更进行评估，以确定其是否会导致产生任何新的致突变杂质或提高已知致突变杂质的可接受标准。不建议对不受变更影响的杂质重新进行评估。例如，如果只有一部分生产工艺发生变更，则致突变杂质的风险评估应局限于该变更是否会产生新的致突变杂质，在受影响的步骤中致突变杂质是否升高，以及来自上游步骤中的已知致突变杂质是否升高。与该变更相关的法规申报资料应描述9.2节中所列的评估。变更原料药、中间体或起始物料的生产场所，或变更原材料供应商，不需要重新评估致突变杂质风险。
如果拟提交一个新的原料药供应商，如有证据证明该供应商生产的原料药采用了与审评区域内已上市药品中所用的原料药相同的合成路线，则足以说明关于致突变杂质的风险/利益是可以接受的，不需要根据本指南进行评估。如果不是这种情况，则强烈建议根据本指南进行评估。
4.2制剂化学、生产和控制的批准后变更
涉及制剂的批准后申报（例如，组分、生产工艺、剂型的变更），则应包括对所有新的致突变降解产物或已有致突变降解产物更高的可接受标准相关的潜在风险进行评估。适当时，法规申报资料应包括更新的控制策略。如果原料药并没有发生变更，则不建议，也不期望对制剂相关的原料药重新进行评估。制剂生产场所变更不需要重新评估致突变杂质风险。
4.3已上市药品的临床用途变更
可能需要重新评估致突变杂质限度的已上市药品的临床用途变更包括临床使用剂量的显著增加、用药时长的增加（特别是将致突变杂质控制在针对先前适应症寿命使用时的可接受摄入量，但该摄入量可能已不再适合于新适应症更长的给药时长），或者适应症由病情较严重或危及生命的病况变为较不严重的病况，先前合理的较高的杂质可接受摄入量（7.5节）可能不再适合于新适应症。与用于新给药途径或扩大患者人群（包括孕妇和/或儿童）相关的已上市药品临床用途的变更，假设每日剂量或给药时长没有增加，则不需要重新评估致突变在杂质风险。
4.4已上市药品的其他注意事项
如有特殊关注原因，本指南可用于已上市的药品。仅凭杂质存在警示结构不足以启动后续措施，除非该结构在“关注队列”中（3节）。然而特殊关注原因可以是在为上市许可建立总体控制策略和质量标准后所获得的新的相关杂质危害性数据（分为第1 类或和 2 类，第 6 节）。这些新的相关杂质危害性数据应来自与相关法规试验指南相一致的高质量科学研究，且其数据记录或报告随时可用。同样，在已上市药品中发现一个新的第 1 类或第 2 类致突变杂质，这也属于一种特殊关注原因。上述两种情形下，一旦申报人知晓这些新的信息，则需要遵循本指南进行评估。
5.原料药和制剂杂质评估
应该对新原料药合成和贮存期间以及新制剂生产和贮存期间可能产生的实际的和潜在的杂质进行评估。
杂质评估包含两个阶段：
?已被鉴定的实际的杂质应考虑其潜在致突变性。
?可能存在于最终的原料药中的潜在杂质应进行评估，以确定是否需要进一步评估其潜在致突变性。
合成杂质和降解产物分别按 5.1节和5.2节描述的步骤遵照执行。
5.1 合成杂质
实际杂质包括原料药中观察到的超出ICH Q3A 报告阈值的杂质。如果实际杂质水平超过了ICH Q3A 中所述的鉴定限度，则应进行鉴定。应当注意，有些低于鉴定限度的杂质可能也要进行鉴定。
原料药中潜在杂质包括从起始物料到原料药的合成路线中的起始物料、试剂和中间体。
应对杂质残留到原料药的风险进行评估，包括起始原料和中间体中已鉴定的杂质，以及合理预测从起始物料到原料药的合成路线中生产的副产物。由于有些杂质被带入原料药的风险可以忽略（例如，很长的合成路线中较早的合成步骤中的杂质），可以提交其在合成中基于风险的论证。之后，应评估此类杂质潜在致突变性。
对于在原料药合成路线后期才引入的起始物料（以及如果起始物料的合成路线已知），应评估起始物料合成的最终步骤中的潜在致突变杂质。
结构已知的实际杂质和如上所述的潜在杂质应按6节所述评估其潜在致突变性。
5.2降解产物
原料药中实际的降解产物包括那些原料药在拟定的长期储存条件以及内包装和外包装储存期间观察到的超过ICHQ3A 报告限度的杂质。制剂中实际的降解产物包括那些制剂在拟定的长期储存条件以及内包装和外包装储存期间观察到的高于ICH Q3B 报告限度的杂质，还包括那些在制剂生产过程中产生的杂质。如果实际降解产物水平超过ICH Q3A/Q3B 所述的鉴定限度，则应进行鉴定。有些低于鉴定限度的降解产物可能也要进行鉴定。
原料药和制剂中潜在的降解产物是在长期存贮条件下预期可能会形成的杂质。潜在的降解产物包括那些在加速稳定性研究（例如，40℃/75%相对湿度 6 个月）和ICH Q1B（参考文献5）所述的验证性光稳定性研究期间形成且高于ICH Q 3A / Q3B 鉴定限度的杂质，但这些杂质在原料药和制剂内包装长期储存条件下尚未确定。
相关降解途径的知识，例如来自于化学降解原理、相关的强制降解试验和研发期间的稳定性研究，可用来指导选择需评估致突变性的潜在降解产物。
实际的和潜在的降解产物可能存在于最终的原料药或药物产品中，并且在结构已知的情况下，应评估第6节所述的致突变潜能。
5.3临床研发的注意事项
预计 5.1和 5.2节所述的杂质评估会用于临床研发中的产品。然而，众所周知此时可获得的信息是有限的。例如，在临床研发期间，可能无法获得长期稳定性研究和光照稳定性试验的信息，因此关于潜在降解产物的信息可能很有限。此外，ICH Q3A/Q3B 中列出的限度不适用于临床阶段的产品，因此被鉴定出的杂质较少。
6.危害评估要素
危害评估包括对实际和潜在杂质的初步分析，通过数据库和文献检索致癌性和细菌致突变性数据，根据表 1 将其归为 1 类，2 类或5 类。如果无法获得这样的分类数据，则应进行构-效关系（SAR）评估，着重关注细菌突变的预测。这可能会使得该杂质被归为 3 类、4 类或 5 类。
表1：根据致突变潜力和致癌潜力对杂质进行分类及其控制措施
显示阳性）
应采用（定量）构-效关系((Q)SAR)方法进行计算机模拟的毒性评估，以预测细菌突变试验（参考文献6）的结果。应采用两个相补的(Q)SAR 预测方法。一个方法应基于专家规则，另一个方法应基于统计学。(Q)SAR 模型采用的这些预测方法应遵循经济合作与发展组织（OECD）制订的一般的验证原则。
如果两个互补的(Q)SAR 方法（专家规则和统计学）均没有警示结构，则足以得出结论该杂质没有致突变忧虑，不建议做进一步的检测（表 1 中的 5 类）。
如有必要，所有基于计算机系统的分析结果均可以使用专家知识进行回顾，以对所有预测的阳性、阴性、相互矛盾或无法得出结论之间的相关性提供额外的支持性证据，从而支持最终结论的合理性。
相关的警示结构（表1中的3类）可以采用充分的控制措施，或者对该杂质单独进行细菌突变试验。如果规范的细菌突变试验（注释2）的结果为阴性，则可以推翻任何基于结构的担忧，不建议进行进一步的遗传毒性评估（注释1）。这些杂质应视为非致突变杂质（表1 中的 5 类）。如果细菌突变试验为阳性，则需要进行进一步的危害评估和/或采取控制措施（表 1 中的 2 类）。例如，如果杂质的水平不能被控制在一个适当的可接受水平，则建议进行体内基因突变试验，以了解在体内环境下细菌突变试验结果的相关性。其它体内遗传毒性试验的选择应根据杂质的反应机理和预期标靶组织暴露（注释3）的知识进行科学论述。体内研究的设计应考虑已有的ICH 遗传毒性指南。适当的体内测试结果可以用于支持设定特定化合物杂质的限度。
与原料药或相关化合物具有相似的警示结构（例如，在相同位置和相同化学环境下具有相同警示结构）的杂质，如其细菌突变试验为阴性，则可视为非致突变杂质（表 1 中的 4 类）。
7.风险表征
作为6节所述的危害评估的结果，每个杂质会按表1 中的 5 个类别进行分类。本节介绍了1、2、3 类杂质用于推导可接受摄入量的风险表征原则。
7.1 基于TTC 的可接受摄入量
基于TTC 计算可接受摄入量时，一个致突变杂质每天每人摄入1.5μg 时其风险被认为是可以忽略的（寿命暴露情况下理论患癌风险小于十万分之一），这一值可以通用于大部分药物，作为可接受控制限度的默认值。该方法一般用于长期治疗用（>10 年）药物中存在的且无致癌数据（2 类和 3 类）的致突变杂质。
7.2基于化合物特异性风险评估的可接受摄入量
7.2.1具有阳性致癌性数据的致突变杂质
如果具备足够的致癌性数据，则应采用化合物特异性风险评估来推导可接受摄入量，而非基于TTC 的可接受摄入量。对于已知的致突变致癌物，化合物特异性的可接受摄入量可以根据致癌性和线性外推法来计算，这是一种默认的方法。或者，可以采用其它已建立的风险评估方法，例如，国际公认机构采用的方法，来计算可接受摄入量或使用监管当局已公布的值（注释4）。
对化合物特异性的可接受摄入量的计算值可以根据实际情况，应用于与已知的致癌化合物类别（按类别制订的可接受摄入量）在化学结构上相似的杂质，但前提是必须证明该杂质与已知化合物化学结构相似的合理性及具备支持性数据（注释5）。
7.2.2有实际阈值证据的致突变杂质
大家现在越来越认识到，存在一些机理致使对剂量的反应为非呈线性或有实际阈值，这不仅针对与非DNA 靶标产生作用的化合物，还涉及与DNA 反应性化合物，这些物质的作用可能会被调节，例如，在与DNA 接触前快速解毒，或有效修复已产生的损伤。可以获得相关数据的情况下，该类化合物的监管方法是通过识别未观察到作用水平（NOEL）和使用不确定性因子（参见ICH Q3C （R5），参考文献7）来计算允许日暴露量（PDE）。
特定化合物风险评估所推导的可接受摄入量（7.2节）可以按以下章节（7.3.1和7.3.2）中定义的相同比例的更短使用时间进行调整，或应限制在不超过0.5%，取较低者。例如，如果寿命暴露时化合物特异性可接受摄入量为15μg/天，短于寿命暴露的限度（表2）可以增加至100μg（>1-10 年治疗时长），200μg（>1-12 个月）或1200μg（<1 个月）。但是，对于一个具有最大日服用剂量的药物，例如，100mg，则<1 个月时长的每日可接受摄入量应限制在0.5%（500μg），而不是1200μg。
7.3 与LTL 暴露相关的可接受摄入量
已知致癌物的标准风险评估假定癌症风险随着给药量的增加而增加。因此，寿命以低剂量持续给药的癌症风险与相同的累积暴露量在较短给药时长内平均给药的癌症风险等同。
基于TTC 的可接受摄入量 1.5μg/天被视为具有保护作用的寿命每日暴露量。药品中致突变杂质的LTL 暴露量可理解为可接受的累积寿命剂量（1.5μg/ 天X25,550 天=38.3mg）在LTL 暴露期间均匀分配在总暴露天数中。这就允许致突变杂质的日摄入量可以高于寿命暴露时的情况，而其风险水平仍与每日或非每日治疗方案相持平。表2 是从上述概念推导而得的数据，说明了临床研发阶段和上市阶段LTL至寿命暴露时的可接受摄入量。间歇给药时，则每日可接受摄入量应根据给药总天数计算，而不是给药的时间间隔，给药天数与表 2 中相关的给药时长分类有关。例如，2年期间每周服用一次的药物（即104 个给药天数），其可接受摄入剂量为每剂20μg。
表2: 单个杂质的可接受摄入量
7.3.1 临床研发阶段
使用上述LTL 概念，为临床研发阶段长达1 个月、1-12 个月以及超过1 年直至完成III 期临床试验的有限治疗期限推荐了致突变杂质的可接受摄入量（表2）。这些调整后的可接受摄入量在受益还未确定的早期临床开发中保持了10-6的风险水平，在后期研发阶段保持了10-5的风险水平（注释6）。
对于给药时间长达14 天的I 期临床试验，慎用致突变杂质调整后的可接受摄入量，可采用替代方法。该替代方法仅要求应将已知致突变致癌杂质（1 类）和潜在致癌性未知的已知致突变杂质（2 类），以及被列入关注化学类别中的杂质控制在7节所述的可接受限度内（参见8节）。所有其它杂质按非致突变杂质控制，其中包括含有警示结构（3 类）的杂质，仅仅只是含有警示结构无需启动对这一有限的I 期持续时间进行评估。
7.3.2已上市药品
对于已上市药品，表 2 中具有可接受摄入量的持续治疗时间类别适用于大多数患者的预期暴露持续时间。所拟定的摄入量以及应用这些摄入量的各种情景均在注释7 表 4 中进行了说明。在某些情况下，患者中一部分人群可能会延长治疗时长，超出上市药物分类的上限（例如，可接受摄入量为10μg/天的药物治疗超出10 年，可能会接受15 年治疗）。与绝大部分治疗10年的患者的整体计算风险相比，可以忽略延长治疗时长所导致的风险增加（如上例，患癌风险增加至1.5/100000）。
7.4多个致突变杂质的可接受摄入量
根据TTC 的可接受摄入量适用于每个单杂。如果有两个 2 类或 3 类杂质，应制定各自限度。对于临床研发和已上市的药品，如果原料药质量标准中有 3 个或更多 2 类或 3 类杂质，应按照表 3 所述制定总致突变杂质限度。
对于复方药品，每种活性成分应单独规定。
表3: 多个杂质的可接受总摄入量
只有原料药质量标准中特定的2 类和 3 类杂质应计入总限度。具有化合物特异性或化合物类别相关的可接受摄入限度的杂质（1 类），不应计入 2 类和 3 类杂质的总限度。另外，制剂中形成的降解产物应单独控制，不应计入总限度。
7.5特例和方法灵活性
?如果人们从其它来源获得的杂质暴露量更大，如食品或内源性代谢物（例如甲醛），则更高的可接受摄入量可能是合理的。
?在严重疾病、预期寿命缩短、迟发的慢性疾病或治疗选择有限的例外情况下，可根据各例外情况使用合理地可接受摄入量。
?致突变物中某些结构的化合物具有高效致癌性（“关注队列”），即黄曲霉毒素类、N-亚硝基化合物、以及烷基-氧化偶氮结构。如果药物中存在这些化合物杂质,则这些高效致癌物的可
接受摄入量可能会显著低于本指南中定义的可接受摄入量。尽管仍可以使用本指南的原则，但是，通常应针对各案情况开发研究方法，例如，使用密切相关的结构的致癌数据（如果
有），来证明药品研发和已上市药品中可接受摄入量的合理性。
上述7节所述的风险方法可用于所有给药途径，且通常不需要对可接受摄入量进行修正。需加以考虑的例外情况可能包括用数据证明给药途径特异性担忧，这些情况应逐案评估。由于所采用的风险方法较为保守，因此上述这些方法适用于所有患者人群。
8.控制
控制策略是一套基于对当前产品和对工艺的理解而制定的有计划的控制方法，用以保证工艺性能和产品质量（ICH Q10，参考文献8）。一个控制策略可以包括，但不限于以下内容：
?物料属性控制（包括原料、起始物料、中间体、试剂、溶剂、内包材）；
?设施和设备操作条件；
?生产工艺设计中隐含的控制；
?过程控制（包括过程检测和工艺参数）；
?原料药和制剂的控制（例如，放行检测）。
如果一个杂质已经定性为表 1 中的1、2 或 3 类杂质，则一定要开发一种控制策略来保证该杂质在原料药和制剂中的水平低于可接受限度。全面理解原料药生产工艺相关的化学信息、制剂生产工艺以及原料药和制剂的整体稳定性，是建立适当的控制策略的基础。建立制剂中致突变杂质的控制策略与ICH Q9（参考文献9）中确定的风险管理过程相一致。基于对产品和工艺的理解以及风险管理原则的使用，控制策略将工艺设计和控制与合适的分析测试相结合，为控制向上游转移提供机会同时最大限度减少终产品测试的需要。
8.1工艺相关杂质的控制
开发原料药控制策略有 4 种可能的方法：
方法 1
在原料药质量标准中包含对杂质的检测，使用合适的分析规程将可接受标准设定在可接受限度以内。
方法 1 的控制方式可以根据ICH Q6A（参考文献10）进行定期确认性检测。如果在至少 6 个连续的中试批次或3个连续的生产批次中，原料药中的致突变杂质水平均低于可接受限度的30%，则可证明定期确认性检测是合理的。如果不满足该条件，则建议作为原料药质量标准中的常规检测项。更多考虑事项请参见8.3节。
方法 2
在原料、起始物料或中间体的质量标准中包含对杂质的检测，或作为过程控制，使用合适的分析规程将可接受标准设定在可接受限度以内。
方法 3
在原料、起始物料或中间体的质量标准中包含对杂质的检测，或作为过程控制，制订一个高于原料药中杂质可接受限度的可接受标准，使用合适的分析规程并结合对杂质去向和被清除的理解，及相关的工艺控制，保证原料药中的杂质的水平低于可接受限度而无需在后续工艺中再行检测。
对实验室规模试验（鼓励采用加样试验）的数据进行综述，必要时可以采用中试规模或商业规模批次数据加以佐证，如果原料药中杂质水平低于可接受限度的30%，则采用该方法是合适的。见案例1和2。可以用其他方法来证明选项3。
方法 4
了解工艺参数及其对残留杂质水平（包括去向和清除知识）的影响，确信原料药中的杂质水平将会低于可接受限度，则建议不需要对该杂质进行分析检测（即，不需要将杂质列在任何质量标准中）。
如果了解对致突变杂质水平有影响的工艺化学特性和工艺参数，并确认最终原料药中杂质残留量高于可接受限度的风险可忽略，则控制策略可以用过程控制代替分析检测。在很多情况下，只需要根据科学原理对控制方法进行论述即可。可以使用科学风险评估要素来论证方法4。可以根据对杂质去向和消除产生影响的理化特性和工艺因素进行风险评估，包括化学反应性、溶解性、挥发性、电离度和任何设计去除杂质的物理过程步骤。该风险评估的结果可表示为杂质被工艺清除的预估清除因子（参考文献11）。
方法 4 特别适用于那些自身不稳定的杂质（例如，与水迅速完全反应的二氯亚砜），或那些在合成路线早期引入并可被有效清除的杂质。
有些情况下，如果已经知道杂质如何形成或者是合成后期引入的杂质，也可以采用方法4；但此时，需要提交工艺特异性数据来论述该方法的合理性。
8.2控制方法的注意事项
与采用方法3 时一样，采用方法 4 时，如果仅仅根据科学原理来进行论述是不够充分的，强烈建议提交分析数据来支持控制方法。提交的资料可以适当包括在下游化学反应中导致杂质结构改变的信息(去向)；中试批次的分析数据；某些情况下，可以包括实验室规模中有意加入杂质的研究（加标研究）。在这些情况下，一定要证明该杂质的去向/清除是可靠的，能够持续地保证最终原料药中杂质残留量超过可接受限度的可能性可以忽略。如果清除因子是根据研发数据得到的，一定要处理预期的规模依赖性或非依赖性。如果用于研发阶段的小规模模型被认为不能代表商业规模，则一般需要确认中试规模和/或初始商业批次中所用的控制是适当的。清除因子（由实验室或中试规模数据计算而来）数量级、杂质引入点和对下游工艺清除点的理解，决定了是否需要中试/商业批次数据。
如果方法 3 和 4 不能得到合理论证，则在原料、起始物料或中间体的质量标准中应包括对杂质的检测，或作为过程控制（方法2），达到可接受限度或在原料药的质量标准中应包括对杂质的检测，达到可接受限度（方法1）。对于在较后合成步骤中引入的杂质，除另有论述外，一般应采用方法 1 的控制方法。
如果致突变杂质的水平低于可接受限度，则不必应用“最低合理可行”（ALARP）原则。同样地，也不必证明已摸索过可替代的合成路线。
如果通过控制仍不能将致突变杂质的水平降低至可接受限度以内，而杂质是“最低合理可行”水平，则可以根据风险/利益分析来论证更高限度的合理性。
8.3定期检测的注意事项
上述这些方法中包括了建议在质量标准中要包含检测的情形，但可能不必对每批均进行放行常规检测。这种方法在ICH Q6A 中被称为定期检测或间隔检测，也可以称为定期确认性检测。如果能证明杂质形成/引入之后的工艺能清除杂质，则该方法也是恰当的。要注意的是，是否允许使用定期确认性测试取决于是否使用控制状态下的工艺（即，生产出的产品质量能持续满足质量标准，符合已建立的合适的设施、设备、工艺和操作控制方案）。如果检测结果显示，致突变杂质的水平不符合定期检测所建立的可接受标准，则药品生产商要立即实施全检（即，对每个批次的指定属性进行检测）直至最终找出失败的原因、实施纠正措施，并且该工艺再次被记录工艺为处于受控状态。正如ICH Q6A 中所注，如果定期确认性检测失败，应通知监管当局，以评估未经检测的放行批次的风险/利益。
8.4降解产物的控制
对于已经定性为具有致突变的潜在降解杂质，一定要了解该降解途径与原料药和制剂的生产工艺和/或其拟定的包装和存贮条件的相关性。建议采用一个设计良好的加速稳定性试验(例如，40°C/75%相对湿度，6 个月)，采用拟定的包装形式，采用适当的分析方法来确定潜在降解产物的相关性。也可以采用一个设计良好的动力学等效的时间更短温度更高的稳定性试验，使用拟定的商业包装，在开始长期稳定性试验前确定降解途径的相关性。对于那些根据潜在降解途径的知识了解到的但在产品中尚未观察到的潜在降解产物，这类研究对了解其相关性特别有用。
根据这些加速试验的结果，如果预计降解产物将在拟定包装和存贮条件下形成，且接近可接受限度水平，则应采取措施控制降解产物的形成。这种情况下，除另有论述外，应监控拟定存贮条件下（拟定的商业包装）长期主要稳定性试验中原料药或制剂中的降解。该致突变降解产物的质量标准限度是否恰当通常取决于这些稳定性研究的结果。
如果预计制剂研发和包装设计的选择不能将致突变降解产物水平控制在可接受限度以下，而杂质是“最低合理可行”水平，则可以根据风险/利益分析来论证更高限度的合理性。
8.5生命周期管理
本部分适用于本指南颁发后批准的药品。
ICH Q10 所述的质量体系要素和管理职责意在鼓励在生命周期各阶段使用基于科学和基于风险的方法，从而促进整个产品生命周期中的持续改进。产品和工艺知识应从研发阶段开始进行管理，贯穿产品的整个商业化生命，直至产品退市。
对原料药和制剂的生产工艺的研发和改进一般会在其生命周期中持续进行。生产工艺性能，包括控制策略的有效性，应定期进行评估。从商业化生产中所获得的知识可用于进一步提高对工艺的理解和工艺性能，以及调整控制策略。
对生产工艺有任何拟定的变更时，均应评估其对原料药和制剂质量产生的影响。该评估应根据对生产工艺的理解来进行，并应明确是否需要适当的检测来分析拟定变更的影响。另外，分析规程的改进可能会导致杂质的结构鉴定。在这种情况下，新结构需要按本指南的要求进行致突变评估。
药品整个生命周期中，当工艺发生了计划内或计划外变更时，一定要重新评估是否需检测。这适用于对可接受限度没有常规监控的情况(方法 3 或方法4 的控制方法)，或采用定期检测而不是每批检测的情况。应在适当的生产工艺点进行该项检测。
在某些情况下，使用统计的工艺控制和工艺测量的趋势分析以获得持续适应性和工艺能力，从而对杂质进行充分控制。即便不对杂质进行常规监控(例如方法4)，统计学工艺控制也可以基于对杂质形成或清除有影响的工艺参数进行。
所有的变更都是质量体系(ICH Q10)的一部分，都应遵循内部变更管理流程。对已批准的申报资料中的内容进行变更应根据当地法规和指南的要求向监管当局进行报告。
8.6临床研发的注意事项
众所周知，人们对产品和工艺的认识在研发过程中不断增长，因此，在临床研发试验阶段用于支持控制策略的数据肯定会比上市注册阶段少。在此鼓励根据工艺的化学基础来建立一种基于风险的方法，优先分析最可能出现在原料药或制剂中的杂质。如果一种杂质出现的可能性很低，分析数据可能无法用于支持早期临床研发，但在类似情形下，分析数据可以用于支持上市申请的控制方法。人们还认识到，商业化处方是在临床研发后期才设计的，因此在早期阶段与制剂降解产物相关的研究会比较有限。
9.文件
本指南中与申报相关的信息应在以下阶段提供:
9.1临床试验申请
?预期在整个临床研发期间，致突变性评估的结构数量、分析数据的收集均会不断增加。
?对于14 天或更短的I 期临床研究，要包括努力降低致突变杂质的风险所采取的措施的描述，重点关注 1 类和 2 类杂质及7节所列的关注队列中杂质。对于长于14 天的 1 期
临床试验和2a 期临床试验，还应包括已有分析控制措施的 3 类杂质。
?对于2b 期和3期临床研究试验，要包括一份(Q)SAR 评估的杂质清单，并描述所有 1 类、
2 类和
3 类实际存在的和潜在的杂质及其控制计划。应描述评估所用的计算机(Q)SAR 系
统。应报告实际杂质的细菌突变试验的结果。
?如8.6节所述，对于存在可能性很低的潜在杂质，可以采用化学证据替代分析数据。
9.2通用技术文件(上市申请)
?如果根据本指南对实际和潜在的工艺相关杂质和降解产物实施了评估，则应提供致突变杂质分类及其理由：
o 应包括所使用的计算机(Q)SAR 系统的结果和描述，并酌情提交支持性信息以得出4 类和 5 类杂质的总体结论。
o 如果对杂质进行了细菌突变试验，应提交杂质细菌突变试验的研究报告。
?应提交拟定的质量标准和控制方法的合理性说明(例如，ICH Q11例5b，参考文献12)。例如，该信息可以包括可接受摄入量，相关常规监测的位置和灵敏度。对于方法3和方法4的控制方法，一定要总结清除因子和提供控制的因素的识别(例如，工艺步骤、洗液中的溶解度等)方面的知识。
注解
注 1 ICH M7 指南中的建议提供了一种最先进的方法来评估杂质诱发点突变的可能性，保证这样的杂质被控制在安全水平，以至于在低于或高于ICH Q3A/B 质控限度时无需进一步界定致突变可能性。该方法包括最初使用（Q）SAR工具来预测细菌致突变性。如果在长期给药时杂质日摄入量超出1mg，则可考虑ICHQ3A/Q3B中推荐的潜在遗传毒性评估。如果杂质日摄入量少于1mg，无论其他质控限度如何，无需进行进一步的遗传毒性检测。
注 2 为了评估杂质的潜在致突变性，可以根据ICH S2(R1)和OECD 471 指南（参考文献13 和14）制订全面充分的方案进行单一细菌的致突变试验。试验应符合GLP 规范；但是，没有完全符合GLP 并不一定意味着数据不能用于支持临床试验和上市许可。这些偏差应在研究报告中进行描述。例如，试验样品的制备和分析可能不符合GLP 规范要求。在某些情况下，检测用细菌菌株可能会被限制在那些经证明对已鉴别警示敏感的菌株。对于不易分离或合成的杂质，或化合物数量有限的杂质，可能无法达到目前试验指南推荐的符合ICH 要求的细菌突变试验的最高试验浓度。这种情况下，细菌突变试验可以采用小型化测试的方式，并证实该方式与符合ICH 的测试高度一致，以确保在较高的浓度下进行测试也合理。
注 3 研究体外致突变物（细菌致突变性为阳性）的体内相关性的试验
注 4 从TD50线性外推的示例
可以根据啮齿动物致癌效价数据，例如TD50值（导致50%肿瘤发生率的给药剂量相当于患癌风险可能性水平为1:2），来计算化合物特异性的可接受摄入量。通过简单地将TD50值除以50000 来线性外推至十万分之一的发生率（即，寿命风险水平）。该方法类似于TTC 使用的推导方法。
计算举例：环氧乙烷
根据致癌效价数据库，环氧乙烷的TD50为21.3mg/kg 体重/天（大鼠）和63.7mg/kg体重/天（小鼠）。在计算可接受摄入量时，采用了较低的大鼠值（即更保守）。
为推导十万分之一致癌率的剂量，将该值除以50000：
21.3mg/kg÷50000 = 0.42 μg/kg.
推导人类每日总摄入量：
0.42 μg/kg/日×50kg 体重= 21.3μg/人/天。
因此，寿命每日服用21.3μg 环氧乙烷对应十万分之一的理论致癌风险，也是环氧乙烷在原料药中作为杂质存在时的可接受摄入值。
药物分析复习题
药物的专属鉴别试验是证实某一种药物的依据，它是根据每一种药物化学结构的差异及其所引起的物理化学特性不同，选用某些特有的灵敏的定性反应，来鉴别药物的真伪。 氧瓶燃烧法系将有机药物放入充满氧气的密闭的燃烧瓶中进行燃烧，并将燃烧所产生的欲测物质吸收于适当的吸收液中，然后根据欲测物质的性质，采用适宜的分析方法进行鉴别、检查或测定含卤素有机药物或含硫、氮、硒等其它元素的有机药物。 比旋度——偏振光透过长1d m 并每1ml含有旋光性物质1g的溶液，在一定的波长与温度下测得的旋光度称之。（符号[ ]） 准确度是指用特定方法测得的生物样品浓度与真实浓度的接近程度，可用相对回收率表示，即采用“回收率”或“加样回收率”得到的药物自样品中回收率。 微生物检定法─以抗生素对微生物的杀伤或抑制程度为指标来衡量抗生素效价的一种方法。其测定方法有稀释法、比浊法、管碟琼脂扩散法生物药物：利用生物体、生物组织或器官等成分，综合运用生物学、生物化学、微生物学、免疫学、物理化学和药学的原理与方法制得的一大类药物。 基因工程药物：先确定对某种疾病具有预防和治疗作用的蛋白质，然后将控制该蛋白质合成过程的基因进行分离、纯化或人工合成，利用重组DNA 技术加以改造，最后将该基因导入可以大量生产的受体细胞中不断繁殖或表达，并能进行大规模生产具有预防和治疗这种疾病的蛋白质，通过这种方法生产的药物称为基因工程药物。 效价测定：采用国际或国家参考品，或经国家检定机构认可的参考品，以体内或体外法测定其生物学活性，并标明其活性单位。 电泳法是指带电微粒如蛋白质、核苷酸、其他微粒分子或离子在电场的作用下，向其对应的电极方向按各自的速度泳动而使组分分离，再进行检测或计算百分含量的方法。 中药指纹图谱中药材或中药制剂经适当处理后，采用一定的分析手段，得到的能够标定该中药材或中药制剂特性的共有峰的图谱。
基因多态性
基因多态性 多态性（polymorphism）是指在一个生物群体中，同时和经常存在两种或多种不连续的变异型或基因型（genotype）或等位基因（allele），亦称遗传多态性（genetic polymorphism）或基因多态性。从本质上来讲，多态性的产生在于基因水平上的变异，一般发生在基因序列中不编码蛋白的区域和没有重要调节功能的区域。对于一个体而言，基因多态性碱基顺序终生不变，并按孟德尔规律世代相传。 基因多态性分类生物群体基因多态性现象十分普遍，其中，人类基因的结构、表达和功能，研究比较深入。人类基因多态性既来源于基因组中重复序列拷贝数的不同，也来源于单拷贝序列的变异，以及双等位基因的转换或替换。按引起关注和研究的先后，通常分为3大类：DNA片段长度多态性、DNA重复序列多态性、单核苷酸多态性。 DNA片段长度多态性DNA片段长度多态性（FLP），即由于单个碱基的缺失、重复和插入所引起限制性内切酶位点的变化，而导致DNA片段长度的变化。又称限制性片段长度多态性，这是一类比较普遍的多态性。 DNA重复序列多态性DNA重复序列的多态性（RSP），特别是短串联重复序列，如小卫星DNA和微卫星DNA，主要表现于重复序列拷贝数的变异。小卫星（minisatellite）DNA由15~65bp的基本单位串联而成，总长通常不超过20kb，重复次数在人群中是高度变异的。这种可变数目串联重复序列（VNTR）决定了小卫星DNA长度的多态性。微卫星（microsatellite）DNA 的基本序列只有1~8bp，而且通常只重复10~60次。 单核苷酸多态性单核苷酸多态性（SNP），即散在的单个碱基的不同，包括单个碱基的缺失和插入，但更多的是单个碱基的置换，在CG序列上频繁出现。这是目前倍受关注的一类多态性。 SNP通常是一种双等位基因的（biallelic），或二态的变异。SNP大多数为转换，作为一种碱基的替换，在基因组中数量巨大，分布频密，而且其检测易于自动化和批量化，因而被认为是新一代的遗传标记。 遗传背景知识遗传和变异各种生物都能通过生殖产生子代，子代和亲代之间，不论在形态构造或生理功能的特点上都很相似，这种现象称为遗传（heredity）。但是，亲代和子代之间，子代的各个体之间不会完全相同，总会有所差异，这种现象叫变异（variation）。遗传和变异是生命的特征。遗传和变异的现象是多样而复杂的，正因为如此，才导致生物界的多种多样性。
人基因治疗研究和制剂质量控制技术指导原则
人基因治疗研究和制剂质量控制技术指导原则 一、引言 基因治疗是指改变细胞遗传物质为基础的医学治疗。目前仅限于体细胞。 基因治疗的技术和方式日趋多样性。按基因导入的形式，分为体外基因导入（exvivo）及体内基因导入（invivo）两种形式。前者是在体外将基因导入人细胞，然后将该细胞注入人体。其制品形式是外源基因转化的细胞，适合在具有专门技术人才和GMP条件的医疗单位进行。后者则是将基因通过适当的导入系统直接导入人体，包括病毒的与非病毒的方法。其制品形式是基因工程技术改造的病毒或者是重组DNA、或者是DNA复（混）合物。基因治疗制剂种类较多，因此，本指导原则不可能用一个模式来概括，只能提出一个共同的原则，具体的方案应根据这些原则，确定研究技术路线。其基本原则：一是必须确保安全与有效，要充分估计可能遇到的风险，并提出相应的质控要求；二是要促进基因治疗的研究，并加强创新。对一些新的治疗技术路线的相应质控要求，可有一定的灵活性，应注意到基因治疗本身的特点以及它与经典的化学合成药物或基因工程药物的差别。目前，一些基因治疗研究相对比较成熟，而一些则不够完善，更加要求研究者在使用该技术指导原则时不可生搬硬套。为此，研究者应加强咨询和论证，提出一个科学可行的研究方案，最终获得确保安全有效的基因治疗制品。 在向国家药品监督管理局申报临床试验时，除须按本指导原则中"研究内容和制品质量控制"准备材料外，同时需提供下述材料： （1）国内外研究现状和进展（综述）。包括： 1．所用基因的研究现状和进展； 2．所用载体的研究现状和进展； 3．所用基因导入系统和方法的研究现状和进展； 4．该研究或制品相关的体外有效性实验资料； 5．该研究或制品相关的动物试验安全性和有效性资料； 6．该研究或制品相关的临床试验安全性和有效性资料； 7．该研究或制品的生产工艺现状； 8．该研究或制品的质量控制现状；
生物药物安全性评价
生物药物安全性评价 第一节生物类药物概述 一、生物类药物的概念和种类 ?生物类药物（biopharmaceutics或biopharmaceuticals）是利用生物体、生物组织或器官等成分，综合运用生物学、生物化学等学科的原理与方法制得的天然生物活性物质以及人工合成或半合成的天然物质类似物。 ?生物药物主要包括生化药物（biochemical drugs）生物技术药物 （bio-technology drugs)、和生物制品（biological products)等。 1、生化药物：一般是系指从动物、植物及微生物提取的，亦可用生物-化学半合成，或用现代生物技术制得的生命基本物质，如氨基酸、多肽、蛋白质、酶、辅酶、多糖、核苷酸、脂和生物胺等，以及其衍生物、降解物及大分子的结构修饰物等。 2、生物技术药物：是指生物来源的和使用生物工程技术制造的药物，包括多肽、蛋白质及其衍生物或由其组成的产品，如细胞因子、生长因子、单克隆抗体、重组DNA 蛋白疫苗及人组织提取的内源性蛋白等。 3、生物制品：是根据免疫学原理，用微生物（细菌、病毒、立克次氏体以及微生物的毒素等）、动物的血液、组织制成的，用以预防、治疗以及诊断人或动物传染病的一类药品。 包括： ★治疗用生物制品：抗体、DNA重组技术制品等。 ★预防用生物制品：疫苗。 ★诊断用生物制品：各种抗原抗体诊断液等。 （一）治疗用生物制品 1.未在国内外上市销售的生物制品。 2.单克隆抗体。 3.基因治疗、体细胞治疗及其制品。 4.变态反应原制品。 5.由人的、动物的组织或者体液提取的，或者通过发酵制备的具有生物活性的多组份制品。
基因工程药物
基因工程药物 周长征 第一部分概述 一、基因工程药物 （一）基因工程药物的概念 基因工程药物是以基因组学研究中发现的功能性基因或基因的产物为起始材料，通过生物学、分子生物学或生物化学、生物工程等相应技术制成的、并以相应分析技术控制中间产物和成品质量的生物活性物质产品，临床上可用于某些疾病的诊断和治疗。基因药物类型广泛，包括重组蛋白质药物、人源化单克隆抗体、基因治疗药物、重组蛋白质疫苗、核酸药物等10多种类型。 生产基因工程药物的基本方法是：将目的基因用DNA重组的方法连接在载体上，然后将载体导入靶细胞（微生物、哺乳动物细胞或人体组织靶细胞），使目的基因在靶细胞中得到表达，最后将表达的目的蛋白质提纯及做成制剂，从而成为蛋白类药物或疫苗。若目的基因直接在人体组织靶细胞内表达，就称为基因治疗。 例如，乙肝表面抗原（HBSAg）的产生也受DNA 调控。利用基因剪切技术，用一种“基因剪刀”将调控HBSAg的那段DNA剪裁下来，装到一个表达载体中（所谓表达载体，是因为它可以把这段DNA的功能发挥出来）再把这种表达载体转移到受体细胞内，如大肠杆菌或酵母菌等；最后再通过这些大肠杆菌或酵母菌的快速繁殖，生产出大量我们所需要的HBSAg（乙肝疫苗）。把一定量的HBSAg注射入人体，就使机体产生对HBV抗衡的抗体。机体依靠这种抗体，可以清除入侵机体内的HBV。过去，乙肝疫苗的来源，主要是从HBV 携带者的血液中分离出来的HBSAg，这种血液是不安全的，可能混有其他病原体的污染。此外，血液来源也是极有限的，使乙肝疫苗的供应犹如杯水车薪，远不能满足全国的需要。基因工程疫苗解决了这一难题。 干扰素具有广谱抗病毒的效能，是一种治疗乙肝的有效药物，国际上批准唯一一种治疗丙型病毒性肝炎的药物。通常情况下人体内干扰素基因处于休眠状态，血中一般检测不到。只有在发生病毒感染或受到干扰素诱导物的诱导时，人体内的干扰素基因才会产生干扰素，但其数量微乎其微。即使经过诱导，从人血中提取1mg 干扰素，需要人血8000ml，其成本高得惊人。获取1磅（453g）纯干扰素，其成本高达200亿美元。1980年后，采用基因工程进行生产，其基本原理及操作流程与乙肝疫苗十分类似。现在要获取1磅纯干扰素，其成本不到1亿美元。 （二）基因工程药物的发展 1973年，Cohen等人首次将带有Tet r基因和链霉素抗性基因（Str r）的两种大肠杆菌质粒成功地进行了重组，获得了可以复制并只有双亲质粒遗传信息的重组质粒，拉开了基因工程研究的序幕。1974年他们对具有Amp r和红霉素抗性基因（Emp r）的金黄色葡萄球菌质粒
基因工程药物发展的历史及启示
基因工程药物发展的历史及启示 吴岚晓1,郭坤元1,秦 煜2 (11第一军医大学珠江医院血液科,广东广州510282;21第一军医大学南方医院创伤骨科,广东广州510282) 摘要:基因工程诞生20余年,运用于医药行业,研制和开发基因工程药物,已取得长足进展。迄今为止,已有近100 个基因工程新药上市,并有数百种正在研制和开发中。可以预计,基因工程药物的发展具有无比强大的生命力。 就基因工程药物发展史进行概述,会从中得到许多启示。 关键词:基因工程;药物;科学;技术 中图分类号:R-02 文献标识码:A 文章编号:1002-0772(2002)12-0011-03 Developing History and the E nlightenment of G enetic E ngineering Drug W U L an-xiao,GUO Kun-yuan,QIN Y u (1.Depart ment of Hem atology,Zhujiang Hospital,First Military Medical U niversity,Guangz hou510282,China;2. N anf ang Hospital,First Military U niversity,Guangz hou510282,China) Abstract:G enetic engineering has made remarkable development in the area of drug production and research since it ap2 peared twenty years ago.More than100new geneitc engineering drugs have been used in clinic,and more drug-projects are undergoing.It can be predicted that genetic engineering drug will make more and more influence in people’s life.A perspective view about genetic engineering drug developing history was made in this article and some philosophic opinions inspired from it were discussed. K ey Words:genetic engineering;drug;science;technology 1 基因工程原理和技术 基因工程是在分子水平上人工改造生物遗传性,创造世间新的生物物种技术,亦称DNA重组或分子克隆,包括基因和载体的制备、切割和连接,重组DNA的转移、表达及产物分离等。基因的制备方法有,多聚酶链反应、互补文库、基因组文库、染色体DNA的酶切分离、酶合成法和化学合成法等,迄今为止,已制备人胰岛素、人尿激酶、人生长激素、人α-干扰素及生长因子等多种药物的基因。载体是能将外源性目的基因运输至宿主细胞的小分子DNA,目前大抵有细菌质粒、嗜菌体DNA及病毒DNA构建人工载体,如pBR322、Charon系列、Cos2 mid、反转录病毒、腺病毒及其相关病毒的DNA,此外,尚有酵母人工染色体DNA,及哺乳动物人工染色体DNA等。载体和含目的基因的DNA分别经限制性内切酶切割后,两者混合通过连接酶连接构成重组DNA,经转化、转导、转染、激光打孔、微注射或基因枪等技术,可转移至宿主内,获得基因工程细胞,后者经培养和表达,即可产生相应的基因工程药物。近年来还发现不用载体也不重组,将编码完整的DNA片段或mRNA直接注射内实现完全表达,表明非重组DNA和mRNA可被细胞直接吸收和表达,既简化了基因操作程序,也修正了基因工程基本概念,又促进了基因工程药物的发展,同时还为基因治疗提供了新理论和新途径。 2 基因工程药物发展的历史 应用基因工程技术,研制和开发的药物称为基因工程药物。它是通过重组DNA技术将治疗疾病的蛋白质、肽类激素、酶、核酸和其他药物基因转移至宿主细胞进行繁殖和表达,最终获得相应药物。包括蛋白质类生物大分子、初级代谢产物,如苯丙氨酸及丝氨酸等以及次生代谢产物抗生素等。自20世纪70年代初基因工程药物诞生以来,基因工程药物发展十分迅速。 ? 1 1 ? 医学与哲学2002年12月第23卷第12期总第259期
基因工程的利与弊
基因工程的利与弊 基因工程的原理:基因工程又称基因拼接技术和DNA重组技术，是以分子遗传学为理论基础，以分子生物学和微生物学的现代方法为手段，将不同来源的基因按预先设计的蓝图，在体外构建杂种DNA分子，然后导入活细胞，以改变生物原有的遗传特性、获得新品种、生产新产品。 操作方法是:将外源基因通过体外重组后导入受体细胞内，使这个基因能在受体细胞内复制、转录、翻译表达的操作。它是用人为的方法将所需要的某一供体生物的遗传物质——DNA大分子提取出来，在离体条件下用适当的工具酶进行切割后，把它与作为载体的DNA 分子连接起来，然后与载体一起导入某一更易生长、繁殖的受体细胞中，以让外源物质在其中“安家落户”，进行正常的复制和表达，从而获得新物种的一种崭新技术。它克服了远缘杂交的不亲和障碍。 例如:将大鼠的生长激素基因导入小鼠受精卵.首先在大鼠的体细胞中提取染色体,分离目标基因.用限制性核酸内切酶处理载体,再将载体与基因片段连接(这里用到DNA连接酶)。通过显微注射的方法将这些重组基因注入小鼠的受精卵内,最后让这些受精卵生长发育。结果小鼠生出几只带有大鼠生长激素基因的小鼠，这些小鼠的生长速度非常快，其个体是同窝其他小鼠的1.8倍，成为“巨型小鼠”。 基因工程中的载体常选取大肠杆菌的环状DNA，用到的工具酶有限制性内切酶、DNA 连接酶，其次还得用到DNA聚合酶。限制性核酸内切酶，用来切割目的基因和载体，主要是2型酶；DNA连接酶，用来连接目的基因和载体，有两类，连接平末端的和粘性末端的，若末端不相同连不起来的话，还得用DNA聚合酶来加片段，如加CCC-和GGG-，再用连接平末端的连接酶来连接。 将目的基因导入受体细胞的方法有： 植物常用的是农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法。农杆菌是普遍存在于土壤中的一种革兰氏阴性细菌，它能在自然条件下趋化性地感染大多数双子叶植物和裸子植物的受伤部位。农杆菌通过侵染植物伤口进入细胞后，可将T-DNA插入到植物基因组中，并且可以通过减数分裂稳定的遗传给后代。基因枪法基本原理是通过动力系统将带有基因的金属颗粒（金粒或钨粒），将DNA吸附在表面，以一定的速度射进植物细胞，从而实现稳定转化的
基 因 工 程 药 物 的 发 展 前 景
基因工程药物的发展前景 周先建2003年4月12日 一、概况 自从DNA重组技术于1972年诞生以来，作为现代生物技术核心的基因工程技术得到飞速的发展。1982年美国Lilly公司首先将重组胰岛素投放市场，标志着世界第一个基因工程药物的诞生。目前，世界各国都将基因工程及其逐渐加速的产业化进程视为国民经济的新增长点，展开了激烈的市场竞争。到1999年底为止，全球至少已有近 3000家生物工程公司在从事生物药品与基因产品研究与开发。据不完全统计，在欧美诸国，已经上市的基因工程药品接近一百种，大约还有超过300种以上的药物处于临床试验阶段，约2000种在研究开发中，形成了一个巨大的高新技术产业，产生了不可估量的社会效益和经济效益。 基因工程药物的定义：将目的基因用DNA重组的方法连接在载体上，然后将载体导入靶细胞（微生物、哺乳动物细胞或人体组织靶细胞），使目的基因在靶细胞中得到表达，最后将表达的目的蛋白质提纯及做成制剂，从而成为蛋白类药或疫苗。这就称为基因工程药物。若目的基因直接在人体组织靶细胞内表达，就成为基因治疗，但目前尚没有基于基因治疗技术的药物被正式批准。 基因工程药物因为其疗效好，副作用小,应用范围广泛而成为各国政府和企业投资研究开发的热点领域，大量的基因工程药品连续问世，年产值达数十亿美元。自1982年问世以来，基因工程药物成为制药行业的一支奇兵，每年平均有3-4个新药或疫苗问世，开发成功的约五十多个药品已广泛应用于治疗癌症、肝炎、发育不良、糖尿病、囊纤维变性和一些遗传病上，在很多领域特别是疑难病症上，起到了传统化学药物难以达到的作用。其原因在于，基因工程制药物的研究与开发多是以对疾病的分子水平上的有了解为基础的，往往会产生意想不到的高疗效。 基因工程制造药行业在近二十年中的飞速发展是以分子遗传、分子生物、分子病理、生物物理等基础学科的突破，以及基因工程、细胞工程、发酵工程、酶工程和蛋白质工程等基础工程学科的高速进展为后盾的。基因工程药物的开发时间为5-7年，比开发新化学单体（10-12年）要短一些，当然这也与各国政府的支持有关。据报道，开发活性蛋白生物创新药的成功率按开发的5个阶段大致是：临床前的成功率为15%，一期临床为27%，二期临床为40%，三期临床为80%，注册登记为90%，总体成功率大大高于化学药。适应症不断延伸也是蛋白类药物的一大特点。例如，rhG-CSF，91年上市时批的适应症是化疗并发中性粒细胞减少，到95年11月13日止，又增加了骨髓移植，严重慢性中性粒细胞减少及外周及外周血干细胞移植等适应症。因此，基因工程生物药物发展包括新品种和新适应症两个方面。 二、美国基因工程药物的发展前景
遗传病及遗传多态性
遗传病及遗传多态性 遗传病（hereditary disease）由基因突变或染色体畸变引起的疾病。已知的遗传病约有5000种，可分为3大类： 单基因遗传病由某一基因突变而引起，又分为：（1）常染色体显性遗传病，致病基因位于1～22号常染色体中的某一对上，且呈显性。如并指、多指、视网膜母细胞瘤、遗传性小脑性运动失调、先天性肌强直、多发性肠胃息肉、遗传性卟啉病等。（2）常染色体隐性遗传病，致病基因位于1～22号常染色体中的某一对上，且呈隐性。如白化病、先天性聋哑症、苯丙酮尿症、半乳糖血症、先天性鳞皮病等。（3）伴性遗传病，由性染色体上的基因发生突变而引起。包括X连锁隐性遗传病（致病基因位于X染色体上且呈隐性），如红绿色盲、血友病、先天性白内障、先天性丙种球蛋白缺乏症等；X连锁显性遗传病（致病基因位于X 染色体上且呈显性），如抗维生素D佝偻病、遗传性肾炎等。 多基因遗传病受多对微效基因控制并易受环境因素影响的遗传病。如唇裂、腭裂、先天性巨结肠、先天性幽门狭窄、早发性糖尿病、各种先天性心脏病等。 染色体异常病由先天性的染色体数目异常或结构异常而引起。又分为：（1）常染色体病，由1～22号常染色体发生畸变而引起。包括单体综合征，某一号染色体为单体，如21单体和22单体，这类病人极少见，大都于胎儿期死亡；三体综合征，某一号同源染色体不是两个而是三个，如21三体（又称先天愚型或唐氏综合征，核型为47XX或XY；＋21）、18三体（Edward氏综合征）和13三体（Patan氏综合征）等；部分三体综合征（由某一片段有三份而引起）如9p部分三体综合征（9号染色体的短臂有三份）；部分单体综合征（由某一常染色体的部分缺失而引起），如猫叫综合征（婴儿期哭声类似猫叫）就是5号染色体短臂部分缺失引起的。（2）性染色体病，由X和Y性染色体数目或结构变异而引起。如女性的特纳氏综合征（45，XO），男性的克氏综合征（47，XXY）等。遗传病目前尚难根治，故应积极预防。预防的措施有检出致病基因的携带者与禁止近亲结婚，推行计划生育，开展遗传咨询，进行产前检查与中止有病胎儿的妊娠等。 遗传多态性（genetic polymorphism）在一个群体内存在两种或两种以上非连续变异类型，而其中最罕见类型的频率不小于0.01（或0.05）的现象。常见的不同水平上的遗传多态性有：（1）基因多态性（gene polymorphism）。经调查人类大多数群体的ABO血型系统的三种复等位基因I A、I B和i的频率，最高的不超过0.55，最低的不小于0.2，所以，ABO血型系统的基因座为多态基因座。据研究，大多数生物的多态基因座约占总数基因座的15%～50%，即约有1/4～1/2的基因座存在两种或两种以上的等位基因。（2）染色体多态性（chromosome polymorphism）。在一群体中的同一染色体上可以发生不同的倒位或易位。例如拟暗果蝇（Drosophila pseudoobscura）的第三染色体上存在多种倒位，其自然群体中的倒位类型竟多达20余种。植物群体中的倒位多态性比动物的更普遍。在一些动植物群体中（如蟑螂、直果曼陀罗）还观察到易位多态性。此外，随着研究的深入，在分子水平上还发现核酸有限制性片段长度多态性（restriction fragment length polymorphism，RFLP），例如，在群体中用同一限制性内切酶“切割”DNA，可得到不同长度的DNA片段。 现在一般用自然选择理论来解释遗传多态性产生的原因，主要有杂合优势说和依赖 选择说。杂合优势说认为，杂合体（如Aa）在适应能力上要优于纯合体（如AA和aa），因此群体中的等位基因A和a的频率就会维持在一个既不过高也不过低的水平上。依赖选
基因工程药物的质量控制
浅议基因工程药物的质量控制 国药集团长春生物制品研究所有限公司 长春金赛药业有限公司 哈药集团 生物工程有限公司 生命科学正成为21世纪的领头科学。生物药物毒性低、副作用小、容易为人体吸收，因此在药品中比例趋增。自1982年全世界第一个基因重组新药“人胰岛素”在美国上市以来，美国现已有近百种基因工程重组生物技术药物获FDA批准上市；自1989年我国批准了第一个在我国生产的基因工程药物重组人干扰素α1b，现已正式批准上市的达20种。《中国药典》（2000年版）首次载入了基因工程产品。 目前，基因工程药物主要有重组蛋白质或多肽类、抗体和疫苗3大类。此类药物的出现和发展，给药物分析带来了新的挑战，由于其可能含有用传统生产方法不可能存在的有害物质，所以这类产品的质量控制与传统方法生产的产品有本质的差别。鉴于这类产品生产工艺的特殊性，除需要鉴定最终产品外，还需从基因的来源及确证、菌种的鉴定、原始细胞库等方面提出质量控制的要求，对培养、纯化等每个生产环节严格控制，才能保证最终产品的有效性、安全性和一致性。由于产品有其固定的易变性，质量控制尚无非常成熟的经验和方法，本文在此就有关问题作一简述。 1 质量控制要点
1.1 原材料 主要是对目的基因、表达载体及宿主细胞（如细菌、酵母、哺乳细胞和昆虫细胞）的检查，以及使用它们时制订严格要求，否则就无从保证产品质量的安全性和一致性，并可能产生不希望产生的遗传诱导的变化。 1.2 培养过程 无论是发酵还是细胞生产，关键是保证基因的稳定性、一致性和不被污染。主要控制的有生产用细胞库、有限代次的生产、连续培养过程。 1.3 纯化工艺过程 要求能保证去除微量DNA、糖类、残余宿主蛋白质、纯化过程带入的有害化学物质、致热原，或者将这类杂质减少至允许量。 1.4 最终产品 主要表现在生物学效价测定、蛋白质纯度检查、蛋白质的比活性、蛋白质的性质鉴定几个方面。 1.5 杂质检测 蛋白类，由于降解、聚合或者错误折叠而造成的目的蛋白变构体在体内往往会导致抗体的产生；非蛋白类，主要有细菌、病毒、热原质和DNA几种类型，往往在极低的水平就可以产生严重的危害作用。 1.6 安全性试验 其中的无菌试验、热原试验、安全性和毒性试验按我国新颁布
基因工程药物的综述
基因工程药物的研究及进展 摘要：20世纪70年代，随着DNA重组技术的成熟，诞生了基因工程药物，高产值、高效率的基因药物给医药产业带来了一场革命，推动了整个医药产业的发展，医药产业进入了新的历史时期。本文以基因工程药物的发展为导向，简要的介绍了国内外基因工程药物的发展概况、研究现状、研究方向、发展方向。 关键词：基因工程，药物，现状，发展 1 基因工程药物的发展概况 20世纪70年代，随着DNA重组技术的成熟，诞生了基因工程药物，高产值、高效率的基因药物给医药产业带来了一场革命，推动了整个医药产业的发展，医药产业进入了新的历史时期。 基因药物经历了三个阶段：第一阶段是把药用蛋白基因导入到大肠杆菌等细菌中，通过大肠杆菌等表达药用蛋白，但这类药物往往有缺陷，人类的基因在低等生物的细菌中往往不表达或表达的蛋白没有生物活性。第二阶段是人们用哺乳动物的细胞代替细菌，生产第二代基因工程药物。但由于哺乳动物细胞培养条件相对苛刻，生产的药物成本居高不下。第一、二代基因药物的研制和生产已经成熟。从第一个反义核酸药物Vitrovene于1998年和1999相继在美国和欧洲上市以来，发展迅速。第三阶段是到了80年代中期，随着基因重组和基因转移技术的不断发展和完善，科学家可以将人们所需要的药用蛋白基因导入NN-~L动物体内，使目的基因在哺乳动物身上表达，从而获得药用蛋白。携带外源基因并能稳定遗传的这种动物，我们称之为转基因动物。由于从哺乳动物乳汁中获取的基因药物产量高、易提纯，因此利用乳腺分泌出的乳汁生产药物的转基因动物称为“动物乳腺生物反应器”。90年代中后期，国际上用转基因牛、羊和猪等家畜生产贵重药用蛋白的成功实例已有几十种，一些由转基因动物乳汁中分离的药物正用于临床试验，但还没有一例药品成功上市。 2 基因工程药物的研究现状 2.1国外基因工程药物研究现状 随着1971年第一家生物制药公司Cetus公司在美国的成立，1973年重组DNA技术的出现，生物医药即已显示出巨大的应用价值和商业前景。1976年，世界第一家应用重组DNA 技术开发新药的公司Genentech建立，l982年第一个基因重组药物——基因重组人胰岛素在美国投放市场以来，生物医药产业以一种前所未有的速度迅猛发展。如在基因重组制药产业中做出过卓越贡献的Genentech和Amgen公司，早期的几个“重型炸弹”的基因重组
生物药物的制备与质量控制习题集
生物药物的制备与质量 控制习题集 Revised as of 23 November 2020
生物药物的制备与质量控制习题集 一、单项选择题（每小题2分共15题） 1蛋白质类物质的分离纯化往往是多步骤的，其前期处理手段多采用下列哪类的方法。（B ） A.分辨率高 B.负载量大 C.操作简便 D.价廉 2、下列药物哪些是重组 DNA 药物（B ） A.蛋白质工程药物 B.基因药物 C.天然生物药物 D.半合成生物药物 3、下列药物中属于糖类药物的是（ A ） A.甲壳素 B.卵磷脂 C.肌苷酸 D.氯霉素 4、4、冬虫夏草的入药部位为（ A ） A.虫体和子座 B.子囊 C.孢子囊 D.全草 5.下列哪项不属于新型疫苗（ C ） A．亚单位疫苗 B．合成肽疫苗 C．多联苗D．抗独特型抗体 6.下列哪种方法是由于细胞内冰晶的形成导致细胞破碎的（ C ） A. 真空干燥 B. 酶解法 C. 冻融法 D. 渗透压法 7.某抗生素以醋酸丁酯为流动相进行 pH 纸层析，酸性条件下比移值大，碱性条下比移值小，则该抗生素为( B ) A. 弱碱性 B. 弱酸性 C.强碱性 D.强酸性 8.从四环素发酵液中去除铁离子,可用（B ） A. 草酸酸化 B. 加黄血盐 C. 加硫酸锌 D. 氨水碱化 9.用大肠杆菌作宿主表达重组 DNA 药物，缺点是（ C ） A.蛋白质表达量低 B.生长慢 C.产物无糖基修饰 D.难以获得工程菌 10.下列药物哪些是重组 DNA 药物（B ） A.蛋白质工程药物 B.基因药物 C.天然生物药物 D.半合成生物药物 11.生物药物原料的保存可采取有机溶剂脱水法，常用的有机溶(D ) A．甲醛 B．酒精 C．苯酚 D．丙酮 12.选用110 树脂分离纯化链霉素，交换时 pH 应为（ C ） A．2～4 B. 4～6 ～8 D. 12～14 13.能够除去发酵液中钙、镁、铁离子的方法是（ C ） A. 过滤 B. 萃取 C. 离子交换 D. 蒸馏 14.下列哪项不属于新型疫苗 ( C ) A．亚单位疫苗 B．合成肽疫苗 C．多联苗 D．抗独特型抗体 15.利用产氨短杆菌发酵法生产肌苷酸，第一步是用诱变育种的方法筛选缺乏哪种酶的腺嘌呤缺陷型菌株，并在发酵培养基中提供亚适量的腺嘌呤。（A ） A．SAMP 合成酶 B．SAMP 裂解酶 C．PRPP 转酰胺酶 D．IMP 脱氢酶 二、填空题（每空1分共20空） 1、生物制药的特点高投入、高产出、高风险 2、抗生素生产的方法发酵法、化学合成法、半合成法、直接提取。 3、药物化学的特点综合性、边缘性。 4、在用药过程中没有吸收过程的是静脉注射，__ 静脉滴注 _. 5、常用的菌种保藏方法有斜面保藏法、石蜡油封藏法、砂土管保藏法_、_冷冻干燥保藏、甘油悬液低温冷冻保藏法、液氮保藏法等。 6、药物的产生菌是微生物药物的来源，其主要包括放线菌、真菌、细菌。 三、名词解释题（每小题2分共5题） 1、药理学：是研究生物体与药物之间相互作用规律及其机制的科学。 2、吸收：药物自给药部位进入血液循环的过程 3、药峰时间：用药以后，血药浓度达到峰值的时间。
基因工程药物
基因工程药物 蛋白质是生命活动最重要的物质之一，很多蛋白质与人类的疾病密切相关。大家所熟悉的侏儒症与病人缺少生长激素有关；一些糖尿病人则是由胰岛素合成不足引起的。在DNA重组技术出现之前，大多数的人用蛋白质药物主要是从人(如血液、尿液)或动物的组织或器官中提取的，成本特别高、产率和产量都很低，供应十分有限。并且由人体来源的材料进行提取，很难保证这种蛋白质药物不被某些病原体，如肝炎病毒、艾滋病病毒的污染，所以存在不安全因素。 1972年DNA重组技术诞生，直到 1982年出现世界第一个基因工程药物。基因工程药物开始进入人们的视线并逐渐得到重视。 基因工程药物是先确定对某种疾病有预防和治疗作用的蛋白质，然后将控制该蛋白质合成过程的基因取出来，即目的基因。将目的基因用DNA重组技术的方法连接在载体DNA上，然后将载体导入可以大量生产的靶细胞（微生物、哺乳动物细胞或人体组织靶细胞），使目的基因在靶细胞中得到表达，最后将表达的目的蛋白质提纯及做成制剂，从而成为蛋白类药物或疫苗。 目前基因工程药物主要分为四类：激素类及神经递质类药物；细胞因子类药物；酶类药物与凝血因子；基因工程活疫苗。这里就只做简单介绍，有兴趣的同学可以去详细了解。 我们来看一下基因工程药物合成的步骤：首先是目的基因DNA的取得——构建DNA重组体——构建工程菌——目的基因的表达——外源基因表达产物的分离纯化——最后是进行产品的检验。经临床试验才可投入市场。 我们来了解一下基因工程药物的发展历程 自1972年DNA重组技术诞生以来，作为现代生物技术核心的基因工程技术得到飞速的发展。1982年美国Lilly公司首先将重组胰岛素投放市场，标志着世界第一个基因工程药物的诞生。到1996年美国已拥有1300多家专门从事生物公司，70%从事生物医药开发。 我国基因工程药物的研究和开发起步较晚，1989年我国批准了第一个在我国生产的基因工程药物——重组人干扰素α1b，标志着我国生产的基因工程药物实现了零的突破。重组人干扰素α1b是世界上第一个采用中国人基因克隆和表达的基因工程药物，也是到目前为止唯一的一个我国自主研制成功的拥有自主知
基因多态性及其生物学作用和医学意义doc资料
基因多态性及其生物学作用和医学意义
基因多态性及其生物学作用和医学意义 一、基因多态性： 多态性（polymorphism）是指处于随机婚配的群体中，同一基因位点可存在2 种以上的基因型。在人群中，个体间基因的核苷酸序列存在着差异性称为基因（DNA）的多态性(gene polymorphism)。这种多态性可以分为两类，即DNA位点多态性(site polymorphism)和长度多态性 (longth polymorphism)。 1.位点多态性：是由于等位基因之间在特定的位点上DNA序列存在差异，也就是基因组中散在的碱基的不同，包括点突变（转换和颠换），单个碱基的置换、缺失和插入。突变是基因多态性的一种特殊形式，单个碱基的置换又称为单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism, SNP), SNP通常是一种二等位基因（biallelic）或二态的变异。据估计，单碱基变异的频率在1/1000-2/1000。SNP在基因组中数量巨大，分布频密，检测易于自动化和批量化，被认为是新一代的遗传标记。 2. 长度多态性：一类为可变数目***重复序列（variable number of tandem repeats, VNTRS），它是由于相同的重复顺序重复次数不同所致，它决定了小卫星 DNA（minisatellite）长度的多态性。小卫星是由15-65 bp的基本单位***而 成，总长通常不超过20bp，重复次数在人群中是高度变异的。另一类长度多态性是由于基因的某一片段的缺失或插入所致，如微卫星DNA （microsatellite），它们是由重复序列***构成，基本序列只有1-8bp,如(TA)n及
我国药物安全性评价及GLP的有效实施
陕西行政学院学报Journal of Shaanxi Administration School 2009年5月第23卷第2期 May ,2009Vol.23,No.2 收稿日期：2008-10-20 作者简介：白山稳（1963-），男，陕西韩城人，讲师，陕西省工商联直属商会会员，陕西省投资协会会员，陕西省残疾人创业协会副会长，主 要从事资金及资本运作研究；任璐（1982-），女，陕西宝鸡人，工商管理系助教，从事企业管理研究。 药物是一种用于预防、治疗、诊断疾病的特殊商品，在促进人类的发展和社会的进步中起到了十分重要的作用。药品使用不安全或使用不当都会给人们的健康、生活质量、社会的安定以及发展建设造成严重威胁。胡锦涛总书记在党的十七大报告中提出了：在新的发展阶段继续全面建设小康社会、发展中国特色社会主义，必须坚持以邓小平理论和“三个代表”重要思想为指导，深入贯彻落实科学发展观。而药物的安全性问题恰是政府和人民关心的头等大事，也是科学发展观中政府执政为民、以人为本的具体体现。在科技迅速发展、社会进步的新时代，我们要切实贯彻落实“全面、协调、可持续发展”的科学发展观，保证药物在上市后是安全有效的良药。 一、临床前药物安全性评价的重要性 药物有两个方面尤为重要，首先是安全性，其次 是它的有效性。其中药物的安全性是使用药物时所必须保证的。 （一）药物安全是人类生命安全的重要保障在人类历史长河中，因对药物的不安全使用，使人们经历了很多伤亡事件和惨痛教训，大量患者病情更加严重，甚至死亡。在20世纪重大的药害事件当中，一些看似有效的药物成份却对人体本身造成了巨大的伤害。比如：甘汞造成汞中毒，死亡585人；醋酸铊造成铊中毒，死亡1万人；氨基比林造成粒细胞缺乏症，死亡2082人；磺胺酏造成肝肾损害，死亡 107人；非那西丁造成肾损害、溶血，死亡500人；二 碘二乙基锡造成神经毒性、脑炎，失明、死亡110人；异丙基肾气雾剂造成严重心律失常、心衰，死亡3500人；氯碘喹啉造成骨髓变性、失明，受害7856人，死亡5%；心得宁造成眼-皮肤-粘膜综合征，受害2257 我国药物安全性评价及GLP 的有效实施 白山稳，任璐 （陕西省行政学院，西安710068） 摘要：我国新药在上市前，所进行的新药审批须经非临床与临床研究，其安全性评价尤为重要。新药非临床安全性研究的 最终目的就是为了降低临床研究安全性方面的风险性，只有当GLP 标准表明该药有充分的安全性和有效性，才可进入临床研究。由于我国医药行业存在诸多问题，多数新药临床前安全性评价不符合GLP 标准，不得上市造福人类，药企也面临着无法生存的难题。因此，必须坚持和落实科学发展观，确保新药安全性评价以及GLP 的有效实施。 关键词：药物；安全性评价；GLP ；规范；药品产业 中图分类号：R286.0 文献标识码：A 文章编号：1673-9973(2009)01-0125-04 经济管理 China's Drug Safety Evaluation and the Effective Implementation of GLP BAI Shan-wen ，REN Lu (Shaanxi Administration School,Xi'an 710068,China) Abstract:Now,in order to value the lives,new drugs must pass those two stages,which are non-clinical and clinical studies be -fore they are put on the market.The most important one is the safety study.The ultimate goal of the non-clinical drug safety study is to reduce the risks of testing the new drugs in the clinical study.And only if the GlP standards show the efficiency and safety of the dugs can they finally be allowed to use in the clinical studies.There are still many problems in China's pharmaceutical industry,and most of the pre-clinical drug safety evaluation is not up to the GLP standard.Thus,these new drugs can not benefit mankind,and the marketing of them will also cause the problems in the pharmaceutical enterprises.Therefore,we must implement the scientific concept of develop -ment to ensure the safety evaluation of new drugs,as well as the effective enforcement of the GLP. Key words:medicine;safety appraises;GLP;standardize;medicine is industrial 125
基因工程药物的研究进展及其应用前景.doc
基因工程药物研究与应用新进展 郭小周 生物技术药物(biotech drugs)或称生物药物(biopharmaceutics)是集生物学、医学、药学的先进技术为一体，以组合化学、药学基因（功能抗原学、生物信息学等高技术为依托，以分子遗传学、分子生物、生物物理等基础学科的突破为后盾形成的产业。现在，世界生物制药技术的产业化已进入投资收获期，生物技术药品已应用和渗透到医药、保健食品和日化产品等各个领域，尤其在新药研究、开发、生产和改造传统制药工业中得到日益广泛的应用，生物制药产业已成为最活跃、进展最快的产业之一。 摘要：自20 世纪70 年代基因工程诞生以来,以DNA重组技术为核心的现代生物技术一直是人们研究的热点，本文主要介绍了基因药物的定义、获得途径、一些前沿技术以及基因药物的应用与发展前景。 关键词:生物技术药物基因工程药物基因发展前景 1. 引言 近年来1953年Waston和Crick发现遗传物质DNA的双螺旋结构，给整个生物学乃至整个人类社会带来了一场革命。此后，一系列有关遗传信息即基因研究的成果很快的向应用和开发拓展。1972年，美国斯坦福大学P.Berg博士研究小组使用EcorRⅠ,第一次在体外获得了包括SV40 DNA和λ噬菌体DNA的重组DNA分子。1973年，S.Cohen 等将两中分别编码卡那霉素和四环素的抗性基因相连，构建出重组的DNA分子，然后转化大肠杆菌，获得了既抗卡那霉素又抗四环素的转化子菌落，这是第一次成功的基因克隆实验，标志着基因工程的诞生。1977年Boyer首次获得生长激素抑制因子的克隆，1982年第一个基因工程重组产品——人胰岛素被批准应用，进入市场。迄今为止，已有50多种基因工程药物上市，近千种处于研发状态。基因工程药物已经形成一个巨大的高新技术产业，产生了不可估量的社会效益和经济效益，由于基因药物的出现，可以大大改善人类的生命质量，对于一些重大疾病的治疗将会有新的突破。 2 基因工程