病毒灭活去除验证指南

病毒灭活血浆制备风险因素探析

病毒灭活血浆制备风险因素探析 目的：探讨病毒灭活血浆制备过程中容易发生的不安全因素及防范措施，确保血液质量安全。方法：对2013年笔者参与的成分制备小组在制备病毒灭活血浆过程中发生并造成血液报废的差错资料进行统计、分析。结果：差错主要发生在血浆袋与灭活器材的连接、献血标签的转移、灭活仪的使用三个环节，共12例。结论：加强管理，明确责任分工；合理安排工作流程，改进缺陷薄弱环节；对发生的问题及时做出分析，制定落实相应环节中的防范措施；控制、消除人为成因，从本质上降低差错的发生，确保血液质量安全。 标签：血浆；病毒灭活；制备；安全隐患；防范措施 亚甲蓝光化学法病毒灭活技术在我国作为一项新技术虽然得到了推广应用，但制备技术和经验还存在不足，笔者试图和同仁们分享工作中的体会，以期相互补充、共同提高。 资料与方法 对2013年笔者参与的成分制备小组在制备病毒灭活血浆过程出现并造成血液报废的差错资料按工作环节、差错原因进行统计。 结果 血浆袋与灭活器材连接环节：渗漏5例，灭活器材与血浆容量不匹配3例；献血码标签转移环节：成品浆献血码标签缺失2例，两袋成品浆标签条码相同1例；灭活仪使用环节：灭活仪运转期间发生故障未及时发现1例。 原因分析 成品袋条码标签缺失主要与标签漏转、黏贴不牢脱落有关；献血码标签转移错误多与岗位分工不明确，操作人员混乱，责任意识淡薄，违反操作规程，常规化核查得不到有效落实有关。两袋成品浆标签码完全相同是由于批量复制缺失的待转移标签，其中一袋被重复复制，加之批量黏贴、人-机核查落实不到位多方因素共同造成。灭活器材与血浆容量不匹的主要原因：血浆称量不准，标量分类错误；不同容量的血浆放在同一运血筐，操作人员不能明确分辨。灭活仪在使用方面存在的问题：一是缺乏监控意识，设备运行期间缺少监控环节；二是缺乏对设备性能的了解以及处理异常情况的经验。节假日、周末、工作量较大、人员安排欠缺的情况下容易导致体能消耗过大，注意力不集中；为追求工作进度，怕麻烦，违反操作规程，是常规性操作出问题的因素。年轻人员工作时间短，经验和技术操作熟练程度都存在不足，对一些问题不能正确判断或采取预见性处理。岗位、责任分工不明确，工作流程不够细化；缺乏责任意识，对后果的严重性认识不足。

2020年度WHO清洁验证指南

2020年度WHO清洁验证指南（中文版） 附录3 清洁验证 世界卫生组织药物制剂规范专家委员会第十四次报告。日内瓦，世界卫生组织；2006：附件4（世卫组织技术报告系列第937号） 1.原则 2.范围 3.概述 4.清洁验证方案和报告 5.人员 6.设备 7.清洁剂 8.微生物 9.取样 10.分析方法 11.确定可接受标准 （1）原则 1.1药品质量管理规范（GMP）的目标包括防止可能的污染、药物原料和产品的交叉污染。 1.2药品可能被各物质污染，如与微生物有关的污染物，产品（包括原料药和赋形剂残留）、清洁剂、空气传播的物料，如微尘和颗粒物。润滑剂和辅料材料，如消毒剂、残留降解产物：例如，在清洗的过程中使用强酸和强碱会导致产品残渣分解。洗涤剂、酸和碱的分解产物，可作为清洗工艺的一部分。 1.3适当的清洗程序对防止污染和交叉污染具有重要作用。清洗方法的验证需提供文件证明，经批准的清洗程序将提供与预期用途相适应的清洁设备。 1.4清洁验证的目的是证明设备对产品、洗涤剂和微生物残留物的清洗均能达到可接受水平，以防止可能的微生物污染和交叉污染。 1.5清洁验证对于非关键性的清洗并不一定是必须的，例如批次相同的产品（或散装过程中相同中间体的不同批次）、地板、墙壁、容器外部以及一些中间步骤

之间的清洗。 1.6清洁验证在多产品生产设备清洁中是很重要的，并应在设备、消毒程序和服装洗涤等方面进行验证。 2.范围 2.1指南里描述了清洁验证的一般方面，不包括可能需要的特殊清洁验证或灭活，例如，在生物制造业中去除病毒或支原体污染物。 2.2一般情况下，清洁验证适用于关键清洁，例如，在生产一种产品与另一种产品，与产品、药品和原料药接触的表面的清洗。 3.概述 3.1要有详细的书面标准操作规程（SOP），说明设备和仪器的清洗过程。清洗程序应该经过验证。 3.2制造商应制定清洗策略和一定的清洗验证程序，包括：与产品的接触表面；产品转换后的清洗（当一种药物配方被另一种完全不同的配方替换时）；在批次之间的活动（当同一配方是在一段时间内，在不同的日期生产）；用于清洁验证的产品组。（这种情况经常发生在产品中含有具有类似性质（如溶解度）或具有不同强度的相同物质的地方。一种可接受的策略是首先制造含量较低的剂型（不一定是最低剂量），然后是含量较高的形式。）有时产品的“组”在活性物质或赋形剂方面略有不同。需定期评估和再清洁验证之间生产的批次数。 3.3至少连续三次应用清洁程序，并证明是成功的，以证明该方法是有效的。 4.清洁验证方案和清洁验证报告 4.1清洁验证应在清洁方案中进行描述，该方案应得到正式批准，例由质量控制或质量保证部门批准。 4.2在制定清洁验证方案时，应考虑一下事项： 系统拆卸 预清洗 清洁剂、浓度、溶液体积、水的质量 时间和温度 流速、压力和冲洗 设备复杂性及设备设计

感染埃博拉病毒后的症状有哪些

感染埃博拉病毒后的症状有哪些 埃博拉病毒是一种具有传染性的疾病，病死率高达50%至90%，其严重地危害到人类身体健康，病死率高达50%至90%, 是世界上最凶猛的疾病之一。那么你们知道感染埃博拉病毒后有哪些症状吗?下面我们一起来看看吧。 感染埃博拉病毒后会有什么症状 人一旦感染埃博拉病毒,起病非常迅急,起初是发热、极度虚弱、肌肉疼痛、头痛和咽喉痛,随后会出现呕吐、腹泻、皮疹、肾脏和肝脏功能受损,某些情况下则会有内出血和外出血。 而外出血就比较可怖了,按维基百科的说法,这种出血是全身孔洞出血,也就是说,除了我们常说的“七窍流血”之外,身体其他地方的孔洞,比如肛门、生殖器,甚至不小心扎出的小伤口,都会出血,因为到了这个时候,人体内的器官基本已经坏 死糜烂,血液奔流,无孔不出。 埃博拉病毒病怎么治疗 1、控制传播 对有出血症状的可疑病人,应隔离观察。一旦确诊应 及时报告卫生部门,对病人进行严格的隔离,即使用带有空气滤过装置的隔离设备。医护人员、实验人员穿好隔离服,可能时 需穿太空服进行检验操作,以防意外。 2、辅助性治疗 治疗首先是辅助性的,包括使病毒入侵小化,平衡电解质,修复损失的血小板以便防止出血,保持血液中氧元素含量, 以及对并发症的治疗。排除个别病例,埃博拉康复者的血清在 治疗疾病中并没有什么作用。干扰素对埃博拉也是无效的。在

猴子试验中,凝固干扰素似乎能起一些作用,使原本100%必死的感染猴中存活下33%。USAMRIID的科学家宣称,4只感染埃博拉病毒的猕猴中有3只康复。对埃博拉病毒病尚无特效治疗方法,一些抗病毒药如干扰素和利巴韦林无效,主要是支持和对症治疗,包括注意水、电解质平衡,控制出血;肾衰竭时进行透析治疗等。 埃博拉病毒病该怎么预防 1、主要是隔离患者,对患者的分泌物、排泄物和使用过的物品要彻底消毒。 2、禁止共享针头,在严格消毒情况下也不能重复使用针头;隔离病人;在任何情况下都要依照严格的规程,使用一次性口罩、手套、护目镜和防护服。 3、保证医院的卫生环境。埃博拉病毒的流行大都是因为医院的环境,糟糕的公共卫生、随处弃置的针头、缺乏负压病房都对医护人员造成极大威胁。因为较好的设备及卫生,在现代化的医院中,埃博拉病毒几乎不可能爆发大规模流行。 ;

病毒灭活血浆制备风险因素探析

龙源期刊网 https://www.wendangku.net/doc/0111932724.html, 病毒灭活血浆制备风险因素探析 作者：高丽台耀丽 来源：《中西医结合心血管病电子杂志》2014年第01期 【摘要】目的：探讨病毒灭活血浆制备过程中容易发生的不安全因素及防范措施，确保血液质量安全。方法：对2013年笔者参与的成分制备小组在制备病毒灭活血浆过程中发生并造成血液报废的差错资料进行统计、分析。结果：差错主要发生在血浆袋与灭活器材的连接、献血标签的转移、灭活仪的使用三个环节，共12例。结论：加强管理，明确责任分工；合理安排工作流程，改进缺陷薄弱环节；对发生的问题及时做出分析，制定落实相应环节中的防范措施；控制、消除人为成因，从本质上降低差错的发生，确保血液质量安全。 【关键词】血浆；病毒灭活；制备；安全隐患；防范措施 亚甲蓝光化学法病毒灭活技术在我国作为一项新技术虽然得到了推广应用，但制备技术和经验还存在不足，笔者试图和同仁们分享工作中的体会，以期相互补充、共同提高。 资料与方法 对2013年笔者参与的成分制备小组在制备病毒灭活血浆过程出现并造成血液报废的差错资料按工作环节、差错原因进行统计。 结果 血浆袋与灭活器材连接环节：渗漏5例，灭活器材与血浆容量不匹配3例；献血码标签转移环节：成品浆献血码标签缺失2例，两袋成品浆标签条码相同1例；灭活仪使用环节：灭活仪运转期间发生故障未及时发现1例。 原因分析 成品袋条码标签缺失主要与标签漏转、黏贴不牢脱落有关；献血码标签转移错误多与岗位分工不明确，操作人员混乱，责任意识淡薄，违反操作规程，常规化核查得不到有效落实有关。两袋成品浆标签码完全相同是由于批量复制缺失的待转移标签，其中一袋被重复复制，加之批量黏贴、人-机核查落实不到位多方因素共同造成。灭活器材与血浆容量不匹的主要原因：血浆称量不准，标量分类错误；不同容量的血浆放在同一运血筐，操作人员不能明确分辨。灭活仪在使用方面存在的问题：一是缺乏监控意识，设备运行期间缺少监控环节；二是缺乏对设备性能的了解以及处理异常情况的经验。节假日、周末、工作量较大、人员安排欠缺的情况下容易导致体能消耗过大，注意力不集中；为追求工作进度，怕麻烦，违反操作规程，是常规性操作出问题的因素。年轻人员工作时间短，经验和技术操作熟练程度都存在不足，对一些问题不能正确判断或采取预见性处理。岗位、责任分工不明确，工作流程不够细化；缺乏责任意识，对后果的严重性认识不足。

动物源性医疗器械产品注册申报指导原则

动物源性医疗器械产品注册申报资料指导原则 一、前言 本指导原则旨在指导申请者/制造商对动物源性医疗器械的注册申报资料进行准备。某些医疗器械可能含有动物来源的材料，这些材料是多种多样的，可以构成该器械的主要部件（例如牛/猪源心脏瓣膜、羊肠缝合线、止血材料等）、涂层或者浸渗剂（例如肝素、明胶、胶原等），也可成为生产过程中所用的辅助材料（例如牛脂等）。动物组织及其衍生物的使用可能会比非动物来源的材料（例如金属、塑料以及织物等）使医疗器械具有更好的性能，但是在另一方面，它们应用到人体则又会增加病毒传播和免疫原性等方面的安全风险。因此，对于动物源性医疗器械安全性的评价，需要考虑比常规医疗器械更多方面的内容。如果申请者/制造商在准备医疗器械注册申报资料时有这方面的考虑，将有助于更加充分、科学地评价医疗器械产品的风险受益比，进而提高产品注册申报的效率。 本指导原则是在注册申报资料中有关的技术性文件（技术报告、风险分析报告、注册产品标准及产品说明书）满足一般性要求的基础上，针对动物源性医疗器械产品的特点提出的需特别关注和增加论述的内容要求。对于其他注册申报资料的要求，申请者/制造商应按照《医疗器械注册管理办法》的相关要求并参照《医疗器械临床试验规定》、《医疗器械标准管理办法(试行)》、《医疗器械说明书、标签和包装标识管理规定》、《关于含有牛、羊源性材料医疗器械注册有关事宜的公告》（国食药监械［2006］407号）、《无源植入性医疗器械产品注册申报资料指导原则》等其他相关法规文件的要求。申请人/制造商应依据具体产品的特性对注册申报资料的内容进行充实和细化。申请人/制造商还应当依据具体产品的特性确定其中的具体内容是否适用。若不适用，应详细阐述其理由及相应的科学依据。 本指导原则是对申请人/制造商和审查人员的指导性文件，但不包括注册审批所涉及的行政事项，亦不作为法规强制执行。如果有能够满足相关法规要求的其他方法，也可以采用，但是应提供详细的研究资料和验证资料。应在遵循相关法规的前提下使用本指导原则。 本指导原则是在现行法规和标准体系以及当前认知水平下制订的，随着法规和标准的不断完善，以及科学技术的不断发展，本指导原则相关内容也将进行适时的调整。 二、适用范围 本指导原则适用于全部或部分采用无生命动物组织制成的或取材于动物组织的医疗器械产品（体外诊断用医疗器械除外）的注册申报。本指导原则同样适用于采用动物组织衍生物或由动物体自然获取物质（例如：牛奶、羊毛等）制成的医疗器械产品注册申报。 三、基本要求 （一）动物源性医疗器械产品注册申报资料要求 1．境内动物源性医疗器械产品注册申报资料在满足一般性要求的基础上，还应增加下述内容： （1）技术报告 对于动物源性医疗器械，这一部分的资料需要增加涉及控制病毒和/或传染性病原体感染以及免疫原性风险方面有关的技术内容。 鉴于不同种类和不同数量的病毒和传染性病原体感染人体的概率不尽相同，而不同动物种类易感染病毒和传染性病原体的种类和程度也千差万别，因此动物种类的确定对于动物源性医疗器械的风险起着重要作用。此外，动物的地理来源、年龄、取材部位的不同也直接影响着动物源性材料所具有风险的高低。

血液制品去除灭活病毒技术方法及验证指导原则

血液制品去除/灭活病毒技术方法及验证指导原则 目前已知经血液制品传染的病毒主要有HBV、HCV、HIV-1、HIV-2、HTLV和细小病毒B19。尚未发现经血液制品传染CJD。但有少数研究报告发现有实验性传染现象，因此要密切关注CJD，特别是vCJD的发展动向。 为了提高血液制品安全性，生产工艺要具有一定的去除/灭活部分病毒能力，生产过程中应有特定的去除/灭活病毒方法。本技术指导原则是对血液制品（指以人血浆为原料制备的制品）生产过程以及特定的去除/灭活病毒方法验证的指导原则，包括指示病毒和病毒去除/灭活方法的选择、验证方案的设计、结果判定以及附录所列技术验证申报的程序。 一、去除/灭活病毒方法的选择 由于不同类血液制品潜在的污染病毒的可能性不同，为此选择病毒去除/灭活方法的侧重点也应有所不同： （一）凝血因子类制品 生产过程中应有特定的能去除/灭活脂包膜和非脂包膜病毒的方法，可采用一种或多种方法联合去除/灭活病毒。 （二）免疫球蛋白类制品 对于免疫球蛋白类制品（包括静脉注射用人免疫球蛋白、人免疫球蛋白和特异性人免疫球蛋白）生产过程中应有特定的灭活脂包膜病毒方法。但从进一步提高这类制品安全性考虑，提倡生产过程中加入特定的针对非脂包膜病毒的去除/灭活方法。 （三）白蛋白 采用低温乙醇生产工艺和特定的去除/灭活病毒方法，如巴斯德消毒法等。 二、常用的去除/灭活病毒方法评价 （一）巴斯德消毒法（巴氏消毒法） 1．人血白蛋白制品 几十年临床应用结果表明，白蛋白的巴氏消毒法对HIV和肝炎病毒是安全的。其病毒灭活条件已很完善，可不要求进行病毒灭活验证。但是必须对巴氏消毒法所用设施进行验证，使巴氏消毒各参数符合要求（包括制品内温度分布的均一性和灭活时间）。 2．其它血液制品（液体制剂） 由于制品的组成、稳定剂（如：氨基酸、糖、枸橼酸盐等）及其浓度的不同，均会对灭活病毒效果有一定的影响。因此在采用巴氏消毒灭活病毒方法时必须进行病毒灭活效果验证。 （二）干热法（冻干制品） 80℃加热72小时，可以灭活HBV、HCV、HIV和A V等病毒。但应考虑制品的水分含量、制品组成（如：蛋白质、糖、盐和氨基酸）对病毒灭活效果的影响。应确定允许的制品瓶间各参数的差异。病毒灭活用的干热箱至少每半年验证一次。验证时干燥箱内应设多个测温点（包括制品内、箱内最高和最低温度点）。 （三）有机溶剂/去污剂（S/D）处理法 有机溶剂，如：磷酸三丁脂（TNBP）和非离子化的去污剂，如：ritonX-100或吐温-80结合可以灭活脂包膜病毒，但对非脂包膜病毒无效。常用的灭活条件是0.3% TNBP和1%吐温-80，在24℃处理至少6小时；0.3%TNBP和1%riton X-100，在24℃处理至少4小时。S/D处理前应先用1μm滤器除去蛋白溶液中可能存在的颗粒（颗粒可能藏匿病毒从而影响病毒灭活效果）。加入S/D后应确保是均一的混合物。在灭活病毒全过程中应将温度控制在规定的范围内。如果在加入S/D后过滤，则须检测过滤后S/D的浓度是否发生变化，如有变化应进行适当调整。吐温-80应采用植物源性，并应采用称量法量取。 （四）膜过滤法 膜过滤技术只有在滤膜的孔径比病毒有效直径小时才能有效除去病毒。该方法不能单独使用，应

常见的动物病毒

常见的动物病毒 一、口蹄疫病毒 1、群体：口蹄疫病毒是牛、猪等动物口蹄疫的病原体，人类偶能感染 2、防制：由于病毒高度的传染性，防制措施必须非常严密。严格检疫，严禁从疫区调入牲畜，一旦发病，立刻样封锁现场，焚毁病畜，周边地区畜群紧急免疫接种疫苗，建立免疫防护带 二、狂犬病病毒 1、群体：引起人和各种混血动物的狂犬病，感染的人和动物一旦发病，几乎都难免死亡 2、防制：目前各国采取的控制措施大致为几个方面 1）、扑杀狂犬病患畜、对家养犬猫定期免疫接种、检疫控制输入犬、捕杀流浪犬，这些措施大大降低了人和动物狂犬病的发病率 三、痘病毒 1、群体：各种动物的痘病中以绵羊痘和鸡痘最为严重，病死率较高 2、防制：主要采用疫苗的免疫接种，效果良好 四、猪瘟病毒 1、猪瘟病毒只侵害猪，使之发病，发病率死亡率均很高，对养猪业危害很大 2、防制：我国研制的猪瘟兔化弱毒疫苗是国际公认的有效疫苗，得到广泛应用

五、犬瘟热病毒 1、群体：是引起犬瘟热的病原体，本病是犬、水貂及其他皮毛动物的高度接触性急性传染病 2、防制：检疫、卫生及免疫是控制本病的关键措施 六、兔出血症病毒 1、简介：是兔出血行败血症的病原体，一呼吸系统出血、实质器官水肿、淤血及出血性变化为特征 2、防制：除采取严格的隔离消毒措施外，用组织灭活疫苗对兔群进行免疫接种是行之有效的措施 七、新城疫病毒 1、简介：能是鸡和火鸡发生新城疫，又称亚洲鸡瘟或伪鸡瘟 2、防制：新城疫是OIE规定的A类疫病，许多国家都有相应的立法，防制须采取综合性措施，包括卫生、消毒、检疫和免疫等 八、禽流感病毒 1、简介：能使家禽发生禽流感，又称欧洲鸡瘟或真性鸡瘟 2、防制：预防措施包括国际、国内及局部养殖场3个不同水平 国内是防制病毒传入及蔓延；养殖场还应侧重防止病毒有野禽传给家禽，要有隔离措施阻挡野禽。

埃博拉病毒调查报告

埃博拉病毒调查报告 篇一：埃博拉试卷 埃博拉出血热防控试卷 本试题满分100分，单选题20题，每题2分，共40分；多选题15题，每题4分，共60分。 一、单选题每题2分 1. 埃博拉病毒目前公认的具备重要公共卫生意义的主要传播途径为 A 接触传播 B 气溶胶传播 C 性传播 D 以上都是 2.埃博拉出血热发病季节 A 春季 B 夏季 C 秋季 D 无明显季节性 3. 埃博拉出血热最长潜伏期为 A 10天 B 21天 C 42天 D 8天 4. 医疗机构发现留观或疑似埃博拉病例后，应当 A 立即隔离，组织院内专家会诊治

疗、并同时网络报告并报告辖区疾控中心 B 立即隔离，网络报告并报告辖区疾控中心，划定专门隔离病房，指定人数较少的医护人员参与救治病例 C 立即隔离，专家会诊后将病例转运至符合条件的定点医院隔离治疗 D 立即隔离，网络报告并报告辖区疾控中心，等待疾控中心处理 5. 各医疗机构发现符合病例的埃博拉出血热疑似或确诊病例时，应在（）之内通过国家疾病监测信息报告管理系统进行网络直报，报告疾病类别选择（）中的“埃博拉出血热”。 A 2小时其他类别传染病 B 6小时乙类 C 12小时丙类 D 2小时甲类 6. 飞机上出现可疑埃博拉出血热病例，可以判定为密切接触者的是 A 该病人的同行人员（家人、同事、朋友等） B 在机上与病人同排左右邻座各一

人（含通道另一侧）及前后座位各一人 C 经调查评估后发现有可能接触病人血液、体液、分泌物和排泄物的其他乘客和空乘人员 D 以上三种情形均可判定 7. 隔离观察期为自（）起到第（）天为止。 A 入境日期21天 B 与病例最后一次接触21天 C入境日期14天 D 离开疫区14天 8.北京市各区县疾控中心接到本辖区内医疗机构埃博拉出血热疑似病例报告后 A 应于2小时内赶赴现场对病例进行初步流行病学调查 B 将调查情况通报病例现住址辖区疾控中心 C 于12小时内将流行病学调查报告上报区县卫生局和市疾控中心 D 以上均是 9. 埃博拉出血热病例传染性的正确

病毒灭活验证模版

***注射液 病毒灭活工艺验证研究 1 “***注射液”生物原材料-**（动物）的病毒污染验证文献综述 2 用于生产“***注射液”的生物原材料-**（动物）的病毒感染的检测 3 模拟生产工艺条件下对指示病毒的灭活实验

1 “***注射液”生物原材料-**（动物）的病毒污染验证文献综述 根据现有的研究结果，***（动物）的病毒包括***、***、***、……*种，其中***、***……病毒可感染人类。以下按***（动物）源性病毒的来源、种类及分布；人体的危害（是否人畜共患）；理化特性；检测方法的次序对各病分述如下： 1、***症 …… 2、…… 附表1 ***（动物）源性病毒的特征 病毒名称病毒的分类核酸类型囊膜病毒颗粒大小（nm）***病毒***科***属RNA or DNA 有or 无***~*** …… 附表2 ***（动物）源性病毒的理化性质 病毒名称温度耐受性pH耐受性化学物质敏感性 ***病毒可耐***℃可耐pH*** 能抵抗***，对***敏感 …… 附表3 ***（动物）源性病毒的检测方法 病毒名称血清抗体 检测方法 病毒抗原检测 组织样品方法 ***病毒**** 皮肤、肝、口腔分泌物、 粪便等 *** …… 参考文献 1、***** 2、

2 用于生产“***注射液”的生物原材料-**（动物）的病毒感染的检测 1、原理及目的 所有用于制药生产的生物性原材料等都有受到病毒污染的可能性，为验证“***注射液”的生物原材料-**（动物）种***、***病毒的感染情况，特进行下述实验。验证以保证生物原材料的安全性。 2、检测方法的选择 综前所述，目前已发现的**动物病毒性感染共有*种，其中***、***可感染人。我们对其中较为重要***、***病毒作为评价***动物病毒感染的指标，进行现场的采样检测，涉及的项目主要是：***抗体检测和病毒抗原检测…… 3、生物样品的种类及采样方法 3.1 血清抗体检测样品 在动物饲养场随即抽取生长健康、无疾患，体重在***—***的动物**只，从***采血***ml（无菌操作，置于*ml试管封口4℃保存备用）。 3.2 组织样品的病毒抗原检测：样品采集地点同上，动物采血处死后无菌取***样本分别置灭菌后的样品瓶中密封，4℃保存备用。 4、实验室样品处理及检测方法 4.1 样品处理 4.1.1 血清的分离按……方法，***转/分离心**分钟，分离血清，备用。 4.1.2 组织样品的处理……。 4.2 样品检测 4.2.1 血清抗体检测采用***试验。详见附件1 4.2.2 组织样品检测采用***试验。详见附件2 5、实验结果 见表**动物血清及组织样品中***病毒抗体及抗原检测结果 样品血清**组织**组织**组织 检测内容抗体抗原抗原抗原 结果———— 6、结论 在所采集的**动物样品中未能检出***、***病毒的血凝活性，结合***动物的饲养和生长情况，本品所选用的***动物符合生物原材料无病毒污染的要求。 附件：***试验操作术式 1、材料*** 2、操作方法*** 3、结果判定*** 4、病毒单位的计算***

含氯消毒剂对脊髓灰质炎病毒灭活试验方法的研究

文章编号:1001-7658(2004)10-0293-04 =论著> 含氯消毒剂对脊髓灰质炎病毒灭活试验方法的研究 王炜红 陈微娜 葛 洪 侯延文 林 玲 宋长江 (黑龙江省疾病预防控制中心,哈尔滨 150036) 提要 为研究含氯消毒剂对脊髓灰质炎病毒灭活试验方法,依照2002年版5消毒技术规范6规定的试验程序进行了实验室观察。结果,含有效氯800mg/L 的次氯酸钠、10mg/L 的优氯净和50mg/L 二氧化氯对Vero 细胞生存率无影响;用0.01mol/L PBS 配制的5g/L 硫代硫酸钠中和剂对Vero 细胞生存率无影响。用含5g/L 硫代硫酸钠中和剂对含有效氯400mg/L 的次氯酸钠设计的6组中和剂鉴定试验,结果符合设计要求。用该方法检测证明,以含有效氯400mg/L 次氯酸钠消毒剂,作用30min,对脊髓灰质炎病毒平均灭活对数值\4.0。试验发现,0.03mol/L 的PBS 、卵磷脂以及吐温80对Vero 细胞生存率均有影响。关键词 脊髓灰质炎病毒;中和剂;有效氯;灭活试验中图分类号:R187.2 文献标识码:A STUDY ON TEST METHOD FOR INAC TIVATION OF POLIOVIRUS BY C HLOR INE -C ONTAIN -ING DISINFECTANTS WANG Wei -hong,C HE N Wei -na,GE Hong ,HOU Yan -wen,LIN Ling ,SO NG Chang -jiang (Heilongjian g Provincial Center for Disease Prevention and Con trol,Harbin 150036,China) Abstract In order to study the test method for inactivation of poliovirus by chlorine-containing disinfectants,laboratory obser -vation was carried out according to the test procedures specified in 5Disinfection T echnical Guidelines 6,2002ed.The results showed that sodiu m hypochlochlorite containing available chlorine 800mg/L,10mg/L You-L -Ji ng ,50mg/L chlorine diox ide and 5g/L sodi um thiosulfate neutralizer reconsti tuted with 0.01mol/L PBS had no influence on survival rate of Vero cells.The results of neu tralizer identification test,in which 6groups were designed using 5g/L sodium thiosulfate as the neutralizer for 400mg/L sodiu m hypochlori te disinfectant,fulfilled the requirement of https://www.wendangku.net/doc/0111932724.html,ing this method,it was proved that sodium hypochlori te containi ng available chlorine 400mg/L with a 30min con tact time could inactivate polivirus wi th an average inacti va -tion logarithm \4.0.It was found by test that 0.03mg/L PBS,lecithin and tween 80had influence on survival rate of Vero cells.Key words p oliovirus ;neutralizer ;available chlorine;inactivation test 1作者简介2 王炜红(1958-),女,黑龙江哈尔滨市人,大学,副主任 医师,从事病毒防治、消毒学及医院感染控制工作。 2002年版5消毒技术规范6采用脊髓灰质炎病毒1型疫苗株作为病毒灭活试验代表,并规定了相应的试验方法。脊髓灰质炎病毒属无包膜小RNA 病毒,对外界理化因子抗力比较强,培养制备方法比较简单,在很多细胞内均可生长,用其作为评价消毒理化因子灭活指标国内外都有应用11,22。但在体外灭活试验中,很多试剂对细胞生长有不同程度的毒性,如消毒试验中的消毒剂、中和剂及稀释液等,给试验带来一定的困难。为了科学评价消毒剂对该病毒的灭活效果,依据5消毒技术规范6规定的试验程序,以含氯消毒剂为对象,在实验室研究了脊髓灰质 炎病毒的灭活试验方法。现将结果报告如下。1 方法 1.1病毒滴定方法 用Vero 细胞培养制备的脊髓灰质炎病毒1型疫苗株(军事医学科学院微生物流行病研究所提供)悬液,再用细胞维持液进行10倍系列稀释,每个稀释度接种(96孔培养板)4孔,置于37e 二氧化碳培养箱内培养。逐日观察结果,连续观察5d,记录细胞病变情况,计算半数细胞感染剂量(TCID 50)。1.2中和剂鉴定试验132 1.2.1预备试验 分别测定消毒剂、中和剂、中和产物对细胞生长的影响。1取次氯酸钠、优氯净和二氧化氯系列稀释液,分别接种于已经形成单层细胞 # 293#中国消毒学杂志2004年第21卷第4期

艾滋病病毒灭活试验

艾滋病病毒灭活试验 （1）目的 测定消毒剂对艾滋病病毒（human immunodeficiency virus，HIV）灭活所需的剂量，以验证对该病毒污染物消毒实用剂量。 （2）实验原理 用细胞感染法测定消毒剂作用前后（或实验组与对照组）样本中HIV 的量。以细胞病变作为判断指标，确定各组病毒的感染滴度，计算消毒剂对 HIV 的灭活对数值。 （3）安全防护 试验中要求采取严密防护措施。我国规定所有接触 HIV 的试验均需在生物安全三级（biological safety level 3，BSL 3）实验室内进行，并制定有相应的安全防护措施。在 HIV 灭活试验时，必须严格按照有关安全规定进行。 （4）试验分组 1）试验组。根据所测消毒剂对其他微生物的杀灭或灭活剂量估计，设立适宜的浓度与作用时间组（不少于1个浓度，3个作用时间），对作用时间的设计应不短于30s。所设组应能测出使 HIV 全部灭活所需的最低有效剂量（药物浓度与作用时间）。 2）阳性对照组。用去离子水代替消毒剂，按试验组规定步骤加入 HIV 悬液进行试验和培养，观察 HIV 生长是否良好。 3）阴性对照组。用不含 HIV 的完全培养基作为阴性对照，观察所用培养基有无污染，细胞是否生长良好。

4）消毒剂对细胞毒性组。取 100μl 待测消毒剂，加入含有100μl 用完全培养基制备的MT4 细胞悬液（含细胞400 000 个/ml）的 96 孔培养板内。置二氧化碳温箱（37℃）中培养 7 d，观察细胞生长情况，确定消毒剂对细胞无毒性的最高稀释度。 （5）HIV 悬液定量灭活试验操作程序 1）从液氮中取出冻存的 MT4 细胞，在37℃ 温水中迅速融化，并用细胞维持液洗涤两次后，转种于加有 10ml 完全培养基培养瓶中。逐日观察细胞生长情况，在细胞对数生长期时收获细胞用于消毒试验。2）从液氮中取出冻存HIV-1毒种，接种于含10ml细胞悬液（含细胞700 000个/ml～800 000个/ml）培养瓶中。逐日观察病变，待3/4细胞出现病变时，收获病毒。收获时，将培养液取出，尽快离心，并将含病毒的上清液按每管 0.5ml 分装于无菌离心管（1.5ml）中，冷冻保存于-80℃备用。如不能立即离心，可暂将培养瓶冷冻保存于 -20℃，并争取尽快离心分装。 3）取待测消毒剂，用无菌去离子水作 1:2、1:4、1:8 ...系列稀释。视消毒剂的类型和实验目的，确定最高稀释度。为防止污染培养液，必要时在试验前需将消毒剂过滤除菌。 4）取 50μl 待检消毒剂，与 50μl 病毒原液混合。在规定温度作用一定时间（根据试验要求确定作用时间和温度），立即加入0.9ml 用完全培养基制备的 MT4 细胞悬液（400 000 个/ml），在37℃，放置 40min，以确保残留病毒全部吸附在细胞上。阳性（病毒）对照

《埃博拉病毒》阅读附答案

《埃博拉病毒》阅读附答案 埃博拉病毒 ①“埃博拉”是刚果（金）北部的一条河流的名字。1976年，一种不知名的病毒光顾这里，疯狂地虐杀埃博拉河沿岸55个村庄的百姓，致使数百人死亡，有的家庭甚至无一幸免，“埃博拉病毒”也因此得名。 ②埃博拉病毒（EBOV）属丝状病毒科，单股负链RNA 病毒，长度为970纳米，呈长丝状体，有分支形、U形、6形或环形，分支形较常见，形状宛如中国古代的“如意”。埃博拉病毒有18959个碱基，分子量为×106。外有包膜，病毒颗粒直径大约80纳米，大小100纳米×（300～1500）纳米，感染能力较强的病毒一般长（665～805）纳米左右。纯病毒粒子由一个螺旋形核糖核壳复合体构成，含负链线性RNA 分子和4个毒粒结构蛋白。在病毒粒子中心结构的核壳蛋白由螺旋状缠绕的基因体RNA与核壳蛋白质以及蛋白质病毒蛋白VP35、VP30、L组成，病毒包含的糖蛋白从表面深入病毒粒子10纳米长，另外10纳米则向外突出在套膜表面，而这层套膜来自宿主的细胞膜，在套膜与核壳蛋白之间的区域，称为基质空间，由病毒蛋白VP40和VP24组成。 ③埃博拉病毒主要是通过病人的血液、唾液、汗水和分

泌物等途径传播。感染潜伏期为2～21天。感染者的早期症状和感冒类似：发烧、食欲不振、头疼和嗓子痛。此时，埃博拉病毒已开始摧残人体的免疫系统。如果某人一旦突然开始出现发热、严重的头疼和肌肉酸痛等症状，则说明他已经被传染了。几天后，病毒感染者会出现全身性疼痛、慢性腹痛、呕吐和腹泻。接下来，患者躯干上会出现皮疹，并会很快蔓延到四肢和头部。再过几天就会达到转折点——此刻一些幸运的患者将会痊愈，而另一些患者则会发展到致命的阶段——出血热，患者肌体的免疫系统被全面破坏，人体微小血管破裂，导致患者从眼睛、嘴巴、鼻孔、耳朵等向外渗血。此时，患者胃肠道和其他内脏也可能会发生内出血。他们的白眼球将变成红色，呕吐物和腹泻物里会有血液出现，其皮下会形成大血疱。绝大多数患者最终因多器官衰竭、出血不止或休克而死亡，这经常发生在第一次发病的8到17天之间。在大约1500例确诊的埃博拉病例中，死亡率高达88﹪。 ④埃博拉病毒在常温下较稳定，对热有中等度抵抗力，56℃不能完全灭活，60℃30分钟方能破坏其感染性；紫外线照射2分钟可完全灭活。埃博拉病毒对化学药品敏感，乙醚、去氧胆酸钠、β-丙内酯、福尔马林、次录酸钠等消毒剂可以完全灭活病毒感染性；钴60照射、г射线也可使之灭活。 ⑤尽管医学家们绞尽脑汁，作过许多探索，但埃博拉病毒的真实“身份”，至今仍为不解之谜。没有人知道埃博拉病

血浆病毒灭活的临床应用与安全输血

2011年5月第18卷第13期 医护论坛 CHINA MODERN MEDICINE 中国当代医药临床成分输血中输注血浆在疾病治疗和挽救生命中起着重要作用，是抢救危重患者的重要手段[1]。随着输血技术的提高，输血安全越来越受到公众重视。虽然现在血站、医院对血液进行非常严格的病毒筛查检测，但由于病毒感染的窗口期以及有些病毒因受现行的检验技术限制而无法检测，从而不能完全保证临床输注血浆的安全，让输注血浆存在安全隐患。推广用亚甲蓝/光化学方法的病毒灭活技术可切断病毒经血液传播疾病,有效控制输血的风险已得到临床输血界的肯定[2]。本站为提高本市的临床用血安全于2009年1月1日起开展采用亚甲蓝/光化学方法的病毒灭活技术取得了良好的效果，现报道如下：1材科与方法1.1标本 采集的无偿献血液400ml 全血离心制备出200ml 血浆40份，留取10cm 长充满血浆血袋上辨管为对照Ⅰ组小样（病毒灭活前）。留取加入亚甲蓝病毒灭活后的一次性使用血浆病毒灭活输血器上10cm 长充满血浆的辨管为对照Ⅱ组小样（病毒灭活后）。检测确认HBV-DNA 为阳性2袋400ml 血液制备分离出血浆，留取10cm 长充满血浆的辨管放入专用冰箱为Ⅲ组小样（病毒灭活）。1.2仪器试剂 大容量低温离心机（德国杜邦）；低温血液滤白柜(天津正源制冷设备有限公司)；一次性使用血浆病毒灭活输血器（上海输血技术有限公司批号091231-2），亚甲蓝含量为1单位mol/L ；上海通用机械集团生产医用病毒灭活箱；上海名典生物工程公司生产的蛋白测定试剂盒TP-KIT ；日本ca-50型全自动血凝仪；上海精密科学仪器有限公司的724分光光度计；Waters 2695高效液相色谱仪。1.3方法 在百级净化间内把血浆与一次性使用血浆病毒灭活输血器连接，将血浆转移到的溶入亚甲蓝的血浆光照袋内后，平放在病毒灭活箱的摆架上照射灭活，摆架摆动频率为60/min ，荧光为30000～38000lux ，温度设置为（4±2）℃照射时间35min 。用低温滤白柜将光照灭活后的血浆用病毒灭活过滤器除去亚甲蓝。1.4检测方法 用对照Ⅰ组小样，对照Ⅱ组小样分别对照检测清蛋白、血浆Ⅷ因子、纤维蛋白原.球蛋白。检测Ⅲ组小样HBV-DNA 变化。血浆Ⅷ因子活性测定采用一期法（KPTT ）纤维蛋白原， 测定采用凝固法，血浆白蛋白测定采用比色法，血浆球蛋白测定采用比浊法。用高效液相色谱法测经滤过后亚甲蓝残留量。2结果 血浆Ⅷ因子平均值为（0.82±0.04）U/ml ，纤维蛋白原的回收率>75%，白蛋白、球蛋白的回收率>85%，免疫原性无变化。经滤过后亚甲蓝残留量平均值为（0.23±0.12）μmol/L 。检测Ⅲ组小样HBV-DNA 均成阴性。3讨论 在成分输血中，血浆的输注占有很大的比例，它对经血传播病毒性传染病的危险性仅少于白细胞，所以说怎样减少输注血浆的风险，是我们临床输血的重点[3]。为提高血液输注的安全性，虽然血液检测项目逐渐增加，血液检测技术不断改进，但病毒感染后的“窗口期”问题仍不能解决，血液输注仍无法达到零风险。要从根本上控制经血传播病毒性传染病，对血浆病毒灭活，才能达到安全输血的目的。严格筛选无偿献血者，严把筛选检测关，严把采供血流程中的各个环节，对血浆采用亚甲蓝/光化学灭活病毒。应用亚甲蓝光化学灭活血浆病毒灭活机理[4]：亚甲蓝可与病毒核酸的鸟嘌呤以及病毒的脂质包膜相结合，在可见光的作用下，可使病毒的核酸断裂，包膜破损，使病毒完全失去穿透、复制及感染能力。本文对血浆在亚甲蓝光化学病毒灭活、前灭活后分别检测了血浆清蛋白、血浆Ⅷ因子、纤维蛋白、球蛋白含量符合≥50g/L 的国家标准；检测经亚甲蓝光化学病毒灭活后的HBV-DNA 阳性血浆转为HBV-DNA 阴性，证明亚甲蓝光化学血浆病毒灭活技术，在保证血浆有效成分不受影响的情况下能使脂质包膜病毒和部分非脂质包膜病毒灭活，尤其对HBV 、HCV 、HIV 等病毒灭活效果更为理想。病毒灭活机制明确、效果可靠。目前我站的成分血分离率已达99%以上，临床应用亚甲蓝光化学灭活血浆病毒的方法大大减少了病毒感染的概率，为本市的输血事业做出贡献。 [参考文献] [1]国家药典委员会.中华人民共和国药典(一部)[M].北京:化学工业出版 社,2005:33-35. [2]国家药品监督管理局.血液制品去除/灭活病毒技术方法及验证指导 原则[S].2002,国药监注[2002]160号. [3]钱开诚.荧光与亚甲蓝对血浆中病毒灭活的研究[J].中国消毒学杂志, 2000,17(1):110-111. [4]房景霞,刘鑫,孙绍秋.亚甲蓝光化学法血浆病毒灭活对凝血因子Ⅷ的 影响[J].河北医药,2010,32(15):2108-2109. （收稿日期：2011-03-21） 血浆病毒灭活的临床应用与安全输血 马春黎，宋静 辽宁省铁岭市中心血站，辽宁铁岭 112000 [摘要]目的：推广亚甲蓝光化学灭活血浆病毒的方法，减少经血液传播感染疾病的发生。方法：用亚甲蓝一次性血浆 病毒灭活过滤器和医用病毒灭活箱灭活血浆中病毒。结果：用亚甲蓝光化学法可以灭活血浆中大多脂质包膜病毒，杀灭效果理想。病毒灭活前后血浆球蛋白、清蛋白、血浆Ⅷ因子、纤维蛋白原平均水平对比符合≥50g/L 的国家标准；HBV-DNA 阳性血浆在经病毒灭活后血浆HBV-DNA 转为阴性。结论：亚甲蓝/光化学病毒灭活技术可将血浆中病毒灭活，大大提高了临床输注血浆的安全性。[关键词]血浆；亚甲蓝/光化学法；输血安全[中图分类号]R826.2+6[文献标识码]C [文章编号]1674-4721（2011）05（a ）-165-02165

同种异体植入性医疗器械病毒灭活工艺验证技术审查指导原则

同种异体植入性医疗器械病毒灭活工艺验证技术审查指导原则（2019年修订） （征求意见稿） 一、前言 同种异体植入性医疗器械是以同种来源组织为原料经加工或组成的产品。 我国目前对同种异体植入性医疗器械产品组织供体的病毒筛选多采用检测血清中病毒特异性抗体或抗原的方法，其中对人免疫缺陷病毒（HIV）还要求检测血清中的病毒核酸。但是，尽管对供体进行了严格的筛选，仍然存在漏检和未知病毒污染的风险，以及生产过程中带入外源病毒的风险。因此，要求同种异体植入性医疗器械产品在生产过程中采用有效的病毒灭活工艺，并对病毒灭活工艺的有效性进行科学的验证。 本指导原则是对同种异体植入性医疗器械生产过程中特定病毒灭活工艺的效果进行验证的一般要求，申请人应依据具体产品的特性对注册申报资料的内容进行充实和细化，如采用的病毒灭活工艺及相关参数等，并依据具体产品的特性确定其中的具体内容是否适用。 本指导原则是对申请人和审评人员的指导性文件，但不包括注册审批所涉及的行政事项，亦不作为法规强制执行，如果有能够满足相关法规要求的其他方法，也可以采用，但是需要提供详细的研究资料和验证资料。应在遵循相关法规的前提下使用本指导原则。 本指导原则是在现行法规和标准体系以及当前认知水平下制定的，随着法规和标准的不断完善，以及科学技术的不断发展，本指导

原则相关内容也将进行适时的调整。 本指导原则为2011年发布的《同种异体植入性医疗器械病毒灭活工艺验证技术审查指导原则》的修订版。主要修订内容包括：修改指导原则中相关语言描述；完善指示病毒类型及举例的相关描述；调整病毒灭活/去除有效性验证的原则。 二、适用范围 本指导原则适用于需要对生产过程中特定病毒灭活工艺的效果进行验证的同种异体植入性医疗器械。 三、基本要求 （一）常用的病毒灭活方法 同种异体植入性医疗器械的病毒灭活有多种方法，企业应根据产品的特性选择合适的病毒灭活工艺。采用病毒灭活工艺应综合考虑以下问题，包括病毒灭活效果的验证；病毒灭活工艺对产品性能的影响；病毒灭活工艺本身的公认性、可靠性、重现性、易放大性及经济性。常用的病毒灭活方法举例如下： 1.巴斯德消毒法（巴氏消毒法） 巴氏消毒法是湿热灭活法之一，是国内外公认的病毒灭活方法。该灭活方法可灭活脂包膜和部分非脂包膜病毒。同种异体植入性医疗器械在充分清洗血液及骨髓成分后，可运用该方法进行病毒灭活。采用该方法时应考虑温度分布的均一性和灭活时间。 2.干热灭活法 干热灭活法主要用于冻干制品的病毒灭活。该方法的病毒灭活效果已为实验室验证和临床应用所肯定，可灭活HIV、乙型肝炎病毒

埃博拉病毒综述

“实验动物疾病学”课程论文 埃博拉病毒综述 姓名：杜开乾 学号：81120704 院系：动物医学 专业：公共卫生

埃博拉病毒 概述：埃博拉（Ebola virus）又译作伊波拉病毒。是一种十分罕见的病毒，1976年在苏丹南部和刚果（金）（旧称扎伊尔）的埃博拉河地区发现它的存在后，引起医学界的广泛关注和重视，“埃博拉”由此而得名。是一个用来称呼一群属于纤维病毒科埃博拉病毒属下数种病毒的通用术语。是一种能引起人类和灵长类动物产生埃博拉出血热的烈性传染病病毒，有很高的死亡率，在50%至90%之间，致死原因主要为中风、心肌梗塞、低血容量休克或多发性器官衰竭。 Ebora (Ebola virus) and translated Ebola virus. Is a very rare virus, in 1976 in southern Sultan and Congo (gold) (formerly Zaire) in the Ebora River region to find its existence after the lead。From the medical community's wide attention and attention, "Ebola" from the name. Is a generic term used to refer to a group of viruses belonging to the family of the virus of the family of the virus. Is a can cause human and primate animals have a potent Ebola hemorrhagic fever virus infectious diseases, high mortality, in between 50% to 90%, the cause of death mainly for stroke, myocardial infarction, hypovolemic shock or multiple organ failure. 1 病原学研究进展 1.1 病毒结构 埃博拉病毒（EBoV）属丝状病毒科，长度为970纳米，呈长丝状体，单股负链RNA病毒，有18959个碱基，分子量为4.17×10?。外有包膜，病毒颗粒直径大约80nm，大小100nm×（300～1500）nm，感染能力较强的病毒一般长（665～805）nm左右，有分支形、U形、6形或环形，分支形较常见。有囊膜，表面有（8～10）nm长的纤突，纯病毒粒子由一个螺旋形核糖核壳复合体构成，含负链线性RNA分子和4个毒粒结构蛋白。较长的奇形怪状的病毒粒子相关结构可呈分枝状或盘绕状，长达10微米。来自刚果（金）、象牙海岸和苏丹的埃波拉毒株其抗原性和生物学特性不同。 “埃博拉”病毒的形状宛如中国古代的“如意”，利用电子显微镜对埃博拉病毒属成员的研究显示，其呈现一般纤维病毒的线形结构。病毒粒子也可能出现“U”字、