丙二醛测量方法

硫代巴比妥酸法（丙二醛含量测定）

一：原理

丙二醛(MDA)是常用的膜脂过氧化指标，在酸性和高温度条件下，可以与硫代巴比妥酸(TBA)反应生成红棕色的三甲川(3，5，5—三甲基恶唑-2，4。二酮)，其最大吸收波长在532nm。但是测定植物组织中MDA时受多种物质的干扰，其中最主要的是可溶性糖，糖与TBA显色反应产物的最大吸收波长在450nm，但532nm处也有吸收。植物遭受干旱、高温、低温等逆境胁迫时可溶性糖增加，因此测定植物组织中MDA—TBA反应物质含量时一定要排除可溶性糖的干扰。低浓度的铁离子能够显著增加TBA与蔗糖或MDA显色反应物在532、450nm处的消光度值，所以在蔗糖、MDA与TBA显色反应中需一定量的铁离子，通常植物组织中铁离子的含量为每克千重100—300ug·g-1，根据植物样品量和提取液的体积，加入Fe3+的终浓度为0．5umol·L-1。

二：试剂

1：质量分数为10％三氯乙酸(TCA)；

2：质量分数0.6％硫代巴比妥酸：先加少量的氢氧化钠(1mol·L-1)溶解，再用10％的三氯乙酸定容；

三：方法

1：MDA的提取称取剪碎的试材1g，加入2mll0％TCA和少量石英砂，研磨至匀浆，再加8mlTCA研磨，匀浆在4000r·min-1离心10min，上清液为样品提取液。

2：显色反应和测定吸取离心的上清液2ml(对照加2ml蒸馏水)，加入2ml 0．6％TBA溶液，混匀物于沸水浴上反应15min，迅速冷却后再离心。取上清液测定532、600和450nm波长下的消光度。

四：结果

C1＝11.71D450

C2＝{6.45(D532 - D600) - 0.56D450}NW-1

C1——可溶性糖的浓度(mmol·L-1)

C2——MDA的浓度（·umol·L-1）

D450、0532、D600分别代表450、532和600nm波长下的消光度值。

N:提取液总体积（ml）

W:植物组织鲜重

丙二醛含量测定讲解学习

丙二醛含量测定

实验六、植物组织丙二醛含量测定 植物叶片在衰老过程中发生一系列生理生化变化，如核酸和蛋白质含量下降、叶绿素降解、光合作用降低及内源激素平衡失调等。这些指标在一定程度上反映衰老过程的变化。近来大量研究表明，植物在逆境胁迫或衰老过程中，细胞内活性氧代谢的平衡被破坏而有利于活性氧的积累。活性氧积累的危害之一是引发或加剧膜脂过氧化作用，造成细胞膜系统的损伤，严重时会导致植物细胞死亡。活性氧包括含氧自由基。自由基是具有未配对价电子的原子或原子团。生物体内产生的活性氧主要有超氧自由基(O-2)、羟自由基(OH·)、过氧自由基(ROO·)、烷氧自由基(RO·)、过氧化氢（H2O2）、单线态氧（O21）等。植物对活性氧产生有酶促和非酶促两类防御系统，超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、过氧化物酶POD和抗坏血酸过氧化物酶(ASA—POD)等是酶促防御系统的重要保护酶，抗坏血酸(ASA)和还原型谷胱甘肽(GSH)等是非酶促防御系统中的重要抗氧化剂。 丙二醛(MDA)是细胞膜脂过氧化作用的产物之一，它的产生还能加剧膜的损伤。因此，丙二醛产生数量的多少能够代表膜脂过氧化的程度，也可间接反映植物组织的抗氧化能力的强弱。所以在植物衰老生理和抗性生理研究中，丙二醛含量是一个常用指标。 [原理] 植物组织中的丙二醛(MDA) 在酸性条件下加热可与硫代巴比妥酸(TBA) 产生显色反应，反应产物为粉红色的3，5，5一三甲基恶唑2，4一二酮(Trimet—nine)。该物质在539nm波长下有吸收峰。由

于硫代巴比妥酸也可与其它物质反应，并在该波长处有吸收，为消除硫代巴比妥酸与其它物质反应的影响，在丙二醛含量测定时，同时测定600nm下的吸光度，利用539nm与600nm下的吸光度的差值计算丙二醛的含量。 [材料、仪器、药品] 1．材料：植物抗逆性鉴定实验中的四种菠菜样品，即绿色和黄色叶片的高温处理和室温对照。 2．仪器：(1) 分光光度计；(2) 离心机；（3）水浴锅：(4) 天平；(5) 研钵；(6) 剪刀；(7) 5ml刻度离心管；(9) 刻度试管(10ml)；(10) 镊子；(11) 移液管(5ml、2ml、1ml)；（12）冰箱。 3．药品： (1) 0.05mol/L pH7.8磷酸钠缓冲液； (2) 石英砂； (3) 5％三氯乙酸溶液：称取5g三氯乙酸，先用少量蒸馏水溶解，然后定容到100ml； (4) 0.5％硫代巴比妥酸溶液：称取0.5g硫代巴比妥酸，用5％三氯乙酸溶解，定容至100ml，即为0.5％硫代巴比妥酸的5％三氯乙酸溶液。 [方法] 1．丙二醛的提取：取0.5g样品，加入2ml预冷的0.05mol/L pH7.8的磷酸缓冲液，加入少量石英砂，在经过冰浴的研钵内研磨成匀浆，转移到5ml刻度离心试管，将研钵用缓冲液洗净，清洗也移

丙二醛含量测定

植物组织或器官中丙二醛含量的测定 一、实验目的 二、实验原理： 三、实验仪器：紫外可见分光光度计离心机 四、实验步骤： ●1 MDA的提取称2g叶片，加入10％三氯乙酸(TCA)2ml及少量石英砂，研磨；进一步加入8mlTCA充分研磨，接着把匀浆液以4000r／min离心10min，其上清液即为MDA提取液。 ●2 MDA显色反应及测定取2ml MDA提取液（对照组取2ml 蒸馏水），在加2ml 0.6％TBA混匀，在试管上加棉塞，置沸水中加热15min，迅速拿出水浴锅冷却，以4000r／min离心15min ，于波长532nm和450nm下测定OD值。 五、结果计算 ●以测得的OD532减去OD600的非特异吸收值，分别计算衰老和对照组的值。 MDA浓度(μmol/L)=6.45OD532-0.56OD450 D450、D532分别代表450nm、532nm波长下的光密度值。 六、注意事项： ●0.1-0.5％的三氯乙酸对MDA—TBA反应较合适，若高于此浓度，其反应液的非专一性吸收偏高； ●MDA-TBA显色反应的加热时间，最好控制沸水浴10-15min之间。时间太短或太长均会引起532nm下的光吸收值下降； ●如待测液浑浊，可适当增加离心力及时间。 ●低浓度的铁离子能增强MDA与TBA的显色反应，当植物组织中铁离子浓度过低时应补充Fe3+（最终浓度为0.5 nmol·L-1） ●可溶性糖与TBA显色反应的产物在532 nm也有吸收（最大吸收在450 nm），当植物处于干旱、高温、低温等逆境时可溶性糖含量会增高，必要时要排除可溶性糖的干扰。 丙二醛(MDA)含量的测定 ①测定步骤 称取剪碎的试材1g，加入2ml10%三氯乙酸(TCA)和少量石英砂，研磨至匀浆，再加8mlTCA进一步研磨，匀浆在4000r/min离心10分钟，上清液为样品提取液。吸取离心的上清液2ml(对照加2ml蒸馏水)，加入2ml0.6%硫代巴比妥酸溶液，混匀物于沸水浴上反应15min，迅速冷却后再离心。取上清液测定532、600和450nm波长下的吸光度。 ②计算(3-6)式中：C—MDA的浓度；A450，A532 和A600—分别代表450、532和600nm 波长下的吸光度值。 丙二醛(MDA)含量的测定 丙二醛(MDA)是常用的膜脂过氧化指标，在酸性和高温度条件下，可以与硫代巴比妥酸(TBA)反应生成红棕色的三甲川(3，5，5—三甲基恶唑-2，4。二酮)，其最大吸收波长在532nm。但是测定植物组织中MDA时受多种物质的干扰，其中最主要的是可溶性糖，糖与TBA显色反应产物的最大吸收波长在450nm，但532nm处也有吸收。 关键词：丙二醛含量测定氧化作用MDA膜脂过氧化硫代巴比妥酸TBATBA显色反应 植物器官衰老或在逆境下遭受伤害，往往发生膜脂过氧化作用，丙二醛(MDA)是膜脂过氧化的最终分解产物，其含量可以反映植物遭受逆境伤害的程度。MDA从膜上产生的位置释放出后，可以与蛋白质、核酸反应，从而丧失功能，还可使纤维素分子间的桥键松驰，或抑制蛋白质的合成。因此，MDA的积累可能对膜和细胞造成一定的伤害。 [原理]丙二醛(MDA)是常用的膜脂过氧化指标，在酸性和高温度条件下，可以与硫代巴比妥酸(TBA)反应生成红棕色的三甲川(3，5，5—三甲基恶唑-2，4。二酮)，其最大吸收波长在532nm。但是测定植物组织中MDA时受多种物质的干扰，其中最主要的是可溶性糖，糖与TBA显色反应产物的最大吸收波长在450nm，但532nm处也有吸收。植物遭受干旱、高温、低温等逆境胁

植物组织中丙二醛含量的测定

植物组织中丙二醛含量的测定 实验六逆境下植物细胞膜脂过氧化产物TBARS的提取与含量测定 活性氧(reactive oxygen species，ROS)是机体在生化反应中产生的性质活泼的具有极强的氧化功能、可以导致机体衰老的物质。 自由基的形成有生化、化学、物理等多方面的因素，但主要是来自机体内的生化反应，如各种酶的催化反应等都可以产生大量自由基。此外，一些化学物质空气污染、辐射、运动和心理压力等都会激发活性氧和自由基的产生。机体在氧的利用过程中，会因各种内因性和外因性因素而产生各种活性氧和自由基，这些自由基在维持机体正常代谢中起到积极的作用。 2-生物体内的自由基主要包括超氧阴离子)、羟自由基(O(?OH)、氢自由基(H?)、有机自 1由基(R?)、单线态氧(O)、过氧化氢(H0)、臭氧(O)及脂类过氧化自由基(LOO?)和脂 2223 类自由基(L?)等。 为维持机体的正常功能，抵御各种活性氧和自由基对器官和组织的伤害，体内有各种清 除活性氧和自由基的抗氧化物质，如抗氧化酶类、蛋白质类和抗氧化维生素等。抗氧化酶类 主要包括超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH—Px)、谷胱甘肽转移酶(GRT)等，这些酶是机体内部的第一道防线，但会随着年龄的增长而下降;蛋白质类包括铁传递蛋白、肝球蛋白、血红素结合蛋白等;抗氧化维生素有维生素C、尿酸、a-VE，α-胡萝卜素，β-胡萝卜素。

当活性氧和自由基浓度超过生理限度时，多余的自由基成为有害物质，攻击脂质、蛋白质、糖类和脱氧核糖核酸等大分子物质，发生各种氧化反应，引发各种 氧化损伤，进而导致细胞结构和功能的变化，使机体抵抗力下降，从而导致各种疾病发生，如人体癌症、动脉硬化、心脑血管疾病、肝肾损伤、糖尿病、缺血再灌流障碍等多种疾病。氧化是导致疾病的主要原因之一。如植物受到高温、水渍、低温等不良环境时，从形态上也表现出一系列症状，如萎嫣，叶片变黄，生物量变小等，以及保护酶活性下降等。为了了解生物体的健康状况，有必要对膜脂过氧化产物MDA进行测定。 一、实验目的 1.重点掌握MDA测定的原理和测定方法。 2.了解丙二醛( MDA )在生物体形成的因素。 3.进一步熟悉和掌握分光光度计和离心机的使用方法和注意事项。 二、原理 植物器官在衰老或逆境条件下，生物膜中的不饱和脂肪酸与自由基发生过氧化 反应，使膜中不饱和脂肪酸含量降低，导致膜的流动性下降，透性增大，使膜的正常功能遭到破坏。 ，MDA是膜脂过膜脂过氧化分解的终产物之一是丙二醛(malondialdehyde MDA ) 氧化作用的最终分解产物，其含量可以反映膜脂过氧化的程度，而且其在生物 体内积累还会对膜和细胞造成进一步的伤害，所以MDA的含量可以反映生物体衰老和遭受逆境伤害的程度。 测定原理:丙二醛在酸性和高温条件，可以与硫代巴比妥酸( TBA )反应生成红 棕色的三甲川( 3,5,5 —三甲基恶唑 2,4- 二酮)，在 532 nm 处有最大光吸收， 在 600 nm 处有最小光吸收，据此可测定MDA。可溶性糖干扰该反应，糖与TBA

丙二醛测量方法

硫代巴比妥酸法（丙二醛含量测定） 一：原理 丙二醛(MDA)是常用的膜脂过氧化指标，在酸性和高温度条件下，可以与硫代巴比妥酸(TBA)反应生成红棕色的三甲川(3，5，5—三甲基恶唑-2，4。二酮)，其最大吸收波长在532nm。但是测定植物组织中MDA时受多种物质的干扰，其中最主要的是可溶性糖，糖与TBA显色反应产物的最大吸收波长在450nm，但532nm处也有吸收。植物遭受干旱、高温、低温等逆境胁迫时可溶性糖增加，因此测定植物组织中MDA—TBA反应物质含量时一定要排除可溶性糖的干扰。低浓度的铁离子能够显著增加TBA与蔗糖或MDA显色反应物在532、450nm处的消光度值，所以在蔗糖、MDA与TBA显色反应中需一定量的铁离子，通常植物组织中铁离子的含量为每克千重100—300ug·g-1，根据植物样品量和提取液的体积，加入Fe3+的终浓度为0．5umol·L-1。 二：试剂 1：质量分数为10％三氯乙酸(TCA)； 2：质量分数0.6％硫代巴比妥酸：先加少量的氢氧化钠(1mol·L-1)溶解，再用10％的三氯乙酸定容； 三：方法 1：MDA的提取称取剪碎的试材1g，加入2mll0％TCA和少量石英砂，研磨至匀浆，再加8mlTCA研磨，匀浆在4000r·min-1离心10min，上清液为样品提取液。

2：显色反应和测定吸取离心的上清液2ml(对照加2ml蒸馏水)，加入2ml 0．6％TBA溶液，混匀物于沸水浴上反应15min，迅速冷却后再离心。取上清液测定532、600和450nm波长下的消光度。 四：结果 C1＝11.71D450 C2＝{6.45(D532 - D600) - 0.56D450}NW-1 C1——可溶性糖的浓度(mmol·L-1) C2——MDA的浓度（·umol·L-1） D450、0532、D600分别代表450、532和600nm波长下的消光度值。 N:提取液总体积（ml） W:植物组织鲜重

丙二醛含量测定

植物组织中丙二醛含量测定 方法一： 一、目的 通过实验，掌握植物体内丙二醛含量测定的原理及方法。 二、原理 丙二醛（MDA）是由于植物官衰老或在逆境条件下受伤害，其组织或器官膜脂质发生过氧化反应而产生的。它的含量与植物衰老及逆境伤害有密切关系。测定植物体内丙二醛含量，通常利用硫代巴比妥酸(TBA)在酸性条件下加热与组织中的丙二醛产生显色反应，生成红棕色的三甲川（3、5、5－三甲基恶唑2、4－二酮），三甲川最大的吸收波长在532nm。但是测定植物组织中MDA时受多种物质的干扰，其中最主要的是可溶性糖，糖与硫代巴比妥酸显色反应产物的最大吸收波长在450nm处，在532nm处也有吸收。植物遭受干旱、高温、低温等逆境胁迫时可溶性糖增加，因此测定植物组织中丙二醛与硫代巴比妥酸反应产物含量时一定要排除可溶性糖的干扰。此外在532nm波长处尚有非特异的背景吸收的影响也要加以排除。低浓度的铁离子能显著增加硫代巴比妥酸与蔗糖或丙二醛显色反应物在532、450nm处的吸光度值，所以在蔗糖、丙二醛与硫代巴比妥酸显色反应中需要有一定的铁离子，通常植物组织中铁离子的含量为100－300μg·g－1Dw，根据植物样品量和提取液的体积，加入Fe3＋的终浓度为0.5nmol· L－1。在532nm、600nm和450nm波长处测定吸光度值，即可计算出丙二醛含量。 三、材料、仪器设备及试剂 1. 材料：植物叶片。 2. 仪器设备：离心机，分光光度计；电子分析天平；恒温水浴；研钵；试管；移液管（1ml、5ml）、试管架；移液管架；洗耳球；剪刀。 3. 试剂：10％三氯乙酸；0.6％硫代巴比妥酸（TBA）溶液：石英砂。 四、实验步骤 1. 丙二醛的提取 称取受干旱、高温、低温等逆境胁迫的植物叶片1g，加入少量石英砂和10％三氯乙酸2ml，研磨至匀浆，再加8ml10％三氯乙酸进一步研磨，匀浆以4000r/min离心10min，其上清液为丙二醛提取液。 2. 显色反应及测定 取4支干净试管，编号，3支为样品管（三个重复），各加入提取液2ml，对照管加蒸馏水2ml，然后各管再加入2ml 0.6％硫代巴比妥酸溶液。摇匀，混合液在沸水浴中反应15 min，迅速冷却后再离心。取上清液分别在532、600和450nm波长下测定吸光度（A）值。

植物组织MDA含量测定

植物组织MDA 含量测定 一、目的要求 1．掌握植物组织MDA 含量测定的原理及具体测量步骤； 2．深化理解MDA 与逆境和衰老的关系，理解植物组织MDA 含量测定的意义； 3．了解膜脂过氧化、氧自由基和MDA 形成的关系； 4．能够根据待测材料的具体情况设计实验步骤测定MDA 含量； 5．学习分光光度计，低温离心机等仪器的使用方法。 二、实验原理 植物遭受逆境胁迫或衰老时，体内会发生一系列生理生化变化，如核酸和蛋白质含量下降、叶绿素降解、光合作用降低，活性氧平衡失调及内源激素平衡失调等。活性氧代谢失调直接导致植物体内活性氧的大量积累，从而引发或加剧膜脂过氧化作用，造成细胞膜系统的损伤，严重时会导致植物细胞死亡。 膜脂过氧化的产物有二烯轭合物、脂类过氧化物、丙二醛、乙烷等。其中丙二醛（Malondialdehyde ，MDA ）是膜脂过氧化最重要的产物之一，它的产生还能加剧膜的损伤。因此在植物衰老生理和抗性生理研究中，MDA 含量是一个常用指标，可通过测定MDA 了解膜脂过氧化的程度，以间接测定膜系统受损程度以及植物的抗逆性。 MDA 在高温及酸性环境下可与2-硫代巴比妥酸（TBA ）反应，产生红棕色的产物3,5,5-三甲基恶唑2,4-二酮（Trimet —nine ），又名三甲川，该物质在532nm 处有最大光吸收，在600nm 处有最小光吸收。由于TBA 也可与其它物质反应，并在532nm 处有吸收，为消除硫代巴比妥酸与其它物质反应的影响，同时测定600nm 下的吸光度，利用532nm 与600nm 下的吸光度的差值计算MDA 的浓度。 即：A 532－A 600＝ε·C ·L 式中，A 532和A 600分别表示532nm 和600nm 处的吸光度值，C 是MDA 浓度，L 为比色杯厚度，ε=155L·mmol -1·cm -1。 + 100 C O H N S N H O O O H H H N H S N H O O H O OH N N H S 2O TB A MDA 3,5,5-三甲基恶唑2,4-二酮 需要指出的是，植物组织中糖类物质可能对MDA-TBA 反应有干扰作用。可用下列公式消除由蔗糖引起的误差。

丙二醛含量测定

实验六、植物组织丙二醛含量测定 植物叶片在衰老过程中发生一系列生理生化变化，如核酸和蛋白质含量下降、叶绿素降解、光合作用降低及内源激素平衡失调等。这些指标在一定程度上反映衰老过程的变化。近来大量研究表明，植物在逆境胁迫或衰老过程中，细胞内活性氧代谢的平衡被破坏而有利于活性氧的积累。活性氧积累的危害之一是引发或加剧膜脂过氧化作用，造成细胞膜系统的损伤，严重时会导致植物细胞死亡。活性氧包括含氧自由基。自由基是具有未配对价电子的原子或原子团。生物体内产生的活性氧主要有超氧自由基(O-2)、羟自由基(OH·)、过氧自由基(ROO·)、烷氧自由基(RO·)、过氧化氢（H2O2）、单线态氧（O21）等。植物对活性氧产生有酶促和非酶促两类防御系统，超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、过氧化物酶POD和抗坏血酸过氧化物酶(ASA—POD)等是酶促防御系统的重要保护酶，抗坏血酸(ASA)和还原型谷胱甘肽(GSH)等是非酶促防御系统中的重要抗氧化剂。 丙二醛(MDA)是细胞膜脂过氧化作用的产物之一，它的产生还能加剧膜的损伤。因此，丙二醛产生数量的多少能够代表膜脂过氧化的程度，也可间接反映植物组织的抗氧化能力的强弱。所以在植物衰老生理和抗性生理研究中，丙二醛含量是一个常用指标。 [原理] 植物组织中的丙二醛(MDA) 在酸性条件下加热可与硫代巴比妥酸(TBA) 产生显色反应，反应产物为粉红色的3，5，5一三甲基恶唑2，4一二酮(Trimet—nine)。该物质在539nm波长下有吸收峰。由于硫代巴比妥酸也可与其它物质反应，并在该波长处有吸收，为消除硫代巴比妥酸与其它物质反

应的影响，在丙二醛含量测定时，同时测定600nm下的吸光度，利用539nm 与600nm下的吸光度的差值计算丙二醛的含量。 [材料、仪器、药品] 1．材料：植物抗逆性鉴定实验中的四种菠菜样品，即绿色和黄色叶片的高温处理和室温对照。 2．仪器：(1) 分光光度计；(2) 离心机；（3）水浴锅：(4) 天平；(5) 研钵；(6) 剪刀；(7) 5ml刻度离心管；(9) 刻度试管(10ml)；(10) 镊子； (11) 移液管(5ml、2ml、1ml)；（12）冰箱。 3．药品： (1) L 磷酸钠缓冲液； (2) 石英砂； (3) 5％三氯乙酸溶液：称取5g三氯乙酸，先用少量蒸馏水溶解，然后定容到100ml； (4) ％硫代巴比妥酸溶液：称取硫代巴比妥酸，用5％三氯乙酸溶解，定容至100ml，即为％硫代巴比妥酸的5％三氯乙酸溶液。 [方法] 1．丙二醛的提取：取样品，加入2ml预冷的L 的磷酸缓冲液，加入少量石英砂，在经过冰浴的研钵内研磨成匀浆，转移到5ml刻度离心试管，将研钵用缓冲液洗净，清洗也移入离心管中，最后用缓冲液定容至5ml。在4500转/min离心10min。上清液即为丙二醛提取液。 2．丙二醛含量测定：吸取2 ml的提取液于刻度试管中，加入％硫代巴比妥酸的5%三氯乙酸溶液3ml，于沸水浴上加热10min，迅速冷却。于4500

实验7-2 丙二醛含量测定

实验7-2 丙二醛（MDA）含量测定 【实验目的】 1、掌握植物组织中丙二醛含量测定的原理和方法。 2、了解丙二醛含量测定的意义。 【实验原理】 植物器官在衰老或逆境胁迫时，会发生脂质过氧化作用，丙二醛（MDA）是其终产物之一，其含量可以反映脂类过氧化程度和植物遭受逆境伤害的程度。 在高温和酸性条件下，丙二醛与硫代巴比妥酸（TBA）反应，生成红棕色的3，5，5-三甲基恶唑-2，4-二酮（三甲川），在532nm处有最大吸收波长。植物在胁迫条件下可溶性糖增加，而糖与硫代巴比妥酸的反应产物在532nm也有吸收（最大吸收波长为450nm），因此测定植物组织中丙二醛含量时需排除可溶性糖的干扰。 采用双组分分光光度法可分别求出丙二醛和可溶性糖的含量。蔗糖与TBA反应产物在450 nm和532nm的摩尔吸收系数分别为85.40和7.40；丙二醛与TBA反应产物在450 nm和532nm的摩尔吸收系数分别为0和155000，根据Lambert-Beer定律，列出二元一次方程： A450=C1×85.4 A532- A600=C1×7.4+ C2×155000 解此方程得： C1（mmol/L）=11.71 A450 C2（μmol/L）=6.45（A532- A600）-0.56 A450 （1）其中：C1——可溶性糖的浓度 C2——丙二醛的浓度 A450、 A532、A600分别表示450、532和600nm波长下的吸光值。【实验器材与试剂】 1、实验材料受逆境胁迫的植物叶片或衰老的植物器官、正常植物叶片或器官 2、实验试剂 10%的三氯乙酸（TCA）（称取10克TCA蒸馏水稀释定容至100mL）、石英砂、0.6%的硫代巴比妥酸（称取0.6克硫代巴比妥酸先用少量1mol/L氢氧化钠溶解，再用10%三氯乙酸定容至100mL） 3、实验仪器分光光度计、离心机、研钵、电炉、试管、量筒、天

植物体内丙二醛含量的测定

植物体内丙二醛含量的测定 一、目的 通过实验，掌握植物体内丙二醛含量测定的原理及方法。 二、原理 丙二醛（MDA）是由于植物官衰老或在逆境条件下受伤害，其组织或器官膜脂质发生过氧化反应而产生的。它的含量与植物衰老及逆境伤害有密切关系。测定植物体内丙二醛含量，通常利用硫代巴比妥酸(TBA)在酸性条件下加热与组织中的丙二醛产生显色反应，生成红棕色的三甲川（3、5、5－三甲基恶唑2、4－二酮），三甲川最大的吸收波长在532nm。但是测定植物组织中MDA时受多种物质的干扰，其中最主要的是可溶性糖，糖与硫代巴比妥酸显色反应产物的最大吸收波长在450nm处，在532nm处也有吸收。植物遭受干旱、高温、低温等逆境胁迫时可溶性糖增加，因此测定植物组织中丙二醛与硫代巴比妥酸反应产物含量时一定要排除可溶性糖的干扰。此外在532nm波长处尚有非特异的背景吸收的影响也要加以排除。低浓度的铁离子能显著增加硫代巴比妥酸与蔗糖或丙二醛显色反应物在532、450nm处的吸光度值，所以在蔗糖、丙二醛与硫代巴比妥酸显色反应中需要有一定的铁离子，通常植物组织中铁离子的含量为100－300μg·g－1Dw，根据植物样品量和提取液的体积，加入Fe3＋的终浓度为0.5nmol· L－1。在532nm、600nm和450nm波长处测定吸光度值，即可计算出丙二醛含量。 三、材料、仪器设备及试剂 1. 材料：植物叶片。 2. 仪器设备：离心机，分光光度计；电子分析天平；恒温水浴；研钵；试管；移液管（1ml、5ml）、试管架；移液管架；洗耳球；剪刀。 3. 试剂：10％三氯乙酸；0.6％硫代巴比妥酸（TBA）溶液：石英砂。 四、实验步骤 1. 丙二醛的提取 称取受干旱、高温、低温等逆境胁迫的植物叶片1g，加入少量石英砂和10％三氯乙酸2ml，研磨至匀浆，再加8ml10％三氯乙酸进一步研磨，匀浆以4000r/min离心10min，其上清液为丙二醛提取液。 2. 显色反应及测定 取4支干净试管，编号，3支为样品管（三个重复），各加入提取液2ml，对照管加蒸馏水2ml，然后各管再加入2ml 0.6％硫代巴比妥酸溶液。摇匀，混合液在沸水浴中反应15min，迅速冷却后再离心。取上清液分别在532、600和450nm波长下测定吸光度（A）值。 五、丙二醛含量计算： 由于蔗糖－TBA反应产物的最大吸收波长为450nm，毫摩尔吸收系数为85.4×10－3，MDA －TBA反应产物在532nm的毫摩尔吸收系数分别是7.4×10－3和155×10－3。532nm非特异性吸光值可以600nm波长处的吸光值代表。 按双组分分光光度法原理，建立方程组，解此方程组即可求出MDA及可溶性糖浓度。方程组： A450=（85.4×10－3）·C糖 （A532－A600）=（155×10－3）·C MDA+（7.4×10－3）·C糖 解得： A450 C糖= —————— = 11.71A450（mmol·L－1） 85.4×10－3

实验三 丙二醛含量测定

实验三丙二醛含量测定 一、实验目的： 熟悉测定丙二醛含量的常用方法。 二、实验原理 植物在盐胁迫下，往往发生膜脂过氧化作用，丙二醛是其产物之一，通常将其作为脂质过氧化指标，用于表示细胞膜脂过氧化程度和植物对逆境条件反应的强弱。丙二醛（MDA）是常用的膜脂过氧化指标，在酸性和高温度条件下，可以与硫代巴比妥酸（TBA）反应生成红棕色的3,5,5-三甲基恶唑2,4-二酮（三胛川），其最大吸收波长在532nm。但是测定植物组织中MDA时受多种物质的干扰，其中最主要的是可溶性糖，糖与TBA显色反应产物的最大吸收波长在450nm，532nm处也有吸收。植物遭受干旱、高温、低温等逆境胁迫时可溶性糖增加，因此测定植物组织中MDA—TBA反应物质含量时一定要排除可溶性糖的干扰。 三、仪器与试剂 分光光度计；离心机；电子天平；研钵两套；试管。 10%三氯乙酸（TCA）；0.6%硫代巴比妥酸；石英砂。 四、实验步骤 1.丙二醛提取 小麦叶片0.5g，加入10﹪三氯乙酸(TCA)5mL(分两次加)和少量石英砂充分研磨，匀浆液以5000r/min离心10min，上清液即为样品提取液。 2.反应体系 取2mL提取液，分别加入2mL 0.6﹪TBA液，混匀，在试管

上加盖塞，置于沸水浴中沸煮15min，迅速冷却，离心。取上清液测定532nm和450nm下的A值。以2mL水代替提取液调零。 3.MDA含量计算： 根据C＝6.45×A532－0.56×A450，计算出样品提取液中丙二醛的浓度C（μmol/L），然后再计算出每克样品中丙二醛的含量(μmol/gFW)。并对数据进行方差分析。

植物丙二醛(MDA)检测试剂盒(TBA比色法)

植物丙二醛(MDA)检测试剂盒(TBA比色法) 简介： 动物或植物细胞发生氧化应激(oxidative stress)时，会发生脂质氧化。丙二醛(Malondialdehyde, MDA)是一种生物体脂质氧化的天然产物，一些脂肪酸氧化后逐渐分解为一系列包括MDA在内的复杂化合物，此时通过检测MDA的水平即可检测脂质氧化的水平，因此MDA的测定被广泛用作脂质氧化的指标。生物体内的一些其它生化反应也会产生MDA，例如thromboxane synthase也可以催化产生，但只要在测定时设置适当对照即可观察到脂质氧化水平的变化。 植物丙二醛(MDA)检测试剂盒(TBA比色法)(Plant MDA Assay Kit with TBA)又称脂质氧化(MDA)检测试剂盒，是采用一种基于MDA和硫代巴比妥酸(thiobarbituric acid, TBA)反应产生红色产物的显色反应，随后通过比色法用于对植物组织(根、茎、叶、种子等)MDA进行检测，是专门用于植物脂质氧化(lipid peroxidation)水平检测的试剂盒，不适用于动物组织、细胞、血液等。丙二醛在较高温度及酸性环境中可与TBA发生反应，形成红色的MDA-TBA加合物，MDA-TBA加合物在有最大吸收，该复合物的吸光系数为155mmol/(L.cm)，并且在长处有最小吸收。植物组织中糖类物质对MDA-TBA反应有干扰，我们总结出经验公式，以消除这一干扰。亦可以通过比标准品进行比较，进行含量检测。本试剂盒仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。 组成： 自备材料： 1、植物根茎、叶子等 2、剪刀 3、离心管、小试管或96孔板 4、分光光度计或酶标仪 5、水浴锅或恒温箱 6、离心机 操作步骤(仅供参考)：编号 名称TO1023 50T TO1023 100T Storage 试剂(A): 组织匀浆液250ml 500ml RT 避光试剂(A): TBA 0.35g 0.7g RT 避光试剂(C): 抗氧化剂0.5ml 1ml 4℃ 试剂(D): MDA标准品(1mmol/L) 0.5ml 1ml -20℃避光使用说明书

SOD POD CAT MDA的测定方法

缩写：SOD：超氧化物歧化酶； CAT：过氧化氢酶； POD：过氧化物酶； MDA：丙二醛；PVP：聚乙烯吡咯烷铜K-30；L-Met：甲硫氨酸；NBT：氮蓝四唑；TBA：硫代巴比妥酸；TCA：三氯乙酸；PBS: 磷酸缓冲液 1.SOD的测定方法 加样顺序：（V=3ml）磷酸缓冲液：1.5ml L-Met: 0.3ml NBT: 0.3ml EDTA-Na2: 0.3ml 核黄素：0.3ml 酶液：0.05ml 蒸馏水：0.25ml 试剂配制： (1) 0.05mol/L PBS：pH7.8 (2) 130mmol/L L-Met: 1.9399g Met用PBS定容至100ml (3) 750mmol/L NBT: 0.06133g用PBS定容至100ml(避光保存) (4) 100umol/L EDTA-Na2: 0.03721g用PBS定容至1000ml (5) 20umol/L核黄素: 0.0753g用蒸馏水定容至1000ml(避光保存) 注：（1）对照：以加缓冲液、不照光为空白；照光的为最大还原管 (2) 照光后至显蓝色要立即避光放置、迅速测定A560值 2.MDA的测定方法 试剂配制： （1）5% TCA： 5g用蒸馏水定容至500ml （2）0.5% TBA：2.5g用TCA定容至500ml 方法： 酶液1ml—3ml0.5%TBA和5%TCA—混合后在100度水浴煮沸15min—迅速冷却，10000r/min离心10min—用蒸馏水调零分别测定上清液在

532nm、600nm处的吸收值 3.POD的测定方法 试剂配制： （1）0.1mol/L的醋酸缓冲液：8.8mlA+41.2mlB得到100mlph5.4的醋酸缓冲液 A(0.2mmol/L的HAc溶液)—6ml冰醋酸溶到494ml蒸馏水中 B(0.2mmol/L的NaAc溶液)—13.6gNaAc.3H2O （2）0.25%愈创木酚溶液—125um愈创木酚溶于50ml 50%乙醇中（临用前配制） （3）0.75%H2O2溶液：1.25ml 30% H2O2定容至50ml（临用前配制）方法：比色杯中依次加入2ml 0.1mol/L的醋酸缓冲液—1ml 0.25%愈创木酚溶液—xml酶液（5min值为500-800即可）—0.1ml 0.75%H2O2溶液—迅速巅到混匀把A460调零并开始计时—1次/30s,连续读取3min 4.CAT的测定方法 试剂配制： (1) 50mmol/L的PBS（pH7.0） (2) 0.3% H2O2—1ml H2O2定容至100ml 方法：(1)以不加H2O2的50mmol/L的PBS（pH7.0）为空白把A240调零 (2)50ul酶液—3ml 50mmol/L的PBS（pH7.0）—0.2ml 0.3% H2O2—迅速颠倒混匀，开始计时—1min后在240nm下比色，1次/1min(连续读取5min)

丙二醛检测试剂盒(TBA荧光法)

丙二醛(MDA)检测试剂盒(TBA 荧光法) 简介： 动物或植物细胞发生氧化应激(oxidative stress)时，会发生脂质氧化。丙二醛(Malondialdehyde, MDA)是一种生物体脂质氧化的天然产物，一些脂肪酸氧化后逐渐分解为一系列包括MDA 在内的复杂化合物，此时通过检测MDA 的水平即可检测脂质氧化的水平，因此MDA 的测定被广泛用作脂质氧化的指标。生物体内的一些其它生化反应也会产生MDA ，例如thromboxane synthase 也可以催化产生，但只要在测定时设置适当对照即可观察到脂质氧化水平的变化。 丙二醛(MDA)检测试剂盒(TBA 荧光法，MDA Assay Kit)又称脂质氧化(MDA)检测试剂盒，是采用一种基于MDA 和硫代巴比妥酸(thiobarbituric acid, TBA)反应产生红色产物的显色反应，随后通过荧光比色法用于对血浆、血清、尿液、动植物组织或细胞裂解液中MDA 进行定量检测，广泛用于脂质氧化(lipid peroxidation)水平检测。丙二醛在较高温度及酸性环境中可与TBA 发生反应，形成红色的MDA-TBA 加合物，MDA-TBA 加合物在处有最大吸收，以为激发光，据此可以通过荧光比色法进行检测。本试剂盒仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。 组成： 自备材料： 1、 蒸馏水 2、 离心管、小试管或96孔板 3、 荧光分光光度计或荧光酶标仪 4、 水浴锅或恒温箱 5、 离心机 操作步骤(仅供参考)： 1、 样本处理： ①血清、血浆、尿液、脑脊液样本：从待测样本中分理出的血清或血浆不应有溶血。取待 编号 名称 TO1015 50T TO1015 100T Storage 试剂(A): TBA 0.4g 0.8g RT 避光 试剂(B): TBA 稀释液 50ml 100ml RT 避光 试剂(C): 抗氧化剂 2.5ml 5ml 4℃ 试剂(D): MDA 标准品(1mmol/L) 0.2ml 0.4ml -20℃ 避光 使用说明书 说明书

丙二醛MDA、总抗氧化能力、超氧化物歧化酶(SOD)的测定

丙二醛MDA、总抗氧化能力、超氧化物歧化酶（SOD）的 测定 丙二醛MDA测定 测试所需仪器设备： 可见光分光光度计，可调到95℃左右的恒温水浴箱（或者铝锅内放几个去掉盖子的易拉罐，将罐壁及底部穿数十个孔，以便水的进入，用来代替水浴箱）。离心机。 100Ｔ试剂盒组成与配制： 试剂一：液体20mL*1瓶，室温保存．（天冷时会凝固，每次测试前适当水浴加温以加速溶解，直至透明方可应用）。 试剂二：液体12mL*1瓶，用时每瓶加340mL双蒸水混匀，4℃冷藏。试剂三：粉剂*1支，4℃冷藏。 1.按规范操作方法来配制MDA3号试剂：将1支100Ｔ的MDA3号 粉剂倒入烧杯内加90℃～100℃的热蒸馏水64mL,充分溶解 （溶解过程中可适当加热）。冷却后加冰醋酸60mL混匀。 2.再将上述配好的MDA3号试剂用50％冰醋酸按2：1进行稀释， 用多少配多少。 例如您需要用微量法测MDA需要试剂三为15mL，则可以取上 述按规范操作法配好的试剂三10mL加冰醋酸5mL，混匀即可。 配好的试剂避光4℃冰箱冷藏（冰醋酸自备）

注：因蒸馏水热胀冷缩，加热过程要蒸发，本应加60mL现多加 4mL，冷却后在60mL。 50％冰醋酸的配制是50mL双蒸水加50mL冰醋酸混合而成的。 冰醋酸又名乙酸，一般的医药公司、化剂公司均有售，要购AR级分析纯级的乙酸较好，乙酸含量为99％以上。 用时将粉剂加入到90℃～100℃的热双蒸水60mL中，（在溶解过程中可适当加热），充分溶解后用双蒸水补足至60mL再加冰醋酸 60mL，混匀，配好的试剂避光冷藏。冰醋酸自备。 标准品：10nmoL/mL四乙氧基丙烷5mL*1瓶，4℃冷藏。 测试盒冷藏至少可保存一年。 操作步骤： 混匀（摇动几下试管架）

丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量试剂盒说明书

货号：MS1401 规格：100管/96样丙二醛(malondialdehyde，MDA)含量试剂盒说明书 微量法 正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定 测定意义： 氧自由基作用于脂质的不饱和脂肪酸，生成过氧化脂质；后者逐渐分解为一系列复杂的化合物，其中包括MDA。通过检测MDA的水平即可检测脂质氧化的水平。 测定原理： MDA与硫代巴比妥酸(thiobarbituric acid，TBA)缩合，生成红色产物，在532nm有最大吸收峰，进行比色后可估测样品中过氧化脂质的含量；同时测定600nm下的吸光度，利用532nm 与600nm下的吸光度的差值计算MDA的含量。 自备实验用品及仪器： 可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。 试剂的组成和配置： 提取液：液体100mL×1瓶，4℃保存； 试剂一：液体30mL×1瓶，4℃保存； 注意事项： 临用前注意试剂一是否完全溶解，如未溶解，可以70℃-90℃加热，并振荡以促进溶解。 MDA提取： 1、细菌、细胞或组织样品的制备： 细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（104个）：提取液体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细菌或细胞加入1mL提取液），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次）；8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。 组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL提取液），进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。 2、血清（浆）样品：直接检测。 测定步骤： 1、吸取0.3mL 试剂一于1.5mL离心管中，再加入0.1mL样本, 混匀。 2、95℃水浴中保温30min（盖紧，防止水分散失），置于冰浴中冷却，10000g，25℃，离心10min。 3、吸取200μL上清液于微量石英比色皿或96孔板中，测定532nm和600nm处的吸光度，记为A532和A600，ΔA= A532-A600。 MDA含量计算： a. 用微量石英比色皿测定的计算公式如下 1、血清（浆）中MDA含量的计算： MDA含量(nmol/ mL)=[ ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷V样=25.8×ΔA 2、细菌、细胞或动物组织中MDA含量计算 第1页，共2页

丙二醛(MDA)检测试剂盒(TBA微板法)

丙二醛(MDA)检测试剂盒(TBA 微板法) 简介： 动物或植物细胞发生氧化应激(oxidative stress)时，会发生脂质氧化。丙二醛(Malondialdehyde, MDA)是一种生物体脂质氧化的天然产物，一些脂肪酸氧化后逐渐分解为一系列包括MDA 在内的复杂化合物，此时通过检测MDA 的水平即可检测脂质氧化的水平，因此MDA 的测定被广泛用作脂质氧化的指标。 丙二醛(MDA)检测试剂盒(TBA 微板法，MDA Assay Kit)又称脂质氧化(MDA)检测试剂盒，是采用一种基于MDA 和硫代巴比妥酸(thiobarbituric acid, TBA)反应产生红色产物的显色反应，特别适用于微量样本的检测。丙二醛在较高温度及酸性环境中可与TBA 发生反应，形成红色的MDA-TBA 加合物，MDA-TBA 加合物在535nm 处有最大吸收，据此可以通过比色法进行检测。本试剂盒仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。 组成： 操作步骤(仅供参考)： 1、 样本处理： ①血清、血浆、尿液、脑脊液样本：从待测样本中分理出的血清或血浆不应有溶血，直接检测，如超过线性范围，用生理盐水稀释后检测。 ②组织、细胞等样本：组织或细胞可以使用PBS 或Leagene Western 及IP 细胞裂解液等进行匀浆或裂解。匀浆或裂解组织时，组织重量占匀浆液或裂解液的比例应为10%；对于细胞，每106个细胞使用0.1ml 裂解液或匀浆液。匀浆或裂解后，取上清用于后续测定。匀浆或裂解等样品制备步骤宜在冰浴或4℃进行操作。样品准备完毕后可以用BCA 蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度，以便于后续计算单位蛋白重量组织或细胞内的MDA 含量。 编号 名称 TO1011 100T Storage 试剂(A): TBA 40mg RT 避光 试剂(C): 抗氧化剂 300μl RT 避光 试剂(D): MDA 标准品(1mmol/L) 200μl -20℃ 避光 试剂(E): MDA 检测液 100ml RT 避光 使用说明书 1份

植物组织中丙二醛含量的测定

植物组织中丙二醛含量的测定 一、原理 植物器官衰老或在逆境下遭受伤害，往往发生膜脂过氧化作用，丙二醛(malondialdehydeMDA)是膜脂过氧化作用的产物之一，其含量可以反映植物遭受逆境伤害的程度。 丙二醛在酸性和高温条件，可以与硫代巴比妥酸(TBA)反应,形成在532nm波长处有最大光吸收的有色三甲基复合物，该复合物的吸光系数为155mmol/(L·cm)，并且在600nm处有最小光吸收。可按公式： A532－A600=155000×C×L① 算出MDA浓度C(μmol/L)，进一步算出单位质量组织中 MDA 含量(μmol/g)。式中A532和A600分别表示532nm和600nm处的吸光度值。L为比色杯厚度(cm )。 需要指出的是，植物组织中糖类物质对MDA-TBA反应有干扰作用。为消除这种干扰，经试验，可用下列公式消除由蔗糖引起的误差。 C(μmol/L)=6.45(A532－A600)?0.56A450② 式中：A450、A532和A600分别表示450nm、532nm 和600nm波长下的吸光度值。用公式②算出植物样品提取液中MDA的浓度后，进一步算出其在植物组织中的含量。 二、实验材料、试剂与仪器设备 （一）实验材料 海滨锦葵叶片。 （二）试剂 1、5%三氯乙酸(TCA)。 2、0.67%（W/V）硫代巴比妥酸(TBA)溶液：称取硫代巴比妥酸0.67g溶于10％TCA溶解并用其定容至l00mL 。 （三）仪器设备 研钵，恒温水浴锅，分光光度计，冷冻离心机，天平，刻度试管，可调加样器 三、实验步骤 1.MDA的提取：称取植物材料0.5g，剪碎，加入5%TCA5mL，研磨至匀浆，匀浆在3000r/min 离心10min，上清液为样品提取液。 2. 显色反应和测定：吸取离心的上清液2mL，加入2 mL0.67%TBA溶液，摇匀。将试管放入沸水浴中煮沸10min(自试管内溶液中出现小气泡开始计时)，取出试管并冷却，3000r/min 再离心15 min。 3．取上清液并量其体积。以0.67％TBA 溶液为空白测定532nm、600nm和450nm处的吸光

植物组织中丙二醛含量的测定

实验六逆境下植物细胞膜脂过氧化产物TBARS的提取与含量测定活性氧(reactive oxygen species，ROS)是机体在生化反应中产生的性质活泼的具有极 强的氧化功能、可以导致机体衰老的物质。 自由基的形成有生化、化学、物理等多方面的因素，但主要是来自机体内的生化反应，如各种酶的催化反应等都可以产生大量自由基。此外，一些化学物质空气污染、辐射、运动和心理压力等都会激发活性氧和自由基的产生。机体在氧的利用过程中，会因各种内因性和外因性因素而产生各种活性氧和自由基，这些自由基在维持机体正常代谢中起到积极的作用。 生物体内的自由基主要包括超氧阴离子(O2-)、羟自由基(·OH)、氢自由基(H·)、有机自由基(R·)、单线态氧(1O2)、过氧化氢(H202)、臭氧(O3)及脂类过氧化自由基(LOO·)和脂类自由基(L·)等。 为维持机体的正常功能，抵御各种活性氧和自由基对器官和组织的伤害，体内有各种清除活性氧和自由基的抗氧化物质，如抗氧化酶类、蛋白质类和抗氧化维生素等。抗氧化酶类主要包括超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢(CA T)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH—Px)、谷 胱甘肽转移酶(GRT)等，这些酶是机体内部的第一道防线，但会随着年龄的增长而下降；蛋白质类包括铁传递蛋白、肝球蛋白、血红素结合蛋白等；抗氧化维生素有维生素C、尿酸、a-VE，α-胡萝卜素，β-胡萝卜素。 当活性氧和自由基浓度超过生理限度时，多余的自由基成为有害物质，攻击脂质、蛋白质、糖类和脱氧核糖核酸等大分子物质，发生各种氧化反应，引发各种氧化损伤，进而导致细胞结构和功能的变化，使机体抵抗力下降，从而导致各种疾病发生，如人体癌症、动脉硬化、心脑血管疾病、肝肾损伤、糖尿病、缺血再灌流障碍等多种疾病。氧化是导致疾病的主要原因之一。如植物受到高温、水渍、低温等不良环境时，从形态上也表现出一系列症状，如萎嫣，叶片变黄，生物量变小等，以及保护酶活性下降等。为了了解生物体的健康状况，有必要对膜脂过氧化产物MDA进行测定。 一、实验目的 1.重点掌握MDA测定的原理和测定方法。 2.了解丙二醛（ MDA ）在生物体形成的因素。 3.进一步熟悉和掌握分光光度计和离心机的使用方法和注意事项。 二、原理