胰岛素、肾上腺素对血糖浓度的影响实验设计

胰岛素、肾上腺素对血糖浓度的影响

【实验目的】

观察胰岛素和肾上腺素对家兔血糖浓度的影响。

掌握血糖浓度的测定方法。

掌握血糖浓度的正常参考值、了解血糖测定的临床意义。

【实验原理】

血清中的糖称为血糖,绝大多数情况下都是葡萄糖。体内各组织细胞活动所需的能量大部分来自葡萄糖,所以血糖必须保持一定的水平才能维持体内各器官和组织的需要。正常人在清晨空腹血糖浓度为80~120毫克/100ml。

使血糖浓度降低的激素:胰岛素

胰岛素对血糖的调节机制,首先是使肌肉和脂肪组织细胞膜对葡萄糖的通透性增加,利于血糖进入这些组织进行代谢。胰岛素还能诱导葡萄糖激酶、磷酸果糖激酶和丙酮酸激酶的合成,医学教|育网搜集整理加速细胞内葡萄糖的分解利用。胰岛素通过使细胞内cAMP含量减少,激活糖原合成酶和丙酮酸脱氢酶系,抑制磷酸化酶和糖异生关键酶等,使糖原合成增加,糖的氧化利用、糖转变为脂肪的反应增加,血糖去路增快;使糖原分解和糖异生减少或受抑制,使血糖来源减少,最终使血糖浓度降低。

使血糖浓度升高的激素:肾上腺素

肾上腺素的作用机制是通过肝和肌肉的细胞膜受体、cAMP、蛋白激酶级联激活磷酸化酶,加速糖原分解,使血糖升高.在肝脏,糖原分解为葡萄糖,在肌肉,则经糖酵解途径生成乳酸,并通过乳酸循环间接升高血糖水平.主要在应急情况下发挥调节作用.是强有力升高血糖的激素。

邻苯甲胺法:本实验采用邻甲苯胺法测定血糖,其原理是葡萄糖在酸性介质中加热脱水反应生成5-羟甲基-2-呋喃甲醛,分子中的醛基与邻甲苯胺缩合成青色的薛夫氏碱,通过比色可以定量

【实验试剂】

肝素抗凝剂、凡士林、二甲苯、抗凝剂、胰岛素、0.1%肾上腺素液、邻苯甲胺试剂、蒸馏水、葡萄糖标准液

【实验操作】

1.动物准备及采血

取空试管4支,编号1,2,3,4,分别加入肝素抗凝剂0.01ml。取空腹16小时以上的家兔两只,分别编号1,2,称体重并记录。

用耳静脉采血法:先剪去兔儿静脉的毛,再用二甲苯擦拭兔耳部静脉,使其充血,在其周围抹上凡士林防止血液污染,用刀片轻轻挑破边缘耳静脉,放血入含抗凝剂的试管1和2,约需2ml至3ml,边滴边摇,以防凝固,取血完毕,用干棉球压迫血管止血。

2.注射激素并采血

1号兔臀部皮下注射胰岛素,一小时后于心脏取血到抗凝管3,测定血糖,将2号兔臀部皮下注射0.1%肾上腺素液,剂量为每公斤体重0.4ml,观察兔子情况。30mins后,心脏取血入抗凝管4中。心脏采血法:将注射器肝素化后,置家兔于仰卧位,固定四肢,在左侧胸壁3至4肋间,摸到心搏最明显处,垂直进针,深度约3cm,当有落空感时,可感觉针尖随心搏而动,固定针头,采血8ml左右,放入抗凝管中。

3.测定注射前后的血糖

将收集的4管血液离心10mins,取上层血浆,分别制成胰岛素前1,胰岛素后2,肾上腺素前1,肾上腺后2。取干燥的试管6支,编号并按表操作,混匀,放入沸水浴15mins,冷却,

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