分子生物学I复习题答案
第一篇绪论
名词解释：
1、广义分子生物学：包括对蛋白质和核酸等生物大分子结构与功能的研究，以及从分子水平上阐明生命现象和生物规律。。
2、狭义分子生物学：是研究核酸、蛋白质等生物大分子的结构与功能，并从分子水平上阐明蛋白质与蛋白质、蛋白质与核酸之间的交互及其基因表达调控机理的学科。
问答题
1、列举5～10位获诺贝尔奖的科学家，简要说明其贡献。
1962年，Watson（美）和Crick（英）因为在1953年提出DNA反向平行双螺旋模型而与Wilkins共获诺贝尔生理医学奖
1980年，Sanger和Gilbert（英）设计出一种测定DNA分子内核苷酸序列的方法，而获得诺贝尔化学奖
1983年，McMlintock 由于在50年代提出并发现可移动遗传因子（jumping gene 或mobile element）而获得诺贝尔生理医学奖
1993年，美国科学家Robert和Sharp因发现断裂基因而获得诺贝尔奖。Mullis由于发明PCR仪而与加拿大学者Smith共享诺贝尔化学奖
1995年，美国人Nusslein--Volhard和美国人Wieshaus由于在20世纪40至70年代先后独立鉴定了控制果蝇体节发育基因而分享诺贝尔生理医学奖
2001年，美国科学家Hartwell、英国科学家Hunt和Nurse对细胞周期调控因子的研究分享诺贝尔生理医学奖
2、一个基因一个酶的说法是否准确,为什么？
不准确
一个基因一个酶假说 one－gene－one－enzy－me hypothesis 这是一种学说，认为一个基因仅仅参与一个酶的生成，并决定该酶的特异性和影响表型。G.W.Bea-dle和E.L.Tatum在1941年发表了链孢霉中生化反应遗传控制的研究；进而使应用各种生化突变型对基因作用的研究有了发展。Beadle在1945年总结了这些结果，提出了一个基因一个酶的假说。以后发现，不仅链孢霉，而且细菌和酵母菌等各种生物由于生化突变都会引起特定酶的缺损，从而导致了特定的代谢反应阻滞，这进一步证明了这个假说的正确性。但是有些酶是由不同的多肽链特异地聚合起来才会呈现有活性，也有一个基因所决定的同样多肽链是两种或两种以上不同酶的组成成分。此外，有的基因能决定具有两种或两种以上作用的酶，也有几个基因所决定的多肽链通过聚合才能发挥作用。随着酶学、蛋白质化学的进展、遗传学方法的进步，进一步弄清楚了基因与酶的关系是建立在基因与多肽链严密对应的关系基础上的。表示这种对应关系的学说就是一个基因一条多肽链假说。
3、简要回顾人类对基因的研究与认识过程并根据你的见解给基因下一个定义
1909年，丹麦遗传学家W.Johannsen 首先使用基因一词，其概念与孟德尔提出的“遗传因子”完全一致。1926年，Morgan发表基因论指出基因代表一个有机的化学实体，1944年，Avery等证实基因的本质是DNA，是DNA分子上的功能单位。1955年，Benzer提出顺反子、
突变子和重组子的概念，认为顺反子是编码一种多肽链的核苷酸序列，是一个功能单位，认为一个顺反子就是一个基因，这个基因或者编码蛋白质或者编码RNA分子。1961年Jacob 和Monod提出操纵元学说，将基因分为结构基因、调节基因、操作子和启动子。到目前为止，普遍认为，基因是能够表达和产生基因产物的DNA序列。
基因是产生一条多肽链或功能RNA分子所必需的全部核苷酸序列。
第二章核酸组成与结构
一．叙述DNA双螺旋结构要点
1. DNA的双螺旋结构为反向平行的双螺旋结构
①DNA分子由两条多核苷酸链组成，以中心为轴，形成右手双螺旋。
②两条链反向平行，即两条链的方向相反。两条单链间以氢键相连。每一单链具有5’- 3’极性。
③糖-磷酸键是在双螺旋的外侧，碱基对与轴线垂直。
④糖与附着在糖上的碱基近于垂直。
⑤碱基配对时，必须一个是嘌呤，另一个是嘧啶。
⑥DNA双螺旋有大沟（major or wide groove）和小沟（minor or narrow groove）的存在。大沟 (2. 2nm），小沟 (1. 2nm)。
2. 碱基顶部基团裸露在DNA 大沟内。
3. 蛋白质因子与DNA 的特异结合依赖于氨基酸与DNA 间的氢键的形成。
4. 蛋白质因子沿大沟与DNA形成专一性的结合，其结合的机率与多样性高于沿小沟的结合。
5. 大沟的空间更有利于与蛋白质的结合。
二．叙述三种RNA的结构与功能特点。
1 mRNA的结构特点：
①大多数真核mRNA的5’末端均在转录后加上一个7-甲基鸟甘，同时第一个核苷酸的C’2也是甲基化，形成帽子结构：m7G5'ppp5'Nm。
②大多数真核mRNA的3’末端有一个多聚腺苷酸结构，称为多聚A尾（polyA）。通常polyA长度从几十到几百个核苷酸不等，是由polyA转移酶加上去的。
mRNA的功能：把DNA所携带的遗传信息，按碱基互补配对原则，抄录并传送至核糖体，指导蛋白质的合成。
2 转运RNA的结构特点：
①tRNA的一级机构特点
1）分子量较小，一般由73~93个核苷酸组成
2）各种tRNA的3’端为CCA; 5’端大多数为pG，少数为pC
3）含10~20%稀有碱基，如二氢尿嘧啶（DHU），假尿苷（ψ）等
② tRNA的二级结构-三叶草形
1）氨基酸臂
2）DHU环
3) 反密码子环
4）TψC环
5) 额外环
③ tRNA的三级结构 - 倒L形
tRNA的功能：活化、搬运氨基酸到核糖体，参与蛋白质的翻译。
3.核糖体体RNA的结构特点：rRNA存在于核糖体中与蛋白质结合。构象不固定，受各种因子的影响，原核生物有23S、16S、5S三种rRNA，真核生物有28S、18S、5S，有的还含有5.5SrRNA。
rRNA的功能：与蛋白质结合组成核糖体，作为蛋白质物质合成的场所。
4、DNA与RNA从结构看哪个更适合作为遗传信息载体，为什么？
从结构看DNA更适合作为遗传信息载体
作为遗传物质必须具备的条件：
(1)在细胞生长和繁殖的过程中能够精确地复制自己;(2)能够指导蛋白质的合成从而控制生物的性状和新陈代谢;(3)具有贮存巨大数量遗传信息的潜在能力;(4)结构比较稳定,但在特殊情况下又能突变,而且突变以后还能继续复制,并能遗传给后代.。
首先DNA是螺旋双链结构，双链很稳定，能稳定的将遗传信息传给子代而不发生很大的变异。碱基由氢键连接，使它的热稳定性增强，抗环境变化能力增强。而且半保留复制严格遵循碱基互补配对，不易产生变异。自然选择也让它成为主要的遗传物质。RNA是单链，具有不稳定性，不能稳定一传，容易变异，不利于种群基因频率的继承。而且热不稳定。
第二篇复制
一、名词解释
1、基因(gene)：染色体上具有遗传效应的DNA片段。包括编码有功能的蛋白质多肽链或
RNA所必需的全部核酸序列（通常是DNA序列）。
2、分子生物学中心法则（the central dogma）：是指遗传信息从DNA传递到RNA，再从RNA
传递给蛋白质，即完成遗传信息的转录和翻译的过程。这是所有细胞结构的生物所遵循的法则。在某些病毒中的RNA自我复制和某些病毒中以RNA为模板逆转录成DNA的过程，是对中心法则的补充。
3、复制（replication）：以DNA为模板合成DNA的过程，称为DNA复制。
4、转录（transcription）：是指以DNA为模板，在依赖DNA的RNA聚合酶催化下，以4中
NTP(ATP、CTP、GTP、UTP)为原料，合成RNA的过程。
5、翻译（translation）：将mRNA核苷酸的排列顺序解读为蛋白质氨基酸排列顺序的过程。
6、基因表达（gene expression）：包括转录和翻译两个阶段，遗传信息从DNA传递到RNA，
再从RNA传递给蛋白质，即完成遗传信息的转录和翻译的过程。
7、逆转录（Reverse transcription）：以RNA为模板合成DNA的过程，即将遗传信息由RN
逆向传给DNA的过程，其遗传的传递方向与转录相反。
8、半保留复制 (Semi-conservative replication)：DNA的两条链均可作为模板，合成出
子代DNA与母代完全相同，且一条链来自母链，一条链是新合成的，这种复制方式称为半保留复制。
9、突变(mutation)：遗传物质的结构改变而引起的遗传信息改变，称为突变。
二、问答题
1、什么是半保留复制，它是如何被证明的？
半保留复制：DNA的两条链均可作为模板，合成出子代DNA与母代完全相同，且一条链来自母链，一条链是新合成的，这种复制方式称为半保留复制。
实验验证：首先，以含有N15标记的NH4Cl培养液来培养大肠杆菌，让其繁殖几代，再将其转移到N14的普通培养液中。然后在不同时刻收集大肠杆菌并提取DNA，再将DNA进行密度梯度离心，记录其位置。若离心后有三条带（自上而下为N15,N15/N14,N14），则可证明其为半保留
2、DNA复制的高保真性主要取决于哪些因素？
（1.）严格的碱基配对
（2.）DNA聚合酶对碱基的选择
（3.）DNA聚合酶的校读功能
（4.）复制后修复（光复活修复、剪切修复、重组修复、SOS）
3、复制体系包括有哪些物质？各有何作用？
参与复制的生物大分子物质：
（1、）底物(substrate)：dNTP(N：A、T、C、G)
（2、）模板(template)：母代DNA的两条单链
（3、）引物(primer)：有3’-OH的寡核苷酸（RNA）
（4、）酶(enzymes)：包括聚合酶、解链解旋酶、引物酶、连接酶等。
（5、）蛋白质：包括各种参与复制的蛋白因子
参与复制的酶：
（1）DNA聚合酶
（2）解旋解链酶类
（3）引物酶
（4）DNA连接酶
4、试比较原核生物与真核生物中DNA聚合酶的种类、生物学作用及特性。
原核生物种类功能5＇—3＇聚合
酶活性
5＇—3＇外切
酶活性
3＇—5＇外切
酶活性
Pol Ⅰ修复及校读＋＋＋
Pol Ⅱ不清＋－＋
Pol Ⅲ复制＋＋＋
真核生物Pol α引发＋＋－Pol β不清＋－Pol γ线粒体DNA复制＋＋＋Pol δ复制＋＋＋Pol ε修复及校读＋＋＋
5、何为端粒和端粒酶？各有何功用？
（1）端粒,是指真核生物染色体线性DNA分子末端的结构。形态学上呈粒状膨大，故而得名。
端粒的作用：维持染色体的稳定性；维持DNA的完整性。
（2）端粒酶，是由RNA和蛋白质组成的复合体。
端粒酶的作用：操纵细胞分化、操纵细胞寿命，细胞愈年青，端粒愈长，细胞愈老，其端粒长度愈短;端粒与细胞老化有关系。
6、何为逆转录？有何生物学意义？
逆转录是指以RNA为模板合成DNA的过程，即将遗传信息由RN逆向传给DNA的过程，其遗传的传递方向与转录相反。
逆转录的生物学意义：
(一）逆转录现象的发现是对传统中心法则的补充与完善。
(二）逆转录现象及随后发现的核酶，使科学界对生命的起源及RNA在进化过程中
的重要性有了更深刻的认识。
(三）逆转录酶的出现为更好地开展分子生物学研究提供了有利的工具，逆转录技
术已成为获取目的基因的重要方法之一。
7、UV导致的DNA损伤常见的为哪种？如何修复？
( 1. ) 嘧啶二聚体用光修复酶进行修复
（2.）原核切除修复去除损伤DNA，填补空隙和链接
转录
名词解释
1.转录 :是指以DNA为模板，在依赖于DNA的RNA聚合酶催化下，以4种rNTP（ATP、CTP、GTP和UTP）为原料，合成RNA的过程。
2.启动子 :在DNA模板上，控制RNA合成开始、并且与RNA聚合酶结合的特异部位或区域，称为启动子(Promoter)
3.RNA拼接 : RNA拼接（RNA splicing）：一个基因的外元和内元共同转录在一条转录产
物中，将内元去除而把外元连接起来形成成熟RNA分子的过程
左、右拼接点5’ 拼接点或左拼接点（内元上游）, 3’ 拼接点或右拼接点（……下游）
不连续转录：
反式拼接
转录终止子终止子（terminator）：在转录的过程中，提供转录终止信号的RNA序列
简答题
④说明RNApol全酶各个亚基的主要功能。
⑤以E.coli为例，说出Prok.启动子结构及各部分功能。
答大部分启动子都存在这两段共同序列，即位于–10 bp处的TATA区和–35 bp处的TTGACA 区，它们是RNA聚合酶与启动子的结合位点。
位于-10bp左右，A.T较丰富，易于解链。其功能是：(1) RNA pol紧密结合;(2) 形成开放启动复合体；(3) 使RNA pol定向转录。
位于-35序列又称为Sextama盒（Sextama box）其功能是:(1) 为RNA pol的识别位点。σ亚基识别-35序列，为转录选择模板(2) -35和-10序列的距离是稳定的，此与RNA pol 的结构有关。
⑥以Prok.为例简述转录起始过程。
答 1.全酶与模板的DNA接触，生成非专一的,不稳定的复合物在模板上移动；
2. 起始识别：全酶与－35序列结合，产生封闭的酶-启动子二元复合物（closed binary complex）；
3.全酶紧密地结合在-10序列处，模板DNA局部变性，形成开放的启动子二元复合体；
4. 酶移动到I，第一个rNTP转录开始,σ因子释放,形成酶-启动子-rNTP三元复合（ternary complex）。
⑦试述Prok.中转录终止子的类型及终止机制。
答： 1、终止子的种类
（1）内在终止子（不依赖ρ因子的终止子）体外实验中，只有核心酶和终止子就足以使转录终止
机制：①新生RNA链发夹结构形成与RNApol发生作用从而阻止RNA链的释放造成
高度延宕（典型的有60秒左右）② RNApol暂停为终止提供了机会，6 ~ 8个连续的U
串可能为RNApol与模板的解离提供了信号（RNA－DNA之间的 rU－dA 结合力较弱）于是：RNA－DNA解离，然后三元复合体解体，接着RNApol解离，最后转录终止
（2）依赖ρ因子的终止子蛋白质辅助因子－－ρ因子存在时，核心酶终止转
机制：RNApol 转录了IR序列之后，发生一定时间的延宕，a、ρ因子与RNA结合（终
止子上游的某一处，RNA的5’端）b、ρ因子沿RNA从5’→3’移动（NTP水解供能）（终
止子处的较长时间的延宕给ρ因子追赶的机会）c、ρ因子与 RNApol 相互作用而造成转录
的终止
⑧解释E.coli的λ噬菌体调控不同发育阶段基因表达的抗终止机制。
答
⑨简述内元的种类及拼接方式。
答Ⅰ类内元（group Ⅰ）:含有中部核心结构的细胞器基因（核基因）
Ⅱ类内元（group Ⅱ）:不含有中部核心结构细胞器线粒体基因内（核基因）
Ⅲ类内元（group Ⅲ）:具有 GU－AG 特征的边界序列核基因mRNA前体
tRNA基因的内元均位于 tRNA 的反密码环上
⑩说明tRNA内元拼接的简单步骤和特点。、
tRNA基因的内元均位于 tRNA 的反密码环上，需要蛋白质酶参与的拼接
8、 tRNA基因的类型及各类型的前体在加工过程中所要解决的问题。
答Ⅰ型具有3’端的CCA序列，Ⅱ型没有3’端的CCA序列
加工中要解决Ⅰ型需在酶的作用下切除CCA下游一段序列（Prok. 的tRNA多为Ⅰ型），
Ⅱ型需要在酶的作用下添加CCA序列（少数 Phage 、 Euk.）
9、说明poly(A)在分子生物学实验中的应用价值。
答： a、可将 oligo (dT) 与载体相连，从总体RNA中分离纯化mRNA，b、用寡聚dT（oligo (dT)）为引物，反转录合成 cDNA
10、为什么在细菌（Prok.）中很少涉及到ρ因子？
答
11、Euk.mRNA帽子的种类。
帽子0（Cap-0）m7GpppXpYp----------（共有） m7G N7—甲基鸟苷
帽子1 （Cap-1m7GpppXmpYp----------第一个核苷酸的2’-O 位上产生甲基化（A N6 位甲基化）
帽子2（Cap-2）m7GpppXmpYmp第二个核苷酸的2’-O 位上产生甲基化（A、G、C、U）
12、以四膜虫的大rRNA前体的拼接为例，说明第Ⅰ类内元拼接
的简单过程及特点。
13、真核生物mRNA的3‘poly(A)的编码情况及其准确生成的机制为何？
答准确是由于：内切酶的识别位点切点上游 13－20bp处的有AAUAAA序列，切点下游的
有GUGUGUG序列（单细胞Euk.除外）
机制a、 RNA末端腺苷酸转移酶（poly(A) 聚合酶）催化前体－－ATP，b、添加位点内切酶(360KDa)切除一段序列，由poly(A) 聚合酶催化添加poly(A)
14、解释“套索结构”，及内元中的套索结构中的磷酸二酯键有何特殊之处。
答
翻译
1．翻译是基因表达的第一步，是根据遗传密码的中心法则，将成熟的信使RNA分子（由DNA通过转录而生成）中“碱基的排列顺序”（核苷酸序列）解码，并生成对应的特定氨基酸序列的过程。
2．密码子(codon)： mRNA上每3个相邻核苷酸编码多肽链中一个氨基酸，这三个核苷酸称一个密码子或三联体密码。
3．密码的简并性（degeneracy）由一种以上密码子编码同一个氨基酸的现象称为简并4．同义密码子（synonymous codon）由一种以上密码子编码同一个氨基酸的现象称为简并,对应于同一氨基酸的密码子称为同义密码子
5．变偶假说Crick提出摆动假说（wobble hypothesis）根据摆动假说，在密码子与反密码子的配对中，前两对严格遵守碱基配对原则，第三对碱基有一定的自由度，可以“摆动”，因而使某些tRNA可以识别1个以上的密码子。
6．移码突变在正常的DNA分子中，某位点插入或者缺失的碱基数目为非3的倍数，造成该点之后的蛋白质三联体密码子阅读框发生改变，从而使一系列基因编码序列产生移位错误的改变，这种现象被称为移码突变
7．同功受体同工受体tRNA ( isoaccepting tRNA ) 摇摆假说的相对性说明了摇摆范围的局限，在通用三联体密码中一个密码子家族必须由两种tRNA识读。能解读同义密码子的不同tRNA被定义为同工受体tRNA
8．多核糖体
1．参与蛋白质生物合成体系的组分有哪些?它们具有什么功能?
(1)参与蛋白质合成的RNA mRNA：蛋白质的DNA序列信息的中间体。tRNA：运送特定氨基酸到核糖体上合成蛋白质。rRNA：核糖体的组成元件。
(2)mRNA与遗传密码
(3)rRNA与核糖体核糖体是翻译进行的场所
(4)tRNA与氨基酰-tRNA tRNA“译员”的作用既是密码子的受体,也是氨基酸的受体氨基酰-tRNA 为肽建的合成提供能量和执行遗传信息的解读。
(5)蛋白质因子多种翻译因子组成翻译起始复合物，完成翻译的起始、延伸和终止，并且保证其准确性
( 6)能量与酶
2,遗传密码是如何破译的?
（1）1954年Gamow首先对遗传密码进行了探讨；
（2）1961年Crick 证明三联体密码子是正确的；
（3）1961年，Nirenberg以均聚物、随机共聚物、特定序列的共聚物作模板合成多肽，破
译遗传密码；
（4）1964年Nirenberg 用核糖体结合技术研究遗传密码，直接测出三联体对应的氨基酸；（5）到1966年，遗传密码全部破译。
3．遗传密码有什么特点?
(1、方向性：密码子的阅读方向从5'到3'。
(2、简并性：由一种以上密码子编码同一个氨基酸的现象称为简并（degeneracy），对应于同一氨基酸的密码子称为同义密码子（synonymous codon）兼职性： AUG（Met)和GUG（Val)两个密码子除代表特定氨基酸外，还兼作起始密码子
(3、密码的普遍性，但也有例外（特殊性）。
(4、读码的连续性：是无标点符号的且相邻密码子互不重叠。
(5、变偶性（摇摆性）在密码子与反密码子的配对中，前两对严格遵守碱基配对原则，而第三对碱基有一定的自由度，可以“摆动”
(6、有起始密码子和终止密码子：64组密码子中，AUG 和GUG既是Met和Val的密码子，又是起始密码子；有三组密码不编码任何氨基酸，而是多肽链合成的终止密码子：UAG、UAA、UGA。
4．简述三种RNA在蛋白质生物合成中的作用。
mRNA：蛋白质的DNA序列信息的中间体。 AUG作为起始密码子（GUG、UUG）S – D序列可受核糖体结合并保护，与核糖体小亚基内16S rRNA 的3’端富含嘧啶的序列3’------UCCUCC-----5’互补，使 tRNA正确定位于起始 codon（2）5’ 端的帽子对翻译有增强作用，且5’ 帽子和3’polyA尾对翻译效率的调节有协同作用
tRNA：运送特定氨基酸到核糖体上合成蛋白质。aa accept arm 位于“L”的一端，契合于核糖体的肽基-anti-codon arm 位于”L”另一端，与结合在核糖体小亚基上的 codon of mRNA配对。起始tRNA和延伸tRNA 。氨基酰-tRNA 为肽建的合成提供能量和执行遗传信息的解读。
rRNA：核糖体的组成元件
5．简述核糖体的活性中心的二位点模型及三位点模型的内容。
6．氨基酸在蛋白质合成过程中是怎样被活化的?
氨基酸在氨酰-tRNA合成酶的作用下AA+tRNA+ATP → AA-tRNA+AMP+PPi
氨酰-tRNA合成酶它可将tRNA和氨基酸进行分类。且每一种氨酰-tRNA合成酶识别一种氨基酸和所有能装载该氨基酸的tRNA。即氨酰-tRNA合成酶对氨基酸有极高的专一性 , 对tRNA具有极高专一性,最终，在专一酶作用下，每种L-氨基酸都可同其对应的tRNA形成氨酰-tRNA 并且氨酰-tRNA合成酶的水解部位可以水解错误活化的氨基酸.
7．简述蛋白质生物合成过程。
7．蛋白质合成中如何保证其翻译的正确性?
mRNA的AUG上－3位的A和＋4位的G…..至关准确翻译
9．原核细胞和真核细胞在合成蛋白质的起始过程有什么区别。
内容原核生物真核生物核糖体
完整70S80S
亚基50S，30S60S，40S 起始tRNA fMet-tRNA f Met Met-tRNA i Met 起始因子3种至少7种
起始复合物的生成顺序1）30S?mRNA1) 40S?Met-tRNA i Met
2）30S?mRNA?fMet-tRNA f Met2) 40S?Met-tRNA i Met ?mRNA 3）70S?mRNA?fMet-tRNA f Met3) 80S?mRNA?Met-tRNA i Met
10．蛋白质合成后的加工修饰有哪些内容?
1、N端fMet或Met切除蛋白质N端甲酰基能被甲酰化酶水解
2、二硫键形成蛋白质合成后通过两个半胱氨酸的氧化作用生成的
3、特定氨基酸化学修饰氨基酸侧链修饰作用包括磷酸化(如核糖体蛋白质)、糖基化(如各种糖蛋白)、甲基化(如组蛋白、肌肉蛋白质)、乙基化(如组蛋白)、羟基化(如胶原蛋白)和羧基化等
4、新生肽链中非功能片段切除
11、蛋白质转运类型及机制
工翻译转运：信号肽假说共翻译定位蛋白质定位信息存在于该蛋白质自身结构中（信号肽），并可通过与特殊受体相互作用，使蛋白质定位于靶位。蛋白质共翻译易位可分两个阶
段：首先：带有新生肽链的核糖体与膜结合；然后：新生肽链进入膜通道并易位
翻译后转运：翻译后跨膜易位的蛋白质，前体一般含前导肽(leader peptide)，前导肽在跨膜运转中起重要作用。过膜后，前导肽水解，蛋白质变为有功能的蛋白质
12、信号肽的结构特点及功能
信号肽结构特点：
（1）常位于蛋白质N末端，可切割；
（2）长度：15 - 30个残基；
（3）序列内有一个全部或大部分疏水组成的疏水核心；
（4）靠近该序列 N 端常有几个正电荷氨基酸；
（5）其C-末端靠近切割处常带数个极性氨基酸，离切割点最近那个氨基酸常带很短侧链(Ala或Gly )
功能：信号肽是保证蛋白质转运的必要条件，通过与特殊受体相互作用，使蛋白质定位于靶位
13、分子伴侣在蛋白质的高级结构形成中的生物学功能。
结合在一些不完全装配或不恰当折叠蛋白上，帮助它们折叠或防止它们聚集的蛋白质.功能是(1)帮助新生蛋白质正确折叠(2)纠正错误折叠或介导其降解
14、试比较原核生物与真核生物的翻译。
第三章原核生物复习题
基因表达(gene expression)所有生物的遗传信息，都是以基因的形式储存于细胞内的DNA （或RNA）分子中，随着个体的发育，DNA分子能有序地将其所承载的遗传信息，通过密码子-反密码子系统，转变成蛋白质或RNA分子，执行各种生理生物化学功能。这个从DNA到蛋白质或功能RNA的过程称为基因表达。
管家基因(housekeeping gene)某些基因在一个个体的几乎所有细胞中持续表达，通常被称为管家基因(housekeeping gene)。
操纵子(operon)指原核生物的基因表达调控单位，包含结构基因和表达调控原件在内的整个系统。
启动子(promoter)是RNA聚合酶结合并启动转录的特异DNA序列.
反义RNA(anti sense RNA)反义RNA是与mRNA互补的RNA分子。弱化子（Attenuator ）衰减子,DNA中可导致转录过早终止的一段核甘酸序列（123-150区）。
前导肽（leader peptide）前导序列包括起始密码子AUG和终止密码子UGA，能产生一个含有14个氨基酸的多肽，称前导肽。
魔斑（magic spot）鸟苷四磷酸（ppGpp）和鸟苷五磷酸（pppGpp）是在色谱上检出的斑点，当时称魔斑。
CAP (catabolite activator protein) 代谢物激活蛋白or cAMP receptor protein (CRP)
问答题：
1、原核与真核生物转录水平基因表达特点如何？
Ⅰ原核：①操纵子是原核生物的基因转录单元；
②mRNA的转录，翻译和降解偶联进行；
③mRNA所携带的信息差别很大。
Ⅱ真核：①顺式作用元件是决定转录活性的关键因素；
②反式作用因子是真核基因的转录调节蛋白；
③真核基因表达调控以正性调节占主导。
2、叙述基因转录激活的基本要素有哪些？
基因表达的调节与基因的结构、性质，生物个体或细胞所处的内、外环境，以及细胞内所存在的转录调节蛋白有关。
特异DNA序列和调节蛋白质\\
调节蛋白\\
DNA-蛋白质、蛋白质-蛋白质相互作用\\
RNA聚合酶.
3、正调控和负调控的主要不同是什么？
负调控：抑制基因表达的调控方式
正调控：促进基因表达的调控方式
4、叙述乳糖操纵子的正负调节机制。
（—）阻遏蛋白的负调控①当细胞内有诱导物时，诱导物结合阻遏蛋白，此刻聚合酶与启动子形成开放式启动子复合物转录乳糖操纵子结构基因。②当无诱导物时，阻遏蛋白结合与启动子与蛋白质部分重叠不转录。
(二) CAP正调控①当细胞内缺少葡萄糖时ATP→CAMP结合，CRP生成CAP与CAP位点结合，增前RNA聚合酶转录活性。②当有葡萄糖存在时CAMP分解多合成少，CAP不与启动子上的CAP位点结合RNA聚合酶不与操纵区结合无法起始转录结构基因表达下降。
5、什么是安慰诱导物?
安慰诱导物是指能高效诱导酶的合成，但又不被所诱导的酶分解的分子。
6、叙述原核生物翻译水平的调控。
基因表达的转录调控是生物最经济的调控方式。但转录生成mRNA以后，再在翻译或翻译后水平进行“微调”，是对转录调控的补充，它使基因表达的调控更加适应生物本身的需求和外界条件的变化。调控方式有：
mRNA自身结构元件对翻译起始的调控
mRNA稳定性对转录水平的影响
调节蛋白的调控作用
反义RNA的调节作用
小RNA分子对翻译的调控
稀有密码子对翻译的影响
重叠基因对翻译的影响
翻译的阻遏
魔斑核苷酸水平对翻译的影响
7、激活蛋白（CAP）对转录的正调控作用？
环腺苷酸（cAMP）受体蛋白CRP（cAMP receptor protein），cAMP与CRP结合后所形成的复合物称激活蛋白CAP（cAMPactivated protein ）。当大肠杆菌生长在缺乏葡
萄糖的培养基中时，CAP合成量增加，CAP具有激活乳糖（Lac）等启动子的功能。一些依赖于CRP的启动子缺乏一般启动子所具有的典型的-35区序列特征（TTGACA）。因此RNA聚合酶难以与其结合。
CAP的存在（功能）：能显著提高酶与启动子结合常数。主要表现以下二方面：
①CAP通过改变启动子的构象以及与酶的相互作用帮助酶分子正确定向,以便与-10区结
合，起到取代-35区功能的作用。
②CAP还能抑制RNA聚合酶与DNA中其它位点的结合，从而提高与其特定启动子结合的
概率。
8、简述衰减子的作用机理。
衰减子转录的mRNA中具有4段特殊的序列，即片段1, 2，3和4。其中片段1和2, 2和3，3和4能配对形成发夹结构。然而片段3和4形成的发夹结构之后紧接着寡尿嘧啶，它是不依赖与ρ因子的转录终止信号。这4个片段形成何种发夹结构是由L基因转录物的翻译过程所控制的。L基因的部分转录产物编码14个氨基酸，其中含有两个相邻的色氨酸密码子。L基因转录后不久，核糖体就与mRNA结合，并翻译L短肽序列。当细胞内有色氨酸时，形成色氨酰-tRNA, 核糖体可通过片段1和2。因遇到终止密码，核糖体在到达片段3之前便以脱落，所以在这种情况下，只有片段3和4可形成发夹结构，即为转录终止信号，从而导致RNA-pol作用停止。当细胞内无色氨酸时，核糖体就停在两个相邻的色氨酸密码子的位置上，此时片段2和3就会形成发夹结构，而片段3和4就不能形成转录终止信号，后面的基因才得以转录。
分析题：
1、当lacZ-或lacY-突变体生长在含乳糖的培养基上时，lac操纵子中剩余的基因没
有被诱导，解释是何原因。由于lacZ-或lacY-发生了突变，故不能表达出透酶或β-半乳糖苷酶。虽然培养基中含有乳糖，但在缺乏透酶或β-半乳糖苷酶的情况下，乳糖无法转变为可与阻遏蛋白结合并使其与O序列解离的别乳糖，导致操纵子仍处于阻遏状态，因此lac操纵子中剩余的基因没有被诱导。
2、用含中性碳源(例如甘油)的液体基本培养基培养E.coli不能诱导lacZ操纵子。一小时后在培养基中加入乳糖和再隔一段时间加入过量的葡萄糖分别会对lac操纵子的表达有什么影响?
前者使lac操纵子的表达增强，后者使lac操纵子的表达逐渐减弱，直至消失。
第四章真核生物复习题
顺式作用元件(cis-acting element)真核生物基因组中含有可以调控自身基因表达活性的特异DNA序列，称为顺式作用元件 (cis-acting element)。顺式作用元件能够被转录调节蛋白特异识别和结合，从而影响基因表达活性。
反式作用因子(trans-acting factor)能直接或间接与顺式作用元件相互作用，进而调控基因转录的一类调节蛋白，统称为反式作用因子。
增强子(enhancer)指远离转录起始点、决定基因的时间、空间特异性、增强启动子转录活性的DNA序列。
沉默子(silencer)位于结构基因附近，能抑制该基因转录表达的DNA序列称为沉默子（silencer）。沉默子是一种负性调控元件。其作用特征与增强子类似，在组织细胞特异性
或发育阶段特异性的基因转录调控中起重要作用。
SD 序列（shine-Dalgarno sequence）存在于原核生物起始密码子AUG上游7~12个核苷酸处的一种4~7个核苷酸的保守片段，它与16SrRNA3’端反向互补，所以可将mRNA的AUG起始密码子置于核糖体的适当位置以便起始翻译作用。根据首次识别其功能意义的科学家命名。
剪接（splicing)自mRNA前体中切除内含子并将外显子连接起来的过程。（rRNA、tRNA剪体中的插入顺序（intervening sequence）也有称之内含子，也要拼接去除，其机制尚不清楚）。问答题：
1、叙述真核基因表达调控特点。
（1）真核生物细胞内绝大部分DNA是用于储存调控信息的，用于合成蛋白质的信息仅占很小一部分。
（2）真核生物能在特定时间和特定的细胞中激活特定的基因，从而实现“预定”的、有序的、不可逆转的分化发育过程，并使组织器官在一定环境条件下保持正常功能。
（3）真核生物基因表达的调控更加复杂、多层次、涉及更多的蛋白质因子参与。
2、写出反式作用因子结构域的模式。
反式作用因子结构域的模式如下：
结构域DNA识别结合域转录活性域结合其它蛋白质的结
合域
模式①锌指结构；
②同源结构域；
③螺旋-转角-螺旋；
④亮氨酸拉链结构；
⑤螺旋-环-螺旋；
⑥碱性α螺旋。
①酸性α-螺旋结构
域；
②富含Gln结构域；
③富含脯氨酸结构域。
二聚体结构域
3、叙述反式作用因子的作用方式。
1.TFⅡD结合TATAbox→蛋白质-DNA复合物
2.RNA pol识别并结合TFⅡD-DNA复合物→闭合复合物
3.其它转录因子结合RNA pol →开放性复合物
反式作用因子的作用主要是→促进或抑制上述3步反应。
4、叙述真核细胞DNA水平的调控。
1.基因丢失（染色质的丢失）
一些低等生物（线虫，昆虫），甲壳类动物细胞在个体发育过程中丢失掉某些基因去除这些基因活性，通过改变基因数目达到调控目的，只有分化成生殖细胞的那些细胞保留整套染色体。高等动物红细胞在发育成熟过程也有染色质丢失。这些调控是不可逆的。
2.基因扩增（gene amplification）
基因扩增——是指细胞内某些特定基因的拷贝数专一性大量增加的现象。它是细胞在短期内为满足某种需要而产生足够基因产物一种调节手段。其机制多数人认为是基因反复复制的结果，也有人认为是姐妹染色体不均等交换从而使一些细胞中的某种基因增多。
3.基因重排（gene rearrangement）
基因重排——是通过调整有关基因片段的衔接顺序，使之重排成为1个完整的转录单位。
4.基因修饰（gene modification）——
DNA甲基化（DNA Methylation)在DNA分子加上某些基团/去掉某些基团→改变了DNA 的微细结构→以达到调控基因表达的目的。其中最重要的是甲基化/去甲基化。
甲基化/去（低）甲基化在真核基因调控中有重要作用。一般认为基因表达与甲基化程度成反比。
（1）管家基因调控区多低甲基化，不表达基因多高甲基化。
（2）激素或致癌物使不表达基因调控区低甲基化重新开放。
5、简述真核生物转录水平的调控机制？
转录是真核调控主要水平，主要通过反式作用因子，顺式作用元件与RNA pol相互作用完成。反式作用因子通过顺式作用影响转录起始复合物的形成。
（一）RNA聚合酶 (RNA Polymerase)
（二）特异DNA序列 (cis-acting elements)
（三）调节蛋白 (trans-acting factors)
6、简述真核生物转录后水平的调控机制？
RNA转录合成后往往需要一系列变化，包括拼接，末端修饰、内部修饰等过程→才能形
（post-transcription processing）。
成成熟mRNA，tRNA和tRNA，这个过程称转录后加工。
1、戴帽加尾
2、选择性剪接
3、 mRNA运输的调控
7、原核生物与真核生物启动子的主要差别？
真核基因启动子是RNA聚合酶结合位点周围的一组转录控制组件，至少包括一个转录起始点以及一个以上的功能组件。真核生物的启动子元件是TATA box TATA盒与TATA因子的转录因子结合后即成为完整的启动子。
原核生物操纵子（operon）是指数个功能相关的结构基因串联在一起，构成信息区，连同其上游的调控区（包括启动和操纵区）及其下游的转录终止信号构成的基因表达单位。
原核生物
TTGACA --- TATAAT------起始位点
-35 -10
真核生物
增强子---GC ---CAAT----TATAA—5mGpp—起始位点
-110 -70 -25
8、比较原核生物与真核生物基因组结构的异同，并指出真核生物细胞的RNA内含子剪接的主要方式。
（1）原核生物与真核生物基因组结构的异同点如下：
原核生物基因组真核生物基因组
不同点①结构简练；
②多顺反子；
③单一序列；
④基因连续排列。
①结构庞大；
②单顺反子；
③重复序列；
④基因不连续性。
相同点例如均为双螺旋结构的DNA分子，均有结构基因和调控序列等.
真核生物细胞的RNA内含子剪接的主要方式如下：
（1）外显子选择；（2）内含子选择；
（3）互斥外显子；（4）内部剪接位点。
9、比较原核生物与真核生物基因表达调控的异同点。
转录调控：
真核生物依靠顺式作用元件和反式作用因子来调控基因的表达。主要模式有：蛋白质的磷酸化、信号转导及基因表达；激素的影响；热激蛋白诱导的基因表达；金属硫蛋白的多重调控。原核生物以操纵子模型进行调控，分为正控和负控两种调节方式。在色氨酸操纵子中还有弱化子，能够对基因的表达进行微调。部分操纵子中还有多个启动子可以调节基因的组成性和诱导性表达。另外还有二组分调控系统信号转导、LexA与SOS应答等调节方式。
转录后调控：
RNA加工与成熟：其中包括RNA的分子切割和化学修饰（原核修饰在碱基上，真核修饰在核糖上）。加polyA和加5端帽子结构，另外还有DNA甲基化。
翻译水平：
真核生物以多聚顺反子弥补其没有多顺反子的缺陷；m RNA加5端帽子调节核糖体对其识别；m RNA稳定性受到3端polyA长度的调控；另外还有可溶性蛋白因子的修饰和翻译起始的调控。
原核生物转录后调控有翻译起始的调控，如SD序列的识别；稀有密码子的影响；重叠基因的影响；polyA对翻译的影响；翻译的阻止；魔斑核苷酸水平对翻译的影响。
10、简述在真核基因表达调控中，结合在不同部位的调控蛋白质之间相互作用的可能方式。
11、简述增强子的作用特点与作用机制。
（一）特点①增强效应十分明显，一般能使基因转录频率增加10-200倍
②增强效应与其位置和取向无关，不论增强子以什么方向排列（5‘→3’或3‘→5’），甚至和靶基因相距3kb，或在靶基因下游，均表现出增强效应；
③大多为重复序列，一般长约50bp，适合与某些蛋白因子结合。其内部常含有一个核心序列：（G）TGGA/TA/TA/T（G），该序列是产生增强效应时所必需的；
④没有基因专一性，可以在不同的基因组合上表现增强效应；
⑤许多增强子还受外部信号的调控，如金属硫蛋白的基因启动区上游所带的增强子，就可以对环境中的锌、镉浓度做出反应。
（二）机制通过提高启动子附近激活剂浓度而起作用。当它被约束在启动子附近时，可在任何位置起作用。
三种可能的作用方式：
<1> 可影响模板附近的DNA双螺旋结构；
<2> 将模板固定在细胞核内特定位置；
<3> 增强子区可以作为反式作用因子或RNA聚合酶Ⅱ进入染色质特定结构的入口
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分子生物学试题及答案 一、名词解释 1．cDNA与cccDNA：cDNA是由mRNA通过反转录酶合成的双链DNA；cccDNA是游离于染色体之外的质粒双链闭合环形DNA。 2．标准折叠单位：蛋白质二级结构单元α－螺旋与β－折叠通过各种连接多肽可以组成特殊几何排列的结构块，此种确定的折叠类型通常称为超二级结构。几乎所有的三级结构都可以用这些折叠类型，乃至他们的组合型来予以描述，因此又将其称为标准折叠单位。 3．CAP：环腺苷酸（cAMP）受体蛋白CRP（cAMP receptor protein ），cAMP与CRP结合后所形成的复合物称激活蛋白CAP（cAMP activated protein ） 4．回文序列：DNA片段上的一段所具有的反向互补序列，常是限制性酶切位点。 5．micRNA：互补干扰RNA或称反义RNA，与mRNA序列互补，可抑制mRNA的翻译。 6．核酶：具有催化活性的RNA，在RNA的剪接加工过程中起到自我催化的作用。 7．模体：蛋白质分子空间结构中存在着某些立体形状和拓扑结构颇为类似的局部区域 8．信号肽：在蛋白质合成过程中N端有15~36个氨基酸残基的肽段，引导蛋白质的跨膜。 9．弱化子：在操纵区与结构基因之间的一段可以终止转录作用的核苷酸序列。 10．魔斑：当细菌生长过程中，遇到氨基酸全面缺乏时，细菌将会产生一个应急反应，停止全部基因的表达。产生这一应急反应的信号是鸟苷四磷酸(ppGpp)和鸟苷五磷酸（pppGpp）。PpGpp与pppGpp的作用不只是一个或几个操纵子，而是影响一大批，所以称他们是超级调控子或称为魔斑。 11．上游启动子元件：是指对启动子的活性起到一种调节作用的DNA序列，-10区的TATA、-35区的TGACA 及增强子，弱化子等。 12．DNA探针：是带有标记的一段已知序列DNA，用以检测未知序列、筛选目的基因等方面广泛应用。13．SD序列：是核糖体与mRNA结合序列，对翻译起到调控作用。 14．单克隆抗体：只针对单一抗原决定簇起作用的抗体。 15．考斯质粒：是经过人工构建的一种外源DNA载体，保留噬菌体两端的COS区，与质粒连接构成。16．蓝-白斑筛选：含LacZ基因（编码β半乳糖苷酶）该酶能分解生色底物X-gal(5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷)产生蓝色，从而使菌株变蓝。当外源DNA插入后，LacZ基因不能表达，菌株呈白色，以此来筛选重组细菌。称之为蓝-白斑筛选。 17．顺式作用元件：在DNA中一段特殊的碱基序列，对基因的表达起到调控作用的基因元件。18．Klenow酶：DNA聚合酶I大片段，只是从DNA聚合酶I全酶中去除了5’→3’外切酶活性 19．锚定PCR：用于扩增已知一端序列的目的DNA。在未知序列一端加上一段多聚dG的尾巴，然后分别用多聚dC和已知的序列作为引物进行PCR扩增。 20．融合蛋白：真核蛋白的基因与外源基因连接，同时表达翻译出的原基因蛋白与外源蛋白结合在一起所组成的蛋白质。 二、填空 1． DNA的物理图谱是DNA分子的（限制性内切酶酶解）片段的排列顺序。 2． RNA酶的剪切分为（自体催化）、（异体催化）两种类型。 3．原核生物中有三种起始因子分别是（IF-1）、（IF-2）和（IF-3）。 4．蛋白质的跨膜需要（信号肽）的引导，蛋白伴侣的作用是（辅助肽链折叠成天然构象的蛋白质）。5．启动子中的元件通常可以分为两种：（核心启动子元件）和（上游启动子元件）。 6．分子生物学的研究内容主要包含（结构分子生物学）、（基因表达与调控）、（DNA重组技术）三部分。7．证明DNA是遗传物质的两个关键性实验是（肺炎球菌感染小鼠）、（ T2噬菌体感染大肠杆菌）这两个实验中主要的论点证据是：（生物体吸收的外源DNA改变了其遗传潜能）。 8．hnRNA与mRNA之间的差别主要有两点：（hnRNA在转变为mRNA的过程中经过剪接，）、 （mRNA的5′末端被加上一个m7pGppp帽子，在mRNA3′末端多了一个多聚腺苷酸(polyA)尾巴）。 9．蛋白质多亚基形式的优点是（亚基对DNA的利用来说是一种经济的方法）、（可以减少蛋白质合成过程中随机的错误对蛋白质活性的影响）、（活性能够非常有效和迅速地被打开和被关闭）。 10．蛋白质折叠机制首先成核理论的主要内容包括（成核）、（结构充实）、（最后重排）。 11．半乳糖对细菌有双重作用；一方面（可以作为碳源供细胞生长）；另一方面（它又是细胞壁的成分）。所以需要一个不依赖于cAMP—CRP的启动子S2进行本底水平的永久型合成；同时需要一个依赖于cAMP—CRP的启动子S1对高水平合成进行调节。有G时转录从（ S2）开始，无G时转录从（ S1）开
分子生物学试题及答案
生命科学系本科2010-2011学年第1学期试题分子生物学（A）答案及评分标准 一、选择题，选择一个最佳答案（每小题1分，共15分） 1、1953年Watson和Crick提出（A ） A、多核苷酸DNA链通过氢键连接成一个双螺旋 B、DNA的复制是半保留的，常常形成亲本——子代双螺旋杂合链 C、三个连续的核苷酸代表一个遗传密码 D、遗传物质通常是DNA而非RNA 2、基因组是（D ） A、一个生物体内所有基因的分子总量 B、一个二倍体细胞中的染色体数 C、遗传单位 D、生物体的一个特定细胞内所有基因的分子总量 3、下面关于DNA复制的说法正确的是（D ） A、按全保留机制进行 B、按3＇→5＇方向进行 C、需要4种NTP加入 D、需要DNA聚合酶的作用 4、当过量的RNA与限量的DNA杂交时（A ） A、所有的DNA均杂交 B、所有的RNA均杂交 C、50%的DNA杂交 D、50%的RNA杂交 5、以下有关大肠杆菌转录的叙述，哪一个是正确的？（B ） A、-35区和-10区序列间的间隔序列是保守的 B、-35区和-10区序列距离对转录效率非常重要 C、转录起始位点后的序列对于转录效率不重要 D、-10区序列通常正好位于转录起始位点上游10bp处 6、真核生物mRNA转录后加工不包括（A ） A、加CCA—OH B、5＇端“帽子”结构 C、3＇端poly（A）尾巴 D、内含子的剪接 7、翻译后的加工过程不包括（C ） A、N端fMet或Met的切除 B、二硫键的形成 C、3＇末端加poly（A）尾 D、特定氨基酸的修饰
8、有关肽链合成的终止，错误的是（C ） A、释放因子RF具有GTP酶活性 B、真核细胞中只有一个终止因子 C、只要有RF因子存在，蛋白质的合成就会自动终止 D、细菌细胞内存在3种不同的终止因子：RF1、RF2、RF3 9、酵母双杂交体系被用来研究（C ） A、哺乳动物功能基因的表型分析 B、酵母细胞的功能基因 C、蛋白质的相互作用 D、基因的表达调控 10、用于分子生物学和基因工程研究的载体必须具备两个条件（B ） A、含有复制原点，抗性选择基因 B、含有复制原点，合适的酶切位点 C、抗性基因，合适的酶切位点 11、原核生物基因表达调控的意义是（D ） A、调节生长与分化 B、调节发育与分化 C、调节生长、发育与分化 D、调节代谢，适应环境 E、维持细胞特性和调节生长 12、乳糖、色氨酸等小分子物质在基因表达调控中作用的共同特点是（E ） A、与DNA结合影响模板活性 B、与启动子结合 C、与操纵基因结合 D、与RNA聚合酶结合影响其活性 E、与蛋白质结合影响该蛋白质结合DNA 13、Lac阻遏蛋白由（D ）编码 A、Z基因 B、Y基因 C、A基因 D、I基因 14、紫外线照射引起DNA损伤时，细菌DNA修复酶基因表达反应性增强，这种现象称为（A ） A、诱导 B、阻遏 C、正反馈 D、负反馈 15、ppGpp在何种情况下被合成？（A ） A、细菌缺乏氮源时 B、细菌缺乏碳源时 C、细菌在环境温度太高时 D、细菌在环境温度太低时 E、细菌在环境中氨基酸含量过高时
关于分子生物学试题及答案
分子生物学试题（一） 一.填空题(,每题1分,共20分) 一.填空题(每题选一个最佳答案,每题1分,共20分) 1. DNA的物理图谱是DNA分子的（）片段的排列顺序。 2. 核酶按底物可划分为（）、（）两种类型。 3．原核生物中有三种起始因子分别是（）、（）和（）。 4．蛋白质的跨膜需要（）的引导，蛋白伴侣的作用是（）。5．真核生物启动子中的元件通常可以分为两种：（）和（）。6．分子生物学的研究内容主要包含（）、（）、（）三部分。 7．证明DNA是遗传物质的两个关键性实验是（）、（）。 8．hnRNA与mRNA之间的差别主要有两点：（）、（）。 9．蛋白质多亚基形式的优点是（）、（）、（）。 10.蛋白质折叠机制首先成核理论的主要内容包括（成核）、（结构充实）、（最后重排）。 11.半乳糖对细菌有双重作用；一方面（可以作为碳源供细胞生长）；另一方面（它又是细胞壁的成分）。所以需要一个不依赖于cAMP-CRP的启动子S2进行本底水平的永久型合成；同时需要一个依赖于cAMP-CRP的启动子S1对高水平合成进行调节。有G时转录从（S2 ）开始，无G时转录从（S1 ）开始。 12．DNA重组技术也称为（基因克隆）或（分子克隆）。最终目的是（把一个生物体中的遗传信息DNA转入另一个生物体）。典型的DNA重组实验通常包含以下几个步骤： ①提取供体生物的目的基因（或称外源基因），酶接连接到另一DNA分子上（克隆载体），形一个新的重组DNA分子。 ②将这个重组DNA分子转入受体细胞并在受体细胞中复制保存，这个过程称为转化。 ③对那些吸收了重组DNA的受体细胞进行筛选和鉴定。 ④对含有重组DNA的细胞进行大量培养，检测外援基因是否表达。 13、质粒的复制类型有两种：受到宿主细胞蛋白质合成的严格控制的称为（严紧型质粒），不受宿主细胞蛋白质合成的严格控制称为（松弛型质粒）。 14．PCR的反应体系要具有以下条件： a、被分离的目的基因两条链各一端序列相互补的 DNA引物（约20个碱基左右）。 b、具有热稳定性的酶如：TagDNA聚合酶。 c、dNTP d、作为模板的目的DNA序列 15．PCR的基本反应过程包括：（变性）、（退火）、（延伸）三个阶段。 16、转基因动物的基本过程通常包括： ①将克隆的外源基因导入到一个受精卵或胚胎干细胞的细胞核中； ②接种后的受精卵或胚胎干细胞移植到雌性的子宫；
(精选)分子生物学期末考试题目及答案
分子生物学复习提纲 一．名词解释 （1）Ori ：原核生物基因质粒的复制起始位点，是四个高度保守的19bp组成的正向重复序列，只有ori能被宿主细胞复制蛋白质识别的质粒才能在该种细胞中复制。 ARS：自主复制序列，是真核生物DNA复制的起点，包括数个复制起始必须的保守区。不同的ARS序列的共同特征是一个被称为A区的11bp的保守序列。（2）Promoter：启动子，与基因表达启动有关的顺式作用元件，是结构基因的重要成分，它是位于转录起始位点5’端上游区大约100~200bp以内的具有独立功能的DNA序列，能活化RNA 聚合酶，使之与模板ＤＮＡ准确地相结合并具有转录起始的特异性。 （3）r-independent termination不依赖r因子的终止，指在不依赖r因子的终止反应中，没有任何其他因子的参与，核心酶也能在某些位点终止转录。（强终止子） （4）SD sequence：ＳＤ序列（核糖体小亚基识别位点），存在于原核生物起始密码ＡＵＧ上游７～１２个核苷酸处的一种４～７个核苷酸的保守片段，它与１６ＳｒＲＮＡ３’端反向互补，所以可以将mRNA的AUG起始密码子置于核糖体的适当位置以便起始翻译作用。 Kozak sequence：存在于真核生物mRNA的一段序列，核糖体能够识别mRNA 上的这段序列，并把它作为翻译起始位点。 （5）Operator：操纵基因，与一个或者一组结构基因相邻近，并且能够与一些特异的阻遏蛋白相互作用，从而控制邻近的结构基因表达的基因。 Operon：操纵子，是指原核生物中由一个或多个相关基因以及转录翻译调控元件组成的基因表达单元。包括操纵基因、结构基因、启动基因。 （6）Enhancer：增强子，能强化转录起始的序列的为增强子或强化子Silencer：沉默子，可降低基因启动子转录活性的一段DNA顺式元件。与增强子作用相反。 （7）cis-acting element ：顺式作用元件，存在于基因旁侧序列中能影响基因表达的序列，包括启动子、增强子、调控序列和可诱导元件，本身不编码任何蛋白质，仅仅提供一个作用位点，与反式作用因子相互作用参与基因表达调控。 trans-acting factor：反式作用因子，是指直接或间接地识别或结合在各类顺式作用元件核心序列上参与调控靶基因转录效率的蛋白质。具有三个功能结构域，即DNA结合域、转录结合域、结合其他结合蛋白的结构域。 （8）Open reading frame (ORF)：开放式阅读框架，是指一组连续的含有三联密码子的能够被翻译成为多肽链的DNA序列。它由起始密码子开始，到终止密码子结束。 （9）Gene：基因，产生一条多肽链或功能RNA所需的全部核苷酸序列。（能转录且具有生物学功能的DNA/RNA的序列。）
分子生物学复习题
1、分子生物学的定义。 从分子水平研究生物大分子的结构与功能从而阐明生命现象本质的科学，主要指遗传信息的传递（复制）、保持（损伤和修复）、基因的表达（转录和翻译）与调控。 2、简述分子生物学的主要研究内容。 a.DNA重组技术（基因工程） （1）可被用于大量生产某些在正常细胞代谢中产量很低的多肽 ; （2）可用于定向改造某些生物的基因组结构 ; （3）可被用来进行基础研究 b.基因的表达调控 在个体生长发育过程中生物遗传信息的表达按一定时序发生变化（时序调节），并随着内外环境的变化而不断加以修正（环境调控）。 c.生物大分子的结构和功能研究(结构分子生物学） 一个生物大分子，无论是核酸、蛋白质或多糖，在发挥生物学功能时，必须具备两个前提： (1)拥有特定的空间结构（三维结构）； (2)发挥生物学功能的过程中必定存在着结构和构象的变化。 结构分子生物学就是研究生物大分子特定的空间结构及结构的运动变化与其生物学功能关系的科学。它包括3个主要研究方向： (1) 结构的测定 (2) 结构运动变化规律的探索 (3) 结构与功能相互关系 d.基因组、功能基因组与生物信息学研究 3、谈谈你对分子生物学未来发展的看法？ (1)分子生物学的发展揭示了生命本质的高度有序性和一致性，是人类认识论上的重大飞跃。生命活动的一致性，决定了二十一世纪的生物学将是真正的系统生物学，是生物学范围内所有学科在分子水平上的统一。 (2)分子生物学是目前自然学科中进展最迅速、最具活力和生气的领域，也是新世纪的带头学科。
(3)分子生物学是由生物化学、生物物理学、遗传学、微生物学、细胞学、以及信息科学等多学科相互渗透、综合融会而产生并发展起来的，同时也推动这些学科的发展。 (4)分子生物学涉及认识生命的本质，它也就自然广泛的渗透到医学、药学各学科领域中，成为现代医药学重要的基础。 1、DNA双螺旋模型是哪年、由谁提出的?简述其基本内容。 DNA双螺旋模型在1953年由Watson和Crick提出的。 基本内容： (1) 两条反向平行的多核苷酸链围绕同一中心轴相互缠绕，两条链均为右手双螺旋。 (2) 嘌呤与嘧啶碱位于双螺旋的内侧，3′,5′- 磷酸与核糖在外侧，彼此通过磷酸二酯键相连接，形成DNA分子的骨架。 (3) 双螺旋的平均直径为2nm,两个相邻碱基对之间相距的高度即碱基堆积距离 为0.34nm,两个核苷酸之间的夹角为36。。 (4) 两条核苷酸链依靠彼此碱基之间形成的氢键相连系而结合在一起，A与T相配对形成两个氢键，G与C相配对形成3个氢键。 (5) 碱基在一条链上的排列顺序不受任何限制，但根据碱基互补配对原则，当一条多核苷酸的序列被确定后，即可决定另一条互补链的序列。
分子生物学复习题及其答案
一、名词解释 1、广义分子生物学：在分子水平上研究生命本质的科学，其研究对象是生物大分子的结构和功能。2 2、狭义分子生物学：即核酸（基因）的分子生物学，研究基因的结构和功能、复制、转录、翻译、表达调控、重组、修复等过程，以及其中涉及到与过程相关的蛋白质和酶的结构与功能 3、基因：遗传信息的基本单位。编码蛋白质或RNA等具有特定功能产物的遗传信息的基本单位，是染色体或基因组的一段DNA序列(对以RNA作为遗传信息载体的RNA病毒而言则是RNA序列)。 4、基因：基因是含有特定遗传信息的一段核苷酸序列，包含产生一条多肽链或功能RNA 所必需的全部核苷酸序列。 5、功能基因组学：是依附于对DNA序列的了解，应用基因组学的知识和工具去了解影响发育和整个生物体的特定序列表达谱。 6、蛋白质组学：是以蛋白质组为研究对象，研究细胞内所有蛋白质及其动态变化规律的科学。 7、生物信息学：对DNA和蛋白质序列资料中各种类型信息进行识别、存储、分析、模拟和转输 8、蛋白质组：指的是由一个基因组表达的全部蛋白质 9、功能蛋白质组学：是指研究在特定时间、特定环境和实验条件下细胞内表达的全部蛋白质。 10、单细胞蛋白：也叫微生物蛋白，它是用许多工农业废料及石油废料人工培养的微生物菌体。因而，单细胞蛋白不是一种纯蛋白质，而是由蛋白质、脂肪、碳水化合物、核酸及不是蛋白质的含氮化合物、维生素和无机化合物等混合物组成的细胞质团。 11、基因组：指生物体或细胞一套完整单倍体的遗传物质总和。 12、C值：指生物单倍体基因组的全部DNA的含量，单位以pg或Mb表示。 13、C值矛盾：C值和生物结构或组成的复杂性不一致的现象。 14、重叠基因：共有同一段DNA序列的两个或多个基因。 15、基因重叠：同一段核酸序列参与了不同基因编码的现象。 16、单拷贝序列：单拷贝顺序在单倍体基因组中只出现一次，因而复性速度很慢。单拷贝顺序中储存了巨大的遗传信息，编码各种不同功能的蛋白质。 17、低度重复序列：低度重复序列是指在基因组中含有2～10个拷贝的序列 18、中度重复序列：中度重复序列大致指在真核基因组中重复数十至数万（<105）次的重复顺序。其复性速度快于单拷贝顺序，但慢于高度重复顺序。 19、高度重复序列：基因组中有数千个到几百万个拷贝的DNA序列。这些重复序列的长度为6~200碱基对。 20、基因家族：真核生物基因组中来源相同、结构相似、功能相关的一组基因，可能由某一共同祖先基因经重复和突变产生。 21、基因簇：基因家族的各成员紧密成簇排列成大段的串联重复单位，定位于染色体的特殊区域。 22、超基因家族：由基因家族和单基因组成的大基因家族，各成员序列同源性低，但编码的产物功能相似。如免疫球蛋白家族。 23、假基因：一种类似于基因序列，其核苷酸序列同其相应的正常功能基因基本相同、但却不能合成功能蛋白的失活基因。 24、复制：是指以原来DNA（母链）为模板合成新DNA（子链）的过程。或生物体以DNA/RNA
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分子生物学备选考题 名词解释: 1.功能基因组学 2.分子生物学 3.epigenetics 4.C值矛盾 5.基因簇 6.间隔基因 7.基因芯片 8.基序（Motifs） 9.CpG岛 10.染色体重建 11.Telomerase 12.足迹分析实验 13.RNA editing 14.RNA干涉（RNA interference） 15.反义RNA 16.启动子（Promoter） 17.SD序列(SD sequence) 18.碳末端结构域（carboxyl terminal domain，CTD） 19.single nucleotide polymorphism，SNP 20.切口平移（Nick translation） 21.原位杂交 22.Expressing vector 23.Multiple cloning sites 24.同源重组 25.转座 26.密码的摆动性 27.热休克蛋白嵌套基因 28.基因家族增强子 29.终止子 30.前导肽RNAi 31.分子伴侣 32.魔斑核苷酸 33.同源域 34.引物酶 35.多顺反子mRNA 36.物理图谱、 37.载体（vector） 38.位点特异性重组 39.原癌基因（oncogene） 40.重叠基因、 41.母源影响基因、
42.抑癌基因（anti-oncogene）、 43.回文序列（palindrome sequence）、 44.熔解温度（melting temperature, Tm） 45.DNA的呼吸作用（DNA respiration） 46..增色效应（hyperchromicity）、 47.C0t曲线（C0t curve）、 48.DNA的C值（C value） 49.超螺旋(superhelix) 、 50.拓扑异构酶（topoisomerase）、 51.引发酶(primase) 、 52.引发体(primosome) 53.转录激活(transcriptional activation) 54.dna基因(dna gene)、 55.从头起始(de novo initiation) 、 56.端粒（telomere） 57.酵母人工染色体（yeast artificial chromosome, YAC）、 58.SSB蛋白（single strand binding protein）、 59.复制叉(replication fork)、 60.保留复制(semiconservative replication) 61.滚环式复制(rolling circle replication)、 62.复制原点(replication origin)、 63.切口(nick) 64.居民DNA (resident DNA) 65.有义链(sense strand) 66.反义链(antisense strand) 67.操纵子(operon) 、 68.操纵基因(operator) 69.内含子(内元intron) 70.外显子(外元exon) 、 71.突变子(muton) 、 72.密码子（codon）、、 73.同义密码（synonymous codons）、 74.GC盒(GC box) 75.增强子(enhancer) 76.沉默子(silencer) 77.终止子(terminator) 78.弱化子（衰减子）(attenuator) 79.同位酶(isoschizomers) 、 80.同尾酶(isocandamers) 81.阻抑蛋白（阻遏蛋白）(repressor) 82.诱导物（inducer）、 83.CTD尾（carboxyl-terminal domain ） 84.载体（vector）、 85.转化体(transformant)
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第2章染色体与DNA 名词解释 原癌基因：细胞内与细胞增殖相关的正常基因，是维持机体正常生命活动所必须的，在进化上高等保守。当原癌基因的结构或调控区发生变异，基因产物增多或活性增强时，使细胞过度增殖，从而形成肿瘤。 复制：以亲代DNA或RNA为模板，根据碱基配对的原则，在一系列酶的作用下，生成与亲代相同的子代DNA或RNA的过程。 转座子 (transposon 或 transposable element)：位于染色体DNA上可自主复制和位移的基本单位。包括插入序列和复合转座子。 半保留复制：以亲代DNA双链为模板以碱基互补方式合成子代DNA，这样新形成的子代DNA 中，一条链来自亲代DNA，而另一条链则是新合成的，这种复制方式叫半保留复制。 染色体：染色体是遗传信息的载体，由DNA、RNA和蛋白质构成，其形态和数目具有种系的特性。在细胞间期核中，以染色质形式存在。在细胞分裂时，染色质丝经过螺旋化、折叠、包装成为染色体，为显微镜下可见的具不同形状的小体。 核小体：是构成真核生物染色体的基本单位，是DNA和蛋白质构成的紧密结构形式，包括200bp左右的DNA和9个组蛋白分子构成的致密结构。 填空题 1.真核细胞核小体的组成是 DNA和蛋白 2.天然染色体末端不能与其他染色体断裂片段发生连接，这是因为天然染色体末端存在端粒结构。 3.在聚合酶链反应中，除了需要模板DNA外，还需加入引物、DNA聚合酶、dNTP和镁离子。 4.引起DNA损伤的因素有自发因素、物理因素、化学因素。 5.DNA复制时与DNA解链有关的酶和蛋白质有拓扑异构酶Ⅱ、解螺旋酶、单链DNA结合蛋白。 6.参与DNA切除修复的酶有DNA聚合酶Ⅰ、DNA连接酶、特异的核酸内切酶。 7.在真核生物中DNA复制的主要酶是DNA聚合酶δ。在原核生物中是DNA聚合酶Ⅲ。 8.端粒酶是端粒酶是含一段RNA的逆转录酶。 9.DNA的修复方式有错配修复、碱基切除修复、核苷酸切除修复、DNA的直接修复。 选择题 1.真核生物复制起点的特征包括（B） A. 富含G-C区 B. 富含A-T区 C. Z-DNA D. 无明显特征 2.插入序列（IS）编码（A） A.转座酶 B.逆转录酶 C. DNA合成酶 D.核糖核酸酶 3.紫外线照射对DNA分子的损伤主要是(D) A.碱基替换 B.磷酸脂键断裂 C。碱基丢失 D.形成共价连接的嘧啶二聚体 4.自然界中以DNA为遗传物质的大多数生物DNA的复制方式（C） A.环式 B.D环式 C.半保留 D.全保留 5.原核生物基因组中没有（A） A.内含子 B.外显子 C.转录因子 D.插入序列 6.关于组蛋白下列说法正确的是(D)
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问答题： 1 衰老与基因的结构与功能的变化有关，涉及到：（1）生长停滞；（2）端粒缩短现象；（3）DNA损伤的累积与修复能力减退；（4）基因调控能力减退。 2 超螺旋的生物学意义：（1）超螺旋的DNA比松驰型DNA更紧密，使DNA分子体积变得更小，对其在细胞的包装过程更为有利；（2）超螺旋能影响双螺旋的解链程序，因而影响DNA分子与其它分子（如酶、蛋白质）之间的相互作用。 3 原核与真核生物学mRNA的区别： 原核：（1）往往是多顺反子的，即每分子mRNA带有几种蛋白质的遗传信息（来自几个结构基因）。（2）5端无帽子结构，3端一般无多聚A尾巴。（3）一般没有修饰碱基，即这类mRNA分子链完全不被修饰。 真核：（1）5端有帽子结构（2）3端绝大多数均带有多聚腺苷酸尾巴，其长度为20-200个腺苷酸。（3）分子中可能有修饰碱基，主要有甲基化，（4）分子中有编码区与非编码区。 4 tRNA的共同特征： （！）单链小分子，含73-93个核苷酸。（2）含有很多稀有碱基或修饰碱基。（3）5端总是磷酸化，5末端核苷酸往往是pG。（4）3端是CPCPAOH序列。（5）分子中约半数的碱基通过链内碱基配对互相结合，开成双螺旋，从而构成其二级结构，开头类似三叶草。（6）三级结构是倒L型。 5 核酶分类：（1）异体催化的剪切型，如RNaseP；（2）自体催化的剪切型，如植物类病毒等；（3）内含子的自我剪接型，如四膜虫大核26SrRNA前体。 6 hnRNA变成有活性的成熟的mRNA的加工过程： （1）5端加帽；（2）3端加尾（3）内含子的切除和外显子的拼接；（4）分子内部的甲基化修饰作用，（5）核苷酸序列的编辑作用。 7 反义RNA及其功能： 碱基序列正好与有意义mRNA互补的RNA称为反意义或反义RNA，又称调节RNA，这类RNA是单链RNA，可与mRNA配对结合形成双链，最终抑制mRNA作为模板进行翻译。这是其主要调控功能，还可作为DNA复制的抑制因子，与引物RNA互补结合抑制DNA的复制，以及在转录水平上与mRNA5末端互补，阻止RNA合成转录。 8 病毒基因组分型：（1）双链DNA（2）单链正股DNA（3）双链RNA（4）单链负股RNA（5）单链正股RNA 9 病毒基因组结构与功能的特点： （1）不同病毒基因组大小相差较大；（2）不同病毒的基因组可以是不同结构的核酸。（3）病毒基因组有连续的也有不连续的；（4）病毒基因组的编码序列大于90%；（5）单倍体基因组，（6）基因有连续的和间断的，（7）相关基因丛集；（8）基因重叠（9）病毒基因组含有不规则结构基因，主要类型有：a几个结构基因的编码区无间隔；bmRNA没有5端的帽结构；c结构基因本身没有翻译起始序列。 10 原核生物基因组的结构的功能特点： （1）基因组通常仅由一条环状双链DNA分子组成。 （2）基因组中只有1个复制起点。 （3）具有操纵子结构。（4）编码顺序一般不会重叠。（5）基因是连续的，无内含子，因此转录后不需要剪切。（6）编码区在基因组中所占的比例（约占50%）远远大于真核基因组，但又远远小于病毒基因组。（7）基因组中重复序列很少（8）具有编码同工酶的基因。（9）细菌基因组中存在着可移动的DNA序列，包括插入序列和转座子。 （10）在DNA分子中具有多种功能的识别区域。 11??真核生物基因组结构与功能的特点：
分子生物学复习题(有详细答案)
绪论 思考题：（P9） 1.从广义和狭义上写出分子生物学的定义？ 广义上讲的分子生物学包括对蛋白质和核酸等生物大分子结构与功能的研究，以及从分子水平上阐明生命的现象和生物学规律。 狭义的概念，即将分子生物学的范畴偏重于核酸（基因）的分子生物学，主要研究基因或DNA结构与功能、复制、转录、表达和调节控制等过程。其中也涉及与这些过程相关的蛋白质和酶的结构与功能的研究。 2、现代分子生物学研究的主要内容有哪几个方面？什么是反向生物学？什么是 后基因组时代？ 研究内容： DNA的复制、转录和翻译；基因表达调控的研究；DNA重组技术和结构分子生物学。 反向生物学：是指利用重组DNA技术和离体定向诱变的方法研究已知结构的基因相应的功能，在体外使基因突变，再导入体内，检测突变的遗传效应，即以表型来探索基因结构。 后基因组时代：研究细胞全部基因的表达图式和全部蛋白质图式，人类基因组研究由结构向功能转移。 3、写出三个分子生物写学展的主要大事件（年代、发明者、简要内容） 1953年Watson和Click发表了?脱氧核糖核苷酸的结构?的著名论文，提出了DNA的双螺旋结构模型。 1972~1973年，重组DNA时代的到来。H.Boyer和P.Berg等发展了重组DNA 技术，并完成了第一个细菌基因的克隆，开创了基因工程新纪元。 1990~2003年美、日、英、法、俄、中六国完成人类基因组计划。解读人类遗传密码。 4、21世纪分子生物学的发展趋势是怎样的？ 随着基因组计划的完成，人类已经掌握了模式生物的所有遗传密码。又迎来了后基因组时代，人类基因组的研究重点由结构向功能转移。相关学说理论相应诞生，如功能基因组学、蛋白质组学和生物信息学。生命科学又进入了一个全新的时代。 第四章 思考题：（P130） 1、基因的概念如何？基因的研究分为几个发展阶段？ 概念：基因是原核、真核生物以及病毒的DNA和RNA分子中具有遗传效应的核苷酸序列，是遗传的基本单位和突变单位以及控制形状的功能单位。 发展阶段：○120世纪50年代以前，主要从细胞的染色体水平上进行研究，属于基因的染色体遗传学阶段。 ○220世纪50年代以后，主要从DNA大分子水平上进行研究，属于分
分子生物学试题
分子生物学试题 一、名词解释 1、基因：能够表达和产生蛋白质和RNA的DNA序列，是决定遗传性状的功能单位。 2、基因组：细胞或生物体的一套完整单倍体的遗传物质的总和。 3、端粒：以线性染色体形式存在的真核基因组DNA末端都有一种特殊的结构叫端粒。该结构是一段DNA序列和蛋白质形成的一种复合体，仅在真核细胞染色体末端存在。 4、操纵子：是指数个功能上相关的结构基因串联在一起，构成信息区，连同其上游的调控区（包括启动子和操纵基因）以及下游的转录终止信号所构成的基因表达单位，所转录的RNA 为多顺反子。 5、顺式作用元件：是指那些与结构基因表达调控相关、能够被基因调控蛋白特异性识别和结合的特异DNA序列。包括启动子、上游启动子元件、增强子、加尾信号和一些反应元件等。 6、反式作用因子：是指真核细胞内含有的大量可以通过直接或间接结合顺式作用元件而调节基因转录活性的蛋白质因子。 7、启动子：是RNA聚合酶特异性识别和结合的DNA序列。 8、增强子：位于真核基因中远离转录起始点，能明显增强启动子转录效率的特殊DNA序列。它可位于被增强的转录基因的上游或下游，也可相距靶基因较远。 9、基因表达：是指生物基因组中结构基因所携带的遗传信息经过转录、翻译等一系列过程，合成特定的蛋白质，进而发挥其特定的生物学功能和生物学效应的全过程。 10、信息分子：调节细胞生命活动的化学物质。其中由细胞分泌的调节靶细胞生命活动的化学物质称为细胞间信息分子；而在细胞内传递信息调控信号的化学物质称为细胞内信息分子。11、受体：是存在于靶细胞膜上或细胞内能特异识别生物活性分子并与之结合，进而发生生物学效应的的特殊蛋白质。 12、分子克隆：在体外对DNA分子按照即定目的和方案进行人工重组，将重组分子导入合适宿主，使其在宿主中扩增和繁殖，以获得该DNA分子的大量拷贝。 13、蛋白激酶：是指能够将磷酸集团从磷酸供体分子转移到底物蛋白的氨基酸受体上的一大类酶。 14、蛋白磷酸酶：是具有催化已经磷酸化的蛋白质分子发生去磷酸化反应的一类酶分子，与蛋白激酶相对应存在，共同构成了磷酸化和去磷酸化这一重要的蛋白质活性的开关系统。 15、基因工程：有目的的通过分子克隆技术，人为的操作改造基因，改变生物遗传性状的系列过程。 16、载体：能在连接酶的作用下和外源DNA片段连接并运送DNA分子进入受体细胞的DNA 分子。 17、转化：指质粒DNA或以它为载体构建的重组DNA导入细菌的过程。 18、感染：以噬菌体、粘性质粒和真核细胞病毒为载体的重组DNA分子，在体外经过包装成具有感染能力的病毒或噬菌体颗粒，才能感染适当的细胞，并在细胞内扩增。 19、转导：指以噬菌体为载体，在细菌之间转移DNA的过程，有时也指在真核细胞之间通过逆转录病毒转移和获得细胞DNA的过程。 20、转染：指病毒或以它为载体构建的重组子导入真核细胞的过程。 21、 DNA变性：在物理或化学因素的作用下，导致两条DNA链之间的氢键断裂，而核酸分子中的所有共价键则不受影响。 22、 DNA复性：当促使变性的因素解除后，两条DNA链又可以通过碱基互补配对结合形成DNA 双螺旋结构。 23、退火：指将温度降至引物的TM值左右或以下，引物与DNA摸板互补区域结合形成杂交
(完整版)分子生物学》试题及答案
《分子生物学》考试试题B 课程号：66000360 考试方式：闭卷 考试时间： 一、名词解释（共10题，每题2分，共20分） 1. SD 序列 2. 重叠基因 3．ρ因子 4．hnRNA 5. 冈崎片段、 6. 复制叉(replication fork) 7. 反密码子(anticodon)： 8. 同功tRNA 9. 模板链(template strand) 10. 抑癌基因 二、填空题（共20空，每空1分，共20分） 1.原核基因启动子上游有三个短的保守序列,它们分别为____和__区. 2.复合转座子有三个主要的结构域分别为______、______、________。 3.原核生物的核糖体由_____小亚基和_____大亚基组成，真核生物核糖糖体由_____小亚基和_______大亚基组成。 4.生物界共有___个密码子，其中__ 个为氨基酸编码，起始密码子为__ _______；终止密码子为_______、__________、____________。 5. DNA生物合成的方向是_______，冈奇片段合成方向是_______。 6.在细菌细胞中，独立于染色体之外的遗传因子叫_______。它是一
种_______状双链DNA，在基因工程中，它做为_______。 三．判断题（共5题，每题2分，共10分） 1.原核生物DNA的合成是单点起始，真核生物为多点起始。( ) 2.在DNA生物合成中，半保留复制与半不连续复制指相同概念。( ) 3.大肠杆菌核糖体大亚基必须在小亚基存在时才能与mRNA结合。( ) 4.密码子在mRNA上的阅读方向为5’→ 3’。( ) 5.DNA复制时，前导链的合成方向为5’→ 3’，后随链的合成方向也是5’→ 3’。（） 四、简答题（共6题，每题5分，共30分） 1.简述三种RNA在蛋白质生物合成中的作用。 2.蛋白质合成后的加工修饰有哪些内容? 3.简述人类基因组计划的主要任务。 4.简述现代分子生物学的四大研究热点。 5.何谓转座子?简述简单转座子发生转座作用的机理。 6.简述大肠杆菌乳糖操纵子与色氨酸操纵子在阻遏调控机制上有那些区别？ 四、问答题（共2题，共20分） 1.叙述蛋白质生物合成的主要过程。（10分） 2.请叙述真核基因的表达调控主要发生在那些环节？分别是怎样进行 的？（10分）
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核酸结构与功能 一、填空题 1．病毒ΦX174及M13的遗传物质都是单链DNA 。 2．AIDS病毒的遗传物质是单链RNA。 3．X射线分析证明一个完整的DNA螺旋延伸长度为 3.4nm 。 4．氢键负责维持A-T间（或G-C间）的亲和力 5．天然存在的DNA分子形式为右手B型螺旋。 二、选择题（单选或多选） 1．证明DNA是遗传物质的两个关键性实验是：肺炎球菌在老鼠体内的毒性和T2噬菌体感染大肠杆菌。 这两个实验中主要的论点证据是（C ）。 A．从被感染的生物体内重新分离得到DNA作为疾病的致病剂 B．DNA突变导致毒性丧失 C．生物体吸收的外源DNA（而并非蛋白质）改变了其遗传潜能 D．DNA是不能在生物体间转移的，因此它一定是一种非常保守的分子 E．真核心生物、原核生物、病毒的DNA能相互混合并彼此替代 2．1953年Watson和Crick提出（ A ）。 A．多核苷酸DNA链通过氢键连接成一个双螺旋 B．DNA的复制是半保留的，常常形成亲本-子代双螺旋杂合链 C．三个连续的核苷酸代表一个遗传密码 D．遗传物质通常是DNA而非RNA E．分离到回复突变体证明这一突变并非是一个缺失突变 3．DNA双螺旋的解链或变性打断了互补碱基间的氢键，并因此改变了它们的光吸收特性。以下哪些是对DNA的解链温度的正确描述？（ CD ） A．哺乳动物DNA约为45℃，因此发烧时体温高于42℃是十分危险的 B．依赖于A-T含量，因为A-T含量越高则双链分开所需要的能量越少 C．是双链DNA中两条单链分开过程中温度变化范围的中间值 D．可通过碱基在260nm的特征吸收峰的改变来确定 E．就是单链发生断裂（磷酸二酯键断裂）时的温度 4．DNA的变性（ACE ）。A．包括双螺旋的解链 B．可以由低温产生C．是可逆的D．是磷酸二酯键的断裂E．包括氢键的断裂 5．在类似RNA这样的单链核酸所表现出的“二级结构”中，发夹结构的形成（AD ）。 A．基于各个片段间的互补，形成反向平行双螺旋 B．依赖于A-U含量，因为形成的氢键越少则发生碱基配对所需的能量也越少 C．仅仅当两配对区段中所有的碱基均互补时才会发生 D．同样包括有像G-U这样的不规则碱基配对 E．允许存在几个只有提供过量的自由能才能形成碱基对的碱基 6．DNA分子中的超螺旋（ACE ）。
分子生物学题(含答案)
1.哪些因素引起 DNA 的突变？简要叙述生物体存在的修复方式。 突变引起的物理因素：辐射、紫外线等，化学因素：聚乙二醇，致癌物质等，生物因素：仙台病毒等。修复方式：错配修复恢复错配 切除修复（碱基、核苷酸）切除突变的碱基和核苷酸片段 重组修复复制后的修复，重新启动停滞的复制叉 DNA 直接修复修复嘧啶二体或甲基化DNA SOS 系统DNA 的修复，导致变异 2.描述乳糖操纵子的调控机制。（看不懂题目，乱写的） 乳糖操纵子的调控属于可诱导调节。在以乳糖为碳源的培养基中，在单个透过酶分子的作用下，少量乳糖分子进入细胞，又在单个β-半乳糖苷酶分子作用下转变成异构乳糖。某个异构乳糖与结合在操纵区上的阻遏物结合后使后者失活离开操纵区，开始了lac mRNA的生物合成。Lac mRNA翻译后生成大量的透过酶和β-半乳糖苷酶，加速了乳糖分子的转变。当乳糖分子都被消耗完毕时，阻遏物仍在不断被合成，有活性的阻遏物浓度超过了异构乳糖浓度，使细胞重新建立起阻遏状态，导致lac mRNA合成被抑制。mRNA 半衰期短，不到一个世代生长期，mRNA 几乎从细胞消失，透过酶和β-半乳糖苷酶的合成也趋于停止。 3.简述 DNA 半保留复制的概念。 每个子代分子的一条链来自亲代 DNA ，另一条链则是新合成的，这种复制方式被称为 DNA 的半保留复制。 4.对生物体转录和复制的特征进行说明比较？（网上找的） DNA 复制和RNA 转录在原理上是基本一致的，体现在：①这两种合成的直接前体是核苷三磷酸，从它的一个焦磷酸键获得能量促使反应走向合成；②两种合成都需要RNA 聚合酶和四种核苷酸；③两种合成都是以DNA为模板；④合成前都必须将双链DNA解旋成单链；⑤合成的方向都是5'→ 3'。 DNA 复制和RNA 转录的不同点体现在：①复制和转录所用的酶是不同的，复制用的是DNA 聚合酶，而转录用的是RNA聚合酶；②所用前体核苷三磷酸种类不同，DNA复制用四种脱氧核糖核苷三磷酸，即dATP、dGTP、dCTP、dTTP，而RNA 转录用四种核糖核苷三磷酸，即ATP、GTP、CrP、UTP 做前体底物；③在DNA 复制时是A 与T配对，而RNA转录是A与U配对；④DNA复制时两条链均做模板，而RNA 转录时只以其中一条链为模板；⑤DNA 复制是半不连续的，可产生冈崎片段，而RNA 转录是连续的；⑥DNA复制时需RNA 做引物，而RNA 转录无需引物；⑦DNA复制时需连接酶的参与，而RNA 转录时不需要。 5.阐述蛋白质生物合成途径 氨基酸的活化→翻译的起始（核糖体结合 mRNA 且甲硫氨酰 -tRNA* 结合到核糖体）→肽链的延伸（后续AA-tRNA 与核糖体的结合，肽键生成，移位）→肽链终止→蛋白质前体加工→蛋白质的折叠 6.简要叙述真核生物 mRNA的转录后加工的方式，这些加工方式各有何意义 RNA 的编辑：某些RNA，特别是mRNA 前体的一种加工方式，如插入、删除或取代一些核苷酸残基，导致DNA所编码的遗传信息的改变。因为经过编辑的mRNA 序列发生了不同于模板DNA的变化。生物学意义：校正作用有些基因突变在突变过程中丢失的遗传信息可能通过RNA 的编辑得以回复 调控翻译通过编辑可以构建或去除起始密码子和终止密码子，是基因表达调控的一种方式
分子生物学试题 3
练习题一 (一)选择题 1、关于基因的说法错误的是(C) A、基因是贮存遗传信息的单位 B、基因的一级结构信息存在于碱基序列中 C、为蛋白质编码的结构基因中不包含翻译调控序列 D、基因的基本结构单位是一磷酸核苷 E、基因中存在调控转录和翻译的序列 2、结构基因的编码产物不包括(C) A、snRNA B、hnRNA C、启动子 D、转录因子 E、核酶 3、已知双链DNA的结构基因中，信息链的部分序列是5′AGGCTGACC3′,其编码的RNA相应序列是 (C) A、5′AGGCTGACC3′ B、5′UCCGACUGG3′ C、5′AGGCUGACC3′ D、5′GGUCAGCCU3′ E、5′CCAGUCGGA3′ 4、已知某 mRNA的部分密码子的编号如下(A)： 127 128 129 130 131 132 133 GCG UAG CUC UAA CGG UGA AGC 以此mRNA为模板，经翻译生成多肽链含有的氨基酸数目为 A、127 B、128 C、129 D、130 E、131 5、真核生物基因的特点是(D) A、编码区连续 B、多顺反子RNA C、内含子不转录 D、断裂基因 E、外显外数目=内含子数目—1 6、关于外显子说法正确的是(E) A、外显子的数量是描述基因结构的重要特征 B、外显子转录后的序列出现在hnRNA中 C、外显子转录后的序列出现在成熟mRNA D、外显子的遗传信息可以转换为蛋白质的序列信息 E、以上都对 7、断裂基因的叙述正确的是(B) A、结构基因中的DNA序列是断裂的 B、外显子与内含子的划分不是绝对的 C、转录产物无需剪接加工 D、全部结构基因序列均保留在成熟的mRNA分子中 E、原核和真核生物基因的共同结构特点 8、原核生物的基因不包括(A) A、内含子 B、操纵子 C、启动子 D、起始密码子 E、终止子 9、原核和真核生物的基因都具有(E) A、操纵元件 B、顺式作用元件 C、反式作用因子 D、内含子 E、RNA聚合酶结合位点 10、原核生物不具有以下哪种转录调控序列(A) A、增强子 B、终止子 C、启动子 D、操纵元件 E、正调控蛋白结合位点 11、关于启动子叙述错误的是(D) A、原核和真核生物均有 B、调控转录起始 C、与RNA聚合酶结合 D、都不能被转录 E、位于转录起始点附近 12、转录激活蛋白的作用是(B) A、识别和结合启动子 B、激活结构基因的转录 C、原核和真核生物均有 D、与RNA聚合酶结合起始转录 E、属于负调控的转录因子