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实验动物的随机分组方法

实验动物的随机分组方法
实验动物的随机分组方法

实验动物的随机分组方法

实验动物在运来之后,要经历什么样的步骤呢?

首先,要确认品系、雌雄、数量,并观察有无不良状态。这相当于一般商品交易中的“验货”环节。

第二,要进行适应性喂养。在此期间只需按雌雄分笼,每笼饲养适当数目即可。这个时间至少三天,多则一周。在前面的专题中已有述及。

第三,对动物进行标号。有多种方法,下面将一一具体介绍。

第四,随机分组。注意,不是随机分组再标号,而是标号后再分组。因为没有标号是没法随机的。

第五,进行实验处理。从这里开始,才是真正进入主题的实验了。包括造模、给药、手术等等处理。分组的设计

前已述及,经过适应性喂养、编号之后,我们就可以着手来分组了。但是,如何分组,要考虑两方面的问题:一是分几组?这涉及到实验设计的问题;二是如何把动物随机地分到这些组中去?下面我们来讨论第一个问题。如何随机在下一贴中再述。

分几组?每一组的干预处理是如何设计的?这是在还没做实验之前就应该确定好的方案。至少应是大体确定,一般不允许在实验开始时临时更换,更不允许将动物养了一段时间之后再决定如何分组。

做动物实验,很讲究“齐同对比”。

因此,第一个设计原则就是:要设立对照组。

按对象不同,可分为自身对照和平行对照;按目的不同,可分为空白对照(正常对照)、模型对照和阳性对照。

1自身对照组

自身对照是把实验动物本身在动物实验前、后两阶段的各项相关数据,分别作为对照组和实验组的结果并进行统计学处理。也可以是自身不同部位的对照,如:左侧和右侧,前面和后面等。

2平行对照组

平行对照组就是与实验组平行地设置另外的组,使之与实验组能够进行对比。它可分为分正常对照组、模型对照组和阳性对照组。

空白对照就是对动物不施加任何处理,正常饲养;或者必要时给予蒸馏水、生理盐水或其它药物的溶剂等。空白对照的设立就是为了突出正常动物与造成疾病的动物之间有何差别?

模型对照组通常就是以一定的方法造成动物的疾病,而不施加任何的处理。也就是说,想看在疾病状态下,没有任何干预措施的动物表现是如何的?模型对照的设立就是为了与空白相对比。当然,如果实验中不研究动物在疾病状态下的表现,而只需看看药物或化合物对正常动物的作用,则可不设立模型组。

阳性对照组通常是将模型动物给予一定的确实有效的药物加以处理,看看其治疗效果如何?阳性对照药的目的,就是看在此模型状态下,药物是否对之有效?假如阳性对照药都没有效的话,那可能此模型或者给药方式有问题;而阳性对照药有效,被测试的药物没有效,则说明被测药物不行。另一方面,被测药物与阳性药物对照,可看出孰优孰劣。因此,经此对比,可以突出被测药物的作用。但,并不是每一个实验都能找到阳性对照药,也不是每一个实验都需要设置阳性对照组。

例如:要观察某种药物对糖尿病的药效。首先,我们要设立一个空白对照,这样才能看出糖尿病的动物与正常动物的区别。第二,我们要有一个模型组。就是说,造成糖尿病,但不施加任何处理,任其得病,这样,才能与正常动物比较。因此,空白与模型通常是相对立而存在的。我想看某药是否有效,假如给药后的结果与糖尿病模型组没有显著差异,那是否就说明我的药物没有效呢?一般来说是的。但是,给予一个阳性对照药就更能确定。阳性对照药一般是临床上常用的药物。如果临床上用的药物对此动物模型没有效的话,则一方面说明此模型不适合作此类药物的筛选。

第二个方面就是:实验设计。

目前,常用的方法有:完全随机设计、随机区组设计、拉丁方设计等。实验设计方法不同,则随机方法不同。

1 完全随机设计

这是医学科研中最简单的一种设计。就是把动物或标本不加区分地随机分成若干个组。这种设计有一个重要的前提,那就是:所有动物必须是“同质”的,或者近似“同质”的。这种设计最好是各组动物数相等.这样的统计效最高.如实在难以做到,也就比较接近.切忌有人为了节省动物,把正常对照组的数目设计得比其它组少.关于其原理,统计学上有详解.

2随机区组设计

也称为配伍组设计.适合于两因素的实验.比如,既要考察几种药物对某一疾病的影响,又要考察年龄因素对疾病的影响,可采用此法.它要求随机先按某一因素分成相等的几组,再在组内按另一因素分成几个区.它对动物的要求比较高.而且在实验期间动物死亡而导致某一数据缺失的话,对统计效能的影响较大.因此,适合一些对动物损害不是特别大的实验.

随机的方法

所谓随机,是指机率均等。对于这个,我们并不陌生。日常生活的中抓阄,就是一种随机。福利彩票中的电脑抽奖也是一种随机。

那么,在动物实验中,随机分组就是要把等质的动物以相等的机率分配到预先设定的各组中去。

请注意这个“等质”的前提。这是不能忽视的一个因素。如果一批小鼠中,小的有18g的,大的有32g 的,体重相差比较大,我们按随机方法分配到各组,那这样的结果实际上并没有达到我们的目的。因为这样有的组分到体重特别大的,有的组分到特别小的。又如:40只体重差异符合要求的小鼠,雌雄不拘,随机分组,那这样得到的结果能会是“等质”的吗?我想,很难保证每个组雌雄的数目相等吧?因为,性别不同,即使体重差不多,也不是“等质”的。所以,在进行随机之前,我们要做的一个事情就是:先把雌雄分开,然后各自按体重分层。基本保证个体都在平均体重的20%上下波动。雌雄分别随机,然后各层内分别随机。所以,我们可见到在论文中,经常会有这样一句话,“按性别、体重分层随机分为……”。

那么如何实现随机呢?目前的方法主要有:随机数字表、软件法、计算器法。

1随机数字表法这是一种比较传统的方法。在数理统计或者科研设计的书后,通常附有随机数字表。这个表是由计算机排出来的。我们按照一定地方法查,就能得到我们所需要的结果。首先,要知道实验分为几个组。计算出每组多少只动物。比如,分为4个组,每组12个动物。然后,从这个表的任何一个位置查起,可以向任意一个方向查。事实上,我们多数习惯从左向右查。把查到的第一个数字除以总的动物数(此处即为48),得到余数。得到余数为1~12为甲组,13~24为乙组,25~36为丙组,37~48为第四组。当随机数小于除数本身,则余数为随机数本身。除尽的话,余数算作除数本身。这样,就可以把各个号随机分配到各组。但通常一次操作不能使各组的数目相等。这就需要调整。如何调呢?就是把数目最多的调往最少的。选择哪一个调过去呢?要接着查随机数字,但除数变为数目最多的那组的数字,余数为几,就调第几个数字到最少的组。如此反复,直至调到相等为止。

从上述做法我们可以看出,其过程比较繁琐,对于大数目的动物要快速实现随机并不是很实用。但是,它让我们了解了随机方法的特点。而且,在没有计算机的情况下,不失为一种重要且几乎唯一的方法。

2软件法许多统计软件都可以进行这一过程。我们常用的Excel就可以实现这一功能。尽管像著名的统计软件SAS,SPSS都有这一功能,但为了普及简便方法的应用,我还是推荐Excel。因为它是目前我们最常用的必不可少的办公软件。且使用它进行随机时,不需要编程,且其表格功能十分灵活,便于编辑和保存。一般操作方法是:在第一列按顺序把各动物编号按升序排列,然后在第二列以Excel中自带的“RAND()”函数插入随机数,以拖曳功能将各个编号附上一个随机号。然后把这些随机数通过“复制”-“选择性粘贴”-“数值”操作而固定下来,再与动物编号一起以“扩展区域”形式按升序排列,即得到了各组的随机号码。其具体操作参见:周一平.用Excel软件进行药物毒理实验的随机分组.医药沙龙.2005;29(9):425-427. 当然,熟悉SPSS、SAS的朋友也可用其实现这一功能。SPSS操作的方法参见:黎明,韦强.用统计分析软件随机分组与随机抽样的方法.广西中医学院学报.2003;6(1):108-110. 个人认为,用SPSS操作比Excel稍嫌麻烦,不过,随后的统计分析却方便一些。

软件操作的优点就是:可进行大量数目的随机过程,快速、简便,并对于后续操作十分有利。这样,我们省去了去查阅随机数字表的麻烦,2~3分钟就轻松搞定一个随机分配过程。不过,我仍然建议初学者学会使用随机数字表,就像能精通计算器的人也要先学学珠算一样。这样,一则是能在没有计算机的情况下实现随机;二则是能更加感受到使用计算机的快捷。

3计算器法这一方法只适合于分两组时的情况。计算器有个随机数的功能。能给出1以下的任意一个随机数。可以把大于0.5的分于甲组,小于0.5的分于乙组。不断地按计算器,就可以快速地实现随机。当然,这一般是在没有计算机,且不愿意查随机数字表下选择的方法。但这一方法应用并不多。目前用软件法是一个主流趋势。

一点多余的讨论:虽然目前计算机的广泛使用使得随机分组成为一个非常简单的事情,但我想,在没有计算机出现以前人们做实验时是怎样随机分组的呢?这就是说,在没有计算机、没有随机数字表(此表也是由计算机排出来的)的情况下,我们怎样去实现随机呢?

一是抓阄法。但这种方法并不是完全随机。它受到阄的形状、大小的影响。也就是说,当把阄团分散开来的时候,是否机率是相等的?常见的是拿扑克牌来抽取,或者自制纸团。这种方法带一点游戏性质。用于科研多有不妥。

二是“土办法”。有些年龄较大的做药理的科研人员并没有受过严格的随机的训练,在当时也没有计算机的普及,于是他们在实践中总结出一些实用的方法。其做法也很简单:把同质的动物依次放到几个组中。比如,有四个组,第一轮按照1,2,3,4的顺序来放,第二轮按2,3,4,1的顺序来放,第三轮按3,4,1,2的顺序来放,第四轮按4,1,2,3的顺序来放,第五轮按1,2,3,4的顺序来放,如此反复,直至分配完成。这种方法有一定的随机作用,但只能属于半随机。因为,在放动物的时候,是按照一定的顺序的,但这种顺序又有一定的变化。就是说,抓动物是随机的,但放的时候并不是完全随机,而只是尽量使每组的机会均等。记得小时候农村里分鱼的时候,就是用这种方法。这种方法有一定的实用性,但在计算机普及的今天,在严谨的药理实验中,理应淘汰。

实验动物房的设计

实验动物房的设计 根据实验动物微生物控制标准,可将实验动物分为四级: 一级普通动物(CV),系指微生物不受特殊控制的一般动物。要求排除人兽共患病的病原体和极少数的实验动物烈性传染病的病原体。为防止传染病,在实验动物饲养和繁殖时,要采取一定的措施,应保证其用于测试的结果具有反应的重现性(即无论不同的操作人员,在不同的时间,用同一品系的动物按规定的实验规程所做的实验,都能获得几乎相同的结果)。 二级清洁动物(CL),要求排除人兽共患病及动物主要传染病的病原体。 三级无特殊病原体动物(SPF),要求到二级外,还要排除一些规定的病原体。其除菌与灭菌的方法,可使用高效空气过滤器除菌法、紫外线灭菌法、三甘醇蒸气喷雾法及氯化锂水溶液喷雾法。 四级无菌动物(GF)或栖生动物(GN),无菌动物要求不带有任何用现有方法可检出的微生物。栖生动物要求在无菌动物体上植入一种或数种已知的微生物。 在病理学检查上,四类实验动物也有不同的病理检查标准。 一级外观健康,主要器官不应有病灶。 二级除一级指标外,显微镜检查无二级微生物病原的病变。 三级无特殊病原体动物。无二、三级微生物病原的病变。 四级不含二、三级微生物病原的病变,脾、淋巴结是无菌动物组织学结构。 综合上述,对不同级别的实验动物在动物房设计上和管理上则有不同的要求。 无菌、已知菌以及无特殊病原体动物都需要在无菌或尽可能无菌的环境里饲养,这种环境,目前国际上通用称为屏障环境,即用一道屏障把动物与周围污染的环境隔开,就如胎鼠在母鼠子宫内一样。这种环境从控制微生物的角度分为隔离系统、屏障系统、半屏障系统、开放系统和层流架系统等五大类。 A 隔离系统是在带有操作手套的容器中饲养动物的系统,用于饲养无菌动物和栖生动物。内部保持按微生物要求的100级的洁净度,但其设置的房间及操作人员不必按无菌室考虑。 B 屏障系统把10000~100000级左右的无菌洁净室作为饲养室,主要用于无特殊病原体动物的长期饲养和繁殖。入室施行严格管理,如淋浴、换贴身衣服等。 C 半屏障系统放宽对屏障系统中人及物出入房间时的管理,平面组成大致与屏障系统相同。 D 层流架系统笼具放在洁净的水平层流空气中。常用于小规模饲养,但在一般房间进行饲

动物的基本知识和操作技术

第二章动物实验的基本知识和操作技术 第一节实验动物 药理学实验常用的动物有蛙、蟾蜍、小白鼠、大白鼠、豚鼠、家兔、猫和犬等。常根据实验目的和要求选用不同的实验动物。由于不同的动物具有不同的特点,故所选用的动物应能较好地反映试验药物的选择性作用,并符合节约的原则。 (一)、实验动物的选择原则 1、尽量选择与人体结构、机能、代谢及疾病特征相似的动物; 2、选用的实验动物的解剖、生理特点应符合实验目的; 3、根据人与实验动物对同一刺激的反应差异,选用具有明显反应的动物; 4、根据生物医学研究必须达到的精确度,选用结构功能简单又能反映研究指标的动物; 5、选用患有人类类似疾病的近交系或突变系动物; 6、选用与实验设计、技术条件、实验方法等相适应的标准化动物; 7、在不影响实验目的与结果的前提下,选择最易获得、最经济、便于操作管理的动物; 8、供实验用的动物应具备质量合格证。 (二)、常用实验动物的特点 1、蛙和蟾蜍 离体心脏能较持久地有节律地搏动,常用于观察药物对心脏的作用;坐骨神经和腓肠肌标本可用来观察药物对周围神经、神经肌肉或横纹肌的作用;蛙的腹直肌还可以用于鉴定胆碱能药物的作用。 2、小白鼠 是实验室最常用的一种动物。易于大量繁殖,且价廉,适用需要大量动物的实验,如药物筛选、半数致死量测定、药物效价比较、抗感染、抗肿瘤药物及避孕药物的研究等。 3、大白鼠 与小白鼠相似。一些在小白鼠身上不便进行的实验可选用大白鼠,如药物抗炎作用的实验常选用大白鼠踝关节制备关节炎的模型。此外,也可用大白鼠直接记录血压、作胆管插管,或用大白鼠观察药物的亚急性或慢性毒性。大白鼠的血压和人相近,且稳定,现常用于抗高血压药物实验。

实验动物的随机分组方法

实验动物的随机分组方法 Prepared on 24 November 2020

实验动物的随机分组方法 数理统计学上,根据随机抽样的原则,编制了随机数目表,应用随机数目表代替抽签法,表中的数字都各自独立,全部数字无论从横行、纵行或斜行的顺序都是随机的。因此使其用时可任自一个数目开始,可从左而右,亦可从右而左,可从上而下,也可从下而上,按顺序取得需要的数目,其结果比抽签更为理想。 1.安全随机法 (1)甲、乙两组安全随机法:设有性别相同、体重在一定范围内的动物20只,试用完全随机法分成甲、乙两组:先将动物分别称量体重,然后按体重从轻到重依次为1、2、3……20号。在随机数目表中任自一数目开始,如自第三横第六纵列的数目56开始自左向右取20个数目,按动物编号和随机数目表上查得的20个数目对应排列,并令随机数目属于单数的归于甲组,属于双数的归于乙组,得下表格式: 这样列入甲组的动物有:4、5、8、10、11、12、15、17共8只;列入乙组的有1、2、3、6、7、9、13、14、16、18、19、20共12只;为使两组动物数相等,须把乙组中的2只改为甲组,但乙组中12只动物,哪2只应改为甲组仍需用随机法来决定。可接着使用前面用过的随机数目,前面已用过20个数字,第三横行第20数字为10,本行已无数字,故应顺序在第四行第1纵列开始算21和22个数字为12和56,为使乙组中12只动物都有改为甲组的机会,故用12除12得余数为0,因动物中无0号,故后推一个数目为56和85,用12除56得余数8,则应将乙组中第8只动物改为甲组,12除85得余数为1,则应将乙组中第1只动物改为甲组。以此类推。 (2)甲、乙、丙三组安全随机分组法:设性别相同、体重在一定范围内的健康大鼠18只,试用完全随机分为甲、乙、丙三组。先称量体重,按体重从轻到重依次编为1、2、3……18号,现从随机数目表上第六横行第一纵列的数目16开始,自上而下依次取18个数止,并与动物编号对应排列。为使每一只动物有同

实验动物的等级划分及实验动物房的设计规范

实验动物的等级划分及实验动物房的设计规范公司标准化编码 [QQX96QT-XQQB89Q8-NQQJ6Q8-MQM9N]

【特殊实验室】实验动物的等级划分及实验动物房的设计规范 一、实验动物的分类 实验室根据实验动物微生物控制标准,可将实验动物分为四级,分别是普通动物、清洁动物、无特殊病原体动物、无菌或栖生动物。 一级普通动物(CV),系指微生物不受特殊控制的一般动物。要求排除人兽共患病的病原体和极少数的实验动物烈性传染病的病原体。为防止传染病,在实验动物饲养和繁殖时,要采取一定的措施,应保证其用于测试的结果具有反应的重现性(即无论不同的操作人员,在不同的时间,用同一品系的动物按规定的实验规程所做的实验,都能获得几乎相同的结果)。 二级清洁动物(CL),要求排除人兽共患病及动物主要传染病的病原体。 三级无特殊病原体动物(SPF),要求到二级外,还要排除一些规定的病原体。其除菌与灭菌的方法,可使用高效空气过滤器除菌法、紫外线灭菌法、三甘醇蒸气喷雾法及氯化锂水溶液喷雾法。 四级无菌动物(GF)或栖生动物(GN),无菌动物要求不带有任何用现有方法可检出的微生物。栖生动物要求在无菌动物体上植入一种或数种已知的微生物。 二、四类实验动物的病理检查标准 在病理学检查上,四类实验动物也有不同的病理检查标准。 一级外观健康,主要器官不应有病灶。 二级除一级指标外,显微镜检查无二级微生物病原的病变。 三级无特殊病原体动物。无二、三级微生物病原的病变。 四级不含二、三级微生物病原的病变,脾、淋巴结是无菌动物组织学结构。三、动物房设计管理上的要求 对不同级别的实验动物在动物房设计上和管理上则有不同的要求。 无菌、已知菌以及无特殊病原体动物都需要在无菌或尽可能无菌的环境里饲养,这种环境,目前国际上通用称为屏障环境,即用一道屏障把动物与周围污染的环境隔开,就如胎鼠在母鼠子宫内一样。这种环境从控制微生物的角度分为隔离系统、屏障系统、半屏障系统、开放系统和层流架系统等五大类。 A隔离系统 是在带有操作手套的容器中饲养动物的系统,用于饲养无菌动物和栖生动物。内部保持按微生物要求的100级的洁净度,但其设置的房间及操作人员不必按无菌室考虑。 B屏障系统

动物实验操作的基本知识

动物实验操作的基本知识 一、实验动物抓拿固定 (一)小白鼠(mouse) 右手抓住其尾,放在鼠笼铁纱网上,然后用左手拇指及食指沿其背向前抓住其颈部,并以左手的小拇指和掌部夹住其尾固定在手上(图3-1)。取尾血及尾静脉注射时,可将mouse固定在金属或木制的固定器上。 (二)大白鼠(rat) 实验者应戴帆布手套,用右手将鼠尾抓住提起,放在粗糙的台面或鼠笼上,抓住鼠尾向后轻拉,左手抓紧两耳和头颈部皮肤,余下三指紧捏鼠背部皮肤,如果rat后肢挣扎厉害,可将鼠尾放在小指和无名指之间夹住,将整个鼠固定在左手中,右手进行操作(图3-2)。若进行手术或解剖,则应事先麻醉或处死,然后用棉线活结缚四肢,用棉线固定门齿,背卧位固定在大鼠固定板上。需取尾血及尾静脉注射时,可将其固定在大鼠固定盒里,将鼠尾留在外面供实验操作。 (三)豚鼠(cavy) Cavy具有胆小易惊的特性,因此抓取时要求快、稳、准。一般方法是:以右手拇指和食指夹住两前肢及头部,使整个颈胸部皆在手掌中(不要抓得太紧以免窒息),左手抓住两后肢,使腹部向上,而后进行操作(图3-3)。 (四)蛙或蟾蜍(frog or toad) 捉拿方法宜用左手将动物背部贴紧手掌固定,以中指、无名指、小拇指压住其左腹侧和后肢,拇指和食指分别压住左,右前肢,右手进行操作(图3-4)。 在捉拿toad时,注意勿挤压其两侧耳部突起之毒腺,以免毒液射到眼中。 实验如需长时间观察,可破坏其脑和脊髓以后放在蛙板上固定进行操作。 (五)家兔(rabbit) 用右手抓住其颈背部皮毛,轻提动物,再以左手托住其臀部,使家兔的体重主要落在左手掌心,然后按实验要求固定(图3-5)。作兔耳血管注射或取血时,可用兔盒固定。作各种手术时,可将家兔麻醉后固定在手术台上。固定方法常采用仰卧位固定,四肢用粗棉线固定,头用兔头固定夹固定或用棉线钩住家兔门齿再固定在兔台头端铁柱上。 (六)狗(dog)

临床试验中的随机分组方法

临床试验中的随机分组方法 时间:2009-10-23 22:17:46 来源:admin 万霞1,刘建平2 (1.中国医学科学院基础医学研究所/中国协和医科大学基础医学院流行病学教研室,北京市东单三5号, 100005; 2.北京中医药大学循证医学中心) 【摘要】成功地实施随机分配依赖于两个相关的步骤:(1)产生随机分配序列用于试验组和对照组的分配; (2)随机分配方案在随机分组实施过程中的隐匿。随机分组方法有: 简单随机化、区组随机化分段(或分层)随机化、分层区组随机化及动态随机化等;随机分配方案隐匿的方法有按顺序编码、不透光、密封的信封, 中心随机系统, 编号或编码的瓶子或容器, 中心药房准备的药物等。科研工作者在临床研究中需要根据设计方法, 正确选择随机分组及随机分配方案隐匿的方法。 【关键词】随机分配; 随机分组; 随机方案; 隐匿 随机分配方法确保对比组之间基线均衡可比,被认为是减少两组患者选择偏倚的最佳方法[1]。因此,有学者认为正是由于随机分配方法,使得随机对照试验在提高医疗卫生服务中起着至关重要的作用[2]。在临床研究中,正确地实施真正的随机分配是临床试验的关键。成功地实施随机分配依赖于两个相关的步骤[3]:(1)产生随机分配序列并用于随机分配到试验组和 对照组; (2) 随机分配方案在随机分组中的隐匿(allocation concealment)。没有随机隐匿的随机临床试验也称为开放式的随机对照试验。 有试验研究表明[4],如果用不适当的分组和双盲方法, 即使是随机临床试验,其干预效果也 会被显着地高估(在一项研究中干预效果平均被夸大约50% )。遗憾的是90%以上的随机临床试验随机分组不恰当[5]。对卫生系统重大科研课题的终审标书进行的系统评价发现,部分治疗性研究存在假的随机分组[6]。有学者分层随机选择综合性国家级中医药学术期刊4种、省级和中医学院(大学)学报类中医药学术期刊各10种, 专业杂志(如针灸) 4种, 共计28种, 从1996 年12月开始回溯20年, 从中选取所有中医药疗效评价的文章逐一评阅。研究结果发现, 83%的文章未描述随机分组方法,操作是否恰当难以判断[7]。

实验动物的等级划分及实验动物房的设计规范

【特殊实验室】实验动物的等级划分及实验动物房的设计规范 一、实验动物的分类 实验室根据实验动物微生物控制标准,可将实验动物分为四级,分别是普通动物、清洁动物、无特殊病原体动物、无菌或栖生动物。 一级普通动物(CV),系指微生物不受特殊控制的一般动物。要求排除人兽共患病的病原体和极少数的实验动物烈性传染病的病原体。为防止传染病,在实验动物饲养和繁殖时,要采取一定的措施,应保证其用于测试的结果具有反应的重现性(即无论不同的操作人员,在不同的时间,用同一品系的动物按规定的实验规程所做的实验,都能获得几乎相同的结果)。 二级清洁动物(CL),要求排除人兽共患病及动物主要传染病的病原体。 三级无特殊病原体动物(SPF),要求到二级外,还要排除一些规定的病原体。其除菌与灭菌的方法,可使用高效空气过滤器除菌法、紫外线灭菌法、三甘醇蒸气喷雾法及氯化锂水溶液喷雾法。 四级无菌动物(GF)或栖生动物(GN),无菌动物要求不带有任何用现有方法可检出的微生物。栖生动物要求在无菌动物体上植入一种或数种已知的微生物。 二、四类实验动物的病理检查标准 在病理学检查上,四类实验动物也有不同的病理检查标准。 一级外观健康,主要器官不应有病灶。 二级除一级指标外,显微镜检查无二级微生物病原的病变。 三级无特殊病原体动物。无二、三级微生物病原的病变。

四级不含二、三级微生物病原的病变,脾、淋巴结是无菌动物组织学结构。 三、动物房设计管理上的要求 对不同级别的实验动物在动物房设计上和管理上则有不同的要求。 无菌、已知菌以及无特殊病原体动物都需要在无菌或尽可能无菌的环境里饲养,这种环境,目前国际上通用称为屏障环境,即用一道屏障把动物与周围污染的环境隔开,就如胎鼠在母鼠子宫内一样。这种环境从控制微生物的角度分为隔离系统、屏障系统、半屏障系统、开放系统和层流架系统等五大类。 A隔离系统 是在带有操作手套的容器中饲养动物的系统,用于饲养无菌动物和栖生动物。内部保持按微生物要求的100级的洁净度,但其设置的房间及操作人员不必按无菌室考虑。 B屏障系统 把10000~100000级左右的无菌洁净室作为饲养室,主要用于无特殊病原体动物的长期饲养和繁殖。入室施行严格管理,如淋浴、换贴身衣服等。 C半屏障系统 放宽对屏障系统中人及物出入房间时的管理,平面组成大致与屏障系统相同。 D层流架系统 笼具放在洁净的水平层流空气中。常用于小规模饲养,但在一般房间进行饲养、操作和处理时有被污染的危险性。可用于半屏障的补充。

动物实验室设计方案

动物实验室设计布局要求与规范 动物实验室包括普通的动物实验室规划设计和洁净动物实验室规划设计,一般由前区、饲养区、动物实验室、辅助区组成。 1.动物实验室布局的设计:计符合实验室标准和使用要求的产品布局规划;确定实验室内产品的类别规格数量。 2.水电预留位置的设计:在确定了平面布局后,提供全面水电位置图,方便客户工程精准施工。 3.通排风系统的设计:在实验室新建或改造项目中,在规划阶段就参与其中,派专业的工程师到现场与相关的人员联系,根据实验室内通风载体的数量(如通风柜、集气罩、排气罩)设计出完整的通风方案;方案内容包括:建筑内预留排风管井的位置及尺寸,管道的分布及规格。确保通风的载体使用时的风速、排风量、噪声等指标符合国家标准,并与建筑内的空调、消防、照明等线路互不干绕。 4.气路管道系统的设计:根据实验对气体供应的需要,结合现场布局,提供供气系统设计方案,在保证气体纯度的同时,精密调控气体的压力和流量。 5.环保的设计:提供完善的废气净化处理解决方案,使实验中产生的废气得到有效的解决,符合环保的排放指标。 6.产品个性设计:根据实验流程及人员的特殊要求,调整产品结构和功能,设计出个性的产品以满足不同用户的需要。 7.安全设施的设计:按照国际标准,在实验室合理配置安全柜、毒品柜及紧急事故淋洗器,急救洗眼器等安全设施。 动物实验室的级别: 一级普通动物(CV),系指微生物不受特殊控制的一般动物。要求排除人兽共患病的病原体和积少数的实验动物烈性传染病的病原体。为防止传染病,在实验动物饲养和繁殖时,要采取一定的措施,应保证其用于测试的结果具有反应的重现性(即无论不同的操作人员,在不同的时间,用同一品系的动物按规定的实验规程所做的实验,都能获得几乎相同的结果)。 二级清洁动物(CL),要求排除人兽共患病及动物主要传染病的病原体。 三级无特殊病原体动物(SPF),要求到二级外,还要排除一些规定的病原体。其除菌与灭菌的方法,可使用高效空气过滤器除菌法、紫外线灭菌法、三甘醇蒸气喷雾法及氯化锂水溶液喷雾法。 四级无菌动物(GF)或悉生动物(GN)。无菌动物要求不带有任何用现有方法可检出的微生物。悉生动物要求在无菌动物体上植入一种或数种已知的微生物。 在病理学检查上,四类实验动物也有不同的病理检查标准。 一级外观健康,主要器官不应有病灶。 二级除一级指标外,显微镜检查无二级微生物病原的病变。 三级无特殊病原体动物。无二、三级微生物病原的病变。

随机分组原理与方法案例word

简单随机抽样,也叫纯随机抽样。就是从总体中不加任何分组、划类、排队等,完全随机地抽取调查单位。特点是:每个样本单位被抽中的概率相等,样本的每个单位完全独立,彼此间无一定的关联性和排斥性。简单随机抽样是其它各种抽样形式的基础。通常只是在总体单位之间差异程度较小和数目较少时,才采用这种方法。 适用于总体量大、差异程度较大的情况。先将总体单位按其差异程度或某一特征分类、分层,然后在各类或每层中再随机抽取样本单位。分层抽样实际上是科学分组、或分类与随机原则的结合。分层抽样有等比抽样和不等比抽样之分,当总数各类差别过大时,可采用不等比抽样。除了分层或分类外,其组织方式与简单随机抽样和等距抽样相同。 随机抽样设计 一、纯随机抽样:对总体的所有容量不做任何的分类和排队,完全按随机原则逐个抽取样本容量。 纯随机抽样的常用抽样方法 1)抽签法:将总体容量全部加以编号,并编成相应的号签,然后将号签充分混合后逐个抽取,直到抽到预定需要的样本容量为止。 缺点:总体容量很多时,编制号签的工作量很大,且很难掺和均匀。 2)随机数字法:用字母顺序或身份证号等任何方便的方法对总体容量编者按号,利用随机数表从1到总体容量N中随机抽取n(样本容量数)个数,遇到那些不在编号里的数字需跳过。 二、等距抽样:先将总体各单位按某一有关标志(或无关标志)排队,然后相等距离或相等间隔抽取样本单位。根据需要抽取的样本单位数(n)和全及总体单位数(N),可以计算出抽取各个样本单位之间的距离和间隔,即:K=N/n,然后按此间隔依次抽取必要的样本单位。 等距抽样的一个例子 某企业有职工5000名,现要随机抽取100人进行家庭收入水平调查。 抽取方法:按与研究目的无直接关系的姓名笔划对总体进行排列,把总体划分为 K=5000/100=50个相等的间隔,在第1至第50人中随机抽取一名,如抽到第10名,后面间隔依次抽取第60,110,160,210,…直到4960为止,总共抽取50同名职工组成一个抽样总体。 等距抽样的优点:(1)能保证被抽取到的样本单位在全及总体中均匀分布;(2)简化抽样过程。 等距抽样应注意:要避免抽样间隔或样本距离和现象本身的节奏性或循环周期相重合。三、类型抽样 类型抽样:将全及总体中的所有单位按某一主要标志分组,然后在各组中采用纯随机抽样或等距抽样方式,抽取一定数目的调查单位构成所需的样本。 适用范围:主要适用于总体情况比较复杂,各类型或层次之间的差异较大,而总体单位又较多的情形,分层使层内各单位之间的差异减小,层间差异扩大。 (一)类型比例抽样 按照总体单位数在各组之间的比例,分配各组的抽样单位数。即:各类型中抽取的样本单位数ni占该类型所有单位数Ni的比例是相等的,等同于样本单位总数n占总体单位数N的比

如何设计动物实验

如何设计动物实验 一般来说,动物实验的研究工作应该明确描述,研究的目的和/或者需要验证的假说。1、选择特定动物模型的原因。2、动物种、品系、来源和类型。3、每个独立实验步骤的详细描述,包括研究设计和使用动物数量。4、数据分析所用的统计学方法。动物实验设计有重要的意义的意义1、正确的动物实验设计对提高科学研究质量、发表高水平的学术论文非常重要2、目前许多动物实验质量不高。3、一个好的实验设计,对统计学分析来说帮助很大,可以使问题变得更加容易解决4、一个不正确的实验设计,导致结果信息无用。实验设计的主要目的一是保证所测变量的任何差异是由处理造成的,而不是其他非对照变量引起;另一个目的是通过控制确定的变量在尽可能小的范围内,减少所测反应的变异性,这样对处理效应的评介更准确。我将它分为以下几个步骤 一、实验设计的最初步骤 1、查阅文献 A: 明确研究焦点B:明确方法 C:明确模型D:评估实验 2、科研方法 A:观察和描述科研中的现象B:系统的陈述问题和解释问题的假说C:利用假说预测新的观察结果D:验证假说 3、问题的陈述、研究的目标和提出假说 ?问题提出:实验将说明的问题是什么,意义 ?研究目标:总目标,特殊问题 ?假说:对每一个至少给出两个预计结果 4、动物模型的确定 ?使用系统发育水平最低的动物,符合3R原则 ?使用的动物具有研究要求种属或品系专一特点,特定研究目的必须特点?实验期间动物模型维持条件 ?动物模型来源渠道 ?最终确定动物模型前征询实验动物兽医意见 5、实验合作者的确定 ?在研究的过程中,明确应用的试验技术操作,并确认具有相应操作专长的人员来完成。 ?让合作者了解实验:设计、计算、样品收集.... ?实验动物中心可以提供动物实验有关技术操作培训及昂贵设备服务 二、动物实验设计 1、研究方案 根据问题、目标、假说,提出实验操作安排的计划并文字化 考虑的方面: A:动物模型持续时间B: 模型中预期疾病的进程(决定测定的最适时间点) C:人员参加的时间,实验花费D:给药方法 E:风险评估F:统计学方法选定 2、实验单元 可以是一个动物,也可以是一组动物群体

临床试验中的随机分组方法 (2)

正确使用随机分组是取得比较组间初始可比性、避免选择性偏倚的保证。随机化分组的方法有多种,但真正的随机化应符合下列原则: (1)医生和患者不能事先知道或决定患者将分配到哪一组接受治疗; (2)医生和患者都不能从一个患者已经进入的组别推测出下一个患者将分配到哪一组。随机序列的产生可以采用计算机、计算器、随机数字表和抛硬币的方法来实现。其随机分组方法包括: 简单随机 化( simple rando mizaton)、区组随机化( blockrandomi zation )、分段(或分层) 随机化( stratifiedrandomization)、分层区组随机 化( stratified blockrandomization) 及动态随机化( dy namicrandomization)等。 1. 1 简单随机化分组 简单随机化分组又称为完全随机化分组,是对研究对象直接进行随机分组,常通过掷硬币或随机数字表,或用计算机产生随机数来进行随机化,在事先或者实施过程中不作任何限制和干预或调整。简单随机化分组方法对小样本试验操作起来很简单,但是如果研究对象例数较少时,则各组例数会出现不平衡现象。例如,掷硬币的方法在小样本的试验中由于随机误差难以保证组间病例数的均衡。有研究表明, 当总例数为100时,每组刚好50例的概率仅为8%。因此,采用随机数字表的方法,以及随机数余数分组法可以很好地解决这个问题, 使分组后各组例数相等。 操作步骤: (1)编号: 将N个实验单位从1 到N 编号。动物可按体重大小,患者可按预计的样本量编号;(2)获取随机数字: 从随机数字表中任意一个数开始,沿同一方向顺序获取每个实验单位一个随机数字; (3)求余数: 随机数除以组数求余数。若整除则余数取组数; (4)分组: 按余数分组; (5)调整: 假如共有n例待调整,需要从中抽取1例,便续抄一个随机数,除以n后将得到的余数作为所抽实验单位的序号(若整除则余数为n)。例1: 欲将15例病例随机等分到3个组中去。方法:从随机数字表中任意选择起始数,现将从第5行第5列开始向右的随机数按随机数余数分组的分类结果列于表1中。第一次分组后,甲组6例,乙组5例,丙组4例。由于各组例数不等,须将甲组调整1例到丙组。因此,继续查随机数字表,下一个随机数字 为58。58 /3余1,因此继续查随机数字表,下一个随机数字为58。58 /3余1,因此,将第1例从甲组调整到丙组中去。

动物实验室设计规范

动物实验室的设计布局是规范工作流程和人员、动物、物品等相互关系和移动,并确保实验室安全,此外,对形成屏障结构具有重要意义。本文将从三个防护区(外围防护区、建筑防护区、饲养防护区)和四条控制路线(人员控制路线、动物控制路线、物料控制路线、废物控制路线)等方面详细介绍。 动物实验室 1.外围防护区 外围防护区主要指建筑外围的区域。鉴于实验动物饲养的特殊性,外围可能需要设监控设备、人员进出的控制、卫生防护带等。如果设施内从事涉及高致病性病原微生物的动物实验活动,须考虑设施的安保要求,以及一旦发生意外事故后对周围控制区域、疏散和救援的需求。外围的防护主要通过设置栅栏、围墙等方式实现。鉴于景观的需求,使用栅栏更显人性化。栅栏不应低于2米,栏杆的间距不大于10厘米,栏杆要坚固、易于清洁。 此外,需要设置照明系统、报警系统和视频监控系统,更高级别的防护包括地下的电磁场报警、红外线报警和运动物体报警、低压电击等措施。防护区内一般不布置绿化,以免影响监控,同时也可减少昆虫、老鼠等。为保证正常的外来服务,如邮件、送货、访客等,通过风险评估决定是否需要建设安检、特殊通道、中转站等措施。对控制区域应设置警示牌,避免无意闯入。对防护要求高的设施,应保证外来车辆不能靠近设施,距离保持至少30米。在外围防护区,宜设专用的外部人员和车辆入口。

2.建筑防护区 建筑防护区主要指动物实验室所在的建筑。建筑内有动物设施和其它设施之分,其它设施可以与动物设施有关,也可以无关;动物设施可以就是建筑的主体,也可以是其部分。需要考虑的主要问题是动物设施环境与建筑物内其它区域环境的相互隔离与相互关系,人员、动物、物料和废物的进出路线。使用时,动物设施及其相关的设施宜集中布置,从事感染动物活动的设施需要单独布置。建筑除主入口外,要考虑设置动物、大型设备和废物的出口和入口。 出于安全考虑,必须评估和明确对门窗的性能要求。在合理控制数量的前提下,对门窗的大小、形状、耐冲击能力、耐火性、保温性、光学特性等均要有要求。可能的风险来自于异常的气候、自然灾害、人为破坏、设备异常等,如,通风系统的异常可造成室内压力急剧变化,造成门窗损坏。 3.饲养防护区 饲养防护区设施基本的形态是由入口、走廊(或通道)、功能间和出口组成。走廊是连接各功能区的纽带,各种通道发挥快捷、隔离、消毒等作用。实验动物设施的特点是不相容的因素多,需要利用走廊和通道对不相容的因素作合理的安排。走廊的形式包括双走廊、单走廊、U型走廊、环廊等。设施内部的安排应根据工作流程和利于控制风险的原则确定,此外,还要考虑工程可行性和日常维护的方便性,可以组成相对独立的单元。 1.人员控制路线 进出动物实验室的人员主要包括动物管理人员、动物实验人员和清洁人员。此外,还有送货人员、维护人员、来访人员、检查人员、安保人员等。为保证各类人员的进出有序,需要合理设计路线和设置不同级别的物理限制。人员的移动具有主动性,可以到达任何区域,要通过SOP和物理控制措施管理人员的移动。

实验动物房总体建筑设计原则SICOLAB

医学实验动物房设计(详细)SICOLAB 实验动物房总体建筑设计原则 根据国家科委《实验动物管理条例》、国家卫生部《医学实验动物管理实施细则》的具体要求,结合广西的具体情况,目前广西尚未有能够提供合格的SPF级实验动物的单位,而我所是药品检验单位,国家科委要求2000年底前药品检定应使用清洁级实验动物。因此,我所新建的实验动物中心设计的原则是以建立动物饲养繁殖和实验饲养相结合的综合基地,该工程的环境与设施要求达到SPF级标准。该中心的设计具有小规模、起点高、设计完善、布局设置合理,可使用面积大,利用率高,具有节能、节资等特点 平面布局设计加层新建的十层楼长48m,宽103m,楼层高为38m;其中十楼西侧长24m暂作普通级设施使用,十楼东侧长24m为SPF级设施即SPF级实验动物中心,十一楼为饲料加工房和空调、风机机房。SPF级实验动物中心内设置有货物电梯、淋浴室1间,2套更衣1、更衣2和风淋室,洁净物品储藏室1间,洗刷消毒室1间,清洁走廊和亚清洁走廊,隔离观察室(检疫室)1间,饲育室6间及实验室2间,平面布局采用三走廊方式,中间走廊为清洁走廊,二边走廊为亚清洁走廊,清洁真走廊与亚清洁走廊之间为饲育室和实验室。饲育室区和实验室区各走廊均有密封门严格隔开,饲育室区和实验室区分别设置有独立的更衣1、更衣2和风淋室,以便各区域的人员运行各行其道,防止交叉感染。 3 空调通风系统 31 空调系统 311 空调设计及SPF级环境设施设计的主要参数:温度:夏季24℃±2℃,冬季22℃±2℃;湿度:RH(50±10)%;光照度:不小于300~350LX,明暗比12∶12h,日光灯照明,且设紫外灭菌灯;通风:采用全新风,顶棚送风,四角回风;净化度:1万级(每立升空气中粒径大于05μm的尘埃粒子数小于或等于350个);噪音:低于50dB;氨浓度:低于20ppm;正压控制:清洁走廊、饲育室(或实验室)、亚清洁走廊、外环境的压力梯度20Pa。 312 空调系统的设计和选用空调系统是实验动物屏障设施中重要设备,主要起调温调湿作用。由于SPF级实验动物中心采用全新风,屏障系统内部与外环境之间换气量大,空调系统在运转时消耗能源相当大,因此,在设计SPF级实验动物设施时必须考虑设备的一次性投资和运转的维持费用两方面问题。我所经过大量调查,采用清华同方股份有限公司生产的FSLR60型风冷模块式冷热水机组空调2台,每台机组制冷量为66kW,输入功率为231kW。2台机组可依据使用情况自动控制十楼普通级环境(约24m2)和SPF级实验动物中心环境(约250m2)的温度和湿度。该机组具有以下优点: ①无需专用机房和水塔,使用方便 ②节省能源,降低维持费用。 ③管理方便。空调机组的工作状态及送风状态都在远程控制上显示及控制,利于使用和管理。 ④维修方便。该机组为模块式组合,可以在工作状态不断电情况下进行维修,更换元件简易,方便;且主要元件均为美国进口元件,不易损坏。 32 通风系统送风系统采用清华同方股份有限公司生产的变频风机,通过该机设置的集成模块可以调节风速和风量,节省运转费用。全新空气经空调净化箱初效、中效过滤、恒温后,由变频风机加压,通过送风管道从各室顶部中央600mm×600mm或400mm×400mm高效过滤器送入各室内、清洁走廊和亚清洁走廊等。排风系统由2台排风机(其中一台为备用机)组成,在各室四角壁及清洁走廊、亚清洁走廊与各室隔墙处均设置回风口,废气从回风口经排风管道在机房排风箱内集中外排。4 建筑室内净化装饰工程及电气设备工程 41 建筑室内净化装饰工程室内四壁墙体和吊顶顶壁均采用50mm厚保温泡沫夹心彩钢板,其外形美观,隔音、保温、阻燃、密闭性能较好。室内竖角和横角选中100铝合金圆弧。进气、排气管道位于技术杂层,室内装饰高23m,技术夹层高15m;内门均采用彩钢夹心板密封推开门,门上设置观察窗,各室内隔墙之

医学研究完全随机分组方法和软件实现

医学研究完全随机分组方法和软件实现 完全随机化(complete randomization)又称简单随机化(simple randomization),是最为常见的一种考察单因数两水平或多水平的实验设计方法。它是将同质的受试对象随机地分配到各处理组,再观察其实验效应。各组样本含量可以相等,称平衡设计(balanced design);也可不等,称非平衡设计(unbanlanced design)。平衡设计时检验效率较高,故值得推荐。 完全随机化分组可以通过随机数字表完成,但是这种方法不能保证分组后各组受试对象的例数一定相同。其具体步骤如下: (1)编号:将n个受试对象编号,动物可按体重大小,患者可按就诊顺序。 (2)取随机数:可从随机数字表或计算器获得。每个受试对象获得的随机数可是一位数,也可以是两位数或三位数,一般要求与n的位数相同。 (3)确定组别:根据受试对象获得的随机数决定受试对象在哪一组。分两组可按随机数的奇偶;分k组可按随机数除以k后的余数进行分组。 完全随机分组还可以通过专业的随机分组软件来完成,现在国内市场上的专业随机化软件有医学研究随机分组系统RandA1.0,类似这种软件,它的基本原理是事先设计好一套关于随机化的一套程序,研究人员只要把自己的随机要求选定,后台程序就可以输出随机结果。 下面我可以通过一道例题介绍完全随机化的实现过程,使大家加深对随机理论的认识。 举例试将同性别、体重相近的30只动物随机分到A、B、C三组。 方法一:随机数字表法 只有凭借毅力,坚持到底,才有可能成为最后的赢家。这些磨练与考验使成长中的青少年受益匪浅。在种种历练之后,他们

基本动物实验知识

当动物有病时,常表现为精神不振、行动迟缓、毛发蓬乱无光泽、鼻部皮肤干燥并流鼻水、眼有分泌物等。 1.大白鼠的生物学特征是什么?主要用于哪些实验? 大白鼠性情温顺,行动迟缓,易于捕捉,但受惊吓或粗暴操作时,会紧张不安甚至攻击人。 大鼠嗅觉发达,对外界刺激敏感,抵抗力较强。大鼠无胆囊,肾单位表浅,肝再生能力强。大鼠的血压反应比兔稳定,可用它作血压实验,也可用于慢性实验、抗炎、降脂、利胆、子宫实验及心血管系统的实验。药典规定该动物为催产素效价测定及药品指控中升压物质检查指定动物。 2.动物实验的常用方法有哪些? 动物实验方法已成为医学科学研究和实验教学及相关学科研究中不可缺少的重要手段。 动物的实验方法是多种多样的,在医学的各个学科领域内都有其不同的应用,但基本的实验方法则是共同的, ⑴如健康动物的识别、选择、抓取、固定、麻醉、动物分组、编号、脱毛、给药、采血、取尿、急救、处死、尸检等,不论从事何种课题的医学研究都涉及到这套实验动物基本操作方法。

⑵动物实验按机体水平不同可分为整体实验和离体实验。还可进一步具体分为分子、亚细胞、细胞、组织、器官、整体动物和无损伤动物等水平的实验。按动物时间的长短则可分为急性实验和慢性实验。 ⑶按学科的实验方法可分为生理学的动物实验方法,病理生理学的动物实验方法,药理学的动物实验方法,病理解剖学、组织学的动实验方法等。 3.实验动物的捉持与固定 如何正确捉拿及固定大白鼠? 以防大鼠在惊恐或激怒时咬伤手指,捉拿时最好带上防护手套, 右手抓住鼠尾立即提起,放在易攀抓的粗糟面上, 用左手拇指和食指抓住其两颊及后枕部皮肤,充分固定慎防咬伤, 其余手指握住整个鼠体,注意握力不要太大,以免大鼠窒息死亡。 然后将其腹部向上,作腹腔麻醉,最后固定。 4.实验动物性别的鉴别? (1)如何鉴别小、大鼠的性别? 根据外生殖器(阴蒂或阴茎)与肛门之间的距离来判断这些动物新生仔的性别, 一般间隔短的是雄性,外生殖器阴茎与阴蒂大,但是对此判别要有一定经验,成熟期雌性有阴道口,有膨起的阴囊和阴茎。 5.实验动物编号标记的方法 (1)为什么要对实验动物进行编号标记?标记的方法有几种? 动物在实验前常常需要作适当的分组,不同的体重或相同的体重放在同一个笼时,这就 需要编号标记。标记的方法很多,良好的标记方法应满足标号清晰、耐久、简便、适用、无 明显损伤、无毒和易辨认等要求。标记的方法有染色标记法、号牌法、打孔剪口法和剃毛、 剪毛法。

临床试验随机分组方法

临床试验中的随机分组方法 真正的随机化应符合下列原则: (1)医生和患者不能事先知道或决定患者将分配到哪一组接受治疗; (2)医生和患者都不能从一个患者已经进入的组别推测出下一个患者将分配到哪一组。 随机序列的产生可以采用计算机、计算器、随机数字表和抛硬币的方法来实现。 随机分组方法包括: 简单随机化(simple randomization)、 区组随机化(blockrandomization)、 分段(或分层)随机化(stratifiedrandomization)、 分层区组随机化(stratified blockrandomization ) 动态随机化( dynamicrandomization) 1.1 简单随机化分组简单随机化分组又称为完全随机化分组,是对研究对象直接进行随机分组,常通过掷硬币或随机数字表,或用计算机产生随机数来进行随机化,在事先或者实施过程中不作任何限制和干预或调整。简单随机化分组方法对小样本试验操作起来很简单,但是如果研究对象例数较少时,则各组例数会出现不平衡现象。例如,掷硬币的方法在小样本的试验中由于随机误差难以保证组间病例数的均衡。有研究表明,当总例数为100时,每组刚好50例的概率仅为8%。因此,采用随机数字表的方法,以及随机数余数分组法可以很好地解决这个问题,使分组后各组例数相等。 操作步骤: (1)编号:将N个实验单位从1到N编号。动物可按体重大小,患者可按预计的样本量编号; (2)获取随机数字:从随机数字表中任意一个数开始,沿同一方向顺序获取每个实验单位一个随机数字; (3)求余数:随机数除以组数求余数。若整除则余数取组数; (4)分组:按余数分组; (5)调整:假如共有n例待调整,需要从中抽取1例,便续抄一个随机数,除以n后将得到的余数作为所抽实验单位的序号(若整除则余数为n)。 例1: 欲将15例病例随机等分到3个组中去。方法:从随机数字表中任意选择起始数,现将从第5行第5列开始向右的随机数按随机数余数分组的分类结果列于表1中。第一次分组后,甲组6例,乙组5例,丙组4例。由于各组例数不等,须将甲组调整1例到丙组。因此,继续查随机数字表,下一个随机数字为58。58/3余1,因此,将第1例从甲组调整到丙组中去。表1 随机数余数分组法的分组结果编号1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15随机数28 26 08 73 37 32 04 05 69 30 16 09 05 88 69余数1 2 2 1 1 2 1 2 3 3 1 3 2 1 3组别甲乙乙甲甲乙甲乙丙丙甲丙乙甲丙调整丙 1.2 区组随机化分组 区组随机化分组也叫均衡随机化或限制性随机化,即将随机加以约束,使各处理组的分配更加平衡,满足研究要求。在一个区间内包含一个预定的处理分组数目和比例。

实验动物的选择与动物实验的设计说明

实验动物的选择和动物实验的设计 第一节实验动物选择基本原则 一、根据课题研究的目的、容、水平选用相匹配的标准化动物 一切动物实验都是为科学研究服务的,选择实验动物首要的就是要根据研究的容来选择实验动物。 蛙的大脑不发达,不可作高级神经活动的实验。但蛙的脊髓具有最简单的发射中枢,做神经反射弧实验,简单、直观、明确、容易分析。 二、必要的预试验有助于选择与本课题相适应的实验动物 动物预试验的作用在于: 1.初步观察动物是否适宜于本项目的研究 2.熟悉动物的生物学特性及饲养管理 3.检查与动物实验配套的实验条件、方法是否初步到位 三、充分利用与人具有某种相似性的实验动物 ?绝大多数生物学与医学研究的最终目的是要为人类服务的。因此在实际可能的情况下尽量选择那些生物学特征及解剖生理特点等与人类类似的实验动物。 ?一般来说,实验动物愈高等,进化程度愈高、其机能、代、结构愈复杂,反应就愈接近人类。 ?猴、拂拂、猩猩、长臂猿等灵长目动物是最近似于人类的理想动物。 1.结构功能的相似性 2.时象或年龄状态的相似性 3.群体分布的相似性 在以群体为对象的研究课题,有时要考虑到选择与人群基因型及表现型分布类型相似的动物类别。主要是一些封闭群动物,如:KM小鼠,Wistar大鼠,毕格犬等。 4.生态或健康状况的相似性 在正常生命过程的研究中,找到与人类生态情况相似的替代模型非常重要。现有的不同微生物学质量级别的普通动物、清洁动物、SPF动物、无菌及悉生动物分别代表着不同的微生态模式并具有不同特点,适用于不同研究目的。 5.疾病特点的相似性

实验动物有许多自发或诱发性疾病能局部或全部地反映与人类类似的疾病过程及特点,可用于研究相关的人类疾病。 6.操作实感的相似性 外科手术性的操作模型中或教学示教中,常选择体型较大的动物。犬为首选。 四、除利用与人具有的相似性以外的实验动物选择原则 1.特殊性原则 由于物种之差异,各种动物之间存在基因型、组织型、代型、易感性等方面的差别,这种差异有时可作为研究课题所需的一种指标或特殊条件。 2. 易化原则 进化程度高或结构机能复杂的动物有时会给实验条件的控制和实验结果的获得带来难以预料的困难。应依据易化原则选择那些结构功能简单而又反映研究指标特质的动物。 例如:在遗传研究中,用寿命短、繁殖快的果蝇取得了丰硕的成果,而同样方法若改用灵长目动物其难度是很难设想的。 有时为了删除系统作用背景对某器官或某功能进行研究,可用离体方法进行。3.相容或匹配原则 所谓“相容”或“匹配”是指所用动物的标准化品质应与实验设计、技术条件、实验方法等条件相适应。在设计实验时不但要了解实验仪器精度和灵敏性能。了解试剂的品质、性能以及试剂和仪器之间的匹配性能,也要了解动物或动物模型对实验手段的反应能力。 4.易获性原则 易获性是理想的实验动物条件之一。 虽然猫、狗、猪及灵长动物居于较高进化水平,各有其研究价值,尤其是灵长类动物在许多方面有不可替代的优越性。然而这些大动物则往往由于其较长生殖周期,低繁殖率、低产仔率等弱点而影响其易获性,因而亦影响其被选用,故通常不作首选。 5.重现性、均一性原则 重现性和均一性为实验结果质量品质所在。若实验结果不能再现或不稳定,则该

实验动物的随机分组方法

实验动物的随机分组方法 数理统计学上,根据随机抽样的原则,编制了随机数目表,应用随机数目表代替抽签法,表中的数字都各自独立,全部数字无论从横行、纵行或斜行的顺序都是随机的。因此使其用时可任自一个数目开始,可从左而右,亦可从右而左,可从上而下,也可从下而上,按顺序取得需要的数目,其结果比抽签更为理想。 1.安全随机法 (1)甲、乙两组安全随机法:设有性别相同、体重在一定范围内的动物20只,试用完全随机法分成甲、乙两组:先将动物分别称量体重,然后按体重从轻到重依次为1、2、3 (20) 号。在随机数目表中任自一数目开始,如自第三横第六纵列的数目56开始自左向右取20 个数目,按动物编号和随机数目表上查得的20个数目对应排列,并令随机数目属于单数的归于甲组,属于双数的归于乙组,得下表格式: 这样列入甲组的动物有:4、5、8、10、11、12、15、17共8只;列入乙组的有1、2、3、6、7、9、13、14、16、18、19、20共12只;为使两组动物数相等,须把乙组中的2只改为甲组,但乙组中12只动物,哪2只应改为甲组?仍需用随机法来决定。可接着使用前面用过的随机数目,前面已用过20个数字,第三横行第20数字为10,本行已无数字,故应顺序在第四行第1纵列开始算21和22个数字为12和56,为使乙组中12只动物都有改为甲组的机会,故用12除12得余数为0,因动物中无0号,故后推一个数目为56和85,用12 除56得余数8,则应将乙组中第8只动物改为甲组,12除85得余数为1,则应将乙组中第1只动物改为甲组。以此类推。 (2)甲、乙、丙三组安全随机分组法:设性别相同、体重在一定范围内的健康大鼠18只,试用完全随机分为甲、乙、丙三组。先称量体重,按体重从轻到重依次编为1、2、3 (18) 号,现从随机数目表上第六横行第一纵列的数目16开始,自上而下依次取18个数止,并与动物编号对应排列。为使每一只动物有同样分到甲、乙、丙三组的机会,可把每一随机数目

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