核酸练习题
一、填充题
1,核糖核酸RNA主要分为( ),( )和( )三种类型。
2,脱氧核糖核酸(DNA)的基本结构单位是( )。
3,脱氧核糖核酸DNA双链中若( )含量高,则( )值高。
4,转移核糖核酸tRNA的二级结构为( )形状,三级结构为( )形状
5,DNA和RNA中的碱基不同的是( )和( )。
二、是非题
1,tRNA分子的3’末端具有聚腺苷酸的“尾”结构。( )
2,若DNA一条链的碱基顺序是pCpTpGpGpApC,则另一条链的碱基顺序是pGpApCpCpTpG.( )
3,DNA的二级结构由两条平行的多核苷酸链构成( )。
4,碱溶液水解RNA产生5’-核苷酸( )。
5,稀碱溶液可以水解DNA,但不可以水解RNA( )。
6,反密码子是位于[a] DNA [b] tRNA [c] rRNA [d] mRNA( )
7, 在变性后,DNA的紫外吸收增加( )。
三、选择题(单选题)
( )1,热变性的DNA在适当条件可以复性,条件之一是:
[a] 骤然冷却[b] 缓慢冷却[c] 能缩[d] 加入浓的盐
( )2.如果反密码子是UGA,它可识别下列哪个密码子?
[a] ACU [b] CUA [c] UCA [d] UAC
( )3,DNA中含有18.4%的A时,其碱基C+G%总含量为多少?
[a]36.8 [b]37. [c] 63.2 [d] 55.2;
( )4,热变性的DNA具有下列哪种特征?
[a]核苷酸间的磷酸二酯键断裂; [b]形成三股螺旋;
[c]260nm处的光吸收下降[d] GC对的含量直接影响Tm值
四、问答题
1.请简单叙述DNA的组成和结构的特点。
2.请说明DNA和RNA在组成、结构、功能上的不同之处。
3, 请描述核酸中的碱基配对原则和DNA中碱基配对的特点?
4,一种病毒的脱氧核糖核酸链具有以下组成:A=32%, G=16%, T=40%, C=12%(摩尔含量比),请问该脱氧核糖核酸的结构具有什么特点?
5, 有一条脱氧核糖核酸链,结构如下:5 -ACCGTAACTTTAG-3,请写出与该链互补的DNA链和RNA链的结构。(2分)
6,请简单论述DNA变性的特性。
2017年07月27日核酸 一.选择题(共5小题) 1.关于核酸的叙述,错误的是() A.细胞核中发生的转录过程有RNA聚合酶的参与 B.植物细胞的线粒体和叶绿体中均可发生DNA的复制 C.双链DNA分子中一条链上的磷酸和核糖是通过氢键连接的 D.用甲基绿和吡罗红染色剂可观察DNA和RNA在细胞中的分布 2.关于DNA和RNA的叙述,正确的是() A.DNA有氢键,RNA没有氢键 B.一种病毒同时含有DNA和RNA C.原核细胞中既有DNA,也有RNA D.叶绿体、线粒体和核糖体都含有DNA 3.组成核酸的碱基、五碳糖和核苷酸的种类依次是() A.5、2、8 B.4、2、2 C.5、2、2 D.4、4、8 4.一分子磷酸、一分子含N碱基和一分子化合物a构成了复杂化合物b,对a 和b的准确叙述是() A.a是核糖,b则为核苷酸 B.a是脱氧核糖,b 则为核糖核苷酸 C.a是核糖,b则为核糖核苷酸 D.a是五碳糖,b则是核糖 5.颜色变化常作为生物实验结果观察的一项重要指标,下列有关叙述正确的是() A.吡罗红甲基绿染色剂可将口腔上皮细胞的细胞质染成红色 B.向未知样品中滴加双缩脲试剂,发现溶液呈现紫色,则未知样品只含蛋白质C.用洋葱鳞片叶外表皮细胞进行质壁分离实验,可观察到绿色区域变小D.酒精可使溴麝香草酚蓝水溶液由蓝变绿再变黄 二.解答题(共1小题)
6.以下是生物体内四种有机物的组成与功能关系图,回答下列问题: (1)物质D的基本元素组成是;小麦种子细胞中,物质E是指.(2)相同质量的E和F彻底氧化分解,释放能量较多的是;细胞核内的染色体是由图中的和构成.(此题填字母代号) (3)物质C的结构通式是,已知G含有由504个C组成的四条链,则C 相互结合过程中相对分子质量减少了,形成肽键数为.
细菌感染性疾病的直接核酸诊断试验 Florence Paillard, PhD, and Craig S. Hill, PhD 准确和快速的诊断是及时采取治疗措施和防止感染性疾病扩散的关键。理想的感染性疾病的诊断试剂应该能够给临床医生提供快速、灵敏度高和特异性强的实验结果。检测试剂如果灵敏度不高则可能导致疾病的漏检,使患者不能得到及时的治疗,还可造成疾病的扩散;同样,试剂如果特异性较差则可能出现假阳性结果,假阳性的出现不仅会导致不必要的治疗,还可能给人们带来心理上的阴影。不论对个人还是公共卫生部门,因检测方法的不可靠所导致的错误诊断都有可能造成严重的后果。令人欣慰的是,近年来分子诊断技术的发展已使得人们可以研制出比传统方法更为灵敏、特异和快速的用于感染性疾病的诊断试剂。 一、细菌感染性疾病诊断方法述评 数十年来,检测细菌的的标准方法是培养(液体和/或固体培养基)和染色,如用于结核分枝杆菌的抗酸染色和淋病奈瑟菌的革兰染色。其它一些方法还包括采用抗体技术检测细菌抗原的酶免疫测定(EIA)和直接荧光抗体技术(DFA)等。 采用分子生物学技术检测微生物核酸成分的核酸检测(NATs)技术的发展为临床诊断方法带来了革命性的变化。目前用于微生物鉴定的NA Ts主要有两种类型:培养确认检测试剂和直接检测试剂。培养确认的NA Ts试剂主要用来对培养基上生长的微生物进行确认;直接NA Ts试剂可以直接检测标本中的微生物,无需培养。与培养确认探针试剂相比,由于直接NATs试剂完全不需要培养这一步骤,所以可以更快地给出检测结果;直接NATs试剂一般来说其准确性也高于直接免疫检测方法。美国FDA批准的第一个非放射性直接NA Ts试剂是Gen-Probe PACE试剂,用来检测衣原体和淋球菌感染。 对直接NATs试剂而言,一个至关重要的改进在于加入了目标扩增步骤,即探针检测前将目标序列进行扩增。第一个用于沙眼衣原体检测的核酸扩增试剂(NAA Ts)于1993年获得了FDA的批准。此后,随着核酸扩增技术的不断改进,出现了可以将样品成分的抑制作用降为最小的第二代NAA Ts,它的操作流程也得到了相应改进。 本文将就已经商品化并得到FDA批准的用于检测五种细菌感染的直接NATs试剂进行述评。这五种感染为:链球菌性咽炎、肺结核(TB)、阴道炎、衣原体(CT)和淋球菌(GC)感染。 二、直接NAT方法学 非扩增直接NATs(表1):大多数商品化的直接NA Ts试剂都采用特异性针对出现在被测生物体内的一段独有的核酸序列(目标序列)的核酸探针。这种探针通常采用荧光或化学发光标记。所测样品需进行处理以使其能够释放出核酸。检测时,标记的DNA探针可以和靶序列特异性结合,形成一个稳定的探针-目标序列杂交体。该杂交体被从非杂交探针中分离或区别开后,标记物散发出信号。 在直接检测临床标本中的微生物时,NATs可以采用不同的方式来提高试剂的灵敏度。Gen-Probe采用的一项专利技术是将rRNA作为检测目标,rRNA在大多数微生物体内是以数以千计的拷贝量存在的。例如,沙眼衣原体中的rRNA可达2000拷贝,而DNA中有用的靶序列在每个细菌体内的量仅有一个或数个拷贝。因此以rRNA为检测目标可以大大提高试剂的灵敏度。除此之外,Gen-Probe由于在杂交检测中还采用了杂交保护检测(HPA)方法,使其试剂的灵敏度得以进一步提高。检测rRNA和HPA技术的结合使得第一个DNA探针检测试剂被临床实验室广泛用于培养的确定和直接检测。 第二个用于提高DNA探针检测灵敏度的方法是对信号分子进行放大,如杂交捕获试剂(Hybrid Capture assay)。它采用针对RNA:DNA杂交体的抗体来检测杂交形成,每个抗体都带有酶标记物。每个酶分子都会产生多种着色分子用于与之结合的每个杂交分子。这种从
核酸化学 (一)名词解释 1.单核苷酸(mononucleotide) 2.磷酸二酯键(phosphodiester bonds) 3.不对称比率(dissymmetry ratio) 4.碱基互补规律(complementary base pairing) 5.反密码子(anticodon) 6.顺反子(cistron) 7.核酸的变性与复性(denaturation、renaturation) 8.退火(annealing) 9.增色效应(hyper chromic effect) 10.减色效应(hypo chromic effect) 11.发夹结构(hairpin structure) 12.DNA的熔解温度(melting temperature T m) 13.分子杂交(molecular hybridization) 14.环化核苷酸(cyclic nucleotide) (二)填空题 1.DNA双螺旋结构模型是_________于____年提出的。 2.核酸的基本结构单位是_____。 3.脱氧核糖核酸在糖环______位置不带羟基。 4.两类核酸在细胞中的分布不同,DNA主要位于____中,RNA主要位于____中。 5.核酸分子中的糖苷键均为_____型糖苷键。糖环与碱基之间的连键为_____键。核苷与核苷之间通过_____键连接成多聚体。 6.核酸的特征元素____。 7.碱基与戊糖间是C-C连接的是______核苷。 8.DNA中的____嘧啶碱与RNA中的_____嘧啶碱的氢键结合性质是相似的。 9.DNA中的____嘧啶碱与RNA中的_____嘧啶碱的氢键结合性质是相似的。 10.DNA双螺旋的两股链的顺序是______关系。 11.给动物食用3H标记的_______,可使DNA带有放射性,而RNA不带放射性。 12.B型DNA双螺旋的螺距为___,每匝螺旋有___对碱基,每对碱基的转角是___。13.在DNA分子中,一般来说G-C含量高时,比重___,T m(熔解温度)则___,分子比较稳定。 14.在___条件下,互补的单股核苷酸序列将缔结成双链分子。 15.____RNA分子指导蛋白质合成,_____RNA分子用作蛋白质合成中活化氨基酸的载体。16.DNA分子的沉降系数决定于_____、_____。 17.DNA变性后,紫外吸收___,粘度___、浮力密度___,生物活性将___。 18.因为核酸分子具有___、___,所以在___nm处有吸收峰,可用紫外分光光度计测定。19.双链DNA热变性后,或在pH2以下,或在pH12以上时,其OD260______,同样条件下,单链DNA的OD260______。 20.DNA样品的均一性愈高,其熔解过程的温度范围愈______。 21.DNA所在介质的离子强度越低,其熔解过程的温度范围愈___,熔解温度愈___,所以DNA 应保存在较_____浓度的盐溶液中,通常为_____mol/L的NaCI溶液。 22.mRNA在细胞内的种类___,但只占RNA总量的____,它是以_____为模板合成的,又是_______合成的模板。 23.变性DNA 的复性与许多因素有关,包括____,____,____,____,_____,等。
选择题 2.自然界游离核苷酸的磷酸多连接于戊糖的( B ) A.C-3' B.C-5' C.C-2' D.C-4' E.C-1' 3.RNA和DNA彻底水解后的产物是( E ) A.部分碱基不同,核糖相同 B.碱基相同,核糖不同 C.碱基不同,核糖不同 D.碱基不同,核糖相同 E.部分碱基不同,核糖不同 4.下列碱基只存在于mRNA中,而不存在于DNA中的是( D ) A.鸟嘌呤 B.腺嘌呤 C.胞嘧啶 D.尿嘧啶 E.胸腺嘧啶 5.通常不存在于RNA中,也不存在于DNA中的碱基是( B ) A.腺嘌呤 B.黄嘌呤 C.鸟嘌呤 D.胸腺嘧啶 E.尿嘧啶 6.核酸的基本组成单位是( E ) A.磷酸和戊糖 B.核糖和脱氧核糖 C.含氮碱基 D.多聚核苷酸 E.核苷酸 7.参与构成DNA分子的单糖是( A ) A.D-2'-脱氧核糖 B.核糖 C.葡萄糖 D.磷酸核糖 E.戊糖 8.作为第二信使的核苷酸是( C ) A.UMP B.AMP C.cAMP D.cTMP https://www.wendangku.net/doc/1b10382940.html,mp 9.真核细胞中DNA主要分布在( C ) A.细胞膜 B.细胞质 C.细胞核 D.线粒体 E.微粒体 10.在核酸中,核苷酸之间的连接方式是( B ) A.2',3'-磷酸二酯键 B.3',5'-磷酸二酯键 C.2',5'-磷酸二酯键 D.1',5'-糖苷键 E.氢键
11.DNA的一级结构是指( B ) A.各核苷酸中核苷与磷酸的连接键性质 B.核苷酸的排列顺序 C.DNA的双螺旋结构 D.核糖与含氮碱基的连接键性质 E.核苷酸的组成 12.细胞内含量最稳定的成分是( C ) A.核糖体 B.氨基酸 C.DNA D.ATP E.TRNA 16.按照Chargaff规则,下列关于DNA碱基组成的叙述,正确的是( D ) A.A与C的含量相等 B.A+T=G+C C.同一生物体,不同组织的DNA碱基组成不同 D.不同生物体来源的DNA碱基组成不同 E.DNA的碱基组成受营养状况的影响 22.核酸分子中储存、传递遗传信息的关键部分是( B ) A.磷酸戊糖 B.碱基序列 C.核苷 D.戊糖磷酸骨架 E.磷酸二酯键 13.DNA的二级结构是( A ) A.双螺旋结构 B.α-螺旋 C.β-转角 D.超螺旋结构 E.β-折叠 14.DNA分子中的碱基配对主要依赖( A ) A.氢键 B.范德华力 C.盐键 D.二硫键 E.疏水键 17.B型-DNA双螺旋结构每旋转一周,沿轴上升的高度是( E ) A.0.34nm B.0.15nm C.6.8nm D.5.4nm E.3.54nm 18.下列关于B型-DNA双螺旋结构的叙述,正确的是( E ) A.一条链是左手螺旋,另一条链是右手螺旋 B.双螺旋结构的稳定纵向靠氢键维系 C.A+T与G+C比值为1 D.两条链的碱基间以共价键相连 E.磷酸和脱氧核糖构成螺旋的骨架 19.具有左手螺旋DNA结构的是( D )
核酸 (一)名词解释 1.单核苷酸(mononucleotide) 2.磷酸二酯键(phosphodiester bonds) 3.不对称比率(dissymmetry ratio) 4.碱基互补规律(complementary base pairing) 5.反密码子(anticodon) 6.顺反子(cistron) 7.核酸的变性与复性(denaturation、renaturation) 8.退火(annealing) 9.增色效应(hyper chromic effect) 10.减色效应(hypo chromic effect) 11.噬菌体(phage) 12.发夹结构(hairpin structure) 13.DNA的熔解温度(melting temperature T)m14.分子杂交(molecular hybridization) 15.环化核苷酸(cyclic nucleotide) (二)填空题 1.DNA双螺旋结构模型是_________于____年提出的。 2.核酸的基本结构单位是_____。 3.脱氧核糖核酸在糖环______位置不带羟基。 4.两类核酸在细胞中的分布不同,DNA主要位于____中,RNA主要位于____中。5.核酸分子中的糖苷键均为_____型糖苷键。糖环与碱基之间的连键为_____键。核苷与核苷之间通过_____键连接成多聚体。 6.核酸的特征元素____。 7.碱基与戊糖间是C-C连接的是______核苷。 8.DNA中的____嘧啶碱与RNA中的_____嘧啶碱的氢键结合性质是相似的。 嘧啶碱的氢键结合性质是相似的。_____中的RNA嘧啶碱与____中的DNA.9.10.DNA双螺旋的两股链的顺序是______关系。 3H标记的_______,可使DNA带有放射性,而RNA11.给动物食用不带放射性。12.B型DNA双螺旋的螺距为___,每匝螺旋有___对碱基,每对碱基的转角是___。13.在DNA分子中,一般来说G-C含量高时,比重___,T(熔解温度)则___,m 分子比较稳定。 14.在_ __条件下,互补的单股核苷酸序列将缔结成双链分子。 15.____RNA分子指导蛋白质合成,_____RNA分子用作蛋白质合成中活化氨基酸的载体。 16.DNA分子的沉降系数决定于_____、_____。 17.DNA变性后,紫外吸收__ _,粘度_ __、浮力密度_ __,生物活性将__ _。18.因为核酸分子具有_ __、__ _,所以在___nm处有吸收峰,可用紫外
第二章核酸化学 一、填充题 1、核酸的基本结构单位是_。 2、20世纪50年代,Chargaff等人发现各种生物体DNA碱基组成有_的特异性,而没有_的特异性。 3、DNA双螺旋中只存在_种不同碱基对。T总是与_配对,C总是与_配对。 4、核酸的主要组成是_、_和_。 5、两类核酸在细胞中的分布不同,DNA主要位于_中,RNA主要位于_中。 6、核酸分子的糖苷键均为_型糖苷键。糖环与碱基之间的连键为_键。核苷与核苷之间通过_键连接形成多聚体。 7、嘌呤核苷有顺式和反式两种可能,但天然核苷多为_。 8、X射线衍射证明,核苷中_与_平面相互垂直。 9、核苷在260nm附近有强吸收,这是由于_。 10、给动物食用3 H标记的_,可使DNA带有放射性,而RNA不带放射性。 11、双链DNA中若_含量多,则Tm值高。 12、双链DNA热变性后,或在PH 2以下,或在PH 12以上时,其OD260_,同样条件下,单链DNA的OD260 _。 13、DNA样品的均一性愈高,其溶解过程的温度范围愈_。 14、DNA所处介质的离子强度越低,其溶解过程的温度范围愈_,溶解温度越_,所以DNA应保存在较_浓度的盐溶液中,通常为_mol/L的氯化钠溶液。 15、DNA分子存在三类核苷酸序列:高度重复序列、中度重复序列和单一序列。tRNA、rRNA以及组蛋白等由_编码,而大多数蛋白质由_编码。 16、硝酸纤维素膜可结合_链核酸。将RNA变性后转移到硝酸纤维素膜上再进行杂交,称_印迹法。 17、变性DNA复性与很多因素有关,包括_、_、_、_、_等。 18、DNA复性过程属于二级反应动力学,其Cot1/2 值与DNA复杂程度成_比。 19、双链DNA螺距为3.4nm,每匝螺旋的碱基数为10,这是_型DNA的结构。 20、RNA分子的双螺旋区以及RNA-DNA杂交双链具有与_型DNA相似的结构,外形较为_。
核酸检测基本知识 1.什么是核酸检测 核酸的定义:核酸是由核苷酸或脱氧核苷酸通过3′,5′-磷酸二酯键连接而成的一类生物大分子。 核酸具有非常重要的生物功能,主要是贮存遗传信息 和传递遗传信息。 2.核酸的分类 核酸大分子可分为两类:脱氧核糖核酸(DNA)和核糖核酸(RNA)。 3.核酸的组成
DNA和RNA都是由一个一个核苷酸(nucleotide)头尾相连而形成的,由C、H、O、N、P,5种元素组成。DNA是绝大多数生物的遗传物质,RNA是少数不含DNA的病毒(如HIV病毒,流感病毒,SARS病毒等)的遗传物质。RNA平均长度大约为2000个核苷酸,而人的DNA却是很长的,约有3X10^9个核苷酸。 4.核酸的功能 在蛋白质的复制和合成中起着储存和传递遗传信息的 作用。核酸不仅是基本的遗传物质,而且在蛋白质的生物 合成上也占重要位置,因而在生长、遗传、变异等一系列 重大生命现象中起决定性的作用。 DNA与RNA都是核酸,它们在化学组成上有什么区别如 下: DNA与RNA的比较DNA RNA 主要存在部位细胞核细胞质 基本组成单位脱氧核苷酸核糖核苷酸碱基种类A、G、C、T A、G、C、U 五碳糖种类脱氧核糖核糖 核苷酸链两条脱氧核苷酸链一条核糖核苷酸链 5.检测方法 核酸检测方法,主要通过同时进行靶核酸扩增和可检 测信号的生成来检测样品中的靶核酸。可应用于临床微生
物学、血液筛选、遗传病诊断和预防、法医学等领域的核 酸检测。 目前主要使用的方法有以下几种: a.核酸序列依赖性扩增法 NASBA是由一对引物介导的、连续均一的、体外特异性 核苷酸序列等温扩增RNA的新技术。反应在42℃进行,可在2h内将RNA模板扩增约109倍。NASBA原理是提取病毒RNA,加入AMV逆转录酶、RNA酶H、T7RNA聚合酶和引物进行扩增。 整个反应分非循环相和循环相:在非循环相中,引物I与模板RNA退火后在AMV逆转录酶的作用下合成cDNA,形成RNA:DNA 杂合体,随即RNaseH降解RNA,引物Ⅱ与cDNA退火,在反转录酶作用下合成第2条DNA互补链。双链DNA可在T7RNA聚合酶的作用下,经其启动子序列起动而转录RNA,RNA又可在反转录酶的作用下反转录成DNA,进入循环相,对模板进行大量 扩增。 b.转录介导的扩增技术 TMA技术原理与NASBA基本一致,略有不同之处是TMA利用的是MMLV逆转录酶及T7RNA聚合酶两种酶,MMLV逆转录酶既有逆转录酶的活性又具有RNA酶H活性。反应在41.5℃进行,可在1h内将RNA模板扩增约109倍。 c.连接酶酶促链式反应(LCR) LCR是基于靶分子依赖的寡核苷酸探针相互连接的一种
第三章核酸的化学及结构 一、名词解释 1.DNA的变性:DNA变性是指核酸双螺旋碱基对的氢键断裂,双链变成单链, 从而使核酸的天然构象和性质发生改变。变性时维持双螺旋稳定性的氢键断裂,碱基间的堆积力遭到破坏,但不涉及到其一级结构的改变; 2.DNA复性:变性DNA在适当条件下,使彼此分离的两条链重新由氢键链接而 形成双螺旋结构的过程; 3.分子杂交:将不同来源的DNA经热变性、冷群,使其复性,在复性时,如这 些异源DNA之间在某些区域有相同的序列,则形成杂交DNA分子; 4.增色效应:天然DNA在发生变性时,氢键断裂,双键发生解离,碱基外露, 共轭双键更充分暴露,变性DNA在260nm的紫外吸收值显著增加的现象;& 5.减色效应:在一定条件下,变性核酸可以复性,此时紫外吸收值又回复至原 来水平的现象; 6.回文结构:在真核细胞DNA分子中,脱氧核苷酸的排列在DNA的两条链中 顺读与倒读序列是一样的(即脱氧核苷酸排列顺序相同),脱氧核苷酸以一个假想的轴成为180°旋转对称(即使轴旋转180°两部分结构完全重叠起来)的结构; 7.T m:DNA热变性的过程不是一种“渐变”,而是一种“跃变”过程,即变性 作用不是随温度的升高缓慢发生,而是在一个很狭窄的临界温度范围内突然引起并很快完成,就像固体的结晶物质在其熔点时突然熔化一样。通常把DNA
在热变性过程中紫外吸收度达到最大值的1/2时的温度称为“熔点”或熔解温度(melting temperature),用符号T m表示; 8.Chargaff定律:不同生物种属的DNA碱基组成不同,同一个体不同器官、不 同组织的DNA具有相同的碱基组成,含氨基的碱基(腺嘌呤和胞嘧啶)总数等于含酮基的碱基(鸟嘌呤和胸腺嘧啶)总数,即A+C=T+G;嘌呤的总数等于嘧啶的总数,即A+G=C+T; 9. 碱基配对:腺嘌呤与胸腺嘧啶成对,鸟嘌呤与胞嘧啶成对,A和T之间形成两个氢键,C和G之间形成三个氢键; ~ 10. 内含子:基因的插入序列或基因内的非蛋白质编码; 11. 正超螺旋:盘绕方向与双螺旋方向相同,此种结构使分子内部张力加大,旋得更紧; 12. 负超螺旋:盘绕方向与双螺旋方向相反,使二级结构处于疏松状态,分子内部张力减小,利于DNA复制、转录和基因重组; 13. siRNA:(small interfering RNA干扰小RNA)是含有21~22个单核苷酸长度的双链RNA,通常人工合成的siRNA是碱基对数量为22个左右的双链RNA; 14. miRNA:(microRNA,) 是一类含19~25单核苷酸的单链RNA,在3’端有1~2个碱基长度变化,广泛存于真核生物中,不编码任何蛋白,本身不具有开放阅读框架,具有保守型、时序性和组织特异性; <
第三节《 遗传信息的携带者—核酸》检测题 一、单项选择题(每小题只有一个符合题意或最优的答案, 每小题 2分,共 40分) 1.对生物体的遗传性、变异性和蛋白质的生物合成具有重要作用的物质是( ) A .氨基酸 B .葡萄糖 C .核酸 D .核苷酸 2.组成 DNA 的结构的基本成分是( ) ①核糖 ②脱氧核糖 ③磷酸 ④腺嘌呤、 鸟嘌呤、胞嘧啶 ⑤胸腺嘧啶 ⑥尿嘧啶 A .①③④⑤ B .①②④⑥ C .②③④⑤ D .②③④⑥ 3.吡罗红甲基绿染色剂的作用是( ) A .仅使 DNA 呈现绿色 B .仅使 RNA 呈现红色 C .只能使一种物质呈现特定的颜色 D .既使 DNA 呈现绿色,也可以使 RNA 呈现红色 4.下列关于核酸的叙述中,正确的是( A .核酸由 C 、H 、O 、 N 元素组成 B C .核酸是一切生物的遗传物质 D 5.关于 DNA 的叙述中,正确的是( ) A .只存在于细胞核中 B C .主要存在于细胞核中 D 6.“观察 DNA 和 RNA 在细胞中的分布”的实验中没有用到的试剂是( A .质量分数为 0.9%的 NaCl 溶液 B .质量分数为 8%的盐酸 C .吡罗红、甲基绿染色剂 D .斐林试剂 7.“观察 DNA 和 RNA 在细胞中的分布”的实验顺序是( ) 10. 下列有关遗传信息携带者——核酸的说法正确的是 ( ) ) .除病毒外,一切生物都有核酸存 在 .组成核酸的基本单位是脱氧核苷 酸 .只存在于细胞质中 ①取细胞制片 ②用吡罗红甲基绿染色剂染色 ③水解 ④盖上盖玻片 ⑤冲洗涂片 A .①③②④⑤ B .⑤③④②① C .②③④①⑤ D .①③⑤②④ 8.用吡罗红和甲基绿染色剂 2 滴对洋葱鳞片叶内表皮细胞的临时装片进行染色,镜检观察呈 绿色的部位是( ) A .细胞壁 B .细胞膜 C .细胞质 D .细胞核 9.制作脱氧核苷酸模型时,各部件之间需要连接,下列图中连接正确的是( )
核酸:是一类重要的生物大分子,担负着生命信息的储存与传递。 DNA一级结构:构成DNA的脱氧核苷酸按照一定的排列顺序而形成的线性结构 Tm:通常把DNA热变性过程中A260达到最大值一半时的温度。 DNA变性:在物理化学因素影响下,DNA碱基对间的氢键断裂,双螺旋解开,DNA功能丧失 增色效应:由于核酸变性引起的对紫外线吸收增加的现象。 减色效应:DNA复性后对紫外线吸收减少的现象。 1简述DNA双螺旋结构模型要点? ○1DNA由两条脱氧多核苷酸链构成,两条链围绕一个中心轴,反向平行缠绕 ○2嘌呤核嘧啶碱基处于双螺旋结构的内侧,碱基平面与螺旋轴垂直,脱氧核糖平面与中心轴平行○3碱基互补A-T,G-C ○4在双螺旋的表面形成大小两个凹槽,分别为大沟和小沟,交替出现○5双螺旋直径2nm每个螺旋包括10bp螺距3.4nm, 2请从分子组成、分子结构、细胞分布以及生物功能的角度,比较DNA和RNA的区别?○1组成单位不同:DNA的组成单位是脱氧核苷酸,RNA的组成单位是核糖核苷酸, ○2组成碱基不同:DNA的组成碱基是ATGC,RNA的组成碱基是AUGC ○3组成五碳糖不同:DNA的组成五碳糖是脱氧核糖,RNA的组成五碳糖是核糖, ○4空间结构不同:DNA是双螺旋结构,RNA一般是单链。 ○5功能不同:DNA是遗传物质,RNA一般在细胞中不作为遗传物质。 3试比较原核生物DNA和RNA转录的主要区别? 相同点:都是利用碱基互补配对原则;都发生在细胞质内(无细胞核);都需要能量和酶。都是生物生长繁殖所必须的。 不同:a DNA复制结过是产生两个DNA分子;RNA转录是以DNA为模板,进行合成,只形成一条链;b DNA复制的目的与RNA转录的目的不同,DNA复制是为了分裂,产生子代;RNA转录是为了合成蛋白质(mRNA)c DNA是半保留复制,新生链各有一半来自母链;RNA只是以DNA为模板合成一条链。d DNA合成需要引物,RNA合成不需要引物f DNA 复制和RNA转录所用的反应底物不同,DNA是脱氧核糖核苷酸RNA是核糖核苷酸;g DNA 复制和RNA转录需要的酶体系不同 4简述真核生物mRNA的成熟加工过程? ⑴在5'端形成帽子结构⑵在3'端形成多聚A尾巴⑶剪接:去除初级转录产物上的内含子,把外显子连接为成熟的RNA 脂:是由脂肪酸与醇作用生成的酯及其衍生物。磷脂:含有磷酸的复合脂质。生物膜:围绕细胞或细胞器的脂双层膜,细胞内的膜系统与质膜的统称。 外周蛋白:在细胞膜的细胞外侧或细胞质与细胞膜表面松散连接的膜蛋白, 内在蛋白:整合进入到细胞膜结构中的一类蛋白,它们可部分地穿过膜磷脂双层1简述生物膜的主要生物学功能? 保护功能,物质转运,信息传递,能量交换,运动功能 2简述生物膜的流体镶嵌模型结构要点? ○1强调了膜的流动性,膜中脂类分子既有固体分子排列的有序性又有液体分子的流动性 ○2强调了膜的不对称性和脂类与蛋白质分子的非极性部分嵌入脂类双分子层的疏水尾部,极性部分露于膜表面.
全面推行核酸检测试运行工作方案 为预防和控制经血传播疾病的发生,保障临床用血质量和安全,经研究决定我站将全面开展核酸检测。为稳步推进核酸全面检测,不影响血液批放行,满足临床用血需求,制定本试运行方案。 一、组织管理 为顺利开展全面核酸检测工作,成立核酸检测工作小组,工作组负责全面推行核酸检测试运行工作,协调处理试运行过程中的相关问题。核酸检测工作小组由田站长总负责,分管站领导和相关科室积极配合。 二、工作目标 根据卫计生发〔2013〕22号,国家卫生和计划生育委员会关于印发全面推进血站核酸检测工作实施方案(2013—2015年)提出的工作目标,到2015年,血液筛查核酸检测基本覆盖全国。2014年5月27日,山东省卫计委又下发了“关于全面推进供血核酸检测工作的通知”,要求各市要按照原卫生部《全面推进血站核酸检测工作实施方案(2013-2015年)》要求,迅速开展核酸检测工作。确保2014年下半年在全省全面开展供血核酸检测。为全面推进我站核酸检测工作,目前前期准备工作已就绪,人员、设备、资金已到位。经研究决定自2014年7月1日开始对我站所有献血员标本(包括沂源采血点)进行核酸检测。 三、保障措施 1、资源保障:器械科购买进口核酸采血管,仅供沂源采血点使用,为沂源采血点配备标本离心机二台(一台备用),购买标本运输箱3个(hiv送检一个,沂源采血点一个,备用一个)。(确认号之后到位,前完成) 2、沂源采血点标本的运送:沂源采血点工作人员严格按《血液标本留取程序 》留取标本和离心,置于2-6℃冰箱保存。标本由计划送血人员运回。根据工作需要,沂源计划送血增加一次,同时减少一次急症送血。即每周二、四、六计划送血三次,中午下班时由送血司机把标本及原料血捎回。为保证核酸标本检测不超48小时,沂源采血点工作人员工作时间调整,接血当日下午采血点工作人员休息,周日休息。 3、机采血小板计划的下达:血液供应科提前和临床沟通,说明我站下一步的工作目标和任务(全面核酸检测并纳入批放行)及造成的血液供应时间的变更,达成共识,取得谅解。合理安排血小板预约和采集计划,血小板采集计划截止到每天下午16:00点之前。?????? 4、机采血小板标本的交接:机采成分科按照血液供应科下达的采集计划预约献血员,安排献血员第二天早上7:30分之前到达血站,血小板标本必须于每天上午9:30之前分别与酶免实验室和核酸实验室当面交接。 5、全血标本的交接:各采血点2014年7月1日起,所有采集的血液同时留取核酸标本和酶免实验室标本。待检室每天早上与酶免实验室和核酸实验室当面交接标本,未检、待检和待放行的原料血和成分血分别存放并标识。 四、核酸检测 1、核酸实验室与酶免实验室同步对当天采集的单采血小板标本和前一天接回的沂源采血点的标本进行血筛三项检测,并对酶免实验室前一天初次检测无反应性的标本进行血筛三项的检测,对酶免实验室前一天初次检测单试剂呈反应性的标本进行血筛三项的单检模式,每天15:30前完成实验。若遇拆分标本,及时与相关科室沟通,调整放行和血小板发放时间,并且完成当天拆分检测,保证该批试验中不留待测的标本。若遇突发应急事件,核酸实验室和酶免实验室同步检测。每天核酸检测完毕后出具书面检测报告交血液质量控制科、血液成分制备科和献血服务科机采成分。 2、质量保证:核酸实验室应建立室内质控标准操作规程,实验室的每一批检测应至少有一个弱阳性室内质控品,该室内质控品应参与混样、核酸纯化、拆分或联检及鉴别检测的全过程。实验结束后,依据室内质控的判定规则对实验结果进行分析和审核,保证检测结果准确可靠。
1核酸的结构与功能 一、名词解释 1、生物化学:是运用化学原理和方法,研究生命有机体化学组成和化学变化的科学,即研究生命活动化学本质的学科。(运用,研究,科学,学科) 2、DNA一级结构:由数量极其庞大的四种脱氧的单核苷酸按照一定的顺序,以3′,5′-磷酸二酯键彼此连接而形成的线形或环形多核苷酸链。 3、增色效应:含DNA和RNA的溶液经变性或降解后对紫外线吸收的增加。是由于碱基之间电子的相互作用的改变所致,通常在260nm测量。 4、减色效应:一种含有DNA或RNA的溶液与含变性核酸或降解核酸的相同溶液相比较,其紫外线吸收为低。是由于DNA双螺旋结构使碱基对的π电子云发生重叠,因而减少了对紫外线的吸收。 5、DNA的变性:指核酸双螺旋的氢键断裂,变成单链,并不涉及共价键的断裂。 6、DNA的复性:变性DNA在适当条件下,又可使两条彼此分开的链重新缔合成为双螺旋结构,全过程为复性。热变性后的复性又称为退火。 7、核酸分子杂交:应用核酸分子的变性和复性的性质,使来源不同的DNA(或RNA)片断按碱基互补关系形成杂交双链分子,这一过程称为核酸的分子杂交。 8、熔解温度:DNA变性的特点是爆发式的,变性作用发生在一个很窄的温度范围内。通常把热变性过程中光吸收达到最大吸收(完全变性)一半(双螺旋结构失去一半)时的温度称为该DNA的熔点或熔解温度(melting temperature),用tm表示。 9、Chargaff定律:所有DNA中腺嘌呤与胸腺嘧啶的摩尔含量相等,(A=T),鸟嘌呤和胞嘧啶的摩尔含量相等(G=C),即嘌呤的总含量与嘧啶的总含量相等(A+G=T+C)。DNA的碱基组成具有种的特异性,但没有组织和器官的特异性。另外生长发育阶段、营养状态和环境的改变都不影响DNA的碱基组成。 二、填空 1、核酸完全的水解产物是(碱基)、(戊糖)和(磷酸)。其中(碱基)又可分为(嘌呤)碱和(嘧啶)碱。 2、体内的嘌呤主要有(腺嘌呤)和(鸟嘌呤);嘧啶碱主要有(胞嘧啶)、(胸腺嘧啶)和(尿嘧啶)。某些RNA分子中还含有微量的其它碱基,称为(稀有碱基)。 3、嘌呤环上的第(9)位氮原子与戊糖的第1位碳原子相连形成(N-C糖苷)键,通过这种键相连而成的化合物叫(核苷)。嘧啶碱—1,1见书上P160 4、体内两种主要的环核苷酸是(cAMP)和(cGMP)。 <3’,5’-环腺苷酸,3’,5’-环鸟苷酸>书上160 5、写出下列核苷酸符号的中文名称:ATP(腺苷三磷酸),dCDP(脱氧胞苷二磷酸)。 6、tRNA的三叶草型结构中,其中氨基酸臂的功能是(携带活化氨基酸),反密码环的功能是(与mRNA模板上的密码子进行碱基配对的专一性的识别)。 7、两类核酸在细胞中的分布不同,DNA主要位于(细胞核)中,RNA主要位于(细胞质)中。 8、核酸分子中的糖苷键均为(β)型糖苷键。糖环与碱基之间的连键为(糖苷)键。核苷与核苷之间通过(磷酸二酯)键连接形成多聚体。 9、核酸在260nm附近有强吸收,这是由于(在嘌呤碱基和嘧啶碱基中存在共轭双键)。 10、给动物食用3H标记的(胸腺嘧啶),可使DNA带有放射性,而RNA不带放射性。 11、双链DNA中若(G-C对)含量多,则Tm值高。 12、DNA样品的均一性愈高,其熔解过程的温度范围愈(窄)。 13、DNA所处介质的离子强度越低,其熔解过程的温度范围越(宽),熔解温度越(低),所以DNA应保存在较(高)
核酸的化学 一、是非题 1.嘌呤碱分子中含有嘧啶碱结构。 2.核苷由碱基和核糖以β型的C—N糖苷键相连。 3.核苷酸是由核苷与磷酸脱水缩合而成,所以说核苷酸是核苷的磷酸酯。 4.核苷酸的碱基和糖相连的糖苷键是C—O型。 5.核糖与脱氧核糖的差别是糖环的2’位有无羟基。 6.核苷酸的等电点的大小取决于核糖上的羟基与磷酸基的解离。 7.在DNA双链之间,碱基配对A-T形成两对氢键,C-G形成三对氢键,若胸腺嘧啶 C-2位的羰基上的氧原于质子化形成OH,A-T之间也可形成三对氢键。 8.任何一条DNA片段中,碱基的含量都是A=T,C=G。 9.DNA碱基摩尔比规律仅适令于双链而不适合于单链。 10.用二苯胺法测定DNA含量必须用同源的DNA作标准样品。 11.DNA变性后就由双螺旋结构变成线团结构。 12.Tin值低的DNA分子中(A-T)%高。 13.Tin值高的DNA分子中(C-G)%高。 14.由于RNA不是双链,因此所有的RNA分子中都没有双螺旋结构。 15.起始浓度高、含重复序列多的DNA片段复性速度快。
16.DNA的复制和转录部必须根据碱基配对的原则。 17.某氨基酸tRNA反密码子为GUC,在mRNA上相对应的密码子应该是CAG。 18.细胞内DNA的核苷酸顺序都不是随机的而是由遗传性决定的。 19.RNA链的5 ′核苷酸的3′羟基与相邻核昔酸的5′羟基以磷酸二酯键相连。 20.假如某DNA样品当温度升高到一定程度时,OD260提高30%,说明它是一条双链 DNA。 21.核酸外切酶能够降解所有的病毒DNA。 二、填空题 1.核苷酸是由___、____和磷酸基连接而成。 2.在各种RNA中__含稀有碱基最多。 3.T m值高的DNA分子中___的%含量高。T m值低的DNA 分子中___%含量高。 4.真核生物的DNA存在于____,其生物学作用是____________。 5.细胞内所有的RNA的核苷酸顺序都是由它们的______决定的。 6.将双链DNA放置在pH2以下或pH12以上,其OD260___,在同样条件下单链
核酸检测和抗体检测 核酸检测和抗体检测 究竟什么是病毒核酸检测?什么是抗体检测?为什么可以用核酸检测结果作为新型冠 状病毒肺炎的确诊依据?我们来了解一下这些问题。 病毒核酸检测是什么? 病毒核酸检测是常见的病毒感染检查方法,并不局限于新型冠状病毒。在埃博拉、流感、禽流感等多种病毒性疾病诊断中,都会应用到病毒核酸检测技术,区别就在于所检测的病毒 特异性基因不一样。 核酸检测是实验室确诊的主要方法。可通过实时荧光PCR检测咽拭子、痰液或血液等标 本中2019-nCoV核酸阳性,或通过病毒基因测序,如与已知的2019-nCoV高度同源即为病原 学阳性。 它既不需要开刀也不需要打针,采集人体分泌物后,进行留样保存,在实验室条件下, 利用PCR技术进行检测,进行临床病原学的确诊。 抗体检测是什么? 血清抗体检测,简称抗体检测。血清检测大多使用三类方法:间接免疫荧光(IIFT)、间接法 ELISA 和胶体金法。 血清抗体检测冠状病毒感染并不能像病毒核酸检测阳性一样作为病毒感染的“金标准”,因为抗体检测的准确性受制于检测方法、灵敏度、特异性、血样制备等因素。 如何判断有没有新冠病毒? 最直接的方法就是通过分子生物学技术检测出属于新型冠状病毒的RNA,这就像法医找到嫌疑人的DNA一样,是可以帮助我们找到“幕后凶手”的直接证据。目前检测新型冠状病 毒核酸的方法主要包括实时荧光RT-PCR(简称为定量PCR)检测和基因测序,而新型冠状病毒核酸检测试剂盒就基于前者,也是最常用的方法。 核酸检测的流程 新型冠状病毒核酸检测样本一般来自咽拭子。检测时,医生会用一个像棉签一样的拭子 去擦拭扁桃体和咽隐窝附近的分泌物,也可以通过鼻腔取鼻咽后部的分泌物,然后放到试管里面,再交给检验部门做相应的病毒核酸的检查。因此,咽拭子采样前应提前漱口。 核酸检测需要经过取样、留样、保存、核酸提取、上机检测五个步骤。
生物化学核酸练习题 第二章核酸化学测试题 一、单项选择题 1.自然界游离核苷酸中,磷酸最常见是位于: A.戊糖的C-5′上 B.戊糖的C-2′上 C.戊糖的C-3′上 D.戊糖的C-2′和C-5′上 E.戊糖的C-2′和C-3′上 2.可用于测量生物样品中核酸含量的元素是: A.碳 B.氢 C.氧 D.磷 E.氮 3.下列哪种碱基只存在于RNA而不存在于DNA: A.尿嘧啶 B.腺嘌呤 C.胞嘧啶 D.鸟嘌呤 E.胸腺嘧啶 4.核酸中核苷酸之间的连接方式是:
A.2′,3′磷酸二酯键 B.糖苷键 C.2′,5′磷酸二酯键 D.肽键 E.3′,5′磷酸二酯键 5.核酸对紫外线的最大吸收峰在哪一波长附近? A.280nm B.260nm C.200nm D.340nm E.220nm 6.有关RNA的描写哪项是错误的: A.mRNA分子中含有遗传密码 B.tRNA是分子量最小的一种RNA C.胞浆中只有mRNA D.RNA可mRNA、tRNA、rRNA E.组成核糖体的主要是rRNA 7.大部分真核细胞mRNA的3′-末端都具有: A.多聚A B.多聚U C.多聚T D.多聚C
E.多聚G 8.DNA变性是指: A.分子中磷酸二酯键断裂 B.多核苷酸链解聚 C.DNA分子由超螺旋→双链双螺旋 D.互补碱基之间氢键断裂 E.DNA分子中碱基丢失 9.DNA Tm值较高是由于下列哪组核苷酸含量较高所致? A.G+A B.C+G C.A+T D.C+T E.A+C 10.某DNA分子中腺嘌呤的含量为15%, 则胞嘧啶的含量应为: A.15% B.30% C.40% D.35% E.7% 二、多项选择题
1、是非题 1.滚筒式复制是环状DNA,一种特殊的单向复制方式。 2.所有核酸的复制过程中,新链的形成都必须遵循碱基配对的原则。 3.双链DNA经过一次复制形成的子DNA分子中,有些不含亲代核苷酸链。 4.原核细胞的每一个染色体只有一个复制起点,而真核细胞的每一个染色体就有许多个复制起点。 5.在细胞中,DNA链延长的速度随细胞的培养条件而改变。6.在细胞生长周期的G1期是双倍体,而在G2期是三倍体。7.所有核酸合成时,新链的延长方向都是从5′→3′。 8.抑制RNA合成酶的抑制剂不影响DNA的合成。 9.在E.coli细胞和真核细胞中都是由DNA聚合酶Ⅰ切除RNA引物。 10.缺失DNA聚合酶Ⅱ的E.coli突变株,可以正常地进行染色体复制和DNA修复合成; 11.在真核细胞中,三种主要RNA的合成都是由一种RNA聚合酶催化。 12.真核细胞中mRNA 5′端都有一个长约200核苷酸组成的PolyA结构。 13.真核细胞中mRNA的前体为hnmRNA。 14.无论是在原核或真核细胞中,大多数mRNA都是多顺反子的转录产物。 15.一段人工合成的多聚尿苷酸可自发形成双螺旋。 2、填空题 1.mRNA前体的加工一般要经过5′端和在3′端三个步骤。 2.识别同一断裂序列的限制性内切酶称为、识别相似断裂序列并产生能通过碱基互补相互缔合粘性末端的限制性内切酶称为。 3.逆转录酶是催化以为模板,合成的一类酶,产物是。 4.欲标记DNA双链5′端,需要酶催化,利用作底物。 5.通过与DNA分子中G-C顺序结合,阻止RNA聚合酶催化的RNA链延伸的抗生素是。 6.核糖体的亚基上含有与mRNA结合的位点。
1.临床实验室若对检测系统进行性能核实,需要进行以下哪组实验(单项该题正确答案: A.精密度、准确 2.基因芯片技术的本质是(单项)该题正确答案: A、核酸分子杂交技术 3.新型冠状病毒肺炎患者行有创机械通气时,正确的方法是(。(单项)该题正确答案: D.小潮气量和低吸气压力 4.合成RNA的原料是:(单功该题正确答案: C、NTP 5.个人防护装置是用于防止人员个体受到生物性、化学性或物理性等()伤害的器材和用品。(单项该题正确答案:A危险因子 6.标记的参与杂交反应的已知核酸序列是(单项该题正确答案 探针 7.级A1型和A2型生物安全柜的通风连接是使用:(单项该题正确答案 A套管“或“伞型罩“连接 8.第三代测序技术的特征(单项该题正确答案 E、单分子测序 9.新冠病毒核酸检测实验室中,不属于净化实验室专用门特点的是:(单项该题正确答案D 以上均不是 10.以下对应关系正确的是()(单项)该题正确答案: B.敏感性一一真阳性/真阳性+假阴性)*100% 11.目前的DNA自动化测序技术可以一次性读取的序列长度约(单项) 该题正确答案D、1000bp 关于分子信标技术的描述,不正确的是(单项该题正确答案 E、分子信标设计简单 13.国内的生物安全实验室一定要按照国务院发布的()进行管理。(单项)该题正确答案: A《病原微生物实验室生物安全管理条例》 14.从鼻咽拭子中提取的检测新型冠状病毒的剩余核酸提取物不可用于哪种病原体诊断(单项该题正确答案 D丙型肝炎病毒 15.退火温度是决定PCR反应特异性的关键因素,通常退火温度为()该题正确答案 C.Tm减5℃ 16.实验室人员培训的主要内容:0(单项该题正确答案E以上都是 17.下列关于Taq DNA聚合酶的描述,正确的是(单项该题正确答案 E、在引物的3-OH末端加入脱氧单核苷酸,形成3',5磷酸二酯键 18.下列关于恒温金属浴的使用说法错误的是()(单项该题正确答案 D孔位不足时,可将0.5mEP管放入1.5m加热孔中进行热裂解,加热时间不变。 9.脱卸三级防护装备的顺序是:0(单项该题正确答案: A.鞋套→护目镜→外层手套→防护服→帽子→内层手套→口罩 20.下列哪项不是临床分子生物学检验分析前质量控制的内容()(单功该题正确答案 E.进行核酸提取的有效性评价 21.在核酸检测体系中加入内质控,其作用不是监控的是(单项)