微生物工程考试复习资料
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第一部分名词解释
上面酵母：发酵时随CO2漂浮在液面上，发酵终了形成了酵母泡盖，长时放置也很少下沉。
下面酵母：发酵时酵母悬浮于发酵液内，终了很快凝结成块并沉淀。
结构性不稳定：由于重组质粒DNA发生缺失、插入或重排引起的质粒结构变化。
复膜氧电极：电极的阴极、阳极和电解质被一层聚分子膜（如聚四氟乙烯）与被测溶液隔开；该膜能透过氧分子，但不能透过溶液中的其它离子或分子。
临界氧浓度：不影响菌的呼吸所允许的最低氧浓度称作临界氧浓度。
比耗氧速率：也称呼吸强度，相对于单位质量的干菌体在单位时间内消耗的氧的量。
全挡板条件：在一定转数下再增加附件而轴功率仍保持不变。
维持因数：供单位重量的细胞（干重）在单位时间内进行维持代谢所消耗的基质量称作维持因数（维持系数）。Monod模型：温度和PH恒定时，μ随培养基组分浓度变化而变化；若着眼于某一特定培养基组分的浓度S，并假设其他培养基组分浓度不变，则μ是S的函数。
渗漏缺陷型：是一种特殊的营养缺陷型，是遗传性代谢障碍不完全的突变型。其特点是酶活力下降而不完全丧失，并能在基本培养基上少量生长。
分离性不稳定：由于在细胞分裂过程中质粒缺失分配到子细胞中而导致整个质粒丢失。
氧的满足度：指血红蛋白被氧饱和的百分比，即血红蛋白的氧含量与氧结合量之比乘以100。
得率：生长得率（菌体得率）——干细胞的生长量与基质消耗量的比值。
比生长速率：基质比消耗速率和产物比生成速率。
呼吸商：对于需氧型微生物反应，CO2的生成量与O2的消耗量之比称为呼吸商，用RQ表示。RQ:值随微生物菌种的不同，培养基成分的不同，生长阶段的不同而不同。测定RQ值一方面可以了解微生物代谢的状况，另一方面也可以指导补料。
摄氧率（OUR）：单位时间内单位体积培养液中微生物摄取氧的量。记作r O2(mmol/L·h)
抗反馈突变株：通过抗结构类似物突变的方法筛选出的菌株。
侧系呼吸链：在标准呼吸链之外的一条不产ATP的呼吸链
氧的饱和度呼吸商：呼吸商(respiratory quotient,RQ)亦称呼吸系数。植物一定时间内呼吸释放二氧化碳对吸收分子氧的体积比或摩尔数比。
F值：单位时间内输入或输出的培养液体积。
F值：又称杀菌值，是指在一定的致死温度下将一定数量的某种微生物全部杀死所需的时间（min）。
比底物消耗速率：Qs——相对单位质量干菌体单位时间内的底物消耗量。Qs=rs/X
原生质体融合：就是把两个亲本的细胞分别去掉细胞壁，获得原生质体，将两亲本的原生质体在高渗条件下混合，由聚乙二醇（PEG）作为助融剂，使它们互相凝集，发生细胞质融合，接着两亲本基因组由接触到交换，从而实现遗传重组。
半连续发酵：在补料分批培养的基础上间歇放掉部分发酵液（带放）称为半连续培养。
决定论结构模型：决定论模型不考虑每个细胞的差异，而是取菌体性质及数量的平均值进行数学处理。
KLa：体积氧传递系数或供氧系数。
稀释度：(D)——单位时间内新进入的培养基体积占罐内培养液总体积的分数。
刚性节点：如果一个或多个途径的流量分割率受严格的控制，那么这类节点就称为刚性节点。
柔性节点：流量分配容易改变并满足代谢需求的一类节点.
种子罐级数：是指制备种子需逐级扩大培养的次数。
灭活原生质体融合技术：采用热、紫外线、电离辐射以及某些生化试剂、抗生素等作为灭活剂来处理单一亲株或双亲株的原生质体，使之失去再生能力，经细胞融合后，由于损伤部位的互补可以形成能再生的融合体。
发酵热：发酵过程中释放出来的净热量。由产热因素和散热因素两方面决定。
脱缰质粒：一些温度敏感型质粒在温度较低时质粒拷贝数较少，当温度升高到一定质粒大量扩增。
反复补料分批操作：随着补料操作的进行，发酵液的体积逐渐增大，到了一定时候将部分发酵液取出，剩下的发酵液继续进行补料分批培养，如此可反复进行多次，称为反复补料分批培养。
PID控制：(比例-积分-微分控制)采用比例、积分、微分算法。P、I、D控制器的控制信号，分别正比于被控过程的输出量与设定点的偏差、偏差相对于时间的积分和偏差变化的速率。PID控制和PI控制广泛应用于发酵过程的控制。微分调节的优点在于它的超前性，当输入发生变化时，马上就有微分信号产生，使被控量得以提前校正，然后再由P、I进行校正，这样可以使整个调节的过渡过程时间缩短，有利于调节质量的提高。PID调节应用最广，技术最成熟，控制结构简单，参数调整容易，是目前过程控制中使用广泛的调节方式。
共固定化技术：将酶、细胞器和细胞同时固定于同一载体中，形成共固定化系统。这种系统稳定，可将几种不同功能的酶、细胞器和微生物细胞进行协同作用，综合了混合发酵和固定化技术的优点。
前体：指某些化合物加入到发酵培养基中，能直接被微生物在生物合成过程中结合到产物分子中去，而其自身的结构并没有多大变化，但是产物的产量却因加入前体而又较大的提高。
对数残留定律：对微生物进行湿热灭菌时，培养基中的微生物受热死亡的速率与残存的微生物数量成正比，这就是对数残留定律。
-dN/dτ=κN
N——培养基中活的微生物个数；
τ——时间（s）;
κ——比死亡速率（s-1）(死亡速率常数)
dN/dτ——微生物的瞬间变化率，即死亡速率
补料分批操作：介于分批培养和连续培养之间的操作方式；在进行分批培养的时候，随着营养的消耗，向反应器内补充一种或多种营养物质，以达到延长生产期和控制发酵过程的目的。
带溶剂：一类能和所提取的生物物质形成复合物，而易溶于溶剂的物质，且此复合物在一定条件下容易分解形成原来的生物物质。
由于萃取剂与抗生素形成的复合物分子的疏水性比批生素分子本身高得多，从而在有机相中很高的溶解度。因此，在抗生素萃取中萃取剂又称带溶剂。
能荷：细胞中A TP、ADP、AMP系统中可为代谢反应供能的高能磷酸键的量度。
促进剂：是一类刺激因子，它们并不是前体或营养，这类物质的加入或可以影响微生物的正常代谢，或促进中间产物的累积，或提高次级代谢产物的产量。
第二部分填空题
1、麦芽干燥过程分_萎凋过程_和_焙焦过程_两个阶段，其中后者是指水分由10%左右降至5%左右。
2、啤酒生产中通常用_汉森罐_罐作为种子的保藏装置；啤酒发酵液过滤常用_硅藻土过滤_法。
3、在酸酶法制备淀粉水解糖工艺中用到的酶（制剂）是_糖化酶_。
4、谷氨酸发酵普遍采用_二_级发酵；国内常采用_等电点-锌盐法_法从发酵液中提取谷氨酸。
5、结晶味精无光泽的原因可能是_结晶操作过程中受长时间的高温（75℃以上）、_干燥温度过高_、_味精分离
之前_、_助晶槽母液浓度过高_。
6、发酵过程生物热的测量可采用_冷却水进出温度差计算法_、_罐温上升速率计算法_等；发酵液液位测量可采
用_双法兰压差法_法；在线测量发酵液菌体浓度可采用_pH-stat值法_法。
7、补料的方式有于预定时间一次补料、_连续恒速补料_和_变速补料_；中间补料需反馈控制，直接法是以_在线
检测葡萄糖或甘油浓度控制碳源浓度_作为反馈控制参数。
８、化学消泡剂的作用机理是_罗氏假说、_促使液膜排液、_破坏膜弹性_、_泡沫液局部表面张力降低_；常用消泡剂有_聚醚类消泡剂_、_高碳醇_、天然油脂_、_硅酮类_等。
９、培养基在管道中不可能呈_活塞_流，通常呈_沟_流，因此在设计连消的维持管时不能简单采用平均停留时间来计算管长，而应采用_扩散_模型来计算。
10、空气贮罐的作用是_消除空压机排出空气量的脉动_、_维持稳定的压力_、_分离部分油水_。
11、影响溶液中氧饱和浓度的因素有温度、_溶液的性质_、_氧分压_等；影响微生物需氧量的因素有_微生物种
类_、_培养基的组成与浓度_、_菌龄_、_培养条件_、_有毒产物的形成及积累_等。
12、单位时间内单位体积培养液中微生物摄取氧的量称作_摄氧率_；测定溶氧系数通常采用_亚硫酸盐氧化法_
法。
13、氧的传质方程式G/τ=K
L a·V·(C*-C
L
)中K
L
a为_体积氧传递系数或供氧系数_，C*为_与气相中氧分压相平衡
的液相中的氧饱和浓度_；通常采用_亚硫酸盐氧化法_测定K
L a；平衡式AQ
S
=Bμ+Q
O2
+CQ
P
中，Q
P
为_mmol/L_。
14、自吸式和气升式发酵罐均罐属于通风发酵罐，自吸式发酵罐省却了_空气压缩机_，其特征性的关键部件是_
转子_和_定子_；气升式发酵罐省却了_搅拌器_，代之在罐内设上升管_或罐外设_循环管。
15、写出下列菌的学名或中文名：啤酒酵母：_Saccharomycescerevisiae_；黑曲霉：_Aspergillusniger_；
Bacillussubtilis：枯草芽孢杆菌_；Aspergillusoryzae：_米曲酶_。
16、确定动力学参数的方法有两类，即_直线拟合、曲线拟合。
17、在以积累末端产物为目的的发酵生产中，如果代谢途径单一无分支，往往不能选用
营养缺陷型突变株，但可采用_抗反馈调节_突变株作为生产菌株；这类突变株通常可以用_添加末端产物类似物_的方法来筛选。
18、酶电极主要由_电化学探头、固定化酶层_组成；酶固定的物理方法主要有_吸附法_、_包埋法_等。
19、评价麦芽质量的指标主要有_叶芽伸展度_、_玻璃质粒_、_千粒重_、_糖化力_。
20、在酶酸法制备淀粉水解糖工艺中用到的酶（制剂）是_α-淀粉酶_；谷氨酸发酵培养基的碳氮比通常为_100∶
15～30_；谷氨酸发酵可用_玉米浆_、_麸皮水解液_、_糖蜜_等提供生长因子。
21、影响工程菌中重组质粒稳定的因素有_重组质粒本身分子结构_、_宿主对质粒稳定的影响_、_质粒拷贝数_、
_重组质粒的表达对质粒稳定性的影响_。
22、电极主要由_电化学探头_、_固定化酶层_组成；酶固定的物理方法主要有_吸附法_、_包埋法_等。
25、培养基连续灭菌（连消）型式有_套管式连消塔_、_汽液混合式连消器_、_喷射式加热器_等。
26、空气贮罐的大小应和空压机排气量相配套，一般为空压机每分钟排气量的_0.1～0.2 _。
27、相对于单位质量的干菌体在单位时间内所消耗的氧量称作_比耗氧速率或呼吸强度_。
28、氧传质方程式是_OTR=K
L a×（C*-C
L
）；C
L
是_液相中氧的浓度_；当微生物的摄氧率不变时（假定C*在一定
条件下也不变），K
L a越大，发酵液中溶解氧浓度_C
L
越大_；影响K
L
a的因素有_搅拌_、_空气流速_、_培养
理液的物性质_等。
29、发酵罐换热装置的类型主要有_夹套式_、_竖式蛇管_、_竖式列管_；轴封的主要类型有_填料函_、_端面轴
封_。
33、抗反馈突变株由于基因突变，它们的酶或_无活性的原阻遏物_不再与末端产物结合，从而不再发生酶的变构
及_阻遏物的活化_，或者_活性阻遏物_不能再与发生了突变的操纵基因结合，因此反馈调节被打破。
35、酒花的主要成分有_α-酸_、_酒花油_、_多酚物质_；主发酵高泡期的特点是_主发酵高泡期的特别是发酵最
旺盛期_、泡沫丰厚（20～30cm)_、应密切注意降温。
36、谷氨酸的生物合成途径包括_酵解途径（EMP)_、_己糖磷酸途径_、_三羧酸途径(TCA)_以及磷酸己糖途径
和伍德-沃克曼反应；以大米为原料生产味精的工艺过程可分四大步，即_淀粉水解糖制备_、_谷氨酸发酵_、_谷氨酸提取_、_谷氨酸制味精_；谷氨酸生物合成的主要反应是_谷氨酸脱氢酶_催化的_还原氨基化反应_反应。
37、重组质粒的不稳定分两种类型，即_分离性不稳定_、_结构性不稳定_。
38、根据流体的固有性质，如质量、导电性、电磁感应性、热传导性能等设计的流量计属于_质量_型流量计；双
法兰压差法是用来测量_发酵液液位_的一种方法；复膜氧电极是用来测量_溶解氧_的一种电极；常用__电极法_电极来测量发酵液中的溶氧；测定溶氧系数通常采用_亚硫酸盐氧化法_法。
39、、组成生物传感器的三大元件（组成部分）是_生物材料_、_反应物（被测物）_、_换能元件_；常用固定酶
的化学方法有_分子间联合_、_共价结合_。
40、影响生物热的因素主要有_发酵时期_、_培养基成分浓度_、_菌株特性_。
41、发酵中引起pH下降的因素有_碳源过多消泡油过多生理酸性物质存在__等。
42、Monod方程μ=μ
max ×S/(K
S
+S)中，μ
max
为_菌体生长比速最大值_，S为_限制性基质浓度_，K
S
为_半饱和常数_；
微生物反应的氧平衡式AQ
S =Bμ+Q
O2
+CQ
P
中，A代表__________________，Q
P
代表________________。
43、不影响菌的呼吸所允许的最低氧浓度称作_临界氧浓度_；在加热致死时间曲线中，加热时间缩短90%所需升
高的温度，称为_Z值_。44、发酵生产中，培养基灭菌前通常要先进行预热（至70℃），预热具用_利于糊化_、_减少冷凝水的生成_以及减少噪音等作用。
46、气液分离器的作用是_分离空气中被冷凝成雾状的水雾和油雾_，其主要型式有_旋风分离器_、_丝网分离器_；
空气总过滤器常用的介质是_棉花_、_玻璃纤维_、_活性炭_等；空气分过滤器常用_平板式纤维纸_作为过滤介质。
47、种子罐级数是指_指制备种子需逐级扩大培养的次数_，一般根据菌种生长特性、菌体繁殖速度以及所采用发
酵罐的容积等而定。48、筛选获得抗分解代谢阻遏突变株的方法是_在以酶受阻遏的底物为唯一氮源的培养基上，选择能正常生长的菌落_。
49、挡板的作用是_改变液体的方向，由径向流改为轴向流，使液体激烈翻动，增加溶解氧_；轴封的作用是_使
灌顶（或底）与搅拌轴间的缝隙密封，防止泄露和染菌_。
50、酒花在啤酒酿造着的主要作用为_赋予啤酒香味_、_爽口苦味_、增进啤酒持泡性和稳定性、_麦汁共沸时促
进蛋白凝固，利于澄清_、_增加麦汁和啤酒的防腐能力_；其主要成分有_α-酸_、_酒花油_、_多酚物质_。
56、发酵中引起pH上升的因素有_菌体自溶_、_尿素被分解成NH3_、_糖缺乏_等。
58、Monod方程的表达式是_μ=μ
max ×S/(K
S
+S)_；其中的Monod常数表示_Ks表示微生物对生长限制基质的亲和力
_；包含维持代谢的生长动力学方程可表示为_μ=_μ
max
S/（Ks+S）-b_。
66、发酵生产上常用的感温元件是_热电偶_；远传式罐压测量需要_压力信号转换器。
67、Qs=μ/Y
X/S 中的Y
X/S
的含义是_以基质消耗为基准的生长得率_。
68、通常采用_化学热力学_和_化学动力学_两种方法学方程与实验数据拟使动力合，以确定动力学参数。
85、分离抗肿瘤药物产生菌可采用_化学诱导分析_法；分离生长因子产生菌通常需要_营养缺陷型菌株_作为指示
菌。
86、细菌原生质体融合育种中常用的促融剂是_聚乙二醇_；影响原生质体制备的因素除酶的种类、浓度、酶解温
度和时间外，可能还有_菌体的预处理_、_渗透压稳定剂_、_菌体的培养时间_。
87、_____________是一种不完全营养缺陷型，仅能合成微量而不是过量的末端产物。
88、在生产上为了提高诱导酶的产量，可采用_____________________、_______________、____________________
等措施。
89、写出对应的中文名称：Streptomycesgriseus_灰色链霉菌_、Saccharomycescerevisiae_酿酒酵母_、
Aspergillusniger_黑曲霉_。
91、在代谢工程设计中，主要方式有_改变代谢途径_、_扩展代谢途径_、_构建新的代谢途径_。
92、生产上通常采用压差_法将实验室制备的摇瓶种子接入种子罐。
93、连消装置主要有连消器和_维持器_、_冷却器_。
94、常用汽液分离器的型式有_旋风分离器_、_丝网分离器_，旋风分离器的原理是_利用气流从切线方向进入容
器，在容器内形成旋转运动时产生的离心场来分离重度较大的微粒。
95、发酵工业使用的空气总过滤器的过滤介质通常为_棉花_、_玻璃纤维_、_活性炭_；该类过滤器是通过_惯性
碰撞_、_重力沉降_、_阻截_、布朗扩散作用和静电吸附作用等原理达到过滤除菌目的的。
99、常用聚醚类消泡剂是_聚氧丙烯甘油GP型_或_聚氧乙烯氧丙烯甘油GPE型_；其消泡机理在于_在气液界面上
优先被吸附_、_本身不赋予泡膜弹性_。
101、生化诱导分析法已成功用于_抗肿瘤药物产生菌_菌的分离。
103、发酵工业中，发酵培养基常用有机氮源有（任举两种）_蛋白胨_、_酵母粉_。
104、在酸酶法制备淀粉水解糖工艺中，所用的酶是_糖化酶_，其作用是_对酸解产生的糊精或低聚糖进行糖化_。105、某正交表显示需作9次实验，最多可观察4个因素，每个因素均为3水平，则该正交表可表示为_L
9
(34)_。106、不需配备空气压缩机的好氧发酵罐是_机械搅拌自吸式发酵罐_。
107、-dN/dτ=κN是__________的数学表达式，其中的κ为_________________。
108、常用连消装置有_气液混合式连消气_、_喷射式加热器_和套管式连消器。
110、影响介质过滤效率的因素有纤维直径、介质填充厚度、_介质填充密度_和_空气流速_。
111、氧传递过程中，供氧方面的阻力有4个，其中与发酵液成分和浓度有关的阻力是_液膜阻力_和_液流阻力_；
耗氧方面的阻力有_细胞周围液膜阻力_、_菌丝从或团内的扩散阻力_、_细胞膜的阻力_、_细胞内反应阻力_。112、单位流体面积上的切向力叫做_剪应力_。
113、OTR=KLa(C*－CL)中的CL是_液相中氧的浓度_；“a”是_比表面积（即单位体积的液体中所含的气-液接触面积）_；测定KLa的方法有_亚硫酸盐氧化法_、_动态法_、_直接测定法_。
114、化学消泡剂消泡的机理主要包括两个方面，即_吸附助泡剂，加入电解质，瓦解双电层_以及降低泡沫的机械强度，使泡沫破裂。
116、带溶剂是_一类能和所提取的生物物质形成复合物，而易溶于溶剂的物质，且此复合物在一定条件下易分解形成原来的生物物质_。
117、酒花中具有苦味和防腐能力的成分是_α-酸_。
118、常用来提供生长因子的农副产品原料有（任举两种）_玉米浆_、_酵母_。
119、在酶酸法制备淀粉水解糖工艺中，所用的酶是_α-淀粉酶_，其作用是_对淀粉进行液化。
121、介质除菌的机理包括静电吸引、布朗运动及_拦截滞留作用_、_重力沉降作用_；在空气流速较大的情况下，起主要作用的是_惯性冲击滞留作用_。
124、影响体积吸收系数KLa的因素有_搅拌_、_空气流速_、培养液的物理性质等。
125、供单位重量的细胞（干重）在单位时间内进行维持代谢所消耗的基质量称作_维持因数_。
127、发酵生产中常用过滤设备有_板框过滤机_和_带式过滤机_。
128、萃取方式有单级萃取、_多级错流萃取和_多级逆流萃取_。
第三部分选择题
*1、麦芽制备的目的有（ABC）
A)使麦粒中的淀粉和蛋白质适度溶解
B)产生麦芽特有的色香味
C)使大麦生成各种酶
D)消除麦粒中的α-酸，除去生青气
2、谷氨酸生产用菌株一般不属于（C）
A)棒状杆菌属B)短杆菌属C)黄单胞菌属D)小杆菌属
3、谷氨酸发酵培养基的C/N一般为（A）
A)100:15～30 B)100:0.2～0.3 C)100:4～5 D)100:21～42
*4、下列关于谷氨酸发酵控制的叙述，对者为（A B CD）
A)通常采用流加尿素来调节pH B)谷氨酸形成期应充分供氧
C)发酵的不同时期可控制不同温度D)可用麸皮水解液提供生长因子
*5、下列关于溶氧的叙述对者为（ACD）
A)溶氧可作为发酵中氧是否足够的度量
B)溶氧可作为发酵异常情况的指示
C)溶氧可作为发酵中间控制的手段之一
D)溶氧可作为考察设备、工艺条件的指标之一
6、空气分过滤器常用过滤介质是（C）
A)棉花B)活性炭C)（玻璃）纤维纸D）硅藻土
7、含有某种细菌的悬液，含菌数为10４/ml,在100℃（212°F）的水浴温度中，活菌数降低到10３/ml时所需
的时间为10min,则（C）
A)该菌的Z值为10B)该菌的F值为10
C)该菌的D值为10D)该菌的热力致死时间为10
8、酒精发酵罐罐高与罐直径的比通常为（A或D）
A)1.1～1.5 B)0.65～0.90 C)2.5～4.0 D)7
*9、下列构件中属于填料函的是（AB）
A)压盖B)压紧螺栓C)动环D)O形密封圈
*10、发学酵动力可类分三种型，下列关于“生长关联型”的叙述对者是（AB）
A)由碳源直接氧化产生初级代谢产物B)酵母菌的酒精发酵属此类
C)由碳源直接氧化产生次级代谢产物D)灰色链霉菌的链霉素发酵属此类
11、谷氨酸生产菌由α-酮戊二酸生成谷氨酸的主导性反应是（A或C）
A)谷氨酸脱氢酶所催化的还原氨基化反应B)转氨酶所催化的转氨反应
C)谷氨酸合成酶所催化的合成反应D)酯化酶所催化的酯化反应
12、Aspergillusoryzae是（D）
A)产黄头孢霉B)黑曲霉C)黄曲霉D)米曲霉
13、构建时不考虑每个细胞的差异，但需考虑菌体组成的变化，将活菌体与死菌体分别处理的动力学模型属（B）
A)概率论结构模型B)决定论结构模型
C)概率论非结构模型D)决定论非结构模型
14、下列关于柠檬酸生产菌柠檬酸积累机理的叙述，错者为（D）
A)丙酮酸羧化酶呈组成型，可源源不断地提供草酰乙酸
B)在控制Fe2+含量的情况下，乌头酸水合酶活性低而不能及时转化柠檬酸
C)具有一条不产ATP的侧系呼吸链
D)一旦柠檬酸浓度升高，会激活异柠檬酸脱氢酶，从而促进柠檬酸的积累
15、灰色链霉菌的学名是（B）
A)Micromonosporagriseus B)Streptomycesgriseus
C)Streptomycesaureofaciens D)Leuconostocmesenteroides
*16、麦芽干燥的目的不包括下列中的（BC）
A)除去生青气B)促进蛋白凝固
C)消除麦粒中的多酚类物质D)终止酶的作用
17、生产淡色啤酒，酒花的加量一般为麦汁的（B）
A)1～3% B)0.18～0.20% C)0.4～0.6% D)4.0～6.0%
18、啤酒生产中常用来兼具种子包藏的装置是（C）
A)巴氏罐B)卡氏罐C)汉森罐D)锥形罐
*19、啤酒主发酵过程可分三个阶段，其中第二阶段的特点有（AB）
A)泡沫丰厚B)发酵旺盛C)发酵开始衰落D)发酵液温度下降
*20、味粉浑浊的可能原因有（AB）
A)硫化物过量B)夹带DL－谷氨酸C)干燥温度过高、时间过长
D)结晶母液pH过低
*21、泡沫对发酵的影响有（AC）
A)降低了发酵罐的装液系数B)增加了菌群的非均一性
C)增加了染菌的机会D)导致产物损失
22、100℃需要加热100分钟杀死微生物甲，而用121℃加热10分钟即可杀死该微生物，则该微生物（C）
A)D值为21 B)F值为21 C)Z值为21 D)热力致死时间为21
*23、装于发酵罐内的消泡装置是（C）
A)梳齿式打泡器B)半封闭涡轮消泡器C)碟片式消泡器D)耙式打泡器
32、（麦芽）焙焦过程是指（B）
A)麦芽水分由18%左右降至10%左右B)麦芽水分由10%左右降至5%左右
C)麦芽水分由5%左右降至1%左右D)麦芽水分由30%左右降至10%左右
*34、味粉浑浊的原因可能是（ABCD）
A)硫化物过量B)夹带DL-谷氨酸钠
C)消泡油使用过量D)原材料质量差
35、Calvet微量热器属于（B）
A)流通量热计B)热流量热计C)绝热量热计D)以上都不属于
*36、下列关于温度对发酵影响的叙述，对者为（AC）
A)温度影响产物合成的速率和产量B)温度可能影响终产物的质量
C)温度可能影响产物合成的方向D)温度对A、B、C中提到的三者都无影响
37、对大多数微生物来说，耐热性最强的pH范围是（B）
A)2.0～3.0 B)6.0～8.0 C)10.0～11.0 D)3.5～4.5
*38、下列项目中属于供氧方面阻力的是（BD）
A)细胞膜的阻力B)气液界面阻力
C)细胞周围液膜的阻力D)液流阻力
39、下列氧传递阻力中，与发酵液成分、浓度相关的是（B）
A)氧膜阻力B)液流阻力
C)细胞内反应阻力D)菌丝丛或团内的扩散阻力
40、Bacillussubtilis和Saccharomycescerevisiae依次分别是（C）
A)灰色链霉菌和假丝酵母B)枯草杆菌和乳酸杆菌
C)枯草杆菌和啤酒酵母D)假丝酵母和灰色链霉菌
*41、下列关于维持因数的叙述，对者为（AB）
A)对某个特定的菌株而言，维持因数是个不变的常数
B)维持因数是单位重量的细胞（干重）在单位时间内进行维持代谢所消耗的基质的量
C)维持因数是单位体积的培养液在单位时间内用于微生物维持代谢所消耗的基质量]
D)同一菌株，在不同培养条件下，维持因数可能不同
42、产物合成动力学分三种类型，酵母菌发酵生产酒精属于（A）
A)生长关联型B)部分生长关联型
C)非生长关联型D)不属于A、B、C任一种
43、通用机械搅拌通风发酵罐的罐高与罐直径的比通常为（B）
A)1.1～1.5 B)2.5～4.0 C)7.0 D)0.5～0.75
44、能量平衡式ΔH
S ·Q
S
=ΔH
X
·μ+ΔH
P
·Q
P
+Q
H
中的Q
H
意为（B）
A)比耗氧速率B)比分解代谢热C)分解代谢热D)基质总比消耗率
45、谷氨酸生产菌株一般不属于（C）
A)棒状杆菌属B)短杆菌属C)黄单胞菌属D)小杆菌属
*59、谷氨酸生产菌一般具有的特点有（AC）
A)需氧
B)分解淀粉的能力强，但分解酪蛋白能力弱
C)发酵过程中菌体发生明显的形态变化
D)乌头酸酶、异柠檬酸脱氢酶活力强，但二氧化碳固定反应酶系活力欠缺75、一个总容积为50m3的酒精发酵罐，一般可装发酵液（C）
A)30～35m3 B)10～15m3 C)40～45m3 D)20～25m3
76、下列属外置式消泡装置的是（C）
A)半封闭涡轮消泡器B)梳齿式打泡器C)碟片式消泡器D)耙式打泡器
*77、下列组件中，属于端面轴封的是（AB）
A)动环B)静环C)填料压盖D)填料
78、在下列发酵过程中，不需供氧的是（C）
A)利用黑曲霉液体深层发酵生产柠檬酸
B)利用葡萄糖液体发酵生产酵母菌体
C)利用固定化酵母液体发酵生产酒精
D)利用米曲霉固体发酵制曲
*80、下列关于Monod模型的叙述，错者为（BC）
A)其成立的条件之一是假设菌的生长为均衡型非结构式生长
B)是描述底物消耗速率的经验性关系式
C)其表达式为Qs=rs/X
D)是描述比生长速率与限制性基质浓度关系的经验式
*81、在发酵过程中引起pH下降的因素有（BC）
A)碳氮比例不当，氮源过多
B)碳氮比例不当，碳源过多
C)生理酸性物质存在
D)中间补料中氨水或尿素加入过多。
*83、下列属于生物传感器组成部份的是（AB）
A)生物体功能材料B)换能元件C)复膜氧电极D)金属转子流量计
*84、使工程菌质粒稳定的措施包括（ABCD）
A)选择适当宿主B)施加选择压力C)组建合适载体D)控制基因过量表达
85、下列关于Saccharomycescerevisiae（啤酒酵）的叙述，对者为（D）
A)根据长与宽的比例可以分为三组，且被称为“第一家养微生物”
B)为灰色链霉素常用生产菌
C)它的中文名称是大肠杆菌，是基因工程的常用宿主
D)淀粉酶活力强，是酒曲生产的重要菌种
86、下列关于放线菌杂交的叙述，错者为（D）
A)就本质来说，放线菌杂交近似于细菌
B)一部分放线菌在杂交过程中会形成异核体，这种异核体在复制过程中染色体不发生交换
C)异核体在放线菌杂交育种中没有多大作用，只有部分结合子才是亲本间遗传信息传递和基因重组的关键
D)放线菌杂交与质粒无关
87、下列关于“前体”的叙述，错者为（B）
A)一般来说前体对菌体生长和产物合成没有任何不良影响
B)前体能直接被微生物在生物合成过程中结合到产物分子中去，而其自身的结构并没有多大变化
C)产物的产量通常会因加入前体而有较大提高
D)在抗生素发酵中，普遍需要添加前体
88、酒精发酵罐没有的配置是（B）
A)冷却装置B)搅拌器C)人孔D)视镜
90、下列选项中，不属于空气贮罐的功能的是（C）
A)消除空压机排出空气量的脉动
B)分离部分油水
C)捕集较大的灰尘颗粒
D)维持稳定的压力
91、下列关于结构模型的叙述，错者为（）
A)考虑菌体组成的变化，将活菌体和死菌体分别处理
B)均相模型和生物相分离模型均可分别构成结构模型
C)属于概率论模型
D)属于决定论模型
92、产物合成动力学有三种类型，下列关于“部分生长关联型”的叙述，错者为（）
A)动力学表达式为dP/dt= X
B)发酵过程可分为两个阶段
C)第一阶段为菌体生长阶段，菌体生长与基质消耗成正比，但无产物生成
D)第二阶段为产物合成阶段，产物合成、菌体生长和基质消耗成正比
94、某种树脂的代码为D013×8，下列关于代码的解释，错者为（B）
A)该代码中的“0”表示树脂分类号
B)该代码中的“1”表示树脂分类号
C)该代码中的“1”表示树脂骨架号
D)该代码中的“8”表示树脂交联度
96、下列关于“下面酵母”的叙述，错者为（A OR C）
A)发酵时酵母悬浮于发酵液内
B)发酵终了很快凝结成块并沉淀
C)发酵时随漂浮在液面上，发酵终了形成酵母泡盖
D)下面酵母为我国大多数啤酒厂使用
97、下列关于“相依型网络”的叙述，错者为（B）
A)网络中的每一节点都依照化学计量规则将代谢物转化为终端产物的组成部分
B)代谢网络中各主节点集中于产物
C)网络各主节点的重要性相同
D)只要改变某一节点上的代谢物流量分配，就有可能提高终端产物的产率
98、高压匀浆器是用来（C）
A)破碎细胞的B)过滤菌丝体的C)浓缩发酵液的D)结合去除高价无机离子的
103、粗过滤器的作用是（B）
A)消除空压机排出空气量的脉动B)分离部分油水
C)捕集较大的灰尘颗粒D)维持稳定的压力
104、下列关于非结构模型的叙述，错者为（C OR D）
A)不考虑菌体组成的变化B)均相模型和生物相分离模型均可分别构成结构模型
C)属于概率论模型D)属于决定论模型
106、双法兰压差法用来测量（A）
A)液位B)罐压C)发酵液黏度D)基质浓度
第四部分判断题
×1、六弯叶搅拌器称为标准型搅拌器，其叶径通常是罐内径的1/3。
√2、通常采用变色圈法分离解脂细菌。
×3、能荷= [ATP] / ([ATP]+1/2[ADP])
×4、应用营养缺陷型菌株无法达到积累分支途径中中间产物的目的。
√5、在抗生素的发酵生产中，补加前体类似物或使用抗抗生素突变株通常可提高产量。（不确定）×6、独立型网络中各主节点集中于产物，各节点的重要性相同。对于独立型网络而言，只要改变在某一节点上的代谢物流量分配，就有可能提高终端产物的产率。
×7、采用管式维持器进行连消时，通常根据管内径和发酵液平均流速计算确定管长。
×8、对于需氧型微生物反应，O2的消耗量与CO2的生成量之比称为呼吸商。
×9、酒花中多酚物质是啤酒爽口苦味的主要物质基础，它还具有促进蛋白凝固沉淀的作用。
√10、黑曲霉积累柠檬酸是菌体代谢失调的结果。
√11、固定化细胞通常透性和热稳定性增强
×12、供菌种繁殖孢子的培养基称为孢子培养基，常用液体培养基。
√13、酸解法制备淀粉水解糖过程中，可能因发生复合反应而生成色素物质，从而使糖液颜色变深。×14、随着温度的上升，灭菌速度常数的增加倍数小于培养基成分破坏的增加倍数；因此培养基灭菌采用高温短时间的方法，有利于减少营养成分的破坏。
×15、分批（实罐）灭菌中，发酵罐规模越大，需要保持额定压力的时间越长。
√16、为获得压力较高的压缩空气，通常采用多级压缩。
√17、当气流速度达到一定时，惯性冲击滞留作用是介质过滤的主要作用。
√18、多级连续培养特别适用于细胞生长和产物合成的最佳条件不同的情况。
×19、Monod方程中的Ks表示微生物对生长限制基质的亲和力；Ks越大，微生物比生长速率对限制性基质浓度的变化越敏感。
×20、下游提取、精制占成本的主要部分的发酵产品，主要追求提高产率、得率和发酵系数。
√21、孢子培养基营养不要太丰富（特别是有机氮源），否则不易产孢子。
×22、尿素、玉米浆属于有机物，为发酵生产中常用的迟效氮源。
√23、酸解法制备淀粉水解糖过程中，两个葡萄糖分子可能通过复合反应生成异麦芽糖和龙胆二糖。√24、随着温度的上升，灭菌的速度常数的增加倍数大于培养基成分破坏的增加倍数。
√25、分批灭菌中，发酵罐规模越大，需要保持额定压力的时间越长。
√26、指数流加补料的加入量呈指数规律增长。
√27、Monod方程中的Ks表示微生物对生长限制基质的亲和力；Ks越大，微生物比生长速率对限制性基质浓度的变化越不敏感。
√28、一般对发酵及原材料成本占整个生产成本主要部分的发酵产品，主要追求提高产率、得率和发酵系数。
√29、多级连续培养特别适用于细胞生长和产物合成的最佳条件不同的情况。
√30、去除发酵液中的钙离子常用草酸。
第五部分问答题
1、简述影响谷氨酸结晶的主要因素。
1温度与降温速度、2加酸速度与终pH的影响、3投晶种、4搅拌的影响2、说明1）影响发酵热的因素2）说明溶氧测定的意义。
·发酵热：就是发酵过程中释放出来的净热量。
1生物热Q
生物、2搅拌热Q
搅拌
、3蒸发热Q
蒸发
、4辐射热Q
辐射
·溶氧测定：溶解氧作为环境因素对微生物反应有直接影响；溶氧可作为发酵中氧是否足够的度量；溶氧可作为发酵中间控制的手段之一；溶氧可作为考察设备，工艺条件的指标之一。
3、简述机械搅拌发酵罐的基本条件以及自吸式发酵罐充气的原理。
·机械搅拌发酵罐的基本条件
1）适宜的径高比。[高：直径约为2.5～4]
2）能承受一定的压力。[水压试验（1.5倍）]
3）搅拌通风装置要能使气泡分散细碎、气液充分混合，保证发酵液必须的溶解氧，提高O2的利用率。
4）应具有足够的冷却面积。[代谢产热]
5）发酵罐内应抛光，尽量减少死角。[避免积污、染菌]
6）轴封应严密，尽量减少泄漏。
·自吸式发酵罐的充气原理：
自吸式发酵罐在搅拌的同时完成了充气作用。启动前转子被液体浸没；转子高速旋转，液体、空气在离心力作用下被甩向外缘，在转子的中心处形成负压；于是将罐外的空气通过搅拌器中心的吸入管而被吸入罐内；通过导轮使气液均匀分布甩出，并使空气在循环的发酵液中分裂成细微的气泡。自吸式发酵罐在搅拌的同时完成了充气作用。
4、简述pH对微生物菌体生长和产物合成的影响。
1）pH影响酶的活性。当pH值抑制菌体某些酶的活性时使菌的新陈代谢受阻
2）pH值影响微生物细胞膜所带电荷的改变，从而改变细胞膜的透性，影响微生物对营养物质的吸收及代谢物的排泄，因此影响新陈代谢的进行
3）pH值影响培养基某些成分和中间代谢物的解离，从而影响微生物对这些物质的利用
4）pH影响代谢方向 pH不同，往往引起菌体代谢过程不同，使代谢产物的质量和比例发生改变。
不同pH值对菌体的形态影响很大，当pH值高于7．5时，菌体易于老化，呈现球状；当pH值低于6．5时菌体同样受抑制，易于老化。而在7．2左右时，菌体是处于产酸期，呈现长的椭圆形；在6．9左右时，菌体处于生长期，呈“八”字形状并占有绝对的优势。
pH6．9时，菌体生长旺盛，pH7．15时，对菌体的产酸有利。因此，在发酵的产酸期产酸较高。采用阶段pH控制模式进行发酵，在发酵中前期控制pH6.9，到48h后pH值为7．15，到80h后pH值为7．25。产率22．27g·/L，产酸率提高12．23％。
5、图示空气中的氧传递到微生物细胞内的过程，并说明哪些阻力与空气质量有关。
1气膜阻力、2气液界面阻力、3液膜阻力、4液流阻力、5细胞周围液膜阻力、6菌丝丛或团内的扩散阻力、7细胞膜的阻力、8细胞内反应阻力
·在好氧发酵中，对微生物的供氧过程，首先是气相中的氧溶解在发酵液中，然后传递到细胞内的呼吸酶位置上而被利用。
·与空气质量有关的阻力：
1）气膜阻力（ 1/k1 ; 1/KG）：为气体主流及气-液界面的气膜阻力，与空气情况有关。
2）气液界面阻力（1/k2；1/KI）：与空气情况有关，只有具备高能量的氧分子才能透到液相中去，而其余的则返回气相
6、简要说明亚硫酸盐氧化法测定溶氧系数的原理和方法。
·原理：
1）Cu2+作催化剂，溶解在水中O2能立即氧化SO
3-2，使之成为SO
4
-2。（氧分子一经溶入液相，立即就被还原
掉）
2）剩余的Na
2SO
3
与过量的碘作用
3）再用标定的Na
2S
2
O
3
滴定剩余的碘
·操作程序：
将一定温度的自来水加入试验罐内，开始搅拌，加入亚硫酸钠晶体，使SO3-2浓度约0. 5mol/L左右；
再加入硫酸铜晶体，使Cu2+浓度约为10-3 mol/L，待完全溶解；通空气，一开始就接近预定的流量，尽快调至所需的空气流量；稳定后立即计时，为氧化作用开始；氧化时间连续4～10min，到时停止通气和搅拌，准确记录氧化时间。
试验前后各用吸管取5～100ml样液，立即移入新吸入的过量的标准碘液中；然后用标准的硫代硫酸钠溶液，以淀粉为指示剂滴定至终点。
7、试述提高次级代谢产物产量的方法。
1)补加前体类似物
2)加入诱导物,把一些对次级代谢产物产生有诱导作用的物质加入发酵培养基中可增加产量
3)防止碳分解代谢阻遏或者抑制的发生
4)防止氮代谢阻遏的发生,避免使用高浓度的铵盐作氮源以防止氮代谢阻遏的发生，是抗生素工业成熟的经
验
5)筛选耐前体或前体类似物的突变株,加入前体有提高次级代谢产物产量的效果，但过量对菌体又会有毒害
6)选育抗抗生素突变株
7)筛选营养缺陷型的回复突变株
16、说明1）泡沫对发酵的影响2）液体深层发酵的优点。
泡沫对发酵的影响
有利之处：气体分散、增加气液接触面积
有害之处：1降低生产能力；2引起原料浪费；3影响菌的呼吸；4引起染菌
液体深层发酵的优点
1）液体悬浮状态是多数微生物的最适生长环境。
2）在液体中，菌体及其底物、产物（包括热）易于扩散，使发酵可在均质或拟均质条件下进行。
3）液体输送方便，易于机械化操作。
4）厂房面积小，生产效率高，易进行自动化控制，产品质量稳定。
5）产品易于提取、精制
17、黑曲酶积累柠檬酸的机理（黑曲酶产生柠檬酸的途径及柠檬酸积累的代谢调节机理）
1）由锰离子缺乏抑制了蛋白质合成而导致细胞内NH4+浓度升高和一条呼吸活性强的侧系呼吸链，不产ATP，这两方面的因素分别解除了对磷酸果糖激酶(PFK)的代谢调节，促进了EMP途径畅通；
2）由组成型的丙酮酸羧化酶源源不断地提供草酰乙酸；
3）在控制Fe 2+含量的情况下，乌头酸水合酶活性低而不能及时转化柠檬酸；
4）一旦柠檬酸浓度升高，就会抑制异柠檬酸脱氢酶，从而进一步促进了柠檬酸自身的积累。
19、何谓抗反馈突变株？如何筛选获得？有何作用。
抗反馈突变株是一种解除合成代谢反馈调节机制的突变型菌株。通常可以用添加末端产物类似物的方法来筛选获得。其特点是所需产物不断积累，不会因其浓度超量而终止产生。抗反馈突变株由于基因突变，它们的酶或无活性的原阻遏物不再与末端产物结合，从而不再发生酶的变构及阻遏物的活化，或者活性阻遏物不能再与发生了突变的操纵基因结合，因此反馈调节被打破，即使在末端产物过量的情况下，也同样可以积累高浓度的末端产物。
20、根据影响重组质粒稳定的因素说明使工程菌重组质粒稳定的措施。
影响重组质粒稳定的因素
1）与质粒稳定有关的基因及质粒结构自身对其稳定性的影响
2）宿主对质粒稳定的影响
3）质粒拷贝数
4）重组质粒的表达对质粒稳定性的影响
使重组质粒稳定的措施
1）组建合适的载体
2）选择适当宿主（一般大肠杆菌较好）
3）施加选择压力（抗生素添加法、抗生素依赖变异法、营养缺陷型）
4）控制基因过量表达（可诱导性启动子和温度敏感型）
5）控制培养条件（培养基的组成、培养温度和菌体的比生长速率）
25、空气中的氧在传递到微生物细胞的过程中需要克服哪些阻力？其中哪些与发酵液成分、浓度有关。
供氧方面的阻力
气膜阻力（ 1/k1，1/KG）、气液界面阻力（1/k2，1/KI）、液膜阻力（1/k3，1/KL ）、液流阻力（1/k4，1/KLB）
耗氧方面的阻力
细胞周围液膜阻力（1/k5，1/KLC）、菌丝丛或团内的扩散阻力（1/k6，1/KA）、细胞膜的阻力（1/k7，1/KW）、细胞内反应阻力（1/k8，1/KR）1/k3 、1/k4 、1/k5与发酵液成分、浓度有关。
32、旋风分离器的原理及要求。
旋风分离器由简体、引入管、项帽、溢流环、简底导叶和底板等部件组成。其工作原理及工作过程是：较高流速的汽水混合物，经引入管切向进入简体而产生旋转运动，在离心力的作用下，将水滴抛向筒壁，使汽水初步分离。分离出来的水通过筒底四周导叶，流人汽包水容积中。饱和蒸汽在筒体内向上流动，进入顶帽的波形板间隙中曲折流动，在离心力和惯性力的作用下，小水滴被抛到波形板上，在附着力作用下形成水膜下流，经简壁流入汽包水容积，使汽水进—步分离，而饱和蒸汽从顶帽上方或四周引入汽包蒸汽空间。
33、啤酒酿造中添加酒花的作用及啤酒后发酵的目的意义。
酒花的作用：
1)赋予啤酒香味和爽口苦味
2)增进啤酒泡持久性和稳定性
3)与麦汁共沸时能促进蛋白凝固，利于澄清
4)这增加麦汁和啤酒的防腐能力
后发酵的目的意义：
1)完成残糖基的最后发酵，增加啤酒稳定性，饱充CO2。
2)充分沉淀蛋白，澄清酒业。
3)消除嫩酒味，促进成熟。
34、说明1）原生质体融合育种的一般步骤2）影响微生物发酵种子质量的因素。
原生质体融合育种的一般步骤
1）直接亲本及其遗传标记的选择
2）原生质体的制备与再生
3）亲本原生质体诱导融合
4）融合重组体（融合子）分离
5）遗传特性分析与测定
影响微生物发酵种子质量的因素
1）原材料质量
2）培养条件（温度、湿度、通气量）
3）斜面冷藏时间
39、代谢产物合成动力学有哪几种类型？写出表达式并说明各自的特点。
40、说明机械搅拌通风发酵罐、自吸式发酵罐和气升式发酵罐通气的原理并比较其结构特点。
41、图示氧传递过程中的各种阻力，指出哪些与微生物的种类、生理状态有关；并说明溶氧测定的意义。
1）菌丝丛或团内的扩散阻力（1/k6; 1/KA）与微生物的种类、生理特性状态有关，单细胞的细菌和酵母菌不存在这种阻力；对于菌丝，这种阻力最为突出。
2）细胞膜的阻力（1/k7; 1/KW）：与微生物的生理特性有关。
3）细胞内反应阻力（1/k8; 1/KR）氧分子与细胞内呼吸酶系反应时的阻力；与微生物的种类、生理特性有关。
1/k6 、1/k7 、1/k8与微生物的种类、特性、生理状态有关
4）溶氧测定：溶解氧作为环境因素对微生物反应有直接影响；溶氧可作为发酵中氧是否足够的度量；溶氧可作为发酵中间控制的手段之一；溶氧可作为考察设备，工艺条件的指标之一。
42、试述谷氨酸生产菌积累谷氨酸的机理和控制细胞膜渗透性的方法，并说明影响谷氨酸结晶的主要因素及控制措施。
谷氨酸生产菌积累谷氨酸的机理
1）谷氨酸产生菌丧失或仅有微弱的α-酮戊二酸脱氢酶活力，使α-酮戊二酸不能继续氧化；但谷氨酸脱氢酶活力很强，同时NADPH2再氧化能力弱，这样就使α-酮戊二酸到琥珀酸的过程受阻；在有过量铵离子存在时，α -酮戊二酸经氧化还原共轭的氨基化反应而生成谷氨酸。
2）谷氨酸产生菌大多为生物素缺陷型，谷氨酸发酵时通过控制生物素亚适量，引起代谢失调，使谷氨酸得以积累。
3）生成的谷氨酸不形成蛋白质，而分泌泄漏于菌体外。
4）谷氨酸产生菌不利用菌体外的谷氨酸，而使谷氨酸成为最终产物。
但是，当环境条件发生变化时，菌体的生物代谢也会发生变化，谷氨酸发酵会向其他发酵转换，谷氨酸积累减少，而其他副产物积累量增加。
控制细胞膜渗透性的方法
1、化学控制法
通过控制发酵培养基中的化学成分，达到控制磷脂、细胞膜的形成或阻碍细胞壁正常的生物合成，使谷氨酸生产菌处于异常的生理状态，以解除细胞对谷氨酸向胞外漏出的渗透障碍。
1）生物素缺陷型
2）添加表面活性剂或饱和脂肪酸
3）油酸缺陷型
4）甘油缺陷型
以上都是通过控制磷脂的合成，导致形成磷脂合成不足的不完全的细胞膜
5）添加青霉素法
2、物理控制法
如利用温度敏感突变型（Ts）
突变发生在决定与谷氨酸分泌有密切关系的细胞膜结构基因上
关键：在生长的什么阶段转换温度是影响产酸的关键
谷氨酸结晶的主要因素
1温度与降温速度、2加酸速度与终pH的影响、3投晶种、4搅拌的影响
控制措施
1）降温过快或忽高忽低，则晶核小而多、结晶微细；且会引起α-型向β -型转变，中和时要控制液温缓慢下降，不能回升
2）发现晶核时，应立即停止加酸，育晶2h，使晶核成长，然后再继续缓慢加酸中和至pH3.2
3）注意晶种的质量（选择较好的α-型晶体）并应掌握好投晶种的时机
4）一般采用：桨式搅拌器；25～35rpm
43、针对微生物诱变育种过程，简要回答：1）分别列举常用于进行诱变育种的物理因素和化学因素各2种；2）为什么通常要制备单细胞或单孢子悬液？3）“前培养”和“后培养”各有什么意义。
诱变育种的化学因素：
硫酸二乙酯(DES)、亚硝基胍 (NTG)、亚硝酸(NA)、氮芥(NM)、羟胺、ICR类等
诱变育种的物理因素：
如紫外线、X-射线、γ-射线、快中子、超声波等
制备单孢子悬液的原因：
1）分散状态的细胞可均匀地接触诱变剂
2）可避免长出不纯的菌落
处理前细胞进行前培养的意义：使变异率可大大提高。
诱变处理后的后培养的意义：
1）遗传物质经诱变处理后发生的突变，必须经复制才能表现出来。
2）研究表明，诱变后的一小时内必须进行新的蛋白质合成，这个变异才有效。
3）因此必须在完全培养基中进行培养才能稳定变异，使菌株表现出高的突变频率
44、什么是抗反馈调节突变株?抗反馈调节突变株对发酵生产有何意义？如何获得抗反馈调节突变株。
抗反馈调节突变株是一种解除合成代谢反馈调节机制的突变型菌株。
抗反馈调节突变株的获得：
抗反馈突变株通常可以用添加末端产物类似物的方法来筛选获得。从营养缺陷型的回复突变株也能获得抗反馈的突变菌株
意义：
抗反馈调节突变株的特点是所需产物不断积累，不会因其浓度超量而终止生产，能提高产量。
45、机械搅拌发酵罐和空气带升式发酵罐都属于好氧发酵罐，二者在结构和供氧机理上有何不同。
空气带升式发酵罐没有搅拌器，罐内或罐外设液体循环管（上升管）。空气由特殊结构的喷嘴以250～300m/s 的高速喷出。
机械搅拌发酵罐的供氧机理：
利用空气分布装置，吹入无菌空气，并使空气均匀分布。分布装置的形式有单管及环形管式。单管式管口对正管底中央，管口与管底的距离约为40MM,这样空气分散效果较好。环管式以环径为搅拌器的0.8倍较有效，喷孔直径为5~8MM，喷孔向下，喷孔约等于通风管的截面积，通风管内通常空气流速取20M\S。
空气带升式发酵罐的供氧机理：
罐内或罐外装设上升管，两端与罐底部和罐上部相连通，构成循环系统；上升管的下部装有空气喷嘴，空气以250-300m/s高速喷入上升管，借喷嘴的作用将空气泡分割成细泡，与上升管内发酵液密切接触；
由于上升管内发酵液含气多、比重小，加上压缩空气的喷流动能，因此使上升管的液体上升，罐内液体下降而进入上升管，形成反复的循环，使氧气溶解于发酵液中。
47、1）简要说明在代谢工程中改变代谢途径的方法；2）如何保持基因工程菌质粒的稳定性。
改变代谢途径的方法
1）加速限速反应
1增加代谢途径中限速酶编码基因的拷贝数
2强化以启动子为主的关键基因表达系统
3提高目标途径激活因子的合成速率
4灭活目标途径抑制因子的编码基因
2）改变分支代谢途径流向：
提高代谢分支点的某一代谢途径酶系的活性，在与另外的分支代谢途径的竞争中占据优势，从而提
高目的末端产物的产量。
3）构建代谢旁路
4）改变能量代谢途径：
改变能量代谢途径或电子传递系统，影响或改变细胞的代谢流
使质粒稳定的措施
1）组建合适载体
2）选择适当宿主
3）施加选择压力：
1抗生素添加法、2抗生素依赖变异法、3营养缺陷型法
4）控制基因过量表达：
1可诱导性启动子、2温度敏感型质粒
5）控制培养条件：
1培养基的组成、2培养温度、3菌体比生长速率
48、控制谷氨酸生产菌细胞膜渗透性的方法有哪些？介绍一种从发酵液中提取谷氨酸的方法，要求简要说明原理。
1、先采用等电点法提取谷氨酸（回收70%左右）
原理：
PH=pI时，谷氨酸的溶解度最小
谷氨酸的等电点pI=(pK1 + pK2)/2= (2.19 + 4.25)/2 = 3.22
将发酵液调至pH = 3.2，使谷氨酸处于过饱和状态而结晶析出
2、再用锌盐法进一步提取（总回收可达80～90%）
原理：
在一定PH条件下(PH6.3)，谷氨酸与锌离子生成难溶于水的谷氨酸锌沉淀下来。在酸性条件下，溶解谷氨酸锌；再调pH至2.4(由于溶液中锌离子浓度很高，产生共存离子效应，使谷氨酸等电点pH 值降低) ,谷氨酸结晶析出。
49、什么是组成型突变株？组成型突变株对发酵生产有何意义？如何获得组成型突变株？
选育组成型突变株的方法
其主要原则是创造一种利于组成型菌株生长而不利于诱导型菌株生长的培养条件，造成对组成型的选择优势以及适当的识别两类菌落的方法，从而把组成型突变株选择出来。调节基因或操纵基因发生突变，都有可能获得组成型突变株。
组成型突变株对发酵生产的意义：
突变可以除去酶合成时对诱导物的依赖，组成酶突变株在没有诱导物存在时，能照常合成诱导酶在生产中使用组成酶突变株时，可不必在发酵液中添加诱导物，且产生的诱导酶活性也比原菌株强。
50、试述原生质体融合育种的优点和步骤。
优点：
1）大幅度提高亲本之间重组频率
2）扩大重组的亲本范围
3）原生质体融合时亲本整套染色体参与交换，遗传物质转移和重组性状较多，集中双亲优良性状机会更大。
4）可以和其它育种方法相结合，把由其他方法得到的优良形状通过原生质体融合再组合到一个单株中。
步骤：
1）直接亲本及其遗传标记选择
2）双亲本原生质体制备与再生
3）亲本原生质体诱导融合
4）融合重组体（融合子）分离
5）遗传特性分析与测定