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柑桔属柠檬类果实果胶酯酶的活性分析

柑桔属柠檬类果实果胶酯酶的活性分析
柑桔属柠檬类果实果胶酯酶的活性分析

柑桔属柠檬类果实果胶酯酶的活性分析摘要: 果胶酯酶( PE 或PME) 能催化果胶脱酯生成低酯果胶和果胶酸, 属于一类果胶酶, 广泛应用于食品特别是果

品加工工业中。以新鲜柠檬为原料, 采用NaCl- 冷冻离心- 盐析的方法提取柠檬果实中的果胶酯酶, pH- stat 法对果

胶酯酶进行活性分析。研究温度、pH、相对储藏度等因素对柠檬类果实果胶酯酶的活性影响, 并探索该酶的最适温

度、最适pH 值, 进而研究该酶的热稳定性; 对柠檬果实中果胶含量进行测定。实验表明: 58 ℃, pH=6.90 时柠檬中的

果胶酯酶的活力最高。

关键词: 果胶酯酶; 柠檬; 活性

果胶酯酶( pectinesterase)( 缩写PE 1,1,11) , 国际酶委员会将果胶酯酶归类为果胶—果胶酰基水解酶。它能催化、水解果胶生成果胶酸和甲醇, 通过去除果胶分子链上的半乳糖醛酸羧基上的酯化基团( 主要是羟甲基或羟乙基) , 增加果胶在水中的溶解度; 所产生的果胶酸在Ca2+等离子的桥联作用下, 使细胞间的黏合加强, 从而容易形成凝胶。因此, 果胶酯酶常用于制备低甲氧基果胶以及用于果汁加工澄清等技术中。另外,果胶酯酶还能够提高食品粘度、延长货架期[1]、脱苦、去除异味和水果果皮等, 有研究发现, 果胶酯酶与植物病毒运动蛋白之间有相互联系[2- 3]。果胶酯酶在食品工业中有着极其重要的作用和开发前景。它广泛存在于一些植物如番茄、桔皮、苹果、葡萄、香蕉、梨、马铃薯、柠檬、向日葵、大豆、烟草等以及一些细胞壁降解的微生物如细菌、真菌等中。柠檬在植物学中属柑橘属类, 柠檬中含有大量的果胶酯酶, 它与细胞壁结合紧密, 主要存在于柠檬的皮、白皮层以及汁胞细胞中[4]。我国盛产柠檬, 但对柠檬皮渣的利用不够重视。柠檬皮渣不但是提取果胶的最佳原料[5], 同时也是果胶酯酶的良好来源。本文对柠檬皮及果肉中的果胶酯酶进行了生物学特性分析, 为果胶酯酶在食品工业中的应用提供依据, 同时充分利用柠檬皮渣, 变废为宝, 还可有效地保护生态环境。

1.1 材料与试剂新鲜柠檬: 市售; 果胶( JCO1 高酯果胶) : 宜昌金川生物科技公司; 氢氧化钠、氯化钠、磷酸氢二钠、柠檬酸等试剂均为分析纯。

1.2 仪器1 材料与方法

ZD- 2 型自动电位滴定仪: 上海精密科学仪器有限公司; JJ- 1 型增力电动搅拌器: 江苏省金坛市医疗仪器厂; DHG- 9075A 型电热恒温鼓风干燥箱: 上海益恒实

验仪器有限公司; JJ- 2(2003- 61)组织捣碎匀浆机: 常州国华电器有限公司; 冷冻离心机

(Centrifuge5810R): https://www.wendangku.net/doc/1215186811.html,A.等

1.3 方法

1.3.1 粗酶液的提取

将柠檬果肉掰瓣, 捣碎均质, 加入2 倍量的1 mol/LNaCl 溶液, 盐提。搅拌1 h 后4 ℃冷冻离心( 5 000 g,20 min) , 过滤得上清液, 然后用饱和度为75 %的( NH4) 2SO4 饱和粗酶液, 离心沉淀即得到较纯净的酶液。4 ℃下保存备用。( 柠檬皮则是洗净后切成小块, 捣碎均质, 加入4 倍量的1 mol/L NaCl 溶液, 盐提。之后处理方法和果肉一致) 。

1.3.2 PE 活力的测定

果胶酯酶催化水解果胶分子而释放出H+, 使反应体系的pH 下降, 用碱液( 0.05 mol/L NaOH 溶液) 使反应体系的pH 始终保持在7。通过碱的消耗量可以反应出果胶酯酶的活性。测定方法: 一定温度条件下, 取30 mL 1 %的柑橘果胶溶液于100 mL 三角烧瓶中, 用0.05 mol/L 的NaOH 调pH 到7 后, 加入10 mL 粗酶液, 同时开始记时, 通过自动电位滴定仪用0.05 mol/LNaOH 滴定, 保持溶液的pH=7。以反应的NaOH 微摩尔数—反应时间作图, 由所得曲线最初部分的斜率表示果胶酯酶的活力, PE 活力单位为mol/s, 即每秒钟消耗1 mol NaOH 定义为一个PE 活力单位。

1.3.3 温度对酶活性的影响

1.3.3.1 PE 最适温度的确定

分别在30、40、50、60、70 ℃下测定PE 活力, 作活力- 温度曲线图。

1.3.3.2 pH 对酶活性的影响

在最适温度下, 分别于不同pH 条件测定PE 活力, 作活力- pH 曲线图。

1.3.3.3 PE 热稳定性研究

将PE 酶液分别在50 ℃、55 ℃、60 ℃、65 ℃温度下

分别保温, 每隔15 min 取样测定酶残余活力, 作活力-时间曲线图。

1.3.3.4 相对储藏度对酶活力的影响

将同一批柠檬储存在冰箱的保鲜柜( 5 ℃) 中, 每

隔5 d 进行一次酶活测定, 作活力- 时间曲线图。

1.3.3.5 柠檬果皮和果肉中PE 活性比较

分别从柠檬果皮和果肉提得粗酶液, 在最适温度和最适pH 条件下测定PE 活力。

2 实验结果与分析

2.1 温度对PE 活力影响

通过测定不同温度( 25、30、40、50、60、70 ℃) 下PE 活力, 得到活力- 温度曲线图( 见图1) 。由图1 可以看出, 在25 ℃~70 ℃条件下分别测得柠檬果皮、果肉的PE 活力明显不同。随着温度的升高, PE 活力呈现明显的上升趋势, 在58 ℃时, PE 活力达到最大, 当高于58 ℃时, PE 活力下降。由此, 可以推断该PE 酶的最适温度在58 ℃左右。

2.2 pH 值对PE 活力影响

最适温度条件下, 在不同pH 条件下分别测定柠檬果皮、果肉PE 活力, 得到活力- pH 曲线图( 见图2) 。由图2 可知, 随着pH 的升高, PE 活力也同样呈上升趋势, pH=6.9 时, PE 的活力表现为最高, pH 高于6.9 后,PE 活力逐渐下降。曲线表明该PE 酶的最适pH 在6.9

左右。图1 温度对PE 酶活力的影响曲线Fig.1 Temperature to the vitality of PE influence curve 图2 pH 对PE 酶活力的影响曲线Fig.2 pH to the vitality of PE influence curve

2.3 PE 热稳定性的测定

将PE 粗酶液分别在50、55、60、65 ℃下保温0 min~60min 后, 测活力, 得到活力- 温度曲线图( 见图3) 。由图3 可知, 在不同温度下保存一定时间后, 酶的活力均呈下降趋势。在55 ℃下保温60 min 后, PE 活力变化较小, 仍保有较高的活力。

2.4 相对储藏度对柠檬中PE 活力的影响每隔5 d 后取出储藏的柠檬, 提取粗酶液, 测定PE 活力, 得到相对储藏度对酶活力的影响曲线( 见图4) 。由图4 可以看出, 在储藏一段时间后, 酶的活力均

呈下降趋势。

2.5 柠檬果皮和果肉中PE 活性比较( 见表1)

由表1 可以得出, 同一条件下, 柠檬果皮中的PE活力高于果肉中PE 活力。

3 结论

本实验结果表明: 柠檬果皮和果肉中的果胶酯酶

的最适温度为58 ℃, 最适pH=6.90 。热稳定性较好, 储藏一段时间后, 酶活下降。果皮中PE 活性更高。由此表明, 该酶的最适宜工作环境是58 ℃, pH=6.9。这很适合一般制备低酯果胶和果汁加工的生产条件。因此, 利用新鲜柠檬皮中的天然果胶酯酶进行酶促反应制备低酯果胶是目前制备低酯果胶的一种可行性办法。这不但有利于保护环境, 还有利于节约成本, 提高生产效率。

参考文献:

[1] 汤______鸣强, 谢必峰.果胶酶不同组分的酶学性质研究[J].福建化工,

2004( 1) : 13- 15

[2] C.Versteeg, et al.Thermostability and Orange Juice Thud Destabilizing

Properties ofmultiple PE fromOrange [J].FOOD SCIENCE,1980

(45):969- 971

[3] 生吉萍, 申琳, 罗云波.果实成熟衰老相关酶的研究进展[J].食品

与机械,2000( 3) :7- 8

[4] 周志娟, 郝俊光, 李崎, 等.利用SDS—PAGE 电泳对啤酒生产过

程中蛋白质动态变化的研究[J].酿酒, 2005, 32( 3) : 59- 62

[5] Hui Yang,Junwen Zeng. Detection of Molecular Weight of PMCA

Isoform with 20cm SDS- PAGE Electrophoresis:Compared with 8cm

SDS- PAGE[J].EYE SCIENCE, 2005( 3) :179- 184

收稿日期: 2006- 11- 02

图3 柠檬中PE 耐热性曲线

Fig.3 Lemon inside PE heat- proof curve

图4 相对储藏度对酶活力的影响曲线

Fig.4 Opposite hoard an influence for to the vitality of PE curve

表1 柠檬果皮和果肉中PE 活性比较

Table 1 Lemon fruit peel with flesh of fruits PE activity compar ison

PE

来源Source

柠檬果肉Lemon flesh of fruits

柠檬果皮Lemon fruit peel

稀释倍数

Dilutionmultiple

2

4

斜率/( mL/min)

Inclined rate

0.126

0.152

酶活力/( μmol/min)

The vitality of PE

6.30

7.60

果胶酶实验报告

实验报告 果胶酶在果汁生产中的作用 一.实验目的 1.探究不同温度对果胶酶活性的影响; 2.探究不同 ph 对果胶酶活性的影响; 3.探究果胶酶的用量对果汁生产的影响。 二.实验原理 1.果胶酶的活性受温度影响。处于最适温度时,活性最高。果肉的出汁率、果汁的澄清 度与果胶酶的活性大小成正比。 2.果胶酶的活性受ph影响,处于最适ph,酶的活性最高,高于或低于此值活性均下 降。果肉的出汁率、果汁的澄清度与果胶酶的活性大小成正比。 3.在一定的条件下,随着酶浓度的增加,果汁的体积增加;当酶浓度达到某一数值后, 在增加酶的用量,果汁的体积不再改变,此值即是酶的最适用量。 三.实验材料与用具 苹果、果胶酶、盐酸溶液、榨汁机、电子天平、恒温水浴锅、烧杯、量筒、试管、漏斗、温度计、玻璃棒、滤纸、滴管、三脚架 四.实验步骤 (一)温度对果胶酶活性的影响 1.制备果汁选取一个中等大小的苹果( 约 200g) 洗净后,不去皮,切成小块,放入榨 汁机中,加入约 200ml 水,榨取 2min,制得苹果泥。量取一定体积的苹果泥, 不同条件下处理后,用滤纸进 行过滤即可得到果汁; 2.取9支试管编号并分别加入等量的果汁和果胶酶; 3.将9支试管分别放入30℃、35℃、40℃、45℃、50℃、55℃、60℃、65℃、70℃的水 浴锅中保温10分钟; 4.过滤果汁用量筒测量果汁的里量,并记录数据。 (二)ph 对果胶酶活性的影响 1.制备果汁; 2.取5支试管编号并分别加入等量的果汁和果胶酶; 3.将5支试管放入40℃恒温水浴锅中加热; 4.待试管内温度稳定后在5支试管分别加入ph分别为5、6、7、8、9的盐酸溶液; 5.恒温保持10min; 6.过滤果汁用量筒测量果汁的里量,并记录数据。 (三)果胶酶的用量对果汁生产的影响 1.配制不同浓度的果胶酶溶液准确称取纯的果胶酶1mg、2mg、3mg、4mg、5mg、6mg、 7mg、8mg、9mg,配制成相等体积的水溶液,取等量放入9支试管中,并编号1~ 9。; 2.在9支试管中加入等量的苹果汁; 3.将上述试管放入恒温水浴加热一段时间。 4.将不同浓度的果胶酶分别迅速与各试管的苹果泥混合,然后再放入恒温水箱中。 5.恒温水浴约20分钟 6.过滤后测量果汁的体积 四.实验结果 五.分析与结论篇二:果胶酶活性测定实验报告 一、实验设计 二、实验报告 篇三:果胶的实验报告

柑橘与柠檬啊

《柑橘与柠檬啊》 初读《柑橘与柠檬啊》,不知道它是一本儿童小说,甚至读完整本小说之后,我都不觉得像儿童小说,儿童小说应该是卡通动漫之类的啊,可是这本书不是的,这是一本能够引人深思的书。 小说的背景是基于一九一四年到一九一八年间的一战,如作者麦克所说的:这场战争逐渐演变成一场消磨战,一场集合残暴的轰炸行动和无谓攻击的战役,而人如同军火般成了战争中的消耗品,毒瓦斯和坦克首度成为战争的武器。轰炸、攻击和毒瓦斯在小说的情节中通过主人公小托也有具体的描述。作者在一次造访中,发现又超过三百名英国士兵在黎明时被枪决,罪名是懦弱或擅离职守,他们之中有的人的生命可能仅在二十分钟就被大发了。这是多么残忍的事情,这些士兵曾经课室在战场中拼命捍卫国家的勇士,他们每天生活在极其艰苦和恐惧当中,下一秒他们随时都有可能见不到明天的阳光,回不去熟悉的家乡,见不到日夜思念的亲人。《柑橘与柠檬啊》是由许多真实的故事汇集而成的一个虚构的故事,这是故事引人深思,因为它告诉我们反思历史,如何坚强。 小说中有着感人至深的亲情、友情、爱情,小托、查理、大个儿乔、妈妈之前的亲情,他们相互关心,相互照顾,妈妈对大个儿乔无微不至的照顾,由于他在出生的时候得了脑膜炎,他永远都像个小孩子,对小托和查理的耐心教导和鼓励。小托、查理和大个儿乔的手足情,小托,小托、查理和茉莉的友情以及查理和茉莉的爱情。当然也有可恶的狼婆婆和上校,有可怕的战争。 查理和小托是小说中的两个主要人物,小说是以小托为第一人称写的,小托用了一个晚上来回忆之前的经历。从小说中可以看出查理是个大哥哥,他勇敢、坚强,时刻都保护着弟弟小托,在上学的时候为小托与别人打架而被老师惩罚,在战争中也是经常鼓励和帮助小托,在被敌军炮轰之后,小托身受重伤,当时他们在无人区,查理为了照顾小托而违抗了上校在白天撤离的不合理的命令,决定等天黑再回去,然而就是仅仅因为这样,查理在最后被判了死刑,让人痛心、愤怒,但同时查理也是坚强的,在他判刑的时候,他依旧唱起《柑橘与柠檬啊》。 小说中的小托经历了一系列的成长过程,从纠结到释怀,从懦弱到坚强。小托一直将爸爸的死归咎于自己:如果自己当时在那棵树倒下来的时候,能够逃跑而不是木讷地站在原地一动不动,爸爸就不会因为就自己而死去。但是他太害怕了,一直没有告诉任何人,小说最后提到因为小托会在晚上说梦话,查理和妈妈早就知道了这件事,小托最终得到了释怀。小托一开始是个一开始害怕当士兵,到了战争中也会有退缩的时候,到

读《柑橘与柠檬啊》有感

读《柑橘与柠檬啊》有感 Oranges and lemons, Say the bells of St.Clement’s 生活在英国小镇的小托,跟妈妈、两个哥哥,还有心生好感的姑娘莫莉,一起过着宁静、明亮、芬芳的生活。生活中也有悲伤、愁苦、失落,和看似解决不了的困境,每每这时,他们就唱起一首名叫《柑橘与柠檬啊》的歌。在歌声中,敏感、柔弱的小托慢慢长大。 战争的轰然来临,改变了所有人的生活。小托本能地逃避战争的行为,却被别人以及他自己认为是懦弱的。为了逃避这种羞耻,为了逃避爱情的挫败,小托谎报了年龄,和查理一起应征入伍。在战火中,小托对世界和自己有了更新的认识,他渐渐褪去了柔弱和怯懦,懂得坚强、担当和关怀,内心越来越强大。 这部小说结构精巧,由时间和回忆组成,时钟嘀嗒,十点五分、十点四十分、接近十一点一刻……时间一分一秒流逝,小托在怀表旁守候着,等待着天明,等待着结局。 第二天,清晨差一分六点,读者终于随着小托的回忆,走回现实的当下,揭开故事的最终秘密……一夕回忆,水样春愁的童年陡然步入悲怆不休的少年。 故事很有电影感,我甚至从文字和精美的插图中感到电影的主色调,那种温暖的橙色,晚霞的颜色。而且好象我能够听到大个乔唱得那曲“柑橘与柠檬啊”天真烂漫的歌声,穿过原野,穿过树林,甚至悠扬在硝烟弥漫的战场上。作者是充满智慧和情感的诗人,这本小说也如诗歌般充满浪漫色彩和人文关怀,感动着我的心。我们都该象小托一样,学会坚强。 童年的小托,一直生活在“自己害死了父亲”的阴影里,还视之为不可告人的秘密,使整个故事从一开始就笼罩在淡淡的悲愁里。后来茉莉加入了大家庭,茉莉一开始就给予了小托无私的帮助,可是她跟查理的感情似乎更好,小托的感情方面开始受挫。还有上校的冷眼和“狼女”责骂,最终使兄弟二人谎报年龄参了军。查理更加无私的保护小托,却在战斗深入的时候被判枪决,原因是“逃跑”“懦弱”。枪声响了,小托心里的某一部分也跟着他一起死了。感情的抑制造就了更大的悲痛。 悲剧中还掺杂了喜剧的成份。大个儿乔虽然是智障,却乐天快乐,一高兴就会唱《柑橘与柠檬啊》。他喜爱动物,总是抱着“茅鼠”唱歌,茅鼠死后四个伙伴还给他举行了葬礼,背祷告词。 文章在战争环境描写中运用了大量的渲染,但并未直接揭露战争的残酷,死伤惨烈。尽管小托也曾在激战中中弹并被“活埋”,查理负伤走过好远,以及最后那名中士狰狞的目光,文章却是以查理被“自己人”枪决结尾,出乎意料而又在情理之中。让人认出战争给予人精神上的扭曲,即“一切为了战争”,是人的禁锢的观点造成了不应发生在战场上的流血事件。 小托,我们不要去想茉莉和大个儿乔,因为我答应过自己不哭的。枪决的那天我会唱起《柑橘与柠檬啊》。你是一个男子汉,要照顾好妈妈和茉莉,还有小小托,你的侄子。 牢房中,兄弟二人喝着甜茶,手握手,大声唱起了《柑橘与柠檬啊》。尽管每个人都在颤抖,尽管每个人咬紧牙关不哭还是止不住眼泪大滴大滴的滑落,此刻我只想和你在一起,只想和你一起回忆我们度过的美好的日子。 他是面带微笑,嘴里还唱着歌。枪决后狱卒对小托这样说。小托和其他6个队员为查理在小溪旁建了坟墓。“查理,再见。”转身的那一刻,小托心中那曾高大勇敢的哥哥瞬间死去。我知道,只有我一个人了,但是查理,我一定会坚持下去。因为我有了必须信守的诺言。 战争使许多人丧生,给人们心中留下了永远无法抹去的恐惧。法官用二十分钟就草草判定了一个人是否应被枪决。他们命运的不公难道不应得到什么补偿吗?哪怕是政府的道歉。

教案果胶酶在果汁生产中的作用人教版

课题1 果胶酶在果汁生产中的作用 (第一课时) 一、教学目标 (一)知识与技能 1、果胶酶的作用; 2、理解、应用影响果胶酶活性的因素; 3、提高学生的实验能力 (二)过程与方法 1、探究温度对果胶酶活性的影响; 2、探究PH对果胶酶活性的影响 3、探究酶量大小对反应速度的影响 (三)情感、态度与价值观 通过实验探究酶的影响因素,培养学生的探索精神、创新精神和合作精神二、教学重难点 教学重点:温度和PH对果胶酶活性的影响 教学难点:果胶酶的最适用量 三、教学方法:启发式教学 四、教学工具:多媒体课件 五、课时:1课时 六、教学过程 (一)引入新课 我国水果生产发展迅速,每年上市的新鲜水果品种多、数量大。但由于收获的季节性强,易造成积压滞销,腐烂变质。在本课题中,我们将探究果胶酶在果汁生产中的作用。 (二)进行新课 1.基础知识 (一)酶的基础知识 回忆:在高一我们学习过有关酶的知识,请回忆以下问题, 1、酶的概念:酶是活细胞所产生的具有生物催化作用的一类特殊的有机物; 2、酶的本质:蛋白质(大多数)或RNA; 基本组成单位:氨基酸或核糖核苷酸 3、酶的功能:在各种化学反应中起催化作用。 原因:酶能降低化学反应的活化能,从而使反应能够迅速的进行。 4、酶的特性 (1)高效性:酶的催化效率是无要催化剂的107~ 1013倍。 (2)专一性:一种酶只能催化一种化合物或一类化合物的化学反应。 (3)需要适宜的条件:适宜的温度、适宜的PH值 活动1:阅读“果胶酶的作用”,讨论并回答下列问题: 1.1果胶是植物细胞壁和胞间层的主要组成成分之一。

1.2在果汁加工中,果胶的存在易导致果汁出汁率低,果汁浑浊。 1.3果胶酶分解果胶的作用是:①瓦解植物的细胞壁及胞间层,使榨取果汁更容易,②把果胶分解为可溶性的半乳糖醛酸,使浑浊的果汁变得澄清,因此可以解决果汁加工中出现的问题。 1.4果胶酶是一类酶的总称,包括:多聚半乳糖醛酸酶、果胶分解酶和果胶酯酶。 〖思考1〗在植物细胞工程中果胶酶的作用是与纤维素酶一起除去植物细胞的细胞壁。 活动2:阅读“酶的活性与影响酶活性的因素”,讨论并回答下列问题: 1.5酶的活性是指:酶催化一定化学反应的能力。 1.6酶的活性高低可用一定条件下的酶促反应速度来表示,即单位时间、单位体积内反应物消耗量或产物生成量来表示。 1.7影响酶活性的因素有:温度、 PH 、激活剂和抑制剂等。 活动3:阅读“果胶酶的用量”,讨论并回答下列问题: 1.8食品工业生产中最常用的果胶酶是通过霉菌发酵产生。 1.9根据影响酶活性的因素,在实际生产中我们如何获得果胶酶的最高活性? 确定果胶酶的最适温度、最适PH等条件。 2.实验设计 活动4:阅读“资料一:探究温度和PH对酶的活性的影响”,思考下列问题并尝试写出实验过程: 2.1实验目的:定量测定温度或pH对果胶酶活性的影响。 〖思考2〗该实验与必修I中探究“影响酶活性的条件”实验有何不同? 前者属于是定量分析实验,后者属于定性分析实验。 2.2实验原理:果胶酶瓦解细胞壁和胞间层增大果汁产量;果胶酶催化分解果胶增大果汁澄清度。 2.3变量设计与控制: ①你确定的温度梯度(或pH梯度)为 10℃或5℃(或0.5、1.0)。 ②实验的自变量是温度(或pH),控制自变量的方法是利用恒温水浴锅(或滴加酸碱等)。 ③实验的因变量是酶的活性,检测因变量的方法是测定果汁的产出量或澄清度。 〖思考3〗果汁与果胶酶在混合之前,分装在不同试管中用同一恒温处理的目的是什么? 保证果汁与果胶酶混合前后的温度相同,避免因混合导致温度变化而影响果胶酶活性。 〖思考4〗该实验中是否设置了对照?若设置,那么它是如何设置的?若没有,则如何进行设置? 已经设置了对照。不同的温度设置之间可以相互对照。 〖思考5〗怎样排除PH和其他因素对实验结果的干扰?目的是什么? 控制PH和其他因素相同,保证只有温度一个变量对果胶酶的活性产生影响。 〖思考6〗教材中A、B两个同学的实验设计有何不同? 测定的因变量不同(A测定果汁产量,B测定果汁澄清度)。 3.操作提示

果胶酶的制备与应用

1104110116 1041101班 食品学院 陈家晟 2013/6/25

摘要:果胶酶是分解果胶质酶类的总称。通常包括聚半乳糖醛酸酶(PG)、果胶酯酶(PE)、果胶裂解酶(PL)等主要组分。本文主要叙述了果胶酶的制备方法和主要的应用。 关键词:果胶;果胶酶;黑曲霉;制备;应用; 前言:50年前国外就将果胶酶应用于果汁的加工,现有商品果胶酶制剂生产。近年来,为了满足国内市场对果胶酶的需求,一些研究单位对果胶酶的生产菌种及研制[1]展开了积极的研究。 此外,随着中国三大产业的发展,特别是第一和第二产业的高速发展,果胶酶的应用也越来越广泛。现在果胶酶主要应用于果汁加工和果酒酿造。除此之外,果胶酶在茶和咖啡的发酵、桔子脱囊衣、麻料脱胶、废水处理、造纸、榨油等领域也有应用。 1.果胶酶及其简述 1.1果胶酶的定义 果胶酶,英文别名:Pectase; Polygalacturonase,是个多酶复合物,通常包括原果胶酶、果胶甲酯水解酶、果胶酸酶。果胶酶由黑曲霉经发酵精制而得。外观呈浅黄色粉末状。主要用于果蔬汁饮料及果酒的榨汁及澄清,对分解果胶具有良好的作用。 1.2果胶酶的特性 特性:作用pH:3.0-6.0,最适作用pH:3.0 温度特性:作用温度为15-55℃左右。最适作用温度为 50℃。 1.3果胶酶的作用原理 果胶酶是从根霉中提取的,可以分解细胞间的果胶物质,可以澄清果汁和分离细胞。2.果胶酶的制备 2.1高产酶菌株的选育 激光诱变育种:由成熟的黑曲霉斜面孢子制成一定浓度的孢子悬液,在搅拌条件下,采用810nm多模连续输出的半导体激光进行辐照.将辐照过的抱子悬液进行分离培养,挑单菌落接种于装有含1%果胶的麦芽汁试管中,置30℃恒温培养5-6d,观测并选出透明层较对照为最长的试管,将其孢子接种于斜面培养,在发酵培养基进行复筛,选出产酶最高者[2]. 2.2果胶酶的生产工艺 固体发酵生产果胶酶工艺流程: 培养料拌料 ↓ 灭菌 ↓ 斜面菌种→麸皮菌种→接种曲盘发酵培养 ↓ 出曲浸提 ↓ 离心甩滤→去渣 ↓ 填充剂脱色 ↓↓ 成品包装←喷雾干燥←超滤浓缩

果胶酶及其在食品工业中应用

果胶酶及其在食品工业中应用 10化本2班禤金萍 2010364223 摘要:果蔬是我们日常生活中必不可少的食品之一,随着生活水平的提高和消费结构的转变,饮料等果蔬加工产品更加受到大众的青睐。而在加工过程离不开酶的参与,果胶酶在工业生产领域中是一种重要的新型酶类,在果蔬饮料中的应用非常广泛,可用于果汁的提取、澄清、提高出汁率等方面。 关键词:果胶酶;应用;展望 1.果胶酶结构和来源 果胶分子是由不同酯化度的半乳糖醛酸以α-1,4糖苷键聚合而成的多糖链,常带有鼠李糖、阿拉伯糖、半乳糖、木糖、海藻糖、芹菜糖等组成的侧链,游离的羧基部分或全部与钙、钾、钠离子,特别是与硼化合物结合在一起[1]。果胶分子的结构因植物的种类、组织部位、生长条件等的不同而不同,其大致的结构简图如图1所示,总体可分为光滑区(smooth region)和须状区(hairy region)两部分,主要由HGA、RG-I和RG-II三个结构区域构成,其中RG-II常以二聚体的形式存在。果胶酶(Pectinase)是世界四大酶制剂之一,是分解果胶质酶类的总称,主要包括原果胶酶、果胶酯酶、多聚半乳糖醛酸酶和果胶裂解酶四大类。[2]果胶酶主要由黑曲霉产生,按作用方式的不同分为两大类,脂酶和解聚酶,后者包括水解酶和裂解酶。 2.果胶酶的应用 果胶酶主要应用于食品工业特别是果汁果酒的加工业,近年来也不断开拓了新的用途。我国学者对果胶酶的应用开展了较广泛而深入的研究。

2.1果蔬汁提取 目前果汁的提取方法主要是加压榨出和过滤,果汁加工时首先将植物细胞壁破坏。大多数植物细胞壁主要由纤维素、半纤维素和果胶物质等组成,细胞壁的结构较紧密,单纯依靠机械或化学方法难以将其充分破碎。另外,果胶随成熟度的增加,酯化程度较高,也是影响出汁率的主要因素之一。用果胶酶处理可以破坏果实细胞的网状结构,提高果实的破碎程度,有效降低其黏度,改善压榨性能,提高出汁率和可溶性固形物含量,从而就能在压榨时达到提高出汁效率并缩短压榨时间的目的,同时把大分子的果胶物质降解后,有利于后续的澄清、过滤和浓缩工序。[3]例如在苹果汁生产中,苹果要先经机械压榨,然后离心获得果汁,但果汁中仍然含有较多的不溶性果胶而呈浑浊状。直接将果胶酶加到苹果汁中,处理后经加热杀菌、灭酶、过滤得到澄清的果汁。 2.2果汁澄清 果胶酶可以降低果汁粘度,使果汁易于被处理而透明澄清。澄清机理的实质包括果胶的酶促水解和非酶的静电絮凝两部分。果汁中有很多物质如纤维素、蛋白质、淀粉、果胶物质等影响澄清,且果胶物质是造成果汁浑浊的主要原因。加入果胶酶澄清处理后,粘性迅速下降,浑浊颗粒迅速凝聚,使果汁迅速澄清、易于过滤。果胶酶能随机水解果胶酸和其他聚半乳糖醛酸分子内部的糖苷键,生成分子质量较小的寡聚半乳糖荃酸,使其粘度迅速下降,容易榨汁过滤,提高果浆出汁率,改善果汁澄清效果。[4] 果胶裂解酶(PL)对苹果汁有较好的澄清作用,但对葡萄汁效果不明显。对于柑橘汁,因要求雾样混浊,应当使用不含果胶酯酶(PE)的聚半乳糖醛酸内切酶(endo-PG)进行处理。由于果胶裂解酶可避免甲醇的产生,也可避免部分脱酯的果胶同钙离子形成沉淀,还可避免构成各种水果芳香性成分的酯类物质的损失。所以有研究表明果胶酶制剂若用于果蔬汁和果酒加工,最好含有较多量果胶裂解酶(PL)。[5] 2.3改善果蔬饮料的营养成分 利用果胶酶生产果蔬汁不仅提高了出汁率,而且保留了果蔬汁中的营养成分。首先果蔬汁的可溶性固形物含量明显提高,而这些可溶性固形物由可溶性蛋白质和多糖类物质等营养成分组成,果蔬汁中的胡萝卜素的保存率也明显提高。酶处理后的果汁的葡萄糖、山梨糖和果糖含量显著提高,蔗糖含量略有下降,总糖含量上升。甜玉米、胡萝卜的试验有相似的结果。此外,由于果胶的脱酯化和半乳糖醛酸的大量生成, 造成果汁的可滴定酸度上升,pH下降[6]。芳香物质含量也有明显提高,经果胶酶处理后的葡萄汁,各种酯类、萜类、醇类和挥发性酚类含量提高,葡萄汁的风味更佳。由于细胞壁的崩溃,类胡萝卜素、花色苷等大量色素溶出,大大提高了果蔬汁的外观品质。K、Na、Ca、Zn 等矿物质元素含量也有较大提高。[7] 3.其他方面的应用 在咖啡发酵过程中利用产碱性果胶酶微生物除去咖啡豆的黏表皮。有时添加碱性果胶酶来去除含大量果胶质的果肉状表层。纤维素酶和半纤维素酶的协同作用可促进咖啡豆黏表皮的降解。碱性果胶酶也可用于茶叶加工。碱性果胶酶处理可促进茶叶发酵,不过要仔细调节用酶剂量以免破坏茶叶。碱性果胶酶还可通过破坏茶叶中的果胶物质来改善速溶茶粉在冲泡过程中形成泡沫的性能。 4.展望 果胶酶是应用于果蔬汁生产中且主要的酶类,它可以较大幅度地提高果蔬品

果胶酶活性的检测

果胶酶活性的检测 目的 本检测方法是用来确定本公司果胶酶的催化活性。本方法适用于各种固体和液体果胶酶制剂。 说明 本方法适合于果胶酶的质量分析和质量控制领域。但不是本公司产品及其它公司产品的绝对活力的预测,而各种酶制剂的最终的酶活力在良好的实验操作下仍可发挥出更好的催化活力。 原理 果胶物质主要存在于植物初生壁和细胞中间,果胶物质是细胞壁的基质多糖。果胶包括两种酸性多糖(聚半乳糖醛酸、聚鼠李半乳糖醛酸)和三种中性多糖(阿拉伯聚糖、半乳聚糖、阿拉伯半乳聚糖)。果胶酶本质上是聚半乳糖醛酸水解酶,果胶酶水解果胶主要生成怜半乳糖醛酸,可用次碘酸钠法进行半乳醛酸的定量,从而测定果胶酶活力。果胶酶活力单位定义 1g(或1ml液体酶)酶粉,于50.0C、pH3.5条件下,每分钟催化果胶水解生成1 微克半乳糖醛酸的酶量为一个活力单位。 1. 试剂和仪器 * 本标准所使用所有的试剂若无任何说明,均为分析纯 1.1醋酸1.2 碘1.3 碘花钾1.4 浓硫酸 1.5果胶(sigma公司)1.6硫代硫酸钠1.7碳酸钠1.8可溶性淀粉 1.9 水浴锅1.10碘量瓶 2.试剂的制备 2.1p H 3.5的酸水 用醋酸将蒸馏水调至3.5

2.21%果胶溶液: 准确称取分析纯果胶1g,用酸水溶解煮沸,冷却后过滤,定至100ml。 2.20.1N 碘液: 准确称取碘化钾5g,用蒸馏水溶解后,加入2.54g碘,溶解后定容至100ml。 2.30.025mol/L 硫代硫酸钠: 准确称取6.2g硫代硫酸钠,加蒸馏水后定容至1L 2.40.5%可溶性淀粉指示剂: 准确称取可溶性淀粉0.5g放入沸水中消煮至透明。 2.51M碳酸钠溶液: 准确称取10.6g碳酸钠,定容于100ml的水中 2.62N硫酸: 吸10ml 的浓硫酸倒入170ml 的水中 2.7酶样的制备 准确称取1.000g固体酶或移取1ml液体酶样,定容至100ml,于50C水浴浸取1 小时,过滤,滤液为供试酶液。则该酶已经稀释100 倍。 3.程序 3.1取1%果胶酶10ml加入5ml酶液和5ml蒸馏水(PH3.5),在50C水浴中保温反应1 小时。 3.2取出后加热煮沸2~3min,冷却后,补水至20ml。 3.3取5ml反应液于100ml碘量瓶中,加1M碳酸钠溶液1ml, 0.1N碘液 5 m l ,摇匀,具塞,于室温暗处下放置20min。 3.4取出后加2N硫酸2ml,立即用0.05N硫代硫酸钠溶液滴定至浅黄色,加

《柑橘与柠檬啊》读后感500字5篇

《柑橘与柠檬啊》读后感500字5篇 一个柔弱、善良不断成长的小托;一个强壮、勇敢、正义的查理;一个单纯、乐天的大个儿乔;一个温柔、贤淑的茉莉,还有一首唱不完的《柑橘与柠檬啊》。下面是收集推荐的《柑橘与柠檬啊》读后感500字,欢迎阅读参考。 《柑橘与柠檬啊》读后感500字篇一 故事源于一个回忆——一个名叫托马斯。皮斯佛的回忆,回忆很长,时间很短,从“十点五分”开始,到“查一分六点”结束,七个小时又五十四分钟,分分秒秒,包含着生命流失,也包含着那童年的美好回忆。 童年,是人们唯一可以公开见面的地方,是圣洁而不可被玷污的美好回忆,莫波格把童年写得像童话,把姑婆婆写成狼外婆,而他们就是那童话故事的主角。 美好的回忆过后,自然就是残酷的现实,前面的一切故事都指向美好的结局,可是结局并非美好,反而意想不到。 一九一四年到一九一八年是查理、小托的参战期间,那是一场毁灭性的战争,给无数人带来了灾难,战争一直持续不断,也夺走了无数人的生命。

查理便在这场战争中,当成了代替品,在军事法庭草率的判断下,一个人的生命,在不到二十分钟就被打发了。他本是那么勇敢、正义,是全家人的守护者,却只是因为上校的一句“爱国责任”就打发他到了战场。在那里,他违抗了错误的指令,保住弟弟小托的生命,却迎来自己的死亡。他直到最后一刻都在坚守个人的良知,却没能让命运向他屈服,不得不说他是个英雄。 小托,柔弱、善良、纯粹的一个孩子,他在哥哥的守护下长大。通过那漫长却又短暂的记忆,一夕之间,少年老成,在成长的过程中,经历了一个又一个的困境,终于,他学会了坚强。 电影终究也会结束,故事也到了末尾,那伤感的结局意想不到,就算那个勇敢的男人查理已逝世,但我相信,他的灵魂会在那歌声中飞扬,在那充满回忆的“柑橘与柠檬啊”的歌声中飞向远方。 《柑橘与柠檬啊》读后感500字篇二 “每个人心中都有一首《柑橘与柠檬啊》,你迟早是要唱起它,获得继续前行的勇气和力量,勇敢的慢慢成长。” 《柑橘柠檬啊》这首歌是英国国家喻户晓给人振奋与力量的勇敢者之歌。英国著名儿童文学家麦克·莫波格同首歌作为其小说的题目·这本书讲述了生活在英国小镇的小托,跟妈妈、两个哥哥,还有心生好感的姑娘茉莉,一起过着宁静、明亮、芬芳的

人教版 选修一 果胶酶在果汁生产中的作用 作业

课题1果胶酶在果汁生产中的作用 基础巩固 1下列有关果胶、果胶酶的说法,错误的是( ) A.果胶是由半乳糖醛酸聚合而成的一种高分子化合物 B.果胶不仅会影响出汁率,还会使果汁浑浊 C.果胶酶能够分解果胶 D.果胶酶是指某一种酶 解析:果胶酶并不特指某一种酶,而是分解果胶的一类酶的总称,包括多聚半乳糖醛酸酶、果胶分解酶和果胶酯酶等。 答案:D 2在果汁加工中,加入果胶酶去除果胶,体现了酶的( ) A.多样性 B.高效性 C.专一性 D.受温度影响 解析:只有果胶酶能分解果胶,这体现了酶的专一性。 答案:C 3果胶酶常在0~4 ℃下保存,原因是( ) A.此温度条件下,酶的活性最高 B.此温度条件下,酶变性失活 C.低温可降低酶的活性,但酶不变性失活 D.自然条件下,果胶酶常在0~4 ℃下发生催化作用 解析:在低温时,酶活性降低,但酶并不失活,有利于保存。 答案:C 4下列能表示酶活性高低的是( ) A.单位时间、单位体积内反应物的总量 B.一段时间后生成物的总量 C.一段时间后,一定体积中消耗的反应物的量 D.单位时间内、单位体积中反应物的减少量或产物的增加量 解析:酶活性的高低可以用在一定条件下酶所催化的某一化学反应的反应速度表示,酶反应速度通常用单位时间内、单位体积中反应物的减少量或产物的增加量表示。 答案:D 5在果胶酶溶液中加入双缩脲试剂,其结果应该是( ) A.产生气泡 B.溶液呈蓝色

C.溶液呈紫色 D.产生砖红色沉淀 解析:果胶酶的化学本质是蛋白质,蛋白质能与双缩脲试剂发生紫色反应。 答案:C 6下列说法错误的是( ) A.酶是细胞合成的生物催化剂 B.温度、pH和酶的抑制剂等条件会影响果胶酶的活性 C.果胶酶能催化果胶分解,但不能提高水果的出汁率,只能使果汁变得澄清 D.生产果汁时,为了使果胶酶得到充分的利用,节约成本,需要控制好酶的用量 解析:果胶酶能使果汁变得澄清,并能提高水果的出汁率。 答案:C 7在用果胶酶处理果泥时,为了使果胶酶能够充分地催化反应,应采取的措施是( ) A.加大果泥用量 B.加大果胶酶用量 C.进一步提高温度 D.用玻璃棒不时地搅拌反应混合物 解析:用玻璃棒不时搅拌反应混合物,可使果胶酶和果泥充分接触,更好地催化反应。 答案:D 8目前市场上果汁饮料越来越受到青睐,请根据所学的有关知识回答下列问题。 (1)果汁饮料的包装瓶上写着105 ℃高温瞬时灭菌的意思是,这样做的目的是。 (2)自己在家中榨的果汁很容易腐败,而瓶装果汁的包装上写着“不含任何防腐剂,最长保质期为一年”,其中的奥秘是。 (3)在果汁加工过程中可添加来提高出汁率和澄清度。 (4)苹果醋是很受欢迎的饮料之一,其生产过程利用了的发酵作用,该过程需将温度控制在。 (5)在传统发酵技术中,果醋的制作往往在果酒制作基础上进行,请用相关反应式表示:。 解析:(1)105 ℃高温瞬时灭菌是指在105 ℃条件下灭菌30 s,优点是能杀死微生物,因为灭菌时间短,又不会过多地破坏果汁的各种营养素。(2)不含任何防腐剂又能较长时间不腐败,可能是经过了高温灭菌处理。(3)纤维素酶和果胶酶可分解果汁中细胞壁的成分,提高出汁率和澄清度。(4)果醋制作需要利用醋酸菌发酵,温度条件是30~35 ℃之间。 答案:(1)在105 ℃下灭菌30 s 既保证杀死引起果汁变质的微生物,又不破坏果汁的品质(2)高温杀死了微生物(3)纤维素酶和果胶酶(4)醋酸菌30~35 ℃(5)C2H5OH+O2CH3COOH+H2O 能力提升 1下列关于温度对酶活性影响的叙述,错误的是( ) A.不同酶的最适温度可能相同 B.随着温度降低,酶的活性下降 C.酶活性最高时的温度不适合该酶的保存

果胶裂解酶活力测定方法

果胶裂解酶活力测定方法 1定义 在测定条件下,每分钟作用果胶产生1μmol双键所需酶量定义为一个酶活力单位(IU)。 2 原理 果胶裂解酶作用果胶产生不饱合寡聚半乳糖醛酸。反应产物分子中C-4和C-5之间有一与C-5上羧基相连的双键,使之在235nm波长有最大吸收。分子消光系数为5500cm2 /mmol。 3 试剂 3.1 琥珀酸钠(C4H4O4Na2·6H2O) 3.3 浓盐酸(HCL) 3.2 琥珀酸(C4H6O4) 3.4 果胶(Sigma公司,P9135) 本标准中所用的试剂,在没有注明其他要求时,均指分析纯试剂和符合GB/T 6682中规定的三级水。 4 仪器和设备 4.1 实验室常用仪器设备。 4.6 秒表(数字显示) 4.2 恒温水浴:(30±0.5℃)。 4.7 分析天平(0.0001g) 4.3 分光光度计(波长范围200-1000nm) 4.8 磁力搅拌器。 4.4 移液管 4.9 离心机:转速为30000r/min 以上。 4.5 酸度计:精确至小数点后2位。 5 溶液 5.1 0.05mol/L,pH=5.2琥珀酸缓冲液 称取琥珀酸钠(C4H4O4Na2)13.51g于900ml水中,溶解后用琥珀酸(C4H6O4)调pH值至5.2,定容至1000ml,校正pH值后置冰箱中备用。 5.2 2mol/L盐酸 准确量取16.7ml浓盐酸,用水定容至100ml。 5.3 0.425%果胶溶液(底物) 称取0.425g果胶于80ml缓冲液中,至少搅拌3h,溶解后于4℃放置16h,30000rpm/min 离心30min,用缓冲液定容至100ml, 4℃保存。 6 分析步骤: 6.1待测酶液的制备 6.1.1 根据酶活力确定稀释倍数,使酶浓度控制在大约 0.06-0.09u/mL,即光吸收值在0.25—0.40范围内。 6.1.2 称取酶粉1g,精确至0.0001g,(或吸取酶液1.00 ml)。用蒸馏水溶解,置于磁力搅拌器上搅拌10分钟,全部移入容量瓶中,稀释倍数小于500倍的直接用缓冲液(5.2)溶解。4000rpm/min离心5分钟,上清液液根据稀释倍数再进行稀释,最后一次用缓冲液稀释,供测试用。

读《柑橘与柠檬啊》有感

中国传媒大学南广学院 系别:媒介管理系班级:国际文化贸易 姓名:杨娜娜学号:20100409119 读《柑橘与柠檬啊》有感 《柑橘与柠檬啊》是一本让人温暖又感伤的书,是一个人在困境和希望中长大的故事,也是一个生命守护和拥抱另一个生命的故事。故事开始于一个孩子—小托的回忆。 皮斯佛,在英语里意为和平。这本书主要围绕生活在英国小镇的皮斯佛,和他的妈妈、哥哥,还有心生好感的姑娘茉莉,一起过着宁静、明亮、芬芳的生活。遇到悲伤、痛苦、失落、贫穷和好像无法解决困境时,他们一起唱起一首名叫《柑橘与柠檬》的歌。 托马斯.皮斯佛,小名小托,善良、柔弱、胆小,成长过程中遇到一个又一个困境,慢慢学会坚强。他认为,人生说到底,就是两个字,坚持。查理.皮斯佛,小托的二哥,强壮、勇敢、正义,小托和全家人的守护者。身材强健富有冒险精神和强烈的正义感,遇到不平之事决不退缩。大个子乔,查理和小托的哥哥,智障,单纯,乐天,热爱动物和大自然,平时最喜欢哼唱《柑橘与柠檬》。茉莉,小托和查理的伙伴,善良,柔顺,小托和查理都爱她,后来嫁给了查理。皮斯佛太太,小托的妈妈,宽容、坚韧,爱孩子,是孩子们成长的支柱。 “十点五分”、“十二点二十四分”、“三点一分”、“还差一分六点”、、、、、、只有一晚,小托要试着以原本的面貌,回忆将近十八年的日夜。一个人,该怎样去用他一晚上追忆这段岁月。 童年的小托,一直生活在“杀死自己的父亲”的阴影里,因为父亲为了救他被巨树砸死,父亲死亡的意外成为小托心中深不可测的创伤,由于自己的胆小,一直把这个秘密埋在心底。小托上学的第一天,因为查理在“大炮”班,小托在“小家伙”班,小托的鞋带松了自己又不会系,自己感到很孤独。就在这时老师让他坐在茉莉的旁边,并给他系了鞋带,于是茉莉慢慢的成了小托和查理的好朋友,小托也是从那时起已经喜欢茉莉了,茉莉成了大家庭的一份子。但是小托渐渐的发现茉莉与查理的感情更好点,所以小托在自己的感情方面受挫。他觉得自己被最爱的两个人—查理和茉莉在追寻对方的过程中遗弃了,他的生活就像被旁观者式的无奈、失落而积蓄的挫折感所笼罩。茉莉与查理之间的感情由于上校与“狼女”的挑拨,使得茉莉的父母对皮斯佛一家产生很大的误解。由于茉莉的怀孕,被父母赶出家,从而茉莉与查理成为夫妻。但是由于上校的逼迫,小托谎报了年龄与查理一起应征入伍,皮斯佛兄弟被命运裹挟,查理更加保护小托,在小托的命运和死亡之间违抗了错误的指令,保住了小托的生命,却迎来了自己的死亡,死在了军事法庭的草率审判之下。枪声响了,小托心里的某一部分也跟着他一起死了。 这本书的前半部分莫波格笔下的大个子乔是众人眼中的智障儿童,思维和行为莫名其妙,不可理喻。大个子乔热爱动物,热爱大自然。他其实保有一切人不被欲望洗劫的美德,一个不具侵略性的人,在一个铁血的,处处充满陷阱,倾轧的社会结构里无处立足。用大个子乔的视野来观察世界,借以反讽自认正常的人

果胶酶在果汁生产中的作用公开课

专题四酶的研究与应用 课题一果胶酶在果汁生产中的作用 教学目标 1简述果胶酶作用。 2 ?检测果胶酶活性。 3. 探究温度和pH 对果胶酶活性影响。 4 ?探究果胶酶的最适用量,搜集有关果胶酶应用的资料。 教学重点 探究温度和pH 对果胶酶活性影响 教学难点 探究果胶酶的最适用量 课时安排 1课时 教学过程 讨论:果汁生产中存在的问题 ? (1、果肉的出汁率低,耗时长.2、榨取的果汁浑浊,黏度高,易发生沉淀. ) 怎么能够提高水果的出汁率并使果汁变得澄清? 在生产上,使用果胶酶、纤维素酶等解决。 果胶酶有什么作用? 一、基础知识 (一) 酶的基础知识 回忆:在高一我们学习过有关酶的知识,请回忆以下问题, 1、 酶的概念:酶是活细胞所产生的具有生物催化作用的一类特殊的有机物; 2、 酶的本质:蛋白质(大多数)或 RNA ; 基本组成单位:氨基酸或核糖核苷酸 3、 酶的功能:在各种化学反应中起催化作用。 原因:酶能降低化学反应的活化能,从而使反应能够迅速的进行。 4、 酶的特性 (1 )高效性: 酶的催化效率是无要催化剂的 107?1013倍。 (2 )专一性: 一种酶只能催化一种化合物或一类化合物的化学反应。 (3)需要适宜的条件: 适宜的温度、适宜的 PH 值。 (二) 果胶酶的作用 阅读课本P42的内容,回答以下问题: (1)细胞壁的组成成分? ( 2)果胶的单体是什么? ( 3 )果胶酶的作用? 1、果胶 是植物细胞壁以及胞间层的主要组成成分之一,它是由半乳糖醛酸聚合 而成的一种高分子化合物,不溶于水。 教学设计 备注 (教学反思 学困生辅导)

(一)探究温度对果胶酶活性的影响 1、实验原理 果胶酶的活性受温度影响。处于最适温度时,活性最高。果肉的出汁率、 果汁的澄清度 与果胶酶的活性大小成正比。 2、实验操作流程你能设计吗? __ 9支诚骨 善取一支分组分别战入30七、35C. 45 C, §09、 55 C. 6d'C. 65兀%:的慨讯水綺屮机型水浴加热 过健果汁,川廉筒聞駁块汁個賦*填人农林 实验 30 V 35 V 40 X? 45 r BO r S5 V 60 X.L 65 T' 70 Y 果汁崔 1)获取苹果泥; (2) 保温一一苹果泥和果胶酶分别进行;(多个温度) (3) 混合后保温; (4) 过滤。 讨论:为什么在混合苹果泥和果胶酶之前,要将果泥和果胶酶分装在不同的试管 中恒温处理? 将果泥和果胶酶分装在不同的试管中恒温处理,可以保证底物和酶在混 合时的温度是相 同的,避免了果泥和果胶酶混合时影响混合物的温度,从而影响 果胶酶活性的问题。 (二)探究pH 对果胶酶活性的影响 1、 实验原理 果胶酶的活性受 pH 影响,处于最适 pH ,酶的活性最高,高于或低于此 值活性均下降。 果肉的出汁率、果汁的澄清度与果胶酶的活性大小成正比。 2、 实验操作流程 你能设计吗? 让学生仿照实验过程设计,提示自变量、因变量;实验设计应遵循胡两个原则。 找一个同学胡设计当范例,肯定其的优势部分,同时请其他同学评价补充。 教学设计 备注 (教学反思 学困生辅导) 胶 nbUftj 持 lomin

果胶酶的生产技术

果胶酶的生产技术 课程:食品生物技术 专业: 班级: 学号: 姓名: 完成时间:2011 年5月15日

果胶酶的生产技术 摘要:果胶酶是一类分解果胶质的酶的总称,它能将复杂的果胶分解为半乳糖醛酸等小分子。目前果胶酶在食品、纺织、医药、造纸、环境、生物技术、饲料等领域得到广泛应用。果胶酶主要来自微生物。综述了微生物果胶酶生产茵的菌种、选育、鉴定、发酵方法和发酵条件优化,酶的分离纯化、酶学性质和分子生物学方面的研究进展,并介绍了果胶酶的应用进展,最后展望了微生物果胶酶研究的广阔前景。 关键词:微生物果胶酶果胶;果胶酶;几丁聚糖;固定化研究现状展望 1 果胶 果胶分子是由不同酯化度的半乳糖醛酸以a一1,4糖苷键聚合而成的多糖链,常带有鼠李糖、阿拉伯糖、半乳糖、木糖、海藻糖、芹菜糖等组成的侧链,游离的羧基部分或全部与钙、钾、钠离子,特别是与硼化合物结合在一起m.它存在于所有的高等植物中,沉积于初生细胞壁和细胞间层,在初生壁中与不同含量的纤维素、半纤维素、木质素的微纤丝以及某些伸展蛋白(extensin)[2]相互交联,使各种细 胞组织结构坚硬,表现出固有的形态.果胶分子的结构因植物的种类、组织部位、生长条件等的不同而不同,总体可分为光滑区(smooth region)和须状区(hairy region)两部分,主要由HGA、RG-I和RG-II三个结构区域构成,其中RG-II常以二聚体的形式存在.同其 它植物多糖一样,果胶也是多分子的、多分散的、多结构的、有高级空间构象的,也具有一定的相对分子质量分布. 2 果胶酶 2.1 果胶酶(pectolytic enzyme or pectinase)是指能够分解果胶物质的多种酶的总称. 2.2 果胶酶的分布 许多霉菌及少量的细菌和酵母菌都可产生果胶酶,主要以曲霉和杆菌为主.新近报道的其它茵有青霉如意大利青霉(Penicillium itaticum)、扩展青霉(Penicillium expansum)以及Penicillium

温度和pH对果胶酶活性的影响

一、课题目标 简述果胶酶的作用;检测果胶酶的活性;探究温度和pH对果胶酶活性的影响以及果胶酶的最适用量;搜集有关果胶酶应用的资料。 二、课题重点与难点 课题重点:温度和pH对果胶酶活性的影响。 课题难点:果胶酶的最适用量。 三、课题背景分析 随着生活水平的提高,水果几乎成为人们生活中的必需品,果汁饮料也深受人们的喜爱。将水果制成果汁,不仅有利于解决水果丰收季节的产、销、运输和保存等多方面的问题,而且提高了水果的附加值,满足了人们不同层次的需要。课题背景从与社会的联系、与学生生活的联系入手,引入课题研究。教师在教学过程中,可以以本地某种水果的生产、贮存、加工和运输为素材,让学生做一个简单的估算,从而认识到果汁加工的经济效益。例如,可以让学生计算生产一升苹果汁大约需要多少斤苹果,苹果与苹果汁的价格相差多少;等等。此外,教师还可以联系学生已有的关于酶的知识,引导学生认识果胶酶的特性及其作用。 四、基础知识分析与教学建议 知识要点:1.果胶酶的作用;2.酶的活性的定义;3.影响酶活性的因素;4.果胶酶的用量。教学建议:关于果胶酶作用的教学,教师可以先展示图4-1,介绍植物细胞壁的成分和细胞与细胞之间的胞间层成分,说明这些成分对果汁制作的影响,从而引出果胶酶在果汁生产过程中的作用。 图4-1 植物细胞壁及细胞之间胞间层的成分 五、实验安排及注意事项 本课题的研究建立在必修模块“探究影响酶活性的条件”的基础之上,与必修模块的探究的不同之处主要体现在两个方面:一是酶的活性不是通过定性分析而是通过定量分析来进行探究的;二是本课题并不仅仅满足于探究温度和pH对酶活性的影响,还探究了果胶酶的最适用量,对生产实践具有指导意义。本课题可用3~4课时。其中,探究温度对果胶酶活性的影响的实验可以参考下面的教学思路进行。

四川省安岳柠檬产业发展经验

四川省安岳柠檬产业发展经验 安岳地处四川省东部、成渝经济区腹地,全县幅员面积2700平方公里,辖69个乡镇,937个行政村,总人口158万人。安岳古称普州,北周建德四年(公元575年)设普州并置县,距今已有1400多年的历史。普州刺史程咬金,理学始祖陈抟,中国古代伟大数学家秦九韶,诗人贾岛都在这里留下众多历史遗迹。 安岳县种植柠檬已有80余年,经过几代人的努力,选育出了既适合鲜食又适合加工的安岳柠檬优良株系,经中国柑橘研究所抽样检测,安岳柠檬柠所含檬油、可溶性固形、柠檬酸和Vc等成份明显优于欧美柠檬。 安岳现有柠檬基地乡镇35个,400余个基地村,柠檬定植面积31万亩,2009年产量达15万吨,优质果12万吨以上,其中:柠檬出口基地备案面积2万余亩,可产出口优质果3.6万吨以上。果农鲜果销售收入7.5亿元,总产值15亿元。近年来,安岳县在发展柠檬产业方面取得了总结了一些经验,主要做法是: 一、突出政策支撑,强化行政推动力 一是搭建行政推动平台。配备柠檬专职副县长,按正科级事业机构设立了全国唯一的柠檬产业局,35个柠檬基地乡镇配备柠檬专职副乡镇长,增设2-3个事业岗位,确保了柠檬产业有人专抓、有人专管。二是出台产业扶持政策。制定《建设中国柠檬之都的实施意见》、《进一步加快柠檬产业化建设的意见》、《关于推进柠檬产业"三百工程"的实施意见》等文件,在基地建设、龙头培育、市场拓展、科技研发、文化助推等方面落实具体有效的支持政策。从2004年开始建立柠檬产业发展专项资金,并随财力增长逐年增加。目前县财政累计直接投入柠檬产业近3000万元。三是集成投放涉农项目。坚持"政策向产业集中、项目向基

果胶裂解酶(pectinate lyases,PL)试剂盒说明书

货号:MS2622 规格:100管/48样果胶裂解酶(pectinate lyases,PL)试剂盒说明书 微量法 注意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。 测定意义: 果胶裂解酶(EC4.2.2.10)是果胶酶的重要组成部分,是一种能降解植物细胞壁,导致植物组织软化甚至死亡的解聚酶,来源比较广泛,主要来源于微生物,可用于果汁、果酒的澄清,提高水果出汁率,植物病毒的纯化,纸浆的漂白和纺织品的生物精炼,在减少环境污染和降低能源消耗方面具有潜在的应用价值。 测定原理: 果胶裂解酶作用于果胶中的α-1,4糖苷键,生成在还原端C4和C5之间位置具有不饱和键的不饱和寡聚半乳糖醛酸,在235nm处有特征吸收峰。 自备实验用品及仪器: 天平、低温离心机、紫外分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板(UV板)、恒温水浴锅。 试剂组成和配制: 提取液:液体100mL×1瓶,4℃保存。 试剂一:液体6mL×1瓶,4℃保存。 试剂二:液体6mL×1瓶,4℃保存。 试剂三:液体6mL×1瓶,4℃保存。 酶液提取: 1.组织:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL提取液),进行冰浴匀浆。10000g ,4℃离心10min,取上清,置冰上待测。 2.细菌、真菌:按照细胞数量(104个):提取液体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500万细胞加入1mL提取液),冰浴超声波破碎细胞(功率300w,超声3秒,间隔7秒,总时间3min);然后10000g,4℃,离心10min,取上清置于冰上待测。 3. 培养液:直接测定。 测定操作表: 1、分光光度计/酶标仪预热30min,调节波长至235nm,蒸馏水调零。 2、操作表 第1页,共3页

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