胚胎工程 电子教案

专题3 胚胎工程教材

学情分析；

在普通高中《生物课程标准》的内容标准中，“胚胎工程”是选修3“现代生物技术专题”模块的第3个专题。该专题涉及胚胎工程的理论基础，胚胎工程的基本技术及原理。胚胎工程的应用与前景，以及胚胎干细胞的研究和应用对生命基础科学研究的重大作用等内容。

本专题的主线是从胚胎工程的理论基础到技术基础，再到应用及发展，因此哺乳动物精子和卵子的发生、受精过程及胚胎发育、哺乳动物体外受精技术的主要操作步骤、胚胎移植的生理学基础及基本程序和应用、胚胎分割的实践意义、胚胎干细胞研究的意义是教学的重点；哺乳动物受精过程中精子的获能与顶体反应及两道屏障的概念及特点、哺乳动物胚胎发育各阶段的主要特点、胚胎移植的生理学基础与基本程序、胚胎干细胞的培养方法与分离途径是教学的难点。尽管在必修部分学习了细胞器的结构与功能、减数分裂等内容，但是要对精卵发生中精子的变形、卵泡的形成及排卵、卵子成熟的两次减数分裂场所及时间等有关内容进行全面深入的介绍及拓展，还是有一定难度的，特别是有些内容与必修部分不一致，如卵细胞形成中的减数第二次分裂是在受精过程中完成的，并且有些哺乳动物减数分裂中极体的数量是两个而不是三个，因为有些哺乳动物的第一极体不进行减数第二次分裂形成两个第二极体，这些内容既是重点也是难点。

学情分析；

学生在必修二的学习中已经学到了相关减数分裂合生殖细胞的形成以及受精作用等内容，所以学生对于这个专题的学习有一定的基础。能从胚胎工程的整个格局来分析问题，也就是学习这一节的目的是为后面学习其它技术打基础，体外受精做好准备的，如自然受精——体外受精，受精卵发育及进入子宫——胚胎移植。就是有一个总体观，不象以往就是为了上课而上课，将其分开来。另外也能带着学生一同来分享整个过程。

第一节体内受精和早期胚胎发育

第一课时

教学目标

1．知识与技能：

（1）简述哺乳动物的精子和卵子的发生过程

2．过程与方法：

（1）学生通过阅读、自学、质疑、讨论、训练和总结等环节，逐步提高独立获取知识的能力、逻辑思维能力、分析问题和解决问题的能力。

（2）通过学习精卵形成和受精过程，使学生联系已有知识，培养学生的知识迁移能力，思维能力。

3．情感态度与价值观：

（1）初步培养学生勇于探索、不断创新的精神和合作精神。

（2）通过向学生介绍动物精卵细胞的形成，使学生明确对生命奥秘的揭示愈加广泛

和深入，形成终身学习的意识。

教学重点、难点：

1.教学重点

（1）哺乳动物精子和卵子的发生。

2.教学难点

（1）哺乳动物精子合卵细胞的发生过程

教学方法：以探究法、谈话法和讲授法相结合进行教学。

教学课时：1课时

教学过程：

以提纲的方式引导学生学习“科技探索之路”并组织学生分组探讨，从中领悟科学的发展就是不断“发现问题——提出问题——设计实验——进行实验——得出结论”的探究过程。

（1）胚胎工程的建立可大致分为几个阶段？在每一个阶段中，胚胎工程技术有什么重大突破？这些重大突破对推动生产力的发展有什么作用？

（2）为什么说胚胎移植技术的成功和应用带动和加速了体外受精技术的研究？

（3）美籍华人科学家张明觉在动物生殖生理学上有什么重大发现？这个发现对促进胚胎工程实现产业化有何意义？

（4）通过胚胎工程的建立过程，你如何认识科学、技术、社会三者之间的关系？

通过学生交流，教师总结，引出课题（展示课题：第一节体内受精和早期胚胎发育）。

教学中，教师引导学生利用已有知识，指导学生根据提纲阅读资料。

教学提纲：

1．高等生物的个体发育的起点是什么？（参考：受精卵）

2．一个受精卵是怎样发育成一个完整的生物个体？（参考：通过细胞分裂、细胞分化、组织器官的形成，最终成为一个完整的生物个体。）

3．通常一只母羊只能生1~2只羊羔，远不能满足人们的生活需要。那么，有什么方法可以一般的繁殖方式，可使牛羊等动物快速繁殖呢？（参考：胚胎工程）

从学生的交流、探讨中提出：什么是胚胎工程？动物的早期胚胎是怎样进行的？

一．精子和卵子的发生：

在教师指导学生阅读资料的基础上回答如下问题：

1.家畜每次射精排出的精子数以亿计，但是通常只有一个精子能够与卵子结合，这能说是一种浪费吗？怎样理解这一现象？

提示：不是。可以从两方面说明这一问题：其一，在自然繁殖的条件下，为了使母畜排出的1个或几个卵子完成受精，公畜一次射出几亿到几十亿的精子到发情母畜的生殖道内，可以说是动物为繁殖后代、延续物种的一种生理保障机制；其二，在自然条件下，精子从射精部位运行到受精部位，在通过母畜生殖道的过程中，复杂的组织结构和生理环境将对精子进行筛选，并致使大量的精子途中死亡，被分解或排除，造成精子大量损耗。最后到达受精部位（输卵管）的精子只剩百余个，与卵子完成受精的只有一个。

2.精子细胞变成精子的过程中，细胞中很多结构会消失，而细胞核和线粒体都保留下来，对这一现象怎样理解？为什么精子中的线粒体集中在尾的基部？

提示：细胞核和线粒体都是精子结构中的重要部分。其中，细胞核是精子遗传物质储存和复制的场所，也是参与精、卵结合和后代遗传特性与细胞代谢活动的控制中心。而线粒体则是精子进行有氧呼吸分解营养物质产生运动能量的场所。精子的线粒体在精子形成过程中，集中于尾的基部形成线粒体鞘膜，是精子维持生存和运动能量的“动力工厂”或“发动机”。1．精子的形成：

（1）场所：睾丸的曲细精管（示图）

（2）时期：从初性期到生殖机能衰退。

（3）过程：（引导学生阅读资料，得出结论）见下图

教师引导学生阅读相关的资料，进行分组讨论，最后归纳总结：

1.一个卵泡中能形成几个成熟的卵子？

答：正常情况下，一个卵泡只能形成一个成熟的卵子。

2.排卵是指卵子从卵泡中排出，还是指卵泡从卵巢中排出？

答：是指卵子从卵泡中排出。

3.刚排出的卵是成熟的卵子吗？它在母体的什么部位与精子受精？

答：刚排出的卵子尚未完全成熟，仅完成第一次减数

分裂，需要在输卵管内进一步成熟，直到第二次减数

分裂的中期才能与精子结合完成受精过程。排出的卵子

是在输卵管内与精子受精的。

2．卵子的发生：

（1）场所：卵巢

（2）过程：

3）时间：减数第一次分裂在雌性动物排卵前完成；减数第二次分裂是在精、卵结合过程中完成。

引导学生回顾必修2有关受精作用的过程和阅读教材所给资料，讨论、分析归纳总结出

受精的知识要点。

第二课时

教学目标

1．知识与技能：

（1）简述哺乳动物的受精过程。

（2）简述哺乳动物的胚胎发育过程及其主要特点。

（3）认同胚胎工程建立及发展的意义。

2．过程与方法：

1.学生通过阅读、自学、质疑、讨论、训练和总结等环节，逐步提高独立获取知识的能力、逻辑思维能力、分析问题和解决问题的能力。

2.通过学习精卵形成和受精过程，使学生联系已有知识，培养学生的知识迁移能力，思维能力。

3．情感态度与价值观：

（1）初步培养学生勇于探索、不断创新的精神和合作精神。

（2）通过向学生介绍动物精卵细胞的形成和受精作用，使学生明确对生命奥秘的揭示愈加广泛和深入，形成终身学习的意识。

教学重点、难点：

1.教学重点

（1）哺乳动物的受精过程。

（2）哺乳动物的胚胎发育。

2.教学难点

（1）哺乳动物受精过程中精子的获能、顶体反应、透明带反应、卵黄膜封闭作用的概念和生理功能。

（2）哺乳动物胚胎发育各阶段的主要特点。

教学方法：以探究法、谈话法和讲授法相结合进行教学。

教学课时：1课时

教学过程：

以复习方式导入新课

二．受精：

1．概念：指精子与卵子结合形成合子（即受精卵）的过程。

2．场所：输卵管

3．受精前的准备阶段：

（1）精子获能：精子必须在雌性动物的生殖道中发生相应的生理变化后，才能获得受精能力。

（2）卵子的准备：卵子在输卵管中发育到减数第二次分裂中期，才具备与精子受精的能力。4．受精阶段：

（1）精子穿越放射冠和透明带；

（2）精子进入卵黄膜；

（3）雄、雌原核形成；

（4）雄、雌原核的融合，产生受精卵。

5．生理意义：

（1）维持各种生物前后代体细胞中染色体数目的恒定；

（2）对于生物的遗传变异和生物进化是十分重要的。

引导学生阅读教材中的资料分析、讨论，归纳总结出相关结论并引入课题。 1.表中哪种动物的胚胎在进入子宫时发育程度最高？

答：比较而言，马的胚胎进入子宫时发育程度最高，其次为小鼠。 2.将体外培养的马胚胎移植到母马子宫时，应选择什么阶段的胚胎？如果换成牛又该怎样处理？

答：马应选择囊胚阶段的胚胎。牛在自然情况下，胚胎虽然最早可在8~16细胞阶段进入子宫，但为了提高移植后胚胎的发育率和妊娠率，在实践中通常用发育到囊胚阶段的胚胎进行移植。

3.为什么说关于动物的体内受精和胚胎发育的研究，会为胚胎工程提供理论基础？请结合本节内容举例说明。

提示：胚胎工程的许多技术都是在了解哺乳动物自然条件下受精和早期胚胎发育的基础上实现的。本节涉及的哺乳动物体内受精和胚胎发育都是在自然条件下的特点和规律，人们正是在认识了这些自然规律的基础上，在体外进行有效的模拟，才使卵母细胞能在体外成熟；精子能在体外完成获能；获能精子和成熟卵母细胞能在试管内完成受精；体外受精卵能在人工培养条件下继续发育等，这些都有赖于体内自然条件下的基础研究成果。 教师引导学生回顾青蛙个体发育的过程和放动画观察，引出新课题。 三．胚胎发育：（见下图）

小结：

受精

2细

4细8细桑椹内细胞滋养

层

乳动物受精卵的发育 囊胚

原肠

受精在输卵管内进行有丝分裂 卵裂在透明带内进行有丝分裂，

细胞数目增加，但总体积 不变

桑椹由具全能性的细胞构成； 细胞数约32个，排列紧密。

内细胞团： 滋养层细胞：

原肠

出现原肠腔和三个胚层， 细胞开始分化，形成组织、 器官、系统

胎儿形

作业；板书

第二节体外受精和早期胚胎培养

教学目标：

1．知识目标：

（1）简述哺乳动物体外受精技术的主要操作步骤。

（2）简述哺乳动物胚胎的早期培养方法。

（3）认同体外受精在家畜快速繁殖中的重要意义。

2．态度观念目标：

（1）初步培养学生勇于探索、不断创新的精神和合作精神。

（2）通过向学生介绍试管动物的基本操作过程和早期胚胎的培养，使学生明确对生命的意义，树立正确的世界观和人生观。

3．能力目标：

（1）学生通过阅读、自学、质疑、讨论、训练和总结等环节，逐步提高独立获取知识的能力、逻辑思维能力、分析问题和解决问题的能力。

（2）通过学习体外受精和早期胚胎培养及其基本操作方法，使学生联系已有知识，培养学生的知识迁移能力，思维能力。

教学重难点：

1.教学重点

（1）体外受精在家畜快速繁殖中的重要意义。

（2）哺乳动物体外受精技术的主要操作步骤。

2.教学难点

（1）卵母细胞的采集和培养。

（2）精子的采集和获能。

教学方法：教师通过引导学生自学、讨论、分析和探究方法、谈话法等结合进行教学。

教学课时：1课时

教学过程：

教师活动：提供相关材料

材料一：我国目前每头奶牛年平均产奶量为3000kg左右，而国际上良种奶牛年平均产奶量达10000kg，而每头良种成年奶牛需要3万~5万元，如此高昂的价格使我们不能大量引进。

根据上述材料，你有何办法既可提高牛卵母细胞的利用率，又可让引进的良

种奶牛快速地大量繁殖呢？

根据上述材料，让学生进行分析、探讨并引出教学课题。

一．试管动物技术：概念（略）

教师引导学生回顾上节课内容：

（1）哺乳动物体内胚胎的形成需要经过哪些过程？（参考：精子和卵子的发生—受精—胚胎的发育）

（2）哺乳动物体外胚胎的发育需要完成哪些环节？（参考：获得精子和卵子—体外受精—体外胚胎培养）。在学生讨论出结果的基础上，教师告诉学生，胚胎工程专家就是根据这几个环节来研究哺乳动物体外受精和胚胎早期培养方法的。今天请大家来扮演胚胎工程专家，共同模拟研究“试管牛”工厂化生产的技术流程。

引导学生阅读教材资料和图片，让学生自己制作“试管牛”的操作流程和拟

出关于操作流程的研究项目：

（1）卵母细胞的采集和培养；

（2）精子的采集和获能；

（3）受精；

（4）胚胎的早期培养；

（5）画出“试管牛”工厂化生产的技术流程图解（见下图）

具体教学板书：

二．体外受精：

1．概念：

2．原理：人工模拟体内环境（包括营养、温度、PH等），使初级卵母细胞成熟和精子获能，最终完成受精和胚胎保存。

3．主要操作步骤：

（1）卵母细胞的采集：

方法一：对小型动物一般采用促性腺激素处理，排卵后直接从输卵管中冲取卵子直接与获能的精子在体外受精。

方法二：对大型动物一般采用从活体的卵巢中吸取卵母细胞，经体外人工培养成熟后与获能的精子在体外受精。

（2）精子的采集和获能：

采集方法：假阴道法、手握法和电刺激法等

获能方法：培养法和诱导法

（3）受精：获能精子和成熟卵子在共同培养一段时间后便可受精。

三．胚胎的早期培养：

1．培养的目的：检测受精状况和受精卵的发育能力。

2．培养液的成分：水、无机盐、有机盐、维生素、激素、氨基酸、核苷酸以及动物血清等。3．移植方式：

（1）冷冻保存；

（2）移植到受体动物子宫内培养。

教学小结：让学生简述体外受精中精子、卵子的采集和精子的获能以及胚胎早期的培养方法。教学后记：

通过上节知识的学习，学生对这节内容的掌握程度较好，能很快理解和应用

相关知识解答一些知识性问题。如有机会，应带学生参观光明农场的奶牛场。

作业；板书；

第三节胚胎的应用及前景

教学目标：

1．知识目标：

（1）举例说出胚胎移植和胚胎分割。

（2）认同胚胎移植在胚胎工程中的地位和作用。

（3）关注胚胎工程的研究进展和应用价值。

2．态度观念目标：

（1）引导学生了解胚胎工程的发展前景和现实生产实践中的应用，激发学生养成勇于探索和不断创新的精神。

（2）通过向学生介绍胚胎工程的应用及前景，激起学生为社会建设而努力奋斗的决心，同时激励学生树立远大的理想。

3．能力目标：

（1）学生通过阅读、自学、质疑、讨论、训练和总结等环节，逐步提高独立获取知识的能力、逻辑思维能力、综合分析问题和实际应用的能力。

（2）通过学习胚胎工程的基本操作方法，使学生联系已有知识，培养学生的知识迁移能力，思维能力和创新能力。

教学重难点：

1.教学重点

（1）胚胎移植的生理学基础、基本程序和应用。

（2）胚胎分割的应用意义。

（3）胚胎干细胞研究的意义。

2.教学难点

（1）胚胎移植的生理学基础。

（2）胚胎干细胞的概念和分离途径。

教学方法：探究法、谈话法、讲授法及引导学生阅读材料、分析、讨论相结合

教学课时：2课时

教学过程：

教师让学生阅读教材上的资料、分析、讨论、归纳。

在学生阅读后，教师指导学生分组讨论：什么是胚胎工程技术？什么是胚胎移植？一．胚胎工程技术：

1．概念：

2．类型：胚胎移植、体外受精、胚胎分割、胚胎干细胞培养、早期胚胎培养（即体外胚胎生产）等技术。

二．胚胎移植：

1．概念：将雌性动物的早期胚胎，或者通过体外受精及其他方式得到的胚胎，移植到同种的、生理状态相同的其他雌性动物体内，使之继续发育为新个体的技术。

也就是生产胚胎的供体和孕育胚胎的受体共同繁殖后代的过程。

2、胚胎移植的生理学基础（条件）：

（1）供体和受体具有相同的生理环境；

（2）早期胚胎处于游离状态,为胚胎的收集提供了可能；

（3）受体对移入子宫的胚胎基本上不发生免疫排斥

（4）供体胚胎与受体子宫建立正常的生理和组织联系,且移入受体的胚胎的遗传物质不会改变。

学习探究：

（1）在胚胎移植操作中，怎样才能使胚胎在移植前后所处的生理环境保持一致？供体胚胎移入受体子宫的位置，应与供体内的位置相同或相似吗？

提示：同种哺乳动物在发情排卵后的生理环境是一致的。

（2）胚胎移植实质上是早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移。你认为这样的概括正确吗？

提示：胚胎移植的成功率的高低与供体、受体的生理环境条件的一致性密切相关。只有供、受体生理环境高度一致，移入的胚胎才能被接受，才能继续发育。

（3）胚胎移植的基本操作程序是怎样的呢？引导学生分组讨论、总结得出课题。

3．胚胎移植的基本程序：（见下图）

（1）供体与受体的选择和处理

（2）配种或人工受精

（3）胚胎的收集、检查、培养或保存

（2）大量节省购买种畜的费用

（4）胚胎胚胎移植及移植后检查

4．胚胎移植的意义

（1）加速育种工作和品种改良

（3）一胎多产

（4）保存品种资源和濒危物种

（5）充分发挥优良个体的繁殖潜能良种供体母牛受体母牛……同期发情处理……

（雌激素）

超数排卵

同种良

种公牛

配种

冲卵

质量检查、培养胚胎移植

妊娠检查

分娩

（胚胎移植的犊牛）

学习探究材料：

通过体外受精、早期胚胎的培养及胚胎移植技术，可以大幅度提高哺乳动物的繁殖能力，但对胚胎的利用率还是相对较低，那么，有什么办法可以进一步提高胚胎的利用率呢？引导学生阅读材料和教材内容，引出课题。

三．胚胎分割：

1．概念：采用机械方法将早期胚胎切割成2等份,4等份或8等份等，经移植获得同卵双胎或多胎的技术。

2．理论基础：细胞的全能性

3．物质基础：每个细胞核内具有相同的遗传物质

4．特点：每个后代具有相同的遗传特性。克隆

5．胚胎的选择：发育良好、形态正常的桑椹胚或囊胚

6．基本操作程序：

（1）将发育良好的胚胎移入含有培养液的培养皿中，在显微操作下用分割针或分割刀片将胚胎分割，或采用胰蛋白酶处理等方式将卵裂中的细胞分散；

（2）将分割的胚胎或细胞直接移植给受体，或在体外培养到囊胚期再移植给受体，着床发育产仔。

思考与讨论：

（1）有人说：胚胎分割的份数越多，产生的后代数量就越多。这种说法正确吗？为什么胚胎分割的份数越多，移植的成功率也越低？

提示：早期胚胎体积小，细胞数目少，显微操作难度大；分割份数越多，每份细胞数目少而不均，囊胚期胚胎内细胞团的影响大。因此，分割份数越多，技术难度越大，移植后的恢复和发育的难度会越大，移植成功率自然会降低。

（2）有什么办法可以克隆更多生物个体？

由引导学生思考讨论上述问题，引出胚胎干细胞技术。

四．胚胎干细胞

1．概念：是指来自人或动物的早期胚胎，具有自我复制、自我更新、高度增殖和多向分化潜能的原始细胞。

2．特点：

（1）形态：体积小，细胞核大，核仁明显。

（2）功能：具有发育的全能性，可分化为成年动物体内任何一种组织细胞。体外培养可增殖不分化。

（3）在体外培养的条件下，ES细胞可以增殖而不发生分化。对它可以进行冷冻保存，也可以进行遗传改造。

3．理论基础：细胞的全能性

4．干细胞的类型：（见课件）

5、主要用途：

（1）治疗人类的某些顽症：如脑病（如帕金森症）、治疗脑瘤（癌）、血癌（白血病）等一些顽症。

（2）培育出人造组织器官，用于器官移植：成功用干细胞分化出肝细胞、用鸡胚胎干细胞制作心肌片、对自身免疫疾病的治疗（如类风湿病、红斑狼疮等）

（3）是研究体外细胞分化的理想材料。

课堂小结：引导学生阅读P82“拓展视野”

课后记：本节内容着重在于拓宽学生视野，激发求知欲。教学中学生能积极参与讨论，了解到胚胎工程在生产实际中应用及前景。课后也布置了相关的网页资料查找的范围。

基因工程实验技术介绍

一、大肠杆菌质粒DNA的提取 质粒DNA的提取是从事基因工程工作中的一项基本实验技术，但提取方法有很多种，以下介绍一种最常用的方法：碱裂解法。此方法适用于小量质粒DNA的提取，提取的质粒DNA可直接用于酶切、PCR扩增、银染序列分析。方法如下： 1、接1%含质粒的大肠杆菌细胞于2ml LB培养 基。 2、37℃振荡培养过夜。 3、取1.5ml菌体于Ep管，以4000rpm离心3 min，弃上清液。 4、加0.lml溶液I(1％葡萄糖，50mM/L EDTA pH8.0，25mM/L Tris-H Cl pH8.0)充分混合。 5、加入0.2ml溶液 II(0.2 mM/L NaOH，1％ SDS)，轻轻翻转混匀，置于冰浴5 min 。 6、加入0.15m1预冷溶液III(5 mol/L KAc，p H4.8)，轻轻翻转混匀，置于冰浴5 min 。 7、以10，000rpm离心20min，取上清液于另 一新Ep管 8、加入等体积的异戊醇，混匀后于?0℃静置1 0min。 9、再以10，000rpm离心20min，弃上清。 10、用70％乙醇0．5ml洗涤一次，抽干所有 液体。 11、待沉淀干燥后，溶于0．05mlTE缓冲液中 二、质粒DNA琼脂糖凝胶电泳鉴定 琼脂糖是从海藻中提取出来的一种线状高聚物，应选用电泳纯的，琼脂糖此级产品筛除了抑制物和核酸酶，而且用溴化乙锭染色后荧光背景最小。 (1)琼脂糖凝胶电泳装置

由于琼脂糖凝胶电泳既要求不高，而适应性又强，在过去15年里已成功地设计了形形色色及大大小小的电泳槽。对这些装置的选择主要是依据个人的喜恶。使用最普遍的装置是Walt er Schaffner发明的水平板凝胶。 水平板凝胶通常在一块可安放于电泳槽平台的玻璃板或塑料盘上灌制。在有些装置中，则可将凝胶直接铺在平台上。凝胶恰好浸在缓冲液液面下进行电泳。凝胶的电阻几乎与缓冲液的电阻相同，所以有相当一部分的电流将通过凝胶的全长。 （2）琼脂糖凝胶的制备 琼脂糖凝胶的制备是将琼脂糖在所需缓冲液中熔化成清澈、透明的溶液。然后将熔化液倒入胶模中，令其固化。凝固后，琼脂糖形成一种固体基质，其密度取决于琼脂糖的浓度。通贯凝胶的电场接通后，在中性pH值下带负电荷的DNA向阳极迁移。 （3）琼脂糖凝胶的染色 电泳完毕，将琼脂糖凝胶转移入含EB的染液中，染色10分钟，取出紫外灯下观察。 三、质粒DNA热激法转化大肠杆菌 感受态的细胞可以摄入外部溶液中的DNA，而常态的细胞却不能，所以要转化质粒DNA进入大肠杆菌必须首先制备感受态的大肠杆菌细胞。 1、取1%大肠杆菌E.coli接种于含2ml LB培 养基的试管中，37℃振荡培养过夜 2、取0.1ml过夜培养物转种于含10ml LB培 养基的三角瓶中，37℃振荡培养3h至OD600=0. 3 3、然后把培养物倒入1.5ml离心管中，冰浴1 0min。 4、在4℃下以4000rpm离心5min，去上清液 5、把菌体悬浮于15m1冰冷的0.1M CaCl2溶液 中，置冰上30min 6、然后再在4℃下以4000rpm离心10min，去 上清液

《组织学与胚胎学-呼吸系统》教案

---------------------------------------------------------------最新资料推荐------------------------------------------------------ 1 / 17 《组织学与胚胎学-呼吸系统》教案 教 案 首 页 课程名称 中文 组织学与胚胎学 英 文 Histology and embryology 授课对象 2019 级 临床 专业 本科 层 次 课 时 2 学时 授课周节 第 7 教学周 周一 第 5-6 大节 上课教室 科技楼 301授课章节 第十五章 呼吸系统 （Respiratory System ） 教学目标 与要求 教学目标： 1. 掌握肺的组织结构： 肺内导气部各段管壁结构变化规律、呼吸部的组成及各段的结构 特点。 2. 掌握肺泡上皮的组织结构与功能、肺泡隔的组织成分和功能、 气－血屏障的组成与功能。 3. 熟悉气管的结构、肺血液循环的特点 教学要求： 具有细胞生物学相关基础知识，呼吸系统解剖学知识 教学重点 1. 气管的结构； 2. 肺呼吸部的组成及各段的结构， 3. I 、II 型 肺泡上皮细胞的组织结构与功能； 4. 气-血屏障的组成与功能。 教学难点 1. 呼吸部管壁结构变化规律； 2. 肺泡管和肺泡 囊的结构。 教学方法与手段 应用板书加多媒体辅助教学，重点内容详细 介绍，反复强调，难点深入浅出。 适当运用演示法，讨论法，启发式教学法和探究式教学； 利用多媒体设备和 PPT 课件展示较多图片，利用模型直观讲授；

适当联系相关基础学科和临床实践；非重点内容以自学为主。 教材参考资料与网站 1.教材： 《组织学与胚胎学》唐军民，张雷主编，北京大学医学出版社 2.参考资料： 1) 组织学与胚胎学第八版邹仲之，李继承主编，人民卫生出版社，2019 2) 现代组织学第二版成令忠主编，人民卫生出版社，2003 3) Anthony L. Mescher. Junqueira’s Basic Histology: Text and Atlas. 13th Edition, McGraw-Hill Medical, 2019 4) Barbara Young, Geraldine O’Dowd, Phillip Woodford . Wheater’s Functinal Histology: A Text and Colour Atlas. 6th edition. Churchill Livingstone, 2019 3.参考网站： 专业词汇 trachea（气管）， bronchiole（细支气管）respiratory bronchiole（呼吸性细支气管）, alveolar duct （肺泡管）, alveolar sac（肺泡囊）, pulmonary alveoli（肺泡）, type I alveolar cell（I 型肺泡上皮细胞）, type II alveolar cell（II型肺泡上皮细胞）, blood-air barrier（气血屏障）, pulmonary macrophage（肺巨噬细胞） alveolar septum （肺泡隔）, alveolar pore（肺泡孔）教学内容与时间分配引言部分： 5分钟复习上节课-消化腺的重点内容，介绍本节课内容概要、重点和难点基本部分：

机械工程测试技术试卷与答案

《机械工程测试技术基础》试题1 一、 填空题（20分，每空1分） 1.测试技术是测量和实验技术的统称。工程测量可分为 静态测量 和 动态测量 。 2.测量结果与 被测真值 之差称为 测量误差 。 3.将电桥接成差动方式习以提高 ，改善非线性，进行 补偿。 4.为了 温度变化给应变测量带来的误差，工作应变片与温度补偿应变片应接在 桥臂上。 5．调幅信号由载波的 携带信号的信息，而调频信号则由载波的 携带信号的信息。 6．绘制周期信号()x t 的单边频谱图，依据的数学表达式是 ，而双边频谱图的依据数学表达式是 。 7．信号的有效值又称为 ，有效值的平方称为 ，它描述测试信号的强度(信号的平均功率)。 8．确定性信号可分为周期信号和非周期信号两类，前者频谱特点是 ，后者频谱特点是 。 9.为了求取测试装置本身的动态特性，常用的实验方法是 和 。 10.连续信号()x t 与0()t t δ-进行卷积其结果是：0()()x t t t δ*-= 。其几何意义是 。 二、 选择题（20分，每题2分） 1．直流电桥同一桥臂增加应变片数时，电桥灵敏度将( )。 A ．增大 B ．减少 C.不变 D.变化不定

2．调制可以看成是调制信号与载波信号( )。 A 相乘 B ．相加 C ．相减 D.相除 3．描述周期信号的数学工具是( )。 A ．相关函数 B ．拉氏变换 C ．傅氏变换 D.傅氏级数 4．下列函数表达式中，( )是周期信号。 A ．5cos100()0 t t x t t π? ≥?=? ?

胚胎工程论文打印

人胚胎干细胞研究现状及其应用前景 印生艺 （联系地址：河北科技大学生物科学与工程学院石家庄050018） 摘要:胚胎干细胞的研究自上世纪80 年代初期始, 经历了由低等动物、灵长类动物至人类胚胎干细胞研究的过程。从干细胞生物学特性、培养条件到干细胞建系的成功; 从科研服务于人类到由此引发的伦理之争;从人类干细胞研究给医疗领域带来的广泛应用前景到目前研究尚存在的困难, 比较全面的反映了 人类干细胞研究的现状和应用前景。由于胚胎干细胞在揭示生命的奥秘、攻克各种疑难杂症等方面具有极为诱人的前景, 尽管目前还有许多困难, 还存在争议, 如果能够正确引导, 建立相应完善的监管机制, 人胚胎干细胞研究领域的每个进步都将对人类自身发展做出重大贡献。[1] 关键词:干细胞; 特性; 胚胎;经历; 应用及展望;伦理 Situation of human embryonic stem cell research and its application prospects Abstract:Embryonic stem cell research since the beginning of the last century, the early 80s, experienced by the lower animals, primates to human embryonic stem cell research process. From Stem Cell, stem cell culture conditions to the success of the Department; from research services to the consequent human ethics dispute; from human stem cell research to the medical field to bring a wide range of application prospects difficulties still exist in the current study, reflect a more comprehensive status of human stem cell research and application. Because embryonic stem cells to reveal the secret of life, overcome all kinds of incurable diseases, and so has a very attractive prospect, although there are still many difficulties, is still controversial, if we can correctly guide, a comprehensive monitoring mechanism to establish the corresponding human embryonic stem cells .Each advance in the research field will make a significant contribution to the development of human beings. Keywords:Stem cell; properties; embryos; experience; applications and prospects; Ethics 胚胎干细胞是从囊胚的内细胞群和早期胚胎的生殖腺分离的多潜能细胞。人胚胎干细胞的研究上世纪末至今, 一直是生物医学领域的热点和焦点。它的研究既给医学领域在许多疑难疾病的治疗上带来希望, 同时就其研究是否有悖现有的伦理观念在社会界引发了激烈的争论, 且研究还处于基础阶段, 面临着许 多的困难, 离临床应用还有相当长的路要走。 一胚胎干细胞的生物学特性 胚胎干细胞是从哺乳动物的囊胚内细胞团和原始生殖细胞分离, 经体外培养获得的多潜能的细胞。胚胎干细胞的生物学特性有①全能性。在体外培养的条件下, 胚胎干细胞可以诱导分化为机体的任何组织细胞。全能性的标志是细胞表面有胚胎抗原和Oct4 蛋白[2]。②无限增殖性。胚胎干细胞在体外适宜条件下, 能在未分化状态下无限增殖。③胚胎干细胞具有种系传递的功能。④胚胎干细胞易于进行基因改造操作。 ⑤细胚胎干胞保留了正常二倍体的性质且核型正常。 二人胚胎干细胞研究经历 1981 年美国科学家Evans 和Kanfman 从小鼠胚胎分离出细胚胎干细胞并成功建系, 从此开辟了哺乳动物细胚胎干胞研究的新纪元[3]。1998 年Thomsn 和Gearhrt 利用内细胞团和原始生殖细胞分别建立了人的胚胎干细胞系[4], 这一结果的宣布将胚胎干细胞的研究又掀开了新的一页。1999 年12 月, 美国《科学》

基因工程实验报告

基因工程实验报告 、

小麦GAPDH截短体的重组与表达 摘要：本实验通过基因工程（genetic engineering）手段对小麦总RNA进行提取、PCR扩增及与质粒载体的重组构建的操作，并将重组质粒以氯化钙法导入大肠杆菌感受态细胞，诱导目的基因表达，并在蛋白水平进行Western检测。通过本对实验的实践，我们对基因工程技术将会有一个比较全面的认识和了解。 关键字：小麦基因；载体；感受态 前言 基因工程（genetic engineering）又称基因拼接技术和DNA重组技术。为在分子水平上对基因进行操作的复杂技术，是将外源基因通过体外重组后导入受体细胞内，使这个基因能在受体细胞内复制、转录、翻译表达的操作。它是用人为的方法将所需要的某一供体生物的遗传物质——DNA大分子提取出来，在离体条件下用适当的工具酶进行切割后，把它与作为载体的DNA分子连接起来，然后与载体一起导入某一更易生长、繁殖的受体细胞中，以让外源物质在其中“安家落户”，进行正常的复制和表达，从而获得新物种的一种崭新技术。它克服了远缘杂交的不亲和障碍。 （一）实验过程

1.实验部分流程：

2．小麦总RNA提取（Trizol法） 2.1 材料 小麦幼苗 2.2 试剂配制及器具处理 ① 0.1％的DEPC H2O（DEPC：焦碳酸二乙酯） ②器具处理：试剂瓶、量筒、研钵、大小枪头和1.5ml和0.2ml 的EP管等用纱布包裹，在 0.1％的DEPC H2O中浸泡过夜（37℃），高压灭菌，80℃烘干备用。剪刀、镊子和药匙等160℃烘烤6h以上。 ③无RNA酶灭菌水（DEPC H2O）：用将高温烘烤的玻璃瓶（180℃×2h）装蒸馏水，然后加入 0.1%的DEPC（体积/体积），处理过夜后高压灭菌。 ④Trizol ⑤ 75%乙醇：用新打开的无水乙醇和DEPC处理过的水配制75%乙醇（用高温灭菌器皿配制），然后装入高温烘烤的玻璃瓶中，存放于低温冰箱。 ⑥氯仿(最好用新的)。 ⑦异丙醇(最好用新的)。 2.3 操作步骤： ①先在研钵中加入液氮，再将小麦叶片剪成小段在液氮中磨成粉末，用液氮预冷的药匙取50～100mg组织粉末加入已盛有1ml的Trizol液的EP管中（注意研磨粉末总体积不能超过所用Trizol体积的10%），充分混合均匀。 ②室温放置5min，然后加入200μL的氯仿，盖紧EP管并剧烈摇荡15秒钟。 ③ 12000rpm离心10min，取上层水相于一新的EP管中（千万不要将中间的沉淀层和下层液混入，否则重新离心分离），加入500μL异丙醇，温和颠倒混匀。室温放置10min，12000rpm 离心10min。 ④小心地弃去上清液，加入1ml的75%乙醇，涡旋混匀，4℃下12000rpm离心5min。 ⑤重复步骤④。 ⑥弃去上清液（尽量将残余液体除去），室温或真空干燥5～10min（注意不要干燥过分，否则会降低RNA的溶解度）。用30μL DEPC处理过的水将RNA溶解，必要时可55℃～60℃水浴10min。RNA可进行mRNA分离，或贮存于70%乙醇并保存于-70℃。 3. RT-PCR扩增目的基因cDNA 3.1 试剂 ① RNA模板 ②Olig（dT）18 ③反转录缓冲液 ④dNTP ⑤ M-MULV反转录酶 ⑥ RNA抑制剂（RNasin） ⑦Premix EX Taq DNA聚合酶 ⑧ PCR特异引物 3.2操作步骤： 3.2.1 RNA的反转录 采用Thermo Scientific（Fermentas）RevertAid First Strand cDNA Synthesis Kit Total RNA 6μL（需加入RNA约1μg） OligodT primer 1μL H2O（nuclease-free）5μL 12μL 65℃ 5min，补加下列试剂： 5× Reaction buffer 4μL RibolockRNase Inhibitor 1μL 10mM dNTP Mix 2μL RevertAid M-MuLV Reverse Transcriptase 1μL 20μL 42℃ 60min 70℃，5min，﹣20℃保存

组织学与胚胎学模拟题电子教案

组织学与胚胎学期末试 专业班级：学号：姓名： 一、单项选择题（30分） 1. 淋巴结毛细血管后微静脉主要分布于： A. 浅层皮质 B. 淋巴小结 C. 副皮质区 D. 皮质与髓质交界处 E. 髓索 2. 排卵时： A. 卵细胞和卵泡液一起从卵巢表面排出 B. 次级卵母细胞、透明带和卵泡液一起从卵巢表面排出 C. 卵细胞和透明带一起从卵巢表面排出 D. 卵细胞、透明带、放射冠和卵泡液一起从卵巢表面排出 E. 次级卵母细胞，透明带、放射冠和卵泡液一起从卵巢表面排出 3. 被覆上皮的分类依据是: A. 上皮的厚度 B. 上皮的功能 C. 组成细胞的形态及排列层次 D. 上皮的分布部位 E. 上皮获取营养的方式 4. 胸腺皮质与髓质相比，前者的主要结构特点是: A. 胸腺细胞多，上皮性网状细胞少 B. 胸腺细胞少，上皮性网状细胞多 C. 胸腺细胞和上皮性网状细胞均较少 D. 胸腺细胞和上皮性网状细胞均较多 E. 有胸腺小体 5. 称为嗜银性纤维的是: A. 网状纤维 B. 胶原纤维 C. 弹性纤维 D. 胶原原纤维 E. 胶原纤维束 6. 称为外周阻力血管的是: A. 大动脉 B. 中动脉 C. 小动脉 D. 中静脉 E. 小静脉 7. 骨骼肌纤维的横小管由： A. 滑面内质网形成 B. 粗面内质网形成

C. 高尔基复合体形成 D. 肌浆网形成 E. 肌膜向肌纤维内凹陷形成 8. 骨骼肌纤维收缩时，其肌节的变化是： A. 仅I带缩短 B. 仅A带缩短 C. 仅H带缩短 D. I带、A带均缩短 E. I带、H带均缩短 9. 胃粘膜之所以能抵御胃液等的侵蚀，是因为: A. 胃液中的酶只是一种酶原，尚无分解消化作用 B. 上皮细胞分泌含有酸性粘多糖的粘液，具有保护作用 C. 上皮中杯状细胞分泌保护性粘液 D. 上皮细胞间紧密连接与表面粘液层构成的胃粘液屏障作用 E. 以上都正确 10.将复层扁平上皮固定于基膜上： A. 紧密连接 B. 中间连接 C. 桥粒 D. 半桥粒 E. 缝隙连接 11.哪一项结构与扩大小肠的表面积无关？ A. 绒毛 B. 微绒毛 C. 小肠腺 D. 柱状细胞 E. 环形皱襞 12.哪一项不是变移上皮的特点？ A. 分布于大部分泌尿管道的腔面 B. 属于复层立方上皮 C. 表层的一个细胞可覆盖中间层的几个细胞 D. 上皮各处厚薄不一，因其与结缔组织的连接面常起伏不平 E. 上皮形态常随所在器官的功能状态而变化 13.哪一个器官的粘膜上皮内不含杯状细胞？ A. 胃 B. 空肠 C. 回肠 D. 结肠 E. 十二指肠 14.肺的呼吸部包括: A. 肺泡、肺泡囊、肺泡管、细支气管 B. 肺泡、肺泡囊、肺泡管、呼吸性细支气管 C. 肺泡、肺泡囊、呼吸性细支气管、终末细支气管 D. 肺泡、肺泡囊、呼吸性细支气管、细支气管

高中生物第三章胚胎工程第1节从受精卵谈起教案浙科版选修3

第一节从受精卵谈起 课标解 读重点 难点 1.说出受精、卵裂、囊胚、原肠胚、三胚层等概念。 2.简述动物胚胎发育的基本过程。1.动物胚胎发育的过程。(重点) 2.胚胎干细胞。(重难点) 受精作用 1.概念：成熟的精卵融合成为受精卵的过程。 2．场所：输卵管。 3．过程：精卵识别→精子附着于卵膜→精卵质膜融合。 4．结果：形成受精卵。 1．马的精子与牛的卵细胞可以正常结合吗？ 【提示】不可以。因二者不能相互识别。 胚胎发育的过程 1.动物个体发育的起点：受精卵。 2．受精卵进行的细胞分裂方式：有丝分裂。 3．过程：(如图示) (1)受精卵 (2)卵裂球：①组成：2～8个全能细胞 变小 特点：随着卵裂球数目的增加，细胞逐渐 ② (3)囊胚：①组成

2．哺乳动物胚胎发育早期所需营养都来自受精卵吗？ 【提示】进入子宫前来自受精卵，进入子宫后，由母体通过胎盘来提供。 1．卵裂球分裂的子细胞时期的每一个细胞均具有全能性。(√) 2．内细胞团的细胞是一种已分化的细胞。(×) 【提示】内细胞团的细胞未分化。 3．内胚层的细胞将分化为食道的上皮组织。(√) 4．原肠胚的中胚层逐渐分化为神经管。(×) 【提示】应为部分外胚层。 5．胚泡外表的一层扁平细胞将来发育成完整的胚胎。(×) 【提示】应为胚泡内部的细胞团。 受精作用及早期胚胎发育

【问题导思】 ①同种生物的精子与卵细胞靠什么识别？ ②受精作用的实质和意义是什么？ ③胚胎发育的过程主要有哪几个时期？各时期有何特点？ 1．受精作用 (1)概念 成熟的精卵融合成为受精卵的过程。 (2)场所 输卵管。 (3)过程 精卵识别物质基础精卵细胞表面有特异性相 互识别的蛋白 ↓ 精子附着于卵膜结构基础 精子有尾，能移动等 ↓ 精卵质膜融合 实质 卵核和精核相互融合，染 色体数目恢复到正常体细胞染色体数 (4)受精的标志和受精完成的标志 ①受精的标志：第二极体的形成。 ②受精完成的标志：雌雄原核融合形成受精卵。 1．受精时间：精子获能后，卵子达到减数第二次分裂的中期时。 2．受精实质：精卵细胞核的融合。 2．早期胚胎发育

《工程测试技术》实验指导书14页

《工程测试技术》实验指导书 目 录 实验一 电阻应变 片 的 原 理 及 应 用………………………………………………………………3 实 验 二 电 容 式 传 感 器 的 原 理 及 应 用……………………………………………………………8 实 验 三 光 纤 传 感 器 原 理 及 应 用…………………………………………………………………11 实 验 四 光 电 和 磁 电 传 感 器 原 理 及 应 用 (14) 实验一 电阻应变片的原理及应用 一、实验目的： 1. 了解金属箔式应变片的应变效应，单臂电桥工作原理和性能。 2. 比较半桥与单臂电桥的不同性能、了解其特点。 3. 了解全桥测量电路的优点。 二、实验设备： 双杆式悬臂梁应变传感器、托盘、砝码、数显电压表、±5V 电源、差动放大器、电压放大器、万用表（自备）。 三、实验原理： ㈠ 单臂电桥实验 电阻丝在外力作用下发生机械变形时，其电阻值发生变化，这就是电阻应变效应，描述电阻应变效应的关系式为 ε?=?k R R （1-1）

式中 R R ?为电阻丝电阻相对变化； k 为应变灵敏系数； l l ?=ε为电阻丝长度相对变化。 金属箔式应变片就是通过光刻、腐蚀等工艺制成的应变敏感组件。如图1-1所示，将四个金属箔应变片（R1、R2、R3、R4）分别贴在双杆式悬臂梁弹性体的上下两侧，弹性体受到压力发生形变，应变片随悬臂梁形变被拉伸或被压缩。 图1-1 双杆式悬臂梁称重传感器结构图 通过这些应变片转换悬臂梁被测部位受力状态变化，可将应变片串联或并联组成电桥。电桥的作用完成电阻到电压的比例变化，如图 1-2 所示 R6=R7=R8=R 为固定电阻，与应变片一起构成一个单臂电桥，其输出电压 R R R R E U ??+?? = 211/4 0 （1-2） E 为电桥电源电压； 式 1-2表明单臂电桥输出为非线性，非线性误差为%10021??? -=R R L 图 1-2 单臂电桥面板接线图 ㈡ 半桥性能实验 不同受力方向的两只应变片接入电桥作为邻边，如图1-3所示。电桥输出灵敏度提高，非线性得到改善，当两只应变片的阻值相同、应变数也相同时，半桥的输出电压为 R R E k E U ??=??= 220ε （1-3） 式中 R R ?为电阻丝电阻相对变化； k 为应变灵敏系数； l l ?= ε为电阻丝长度相对变化。 E 为电桥电源电压。 式 1-3表明，半桥输出与应变片阻值变化率呈线性关系。 图1-3 半桥面板接线图 ㈢全桥测量电路 全桥测量电路中，将受力性质相同的两只应变片接到电桥的对边，不同的接入邻

植物基因工程实验技术

植物基因工程实验技术
编者: 赵 燕
主审: 张学文
湖南农业大学植物科学实验教学中心
2007 年 4 月

前
言
基因工程是现代生物技术的核心, 也是现代分子生物学研究的重 要手段. 掌握基因工程技术对于生物技术专业及其它生物学相关专业 学生都很重要. 基因工程本身是由一系列分子生物学操作技术组成的系统性技 术体系,本实验指导侧重于 DNA 重组操作,将基因工程操作的常用 和核心技术组织起来, 以为我校生物技术本科生及有关专业研究生基 因工程实验提供简单而明确的指导. 为适应基因工程的飞速发展,一些生物技术公司匠心独运,开发 出专门的试剂盒,使一些复杂的实验操作简单化了.这对于实验者来 说自然是好事,但也使实验者动手胜于用脑.对于实验人员来说,一 定应知其然并知其所以然, 才会在实验中运用自己的知识予以创新性 的发展.期望本实验指导不成为实验中的教条.
编
者
2007 年 4 月
1

目
实验一 实验二 实验三 实验四 实验五 实验六 实验七 实验八 实验九 实验十 附录:
录
大肠杆菌的对照培养,单菌落的分离及菌种保存 ...............3 强碱法小量制备质粒 DNA.....................................................5 琼脂糖凝胶电泳......................................................................7 植物总 DNA 的提取,纯化和检测 ........................................9 DNA 的 PCR 扩增................................................................. 11 植物总 RNA 的分离 .............................................................15 RT-PCR..................................................................................17 体外重组分子的构建,筛选及检测.....................................21 植物表达载体的构建,筛选及检测.....................................22 植物遗传转化技术 ................................................................23 实验中常用的仪器与器皿 .....................................................24
2

组织学与胚胎学教案和讲稿

教案 授课时间月日至月日课时数 2 授课方式理论课√讨论课□习题课□实验课□上机课□技能课□其他□授课单元绪论、上皮组织 目的与要求1.掌握组织学与胚胎学的研究内容，并了解学习本门课程的目的及应注意的问题 2.了解组织学与胚胎学的研究方法，常用技术及其发展史与新进展。 3.了解腺细胞，腺上皮和腺的概念，外分泌腺的形态、结构、分类。 4.理解上皮组织的一般特点和分类，各种被覆上皮的结构特点、分布与功能意义 5.掌握上皮组织特殊结构的光镜、电镜结构特点、分布、功能意义。 重点与难点重点： 1.组织切片制作HE染色方法、原理；嗜酸性、嗜碱性、中性的含义； 2. 透射电镜的基本原理；电子密度高和电子密度低的含义。 3.被覆上皮的一般特点和分类。 4.上皮细胞游离面、侧面、基底面的特化结构及其光镜结构，电镜结构及其成分与功能。 难点：免疫细胞化学；荧光组织化学、原位杂交的原理；上皮细胞侧面连接。 主要内容1.组织切片制作方法，原理。 2.嗜酸性、嗜碱性、中性的含义，组织亲银性和嗜银性的含义。 3.介绍几种新型显微镜应用。 4.组织化学和细胞化学技术。 5.上皮组织的一般特点和分类。 6.被覆上皮：一般特点和分类。上皮的极性，单层扁平上皮，单层立方上皮，单层柱状上皮，假复层纤毛柱状上皮，变移上皮和复层扁平上皮的光镜结构，分布和功能。 7.上皮细胞游离面的微绒毛和纤毛的光镜，电镜结构特点和功能。侧面各种连接结构，特点、分布、功能意义。连接复合体。基底面的基膜光镜结构，电镜结构及其成分与功能，质膜内褶的电镜结构特点、分布及功能意义。 8.腺上皮：腺上皮、腺细胞和腺的概念，腺的发生。 教学方法手 段（教具） 多媒体教学与讲授相结合。 参考资料组织学与胚胎学石玉秀主编人民卫生出版社，1997 现代组织学成令忠主编上海科学技术文献出版社， 2003.2 思考题、作业1.何谓组织学,其研究内容包括哪些? 2.简述被覆上皮的分类及其光镜下的结构特征。 2.上皮细胞的侧面连接包括哪些？ 3.简述基膜的光、电镜结构与机能。

基因工程实验(答案)

——凯1.简述本学期从基因组DNA提取到重组质粒鉴定的实验流程？（实验题目的总结） 答：①基因组DNA的提取；②PCR扩增目的基因；③凝胶电泳分离纯化PCR扩增的DNA片段以及DNA的体外连接；④重组质粒的转化及转化子的筛选；⑤重组质粒的抽提；⑥重组质粒的酶切鉴定。 2.如何正确使用微量移液器？（自己写的） 答：①选取合适量程的移液器；②根据取液量设定量程；③安装（吸液）枪头；④按至第一档，将枪头垂直伸入液面下适当位置吸液；⑤按至第二档将液体打入容器；⑥弃掉枪头；⑦将量程调至最大，放回原处。 3.在琼脂糖凝胶电泳点样时，DNA通常和什么试剂混匀，其主要成分和作用是什么？ 答：loading Buffer。主要成分为溴酚蓝，二甲苯青和甘油。 溴酚蓝和二甲苯青起指示作用；甘油加大样品密度，从而沉降于点样孔中，以免浮出。 4.简述制作1%的琼脂糖凝胶电泳的操作步骤。（题目有歧义） 答：①取0.5g琼脂粉置于锥形瓶，量取50ml 1×TBE溶液于瓶中，微波炉加热至琼脂溶解； ②将移胶板放入胶室中，选取合适梳子垂直安插在移胶板上方，待琼脂降温至55℃下后，缓慢导入该胶室里；③量取合适量1×TBE溶液导入洗净的电泳槽，并正确插好电泳线；④等凝胶凝固后，将梳子垂直拔出；⑤点样；⑥轻放移胶板至电泳槽的合适位置；⑦打开电泳仪的开关，调好参数，开始电泳；⑧一定时间后，停止电泳，取出凝胶板，然后经BE染色放入成像系统显色、观察。 5.琼脂糖凝胶电泳中DNA分子迁移率受哪些因素的影响？（实验书P75） 答：①样品DNA的大小和构象；②琼脂糖浓度；③电泳电场；④温度；⑤缓冲液；⑥嵌入染料的存在与否； 6.在使用苯酚进行DNA抽提时应注意什么？（实验书P31） 答：注意不要吸取中间的变性蛋白质层。 7.在基因组DNA提取过程中常用酚、氯仿、异戊醇试剂，它们各有什么作用？ 答：酚——是蛋白质变性，抑制DNA酶的降解作用；氯仿——除去脂类，同时加速有机相与水相的分层；异戊醇——降低表面张力，从而减少气泡的产生。 8.提取DNA实验中，通常可选用哪些试剂沉淀DNA？ 答：冷的无水乙醇，冷的异丙醇，终浓度为0.1～0.25mol/L 的NaCl 9.简述在DNA提取实验中个试剂的作用（SDS，EDTA，酚/氯仿/异戊醇、无水乙醇，70%乙醇）。 答：SDS——破坏细胞膜，解聚核蛋白；EDTA——整合金属离子，抑制DNase活性；酚/氯仿/异戊醇——见第7题；无水乙醇——沉淀DNA；70%乙醇——洗涤DNA沉淀。 10.简述PCR扩增技术的原理及各种试剂的作用（Mg2+，dNTP，引物，DNA，缓冲液，Taq

《胚胎工程的应用及前景》教学设计

胚胎工程的应用及前景 课前预习 概念：是指将雌性动物的，或者通过及其他方式得到的胚胎，移植到同种的、相同的其他动物的体内，使之继续发育为新个体的技术。其中提供胚胎的个体叫供体，接受胚 胎的个体叫。 应用：胚胎移植是、、或体外受精等技术的最后一道“工序” 现状：在的胚胎移植中，技术方法更为简便、实用。 意义：可充分发挥个体繁殖潜力。供体主要职能只产生优良特性的胚胎，缩短繁殖 胚胎移植周期 胚胎移植成功与否关系到：供体和受体的 1供、受体的生理变化相同，为胚胎提供相同的生理环境 生理学基础 2早期胚胎没有与母体子宫建立组织联系，为提供可能 3受体对外来胚胎基本不发生，为胚胎的存活提供可能 4胚胎能与受体子宫建立正常的生理和组织联系，但其不受影响 1供、受体的选择和处理（使用激素进行处理、处理） 2 或人工受精 基本程序 3胚胎收集（冲卵）、检查（胚胎发育到或囊胚）、培养或保存（－196℃的液氮） 4胚胎移植：手术法（引出子宫和卵巢将其注入）；非手术法（用移植管将其送入子宫） 5移植后的检查（是否妊娠）等 概念：指采用方法将早期胚胎切割成2、4或8等份等，经移植获得双胎或多胎的技术。 仪器设备：和显微操作仪 1选择发育良好、形态正常的桑椹胚或囊胚，移入盛有的培养皿 操作程序 胚胎分割 2用分割针或分割刀切开胚胎，吸出半个，注入空或直接将移植给受体。分割囊胚时要将均等分割。此时还可用分割针分割，做胚胎DNA分 析。 局限：刚出生的动物体重偏低，毛色和斑纹上存在差异，的可能性有限。 概念：由或中分离出来的一类细胞。简称ES或EK细胞。 特点形态上：体积小、大、核仁明显 功能上：具有，即可分化为成年动物体任何一种组织细胞；在体外 胚胎干细胞可增殖而不发生；可冷冻保存；可进行遗传改造 1移植ES细胞修复坏死或退化部位，治愈糖尿病、肝(心)衰竭、等病症 意义 2ES细胞体外诱导分化，可培育 3ES细胞在牛黄酸、丁酰环腺苷酸等分化诱导因子作用下可向不同类型组织细胞 答案：A、自主学习： 早期胚胎体外受精生理状态雌性受体转基因核移植牛雌性优良生理状况生殖器官胚胎收集免疫排斥反应遗传物质同期发情超数排卵配种桑椹胚机械同卵实体显微镜操作液透明带裸半胚内细胞团滋养层性别鉴定同卵多胎早期胚胎原始性腺细胞核发育的全能性分化成骨不良人造组织器官分化 目标检测

基因工程实验考试试题(答案)

1.简述本学期从基因组DNA提取到重组质粒鉴定的实验流程？ 答：①基因组DNA的提取；②PCR扩增目的基因；③凝胶电泳分离纯化PCR扩增的DNA片段以及DNA的体外连接；④重组质粒的转化及转化子的筛选；⑤重组质粒的抽提；⑥重组质粒的酶切鉴定。 2.如何正确使用微量移液器？ 答：①选取合适量程的移液器；②根据取液量设定量程；③安装（吸液）枪头；④按至第一档，将枪头垂直伸入液面下适当位置吸液；⑤按至第二档将液体打入容器；⑥弃掉枪头；⑦将量程调至最大，放回原处。 3.在琼脂糖凝胶电泳点样时，DNA通常和什么试剂混匀，其主要成分和作用是什么？ 答：loading Buffer。主要成分为溴酚蓝，二甲苯青和甘油。 溴酚蓝和二甲苯青起指示作用；甘油加大样品密度，从而沉降于点样孔中，以免浮出。 4.简述制作1%的琼脂糖凝胶电泳的操作步骤。 答：①取0.5g琼脂糖置于锥形瓶，量取50ml 1×TBE溶液于瓶中，微波炉加热至琼脂糖溶解；②将移胶板放入胶室中，选取合适梳子垂直安插在移胶板上方，待琼脂降温至55℃下后，缓慢导入该胶室里；③量取合适量1×TBE溶液导入洗净的电泳槽，并正确插好电泳线； ④等凝胶凝固后，将梳子垂直拔出；⑤点样；⑥轻放移胶板至电泳槽的合适位置；⑦打开电泳仪的开关，调好参数，开始电泳；⑧一定时间后，停止电泳，取出凝胶板，然后经BE染色放入成像系统显色、观察。 5.琼脂糖凝胶电泳中DNA分子迁移率受哪些因素的影响？（实验书P75） 答：①样品DNA的大小和构象；②琼脂糖浓度；③电泳电场；④温度；⑤缓冲液；⑥嵌入染料的存在与否； 6.在使用苯酚进行DNA抽提时应注意什么？（实验书P31） 答：注意不要吸取中间的变性蛋白质层。 7.在基因组DNA提取过程中常用酚、氯仿、异戊醇试剂，它们各有什么作用？ 答：酚——是蛋白质变性，抑制DNA酶的降解作用；氯仿——除去脂类，同时加速有机相与水相的分层；异戊醇——降低表面张力，从而减少气泡的产生。 8.提取DNA实验中，通常可选用哪些试剂沉淀DNA？ 答：冷的无水乙醇、冷的异丙醇、终浓度为0.1～0.25mol/L 的NaCl 9.简述在DNA提取实验中个试剂的作用（SDS，EDTA，酚/氯仿/异戊醇、无水乙醇，70%乙醇）。 答：SDS——破坏细胞膜，解聚核蛋白；EDTA——整合金属离子，抑制DNase活性；酚/氯仿/异戊醇——见第7题；无水乙醇——沉淀DNA；70%乙醇——洗涤DNA沉淀。 10.简述PCR扩增技术的原理及各种试剂的作用（Mg2+，dNTP，引物，DNA，缓冲液，Taq DNA聚合酶）。 答:(1)利用半保留复制的原理，以待扩增的DNA为模板，通过一系列酶在体外引物介导下，

机械工程测试技术实验指导书

实验一 用“双踪示波比较法”测量简谐振动的频率 1． 实验目的 一、 了解“双踪示波比较法”测试未知信号频率的原理； 二、 学习“双踪示波比较法”测量简谐振动的频率； 三、 学习用 DASP 软件的频率计功能测试简谐振动的频率。 2． 实验原理 双踪示波比较法是采用双踪示波，同时看两个信号波形，其中一通道是已知频率的参考信号，另一通道是待测信号，通过对波形进行比较来确定简谐振动信号的频率。 双通道并行同步示波或采样信号，采用相同的采样频率f s, 所以，时间分辨率 1/S t f ?=相同，不同频率的正弦信号反映到波形上就是一个周期内的采样点数N 不同, 信号的频率为： 1f N t = ? 用光标读取已知频率为f 0参考信号的一个周期内的点数N1再读取待测信号的一个周期内的点数N2, 则被测信号的频率为： 1 02 x N f f N = 根据所测频率可以计算当前电机的转速：60x n f = (转/分钟) 3. 实验步骤 一） 、用双踪示波比较法测试简谐振动的频率 1、 开机进入 INV1601 型 DASP 软件的主界面，选择“双通道” 。进入双通道示波状态进行波形示 波。 2、 安装偏心激振电机，偏心激振电机的电源线接到调压器的输出端，把调速电机安装在简支梁中部，对简支梁产生一个频率未知的激振力，电机转速（强迫振动频率）可用调压器来改变，把调压器放在“60”档左右，具体调节以信号方便观察为准，注意调压器电压不可调的过高，以免烧坏电机。调好后在实验的过程中不要再改变电机转速。 3、 将 INV1601B 实验仪的内部信号源输出接到采集仪的第一通道（速度） 。将速度传感器布置在激振电机附近，速度传感器测得的信号接到 INV1601B 实验仪的第二通道速度传感器输入口上。 4、 INV1601B 实验仪功能选择设置旋钮置第二通道速度输入“速度”档。 5、 软件中“纵坐标尺度调整”选择“自动”档，以便观察波形；“两通道光标移动”选择“自动” ，可以分别对两路波形进行相关操作。 6、 采样频率可以使用“虚拟仪器库”内的“自动 SF 装置”设置。 7、 调节 INV1601B 实验仪信号源频率，振动稳定后，按鼠标左键，停下来读数，把光标移到第一通道一个波峰处，读取最大值所对应的点号 NC 值，记作' 1N ，向右移到相邻的峰值处读取相应的点号 NC 值，记作 ''1N ，第一通道正弦信号的一个周期内的点数 '''111N N N =-（移动过程中可使用“移动光标”悬浮窗中的图标来选取波峰点） 。

组织胚胎学教案

组织胚胎学教案 章节：第九章免疫系统 目的要求：掌握淋巴结、脾、胸腺的结构及血-胸腺屏障的结构。熟悉淋巴细胞再循环及其意义；单核吞噬细胞系统的组成和功能。了解淋 巴结内的淋巴通路。 教学内容：一、免疫细胞（10分钟） 二、淋巴组织（15分钟） 三、免疫器官（25分钟） 重点：淋巴结的结构与功能；脾的结构和功能；胸腺的结构及血-胸腺屏障的结构。 难点：脾血窦的结构。 授课单位：组织胚胎学教研室

时间 45ˊ 淋巴组织 （二）淋巴小结 教学内容 淋巴小结（1ymphoid nodu1e）是具有一定形态结构的密 集淋巴组织，呈圆形或卵圆形，小结内以B细胞为主；在抗原 刺激下，常产生一染色较淡的生发中心，又称反应中心，多由 分裂快的大、中淋巴细胞构成，其周围为较密集的小淋巴细胞。（三）淋巴索 淋巴索（1ympoid cord）为淋巴组织构成的条索状结构， 索内以B细胞为主。 三、免疫器官 （一）胸腺 1．胸腺的一般结构 胸腺是实质性器官，外包由结缔组织构成被膜：结缔组织 伸入胸腺实质形成小叶间隔。 2．胸腺的实质——胸腺小叶 胸腺的实质由许多小叶构成，每一小叶又可分为周边的皮 质和中央的髓质。 胸腺 （1）皮质：由上皮性网状细胞和网眼中大量密集的淋巴 备注

时间细胞、巨噬细胞等构成。 胸腺内的淋巴细胞又称胸腺细胞，主要分布在胸腺皮质内，约占胸腺淋巴细胞总数的85％。 （2）髓质：细胞成分与皮质相同，但上皮性网状细胞多而分布密集，淋巴细胞较少而分布稀疏。 胸腺皮质胸腺髓质 血-胸腺屏障：胸腺皮质的毛细血管及其周围的结构，具有屏障作用，称为血-胸腺屏障（blood-thymus barrier）。它由下 列结构组成： 教学内容 ①连续性毛细血管内皮。 ②完整的内皮基膜。 ③血管周隙，其内含有巨噬细胞。 ④上皮性网状细胞的基膜。 ⑤连续的上皮性网状细胞。 3．胸腺的功能 （1）分泌激素。 （2）培育T细胞。 （二）淋巴结 1．淋巴结的一般结构 淋巴结表面为由薄层致密结缔组织构成的被膜。被膜结缔组织伸入淋巴结内形成许多粗细不等的小梁。 淋巴结的实质由淋巴组织构成，可分为皮质和髓质两部分。 备注