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分子生物学Chapter 7 Prokaryotic RNA Transcription

Chapter 7 Prokaryotic RNA Transcription

Introduction

"Gene expression" means the production of a protein or a functional RNA from its gene. Several steps are required:

Transcription: A DNA strand is used as the template to synthesize a RNA strand, which is called the primary transcript.

RNA processing:This step involves modifications of the primary transcript to generate a mature mRNA (for protein genes) or a functional tRNA or rRNA.

For RNA genes (tRNA and rRNA), the expression is complete after a

functional tRNA or rRNA is generated. However, protein genes

require additional steps:

Transcription is a process in which one DNA strand is used as template to synthesize a complementary RNA. The following is an example:

Note that uracil (U) of RNA is paired with adenine (A) of DNA. There are a few different names for these nucleic acid strands. The DNA strand which serves as the template may be called "template strand", "minus strand", or "antisense strand". The other DNA strand may be termed "non-template strand", "coding strand", "plus strand", or "sense strand". Since both DNA coding strand and RNA strand are complementary to the template strand, they have the same sequences except that T in the DNA coding strand is replaced by U in the RNA strand.

Figure 7-1. Schematic illustration of transcription. (a) DNA before transcription. (b) During transcription, the DNA should unwind so that one of its strand can be used as template to synthesize a complementary RNA.

Growth of a nucleic acid strand is always in the 5' to 3' direction.

The entire transcription process should involve the following essential steps:

(i) Binding of polymerases to the initiation site. The DNA sequence

which signals the initiation of transcription is called the

promoter.Prokaryotic polymerases can recognize the promoter and

bind to it directly, but eukaryotic polymerases have to rely on other

proteins called transcription factors.

(ii) Unwinding (melting) of the DNA double helix (Figure 4-B-1). The

enzyme which can unwind the double helix is called

helicase. Prokaryotic polymerases have the helicase activity, but

eukaryotic polymerases do not. Unwinding of eukaryotic DNA is

carried out by a specific transcription factor.

(iii) Synthesis of RNA based on the sequence of the DNA template

strand.RNA polymerases use nucleoside triphosphates (NTPs) to

construct a RNA strand.

(iv) Termination of synthesis. Prokaryotes and eukaryotes use

different signals to terminate transcription. [Note: the "stop" codon in

the genetic code is a signal for the end of peptide synthesis, not the end

of transcription.]

Definition of terms:

Upstream of a Promoter: AWAY from Gene; opposite direction from

transcription

Downstream of a Promoter: INTO the Gene, same direction as

transcription

The numbering of base pairs in the promoter region is as follows. The

number increases along the direction of transcription, with "+1"

assigned for the initiation site. There is no "0" position. The base

pair just upstream of +1 is numbered "-1", not "0".

TRANSCRIPTION UNIT: contiguous stretch of DNA that encodes the sequence in the primary transcript (including the coding sequence, the

5’ leader, the 3’ trailer and spliced intervening sequences).

cis-REGULATORY ELEMENTS: DNA sequence elements,

linked to the gene, that regulate gene expression. Include promoters, enhancers, silencers, transcription termination signals, splicing signals, and sequences that regulate translation.

trans-FACTORS: proteins that bind to cis-regulatory

1. RNA Polymerase

Unlike eukaryotes, bacteria have a single type of RNA polymerase that catalyzes synthesis of mRNAs, rRNAs, and tRNAs encoded in the bacterial chromosome. The major form of this enzyme is composed of five subunits (Figure 7-3): two large subunits called β′ (156 kDa) and β (151 kDa), two copies of a smaller subunit called α (37 kDa), and one cop y of a subunit called σ70 (70 kDa). The different subunits have distinct functions:

? Interaction of the σ subunit with a promoter signals the polymerase to initiate transcription at a specific sequence in template DNA.

? The β and β′ subunits polymerize ribonucleoside triphosphates (NTPs) as directed by the template strand.

? The α subunits interact with regulatory proteins and, in some cases, with DNA to control how frequently RNA polymerase initiates transcription from a specific promoter.

In vitro binding studies with purified RNA polymerase and lac promoter sequences from promoter mutants that exhibit decreased lac-operon

expression showed that the enzyme has a greatly reduced affinity for the

mutant DNA. This finding indicates that the polymerase molecule contacts

bases in wild-type lac DN A when it binds to the promoter. Of the ≈3000 RNA polymerase molecules in an E. coli cell, about half are actively engaged in transcribing DNA into RNA at any one time in rapidly growing cells. Most of

the remainder are loosely associated with DNA, moving randomly along the

DNA until they encounter a promoter sequence.

Figure 7-3. Schematic representation of the major form of E. coli RNA polymerase bound to DNA. By convention, the transcription-initiation site is generally numbered +1. Base pairs extending in the direction of transcription

are said to be downstream of the start site; those extending in the opposite

direction are upstre am. The σ70 subunit binds to specific sequences near the

?10 and ?35 positions in the promoter. The α subunits lie close to the DNA in

the upstream direction. The β and β′ subunits associate with the start site.

The nucleotides used to extend a growing RNA chain are ribonucleoside triphosphates (NTPs). Two phosphate groups are released as pyrophosphate

(PP i) during the reaction. Strand growth is always in the 5' to 3'

direction.The first nucleotide at the 5' end retains its triphosphate group

(Figure 4-B-3).

Figure 4-B-3. Simplified presentation for the chain elongation. The vertical

line represents the pentose and the slanting line denotes the phosphodiester

bond. Bases are designated as N1, N2, etc.

Yeast RNA polymerase has grooves that could be binding sites for nucleic acids. The pink beads show a possible path for DNA that is ~25 ? wide and 5-10 ? deep. The green beads show a narrower channel.

RNA polymerase: synthesis of RNA strand from DNA template.

1. Requires no primer for polymerization

2. Requires DNA for activity and is most active with a double-stranded DNA as

template. 5’ →3’ synthesis

(NMP)n + NTP → (NMP)n+1 + PPi

3. Require Mg2+ for RNA synthesis activity

4. Different from organism to organism

5. E. coli has a single DNA-directed RNA polymerase that synthesizes all types of

RNA.

v E. coli RNA polymerase:

v Holoenzyme: a2b b’sw for initiation

v Core enzyme: a2b b’w for elongation

Eubacteria RNA pol

The cylindrical channel in the enzyme complex can bind directly to 16 bp of DNA. The whole polymerase binds over 60 bp.

? RNA synthesis rate: 40 nt per second at 37o C

E. coli subunit?polymerase:

?Two identical subunits in the core enzyme

?Encoded by the rpoA gene

?Required for core protein assembly

?May play a role in promoter recognition

E. coli polymerase: b subunit

?Encoded by rpoB gene.

?The catalytic center of the RNA polymerase

?Rifampicin ：bind to the β subunit, and inhi bit transcription initiation.

Mutation in rpoB gene can result in rifampicin resistance. ?Streptolydigins：resistant mutations are mapped to rpoB gene as well.

Inhibits transcription elongation but not initiation.

3. subunit may contain two domains responsible? for transcription initiation

and elongation

E. coli polymerase: b’ subunit

?Encoded by the rpo C gene .

?Binds two Zn 2+ ions and may participate in the catalytic function of the polymerase

Heparin：’ subunit and inhibits transcription in vitro.?binds to the

Heparin competes with DNA for binding to the polymerase.

3. ’ subunit may be responsible for? binding to the template DNA .

E. coli polymerase: s factor

?s factor is critical in promoter recognition, by decreasing the affinity of the core enzyme for non-specific DNA sites (104) and increasing the affinity for the corresponding promoter

?s factor is released from the RNA pol after initiation (RNA chain is 8-9 nt) ?Less amount of s factor is required in cells than that of the other subunits of the RNA pol.

2.Initiation of Transcription

Promoter is the DNA region where the transcription initiation takes place. In prokaryotes, the sequence of a promoter is recognized by the Sigma (s) factor of the RNA polymerase.

vAfter the polymerase transcribes approximately 10 base pairs, the σ70 subunit is released. Consequently the σ70 subunit acts as an initiation factor required for transcription initiation, but not for RNA-strand elongation once initiation has taken place.

v The form of the polymerase that continues transcribing, consisting of the β′, β, and two α subunits, is called the core polymerase. The form of the polymerase that also contains the σ70 subunit and can initiate transcription is called the holoenzyme Promoters recognized by E. coli RNA po lymerase containing σ70

Structure of Promoter: ... [Lod3, 11-9; Lod4, 10-9 part]

1. Purine at +1

2. TATAAT (TATA box) at -10; (Note that the promoter is rich in A and T. The AT pair involves two hydrogen bonds whereas the CG pair involves three hydrogen bonds. Therefore, AT pairs are easier to separate)

3. Spacer Region (16-19 bases);

4. TTGACA at -35

Evidence that this is the Important Structure:

Consensus Sequence: compare DNA sequences of many promoters

Promoter Mutations:

Up: stronger Promoter; Down: weaker promoter

Mutational changes fit well with Consensus Sequence, and are mainly in -10 and -35 regions

Evidence that this is the important Structure :

Consensus Sequence: compare DNA sequences of many promoter

Promoter Mutations:

Up: stronger Promoter; Down: weaker promoter

Mutational changes fit well with Consensus Sequence, and are mainly in -10 and -35 regions

Evidence for DNA Polymerase binding to Promoter:

DNA footprinting: sequencing gel analysis of fragments generated by DNase I digestion with and without Protein bound

-10 sequence (Pribnow box)

6 bp sequence which is centered at around the –10 position (Pribnow, 1975).

A consensus sequence of TATAAT

The first two bases(TA) and the final T are most highly conserved among other E.

coli promoters

This hexamer is separated by 5 to 8 bp from position +1, and the distance is critical

DNA unwinding is initiated at promoter by the polymerase

-35 sequence: enhances recognition and interaction with the polymerase s factor A conserved hexamer sequence around position –35

A consensus sequence of TTGACA

The first three positions (TTG) are the most conserved among E. coli promoters. Separated by 16-18 bp from the –10 box in 90% of all promoters

?A purine in 90% of all genes

?Often, there are C and T bases on either side of the start site nucleotide (i.e. CGT or CAT)

Steps in Initiation once a Tight Complex is formed:

HoloRNAPol binds tightly to Promoter: Tight binary complex vSigma recognizes Promoter sequences; enzyme covers ~75 bp of DNA

HoloRNAPol catalyzes DNA strand opening: Open binary complex vOnly about 9 bp of DNA are unwound ...

HoloRNAPol repeatedly synthesizes 2-9 bases of RNA, which are released:

3. Elongation Process

catalyzed by CoreRNAPol ... about 100 nucs/sec (vs 105 for Replication)

Similar to DNA synthesis but no Primer is required ... no Exonuclease activity:

DNA + 4 rNTPs --> DNA + RNA + PPi

RNA has ppp at its 5' end ... [Lod3, 4-20; Lod4, 4-15]

RNA polymerase structure changes during Elongation:

CoreRNAPol initially 35 bp in length ... 35 x 3.4 = 120 ? ... 3.5 DNA turns

Length shrinks at 9 RNA nucleotides are synthesized ... to about 27 bp = 90 ? Length springs back to 35 bp => Enzyme ratchets down the DNA, ala a slinky

vσFactor is released to form a ternary complex of the pol-DNA-RNA (newly synthesized), causing the polymerase to progress along the DNA (promoter clearance)

v Transcription bubble (unwound DNA region, ~ 17 bp) moves along the DNA with RNA polymerase which unwinds DNA at the front and rewinds it at the rear v3’ part of RNA forms hybrid helix (ca. 12bp) with antisense DNA strand.

v The E. coli polymerase moves at an average rate of ~ 40 nt per sec, depending on the local DNA sequence.

4. Termination Process ... Rho-dep and Rho-indep

Termination of transcription occurs when CoreRNAPol encounters a Terminator or Termination Site (t)

Termination sites in bacteria are of 2 types:

4.1 Rho-independent Termination Sites:

These are characterized by the RNA structure and involve no known Protein or other factors. The structure is a G,C-rich Stem-Loop ending in a run of U's

The Stem-Loop is thought to slow down CoreRNAPol, and the weak basepairing in the U region of the RNA to the DNA template releases the RNA. CoreRNAPol is then released, to again hop onto DNA (loose binding complex).

The Rho-independent termination signal is a stretch of 30-40 bp sequence, consisting of many GC residues followed by a series of T ( "U" in the transcribed RNA). The resulting RNA transcript will form a stem-loop structure to terminate transcription.

Figure 7-5. The stem-loop structure of the RNA transcript as a termination signal for the transcription of the trp operon.

4.2 Rho-dependent Termination Sites:

The less common of the two types of sites, these sites require the Protein factor called Rho, isolated via its property to terminate otherwise very long RNA

Rho sites are characterized only by high-C, low-G regions

Rho can bind RNA and, using ATP as energy, can move along the RNA. It is thought to terminate by "catching" CoreRNAPol which has paused at a Rho termination site, and then catalyzes unwinding and release of the RNA from the DNA.

Much, however, is not yet understood here, eg why only Rho sites if only pausing of CoreRNAPol is needed?

Rho-dependent mechanism

Rho is a ~ 50 kD protein, involved in bout half of E. coli transcriptional terminations. It has been well established that six Rho proteins form a hexamer to terminate transcription, but the precise mechanism is not clear. Experiments suggest that two components are essential: (i) the upstream Rho loading site and (ii) the downstream termination site. The Rho hexamer first binds to the RNA transcript at the upstream site which is 70-80 nucleotides long and rich in C residues. Upon binding, the Rho hexamer moves along the RNA in the 3' direction. If movement of the polymerase is slow, the Rho hexamer will catch up and terminate the transcription at the downstream termination site. Rho has ATPase activity which can induce release of the polymerase from DNA.

动火作业管理规范测答案

检维修、动火、进入受限容器特殊作业管理规范测试姓名：成绩：一、填空（每题5分共100分） 1、动火作业前，应辨识（），进行（），采取（），必要时编写（）。 2、凡是没有办理（），没有落实（）或安全工作方案，未设现场（）以及安全工作方案有变动且未经批准，禁止动火。 3、动火作业许可证是动火作业现场操作依据，只限同类介质、同一设备、指定的措施和时间范围内使用，不得（）、（）。 4、在带有可燃、有毒介质的容器、设备和管线上不允许动火。确属生产需要应动火时，应制定可靠的（）及（）后方可动火。 5、企业应结合实际情况，对动火作业实行（） 6、申请动火作业前，作业单位应针对（）、（）、（）等方面进行风险评估。 7、动火作业过程中应严格按照（）或（）的要求进行作业。 8、动火作业过程中，（）硬件收作业现场。动火监护人发生变化需经批准。 9、遇有五级以上风不应进行室外（），遇六级以上风应停止室外（） 10、动火作业申请人是动火（），负责提出动火作业申请，（）作业许可证，（）作业安全措施，（）动火作业，并对作业安全措施的有效性和可靠性负责。 11、动火前气体检测时间距动火时间不应超过（）分钟。 12、动火作业前，应核对作业区与活动火点（）浓度进行检测。

13、高处动火应采取防止火花溅落措施，并应在火花可能溅落的部位安排（） 14、在埋地管线操作坑内进行动火作业的人员应系阻燃或不阻燃材料的（）。 15、带压不置换动火作业是（）动火作业，应严格控制。 16、严禁在（）以及设备管道等腐蚀情况下进行带压不置换动火。 17、严禁在（）气管道等可能存在中毒危险环境下进行带压不置换动火。 18、如动火作业中断超过（）分钟，继续动火前，（）、（）应重新确认安全条件。 19、动火作业结束后，应清理（），解除相关隔离设施，东或监护人留守现场确认无任何火源和隐患后，申请人与批准人关闭动火作业证。 20、在动火过程中，发现（）动火安全时（）有权终止动火。二、判断题 1、受限空间作业管理由总经理负责总体协调。（） 2、受限空间的有害环境中空气的氧含量可以低于18%或超过 25%。（） 3、作业前，必须将作业的受限空间与其他空间、管道等进行可靠隔离。并视空间情况进行清理、清洗、置换、通风等，可能存在有机物的受限空间，必须检测硫化氢、甲烷、一氧化碳、二氧化碳气体浓度。（） 4、受限空间作业时可根据受限空间作业情况，安排作业人员定时轮换，无需在受限空间外部设监护人。（） 5、进入受限空间作业人员必须佩戴好规定的劳动防护用品，如安全

现代分子生物学_复习笔记完整版.doc

现代分子生物学复习提纲第一章绪论第一节分子生物学的基本含义及主要研究内容 1 分子生物学Molecular Biology的基本含义 ?广义的分子生物学：以核酸和蛋白质等生物大分子的结构及其在遗传信息和细胞信息传递中的作用为研究对象，从分子水平阐明生命现象和生物学规律。 ?狭义的分子生物学：偏重于核酸（基因）的分子生物学，主要研究基因或DNA的复制、转录、表达和调控等过程，也涉及与这些过程相关的蛋白质和酶的结构与功能的研究。 1.1 分子生物学的三大原则 1) 构成生物大分子的单体是相同的 2) 生物遗传信息表达的中心法则相同 3) 生物大分子单体的排列（核苷酸、氨基酸）的不同 1.3 分子生物学的研究内容 ●DNA重组技术（基因工程） ●基因的表达调控 ●生物大分子的结构和功能研究(结构分子生物学） ●基因组、功能基因组与生物信息学研究第二节分子生物学发展简史 1 准备和酝酿阶段 ?时间：19世纪后期到20世纪50年代初。 ?确定了生物遗传的物质基础是DNA。 DNA是遗传物质的证明实验一：肺炎双球菌转化实验 DNA是遗传物质的证明实验二：噬菌体感染大肠杆菌实验 RNA也是重要的遗传物质-----烟草花叶病毒的感染和繁殖过程 2 建立和发展阶段 ?1953年Watson和Crick的DNA双螺旋结构模型作为现代分子生物学诞生的里程碑。 ?主要进展包括： ?遗传信息传递中心法则的建立 3 发展阶段 ?基因工程技术作为新的里程碑，标志着人类深入认识生命本质并能动改造生命的新时期开始。 ? 第三节分子生物学与其他学科的关系思考 ?证明DNA是遗传物质的实验有哪些？ ?分子生物学的主要研究内容。 ?列举5～10位获诺贝尔奖的科学家，简要说明其贡献。

分子生物学第三章习题

1、有关RNA转录合成的叙述，其中错误的是？。 A、转录过程RNA聚合酶需要引物Ｂ、转录时只有一股DNA作为合成RNA的模板Ｃ、ＲＮＡ链的生长方向是５`→3` D、所有真核生物RNA聚合酶都不能特异性地识别promoter 2、以下有关大肠杆菌转录的叙述，哪一个是真确的？。 A、-35区和-10区序列的间隔序列是保守的 B、-35区和-10区序列的距离对于转录效率非常重要 C、转录起始位点的序列对于转录效率不重要 D、-10区序列通常正好位于转录起始位点上游10bp处 3、以DNA为模板，RNA聚合酶作用时，不需要。 A、NTP B、dNTP C、ATP D、Mg2+/Mn2+ 4、关于外显子与内含子的叙述，真确的是。 A、外显子是不表达成蛋白质的序列 B、内含子在基因表达过程中不被转录 C、内含子在基因组中没有任何功能 D、真核生物的外显子往往被内含子隔开 5、核生物mRNA的poly（A）尾巴。 A、是运送到细胞质之后才加工接上的 B、先切除部分3`端的部分核苷酸然后加上去的 C、可直接在初级转录产物的3`—OH末端加上去

D、由模板DNA上聚poly（T）序列转录生成 6、关于转录的序列，真确的事。 A、以DNA为模板 B、以RNA为模板 C、既可以用RNA为模板，也可以用DNA作为模板 D、需要逆转录酶的参与 7、真核生物转录过程中RNA链延伸的方向是。 A、5`→3` B、3`→5` C、N端→C端 D、C端→N端 8、大肠杆菌转录生成mRNA是。 A、hnRNA B、半衰期普遍比真核生物mRNA长 C、只能编码一个多肽 D、多顺反子 9、真核生物mRNA转录后加工不包括。 A、加CCA-OH B、5`端加“帽子结构 C、3`端加poly D、内含子的剪接 10、以下对DNA聚合酶和RNA聚合酶的叙述中，真确的是。 A、RNA聚合酶的作用需要引物 B、两种酶催化新链的延伸方向都是5`→3` C、DNA聚合酶能以RNA作模板合成DNA D、RNA聚合酶用NDP作原料 11、内含子是。

中断管理函数

中断管理函数 CM3内核支持256个中断，其中包含了16个内核中断和240个外部中断，并且具有256级的可编程中断设置。但STM32并没有使用CM3内核的全部东西，而是只用了它的一部分。STM32有76个中断，包括16个内核中断和60个可屏蔽中断，具有16级可编程的中断优先级。而我们常用的就是这60个可屏蔽中断，所以我们就只针对这60个可屏蔽中断进行介绍。在MDK内，与NVIC相关的寄存器，MDK为其定义了如下的结构体： typedef struct { vu32 ISER[2]; u32 RESERVED0[30]; vu32 ICER[2]; u32 RSERVED1[30]; vu32 ISPR[2]; u32 RESERVED2[30]; vu32 ICPR[2]; u32 RESERVED3[30]; vu32 IABR[2]; u32 RESERVED4[62]; vu32 IPR[15]; } NVIC_TypeDef; STM32的中断在这些寄存器的控制下有序的执行的。了解这些中断寄存器，你才能方便的使用STM32的中断。下面重点介绍这几个寄存器： ISER[2]：ISER全称是：Interrupt Set-Enable Registers，这是一个中断使能寄存器组。上面说了STM32的可屏蔽中断只有60个，这里用了2个32位的寄存器，总共可以表示64个中断。而STM32只用了其中的前60位。ISER[0]的

bit0~bit31分别对应中断0~31。ISER[1]的bit0~27对应中断32~59；这样总共60个中断就分别对应上了。你要使能某个中断，必须设置相应的ISER位为1，使该中断被使能(这里仅仅是使能，还要配合中断分组、屏蔽、IO口映射等设置才算是一个完整的中断设置)。具体每一位对应哪个中断，请参考 stm32f10x_nvic..h里面的第36行处。 ICER[2]：全称是：Interrupt Clear-Enable Registers，是一个中断除能寄存器组。该寄存器组与ISER的作用恰好相反，是用来清除某个中断的使能的。其对应位的功能，也和ICER一样。这里要专门设置一个ICER来清除中断位，而不是向ISER写0来清除，是因为NVIC的这些寄存器都是写1有效的，写0是无效的。具体为什么这么设计，请看《CM3权威指南》第125页，NVIC概览一章。 ISPR[2]：全称是：Interrupt Set-Pending Registers，是一个中断挂起控制寄存器组。每个位对应的中断和ISER是一样的。通过置1，可以将正在进行的中断挂起，而执行同级或更高级别的中断。写0是无效的。 ICPR[2]：全称是：Interrupt Clear-Pending Registers，是一个中断解挂控制寄存器组。其作用与ISPR相反，对应位也和ISER是一样的。通过设置1，可以将挂起的中断接挂。写0无效。 IABR[2]：全称是：Active Bit Registers，是一个中断激活标志位寄存器组。对应位所代表的中断和ISER一样，如果为1，则表示该位所对应的中断正在被执行。这是一个只读寄存器，通过它可以知道当前在执行的中断是哪一个。在中断执行完了由硬件自动清零。 IPR[15]：全称是：Interrupt Priority Registers，是一个中断优先级控制的寄存器组。这个寄存器组相当重要！STM32的中断分组与这个寄存器组密切相关。IPR寄存器组由15个32bit的寄存器组成，每个可屏蔽中断占用8bit，这样总共可以表示15*4=60个可屏蔽中断。刚好和STM32的可屏蔽中断数相等。IPR[0]的[31~24]，[23~16]，[15~8]，[7~0]分别对应中中断3~0，依次类推，总共对应60个外部中断。而每个可屏蔽中断占用的8bit并没有全部使用，而是只用了高4位。这4位，又分为抢占优先级和子优先级。抢占优先级在前，子优先级在后。而这两个优先级各占几个位又要根据SCB->AIRCR中中断分组的设置来决定。这里简单介绍一下STM32的中断分组：STM32将中断分为5个组，组0~4。该分组的设置是由SCB->AIRCR寄存器的bit10~8来定义的。具体的分配关系如下表所示：

作业中断再展开规定

1 目的本文件规定了作业中断的界定，在重新展开生产前的首件产品进行鉴定的控制要求，工作程序和质量职责，确保每个操作工对产品加工要求进一步明确，提高批次产品的合格率。 2 适用范围本文件适用于本厂对作业中断重新再展开的控制要求。 3 职责 3.1 质量管理部负责对作业中断再展开后首件产品实施鉴定。 3.2 生产技术部参与首件产品的鉴定。 4 工作程序 4.1 作业中断的界定： 1）生产调整，产品品种更换； 2）更换工装； 3）发生设备维修后； 4）当班正式开展生产前； 5）作业中断4小时以上时等。为确保产品满足客户要求和符合标准，必须对作业中断再展开的首件产品按规定程序进行鉴定，不经首件鉴定的产品，不准成批生产。 4.2 对每种产品，均由生产技术部根据合同要求、有关标准编制相应的作业指导书和检验标准的具体要求，并发放到相关人员。 4.3 在批量生产前，先制作一件产品（首件）交质检员确认，生产过程中严格要求按照工艺文件的要求进行生产，经过各道工序加工和工序检验后，按出厂要求完成首件产品的生产。 4.4 由质量管理部负责会同生产技术部部门人员按最终检验指导书、检验标准、客户确认样等对首件产品进行鉴定，鉴定结束填写《首件产品检验记录》，鉴定记录由质量管理部保存。 4.5首件鉴定内容： A、工艺文件是否完整、正确，并能指导生产。 B、产品造型结构是否合理、适合批量生产。 C、生产工艺安排是否合理可行。 D、首件产品是否符合合同、客户确认样及安全标准要求。 4.6 经鉴定合格的首件样品，由质检员标示“S”，由各车间保存至当班生产结束后移工，作为各工序检验员检验产品的依据。 4.7在首件产品鉴定时，发现产品不能满足技术、质量、客户的要求时，则作为不合格品处理，并依据不合格品控制程序执行。 4.8鉴定时发现不合格应分析原因，找出解决的办法并实施纠正或纠正措施，当需对工艺文件等技术文件实施更改时，应执行《文件控制程序》的规定要求。 4.8 本文件涉及到的记录由质量管理部执行《记录控制程序》的规定要求。。 5 相关记录 5.1《首件检验记录》

中断异常处理流程

计算机体系结构中,异常或者中断是处理系统中突发事件的一种机制，几乎所有的处理器都提供这种机制。异常主要是从处理器被动接受的角度出发的一种描述，指意外操作引起的异常。而中断则带有向处理器主动申请的意味。但这两种情况具有一定的共性，都是请求处理器打断正常的程序执行流程,进入特定程序的一种机制。若无特别说明，对“异常”和“中断”都不作严格的区分。本文结合经过实际验证的代码对ARM９中断处理流程进行分析，并设计出基于S3Ｃ２４1０芯片的外部中断处理程序。 1.异常中断响应和返回系统运行时，异常可能会随时发生。当一个异常出现以后，ARM微处理器会执行以下几步操作： 1) 将下一条指令的地址存入相应连接寄存器ＬR,以便程序在处理异常返回时能从正确的位置重新开始执行。 2）将ＣPSR复制到相应的SPＳR中。 3）根据异常类型,强制设置CPSR的运行模式位。 4) 强制PC从相关的异常向量地址取下一条指令执行，从而跳转到相应的异常处理程序处。这些工作是由ＡRM内核完成的,不需要用户程序参与。异常处理完毕之后，ARM微处理器会执行以下几步操作从异常返回： 1）将连接寄存器ＬR的值减去相应的偏移量后送到PC中。 2)将SPSR复制回CPSR中。 3) 若在进入异常处理时设置了中断禁止位,要在此清除。这些工作必须由用户在中断处理函数中实现。为保证在ARＭ处理器发生异常时不至于处于未知状态，在应用程序的设计中,首先要进行异常处理。采用的方式是在异常向量表中的特定位置放置一条跳转指令,跳转到异常处理程序。当ARＭ处理器发生异常时,程序计数器ＰC会被强制设置为对应的异常向量,从而跳转到异常处理程序。当异常处理完成以后,返回到主程序继续执行。可以认为应用程序总是从复位异常处理程序开始执行的,因此复位异常处理程序不需要返回。 2.异常处理程序设计 2．1 异常响应流程

分子生物学与基因工程主要知识点

分子生物学与基因工程复习重点第一讲绪论 1、分子生物学与基因工程的含义从狭义上讲，分子生物学主要是研究生物体主要遗传物质-基因或DNA的结构及其复制、转录、表达和调节控制等过程的科学。基因工程是一项将生物的某个基因通过载体运送到另一种生物的活体细胞中，并使之无性繁殖和行使正常功能，从而创造生物新品种或新物种的遗传学技术。 2、分子生物学与基因工程的发展简史，特别是里程碑事件，要求掌握其必要的理由上个世纪50年代，Watson和Crick提出了的DNA双螺旋模型； 60年代，法国科学家Jacob和Monod提出了的乳糖操纵子模型； 70年代，Berg首先发现了DNA连接酶，并构建了世界上第一个重组DNA分子； 80年代，Mullis发明了聚合酶链式反应（Polymerase Chain Reaction，PCR）技术； 90年代，开展了“人类基因组计划”和模式生物的基因组测序，分子生物学进入“基因组时代”；目前，分子生物学进入了“后基因组时代”或“蛋白质组时代”。 3、分子生物学与基因工程的专业地位与作用：从专业基础课角度阐述对专业课程的支撑作用第二讲核酸概述 1、核酸的化学组成（图画说明） 2、核酸的种类与特点：DNA和RNA的区别（1）DNA含的糖分子是脱氧核糖，RNA含的是核糖；（2）DNA含有的碱基是腺嘌呤（A）、胞嘧啶（C）、鸟嘌呤（G）和胸腺嘧啶（T），RNA含有的碱基前3个与DNA完全相同，只有最后一个胸腺嘧啶被尿嘧啶（U）所代替；（3）DNA通常是双链，而RNA主要为单链；

（4）DNA的分子链一般较长，而RNA分子链较短。 3、DNA作为遗传物质的直接和间接证据；间接：（1）一种生物不同组织的细胞，不论年龄大小，功能如何，它的DNA含量是恒定的，而生殖细胞精子的DNA含量则刚好是体细胞的一半。多倍体生物细胞的DNA含量是按其染色体倍数性的增加而递增的，但细胞核里的蛋白质并没有相似的分布规律。（2）DNA在代谢上较稳定。（3）DNA是所有生物的染色体所共有的，而某些生物的染色体上则没有蛋白质。（4）DNA通常只存在于细胞核染色体上，但某些能自体复制的细胞器，如线粒体、叶绿体有其自己的DNA。（5）在各类生物中能引起DNA结构改变的化学物质都可引起基因突变。直接：肺炎链球菌试验、噬菌体侵染实验 4、DNA的变性与复性：两者的含义与特点及应用变性：它是指当双螺旋DNA加热至生理温度以上（接近100oC）时，它就失去生理活性。这时DNA双股链间的氢键断裂，最后双股链完全分开并成为无规则线团的过程。简而言之，就是DNA从双链变成单链的过程。增色效应：它是指在DNA的变性过程中，它在260 nm的吸收值先是缓慢上升，到达某一温度后即骤然上升的效应。复性：它是指热变性的DNA如缓慢冷却，已分开的互补链又可能重新缔合成双螺旋的过程。复性的速度与DNA的浓度有关，因为两互补序列间的配对决定于它们碰撞频率。DNA复性的应用-分子杂交：由DNA复性研究发展成的一种实验技术是分子杂交技术。杂交可发生在DNA和DNA或DNA与RNA间。 5、Tm的含义与影响因素 Tm的含义：是指吸收值增加的中点。影响因素： 1）DNA序列中G + C的含量或比例含量越高，Tm值也越大（决定性因素）；2）溶液的离子强度 3）核酸分子的长度有关：核酸分子越长，Tm值越大

现代分子生物学第3版【第三章】课后习题答案

第3章生物信息的传递（上）——从DNA到RNA 一、什么是编码链？什么是模板链？基因转录过程中，与mRNA序列相同的DNA链称为编码链（有意义链），另一条根据碱基互补原则指导mRNA合成的DNA链称为模板链（反义链）。二、简述RNA转录的概念及基本过程。 1、在基因表达过程中，拷贝出一条与DNA链序列完全相同（除了T→U之外）的RNA 单链的过程称为转录（transcription），是基因表达的核心步骤。 2、转录的基本过程包括：模板识别——RNA聚合酶与DNA启动子结合；转录起始——结合处DNA解链形成转录泡，形成第一个核苷酸键；通过启动子——从转录起始到形成9个核苷酸短链；转录延伸——RNA聚合酶释放σ因子，新生RNA链不断延长；转录终止——出现终止子，RNA聚合酶及新生RNA链解离释放。三、大肠杆菌的RNA聚合酶有哪些组成成分？各个亚基的作用如何？亚基亚基数组分功能 α 2 核心酶核心酶组装，启动子识别 β 1 核心酶 β和β’共同形成RNA合成的催化中心β’ 1 核心酶 ω 1 核心酶未知 σ 1 即σ因子，参与形成全酶模板链的选择，转录的起始四、什么是封闭复合物、开放复合物以及三元复合物？ 1、转录中DNA模板的识别阶段，RNA聚合酶全酶识别启动子并与之可逆性结合，形成封闭复合物，此时DNA链仍处于双链状态。 2、伴随着DNA构象上的重大变化，RNA聚合酶全酶所结合的DNA序列中有一小段双链被解开，此时封闭复合物转变为开放复合物。 3、开放复合物与最初的两个NTP相结合，并在二者之间形成磷酸二酯键，此时由RNA 聚合酶、DNA和新生RNA短链组成了三元复合物。五、简述σ因子的作用。特异的转录起始位点有利于转录的真实性，RNA的合成是在模板DNA的启动子位点上起始的，这个任务靠σ因子完成——只有带σ因子的RNA聚合全酶才能专一地与DNA 的启动子结合，并选择其中一条链作为模板，合成RNA链。σ因子的作用在于帮助转录起始，一旦转录开始，它就脱离了起始复合物，而由核心酶负责RNA链的延伸。六、什么是Pribnow box？它的保守序列是什么？原核生物中位于转录起始点上游-10区的TATA区，又称为-10区；Pribnow box的保守序列是TATAAT。（附：功能——RNA聚合酶的σ因子与之特异性结合使转录得以起始。）七、什么是上升突变？什么是下降突变？ 1、上升突变：基因的启动子序列上发生的、增强结构基因转录水平的突变。（主要是增加Pribnow区共同序列的同一性，例如TATAAT→AATAAT） 2、下降突变：基因的启动子序列上发生的、减弱结构基因转录水平的突变。八、简述原核生物和真核生物mRNA的区别。 1、半衰期：原核生物mRNA半衰期较短，真核生物mRNA半衰期较长。 2、顺反子类型：原核生物mRNA为多顺反子，真核生物mRNA为单顺反子。

中断问题(详解)

概念：引起CPU中断的根源，称为中断源。中断源向CPU提出的中断请求。CPU暂时中断原来的事务A，转去处理事件B。对事件B处理完毕后，再回到原来被中断的地方（即断点），称为中断返回。实现上述中断功能的部件称为中断系统（中断机构）。 80C51的中断系统有5个中断源，2个优先级，可实现二级中断嵌套（就是可以在嵌套过程中再次响应嵌套）。中断源 1、INT0（P3.2），外部中断1。可由IT0(TCON.0)选择其为低电平有效还是下降沿有效。当CPU检测到P3.2引脚上出现有效的中断信号时，中断标志IE0(TCON.1)置1，向CPU 申请中断。 2、INT1（P3.3），外部中断2。可由IT1(TCON.2)选择其为低电平有效还是下降沿有效。当CPU检测到P3.3引脚上出现有效的中断信号时，中断标志IE1(TCON.3)置1,向CPU 申请中断。 3、TF0（TCON.5），片内定时/计数器T0溢出中断请求标志。当定时/计数器T0发生溢出时，置位TF0，并向CPU申请中断。 4、TF1（TCON.7），片内定时/计数器T1溢出中断请求标志。当定时/计数器T1发生溢出时，置位TF1，并向CPU申请中断。 5、RI（SCON.0）或TI（SCON.1），串行口中断请求标志。当串行口接收完一帧串行数据时置位RI或当串行口发送完一帧串行数据时置位TI，向CPU申请中断。中断请求标志 1、TCON的中断标志 IT0（TCON.0）：外部中断0触发方式控制位。 ●当IT0=0时：为电平触发方式。 ●当IT0=1时：为边沿触发方式（下降沿有效）。 IE0（TCON.1）：外部中断0中断请求标志位。 IT1（TCON.2）：外部中断1触发方式控制位。 IE1（TCON.3）：外部中断1中断请求标志位。

作业风险分析及控制措施

动火作业风险分析及控制措施序号风险分析安全措施 ①将动火设备、管道内的物料清洗、置换，经分析合格。 ②储罐动火，清除易燃物，罐内盛满清水或惰性气体保护。 1 易燃易爆有害物质 ③设备内通（氮气、水蒸气）保护。 ④塔内动火，将石棉布浸湿，铺在相邻两层塔盘上进行隔离。 ⑤进入受限空间动火，必须办理《受限空间作业证》火星窜入其它设备或易燃切断与动火设备相连通的设备管道并加盲板＿＿＿块隔断，挂牌，并办理《抽 2 物侵入动火设备堵盲板作业证》。 ①清除动火点周围易燃物，动火附近的下水井、地漏、地沟、电缆沟等清除 3 动火点周围有易燃物易燃后予封闭。②电缆沟动火，清除沟内易燃气体、液体，必要时将沟两端隔绝。 4 泄漏电流（感应电）危害电焊回路线应搭接在焊件上，不得与其它设备搭接，禁止穿越下水道（井）。 5 火星飞溅①高处动火办理《高处作业证》，并采取措施，防止火花飞溅。 ②注意火星飞溅方向，用水冲淋火星落点。 6 气瓶间距不足或放置不当①氧气瓶、溶解乙炔气瓶间距不小于5m，二者与动火地点之间均不小于10m。 ②气瓶不准在烈日下曝晒，溶解乙炔气瓶禁止卧放。 7 电、气焊工具有缺陷动火作业前，应检查电、气焊工具，保证安全可靠，不准带病使用。 8 作业过程中，易燃物外泄动火过程中，遇有跑料、串料和易燃气体，应立即停止动火。 ①室内动火，应将门窗打开，周围设备应遮盖，密封下水漏斗，清除油污， 9 通风不良附近不得有用溶剂等易燃物质的清洗作业。②采用局部强制通风； ①取样与动火间隔不得超过30min，如超过此间隔或动火作业中断时间超过 3 0min，必须重新取样分析。 10 未定时监测 ②做采样点应有代表性，特殊动火的分析样品应保留至动火结束。 ③动火过程中，中断动火时，现场不得留有余火，重新动火前应认真检查现场条件是否有变化，如有变化，不得动火。 ①监火人应熟悉现场环境和检查确认安全措施落实到位，具备相关安全知识 11 和应急技能，与岗位保持联系，随时掌握工况变化，并坚守现场。②监火人监护不当随时扑灭飞溅的火花，发现异常立即通知动火人停止作业，联系有关人员采取措施。 12 应急设施不足或措施不当 ①动火现场备有灭火工具（如蒸汽管、水管、灭火器、砂子、铁铣等）。 ②固定泡沫灭火系统进行预启动状态。 13 涉及危险作业组合，未落实相应安全措施若涉及高处、抽堵盲板、管道设备检修作业等危险作业时，应同时办理相关作业许可证。 14 作业条件发生重大变化若作业条件发生重大变化，应重新办理《*级动火作业证》。作业人员签字：监护人员签字:

分子生物学历年大题

2012年1月分子生物学自考试卷大题 26.半不连续复制 27.上游启动子元件 28.遗传密码 29.报告基因 30.锌指结构 31.简述DNA双螺旋结构模型 32.简述启动子的作用特点 33.简述原核生物蛋白质生物合成的起始过程 34.简述半乳糖操纵子的结构特点 35.简述在原核生物翻译水平上影响基因表达调控的因素 36.试述利用λ噬菌体构建基因组DNA文库的方法 37.试述真核生物基因表达调控的主要特点 2011年7月分子生物学自考试卷大题 26.SOS反应 27.RNA再编码 28.cDNA文库 29.RNA干扰 30.物理图谱 31.比较原核生物与真核生物在复制过程中的差异。 32.简述增强子的作用特点。

33.简述CAP对gal操纵子的作用。 34.真核生物在转录前对基因表达调控的方式有哪些？ 35.反式作用因子有哪些结构特征。 https://www.wendangku.net/doc/271537694.html,c操纵子的调控机理。 37.试述蛋白质合成的基本过程，并比较原核与真核生物在蛋白质合成过程中的差异。 2010年10月： 26.C值反常 27.同工Trna 28.释放因子 29.细菌转化 30.选择性剪接 31.简述DNA复制的特点 32．核糖体上与翻译有关的位点有哪些？ 33.简述操纵子的一般结构 34.简述真核生物DNA甲基化抑制基因表达的原因 35.简述细胞内癌基因的激活方式。 36.色氨酸操纵子在高色氨酸浓度和低色氨酸浓度时表达水平相差约600倍，但阻遏作用仅只能使转录水平降低70倍，请利用色氨酸操纵子的调控机制解释上述现象。 37.试比较原核生物与真核生物转录产物mRNA的异同。

2010年7月：名词解释：同源域基因、基因定点突变、基因、遗传密码、冈崎片段简答：1.简述细胞中原癌基因转变为癌基因的主要途径。 2.简述sanger双脱氧链终止法测序基本原理。 3.简述原核生物蛋白质合成具体步骤。 4.简述大肠杆菌RNA聚合酶中a因子生物学功能。简单应用：色氨酸操纵子调节作用。论述：真核生物与原核生物在基因结构、转录和翻译主要差异。 2010年1月部分大题：名词解释：中心法则、转座子、基因敲除、增强子、基因治疗简单：1.简述原核生物RNA转录终止信号分类、结构特点。 2.简述tRNA mRNA tRNA各自生物学功能。 3.简述聚合酶链式反应（PCR）基本原理。简单应用：乳糖操纵子的调节功能。论述：真核生物基因表达可在多个层次上进行调控，根据发生先后顺序，叙述真核生物基因表达调控过程。 09年10月部分大题：名词解释：半不连续复制、基因家族、基因扩增简答：1.RNA编辑生物学意义。 2.转录与翻译不同点

现代分子生物学总结题库

第一章、基因的结构和功能实体及基因组 1、基因定义基因（遗传因子）是遗传的物质基础，是DNA（脱氧核糖核酸）分子上具有遗传信息的特定核苷酸序列的总称，携带有遗传信息的DNA序列，是具有遗传效应的DNA分子片段，是控制性状的基本遗传单位，通过指导蛋白质的合成来表达自己所携带的遗传信息，从而控制生物个体的性状表现。 2、DNA修复 DNA修复（DNA repairing）是细胞对DNA受损伤后的一种反应，这种反应可能使DNA结构恢复原样，重新能执行它原来的功能；但有时并非能完全消除DNA的损伤，只是使细胞能够耐受这DNA的损伤而能继续生存。也许这未能完全修复而存留下来的损伤会在适合的条件下显示出来（如细胞的癌变等），但如果细胞不具备这修复功能，就无法对付经常在发生的DNA损伤事件，就不能生存。对不同的DNA损伤，细胞可以有不同的修复反应。3、DNA损伤 DNA损伤是复制过程中发生的DNA核苷酸序列永久性改变，并导致遗传特征改变的现象。情况分为：substitutation （替换）deletion （删除）insertion （插入）exon skipping （外显子跳跃）。 DNA损伤的改变类型：a、点突变：指DNA上单一碱基的变异。嘌呤替代嘌呤（A与G之间的相互替代）、嘧啶替代嘧啶（C与T之间的替代）称为转换（transition）；嘌呤变嘧啶或嘧啶变嘌呤则称为颠换（transvertion）。b、缺失：指DNA链上一个或一段核苷酸的消失。c、插入：指一个或一段核苷酸插入到DNA链中。在为蛋白质编码的序列中如缺失及插入的核苷酸数不是3的整倍数，则发生读框移动（reading frame shift），使其后所译读的氨基酸序列全部混乱，称为移码突变（frame-shift mutaion）。d、倒位或转位：（transposition）指DNA链重组使其中一段核苷酸链方向倒置、或从一处迁移到另一处。 e、双链断裂：对单倍体细胞一个双链断裂就是致死性事件。 4、同源重组同源重组，（Homologus Recombination)是指发生在姐妹染色单体（sister chromatin) 之间或同一染色体上含有同源序列的DNA分子之间或分子之内的重新组合。同源重组需要一系列的蛋白质催化，如原核生物细胞内的RecA、RecBCD、RecF、RecO、RecR等；以及真核生物细胞内的Rad51、Mre11-Rad50等等。同源重组反应通常根据交叉分子或holiday 结构（Holiday Juncture Structure) 的形成和拆分分为三个阶段，即前联会体阶段、联会体形成和Holiday 结构的拆分。 a、基因敲除基因敲除（geneknockout），是指对一个结构已知但功能未知的基因，从分子水平上设计实验，将该基因去除，或用其它顺序相近基因取代，然后从整体观察实验动物，推测相应基因的功能。这与早期生理学研究中常用的切除部分-观察整体-推测功能的三部曲思想相似。基因敲除除可中止某一基因的表达外，还包括引入新基因及引入定点突变。既可以是用突变基因或其它基因敲除相应的正常基因，也可以用正常基因敲除相应的突变基因。 b、因转移法同源重组(homologousrecombination)是将外源基因定位导人受体细胞染色体上的方法，因为在该座位有与导人基因同源的序列，通过单一或双交换，新基因片段可替换有缺陷的基因片段，达到修正缺陷基因的目的。位点特异性重组是发生在两条DNA链特异位点上的重组，重组的发生需一段同源序列即特异性位点(又称附着点；attachmentsite，att)和位点特异性的蛋白因子即重组酶参与催化。重组酶仅能催化特异性位点间的重组，因而重组具有特异性和高度保守性。

单片机_C语言函数_中断函数(中断服务程序)

单片机_C语言函数_中断函数（中断服务程序）在开始写中断函数之前，我们来一起回顾一下，单片机的中断系统。中断的意思（学习过微机原理与接口技术的同学，没学过单片机，也应该知道），我们在这里就不讲了，首先来回忆下中断系统涉及到哪些问题。（1）中断源：中断请求信号的来源。（8051有3个内部中断源T0，T1，串行口，2个外部中断源INT0，INT1（这两个低电平有效，上面的那个横杠不知道怎么加上去））（2）中断响应与返回：CPU采集到中断请求信号，怎样转向特定的中断服务子程序，并在执行完之后返回被中断程序继续执行。期间涉及到CPU响应中断的条件，现场保护，现场恢复。（3）优先级控制：中断优先级的控制就形成了中断嵌套（8051允许有两级的中断嵌套，优先权顺序为INT0，T0，INT1，T1，串行口），同一个优先级的中断，还存在优先权的高低。优先级是可以编程的，而优先权是固定的。 80C51的原则是①同优先级，先响应高优先权②低优先级能被高优先级中断③正在进行的中断不能被同一级的中断请求或低优先级的中断请求中断。 80C51的中断系统涉及到的中断控制有中断请求，中断允许，中断优先级控制（1）3个内部中断源T0，T1，串行口，2个外部中断源INT0，INT1 （2）中断控制寄存器：定时和外中断控制寄存器TCON（包括T0、T1，INT0、INT1），串行控制寄存器SCON，中断允许寄存器IE，中断优先级寄存器IP 具体的是什么，包括哪些标志位，在这里不讲了，所有书上面都会讲。在这里我们讲下注意的事项（1）CPU响应中断后，TF0（T0中断标志位）和TF1由硬件自动清0。（2）CPU响应中断后，在边沿触发方式下，IE0（外部中断INT0请求标志位）和IE1由硬件自动清零；在电平触发方式下，不能自动清楚IE0和IE1。所以在中断返回前必须撤出INT0和INT1引脚的低电平，否则就会出现一次中断被CPU多次响应。（3）串口中断中，CPU响应中断后，TI（串行口发送中断请求标志位）和RI（接收中断请求标志位）必须由软件清零。（4）单片机复位后，TCON，SCON给位清零。 C51语言允许用户自己写中断服务子程序（中断函数）首先来了解程序的格式： void 函数名() interrupt m [using n] {} 关键字 interrupt m [using n] 表示这是一个中断函数 m为中断源的编号，有五个中断源，取值为0,1,2,3,4，中断编号会告诉编译器中断程序的入口地址，执行该程序时，这个地址会传个程序计数器PC，于是CPU开始从这里一条一条的执行程序指令。 n为单片机工作寄存器组（又称通用寄存器组）编号，共四组，取值为0,1,2,3 中断号中断源 0 外部中断0 1 定时器0 2 外部中断1 3 定时器1中断 4 串行口中断（在上一篇文章中讲到的ROM前43个存储单元就是他们，这5个中断源的中断入口地址为：这40个地址用来存放中断处理程序的地址单元，每一个类中断的存储单元只有8B，显然不

作业中断管理规定

生产过程作业中断管理规定版本：A/0 页码：1/4 修訂履历表项次修订日期页次版次修订说明备注

生产过程作业中断管理规定版本：A/0 页码：2/4 1 目的为保证生产过程的过程质量管理效果，制定本规定。 2 适用范围适用于公司生产部门生产过程的质量管理。 3 职责 3.1 生产部和技术部负责对生产作业中断原因的调查、改善。 3.2 生产部各责任班长负责对本责任区加工产品的确认。 3.3 操作人员负责对手中加工品进行确认及隔离，严格按《过程作业中断管理规定》作业。 3.4检验员负责监督作业员对生产中断产品品质确认。 4 定义 4.1过程作业中断：指生产过程因突发断电、停气、下班用餐、暂时离岗、交接班、人员调动、设备维修、工艺参数调整、中途休息、标准件补充、车型更换、过程交谈与信息沟通等原因造成加工过程中断。 4.2焊接过程：本规定指单个标准件从焊机上下电极闭合开始工作至上下电极正常自动断开的整个焊接过程。 5 作业规定 5.1首件调试 5.1.1所有产品在正式开机生产前必须首件确认合格后才可生产。 5.1.2所有焊接调试（包括电阻焊机和MIG焊机）不允许首先直接使用合格品进行焊机调试，电阻焊机用对应的测试片进行调试，MIG焊机调试应在焊接试验块上测试，所有调试品在确认前应视作不合格品处理，不允许直接放入合格品中。 5.1.3首件检验时机：当班开机前、设备维修后、补充标准件时、更换车型时。 5.2生产异常调校 5.2.1产品品质异常需要对设备等进行调校时，责任作业员必须将自己所负责加工的产品予以确认，是否加工完毕，品质是否符合要求，特别是标准件是否焊接，位置是否正确，确认无

单片机中断作业(三)

装备工程学院 09 级单片机作业学号：0911020214 姓名：文星

单片机中断系统的应用设计要求： P0口接8个LED灯依次左移点亮，按INT1的按钮时8个LED灯依次右移点亮，按INT0时，8个LED闪烁5次（INT0优先）。摘要：计算机工作过程中，由于系统内、外某种原因发生的随机事件，计算机必须尽快中止正在运性的原程序，转向相应的处理程序为其服务，待处理完毕在返回去执行被中止的源程序，这个过程就是中断。引起中断的原因火设备称为中断源。一个计算机系统的中断源会有多个，用来管理这些中断的逻辑称为终端系统。采用中断的优点如下： 1、分时操作、中断系统解决了快速CPU与慢速外设、定时/计数器及串行口之间的“定时”矛盾。例如：在CPU启动定时器之后，就可继续执行主程序，同时定时器也在工作。当定时器溢出便向CPU 发出中断请求，CPU响应中断（终止正在运行的主程序）转去执行定时器服务程序，中断服务结束后，又返回主程序继续执行，这样CPU就可以命令定时器、串行口以及多个外设同时工作，分别为各中断源提供服务，使CPU高效而有秩序地工作。 2、实时处置中断系统使CPU能及时处理实时控制系统中许多随机参数和信息。实时控制现场的各种随机信号，它们在任意时刻均可向CPU发出中断请求，要求CPU给予服务，有了中断系统便可及时地处理这些瞬息变化的现场信息，是CPU具有随机应变和实时处理的能力。 3、故障处理中断系统还可以使CPU处理系统中出现的故障。例如，电源的突变、运算溢出、通信出错等。有了中断系统计算机都可以自行解决，不必人工干预或停机，提高了系统的稳定性和可靠性。关键字：中断；控制

直接作业环节管理

第三课直接作业环节管理直接作业环节是安全管理工作的重点，直接作业环节的措施不当或操作失误以及管理缺陷往往是事故的直接或间接原因，因此，落实好直接作业各环节的措施、规范操作行为、完善各环节的管理是杜绝各类事故的根本途径。 1、用火的作业方式： 1）气焊、电焊、铅焊、锡焊、塑料焊等各种焊接作业及气割、等离子切割机、砂轮机、磨光机等各种金属切割作业。 2）使用喷灯、液化气炉、火炉、电炉等明火作业。 3）烧（烤、煨）管线、熬沥青、炒砂子、铁锤击（产生火花）物件，喷砂和产生火花的其他作业。 4）生产装置和罐区联接临时电源并使用非防爆电器设备和电动工具。 5）使用雷管、炸药等进行爆破作业 2、油田企业用火作业分级: 一级用火作业二级用火作业。三级用火作业四级用火作业用火作业安全措施： 1）凡在生产、储存、输送可燃物料的设备、容器及管道上用火，应首先切断物料来源并加好盲板；经彻底吹扫、清洗、置换后，打开人孔，通风换气；打开人孔时，应自上而下依次打开，经分析合格方可用火。若间隔时间超过1小时继续用火，应再次进行用火分析或在管线、容器中充满水后，方可用火。 2）在正常运行生产区域内，凡可用可不用的用火一律不用火，凡能拆下来的设备、管线都应拆下来移到安全地方用火，严格控制一级用火。 3）各级用火审批人应亲临现场检查，督促用火单位落实防火措施后，方可审签“中国石化用火作业许可证 4）一张用火作业许可证只限一处用火，实行一处（一个用火地点）、一证（用火作业许可证）、一人（用火监护人），不能用一张“中国石化用火作业许可证”进行多处用火。 5）油田企业的“中国石化用火作业许可证”有效时间为一个作业周期，但最多不超过5天。若中断作业超过1小时后继续用火，监护人、用火人和现场负责人应重新确认。固定用火作业区，每半年检查认定1次。 6）用火分析。凡需要用火的塔、罐、容器等设备和管线，应进行内部和环境气体化验分析，并将分析数据填入“中国石化用火作业许可证”，分析单附在“中国石化用火作业许可证”的存根上，以备查和落实防火措施。当可燃气体爆炸下限大于4%时，分析检测数据小于0.5%为合格；可燃气体爆炸下限小于4%时，分析检测数据小于0.2%为合格 7）用火部位存在有毒有害介质的，应对其浓度作检测分析。若含量超过车间空气中有害物质最高容许浓度时，应采取相应的安全措施，并在“中国石化用火作业许可证”上注明。 8）施工单位（含承包商）应做好施工前的各项准备工作，化验中心（室）应尽可能缩短采样分析时间，为用火作业创造条件。