利用转基因番茄生产人胰岛素的研究
分子植物育种,2003年,第1卷,第4期,第581—582页
M olecular P lant Breeding,2003,V ol.1,No.4,581—582
“君政学者”论文摘要
THESIS FOR CHUN-TS UNG SCHO LAR
利用转基因番茄生产人胰岛素的研究
学生:陈溪
导师:林忠平教授
北京大学,北京,100871
摘要
利用转基因番茄作为生物反应器生产人胰岛素,研究以口服方式摄入胰岛素在抑制自身免疫攻击以及预防I型糖尿病中所起到的作用。为了提高人胰岛素在植物细胞中的表达量并正确折叠形成有活性的胰岛素分子,用双链法人工合成了人胰岛素基因,该基因全部采用植物偏爱密码子,并将B链与A链用一可以形成典型的β转角的6氨基酸短肽连接起来。分别将其与组成型表达启动子35S和番茄果实专一性启动子2A12融合构建了植物表达载体pCAM35S-Ins和pCAM2A12-Ins,并通过农杆菌介导的叶盘转化法分别导入烟草和番茄。用PCR对pCAM35S-Ins转基因烟草进行了鉴定,并用Western印迹实验对转基因烟草中胰岛素的表达及其与抗体结合活性进行了初步的鉴定。后续工作将致力于动物实验和功能分析。
关键词
人胰岛素,生物反应器,转基因烟草,转基因番茄,人工合成基因,果实专一性启动子
致谢
本论文是在秦惠君-李政道基金会的资助下完成的。感谢导师林忠平教授在论文完成过程中所给予我的悉心指导,感谢君政基金会三年的资助和君政基金邀请的各位专家组成的答辩委员会。
Production of Human Insulin in Transgenic Tomato
Scholar:Chen xi
Supervisor:Prof.Lin Z.P.
Peking University,Beijing,100871
ABST RACT
It has been suggested that o ral administration of human insulin might prevent or delay the onset of the ty pe I diabetes mellitus by suppressing autoimmune destruction.In this project,w e use tomato fruit as a bioreactor to produce human insulin and test its effect as edible vaccine against diabetes.In order to enhance its expression level and natural folding,the B-chain and A-chain of human insulin were encoded with plant bias codons and linked w ith a6amino acids linker,w hich is expected to form a typicalβ-turn.This recombinant gene was syn-thesized by double-chain method and fused w ith constitutive35S CaM V promo ter and tomato fruit-specific pro-moter2A12,respectively.The chimeric plant expression vecto rs pCAM35S-Ins and pCAM2A12-Ins have been
introduced into tobacco and tom ato by Agrobacterium -mediated transformation .The ex pression of the synthe -sized insulin gene and its antibody -binding activity w ere identified by PCR procedure and western dot blot anal -ysis in transgenic tobacco .Further studies will focus on animal test and functional analy sis .
K EYWO RDS
Human insulin ,Bioreacto r ,Transgenic tobacco ,Transgenic tomato ,Sy nthesized gene ,Fruit -specific promoter
ACKNO WLEDG EM EN T
This work was supported by Chun -Tsung Endow ment and was under guidance of Professor Zong ping Lin .The autho r thanks Dr .T .C .Lee ,my supervisor Prof .Lin and all the people in organizing Commititee of Chun -Tsung Endowment .582 分子植物育种M olecular Plant Breeding
胰岛素制备
生物技术制药参考资料 基因工程制备胰岛素 一、胰岛素的定义 胰岛素是由胰岛β细胞受内源性或外源性物质如葡萄糖、乳糖、核糖、精氨酸等的刺激而分泌的一种蛋白质激素。 二、目前临床使用的胰岛素来源 1、动物胰岛素：从猪和牛的胰腺中提取，两者药效相同，但与人胰岛素相比，猪胰岛素中有1个氨基酸不同，牛胰岛素中有3个氨基酸不同，因而易产生抗体。 2、半合成人胰岛素：将猪胰岛素第30位丙氨酸，置换成与人胰岛素相同的苏氨酸，即为半合成人胰岛素。 3、重组人胰岛素（现阶段临床最常使用的胰岛素）：利用生物工程技术，获得的高纯度的生物合成人胰岛素，其氨基酸排列顺序及生物活性与人体本身的胰岛素完全相同。 三、目前，国际上生产医用重组人胰岛素(recombi—nant human insulin，rhI)的方法 1、用基因工程大肠杆菌escherichia coli，E．CO一)分别发酵生产人胰岛素(human insulin，hi)的A、B链，然后经化学再氧化法，使两条链在一定条件下重新形成二硫键，得到hI。这一方法缺点较多，目前已较少使用； 2、用基因工程E．coli发酵生产人胰岛素原(hu—man peoinsulin，hPI)，后经加工形成hI。E．coli系统表达量高，但缺点是不利于表达hI这样的小蛋白，产物易降解，故常采用融和蛋白形式将hPI连接在一个较大的蛋白质后，表达产物需经过一系列复杂的后加工才能形成有活性的hi； 3、通过基因工程酵母菌发酵生产hPI，经后加工形成hI。酵母系统下游后加工比细菌表达系统简单，但缺点是生产慢，生产周期长，且重组蛋白分泌量少(1～50 mg／L)，产量低。因此，虽然rhI投放市场已久，但人们一直在努力寻求和探索更加有效的表达系统和高效的表达策略 I2 J，尤其是对E．CO一尻表达系统的研究更是越来越深入，用E．coli系统表达hPI的策略也越来越多。另一方面，在胰岛素的基因工程生产中，下游处理非常复杂，复杂的下游处理极大地降低了胰岛素的最终收率。本研究围绕着提高重组目的蛋白表达量，简化下游处理过程等方面进行探索，建立了一套经过优化的高效完整的基因工程E．coli发酵表达(His)6一Arg—Arg一人胰岛素原[(His)6一Arg—Arg—human proinsulin，PPh—PI]，后加工成hI的制备工艺。 四、基因工程制备胰岛素 1、提取目的基因：既从人的DNA中提取胰岛素基因，可使用限制性内切酶将目的基因从原DNA中分离。主要有如下4种方法： （1）鸟枪法：用一大堆限制性核酸内切酶对附近基因进行剪切，再提取所需要的。至于如何筛选，用DNA分子杂交，即DNA探针 （2）人工合成法：根据转录蛋白或者mRNA推导出基因序列，然后人工合成，没有内含子。 （3）从基因文库中提取：也就是事先已经提取完毕的拿来用 （4）PCR扩增技术：用于大量生产该段基因片段，用于商业化运作…… 2、提取质粒：使用细胞工程,培养大肠杆菌，从大肠杆菌的细胞质中提取质粒，质粒 为环状。主要有如下2种方法：
甘精胰岛素与预混胰岛素治疗2型糖尿病的疗效和安全性比较
·12 ·中国医师进修杂志2006 年4 月第29 卷第4 期内科版Chin J Postgrad Med ,April 2006 ,V ol. 29 ,No. 4A ·临床论著· 甘精胰岛素与预混胰岛素治疗2 型 糖尿病的疗效和安全性比较 周桂兰李竞毕会明王芳 量少。 【关键词】甘精胰岛素; 预混胰岛素; 2 型糖尿病 【摘要】目的在口服降糖药不能良好控制血糖的情况下,加用每日1 次甘精胰岛素或加用 每日2 次预混胰岛素治疗,比较这两种方案的疗效和低血糖的风险。方法40 例用口服降糖药血 糖控制不良的 2 型糖尿病患者随机分为甘精胰岛素组(简称甘精组) 和预混胰岛素组(诺和灵30R , 简称预混组),每组各20 例。所有患者在原有的口服降糖药不变的基础上,甘精组每晚10 时注射 甘精胰岛素1 次;预混组每日早晚餐前分别注射诺和灵30R 预混胰岛素。根据空腹血糖( FB G) 的 水平,每周调整胰岛素剂量,以FB G 小于5.6 mmol/L 为治疗目标,共治疗16 周。观察血糖控制和 低血糖发生情况。结果治疗后两组的FB G 在4 周和16 周都明显下降,但甘精组的下降幅度明 显大于预混组,差异有统计学意义( P < 0. 01) 。两组的糖化血红蛋白( HbA1c) 在16 周时也明显的 下降,甘精组的下降幅度稍优于预混组,但二者的差异无统计学意义( P > 0. 05) 。到达终点时预混 组的胰岛素用量明显大于甘精组 混组(甘精组3 例,15 %; 预混组9 例,45%) ,χ2 =4.285, P < 0. 05 。结论单用口服降糖药不能较 好控制血糖时,加用每日 1 次甘精胰岛素或加用每日 2 次预混胰岛素进行治疗,均能达到明显的 降糖效果。甘精胰岛素与预混胰岛素相比,降低FB G 的效果更好,低血糖的发生率低,胰岛素的用 ,差异有统计学意义( P < 0. 05) 。甘精组低血糖事件明显少于预 Comparison of eff icacy and safety in treatment of type 2 diabetic mellitus between glargine quaque and mixed insulin ZHOU Gui -lan, LI Jing, BI Hui -ming, WANG Fang. Department of En2 docrinology , The People′sHospitalof WuhanUniversity,Wuhan 430060 , China
人胰岛素的制备
人胰岛素的制备
一、获得目的基因 从供体细胞中提取mRNA，以其为模板，在反转录酶的作用下，反转录合成胰岛素mRNA互补DNA，再以cDNA第一链为模板，在反转录酶或DNA聚合酶I的作用在，最终合成编码它的双链DNA序列。即得到了目的基因。 反转录-聚合酶链反应法 (一)从人体细胞内提取胰岛素基因转录的mRNA 1, 细胞总RNA的提取 : 取胰岛B细胞，用PBS洗后，加入TRIZOL试将细胞破裂，后用DEPC处理，多次离心后，取RNA白色沉淀，测OD值，电泳。 2 ，从总RNA中分离mRNA： 取上述提取的总RNA若干，加入Buffer OBB ，Oligotex Suspension ，打匀。 70℃水浴（裂解RNA的二级结构）， 20-30℃条件下，静置（让Oligotex 与mRNA结合）。将Oligotex/mRNA复合物的沉淀加到EP管SPIN柱上高速离心，加Buffer将其他RNA洗脱，最后用琼脂糖凝胶电泳纯化mRNA。 （二）mRNA转录合成cDNA第一链 cone 第一链的合成 加入上步获得的mRNA和适当引物于EP管中，加入RNase-free water，混匀后,70℃反应10分钟，反应完成后,立刻将反应体系置于冰上5min;稍微离心一下,顺序加入缓冲液、 RNA酶抑制剂、反转录酶、 dNTP（加入放射性同位素 利于检验），混匀，稍微离心反应物之后,42℃放置2分钟。取出置于冰上。
电泳分析，同位素活性测定。 （三）PCR法扩增，特异合成目的cDNA链 通过胰岛素的特异引物，用PCR法进行扩增，特异的合成胰岛素的cDNA 链。 PCR法的操作步骤： 预变性 引物退火 引物延伸 循环25-35次 最后延伸 ?前端引物： ?5’-ggt tcc gga tct ggt tct ggt tct ctg gtc ccc cgc ggt agt cac cac cac cac cac cac cgt ttt gtg aac caa cac ctg tgc ggc-3’ ?后端引物： ?5’-agt gtc gac tta gtt gca gta gtt ctc cag ctg gta-3’ 二、组建重组质粒 采用pQE--30质粒作为载体，用双酶切法进行基因重组。 １.双酶切法 用两种酶限制性内切核酸酸消化载体DNA和外源DNA片段，使载体和外源目的基因的两端分别形成不同黏性末端，将它们混合，在连接酶的作用下相同的黏性末端可退火连接成重组DNA分子，从而实现DNA的定向连接。 ２.重组过程 pQE--30用Hind Ⅲ和BamHⅠ酶切，琼脂糖凝胶电泳分离、回收纯化酶切片段。外源DNA片段同样也用Hind Ⅲ和BamHⅠ酶切并回收纯化酶切片段。双酶切后的载体外源DNA片段混合退火，因为Hind Ⅲ和BamHⅠ的黏性末端不匹配，避免了载体和外源DNA片段的自身连接，外源DNA片段只能定向地连接到载体的Hind Ⅲ和BamHⅠ位点之间。当然也不可避免发生载体的Hind Ⅲ和BamHⅠ的黏性末端之间的两个碱基互补形成开环，转到大肠杆菌中被修复，但这样的重组子占少数，是低效转化。 三、构建基因工程菌 (一)重组人胰岛素的大肠杆菌工程菌的构建 A链和B链同时表达法 将人胰岛素的A链和B链编码序列拼接在一起，然后组装在大肠杆菌-半乳糖苷酶基因的下游。重组子表达出的融合蛋白经CNBr处理后，分离纯化A-B链多肽，然后再根据两条链连接处的氨基酸残基性质，采用相应的裂解方法获得A 链和B链肽段，最终通过体外化学折叠制备具有活性的重组人胰岛素。重组DNA 的转化 1, CaCl2法制备大肠杆菌感受态细胞：
转基因作物的研究进展
生物与环境工程学院课程论文 转基因作物的研究进展 学生姓名：魏斌聪 学号：200806016139 专业/班级：生物工程081班 课程名称：生物工程原理 指导教师：陈蔚青教授 浙江树人大学生物与环境工程学院 2011年5月
转基因作物的研究进展 魏斌聪 （浙江树人大学生物与环境工程学院生工081班浙江杭州310015） 摘要：人们将所需要的外源基因(如高产、抗病虫害优质基因) 定向导入作物细胞中, 使其在新的作物中稳定遗传和表现,产生转基因作物新品种, 是大幅度提高作物产量的一项新技术。本文先描述了转基因作物的发展进程，对其基因问题的研究作了讨论，并列出转基因作物目前存在的主要问题并作分析，最后对此项技术作出展望。 关键词：转基因作物；DNA技术；基因导入；安全性 前言 转基因植物（transgenic plant），是指基因工程中运用DNA 技术将外源基因整合于受体植物基因组、改变其遗传组成后产生的植物及其后代。转基因植物的研究主要在于改进植物的品质，改变生长周期等提高其经济价值或实用价值。[ 1 ]其主要范围是在作物方面，如可食用的大豆、玉米等，或者可投入生产的棉花等作物。 从表面上看来，转基因作物同普通植物似乎没有任何区别，它只是多了能使它产生额外特性的基因。从1983年以来，生物学家已经知道怎样将外来基因移植到某种植物的脱氧核糖核酸中去，以便使它具有某种新的特性：抗除莠剂的特性，抗植物病毒的特性，抗某种害虫的特性。[ 2 ]这个基因可以来自于任何一种生命体：细菌、病毒、昆虫等。这样，通过生物工程技术，人们可以给某种作物注入一种靠杂交方式根本无法获得的特性，这是人类9000年作物栽培史上的一场空前革命。[ 3 ] 1 转基因作物的发展进程 转基因作物的研究最早始于20世纪80年代初期。1983年，全球第一例转基因烟草在美国问世。1986年，首批转基因抗虫和抗除草剂棉花进入田间试验。1996年，美国最早开始商业化生产和销售转基因作物(包括大豆、玉米、油菜、
转基因番茄研究进展
转基因番茄研究进展 摘要：利用转基因技术培育，已经获得延熟、抗病、抗虫、抗逆、抗除草剂和品质改良的转基因番茄，并主要介绍转基因技术在这些方面的研究成果和研究进展，此外简单介绍了转基因番茄的优势及其展望。 关键词：转基因番茄进展 番茄（Lycopersicon eseulentem．Mil）是茄科( Solanaceae) 番茄属 ( Lycopersicon) 的一年生或多年生植物，是世界上重要的蔬菜作物之一。番茄需求量大，种植广泛，同时对其的遗传理论研究较为深入，番茄已经成为蔬菜基因工程研究的模式植物之一，且在1994年成为世界上第一例商品化生产的转基因作物——转基因延熟番Flavr-SavrTM，其由美国Calgene公司培育成功并获准进入市场。其后几年利用转基因技术培育出抗病虫害、抗除草剂、抗逆和高品质的优良番茄品种。番茄的基因转化技术主要采用农杆菌介导的基因转化方法。此外，黄永芬等[1]利用花粉管导入法进行番茄的基因转化，将整合了抗冻蛋白基因的Ti 质粒直接注入番茄子房或花粉管中进行转化获得了抗冻番茄。 1．转基因番茄研究进展 1．1 延熟转基因番茄 目前利用基因转化技术延熟番茄有两种方法，一是抑制细胞壁的降解，二是抑制乙烯的合成，在防止其腐烂方面取得了较好的效果。 1．1．1 抑制番茄细胞壁降解的研究 细胞壁水解酶对果实的成熟有促进作用，通过抑制阻止细胞壁水解酶活性，可抑制果实细胞壁的降解，延缓成熟与衰老。 主要包括两类酶，一类是多聚半乳糖醛酸酶(PG)，可将细胞壁中的多聚半乳糖苷降解为低聚半乳糖苷，在果实成熟过程中，PG的mRNA水平可提高100倍。叶志彪等[2]将PG基因的Hindfi 片段反向克隆在植物转化载体Bin19的花椰菜病毒( CaMV) 的35S启动子和3' 端非翻译区( nos) 终止子之间，经农杆菌与番茄无菌苗子叶外植体共培养，获得转化植株，这种转反义PG基因的番茄果
大肠杆菌生产制备重组人胰岛素工艺修订稿
大肠杆菌生产制备重组 人胰岛素工艺 WEIHUA system office room 【WEIHUA 16H-WEIHUA WEIHUA8Q8-
1.提取: 2.既从人的DNA中提取胰岛素基因,可使用限制性内切酶将从原DNA中分离. 3.2.提取质粒: 4.使用细胞工程,培养大肠杆菌,从大肠杆菌的细胞质中提取质粒,质粒为环状DNA. 5.3.基因重组: 6.取出与质粒,先利用同种限制性内切酶将质粒切开,再使用将目的基因与质粒"缝合",形成一个能表达出胰岛素的DNA质粒. 7.4.将质粒送回大肠杆菌: 8.再大肠杆菌的培养液中加入含有Ca+的物质,如,这使细胞会吸收外源基因.此时将重组的质粒也放入培养液中,大肠杆菌便会将吸收. 9.5.胰岛素的产生: 10.再大肠杆菌内,质粒通过表达转录与翻译后,便产生出胰岛素蛋白质.通过大肠杆菌的大量繁衍,便可大量生产出胰岛素! 〖学习要求〗知道DNA的粗提取与鉴定的原理；掌握并能分析DNA粗提取的技术方法和要求；学会DNA分子的鉴定方法 【预习指导】在课前时间通过阅读教材、同学交流和讨论，完成下列问题，并初步巩固。 一、基础知识 【活动1】阅读教材P54“基础知识”，讨论并回答下列问题：
1．（记忆）提取生物大分子的基本思路是利用它们的理化性质的不同进行分离。 2．（记忆）DNA的溶解性特点： DNA在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同；DNA不溶于酒精而蛋白质溶于酒精。 【思考1】据图5－1分析： DNA在不同浓度NaCl溶液中溶解度有何特点？在L时溶解度最小； 要使DNA溶解，需要使用什么浓度？较高浓度，可使DNA溶解； 要使DNA析出，又需要使用什么浓度？L可使DNA析出。 【思考2】利用DNA不溶于酒精的原理，可以达到将DNA和蛋白质进一步分离目的。 3．（记忆）DNA的耐受性特点： 蛋白酶能分解蛋白质而不能分解DNA；在60～80℃时蛋白质变性沉淀而DNA 分子不变性。洗涤剂能与蛋白质结合瓦解细胞膜而不破坏DNA分子。 4．（记忆）DNA的鉴定原理 当鉴定提取出的物质是否是DNA时，需要使用二苯胺（甲基绿）进行鉴定。在沸水浴条件下，该试剂与DNA反应，呈现（浅）蓝色。
预混胰岛素作用时间
预混胰岛素作用时间 一、预混胰岛素作用时间1. 预混胰岛素作用时间2. 胰岛素怎么时候注射3. 胰岛素注射什么部位二、长期打胰岛素的危害三、胰岛素的作用 预混胰岛素作用时间 1、预混胰岛素作用时间预混胰岛素:30 min 起效,2～12 h 达高峰,持续约 16～24 h,临床常用的包括精蛋白生物合成人胰岛素注射液 (预混 30R)、精蛋白生物合成人胰岛素注射液 (预混 50R)、精蛋白锌重组人胰岛素混合注射液等。预混胰岛素具有多为短效或超短效胰岛素与中效胰岛素按一定比例预混而成,因此具有快速降糖且作用时间长的特点,临床使用较为广泛,注意本品使用前应混匀至呈白色均匀的混悬液。 短效胰岛素作用时间是10～20 min 起效,1～2 h 达峰,持续时间3～5 h。中效胰岛素:0.5～1 h 开始生效,2～4 h 作用达高峰,维持时间5～7 h。长效胰岛素:1～1.5 h 起效,8～12 h 达高峰,持续约 24 h。 2、胰岛素怎么时候注射胰岛素的注射时间应根据类型选择注射时间。速效型在每餐前注射,短效型在用餐前15—30分钟时注射,中效型在每天晚上9—10点钟睡觉前注射,长效型在每天固定的时间注射。餐前注射还有一个原则是,见饭打针,不可打针后等饭,打针后还要避免剧烈活动,以防发生低血糖。 3、胰岛素注射什么部位最适合胰岛素注射的部位是腹部、大腿外侧,上臂外侧和臀部,比较常用的是腹部,注射方便,吸收均匀。注射部位要避开硬结、伤口、感染和瘢痕处。注射部位要轮换,每天注射要小轮换,两次注射点相距最好是2厘米;每周注射大轮换,如腹部、上臂、大腿等部位轮换,也可同一部位对称轮换,如左右侧腹部、
诺和灵 30R(精蛋白生物合成人胰岛素注射液(预混30R))
诺和灵30R(精蛋白生物合成人胰岛素注射液(预混 30R)) 【药品名称】 商品名称：诺和灵30R 通用名称：精蛋白生物合成人胰岛素注射液(预混30R) 英文名称：Isophane Protamine Biosynthetic Human Insulin Injection(Pre-mixed 30R) 【成份】 本品主要成份及其化学名称为：双时相低精蛋白锌胰岛素。活性成份：生物合成人胰岛素（它是通过基因重组技术，利用酵母生产的）。1IU（国际单位）相当于0.035毫克无水人胰岛素。其他成份：硫酸鱼精蛋白、氯化锌、甘油、磷酸氢二钠二水合物、间甲酚、苯酚、氢氧化钠、盐酸和注射用水。 【适应症】 本品具有降血糖作用，适用于治疗糖尿病。 【用法用量】 剂量因人而异，由医生根据患者的需要而定。 用于糖尿病治疗的平均每日胰岛素需要量在每公斤体重0.5-1.0国际单位之间。有时会需要更多，因患者的情况不同而有所不同。 糖尿病患者良好的代谢控制可以延缓糖尿病晚期并发症的发生和发展。因此，建议患者大道最理想的代谢控制，包括血糖监测。 老年患者治疗的主要目的是减轻症状和避免低血糖反应。 本品可在大腿或腹壁做皮下注射;如果方便的话，也可在臀肌或三角肌区域做皮下注射。 本品不可静脉给药。
从腹壁皮下给药比从其它注射部位给药吸收更快。 将皮肤捏起注射会减少误做肌肉注射的危险。 为防止脂肪萎缩，注射部位应在注射区域内轮换。 当需要共同使用短效胰岛素和较长作用的胰岛素时，给予预混胰岛素一天一次或一天两次。注射后30分钟内必须进食含有碳水化合物的正餐或加餐。 或遵医嘱。 患者使用指南 注射胰岛素之前 1.消毒橡皮塞 2.将药瓶放置于双手掌心轻轻滚转，直至该胰岛素呈白色均匀混悬液。 3.用注射器抽取与所需注射胰岛素等量的空气，并将该空气注入药瓶内。 4.将药瓶及注射器倒转，抽取正确剂量的胰岛素，然后将针头从药瓶拔出，再将注射器内余有的气泡排出，并检查剂量是否正确。 5.立即注射。 如何注射胰岛素 将两只手捏起皮肤，将针头扎入皮肤皱褶中，在皮下注射胰岛素。 将针头在皮下停留至少6秒钟，以确保所有胰岛素均被注入。 针头拔出后如果有血渗出，用手指轻压注射点。 【不良反应】 1.低血糖是胰岛素治疗经常发生的不良反应。低血糖的症状可以突然发生，包括出冷汗、皮肤发冷苍白、神经紧张或震颤、焦虑、不同寻常的疲倦或衰弱、错乱、难以集中精力、嗜睡、过度饥饿、暂时的视觉改变、头痛、恶心和心悸。严重的低血糖可导致意识丧失及引起暂时
常见的转基因食品品种
(附录一) 常见的转基因食品品种: 1.部分水稻品种(以湖北,广西居多), 2.彩色棉花(新疆居多), 3.小西红柿(全国都有), 某些别有用心的人居然叫它"圣女果"! 典型的转基因! 4.彩色辣椒(全国都有), 5.黑米花生(全国都有), 6.冬枣(产地山东、河南、河北居多），前几年温州人简直是抢购啊！ 7.部分菜籽油（南方各省居多）, 8.全部进口大豆（中粮集团居多） 9.全部进口玉米（中粮集团居多） 10.一种紫色地瓜,价格比普通地瓜贵(也叫红苕、番薯），（浙江、四川、山东、河南等省均有） 11、甜玉米（水果玉米）（全国很普遍） 12、全国市场上卖的所有木瓜，以及附属品，因为现在全中国已经找不到非转基因木瓜了。
（附录二） 判断转基因食品的几个标准： 1、季节。除了大棚蔬菜外，其它的反季节水果，比如冬枣，绝对是转基因。也就是说：应该在什么季节吃的东西就出现在那个季节，就没转基因，反之，10有8、9是转基因。 2、色彩。与传统的不一样的绝对是转基因，比如彩色棉花，这种棉花做成衣服，被褥，人长期接触绝对是不行的；再比如彩色辣椒、黑米花生、紫色番薯。 3、个头。按照传统，西红柿也有一定个头的，比如：像大拇指头那么一点大的小西红柿绝对是转基因。再比如大豆，也叫黄豆，就是做豆腐，豆浆那种豆子，形状应该像动物内脏：腰的样子，有点扁，可现在的大豆，全是圆圆的、大不少、就像豌豆一样的大豆，产量很高，这绝对是转基因。 4、味道。传统的玉米一般就是黄玉米，白玉米，略带甜味，而现在流行的甜玉米，其甜度非常高，无疑是转基因。 5、害虫。凡是害虫喜欢光顾的作物就是没转基因的，凡是害虫害怕，也就是没有害虫，或很少害虫的作物，绝对是转基因。 6、产量。转基因作物一般在开始几年，其产量要比传统作物高不少。 以上只是个人经验总结，仅供参考！
转基因番茄口服疫苗的研究进展
DOI:10.3969/cmba.j.issn.1673-713X.2010.01.013 · 综述· 转基因番茄口服疫苗的研究进展 郑卿，郭书巧，葛才林，倪万潮 第 1 例转基因烟草表达链球菌变异株 SpaA（surface protein antigen A）蛋白疫苗的成功研制[1]，开启了利用植物表达动物病原抗原蛋白的新纪元。1992 年，Mason 等[2]提出了“转基因植物疫苗”的概念，标志着植物口服疫苗成为新药研发新途径的全面展开。 口服转基因植物疫苗不仅能诱导机体产生全身性的体液免疫和细胞免疫应答，还能同时激活黏膜免疫。口服疫苗到达肠内黏膜诱导部位之前经过胃内的不利环境时必须受到保护，否则有可能被降解而失去免疫原性。而植物细胞壁作为天然的生物胶囊，可保护细胞内的疫苗免受消化道酸性环境和各种酶的降解，使表达的疫苗在小肠内缓慢释放，被小肠上皮的 M 细胞（membrane cell）识别并转运，APC （antigen presenting cell）细胞加工递呈，使机体产生黏膜和全身性的免疫反应，发挥对机体的全面保护作用[3]。因此，利用植物作为抗原表达和递送的载体已经成为当今生物技术研究的热点，并取得了长足的发展。但是食物的加工对目标蛋白有一定的破坏，并可能影响其免疫原性。番茄（Lycopersicon esculentum）作为具备良好加工特性的蔬菜，具有全世界的普及性，其口感好，营养丰富，是植物口服疫苗的理想载体。因此，番茄作为生物反应器来生产可食性疫苗具有较好应用前景。 1 番茄口服疫苗的优点 番茄作为外源蛋白的表达系统，除具有植物所共有的优点外还具有以下鲜明的特点： ⑴番茄是全球广泛栽培的一种植物，不易受地域条件的限制，因此有利于进行规模化生产，降低生产成本。 ⑵番茄作为一种茄科植物的模式植物，在遗传学和分子生物学方面有着较为深入的研究，许多成熟的技术可以直接应用于番茄的研究中，这为番茄作为生物反应器技术平台的建立创造了有利条件。 ⑶表达外源蛋白的转基因番茄果实可以直接食用，在预防或治疗疾病的同时也可以增加营养。还可以将果实制成粉末，进行有效以及长时间的储存，这样在植物疫苗和其他药用蛋白用于疾病的预防或治疗时，不需要经过繁杂的分离以及纯化步骤，不仅降低了成本和患者的负担，而且使患者能够从情感上易于接受。 2 番茄口服疫苗的研究进展 利用转基因技术，番茄可被用于生产在医学上有重要应用价值的酶或蛋白质。目前研究人员已经利用番茄作为生物反应器，在生产药用蛋白、抗体、口服疫苗以及其他工业用品方面做了广泛的尝试，多种外源基因已经成功转入番茄，并表达出有效的蛋白质，小鼠实验[4-8]证明，这些转基因番茄表达的蛋白可以引起有效的免疫反应，取得了可喜的成果，研究较多的番茄口服疫苗主要有以下几种：乙肝病毒疫苗、口蹄疫病毒疫苗、霍乱弧菌疫苗、狂犬病病毒疫苗、呼吸道合胞病毒疫苗等。 2.1 乙肝病毒转基因番茄口服疫苗 乙肝病毒（hepatitis B virus，HBV）是引发严重慢性肝炎的病原，目前乙肝病毒疫苗的获得是利用酵母细胞通过发酵途径产生的，属于生物技术产物下的亚单位疫苗。HBV 在肝 DNA 病毒家族中属于双链 DNA 病毒。HBV 基因组包括四个基因：pol、env、precore和X，分别编码病毒的 DNA 聚合酶、外壳蛋白、前核心区蛋白和 X 蛋白。乙肝病毒表面抗原（hepatitis B virus surface antigen，HBsAg）的主要成分蛋白即是由 env 基因编码的 S 蛋白。由于 HBsAg 颗粒可以使人体产生专一的抗体，能对病毒的感染起预防作用[9]，因此科学家在进行疫苗研制时都将编码乙肝病毒表面抗原的基因作为研究的重点。 Shchelkunov 等[4]将表达人免疫缺陷病毒（human immunodeficiency virus，HIV）的表位 ENV、GAG 和编码HBsAg 的基因融合，以 CaMV35S 为启动子构建载体，获得转基因番茄。用表达融合蛋白的转基因番茄果实干粉每2 周饲喂一次小鼠，每 7 d 取一次全血检测，结果表明，小鼠对两种病毒均产生免疫反应，说明融合基因可以足量地表达引起免疫反应的抗原。Lou 等[10]为了使乙肝病毒表面抗原能在转基因番茄中更好地表达，将烟草致病相关蛋白（tobacco pathogenesis-related protein S）PR-S 信号肽融合到改良目的基因的 5’ 端，同时将表达氨基酸序列 SEKDEL 的基因融合到 3’ 端，利用果实特异性表达的启动子 2A11，使 HBsAg 大蛋白基因在转基因番茄的果实中特异表达。目的蛋白的最高表达水平占转基因番茄果实可溶蛋白总数的 0.02%，并且在成熟果实中的表达量是其他组织的 65 ~ 171 倍。用免疫金标记方法检测到重组 HBsAg 大蛋白在内质网附近累积，并且证明所捕获的 HBsAg 大蛋白微粒仍旧可以保持与人血清中获得的 HBsAg 具有相同的物理性质， 基金项目：国家转基因专项（2008ZX08005-001） 作者单位：225009 扬州大学生物技术学院（郑卿、葛才林）；210014 南京，江苏省农业科学院生物技术所（郑卿、郭书巧、倪万潮） 通讯作者：倪万潮，Email：niwc@https://www.wendangku.net/doc/276771290.html,；葛才林，Email：gecailin10@ https://www.wendangku.net/doc/276771290.html, 收稿日期：2009-09-14
诺和灵30R(精蛋白生物合成人胰岛素注射液(预混30R))
诺和灵30R(精蛋白生物合成人胰岛素注射液(预混30R)) 药品名称: 商品名称：诺和灵30R 通用名称：精蛋白生物合成人胰岛素注射液(预混30R) 英文名称：Isophane Protamine Biosynthetic Human Insulin Injection(Pre-mixed30R) 主要成份: 本品主要成份及其化学名称为：双时相低精蛋白锌胰岛素。活性成分：生物合成人胰岛素(它是通过基因重组技术，利用酵母生产的)。1IU(国际单位) 相当于0.035mg无水人胰岛素。其它成分：硫酸鱼精蛋白，氯化锌，甘油，磷酸氢二钠二水合物，间甲酚，苯酚，氢氧化钠，盐酸和注射用水。本品是短效和中效胰岛素混悬液的混合物。本品是双时相低精蛋白锌胰岛素注射液，含有30%可溶性胰岛素和70%低精蛋白锌胰岛素混悬液。本品3毫升卡式瓶是为诺和诺德胰岛素注射系统及诺和针特别设计的。只有将笔芯3毫升卡式瓶与配套产品共同使用才能保证 性状及剂型: 白色或类白色混悬液。 适应症: 本品用于糖尿病的治疗。 规格: 300IU/3ml/支(笔芯)，1支/盒。 用法用量: 本品为双效胰岛素制剂。本品的双时相组份包含短效胰岛素和中效胰岛素。当需要同时使用短效胰岛素和中效胰岛素时，通常给予预混胰岛素一天一次或一天二次。 1.用量：剂量因人而异，由医生根据患者的需要而定。用于糖尿病治疗时，平均每日胰岛素需 要量在每公斤体重0.5-1.0国际单位之间。青春期前的儿童，胰岛素的需要量在每日每公斤体重 0.7-1.0国际单位之间。当病情得到部分缓解时，胰岛素的需要量可明显减少;然而，当患者存在 胰岛素抵抗时(如处于青春期或肥胖状态)，每日的胰岛素需要量将会大量增加。由医务人员来决定每天注射一次或几次。本品可单独使用或与短效胰岛素混合使用。在强化胰岛素治疗中，本品可用作基础胰岛素(晚上和/或早上注射)与短效胰岛素混合餐前使用。对糖尿病患者进行良好的血糖水平控制，可以有效延缓糖尿病晚期并发症的发生和发展。因此，建议加强血糖水平监测。 老年患者治疗的主要目的是减轻症状和避免低血糖症。 2.剂量调整伴发其他疾病时(特别是感染和发热)，通常患者的胰岛素需要量会增加。肾功能或
影响番茄果实大小相关基因的研究进展
D O I :10.3969/j .i s s n .1001-5337.2018.2.081 *收稿日期:2017-11-29 基金项目:2017年国家级大学生创新创业训练计划项目(201710446071). 通讯作者:包颖,女,1970-,博士,教授;研究方向:植物学;E -m a i l :b a o y i n g u s @126.c o m.影响番茄果实大小相关基因的研究进展* 刘洪岩, 岳淑婷, 张 琳, 赵文静, 包 颖 (曲阜师范大学生命科学学院,273165, 山东省曲阜市) 摘要: 果实作为被子植物的一种特殊器官,形态变化非常丰富,但其大小变异的分子机制却相对保守.目前,以番茄作为模式体系的研究已经识别出对果实大小具有调控作用的4个基因:f w 2.2二f w 3.2二F A S 和WU S ,这些基因分别隶属C N R 二C Y P 78A 二C L A 和W O X 基因家族,并且从细胞分裂次数和子房室数目改变等两个方面来调控果实大小.这些基因及其各自的基因家族在各类植物中广泛存在,起源古老,甚至可以追溯到陆生植物的祖先,并且每个家族成员在功能上均享有高度的特异性,即均可以对植物果实的大小产生影响.关键词:果实大小;基因;细胞分裂;子房室数目 中图分类号:Q 941 文献标识码:A 文章编号:1001-5337(2018)02-0081-05 果实作为被子植物的一种特殊器官,不但可以为胚珠和种子提供保护,还可以在繁殖期协助种子的传播,利于物种的繁殖.植物果实大小并不一致,重达数千克,轻至几克的植物果实已经屡见不鲜.如此多样的表型,其背后的遗传机制是否相同?本文基于前人的研究,将聚焦模式植物番茄,对控制果型大小有重要影响的功能基因的研究进展进行总结. 1 控制果实大小的重要功能基因 以往研究证明,正常条件下,影响果实大小的主要内因在于细胞分裂次数和子房室数目改变等两个方面 [1,2] . 细胞,特别是果皮细胞的分裂次数增多或子房室增加都会产生大果实,反之则会产生小果实.当然,细胞大小和倍性变化也会不同程度上引发果 实大小改变[3,4 ]. 目前,探究果实大小表型变化背后遗传因素的研究在番茄二甜瓜二南瓜二葡萄 [5-9 ]等众多 植物中广泛开展,其中以番茄研究最为深入.基于早 期的遗传图谱技术[10-12]以及后来的转录组[7-9,13,14]和基因组等比较[1,15] ,目前有4个数量性状位点 (Q u a n t i t a t i v e t r a i t l o c i ,Q T L s )被认为和 果实大小 这种表型密切相关,其分别是控制果实重量的f w 2.2和f w 3.2,以及控制子房数目F A S 和WU S , 下面就这4个基因的研究情况进行简单汇总. 1.1 f w 基因 控制果实的重量f w 是英文 F r u i tW e i g h t 的缩写,以其为前缀的基因包括一系列和果实重量相关的基因位点.最早在番茄的研究中,大约有30个Q T L s 被认为和果实大小的性状相关[16] ,但目前比较公认的主效 Q T L 为f w 2.2和f w 3.2[2,17] . 1.1.1 f w 2.2 f w 2.2基因是细胞数目调控子(C e l lN u m b e r R e g u l a t o r ,C N R )基因家族的一个成员,是由A l p e r t 等人[18] 在番茄2号染色体的N o .2位置上识别的1个控制果实大小的Q T L , 也是第一个被识别和克隆的与数量性状相关的基因[19 ].早期的研究表明,该Q T L 对于野生和栽培番茄鲜果重量差异贡献率高 达30%[16,18,19].为验证其功能,C o n g 等[20] 通过基因表达情况的比较,发现f w 2.2在具有小果实的野生番茄中比具有大果实的栽培番茄具有更高和更持久的表达量,因此推测该基因在影响细胞数目变化过程中应该承担负调控子的作用.此后,利用酵母双杂交二体外结合以及基因枪轰击等技术,C o n g 等再次对f w 2.2在果实发育中的作用机制进行了探究,结果发现f w 2.2是植物特有的蛋白,它和分布在质体膜上的C K I I 激酶的β亚基互作, 参与控制细胞分裂周期的信号转导途径[21]. 另外一些学者也研究了该 第44卷 第2期2018年4月 曲阜师范大学学报J o u r n a l o f Q u f u N o r m a l U n i v e r s i t y V o l .44 N o .2 A p r .2018
胰岛素制备
生物技术制药参考资料 09级制药工程（1）班叶溢民090219011 基因工程制备胰岛素 一、胰岛素的定义 胰岛素是由胰岛β细胞受内源性或外源性物质如葡萄糖、乳糖、核糖、精氨酸等的刺激而分泌的一种蛋白质激素。 二、目前临床使用的胰岛素来源 1、动物胰岛素：从猪和牛的胰腺中提取，两者药效相同，但与人胰岛素相比，猪胰岛素中有1个氨基酸不同，牛胰岛素中有3个氨基酸不同，因而易产生抗体。 2、半合成人胰岛素：将猪胰岛素第30位丙氨酸，置换成与人胰岛素相同的苏氨酸，即为半合成人胰岛素。 3、重组人胰岛素（现阶段临床最常使用的胰岛素）：利用生物工程技术，获得的高纯度的生物合成人胰岛素，其氨基酸排列顺序及生物活性与人体本身的胰岛素完全相同。 三、目前，国际上生产医用重组人胰岛素(recombi—nant human insulin，rhI)的方法 1、用基因工程大肠杆菌escherichia coli，E．CO一)分别发酵生产人胰岛素(human insulin，hi)的A、B链，然后经化学再氧化法，使两条链在一定条件下重新形成二硫键，得到hI。这一方法缺点较多，目前已较少使用； 2、用基因工程E．coli发酵生产人胰岛素原(hu—man peoinsulin，hPI)，后经加工形成hI。E．coli系统表达量高，但缺点是不利于表达hI这样的小蛋白，产物易降解，故常采用融和蛋白形式将hPI连接在一个较大的蛋白质后，表达产物需经过一系列复杂的后加工才能形成有活性的hi； 3、通过基因工程酵母菌发酵生产hPI，经后加工形成hI。酵母系统下游后加工比细菌表达系统简单，但缺点是生产慢，生产周期长，且重组蛋白分泌量少(1～50 mg／L)，产量低。因此，虽然rhI投放市场已久，但人们一直在努力寻求和探索更加有效的表达系统和高效的表达策略I2 J，尤其是对E．CO一尻表达系统的研究更是越来越深入，用E．coli系统表达hPI的策略也越来越多。另一方面，在胰岛素的基因工程生产中，下游处理非常复杂，复杂的下游处理极大地降低了胰岛素的最终收率。本研究围绕着提高重组目的蛋白表达量，简化下游处理过程等方面进行探索，建立了一套经过优化的高效完整的基因工程E．coli发酵表达(His)6一Arg—Arg一人胰岛素原[(His)6一Arg—Arg—human proinsulin，PPh—PI]，后加工成hI的制备工艺。 四、基因工程制备胰岛素 1、提取目的基因：既从人的DNA中提取胰岛素基因，可使用限制性内切酶将目的基因从原DNA中分离。主要有如下4种方法： （1）鸟枪法：用一大堆限制性核酸内切酶对附近基因进行剪切，再提取所需要的。至于如何筛选，用DNA分子杂交，即DNA探针 （2）人工合成法：根据转录蛋白或者mRNA推导出基因序列，然后人工合成，没有内含子。 （3）从基因文库中提取：也就是事先已经提取完毕的拿来用 （4）PCR扩增技术：用于大量生产该段基因片段，用于商业化运作…… 2、提取质粒：使用细胞工程,培养大肠杆菌，从大肠杆菌的细胞质中提取质粒，质粒为 环状。主要有如下2种方法： （1）碱裂解法：此方法适用于小量质粒DNA的提取，提取的质粒DNA可直接用于
大肠杆菌生产制备重组人胰岛素实用工艺
1.提取目的基因: 既从人的DNA中提取胰岛素基因,可使用限制性内切酶将目的基因从原DNA中分离. 2.提取质粒: 使用细胞工程,培养大肠杆菌,从大肠杆菌的细胞质中提取质粒,质粒为环状DNA. 3.基因重组: 取出目的基因与质粒,先利用同种限制性内切酶将质粒切开,再使用DNA连接酶将目的基因与质粒"缝合",形成一个能表达出胰岛素的DNA质粒. 4.将质粒送回大肠杆菌: 再大肠杆菌的培养液中加入含有Ca+的物质,如CaCl2,这使细胞会吸收外源基因.此时将重组的质粒也放入培养液中,大肠杆菌便会将重组质粒吸收. 5.胰岛素的产生: 再大肠杆菌内,质粒通过表达转录与翻译后,便产生出胰岛素蛋白质.通过大肠杆菌的大量繁衍,便可大量生产出胰岛素! 〖学习要求〗知道DNA的粗提取与鉴定的原理；掌握并能分析DNA粗提取的技术方法和要求；学会DNA分子的鉴定方法 【预习指导】在课前时间通过阅读教材、同学交流和讨论，完成下列问题，并 初步巩固。 一、基础知识 【活动1】阅读教材P54“基础知识”，讨论并回答下列问题： 1．（记忆）提取生物大分子的基本思路是利用它们的理化性质的不同进行分离。2．（记忆）DNA的溶解性特点： DNA在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同；DNA不溶于酒精而蛋白质溶于酒精。【思考1】据图5－1分析： DNA在不同浓度NaCl溶液中溶解度有何特点？在0.14mol/L时溶解度最小；
要使DNA溶解，需要使用什么浓度？较高浓度，可使DNA溶解； 要使DNA析出，又需要使用什么浓度？0.14mol/L可使DNA析出。 【思考2】利用DNA不溶于酒精的原理，可以达到将DNA和蛋白质进一步分离目的。 3．（记忆）DNA的耐受性特点： 蛋白酶能分解蛋白质而不能分解DNA；在60～80℃时蛋白质变性沉淀而DNA 分子不变性。洗涤剂能与蛋白质结合瓦解细胞膜而不破坏DNA分子。 4．（记忆）DNA的鉴定原理 当鉴定提取出的物质是否是DNA时，需要使用二苯胺（甲基绿）进行鉴定。在沸水浴条件下，该试剂与DNA反应，呈现（浅）蓝色。 二、实验设计 【活动2】阅读教材P55“实验设计”，讨论并回答下列问题： 1．（记忆）实验材料的选取：选取材料时应本着DNA含量高、材料易得、便于提取的原则。 【思考3】你认为教材提供的材料中哺乳动物的血液不适合提取DNA。 2．（记忆）破碎细胞，获取含DNA的滤液：
预混胰岛素类似物
---------------------------------------------------------------最新资料推荐------------------------------------------------------ 预混胰岛素类似物 预混胰岛素类似物预混胰岛素类似物糖尿病是全世界危害性最大的慢性病之一。 随着经济水平的持续提高和生活方式的骤变，我国居民患糖尿病的几率正在迅速增高。 据最新的调查数据显示，目前我国糖尿病患者已达到 9200 万人，而且他们具有以下特征： ①血糖的达标率较低。 ②有 80%的Ⅱ 型糖尿病患者出现了并发症。 存在这些问题的根本原因是，我国糖尿病患者进行起始治疗和进行胰岛素治疗的时间常被延误。 以前，使用胰岛素治疗常被看作是治疗糖尿病的最后手段，糖尿病患者只有在进行生活方式干预和联合使用多种口服降糖药治疗无效后才启用这一疗法。 2010年末，中华医学会糖尿病学分会发布了新版的《中国 2 型糖尿病防治指南》。 该指南指出， 2 型糖尿病患者在进行生活方式干预和联合应用降糖药治疗 3 个月后若血糖仍不达标，即可加用预混胰岛素类似物等胰岛素进行治疗。 这一年，预混胰岛素类似物成为我国 2 型糖尿病患者进行个体化治疗的首选药物。 1 / 5
在 2019 年的第 71 届美国糖尿病学会年会上，有史以来规模最大的 2 型糖尿病观察性研究――A1chieve 研究的成果备受人们的关注[1]。 该研究为期 24 周，有 28 个国家的 66726 名 2 型糖尿病患者（其中包括我国的 11020 名2 型糖尿病患者）和 3000 多名专业医师参与研究，是一项国际性、前瞻性、多中心的观察性研究。 A1chieve 研究的成果成为我国糖尿病防治方面最权威、最准确的临床资料，对我国糖尿病临床工作有重大的指导作用。 在这项研究中，糖尿病患者主要是使用预混胰岛素类似物治疗，其用药的有效性、不良反应、发生低血糖的几率及生活质量的改善情况都得到了准确的评估。 A1chieve 研究结果证实，在该研究涉及的所有糖尿病患者中，约有 9%的患者尽管其平均糖化血红蛋白水平高于 10%，但未服用任何降糖药，约有 58%的患者虽然血糖控制不佳，但仍单用口服降糖药进行治疗。 我国参加此项研究的糖尿病患者服用降糖药的比例及使用胰岛素的比例均低于全球平均水平。 A1chieve 研究结果还证明，与预混人胰岛素相比，预混胰岛素类似物控制血糖的能力与其相当，但预混胰岛素类似物在模拟生理性胰岛素分泌和减少发生低血糖几率等方面均较优。 预混胰岛素类似物可同时控制空腹血糖及餐后血糖，可避免胰岛细胞进一步受损，并可减少患者发生慢性并发症的几率。
中国转基因食品名单最新一览
中国转基因食品名单最新一览 我国转基因食品名单一直是大家关注的话题，那么中国有哪些食品是转基因的？下面小编分享了转基因食品名单，一起来了解吧。 转基因食品名单中国农业部已经批准种植的转基因农作物有：甜椒、西红柿、土豆;主粮作物有玉米、水稻。今后可能陆续批准的农作物有小麦、甘薯、谷子、花生等。进口的转基因食品有大豆油、菜子油、大豆等。目前只有花生油不是转基因的。麦当劳、肯德基的食品基本全部是转基因的。猪、牛、鸡饲料是转基因玉米、转基因大豆。转基因大豆油是用6号轻汽油浸出的。 没有承诺不使用转基因成份，或没有回应查询的品牌： 食用油和调味品：太太乐、辣得劲、迎春楼、四季宝、金象牌、粤皇、味好美牌、美味鲜牌、贵夫人、家乐、老蔡、阿香婆、元宝牌、百味佳牌、老才臣牌、鹰唛、好乐门、红宝牌、福临门、红灯牌、狮头唛、大满贯、鸿禧牌、金龙鱼、花旗、刀唛饼干：乐之、趣多多、鬼脸嘟嘟、奥利奥、天伦、美嘉思、丹麦蓝罐曲奇。 即溶饮品及冲调食品：雀巢、美禄、雀巢巧伴伴、麦斯威尔、果珍、伊利、南方、金味、南国、百草堂、荔八江。 饮料及奶制饮品：康师傅、伊利、杨协成、非常可乐、京华、娃哈哈、新奇士婴儿食品及奶粉：雀巢、三鹿、伊利、安怡、安满、亨氏膨化食品及零食：可比客、卡乐B、明治、卡露芙、旺旺糖果
及果冻：雀巢、雀巢奇巧、瑞士糖、喜之郎。雪糕：雀巢、五羊、和路雪、伊利。 转基因蔬菜一般具备的特征如下1、没有传统蔬菜参差不齐的外形，普遍个头均匀，型大体长，色泽光艳，质地鲜嫩，如黄瓜、茄子、丝瓜、洋葱等; 2、非传统原始地道的味道，无论是烹调前或烹调后的气味还是滋味具备与传统蔬菜明显的区别，如甜椒等; 3、非当地时令菜蔬，各类蔬菜的一大特性就是均具备很强的季节性和地域性，有部分非当地时令菜蔬并非依靠外地长时间保鲜和运输而来，而是靠转置耐寒或耐高温基因所得。 被确认的转基因食物如下：1、生菜2、甜椒3、玉女番茄4、紫番薯5、非洲鲫鱼6、非洲鲇鱼(塘虱鱼)。 警惕几大知名转基因大豆油品牌! 1、金龙鱼牌，大豆油、色拉油、调和油等，市场占有率约40%，资方为新加坡丰益国际华裔郭鹤年家族+美国ADM公司; 2、福临门牌，大豆油、色拉油、调和油等，市场占有率约30%，资方为国资中粮集团+新加坡丰益国际+美国ADM公司; 另外，我国目前各地方食用油品牌仍然多达数百个，大多数为降低成本，采用转基因大豆油，但是市场占有率不大，购买时可看清标注，如本品为转基因大豆油，巴西大豆，浸出等字样，购买时需请谨慎。 转基因食品名单除了以上的还有其他没有统计的，更多有关转基因食品方面的内容，请关注养生之道网有机食品频道。