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说明书摘要

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本发明的中草药的产品的有效成分由紫锥菊、金银花、贯叶连翘、甘草、大青叶、桔梗、淡竹叶、薄荷和金丝桃素组成。本发明的中草药能够辛凉解表,清热解毒;主治:驱邪扶正,平衡阴阳,提高机体的非特异免疫能力。本发明的中草药对家禽的精神沉郁,采食量减少,产蛋下降,及不明病毒引起的家禽眼睑肿胀,呼吸道炎症,黄绿色粪便,增重下降,产软壳蛋,死亡率升高等均有显著的治疗作用;能够用于非典型新城疫,禽流感等病的早期防治及对相关的混合感染,继发感染,非典型病和慢性病例的治疗;对愈后生产性能恢复也有良好的促进作用。

摘要:【目的】探讨自行研制的由贯众、板蓝根、黄芪、柴胡、连翘、黄连、金银花、黄芩及甘草配制的复

方中药在体内、体外对禽流感病毒的抑制作用、药物代谢动力学、急性毒性试验及对SPF 鸡免疫功能的影响。【方

法】在鸡胚、MDCK 细胞上进行复方中草药对H5N1 和H9N2 亚型禽流感病毒的直接灭活作用、治疗作用和预防作用;

在体内通过药物累计法研究复方中药在昆明鼠体内的药物代谢动力学;采取口服和腹腔注射两种给药途径研究复

方中药对昆明鼠的急性毒性试验;通过免疫器官的指数、在FAC 上测量CD3+、CD4+、CD8+及TCR+的含量及采用血凝

抑制(HI)方法检测血清中H9 亚型禽流感抗体滴度研究复方中草药的对SPF 鸡免疫功能的影响;通过体外试验研

究其对H5N1 禽流感病毒的治疗作用。【结果】该复方药物在鸡胚内对H5N1 亚型禽流感病毒的有效灭活浓度、治

疗浓度及预防浓度分别是31.25 mg·ml-1、125 mg·ml-1 及250 mg·ml-1,对H9N2 亚型禽流感病毒的有效灭活浓度、治

疗浓度及预防浓度分别是31.25 mg·ml-1、15.625 mg·ml-1 及62.5 mg·ml-1;在MDCK 上对H5N1 亚型禽流感病毒的有

效灭活浓度及预防浓度分别是31.25 mg·ml-1、125 mg·ml-1,治疗浓度未测出。对H9N2 亚型禽流感病毒的有效灭活

浓度、治疗浓度及预防浓度分别是15.625 mg·ml-1、31.25 mg·ml-1 及31.25 mg·ml-1;其在小白鼠体内的经时过程为

一室模型。其药-时方程式为:C=650.66e-4.9078t ;口服复方中药后对昆明小鼠无毒;腹腔注射复方中药后对昆明小

鼠的半数致死量(LD50)为425.6 mg·kg-1;给药后21 d,CD3+、CD4+、CD8+及TCR+的含量分别为64.01%、27.39%、

45.05%和32.19%;免疫后半个月,给药-免疫组的禽流感抗体滴度比免疫组高1.6 个滴度;同群感染组中,该复

方中药预防组的保护率达30%,而治疗组为20%;【结论】体外试验表明,复方中药不仅对禽流感病毒有直接灭活

作用,而且对吸附于细胞表面和进入细胞内的禽流感病毒都有抑制作用;其药物代谢动力学特征是吸收快、消除

慢;该复方中药不仅安全、而且能增强鸡的体液免疫、细胞免疫功能、增加免疫器官指数。体内试验表明,该复

方中药能延长鸡的平均死亡时间,预防效果强于治疗效果。总之,自行研制的复方中药具有预防、安全、延长感

染鸡的存活时间、增强机体免疫力的作用。

关键词:禽流感病毒;复方中药;防治;药物代谢动力学;安全性;免疫功能

Study of the Compound Chinese Medicine Against

the Anti-avian Influenza Virus

LI Yan-hua1, YAN Qing-bo1, YU Kang-zhen2, TONG Heng-min1, SUN Yuan1

(1College of Veterinary Medicine, Northeast Agricultural University, Harbin 150030;

2China Institute of Veterinary Drug Control, Beijing 100081)

Abstract: 【Objective】To research the inhibiting effects of compound Chinese medicine against the avian influenza virus in

vivo and in vitro, its pharmacokinetics and acute toxicity test, its effects on immune function of SPF chicken.【Method】The effects of direct inactivation, preventive and therapeutic effects of compound Chinese medicine on the anti-avian influenza virus were studied on chicken embryo and MDCK cell. Its pharmacokinetics were studied by drug residual accumulation. The acute toxicity test of the compound Chinese medicine was studied by oral administration and intraperitoneal injection on Kunming mice. The effects of 引言

【研究意义】家禽流感(avian influenza)是由

流感病毒引起的严重危害家禽类的一种急性接触性传

染病。高、低致病力的禽流感给世界各国的养禽业均

带来巨大的经济损失。禽流感病毒(avian influenza

virus,AIV)抗原具有多样性,各亚型之间缺乏坚强

的交叉保护作用。由于临床上常用的抗禽流感病毒药

物例如盐酸金刚烷胺使产蛋鸡产量下降,同时AIV 对

其易产生耐药性,而病毒唑、病毒灵不仅使产蛋量

下降,而且是人畜共用的药物,限制了它们在临床的

应用。此外由于药物残留问题已经限制了中国动物源

性食品的出口,所以开发出一种绿色、无污染、安全、

有效、畜禽专用的抗禽流感病毒药物已迫在眉睫。该

药物的研制不仅可以解决处在亚临床状态鸡群的免疫

问题,而且是有效预防禽流感的途径之一。【前人

研究进展】中草药在中国资源丰富,价格低廉。相对

于化学合成药物而言,中草药有多种有效成分,不仅

具有毒性低、不易产生副作用、多靶点、病原微生物

对其不易产生耐药性的优点,而且在抗菌抗病毒的同

时,还能促进动物生长,增强动物的免疫机能,提高

机体抗病力。目前,国内研究的抗流感病毒中草药大

多数是解表药和清热药以及以他们为主药组成的中成

药,受到国内外学者的关注。禽流感和人流感有密切的相关性,目前分离的禽流感

病毒,几乎包罗全部人流感病毒的两种表面抗原,从

感染流感的家禽体内能分离到人流感病毒并能检测到

相应的抗体。近几年来,禽流感已经给世界各国带来

了巨大的经济损失,中草药是中国最有可能获得自主

知识产权的一大类药物,具有较强的竞争力和市场潜

力,所以开展对抗禽流感病毒中草药的研究已势在必

行。本试验对自行研制的抗禽

流感病毒复方药物进行体外试验,毒性试验、药代动

力学试验及对SPF 鸡免疫功能影响的试验,从而为临

床应用奠定基础。

1 材料与方法

1.6.2 动物分组按性别、体重等组间一致原则将小

鼠分为6 组,每组20 只,第一次给药后不同时间第二次用药,观察2 次用药后的死亡率(不再出现死亡为止)。腹腔注射药液容量为0.5 ml,125 mg·kg-1 bw。

1.6.3 计算方法由表查出各死亡率的几率单位,按

D-P 直线找出死亡率的相应剂量,按下列计算药量的

体存%。

体存率%=(死亡率相应的函数剂量-第二次用

量)/第一次用量×100%

式中第一次和第二次用量在本试验中是相等的。就间

隔时间与体存率、log 体存率作图,即得出一次用药后体存率%的动态变化。此变化若符合一级动力学规律,则按MCPKP 程序拟合药时曲线,也就是以体存%和

时间的数据经MCPKP 程序进行拟合[4]。

1.7 复方中药对SPF 鸡免疫功能的影响

将1 日龄80 羽SPF 鸡随机分成4 组,每组20 羽,

统一饲喂相同的全价饲料。两组40 只鸡从1 日龄起

0.5%复方中药饮水,其中20 只鸡15 日龄免H9 亚型

的禽流感油乳剂灭活疫苗。其余20 只作为给药组;其余40 只鸡中,20 只15 日龄免H9 亚型的禽流感油乳

剂灭活疫苗,为疫苗对照组;另外20 只为空白对照组。从15 日龄开始,22 d、29 d 随机抽取发育正常的5 羽鸡,按常规方法解剖,分离并测定胸腺、脾脏、法氏

囊免疫器官的指数(免疫器官重量除以相应鸡体重求

得各脏器指数)。了解免疫器官生产发育情况。在21

日龄,从4 组试验鸡中随机挑选5 只,心脏采2 ml 1514 中国农业科学41卷

肝素抗凝血。在FAC 上测量CD3、CD4、CD8 及γδTCR 的含量。采用血凝抑制(HI)方法检测血清中禽流感

抗体滴度。

1.8 复方中药防治SPF 鸡感染禽流感病毒的试验

试验共分5 组,第Ⅰ组是中药治疗组,共18 只8

周龄SPF 鸡。18 只鸡同时给予0.5%的中药饮水。其

中8 只给药同时功击H5N1 亚型禽流感病毒,攻毒剂量为104 EID50/0.1 ml,肌肉注射0.2 ml。另外10 只不攻毒,以便模拟鸡场鸡群自然感染及给药后的治疗情况。第Ⅱ组是盐酸金刚烷胺对照组,共17 只8 周龄

SPF 鸡。17 只鸡同时给予0.1%的盐酸金刚烷胺饮水。其中7 只攻毒同时给药,攻毒剂量为104 EID50/0.1 ml,肌肉注射0.2 ml。另外10 只不攻毒,以便模拟鸡场鸡

群在给予盐酸金刚烷胺后的治疗情况。

第Ⅲ组是中药预防组。试验用鸡12 只8 周龄SPF

鸡,12 只鸡均在攻毒前15 d 给予0.5%的中药。其中

6 只攻毒,攻毒剂量为104 EID50/0.1 ml,肌肉注射0.2 ml/只。另外6 只不攻毒,以便模拟鸡场鸡群在给予复

方中药后的预防及治疗情况。

从攻毒开始连续观察14 d,观察并记录鸡的死亡

数,然后计算死亡率,保护率、平均存活时间。在攻毒后3、5、7d 采集泄殖腔、喉头棉试子,采集的棉试子用灭菌生理盐水配成10-1~10-8 悬液,尿囊腔接种在9~10 日龄5 只SPF 鸡胚内,在37℃孵育48 h,按照微量红细胞凝集法,检查鸡胚尿囊液中血凝活性。如具有血凝活性,通过血凝抑制试验在排除新城疫病毒感染的前提下,说明有禽流感病毒的存在。

第Ⅳ组是对照组。对照组分3 组。一组为攻毒组,

攻毒剂量同其它组,共8 只SPF 鸡,另外一组为7

只SPF 鸡同群感染组,最后一组未感染病毒对照组,由4 只SPF 鸡组成。

2 结果与分析

2.1 复方药物最大无毒剂量测定

药物对鸡胚、MDCK 的无毒剂量分别是1 000 和

62.5 mg·ml-1。

2.2 复方药物体外抗病毒的作用

2.2.1 复方药物在鸡胚内对禽流感病毒的作用复

方药物在鸡胚内对H5N1 亚型禽流感病毒的有效灭活浓度、治疗浓度及预防浓度分别是31.25、125 及250 mg·ml-1,对H9N2 亚型禽流感病毒的有效灭活浓度、治疗浓度及预防浓度分别是31.25、15.625 及62.5 mg·ml-1。

2.2.2 复方药物在MDCK 上对禽流感病毒的作用复

方药物在MDCK上对H5N1 亚型禽流感病毒的有效灭活浓度、预防浓度分别是31.25 和125 mg·ml-1,治疗

浓度未测出。对H9N2 亚型禽流感病毒的有效灭活浓度、治疗浓度及预防浓度分别是15.625、31.25 及31.25 mg·ml-1。

2.3 复方药物的安全性研究

2.3.1 复方中药口服组对小白鼠的急性毒性试验

复方中药口服后,没有引起小白鼠的死亡。但在高剂量时有体重减轻的趋势。

2.3.2 复方中药腹腔注射后对小白鼠的急性毒性试

验小白鼠腹腔注射中药10 min 后,即表现出兴奋不安,痉挛,缩成一团,呼吸困难,在给药后0.5 h 出现死亡。对死亡鼠各脏器进行剖检:肝脏体积稍肿大,被膜紧张,边缘钝圆,表面呈暗紫红色,切面呈暗红色,质地变软。脾、肾脏体积均增大。按照剂量的减少,死亡率也相应减少,而且脏器病变也逐渐降低。经组织学病理切片后可以看出各脏器的病理变化与剂量呈一定的关系。用简化几率单位计算法(亦称和尔恩法)计算CD50。该复方中药经腹腔注射后,对小白鼠的CD50 为425.6 mg·kg-1 bw。

2.4 复方药代动力学试验

根据小白鼠死亡率计算体存药物量,通过MCPKP

程序对体存百分率与间隔时间拟合后,计算药代动力

学参数及药-时方程。该复方药物在小白鼠体内的经时

过程为一室模型。其药-时方程式为:C=650.66e-4.9078t,

药动学参数见表1。

表1 复方中药在小白鼠体内的表观药动学参数

Table 1 Pharmacoketics parameter of the compound Chinese

medicine in mouse

参数Pameters 单位Unit 数值Value

初始浓度Co μg·ml-1 622.547

吸收速率常数Ka 1/nrs 4.9078

消除速率常数Kel 1/nrs 0.1501

吸收相半衰期T1/2 h 0.1412

消除相半衰期T1/2βh 4.6176

Tp h 0.733

达峰浓度Cmax μg·ml-1 557.69

曲线下面积AUC mg·L-1·h-1 4148.1

滞后时间Lagtime h 0

Tcp(ther)h 70.592

表观分布容积V L·mg-1 10.039

消除率D L·h-1·kg-1 1.507

5 期李艳华等:复方中药对禽流感病毒的防治研究1515

2.5 复方中药对SPF 鸡免疫功能的影响

2.5.1 复方中药对免疫器官指数的影响复方中药

饮水组的法氏囊指数、脾脏指数、胸腺指数在14 日龄

明显高于对照组。

2.5.2 复方中药对雏鸡血清中禽流感抗体滴度的影

响在免疫后半个月,给药组+免疫组的禽流感抗体

滴度比免疫组高1.6 个滴度。

2.5.3 复方中药对SPF 鸡体重变化的影响给药组

的体重明显高于对照组,其中在第21 天时重量差异显

著。

2.5.4 不同的外周血液中CD3+、CD4+、CD8+、TCR+T

淋巴细胞变化CD3+、CD4+、CD8+、TCR+T 淋巴细

胞的变化情况见表2。

2.6 复方中药防治SPF 鸡感染禽流感病毒的试验

表2 复方中药对外周血液中T 淋巴细胞的影响(百分比)

Table 2 Influence of the compound Chinese medicine on T lymphocyte on peripheral blood (percentage) 组别Group 动物数No. CD3+ CD4+ CD8+ TCR+

Ⅰ5 31.25±5.68 21.49±3.42 14.56±4.57 11.46±1.39

Ⅱ5 36.57±4.56 30.74±1.98 28.12±9.16 26.27±2.56

Ⅲ5 63.61±7.65 29.69±6.79 35.58±8.17 33.186±5.66

Ⅳ5 64.01±4.32 27.39±5.79 45.05±6.32 32.19±4.47

Ⅰ组为空白对照组;Ⅱ组为疫苗免疫组;Ⅲ组为疫苗+给药组;Ⅳ组为给药组

Ⅰ. CK;Ⅱ. Immune group ;Ⅲ. Vaccine+MDCK;Ⅳ. MDCK group

2.6.1 保护作用除未感染病毒对照组外,感染病毒

组均有鸡只死亡。

(1)中药对感染病毒组的保护作用在攻毒同时

给予药物的试验组保护率均低于同群感染后给药组。

复方中药治疗组保护率为0,说明其不能完全抑制禽

流感病毒在鸡体内的复制与繁殖。而盐酸金刚烷胺组

的保护率为14.3%,说明盐酸金刚烷胺能起到一定的

保护作用。

从平均死亡时间来看,病毒感染对照组鸡只死亡

最快,其次是中药治疗组、中药预防组、再次是盐酸

金刚烷胺组,最后为对照组。

(2)同群感染组保护作用除未感染禽流感病毒

对照组以外,其它组均有鸡只死亡。保护率以盐酸金

刚烷胺为最高,达33.4%,其次为复方中药预防组达

30%,再次是复方中药治疗组为20%。

2.6.2 病毒分离情况

(1)感染病毒组对感染病毒组的鸡只在3、5、

7 d 分离病毒。泄殖腔棉试子、喉头棉试子分离病毒情

况见表3。

(2)同群感染组对同群感染组的鸡只在3、5、

7 d 分离病毒。分别采集泄殖腔棉试子和喉头棉试子,

结果见表4。

3 讨论

3.1 该复方中药的特点

中药复方是中医临床治病的主要形式和手段,是

中药药学的重要组成部分。中药复方是单味用药的发

展,复方的作用明显优于单味药。禽流感病毒感染后,

极易并发细菌感染,此外引起全身器官出血性变化,

引起免疫抑制,所以选用一些抗禽流感病毒效果好的,

且有抗菌作用的复方中药。本方针对发病鸡出现高热、

出血、腹泻、饮食欲降低或废绝、免疫力低下等共性,

表3 病毒感染组泄殖腔棉试子、喉头棉试子病毒分离情况

Table 3 Isolation of avian influenza virus of cloacal swabs and throat swabs 泄殖腔棉试子病毒分离情况

Isolation of virus from cloacal swabs

喉头棉试子病毒分离情况

Isolation of virus from throat swabs

病毒分离率Isolation rate of virus (%) EID50 病毒分离率Isolation rate of virus (%) EID50

病毒引言

【研究意义】禽流感(avian influenza)是由A 型

流感病毒引起的严重危害养鸡业的一种急性接触性传

染病。高、低致病力的禽流感给世界各国的养禽业均

带来巨大的经济损失[1]。禽流感病毒(avian influenza

virus,AIV)抗原具有多样性,各亚型之间缺乏坚强

的交叉保护作用。由于临床上常用的抗禽流感病毒药

物例如盐酸金刚烷胺使产蛋鸡产量下降,同时AIV 对其易产生耐药性[2,3],而病毒唑、病毒灵不仅使产蛋量下降,而且是人畜共用的药物,限制了它们在临床的应用。此外由于药物残留问题已经限制了中国动物源性食品的出口,所以开发出一种绿色、无污染、安全、有效、畜禽专用的抗禽流感病毒药物已迫在眉睫。该药物的研制不仅可以解决处在亚临床状态鸡群的免疫问题[4],而且是有效预防禽流感的途径之一。【前人

研究进展】中草药在中国资源丰富,价格低廉。相对于化学合成药物而言,中草药有多种有效成分,不仅具有毒性低、不易产生副作用、多靶点、病原微生物对其不易产生耐药性的优点,而且在抗菌抗病毒的同时,还能促进动物生长,增强动物的免疫机能,提高机体抗病力。目前,国内研究的抗流感病毒中草药大多数是解表药和清热药以及以他们为主药组成的中成药,受到国内外学者的关注[5~10]。【本研究切入点】

禽流感和人流感有密切的相关性,目前分离的禽流感病毒,几乎包罗全部人流感病毒的两种表面抗原,从感染流感的家禽体内能分离到人流感病毒并能检测到相应的抗体。近几年来,禽流感已经给世界各国带来了巨大的经济损失,中草药是中国最有可能获得自主知识产权的一大类药物,具有较强的竞争力和市场潜力,所以开展对抗禽流感病毒中草药的研究已势在必行。【拟解决的关键问题】本试验对自行研制的抗禽流感病毒复方药物进行体外试验,毒性试验、药代动力学试验及对SPF 鸡免疫功能影响的试验,从而为临床应用奠定基础。

1 材料与方法

1.1 供试试剂和病毒

复方中兽药,为黄褐色透明澄清液体,自行研制

含量1 g·L-1 的生药,由贯众、板蓝根、黄芪、柴胡、连翘、黄连、金银花、黄芩及甘草9 味组成。对照组盐酸金刚烷胺购于东北制药总厂;H5N1 和H9N2 亚型的禽流感病毒、MDCK 细胞由中国农业科学院动物流感中心提供;细胞培养板(24,96 孔)、DMEM 购于Gibco 公司;SPF 鸡胚、8 周龄SPF 鸡由中国农业科学院哈尔滨兽医研究所实验动物中心提供;淋巴细胞分离液购自中国医学科学院血液学研究所;FITC 标记的CD3 购自Southern Biotechnology Associates.

5 期李艳华等:复方中药对禽流感病毒的防治研究1513 Inc 公司,FITC 标记的CD4、CD8、TCR 由乔传玲博士后、姜永萍博士惠赠。H9 亚型禽流感油乳剂灭活疫苗由中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感开放实验室提供,FACScanTM(Flow cytometer BDIS,San Jose,CA),Beckman 离心机等。

1.2 药物无毒剂量测定

1.2.1 药物对鸡胚的最大无毒剂量取上述复方药

液的多个稀释度接种5 个10 日龄鸡胚(0.2 ml/胚),

同时设灭菌生理盐水对照,24 h 以内死亡鸡胚弃掉,24 h 后死亡鸡胚及时取出冷冻,活鸡胚继续孵化直至

出雏。

1.2.2 药物对犬肾细胞(MDCK)毒性试验取上述用

细胞维持液稀释的不同稀释度的复方中药,每稀释度

接种4 孔,每管1 ml,并设正常对照管,每天观察细

胞病变,观察结果。

1.3 中草药在鸡胚上抗禽流感病毒试验

1.3.1 中草药与禽流感病毒直接灭活作用将不同

浓度的样品分别与等量105 EID50 的H5N1 与104 EID50

的H9N2 混匀,在室温作用1 h 后,立即分别接种于9~10 日龄鸡胚尿囊腔内,每组4 枚,37℃孵育96 h,分

别测定各组鸡胚尿囊液内的血凝效价。同时设生理盐水,病毒及室温放置1 h 后的病毒对照[5,10~13]。

1.3.2 中草药在鸡胚上对禽流感病毒的治疗作用

将9~10 日龄鸡胚分组,4 个/组,先分别接种104EID50 H9N2 和105EID50 H5N1 0.1 ml,接种于尿囊腔内,37℃孵化1 h 后,接种各稀释度的复方中药,37℃孵化96 h。测定每组鸡胚尿囊腔中病毒的血凝效价。

1.3.3 中草药在鸡胚上对禽流感病毒的预防作用

先依法接种药物,后接种病毒,操作方法同上。

1.4 中草药在MDCK 上抗禽流感病毒试验

1.4.1 中草药与病毒相混立即加入细胞将不同稀

释度、不同中草药(在最大无毒剂量基础上)与等体

积10TCID50 H9N2 和H5N1 混合作用1 h 后,立即接

种细胞,并同时设病毒对照,正常细胞和药物对照。1.4.2 中草药在MDCK 上对禽流感病毒的预防作用

先用不同稀释度、不同中草药37℃处理细胞1 h 后,

按1.3.1 中方法加入病毒。同时设病毒对照,正常细胞和药物对照。

1.4.3 中草药在MDCK 上对禽流感病毒的治疗作用

先接种10TCID50 H9N2 和H5N1 病毒感染细胞,在37℃孵化1 h,按1.3.1 中方法加入各稀释度不同中药。同时设病毒对照,正常细胞和药物对照。

1.4.4 结果判定在鸡胚内,能抑制血凝滴度32 倍

以上的最小药量,即为有效药物浓度。在MDCK 细胞系统内,不引起细胞病变的药物浓度为有效的药物浓

度[6]。

1.5 急性毒性试验-半数致死量(LD50)的测定

采取口服和腹腔注射两种给药途径。口服剂量为

330 mg/10 g bw,口服组组间剂量比为1﹕0.8,试验共

分7 组,其中一组为对照组,10 只/组;连续观察7 d,并称量体重。腹腔注射组注射剂量为50 mg/10 g bw,

组间剂量比为1﹕0.75,试验共为6 组,其中一组为对

照组,10 只/组。腹腔注射后,死亡动物及时剖检并取心、肝、脾、肾、肺做病理切变,观察其病理变化。

采用简化机率单位计算法计算LD50。

1.6 复方药代动力学的研究[14]

1.6.1 给药剂量及给药时间的确定取CD5~CD35

内剂量。本试验取CD11 的剂量即125 mg·kg-1 bw 两次

相同量用药。取0.5、1、2、4、8、12 h 6 个时间点再

次给药。

1.6.2 动物分组按性别、体重等组间一致原则将小

鼠分为6 组,每组20 只,第一次给药后不同时间第二次用药,观察2 次用药后的死亡率(不再出现死亡为止)。腹腔注射药液容量为0.5 ml,125 mg·kg-1 bw。

1.6.3 计算方法由表查出各死亡率的几率单位,按

D-P 直线找出死亡率的相应剂量,按下列计算药量的

体存%。

体存率%=(死亡率相应的函数剂量-第二次用

量)/第一次用量×100%

式中第一次和第二次用量在本试验中是相等的。就间

隔时间与体存率、log 体存率作图,即得出一次用药后体存率%的动态变化。此变化若符合一级动力学规律,则按MCPKP 程序拟合药时曲线,也就是以体存%和

时间的数据经MCPKP 程序进行拟合[4]。

1.7 复方中药对SPF 鸡免疫功能的影响

将1 日龄80 羽SPF 鸡随机分成4 组,每组20 羽,

统一饲喂相同的全价饲料。两组40 只鸡从1 日龄起

0.5%复方中药饮水,其中20 只鸡15 日龄免H9 亚型

的禽流感油乳剂灭活疫苗。其余20 只作为给药组;其余40 只鸡中,20 只15 日龄免H9 亚型的禽流感油乳

剂灭活疫苗,为疫苗对照组;另外20 只为空白对照组。从15 日龄开始,22 d、29 d 随机抽取发育正常的5 羽鸡,按常规方法解剖,分离并测定胸腺、脾脏、法氏

囊免疫器官的指数(免疫器官重量除以相应鸡体重求

得各脏器指数)。了解免疫器官生产发育情况。在21

日龄,从4 组试验鸡中随机挑选5 只,心脏采2 ml 1514 中国农业科学41卷

肝素抗凝血。在FAC 上测量CD3、CD4、CD8 及γδTCR 的含量。采用血凝抑制(HI)方法检测血清中禽流感

抗体滴度。

1.8 复方中药防治SPF 鸡感染禽流感病毒的试验

试验共分5 组,第Ⅰ组是中药治疗组,共18 只8

周龄SPF 鸡。18 只鸡同时给予0.5%的中药饮水。其

中8 只给药同时功击H5N1 亚型禽流感病毒,攻毒剂量为104 EID50/0.1 ml,肌肉注射0.2 ml。另外10 只不攻毒,以便模拟鸡场鸡群自然感染及给药后的治疗情况。第Ⅱ组是盐酸金刚烷胺对照组,共17 只8 周龄

SPF 鸡。17 只鸡同时给予0.1%的盐酸金刚烷胺饮水。其中7 只攻毒同时给药,攻毒剂量为104 EID50/0.1 ml,肌肉注射0.2 ml。另外10 只不攻毒,以便模拟鸡场鸡群在给予盐酸金刚烷胺后的治疗情况。

第Ⅲ组是中药预防组。试验用鸡12 只8 周龄SPF

鸡,12 只鸡均在攻毒前15 d 给予0.5%的中药。其中

6 只攻毒,攻毒剂量为104 EID50/0.1 ml,肌肉注射0.2 ml/只。另外6 只不攻毒,以便模拟鸡场鸡群在给予复方中药后的预防及治疗情况。

从攻毒开始连续观察14 d,观察并记录鸡的死亡

数,然后计算死亡率,保护率、平均存活时间。在攻毒后3、5、7d 采集泄殖腔、喉头棉试子,采集的棉试子用灭菌生理盐水配成10-1~10-8 悬液,尿囊腔接种在9~10 日龄5 只SPF 鸡胚内,在37℃孵育48 h,按照微量红细胞凝集法,检查鸡胚尿囊液中血凝活性。如具有血凝活性,通过血凝抑制试验在排除新城疫病毒感染的前提下,说明有禽流感病毒的存在。

第Ⅳ组是对照组。对照组分3 组。一组为攻毒组,

攻毒剂量同其它组,共8 只SPF 鸡,另外一组为7

只SPF 鸡同群感染组,最后一组未感染病毒对照组,由4 只SPF 鸡组成。

2 结果与分析

2.1 复方药物最大无毒剂量测定

药物对鸡胚、MDCK 的无毒剂量分别是1 000 和

62.5 mg·ml-1。

2.2 复方药物体外抗病毒的作用

2.2.1 复方药物在鸡胚内对禽流感病毒的作用复

方药物在鸡胚内对H5N1 亚型禽流感病毒的有效灭活浓度、治疗浓度及预防浓度分别是31.25、125 及250 mg·ml-1,对H9N2 亚型禽流感病毒的有效灭活浓度、治疗浓度及预防浓度分别是31.25、15.625 及62.5 mg·ml-1。

2.2.2 复方药物在MDCK 上对禽流感病毒的作用复

方药物在MDCK上对H5N1 亚型禽流感病毒的有效灭活浓度、预防浓度分别是31.25 和125 mg·ml-1,治疗

浓度未测出。对H9N2 亚型禽流感病毒的有效灭活浓度、治疗浓度及预防浓度分别是15.625、31.25 及31.25 mg·ml-1。

2.3 复方药物的安全性研究

2.3.1 复方中药口服组对小白鼠的急性毒性试验

复方中药口服后,没有引起小白鼠的死亡。但在高剂量时有体重减轻的趋势。

2.3.2 复方中药腹腔注射后对小白鼠的急性毒性试

验小白鼠腹腔注射中药10 min 后,即表现出兴奋不安,痉挛,缩成一团,呼吸困难,在给药后0.5 h 出现

死亡。对死亡鼠各脏器进行剖检:肝脏体积稍肿大,

被膜紧张,边缘钝圆,表面呈暗紫红色,切面呈暗红

色,质地变软。脾、肾脏体积均增大。按照剂量的减

少,死亡率也相应减少,而且脏器病变也逐渐降低。

经组织学病理切片后可以看出各脏器的病理变化与剂

量呈一定的关系。用简化几率单位计算法(亦称和尔

恩法)计算CD50。该复方中药经腹腔注射后,对小白

鼠的CD50 为425.6 mg·kg-1 bw。

2.4 复方药代动力学试验

根据小白鼠死亡率计算体存药物量,通过MCPKP

程序对体存百分率与间隔时间拟合后,计算药代动力

学参数及药-时方程。该复方药物在小白鼠体内的经时

过程为一室模型。其药-时方程式为:C=650.66e-4.9078t,

药动学参数见表1。

表1 复方中药在小白鼠体内的表观药动学参数

Table 1 Pharmacoketics parameter of the compound Chinese

medicine in mouse

参数Pameters 单位Unit 数值Value

初始浓度Co μg·ml-1 622.547

吸收速率常数Ka 1/nrs 4.9078

消除速率常数Kel 1/nrs 0.1501

吸收相半衰期T1/2 h 0.1412

消除相半衰期T1/2βh 4.6176

Tp h 0.733

达峰浓度Cmax μg·ml-1 557.69

曲线下面积AUC mg·L-1·h-1 4148.1

滞后时间Lagtime h 0

Tcp(ther)h 70.592

表观分布容积V L·mg-1 10.039

消除率D L·h-1·kg-1 1.507

5 期李艳华等:复方中药对禽流感病毒的防治研究1515

2.5 复方中药对SPF 鸡免疫功能的影响

2.5.1 复方中药对免疫器官指数的影响复方中药

饮水组的法氏囊指数、脾脏指数、胸腺指数在14 日龄

明显高于对照组。

2.5.2 复方中药对雏鸡血清中禽流感抗体滴度的影

响在免疫后半个月,给药组+免疫组的禽流感抗体

滴度比免疫组高1.6 个滴度。

2.5.3 复方中药对SPF 鸡体重变化的影响给药组

的体重明显高于对照组,其中在第21 天时重量差异显

著。

2.5.4 不同的外周血液中CD3+、CD4+、CD8+、TCR+T

淋巴细胞变化CD3+、CD4+、CD8+、TCR+T 淋巴细

胞的变化情况见表2。

2.6 复方中药防治SPF 鸡感染禽流感病毒的试验

表2 复方中药对外周血液中T 淋巴细胞的影响(百分比)

Table 2 Influence of the compound Chinese medicine on T lymphocyte on peripheral blood (percentage)

组别Group 动物数No. CD3+ CD4+ CD8+ TCR+

Ⅰ5 31.25±5.68 21.49±3.42 14.56±4.57 11.46±1.39

Ⅱ5 36.57±4.56 30.74±1.98 28.12±9.16 26.27±2.56

Ⅲ5 63.61±7.65 29.69±6.79 35.58±8.17 33.186±5.66

Ⅳ5 64.01±4.32 27.39±5.79 45.05±6.32 32.19±4.47

Ⅰ组为空白对照组;Ⅱ组为疫苗免疫组;Ⅲ组为疫苗+给药组;Ⅳ组为给药组

Ⅰ. CK;Ⅱ. Immune group ;Ⅲ. Vaccine+MDCK;Ⅳ. MDCK group

2.6.1 保护作用除未感染病毒对照组外,感染病毒

组均有鸡只死亡。

(1)中药对感染病毒组的保护作用在攻毒同时

给予药物的试验组保护率均低于同群感染后给药组。

复方中药治疗组保护率为0,说明其不能完全抑制禽

流感病毒在鸡体内的复制与繁殖。而盐酸金刚烷胺组

的保护率为14.3%,说明盐酸金刚烷胺能起到一定的

保护作用。

从平均死亡时间来看,病毒感染对照组鸡只死亡

最快,其次是中药治疗组、中药预防组、再次是盐酸

金刚烷胺组,最后为对照组。

(2)同群感染组保护作用除未感染禽流感病毒

对照组以外,其它组均有鸡只死亡。保护率以盐酸金

刚烷胺为最高,达33.4%,其次为复方中药预防组达

30%,再次是复方中药治疗组为20%。

2.6.2 病毒分离情况

(1)感染病毒组对感染病毒组的鸡只在3、5、

7 d 分离病毒。泄殖腔棉试子、喉头棉试子分离病毒情

况见表3。

(2)同群感染组对同群感染组的鸡只在3、5、

7 d 分离病毒。分别采集泄殖腔棉试子和喉头棉试子,

结果见表4。

3 讨论

3.1 该复方中药的特点

中药复方是中医临床治病的主要形式和手段,是

中药药学的重要组成部分。中药复方是单味用药的发

展,复方的作用明显优于单味药。禽流感病毒感染后,

极易并发细菌感染,此外引起全身器官出血性变化,

引起免疫抑制,所以选用一些抗禽流感病毒效果好的,

且有抗菌作用的复方中药。本方针对发病鸡出现高热、

出血、腹泻、饮食欲降低或废绝、免疫力低下等共性,

表3 病毒感染组泄殖腔棉试子、喉头棉试子病毒分离情况

Table 3 Isolation of avian influenza virus of cloacal swabs and throat swabs 泄殖腔棉试子病毒分离情况

Isolation of virus from cloacal swabs

喉头棉试子病毒分离情况

Isolation of virus from throat swabs

病毒分离率Isolation rate of virus (%) EID50 病毒分离率Isolation rate of virus (%) EID50

病毒

注意事项

一、申请发明专利或者实用新型专利应当提交说明书摘要,一式一份。

二、说明书摘要文字部分应当打字或者印刷,字迹应当整齐清晰,黑色,符合制版要求,不得涂改,字高

在3.5毫米至4.5毫米之间,行距在2.5毫米至3.5毫米之间。纸张应当纵向使用,只限使用正面,四周应当留有页边距:左侧和顶部各25毫米,右侧和底部各15毫米。

三、说明书摘要文字部分应当写明发明或者实用新型的名称和所属的技术领域,清楚反映所要解决的技术

问题,解决该问题的技术方案的要点及主要用途。说明书摘要文字部分不得加标题,文字部分(包括标点符号)不得超过300个字,对于进入国家阶段的国际申请,其说明书摘要译文不限于300个字。

四、说明书摘要附图应当使用规定格式的表格绘制。

专利说明书范本(包含说明书和权利要求书的撰写格式)

说明书(撰写示例) 试电笔 *[实用新型名称应简明、准确地表明实用新型专利请求保护的主题。名称中不应含有非技术性词语,不得使用商标、型号、人名、地名或商品名称等。名称应与请求书中的名称完全一致,不得超过25个字,应写在说明书首页正文部分的上方居中位臵。] [依据专利法第二十六条第三款及专利法实施细则第十八条的规定,说明书应对实用新型作出清楚、完整的说明,使所属技术领域的技术人员,不需要创造性的劳动就能够再现实用新型的技术方案,解决其技术问题,并产生预期的技术效果。说明书应按以下五个部分顺序撰写:所属技术领域;背景技术;发明内容;附图说明;具体实施方式;并在每一部分前面写明标题。] 所属技术领域 本实用新型涉及一种指示电压存在的试电装置,尤其是能识别安全和危险电压的试电笔。 [所属技术领域:应指出本实用新型技术方案所属或直接应用的技术领域。] 背景技术 目前,公知的试电笔构造是由测试触头、限流电阻、氖管、金属弹簧和手触电极串联而成。将测试触头与被测物接触,人手接触手触电极,当被测物相对大地具有较高电压时,氖管启辉,表示被测物带电。但是,很多电器的金属外壳不带有对人体有危险的触电电压,仅表示分布电容和/或正常的电阻感应产生电势,使氖管启辉。一般试电笔不能区分有危险的触电电压和无危险的感应电势,给检测漏电造成困难,容易造成错误判断。 [背景技术:是指对实用新型的理解、检索、审查有用的技术,可以引证反映这些背景技术的文件。背景技术是对最接近的现有技术的说明,它是作出实用技术新型技术方案的基础。此外,还要客观地指出背景技术中存在的问题和缺点,引证文献、资料的,应写明其出处。] 发明内容 [发明内容:应包括实用新型所要解决的技术问题、解决其技术问题所采用的技术方案及其有益效果。] 为了克服现有的试电笔不能区分有危险的触电电压和无危险的感应电势的不足, 本实用新型提供一种试电笔,该试电笔不仅能测出被测物是否带电,而且能方便地区分是危险的触电电压还是无危险的感应电势。 [要解决的技术问题:是指要解决的现有技术中存在的技术问题,应当针对现有技术存在的缺陷或不足,用简明、准确的语言写明实用新型所要解决的技术问题,也可以进一步说明其技术效果,但是不得采用广告式宣传用语。] 本实用新型解决其技术问题所采用的技术方案是:在绝缘外壳中,测试触头、限流电阻、氖管和手触电极电连接,设置一分流电阻支路,使测试触头与一个分流电阻一端电连接,分流电阻另一端与一个人体可接触的识别电极电连接。当人手同时接触识别电极和手触电极时,使分流电阻并联在测试触头、限流电阻、氖管、手触电极电路测试时,人手只和手触电极接触,氖管启辉,表示被测物带电。当人手同时接触手触电极和识别电极时,若被测物带有无危险高电势时,由于电势源内阻很大,从而大大降低了被测物的带电电位,则氖管不启辉,若被测物带有危险触电电压,因其内阻小,接入分流电阻几乎不降低被测物带电电位,则氖管保持启辉,达到能够区别安危电压的目的。 [技术方案:是申请人对其要解决的技术问题所采取的技术措施的集合。技术措施通常是由技术特征来体现的。技术方案应当清楚、完整地说明实用新型的形状、构造特征,说明技术方案是如何解决技术问题的,必要时应说明技术方案所依据的科学原理。撰写技术方案时,机械产品应描述必要零部件及其整体结构关系;涉及电路的产品,应描述电路的连接关系;机电结合的产品还应写明电路与机械部分的结合关系;涉及分布参数的申请时,应写明元器件的相互位臵关系;涉及集成电路时,应清楚公开集成电路的型

概要设计说明书范例及模板

《XXXXXX》概要设计说明书 张三、李四、王五

1.引言 1.1编写目的 在本机票预定系统项目的前一阶段,也就是需求分析阶段中,已经将系统用户对本系统的需求做了详细的阐述,这些用户需求已经在上一阶段中对航空公司、各旅行社及机场的实地调研中获得,并在需求规格说明书中得到详尽得叙述及阐明。 本阶段已在系统的需求分析的基础上,对机票预定系统做概要设计。主要解决了实现该系统需求的程序模块设计问题。包括如何把该系统划分成若干个模块、决定各个模块之间的接口、模块之间传递的信息,以及数据结构、模块结构的设计等。在以下的概要设计报告中将对在本阶段中对系统所做的所有概要设计进行详细的说明。 在下一阶段的详细设计中,程序设计员可参考此概要设计报告,在概要设计对机票预定系统所做的模块结构设计的基础上,对系统进行详细设计。在以后的软件测试以及软件维护阶段也可参考此说明书,以便于了解在概要设计过程中所完成的各模块设计结构,或在修改时找出在本阶段设计的不足或错误。 1.2项目背景 机票预定系统将由两部分组成:置于个旅行社定票点的前台客户程序,以及置于航空公司的数据库服务器。本系统与其他系统的关系如下: 1.3定义 1.3.1 专门术语 SQL SERVER: 系统服务器所使用的数据库管理系统(DBMS)。 SQL: 一种用于访问查询数据库的语言 事务流:数据进入模块后可能有多种路径进行处理。 主键:数据库表中的关键域。值互不相同。 外部主键:数据库表中与其他表主键关联的域。 ROLLBACK: 数据库的错误恢复机制。 1.3.2 缩写

系统:若未特别指出,统指本机票预定系统。 SQL: Structured Query Language(结构化查询语言)。 ATM: Asynchronous Transfer Mode (异步传输模式)。 1.4参考资料 以下列出在概要设计过程中所使用到的有关资料: 1.机票预定系统项目计划任务书浙江航空公司1999/3 2.机票预定系统项目开发计划《**》软件开发小组1999/3 3.需求规格说明书《**》软件开发小组1999/3 4.用户操作手册(初稿)《**》软件开发小组1999/4 5.软件工程及其应用周苏、王文等天津科学技术出版社1992/1 6.软件工程张海藩清华大学出版社1990/11 7.Computer Network A.S.Tanenbaun Prentice Hall 1996/01 文档所采用的标准是参照《软件工程导论》沈美明著的“计算机软件开发文档编写指南”。 2.任务概述 2.1 目标 2.2 运行环境 系统将由两部分程序组成,安装在各旅行社客户机上的客户程序及航空公司内的数据服务器程序。 根据调研得知所有旅行社的计算机配置均在Pentium 133级别以上,客户程序应能够在Pentium 133级别以上, Win NT环境下运行。 2.3 需求概述 浙江航空公司为方便旅客,需开发一个机票预定系统。为便于旅客由旅行社代替航空公司负责为旅客定票,旅行社把预定机票的旅客信息,包括姓名、性别、工作单位、身份证号码、旅行时间、旅行目的地,输入机票预定系统的客户端程序,系统经过查询航空公司内的航班数据服务器后,为旅客安排航班,印出取票通知。旅客在飞机起飞前一天凭取票通知和帐单交款后取票,系统校对无误后即印出机票给旅客。 要求系统能有效、快速、安全、可靠和无误的完成上述操作。并要求客户机的界面要简单明了,易于操作,服务器程序利于维护。 2.4 条件与限制 3.总体设计 3.1 处理流程 下面将使用(结构化设计)面向数据流的方法对机票预定系统的处理流程进行分

说明书及摘要、权利要求的规定

121 第二章 说明书和权利要求书 1.引 言 根据专利法第二十六条第一款的规定,一件发明专利申请应当有说明书(必要时应当有附图)及其摘要和权利要求书;一件实用新型专利申请应当有说明书(包括附图)及其摘要和权利要求书。 说明书和权利要求书是记载发明或者实用新型及确定其保护范围的法律文件。 说明书及附图主要用于清楚、完整地描述发明或者实用新型,使所属技术领域的技术人员能够理解和实施该发明或者实用新型。 权利要求书应当以说明书为依据,清楚并简要地表述请求保护的范围。 根据专利法第五十六条第一款的规定,发明或者实用新型专利权的保护范围以其权利要求的内容为准,说明书及附图可以用于解释权利要求。 本章对说明书和权利要求书的主要内容及撰写要求作了适用于所有技术领域的一般性规定。涉及计算机程序以及化学领域专利申请的说明书和权利要求书的若干具体问题,适用本部分第九章和第十章的规定。 2.说 明 书 专利法第二十六条第三款和专利法实施细则第十八条分别对说明书的实质性内容和撰写方式作了规定。 2.1 说明书应当满足的要求 专利法第二十六条第三款规定,说明书应当对发明或者实用新型作出清楚、完整的说明,以所属技术领域的技术人员能够实现为准。 说明书对发明或者实用新型作出的清楚、完整的说明,应当达到所属技术领域的技术人员能够实现的程度。也就是说,说明书应当满足充分公开发明或者实用新型的要求。 关于“所属技术领域的技术人员”的含义,适用本部分第四章第2.4节的规定。 法26.3 法26.4 细则20.1

122 2.1.1 清楚 说明书的内容应当清楚,具体应满足下述要求。 (1) 主题明确。说明书应当从现有技术出发,明确地反映出发明或者实用新型想要做什么和如何去做,使所属技术领域的技术人员能够确切地理解该发明或者实用新型要求保护的主题。换句话说,说明书应当写明发明或者实用新型所要解决的技术问题以及解决其技术问题采用的技术方案,并对照现有技术写明发明或者实用新型的有益效果。上述技术问题、技术方案和有益效果应当相互适应,不得出现相互矛盾或不相关联的情形。 (2) 表述准确。说明书应当使用发明或者实用新型所属技术领域的技术术语。说明书的表述应当准确地表达发明或者实用新型的技术内容,不得含糊不清或者模棱两可,以致所属技术领域的技术人员不能清楚、正确地理解该发明或者实用新型。 2.1.2 完整 完整的说明书应当包括有关理解、实现发明或者实用新型所需的全部技术内容。 一份完整的说明书应当包含下列各项内容: (1) 帮助理解发明或者实用新型不可缺少的内容。例如,有关所属技术领域、背景技术状况的描述以及说明书有附图时的附图说明等。 (2) 确定发明或者实用新型具有新颖性、创造性和实用性所需的内容。例如,发明或者实用新型所要解决的技术问题,解决其技术问题采用的技术方案和发明或者实用新型的有益效果。 (3) 实现发明或者实用新型所需的内容。例如,为解决发明或者实用新型的技术问题而采用的技术方案的具体实施方式。 对于克服了偏见的发明或者实用新型,说明书中还应当解释为什么说该发明或者实用新型克服了偏见,新的技术方案与偏见之间的差别以及为克服偏见所采用的技术手段。 应当指出,凡是所属技术领域的技术人员不能从现有技术中直接、唯一地得出的有关内容,均应当在说明书中描述。 法26.3 法26.3

产品说明书格式规范

XXXXX(机型,居中,宋体二号) 产品说明书 机型实物图 XXXXXXXXX公司 1 首页格式要求: 说明书首页规范格式应该无页眉和页脚。 首页内容应该包含说明书的名称、适用设备型号范围、公司LOGO等其他信息。 产品名称和产品类型必须分两行单独列出,使用相同大小的字体。首页字体:居中,宋体二号

2 目录格式 2.1 页眉页脚 目录部分的页眉、页脚的页码应该使用1、2、3类型的符号页码。其中页眉应该包含公司LOGO,产品型号,如下: 页脚部分,如下: 2.2 目录格式 1 安全事项 (6) 1.1 必须遵守的条款 (6) 1.2 须禁止的条款 (6) 1.3 XXX防范措施 (7) 一级标题:宋体,小四,加粗,左对齐,无缩进,单倍行距。 二级标题:宋体,小四,左对齐,首行缩进1字符,单倍行距。 三级标题:宋体,五号,左对齐,首行缩进2字符,单倍行距。 3 正文格式示例: 1 安全事项 1.1 安全装置 1.1.1紧急停止按钮 紧急停止按钮作用时,整个成型机注意和警告信息 正文文本:宋体,小四,两端对齐,左对齐,首行缩进2字符,1.5倍行距。

正文表格、图片:居中,行距1.5倍行距。 表格、图片题注格式:宋体10号,居中,单倍行距,编号格式“图\表+所在章节的阿拉伯数字+.+图片序号”,右对齐。 正文页眉页脚: 目录部分的页眉、页脚的页码应该使用1、2、3的符号页码。其中页眉应该包含公司LOGO,公司名称; 正文部分的页脚页码显示从正文第一页开始起始页码为1。 3.2 正文内容顺序 第一章:安全事项 第二章:主要技术参数 第三章:概述设备型号、规格、主要性能、结构示意图等内容。第四章:保养与维护 第五章:设备安装 第六章:设备调试 第七章:常见故障处理 第八章:附件 附录: 注:说明书各章节的内容应根据实际情况可调整,但是总体信息必须包含安装、调试、操作、使用、维护、保养的基本信息。

概要设计说明书范例及模板

《XXXXXX》 概要设计说明书 张三、李四、王五 1.引言 1.1编写目的 在本机票预定系统项目的前一阶段,也就是需求分析阶段中,已经将系统用户对本系统的需求做了详细的阐述,这些用户需求已经在上一阶段中对航空公司、各旅行社及机场的实地调研中获得,并在需求规格说明书中得到详尽得叙述及阐明。 本阶段已在系统的需求分析的基础上,对机票预定系统做概要设计。主要解决了实现该系统需求的程序模块设计问题。包括如何把该系统划分成若干个模块、决定各个模块之间的接口、模块之间传递的信息,以及数据结构、模块结构的设计等。在以下的概要设计报告中将对在本阶段中对系统所做的所有概要设计进行详细的说明。 在下一阶段的详细设计中,程序设计员可参考此概要设计报告,在概要设计对机票预定系统所做的模块结构设计的基础上,对系统进行详细设计。在以后的软件测试以及软件维护阶段也可参考此说明书,以便于了解在概要设计过程中所完成的各模块设计结构,或在修改时找出在本阶段设计的不足或错误。 1.2项目背景 机票预定系统将由两部分组成:置于个旅行社定票点的前台客户程序,以及置于 1.3 1.3.1 专门术语 SQL SERVER: 系统服务器所使用的数据库管理系统(DBMS)。 SQL: 一种用于访问查询数据库的语言 事务流:数据进入模块后可能有多种路径进行处理。 主键:数据库表中的关键域。值互不相同。 外部主键:数据库表中与其他表主键关联的域。 ROLLBACK: 数据库的错误恢复机制。 1.3.2 缩写

系统:若未特别指出,统指本机票预定系统。 SQL: Structured Query Language(结构化查询语言)。 ATM: Asynchronous Transfer Mode (异步传输模式)。 1.4参考资料 以下列出在概要设计过程中所使用到的有关资料: 1.机票预定系统项目计划任务书浙江航空公司 1999/3 2.机票预定系统项目开发计划《**》软件开发小组 1999/3 3.需求规格说明书《**》软件开发小组 1999/3 4.用户操作手册(初稿)《**》软件开发小组 1999/4 5.软件工程及其应用周苏、王文等天津科学技术出版社 1992/1 6.软件工程张海藩清华大学出版社 1990/11 7.Computer Network A.S.Tanenbaun Prentice Hall 1996/01 文档所采用的标准是参照《软件工程导论》沈美明著的“计算机软件开发文档编写指南”。 2.任务概述 2.1 目标 2.2 运行环境 系统将由两部分程序组成,安装在各旅行社客户机上的客户程序及航空公司内的数据服务器程序。 根据调研得知所有旅行社的计算机配置均在Pentium 133级别以上,客户程序应能够在Pentium 133级别以上, Win NT环境下运行。 2.3 需求概述 浙江航空公司为方便旅客,需开发一个机票预定系统。为便于旅客由旅行社代替航空公司负责为旅客定票,旅行社把预定机票的旅客信息,包括姓名、性别、工作单位、身份证号码、旅行时间、旅行目的地,输入机票预定系统的客户端程序,系统经过查询航空公司内的航班数据服务器后,为旅客安排航班,印出取票通知。旅客在飞机起飞前一天凭取票通知和帐单交款后取票,系统校对无误后即印出机票给旅客。 要求系统能有效、快速、安全、可靠和无误的完成上述操作。并要求客户机的界面要简单明了,易于操作,服务器程序利于维护。 2.4 条件与限制 3.总体设计 3.1 处理流程 下面将使用(结构化设计)面向数据流的方法对机票预定系统的处理流程进行分析。系统可分为两大部分:一、客户机上的程序,二、服务器上的程序。以下将分别对系统的这两大部分进行流程分析:

桥梁毕业设计摘要

桥梁毕业设计摘要 篇一:毕业设计-土木工程-桥梁工程-设计摘要 摘要 根据桥址处的具体情况,并结合设计要求,拟定出三个比选方案。分别是预应力混凝土连续梁桥、钢筋混凝土简支梁桥、钢筋混凝土连续刚构桥。根据安全、适用、经济、美观的原则确定预应力混凝土连续梁桥为推荐方案,桥梁总长136m(40m+56m+40m)。主梁采用单箱单室箱形截面。施工方法采用满堂支架施工法。使用midas6.71程序进行结构计算。计算结构的恒载内力,求得恒载内力下结构的弯矩图及剪力图;计算各控制截面内力影响线,并按最不利情况进行加载,求得活载作用下内力包络图。定义基础沉降组,按最不利组合求得基础沉降引起的内力。施加温度荷载,求得温度荷载下内力。并进行荷载组合,根据各控制截面内力进行了估束和配筋计算,并对梁体进行具体的钢束布置。最后,对各控制截面进行了强度、抗裂性、应力和变形验算。 关键词:预应力混凝土;连续梁桥;荷载组合 Abstract According to the specific situation at the bridge site, combined with the design requirements, to work

out more than three alternatives. Are continuous prestressed concrete beam bridge, bridge of reinforced concre beams reinforced concrete continuous rigid frame bridge. According to security, application, economic, aesthetic principles of prestressed concrete continuous beam bridge to determine the recommended program Bridge length 131.1m (32.55m+48m+32.55m). Single box girder single-cell box sections. Full Support Construction Methods Construction Law. Structure calculation using midas6.71 program. Calculate the structure dead load internal forces, internal forces obtained under the structure dead load bending moment diagram and shear diagram; calculate the internal force control section of line, according to the most adverse conditions to load, internal forces obtained under live load envelope. The definition of foundatio settlment group, obtained by the most unfavorable combination of internal forces caused by foundation settlement. Applied thermal load, internal forces obtained under temperature loading. And the load combination, according to Section Analysis of the control beam and reinforcement estimates

情况说明书格式及

情况说明书格式及 导读:情况说明书格式 一、标题部分:某某公司申请发票增量的申请 二、台头部分:某某国税局 三、本企业基本情况:成立日期、认定一般纳税人日期、法人、财务负责人姓名,经营地址、注册资金、主要经营项目。 四、本企业最近几个月的收入、税金、税负情况; 财务核算情况,是否按时纳税。 五、本企业发票的核定情况,以及最近几个月的发票使用情况;特别是增值税发票使用情况。 六、本企业申请发票增量的理由:有无大笔定单或合同,根据现有核定情况无法满足实际要求。 七、提出申请,根据我企业的.实际情况,现申请发票增量。 八、落款:某某公司 九、日期: 情况说明书范文 个人情况说明 XXX: 我已于2011年7月在天津师范大学顺利毕业,并取得毕业证书。就读期间办理的学生证在毕业前已由天津师范大学统一收回,故现在只能提供毕业证复印件,无法再提供学生证原件。

特此说明。 XXX 年月日 家庭经济情况说明 我叫张三,家在重庆××县×××镇××××村×××社,, 家中有七口人。家居贫困山区,家境贫困,其主要经济来源靠种农田为生,无其它任何经济来源,现母亲因劳累过度,而生病需长期药物疗养,增加了家庭负担,再加上父亲年老体弱母亲身体不好,且有一祖母已70多岁,常年卧病在床。姐妹四人均在上学。全家的生活重 担全靠父母种几亩责任田来维持,为了四姐妹上学,其父母借遍了亲友。全家年总收入不超过叁仟元,人均月收入远远低于350元。 关于企业营业执照年检的说明 某某公司: 目前我们双方要签订合同,贵公司要求提供经过年检的营业执照,我公司表示理解。由于我公司营业执照正在工商年检之中,估计一 个月之内可以解决。 特此说明。 此致 敬礼! 公司(盖章) 20xx年5月5日

河南科技大学毕业设计说明书(论文)的格式规范

毕业设计说明书(论文)的格式规范 毕业设计说明书(论文)的格式、图纸绘制、实验数据、各种标准的运用和引用都要符合各学科、各专业国家标准的规定。毕业设计说明书(论文)应采用汉语(外语专业用外语)撰写,一律使用计算机编辑,用A4规格纸输出,页面设置上、下页边距 2.54厘米,左、右页边距 2.5厘米,装订线1厘米,文档网络设为小四号宋体,指定行网络和字符网络,每行33个字符,每页31行,栏数为1,页码置于页面的底部并居中放置,页码从前言开始到论文最后。页眉统一为宋体小五,右对齐,内容为“河南科技大学毕业设计论文”或“河南科技大学毕业设计说明书”,下有一横线,从中文摘要开始到论文最后。用统一封面装订成册。 一、毕业设计说明书(论文)各部分的具体要求 1. 封面 2. 任务书论文内容全部打印,栏内字体、字号统一,全部采用单倍行距。上部的填表日期统一为年月日,设计说明书中文字数更改为12000字,中文摘要400-500字。 3. 中英文摘要 (1) 毕业设计(论文)中文题目为三号黑体字,可以分成1或2行居中打印。 (2) 中文题目下空一行居中打印“摘要”二字(三号黑体),字间空一格。 (3) “摘要”二字下空一行打印摘要内容(小四号宋体)。每段开头空二格。 (4) 中文摘要内容下空一行打印“关键词”三字(小四号黑体),其后为关键词(小四号宋体)。关键词数量为4-6个,每一关键词之间用逗号分开,最后一个关键词后不打标点符号。 (5) 英文摘要题目采用三号大写字母(黑体),可分成1-3行居中打印。每行左右两边至少留2个字符空格。 (6) 英文题目下空二行居中打印“ABSTRACT”(大写三号黑体),再下空二行打印英文摘要内容。

论文摘要怎么写

论文摘要怎么写 导读:一、论文摘要定义: 论文摘要是对论文的内容不加注释和评论的简短陈述,要求扼要地说明研究工作的目的、研究方法和最终结论等,重点是结论,是一篇具有独立性和完整性的短文,根据内容的不同,摘要可分为以下三大类:报道性摘要、指示性摘要和报道指示性摘要。 二、论文摘要写法: 目前,我国期刊上发表的论文,多采用报道性摘要。即包括论文的目的、方法、结果和结论等四部分内容。而毕业论文的摘要的写法多是采用指示性摘要的写法,即概括文章的主题和主要内容。在指示性摘要的写作过程中,作者首先应该对论文的写作背景做简单介绍,然后应该对文章的主要内容进行简单的介绍,主要是对文章的提纲做简要的介绍,最后要对文章的研究意义进行介绍。 三、论文摘要写作步骤: 撰写前,明确写出目的、方法、结果和结论四部分。目的要求简明指出此项工作的目的,研究的范围。方法要求简要说明研究课题的基本做法,包括对象(分组及每组例数、对照例数或动物只数等)、材料和方法(包括所用药品剂量,重复次数等)。统计方法特殊者需注明。结果要求简要列出主要结果(需注明单位)、数据、统计学意义(P值)等,并说明其价值和局限性。结论要求简要说明从该项研究结果取得的正确观点、理论意义或实用价值、推广前景。

四、论文摘要格式: 学位论文应根据学校论文指导写作,需要发表到刊物上的论文,其摘要应根据具体期刊要求调整,一般论文可以在网上借鉴参考同类论文的'摘要格式。 五、论文摘要注意事项: (1)摘要中应排除本学科领域已成为常识的内容;切忌把应在引 言中出现的内容写入摘要;一般也不要对论文内容作诠释和评论(尤 其是自我评价)。 (2)用简单而直接的句子。避免使用成语、俗语或不必要的技术性用语。 (3)删除无意义的或不必要的字眼。但也不要矫枉过正,将应有的字眼过份删除,如在英文中不应删除必要的冠词如a'' an'' the 等。 (4)尽量少用缩写字。在英文的情况较多,量度单位则应使用标准化者。特殊缩写字使用时应另外加以定义。 (5)不要将在文章中未提过的数据放在摘要中。 (6)不要置放图或表于摘要之中,尽量采用文字叙述。 【论文摘要怎么写】 1.论文怎么写 2.情书怎么写 3.写春风春雨的作文怎么写

需求分析说明书、详细设计说明书、概要设计说明书样例

以下是需求分析说明书、详细设计说明书、概要设计说明书样例 需要详细资料的去 https://www.wendangku.net/doc/2f11472756.html,/BBS/view.asp?ID={CA9329C0-93C5-4417-9170-452FF61E8C DB}&page=1下载 XX系统概要设计说明书 目录 1. 文档介绍1 1.1 文档目的1 1.2 文档范围1 1.3 读者对象1 1.4 参考文献1 1.5 术语与缩写解释1 2. 系统概述2 3. 设计约束2 3.1需求约束2 3.2隐含约束2 4. 设计策略3 4.1扩展策略3

4.2复用策略3 4.3折衷策略3 5.系统总体结构3 5.1、系统总体结构3 5.2、子系统功能及接口4 6. 子系统的结构与功能5 6.1、TERMSERV 5 7. 功能需求追溯5 8. 环境的配置5 9.其它6 附录 6 A、与主机接口6 B、与终端接口6 1. 文档介绍 1.1 文档目的 编写该文档的目的在于从总体设计的角度明确xxxx系统的功能和处理模式,明确与银联的接口,使系

统开发人员和产品管理人员明确产品功能,可以有针对性的进行系统开发、测试、验收等各方面的工作。 1.2 文档范围 1.3 读者对象 该文档的读者为用户代表、软件分析人员、开发管理人员和测试人员。 1.4 参考文献 《xxxx系统需求说明书》 1.5 术语与缩写解释 无 2. 系统概述 XX系统是以触摸屏为主要交互工具,帮助用户以自助方式做业务查询。本系统的主要功能包括:话费 查询、新业务介绍、网点分布查询、自助终端分布查询、电信新闻、交易监控、设备维护和监控等。本系 统的设计目标是保证系统可以7*24小时安全、高效无故障运行;业务人员可以轻松完成设备和交易的监控 、管理工作;报表种类齐全,可以满足业务人员各种帐务需求。 3. 设计约束

说明书格式及范文

说明书格式及范文 岗位说明书模板岗位说明书,是表明企业期望员工做些什么、规定员工应该做些什么、应该怎么做和在什么样的情况下履行职责的总汇。岗位工作说明书最好是根据公司的具体情况进行制定,而且在编制时,要注重文字简单明了,并使用浅显易懂的文字填写;内容要越具 公司岗位说明书【说明书一】:总经理岗位名称总经理岗位编号JG-GMO-001 所属部门总经办岗位定员1人直接上级董事会所辖人员4人直接下级财务总监、常务副总、行政副总、行政人事经理、综合管理部经理、财务部经理本职概述:负责公司整体经营计 产品说明书样本产品说明书是一种以说明为主要表达方式,用平易、朴实、易懂的语言向用户等消费者通俗地介绍产品(包括服务等)的性能、特征、用途、使用和保养方法等知识的文书材料。产品说明书的结构一般由标题,正文,落款三部分组成。(一)标题产品 职位说明书范本职位说明书(也称职务说明书,岗位说明书)是通过职位描述的工作把直接的实践经验归纳总结上升为理论形式,使之成为指导性的管理文件。职位说明书主要包括两个部分:一是职位描述,主要对职位的工作内容进行概括,包括职位设置的目的、

基本 公司职务说明书【说明书一】:总经理岗位名称:总经理所在部门:职务等级:岗位定员:1 直接上级:直接下级:部门经理管辖范围:全面工作【岗位职责】1、制定公司战略和经营计划根据厂家的战略,组织制定公司的战略目标、远景目标及年度经营计划事业单位岗位说明书岗位名称:综合管理主管工作部门:综合部岗位类别:管理岗位岗位等级:七级工作职责1.在单位领导指挥下,负责单位文秘、财务、文书收发、档案、车辆、等行政事务工作。2.参与单位业务计划、目标制订工作,负责制订单位的各项管理规章制

毕业设计摘要和引言

摘要 随着我国经济的不断发展,把国家建设成小康社会的战略计划正在实施。小康社会不仅体现人民物质生活极大丰富,它的一个重要标志,就是一座座现代化的城市拔地而起。建筑工程是我国发展的前哨。对于我们建筑业来说,每建设一个工程,首先要对工程进行策划,这里的策划,就是我们讲的施工组织设计和方案的编制。本施工组织设计作为主导施工的依据,包括以下几个方面的内容:编制依据、工程概况、施工部署、施工准备、施工进度计划、施工平面布置、拟投入本工程资源计划、总承包管理协调配合方案、主要分部(分项)工程施工技术方案、专项施工方案和施工组织各项管理保证措施。编制时对目标工期、工程质量、项目管理机构设置、劳动力组织、施工进度计划控制、机械设备及周转材料配备、主要分部分项工程施工方法、安全保证措施、文明施工及环境保护措施、降低成本措施等诸多因素尽可能充分考虑,突出科学性及可行性。【关键词】:现场施工组织设计施工管理 Abstract Along with our country economy unceasing development,The country into a well-off society's strategic plan is being implemented .The affluent society not only manifests the people material life enormously rich, Its important symbol , is a modernized city rises straight from the ground. The architectural engineering is the advanced post whose our country develops. Regarding our architecture industry , Constructs a project every time, must first carry on the plan to the project , Here plan, is the construction organization plan which and the plan establishment we say .This construction organization design be predominant the basis of construction, Include the following aspects of the Content: Establishment basis, Project survey, construction deployed, Construction preparation, Construction progress schedule, Construction plane layout, Plans to put into this project resources plan, Contract management coordination of programmes, Main branch (sub-item) project construction technique plan, The special plan of construction and the construction organize each management safeguard measure。expect to the target work while drawing up, engineering quality, item management organization constitution, labor force organization, construction the progress plan a control, machine equipments and turnover material an equipment, main divide parts of item engineering construction method, safety assurance measure, civilization construction and environmental protection measure, decline low cost measure etc. many factors to consider possibly and well, outstanding science and possibility. 【Keyword】:Scene construction The organization designs Construction management

写文本说明书规范格式

规划文稿编辑体例 一、文本层次 文本层次1:文本的层次编排顺序应全文统一,层次分明,采用章节结构,每个规划文本的层次按“章、一、(一)、1、(1)、①”排版。章之上根据需要可以加“篇”。 文本层次2:总规类稿件的层次编排顺序应全书统一,可以按上述顺序排版,亦可统一按条款结构,每个规划文本的层次按“章、条、款”顺序排列。 一般采用“文本层次1”进行。 二、标题占行及标点符号 ●“(一)”及以上的标题均须单占行,不加标点符号。 ●“1、(1)”作为标题时,应单独占行,不加标点符号;作为需要说明的系列问题时可不作为标题,不单独占行,加标点符号。 ●“1、(1)”以下均不作为标题,不单独占行。 ●正文中如果遇到并列层次的内容,可用“:”另起行缩进二字加“──”分段表述。如: 根据研究对象的不同,社会学可分为以下分支学科: ──城市社会学; ──农村社会学; ──家庭社会学。 三、引文出处、注释

确需注释时,采用当页页下注的方式,五号宋体。中文书刊出处引次序,除古籍、经典应与所据版本一致外,一般顺序为:著(译)者,书名,出版者,年份(一般用阿拉伯数字,后面不加“年”字),页码。 四、插图 文本插图按“先看文、后见图”的原则编排,图应编序号,图序一般采用“图1-1”的方式标示,图题一般排5号黑体置于图下方居中位置,图序与图题之间空1字位(两个字符)。例: 注:图中横轴为竞争力分布区间,纵轴为民营企业的数目。 资料来源:中国社会科学院民营经济研究中心对浙江等四省民营企业问卷调查数据库。 图3-1 民营企业的竞争力分布 整篇文章图的宽度应该一致。宽度不应超过文字段体最大宽度。否则无法打印。如避免以下情况:

软件概要设计说明书范例

XX概要设计说明书

文档修改记录

填写说明 1. 系统结构的定义 本体系对整个软件系统按如下结构方式进行划分:系统子系统模块子模块 其中: (1)“系统子系统”划分属于“系统设计”,在系统设计说明书中予以描述。 (2)“子系统模块”划分属于“概要设计”,在本说明书中予以描述。 (3)“模块子模块”划分属于“详细设计”,在详细设计说明书中予以描述。如果系统相对简单,可以省略“子模块”这一层次。 2. 如果填写了系统设计说明书,则在本说明书中略过“系统子系统”划分的相关内容(即第2章)。 3. 如果系统相对简单,不需要做“系统子系统”划分,这种情况下,取消填写系统设计说明书,只须填写本说明书,直接套用“子系统模块”划分(即第3章)进行“系统模块”划分(把其中“子系统”一词替换为“系统”),并删除本说明书中“系统子系统”划分的相关内容(第2章)。

目录 1. 简介 ................................................................ 错误!未定义书签。 . 背景和目的.................................................... 错误!未定义书签。 . 范围.......................................................... 错误!未定义书签。 . 术语和缩略语.................................................. 错误!未定义书签。 2. 系统总体设计 ........................................................ 错误!未定义书签。 . 任务概述...................................................... 错误!未定义书签。 目标 .................................................... 错误!未定义书签。 需求概述 ................................................ 错误!未定义书签。 . 设计概述...................................................... 错误!未定义书签。 总体约束 ................................................ 错误!未定义书签。 系统外部接口 ............................................ 错误!未定义书签。 设计方案概述 ............................................ 错误!未定义书签。 . 系统架构设计.................................................. 错误!未定义书签。 系统的逻辑架构设计 ...................................... 错误!未定义书签。 系统的物理架构设计 ...................................... 错误!未定义书签。 . 子系统定义.................................................... 错误!未定义书签。 子系统列表 .............................................. 错误!未定义书签。 子系统间关系 ............................................ 错误!未定义书签。 3. 子系统1设计 ........................................................ 错误!未定义书签。 . 任务概述...................................................... 错误!未定义书签。 目标 .................................................... 错误!未定义书签。 需求概述 ................................................ 错误!未定义书签。 . 设计概述...................................................... 错误!未定义书签。 总体约束 ................................................ 错误!未定义书签。 子系统外部接口 .......................................... 错误!未定义书签。 设计方案概述 ............................................ 错误!未定义书签。 . 子系统架构设计................................................ 错误!未定义书签。 . 模块定义...................................................... 错误!未定义书签。

软件设计说明书(概要+详细)

xxxxx/软件概要设计说明书软件概要设计说明书 设计负责人: 主要设计人: 2018年 06月 11日 公司(盖章): 审核意见: 审核人: 年月日

概要设计说明书版本记录 组员分工(概要设计)

xxxxxxx/软件概要设计说明书 目录 1 引言 (1) 1.1 标识 (1) 1.2 项目概述 (1) 1.3 系统概述 (1) 2 文档简介 (1) 2.1 目的 (2) 2.2 范围 (4) 2.3 读者对象 (6) 2.4 参考资料 (6) 2.5 名词解释................................................. 错误!未定义书签。 3 软件总体说明 (6) 3.1 设计指导思想 (6) 3.2 主要业务功能划分 (7) 3.2.1 逻辑视图 (7) 3.2.2 模块功能简介 (7) 3.3 软件边界 (9) 3.4 接口 (9) 3.5 物理视图(可删节) ......................................... 错误!未定义书签。 3.6 关键点考虑 (9) 3.7 开发环境配置 (10) 3.8 运行环境配置 (10) 3.9 测试环境配置 (10) 4 模块设计 (6) 4.1 模块1 (12) 4.1.1 技术概述 (12) 4.1.2 接口 (12) 4.1.3 数据结构 (12) 4.1.4 用户界面规范(可删节) (13) 4.1.5 用户界面流图(可删节) (14) 4.1.6 处理流程概述 (15) 5 数据库设计 (12) 5.1 数据库Schema设计 (16) 5.1.1 ER图 (16) 5.1.2 Schema描述列表 (16) 6 功能需求追溯 (20)

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