香青兰水提物与乙酸乙酯提取物降血脂的实验研究_谭梦晖
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第13卷 第12期 2011 年 12 月
辽宁中医药大学学报
JOURNAL OF LIAONING UNIVERSITY OF TCM
Vol. 13 No. 12 Dec . ，2011
香青兰Dracocephalum moldevica L,是唇形科青兰属植物,在民间广泛用于治疗冠心病及高血压等疾病[1-2]。本文主要研究该药不同提取物对大鼠实验性高脂血症的作用。
香青兰味甘、苦、性凉，归肝、脾经，具有补益心脑、活血化瘀、通络开窍的功能。在民间广泛用
于治疗冠心病及高血压等疾病[5-7]。文章主要研
究该药不同提取物对大鼠实验性高脂血症的作用。
1 材 料1.1 药物
香青兰全草，购自新疆维吾尔药业有限公司，
香青兰水提物与乙酸乙酯提取物降血脂的实验研究
谭梦晖1，于波2，沈旭华1，毕美琼1，祝洁1，朱灿伶2，路瑶1，陈玉玺1
（1.上海中医药大学中药学院，上海 201203；2.上海中医药大学基础医学院，上海 201203）
摘 要：目的：建立实验性高脂血症大鼠模型，观察香青兰水提物、乙酸乙酯提取物对高脂血症大鼠血脂水平
的影响。方法：采用脂肪乳剂灌胃制备高脂血症大鼠模型，造模同时连续给药10周，观察香青兰不同提取物对高脂血症大鼠血清总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）、超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）以及肝组织SOD、MDA 水平的影响。结果：与模型组比较，香青兰水提取物组能显著降低高脂血症大鼠血清TC、TG、LDL-C、AST、MDA（P <0.05或P <0.01），升高HDL-C、SOD（P <0.05或P <0.01），显著降低肝匀浆MDA（P <0.01）；香青兰乙酸乙酯提取物能显著降低高脂血症大鼠血清TC、LDL-C、ALT、AST、MDA（P <0.01），显著升高血清SOD（P <0.05），显著升高肝匀浆SOD（P <0.01），显著降低肝匀浆MDA（P <0.01）。结论：香青兰水提取物与乙酸乙酯提取物能调节高脂血症大鼠脂质代谢紊乱，其调节血脂机制可能与抗脂质过氧化有关。
关键词：香青兰水提取物；香青兰乙酸乙酯提取物；高脂血症；大鼠；抗脂质过氧化
中图分类号：R222.19 文献标识码：A 文章编号：1673-842X (2011) 12- 0060- 03
收稿日期：2011-06-05
基金项目：上海市教委科研项目（08CZ010）；上海中医药大学第二届大学生创新项目（SHUTCMCXHDZ16）作者简介：谭梦晖（1969-），女，山东人，讲师，博士，研究方向：中药药理药效学与毒理学研究。
Effects of Dracocephalum Moldavica on Hyperlipidemia in Rats
TAN Meng-hui 1，YU Bo 2，SHEN Xu-hua 1，BI Mei-qiong 1，ZHU Jie 1，
ZHU Can-ling 2，
LU Yao 1，CHEN Yu-xi 1（1.College of Pharmacy，Shanghai University of Traditional Chinese Medicine，Shanghai 201203，China ；2.College of Basic Medicine，Shanghai University of Traditional Chinese Medicine，Shanghai 201203，China）
Abstract ：Objective ：The experiment is to establish a rat model of experimental hyperlipidemia and to observe，the effect of Dracocephalum moldavica and ethyl acetate extract on the total cholesterol（TC），triglyceride （TG），low density lipoprotein-cholesterol （LDL-C），high density lipoprotein-cholesterol （HDL-C），malondialdehyde（MDA），superoxide dismutase（SOD），alanine aminotransferase（ALT），aspartate aminotransferase（AST） ；the impact of experimental hyperlipidemia on the liver tissue malondialdehyde （MDA），superoxide dismutase（SOD）and to explore Dracocephalum moldavica extract the impact of high
blood cholesterol. Methods ：
To establish a hyperlipidemia rat model，after 10 weeks therapy，to observe the effects of different parts of Dracocephalum moldavica and Dracocephalum moldavica of ethyl acetate extract
on serum lipid levels，anti lipid peroxidation ability. Results ：
Compared with model group，Dracocephalum moldavica could lower the serum level of TC，TG，LDL-C，AST，MDA（P <0.05 or P <0.01）
，increase the serum level of HDL-C，SOD（P<0.05 or P<0.01），and lower the liver homogenate level of MDA（P <0.01）
；Compared with model group，Dracocephalum moldavica ethyl acetate extract could lower the serum level
of TC，LDL-C，ALT，AST，MDA（P <0.01），increase the serum level of SOD（P <0.05），and increase the liver homogenate level of SOD（P <0.01）
，lower the liver homogenate level of MDA（P <0.01）. Conclusion ：Dracocephalum moldavica extract can regulate lipid metabolism disorders and reduce the incidence of fatty liver and its modulation may be related to its anti lipid peroxidation.
Key words ：
Dracocephalum moldavica ；Dracocephalum moldavica of ethyl acetate extract ；hyperlipidemia ；rat ；lipid peroxidation
13卷辽宁中医药大学学报
经上海中医药大学中药学院周秀佳教授鉴定为Dracocephalum moldevica L。
1.2动物
SD大鼠，雄性，体重160~180g，由上海西普尔-必凯实验动物有限公司提供，合格证号SCXK(沪)2008-0016，所有动物均饲养于上海中医药大学实验动物中心清洁级动物实验室。
1.3仪器
JA1003上皿电子天平，上海天平仪器厂；SK2200LH超声仪，上海科导超声仪器有限公司；2-16K低温冷冻离心机，美国Sigma公司；日立7080全自动生化分析仪，日本日立贸易有限公司；DENLEY DRAGON Wellscan MK3酶标仪，芬兰Thermo公司；DK-S22电热恒温水浴锅，上海精宏实验设备有限公司。
1.4试剂及配制
谷丙转氨酶（ALT）检测试剂盒，R1，批号J921，R2，批号J916；谷草转氨酶（AST）检测试剂盒，R1，批号L922，R2，批号J916；胆固醇（TC）检测试剂盒，R1，批号K917，R2，批号A018；甘油三酯（TG）检测试剂盒，R1，批号J916，R2，批号J916；以上均由日本世诺临床诊断制品株式会社提供；高密度脂蛋白试剂盒，R1，批号AE746，R2，批号AE747；低密度脂蛋白试剂盒，R1，批号AR153，R2，批号AF385，以上均由日本和光纯药工业株式会社提供；丙二醛试剂盒（MDA），批号20100603；超氧化物歧化酶（SOD）试剂盒，批号20100603，南京建成生物工程研究所；胆酸钠，批号080628，上海蓝季化学试剂有限公司；胆固醇，批号T20080415，1，2丙二醇，批号T20090312，聚氧乙烯山梨糖醇酐单油酸酯（吐温-80），批号T20090225，氨基甲酸乙酯（乌来糖），批号T20091109，均为国药集团化学试剂有限公司提供；辛伐他汀片，批号09222，杭州默沙东有限公司。
1.4.1 脂肪乳的制备[3-4]
胆固醇25g，研磨，倒入烧杯中，加50mL丙二醇和50mL吐温-80溶解，胆酸钠5g，溶解于50mL蒸馏水中，猪油75g，置烧杯于热水中充分融化至透明后，加于胆固醇溶液中，搅匀，将溶解的胆酸钠加于胆固醇中，搅匀，最后将溶液用蒸馏水定容至500mL。
1.4.2 香青兰水提物制备
取香青兰全草按1∶8（W/V）加蒸馏水浸泡24h，80℃水提取2次，每次2h，合并滤液，低压浓缩得干浸膏。配制：取干浸膏100g加入100mL 0.5％羧甲基纤维素钠溶液，完全溶解后备用。
1.4.3 香青兰乙酸乙酯提取物制备
取香青兰全草按1∶8（W/V）加乙醇浸泡3天后进行70℃水浴热回流提取2次，每次1.5h，合并滤液，将获得的乙醇提取物减压回收，得到浸膏状药物，将浸膏状药物用5倍量的水溶解，依次用石油醚、乙酸乙酯萃取，将获得的萃取物再次减压回收、干燥，备用。配制：取乙酸乙酯萃取干浸膏0.8g加入50mL 0.5％羧甲基纤维素钠溶液，完全溶解后备用。
1.4.4 辛伐他汀
辛伐他汀40mg研磨后加入50mL 0.5％羧甲基
纤维素钠溶液，完全溶解后备用。
2 实验方法[3-4]
2.1香青兰提取物对高脂血症大鼠的影响
取SD大鼠适应性喂养3天，称重，随机分为5组，分别为空白对照组、模型对照组、阳性对照组（辛伐他汀）、香青兰水提物组、香青兰乙酸乙酯提取物组，每组动物各6只。参照文献方法[3-4]制备脂肪乳剂，4℃冰箱保存。使用时先于37℃水浴中融化。除空白对照组外，其它各组每天下午灌胃给予脂肪乳剂，给药容积1mL·100g-1体重，正常组灌胃等量蒸馏水溶液。各给药组在造模的同时，每天上午灌胃给予相应药物。阳性对照组灌胃辛伐他汀8mg·kg-1；香青兰水提物组灌胃10000mg·kg-1；香青兰乙酸乙酯提取物组灌胃80mg·kg-1；正常对照与模型对照组：灌胃等量0.5％羧甲基纤维素钠水溶液，每5天称重1次，随体重调整给药量，各组动物连续灌胃给药70天后处理。末次给药后各组动物禁食不禁水12h。称重，25%乌来糖腹腔注射麻醉，腹主动脉取血，室温放置0.5h后，4000r·min-1离心，分离上清，-80℃保存备用。
2.2统计方法
应用SPSS11.5统计软件，计量资料采用“均数±标准差（x—±s）”表示，两组间比较采用t检验，多组间比较采用单因素方差分析，组间两两比较方差齐性时用LSD方法分析，方差不齐时用非参数检验方法分析，P<0.05为两者有显著性差异。
3 结 果
3.1香青兰提取物对高脂血症大鼠血清TC、TG、HDL-C、LDL-C的影响
香青兰提取物对高脂血症大鼠血清总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）的影响与模型组相比，辛伐他汀组显著降低高脂血症大鼠TC、TG、LDL-C，显著升高HDL-C（P<0.05或P<0.01）；香青兰水提取物组显著降低TC、TG、LDL-C（P<0.05或P<0.01），显著升高HDL-C （P<0.01）；香青兰乙酸乙酯组提取物组显著降低TC、LDL-C（P<0.01）。结果见表1。
表1 香青兰提取物对高脂血症大鼠血清TC、
TG、HDL-C、LDL-C的影响（n=6，x—±s）
组别
剂量
(mg·kg-1)
TC
(mmol·L-1)
TG
(mmol·L-1)
HDL-C
(mmol·L-1)
LDL-C
(mmol·L-1)正常组- 1.05±0.212）0.45±0.052）0.83±0.191）0.23±0.102）
模型组- 1.76±0.30 1.07±0.180.64±0.130.89±0.12
辛伐他汀组8 1.35±0.191）0.74±0.082）1.05±0.182）0.61±0.231）香青兰水提取物组10000 1.44±0.261）0.65±0.232）0.93±0.152）0.45±0.202）香青兰乙酸乙
酯提取物组
80 1.27±0.352）0.95±0.270.69±0.040.32±0.232）
注：与模型组比较，1）P<0.05，2）P<0.01。
3.2香青兰提取物对高脂血症大鼠血清超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）的影响
与模型组相比，辛伐他汀组、香青兰水提取物组、香青兰乙酸乙酯提取物组均显著升高血清SOD 含量（P<0.05），显著降低血清MDA含量（P<0.01），结果见表2。
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辽宁中医药大学学报13卷表2 香青兰提取物对高脂血症大鼠血清
SOD、MDA水平的影响（n=6，x—±s）
组别
剂量
（mg·kg-1）
SOD
（U·mL-1）
MDA
（μmol·L-1）
正常组-266.11±21.382） 2.13±0.652）
模型组- 193.14±18.43 18.81±9.49
辛伐他汀组8232.78±16.291） 5.47±2.132）香青兰水提取物组10000236.26±28.111） 4.71±2.692）香青兰乙酸乙
酯提取物组
80235.72±36.731） 4.99±0.982）注：与模型组比较,1）P<0.05，2）=P<0.01。
3.3香青兰提取物对高脂血症大鼠血清谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）的影响
与模型组相比，辛伐他汀组、香青兰乙酸乙酯提取物组均能显著降低血清ALT、AST含量（P<0.01），香青兰水提取物组能显著降低血清AST 含量（P<0.05）。结果见表3。
表3 香青兰提取物对高脂血症大鼠
血清ALT、AST的影响（n=6，x—±s）
组别
剂量
（mg·kg-1）
ALT
（IU·L-1）
AST
（IU·L-1）
正常组-110.33±17.362） 62.00±8.462）
模型组-185.33±40.24129.67±34.07
辛伐他汀组8130.17±29.342） 78.33±28.742）香青兰水提取物组10000153.17±26.41 93.50±21.381）香青兰乙酸乙
酯提取物组
80136.50±33.482） 83.67±36.932）注：与模型组比较，1）P<0.05，2）P<0.01。
3.4香青兰提取物对高脂血症大鼠肝脏超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）的影响
与模型组相比，辛伐他汀组、香青兰乙酸乙酯提取物组均显著升高肝匀浆SOD含量（P<0.01），显著降低MDA含量（P<0.01），香青兰水提取物组显著降低MDA含量（P<0.01）。结果见表4。
表4 香青兰提取物对对高脂血症大鼠肝
脏SOD、MDA水平的影响（n=6，x—±s）
组别
剂量
（mg·kg-1）
SOD
（kU·gprot-1）
MDA
（μmol·gprot-1）
正常组-32.44±1.452） 1.21±0.182）
模型组-21.54±5.98 2.75±0.60
辛伐他汀组838.05±6.612） 1.41±0.392）
香青兰水提取物组1000026.72±4.16 1.22±0.182）
香青兰乙酸乙
酯提取物组
8038.09±8.812） 1.35±0.162）注：与模型组比较，1）P<0.05，2）P<0.01。
4 讨 论
高脂血症与多种疾病的发生发展密切相关，是导致动脉粥样硬化和冠心病等心脑血管疾病发生的重要危险因素[6-7]。本试验采用脂肪乳10周灌胃给予大鼠造模，试验结果显示：与正常组比较，模型组动物血清TC、TG、LDL-C明显升高，HDL-C明显下降，说明造模成功。TC与TG是目前作为临床初步诊断血脂异常的标准。LDL-C的主要作用是将TC从肝内转运到肝外组织，使TC形成蓄积，是高脂血症导致动脉粥样硬化的危险因子。HDL-C与LDL-C的作用正好相反，它能将周围组织和动脉壁上游离的胆固醇吸收下来，并把它运输到肝脏中代谢，从胆汁排出；并促进胆固醇转化。因此HDL-C可防止脂质在动脉壁上沉积，防止脂肪在肝内堆积，具有抗动脉硬化和抗脂肪肝的作用[8-10]。本试验结果显示，香青兰水提取物能显著降低TG、TC、LDL-C，显著升高HDL-C；香青兰乙酸乙酯提取物组能显著降低TC、LDL-C。说明香青兰水提取物、香青兰乙酸乙酯提取物可能具有纠正高脂血症动物脂质代谢紊乱的作用。
研究表明，高血脂水平导致体内自由基的产生与清除之间的失平衡，自由基清除剂超氧化物歧化酶（SOD），其活性代表着体内氧自由基防御系统的水平，对机体的氧化与抗氧化平衡起着重要作用，SOD可抑制MDA等物质的生成；而MDA是脂质过氧化代谢物，可以反映体内脂质过氧化物程度，并间接反映全身脂质代谢障碍的程度[10-11]。本试验结果显示与模型组比较，香青兰乙酸乙酯提取物能显著升高血清与肝匀浆SOD含量，显著降低血清与肝匀浆MDA含量；香青兰水提取物能显著升高血清SOD 含量,显著降低血清与肝匀浆MDA含量。提示香青兰水提取物与乙酸乙酯提取物可能通过提高机体抗氧化能力，抑制脂质过氧化反应，从而起到改善机体脂质代谢的功能。
ALT、AST主要存在于肝细胞浆中，在肝细胞损害、坏死甚至在细胞变性时升高，是临床上监测肝功能的敏感指标[16]。本试验结果显示，香青兰水提取物显著降低AST含量；香青兰乙酸乙酯提取物能显著降低ALT、AST含量。提示香青兰水取提物与乙酸乙酯提取物可能具有恢复肝细胞活性的能力。
综上所述，香青兰水提物与乙酸乙酯提取物具有一定的降血脂作用，其机制可能与提高大鼠抗脂质过氧化能力有关。本研究为临床开发香青兰提供了一定的药理学实验依据。◆
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