强、弱筋小麦籽粒形成期蔗糖、淀粉合成相关酶活性及其与氮代谢的关系

作物学报 ACTA AGRONOMICA SINICA 2008, 34(6): 1019?1026https://www.wendangku.net/doc/3d4239821.html,/zwxb/ ISSN 0496-3490; CODEN TSHPA9E-mail: xbzw@https://www.wendangku.net/doc/3d4239821.html,

DOI: 10.3724/SP.J.1006.2008.01019

强、弱筋小麦籽粒形成期蔗糖、淀粉合成相关酶活性及其与氮代谢的关系

李建敏王振林高荣岐李圣福蔡瑞国闫素辉于安玲尹燕枰*

(山东农业大学农学院作物生物学国家重点实验室, 山东泰安271018)

摘要: 2005—2006年生长季, 以小麦强筋品种藁城8901和弱筋品种豫麦50为材料, 研究了灌浆期籽粒和旗叶氮代

谢底物含量与相关酶活性变化、蔗糖淀粉合成相关酶活性及籽粒淀粉积累特征, 分析了氮代谢与籽粒淀粉积累的关系。结果表明, 旗叶蔗糖合酶(SS)和磷酸蔗糖合酶(SPS)、籽粒腺苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶(AGPP)、可溶性淀粉合

酶(SSS)、束缚态淀粉合酶(GBSS)和淀粉分支酶(SBE)活性均呈单峰曲线变化。两品种比较, 除AGPP活性峰值豫麦50

低于藁城8901外, 其他酶活性峰值均是豫麦50高于藁城8901。相关分析表明, 藁城8901支链淀粉积累速率与SS、SPS、AGPP和SBE活性呈极显著正相关, 相关系数分别为0.9377**、0.8857**、0.6489**和0.5980**; 直链淀粉积累速

率与SS、SPS活性呈极显著正相关, 相关系数分别为0.7616**和0.7750**。豫麦50支链淀粉积累速率与SS、SPS、AGPP、GBSS和SBE活性呈极显著或显著正相关, 相关系数分别为0.8182**、0.6762**、0.7028**、0.8749**和0.5433*; 直链淀

粉积累速率与SS、SPS和SBE活性呈极显著正相关, 相关系数分别为0.8528**、0.8428**和0.8603**。两品种硝酸还原

酶(NR)、谷氨酰胺合成酶(GS)活性在开花后逐渐降低, 且藁城8901的NR活性一直高于豫麦50。硝态氮和氨态氮含

量与NR、GS活性呈极显著正相关; 藁城8901的NR、GS活性与SS、SPS活性呈显著负相关, 而豫麦50只有GS与SPS

达显著负相关(r = ?0.5212*)。上述结果表明, 不同品质类型小麦籽粒淀粉合成积累受氮代谢相关酶活性的影响, 藁城8901较高的NR活性抑制与蔗糖合成有关酶SS、SPS的活性, 导致淀粉合成积累速率降低。由此可见, SPS/NR比值对

淀粉合成具有重要调节作用。

关键词:冬小麦; 强筋; 弱筋; 氮代谢; 淀粉; 酶活性

Activities of Enzymes Involved in Sucrose and Starch Synthesis during Grain Filling and the Relation to Nitrogen Metabolism in Strong- and Weak-Gluten Wheat Cultivars

LI Jian-Min, WANG Zhen-Lin, GAO Rong-Qi, LI Sheng-Fu, CAI Rui-Guo, YAN Su-Hui, YU An-Ling, and YIN Yan-Ping*

(National Key Laboratory of Crop Biology, Agronomy College of Shandong Agricultural University, Tai’an 271018, Shandong, China)

Abstract: The strong- and weak-gluten cultivars are two typical patterns of high-quality wheat for different end-uses, between which many differences exist in the synthesis, accumulation, concentration, and components of both protein and starch in grain. The experiment was conducted at Tai’an experimental station of Shandong Agricultural University in 2005–2006 growth season.

A strong-gluten cultivar Gaocheng 8901 and a weak-gluten cultivar Yumai 50 were used to compare the contents of NO3?-N, NH4+-N and activities of enzymes relating to nitrogen metabolism, sucrose and starch syntheses and the starch accumulation dur-

ing grain filling, and to characterize the relationship between nitrogen and carbon metabolisms during grain development. The results indicated that the activities of sucrose synthase (SS), sucrose-phosphate synthase (SPS), adenosine diphosphorate glucose pyrophrylase (AGPP), soluble starch synthase (SSS), granule-bound starch synthase (GBSS), and starch branching enzyme (SBE)

基金项目:国家自然科学基金项目(30571099)；教育部高等学校博士学科点科研基金项目(20060434006)；山东省教育厅科技计划项目(j06k06)；

山东省自然科学基金项目(Y2005D13)

作者简介:李建敏(1977–), 女, 河北沧州人, 硕士, 研究方向为小麦产量品质生理与调节。

*通讯作者(Corresponding author):尹燕枰。E-mail: ypyinsdau@https://www.wendangku.net/doc/3d4239821.html,

Received(收稿日期): 2007-10-25; Accepted(接受日期): 2008-01-26.

1020作物学报第34卷

performed in the pattern of a single-peak curve during grain filling. The peak values of SS, SPS, SSS, GBSS, and SBE activities were higher in Yumai 50 than in Gaocheng 8901 except AGPP.The accumulation rate of amylopectin was highly significantly correlated with the activities of SS (r=0.9377**), SPS (r=0.8857**), AGPP (r=0.6489**), and SBE (r=0.5980**) in Gaocheng 8901, however, the accumulation rate of amylose was highly significantly correlated with the activities of SS (r=0.7616**) and SPS (r=0.7750**). The accumulation rate of amylopectin was significantly or highly significantly correlated with the activities of SS (r=0.8182**), SPS (r=0.6762**), AGPP (r=0.7028**), GBSS (r=0.8749**), and SBE (r=0.5433*) in Yumai 50, and the accumulation rate of amylose was highly significantly correlated with the activities of SS (r=0.8528**), SPS (r=0.8428**), and SBE(r=0.8603**). The activities of both nitrate reductase (NR) and glutamine synthetase (GS) exhibited a gradually decreased trend in the processs of grain filling in both cultivars, the activities of NR and GS in Gaocheng 8901 were higher than those in Yumai 50. The contents of NO3?-N and NH4+-N were highly significantly positively correlated with the activities of NR and GS in both cultivars. In Gaocheng 8901, the activities of NR and GS were negatively correlated with the activities of SS and SPS, but in Yumai 50 only the negative correlation of the activities between GS and SPS was significant (r=?0.5212*). Based on the results mentioned-above it was found that the starch synthesis and accumulation in grains of the different cultivars were influenced by the activities of the enzymes involved in nitrogen metabolism. The higher activity of NR caused the activities of both SS and SPS to be decreased, resulting in the decline of starch accumulation rate. This finding here supported the assumption that the ratio of SPS to NR plays an important role in starch synthesis and accumulation in wheat grains.

Keywords: Winter wheat (Triticum aestivum L.); Strong gluten; Weak gluten; Nitrogen metabolism; Starch; Enzyme activity

小麦籽粒发育过程协调并行着碳、氮两条重要的代谢途径, 二者相互联系, 共同完成籽粒的形成与物质积累[1]。强筋与弱筋小麦在籽粒蛋白质和淀粉的含量、组分及其积累特征等方面存在显著差异, 其籽粒形成过程中的碳、氮代谢亦存明显差异。关于不同品质类型小麦品种的氮代谢包括蛋白质及其组分合成以及相关酶活性的变化, 前人已有许多研究[2-4]表明, 不同品质类型品种籽粒蛋白质含量的变化趋势一致, 但强筋品种籽粒合成与积累蛋白质的能力强于弱筋品种; 其蛋白质组分的差异主要在醇溶蛋白与谷蛋白的含量和比例上。旗叶谷氨酰胺合成酶活性和籽粒谷氨酸合酶活性与籽粒蛋白质含量呈显著正相关。近年来关于不同品质类型小麦品种的籽粒碳代谢包括蔗糖、淀粉及淀粉组分的形成以及淀粉合成相关酶活性的变化引起了人们的关注[5-10]。本课题组曾对直链淀粉含量不同的小麦品种间籽粒淀粉合成酶活性及淀粉积累特征的差异进行了比较[11], 提出淀粉积累量高的弱筋小麦品种其籽粒蔗糖合酶、磷酸蔗糖合酶、ADPG焦磷酸化酶、可溶性淀粉合酶活性以及蔗糖积累量均高于淀粉积累量低的强筋品种[12]。然而, 现有报道多是针对不同品质类型品种籽粒蛋白质或淀粉的形成、组分及相关酶活性变化等的单项研究, 对籽粒发育形成过程中氮代谢与碳代谢之间的关系, 迄今了解尚少[13]。本试验以强筋和弱筋小麦品种为材料, 对比研究其籽粒形成期蔗糖转化、淀粉积累及相关酶活性变化, 以及与籽粒氮代谢底物NO3?、NH4+含量及关键酶活性变化的关系, 探讨两类品种间籽粒淀粉合成积累和氮代谢的差异及相互关系, 旨在为通过协调小麦碳、氮代谢关系改善籽粒品质提供理论依据。

1 材料与方法

1.1材料与设计

试验于2005—2006年生长季在山东农业大学泰安试验农场进行, 前茬为大豆, 秸秆直接还田。选用小麦强筋品种藁城8901(蛋白质含量15.60%)和弱筋品种豫麦50(蛋白质含量12.67%)。种植密度均为120株m?2, 小区面积3 m×3 m = 9 m2, 随机区组排列, 3个重复。按小麦高产栽培技术规程进行田间管理。

开花期在各重复选择同一日开花的单茎挂牌标记。于开花后5、10、15、20、25、30和35 d分别取旗叶和籽粒, 部分样品在液氮中固定30 min后, ?70℃保存, 用于酶活性测定; 部分样品于105℃杀青30 min, 65℃烘干至恒重, 用于蔗糖、淀粉含量的测定。

1.2 测定项目与方法

采用蒽酮比色法[14]测定蔗糖含量, 双波长比色法[14]测定淀粉含量。参照程方民等[15]的方法提取酶液。参照Douglas等[16]的方法测定蔗糖合酶(SS)、磷酸蔗糖合酶(SPS)活性。参照Douglas等[16-17]的方法测定腺苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶(AGPP)活性。参照Nakamura等[18]、李太贵等[19]的方法测定可溶性淀粉合酶(SSS)、束缚态淀粉合酶(GBSS)和淀粉分支酶(SBE)活性。

采用水杨酸法[20]测定硝态氮含量, 茚三酮法[21]测定氨态氮含量, 离体法[20]测定旗叶硝酸还原酶(NR)活性。参照王小纯等[3]的方法测定籽粒谷氨酰

第6期

李建敏等: 强、弱筋小麦籽粒形成期蔗糖、淀粉合成相关酶活性及其与氮代谢的关系 1021

2.1.2 蔗糖含量 两个品种旗叶蔗糖含量变化趋势一致, 均呈单峰曲线(图1-C)。但豫麦50峰值高于藁城8901, 出现峰值的时间早于藁城8901。豫麦50的蔗糖含量在开花后10 d 之前高于藁城8901, 而后期则低于藁城8901。这可能是豫麦50在灌浆前期旗叶合成的大量蔗糖快速转运到籽粒库中所致。

胺合成酶(GS)活性。 1.3 数据处理

上述指标均重复测定3次, 取平均值。用Microsoft Excel 和DPS 软件处理数据, 显著性检验用f 检验法。

2 结果与分析

图1-D 显示, 在灌浆前中期, 豫麦50旗叶蔗糖/淀粉比值均高于藁城8901, 且豫麦50在各个籽粒灌浆时期籽粒直、支链淀粉含量高于藁城8901同期籽粒的直、支链淀粉含量(图3)。表明弱筋品种豫麦50将叶片中合成的光合产物向籽粒运转的能力高于强筋品种藁城8901。这可能与豫麦50在灌浆中期有较高的SS 和SPS 活性有关。

2.1 旗叶SS 和SPS 的活性变化及其对蔗糖含量的影响

2.1.1 SS 和SPS 活性 由图1-A 可见, 两个品种旗叶SS 活性均呈单峰曲线变化, 峰值出现在花后15 d; 花后5~10 d 豫麦50的旗叶SS 活性低于藁城8901, 花后15~20 d 则豫麦50旗叶SS 活性显著高于藁城8901, 表明在籽粒淀粉积累的旺盛期, 弱筋品种豫麦50旗叶能合成更多的蔗糖以利于籽粒淀粉的合成。

2.2 籽粒淀粉合成相关酶的活性变化及对淀粉积累的影响

2.2.1 淀粉合成相关酶活性 两品种籽粒灌浆过程中籽粒淀粉合成的关键酶AGPP 活性均呈单峰曲线变化, 且在花后15 d 左右达到峰值, 藁城8901在花后20 d 之前的AGPP 活性略高于豫麦50, 但20 d 之后则豫麦50显著高于藁城8901(图2-A)。表明在籽粒灌浆中前期藁城8901比豫麦50蔗糖转化能力强, 在籽粒灌浆的后期弱筋品种豫麦50籽粒蔗糖转化为淀粉的能力远大于强筋品种藁城8901。

图1-B 表明, 灌浆期旗叶SPS 活性变化呈单峰曲线, 豫麦50峰值出现在花后15 d, 藁城8901峰值出现在花后10 d 。在籽粒灌浆中后期豫麦50旗叶SPS 活性显著高于藁城8901, 表明在籽粒淀粉积累的旺盛期弱筋品种豫麦50的蔗糖供应能力强于强筋品种藁城8901, 这可能是弱筋品种籽粒中淀粉含量相对较高的原因之一。

图1 旗叶SS 活性(A)、SPS 活性(B)和旗叶蔗糖含量(C)、旗叶蔗糖/淀粉(D)的变化

Fig.1 Changes of activities of SS(A), SPS(B), sucrose content(C), and the ratio of sucrose to starch(D) in flag leaf

1022

作 物 学 报 第34卷

图2 籽粒AGPP 活性(A)、SSS 活性(B)、GBSS 活性(C)和SBE 活性(D)的变化

Fig.2 Changes of activities of AGPP (A), SSS(B), GBSS(C), and SBE(D) in grains

图2-B 显示, 在籽粒灌浆过程中籽粒SSS 活性变化呈单峰曲线, 花后10 d 达峰值且弱筋品种豫麦50几乎整个灌浆期的籽粒SSS 活性均高于强筋品种藁城8901, 以灌浆盛期两者间的差幅最大, 但在灌浆35 d 之后豫麦50的SSS 活性下降较明显。

GBSS 活性在小麦花后20 d 达峰值。藁城8901的活性在籽粒灌浆10 d 前高于豫麦50, 此后至成熟

期明显低于豫麦50(图2-C)。

SBE 活性的峰值出现在花后20 d(图2-D)。但两品种籽粒SBE 活性变化存在明显差异。花后5~15 d, 藁城8901的SBE 活性高于豫麦50, 从花后20 d 至成熟豫麦50的活性显著高于藁城8901, 这可能是导致豫麦50籽粒支链淀粉含量高于藁城8901(图3-B)的一个重要原因。

图3 籽粒直(A)、支(B)链淀粉积累量和积累速率的变化

Fig.3 Changes of content and accumulation rate of amylose (A) and amylopectin (B) in grains

第6期

李建敏等: 强、弱筋小麦籽粒形成期蔗糖、淀粉合成相关酶活性及其与氮代谢的关系 1023

2.2.2 直、支链淀粉的积累 由图3-A 可以看出, 2个品种直链淀粉的积累速率呈单峰曲线变化, 但豫麦50的直链淀粉积累速率峰值显著高于藁城8901。籽粒直链淀粉积累量呈逐渐增加的趋势, 且弱筋品种豫麦50高于强筋品种藁城8901。籽粒支链淀粉的积累速率和积累量的变化趋势同直链淀粉(图3-B)。

2.3 蔗糖、淀粉合成相关酶活性与淀粉积累的关系

相关分析(表1)表明, 豫麦50支链淀粉积累速率和总淀粉积累速率与SS 、SPS 、AGPP 和GBSS

活性均呈极显著正相关, 与SBE 活性呈显著正相关; 直链淀粉积累速率只与SS 、SPS 和SBE 活性呈极显著正相关。而藁城8901支链淀粉积累速率和总淀粉积累速率与SS 、SPS 、AGPP 和SBE 活性呈极显著正相关; 直链淀粉积累速率只与SS 和SPS 活性呈极显著正相关。两品种籽粒支直链淀粉、总淀粉积累速率与SSS 活性高低没有必然的联系, 而与SS 和SPS 活性则呈极显著正相关。由此可见, 旗叶中蔗糖供应对淀粉的合成起重要作用, 籽粒AGPP 、GBSS 和SBE 共同作用调节淀粉合成。

表1 蔗糖、淀粉合成相关酶活性与淀粉积累速率的相关系数

Table 1 Correlation coefficients between starch accumulation rate and activities of enzymes involved in sucrose and starch synthesis

品种 Cultivar 酶 Enzyme 直链淀粉积累速率 Amylose accumulation rate

支链淀粉积累速率

Amylopectin accumulation rate

总淀粉积累速率 Starch accumulation rate

SS 0.7616**0.9377**0.9436**SPS 0.7750**0.8857**0.8981**AGPP 0.0495 0.6489**0.5567**SSS ?0.6723 ?0.2721 ?0.3597 GBSS ?0.3049 0.3157 0.2139 藁城8901 Gaocheng 8901

SBE

0.3577

0.5980**

0.5957**

SS 0.8528

**

0.8182

**

0.8702**SPS 0.8428**0.6762**0.7523**AGPP 0.2507 0.7028**0.6240**SSS ?0.2984 0.1092 0.0176 GBSS 0.3296 0.8749**0.7762**豫麦50 Yumai 50

SBE

0.8603**

0.5433*

0.6498*

*

P <0.05;** P <0.01.

2.4 氮代谢相关酶活性与蔗糖合成相关酶活性的关系

2.4.1 籽粒GS 活性和NH 4+-N 含量的变化 由图4-A 可以看出, 两品种籽粒GS 活性在开花后均逐渐下降, 整个灌浆前中期强筋品种藁城8901显著高于弱筋品种豫麦50, 说明藁城8901的NH 4+-N 同化能力高于弱筋品种豫麦50。

由图4-B 可以看出, 两品种籽粒NH 4+-N 含量变化趋势基本一致。花后20 d 之内, 藁城8901显著高于豫麦50, 之后品种间差异变小并略低于豫麦50。藁城8901在籽粒灌浆的前中期氮素转化较强并能积累足量的NH 4+-N 供应氨基酸合成所需, 至籽粒灌浆中后期籽

粒蛋白质积累的增加使籽粒NH 4+-N 含量降低。

豫麦50则呈现出与藁城8901明显不同的变化趋势。

2.4.2 旗叶NR 活性与SPS/NR 比值 由图5-A 可以看出, 旗叶NR 活性在开花期最高, 之后呈逐渐下

降趋势, 整个灌浆期藁城8901的NR 活性显著高于豫麦50, 说明强筋品种藁城8901同化NO 3?-N 的能力显著高于弱筋品种豫麦50, 也是其籽粒蛋白质含量高的原因之一。

由图5-B 可以看出, 开花后10 d 之前, 藁城8901和豫麦50的SPS/NR 值均很小, 而花后15 d 以后, 豫麦50的SPS/NR 值迅速上升, 且显著高于藁城8901, 这可能是弱筋品种淀粉含量高于强筋品种的一个重要原因。

2.4.3 氮代谢与蔗糖合成相关酶的关系 对氮代谢底物、相关酶活性及蔗糖合成相关酶活性进行相关分析(表2)表明, 两品种的NO 3?-N 、

NH 4+-N 含量均与NR 和GS 活性呈极显著正相关。藁城8901的旗叶NR 、籽粒GS 活性与旗叶SS 、SPS 活性呈显著负相关, 而豫麦50虽NR 、GS 活性亦与SS 、SPS 活性呈负相关, 但只有GS 与SPS 达显著水平, 其他

1024

作 物 学 报 第34卷

图4 籽粒GS 活性(A)和NH 4+-N 含量(B)的变化 Fig.4 Changes of GS activity (A) and NH 4+-N content

(B) in grains

均不显著。由此说明, 氮代谢关键酶NR 、GS 活性的提高促进了NO 3?-N 与NH 4+-N 的代谢运转, 而与蔗糖合成有关的酶SS 、SPS 的活性可能受到抑制。

图5 旗叶NR 活性和SPS/NR 比值

Fig.5 NR activity (A) and activity ratio of SPS to

NR (B) in flag leaf

由于SS 、SPS 的活性呈单峰曲线变化, 其峰值略早于籽粒淀粉积累速率的高峰期, 若SS 、SPS 的活性受到抑制则不利于淀粉的积累。

表2 氮代谢与蔗糖合成相关酶的相关系数

Table 2 Correlation coefficients between nitrogen metabolism and enzyme activities involved in sucrose synthesis 品种Cultivar 酶Enzyme

NO 3?

NH 4+NR GS NR 0.9809**0.9535** GS 0.9818

**

0.9545

**

SS ?0.4322

*

?0.4359*藁城8901 Gaocheng 8901

SPS ?0.5253*

?0.5299*

NR 0.9635**0.9849** GS 0.9501**

0.9619**

SS ?0.2612 ?0.3825 豫麦50

Yumai 50

SPS ?0.4163

?0.5212*

*

P <0.05;** P <0.01.

3 讨论

3.1 不同品质类型小麦旗叶、籽粒氮同化的差异

王月福等[4]认为, 小麦花后旗叶NR 和GS 活性与花后吸收氮量密切相关, 与品种籽粒蛋白质含量并不一致, 不同品种间籽粒蛋白质含量的差异是开

花后氮素吸收同化和再运转综合作用的结果。本试验认为不同类型小麦品种旗叶NR 活性存在差异, 藁城8901的旗叶NO 3?同化较快, CO 2同化由合成碳水化合物(主要是蔗糖)方向转向氨基酸合成[22]方向, SPS 活性下降(图1-B)。藁城8901在籽粒灌浆的前中期氮素同化较快并能积累较多的NH 4+-N, 其含量

第6期李建敏等: 强、弱筋小麦籽粒形成期蔗糖、淀粉合成相关酶活性及其与氮代谢的关系1025

高于豫麦50。藁城8901籽粒具有较高的GS活性(图4-A)将NH4+合成为谷胺酰胺用于蛋白质合成, 使籽粒灌浆中后期随蛋白质含量的增加而籽粒NH4+-N含量降低。表明藁城8901较高的旗叶NR活性和较高的籽粒GS活性有利于氮素同化, 为籽粒蛋白质合成提供了充足的底物, 更有利于蛋白质的积累。由此也可以认为籽粒蛋白质含量与氮素同化及NR、GS 活性密切相关。

3.2 不同品质类型小麦籽粒淀粉合成的差异

在籽粒灌浆过程中, 中筋小麦和弱筋小麦旗叶中SS和SPS活性均高于强筋品种, 中筋小麦略高于弱筋小麦[6,23]。王文静等[24]认为, 中筋品种灌浆期籽粒中AGPP、SSS、GBSS和SBE活性均高于强、弱筋品种, 且弱筋品种稍高于强筋品种。本研究中, 尽管AGPP活性峰值豫麦50低于藁城8901, 但籽粒灌浆中后期明显高于藁城8901, SS、SPS、GBSS、SSS 和SBE活性峰值均豫麦50高于藁城8901。两品种直链淀粉含量与GBSS活性相关不显著的结果与前人研究[25]的结论不尽一致。究其原因可能是在淀粉合成过程中, 虽然各种酶的功能已较明确, 但不同基因型和种植条件会引起酶活性变化, 即便同一品种, 环境条件也可影响基因转录使酶的表达发生变化[26], 导致其含量、活性和产物生成量的关系改变。可见淀粉合成是在基因型控制和环境影响共同作用下完成的一个复杂过程。

3.3 不同品质类型品种氮代谢与籽粒淀粉合成的关系

周琴等[27]认为, 营养器官中可溶性糖/氮素转运量比值与籽粒蛋白质含量、淀粉含量、淀粉/蛋白质产量比值之间存在密切关系。葡萄糖/蔗糖的比值可影响NR的活性, 硝酸根可通过抑制淀粉合成关键酶的基因表达使碳架向着用于氮合成的方向转化[28-29]。本试验中, 强筋品种藁城8901蛋白质含量高于弱筋品种豫麦50, 而豫麦50淀粉含量高于藁城8901。藁城8901的NR和GS活性明显高于豫麦50, 蔗糖、淀粉合成的相关酶, 除AGPP活性峰值略低于藁城8901外, SS、SPS、SSS、GBSS和SBE活性的峰值均高于藁城8901。这说明强筋和弱筋小麦品种氮代谢和碳代谢途径对光合产物的竞争优势各异, 相对而言, 藁城8901的氮代谢途径存在竞争优势, 而豫麦50在碳代谢方面优势较强。

小麦籽粒在灌浆过程中, 源器官制造的光合产物是用于氮同化还是用于碳同化, 可能取决于SPS 活性与NR活性的比例[30]。本试验认为花后10 d之前, 藁城8901和豫麦50的SPS/NR值均很小, 而藁城8901的NR、GS活性显著高于豫麦50, 致使光合碳

架用于氨基酸及蛋白质的合成; 花后15 d以后, 豫

麦50的SPS/NR值迅速上升, 且显著高于藁城8901, 而此时豫麦50的NR、GS活性较低, 与淀粉积累速率

呈显著或极显著正相关的SS、SPS、AGPP和SBE活性

均高于藁城8901, 光合碳架向着有利于淀粉合成的

方向运输。由此导致藁城8901蛋白质含量较豫麦50高, 而淀粉含量则是豫麦50高于藁城8901, 这可能

是两品种蛋白质含量差异的原因之一。

4结论

强、弱筋小麦籽粒淀粉合成积累受氮代谢相关

酶活性的影响。强筋品种藁城8901灌浆前中期旗叶

较高的NR活性和籽粒GS活性促进氮代谢而导致与

蔗糖合成有关酶SS、SPS的活性峰值显著低于豫麦50, 进而降低淀粉的合成积累。弱筋品种豫麦50籽

粒淀粉含量高于藁城8901, 是蔗糖、淀粉合成相关

酶协同作用的结果, 旗叶较高的SPS/NR比值利于

蔗糖合成和快速向籽粒中转运, 对淀粉的合成具有

重要作用。

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探究影响酶活性的因素实验报告 ()

探究影响酶活性的因素 一、探究温度对酶活性的影响 （一）实验原理（注：市售a-淀粉酶的最适温度约600C）： 1．淀粉遇碘后，形成紫蓝色的复合物。 2．淀粉酶可以使淀粉逐步水解成麦芽糖和葡萄糖，麦芽糖和葡萄糖遇碘后不显色。 （二）方法步骤： 1、取3支试管，编上号（A、B、C），然后分别注入2mL可溶性淀粉溶液。 2、另取3支试管，编上号（a、b、c），然后分别注入1mL新鲜淀粉酶溶液。 3、将装有淀粉溶液和酶溶液的试管分成3组，A和a试管放入热水（约600C）、B和b放 入沸水，C和c放入冰块中，维持各自的温度5min。 思考题1、不能只用不同温度处理淀粉溶液或酶溶液，这是为什么？ 4、分别将淀粉酶溶液注入相同温度下的淀粉溶液中，摇匀后，维持各自的温度5min。 5、在3支试管中各滴入1-2滴碘液，摇匀后观察这3支试管中溶液颜色变化并记录。 思考题2、在试管A、B、C中分别能观察到什么现象？ 思考题3、通过上述实验，你能得出什么结论？ 思考题4、在上述实验中，自变量是什么？无关变量是什么？ 思考题5、探究温度对酶活性的影响实验中是否可以用斐林试剂来检验实验结果？ 为什么？ 二、探究PH值对酶活性的影响 （一）实验原理：思考题6、请依据下面所列实验操作步骤，写出该实验的实验原理。

（二）操作步骤：用表格显示实验步骤：（注意操作顺序不能错） 思考题7、请在上表中填入你所观察到的实验现象。 思考题8、通过上述实验，你能得出什么结论？ 思考题9、在上述实验中，自变量是什么？无关变量是什么？ 思考题10、在设计“影响酶活性的条件”实验中最关键的一步是什么？ 附加实验：思考题11、能否用淀粉酶探究PH对酶活性的影响？ 课堂练习： 1.（多选）在证明酶的催化作用受温度影响的实验时，有学生取两支试管分别将淀粉溶液与唾

参考教案-蔗糖酶的提取纯化与鉴定分析

参考教案：酵母蔗糖酶的提取纯化与鉴定 蔗糖酶（E.C.3.2.1.26）（ —D—呋喃果糖苷果糖水解酶），能催化非还原性双糖（蔗糖）的1，2-糖苷键裂解，释放出等量的果糖和葡萄糖。不仅能催化蔗糖水解生成葡萄糖和果糖，也能催化棉子糖水解，生成密二糖和果糖。 由于果糖甜度高 ,约为蔗糖1.36～1.60倍 ,在工业上具有较高的经济价值。可用以转化蔗糖,增加甜味,制造人造蜂蜜,防止高浓度糖浆中的蔗糖析出,制造含果糖和巧克力的 软心糖,还可为果葡糖浆的工业化生产提供新的方法。 蔗糖酶以两种形式存在于酵母细胞膜的外侧和内侧，在细胞膜外细胞壁中的称之为外蔗糖酶,其活力占蔗糖酶活力的大部分，是含有50% 糖成分的糖蛋白。在细胞膜内侧细胞质中的称之为内蔗糖酶，含有少量的糖。两种酶的蛋白质部分均为双亚基，二聚体，两种形式的酶的氨基酸组成不同，外酶每个亚基比内酶多两个氨基酸，Ser和Met，它们的分子量也不同，外酶约为27万(或22万，与酵母的来源有关)，内酶约为13.5万。尽管这两种酶在组成上有较大的差别，但其底物专一性和动力学性质仍十分相似，因此，本实验未区分内酶与外酶，而且由于内酶含量很少，极难提取，本实验提取纯化的主要是外酶。 每摩尔蔗糖水解产生两摩尔还原糖，蔗糖的裂解速率可以通过NeLson法测定还原糖的产生数量来测定。一个酶活力单位规定为在标准分析条件下每分钟催化底物转化的数量。比活力单位为每毫克蛋白含有酶活力单位。 （本实验以酵母为原料） 一、教学目的 通过酵母菌扩大培养及蔗糖酶的提取纯化与鉴定使学生学会生物大分子（酶）制备方案设计和开展实践研究的方法，体验从复杂细胞混合物体系中提取纯化酶的基本原理、 过程和方法。 本实验为学生提供一个较全面的科学研究实践机会，整个实验过程学生独立完成，虽然操作难度较大，所需要的实间较长（64学时），但每一步单元操作的原理清晰，技术成熟，实验结果明显，能给学生较多的设计空间和动手机会，有利于培养学生的学习兴趣和从事科学研究的能力。 二、教学内容

蔗糖水解反应速率常数的测定

蔗糖水解反应速率常数的测定 一、实验目的 1、根据物质的光学性质研究蔗糖水解反应，测定其反应速率常数。 2、了解旋光仪器仪的基本原理,掌握其使用方法。 二、实验原理 蔗糖在水中转化成葡萄糖与果糖，其反应为： 612661262112212O H C O H C O H O H C +→+ 它属于二级反应，在纯水中此反应的速率极慢，通常需要在H+ 离子催化作用下进行。由于反应时水大量存在，尽管有部分水分子参与反应，仍可近似地认为整个反应过程中水的浓度是恒定的，而且H+是催化剂,其浓度也保持不变。因此在一定浓度下，反应速度只与蔗糖的浓度有关，蔗糖转化反应可看作为一级反应。 一级反应的速率方程可由下式表示： 式中：c 为蔗糖溶液浓度，k 为蔗糖在该条件下的水解反应速率常数。 令蔗糖开始水解反应时浓度为c0，水解到某时刻时的蔗糖浓度为ct ，对上式进 行积分得： 该反应的半衰期与k 的关系为： 蔗糖及其转化产物，都具有旋光性，而且它们的旋光能力不同，故可以利用体系在反应进程中旋光度的变化来度量反应进程。 测量物质旋光度所用的仪器称为旋光仪。溶液的旋光度与溶液中所含旋光物质的旋光能力，溶剂性质，溶液浓度，样品管长度及温度等均有关系。当温度、波长、溶剂一定时，旋光度的数值为： []t D C L αα??= 或 KC =α

L 为液层厚度，即盛装溶液的旋光管的长度；C 为旋光物质的体积摩尔浓度；[]t D α为比旋光度；t 为温度；D 为所用光源的波长。 比例常数'K 与物质旋光能力，溶剂性质，样品管长度，光源的波长，溶液温度等有关。可见，旋光度与物质的浓度有关，且溶液的旋光度为各组分旋光度之和。 作为反应物的蔗糖是右旋性物质，其比旋光度[]020 65.66=D 蔗α；生成物中葡 萄糖也是右旋性物质，其比旋光度[]020 5.52=D 葡α；但果糖是左旋性物质，其比旋 光度[]020 9.91-=D 果α。由于生成物中果糖的左旋性比葡萄糖右旋性大，所以生成 物呈左旋性质。因此随着反应的进行，体系的右旋角不断减小，反应至某一瞬间，体系的旋光度可恰好等于零，而后就变成左旋，直至蔗糖完全转化，这时左旋角达到最大值∞α。 反应过程浓度变化转变为旋光度变化： 当t=0时，溶液中只有蔗糖，溶液的旋光度值为： 00C k 蔗糖=α （1） 当t=∞时，蔗糖完全水解，溶液中只有葡萄糖和果糖。旋光度为： ()0C k k 果葡+=∞α （2） 当t=t 时，溶液中有蔗糖、果糖和葡萄糖，此时旋光度为： ()()t t t C C k k C k -++=0果葡蔗糖α (3） 经数学处理得： ()()[]果葡蔗糖k k k C +--=∞αα00 （4）

土壤酶活性测定的实验步骤

土壤酶的测定 1．三角瓶用稀HNO 3（3-5%）或用洗衣粉浸泡24h，后刷洗，然后再用蒸馏水润洗，晾干。 2．土样研磨精细后分袋装好。土量需2g+2.5g+5g+5g=14.5g，重复一次，14.5×2=29g。 一、过氧化氢酶（容量法）（关松荫P323） 1．试剂配制： (1)0.3%过氧化氢溶液： ①（1：100 30%的H 2O 2和水） ②（0.5molH 2O 2+49.5ml蒸馏水） ③（1ml30% H 2O 2+99ml蒸馏水） (2)3N硫酸： （10ml硫酸+50ml水） (3)0.1N高锰酸钾溶液： （1.58gKMnO

4+100ml蒸馏水） 2．操作步骤： 2g风干土置100三角烧瓶→注入40ml蒸馏水和5ml 0.3%过氧化氢（现配）→在往复式振荡机上振荡20min→加入5ml3N硫酸（以稳定未分解的H 2O 2）→用慢速型滤纸过滤，→吸取25ml滤液，用0.1N高锰酸钾的滴定至淡粉红色 3．结果计算 过氧化氢酶的活性（M），以20min后1g土壤的0.1N KMnO 4的毫升数表示： M=（A－B）×T 式中： A： 空白消耗的0.1N KMnO 4毫升数 B： 滤液消耗的0.1 N KMnO 4毫升数 T： KMnO 4滴定度的校正值

以容量法测H2O2的酶活： Kappen （1913）首先介绍硫酸存在下用高锰酸钾滴定剩余的过氧化氢测定酶活。此法根据H 2O 2与土壤相互作用时，未分解的H 2O 2的数量用容量法（常用高锰酸钾滴定未分解的H 2O 2）测定H 2O 2的酶活 2 KMnO 4＋5H 2O 2＋3H 2SO 4→2MnSO 4＋K 2SO

酵母蔗糖酶的提取及性质测定

酵母蔗糖酶的提取及性质测定 引论及原理 酶的分离制备在酶学以及生物大分子的结构功能研究中有重要意义。本实验属综合性实验，接近研究性实验，包括八个连续的实验内容，通过对蔗糖酶的提纯和性质测定，了解酶的基本研究过程；同时掌握各种生化技术的实验原理、基本操作方法。本实验技术多样化，并且多个知识点互相联系，实验内容逐步加深，构成了一个综合性整体，为学生提供一个较全面的实践机会，学习如何提取纯化、分析鉴定一种酶，并对这种酶的性质，尤其是动力学性质作初步的研究。 蔗糖酶（invertase ）（β—D —呋喃果糖苷果糖水解酶）（fructofuranoside fructohydrolase ）（EC.3.2.1.26）特异地催化非还原糖中的α—呋喃果糖苷键水解，具有相对专一性。不仅能催化蔗糖水解生成葡萄糖和果糖，也能催化棉子糖水解，生成密二糖和果糖。每水解1mol 蔗糖，就生成2mol 还原糖。还原糖的测定有多种方法，本实验采用Nelson 比色法测定还原糖量，由此可得知蔗糖水解的速度。 在研究酶的性质、作用、反应动力学等问题时都需要使用高度纯化的酶制剂以避免干扰。酶的提纯工作往往要求多种分离方法交替应用，才能得到较为满足的效果。常用的提纯方法有盐析、有机溶剂沉淀、选择性变性、离子交换层析、凝胶过滤、亲和层析等。酶蛋白在分离提纯过程中易变性失活，为能获得尽可能高的产率和纯度，在提纯操作中要始终注意保持酶的活性如在低温下操作等，这样才能收到较好的分离效果。啤酒酵母中，蔗糖酶含量丰富。本实验用新鲜啤酒酵母为原料，通过破碎细胞，热处理，乙醇沉淀，柱层析等步骤提取蔗糖酶，并对其性质进行测定。 一、蔗糖酶的提取与部分纯化 （一）实验目的 学习酶的提取和纯化方法，掌握各步骤的实验原理，并为后续实验提供一定量的蔗糖酶。 （二）实验原理（略） （三）实验仪器、材料及试剂 仪器 1. 高速冷冻离心机、恒温水浴箱、－20℃冰箱 2. 电子天平、研钵（＞200ml ）、制冰机、50ml 烧杯 3. 离心管（2ml ，10ml ，30ml 或50ml ）、移液器（1000ul ）或滴管、量筒 材料及试剂 1. 市售鲜啤酒酵母（低温保存） ＋ H 2O 蔗糖酶 O H H O

蔗糖水解反应速率常数的测定--另一种方法

蔗糖水解反应速率常数的测定 实验目的 （1）明了旋光度法测定化学反应速率的原理； （2）测定蔗糖水解反应速率常数； （3）掌握旋光仪的使用方法； （4）掌握用图解法求反应速率常数。 实验原理 蔗糖溶液在H +离子存在时，按下式进行水解： C 12H 22O 11 + H 2O → C 6H 12O 6 + C 6H 12O 6 蔗糖 葡萄糖 果糖 时间t =0 c 0 0 0 t =t c 0-c x c x c x t =∞ 0 c 0 c 0 其中，c 0为反应物初始浓度，c x 为反应进行至t 时间的产物浓度，c 0-c x 为反应进行t 时间后反应物的浓度。 此反应中H +离子为催化剂。当H +离子浓度一定时，此反应在某时间t 的反应速率和蔗糖及水浓度一次方的乘积成正比，故为二级反应。由于在反应过程中水是大大过量，故认为水的浓度在反应过程中不变，这样蔗糖水解反应就可以作为一级反应处理，起速率方程的积分式为： x c c c t k -=00lg 303.2 （1） 式中，c 0为反应开始时蔗糖的浓度；c 0-c x 为反应至时间t 时蔗糖的浓度；k 为速率常数。 若测得在反应过程中不同时刻对应的蔗糖浓度，代入上式就可以求出此反应的速率常数k 。而测定各时间所对应的反应物浓度的方法有化学方法和物理方法两种。化学方法是在反应过程中反应进行若干时间，取出一部分反应混合物，并让其迅速停止反应，记录时间，然后分析和此时间相对应的反应物浓度。但是要时反应迅速停止在实验上是很困难的，因而所分析的浓度总和取样的时间存在偏差，所以此方法是不够准确的；而物理方法则是利用反应系统中某一物理性质（如

直链淀粉含量检测试剂盒说明书 微量法

直链淀粉含量检测试剂盒说明书微量法 注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。 货号：BC4265 规格：100T/96S 产品简介： 直链淀粉是D-葡萄糖基以α-(1,4)糖苷键链接的多糖链，直链淀粉含量影响着食品的食用品质和外观品质，与食品安全息息相关。 直链淀粉和碘形成蓝色络合物，利用乙醇分开样品中的可溶性糖和淀粉，再用碘与其反应得到直链淀粉含量。 试验中所需的仪器和试剂： 可见分光光度计/酶标仪、天平、台式离心机、微量玻璃比色皿/96孔板、可调式移液枪、研钵/匀浆器、乙醚、无水乙醇、EP管。 产品内容： 试剂一：液体110mL×1瓶，4℃保存； 试剂二：乙醚100mL×1瓶，自备； 试剂三：液体55mL×1瓶，4℃保存； O=9mL：91mL混匀，现用现配，4℃保存半年。 试剂四：将试剂三：H 2 试剂五：液体0.5mL×1支，4℃保存； 粉剂一：粉剂×1瓶，4℃保存； 粉剂二：粉剂×1瓶，4℃保存； 试剂六的配制：将粉剂一倒入粉剂二，用蒸馏水定容至10mL，4℃避光保存一个月。 标准品：10mg直链淀粉×1支，4℃避光保存。临用前加入0.1mL无水乙醇和0.9mL试剂三，混匀后封口膜封口，沸水浴至溶解，即10mg/mL的直链淀粉。吸取0.1mL加入0.9mL蒸馏水配制为1mg/mL的标准溶液待用。 操作步骤：

一、直链淀粉的提取： 称取0.005g烘干样本于研钵中研碎，加入1mL试剂一，充分匀浆后转移到EP管中，80℃水浴提取30min，3000g，25℃离心5min，弃上清，留沉淀，加入1mL试剂二（乙醚）振荡5min，3000g，25℃离心5min，弃上清，留沉淀，加入5mL试剂四充分溶解，90℃水浴10min，冷却后3000g，25℃离心5min，取上清待测。 二、测定步骤： 1、分光光度计/酶标仪预热30min以上，调节双波长至550nm和485nm，蒸馏水调零。 2、将1mg/mL标准液用试剂四稀释为0.4mg/mL的标准溶液备用。 3、操作表：(在1.5mL离心管或96孔板中依次加入下列试剂) 测定管标准管空白管样品（μL）20--标准溶液（μL）-20- 蒸馏水（μL）--20 试剂五（μL）444 试剂六（μL）444 蒸馏水（μL）172172172 充分混匀，测定550nm和485nm处的吸光值，550nm下的测定管、标准管、空白管分别记为A测定、A标准和A空白，485nm下的分别记为A’测定、A’标准和A’空白，计算△A测定=（A测定-A空白）-（A’测定-A’空白），△A标准=（A标准-A空白）-（A’标准-A’空白）。 直链淀粉含量计算： 直链淀粉含量（mg/g样本）=△A测定÷（△A标准÷C标准）×V样总÷W=2×△A测定÷△A标准÷W。 C标准：标准溶液浓度，0.4mg/mL；V样总：加入试剂四体积，5mL；W：样本质量，g。 注意事项 1、反应后建议在20min内检测完成防止褪色。 2、若A测定大于1，建议样本上清用试剂四稀释后再进行测定；若A测定低于0.05时，可以提取 时减少试剂四体积进行测定。

测定蛋白酶活力实验

测定蛋白酶活力实验 一、实验目的 1.加深了解酶活力的概念。 2.学习掌握测定蛋白酶活力的方法。 二、实验原理 酶活力指酶催化某一特定反应的能力。其大小可用在一定条件下酶催化反应进行一定时间后，反应体系中底物的减少量或产物的生成量来表示。 酶活力单位是表示酶活力大小的重要指标。本实验规定酶活力单位(U)为一定条件下每分钟分解1μg 酪氨酸所需的酶量。 实验选用枯草杆菌蛋白酶水解酪蛋白产生酪氨酸的反应体系。产物酪氨酸在碱性条件下与Folin-酚试剂反应生成蓝色化合物，该蓝色化合物在680nm 处有最大光吸收，其吸光值与酪氨酸含量呈正比。 因此通过测定一定条件下产物酪氨酸的含量变化，可计算出蛋白酶的活力。 三、仪器和试剂 仪器: 恒温水浴锅、分光光度计、试管及试管架、干燥滤纸、玻璃漏斗。原料 枯草杆菌蛋白酶：称取1g 枯草杆菌蛋白酶粉，用少量L，磷酸缓冲液溶解并定容至100mL，震荡15分钟，使充分溶解，干纱布过滤，取滤液冰箱备用。使用时视酶活力高低用缓冲液适当稀释。

试剂 1. Folin-酚试剂： 在2L 磨口回流瓶中加入钨酸钠(Na2WoO4. 2H2O)100g，钼酸钠(Na2WoO4. 2H2O)25g，蒸馏水700mL，85%磷酸50mL 以及浓盐酸100mL，充分混匀后，微火回流加热10小时。再加入硫酸锂150g，蒸馏水50mL 和液溴数滴，摇匀后开口继续煮沸15min，以驱赶过剩的溴。冷却后加蒸馏水定容至1000mL，过滤，溶液呈黄绿色，置于棕色试剂瓶中暗处贮藏。使用前用标准NaOH 溶液、酚酞为指示剂标定酸度(约为2mol/L)，然后加水稀释至1mol/L，即可使用。 2. 0.2mol/L 盐酸溶液 3. L 氢氧化钠溶液 4. L 碳酸钠溶液 5. 10%三氯乙酸溶液 6. 磷酸缓冲液： 称取磷酸氢二钠(Na2HPO4 . 12H2O)7.16g，用水定容至100mL(A 液)；称取磷酸二氢钠(Na2HPO4.12H2O)3.12g，用水定容至100mL(B 液)。取A 液84mL，B 液16mL 混合后，得到磷酸缓冲液，可长期存放。临用时稀释10倍即可。 7. 标准酪氨酸溶液(50μg/mL)：称取以烘干至恒重的酪氨酸，用L 盐酸约30mL 溶解后，蒸馏水定容至250mL。 8. 酪蛋白溶液%)：称取1.25g 酪蛋白，用L 氢氧化钠溶液(20mL)溶解，再用磷酸缓冲液定容到250mL。

物化实验 蔗糖水解习题解答

实验 15 蔗糖水解反应速率常数测定 一、实验目的 1．学习测定反应级数、反应速率常数的方法； 2．掌握旋光仪的使用；掌握通过测量系统物理量跟踪反应系统浓度的方法。 二、实验原理 蔗糖水溶液在H +存在的条件下，按下式进行水解： （葡萄糖）（果糖）（蔗糖）6 1266126] [2112212O H C O H C O H O H C H +??→?++ 在该反应中，H +是催化剂，当温度、H +浓度一定时，反应速率与蔗糖和水的浓度成正比， 即： B A c c k dt dc '=- （15.1） 式中，B A c c 、分别代表蔗糖浓度和水的浓度。 当蔗糖浓度很低时，反应过程中H 2O 浓度相对与蔗糖浓度改变很小，故，可近似认为c B 为常数，令： 常数==k c k B ' （15.2） 则（15.1）式可写成： A kc dt dc =- （15.3） 将（15.3）式分离变量后进行定积分： 当 t=0时， C A =C A0 ； t=t 时， C A =C A; 定积分式为： ??=-A A C C t A A kdt c dc 00 (15.4) 积分结果： 0ln ln A A c kt c +-= （15.5） (15.5)式是t c A ~ln 的直线方程。反应进行过程中，测定不同时刻 t 时反应系统中蔗糖的浓度c A ，取得若干组c A 、t 的数据后，以lnc A 对t 作图，得一直线，表明该反应为一级反应（准一级反应），直线斜率为-k 。 物理化学的研究方法是采用物理的方法测定反应系统某组分的浓度，所谓物理的方法是利用反应系统某组分或各组分的某些物理性质（如面积、压力、电动势、折光率、旋光度等）与其有确定的单值函数关系的特征，通过测量系统中该物理性质的变化，间接测量浓度变化。此种物理化学的实验方法最大的优点是可以跟踪系统某组分或各组分

蔗糖水解反应速率常数的测定

姓名: 肖池池序号: 31 周次: 第八周指导老师: 张老师 蔗糖水解反应速率常数的测定 一、实验目 1. 了解蔗糖水解反应体系中各物质浓度与旋光度之间的关系。 2. 测定蔗糖水解反应的速率常数k、半衰期t1/2和活化能E a。 3. 了解旋光仪的简单结构原理和测定旋光物质旋光度的原理，正确掌握旋光仪的使用方法。 二、基本原理 蔗糖在水中转化成葡萄糖与果糖,其反应为: C12H22O11 + H2O C6H12O6 + C6H12O6 (蔗糖) (葡萄糖) (果糖) 它是一个二级反应,在纯水中此反应的速率极慢,通常需要在H+离子催化作用下进行。由于反应时水是大量存在的,尽管有部分水分子参加了反应,仍可近似地认为整个反应过程中水的浓度是恒定的,而且H+作为催化剂,其浓度也保持不变.因此蔗糖水解反应可近似为一级反应。 一级反应的速率方程可由下式表示: c为时间t时的反应物浓度,k为反应速率常数。积分可得: c0为反应开始时反应物浓度。 从上式不难看出，在不同时间测定反应物的相应浓度，并以ln c对t作图,可得一直线,由直线斜率即可得反应速率常数k o然而反应是在不断进行的,要快速分析出反应物的浓度是困难的.但蔗糖及其转化物,都具有旋光性,而且它们的旋光能力不同,故可以利用体系在反应进程中旋光度的变化来度量反应的进程。 旋光度错误！未找到引用源。与反应物浓度c呈线性关系,即: 错误！未找到引用源。 式中比例常数A与物质旋光能力、溶液性质、溶液浓度、样品管长度、温度等有关。 物质的旋光能力用比旋光度来度量,比旋光度用下式表示: 式错误！未找到引用源。中右上角的“20”表示实验时温度为20℃,D是指用钠灯光源D线的波长(即589nm),错误！未找到引用源。为测得的旋光度,L为样品管长度(dm),C为试样浓度(g/mL)。 设体系最初的旋光度为: 错误！未找到引用源。(t=0,蔗糖尚未转化) 体系最终的旋光度为: 错误！未找到引用源。(t=∞,蔗糖已完全转化)

直链淀粉含量分析仪测定绿豆中的直链淀粉含量

直链淀粉含量分析仪测定绿豆中的直链淀粉含量 绿豆淀粉具有热粘度高，凝胶强度弱，凝胶透明度大等优良性能，因此是制作粉丝、粉皮、绿豆馅等的良好原料。近年来，借助直链淀粉含量分析仪测定绿豆中的直链淀粉含量，结果发现绿豆淀粉中直链淀粉占粗淀粉近60%，可溶性直链淀粉占粗淀粉的36-37%。而不溶性直链淀粉、支链淀粉含量均低于豌豆、豇豆。 由于绿豆直链淀粉含量高，其淀粉结晶区多，淀粉粒难于糊化，而糊化的绿豆淀粉又易于老化，其老化主要由分子间羟基数量决定。糊化的直链淀粉在冷却过程中，无规则排列的分子能自动平行排列而形成溶解度低的聚集体，使淀粉糊的韧性增大。因此绿豆淀粉具有较强的成膜性及膜强度。 而粉丝作为我国的传统食品是一种淀粉凝胶产品，它是经过淀粉糊化、成型、凝沉、干燥而成。因此借助直链淀粉含量分析仪测定绿豆中的直链淀粉含量，可以帮助提高粉丝的食味品质。 直链淀粉含量分析仪简称粉含量测定仪、淀粉分析仪，又名直链链淀粉检测仪，DPCZ-II淀粉含量测定仪由直链淀粉测定仪、计算机检测系统组成，具有灵敏度高，稳定性好，自动化程度高，检测速度较快等优点。 托普云农DPCZ-I型稻谷品质快速检测装置的直链淀粉检测单元部分设计的高灵敏度和稳定性能，测定直链淀粉时，采用脱脂和不脱脂预处理，均能保证检测精度。美国ALPKEM公司的FS-IV化学自动分析仪是1996年ALPKEM公司推出

的世界上先进的第六代产品，该新型流动分析系统针对中国水稻行业分析测试的需要，可实现直链淀粉的测定，分析方法符合中国国家标准，但价格昂贵，到岸价4.9万美元。DPCZ-I型稻谷品质快速检测装置的直链淀粉检测单元和FS-IV 化学自动分析仪进行了对比试验，两种仪器均采用不脱脂的前处理工艺，测定大米直链淀粉含量的最大偏差为0.725%，满足了测定准确度的要求。该装置对国产优质大米和进口泰国香米均进行了测定，测定结果表明，DPCZ-I型稻谷品质快速检测装置不仅可以用来测试分析国产优质大米的品质，也可用来测试和评价进口大米的品质。 直链淀粉含量分析仪|淀粉含量测定仪|淀粉分析仪功能特性： 农业部谷物品质监督检验测试中心，国家分析仪器质量监督检验中心分别对DPCZ-I型稻谷品质快速检测装置直链淀粉单元进行了技术测试，测试结果均满足技术要求。 DPCZ-Ⅱ型直链淀粉测定仪在DPCZ-I型稻谷品质快速检测装置直链淀粉检测单元的基础上并且保留其优点和性能，吸取分析仪器专用化、微型化、接口通用化的思想设计研制，集计算机技术、分光光度技术于一体的快速、在线检测仪器，可用于大米，玉米，小麦等谷物的直链淀粉品质的快速、在线检测。灵敏度高，稳定性好，自动化程度高，检测速度较快，重复方便使用，性能价格比高等特点，是粮食部门和食品生产部门提高检测水平与效率，控制粮食质量与成本，减少浪费的先进技术手段 DPCZ-Ⅱ型直链淀粉测定仪由计算机(奔腾3以上配置)和直链淀粉测定仪组成。计算机通过RS-232通讯端口与备有专用接口的直链淀粉测定仪连接实现数据的自动采集和传输。整个系统由直链淀粉测定仪系统软件控制。 直链淀粉含量分析仪|淀粉含量测定仪|淀粉分析仪技术参数： 检测品种：大米、玉米、小麦等农作物 检测参数：直链淀粉含量 单位：% 操作系统：Windows 98/2000/ME/XP 测量时间：约1分钟 电源电压：220±1V 温度： 20℃～30℃ 其他作物品质仪器：凯氏定氮仪、消化炉、脂肪测定仪、粗脂肪测定仪、粗纤维测定仪、精米机、智能百度仪、降落值测定仪

实验二淀粉酶活性测定实验报告

实验二淀粉酶活性测定 实验报告 集团文件版本号：（M928-T898-M248-WU2669-I2896-DQ586-M1988）

淀粉酶活性的测定 一、实验目的 酶的活力是酶的重要参数，反映的是酶的催化能力，因此测定酶活力是研究酶的基础。酶活力由酶活力单位表征，通过计算适宜条件下一定 时间内一定量的酶催化生成产物的量得到。 淀粉酶是水解淀粉的糖苷键的一类酶的总称。α-淀粉酶是一种典型 的内切型淀粉酶,主要作用于淀粉水解的液化阶段,因此又叫液化酶。作 为一种最重要的工业酶制剂，α-淀粉酶广泛存在于动物,植物和微生物中。其中，微生物α-淀粉酶以其经济易得成为工业生产主要来源。目前,关于α-淀粉酶活性的测定方法很多种。 本实验采用杨氏改良法测定α-淀粉酶；掌握测定α-淀粉酶活性大 小与温度关系的方法，通过分析得出酶的最适温度范围。 二、实验原理 酶促反应中，反应速度达到最大值时的温度和pH值称为某种酶作用 时的最适温度和pH值。温度对酶反应的影响是双重的：一方面随着温度的增加，反应速度也增加，直至最大反应速度为止；另一方面随着温度 的不断升高，而使酶逐步变性从而使反应速度降低，其变化趋势呈钟形 曲线变化。 不同菌株产生的酶在耐热性、酶促反应的最适温度、PH、对淀粉的水解程度，以及产物的性质等均有差异。α-淀粉酶属水解酶，作为生物催化剂可随机作用于直链淀粉分子内部的α-1,4糖苷键，迅速地将直链淀 粉分子切割为短链的糊精或寡糖，使淀粉的粘度迅速下降，淀粉与碘的

反应逐渐消失，这种作用称为液化作用，生产上又称α-淀粉酶为液化淀粉酶。α-淀粉酶不能水解淀粉支链的α-1,6糖苷键，因此最终水解产物是麦芽糖、葡萄糖和α-1,6键的寡糖。 本实验通过淀粉遇碘显蓝色，淀粉含量越高，颜色越深。用分管光度计检测显色效应大小，通过分管光度值计算酶活力 注意：实验中为了消除非酶促反应引起的淀粉水解带来的误差，每组实验都做了相应的对照实验，在最终计算酶的活性时以测量组的值减去对照组的值加以校正。 在实验中要严格控制温度及时间，以减小误差。并且在酶的作用过程中，三支测定管及空白管不要混淆。 三、材料、试剂与仪器 实验材料：α-淀粉酶 仪器：分光光度计、电热恒温水浴锅、小台秤、研钵、玻璃仪器若干 试剂： ① 0.4M NaOH/0.4M CH3COOH及0.1M HCl： ② 0.005%工作碘液：0.5克I2和5.0克KI水中研磨，定容至1000mL； ③1%糊化淀粉溶液：称取1.0克淀粉，加入25mL0.4M NaOH，60℃ COOH，定容至100mL； 5min，冷却后加25mL0.4M CH 3 ④稀释α-淀粉酶溶液：待测样品 四、实验步骤 ① 10mL1%淀粉溶液加入试管中，室温25/45/65℃保温10min

蔗糖酶测定方法

蔗糖酶测定（比色法）： 蔗糖酶是一种可以把土壤中高分子量蔗糖分子分解成能够被植物和土壤微生物吸收利用的葡萄糖和果糖的水解酶，为土壤生物体提供充分能源，其活性反映了土壤有机碳累积与分解转化的规律。 蔗糖酶能酶促蔗糖水解生成葡萄糖和果糖。因此，蔗糖酶的活性可以根据水解生成物与某些物质（3，5-二硝基水杨酸或磷酸铜）生成有色化合物含量来确定。现介绍3，5-二硝基水杨酸比色法，该方法以蔗糖为基质，根据葡萄糖与3，5-二硝基水杨酸反应生成黄色产物，来确定土壤蔗糖酶活性。 试剂 1）3，5-二硝基水杨酸溶液：称取0.5克二硝基水杨酸，溶于20mL 2mol/L氢氧化钠和50毫升水中，再加入30克酒石酸钾钠，用水稀释至100mL（不超过一周）。 2）pH值为5.5的磷酸缓冲液：1/15mol/L磷酸氢二钠（11.867g Na2HPO4·2H2O溶于1升蒸馏水中）0.5毫升加1/15mol/L 磷酸二氢钾（9.078gKH2PO4溶于1升蒸馏水中）9.5毫升配成。 3）8％蔗糖溶液。 4）甲苯 5) 标准葡萄糖溶液：将葡萄糖先在50-58℃条件下，真空干燥至恒重。然后取500mg 溶于100ml蒸馏水中，即成葡萄糖标准溶液（5mg/ml）。再将此液稀释10倍制成葡萄糖工作液（0.5mg/ml）。 操作步骤 称取5g土，置于50mL三角瓶中，加入5滴甲苯，15min后注入15mL 8％蔗糖溶液和5mL pH 5.5磷酸缓冲液，摇匀混合物后，放入恒温箱，在37℃下培养24h。 到时取出，迅速过滤。从中吸取滤液1mL，注入50mL容量瓶中，加3mL3，5－二硝基水杨酸，并在沸腾的水浴锅中加热5min，随即将容量瓶移至自来水流下冷却3min。溶液因生成3－氨基-5-硝基水杨酸而呈橙黄色，最后用蒸馏水稀释至50mL，并在分光光度计上于波长508nm处比色。 每一土壤需做无基质对照，整个试验需做无土壤对照。 在分析样品的同时，取0、1、2、3、4、5、6、7mL葡萄糖工作液，分别注入50mL容量瓶中，并按与测定蔗糖酶活性同样的方法进行显色，比色后以吸光度为纵坐标，葡萄糖浓度为横坐标绘制标准曲线。

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蔗糖水解反应速率常数的测定 一、实验目的 1、根据物质的光学性质研究蔗糖水解反应，测定其反应速率常数。 2、了解旋光仪器仪的基本原理, 掌握其使用方法。 二、实验原理 蔗糖在水中转化成葡萄糖与果糖，其反应为： C 12 H 22 O 11 H 2 O C 6 H 12 O 6 C 6 H 12 O 6 它属于二级反应，在纯水中此反应的速率极慢，通常需要在H+ 离子催化作用下进行。由于反应时水大量存在，尽管有部分水分子参与反应，仍可近似地认为整个反应过程中水的浓度是恒定的，而且 H+是催化剂 , 其浓度也保持不变。因此在一定浓度下，反应速度只与蔗糖的浓度有关，蔗糖转化反应可看作为一级反应。 一级反应的速率方程可由下式表示： dC dt kC 式中： c 为蔗糖溶液浓度， k 为蔗糖在该条件下的水解反应速率常数。 令蔗糖开始水解反应时浓度为c0，水解到某时刻时的蔗糖浓度为ct ，对上式进行积分得：ln C0 C t kt 该反应的半衰期与 k 的关系为： t1 2ln 2 k 蔗糖及其转化产物，都具有旋光性，而且它们的旋光能力不同，故可以利用 体系在反应进程中旋光度的变化来度量反应进程。 测量物质旋光度所用的仪器称为旋光仪。溶液的旋光度与溶液中所含旋光物质的旋光能力，溶剂性质，溶液浓度，样品管长度及温度等均有关系。当温度、波长、溶剂一定时，旋光度的数值为： L C t D 或KC

L为液层厚度，即盛装溶液的旋光管的长度；C为旋光物质的体积 摩尔浓度；t D 为比旋光度； t 为温度； D 为所用光源的波长。 比例常数 'K 与物质旋光能力，溶剂性质，样品管长度，光源的波长，溶液温度 等有关。可见，旋光度与物质的浓度有关，且溶液的旋光度为各组分旋光度之和。 作为反应物的蔗糖是右旋性物质，其比旋光度 20 66.650；生成物中葡蔗 D 萄糖也是右旋性物质，其比旋光度 20 52.50；但果糖是左旋性物质，其比旋葡 D 光度 20 -91.90。由于生成物中果糖的左旋性比葡萄糖右旋性大，所以生成果 D 物呈左旋性质。因此随着反应的进行，体系的右旋角不断减小，反应至某一瞬间，体系的旋光度可恰好等于零，而后就变成左旋，直至蔗糖完全转化，这时左旋角达到最大值。 反应过程浓度变化转变为旋光度变化： 当 t=0 时，溶液中只有蔗糖，溶液的旋光度值为： 0k 蔗糖 C 0 （ 1） 当 t= ∞时，蔗糖完全水解，溶液中只有葡萄糖和果糖。旋光度为： k葡 k果 C0（2） 当 t=t 时，溶液中有蔗糖、果糖和葡萄糖，此时旋光度为： t k蔗糖 C t k葡k果C0 C t(3 ） 经数学处理得： C0 0 k 蔗糖k葡k果（4） C t t k 蔗糖k葡k果（5）

双波长法测淀粉含量

附录4 直链淀粉和支链淀粉的测定（双波长法） 1、目的 淀粉一般都是直链淀粉和支链淀粉的混合物。直链淀粉和支链淀粉含量和比例因植物种类而不同，决定着谷物种子的出粉率和食物品质，并影响着谷物的贮藏加工。通过本实验学习掌握双波长测定谷物中直链淀粉和支链淀粉的含量。 2、原理 根据双波长比色原理，如果溶液中某溶质在两个波长下均有吸收，则两个波长的吸收差值与溶质浓度成正比。 直链淀粉与碘作用产生纯蓝色，支链淀粉与碘作用产生紫红色。如果用两种淀粉的标准溶液与碘反应，然后在同一个坐标系里进行扫描或做吸收曲线，即可达到实验目的。 3、仪器、试剂和材料 1、仪器 （1）电子分析天平 （2）分光光度计1台 （3）ph计 （4）容量瓶100mlx2，50mlx16 （5）吸管0.5mlx1，2mlx1，5mlx1 2、试剂 （1）乙醚 （2）无水乙醇 （3）0.5mol/LKOH溶液 （4）0.1mol/LHCL溶液 （5）碘试剂：称取碘化钾2.0g，溶于少量蒸馏水，在加碘0.2g，待溶解后用蒸馏水稀释定容至100ml。 （6）直链淀粉标准溶液：称取直链淀粉纯品0.1000g，放在100ml容量瓶中，加入0.5mol/LKOH10ml，在热水中待溶解后，取出加蒸馏水定容至100ml，即为1mg/ml直链淀粉标准溶液。 (7)支链淀粉标准溶液：用0.1000 g 支链淀粉按（6）法制备成1mg支链淀粉标准溶液。 3、材料 小麦粉 4、操作步骤 1、选择支链、直链淀粉测定的波长参比波长。 直链淀粉：取1mg/ml直链淀粉标准溶液1ml，放入50ml容量瓶中，加蒸

馏水30ml，以0.1mol/LHCL溶液调至PH3.5左右，加入碘试剂0.5ml，并以蒸馏水定容。静置20min，以蒸馏水为空白，用光束分光光度计进行可见光全波段扫描或用普通比色法绘出直链淀粉吸收曲线。 支链淀粉：取1mg/ml支链淀粉标准溶液1ml，放入50ml容量瓶中，加蒸馏水30ml，以0.1mol/LHCL溶液调至PH3.5左右，加入碘试剂0.5ml，并以蒸馏水定容。静置20min，以蒸馏水为空白，用光束分光光度计进行可见光全波段扫描或用普通比色法绘出支链淀粉吸收曲线。 2、制作双波长直链淀粉标准曲线：吸取1mg/ml直链淀粉标准溶液0. 3、0.5、0.7、0.9、1.1、1.3ml分别放入6只不同的50ml容量瓶中，加蒸馏水30ml，以0.1mol/LHCL溶液调至PH3.5左右，加入碘试剂0.5ml，并以蒸馏水定容。静置20min，以蒸馏水为空白，比色，吸光差值为纵坐标，直链淀粉含量（mg）为横坐标制备双波长直链淀粉标准曲线。 3、制作双波长支链淀粉标准曲线：吸取1mg/ml支链淀粉标准溶液2.0、2.5、3.0、3.5、4.0、4.5ml分别放入6只不同的50ml容量瓶中，加蒸馏水30ml，以0.1mol/LHCL溶液调至PH3.5左右，加入碘试剂0.5ml，并以蒸馏水定容。静置20min，以蒸馏水为空白，比色，吸光差值为纵坐标，支链淀粉含量（mg）为横坐标制备双波长支链淀粉标准曲线。 4、样品中直链淀粉、支链淀粉及总淀粉的测定：样品粉碎过60目筛，用乙醚脱脂，称取脱脂样品0.1g左右（精确到1ml），置于50ml容量瓶中。加0.5mol/LKOH溶液10ml，在沸水浴中加热10min，取出，以蒸馏水定容至50ml，静置。吸取样品液2.5ml两份（即样品液和空白液），均加蒸馏水30ml，以0.1mol/LHCL溶液调至PH3.5左右，样品中加入碘试剂0.5ml，空白液不加碘试剂，然后定容至50ml。静置20min，以样品空白液为对照比色。 五、结果处理 直链淀粉（%）=（X1*50*100）/（2.5*m*1000） 支链淀粉（%）=（X2*50*100）/（2.5*m*1000） 式中， X1----查双波长直链淀粉标准曲线得样品中直链淀粉含量（mg） X2----查双波长支链淀粉标准曲线得样品中支链淀粉含量（mg） m-----样品质量（g） 总淀粉（%）=直链淀粉（%）+支链淀粉（%）

实验报告-不同因素对酶的影响

实验报告-不同因素对酶的影响

成绩： 酶的基本性质实验一一底物专一性剂、激活剂和抑制、最适温度 实验名称: 实验类型： 分离鉴定实验 同组学生姓名： 一、实验目的和要求（必填） 二、实验内容和原理（必填） 三、主要仪器设备（必填） 四、操作方法和实验步骤 五、实验数据记录和处理 六、实验结果与分析（必填） 七、讨论、心得 I .酶的基本性质——底物专一性 一、实验目的和要求 1. 了解酶的专一性。 2.掌握验证酶的专一性的基本原理及方法。 3.学会排除干扰因素，设计 酶学实验。二、实验基本原理 酶是一种具有催化功能的蛋白质。酶蛋白结构决定了酶的功能——酶的高效性，酶催化的 反应（酶促反应）要比相应的没有催化剂的反应快 103-1017倍。 酶催化作用的一个重要特 点是具有高度的底物专一性，即一种酶只能对某一种底物或一类底物起催化作用，对其他底物 无催化反应。根据各种酶对底物的选择程度不同，它们的专一性可以分为下列几种： 1. 相对专一性 一种酶能够催化一类具有相同化学键或基团的物质进行某种类型的反应。 2. 绝对专一性： 有些酶对底物的要求非常严格只作用于一种底物，而不作用于任何其他 物质。如脲酶只能催化尿素进行水解而生成二氧化碳和氨。如麦芽糖酶只作用于麦芽糖而不作 用其它双糖，淀粉酶只作用于淀粉，而不作用于纤维素。 3.立体异构专一性 有些酶只有 作用于底物的立体异构物中的一种，而对另一种则全无作用。如酵母中的糖酶类只作用于 D-型 糖而不能作用于 L-型的糖。 本实验以唾液淀粉酶、蔗糖酶对淀粉、蔗糖水解反应的催化作 用来观察酶的专一性。采用 Benedict 试剂检测反应产物。 Ben edict 试剂是碱性硫酸铜溶液，具有一定的氧化能力，能与还原性糖的半缩醛羟基 发生氧化还原反应，生成砖红色氧化亚铜沉淀。 Na 2CO+ 2H 2O 2NaOH + fCO CuSO+ 2NaOH Cu （OH ） ■ 2 + Na z SO 还原糖（一CHO or — C=O ）+ 2Cu （OH ） 2 CU 2O （砖红色或黄色）+ 2H 2O +糖的氧化产物 在分子结构上，淀粉几乎没有，而蔗糖、棉子糖全无半俪基，它们均无还原性，因此它 们与Ben edict 试剂无呈色反应。 淀粉被淀粉酶水解，产物为葡萄糖；蔗糖和棉子糖被蔗糖 酶水解，其产物为果糖和葡萄糖，它们都为具有自由半缩醛羟基的还原糖，与 Ben edict 试剂共 热，即产生红棕色 Cu2 O 沉淀。本实验以此颜色反应观察淀粉酶、蔗糖酶对淀粉和蔗糖的水解作 用。三、实验材料与试剂 1、实验材料⑴ 蔗糖酶（样品W ）:⑵新鲜唾液（含唾液淀粉酶）；2、实验试剂⑴ 蔗糖酶液 沖门七穿实验报告 课 程名称：生物化学实验（甲） 专业： 姓名： 学号： 日期： 地点： 指导老师：

土壤蔗糖酶活性测定方法

土壤蔗糖酶活性测定 1.原理 采用3,5-二硝基水杨酸比色法。该方法以蔗糖为基质，基质在土壤蔗糖酶作用下生成葡萄糖，葡萄糖和3,5-二硝基水杨酸反应生成橙黄色的3-氨基-5-硝基水杨酸，并在508nm 波 长下有最大吸光值。 2.测定方法 ①称取壤土0.15g、砂土0.3g、粘土0.1g风干土于10mL离心管中，加入0.06 mL甲苯和 1mL ph5.5磷酸缓冲液，再加3mL 8%蔗糖溶液，摇匀后加盖，放进36~37C的培养箱中进行培养24 个小时； ②培养完成后取出，摇匀，并于4000r/min离心5min ； ③取上层清液0.2ml于20ml玻璃管中，并加入0.5ml3,5-二硝基水杨酸，再立即将玻璃 管沸水浴中加热5min，加热完毕后在自来水流下冷却3min ; ④将显色液体用蒸馏水稀释到5ml，在508nm波长下比色，记录吸光值。 3.蔗糖酶标准曲线的测定方法 （1 ）葡萄糖标准溶液的配制 a. 饱和苯甲酸溶液的配制 在洁净的烧杯中加入适量蒸馏水，慢慢加入少量苯甲酸同时用玻璃棒搅拌，直至苯甲酸溶解的同时出现析出的苯甲酸晶体为止。 b. 标准葡萄糖溶液的配制 称取500mg葡萄糖溶解于适量苯甲酸饱和溶液中，并取100ml容量瓶用苯甲酸饱和溶液定 容（5mg/ml）。 （2）. 操作步骤 a.取11 支洁净20ml 玻璃管编号0—10。 b.按下表加液 编号：0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 葡萄糖母液（ml）0 0.005 0.01 0.015 0.02 0.025 0.03 0.04 0.05 0.06 0.07 饱和苯甲酸（ml）0.2 0.195 0.19 0.185 0.18 0.175 0.17 0.16 0.15 0.14 0.13 葡萄糖浓度（mg/ml）0 0.005 0.01 0.015 0.02 0.025 0.03 0.04 0.05 0.06 0.07 吸光值（A508nm）0 0.05 0.117 0.227 0.31 0.392 0.49 0.666 0.839 1.006 1.176 c.在玻璃管中各加入0.5ml3,5- 二硝基水杨酸溶液，并立刻放入沸水浴中加热5min. 加热 后，立刻将玻璃管在流动自来水下冷却3min. 冷却完毕后，用蒸馏水定容至5ml. d.将显色液在508nm波长下比色。 4.计算 蔗糖酶活性以24h后1g 土壤中含葡萄糖的mg数表示。 葡萄糖（mg）=a x 100 a—从标准曲线查得的葡萄糖mg数 100—换算系数 小贴士：夏季养生常识 立夏已过，炎热的夏季来了。夏季是充满生气的季节，但同时也要特别注意养生保健。我们 该如何保持在炎热的夏季保持身体健康，从而享受这个夏季呢？让我来告诉大家几个夏季养生保健小常识吧。 1.夏季养生保健之多喝温水 每天要喝七八杯白开水，身体要随时保持水分和补充水分，水在人体内起着至关重要的作明，维