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大豆磷脂油丙酮不溶物含量测定

大豆磷脂油丙酮不溶物含量测定
大豆磷脂油丙酮不溶物含量测定

大豆磷脂油丙酮不溶物含量测定

参考标准:海大统一推荐法

一、适用范围

二、实验原理

溶于乙醚,不溶于丙酮的物质为丙酮不溶物(AI),其主要由磷脂酰胆碱(PC)俗称卵磷脂、磷脂酰肌醇(PI)、磷脂酰乙醇(PE)、糖脂、碳水化合物等物质组成,因此,丙酮不溶物为混合物的总称。

三、实验用品

1.实验用试剂

2.实验用设备

三、实验内容

重复性:每个试样取两个平行样进行测定,以其算术平均值为结果,平行误差应在1%以内,否则应重做。

误差来源及分析

大豆磷脂微生物限度检查法验证(DOC)

验证文件 大豆磷脂微生物限度检测方法验证 起草人 起草日期 审核人 审核日期 批准人 批准日期 文件编号

目录 1适用范围 ....................................................................................................................... - 1 - 2目的 ............................................................................................................................... - 1 - 3概述 ............................................................................................................................... - 1 - 4验证所需要的仪器设备及文件 ................................................................................... - 1 - 5可接受的限度范围标准 ............................................................................................... - 2 - 6测试方法 ....................................................................................................................... - 5 - 7异常情况处理 ............................................................................................................. - 15 - 8测试结果 ..................................................................................................................... - 15 - 9结论 ............................................................................................................................. - 15 - 10再验证周期 ............................................................................................................... - 16 - 11附表 ........................................................................................................................... - 16 -

丙酮酸的测定方法

丙酮酸的测定方法内部编号:(YUUT-TBBY-MMUT-URRUY-UOOY-DBUYI-0128)

实验七丙酮酸含量的测定 一、实验目的 掌握植物组织中丙酮酸含量测定的原理和方法。 二、实验原理 植物样品中的组织液,用三氯乙酸去蛋白质后,其中所含的丙酮酸可与2,4—二硝基苯肼作用,生成丙酮酸—2,4—二硝基苯腙,后者在碱性溶液中呈樱红色,其颜色可用分光光度计测量,与已知丙酮酸标准曲线进行比较,即可求得样品中丙酮酸的含量。 三、实验器材与试剂 1、.实验器材 分光光度计;研钵;具塞刻度试管:20mL×8;容量瓶:100mL×2;移液管: 1mL×15mL×4; 量筒:10mL×1;离心机;天平; 大蒜、大葱或洋葱 2、试剂 (1)8%三氯乙酸(当日配制置冰箱中备用)

(2)1.5mol/L氢氧化钠 (3)0.1%2,4—二硝基苯肼:称取2.4—二硝基苯肼100mL,溶于2mol/LHCl中配成100mL溶液,盛入棕色试剂瓶,保存于冰箱内。 (4)丙酮酸钠 四、实验操作步骤 1.丙酮酸标准曲线的制作: 称取丙酮酸钠7.5mg于烧杯中,用8%三氯乙酸溶解,转入100mL容量瓶中,并用8%三氯乙酸定容,此液为60μg/mL的丙酮酸原液。 取6支试管,按下表数据配制不同浓度的丙酮酸标准液: 1.5mol/L的氢氧化钠溶液,摇匀显色,在520nm波长下比色。做标准曲线。 2.植物样品组织液的提取: 称取植物样品(大蒜、大葱或洋葱)5g,于研钵中加入少许石英沙及少量8%三氯乙酸,仔细研成匀浆,再用8%三氯乙酸洗入100mL容量瓶中(沙留在研钵内),

定容至刻度。静置30min,取10mL匀浆液离心(4000r/min)10min,取上清液备用。 3.组织液中丙酮酸的测定1.5mol/L氢氧化钠溶液,摇匀显色。在520nm波长下比色,记录吸光度,在标准曲线上查得丙酮酸的含量。 五、结果处理 式中:A—标准曲线中查得的丙酮酸克数。 六、思考题:测定丙酮酸含量的基本原理是什么?

中国药典2010--大豆磷脂

大豆磷脂 Soya Lecithin (中国药典2010二部全书p1183~84)) 本品系从大豆中提取精制而得的磷脂混合物。以无水物计算,含磷(P)应不得少于2.7%,含氮(N)应为1.5%~2.0%;含磷脂酰胆碱应不得少于45.0%,含磷脂酰乙醇胺应不得过30.0%,含磷脂酰肌醇应不得过5.0%。 【性状】本品为黄色至棕色的半固体或块状物。 本品在乙醚和乙醇中易溶,在丙酮中不溶。 酸值应不大于30 (附录VII H) 碘值应不小于75 (附录VII H) 过氧化值应不大于5 (附录VII H) 【鉴别】(1)取本品约10mg,加乙醇2ml溶解,加5%氯化镉乙醇溶液1~2滴,即产生白色沉淀。 (2)取本品0.4g,加乙醇2ml使溶解,加硝酸铋钾溶液(取硝酸铋8g,加硝酸20ml溶解,加硝酸20ml使溶解;另取碘化钾27.2g,加水 50ml使其溶解;合并上述两种溶液,加水稀释成100ml,摇匀)1~2滴,即产生砖红色沉淀。 【检查】溶液的颜色取本品适量,加乙醇制成每1ml中含6mg的溶液。照紫外-可见光分光度法(附录IV A),在205nm的波长处测定吸光度,不得过0.8。 丙酮中不溶物取本品约1g,精密称定,加丙酮15ml,充分搅拌后,用经105℃干燥1h并称重的4号垂熔玻璃坩埚滤过,残渣用丙酮洗涤,至洗出的丙酮几乎无色,残留物在105℃干燥至恒重,不溶物不得少于 90.0%。

己烷中不溶物取本品约10g,精密称定,加正己烷100ml,振摇使溶解,用经105℃干燥1h并称重的4号垂熔玻璃坩埚滤过,容器再用25ml正己烷洗涤两次,洗液滤过后,4号垂熔玻璃坩埚在105℃干燥1h后,称重,不溶物不得过0.3%。 水分取本品,照水分测定法(附录VIII M第一法A)测定,含水分不得过1.5%。 重金属取本品1.0g,依法检查(附录VIII H第二法),含重金属不得过百万分之二十。 砷盐取本品1.0g,置100ml锥形瓶中,加硫酸5ml,加热至样品炭化,滴加浓过氧化氢溶液,至反应停止后继续加热,滴加浓过氧化氢溶液至溶液无色,冷却后加水10ml,蒸发至浓烟消失,依法检查(附录VIII J 第二法),应符合规定(0.0002%)。 有关物质含溶血磷脂酰乙醇胺不得过0.5%,含溶血磷脂酰胆碱不得过3.5%。

大豆磷脂质量标准

大豆磷脂质量标准 一、浓缩大豆磷脂(??????? ????年) 由油脂精炼的副产品 ?水化油脚,经真空干燥脱水后,添加适量植物油制成,其产品有脱色或不脱色两类。 、 产品质量指标 、产品用途:乳化剂,消泡剂等 二、羟基化磷脂(??? ????年) 由浓缩大豆磷脂或其它植物磷脂,经过氧化氢和乳酸处理后,制得的碘值低于原料 ??的羟基化磷脂产品。 产品质量指标

三、中华人民共和国行业(国内贸易部 发布 )磷脂标准 ???? ???????? ?、磷 脂:磷脂系指黄色或棕色的难溶于丙酮的含磷类脂物。根据产品制造工艺的产品性状分为:浓缩磷脂、粉状磷脂和卵磷脂三类。 ?? 浓缩磷脂:水化磷脂经真空脱水、浓缩等工序而制成的塑状或粘稠状产品。 ?? 粉状磷脂:浓缩磷脂经脱脂、分离、干燥等工序而制成的粉粒状产品。 ?? 卵 磷 脂:浓缩磷脂或粉状磷脂经乙醇萃取、分离、干燥等工序而制得以磷脂酰胆碱为主的胶质产品。 、 技术要求 ?? 原料要求所用原料必须是新鲜的水化磷脂或合格的浓缩磷脂,原料中不得混有非食用植物油。 ?? 感官指标感官指标 ?? 质量指标 ???? 浓缩磷脂质量指标

???? 粉状磷脂质量指标 ?????卵磷脂质量指标 ?? 食用浓缩磷脂卫生指标 四、中华人民共和国国家标准改 性 大 豆 磷 脂 ?? ????????

?、改性大豆磷脂产品类型以天然大豆磷脂为原料 经过适度乙酰化、羟基化及脱脂后生产的粉粒状产品,用作食品乳化剂、脱模剂、品质改良剂等。 、 技术要求 ?? 物理性状产品为黄色或黄棕色粉状 极易溶于动植物油 能分散于水 部分溶于乙醇。 ??? 产品理化指标应符合要求: 五、美国中央大豆公司( ?????● ?????) 、羟基化大豆磷脂( ?????●????) 应用范围:糕点(蛋糕)用量以面粉总量的 ?????计 改善纹理和组织 颜色 提高油溶性色素对水的溶解度 香精调味料 使香精对水的分

磷脂的提取与分析检测技术_王道营

磷脂的提取与分析检测技术 王道营 徐幸莲 徐为民 (南京农业大学食品科技学院)  【摘 要】磷脂的提取方法主要是萃取法;总含量的测定方法有称重法、比色法、紫外分光光度法等;磷脂不同组分的分离和测定方法有T LC、HPLC和31P-NM R等;利用RP-HPLC和GC可以对磷脂的脂肪酸的组成分析测定;使用HPLC、GC等和M S的联合使用可以对磷脂分子量及分子结构进行分析。本文分别对上述5个方面进行综述,并对不同方法的特点进行了初步探讨。  【关键词】磷脂;组分;脂肪酸组成;分子结构;分析检测 中图分类号:TS224.4 文献标识码:A 文章编号:1009-1807(2005)07-0051-04 磷脂是一类存在于生物界的含磷脂肪物质。在植物的种子、动物血液和脏器、蛋黄及细菌中与油脂并存,是构成细胞基本结构的必需物质,对维持细胞的通透性和细胞内氧的传递起重要作用。磷脂可分为3大类:糖基甘油二酯、神经鞘磷脂(SM)和磷酸甘油酯(PL)。磷酸甘油酯又可分为酯磷脂和醚磷脂,醚磷脂包括胆碱缩醛磷脂和乙醇胺缩醛磷脂,通常所说的磷脂就是指酯磷脂。酯磷脂主要包括磷脂酰胆碱(PC)、磷脂酰乙醇胺(PE)、磷脂酰肌醇(PI)、磷脂酰丝氨酸(PS)、磷脂酰甘油(PG)、磷脂酸(PA)、二磷脂酰甘油(DPG)以及N-乙酰基-磷脂酰乙醇胺(NAPE)等。一种磷脂就是多种磷脂分子组成的混合物,这造成了磷脂分离和定量上的困难。本文就磷脂的提取和分析检测技术作一综述。 1 磷脂提取 常用的提取方法可归纳为两大类:一是物理萃取法,即用超临界流体技术(SFE-CO 2 ),这是一种新型的分离技术,其操作简单,萃取纯度较高;二是化学萃取法,即用氯仿、甲醇、丙酮、乙醚、乙醇等有机溶剂反复萃取,其操作步骤较复杂。原料不同,所采用的提取方法也不同。对于一些粗磷脂产品可以直接取样进行分析;对于大豆油、菜籽油等植物油类样品可采用丙酮沉淀法获取磷脂;对于大豆、动物组织等固体类样品,要先提取样品中的粗脂肪,然后对其进行分离获取磷脂。如章建浩等人对金华火腿的肌间脂质成分的分析,取股二头肌根据Folc h.J等人方法提取脂质,然后用氨丙基硅柱分离,用2%乙酸-乙醚(W/ W)溶液洗出游离脂肪酸,用甲醇洗出磷脂。由于磷脂的结构组成比较复杂,采用一种方法可能对某种磷脂的提取效果好但对另一种的提取效果却很差,因此在分析检测之前必须根据分析目的、分析条件等选择合适的提取方法。 2 磷脂总含量的测定方法 2.1 称量法 称量法有两种:一种是将磷脂混合物用浓硫酸和浓硝酸混合物分解,使磷变成正磷酸根离子,再将后者转化成为磷钼酸铵沉淀称量;另一种方法是利用油脂溶于丙酮,而磷脂不溶于丙酮的性质,用丙酮萃取样品,除去油脂,烘干残留物,称量即得磷脂含量,这种方法主要适用于植物油脂中磷脂总量的测定,其优点是操作简单,但其测定值并非磷脂真实值。 2.2 比色法 比色法有钼蓝比色法、硫氰亚铁胺比色法和酶法比色法之分,三者在磷脂检测上均有应用。钼蓝比色法是将样品与金属氧化物灰化,试样中的磷变为磷酸盐,加酸溶解而得磷酸根,在加入钼酸盐后生成磷钼酸盐,磷钼酸盐被还原而产生钼蓝,其颜色深浅与磷脂含量成正比关系,由此可进行比色定量。该法容易受样品中无机磷的影响,而使测定值偏高。高氯酸-浓硫酸-钼锑抗比色法也有报道,它是在钼蓝比色法的基础上发展而来的,由于用强酸消化使分析时间大大缩短,同时用2,6-二硝基酚作酸碱指示

大豆磷脂中溶血磷脂酰胆碱含量测定方法研究

大豆磷脂中溶血磷脂酰胆碱含量测定方法研究 摘要:目的:采用HPLC法测定大豆磷脂中有关物质溶血性磷脂酰胆碱的含量。方法:采用C18色谱柱,以甲醇-乙腈-水(50∶40∶10)为流动相,紫外检测器,进样量20μL。结果:大豆磷脂中主成分磷脂酰胆碱和溶血性磷脂酰胆碱能很好地分离检出,LPC线性浓度范围为2.3625μg/mL~189.0μg/mL;平均回收率98.05%,RDS为0.86%(n=6),溶血性磷脂酰胆碱的最低检测限为1.0ng,所含其它物质对检测无干扰。结论:该法准确、灵敏、快捷,可作为大豆磷脂中有关物质溶血性磷脂酰胆碱的测定方法。 关键词:大豆磷脂;溶血性磷脂酰胆碱;HPLC 大豆磷脂主要含有磷脂酰胆碱(PC)、磷脂酰乙醇胺(PE)、磷脂酰丝氨酸(PS)、磷脂酰肌醇(PI)、磷脂酸(PA)、溶血磷脂酰胆碱(LPC)、溶血磷脂酰丝氨酸(LPS)、溶血磷脂酰乙醇胺(LPE)、胞苷二磷酸(CDP)等。在大豆磷脂原料的制备、纯化及其注射液的制备、贮藏过程中,均会有部分PC分解产生LPC,LPC具有溶血或溶解细胞膜作用,故对大豆磷酯中LPC含量需进行严格控制。目前,对大豆磷脂中杂质LPC含量测定的研究不太多,大多采用TLC和HPLC法。TLC法具有仪器设备简单价廉等优点,但操作烦琐。HPLC法虽具有快速、易于自动化等特点,但所用检测器多采用蒸发光散射检测器和质谱检测器,仪器价格昂贵。针对目前企业单位一般的液相配置的情况,为了快速、简便地测定大豆磷脂中的溶血磷脂酰胆碱,我们选择紫外检测器。 1 材料与方法 1.1 仪器和试药 HP1100型高效液相色谱仪;PHS-2C型精密酸度计(上海精密科学仪器有限公司);Sartorius211型电子天平;UV-2550型紫外分光光度计(日本岛津公司)。 溶血磷脂酰胆碱(LPC)、磷脂酰胆碱(PC)对照品,Sigma公司;大豆磷脂(含磷脂酰胆碱量>90%),实验室自制;甲醇(色谱试剂);乙腈(色谱试剂)。 1.2 色谱条件 HypersilC18色谱柱:150mn×4.6mn,流动相:甲醇-乙腈-水(50∶40∶10),柱温:室温,流速:1.0mL/min,进样量:20μL;紫外检测器;进样量20μL。 1.3 对照品溶液和样品溶液的配制 取样品约25mg,精密称定,置50mL量瓶中,加甲醇溶解并稀释至刻度,摇匀,即得样品试液。取溶血磷脂酰胆碱对照品约10mg,精密称定,置100mL

国内外大豆磷脂质量标准

国内外大豆磷脂质量标准 一、浓缩大豆磷脂(FAO/WHO 1980年)由油脂精炼的副产品——水化油脚,经真空干燥脱水后,添加适量植物油制成,其产品有脱色或不脱色两类。 1、产品质量指标外观形态:浅黄至棕色透明或半透明的粘稠状液态丙酮不 溶物% 60苯不溶物% 0.3水分及挥发物% 2.0酸值KOHmg/孚36过氧化值未漂白w 10 砷(以As计)<3mg/kg重金属(以Pb计)<40mg/kg 2、产品用途:乳化剂,消泡剂等二、羟基化磷脂(FCC 1981年)由浓缩大豆磷脂或其它植物磷脂,经过氧化氢和乳酸处理后,制得的碘值低于原料10% 的羟基化磷脂产品。 产品质量指标外观形态:浅黄至棕色透明或半透明的粘稠状液态丙酮不溶 物%>50己烷不溶物%W 0.3水分及挥发物%W 1.5酸值KOHmg/^70过氧化值<100 碘值l2g/100g85-95砷(以As计)w3mg/kg铅w 10mg/kg重金属(以Pb 计)w 40mg/kg 产品用途: 三、中华人民共和国行业(国内贸易部发布)磷脂标准SB/T10206-941磷 脂产品类型磷脂:磷脂系指黄色或棕色的难溶于丙酮的含磷类脂物。根据产品制造工艺的产品性状分为:浓缩磷脂、粉状磷脂和卵磷脂三类。 1.1 浓缩磷脂:水化磷脂经真空脱水、浓缩等工序而制成的塑状或粘稠状产品。 1.2粉状磷脂:浓缩磷脂经脱脂、分离、干燥等工序而制成的粉粒状产品。 1.3卵磷脂:浓缩磷脂或粉状磷脂经乙醇萃取、分离、干燥等工序而制得以磷脂酰胆碱为主的胶质产品。 2 、技术要求 2.1 原料要求所用原料必须是新鲜的水化磷脂或合格的浓缩磷脂,原料中不得混有非食用植物油。 2.2感官指标感官指标见表 1 表 1 产品名称感官指标外观气味浓缩磷脂色泽为棕黄色或棕色、呈塑状或粘稠状;质地均匀,无霉变具有

丙酮酸(pyruvic acid PA)含量测定试剂盒使用说明

丙酮酸(pyruvic acid PA)含量测定试剂盒使用说明 货号:BC0970 规格:50管/48样 产品内容: 提取液:液体50mL×1瓶,4℃保存; 试剂一:液体5mL×1瓶,4℃保存; 试剂二:液体25mL×1瓶,4℃保存。 产品说明: 丙酮酸通过乙酰CoA连接葡萄糖、脂肪酸和氨基酸三大代谢,起着重要的枢纽作用。丙酮酸与2,4-二硝基苯肼作用,生成丙酮酸-2,4-二硝基苯腙,在碱性溶液中呈樱红色。需自备的仪器和用品: 可见分光光度计、台式离心机、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵、冰、蒸馏水。操作步骤: 一、丙酮酸提取: 1、细菌或培养细胞:先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量(104个):提取液体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1mL提取液),超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次),静置30min,8000g,常温离心10min,取上清待测。 2、组织:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL提取液),进行冰浴匀浆,静置30min,8000g,常温离心10min,取上清待测。 3、血清(浆)样品:按照血清(浆)体积(mL):提取液体积(mL)为1:5~10的

比例(建议取0.1mL血清(浆)加入1mL提取液),进行冰浴匀浆,静置30min,8000g,常温离心10min,取上清待测。 二、测定步骤: 1、分光光度计预热30min以上,调节波长至520nm,蒸馏水调零。 2、取300μL样本+100μL试剂一于1.5mL EP管中,混匀,静置2min,加入500 μL试剂二,混匀,于520nm波长处测定管吸光值A。 三、丙酮酸含量计算: 1、标准条件下测定回归方程为y=0.0466x+0.0675;x为丙酮酸钠含量(μg/mL), y为吸光值。 2、按照血清(浆)体积计算 丙酮酸含量(μg/mL)=[(A-0.0675)÷0.0466×V1]÷(V3×V1÷V2)=214.6× (A-0.0675) 3、按照蛋白浓度计算 丙酮酸含量(μg/mg prot)=[(A-0.0675)÷0.0466×V1]÷(V1×Cpr)=21.46× (A-0.0675)÷Cpr 4、按照样品质量计算 丙酮酸含量(μg/g鲜重)=[(A-0.0675)÷0.0466×V1]÷(W×V1÷V2)=21.46×(A-0.0675)÷W 5、按照细菌或细胞密度计算 丙酮酸含量(μg/104cell)=[(A-0.0675)÷0.0466×V1]÷(500×V1÷V2)=0.043×(A-0.0675) V1:加入反应体系中样本体积,0.3mL;V2:加入提取液体积,1mL;V3:加入血清(浆)

大豆磷脂

大豆磷脂 Dadou Linzhi Soya Lecithin [8030-76-0] 大豆磷脂系从大豆中提取精制而得的磷脂混和物。以无水物计算,含磷量应不得少于2.7%;含氮量应为1.5%~2.0%;含磷脂酰胆碱应不得少于45.0%,含磷脂酰乙醇胺应不得过30.0%,含磷脂酰肌醇应不得过5.0%。 【性状】本品为黄色至棕色的半固体、块状体。 本品在乙醚和乙醇中易溶,在丙酮中不溶。 酸值应不大于30 (附录Ⅶ H)。 碘值应不小于75 (附录Ⅶ H)。 过氧化值应不大于5(附录Ⅶ H)。 【鉴别】 (1)取本品0.5%的乙醇溶液2ml,加5%氯化镉乙醇溶液1~2滴,即产生白色沉淀。 (2)取本品10%的乙醇溶液2ml,加硝酸铋钾溶液(取硝酸铋8g,加硝酸20ml 使溶解;另取碘化钾27.2g,加水50ml使溶解,合并上述两种溶液,加水稀释成100ml)1~2滴,即产生砖红色沉淀。 【检查】溶液的颜色取本品适量,加乙醇制成每1ml中含6mg的溶液。照紫外-可见分光光度法(附录ⅣA),在350nm的波长处测定吸光度,不得过0.8。 丙酮不溶物取本品1.0g,精密称定,加丙酮约15ml,搅拌使其溶解后,用G4垂熔玻璃坩埚滤过,残渣用丙酮洗涤,洗至丙酮几乎无色。残渣在105℃干燥至恒重,不溶物不得少于90.0%。 己烷不溶物取本品10.0g,精密称定,加正己烷100ml,振摇使样品溶解,用事先在105℃干燥一小时并称重的G4垂熔玻璃坩埚滤过,锥形瓶用25ml正己烷洗涤两次,洗液过滤后,G4垂熔玻璃坩埚于105℃干燥一小时并称重,不溶物不得过0.3%。 水分取本品适量,照水分测定法(附录Ⅷ M 第一法)测定,含水分不

丙酮酸含量测定

丙酮酸含量测定 一、目的:丙酮酸是一种重要的中间代谢物。通过本实验掌握测定植物组织中丙酮酸含量的原理和方法,增加对代谢的感性认识。 二、原理:植物样品组织液用三氯乙酸除去蛋白质后,其中所含的丙酮酸可与 2,4- 二硝基苯阱反应,生成丙酮酸一 2 , 4 一二硝基苯踪,后者在碱性溶液中呈樱红色,其颜色深度可用分光光度计测量。与同样处理的丙酮酸标准曲线进行比较,即可求得样品中丙酮酸的含量。 三、仪器、试剂、材料 1、1.5 mol/L NaOH 2、 8% 三氯乙酸 3、 0.1% 2,4 一二硝基苯肼 4 、丙酮酸标准液 5、.材料大蒜的鳞茎。 四、操作步骤 1、.植物材料提取液的制备 称取 0.5—1g大蒜于研钵内加适量 8% 三氯乙酸,仔细研成匀浆,再用 8% 三氯乙酸洗入 25ml 容量瓶,定容至刻度。塞紧瓶塞,振摇提取,静置 30min 。取约 10ml 匀浆液离心( 4000 r/min ) 10min ,上清液备用。 2、标准曲线制作(略) 3、.组织液中丙酮酸的测定 取 1. 0ml 上清液于一刻度试管中,加 2ml 8 %三氯乙酸,加 1.0ml 0.1%2.4 -二硝基苯肼液,摇匀,再加 5.0 ml 1.5mol/L, NaOH 溶液,摇匀显色,10min 后在 520 nm 波长下比色,记录吸光度,在标准曲线上查得测定管的丙酮酸含量。 五、结果处理

丙酮酸含量(mg/g鲜重)=A*V*稀释倍数/样品重(g)*1000

式中, A 为在标准曲线上查得的丙酮酸的微克数。 V为提取液体积。 六、注意事项 1. 所加试剂的顺序不可颠倒,先加丙酮酸标准液或待测液,再加 8% 三氯乙酸,最后加 1.5mol/ L NaOH 。 2 .应反应 10min 后再比色。

磷脂在食品中的应用

卵磷脂作为食用乳化剂广泛应用于食品加工行业,其主要的应用领域有以下几个 方面。 1.在乳浊液中的应用 卵磷脂分子中的亲水(极性的)和亲油(非极性的)基团能在两种非互溶的液体交接面共同作用,从而使它们相互混合,生产出油水均匀化的乳浊液。众所周知,亲水亲油平衡值(HLB)反映乳化剂对某一特定乳浊液的稳定能力。HLB 常为1~20(1表示亲油性最大,HLB值低的乳化剂最适于油包水(W/O)型乳浊液,HLB高的则是气种很高的水包油(O/W)型乳化剂。天然卵磷脂的HLB值一般在4左右,改性卵磷脂的HLB为4~12,脱脂粒状卵磷脂的HLB值还要高。因此,天然卵磷脂在制作类似人造黄油、巧克力等产品时,被用作W/O型乳化剂。例如,它用于人造黄油中,可使其中的脂肪具有某种特点,如生产医用人造黄油、高级人造黄油以及商业用人造黄油;改性卵磷脂包括乙酰化、水解化以及羟基化卵磷脂。与天然卵磷脂相比,改性卵磷脂具有较好的亲水能力,在水包油(O/W)型乳浊液(如奶、色拉调味汁、蛋黄酱、冰淇淋以及婴儿配方食品)中所起的效果最好。在色拉调味汁中,改性卵磷脂不仅能够阻止胶体脱水收缩和分离,改善产品储藏的稳定性,而且能够使产品具有特定的比重和松散度。 卵磷脂单独使用时,它的乳化效果受乳浊液本身粒度所限制。因此,在许多乳浊液中,卵磷脂要同其他稳定剂(最常用的是甘油二酸酯)一起使用但是采用机械方法(如高度剪切或超声波)降低粒度后的微粒乳浊液,卵磷脂单独使用就可起到较好的乳化效果,因为在一般情况下,机械能输入得越多,则乳化剂使用 的量就越少。 2.在糖果中的应用 卵磷脂大量地应用于糖果制品中,尤其是巧克力产品中使用的最多。卵磷脂具有再乳化性、防黏结、释放性和黏度调节能力,对糖果产品性能产生重要影响,可控制黏度、降低发黏及控制结晶。国外常将0.2%~0.3%卵磷脂用于巧克力生产,可以提高巧克力的柔脆性,降低黏性并阻止表面起霜;它还能够降低可可酱以及植物油表面的张力从而降低产品的粘度。在可可酱中,每加入0.1%的卵磷脂,其粘度可降低2%;在糖色、乳脂糖以及勿奇糖中,卵磷脂起乳化用、

大豆磷脂检验操作规程

大豆磷脂检验操作规程 1 目的:建立大豆磷脂检验操作规程。 2 适用范围:适用于大豆磷脂检验操作。 3 职责:检验人员对本规程的实施负责。 4 规程: 4.1编制依据:《中国药典》2010年版二部P1183。 4.2 质量指标:见《大豆磷脂质量标准》。 4.3 仪器与用具:电子天平、水浴锅、PH计、紫外分光光度计、干燥箱。 4.4 试药与试液:乙醚、乙醇、丙酮、氯化镉、硝酸铋钾溶液、碘化钾、过氧化氢、钼酸铵硫酸试液、亚硫酸钠试液、对苯二酚、硫酸。 4.5 操作方法

4.5.1.1 性状:本品为黄色至棕色的半固体或块状物。本品在乙醚和乙醇中易溶,在丙酮中不溶。 4.5.1.2 酸值:本品的酸值应不大于30。 4.5.1.3 碘值:本品的碘值应不小于75。 4.5.1.4过氧化值:本品的过氧化值应不大于5。 4.5.2 鉴别 4.5.2.1 化学反应:取本品约10mg,加乙醇溶液2ml 使溶解,加5%氯化镉乙醇溶液1-2滴,即产生白色沉淀。 4.5.2.2化学反应:取本品0.4g,加乙醇溶液2ml使溶解,加硝酸铋钾溶液(取硝酸铋8g,加硝酸20ml使溶解;另取碘化钾27.2g,加水50ml使溶解,合并上述两种溶液,加水稀释成100ml)1-2滴,即产生砖红色沉淀。

4.5.3.1 溶液的颜色:取本品,加乙醇制成每1ml中含6mg的溶液,照《紫外分光光度法检验操作规程》测定,在350nm的波长处测定吸收度,不得过0.8。 4.5.3.2 丙酮不溶物:取本品约1g,精密称定,加丙酮约15ml,充分搅拌后,用经105℃干燥1小时并称重的4号垂熔玻璃坩埚滤过,残渣用丙酮洗涤,至洗出的丙酮几乎无色。残渣在105℃干燥至恒重,不溶物不得少于90.0%。 4.5.3.3 己烷中不溶物:取本品约10g,精密称定,加正己烷100ml,振摇使溶解,用经105℃干燥1小时并称重的4号垂熔玻璃坩埚滤过,容器用25ml正己烷洗涤两次,洗液滤过后,4号垂熔玻璃坩埚在105℃干燥1小是后,称重,不溶物不得过0.3%。

丙酮酸检测试剂盒(乳酸脱氢酶微板法)

丙酮酸检测试剂盒(乳酸脱氢酶微板法) 简介: 丙酮酸(Pyruvic acid)又称2-氧代丙酸,是参与整个生物体基本代谢的中间产物之一,可通过乙酰CoA 和三羧酸循环实现体内糖、脂肪和氨基酸间的互相转化,丙酮酸在三大营养物质的代谢联系中起着重要的枢纽作用。 丙酮酸是糖无氧代谢的产物,科研工作者常将丙酮酸和乳酸一起研究,并用二者的比值推算循环衰竭的程度。丙酮酸检测可采用酶催化法,该发是使用乳酸脱氢酶(LDH)催化丙酮酸氧化,生成乳酸和NAD +,通过分光光度法或荧光光度法测定NADH 的减少量,进而计算出丙酮酸含量。 通过分光光度比色法(酶标仪)测定340nm 处吸光度的下降速率,据此通过比色分析就可以计算出PA 水平。该试剂盒可用于检测细胞或组织的裂解液或匀浆液、血浆、血清等样品中内源性的丙酮酸含量。该试剂盒仅用于科研领域,不宜用于临床诊断或其他用途。 组成: 操作步骤(仅供参考): 1、 准备样品: ① 血浆、血清、尿液及其他体液样品:血浆、血清按照常规方法制备后可以直接用于 本试剂盒的测定,尿液通常也可以直接用于测定,-20℃冻存。 ② 细胞或组织样品:取恰当细胞或组织裂解液,如果有必要需进行适当匀浆,低速离 心取上清,-20℃冻存,用于PA 的检测。 ③ 高浓度样品:如果样品中含有较高浓度的PA ,可以使用原有的裂解液或PBS 等进 行稀释,如鸡血清、血浆可稀释5~10倍后检测。 2、 配制标准品工作液:取丙酮酸标准(25mmol/L)稀释液,使浓度达到0.5mmol/L ,即为 标准品工作液-丙酮酸标准(0.5mmol/L)。4℃避光保存24h 有效。 编号 名称 TC0754 120T Storage 试剂(A): 丙酮酸标准(25mmol/L) 1ml 4℃ 避光 试剂(B): 丙酮酸标准稀释液 1ml RT 试剂(C): PA 显色液 C1: PA Assay buffer 30ml 4℃ 避光 C2: NADH 3支 -20℃ 避光 临用前,按C1:C2=10ml:1支的比例混合,即为PA 显色液。 试剂(D): LDH solution 0.2ml -20℃ 避光 使用说明书 1份

大豆磷脂质量规范标准

大豆磷脂质量标准 、浓缩大豆磷脂(FAO/WHO 1980 年) 由油脂精炼的副产品一一水化油脚,经真空干燥脱水后,添加适量植物油制成,其产品有脱色或不脱色两类。 1、产品质量指标 2、产品用途:乳化剂,消泡剂等 、羟基化磷脂(FCC 1981年) 由浓缩大豆磷脂或其它植物磷脂,经过氧化氢和乳酸处理后,制得的碘值低于原料10%的羟基化磷脂产品。 产品质量指标

三、中华人民共和国行业(国内贸易部发布)磷脂标准SB/T 10206-94 1、磷脂:磷脂系指黄色或棕色的难溶于丙酮的含磷类脂物。根据产品制造工艺的产品性状分为:浓缩磷脂、粉状磷脂和卵磷脂三类。 1.1浓缩磷脂:水化磷脂经真空脱水、浓缩等工序而制成的塑状或粘稠状产品。 1.2粉状磷脂:浓缩磷脂经脱脂、分离、干燥等工序而制成的粉粒状产品。 1.3卵磷脂:浓缩磷脂或粉状磷脂经乙醇萃取、分离、干燥等工序而制得以磷脂酰胆碱为主的胶质产品。 2、技术要求 2.1原料要求所用原料必须是新鲜的水化磷脂或合格的浓缩磷脂,原料 中不得混有非食用植物油。 2.2感官指标感官指标 2.3质量指标 2.3.1浓缩磷脂质量指标

2.3.2粉状磷脂质量指标 233卵磷脂质量指标 2.4食用浓缩磷脂卫生指标

四、中华人民共和国国家标准改性大豆磷脂GB 12486-90 1、改性大豆磷脂产品类型以天然大豆磷脂为原料,经过适度乙酰化、羟基化及脱脂后生产的粉粒状产品,用作食品乳化剂、脱模剂、品质改良剂等。 2、技术要求 2.1物理性状产品为黄色或黄棕色粉状,极易溶于动植物油,能分散于水,部分溶于乙醇。 2.2产品理化指标应符合要求: Centrol Soyea 1CentroleneA

大豆磷脂的制备_功能特性及行业应用研究进展_袁利鹏

中国酿造 2013年第32卷第5期 总第254期大豆磷脂的制备、功能特性及行业应用研究进展 袁利鹏1,刘 波1*,熊 波2,彭述辉3,李孟繁2 (1.广东农工商职业技术学院,广东广州510507;2.福建农林大学食品科学学院,福建福州350002; 3.广州城市职业学院食品系,广东广州510405) 摘要:大豆磷脂是从大豆中提取的磷脂类混合物,具有多种重要的功能特性和巨大的应用价值。该文主要介绍了大豆磷脂的制备工艺、功能特性,及近年来关于大豆磷脂应用的研究进展,并对大豆磷脂未来的发展前景做了简要分析,以期为我国大豆磷脂行业的进一步发展提供参考。关键词:大豆磷脂;功能;应用中图分类号: TS202.3文献标识码:A 文章编号:0254-5071(2013)05-0013-03 Progressinpreparation,functionandapplicationofsoylecithin YUANLipeng1,LIUBo1*,XIONGBo2,PENGShuhui3,LIMengfan2 (1.GuangdongAIBPolytechnicCollege,Guangzhou510507,China; 2.CollegeofFoodScience,FujianAgricultureandForestryUniversity,Fuzhou350002,China; 3.DepartmentofFood,GuangzhouCitypolytechnic,Guangzhou510405,China) Abstract:Soylecithinisakindofphospholipidsmixtureextractedfromsoybean.Ithasmanyimportantfunctionsandgreatapplicationvalues.Thispapermainlyintroducedpreparation,functionalproperties,andtheapplicationofsoylecithin.Then,briefanalysistheprospectofsoylecithintoprovidereferenceforthedevelopmentofsoylecithinindustry. Keywords:soylecithin;function;application 收稿日期:2013-04-19 基金项目:国家科技支撑计划课题(2012BAD31B03);广东省科技计划项目(2010B080702016);广东省科技计划项目(2010A032000001-4)作者简介:袁利鹏(1979-),男,山西大同人,讲师,研究方向为食品营养与安全;刘波*,讲师,通讯作者。 大豆磷脂是从大豆中提取的磷脂类混合物,主要由磷脂酰胆碱(PC)、磷脂酰乙醇胺(PE)、磷脂酰肌醇(PI)、磷脂酰丝氨酸(PS)等成分组成。 其化学结构式[1]: 其中R1和R2为C14 ̄C20的饱和或不饱和脂肪羧酸,根据X的不同,磷脂被分为多种。当X为-CH2CH2N(CH3)3时,为PC;当X为-CH2CH2NH3时,为PE;当X为C6H(OH)5时,为PI。由于特殊的化学结构,使得大豆磷脂具有独特的理化性质和营养保健功能,从而被广泛应用于食品、医药、饲料、化妆品等领域中。然而由于对大豆磷脂的研究起步较晚,导致目前我国关于大豆磷脂的应用还处于较低水平,虽有文献报道其物化特性和在部分轻工业中的添加使用, 但因其应用领域广泛且迅速,故其特性研究及行业应用新情况需要被不断总结关注。因此, 本文对大豆磷脂的功能特性和应用进展进一步综述,也在此基础上对其发展前景做简要分析,以期为我国大豆磷脂行业的发展提供参考。1大豆磷脂的制备工艺 目前,常见的大豆磷脂制备工艺主要有:有机溶剂萃取法[2]和超临界CO2萃取法[3]。其中有机溶解萃取法是利用磷脂在丙酮等有机溶剂中的溶解性较好,而将大豆磷脂从大豆油角中萃取出来的方法,该方法生产成本低廉、制作工艺简单,是目前最常见的磷脂制备工艺,但是该方法制备的大豆磷脂纯度较低,而且通常会用到丙酮等有毒有害溶剂,存在溶剂残留的问题,因此随着随着市场对高纯度、 高质量磷脂的需求,该方法的发展空间并不是很大;超临界CO2萃取法是利用磷脂在乙醇作夹带剂的条件下,在超临界CO2中具有溶解性,而将磷脂分离出来的方法,该方法制备的大豆磷脂纯度较高,无溶剂残留,是制备高纯度、高质量磷脂的有效方法,但是该方法生产成本较高,工业化难度较大,但是随着大豆磷脂行业的发展,超临界CO2萃取法将在大豆磷脂的工业化生产中起到越来越重要的作用 。 专论与综述 13··

丙酮酸检测试剂盒(乳酸脱氢酶比色法)

丙酮酸检测试剂盒(乳酸脱氢酶比色法) 简介: 丙酮酸(Pyruvic acid)又称2-氧代丙酸,是参与整个生物体基本代谢的中间产物之一,可通过乙酰CoA 和三羧酸循环实现体内糖、脂肪和氨基酸间的互相转化,丙酮酸在三大营养物质的代谢联系中起着重要的枢纽作用。 丙酮酸是糖无氧代谢的产物,科研工作者常将丙酮酸和乳酸一起研究,并用二者的比值推算循环衰竭的程度。丙酮酸检测可采用酶催化法,该发是使用乳酸脱氢酶(LDH)催化丙酮酸氧化,生成乳酸和NAD +,通过分光光度法或荧光光度法测定NADH 的减少量,进而计算出丙酮酸含量。 通过分光光度比色法(自动分析仪或分光光度计)测定340nm 处吸光度的下降速率,据此通过比色分析就可以计算出PA 水平。该试剂盒可用于检测细胞或组织的裂解液或匀浆液、血浆、血清等样品中内源性的丙酮酸含量。该试剂盒仅用于科研领域,不宜用于临床诊断或其他用途。 组成: 操作步骤(仅供参考): 1、 准备样品: ① 血浆、血清、尿液及其他体液样品:血浆、血清按照常规方法制备后可以直接用于 本试剂盒的测定,尿液通常也可以直接用于测定,-20℃冻存。 ② 细胞或组织样品:取恰当细胞或组织裂解液,如果有必要需进行适当匀浆,低速离 心取上清,-20℃冻存,用于PA 的检测。 ③ 高浓度样品:如果样品中含有较高浓度的PA ,可以使用原有的裂解液或PBS 等进 行稀释,如鸡血清、血浆可稀释5~10倍后检测。 2、 配制标准品工作液:,即为标准品工作液-丙酮酸标准(0.5mmol/L)。4℃避光保存24h 编号 名称 TC0755 50T Storage 试剂(A): 丙酮酸标准(25mmol/L) 1ml 4℃ 避光 试剂(B): 丙酮酸标准稀释液 5ml RT 试剂(C): PA 显色液 C1: PA Assay buffer 90ml 4℃ 避光 临用前,按C1:C2=30ml:1支的比例混合,即为PA 显色液。 试剂(D): LDH solution 0.4ml -20℃ 避光 使用说明书 1份

实验一可溶性糖含量的测定——蒽酮法

实验十二胰岛素、肾上腺素对血糖浓度的影响 血糖是指血液中糖,由于正常人血液中糖主要是葡萄糖,所以一般认为,血糖是指血液中的葡萄糖。正常人空腹血糖浓度为4.4~6.7mmol/L(80~ 120mg/100ml)。 血糖是糖在体内的运输形式。全身各组织都从血液中摄取葡萄糖以氧化供能,特别是脑、肾、红细胞、视网膜等组织合成糖原能力极低,几乎没有糖原贮存,必须不断由血液供应葡萄糖。当血糖下降到一定程度时,就会严重妨碍脑等组织的能量代射,从而影响它们的功能。所以维持血糖浓度的相对恒定有着重要的临床意义。 血糖浓度的调节 血糖浓度能维持相对恒定是由于机体内存在一整套高效率的调节机制,精细地控制着血糖的来源与去路,使之达到动态平衡。 神经系统的调节作用 神经系统对血糖浓度的调节作用主要通过下丘脑和自主神经系统对所控制激素的分泌,后者再通过影响血糖来源与去路关键酶的活性来实现。神经系统的调节最终通过细胞水平的调节来达到目的。 下丘脑一方面通过内脏神经作用于肾上腺髓质,刺激肾上腺素的分泌;另

一方面也作用于胰岛α-细胞,使其分泌胰高血糖素;同时还可以直接作用于肝。三方面共同作用的结果是使肝细胞的磷酸化酶活化,使糖原分解加速;糖异生关键酶的活性增加,糖异生作用增加,从而使血糖浓度升高。 下丘脑还可通过兴奋迷走神经,使胰腺β-细胞分泌胰岛素,同时还可直接作用于肝,使肝细胞内糖原合成酶活化,促进肝糖原的合成;此外还抑制糖异生途径,促进糖的氧化和转化,总体上使血糖的去路增加,来源减少,最终达到使血糖浓度降低的目的。 激素 使血糖浓度降低的激素 :胰岛素 使血糖浓度升高的激素:胰高血糖素、肾上腺素、肾上腺皮质激素、生长素、甲状腺素 它们对血糖的调节主要是通过对糖代谢各主要途径的影响来实现的。 在激素发挥调节血糖浓度的作用中,最重要的是胰岛素和胰高血糖素。肾上腺素在应激时发挥作用,而肾上腺皮质激素、生长激素、甲状腺素等都可影响血糖水平,但在生理性调节中仅居次要地位。 胰岛素 使肌肉和脂肪组织细胞膜对葡萄糖的通透性增加,利于血糖进入这些组织进行代谢。 诱导葡萄糖激酶、磷酸果糖激酶和丙酮酸激酶的合成,加速细胞内葡萄糖的分解利用。 通过使细胞内cAMP含量减少,激活糖原合成酶和丙酮酸脱氢酶系,抑制磷酸化酶和糖异生关键酶等,使糖原合成增加,糖的氧化利用、糖转变为脂肪的反应增加,血糖去路增快;使糖原分解和糖异生减少或受抑制,使血糖来源减少,最终使血糖浓度降低。 胰高血糖素 主要通过提高靶细胞内cAMP含量达到调节血糖浓度的目的。细胞内的cAMP 可激活依赖cAMP的蛋白激酶,后者通过酶蛋白的共价修饰改变细胞内酶的活性,即激活糖原分解和糖异生的关键酶,抑制糖原合成和糖氧化的关键酶,使血糖升高。 肾上腺素

实验五、蛋黄中卵磷脂的提取、纯化与鉴定

实验五:蛋黄中卵磷脂的提取、纯化与鉴定 一、实验目的 ?掌握从鲜鸡蛋中提取卵磷脂的方法与原理。 ?卵磷脂鉴定的方法与原理。 ?加深了解磷脂类物质的结构和性质。 二、实验内容 磷脂是一类含有磷酸的脂类,机体中主要含有两大类磷脂,由甘油构成的磷脂称为甘油磷脂(phosphoglyceride);由神经鞘氨醇构成的磷脂,称为鞘磷脂(sphingolipid)。其结构具有由磷酸相连的取代基团(含氨碱或醇类)构成的亲水头(hydrophilic head)和由脂肪酸链构成的疏水尾(hydrophobic tail)。在生物膜中磷脂的亲水头位于膜表面,而疏水尾位于膜内侧。磷脂是重要的两亲物质,它们是生物膜的重要组分、乳化剂和表面活性剂。 磷脂依照氨基醇的不同可分:(1)磷脂酰胆碱(卵磷脂)(PC),分布:植物主要有大豆等,动物主要有脑、精液、肾上腺、红细胞,蛋卵黄(8-10%)。其主要作用是控制肝脂代谢,防止脂肪肝的形成;(2)、磷脂酰乙醇胺(脑磷脂)(PE),参与血液凝结;(3)、磷脂酰丝氨酸(PS);(4)、磷脂酰肌醇(PI);(5)、磷脂酰甘油(PG);(6)、二磷脂酰甘油(心磷脂)。 蛋黄磷脂属动物胚胎磷脂,含有大量的胆固醇和甘油三酯及许多人体不可缺少的营养物质和微量元素。卵磷脂是生命的基础物质,人类生命自始至终都离不开它的滋养和保护。卵磷脂存在于每个细胞之中,更多的是集中在脑及神经系统、血液循环系统、免疫系统以及肝、心、肾等重要器官。卵磷脂也被誉为与蛋白质、维生素并列的“第三营养素”。蛋黄卵磷脂可将胆固醇乳化为极细的颗粒,这种微细的乳化胆固醇颗粒可透过血管壁被组织利用,而不会使血浆中的胆固醇增加。 三、实验原理、方法和手段 原理一:卵磷脂是生物体组织细胞的重要成分,主要存在于大豆等植物组织以及动物的肝、脑、脾、心、卵等组织中,尤其在蛋黄中含量较多(10%左右)。卵磷脂和脑磷脂均溶于乙醚而不溶于丙酮,利用此性质可将其与中性脂肪分离开;卵磷脂能溶于乙醇而脑磷脂不溶,利用此性质又可将卵磷脂和脑磷脂分离。 原理二:卵磷脂为白色,当与空气接触后,其所含不饱和脂肪酸会被氧化而使卵磷脂呈黄褐色。卵磷脂被碱水解后可分解为脂肪酸盐、甘油、胆碱和磷酸盐。甘油与硫酸氢钾共热,可生成具有特殊臭味的丙烯醛;磷酸盐在酸性条件下与钼酸铵作用,生成黄色的磷钼酸沉淀;胆碱在碱的进一步作用下生成无色且具有氨和鱼腥气味的三甲胺。这样通过对分解产物的检验可以对卵磷脂进行鉴定。 四、实验组织运行要求

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