养血清脑颗粒治疗慢性脑供血不足实验研究

·基础研究·

养血清脑颗粒治疗慢性脑供血不足实验研究

蔡定芳 顾喜喜 陈依萍 闻名 范越

基金项目:

上海市卫生系统百人计划(B R 97016) 作者单位:

200032上海市,复旦大学附属中山医院 慢性脑供血不足以头晕、

头重、肢体麻木反复发作时轻时重、无神经系统局灶性定位体征为主要临床特征,多伴有高血压或眼底动脉硬化,C T 、MR I 等影像学检查未见器质性脑部病变,

脑循环检查确认脑血流低下。慢性脑供血不足不仅是临床常见病、多发病,而且还是A l z h e i m e r 病、血管性痴呆、B i n s w a n g

e r 病、缺血性卒中等多种疾病发生、发展过程的一个重要环节[1]。

我们于2002至2003年期间,应用天津天士力医药有限公司生产的养血清脑颗粒对慢性脑供血不足大鼠学习记忆及眩晕潜伏期等影响进行观察,旨在了解其对慢性脑供血不足的疗效。

一、材料和方法

1.动物分组:雄性S D 大鼠60只,18周龄,

体重(250±20)g ,随机分为3组:养血清脑颗粒组、尼莫地平组、对照组,每组各20只。

2.给药方法:

养血清脑颗粒组于造模后8周开始灌服中药养血清脑颗粒2g ·k g -1·d -1

,每天1次,连续4周;尼莫地平组以尼莫地平(500μg /k g

)替代养血清脑颗粒,余同养血清脑颗粒组;模型对照组以等体积生理盐水替代养血清脑颗粒,余同养血清脑颗粒组。

3.大鼠慢性脑供血不足模型研制:参考T o r r e 等[2]

方法制作大鼠两侧颈动脉结扎模型。大鼠经10%水合氯醛3.0m l /k g 腹腔注射麻醉后固定于

手术板上,取颈部正中切口,钝性分离各层组织,至颈内、颈外动脉分叉,分离迷走神经,用4-0号线结扎双侧颈总动脉,逐层缝合。术中保持肛温37℃～3

8℃,术后饲养环境温度为23℃,自由饮食。4.学习记忆测定:采用Y 型迷宫实验。将大鼠置于Y 型迷宫箱内,适应环境3m i n 后开始实验。顺时针依次电击大鼠,大鼠学习记忆成绩以达

到连续10次中有9次正确所需的电击次数表示,用达9/10次正确所需的电击次数多少表示大鼠学习记忆功能的优劣。实验大鼠分别于颈动脉结扎前、颈动脉结扎后8周、12周、16周各进行Y 型迷宫测试并记录成绩。

5.眩晕潜伏期测定:

调节旋转诱导仪旋转速度200r /m i n 。大鼠旋转1m i n 后置于底部带电周围绝缘的50c m×50c m×40c m 实验箱内(实验箱中央置一直径6.5c m 、高10c m 的圆柱形橡胶),即刻电击。大鼠从旋转停止至跳上橡胶柱逃避电击并在橡胶柱上保持30s 即为眩晕潜伏期。潜伏期越长提示眩晕越严重。所有大鼠于颈动脉结扎前、颈动脉结扎后8周、12周、16周各测定1次眩晕潜伏期。

6.统计学处理:数据用-x ±

s 表示,采用t 检验、x 2

检验和方差分析进行组间显著性检验。

二、结果

1.养血清脑颗粒对慢性脑供血不足大鼠学习记忆功能的影响:结果见表1。

大鼠颈动脉结扎前正确学习记忆功能大约需要18～20次左右;颈动脉结扎后,随着时间延长,学习记忆成绩逐渐下降。颈动脉结扎12周大鼠正确学习记忆成绩为电击(39.5±4.3)次,16周为(58.3±5)次;尼莫地平组与对照组差异无统计学意义(P >0.05)。养血清脑颗粒组12周与16周的正确学习记忆成绩电击数分别为(29.2±3.9)次与(43.2±6.2)次,与对照组比较差异有统计学意义(P <0.05)。提示养血清脑颗粒能有效改善颈动脉结扎大鼠学习记忆功能。

2.养血清脑颗粒对慢性脑供血不足大鼠眩晕潜伏期的影响:结果见表2。所有大鼠造模前眩晕潜伏期为(95.12±14.25)s 。大鼠颈动脉结扎后,随着时间延长眩晕潜伏期增大,对照组8周、12周、16周的眩晕潜伏期分别为(30.34±24.54)s 、(147.32±34.47)s 、(15

3.13±52.35)s

,与颈动脉

表1养血清脑颗粒对慢性脑供血不足大鼠学习记忆功能的影响(-

x±s,次)

组别鼠数

(只)

两侧颈动脉结扎时间

术前术后8周术后12周术后16周

对照组208.6±2.117.3±2.339.5±4.358.3±8.5尼莫地平组208.9±1.816.2±1.935.3±4.551.2±7.3养血清脑组209.1±2.315.2±2.029.2±3.9*43.2±6.2*注:与对照组比较,*P<0.05

表2养血清脑颗粒对慢性脑供血不足大鼠眩晕潜伏期的影响(-

x±s,s)

组别鼠数

(只)

两侧颈动脉结扎时间

术前术后8周术后12周术后16周

对照组1595.12±14.25130.34±24.54147.32+34.47153.13±52.35尼莫地平组1596.21±22.54128.23±26.76143.13±36.45148.52±42.89养血清脑组1597.25±18.35112.12±16.46*127.41±26.65*134.14±31.56*注:与对照组比较,*P<0.05。

结扎前比较,差异有统计学意义(P>0.05)。尼莫地平治疗后各时间点与对照组差异无统计学意义(P>0.05)。养血清脑组12周与16周的眩晕潜伏期分别为(112.12±16.46)s、(127.41±26.65)s、(134.14±31.56)s,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05),提示养血清脑颗粒具有效改善颈动脉结扎大鼠眩晕潜伏期作用。

三、讨论

1992年,T o r r e等［2］首先报道结扎大鼠两侧颈总动脉造成慢性脑供血不足模型获得成功。随后的研究证实颈动脉结扎大鼠海马C A1区神经变性、皮质萎缩、白质疏松、小胶质细胞增生及毛细血管床改变等［3］。颈动脉结扎3周后即进入慢性期,颈动脉结扎3个月后大鼠出现额叶、海马M型胆碱受体结合率下降,单氨类递质改变及能量代谢代偿性激活及神经行为学改变［4,5］。

本实验结果证实颈动脉结扎大鼠8周,迷宫试验正确率明显低于颈动脉结扎前,提示长期慢性脑供血不足可引起学习记忆障碍。同时亦表明颈动脉结扎大鼠8周眩晕潜伏期明显延长,至颈动脉结扎16周眩晕潜伏期较假手术组明显延长。

慢性脑供血不足目前缺乏积极有效的治疗。中药复方养血清脑颗粒的主要药理作用是改善软脑膜微循环,增加脑血流量,改善脑部供血不足,缓解血管痉挛,止痛。临床上主要用于治疗慢性脑供血不足引起的头晕、头痛、眩晕眼花、心烦易怒、失眠多梦等症状。本研究结果提示中药复方养血清脑颗粒对实验性慢性脑供血不足有较好疗效。以上结果提示养血清脑颗粒能有效改善慢性脑供血不足大鼠血液循环,改善因慢性脑缺血引起的头晕及记忆障碍等。养血清脑颗粒由当归、川芎、熟地、白芍、决明子、珍珠母、夏枯草等组成。以补血的代表名方四物汤为基础,加上决明子、夏枯草、珍珠母等平肝潜阳。有关养血清脑颗粒对慢性脑供血不足大鼠的脑血流量及血流速度等正在进一步研究中。

参考文献

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63-68.

(收稿日期:2004-03-10)

(本文编辑:刘季蓉)