二次回归中心组合试验法提取车前草中总黄酮的研究

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强度的影响不很显著，但对其黏附性的影响较大，在85℃时出现最大值，之后则迅速减小。

探讨发现，静电作用力和疏水作用力为蛋白质与阴离子多糖间主要的相互作用力。

参考文献

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收稿日期：2010－04－26

作者简介：熊拯（1981—），男，江西九江人，讲师，研究方向粮食、油脂及植物蛋白。

通信地址：（535000）广西钦州市育才路9号

二次回归中心组合试验法提取车前草中总黄酮的研究

卢俊陆志发陈福北余希成

（广西工业职业技术学院石油与化学工程系）

【摘要】以液料比、微波功率、乙醇浓度、提取时间为考察因素，采用二次回归中心组合试验对车前草黄酮的提取工艺条件进行优化。通过design expert数学软件分析，得到提取工艺的优

化条件为：乙醇浓度66％、提取时间35min、微波功率600W、液料比20∶1mL／g，且所建立的数

学模型在此范围内能够较准确的预测车前草总黄酮的提取率。

【关键词】二次回归中心组合试验；车前草；黄酮；微波

中图分类号：TS202．3文献标识码：A文章编号：1673-7199(2010)09-0136-04

车前草是我国传统名贵中药，又名车前、车轮菜、猪耳草、钱串草等，为车前科植物车前或平车前的干燥全草。现代医学和中医药理研究表明，车前草富含桃叶珊瑚苷、车前苷和各种氨基酸等，在提高人体免疫能力、抗衰老、抑制肿瘤、补五脏虚劳、改善糖尿病症状和萎缩性胃炎等方面有明显的效果。夏道宗研究了车前草总黄酮体外清除自由基及对D－半乳糖诱导小鼠氧化损伤的保护作用，结果显示可显著增高氧化

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＜＜＜食品工程·技术表1响应面设计及相应的试验结果

试验号乙醇浓度

X1（％）

液料比

X2（mL／g）

时间

X3（min）

微波功率

X4（W）

Y

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30

1（70）

0（60）

－1（50）

－1

1

－1

－1

－1

1

－1

1

1

2（80）

－2（40）

1

－1

－1

1

1

1（25）

－2（10）

0（20）

－1（15）

1

1

－1

1

－1

1

1

－1

－1

1

1

－1

2（30）

－1

－1

1（35）

0（30）

－1（25）

－1

1

－1

1

1

－1

－1

－1

2（40）

－1

－1

1

1

－2（20）

1

1

－1（500）

0（600）

－2（400）

－1

－1

1（700）

1

－1

－1

－1

2（800）

1

－1

1

1

1

1

1

－1

0．633

0．465

0．443

0．754

0．418

0．694

0．493

0．641

0．765

0．521

0．616

0．493

0．434

0．583

0．592

0．437

0．742

0．439

0．675

0．748

0．412

0．574

0．486

0．442

0．477

0．648

0．415

0．512

0．755

0．641

损伤小鼠体内抗氧化酶活性，改善脂质过氧化，从而明显保护D－半乳糖诱导的氧化损伤。

通常，从植物中提取有效成分常采用水或有机溶剂浸提，但这些方法提取时间长，能耗大，提取率低。微波辅助提取（MAE）具有设备简单、适用范围广、提取效率高、重现性好、节省时间、节省试剂、污染小等特点。另外，由于其特殊的加热模式和诸多优点，用它强化天然产物的提取已成为当前研究的一个热点。

本文采用二次回归中心组合（CCD）试验设计方法，研究了微波提取车前草总黄酮的技术，应用design expert7．0数学软件进行分析，建立可预测最佳工艺条件的模型方程，为植物总黄酮的提取工艺研究提供了理论依据和参考。

1材料与方法

1．1材料与设备

车前草（市售，产地南宁），用时干燥粉碎，过60目筛，备用。

1．2试剂

芦丁标准品（AR，中国药品生物制品检定所）、无水乙醇、NaNO2、Al（NO3）3、NaOH均为分析纯。

1．3仪器

DK－24型电热恒温水浴锅、722型分光光度计、PHS－3S精密pH计，上海精密科学仪器有限公司；远红外快速恒温干燥箱，上海跃进医疗器械厂；GL－16G－型高速冷冻离心机，上海安亭科学仪器厂；AL-PHA1－4冷冻干燥机，德国CHAIST公司；MG－5530S 型微波炉，LG微波炉电器有限公司。

1．4方法

1．4．1标准曲线的制作

精密称取芦丁10．0mg，用70％的乙醇溶解并定容至100mL，使其浓度为100μg／mL。将芦丁溶液用70％的乙醇稀释成10、20、30、40、50、60μg／mL，各取1mL于试管中，加70％的乙醇1mL，加入300μL5％的NaNO2，6min后加入300μL10％的Al（NO3）3溶液，6min后再加入2mL4％的NaOH溶液，10min后于分光光度计波长510nm处测定吸光度。以吸光度A为纵坐标，浓度C为横坐标，经回归分析，得到标准曲线方程为：y＝0．002674x＋0．0000423，r＝0．9993。

1．4．2车前草黄酮的提取及测定

准确称取车前草干粉2g，于250mL锥形瓶中，按一定的料液比加入乙醇溶液，微波辐射提取一定时间，抽滤。滤渣以同样条件提取、抽滤，并将几次的提取液合并、离心，用旋转蒸发器减压浓缩，回收乙醇。浓缩后转入100mL容量瓶中，用乙醇水溶液定容，用制作标准曲线同样的方法，测定其黄酮类化合物的含量。

提取率＝（C×V×10－6／W）×100％

式中：V为定容体积，mL；W为车前草药粉质量，g；C为车前草提取液浓度，μg／mL。

1．5微波提取工艺条件的选择

通过预试验选定4个主要因素：乙醇浓度（X1）、液料比（X2）、时间（X3）、微波功率（X4）为自变量，以黄酮提取率为响应值Y，采用DesignExpert7．0中的响应面试验设计法，设计了4因素5水平的二次回归中心组合试验，每个因素各取5个水平，根据Central－

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表2

二次回归模型的方差分析

方差来源平方和自由度

均方

F 值

Pr＞F 显著性模型X 1X 2X 3X 4X 1X 2X 1X 3X 1X 4X 2X 3X 2X 4X 3X 4X

1

2X 22X 32X 42

残差失拟项纯误差总和

0．36

0．0250．0150．0614．32×10－3

2．25×10－40．0180．0006．25×10－62．304×10－30．0260．0590．110．0390．0800．0570．0460．0110．42

14111

111111111111510529

0．0260．0250．0150．0614．32×10－3

2．25×10－4

0．0180．0006．25×10－62．304×10－3

0．0260．0590．110．0390．0803．788×10

－34．610×10－32．145×10－3

6．81

6．623．8316．101．140．0594．630．0001．65×10－30．616．8915．6630．2410．3221．212．15

0．00030．02120．06930．00110．30240．81080．04801．00000．9681

0．44760．01920．0013＜0．00010．00580．00030．2062

显著显著显著

显著

显著显著显著显著不显著

Composite 的中心组合原理，对总黄酮提取工艺进行响应面分析，试验因素和结果见表1。

2

结果与分析

2．1

模型的建立与检验

通过Design－Expert 软件对表2试验数据进行二次

多项回归拟合，获得回归方程为：

Y ＝0．73＋0．032X 1＋0．025X 2＋0．050X 3＋0．013X 4－0．046X 12－0．00375X 1X 2＋0．033X 1X 3－0．0001X 1X 4－0．065X 22＋0．0006X 2X 3＋0．012X 2X 4－0．038X 32－0．04X 3X 4－0．054X 42

对该模型进行方差分析，结果见表2。模型P ＝

0．0003＜0．01，表明回归模型极显著；失拟项F ＝2．15，

P ＝0．2062＞0．05，不显著；复相关系数R 为0．9295，表

明该方程对试验拟合度好，试验误差小。所以，可以

用该方程对不同提取条件下的黄酮产率进行预测。

由表2可知：模型的一次项X 1，X 3对车前草黄酮提取的线性效应显著，其他因素不显著；二次项X 12，

X 22，X 32和X 42对车前草总黄酮提取的曲面效应极显著，交互项X 1X 3交互效应显著，其他交互作用不显著，说明各影响因素对车前草黄酮提取率的影响不是简单的线性关系。

2．2因素间的交互作用

选取两个因素固定于零水平，求

余下2个因素的交互效应关系，可得到两两交互的曲面图，由回归方程所作的响应曲面图及其等高线图如图1～图6所示。各个因素及其交互作用对响应值的影响结果可以通过该组图直观的反映出来。

3

结论

（1）车前草总黄酮提取条件的优化

数学回归模型为：

Y ＝0．73＋0．032X 1＋0．025X 2＋0．050X 3＋0．013X 4－0．046X 12－0．00375X 1X 2＋0．033X 1X 3－0．0001X 1X 4－0．065X 22＋0．0006X 2X 3＋0．012X 2X 4－0．038X 32－0．04X 3X 4－0．054X 42

此模型在试验范围内能较准确的预测总黄酮的浸提率。

（2）综合回归模型的数学分析可知，车前草黄酮提取最优工艺为：乙醇浓度66％，液料比20∶1mL／g ，时间

35min ，微波功率为600W ，此条件下

图1

液料比和乙醇浓度交互影响车前草黄酮提取率的响应面和等高线图

图2

时间和乙醇浓度交互影响车前草黄酮提取率的响应面和等高线图

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食品工程·技术

图3

微波功率和乙醇浓度交互影响车前草黄酮提取率的响应面和等高线图

图4

提取时间和液料比交互影响车前草黄酮提取率的响应面和等高线图

车前草总黄酮的理论最大提取率为

1．18％。

采用上述最优条件进行可靠性验证，实际测的车前草黄酮提取率为

1．09％，与理论值相比，相对误差为7．6％左右。所以，采用二次回归中心组合设计优化得到的车前草总黄酮浸提条件参数准确可靠，对实际应用有一定的价值。

参考文献

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基金项目：广西工业职业技术学院课题（桂工职院科研2010xx 号）广西工业职业技术学院自治区优质专业：化工生产技术收稿日期：2010－04－20

作者简介：卢俊（1973—），男，广西合浦人，工程师、实验师，研究方向天然产物提取分离。通信地址：

（530001）广西南宁市秀灵路37号

图5

微波功率和液料比交互影响车前草黄酮提取率的响应面和等高线图

图6

微波功率和时间交互影响车前草黄酮提取率的响应面和等高线图

139

2010大一暑假实验报告提取分离试验

10年7月18日星期日雨 按照陈老师说的，我们今天开始做黄酮分离的预试实验，大家每人各取20g粉碎过的蕨菜，包扎好放在干燥的索氏提取器中。接好在铁架台上，最上面接冷凝管，中间接所氏提取器，下面接平底烧瓶，接口一定要配套，是磨口的。蕨菜粉末袋要包好装在连通管顶的下端，以便于每次冷凝下来的水都能覆盖满粉末，从而充分浸泡，脱色。然后在冷凝管进水雨出水管口接上橡皮管，进水管橡皮管另一端套紧水龙头管口，等水浴锅温度上升到近50度才打开水龙头放水。 接下来迅速往烧瓶里倒入其2/3~3/4的乙醚，我快速倒了乙醚。那刺鼻味简直让人窒息，加之有毒，易爆炸，使人麻醉，我是百般小心，才避免了它的危害。倒完乙醚立刻将烧瓶接好，乙醚瓶要立刻盖紧，以防挥发。 脱脂装置开始正常运行了，注意水浴锅内水不能过少，温度保持

原样。只要等着其流出液体变为无色即可。过了好几个小时，终于完了，关掉水浴锅，取下装置，将乙醚包紧，留着处理。滤纸包仍置于所氏提取器中，放在空气流通的地方让其干燥。 中文名称： 旋转蒸发器 英文名称： rotary evaporator 定义： 一种快速液体样品浓缩的装置。样品在球形的玻璃容器中加热、减压，并不断地旋转增大蒸发表面积，加快蒸发速度。 所属学科： 生物化学与分子生物学(一级学科) ；方法与技术(二级学科) 普通蒸馏最大的不同就是通过旋转，增大溶剂的蒸发面积，使蒸发更加顺畅！ 现在的旋转蒸发仪也可以进行减压蒸馏，通过减压，还可以补充蒸发的液体而不需要用方法: 1.高低调节:手动升降,转动机柱上面手轮,顺转为上升,逆转为下降. 电动升降,手触上升键主机上升,手触下降键主机下降. 2.冷凝器上有两个外接头是接冷却水用的,一头接进水,另一头接出水,一般接自来水,冷凝水温度越低效果越好.上端口装抽真空接头,接真空泵皮管抽真空用的. 3.开机前先将调速旋钮左旋到最小,按下电源开关指示灯亮,然后慢慢往右旋至所需要的转速,一般大蒸发瓶用中,低速,粘度大的溶液用较低转速.烧瓶是标准接口24号,随机附500ml,1000ml两种烧瓶,溶液量一般不超过50%为适宜. 注意事项: 1.玻璃零件接装应轻拿轻放,装前应洗干净,擦干或烘干. 2.各磨口,密封面密封圈及接头安装前都需要涂一层真空脂. 3.加热槽通电前必须加水,不允许无水干烧. 4.RE-52B必须使(19)拧入保险孔内保险,以免损坏烧瓶. 5.如真空抽不上来需检查 (1)各接头,接口是否密封 (2)密封圈,密封面是否有效 (3)主轴与密封圈之间真空脂是否涂好 (4)真空泵及其皮管是否漏气 7月19日星期一晴 天气好转，经过一夜的烘干，我的蕨菜包是完全干了。所以可以重新组装装置进行提纯。重新找了一个冷凝管和圆底烧瓶，用橡皮

车前叶药膳

车前叶药膳 中医学认为，车前叶性味甘、寒。能清热利尿、清肝明目、祛痰止咳、渗湿止泻。 车前草又称车前菜、牛甜菜、田菠菜，其叶叫车前叶。 中医学认为，车前叶性味甘、寒。能清热利尿、清肝明目、祛痰止咳、渗湿止泻。适用于湿热内郁之水肿；泌尿系感染时出现的尿频、尿急、尿痛；暑热泄泻、菌痢；肝热所致的目赤肿痛，怕光流泪，视物昏花。 据分析，每百克车前叶含蛋白质4.0克，脂肪1.0克，糖11.0克，胡萝卜素5.85毫克，硫胺素0.09毫克，核黄素0.25毫克，维生素C23毫克，钙309毫克，磷175毫克，铁25.3毫克。据近代研究报道，车前叶不仅有显著的利尿作用，而且具有明显的祛痰、抗菌、降压效果。它能作用于呼吸中枢，有很强的止咳力。能增进气管、支气管黏液的分泌，而有祛痰作用。 车前竹叶甘草汤 车前叶100克，淡竹叶12克，甘草10克，冰糖适量。将车前叶、淡竹叶、甘草洗净后，共入锅中，水煎去渣取汁1大碗，加入冰糖，入沙锅中稍炖即成。代茶饮用。每日1剂，连用7～10日为一疗程。淡竹叶性味甘淡，微寒。下能导小肠、膀胱之湿热外出，上可清心经之火而除烦，故有利尿通淋、清心除烦之效。

车前叶粥 车前叶50克，小米100克，葱白1茎，食盐、味精少许。将车前叶洗净切碎，葱白切段，备用。小米淘洗干净，入锅中加水煮粥，待熟时下车前叶、葱段和食盐，再炖10分钟，调入味精即成。晨起空腹食。连用5～7日为一疗程。可清热、祛痰、利尿、明目。适用于小便不利、淋沥涩痛、尿血、水肿、目赤肿痛、咳嗽痰多等症。 车前叶也可换成车前子25克（布包）加入小米中煮粥。先将车前子煎汁后，再同小米煮粥食。功用同上。 车前银耳冰糖汤 新鲜车前叶60克或干品20克，银耳10克，冰糖适量。将车前叶洗净切碎，银耳泡发去根。二味共入锅中，水煮5分钟，加入冰糖，稍炖即成。每日1剂，连用10～15日。银耳能滋阴润肺，善治肺中有热、肺燥咳嗽；车前叶清热润燥，亦治肺燥咳嗽。加入清热补中、润肺生津的冰糖，有异曲同工之妙。对肺燥咳嗽不失为一剂理想的药膳良方。 车前茵陈公英汤 鲜车前叶50克，鲜蒲公英50克，鲜茵陈50克，白糖50克。将前三物洗净切碎，入锅中水煎去渣取汁1大碗，加入白糖稍炖即成。每日1剂，分2次服饮，连用5日为一疗程。茵陈性味苦，微寒。苦能燥湿，寒能清热，并善渗泄而利小便。故可去湿热、利黄疸，为治黄疸之要药。蒲公英能清热

关于头发稀疏和掉头发的超级秘密(我的秘方太有效)

1-看到一篇帖子说头发稀少或者掉头发的姐妹有什么办法因为我的秘方太有 效就另开帖子说明首先，我老婆以前就头发稀少，头上成块的没头发，还掉头发。后来在湖南遇见一个老中医，开了一个方子，吃了后头发开始长，也不咋掉了，而且开始长新头发，非常有效，后来把这方子告诉身边掉头发，头发少的朋友，用了都说有效。关键是这个方子非常便宜，呵呵！开始公布，一共是3种药：鱼肝油，胱氨酸，维生素B6。都是一块多一瓶，都是一天3次，按着瓶上说明吃几片去吃，记住，3瓶一块吃，不要断。效果绝对好，比可贵的其他药有效得多。 2-煮生姜水洗头治疗脱发。我洗了两次，效果非常好。不但治疗了脱发，连头皮屑都治好了~ 本人被头皮屑困扰多年，曾用了，采乐，什么霸王洗发水。。根本不管用，想不到被2块生姜给治好了就是把生姜切小,放在锅里加水小火煮,煮到汤汁变得黄黄的有浓烈姜味溢出就可以使用了..用姜水抹在头皮上就可以了~ 等它自然干掉,可洗可不洗，一周一两次。还有就是可以喝红枣黄芪汤。也是生发的。电热壶烧开水的时候把姜切好放进去。 3-我就是看了那个生姜水洗头发的帖子后试了一下，到现在已经洗过3次了，头发多没多我没看不出来，但是控制脱发的效果是很明显，以前每次洗头头发都掉一大把，现在好了很多。头发也有点光泽了，而且蓬松了，哈哈。具体方法：大润发买的生姜（嫩的），切了大约20~30片，放大半锅水一起煮，煮啊煮，一直煮直到水的颜色很黄，并且整个屋子弥漫着姜的味道，我用的电磁炉，160度火，半小时左右。然后，我用买豆浆机时赠的那个滤网把姜水过滤，等姜水冷却成温水就可以洗啦，我是直接就把自己脑袋泡进去了，不是说一定要泡到头皮么，不过TZ们千万别把姜水弄到脸尤其是眼睛上，很疼。我是每隔1天洗1次。4-我的头发三大症状：症状一：头皮屑很多，多到什么地步？刚洗完头，一下午时间久又长出来了，很且很大块~ 我都有心理疾病了，比如有人站在我身后，我就很紧张，恐怕被人看到我有头皮屑。每次出门之前，必问我老公，让他看看我有没有头皮。症状二：我头发很容易油，但是又很干！是真的，又油又干。症状三：最近1，2年开始掉头发，本来我头发很多，很且很粗的。最近一两年，我洗头的时候，发现头发掉的很多~~ 然后，我一照镜子发现，原来很粗的头发变的很细的~~ 也许变的过程是漫长的，但是我的发现是突然的和惊人的。看了原来天涯的那个贴之后，我本来没当真，这些年来，希望太多，失望太多了~~ 。我也就是那么姑且一试而已，想不到效果是惊人的！！ 程序一，切姜块煮水，把大拇指那么大的生姜，切成四，五块。煮到水变少，变成黄色，就可以了。稍微凉会儿，否则一会烫脑袋。 程序二，我先用洗发水把头发洗一遍，我没用护发素，就把姜水倒在洗头的盆里。把脑袋放进去泡着，沾不到水的地方，用手来淋水，直到很烫的姜水变凉就可以了。（原帖是按摩，我人比较懒，我宁愿直接泡，呵呵）。别用水冲。就等干就行了。没任何味道的。到现在为止，共用了两次。第一次用完，我就立刻

黄酮的提取实施方案

黄酮提取实验方案 1材料与仪器 1.1材料 1.2试剂 芦丁，无水乙醇，氢氧化钠，石油醚，硝酸铝，三氯化铁，三氯化铝，浓氨水，浓盐酸，镁粉，亚硝酸钠(以上均为国产分析纯)，实验所用水均为蒸馏水。 1.3实验仪器 电热恒温水浴锅 电子天平(感量0.0001g) 722型光栅分光光度计 索氏提取器 量筒(100ml,10ml)25ml比色管移液管小试管白瓷板圆底烧瓶100m 容量瓶 锥形瓶 2实验原理 2.1提取原理 溶剂提取原理游离黄酮黄酮昔备注 乙辱溶解范围广+ + (甲醇)著■甘元均可溶(90-95%) (6M)甲醇毒性大 沸水多糖昔易于水+ 成本低、安全, 水溶性杂质多 臓性水或稀氢氧化钠溶出能力强 碱性乙醇酚强基的酸性 + +石灰水除杂质效果好

分离依据 之间的极性（分配系数K ）差异 分离工艺 回收 回收 单糖瞽 多糖昔 誓元 爸游离黄酮的乙瞇液 2 黄酮与杂质 昔与昔元 昔元与昔元 ）溶剂萃取法 2.2分离方法及原理 （二）pH 梯度萃取法 分离依据： 游离黄酮类化合物的酸性差异（见黄酮酸性规律） 分离工艺： 依次以 5%NiiH0h . 5%Na2C0 0. 2%N SL OH. 4%NaOH^取 5%NaHCO3< 5%Na2CO3液 0. 2KNaOH 液 4%NaOH 液 母液 （脂溶性杂石油駆液 乙豔液 乙酸乙酯 （脂溶性杂质）| | 丄酸化 水饱和正丁醇 母液 （水溶性杂质） 减压回收 原料的提取苹缩液（水溶液） 依次以石油耿、乙馳、 乙酸乙酯、水饱和正丁醇萃取

3 实验部分 3.1 原料的预处理 金星科厥类叶T除杂T水洗T晾干T粉碎 3.2 芦丁—标准溶液的配制 将芦丁在干燥箱里用120C条件下恒重1.5h,然后精确称取芦丁标准品O.OIg用85%勺乙醇溶液配制成100.00mL 的溶液，备用。 3.3 测定波长勺选择 精确移取芦丁标准溶液0.50mL, 置于25.00mL 勺比色管中，用质量分数为85%勺乙醇稀释到10.00mL 处，加人5%勺亚硝酸钠溶液0.80mL, 混匀，放置10min; 加入10%硝酸铝溶液0.80mL , 混匀，放置10min, 再加入4%勺氢氧化钠溶液10.00mL, 混匀，放置10min, 加入85%勺乙醇溶液至刻度，摇匀，10min后在460?560nm处测定吸光度，⑷（以试剂样品做空白）选择最大吸收波长。 3.4 芦丁标准曲线勺绘制 精确吸取芦丁标准溶液0.00、0.50、1.00、2.00、3.00、4.00 mL于6支25.00mL的比色管中，用质量分数为85%勺乙醇稀释到10.00mL 处，加人5%勺亚硝酸钠溶液0.80mL, 混匀，放置10min; 加入1 0%硝酸铝溶液0.80mL , 混匀，放置10min, 再加入4%的氢氧化钠溶液10.00mL, 混匀，放置10min，加入85%的乙醇溶液至刻度，摇匀，10min后于波长500nm处测定吸光度，（以第一瓶为空白溶液）然后以吸光度和芦丁溶液浓度做图，绘制标准曲线。 3.5 黄酮类化合物的特征性实验[5]-[6] 在一定条件下对提取的黄酮类化合物进行特征性实验，具体内容如 下： （1）盐酸一镁粉反应：取 1.00mL提取液于试管中加适量镁粉摇匀，再加入浓盐酸数滴（1次加入），观察其泡沫颜色。（2）三氯化铝反应：取提取液点在滤纸上，滴加1%三氯化铝乙醇溶液， 吹干，观察颜色变化。（3）三氯化铁反应：取几滴提取液于白瓷板上，滴加1%三氯化铁乙醇溶液， 观察其颜色。（4）浓氨水反应：取乙醇提取液点在滤纸上，将滤纸在浓氨水上方熏0.5min ，观察 其颜色变化。 3.6 单因素实验 2.6.1 较佳提取剂质量分数的确定 准确称取3g 处理好的金星厥科叶样品置于圆底烧瓶中，分别用无水乙醇、95%、85% 80%、 75%的乙醇60mL对3g金星厥科叶样品在水浴温度为80C下回流提取3h.提取完毕，用与提取剂的 质量分数相同的乙醇反复洗涤圆底烧瓶、滤纸包，将其定容于100:00mL 容量瓶中，然后精确吸取 0.50mL提取液置于25.00mL的比色管中，用与提取剂质量分数相同的乙醇稀释到10.00mL处，加人5%的亚硝酸钠溶液0.80mL,混匀，放置10min;加入10%硝酸铝溶液0.80mL ,混匀，放置10min,再加入4%的氢氧化钠溶液10.00mL, 混匀，放置10min, 加入85%的乙醇溶液至刻度，摇匀，10min 后 于波长500nm处测定其吸光度，同时做三组平行实验。

银杏叶黄酮提取及含量测定

银杏叶黄酮提取及含量测定 一、实验目的 1、掌握银杏叶中黄酮的提取方法 2、了解银杏叶中黄酮的含量测定 二、实验原理 近几年来，随着对黄酮类化合物研究的日益深入与重视，黄酮类化合物提取技术的发展也得到了促进。目前提取黄酮类化合物的方法主要包括有机溶剂浸提法、超声波提取法、超临界流体萃取法、微波提取法和酶提取法等。 １．１有机溶剂浸提法 目前国内外使用最广泛的银杏叶中黄酮的提取方法就是有机溶剂提取法，一般可用乙酸乙酯、丙酮、乙醇、甲醇或某些极性较大的混合溶剂，如甲醇－水（１＋１）溶液。由于甲醇的毒性、挥发性较大，因此一般采用乙醇作为提取剂。银杏叶干燥粉碎后用有机溶剂浸泡、提取、过滤，滤液中的溶剂经减压蒸馏除去后得银杏叶浸膏粗提物。徐桂花等［１］提取银杏叶中黄酮类化合物时，采用乙醇（７０＋３０）溶液为提取剂，提取温度为７０℃，料液质量浓度比为１ｇ比４０ｍＬ，提取时间为４ｈ。由于乙醇提取工艺在安全性、溶剂成本、效率及杂质酚酸去除等方面都不能应对日益严酷的市场竞争，张林涛等［1］提出了以硼砂－ 氢氧化钙碱水为溶剂提取银杏叶黄酮，其黄酮提取率与文献值相近，但提取工艺时间缩短为１ｈ。 １．２超声波提取法 超声波提取法是利用搅拌作用、强烈的振动和空间效应、高的加速度等使药物有效成分进入溶剂，从而提高提取率，缩短提取时间，并能消除高温对提取成分影响的一种提取法。刘晶芝等［2］运用了超声波技术与水浸提取相结合的方法得出超声波提取的最佳工艺条件为：超声频率４０ｋＨｚ，超声处理时间５５ｍｉｎ，料液质量比１比１００，提取温度３５℃，静置３ｈ，提取率为８１．９％。郭国瑞等［3］以水为介质，超声波提取银杏叶中黄酮苷，与常规水浸提法比较，超声波提取效率大大提高，确定超声波提取的最佳工艺为：超声处理时间５５ｍｉｎ，料液质量比１比３０，提取温度５０℃，提取率为８２．３％。 １．３超临界流体萃取法 超临界流体萃取法是一种以超临界流体代替常规有机溶剂对有效成分进行萃取和分离的新技术。可作为超临界流体的物质很多，其中二氧化碳临界温度（ＴＣ＝３１．３℃）接近室温，且具有无色、无毒、无味、不易燃、化学惰性、价廉、易制成高纯气体等优点而被广泛应用，特别在中药材及其制剂中更显示出其独特、简便、快速、具有较高的选择性、提取杂质少、可直接进样分析的优点。邓启焕等［4］探讨了超临界萃取银杏叶有效成分的影响因素，最佳条件为萃取压力２０ＭＰａ、时间９０ｍｉｎ、粒度３．９ｍｍ、温度４０℃，经测定银杏叶黄酮的质量分数为２８％，高于国际公认标准。 １．４微波提取法 微波提取法是利用分子或离子在微波场中的导电效应直接对物质进行加热从而提取植物细胞内耐热物质的新工艺。曾里等［5］的研究表明以乙醇溶液作溶剂比以水作溶剂的效果好，最佳条件为以乙醇 （６０＋４０）溶液为提取剂，解冻处理２０ｍｉｎ。张鹏等［6］对微波法提取银杏叶中黄酮类物质进行了研究，最佳提取条件为以乙醇（５０＋５０）溶液

甘露消毒丸的妙用

甘露消毒丸的妙用 *导读：甘露消毒丸，原名甘露消毒丹，是知名的清热利湿 的中成药。目前，甘露消毒丸的引伸应用已涉及到临床各科湿热见证的多种疾病。…… 甘露消毒丸，原名甘露消毒丹，是知名的清热利湿的中成药。为清代温病四大家之一王孟英先生所创制，已沿用了160多年，原载入《温热经纬》卷五，现收入《国家中成药》和《国家药品标准》中成药方剂第9册第54页，并列入医保用药乙类。 甘露消毒丸由石菖蒲、黄芩、茵陈蒿、豆蔻、木通、川贝母、薄荷、藿香、连翘、滑石、射干等11味中药配伍而成。石菖蒲 开窍辟秽、宣气逐痰；黄芩清热燥湿；茵陈蒿清除湿热、利胆退黄；豆蔻温中止呕、行气宽胸（中）；木通清热利湿、温经；川 贝母润肺化痰、清热开郁、解毒散结；薄荷疏风清热；藿香芳香化湿、解暑辟浊；连翘清热解表、解毒散结；滑石利水渗湿、清热解暑；射干清热利咽、祛痰止咳。诸药配伍具有芳香化浊、清热利湿的功能，主治湿热蕴结、发热体倦、胸闷腹胀、舌苔厚腻、尿赤黄疸等证。目前，甘露消毒丸的引伸应用已涉及到临床各科湿热见证的多种疾病。 甲型病毒性肝炎 适用于中医辨证甲肝热重于湿和湿重于热两型证候。热重于湿证，身目皆黄，色如橘色，口干口苦，恶心厌油，脘腹胀满，不思饮

食，大便干结，小溲黄赤，舌质红，苔黄腻，脉弦大；湿重于热证，身目黄染，其色鲜明，口黏或淡，恶心纳呆，胸脘痞满，疲乏无力，大便黏滞不爽，舌淡而润，苔白腻，脉弦滑。甘露消毒丸，每次9克，一日3次。热重于湿证用鲜凤尾草15克煎水送服，湿重于热证用鲜车前草15克煎水送服。 夏秋暑湿感冒 此时感冒多挟暑湿挟风寒，表现为身热，汗出恶风，头胀痛，咳嗽痰黄，咽干咽痛，流涕，困倦，心烦口渴，部分患者伴腹痛、腹泻、舌苔黄腻，脉濡数。甘露消毒丸，每次9克，一日3次，用鲜佩兰叶、鲜荷叶各15克煎水送服。 急性胆囊炎 适用于中医辨证之肝胆湿热证型之胆囊炎症，证见脘胁疼痛及背，或持续性上腹疼痛有阵发性加重，口苦咽干，恶心呕吐，不思饮食，身目发黄，大便干结，尿少色黄，舌苔黄腻，脉弦滑或滑数。甘露消毒丸，每次10克，一日3次，用山栀子10克煎水送服。皮肤湿疹 适用于中医辨证湿热浸淫证型。证见发病较急，病程较短，体表某部位可见红斑、斑丘疹、丘疱疹、水疱、糜烂、渗水等各种形态样皮疹，可先后相继出现，或几种皮疹同时出现，皮疹处瘙痒剧烈，口苦口干，大便干结，小溲赤黄，舌质红、苔薄黄腻，脉弦滑。甘露消毒丸，每次9克，一日2次，用苍术9克、鲜车前草30克煎水送服。

黄酮类化合物提取方法的研究

黄酮类化合物提取方法的研究 发表时间：2019-07-23T09:36:27.620Z 来源：《医师在线（学术版）》2019年第10期作者：鲍兴隆[导读] 旨在研究黄酮类化合物的提取分离工艺，为选择合适的方法提供参考依据。 浙江大学校医院浙江杭州310000 摘要：近年来，随着对黄酮研究的深入，国内外对黄酮的研究也越来越重视，本文旨在研究黄酮类化合物的提取分离工艺，为选择合适的方法提供参考依据。通过对比黄酮类化合物传统及新型方法的总黄酮提取率发现，新型提取方法相对于传统提取法而言提取率具有明显优势，但新型提取技术对原料、设备、处理要求也相应提高，目前国内外研究相对偏少。 关键词：黄酮类化合物；微波提取；超临界流体萃取法 黄酮类化合物是一类存在于自然界的、具有2-苯基色原酮结构的化合物，泛指两个苯环通过三个碳原子或一个吡喃环或吡喃环连接而成的化合物，主要包括：黄酮和黄酮醇类、二氢黄酮和二氢黄酮醇、异黄酮类及二氢异黄酮类、查尔酮和二氢查耳酮类及花青素类等[1]。黄酮类化合物属植物次生代谢产物，在植物体内大部分与糖结合成苷类，小部分以苷元的形式存在，具有多种生物活性，有抗炎、抗氧化、抗肿瘤、抗衰老等药理活性，在医药、保健食品等行业中均有广泛的开发利用。对黄酮类化合物的提取有传统的超声波提取法等；以及新型的：微波提取法、超临界流体萃取法、双水相萃取法等。 1传统提取方法 1.1超声波提取法 超声波空化作用使植物细胞壁及整个生物体破裂，这样有利于黄酮类化合物的释放和溶出，另一方面可加速提取液的分子运动，使得提取液和苎麻叶中的黄酮类化合物快速接触，相互溶合、混合，此外超声波热效应也有利于水溶作用，有效缩短了提取时间。贺波[2]以“华苎4号”苎麻叶为原料，采用超声辅助提取法,通过单因素及正交实验,得出最佳的提取工艺条件是：液固比30:1,乙醇浓度70%,超声功率60W,超声时间30min,超声温度60℃,提取一次。在此工艺条件下苎麻叶中黄酮类化合物得率为4.94%。2新型提取方法 2.1微波提取法 微波提取法是微波转化成热能使细胞内部温度上升，当细胞内部压力超过细胞壁的承受能力，细胞破裂，其有效成分流出，在较低的温度条件下萃取介质捕获并溶解。此外，微波产生的电磁场还能加速被萃取部分成分向萃取溶剂界面扩散速率，缩短萃取组成的分子由物料内部扩散到萃取溶剂界面的时间。张海慧等[3]以黑穗醋栗为试材，进行单因素实验，在此基础上设计了四因素三水平正交试验。最后确定了微波辅助法提取黑穗醋栗黄酮的最佳条件为：以95%乙醇为溶剂，微波功率500W，微波65℃，提取8min，液料比10:1，此时提取率可达到0.738mg/g。张鹏等[4]通过实验得出银杏黄酮微波提取的最佳条件为乙醇浓度50%，料液比1:25，回流温度70℃，微波时间120s，在此条件下总黄酮提取率为11.02%。与传统方法相比，微波提取法具有省时、节约溶剂、提取率高等优点，有较大的推广价值。 2.2超临界流体萃取法 超临界流体萃取分离过程的原理是利用超临界流体的溶解能力与其密度的关系，即利用压力和温度对超临界流体溶解能力的影响而进行的。在超临界状态下，将超临界流体与待分离的物质接触，使其有选择性地把极性大小、沸点高低和分子量大小的成分依次萃取出来。余青等[5]采用单因素与正交试验对超临界CO2萃取具乌饭树叶总黄酮的工艺进行了研究，结果表明，最佳提取条件为：萃取压力18MPa，萃取时间1.5h，萃取温度50℃，夹带剂乙醇浓度75%，CO2流量20kg/h，夹带剂添加量5mL/g在此条件下乌饭树叶总黄酮平均提取率为73.10%（n=3，RSD=3.58%）。谢建华等[6]利用响应面发优化超临界CO2萃取苦瓜总黄酮的工艺参数,在实验的基础上,确定最佳工艺条件:以无水乙醇为夹带剂1.0mL/g，萃取压力33.4MPa，萃取温度46℃，萃取时间53.2min。此条件下苦瓜总黄酮提取率达到84.3%。超临界流体萃取技术萃取速度快，提取率高，流程简单，且对生物活性保留较好，具有一定的应用价值。 除以上的提取方法外，还有双水相萃取分离、双水相—超声耦合、超声—酶法耦合、酶法—高压脉冲电场耦合等技术。总的来说，传统提取方法的总黄酮提取率基本在5%左右，而新型提取方法的提取率在10%以上（有的甚至可达80%-90%），相对于传统提取法而言，新型提取方法的提取率具有明显优势，但对新型提取技术对原料、设备、处理要求也相应提高，目前国内外研究相对偏少。3展望 黄酮类化合物分布范围广、种类多，黄酮类化合物的保健品也早在二十世纪八十年代末就引起国际医药界的注意，而且大部分毒理学研究提示其一般无毒，近年来此类化合物一直是生化制药、保健品生产方面的热门之一，在最近上市的保健产品中也有很大一部分其主要功效成分就属于黄酮类化合物，其涉及的功能食品也很多。最近由于心血管疾病、癌症等疾病死亡人数呈快速增长，而黄酮对心血管系统及防癌抗癌有一定的作用，许多国家和地区正在开发相关的产品，前景较好。由于黄酮类化合物可能存在几种不同的作用机制与合成途径，有些实验结果的解释可能依然存在不足之处。因此今后黄酮类化合物的研究还需要关注的是生物利用度、代谢动力学、体内的氧化损伤及长期服用产生的慢性后果等方面[7]。开发出更加可靠、令人信服的模型或系统，以此来精确评估黄酮类化合物在人体内的代谢作用是非常必要的。 参考文献 [1] TAYLOR L P,GROTEWOLD E. Flavonoids as developmental regulatoes [J].Current Opinion in Plant Biology,2005,3(8)：317-323. [2] 贺波.苎麻叶中黄酮的提取、分离纯化、结构及抗氧化活性研究[D].武汉:华中农业大学硕士学位论文,2010. [3] 张海慧.微波辅助法提取黑穗醋栗中黄酮类物质的研究[J].东北农业大学学报,2008.39(9):32-35. [4] 张鹏.银杏叶黄酮的微波提取及抗氧化性研究[J].安徽农业科学,2009,37(12):5496-5497,5730. [5] 余青,郑小严,黄红霞,等.超临界CO2萃取乌饭树叶总黄酮的工艺[J].2009,38(01):97-102. [6] 谢建华,单斌,彭云.超临界CO2流体萃取苦瓜总黄酮工艺及其抗氧化活性[J].2010,08(1):66-71. [7] 佟永薇.黄酮类化合物提取方法的研究及展望[J].食品研究与开发,2008,29(7):188-190.

溶剂提取法提取银杏叶中得黄酮实验报告

溶剂提取法提取银杏叶中得黄酮实验报告 小组成员：周璟、胡静、左兵华、刘云飞 2014年5月一、实验目的 ⅰ）掌握传统的溶剂提取法并对银杏中的黄酮进行提取 ⅱ）掌握紫外分光光度计的应用，以及origin软件绘图的基本操作ⅲ）学会自主设计实验，培养团队合作精神 二、实验原理 ⑴关于黄酮：银杏中最具药用价值的成分，有提高人体免疫力的作用；并且抗衰老、调节内分泌，还具有抗炎、抗真菌的作用； ⑵实验需设置空白参比液，由文献资料可知芦丁标准液的最大波长大概为510nm; ⑶本实验采用硝酸铝（氯化铝）法测定银杏叶总黄酮的质量浓度，因 为黄酮类化合物可以与铝盐发生络合显色反应。 其主要原理为：在中性或弱碱性及亚硝酸钠存在的条件下，黄酮类化合物与铝盐发生螯合反应，加入氢氧化钠溶液后，溶液显橙红色，在510nm（左右）处有吸收峰，且符合定量分析的朗伯—比尔定律（即A=kbc）一般与芦丁标准溶液比较定量。先用亚硝酸钠还原黄酮类化合物，再加铝盐络合，最后加氢氧化钠溶液使黄酮类化合物开环，生成2-羟基查尔酮而显色。显色原理发生在黄酮醇类邻位无取代的邻二

酚羟基部位，不具有邻位无取代的邻二酚羟基的黄酮类成分加入上述试剂时是不显色的。（如二氢黄酮类化合物就不发生该显色反应） 三、实验药品及仪器 ⑴药品：银杏叶（阴干碾碎储藏备用），芦丁，无水乙醇，亚硝酸钠，氯化铝和氢氧化钠； ⑵仪器：电子天平，旋转蒸发仪，索氏提取器，uv-1800型紫外分光光度计，研钵，比色皿，容量瓶（10ml*6,50ml*1,100ml*2），移液管，量筒，烧杯，玻璃棒。 四．实验步骤 Ⅰ）配制60%的乙醇溶液（黄酮同时具有水溶和油溶性）。 Ⅱ）准确称取10g银杏叶粉末置于索氏提取器中，加入60%的乙醇溶液10ml，回流提取3h，然后用旋转蒸发仪浓缩并回收乙醇溶液，抽滤得到银杏叶黄酮粗提物。再用60%的乙醇定容到100ml。 Ⅲ）芦丁标准液的配置：准确称取芦丁标准品0.005g，用60%的乙醇溶液加热溶解，并转移到50ml容量瓶内用乙醇溶液定容，摇匀，得质量浓度为0.1mg/ml的芦丁标准液。 Ⅳ）分别吸取上部配制的母液0.0,1.0,2.0,3.0,4.0,5.0ml于6只10ml容量瓶中摇匀，先加入5%的亚硝酸钠0.5ml摇匀，静置6min，再加入10%的氯化铝溶液0.31ml，摇匀，静置6min，再加入4%的氢氧化钠溶液4ml，用60%的乙醇溶液定容到10ml，放置20min。其中，加入

车前草的妙用

车前草的妙用（附民间痛风偏方大全） 车前草——性味和功用甘，寒，归手太阳，阳明经。利水，清热，明目，祛痰，用于小便不通，淋浊，带下，尿血，黄疸，水肿，热痢泄泻，鼻衄，目赤肿痛，喉痛，咳嗽，皮肤溃疡。 《本经逢原》："若虚滑精气不固者禁用。" 车前草可食用，部位：嫩叶及种子；调理法：鶣采嫩叶洗净，先以沸水汤过一遍，再行炒食。鹍采收种子，可煮成糜粥或制酱食用。 车前草药理作用：有利尿作用，并能增加尿素尿酸的排泄。能作用支气管分泌物增加呼吸运动变缓而有祛痰止咳作用。 车前草治疗痛风性关节炎： 取干车前草30-60克，鲜者加倍，水煎2次服用，每日1剂，连续服用，服药后分别于用药12-15天内症状缓解。为防治复发，以后每隔20天服药10-15剂，未再复发。 民间绝妙验方： ？ 治痛风验方一：用乌龟壳（*）15克，黑木耳10克，煎成一碗汤一次服下，一日二次，连服5~7天，忌动物内脏、鲤鱼、酸物。 ？ 治痛风验方二： ？ 1、车前子30克(布包)，加水500毫升，浸泡30分钟后煮沸，代茶频饮，每日1剂。可增长尿量，促进尿酸排泄。 ？ 2、金钱草60-120克，水煎服，每日1剂。可增长尿酸排泄，降低血尿酸，防止痛风石形成，用于痛风缓解期。 ？ 3、水煎葛根防痛风：生葛根50-100克，水煎代茶饮，可预防痛风复发。 4、硫磺软膏冰硼散治痛风：取冰硼散与硫磺软膏各1支，调匀后外敷于患处，可活血解毒通络。合用于痛风关节红肿痛苦悲伤，行走不便，每日用药1次，一般施用3-5日即可止痛。

5、治尿酸过高症方：鲜丝瓜1条(200克摆布)，洗净，勿去皮，切块；鲜艾草60克，切细。将艾草置于碗底，丝瓜置于艾草上边，入锅隔水炖熟，饮汤即可。每日1次，以愈为度。 6、常饮金钱草车前草茶治痛风病：将金钱草、车前草的干品(国药铺有售)各15克，每天早上加水煮沸后代茶饮。痛风病会逐渐减缓，直至痊愈。金钱草与车前草历来是利尿、排石的经常使用药物，可促进尿酸排泻，按捺以及清除尿酸盐结晶，从而达到疗治痛风的目的，对早期痛风患者有效。 治痛风验方三：栀子蛋清外敷治痛风：栀子25克，鸡蛋清1个，用高度烧酒调成糊状，敷在痛处，外面用纱布包好，每日换一次，一般2至3天即可见效，无任何副效用。敷药后局部皮肤有可能变黑，但无疼痒，不破溃。以上剂量可敷一个痛处，如痛苦悲伤部位多，可酌增剂量。敷药时期，少吃海鲜以及啤酒。 治痛风验方四： 1、山慈菇30克，水煎服。本品含有眼睛仙碱成分，能有效地缓解痛风发作，用于痛风发作期。 2、土茯苓30克，水煎服。用于痛风发作期暖以及解期，能够增长尿酸排泄，降低血尿酸。 民间绝妙药方： (1)祛风活血方 药物组成：羌活9g，独活9g，桂枝9g，当归12g，荆芥9g，防风9g，秦艽9g，路路通9g，川红花9g。 功效：祛风活血，通络止痛。 主治：风湿阻滞，关节、肌肉，筋络酸痛，活动限制。 用法：煎水熏洗患处，每日2～3次。 (2)羊桃淋蘸方

黄酮提取工艺

黄酮提取工艺 2-1 微波辅助提取金银花总黄酮工艺流程图 3.实验方法 3.1 标准曲线的制备 3.1.1最大吸收波长的选择方法 以亚硝酸钠、硝酸铝和氢氧化钠为显色剂，分别作各样品提取液以及芦丁标准品的吸收曲线，在510nm处均有1个强吸收峰，因此选择510nm为测定波长。 3.1.2对照品溶液的制备方法 精密称取芦丁对照品10.2mg置50mL容量瓶中，加适量甲醇溶解，并稀释至刻度，摇匀备用。 3.1.3 标准曲线的制备 精密量取对照品溶液0，1，2，3，4，5mL，分别置10mL容量瓶中，加入5%亚硝酸钠溶液0.3mL，振荡摇匀，放置6min；再加入10%硝酸铝0.3mL，振荡摇匀，放置6min；最后加入4%氢氧化钠试液4mL，加甲醇定容至刻度，摇匀，放置15min。采用分光光度法，在510nm处测定吸光度，以对照品量（mg/mL）为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。

3.2 微波提取单因素实验方法 分别考察不同的微波辐射功率,辐射时间,乙醇浓度,固液比对提取效果的影响 3.3 提取工艺正交试验设计方法 系统考察微波提取法的工艺参数，根据已有的资料及实际情况，选用微波辐射功率（A），辐射时间（B），乙醇浓度（C），固液比（D）作为考察因素，以测得的浸提取样品中总黄酮含量为考察指标，选用L9（34）正交表设计，得到供试液。 3.4微波辅助提取法与乙醇回流法比较 比较两种提取方法的处理时间和液固比对总黄酮提取量的影响。传统乙醇回流法提取总黄酮的所需时间比微波辅助提取法提取长得多，且金银花总黄酮提取量比较低;而微波辅助提取的总黄酮较乙醇回流法高。比较此两种方法在最佳条件下的总黄酮含量。 3.5总黄酮含量测定方法 取0.5mL液，加入5%亚硝酸溶液0.3mL荡摇匀，放置6min加入10%硝酸铝0.3mL荡摇匀，放置6min入4%氢氧化钠试液4mL，30%（V/V）乙醇定容至刻度，摇匀，放置15min分光光度法，在510nm定吸光度值由标准曲线计算得总黄酮含量。 4. 结果 4.1 标准曲线绘制 表4-1 标准曲线表 编号 0 1 2 3 4 5 芦丁浓度 0 0.02 0.03 0.05 0.07 0.09 （mg/mL） 吸光度 0 0.206 0.381 0.548 0.738 0.911 （OD）

黄酮实验报告

学院：化学化工学院 专业：生物工程 学生姓名：张文实 目录 摘要 (2)

1 绪论 (3) 2 实验原理 (3) 3 实验仪器和药品 (4) 3.1 实验仪器 (4) 3.2 实验药品 (4) 4 实验过程 (4) 4.1 侧柏叶中黄酮的提取及定性分析 (4) 4.2 侧柏黄酮洗发香波的配制及性能定 (6) 4.3 侧柏黄酮雪花膏的配制及性能测定 (7) 5 结果与讨论 (7) 5.1 侧柏叶中黄酮的含量 (7) 5.2 侧柏叶黄酮提取物的紫外—可见分析 (8) 5.3 洗发香波和雪花膏的性能测定 (9) 6 结论 (10) 参考文献 摘要

采用超声波法和索氏提取法从侧柏叶中提取黄酮类化合物。芦丁中也含有黄酮类化合物，根据不同溶度的黄铜提取液对应不同的吸光度，作出标准曲线，得出吸光度关于浓度的方程，然后再测得侧柏提取液的吸光度，根据方程计算黄酮类化合物的含量。黄酮类化合物主要用于激活毛母细胞和促进血液循环，使毛发生长能力衰退的毛囊复活和促进血液循环后补充营养成分而发挥出养发、生发的作用。去屑止痒的机理在于抑制头发表皮细胞蜕化的速度，延迟脱落，减少脂溢性皮肤病的产生。因此，广泛应用于洗发香波的制备中。同时它还有很好的美白效果，可添加到雪花膏中。 关键词：侧柏；黄酮类化合物；洗发香波；雪花膏 1 绪论

侧柏(Platycladus orientalis)系柏科侧柏属常绿乔木，别名扁柏、香柏、片柏、片松。喜生于湿润肥沃的山坡[1]，分布于全国大部分地区。现代医学研究证明，侧柏叶对肺炎双球菌、金黄色葡萄球菌、宋内氏痢疾杆菌有明显的抑制作用，能缩短出血和凝血时间，对肺炎、痢疾、高血压等多种疾病有一定的疗效。侧柏叶的疗效作用主要是通过存在其中的黄酮类物质起作用的。 黄酮类化合物（flavonoids）是一类存在于自然界的、具有2-苯基色原酮（flavone）结构的化合物。它们分子中有一个酮式羰基，第一位上的氧原子具碱性，能与强酸成盐，其羟基衍生物多具黄色，故又称黄碱素或黄酮。黄酮类化合物在植物体中通常与糖结合成苷类，小部分以游离态（苷元）的形式存在。绝大多数植物体内都含有黄酮类化合物，它在植物的生长、发育、开花、结果以及抗菌防病等方面起着重要的作用。最初，这类物质的粗制品仅作为染料应用，20世纪20年代，国外把槲皮素、芦丁用于临床后，才引起人们的关注。60年代末，人们发现黄酮类化合物有抗炎、抗病毒、利胆、强心、镇静和镇痛等作用。到70年代，又发现它们有抗氧化、抗衰老、免疫调节和抗肿瘤等作用。 此外，黄酮还有明显的美白功效，其美白功效的药理作用主要在于抑制酪氨酸酶的活性，从而抑制黑色素的合成。侧柏叶总黄酮作为美容护肤化妆品的添加剂，具有药性稳定，药力持久，对皮肤作用温和、刺激性小、安全性高、疗效显著等特点。将其制成水包油型的乳化产品，安全性好，使肌肤自然、美白亮泽[2]。且成本低廉，原料易得，又不会产生副作用，顺应了国际化妆品天然化、营养化、疗效化的发展趋势，具有广阔的市场前景。在雪花膏中加入侧柏叶提取液组分，与表面活性剂等配制成美白雪花膏，是一种兼具美白、保湿功效和调理性能的天然植物功能性雪花膏。同时，黄酮类化合物主要用于激活毛母细胞和促进血液循环，使毛发生长能力衰退的毛囊复活和促进血液循环后补充营养成分而发挥出养发、生发的作用[3]。广泛用于洗发香波的生产中。 2 实验原理

郑清莲教授妙用三仁汤的经验

郑清莲教授妙用三仁汤的经验 发表时间：2015-10-08T16:36:23.920Z 来源：《中医学报》2015年6月第30卷供稿作者：蔡云刘昳[导读] 西安交通大学医学院第一附属医院郑清莲教授，博士生导师，陕西省名中医，全国第五批老中医药专家学术经验继承工作指导老师。 蔡云刘昳 西安交通大学医学院第一附属医院陕西西安 710061 【摘要】目的：名中医郑清莲教授妙用三仁汤的经验。方法：跟师临证学习，对三仁汤的临床应用进行分析。结果：三仁汤是治疗上中二焦湿热证的要方，可根据不同主症加味，以达到清热利湿、疏通三焦、调理气机、健脾利小便之效。。 【关键词】三仁汤；名医经验 【中图分类号】R289.6 【文献标识码】B 【文章编号】1674-8999（2015）6-0001-02 郑清莲教授，博士生导师，陕西省名中医，全国第五批老中医药专家学术经验继承工作指导老师。陕西中医学院毕业后，又师承于全国首批有独到专长的老中医专家刘茂甫教授，从事中西医结合治疗工作30余载，对临床应用三仁汤治疗湿热证有较深刻的认识，积累了丰富的临床经验。现就跟师学习期间，郑老师应用三仁汤治疗湿热证的经验进行总结，与同道共享。 郑老师熟读《温病条辨》，深领三仁汤方义，临证善于把握三焦辨证论治要领，灵活运用三仁汤治疗内科杂证取得良好疗效。三仁汤出自吴鞠通《温病条辨?上焦篇》，原文：“头痛恶寒，身重疼痛，舌白不渴，脉弦细而濡，面色淡黄，胸闷不饥，午后身热，状若阴虚，病难速已，名曰湿温。汗之则神昏耳聋，甚则目瞑不欲言，下之则洞泄，润之则病深不解。长夏、深秋、冬日同法，三仁汤主之。”“三仁汤方：杏仁五钱，飞滑石六钱，白通草二钱，白蔻仁二钱，竹叶二钱，厚朴二钱，生薏仁六钱，半夏五钱。甘澜水八碗，煮取三碗，每服一碗，日三服。”书中并没有对三仁汤做详细方解，只是指出“惟以三仁汤轻开上焦肺气，盖肺主一身之气，气化则湿亦化也”。叶天士也说:“治湿不用燥热之品,皆以芳香淡渗之药,疏肺气而利膀胧,此为良方。”(《临症指南医案?湿)。湿气弥漫，闭阻阳气，病位偏于肺表，治疗重在轻开宣化。主要病邪为“湿”，治疗目的为祛“湿”。治疗手段为“气化”，通过“气化”以达“湿化”。当代方书对本方的解读，多从以药解方的角度，认为本方有“宣上、畅中、渗下”之功。如秦伯未[1]在《谦斋医学讲稿》中指出：“三仁汤为湿温证的通用方。它的配合，用杏仁辛宣肺气，以开其上；蔻仁、厚朴、半夏苦辛温通，以降其中；苡仁、通草、滑石淡渗湿热，以利其下。虽然三焦兼顾，其实偏重中焦。”《中医治法与方剂》一书中也说：“方中杏仁辛开苦降，开肺气，启上闸；蔻仁芳香化浊，与厚朴、半夏同用燥湿化浊之力颇强；苡仁、滑石、通草皆甘淡渗湿之品，使湿邪从下而去；用竹叶、滑石略事清热，数药合用，则辛开肺气于上，甘淡渗湿于下，芳化燥湿于中。” 此方宣肺之力较胜,故尤适于湿在上焦。郑老师则认为：吴鞠通创立的三仁汤方包涵了清热利湿、疏通三焦、调理气机、健脾利小便等治疗湿温病的普遍治疗法则，其治疗范围实在远不止于上焦卫气分湿温病一证。因此对于急慢性胃肠炎、痤疮、汗证、黄疸等病症, 病位在中上二焦的均以其加减论治。 对于急慢性胃肠炎湿热阻滞中焦,挟食，症见胃脘闷痛较甚，嗳腐，有饮食不调史，加入鸡内金、炒麦芽；对于呕吐较剧者,三仁汤和胃止呕之力稍逊，加入生姜、半夏；对于腹胀、纳呆者，加入莱菔子、干姜；对于大肠气机不畅所致便溏或便秘，此便秘多为先硬后塘，以大便困难，大便时间长为特征，苔黄厚腻者，可在方中加入莱菔子、白术、大黄。典型病例； 孙某，男，36岁，以“胃脘闷痛半年，加重2周” 主诉就诊，1年来饭后胃脘胀闷，甚则闷痛，未就医，自服健胃消食片等可减轻，2周来胃脘胀闷痛不适，饭后加重，嗳腐，无泛酸，服药无效，伴腹胀、纳呆，便溏粘滞不爽，口粘，口干，舌红苔黄腻，脉滑。给予三仁汤加味(杏仁6g 生薏仁15g 蔻仁6g 滑石10g 竹茹6g 生草6g 厚朴9g 通草6g 莱菔子12g 干姜6g 生芪30g白术12g鸡内金15g 麦芽15g 公英30g)，服药3剂症状即明显减轻，再服10剂而愈。 对于痤疮等属湿热者，加入车前子、公英、生芪。 典型病例； 张某，女，22岁，以“面部痤疮2年”就诊，2年来面部痤疮，逐渐增多，色红，部分可见脓点，伴口粘，自汗，月经不规律，多梦，手足心热，余无不适。舌淡红，苔白腻，脉弦。给予三仁汤加味(杏仁6g 生薏仁15g 蔻仁6g 滑石10g 竹茹6g 生草6g 厚朴9g 通草6g 莱菔子12g 公英30g 丹参30g 生芪30g 车前草15g 鱼腥草30g)，并配合知柏地黄丸治疗。该例患者初诊时面部大量痤疮，部分有脓点，面红，口粘，苔腻脉弦，一派湿热之征，而热盛伤阴，同时伴有手足心热、多梦之阴虚火旺之象。故以三仁汤清热利湿，更加公英、鱼腥草以增清热之功，车前草以利湿，生芪以托毒排脓。服药20剂，面部痤疮基本消失。治疗湿热汗证，则加入浮小麦以敛汗，汗出过多，则再酌加麦冬以防汗多伤阴。典型病例： 陈某，男，30岁，以“汗出2月”主诉就诊，2月来汗出明显，汗出如水，以活动、进食、进水等后更甚，伴口干、口粘，头油多，面部潮红，余无不适，舌红苔黄腻，脉滑。给予三仁汤加味(杏仁6g 生薏仁15g 蔻仁6g 滑石10g 竹茹6g 生草6g 厚朴9g 通草6g 浮小麦30g 麦冬12g 生芪30g)。服药7剂后，汗出减少，伴随症状消失，舌淡红，苔薄黄微腻，脉微滑，后再诊服药14剂而愈。上中二焦湿热证用三仁汤，本方原意治疗重在轻开宣化，通过“气化”以达“湿化”，故清热之力薄弱。郑老师临证若见舌红苔黄腻，脉滑数属湿热俱重者，加入黄芩、二花、鱼腥草等清热药，热象愈重加入愈多。故郑清莲教授认为三仁汤是治疗上中二焦湿热证的要方，可根据不同主症加味，以达到清热利湿、疏通三焦、调理气机、健脾利小便之效。 参考文献 [1] 秦伯未，谦斋医学讲稿，上海科学技术出版社，2009 [2] 陈潮祖，中医治法与方剂，人民卫生出版社，2009

天然药物化学实验报告(槲皮素的提取与鉴别)

天然药物化学实验报告 一、实验题目：槐米中槲皮素的提取分离及结构鉴定 二、实验目的: 通过对该选题进行资料查阅、方案设计、试验、结果分析等，让我自己学到一套系统、完整的槐米药效成分芦丁和槲皮素进行基源鉴定、提取、分离和结构鉴定的方法，并通过此项训练，提高自己的动手操作能力及综合运用自己所学知识的能力，培养自己独立思考、分析问题、解决问题的能力。 掌握槐米中槲皮素的提取及提取方法 了解槲皮素的药理作用及应用价值 掌握槲皮素的纯度检测 掌握槲皮素的结构鉴定的方法 三、实验基本原理： 本实验主要利用黄酮类化合物虽然有一定的极性，可溶于水，但却难溶于酸性水，易溶于碱性水，故可用碱性水提取，再将碱水提取液调成酸性，黄酮苷类即可沉淀析出。以槐米为原料，采用煎煮法提取槐米有效成分芦丁，然后酸溶液水解获得槲皮素粗品，乙醇重结晶获得槲皮素精品。 四、实验所用试剂、仪器的型号及生产厂家： （一）实验试剂，见下表： 序号名称数量规格生产厂家 1 95%乙醇溶液25ml 500ml／瓶 AR 天津天力 2 浓H2SO4 12ml 500ml／瓶 AR 天津天力 3 甲醇10ml 500ml／瓶 AR 天津天力 4 无水乙醇43ml 500ml／瓶 AR 天津天力 5 纯净水1500ml 18L/桶万家纯水 6 硅胶GF254 30g 500g／瓶 青岛海浪 薄层层析

（二）实验仪器，见下表： 序号名称数量型号生产厂家 1 电子天平1台IM-B200 2 余姚市纪铭称量校验设备有 限公司 2 圆底烧瓶1个GG-17 1000ml 蜀牛 3 烧杯1个GG-17 1000ml 蜀牛 4 烧杯1个 GG-17 500ml 环球 5 烧杯1个GG-17 250ml Jing Xing 6 量筒1个100ml BOMEX 7 量筒1个10ml 旌湖 8 直型冷凝 管 1个BOMEX 9 75?弯管1个 10 橡胶管2条 11 移液管1个10ml 12 玻璃棒1个直径7mm 长40cm 高邮亚泰 13 尾接管1个BZ24129 HENG TAJ 14 布氏漏斗1个 15 抽滤瓶1个GG-17 500ml 蜀牛 16 滤纸1张 17 玻璃漏斗1个 18 研钵1套 19 胶头滴管1个 20 薄层板10个 21 展开缸1个P-1 100×100 上海信谊仪器 厂 22 紫外光谱 仪 1台 UV-8三用紫外分 析仪 无锡科达仪器 厂 23 熔点测定 仪 1台 X-6显微熔点测定 仪 北京泰克仪器 有限公司 24 真空泵1台SHD-III型循环水 式多用真空泵 保定高新区阳 光科教仪器厂 25 电热套1台98-1-C型数字控 温电热套 天津市泰斯特 仪器有限公司