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苹果酸脱氢酶(MDH)检测试剂盒(OAA比色法)

苹果酸脱氢酶(MDH)检测试剂盒(OAA比色法)
苹果酸脱氢酶(MDH)检测试剂盒(OAA比色法)

苹果酸脱氢酶(MDH)检测试剂盒(OAA比色法)

简介:

苹果酸脱氢酶(Malate Dehydrogenase,MDH)是合成苹果酸的关键酶之一,催化苹果酸和草酰乙酸(OAA)的相互转化,参与众多生理代谢途径如TCA循环C4循环脂肪酸的氧化呼吸作用氮同化等,因此MDH在植物的生长发育中发挥着重要作用,广泛存在于线粒体、细菌细胞膜上,为三羧酸循环中的一种酶,由于酶的来源不同,其某些性质也不尽相同。MDH在细胞多种生理活动中扮演着重要的角色,包括线粒体的能量代谢、苹果酸-天冬氨酸穿梭系统、活性氧代谢和抗病性等。根据不同的辅酶特异性,MDH分为NAD-依赖的MDH和NADP-依赖的MDH,细菌中通常只含有NAD-MDH,在真核细胞中,NAD-MDH 分布于细胞质和线粒体中。

Leagene苹果酸脱氢酶(MDH)检测试剂盒(OAA比色法)检测原理是在弱碱条件下,以草酰乙酸(OAA)作为显色底物,OAA在MDH催化下被NADH还原为苹果酸(Mal),每催化1分子OAA消耗1分子NADH,通过分光光度比色法(分光光度计)测定吸光度的变化,计算出NADH的消耗速率进一步推算出苹果酸脱氢酶活性水平。该试剂盒主要用于检测植物样本、血清等中苹果酸脱氢酶活性。该试剂盒仅用于科研领域,不宜用于临床诊断或其他用途。

组成:

自备材料:

1、研钵或匀浆器

2、离心管或试管

3、低温离心机

4、比色杯

5、分光光度计

操作步骤(仅供参考):编号

名称TE0463

50T

Storage

试剂(A):MDH Lysis buffer250ml4℃避光试剂(B):PMSF1ml-20℃

试剂(C):MDH Assay buffer100ml RT

试剂(D):NADH1支-20℃

试剂(E):ddH2O10ml RT

使用说明书1份

1、配制MDH Lysis buffer工作液:取出MDH Lysis buffer和PMSF,恢复至室温,MDH

Lysis buffer:PMSF按一定比例混合,混匀,即配即用,不易久置,否则白酶抑制剂PMSF的效率会有所下降。

2、准备样品:

①植物样品:取植物组织(根系)清洗干净,切碎,植物组织:MDH Lysis buffer工作液按一定的比例,加入预冷的MDH Lysis buffer工作液,冰浴情况下充分匀浆或研磨。离心,留取上清液即为苹果酸脱氢酶粗提液。短期4℃保存待用,长期-20℃冻存待用。

②血浆、血清和尿液样品:血浆、血清按照常规方法制备后可以直接用于本试剂盒的测定,冻存,用于苹果酸脱氢酶的检测。

③细胞或组织样品:取恰当细胞或组织裂解液,如有必要用MDH Lysis buffer工作液进行适当匀浆,离心,取上清液,冻存,用于苹果酸脱氢酶的检测。

④高活性样品:如果样品中含有较高活性的苹果酸脱氢酶,可以使用MDH Lysis buffer 工作液进行恰当的稀释。

3、配制NADH工作液:取出NADH,恢复至室温,准确溶解于ddH2O,混匀,4℃预冷

备用。-20℃保存1周有效。

4、MDH加样:按照下表设置对照管(备选,一般可以不设对照管)、测定管,溶液应按照

顺序依次加入,并注意避免产生气泡。如果样品中的苹果酸脱氢酶活性过高,可以减少样品用量或适当稀释后再进行测定,样品的检测最好能设置平行管。

加入物(ml)对照管(备选)测定管

MDH Lysis buffer0.025—

待测样品—0.025

MDH Assay buffer 1.8 1.8

5、MDH测定:加入NADH工作液,立即以分光光度计(1cm光径比色杯)测定吸光度(记

为A0)并同时计时,每隔30s测定一次吸光度,其中至1min时吸光度记为A1,记录其变化。Leagene建议加入NADH工作液后立即检测,加样时间越短越好,其反应基本在1-3min内,其后反应趋于平缓。

注意:该反应系统是利用速率变化,求得相应OD的变化,进而推算出NADH的消耗速率,再进一步推算出苹果酸脱氢酶的量。因此加入NADH工作液立即计时很重要,每次检测指标不宜过多,否则有可能由于操作时间有差异进而导致结果偏差。

计算:

苹果酸脱氢酶活性定义:每分钟NADH氧化吸光度变化0.01为1个酶活力单位。

液体样品MDH(U/ml·min)=ΔA/(0.01×t×0.025)

式中:ΔA=A0?A1(如有必要,可再减去对照最初1min的吸光度变化量)

0.01=每分钟NADH氧化吸光度变化0.01为1个酶活力单位

t=1=检测时间(min)

0.025=待测样品体积(ml)

组织样品MDH(U/g·min)=ΔA/(0.01×t×W)

式中:ΔA=A0?A1(如有必要,可再减去对照最初1min的吸光度变化量)

0.01=每分钟NADH氧化吸光度变化0.01为1个酶活力单位

t=1=检测时间(min)

W=待测样品鲜重或干重(g)

组织或植物粗酶液获得率(ml)=上清液体积(ml)/组织或植物质量×100%

注意事项:

1、实验材料应尽量新鲜,如取材后不立即使用,应存于-20-80℃。

2、待测样品中不能含有磷酸酶抑制剂,同时需避免反复冻融。

3、如果没有分光光度计,也可以使用普通的酶标仪测定,但应考虑酶标仪的最大检测体

积。

4、该反应系统是利用速率变化,求得相应OD的变化,进而推算出NADH的消耗速率,

再进一步推算出苹果酸脱氢酶的量。因此加入NADH工作液立即计时很重要,每

次检测指标不宜过多,否则有可能由于操作时间有差异进而导致结果偏差。

5、酶液的稀释度应尽量控制在A340/min下降范围在0.1-0.2之间,以便减少实验误差。

6、ΔA为反应最初1min内吸光度变化的绝对量,如有必要可减去对照液最初1min的吸

光度变化量。

7、所测样本的浓度过高,应用MDH Lysis buffer工作液稀释样品后重新测定。

有效期:6个月有效。

相关:

编号名称

DF0135多聚甲醛溶液(4%PFA)

NR0001DEPC处理水(0.1%)

PS0013RIPA裂解液(强)

TO1013丙二醛(MDA)检测试剂盒(TBA比色法)

色度铂钴标准比色法

色度 (铂钴标准比色法) 方法原理 用氯铂酸钾与氯化钴配成标准系列,与水样进行目视比色。 干扰及消除 如水样浑浊,则放置澄清,也可用离心法或用孔径为0.45滤膜过滤以去掉悬浮物。但不能用滤纸过滤,因滤纸可吸附部分溶解于水的颜色。 仪器 50ML具塞闭塞管,其刻线高度应一致。 试剂 铂钴标准溶液:称取1.246g氯铂酸钾K2PCL6(相当于500铂)及1.000氯化钴 步骤 标准色列的配置: 向50ML比色管中加入0、0.5、1.00、1.50、2.00、2.50、3.00、3.50、4.00、4.50、5.00、6.00及7.000铂钴标准溶液,用水稀释至标线,混匀。各管的色度依次为5、10、15、20、25、30、35、40、45、50、60和70度。密封保存。 水样的测定: 1、分取50.0ML澄清透明水样于比色管中,如水样色度较大,可酌情少取水样,用水稀释至50.0ML。 2、将水样与标准色列进行目视比较。观测时,可将比色管至于白瓷板或白板上,使光线从关底部向上透过液柱,目光自管口垂直向下观察。记下与水样色度相同的铂钴标准色列的色度。 计算 色度=A×50/B 式中: A------稀释后水样相当于铂钴标准比色法的色度 B------水样得体积(ML) 注意事项 可用重铬酸钾代替氯铂酸钾配置标准色列。方法是:称取0.0437g重铬酸钾 和1.000g硫酸钴(CoSo 4.7H 2 O)溶于少量水中,加入0.50ml硫酸,用水稀释至 500ml。此溶液的色度为500度。不宜久存, 如果样品中有泥土或其它分散很散狠细的悬浮物,虽经处理而得不到透明水样时,则只测“表面颜色”。

唾液酸酶法与常规镜检法的临床应用比较

唾液酸酶法与常规镜检法的临床应用比较 摘要:目的通过唾液酸酶检测法和白带常规镜检法的结果进行对比分析,探讨唾液酸酶法在细菌性阴道病(BV)中的诊断价值,为临床快速诊断BV提供可靠的方法。方法将480例患者按年龄分为四组(50岁),同时应用唾液酸酶法和常规镜检法检测,对比分析结果。结果唾液酸酶法的阳性率为17.91%,白带常规镜检法的阳性率8.75%,两种方法检测细菌性阴道病的阳性率的比较,差异有统计学意义(P50岁组的阳性率为最高(25.68%)。结论唾液酸酶法操作简便、快速,提高了阳性检出率和准确度,适合临床推广。 关键词:细菌性阴道病;阴道分泌物;白带常规镜检法;唾液酸酶法 Abstract:Objective To investigate the significance of sialidase test in diagnosis of bacterial vaginosis by comparing sialidase test with conventional microscopy,and provide rapid and reliable methods for diagnosis BV in clinic. Methods Sialidase test and conventional microscopy were used to determine 480 samples (50 years old group) and the results were analyzed comparatively. Results The positive rate of sialidase test for diagnosis BV was

氨氮的测定纳氏试剂法

实验4 水中氨氮的测定(纳氏试剂比色法) HJ535-2009代替GB 7479-87 一.实验目的 1.了解水中氨氮的测定意义。 2.掌握水中氨氮的测定方法和原理。 二.实验原理 氮是蛋白质、核酸、酶、维生素等有机物中的重要组分。纯净天然水体中的含氮物质是很少的,水体中含氮物质的主要来源是生活污水和某些工业废水。当含氮有机物进入水体后,由于微生物和氧的作用,可以逐步分解或氧化为无机氨(NH 3)、铵(NH 4+)、亚硝酸 盐(NO 2-)和最终产物(NO 3-)。 氨和铵中的氮称为氨氮(Ammonia nitrogen 简称NH 3-N )。水中氨氮的含量在一定程度 上反映了含氮有机物的污染情况。在污水综合排放标准(GB8978-1996)和地表水环境质量标准(GB3838-2002)中,氨氮都是重要的监测指标。 以游离态的氨或铵离子等形式存在的氨氮与纳氏试剂反应生成淡红棕色络合物,该络合物的吸光度与氨氮含量成正比,于波长420 nm 处测量吸光度。 氨氮与纳氏试剂反应生成棕色胶态化合物, 干扰及消除:水样中含有悬浮物、余氯、钙镁等金属离子、硫化物和有机物时会产生干扰,含有此类物质时要作适当处理,以消除对测定的影响。 若样品中存在余氯,可加入适量的硫代硫酸钠溶液去除,用淀粉-碘化钾试纸检验余氯

是否除尽。在显色时加入适量的酒石酸钾钠溶液,可消除钙镁等金属离子的干扰。若水样 浑浊或有颜色时可用预蒸馏法或絮凝沉淀法处理。 三. 仪器与试剂 1.尤尼柯WFJ7200型可见分光光度计,具20mm比色皿。 2.纳氏试剂(碘化汞-碘化钾-氢氧化钠(HgI 2 -KI-NaOH)溶液): 称取 16.0g氢氧化钠(NaOH),溶于50ml水中,冷却至室温。称取7.0g碘化钾(KI) 和10.0g碘化汞(HgI 2 ),溶于水中,然后将此溶液在搅拌下,缓慢加入到上述50ml氢氧化钠溶液中,用水稀释至100ml。贮于聚乙烯瓶内,用橡皮塞或聚乙烯盖子盖紧,于暗处存放,有效期1年。 3.酒石酸钾钠溶液:称取50.0g酒石酸钾钠(KNaC 4H 4 O 6 ·4H 2 O)溶于100mL水中,加热煮 沸以驱除氨,充分冷却后稀释至100ml。 4.氨氮标准贮备溶液(1000μg/ml):称取3.8190g氯化铵(NH 4 Cl,优级纯,在100~105℃干燥2h),溶于无氨水中,移入1000ml容量瓶中,稀释至刻度,摇匀。可在2~5℃保存1个月。 5.氨氮标准工作溶液(10μg/mL):吸10.00ml氨氮标准贮备溶液于1000ml容量瓶内,用无氨水稀释至刻度,摇匀。临用前配制。 以下为水样需预处理时所需试剂 6. 硫代硫酸钠溶液(3.5g/L):称取3.5g硫代硫酸钠(Na 2S 2 O 3 )溶于水中,稀释至1000ml。

唾液酸(SA)测定试剂盒(神经氨酸苷酶法)产品技术要求百奥泰康

唾液酸(SA)测定试剂盒(神经氨酸苷酶法)适用范围:该产品用于体外定量测定人血清或血浆中唾液酸的浓度。 1.1 产品规格

1.2 组成成分 1.2.1 试剂组成 试剂1: Tris缓冲液 0.1 mol/L PH=7.0 神经氨酸苷酶 >0.2U/mL 乳酸脱氢酶 >2U/mL 试剂2: Tris缓冲液 0.1 mol/L PH=9.0 烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH) >0.13mmol/L N-乙酰神经氨酸醛缩酶 >2U/mL。 1.2.2 校准品的组成 单水平的液体校准品,在水基质中添加唾液酸(60mg/dL),稳定剂<0.1%; 定值范围:(50-70)mg/dL。 1.2.3质控品的组成 两个水平的液体质控品,在牛血清(30g/L)中添加唾液酸(60mg/dL和150mg/dL),稳定剂<0.1%; 定值范围:(50-70)mg/dL、(120-180)mg/dL。 2.1 外观 液体双试剂:试剂1:无色至淡黄色液体,试剂2:无色至淡黄色液体。 校准品:无色至淡黄色澄清液体。

质控品:无色至淡黄色澄清液体。 2.2 净含量 液体试剂的净含量不得低于标示体积。 2.3 空白吸光度 在规定参数下,试剂空白吸光度≥0.8。 2.4 分析灵敏度 浓度为60mg/dL时,吸光度变化应≥0.005.。 2.5 线性 在(0,200]mg/dL线性范围内,线性相关系数r ≥0.996。在(0,50]mg/dL范围内绝对偏差不超过5mg/dL,在(50,200]mg/dL范围内的相对偏差不超过±10%。 2.6 精密度 变异系数CV应≤8% 2.7 批间差 不同批号之间测定结果的相对极差应≤10%。 2.8准确度 回收试验:回收率应在90%-110%范围内。 2.9 质控品赋值有效性 测定值在质控靶值范围内。 2.10校准品溯源性要求 根据GB/T21415-2008《体外诊断医疗器械生物样品中量的测量校准品控制物质赋值的计量学溯源性》及有关规定提供唾液酸校准品的来源、赋值过程以及测量不确定度等内容。校准品溯源至唾液酸纯品(Sigma)。

纳氏试剂测定氨氮技巧

纳氏试剂比色法测定水体中氨氮常见问题与解决办法 纳氏试剂比色法是测定水中氨氮的国家标准方法,文献[2]介绍了纳氏试剂比色法的等效方法。标准方法和等效方法对氨氮测定的介绍较为详细,但实际工作中情况复杂,很多问题需要分别深入探讨并加以解决。不少专家学者和专业技术人员对纳氏试剂比色法测定氨氮作了研究,我们根据工作经验,对纳氏试剂比色法测定水体中氨氮常见问题进行了总结,以期更好的指导实际工作。 1实验原理 1.1纳氏试剂配制原理纳氏试剂的正确配制,影响方法的灵敏度。了解纳氏反应机理,是正确配制纳氏试剂的关键。纳氏试剂由Nessler于1856年发明,有2种配制方法,常用HgCl2与KI反应的方法配制,其反应过程如下: 显色基团为[HgI4]2-,它的生成与I-浓度密切相关。开始时,Hg2+与I-按反应(1)式生成红色沉淀HgI2,迅速与过量I-按反应(2)式生成[HgI4]2-淡黄色显色基团;当红色沉淀不再溶解时,表明I-不再过量,应立即停止加入HgCl2,此时可获得最大量的显色基团。若继续加入HgCl2,反应(3)式和(4)式就会显著进行,促使显色基团不断分解,同时产生大量HgI2红色沉淀,从而引起纳氏试剂灵敏度的降低。 1 2氨氮反应原理 了解氨氮反应原理对我们理解反应过程,控制反应条件有重要意义。纳氏试剂与氨氮反应的情况较为复杂,随反应物质含量不同而分别按方程式(5)~(9)进行。 一般情况,纳氏试剂主要用于微量氨氮测定,其反应式为(5)式和(8)式。(9)式表明NH3与NH4+在水溶液中可相互转化,主要受溶液pH的影响。 1.3酒石酸钾钠掩蔽原理 水体中常见金属离子有Ca2+、Mg2+、Fe2+、Mn2+等,若含量较高,易与纳氏试剂中OH-或I-反应生成沉淀或浑浊,影响比色。因而在加入纳氏试剂前,需先加入酒石酸钾钠,以掩蔽这些金属离子,其掩蔽原理如下: 2氨氮实验的影响因子及解决方法 2.1商品试剂纯度 纳氏试剂比色法实验所用试剂主要有KNaC4H6O6·4H2O、KI、HgCl2、KOH。某些市售分析纯试剂常达不到要求,从而给实验造成较大影响,据我们的经验,影响实验的试剂主要是KNaC4H6O6·4H2O和HgCl2。 不合格酒石酸钾钠会导致实验空白值高和引起实际水样浑浊,影响测定。不纯试剂从外

唾液酸测定试剂盒(神经氨酸苷酶法)产品技术要求danda

唾液酸测定试剂盒(神经氨酸苷酶法)适用范围:本品用于体外定量测定人血清中唾液酸的含量。 1.1规格 规格1: (试剂1:15mL;试剂2:5mL); 规格2: (试剂1:30mL;试剂2:10mL); 规格3: (试剂1:60mL;试剂2:20mL); 校准品:(选配): 规格1(0.3mL×1;1水平);规格2(0.5mL×1;1水平);规格3(1.0mL×1;1水平); 质控品:(选配) 规格1(0.5mL×2;2水平);规格2(1.0mL×2;2水平)。 1.2组成 试剂盒组成见表1 表1 唾液酸测定试剂盒组成

注:校准品及质控品赋值具有批特异性,每批次浓度详见标签。 2.1试剂 2.1.1外观 试剂盒外观应整洁,文字符号标识清晰;组分齐全,液体无漏液;试剂1、试剂2为透明液体,不得有沉淀和絮状物。 2.1.2装量 每瓶不少于标示值。 2.1.3试剂空白吸光度 用指定的空白样品测试试剂(盒),在光径1cm下,在340 nmm处测定试剂空白吸光度≥0.8A,空白吸光度变化率≤0.01A。 2.1.4分析灵敏度 试剂测定75mg/dL被测物,吸光度变化≥0.01A。 2.1.5线性范围 2.1.5.1在[2,200] mg/dL内,相关系数R≥0.990。

2.1.5.2在[2,40] mg/dL内,线性绝对偏差不超过±4mg/dL;(40,200] mg/dL 内,线性相对偏差不超过±10%。 2.1.6 重复性 重复测试(75±15)mg/dL和(150±30)mg/dL样本,所得结果的变异系数(CV%)应不大于5%。 2.1.7批间差 测定(75±15)mg/dL和(150±30)mg/dL样本,所得结果的批间相对极差(R)应不大于10%。 2.1.8准确度 )中加入一定体积高于200 mg/dL的唾液酸纯在正常浓度范围的临床样本(C 品(Cs)或由纯品配制的标准溶液,回收率应在90%-110%范围内。 2.2校准品 2.2.1外观 校准品为淡黄色液体。 2.2.2装量 每瓶不少于标示值。 2.2.3准确度 与配套试剂组成测试系统,指标要求同2.1.8。 2.2.4 校准品溯源性 根据GB/T21415-2008的要求,校准品溯源至工作校准品,工作校准品采用上海聚创医药科技有限公司SA试剂盒进行方法学比对赋值。 2.3质控品

水杨酸测定氨氮

水杨酸-次氯酸盐分光光度法测定氨氮氨氮的测定方法:通常有纳氏试剂比色法、水杨酸-次氯酸盐,比色法和电极法。氨氮含量较高时,可采用蒸馏-酸滴定法。纳氏试剂比色法具有操作简便、灵敏等特点,但钙、镁、铁等金属离子、硫化物、醛、酮类,以及水中色度和混浊等干扰测定,需要相应的预处理。水杨酸-次氯酸盐法具灵敏、稳定等优点,操作简便、实验室污染少等优点而被广泛应用。 1、测定原理 在碱性介质(pH =11.6)中,亚硝基铁氰化钠[Na 2(Fe(CN) 6 )NO]·2H 2 O存在下, 水中的氨、铵离子与水杨酸盐和次氯酸离子反应生成蓝色化合物,在波长697nm 具最大吸收,用分光光度计测量吸光度。 这类反应称为Berthelot反应。这类反应的机理比较复杂,是个分步进行的反应: (1)第一步是氧与次氯酸盐反应生成氯胺。NH 3+HOCl←→NH 2 Cl+H 2 O (2)第二步氯胺与水杨酸C 6H 4 (OH)COOH反应形成一个中间产物:5氨基水杨酸。 (3)第三步是氨基水杨酸转变为醌亚胺 (4)最后是卤代醌亚胺与水杨酸缩合生成靛酚蓝。 pH对每一步反应几乎都有本质上的影响。最佳的pH值不仅随酚类化合物而不同,而且随催化剂和掩蔽剂的不同而变化。此外,pH还影响着发色速度、显色产物的稳定性以及最大吸收波长的位置。因此控制反应的pH值是重要的。

2、本标准适用于地下水、地表水、生活污水和工业废水中氨氮的测定。 当取样体积为8.0mL,使用10mm比色皿时,检出限为0.01mg/L,测定下限为0.04mg/L,测定上限为1.0mg/L(均以N计)。 3、干扰及消除 氯铵在此条件下均被定量地测定。钙、镁等阳离子的干扰,可加酒石酸钾钠掩蔽。如果水样的颜色过深、含盐量过多,酒石酸钾盐对水样中的金属离子掩蔽能力不够,或水样中存在高浓度的钙、镁和氯化物时,需要预蒸馏。 (一)水样的预处理 1.1 样品采集与保存 水样采集在聚乙烯瓶或玻璃瓶内,要尽快分析。如需保存,应加硫酸使水样酸化至pH<2,2℃~5℃下可保存7天。 1.2 水样的预处理 水样带色或浑浊以及含其他一些干扰物质,影响氨氮的测定。为此,在分析时需作适当的预处理。对较清洁的水,可采用絮凝沉淀法;对污染严重的水或工业废水,则用蒸馏消除干扰。 絮凝沉淀法 加适量的硫酸锌于水样中,并加氢氧化钠使呈碱性,在pH>10.5时,生成氢氧化锌絮状沉淀,再经过滤除颜色和浑浊等。 1.3. 仪器与试剂: 100 ml具塞量筒或比色管。 (1)10%硫酸锌溶液:称取10g硫酸锌溶于水,稀释至100 ml。 (2)25%氢氧化钠溶液:称取25g氢氧化钠溶于水,稀释至100ml,贮于聚乙烯 瓶中。 (3)硫酸, =1.84。 (4)中速滤纸 (5)漏斗 1.4.絮凝沉淀步骤:

白带常规与BV唾液酸酶法联合检测的临床价值

白带常规与BV唾液酸酶法联合检测的临床价值 发表时间:2013-12-10T12:57:52.687Z 来源:《医药前沿》2013年11月第31期供稿作者:朱建新 [导读] 在育龄期妇女的阴道感染性疾病中,细菌性阴道炎、霉菌性阴道炎和滴虫性阴道感染是最为常见的妇科病。 朱建新(江苏省常熟市辛庄中心卫生院检验科江苏常熟 215500) 【摘要】目的对白带常规、BV唾液酸酶法在妇产科常规检查中的临床价值。同时观察BV合并霉菌滴虫感染情况。方法对本院妇产科门诊2012年11月至2013年10月321例阴道分泌物常规检查。通过盐水涂片法查找滴虫,进行革兰染色判断清洁度及检查念珠菌、线索细胞,通过唾液酸酶检测细菌性阴道病(BV)。结果清洁度Ⅱ度占31.46%;Ⅲ度占62.62%;Ⅳ度占5.92%;霉菌感染占20.87%;滴虫感染占3.43%;BV唾液酸酶法检测阳性占27.10%;念珠菌、滴虫和BV阳性混合感染占4.05%。结论白带常规与BV唾液酸酶法联合检测在妇科常规检查中两者都有其独立的临床价值,能更好的正确诊断、合理用药,规范治疗,提高治疗效果。 【关键词】白带常规 BV唾液酸酶法联合检测 【中图分类号】R446 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752(2013)31-0262-01 在育龄期妇女的阴道感染性疾病中,细菌性阴道炎、霉菌性阴道炎和滴虫性阴道感染是最为常见的妇科病。特别是对于孕前女性阴道分泌物常规筛查,女性患有阴道炎症会引起产道感染和宫内感染,还会造成早产、胎膜早破、低体重儿、先天发育畸形等严重后果。现对本院321例阴道分泌物检测结果分析报道如下。 1 资料与方法 1.1 临床资料对我院妇产科门诊2012年11月至2013年10月321例阴道分泌物进行白带常规与BV唾液酸酶法联合检测。 1.2 试剂(1)0.9%的氯化钠溶液。(2)细菌性阴道病检测试剂盒(唾液酸酶法)。 1.3 仪器江元医疗AT-1600全自动细菌性阴道病检测仪。 1.4 检测方法通过显微镜检和形态学检测阴道毛滴虫、霉菌、线索细胞和清洁度。 (1) 0.9%氯化钠湿片法:阴道毛滴虫采用0.9%氯化钠湿片法高倍镜观察20个视野,找到波状运动的阴道毛滴虫可以判断为阳性。(2)革兰染色法:霉菌性阴道炎采用革兰染色法,油镜观察。霉菌可以找到革兰氏阳性孢子或假菌丝与出芽细胞相连接,成链状及分枝状。(3)细菌性阴道病检测(唾液酸酶法):根据仪器操作规程与细菌性阴道病检测(唾液酸酶法)试剂盒操作规程操作。 1.5 白带常规清洁度判定标准:参照《全国临床检验操作规程》第三版。 2 结果 2.1 妇产科门诊321例白带常规与BV唾液酸酶法联合检测结果。见表(1)。 表(1) 321例白带常规与BV唾液酸酶法联合检测结果 3 讨论 通过阴道分泌物检查除了可以判断阴道有无炎症,还能进一步诊断炎症发生的原因。当清洁度达到Ⅲ、Ⅳ度时,多数情况下可诊断为阴道炎症(如滴虫性阴道炎、真菌性阴道炎和细菌性阴道炎)为炎症的治疗提供依据。单纯清洁度增高多见于非特异性阴道炎。在检查中发现有阴道滴虫可诊断为滴虫性阴道炎或滴虫感染。有阴道霉菌时可作为霉菌性阴道炎的诊断依据。此外,清洁度、阴道霉菌、阴道滴虫,它们与BV无直接关联。但患有滴虫性阴道炎和霉菌性阴道炎的患者由于其阴道内正常菌群数量减少,更易感染BV,也就是会出现合并感染。 镜检有线索细胞,但BV检测不一定是阳性。因为镜检时有人为带来的错误,而且现在主张线索细胞占20%以上才能判断线索细胞阳性。所以,如果把镜检有线索细胞就认为BV检测一定阳性这错误的观点用在诊断和治疗中,就会产生不良的后果。BV则是由于阴道内原有的菌群比例发生了改变,加特纳菌、厌氧菌占绝对优势而引起的阴道病症,和长期滥用抗生素有关,该病阴道黏膜无充血的炎症表现。在临床上,清洁度II度时,BV检测阳性率也占了一定的百分比。因此,白带常规与BV唾液酸酶法联合检测,在临床妇科病的诊断和治疗中有积极意义。 参考文献 [1] 《全国临床检验操作规程》第三版 324. [2] 辛华,占伏良等《白带常规找线索细胞检测细菌性阴道炎与Amsel、BV Blue结果比较》检验医学 2006,21(3) 307-308.

水质氨氮的测定纳氏试剂分光光度法

水质氨氮的测定纳氏试剂 分光光度法 The following text is amended on 12 November 2020.

实验三水质氨氮的测定——纳氏试剂分光光度法 仪器和药品: 天平、称量纸、玻璃棒、手套、擦镜纸 可见分光光度计:具20 mm比色皿(6只) 比色管:50mL,40支;25mL,40支 移液管:20mL,5支;10、5、1mL各5支 容量瓶:250、500mL和1000ml 5个;100mL,10个 烧杯:200mL,5个 量筒100ml,5个 聚乙烯瓶、棕色瓶各5个 加热装置 氢氧化钠、碘化钾、碘化汞、酒石酸钾钠、氯化铵 一、目的和意义 水中的氨氮来源于生活污水中含氮有机物受微生物作用分解产物、某些工业废水以及农田排水。水中氨氮含量与人们的生产和生活有密切的关系,如果水中氨氮浓度过高会造成鱼类死亡,水质变臭,无法达到人们正常饮用和使用的标准。 掌握纳氏试剂光度法测定水中氨氮的原理和方法。 二、方法原理 以游离态的氨或铵离子等形式存在的氨氮与纳氏试剂反应生成淡红棕色络合物,该络合物的吸光度与氨氮含量成正比,于波长420 nm处测量吸光度。 水样中含有悬浮物、余氯、钙镁等金属离子、硫化物和有机物时会产生干扰。若样品中存在余氯,可加入适量的硫代硫酸钠溶液去除,用淀粉-碘化钾试纸检验余氯是否除尽。在显色时加入适量的酒石酸钾钠溶液,可消除钙镁等金属离子的干扰。若水样浑浊或有颜色时可用预蒸馏法或絮凝沉淀法处理。 三、溶液配制 1、纳氏试剂【碘化汞-碘化钾-氢氧化钠溶液】 称取 g氢氧化钠,溶于50 ml水中,冷却至室温。称取 g碘化钾和 g碘化汞,溶于水中,然后将此溶液在搅拌下,缓慢加入到上述50 ml氢氧化钠溶液中,用水稀释至100 ml。贮于聚乙烯瓶内,用橡皮塞或聚乙烯盖子盖紧。 2、酒石酸钾钠溶液,ρ=500 g/L。 称取 g酒石酸钾钠(KNaC4H6O6·4H2O)溶于100 ml水中,加热煮沸以驱除氨,充分冷却后稀释至100 ml。 3、氨氮标准溶液氯化铵分子量 氨氮标准贮备溶液,ρN =1000 mg/L。 称取 g氯化铵(优级纯,在100~105℃干燥2 h),溶于水中,移入1000 ml容量瓶中,稀释至标线。

比色法

运用“HSB模型”测定烤瓷牙色彩的探讨 章加宇丁加根曾永红 [摘要]目的依据孟塞尔(Munsell)HVC颜色系统,运用Adobe Photoshop6.0软件的“HSB模型”,借助于计算机、数码相机探讨一种科学、量化、精确、快速的方法,以弥补肉眼比色不足的缺陷。方法对450例烤瓷冠用数码相机采集被比色牙与标准比色板色片的图片,通过Photoshop6。0软件局部拾色分析,运用“HSB模型”滑杆显示不同色片及被比色牙的H、S、B数值。结合Nickerson 色差公式,应用Office 2000 excel软件,制定快速运算、自动生成总色差表格,从中选取最小总差植的比色色片的色阶,作为被比色牙的色彩。结果随机选取临床色差极小,不易为肉眼所识别的烤瓷冠450颗,运用“HSB模型”比色,439颗色质良好,与邻牙协调;8颗色质稍偏差,细看能区别出修复体;3颗与邻牙有较大差别。结论:依据孟塞尔HVC颜色系统,运用“HSB模型”,借助数码相机,计算机并结合相关软件,对不同颜色进行测定,分析,制表显示总色差值、比色。该方法科学、量化,比色快速、方便。所需材料易取,具有临床应用价值。 关键词:HSB-模型;HVC颜色系统;烤瓷牙比色;计算机;色差值 随着口腔修复技术水平的日益提高,烤瓷冠、桥已成为牙体、牙列缺损的主要固定修复方式。烤瓷牙的色彩是烤瓷修复成功的重要因素之一,比色也就成为修复医生临床操作的重要步骤。由于比色方法,比色环境及比色操作者的个体差异,常规肉眼比色往往造成有些瓷色不很满意,尤其是遇到色阶差别不很明显的自然牙(以下称被比色牙),比色者更是很难识别。过去厂家曾研制推广出比色仪,由于取色头范围的局限性,而且价格昂贵,临床用于比色的单位相对较少。近年来,我科依据Mussel HVC颜色系统(这个表色系统于1905年由美国人Mussel发明,它使用色相环和色票表现物体的色相、亮度、饱和度三要素,反映了物体颜色的心理规律,可分别代表颜色的色相、亮度和饱和度的色知觉特

03氨氮的测定 纳氏试剂比色法 HJ535-2009

水质氨氮检测标准操作规程 纳氏试剂分光光度法 一、目的 规范测定水中氨氮的纳氏试剂分光光度法标准操作规程。 二、适用范围 1、适用于地表水、地下水、生活污水和工业废水中氨氮的测定。 2、当水样体积为50 ml时,本方法的检出限为0.025 mg/L,测定下限为0.10 mg/L,测定上限为2.0mg/L(均以N计)。 三、责任者 实验室检验人员及负责人。 四、正文 1、方法原理 以游离态的氨或铵离子等形式存在的氨氮与纳氏试剂反应生成淡红棕色络合物,该络合物的吸光度与氨氮含量成正比,于波长420nm处测量吸光度。 2、仪器 2.1、分析天平、紫外可见分光光度计、30mm比色皿、50ml具塞玻璃比色管、实验室常用玻璃仪器等。 2.2、氨氮蒸馏装置:由500ml凯式烧瓶、氮球、直形冷凝管和导管组成,冷凝管末端可连接一段适当长度的滴管,使出口尖端浸入吸收液液面下。亦可使用500 ml 蒸馏烧瓶。 3、试剂 分析时所用试剂均使用符合国家标准的分析纯化学试剂,实验用水为制备的无氨水。

3.1、无氨水:用市售纯水器临用前制备。 3.2、轻质氧化镁(MgO):将氧化镁在500℃下加热,以除去碳酸盐。 3.3、纳氏试剂: 碘化汞-碘化钾-氢氧化钠(HgI2 -KI-NaOH)溶液 称取16.0g氢氧化钠(NaOH),溶于50ml水中,冷却至室温。 称取7.0g碘化钾(KI)和10.0g碘化汞(HgI2),溶于水中,然后将此溶液在搅拌下,缓慢加入到上述50ml氢氧化钠溶液中,用水稀释至100ml。贮于聚乙烯瓶内,用橡皮塞或聚乙烯盖子盖紧,于暗处存放,有效期1年。 3.4、ρ =500g/L酒石酸钾钠溶液 称取50.0g酒石酸钾钠(KNaC4H4O6·4H2O)溶于100mL水中,加热煮沸以除去氨,充分冷却后,定容至100mL。 3.5、ρ=3.5g/L硫代硫酸钠溶液 称取3.5g硫代硫酸钠(Na2S2O3)溶于水中,稀释至1000ml。 3.6、ρ=100g/L硫酸锌溶液 称取10.0 g硫酸锌(ZnSO4·7H2O)溶于水中,稀释至100ml。 3.7、ρ=250g/L氢氧化钠溶液 称取25g氢氧化钠溶于水中,稀释至100ml。 3.8、c(NaOH)=1mol/L氢氧化钠溶液 称取4g氢氧化钠溶于水中,稀释至100 ml。 3.9、c(HCl)=1mol/L盐酸溶液 量取8.5ml浓盐酸于适量水中用水稀释至100 ml。 3.10、ρ=20g/L硼酸(H3BO3)溶液 称取20g硼酸溶于水,稀释至1L。 3.11、ρ=0.5g/L溴百里酚蓝指示剂(bromthymol blue),。 称取0.05g溴百里酚蓝溶于50ml水中,加入10 ml无水乙醇,用水稀释至100ml。 3.12、氨氮标准溶液 3.12.1、ρN =1000μg/ml氨氮标准贮备溶液 称取3.8190g氯化铵(NH4Cl,优级纯,在100~105℃干燥2 h),溶于水中,移入1000 ml容量瓶中,稀释至标线,可在2~5℃保存1个月。

纳氏试剂光度法测定氨氮

纳氏试剂光度法测定氨氮 概述 1.方法原理 碘化汞和碘化钾的碱性溶液与氨反应生成淡红棕色胶态化合物,此颜色在较宽的波长范围内具强烈吸收。通常测量用波长在410—425nm范围。 2.方法适用范围 本法最低检出浓度为0.025mol/L(光度法),测定上限为2mg/L。采用目视比色法,最低检出浓度为0.02mg/L。水样作适当的预处理后,本法可适用于地表水、地下水、工业废水和生活污水。 仪器 (1)分光光度法。 (2)pH计。 试剂 无氨水。纳氏试剂、酒石酸钾钠溶液、铵标准贮备溶液、铵标准使用溶液 步骤 1.校准曲线的绘制 吸取0、0.50、1.00、2.00、3.00和5.0ml铵标准使用液于50ml 比色管中,加水至标线。加1.0ml酒石酸钾钠溶液,混匀。加1.5ml 纳氏试剂,混匀。放置10min后,在波长4250nm处,用光程10mm 比色皿,以水作参比,测量吸光度。

由测得得吸光度,减去零浓度空白管的吸光度后,得到校正吸光度,绘制以氨氮含量(mg)对校正吸光度得校准曲线。 2.水样的测定 (1)取适量水样(使氨氮含量不超过0.1mg),加入50ml比色管中,稀释至标线,加1.0ml酒石酸钾钠溶液。加1.5ml纳氏试剂, 混匀。放置10min后,同校准曲线步骤测量吸光度。 计算 由水样测得的吸光度减去空白试验的吸光度后,从校准曲线上查得氨氮含量(mg)。 m 氨氮(N,mg/L)=1000 V 式中,m—由校准曲线查得的氨氮量(mg); V—水样体积(ml)。 注意事项 (1)纳氏试剂中碘化汞与碘化钾的比例,对显色反应的灵敏度有较大影响。静置后生成的沉淀应除去。 (2)所用玻璃器皿应避免实验室空气中氨的沾污。

唾液酸测定试剂盒(比色法)产品技术要求lepu

唾液酸测定试剂盒(比色法) 适用范围:用于体外定量测定人血清中唾液酸的浓度。 1.1 规格 试剂盒是由试剂1和试剂2组成的液体双试剂,校准品为液体剂型,质控品为冻干粉。规格及装量见表1。 表1 规格及装 量 1.2主要组成成分

试剂1主要组分: 试剂2主要组分: 校准品主要组分: 质控品主要组分: 2.1 净含量 应不低于试剂瓶标示装量。 2.2 外观 试剂1:无色或淡黄色透明溶液;试剂2:无色或黄色透明溶液,校准品:为无色透明液体,质控品:为浅黄色至黄色冻干粉,复溶后为浅黄色至黄色液体。外包装完好、无破损,标签完好、字迹清晰。 2.3 试剂空白 2.3.1 试剂空白吸光度 在340nm处测定试剂空白吸光度,应≥0.05; 2.3.2 试剂空白吸光度变化率

试剂空白吸光度变化率△A/min≤0.8。 2.4 分析灵敏度 测试50 mg/dL的被测物时,吸光度变化率(ΔA/min)应不低于0.0005。 2.5 准确度 参照EP9-A2的方法,用比对试剂盒同时测试40例线性区间内的不同浓度的血清样本,其相关系数r≥0.975。[10,60)mg/dL区间内绝对偏差不超过±6mg/dL;[60,180]mg/dL区间内相对偏差不超过±10%。 2.6 重复性 批内变异系数(CV)应不超过10%。 2.7 线性 2.7.1在[10,180]mg/dL区间内,线性相关系数r应不低于0.990; 2.7.2[10,60)mg/dL区间内绝对偏差不超过±6mg/dL;[60,180]mg/dL区间内相对偏差不超过±10%。 2.8 批间差 对同一份样品进行重复测定,相对极差不大于10%。 2.9质控品批内瓶间差 变异系数(CV)应≤5%。 2.10溯源性 根据GB/T 21415-2008的规定,本试剂盒内校准品溯源至企业工作校准品,与已上市公司试剂盒进行比对赋值。 2.11质控品赋值有效性 质控品测值应在靶值范围内。

纳氏试剂光度法测定氨氮

水质 氨氮的测定 纳氏试剂分光光度法 方法学验证报告 验证起始日期 :2018年 月 日 结束日期:2018年 月 日 一、实验目的 1、掌握比色法测定水中氨氮含量的测定方法及原理。 2、熟悉纳氏试剂分光度法测定氨氮的方法学验证。 二、依据标准文献 HJ 535-2009 水质 氨氮的测定 纳氏试剂分光光度法 化学分析方法确认和验证指南 GB/T 27417-2017 三、适用范围 适用于地表水、地下水、生活污水和工业废水中氨氮的测定。 四、方法原理 以游离态的氨或铵离子等形式存在的氨氮与纳氏试剂反应生成淡红棕色络合物,该络合物的吸光度与氨氮含量成正比,于波长420 nm 处测量吸光度。 氨氮与纳氏试剂反应生成棕色胶态化合物, [][]KI O H I NH O Hg NH KOH HgI K 7232222342++?=++ 五、仪器设备 紫外可见分光光度计 型号:T6新世纪 出厂编号:26-1650-01-1108 厂家:北京普析 六、试剂材料 1. 20mm 比色皿,50毫升比色管,实验室用超纯水机。 2. 纳氏试剂(碘化汞-碘化钾-氢氧化钠(HgI 2-KI-NaOH )溶液): 称取 16.0g 氢氧化钠(NaOH ),溶于50ml 水中,冷却至室温。 称取7.0g 碘化钾(KI )和10.0g 碘化汞(HgI 2),溶于水中,然后将此溶液在搅拌下,缓慢加入到上述50ml 氢氧化钠溶液中,用水稀释至100ml 。贮于聚乙烯瓶内,用橡皮塞或聚乙烯盖子盖紧,于暗处存放,有效期1年。 3. 酒石酸钾钠溶液:称取50.0g 酒石酸钾钠(KNaC 4H 4O 6·4H 2O )溶于100mL 水中,加热煮沸以驱除氨,充分冷却后稀释至100ml 。 4. 氨氮标准贮备溶液(1000μg/ml ):称取3.8190g 氯化铵(NH 4Cl ,优级纯,在100~105℃干燥2h ),溶于无氨水中,移入1000ml 容量瓶中,稀释至刻度,摇匀。可在2~5℃保存1个月。 5. 氨氮标准工作溶液(10μg/mL ):吸10.00ml 氨氮标准贮备溶液于1000ml 容量瓶内,用无氨水稀释至刻度,摇匀。临用前配制。 以下为水样需预处理时所需试剂 6. 硫代硫酸钠溶液(3.5g/L ):称取3.5g 硫代硫酸钠(Na 2S 2O 3)溶于水中,稀释至1000ml 。 7. 硫酸锌溶液(100g/L ):称取10.0g 硫酸锌(ZnSO 4·7H 2O )溶于水中,稀释至100ml 。 8. 氢氧化钠溶液(250g/L ):称取25g 氢氧化钠溶于水中,稀释至100ml 。

标准葡萄糖DNS比色法测定.doc

标准准葡萄糖DNS比色法测定的方法 采用3,5-二硝基水杨酸比色法测定水解液中还原糖含量,用752型分光光度计进行比色测定。 1葡萄糖DNS比色法的测定原理 3,5-二硝基水杨酸与还原糖共热后被的还原为棕红色的3-氨基-5-硝基水杨酸。在一定范围内,还原糖的量与棕红色物质颜色的深浅成正比关系,利用分光光度计,在540nm波长下测定光密度值,查对标准曲线并计算,便可求出样品中还原糖的含量。 2测试药品 (1)1mg/mL葡萄糖标准液 准确称取80℃烘至恒重的分析纯葡萄糖100mg,置于小烧杯中,加少量蒸馏水溶解后,转移到100mL容量瓶中,用蒸馏水定容至100mL,混匀,4℃冰箱中保存备用。 (2)3,5-二硝基水杨酸(DNS)试剂 3测试方法 (1)葡萄糖标准曲线制作 ①按下表制备9个试管。 ②向9支试管中分别加入DNS试剂0.5ml,充分混合。 ③将9支试管放入沸水浴中加热煮沸5min。 ④将试管放入盛有冷水的烧杯中冷却。 ⑤向各管中分别加入4mL蒸馏水,充分混合。 ⑥以空白(1#)管做对照,用分光光度计于540nm波长下分别测定各管溶液的OD值。 ⑦以每管在540nm下的吸光值为纵坐标,每管所含的葡萄糖浓度为横坐标作图,即可得到一条通过零点的直线。如果直线不通过零点则需重做。 标准葡萄糖曲线浓度的量取 Tab.2.2 Preparation on standard curve of glucose 试管编号标准葡萄糖溶液(mL) 蒸馏水(mL) 最终浓度(mg/mL) 1 0 0.5 0 2 0.05 0.45 0.1 3 0.1 0. 4 0.2 4 0.1 5 0.35 0.3 5 0.2 0.3 0.4 6 0.25 0.25 0.5 7 0.3 0.2 0.6

5.唾液酸测定试剂盒说明书

唾液酸测定试剂盒(酶法)说明书 【产品名称】 通用名称:唾液酸测定试剂盒(酶法) 英文名称:SA Determination Kit 【包装规格】试剂1/试剂2: 99ml×6/99ml×2、 99ml×4/66ml×2、 99ml×3/99ml×1、 99ml×2/66ml×1、 99ml×1/33ml×1、 84ml×6/84ml×2、 84ml×4/56ml×2、 84ml×3/84ml×1、 84ml×2/56ml×1、 84ml×1/28ml×1、 60ml×6/20ml×6、 60ml×5/20ml×5、 60ml×4/20ml×4、 60ml×3/20ml×3、 60ml×2/20ml×2、 60ml×1/20ml×1、 48ml×6/16ml×6、 48ml×5/16ml×5、 48ml×4/16ml×4、 48ml×3/16ml×3、 48ml×2/16ml×2、 48ml×1/16ml×1、 45ml×8/20ml×6、 45ml×6/18ml×5、 45ml×4/20ml×3、 45ml×2/15ml×2、 45ml×1/15ml×1、 21ml×5/7ml×5、 21ml×4/ 7ml×4、 21ml×3/7ml×3、 21ml×2/7ml×2、 21ml×1/7ml×1 【预期用途】 本试剂用于体外定量测定人血清中唾液酸的含量,临床上可作为一种非特异性炎症指标之一。 【检验原理】 神经氨酸苷酶 唾液酸(结合型) N-乙酰神经氨酸 NANA-醛缩酶 N-乙酰神经氨酸 N-乙酰甘露糖胺 + 丙酮酸 LDH 丙酮酸+ NADH + H + 乳酸 + NAD + 样本中的唾液酸(SA )受神经氨酸苷酶的作用,形成N-乙酰神 经氨酸,进而在NANA-醛缩酶的作用生成丙酮酸和N-乙酰甘露 糖胺,丙酮酸在NADH 存在下有LDH 作用下生成乳酸和NAD +, 测定NADH 吸光度下降的速度可求得样本中的唾液酸的浓度。 【主要组成成分】 试剂1 Tris-HCl 100mmol/L pH 7.0、 神经氨酸苷酶 0.2KU/L 、 乳酸脱氢酶(LDH ) 2KU/L 试剂2 烟酰腺嘌呤二核苷酸(NADH ) 0.13mmol/L 、 N-乙酰神经氨酸醛缩酶(NANA-醛缩酶)2KU/L 【储存条件及有效期】 1.试剂在2~8℃密封避光保存,有效期12个月。 2.已开瓶试剂注意避免污染,2~8℃可稳定15天。 【适用仪器】 本产品适用于所有开放式的半自动或全自动生化分析仪。 【样本要求】 新鲜血清样本:用真空采血管静脉采血,采集后尽快(2h 内) 分离,避免溶血,送检应及时并注意密封;22℃保存不超过8h , 如不能完成应转入2~8℃冰箱保存,在48h 内不能完成或者需贮 存48h 以上,应于-20℃保存;保持密封,避免反复冻融。 【检验方法】 酶法。 【操作步骤】 【计算】 样本浓度= 样本△A/min × 校准品浓度 校准△A/min 【参考区间】 45.6mg/dl ~75.4 mg/dl 各实验室应根据地区及人群情况建立自己的正常参考范围。 【检验结果的解释】 人体SA 主要来源为葡萄糖代谢的中间产物。在一些炎症,发热等情况SA 也会升高。专业人员负责检验结果的审核,检验结果的分析,受年龄、性别、饮食、地域影响,通常在参考范围内认为正常,如超出范围,应重新测定进行确认,检验结果如出现与临床不符甚至相悖的情况,应分析查找原因。 【检验方法的局限性】 若样本中:胆红素≤50mg/dl 、血红蛋白≤500 mg/dl 、抗坏血酸≤100 mg/dl ,对测定结果无明显影响。 【产品性能指标】 1.外观:试剂1为无色澄清液体,试剂2为无色澄清液体。 2.试剂空白 a)试剂空白吸光度:在340nm 波长下测得的试剂空白吸光度 (A )≥1.0000(1cm ;340nm ;37℃); b)空白吸光度变化率:在波长340nm ,1cm 光径下,空白吸光度变化率(△A/min )≤0.2000。 3.分析灵敏度:当样本浓度为60mg/dl 时,试剂与样本反应产生 的每分钟吸光度变化率≥0.0020。 4.线性范围:在0mg/dl ~200 mg/dl 范围内,线性相关系数r ≥0.990;在42mg/dl ~200 mg/dl 范围内的相对偏差≤15%;测定浓度小于42 mg/dl 时,绝对偏差≤3mg/dl 。 5.测量精密度 a)重复性:批内变异系数(CV )≤10%; b)批间差:不同批号之间测定结果的相对极差(R )≤10%。 6.准确度:使用质控品测试相对偏差应不超过±10%。 【注意事项】 1.试剂与样本量可按生化分析仪器要求恒比例增减。 2.仪器内无所需波长滤光片,选择波长接近的滤光片数值输入。 3.避免试剂接触皮肤、眼睛及粘膜,一旦接触,应立即用水冲洗 污染部位,必要时在医生的指导下做进一步处理。 4.试剂反应后所产生的废液及使用后难降解的包装材料应集中 收集后交当地废物处理站处理。 5.试剂中含叠氮钠(NaN 3),废瓶、废液应按有关规定销毁处理。 6.在检测的过程中,请不要混合或者交换使用批号不同的试剂,换用不同批号的试剂时,必须重新定标。 【参考文献】 1.Sugahara,K.,et al,Enzymatic assay of serum sialic acid.Clin. Chim. Acta, 108, 493-498 (1980). 2.Kolisis,F.N.An immobilized bienzyme system for assay of sialic acid.Biotechnol.Appl.Biochem,8,148-152 (1986). 3.WS/T225-2002,临床化学检验血液标本的收集与处理[S].中华 人民共和国卫生部,2002-07-01. 4.陶月仙.临床标本的正确采集[A].第三届全国临床检验实验室 管理学术会议[C].2005. 【基本信息】 生产企业名称/售后服务单位名称: 永和阳光(湖南)生物科技有限公司 住 所:长沙国家生物产业基地康天路 邮 编:410329 生产地址:长沙国家生物产业基地康天路 电 话:86-731-83285463 传 真:86-731-83285465 技术服务:400 077 3639 生产许可证编号:湘食药监械生产许(2012)第A128号(更) 【医疗器械注册证编号】 【产品技术要求编号】 【说明书核准日期及修改日期】 样本量 sample volume μl 7 试剂1(R1) Reagent 1 μl 210 混匀,在37℃孵育300秒。 试剂2(R2) Reagent 2 μl 70 混匀,37℃下孵育90秒,连续监测90秒吸光度变化速率。 主波长 main wavelength nm 340 副波长 sub wavelength nm 405 反应类型 reaction type 速率法 反应方向 reaction direction 降反应 (-) 定标模式 Calibration mode 线性

纳氏试剂分光光度法测定氨氮

氨氮(NH3-N)指标的监测规程---纳氏试剂分光光度法1.目的 为了规范化验人员在污水处理厂中的监测方法和操作程序,提高监测数据的准确性,特制定本规程。 2.适用范围 本监测规程适用污水处理站。 3.定义及原理 3.1 定义: 氨氮(NH 3-N)以游离(NH 3 )或(NH 4 +)形式存在于水中,两者的组成比取决 于水中的PH值和水温。当PH高时,游离铵的比例高。反之,则铵盐的比例高,水温则相反。 水中氨氮的来源主要为生活污水中含氮有机物受微生物作用的分解产物,有些水中存在的亚硝酸盐亦可受微生物作用,还原为氨。在有氧环境中,水中氨亦可转变为亚硝酸盐,甚至继续转化为硝酸盐。监测水中各种形态的氮化合物,有助于评价水体被污染和自净的状况。 3.2 原理: 碘化汞和碘化钾的碱性溶液与氨反映生成淡红棕色胶态化合物,其色度与氨氮含量成正比,通常可在波长410~425nm范围内测其吸光度,计算其含量. 本法最低检出浓度为0.025mg/L(光度法),测定上限为2mg/L.采用目视比色法,最低检出浓度为0.02mg/L.水样做适当的预处理后,本法可用于地面水,地下水,工业废水和生活污水中氨氮的测定. 4.试剂 测试剂除非另有说明,均为符合国家标准的分析纯试剂,配制试剂用水均应为无氨水 4.1 无氨水可选用下列方法之一进行制备: 4.1.1 蒸馏法:每升蒸馏水中加0.1mL硫酸,在全玻璃蒸馏器中重蒸馏,弃去50mL 初馏液,按取其余馏出液于具塞磨口的玻璃瓶中,密塞保存. 4.1.2 离子交换法:使蒸馏水通过强酸型阳离子交换树脂柱.

4.2 1mol/L盐酸溶液. 4.3 1mol/L氢氧化纳溶液. 4.4 轻质氧化镁(MgO):将氧化镁在500℃下加热,以出去碳酸盐. 4.5 0.05%溴百里酚蓝指示液:pH60.~7.6. 4.6 防沫剂,如石蜡碎片. 4.7 吸收液: 4.7.1 硼酸溶液:称取20g硼酸溶于水,稀释至1L. 4.7.2 0.01mol/L硫酸溶液. 4.8 纳氏试剂:可选择下列方法之一制备: 4.8.1 称取20g碘化钾溶于约100mL水中,边搅拌边分次少量加入二氯化汞(HgCl2)结晶粉末(约10g),至出现朱红色沉淀不易溶解时,改写滴加饱和二氯化 汞溶液,并充分搅拌,当出现微量朱红色沉淀不再溶解时,停止滴加二氯化汞溶液. 另称取60g氢氧化钾溶于水,并稀释至250mL,冷却至室温后,将上述溶液徐徐注 入氢氧化钾溶液中,用水稀释至400mL,混匀.静置过夜将上清液移入聚乙烯瓶中,密塞保存. 4.8.2 称取16g氢氧化纳,溶于50mL水中,充分冷却至室温. 另称取7g碘化钾和碘化汞(HgI2)溶于水,然后将此溶液在搅拌下徐徐注入氢氧化纳溶液中,用水稀 释至100mL,贮于聚乙烯瓶中,密塞保存. 4.9 酒石酸钾纳溶液:称取50g酒石酸钾纳KNaC4H4O6·4H2O)溶于100mL水中, 加热煮沸以除去氨,放冷,定容至100Ml. 4.10 铵标准贮备溶液:称取3.819g经100℃干燥过的优级纯氯化铵(NH4Cl)溶于水中,移入1000mL容量瓶中,稀释至标线.此溶液每毫升含1.00mg氨氮. 4.11 铵标准使用溶液:移取 5.00mL铵标准贮备液于500mL容量瓶中,用水稀释至标线.此溶液每毫升含0.010mg氨氮. 5仪器 5.1 带氮球的定氮蒸馏装置:500mL凯氏烧瓶,氮球,直形冷凝管和导管. 5.2 分光光度计 5.3 pH计 6 测定步骤

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