16S Ribosomal DNA Terminal Restriction Fragment Pattern Analysis of Bacterial Communities i
A PPLIED AND E NVIRONMENTAL M ICROBIOLOGY ,0099-2240/01/$04.00?0DOI:10.1128/AEM.67.4.1935–1939.2001
Apr.2001,p.1935–1939Vol.67,No.4
Copyright ?2001,American Society for Microbiology.All Rights Reserved.
16S Ribosomal DNA Terminal Restriction Fragment Pattern Analysis
of Bacterial Communities in Feces of Rats Fed
Lactobacillus acidophilus NCFM
CHRISTOPHER W.KAPLAN,1JOHANNA C.ASTAIRE,1MARY ELLEN SANDERS,2
BANDARU S.REDDY,3AND CHRISTOPHER L.KITTS 1*
Environmental Biotechnology Institute 1and Dairy Products Technology Center,2California Polytechnic State University,
San Luis Obispo,California 93407,and American Health Foundation,Valhalla,New York 105953
Received 16August 2000/Accepted 6January 2001
16S ribosomal DNA terminal restriction fragment patterns from rat fecal samples were analyzed to track the dynamics of Lactobacillus acidophilus NCFM and discern bacterial populations that changed during feeding with https://www.wendangku.net/doc/408607739.html,ctobacillus johnsonii and Ruminococcus ?avefaciens were tentatively identi?ed as such bacterial populations.The presence of L.johnsonii was con?rmed by isolation from feces.
Many efforts to study microbial communities in the gastro-intestinal tract have focused on the large bowel and conse-quently on fecal samples (9,10,17,22,23,24).Several methods for following the complex communities in the large bowel have been employed.However,because of the abundance and di-versity of bacteria in feces,this has proved a dif?cult task.One method well suited for studying complex bacterial communities is the analysis of terminal restriction fragment (TRF)patterns (also known as terminal restriction fragment length polymor-phism analysis),which can provide a rapid and reproducible means observing bacterial population dynamics.The goal of this report was to explore a method for analyzing TRF patterns that can be used to track the dynamics of speci?c populations of bacteria in complex communities such as those in feces.TRF patterns are created by endonuclease digestion of DNA from a PCR using one ?uorescently labeled primer.Only the terminal restriction fragments are visualized after electro-phoretic separation on a DNA sequencing machine.When the target of PCR is 16S ribosomal DNA (rDNA),then the TRF pattern re?ects the taxonomic diversity of the bacteria in the sample (7,11).This method was used to compare bacterial communities from different environments with clear success (7,10,11,12,13,15,20).Comparing TRF patterns taken at different times can also monitor temporal changes in bacterial community structure.
While TRF pattern analysis allows rapid monitoring of en-vironments over time and space,it does have drawbacks.The ability of TRF patterns to accurately describe complex bacte-rial communities is complicated by variations in the conserved 16S rDNA sequences commonly used as PCR priming sites.Primer selection can dramatically alter the picture that is pre-sented in a TRF pattern,because only a fraction of the bacte-rial 16S rDNA sequences in a sample will be ampli?ed.In this study we used primers shown to hybridize well with 90%(46f)and 99%(536r)of the ?1,500bacterial 16S rDNA sequences
tested in a study by Brunk et al.(5).In addition to the coverage provided by PCR primers,there is the concern of TRF length overlap.Phylogenetically distant bacteria might produce TRFs of different lengths when digested with one endonuclease but result in TRFs of the same length when digested with a differ-ent enzyme.Thus,a more complete picture of the bacterial community is provided by an analysis of TRF patterns derived from multiple-enzyme digests.The use of several enzyme-de-rived TRF patterns can also provide data that allow the iden-ti?cation of bacteria involved in population shifts during a study (2,3,16).
The samples for this study came from an experiment re-ported by Rao et al.on colon carcinogenesis in rats fed L.acidophilus NCFM (18).Rao et al.showed that dietary NCFM suppressed the formation of precancerous lesions in the colons of rats injected with azoxymethane (18).The rats were injected with azoxymethane at 7weeks and sacri?ced after reaching 16weeks of age.We received combined fecal samples collected at 7and 16weeks of age from three groups of rats (one cage per group).Each sample was stored at ?70°C and consisted of pellets collected over a 24-h period from each cage (three rats per cage).Each group was fed the same diet except that the amount of NCFM was varied.Table 1shows the sample names,diets,and ages of the rats these samples came from.This study used TRF pattern analysis to follow NCFM content in the feces and monitor changes in the fecal bacterial communities.Creating TRF patterns for analysis.Each sample was ho-mogenized by pulverization under liquid nitrogen.DNA was extracted from 100mg of sample using a MoBio (Solano Beach,Calif.)Ultraclean Soil DNA Kit by the manufacturer’s protocol.Ampli?cation of the template DNA was performed by using a 5?-FAM-labeled primer,46f (5?-FAM-GCYTAA CACATGCAAGTCGA;Applied Biosystems Inc.,Fremont,Calif.),and unlabeled primer 536r (5?-GTATTACCGCGGCT GCTGG).Reactions were carried out in triplicate with the following reagents in 50-?l reaction mixtures:template DNA,10ng;1?buffer (Promega);deoxynucleoside triphosphates,0.6mM;bovine serum albumin,0.8?g/liter;MgCl 2,3.5mM;46f,0.2?M;536r,0.2?M;and Taq DNA polymerase (Pro-mega),2U.Reaction temperatures and cycling for fecal sam-*Corresponding author.Mailing address:Environmental Biotech-nology Institute,California Polytechnic State University,San Luis Obispo,CA 93407.Phone:(805)756-2949.Fax:(805)756-1419.E-mail:ckitts@https://www.wendangku.net/doc/408607739.html,.
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ples were as follows:94°C for2min;35cycles of94°C for2 min,48.5°C for1min,and72°C for1min;and one cycle of 72°C for10min.Primers were removed and amplicons were concentrated using the MoBio PCR Clean-Up kit according to the manufacturer’s protocol.Fluorescently labeled DNA(200 ng)was cut with one restriction endonuclease enzyme—Msp I, Dpn II,or Hae III(2.0to4.0U;New England Biolabs,Beverly, Mass.)—in the manufacturer’s recommended reaction buffers. Reaction mixtures were incubated for5h at37°C and then immersed in a65°C water bath for20min.After ethanol
precipitation the DNA was dissolved in18?l of formamide (Bio-Rad,Benecia,Calif.),with1?l each of Genescan Rox500 (Applied Biosystems)and Rox550-700(BioVentures,Mur-freesboro,Tenn.)size standards.The DNA was denatured at 95°C for5min and snap-cooled on ice.Samples were run on an ABI Prism310Genetic Analyzer.Genescan3.1software with a50-U detection threshold,Local Southern size matching, and heavy smoothing were used to quantify the electrophero-gram output.
Sample data consisted of the size(base pairs)and peak area for each TRF peak in a pattern.Because the amount of DNA loaded on the capillary cannot be accurately controlled,the sum of all TRF peak areas in a pattern(total peak area)varied between TRF patterns.To compensate for this variation,it was necessary to normalize peak detection thresholds and peak areas.The peak detection threshold was normalized by creat-ing arti?cial detection thresholds for each sample.The new threshold value was created by multiplying a pattern’s relative DNA ratio(the ratio of total peak area in the pattern to the total peak area in the sample with the smallest total peak area) by580area units(the area of a peak at the50-U detection threshold).TRF peaks with areas less than the new threshold value for a sample were removed from the data set(Table2). Peak areas were then normalized by converting the value of each remaining peak area to parts per million of the new total area.
Monitoring Lactobacillus acidophilus NCFM in feces.All the TRF patterns for rats fed NCFM included a large TRF peak2 to3bp smaller than that predicted for NCFM by rDNA se-quence analysis(Table3).A pure culture of NCFM produced the same size TRF peak as the one seen in the fecal patterns. This difference between predicted and observed TRF length has been described previously,though not fully explained(4,7, 11,13).
Visual inspection of the TRF patterns shows a large NCFM-associated peak in feces from rats fed NCFM,in contrast to a very small peak in those not fed NCFM(Fig.1).Fortunately, there appeared to be very few bacteria with the same TRF peaks as NCFM in the feces of rats not fed NCFM(Table4). Regardless of the enzyme used to create a TRF pattern,TRF peak areas increased with dietary NCFM content.In fact,the relative amount of peak area attributable to NCFM doubled in rats fed twice as much NCFM(Table4).This does not neces-sarily imply that the feces harbored twice as many live cells of NCFM because PCR was performed on DNA extracted di-rectly from the feces and could have been isolated from non-viable cells.
The ability of TRF patterns to detect the relative amount of NCFM DNA in the feces suggests that TRF patterns may be used for the relative quantitation of some bacteria in complex communities.In fact,Clement and Kitts reported a one-to-one correspondence between the proportion of NCFM cells added to a fecal sample and the percentage of the total TRF peak area present as L.acidophilus TRF peaks(6).This correspon-dence may be in?uenced by both PCR primer homology and 16S rDNA copy number in L.acidophilus.Previous papers have postulated that an average bacterial community has3.8 16S rDNA copies per genome(8)and L.acidophilus has four copies(19).
Monitoring changes in fecal communities.While the num-ber of samples collected in the study of Rao et al.was too small to produce statistically signi?cant data(18),we were interested in testing methods for analyzing TRF patterns to detect spe-ci?c organisms that contribute to differences in bacterial com-munities.A combination of principal component analysis (PCA)and database matching was investigated. Covariance PCA(21)was performed on normalized data sets consisting of TRF peak areas combined from all three
TABLE1.Rat fecal samples with respective diets as received from the American Health Foundation for use in this study
Fecal sample Age(wk)Probiotics in the diet
YR0%7Control
YR2%72%L.acidophilus(4.2?109CFU/g) YR4%74%L.acidophilus(8.4?109CFU/g) OR0%16Control
OR2%162%L.acidophilus(4.2?109CFU/g) OR4%164%L.acidophilus(8.4?109CFU/g)
TABLE2.Example of truncation procedure used to determine smallest observable peak for each sample in a data set
Sample Total area
(area units)Ratio of total
peak areas
Threshold value
(area units)
Smallest200,0001:1580a Big400,0002:11,160 Bigger2,000,00010:15,800 a Minimum detectable peak area with Genescan software.
TABLE3.TRF peak matches to organisms from
the RDP database
TRF peak set a and
organism
TRF matching length for:
Msp I Dpn II Hae III TRF peaks in the L.acidophilus set141156207 Lactobacillus acidophilus NCFM144158209 Lactobacillus crispatus143157208 Lactobacillus amylovorus141155206 TRF peaks in the L.johnsonii set149287293 Lactobacillus acidophilus ssp.johnsonii151288294 Lactobacillus gasseri151288294 Lactobacillus johnsonii151288294 TRF peaks in the R.?avefaciens set243233264 Ruminococcus?avefaciens(5strains)244234264 Unidenti?ed rumen bacterium(3clones)244234264 Ruminococcus?avefaciens(1strain)246236266 Unidenti?ed rumen bacterium(1clone)246236266 a TRF peak sets(data in boldface type)were seen in TRF patterns(Fig.3), while TRF lengths ascribed to organisms were predicted from16S rDNA se-quences in the RDP database.
1936KAPLAN ET AL.A PPL.E NVIRON.M ICROBIOL.
enzyme-derived TRF patterns.Samples from rats with NCFM in their diet (samples YR 2%,YR 4%,OR 2%,and OR 4%[Table 1])were analyzed after removing peaks speci?c to NCFM to prevent PCA from separating the samples based solely on the dominant NCFM peaks.PCA produces a collec-tion of loadings for each principal component that describes the relative contribution of each variable to the principal com-ponent score for a sample (21).This allows an investigator to focus on those variables (TRF peaks in this case)that contrib-ute to differences in principal component scores between sam-ples.The TRF peaks with large loadings can then be matched to database-predicted TRF lengths for presumptive identi?ca-tion of signi?cant bacterial populations.The ?rst principal component (PC1)appeared to separate samples based on the age of rats (sample group YR versus OR [Fig.2]).The second principal component (PC2)appeared to separate samples by NCFM content (0%versus 2and 4%[Fig.2]).This suggested that some bacteria differed in levels of abundance in the rat feces depending on age and/or diet.
For each sample,TRF pattern data from the three enzyme digests were used to look for matches to database-predicted TRF lengths.16S rDNA sequences from the Ribosomal Database Project (RDP)7.1(14)were used to create a new database containing the calculated TRF peak sizes for 6,358organisms after PCR with primers 46f and 536r.To identify bacteria in a fecal sample,each organism from the database was compared to the TRF peaks from three different enzyme digests using a Microsoft Excel macro.Differences are com-monly reported between observed TRF lengths and those pre-dicted by sequence analysis (5,6,11,13).To compensate for this discrepancy,an observed TRF (from a sample)was al-lowed to be within ?1to ?4of the predicted TRF length (in the database).
TRF peaks with large,congruent loadings for PC1were then used to search through database matches to identify presump-tive bacterial species whose abundance differed with the age of the rats.Two sets of TRF peaks clearly ?t these criteria and were thus chosen for closer investigation (Fig.2).The TRF peak sets were named for bacteria in the database that matched the set (Table 3).We could now monitor two TRF peak sets that showed different dynamics during the study of Rao et al (18).
Lactobacillus johnsonii TRF peak set.Peak areas from the L.johnsonii set were more abundant (1.8to 6.7%)in young rats than in old rats (0.3to 2.2%)as visualized in the PCA graph (Fig.2).Peak areas decreased as the rats aged,
regard-
FIG.1.Close-up of Hae III-derived TRF patterns from young rats in the study.The TRF patterns from feces of rats not fed NCFM (A)and from feces from rats fed 2%NCFM (B)are shown.Peaks of interest in this study are labeled for ease of discussion (Lba,L.acidophilus NCFM).
V OL .67,2001TRF ANALYSIS OF FECAL FLORA IN RATS FED L.ACIDOPHILUS 1937
less of dietary NCFM (Table 4).A similar decrease in NCFM peak areas was seen as the rats aged.Since both species of lactobacillus decreased in relative abundance,perhaps some-thing changed in the older rat’s cecal environment that made it less hospitable to lactobacillus species in general.
To con?rm the presence of L.johnsonii in the feces,three different bacteria were isolated at random from two fecal sam-ples (YR 0%and YR 4%).Rat fecal samples were diluted and plated on MRS agar (Difco,Sparks,Md.).Colonies were picked and streaked twice for purity.DNA from each isolate was then processed for TRF analysis as described above.All three bacteria produced TRF peaks identical to the L.johnso-nii TRF set.Extracted DNA samples were ampli?ed for se-quencing by PCR as described above except that the forward primer was replaced with unlabeled 8df (5?-AGAGTTTGTT
CMTGGCTCAG).Sequencing reaction mixtures (10?l)con-tained DNA,4ng;primer,1?M;ABI Big Dye (Perkin-Elmer),4?l;and PCR water,0.4?l.Samples were run on an ABI 377DNA sequencer,and the resulting sequences were analyzed in Autoassembler (Perkin-Elmer).A BLAST search of the sequences gave L.johnsonii as a 99%match.This indicates not only that L.johnsonii was actually present in the feces but also that it was numerically abundant enough to be easily isolated after the freezing and processing steps the feces were taken through.
Ruminococcus ?avefaciens TRF peak set.In seven-week-old rats the R.?avefaciens set represented an average of 5%of the total peak area in control rats,while those fed NCFM showed an average of 1.7%.By age 16weeks,the average peak area of the R.?avefaciens set had increased to 6%in the NCFM-fed rats and 7%in the controls (Table 4).In contrast with L.johnsonii ,this suggests that R.?avefaciens was adversely effected by NCFM at an early stage but eventually reached levels similar to those of the controls in spite of the continuing presence of NCFM.Perhaps NCFM altered the cecal environ-ment in such a way that R.?avefaciens growth was inhibited in young rats.The increase in R.?avefaciens TRF peak areas to levels similar to those seen in control rats by 16weeks of age suggests that this effect was only temporary.Perhaps the in-hibitory effect against R.?avefaciens in young rats was dimin-ished as the levels of NCFM dropped in the older rats.Rao et al.found that feeding NCFM correlated with a signi?cant decrease in fecal ?-glucuronidase activity (18).It is not unrea-sonable,therefore,to expect to ?nd altered TRF peak areas corresponding to bacteria known to produce ?-glucuronidase enzymes.Intriguingly,Ruminococcus species have been re-cently reported to express ?-glucuronidase (1).
Conclusions.Although no obvious mechanism behind the bene?cial health effects seen in the Rao et al.study could be ascertained here,TRF patterns proved to be a useful tool for monitoring the effects of probiotic dietary supplements on bacterial community structure.TRF pattern analysis clearly has the ability to detect changes in bacterial communities due to the introduction of probiotic supplements.Unfortunately,the statistical signi?cance of the observed differences in TRF patterns could not be accurately assessed in this case because the feces of three rats per treatment were combined during sampling.However,TRF patterns were able to identify organ-isms involved in the dynamics of bacterial community struc-ture,a con?rmation of suggestions by researchers using this tool (2,3,10,16).The isolation of fecal L.johnsonii strains producing the exact TRF peaks seen in fecal TRF
patterns
FIG.2.PCA of three combined TRF patterns for each fecal sam-ple.Data for each sample consist of TRF peak areas from all patterns made after digestion with each of the three enzymes.Arrows represent principal component loadings for the TRF peak sets listed in Table 3:arrows with solid lines,L.johnsonii set;arrows with dashed lines,R.?avifaciens set.The TRF lengths (base pairs)and enzymes (M,Msp I;D,Dpn II;H,Hae III)are indicated.Percent variation covered by each principal component is indicated in parentheses in the axis titles below and to the left,along with principal component scores.The right and top axes show values for principal component loadings.
TABLE 4.Peak areas from each fecal sample for each TRF peak set
Fecal sample
Mean (SD)peak area (%of total area)when indicated enzyme was used
L.acidophilus TRF peak set
L.johnsonii TRF peak set R.?avefaciens TRF peak set Msp 141
Dpn 156
Hae 207
Msp 149
Dpn 287
Hae 293
Msp 243
Dpn 233
Hae 264
YR 0%0.1(0.0)0.0(0.0)0.4(0.4) 1.8(1.0) 2.1(0.4) 3.0(0.4) 5.1(1.5) 4.3(0.7) 4.4(1.4)YR 2%9.5(1.2)9.7(4.1) 6.1(2.6) 6.2(1.9) 6.7(0.1) 6.4(0.3) 1.8(0.9) 2.9(0.9) 2.9(1.0)YR 4%13.5(3.3)15.3(1)15.2(10.8) 1.8(0.8) 3.2(0.6) 2.5(0.3)0.5(0.2) 1.2(0.1)0.8(0.4)OR 0%0.0(0.0)0.0(0.0)0.2(0.2)0.9(0.1) 1.7(0.4) 2.0(0.7) 4.3(0.4)7.2(0.4)9.6(0.4)OR 2% 4.6(1.3)8.5(3.9) 6.1(1.3) 1.1(0.2) 2.2(0.4) 1.9(0.5) 3.4(0.4) 6.1(0.7) 6.5(1.7)OR 4%8.7(4.1)11.6(1)9.6(2.7)0.3(.01) 1.9(1.8)0.5(0.2) 3.6(2.1)7.1(1.0)7.0(0.5)
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after a database search predicted the presence of this bacte-rium con?rmed the accuracy of this method.The ability to associate TRF peaks with organisms allowed a deeper under-standing of bacterial community dynamics with some unfore-seen results.The addition of L.acidophilus NCFM to the young rat’s diet appeared to inhibit the growth of an R.?avi-faciens strain and decrease?-glucuronidase activity(18).Why this happened,whether it is a reproducible effect,and what the signi?cance of this interaction might be are now topics for investigation in a new study designed speci?cally to explore these?ndings.
Thanks are due to the Environmental Biotechnology Institute at Cal Poly San Luis Obispo for funding this study and to the Unocal Cor-poration for their support of TRF studies that has provided the foun-dation for this study at the EBI.
We also thank the staff at EBI that helped with the research:Raul Cano,Brian Clement,Tobe Cox,and Alice Hamrick.
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建筑设备基础知识与识图
建筑设备基础知识与识图
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一、筒答题 1.建筑内给水系统由哪几部分组成? ２.水箱一般设置哪些配管? ３.常用的给水附件有哪两类?各举一例。 4．简述蒸汽供暖与热水供峻比较的优缺点。 ５.简述垂直单管顺流式系统的优缺点。 6、给排水管道如何防止腐蚀？ 7、机械循环热水采暖系统中异程式系统与同程式系统各有何优缺点? ８、通风与空气调节在概念上有何区别? 9、室内照明灯具有哪几种布置方式?各有什么特点?分别适用于什么场合? １0、简述卫生器具的满水和通水试验要求。 二计算题 1.某住宅楼有住户66户,每户设有洗脸盆、低位冲洗水箱大便器、洗涤盆、浴盆各一个。试计算该楼的设计秒流量。当v＝１.０m/ｓ时,引入管的管径为多少?(α=１.1,k ＝0) 2、在自然热水采暖系统中，锅炉与最底层散热器的高差为8ｍ,当供水温度为９5℃(密度是96１.９2kg/m3）,回水温度为7０℃(密度是97７.8１ｋg/m3）时,则可产生循环作用压力为多少？ ３、普通的15W的白炽灯的初始光通量为110 ｌｍ,普通的15W的荧光灯的初始光通量为450 lm，试比较哪种灯的发光率高？ 器具名称洗脸盆洗涤盆浴盆坐便器 额定流量L/s ０.２０．2 ０.2 ０．1
一、判断：(每题2分,共20分） １、为了检验各卫生器具与连接件接口处的严密性，卫生器具安装完毕必须进行通水试验。（×） 2、高压蒸汽采暖系统可以采用重力回水或者机械回水方式。（×) P262 3、大型民用建筑设施的供电，一般电源进线为6~10ｋv,经过高压配电所,再用几路高压配电线,将电能分别送到各建筑物变电所，降为38０/220V低压，供给用电设备。（×) ４、风机出口要有不小于管道直径的5倍的直管段，以减小涡流和阻力。( ） P278５、ＰE线和ＰEN线上一般不允许设开关或者熔断器。(√ ) P265 6、低压断路器又称低压自动空气开关。它既能带负荷通断正常的工作电路又能在短路、过负荷及电路失压时自动跳闸，因此被广泛用于低压配电系统中。(√ ) ７、管道布置应该遵循水管让风管,有压管道让无压管道原则。（） 8、全自动楼梯过道照明开关可根据声音传感装置随时提供照明。(×）
1交通工程的设计说明书(施工图的设计)
交通工程设计说明书 1 工程概述 空港大道南起黄石东路，连接现状云城西路，北至106国道，全长约6公里。 本项目为空港大道（黄石东路-109国道）工程北段，工程南起于规划七路地铁检修段下沉道路，北止于106国道。主线长337.074m，城市主干道标准，设计速度为60km/h，道路标准红线宽度为43.5m，双向8车道；左辅道长384.171m，右辅道长397.542m，城市次干道标准，设计速度为40km/h，，道路标准红线宽度为45.6m，双向4车道。 项目地理位置图 2 本次设计采用的规范和标准 1、《中华人民共和国道路交通安全法》。 2、《道路交通标志和标线第1部分：总则》GB 5768.1-2009。 3、《道路交通标志和标线第2部分：道路交通标志》GB 5768.2-2009。 4、《道路交通标志和标线第3部分：道路交通标线》GB 5768.3-2009。 5、《路面标线用玻璃珠》GB/T 24722-2009。 6、《道路预成形标线带》GB/T 24717-2009。 7、《变形铝及铝合金化学成分》GB/T3190-2008。 8、《一般工业用铝及铝合金板、带材第1部分：一般要求》GB/T 3880.1-2006。 9、《一般工业用铝及铝合金板、带材第2部分：力学性能》GB/T 3880.2-2006。 10、《一般工业用铝及铝合金板、带材第3部分：尺寸偏差》GB/T 3880.3-2006。 11、《道路交通标志板及支撑件》GB/T 23827-2009。 12、《公路交通标志反光膜》GB/T18833-2012。 13、《道路交通信号灯》GB 14887-2003。 14、《道路交通信号灯设置与安装规范》GB 14886-2006。 15、《人行横道信号灯设置规范》GA/T851-2009。 16、《广州市道路交通管理设施设计技术指引》 17、《无障碍设计规范》GB 50763-2012。 18、《公路工程质量检验评定标准》JTG F80-2004。 19、《道路交通标志板及支撑件》GB/T 23827-2009。 20、《城市道路交通规划设计规范》GB 50220-95。 21、《城市道路交叉口规划规范》GB 50647-2011。 22、《城市道路交叉口设计规程》CJJ 152-2010。 23、《城市道路交通设施设计规范》GB 50688-2011。 24、《公路养护安全作业规程》JTG H30-2015。 3 交通标线 3.1 设计原则 1、各标线的设置应符合《道路交通标志和标线第3部分：道路交通标线》（GB5768.3-2009）的要求。 2、标线用于管制和引导交通，应具有鲜明的确认效果。标线设置在路面上，应具有附着力强、经久耐磨、使用寿命长、耐候牲好、抗污染、抗变色等性能。同时，标线还应具有施工时干燥迅速、施工方便、安全性能好等性能。在夜间，标线应具有良好反光效果，对行驶车辆的诱导有重要作用。 3、除减速标线外，一般热熔型涂料的冷膜厚度为1.8±0.2mm。
华为eNSP模拟器命令PDF.pdf
华为模拟器命令 计算机命令 PCA login: root ；使用root用户password: linux ；口令是linux # shutdown -h now ；关机 # init 0 ；关机 # logout ；用户注销 # login ；用户登录 # ifconfig ；显示IP地址 # ifconfig eth0
思科路由模拟器命令大全
命令要在一行内打完，窗体可以自动拉大。Aux口这个版本暂不支持。 支持三级Switch网络,需要路由时支持两级Switch。 设置的主机名中不要含有空格。F2、F3键清屏(为了方便而加) Ctrl+P 历史命令，建议使用方向键。 Ctrl+z 回根， 建议使用end命令 Ctrl+Break 路由器进入ROM监控状态。交换机清除特权密码。 双击设备进入终端操作 单击设备的接口可以实现画线 单击画有线的接口可以删除连线 在指定的设备按下鼠标右键可以删除设备。 在指定的设备按下鼠标左键可以实现移动。 按Tab键，可以得到命令全称。 键入"?"可以得到当前状态下的命令帮助。 接收的作业名固定为当前目录下的sim.txt。 系统的配置文件是：sim.ini。 计算测验得分中，ping PCA->PCB;5 表示ping通得5分， SWAf6=2;5表示交换机SwitchA的f0/6在vlan 2时得5分。 ~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~ PCA login: root ；使用root用户password: linux ；口令是linux # shutdown -h now ；同init 0 关机 # logout # login # ifconfig ；显示IP地址 # ifconfig eth0
工程识图之平法标注(板)
工程识图之平法标注(板) 本文主要从有梁楼盖板、无梁楼盖板、楼板相关构造三个方面讲述板平面标注的具体规则。 一、有梁楼盖板 （一）、概念。以粱为支座的楼面和屋面板。如图：
（二）、标注。有梁楼盖板平法标注，系在楼面板和屋面板布置图上，采用平面注写的表达方式。板平面注写主要包括板块集中标注和板支座原位标注。
1、板块集中标注 A、标注内容。 包括板代号序号、板厚、上下部贯通纵筋等信息。 B、标注规则 （1）、板结构平面坐标方向 1)当两向轴网正交时，图面从左至右为X向，从下至上为Y向； 2)当轴网转折时，局部坐标方向顺轴网转折角度做相应转折； 3)当轴网向心布置时，切向为X向，径向为Y向； （2）、板块编号
（3）、板厚注写。①板厚注写为h=xxx（为垂直于板面的厚度），当悬挑板的端部改变截面厚度时，用斜线分隔根部与端部的高度值，注写为h=xxx/xxx,当设计已在图注中统一标明板厚时，此项可不注。②集中标注处标明板厚，如：h=120，图名处标注板厚，如：12.000-21.000板平面布置图h=120。 （4）、板贯通纵筋。 ①、贯通筋前用B代表下部，以T代表上部，B&T代表下部与上部； ②、X向贯通纵筋以X打头，Y向贯通纵筋以Y打头，两向贯通纵筋配置相同时以X&Y打头；格式为： B：XΦxx@xxx;YΦxx@xxx T：XΦxx@xxx;YΦxx@xxx ③、当为单向板时，另一向贯通的分布筋可不必注写，而在图中统一注明。 ④、当在某些板内配置有构造钢筋时，则X向以Xc，Y向以Yc打头注写，例如： XB h=150/100 B：Xc&YcΦ8@200)； ⑤、当Y向采用放射配筋时，设计者应注明配筋间距的度量位置； ⑥、当贯通钢筋采用两种规格的钢筋“隔一布一”时，表达为Φxx/ yy@×××,表示直径为xx的钢筋和直径为 yy的钢筋二者之间的间距为×××，如图：
公路工程施工图设计
本科学生毕业论文 设计题目：黑洛公路（K590-K593+500）段施 工图设计 学院：建筑工程学院 年级：2008级 专业：土木工程 姓名： 学号： 指导教师： 2012年 5 月30 日
摘要 黑洛公路是黑龙江省公路建设的重点项目之一，它连接了黑河市和大兴安岭地区，设计行车速度40公里/小时，采用二级公路设计标准，全长740km。它的建设对完善黑龙江省内公路交通网，促进公路沿线地区经济发展，带动沿边地区早日脱贫致富，促进黑河市和大兴安岭市之间的联系，有重要意义。本设计根据沿线地质、地形、水文等自然条件，以及黑洛公路外业勘测资料，参照交通部颁发的各种技术标准、规范，完成K590—K593+500段施工图设计。 本次设计利用各种计算机软件，包括：应用纬地道路辅助设计软件HintCAD5.88、绘图软件AutoCAD2004、办公软件Offices2003等，对黑洛公路平面、横断面、纵断面、路基、路面、排水工程、附属工程、平面交叉及沿线设施等进行了施工图设计，并绘制出相应表格和图纸，确定了沥青混凝土路面和水泥混凝土路面的各结构层厚度，本着优质、高效、经济、合理的原则进行施工组织设计。 关键词 路线设计；路基；沥青混凝土路面；水泥混凝土路面；施工组织
Abstract Heiluo road is one of the key project in Heilongjiang province, it connects the Heihe city and the Daxinganling city . Its design speed is 40km/h, which adopt three-stage highway design standard. The full-length is 740 km. The meaning of its construction to the consummation of the road network, is promoting along the route area economy development, bringing poverty area to get rid of poverty and become rich soon, and promoting crosswise relation between the city group of the northeast of Heilongjiang Province, which is significant. This design is based on the field operation survey data, as well as along the route natural condition including geology, terrain, hydrology and the related technical standard, which is issued by the Ministry of Transportation & Communications. According to the above we can complete the K590to K593+500section construction drawing design. The computer technology is fully used in this design. This design uses the latitude path assistance design software HintCAD5.8, cartography software AutoCAD2004, office software Offices2003 and so on. Meantime this design also completes construction drawing design which includes the highway route, the roadbed, road surface, drainage work plan cross ,the attached project and the facility along the route and so on, and draws up the corresponding graph and form. Through to designing of the Asphaltic concrete pavement and Cement concrete pavement, I ensure that thickness on each Structural layer and design the construction organization by the high-quality, efficient, economic and rational principles. Key words Route design,Roadbed,Asphaltic concrete pavement,Cement concrete pavement, Construction organization
2017年二代基因测序市场分析
二代基因测序市场分析 目录 一、二代测序资本市场融资火爆 二、二代测序为何如此受市场追捧？ 三、测序市场当前现状及存在的问题 四、未来趋势判断及启示 一、二代测序资本市场融资火爆 在整个体外诊断市场，生化和免疫经过多年的发展，市场格局已基本形成；分子诊断目前市场规模还不大，但增速较快，潜力被广泛看好。在分子诊断的不同技术平台中，又以近两年随着“精准医疗”概念迅速崛起的二代测序（NGS）领域最受关注，国内就存在上百家同类企业，且资本市场融资火爆，估值也是居高不下。简单梳理了几个较有代表性的融资案例如下： 1、华大基因 华大基因是国内基因测序领域的领导者，在NGS产业链上、中、下游均有所布局。2012 年-2015 上半年营收分别为7.95亿、10.47亿、11.32亿、5.65亿，净利润对应 8500万、1.73亿、5900万，8200万。2015 年最近一轮融资引进 PE机构以 191 亿估值作为增资及转让的定价基础，引入和玉高林及中国人寿，融资20 亿元，投后估值 210亿。而华大基因按照其IPO的计划定价得出估值约为156亿元，相当于相较一级市场的估值，华大基因的估值实际已缩水超过50亿元，出现了一二级市场的倒挂。
2、贝瑞和康 贝瑞和康成立于 2010 年，利用二代测序平台，在 NIPT 领域占据了主要的市场，全国 100 家医疗机构获得 NIPT 试点资格，70％使用贝瑞和康的仪器及试剂。2015 年底最近一轮融资估值 100 亿，融资金额 3.3 亿左右，引入了海通兴泰、尚融宁波、中信锦绣等机构；2016 年 12 月，上市公司天兴仪表作价 43 亿元购买贝瑞和康 100％股权，若交易完成，贝瑞和康将成功借壳上市。值得关注的是，贝瑞和康 43 亿的借壳价与此前一级市场百亿估值相比，有着较大的出入，同样出现了一二级市场的倒挂，其原因在于市场对贝瑞和康的预期降低还是之前 PE入股时估值过高，也是值得思考推敲的。 3、碳云智能 2015 年 10 月成立，由原华大基因 CEO 王俊等联合创办，定位在“医疗+人工智能”方向，运用人工智能技术进行数据处理，目标是打造智能健康管理大数据平台。成立半年左右，即 2016 年 3 月完成 A 轮融资，融资金额 10 亿元，估值约 65 亿元，腾讯、中源协和、天府集团等机构领投。碳云智能所锚定的大数据积累及解读这个细分相对而言存在一定的门槛，是未来的一个发展方向，但存在的难度及障碍也很大，还有很漫长的路要走。天使期就以如此高的估值融到资更多的还是王俊的“名人”效应，但即使是 65 亿的高估值，王俊依然表示：这只是碳云智能最便宜的时候。 4、燃石医学 2014 年成立，定位于基于 NGS 平台的肿瘤精准医疗基因诊断领域，产品线包括基于组织层面的靶向药物用药指导、易感基因筛查及液体活检，目前以 LDT的形式进行检测。2015 年下半年曾以 15 亿估值获投资机构 1.5 亿元投资，今年正以 30 亿估值融资 2 亿元，进展未知。
android常用的adb命令
第一部分： 1. ubuntu下配置环境anroid变量： 在终端执行 sudo gedit /etc/profile 打开文本编辑器，在最后追加#set android environment 2. 运行Eclipse，还需要配置JAVA环境变量 #set java environment JAVA_HOME=/home/loginname/jdk目录名 JRE_HOME=/home/loginname/jdk目录名/jre export PATH=$JAVA_HOME/bin:$JRE_HOME/bin:$PATH export CLASSPATH=$JAVA_HOME/lib:$JRE_HOME/lib:$CLASSPATH export PATH=/home/loginname/android-sdk-linux_86/tools:$PATH 保存后，重启 3. 加入设备ID标识到当前的android调试环境 在/home/loginname/.android文件中添加，android终端的设备标识ID 4. 更新sdk 【android update sdk】更新sdk 5. 常用命令： 【adb help】获取帮助 【adb get-serialno】获取设备串号 【adb root】获取root权限，对部分手机有用，大部分上市手机已经把这个功能给关闭了。获取root权限还可以通过豌豆夹等第三方工具。 【adb kill-server】杀死adb的server进程。 【adb start-server】启动adb的server进程。 【adb devices】查看建立连接的android终端。 【android list】显示所有android终端 【ddms】启动ddms 【adb remount】重新加载硬盘。 【adb reboot】重新启动终端。 【adb install /path/appname】安装应用程序 【adb uninstall com.android.helloworld】卸载helloworld，系统带的应用不可卸载。【adb push /sourcepath/filename /destinationpath/filename】从pc端拷贝一个文件到终端【adb pull /sourcepath/filename /destinationpath/filename】从终端拷贝一个文件到pc端【adb logcat -v time -s TAGNAME】显示自定义的TAGNAME并显示时间 【adb ppp】通过usb启动ppp 【adb monkey -p /path/appname -v 100】对程序进行强制测试100次 【adb shell】在pc端启动shell命令终端。
交通工程施工图设计说明
交通工程施工图设计说明 1设计标准 1.《城市道路工程设计规范》（CＪJ 37-２01２） 2.《道路交通标志和标线》（GB576８—20０9) 3.《道路交通标志板及支撑件》（ＧＢ/T2３827-2０09) 4.《公路交通标志反光膜》（GB／T１883３-2002) 5.《路面标线涂料》（JT/Ｔ２８0－２004） 6.《路面标线用玻璃珠》（GB/T２4７72－200９) 7.《道路交通信号灯安装规范》(GB１48８6—2006) 8.《道路交通信号灯》（GＢ1488７—2０03/XG1—20０6) 9.《道路交通信号控制机》（ＧA252８0—２010） 10.《公路交通标志和标线设置规范》（JTＧＤ８2—2009） 11.《成都市道路指路标志系统》（ＤB5１０100/T 129—2013） 12.《四川省旅游标志标牌设置标准》 13.《公共场所双语标志英文译法》 14.《成都市道路交通设施设置指南》 15.《电气装置安装工程施工及验收规范》（GＢＪ2３20８２） 16.《中华人民共和国道路交通安全法》 17.《中华人民共和国道路交通安全法实施条例》 18.现行有关材料标准 2设计内容 本次设计包含：1、广州路交通工程；2、海口路交通工程;3、海南路交通工程4、兴隆湖十四号路交通工程5、广西路交通工程;以及与本项目相交道路的交叉口１0０m 范围内的标志牌. 道路等级：1、广州路城市主干路;2、海口路城市支路；3、海南路城市次干路4、兴隆湖十四号路城市主干路5、广西路城市次干路。主干路安全设施等级按A级配置设计。次干路、支路安全设施等级按B级配置设计。 设计车速：主干路主车道60Km/ｈ，交织段集散车道30Ｋｍ/h;次干路设计速度40Km/ｈ;支路设计速度3０Km/h。 车道宽度:主车道3。５m,集散车道3．25ｍ，交叉口渠化段进口车道３。25m。 2.1交通标志 2.1.1设计原则 1.道路上的标志具有法律效力,应根据交通管理法规及有关标准,正确地设计与设置 标志。 2.标志的设计应根据道路的交通量及其构成，计算行车速度,平、纵面线形,桥涵、隧 道等构造物的位置,投资与自然环境等因素综合考虑。 3.标志的设置不得侵占道路建筑限界。标志牌不应侵占路肩,应确保净空高度。 4.标置的设置数量应平衡、均匀，避免信息过载或疏漏，重要信息可重复设置。在 某些情况下,应根据交通标志的重要性划分层次，保障重要标志的位置。在路况较好的长直路段也应设置一些提示性的标志。 5.以不熟悉该道路及周围路网体系的道路使用者为设计对象，交通标志的设置应充 分考虑整个路网和该道路之间的关系。 6.在设置交通标志时，应注意与交通标线的配合使用.交通标志的设置还应周围环境 等其它沿线设施的协调配合。 7.道路全线应采用统一的设置标准、版面规格，在特殊情况下,交通标志的设置位置 与统一性发生矛盾时，应优先保证交通标志的可读性和视认性。 8.交通标志的版面设计应以驾驶人员在计算行车速度下行驶时能及时辨认标志信息 为基本原则，同时力求使版面美观、醒目。 9.交通标志的结构设计应符合“充分满足功能要求、尽量考虑美观、统一规格并降 低造价”的原则. 2.1.2设计内容 2.1.2.1交通标志种类 本设计交通标志主要有四种：
adb基本的命令讲解教程【安卓通用】
一、【问与答】 疑问：adb是什么? 回答：adb的全称为Android Debug Bridge，就是起到调试桥的作用。通过adb我们可以在Eclipse中方面通过DDMS 来调试Android程序，说白了就是debug工具。adb的工作方式比较特殊，采用监听Socket T CP 5554等端口的方式让IDE和Qemu通讯，默认情况下adb会daemon相关的网络端口，所以当我们运行Eclipse时adb进程就会自动运行。 疑问：adb有什么用? 回答：借助adb工具，我们可以管理设备或手机模拟器的状态。还可以进行很多手机操作，如安装软件、系统升级、运行shell命令等等。其实简而言说，adb就是连接Android手机与PC端的桥梁，可以让用户在电脑上对手机进行全面的操作。 疑问：作为最关键的问题，adb工具如何用? 回答：这也是今天这篇教程的关键所在，下面我会为大家介绍一下adb工具如何操作，并介绍几个常用命令以备大家参考! 二、【准备工作】 步骤1：安装USB驱动 下载并安装H TC完整驱动程序( HTCDriver3.0.0.018.exe(13.48 MB, 下载次数: 75) ) 手机进入设置-应用程序-开发-USB调试，将第一个选项打钩选中。然后通过USB线连接电脑，提示安装驱动。 步骤2：软件准备 1、把ADB工具adb.rar(375.41 KB, 下载次数: 161) 解压放到你的电脑系统盘的根目录下 2、运行中，输入cmd进入命令提示符。以下命令均在命令提示符下进行。开始（点开始在输入框里输入CMD） 3、输入cd c:\adb回车，进入ADB所在目录
(完整版)建筑设备安装识图与施工工艺
《建筑设备安装识图与施工工艺》课程标准 编制单位：应用工程学院 课程建设负责人：哈丽娜 课程名称：建筑设备安装识图与施工工艺 适用专业：建筑工程技术、工程造价 总学时：60 学分：4
一、课程的定位、性质与任务 《建筑设备安装识图与施工工艺》是建筑工程技术、工程造价专业一门重要的专业技术课，属于B类课程。对于建筑工程技术专业学生来说，是土建施工员等职业岗位工作过程中的部分内容，是专业的拓展课程，对于工程造价专业学生来说，该课程专业基础课，为后续进行安装工程计量计价奠定基础。 《建筑设备安装识图与施工工艺》课程系统地介绍了建筑设备基础知识、建筑给水系统、建筑消防给水系统、建筑排水系统、热水及燃气供应系统、建筑给排水施工图、建筑采暖施工图、建筑通风、防排烟与空气调节、建筑电气施工图与建筑智能系统。该课程是一门实践性很强的课程，它作为建筑设备安装工程预算、工程监理等课程的基础，广泛应用于建筑工程、安装工程等各种工程技术领域。 该课程的任务是使学生掌握建筑设备基础知识、具备基本施工图识读能力，培养学生分析问题的能力，从而，为后续课程的学习打下坚实基础。 二、课程设计思路 与行业企业合作，就课程的内容、标准进行设计；基于工作任务和工作过程，整合、序化教学内容，突出课程的针对性，强化工作任务的实用性；以学生职业能力培养为核心,加强工学结合，“教、学、做”一体，精心组织教学，强化能力培养
校企合作，建立校外第二教学课堂，为学生创造有利条件，参加社会实践，加强工学结合，培养建筑设备的施工工艺和技术标准。 课堂教学与建筑模型、建筑仿真软件、现场教学相结合，理论与实物相对接，消除抽象想象，与现实接轨。 在课堂采用案例教学法、任务驱动教学法等方法提高教学效果. 三、课程目标 （一）知识目标 1.掌握建筑给水排水系统的类型及适应场合； 2.掌握建筑给水排水施工图的内容及表示方法； 3.了解建筑给排水施工质量验收评定相关知识； 4.了解建筑采暖与通风空调系统的基本知识， 5.了解供电和配电系统基本知识，掌握电气照明基本知识； 6.掌握安全用电基本知识；了解建筑弱电初步知识； 7.掌握建筑防雷接地基本知识； 8.掌握建筑设备工程与土建施工配合的知识； 9.了解电气施工质量验收评定的关知识； 10.熟悉安装工程施工验收规范，了解建筑设备安装施工方案的编制方法。 （二）能力目标
建筑图标注
建筑图纸符号含义大將軍 一、箍筋表示方法： ⑴φ10@100/200(2)表示箍筋为φ10 ，加密区间距100，非加密区间距200，全为双肢箍。 ⑵φ10@100/200(4)表示箍筋为φ10 ，加密区间距100，非加密区间距200，全为四肢箍。 ⑶φ8@200(2)表示箍筋为φ8，间距为200，双肢箍。 ⑷φ8@100(4)/150(2)表示箍筋为φ8，加密区间距100，四肢箍，非加密区间距150，双肢箍。 一、梁上主筋和梁下主筋同时表示方法： ⑴3Φ22，3Φ20表示上部钢筋为3Φ22,下部钢筋为3Φ20。 ⑵2φ12，3Φ18表示上部钢筋为2φ12,下部钢筋为3Φ18。 ⑶4Φ25，4Φ25表示上部钢筋为4Φ25,下部钢筋为4Φ25。 ⑷3Φ25，5Φ25表示上部钢筋为3Φ25,下部钢筋为5Φ25。 二、梁上部钢筋表示方法：（标在梁上支座处） ⑴2Φ20表示两根Φ20的钢筋，通长布置，用于双肢箍。 ⑵2Φ22+（4Φ12）表示2Φ22 为通长，4φ12架立筋，用于六肢箍。 ⑶6Φ25 4/2表示上部钢筋上排为4Φ25，下排为2Φ25。 ⑷2Φ22+ 2Φ22表示只有一排钢筋，两根在角部，两根在中部，均匀布置。 三、梁腰中钢筋表示方法： ⑴G2φ12表示梁两侧的构造钢筋，每侧一根φ12。 ⑵G4Φ14表示梁两侧的构造钢筋，每侧两根Φ14。 ⑶N2Φ22表示梁两侧的抗扭钢筋，每侧一根Φ22。 ⑷N4Φ18表示梁两侧的抗扭钢筋，每侧两根Φ18。 四、梁下部钢筋表示方法：（标在梁的下部） ⑴4Φ25表示只有一排主筋，4Φ25 全部伸入支座内。 ⑵6Φ25 2/4表示有两排钢筋，上排筋为2Φ25，下排筋4Φ25。 ⑶6Φ25 （-2 ）/4 表示有两排钢筋，上排筋为2Φ25，不伸入支座，下排筋4Φ25，全部伸入支座。 ⑷2Φ25 + 3Φ22（-3）/ 5Φ25表示有两排筋，上排筋为5根。2Φ25伸入支座，3Φ22，不伸入支座。下排筋5Φ25，通长布置。 五、标注示例： KL7（3）300×700 Y500×250 φ10@100/200(2) 2Φ25 N4Φ18 （-0.100） 4Φ256Φ25 4/26Φ25 4/26Φ25 4/24Φ25 □———————————□———————□———————————□ 4Φ252Φ254Φ25 300×700 N4φ10 KL7(3) 300×700 表示框架梁7，有三跨，断面宽300，高700。 Y500×250 表示梁下加腋，宽500，高250。 N4Φ18表示梁腰中抗扭钢筋。 φ10@100/200(2) 2Φ25 表示箍筋和架立筋。 -0.100 表示梁上皮标高。
我国基因测序行业研究-行业政策、发展状况
我国基因测序行业研究-行业政策、发展状况 （一）行业政策 当前，生物技术在引领未来经济社会发展中的战略地位日益凸显，现代生物技术的一系列重要进展和重大突破正在加速向应用领域渗透。我国政府为加快推进生物技术与生物技术产业发展，打造国家科技核心竞争力和产业优势，对于生物产业，尤其是基因测序领域，加大了产业扶持力度，先后推出了多项相关政策、规划等产业指导。 （1）中华人民共和国国民经济和社会发展第十三个五年规划纲要2016 年3 月，全国人民代表大会发布“十三五”规划指出，支持新一代信 息技术、生物技术、精准医疗等新兴前沿领域创新和产业化，形成一批新增长点。加强前瞻布局，在生命科学等领域，培育一批战略性产业。加快发展合成生物和再生医学技术，打造未来发展新优势。战略性新兴产业发展行动指出，加速推动基因组学等生物技术大规模应用，建设网络化应用示范体系，推进个性化医疗，新型药物，生物育种等新一代生物技术产品和服务的规模化发展，推进基因库细
胞库等基础平台建设。 （2）“十三五”国家科技创新规划 2016 年7 月，国务院印发《关于“十三五”国家科技创新规划的通知》，规划指出：加快推进基因组学新技术、合成生物技术、生物大数据等生命科学前沿关键技术突破，加强生物产业发展及生命科学研究核心关键装备研发，提升我国生物技术前沿领域原创水平，抢占国际生物技术竞争制高点；把握生物技术和信息技术融合发展机遇，建立百万健康人群和重点疾病病人的前瞻队列，建立多层次精准医疗知识库体系和国家生物医学大数据共享平台，重点攻克新一代基因测序技术、组学研究和大数据融合分析技术等精准医疗核心关键技术，开发一批重大疾病早期筛查、分子分型、个体化治疗、疗效预测及监控等精准化应用解决方案和决策支持系统，推动医学诊疗模式变革。 （3）促进和规范健康医疗大数据应用发展的指导意见 2016 年6 月，国务院办公厅发布《关于促进和规范健康医疗大数据应用发 展的指导意见》，意见指出：依托现有资源建设一批心脑血管、肿瘤、老年病和儿科等临床医学数据示范中心，集成基因组学、蛋白质组学等国家医学大数据资
建筑设备安装识图与施工复习题
建筑设备安装识图与施工复习题1 复习题 一、填空题 1.建筑给水系统的分类按用途基本可分三类、及消防给水系统。 2.建筑设备施工图一般有、、、及安装详图组成。 3.室内给水系统的组成主要由、、给水主管、给水立管、给水横支管、升压和贮水设备等部分组成。 4. 给水系统的给水方式常有、设水箱的给水方式及。 5. 建筑内部给水系统常用的管材有和。 6. 管道安装完后还要管道试压、、。 7. 控制附件在管路上起和，一般指各种阀门。 8. 水泵的试运行包括：试运转前的检查、、、运转后的各项检查及运行记录。 9. 止回阀通常安装于水泵出口，防止水。 10. 管道的连接方式有、焊接连接、法兰连接等方式。 11. 水表用来计量建筑物的。 12. 根据供暖系统散热方式不同，主要可分为对流供暖和。
13. 消防管道系统的阀门一般采用或蝶阀。 14. 例如在识读电气系统和给水系统时，一般应按下面的顺序进行：进户线→配电盘→→→ →用电设备。 15. 给水管道敷设可分为和两种。 16. 离心式水泵的基本参数有、、功率、效率和转速及吸程等。 17. 排水立管上应每隔一层设置一个检查口，但在和有卫生器具的必须设置。 18. 下图为水泵接管的平面图，其标注框内所指设备、配件的名称是①、②、③、 ④、⑤、⑥、⑦、⑧。 19. 排水通气管道在经常有人停留的平屋顶上，通气管应高出屋面，并应根据防雷要求。 20. 消防水龙带是输送消防水的软管，一端通过快速内扣式接口与，另一端。 21. 管道保温结构由、和保护层三个部分组成。 22. 水泵工作管路附件可简称一泵、、三阀 23. 水泵的基本参数是流量、扬程、功率、转速和收程等，上述参数中，以、最为重要。
华为模拟器 3.0-实验命令参考
华为模拟器 3.0绿色特别版-实验命令参考 计算机命令 ~~~~~~~~~~ PCA login root ；使用root用户 password linux ；口令是linux # shutdown -h now ；关机 # init 0 ；关机 # logout ；用户注销 # login ；用户登录 # ifconfig ；显示IP地址 # ifconfig eth0 ip address netmask netmask ；设置IP地址 # ifconfig eht0 ip address netmask netmask down ；禁用IP地址 # route add 0.0.0.0 gw ip ；设置网关 # route del 0.0.0.0 gw ip ；删除网关 # route add default gw ip ；设置网关 # route del default gw ip ；删除网关 # route ；显示网关 # ping ip ；发ECHO包 # telnet ip ；远程登录 －－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－ 交换机命令 ~~~~~~~~~~ [Quidway]dis cur ；显示当前配置 [Quidway]display current-configuration ；显示当前配置 [Quidway]display interfaces ；显示接口信息 [Quidway]display vlan all ；显示路由信息 [Quidway]display version ；显示版本信息 [Quidway]ip route-static 0.0.0.0 0.0.0.0 10.65.1.2 ；静态路由＝网关/设置缺省路由的下一跳为10.65.1.2 [Quidway]rip ；三层交换支持 [Quidway]local-user ftp ；指定FTP用户 [Quidway]user-interface vty 0 4 ；进入虚拟终端 [S3026-ui-vty0-4]authentication-mode password ；设置口令模式 [S3026-ui-vty0-4]set authentication-mode password simple 222 ；设置口令 [S3026-ui-vty0-4]user privilege level 3 ；用户级别 [Quidway]interface ethernet 01 ；进入端口模式 [Quidway]int e01 ；进入端口模式 [Quidway-Ethernet01]duplex {halffullauto} ；配置端口工作状态 [Quidway-Ethernet01]speed {10100auto} ；配置端口工作速率 [Quidway-Ethernet01]flow-control ；配置端口流控 [Quidway-Ethernet01]mdi {acrossautonormal} ；配置端口平接扭接
《建筑设备工程CAD制图与识图》教案
学习目标： 了解建筑制图的任务与学习方法，掌握常用的工程图的几个分类 教学重点： 1．搞清本章所讲的几个概念，及其相互间的关系； 2．掌握本课程的学习方法，培养一丝不苟的学习作风。 教学难点： 1．搞清“画法几何”与“工程制图”之间的关系，并在工程制图中正确运用画法几何理论； 2．掌握本课程的学习方法，培养一丝不苟的学习作风。 课时：2个课时 第一章绪论 1.1 建筑制图的任务 1．研究正投影的基本理论 2．培养绘制和阅读工程图的能力 3．研究常用的图解方法，培养图解能力 4．通过绘图、读图和图解的实践，培养空间想象能力 5．培养认真、细致、一丝不苟的工作作风 6．培养用图形软件绘制图样的初步能力 工程图：在生产建设和科学研究工程中，对于已有的或想象中的空间体（如地面、建筑物、机器等）的形状、大小、位置和其它有关部门资料，很难用语言和文字表达清楚，因而需要在平面上（例如图纸上）用图形表达出来。这种在平面上表达工程物体的图，称为工程图。
工程图常用的有以下几种：1．透视图 2．轴测图 3．正投影图 4．标高投影图 1.1.1画法几何 当研究空间物体在平面上如何用图形来表达时，因空间物体的形状、大小和相互位置等不相同，不便以个别物体来逐一研究，并且为了使得研究时易于正确、深刻和完全，以及所得结论能广泛地应用于所有物体起见，特采用几何学中将空间物体综合概括成抽象的点、线、面等几何形体的方法，先研究这些几何形体在平面上如何用图形来表达，以及如何通过作图来解决它们的几何问题。 这种研究在片面上用图形来表示空间几何形体和运用几何图来解决它们的几何问题的一门学科，称为画法几何。 例如：正方体6个面组成 每个面由无数条线组成 每条线由无数个点组 1.1.2 工程制图 把工程上具体的物体，视为由几何形体所组成，根据画法几何的理论，研究它们在平面上用图形来表达的问题，而形成工程图。在工程图中，除了有表达物体形状的线条以为，还要应用国家制图标准规定的一些表达方法和符号，注以必要的尺寸和文字说明，使得工程图能完善、明确和清晰地表达出物体的形状、大小和位置，以及其它必要的资料（例如：物体的名称、材料的种类和规格，生产方法等）。研究绘制工程图的这门学科，称为工程制图。 注意：如将工程图比喻为工程界的一种语言，则画法几何便是这种语言的语法。 一、目的
交通工程施工图设计说明
枝江市城区环境改造项目第一标段（东干渠路） 交通工程施工图设计说明 一.工程概况 1.工程范围 本次设计东干渠路起点与迎宾大道相交，终点顺接仙女大道，道路全长为7339.314m，道路红线宽40m。 2.工程内容 本次交通工程设计内容为交通标志、标线等安全设施，交叉口交管预埋管线等。 二.设计依据 1、设计合同； 2、本工程道路工程施工图。 三.设计采用的规范、标准 1、《城市道路工程设计规范》（CJJ37-2012）； 2、《城市道路交叉口设计规程》（CJJ152-2010）； 3、《道路交通标志和标线》GB5768-2009； 4、《城市道路交通设施设计规范》（GB50688-2011）； 5、《道路交通标志和标线》（GB 5768-2009）； 6、《道路交通信号灯设置与安装规范》（GB14486-2006）； 7、《公路交通安全设施设计规范》JTG D81-2006； 8、《公路交通安全设施设计细则》JTG/T D81-2006； 9、《路面标线涂料》JT/T2081-2004； 10、《道路交通标线质量要求和检测方法》GB/T 16311-2005； 11、《城市工程管线综合规划规范》GB 50289-98； 12、《高速公路安全设施设计及施工技术规范》JTJ074-94； 其它相关的规范、规程。 四.主要技术标准 道路等级：城市快速路； 设计速度：V＝60km/h； 道路红线宽度：40m； 设计车道：双向6车道； 车道宽度：机动车道宽3.5m，3.25m； 净空高度：机动车道：≥5m，人行道：≥2.5m。 五.交通标线 交通标线设计均按国标执行，本设计设置了车道边缘线、车道分界线、导向箭头、导流渠化标线、人行横道线、停止线、导向车道线、中心黄线等。 除道路中心黄线外，其余各种标线均采用白色。纵向标线线宽15cm，人行横道线线宽45cm，停止线宽度30cm。标线均采用热熔型反光标线。 标线施工要点： （1）各类标线均按国标有关规定布置，同时应严格按照设计和交管部门意见施工。 （2）标线应宽度一致、间隔相等、线形规则、边缘整齐、线条流畅。 （3）标线材料均应满足《路面标线涂料》（JT/T280-2004）。 （4）标线施工质量应满足《道路交通标线质量要求和检测方法》（GB/T 16311—2005）。 （5）标线涂层厚度均匀，无气泡、开裂、发粘、脱落等现象；标线涂层厚度为2.0±0.2mm。面撒玻璃珠用量为(0.3～0.4)kg/m2。 （6）连续设置的实线类标线，应每隔15m左右设置排水缝，其他标线有可能阻水时，应沿排水方向设置排水缝，排水缝宽度一般为3cm～5cm。 六.交通标志 1、标志总体设计
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