Slr0351的表达及其在Synechoc_省略_tissp_PCC6803中功
第39卷第1期2015年1月
水产学报
JOUＲNAL OF FISHEＲIES OF CHINA
Vol．39，No．1Jan．，2015
文章编号：1000－0615（2015）01－0016－08DOI ：10．3724/SP．J．1231．2015．59334
收稿日期：2014-06-09修回日期：2014-
10-10资助项目：湖北省自然科学基金面上项目（2014CFB400）；国家自然科学基金（31070743，
31400586）；湖北民族学院科技创新团队项目（MY2014T005）；湖北民族学院博士科研启动基金项目（MY2013B013）；湖北民族学院林学省级重点学科
通信作者：马
琼，
E-mail ：maqiong110@126．com Slr0351的表达及其在Synechocystis sp．
PCC 6803中功能的初步研究
马琼
1，2*
，郑小江1，2
，赵开弘3，周明3，王胜鹏4
（1．湖北民族学院生物资源保护与利用湖北省重点实验室，湖北恩施445000；
2．湖北民族学院生物科学与技术学院，湖北恩施445000；3．华中农业大学农业微生物学国家重点实验室，湖北武汉430070；
4．湖北省农业科学院果树茶叶研究所，湖北武汉430071）
摘要：Slr0351是Synechocystis sp．PCC 6803中的未知功能蛋白，其同源蛋白广泛存在于各种
蓝藻和铁硫杆菌中。为了确定Slr0351的性质，构建了表达质粒pET-slr 0351，并在E．coli 中表达Slr0351。在无氧条件下采用亲和层析纯化方法获得了Slr0351，无氧条件下Slr0351呈棕红
色，在460nm 处有［2Fe －2S ］铁硫簇的特征吸收峰，棕红色Slr0351对氧气敏感，能被连二亚硫酸钠还原，由此表明Slr0351为铁硫蛋白。为了获知slr 0351的功能，基于基因同源重组交换
的原理，利用Kana 抗性片段替换slr 0351，将Synechocystis sp．PCC 6803中的slr 0351基因缺失，构建了Δslr 0351突变体。利用紫外－可见吸收光谱仪扫描了Δslr 0351与野生型Synechocystis sp．PCC 6803（WT ）的吸收光谱，发现正常光照条件下Δslr 0351的叶绿素a 仅为WT 的68．8%，slr 0351的缺失使蓝藻中叶绿素a 含量降低。比较了藻细胞在缺乏不同营养元素和不同光照条件下的生长速率差异，
与WT 相比，Δslr 0351具有如下特征：（1）对缺Fe 和缺S 胁迫条件更敏感；（2）在弱光照条件下Δslr 0351的光能利用效率和生长速率更低，该现象与Δslr 0351中叶绿素a 含量的降低有关。
关键词：蓝藻；Synechocystis sp．PCC 6803；Slr0351；铁硫蛋白中图分类号：Q 753；S 917．3文献标志码：A 集胞藻Synechocystis sp．PCC 6803为单细胞蓝藻，细胞结构简单，遗传背景清楚，具有外源DNA 自然转化性质，能与外源基因进行高频同源重组。Slr0351是Synechocystis sp．PCC 6803中的未知功能蛋白
［1］
，利用Slr0351的氨基酸序列在
NCBI 上进行同源性搜索，发现其同源蛋白广泛存在于各种蓝藻和铁硫杆菌中，
且Slr0351与念珠海绵杆菌WGA-A3中的琥珀酸脱氢酶铁硫蛋白SdhB 亚基的同源性高达38%，SdhB 亚基作为琥珀
酸脱氢酶的主要组成部分，其铁硫簇中心通过参与脱氢和电子传递过程，
影响细胞的呼吸作用。铁硫蛋白基于铁硫簇具备优异的电子传递功
能，在许多生命活动过程中扮演着重要角色，生物
体中主要的铁硫蛋白包括呼吸链复合体（Ⅰ、Ⅱ、
Ⅲ）、光合作用中的光系统Ⅰ以及铁氧还蛋白［2］。
铁硫簇既可在生物体内合成，也可在体外进行人工组装。铁硫蛋白在体外对氧特别敏感，容易发生不可逆氧化失活。在厌氧条件下，体外添加适当浓度的Fe
2+
/Fe 3+和S 2－，可以有效地把铁硫簇
人工组装到辅基蛋白中形成铁硫蛋白［2－3］
。
本研究利用分子生物学的方法，构建了表达质
粒pET-slr 0351，并在E．coli BL21中表达Slr0351，在无氧条件下利用镍柱亲和层析纯化Slr0351，分
析了无氧条件下铁硫蛋白Slr0351的吸收光谱性
1期马琼，等：Slr0351的表达及其在Synechocystis sp．PCC6803中功能的初步研究
质。利用同源重组交换技术构建了Δslr0351突变体，研究了Δslr0351与野生型Synechocystis sp．PCC6803（Wild Type，简称WT）的吸收光谱性质。比较了不同营养元素缺乏条件下或不同光照条件下藻细胞的生长速率差异，从而确定slr0351在Synechocystis sp．PCC6803中的功能。
1材料与方法
1．1Slr0351的表达及吸收光谱分析
表达质粒的构建根据slr0351核苷酸序列设计克隆引物P1和P2（表1），以Synechocystis sp．PCC6803基因组DNA为模板，PCＲ扩增slr0351，将slr0351连接到pET-30a（+）表达载体中，获得表达质粒pET-slr0351。将pET-slr0351转化E．coli BL21，在含有卡那霉素抗性的平板上筛选阳性重组子，利用酶切图谱和核苷酸序列测序鉴定阳性重组子。
蛋白表达与纯化将pET-slr0351转化E．coli BL21，在含有卡那霉素抗性的平板上筛选转化子，挑取单克隆于5mL新鲜LB培养液中培养至OD600nm为0．5 0．6，然后转接入250mL LB 培养液中，37?培养至OD600nm为0．6 0．8。加入1mmol/L IPTG，摇床转速为150r/min，低温诱导表达10 12h，离心，收集细胞并用蒸馏水洗涤2次，用Tris-HCl缓冲液（5mmol/L DDT，50 mmol/L NaCl，10mmol/L MgCl
2
，pH8．0）重悬细
胞，加入100μmol/L Na2S和Fe（NH4）2（SO4）2·
6H
2
O［4］。将新鲜细胞破碎，在厌氧操作箱（＜4
ppm O
2
，18?）中采用镍柱亲和层析法纯化蛋白［5］，纯化蛋白经SDS-PAGE鉴定目的蛋白的表达情况，并利用Perkin-Elmer Lambda25紫外－可见吸收光谱仪测定蛋白质的吸收光谱［6］。
表1构建质粒所用引物Tab．1Primers for construction plasmids
引物primer
序列
sequences
DNA片段
DNA fragment
P15'TATAGAATTCGTGGATCCCAGCGGCTCACTTTTGCG3'slr0351
P25'CGTCTCGAGTTAGCCCGCCATTGGTAAATTGCCTAT3'
P35'ACACTCGAGACAGCACGGACATCACAGATAGC3'slr0351上游同源臂P45'ATCAAGCTTGTGGAGGCGATCACCGAACT3'
P55'TATGATATCACCAATGGCGGGCTAAATCGTAAACT3'slr0351下游同源臂P65'ATCGGATCCCTCTGTCTATCAATCTTGCATCG3'
注：带下划线的碱基序列为酶切位点
Notes：the underlined base sequences as restriction enzyme site
1．2蓝藻菌株及突变体的构建
Synechocystis sp．PCC6803购自中国科学院典型培养物保藏委员会淡水藻种库，采用同源重组交换技术构建Δslr0351突变体。为了获知Δslr0351的表型，确定slr0351的功能，设定野生型（WT）和突变体Δslr0351的培养条件［7－8］：BG11培养基，30?，正常光照（Medium Light，简称ML）光强50μmol/（m2·s），CO20．03%，150r/min，弱光（Low Light，简称LL）光强10μmol/（m2·s），强光（High Light，简称HL）光强200μmol/（m2·s）。BG11培养基分别缺乏C、P、N、Fe、S等元素形成相应的缺乏营养元素培养基。
突变体的构建以slr0351为中心，向上游延伸970bp作为slr0351的上游同源臂（upper-stream arm），向下游延伸960bp作为slr0351的下游同源臂（down-stream arm）。在上游同源臂的两端设计引物P3和P4（表1），在下游同源臂的两端设计引物P5和P6。以Synechocystis sp．PCC6803基因组DNA为模板，以P3和P4为引物，PCＲ扩增slr0351基因的上游同源臂，将PCＲ产物连接到pBluescript SK（+）中，在含有氨苄青霉素抗性的LB平板上筛选pBlu-上游同源臂。以P5和P6为引物（表1），PCＲ扩增slr0351的下游同源臂，将下游同源臂连接到已构建成功的pBlu-上游同源臂中，获得pBlu-上游同源臂－下游同源臂，简称pBlue-neighboring。然后利用EcoＲV酶切pBlu-上游同源臂－下游同源臂，与同样用EcoＲV从pCOLADuet上切下自带启动子的Kana（kanamycin resistance gene）抗性片断连接，在含有Kana抗性的LB平板上筛选，得到pBlu-上游同源臂-Kana-下游同源臂，简称pBlue-neighboring-Kana。将该重组质粒转化Synechocystis sp．PCC6803，在含有
71
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Kana 抗性的平板上筛选阳性转化子Δslr 0351，利用PCＲ技术鉴定阳性转化子［9］。
生长曲线的测定取WT 及Δslr 0351对
数期的藻细胞，5000r /min 离心2min ，在无菌条件下用BG11培养基和相应的缺乏营养元素培养
基洗涤藻细胞3次，按2%接种量转接于新鲜BG11培养基和相应的缺乏营养元素培养基，每种培养基做3个重复，置于30?恒温光照培养箱中培养，每隔12h 取样测定藻液在730nm 处的光密度值OD 730nm 。
2
结果与分析
2．1
Slr0351的鉴定及其吸收光谱性质在E．coli 中表达Slr0351，无氧条件下纯化获
得棕红色蛋白质，棕红色蛋白质经SDS-PAGE ，检
测到了50kD 大小的条带（图1-a ），与Slr0351的分子量大小一致。扫描棕红色蛋白质溶液的吸收
光谱（图1-b ），Slr0351在460nm 处有明显的吸收峰，为铁硫簇［
2Fe －2S ］的特征吸收峰［10－11］，由此表明Slr0351与铁硫簇在厌氧提纯过程中重组成功，Slr0351为铁硫蛋白。将铁硫蛋白Slr0351在空气中放置3h 后，其颜色由棕红色变成无色，扫描无色蛋白质溶液的吸收光谱，其在460nm 处的吸收峰大大降低。当铁硫蛋白Slr0351用连二亚硫酸钠（5mmol /L ，pH 7．5）还原，铁硫蛋白Slr0351由红棕色变成无色，测定还原产物的吸收光谱，还原产物在460nm 处的吸收峰消失
。
图1Slr0351的SDS-PAGE 图谱以及吸收光谱
（a ）M ：蛋白质分子量标准，1：Slr0351蛋白质样品；（b ）铁硫蛋白Slr0351（实线）、铁硫蛋白Slr0351在空气中放置3h 后（虚线）以及经5mM 连二亚硫酸钠还原后（点线）的吸收光谱
Fig．1SDS-PAGE and absorption spectra of Slr0351
（a ）M ：Protein molecular weight marker ，1：Slr0351；（b ）Absorption spectra of iron-sulfur protein Slr0351（solid line ），placed in the air for 3h （dashed line ）or reduction with 5mM sodium dithionite （dotted line ）
2．2
Δslr 0351突变体的构建
为了缺失集胞藻PCC 6803的slr 0351基因，构建了含有slr 0351上下游同源臂和Kana 片断的
质粒pBlue-neighboring-Kana 。由于Kana 片断两端均含有EcoＲV 酶切位点，利用EcoＲV 酶切pBlue-neighboring-Kana ，酶切产物经琼脂糖凝胶电泳（图2-a ），泳道中第一条带显示的是pBlue-neighboring 的大小为4830bp ，第二条带显示的是Kana 片断的大小为1790bp ，与预期结果
相符。
将质粒pBlue-neighboring-Kana 转化集胞藻PCC 6803，在Kana 抗性平板上筛选阳性转化子，
获得了slr 0351与Kana 同源交换成功的Δslr 0351
突变体，绘制其同源重组交换原理（图2-b ）。以Δslr 0351或WT 的基因组DNA 为模板，利用P3和P6为引物进行PCＲ，
PCＲ产物经琼脂糖凝胶电泳，第1条泳道和第2条泳道为WT 的PCＲ产物，其DNA 片段大小为3130bp ，与上游同源臂-slr 0351-下游同源臂的大小一致；第3条泳道和第4条泳道为Δslr 0351的PCＲ产物，其DNA 片段大小为3720bp ，与上游同源臂-Kana-下游同源臂
的大小一致（图2-c ），由此表明Synechocystis sp．PCC 6803中的slr 0351被Kana 抗性片段替换，
Δslr 0351构建成功。
81
1期马琼，等：Slr0351的表达及其在Synechocystis sp．PCC 6803中功能的初步研究2．3slr 0351的缺失影响蓝藻中叶绿素a 和类胡
萝卜素的含量
在正常光照条件下培养藻细胞，发现相同
OD 730nm 的藻细胞Δslr 0351的颜色与WT 相比偏黄（图3-a ）。实验分析了藻细胞、藻细胞经100%
丙酮萃取脂溶性色素后上清的吸收光谱（图3-b ，c ）。Δslr 0351藻细胞中叶绿素a 的吸收峰稍低于
WT ，而类胡萝卜素的吸收峰稍高于WT （图3-b ）。藻细胞经丙酮萃取后叶绿素a 和类胡萝卜素的吸收峰均发生了蓝移，叶绿素a 的吸收峰由681nm 蓝移至663nm ，类胡萝卜素的吸收峰由498nm
蓝移至478nm ；Δslr 0351中叶绿素a 的含量为
7．249mg /mL ，WT 中叶绿素a 的含量为10．530mg /mL ，Δslr 0351的叶绿素a 仅为WT 的68．8%，Δslr 0351中叶绿素a 的吸收峰明显低于WT ，而Δslr 0351中类胡萝卜素的吸收峰却明显高于WT （图3-c ）。由此可知，slr 0351的缺失使蓝藻中叶绿素a 含量降低，
使类胡萝卜素的含量升高。Δslr 0351和WT 中叶绿素a 和类胡萝卜素在藻细胞中的含量不同，也就解释了两种藻细胞颜色的差异（图3-
a ）
。图2构建Δslr 0351的琼脂糖凝胶电泳分析
（a ）pBlue-neighboring-Kana 的酶切图谱，M ：1kb DNA 标准；1：pBlue-neighboring-Kana 酶切产物；（b ）Δslr 0351构建原理示意图；（c ）Δslr 0351的PCＲ检测，M ：1kb DNA 标准；1和2：WT PCＲ产物；3和4：Δslr 0351PCＲ产物
Fig．2Agarose gel electrophoresis analysis for constructing Δslr 0351
（a ）agarose gel electrophoresis of the digested pBlue-neighboring-Kana．M ：1kb DNA ladder．1：digested products of pBlue-neighboring-Kana ；（b ）construction scheme of Δslr 0351；（c ）detection of PCＲproducts of Δslr 0351and WT．M ：1kb DNA ladder．1and 2：PCＲproducts of WT．3and 4：PCＲproducts of Δslr
0351
图3
Δslr 0351和WT 的颜色及其吸收光谱
（a ）藻细胞的颜色；（b ）藻细胞的吸收光谱；（c ）藻细胞经丙酮萃取后的吸收光谱，其中实线为WT ，点线为Δslr 0351
Fig．3
The color and absorption spectra of Δslr 0351and WT
（a ）color of Synechocystis cells ；（b ）absorption spectra of Synechocystis cells ；（c ）the supernatant after Synechocystis cell extraction with 100%acetone．Solid line ：WT ；Dotted line ：Δslr 0351
9
1
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2．4不同营养条件下WT 和Δslr 0351的生长
曲线
在标准BG11培养基中ML 光照条件下，
Δslr 0351的生长速率稍慢于WT （图4-a ）。与藻细胞在标准BG11中培养相比，在缺乏CO 2－
3（图4-b ）、缺乏P （图4-c ）营养的BG11中Δslr 0351生长速率比WT 更慢，
由此表明在缺失slr 0351的条件下，藻细胞对培养基中的C 和P 元素等大量元素的需求量升高了。值得注意的是在BG11缺乏Fe 元素的情况下，Δslr 0351的生长速率明显低于
WT 的生长速率（图4-d ）。适当浓度的氮营养对
蓝藻的生长是十分必要的，
实验结果表明氮营养缺乏对Synechocystis sp．PCC 6803的生长影响较
大（图4-e ），有趣的是，硫缺乏对Synechocystis sp．PCC 6803生长的影响趋势与氮缺乏类似。在硫
缺乏条件下，Δslr 0351的最大吸收值仅为0．27，而WT 的最大吸收值达0．51（图4-f ）。可见Δslr 0351对缺硫胁迫条件十分敏感，铁营养缺乏亦对Δslr 0351的生长影响较大，该现象与Slr0351为铁硫蛋白有较大关系
。
图4
不同营养条件下Δslr 0351和WT 的生长曲线
在正常BG11培养基（a ）、缺C （b ）、缺P （c ）、缺Fe （d ）、缺N （e ）和缺S （f ）元素的BG11中Δslr 0351突变体（△）与WT （▼）的生长
曲线
Fig．4
The growth curve of Δslr 0351and WT in different nutrition conditions
The growth curve of Δslr 0351（△）and WT （▼）in standard BG11（a ），BG11lacking of carbon （b ），phosphorus （c ），iron （d ），nitrogen
（e ）and sulfur （f ）
2．5slr 0351的缺失影响藻细胞在强、弱光照条件下的光能利用效率
在强光照（HL ）条件下，Δslr 0351与WT 的生
长速率基本一致（图5-a ）；在正常光照（ML ）条件下，Δslr 0351的生长速率仅稍慢于WT （图4-a ）；而在弱光照（LL ）条件下，Δslr 0351的生长速率明
02
1期马琼，等：Slr0351的表达及其在Synechocystis sp．PCC 6803中功能的初步研究显低于WT （图5-b ），由此表明slr 0351基因的缺失在强光照条件下不影响藻细胞的光能利用效
率，
而在弱光照条件下对藻细胞的光能利用效率有较大影响，该现象可能与Δslr 0351中叶绿素a 含量的降低有关。在HL 或ML 条件下，即使Δslr 0351中叶绿素a 含量降低，但足够的光照条
件使得Δslr 0351的光合营养不受影响或影响较
小，
因此Δslr 0351的生长速率与WT 基本一致或稍慢于WT ；但在LL 条件下，由于光照强度不足，加之Δslr 0351的叶绿素a 含量降低，使Δslr 0351的光合营养受到较大影响，其生长速率明显低于WT
。
图5
不同光照条件下Δslr 0351与WT 的生长曲线
（a ）在强光照条件下Δslr 0351突变体（△）与WT （▼）的生长曲线；（b ）在弱光照条件下Δslr 0351突变体（△）与WT （▼）的生长
曲线
Fig．5
The growth curve of Δslr 0351and WT under different light conditions
（a ）The growth curve of Δslr 0351（△）and WT （▼）under HL condition ；（b ）The growth curve of Δslr 0351（△）and WT （▼）under LL
condition
3讨论
利用分子生物学的方法和技术，构建了铁硫
蛋白基因slr 0351的表达质粒pET-slr 0351，并在
E．coli BL21中成功表达了Slr0351。在无氧条件下纯化Slr0351，将Slr0351与S
2－
、Fe 2+/Fe 3+在体
外重组，
获得了重组［2Fe －2S ］的铁硫蛋白Slr0351。利用抗氧化剂连二亚硫酸钠还原铁硫蛋白
［13－14］
，Slr0351在460nm 处的特征吸收峰消
失，进一步证明了铁硫蛋白Slr0351在O 2存在时不稳定，该现象与大肠杆菌琥珀酸脱氢酶铁硫蛋白SdhB 亚基对氧气敏感现象类似
［12－13］
。为了进一步研究Slr0351的功能，利用DNA
同源重组技术，以Kana 基因替换Synechocystis sp．PCC 6803中slr 0351基因，获得了Δslr 0351突变体。蓝藻的颜色主要由藻细胞中的叶绿素a 、藻胆色素和类胡萝卜素所决定，它们吸收不同波长的可见光，均有特定的吸收峰
［14］
，叶绿素a 呈
绿色，类胡萝卜素多为橘黄色或橙色。与WT 相比，Δslr 0351中叶绿素a 含量降低，类胡萝卜素含
量升高，也就解释了Δslr 0351颜色偏黄的原因。利用缺营养元素培养基培养藻细胞，发现Δslr 0351对铁胁迫和硫胁迫十分敏感，该现象与Slr0351为铁硫蛋白有较大关系。叶绿素a 是蓝
藻捕获光能的主要光合色素，藻胆色素和类胡萝卜素也起着捕获光能的作用
［15－16］
。在正常光照、
弱光照和强光照条件下培养藻细胞，发现slr 0351基因的缺失明显降低了弱光照条件下
Synechocystis sp．PCC 6803的光能利用效率，这一点与Δslr 0351中叶绿素a 含量的降低有关。研究报道
［17－18］
大肠杆菌琥珀酸脱氢酶的铁硫蛋白
SdhB 亚基的突变会引起基因功能的紊乱，进而影响细胞呼吸作用，使细胞过早衰老
［19－20］
。由此可
以推断slr 0351基因的缺失不仅影响藻细胞的光合作用过程，还可能对呼吸作用造成影响，其功能有待进一步深入研究。
集胞藻PCC 6803是引起淡水水华的藻种之一，属于混合营养型微生物，既能进行异养生长，又能利用光能进行自养生长。一旦光照和营养条件适宜，就会大量生长繁殖，形成水华。本实验研
1
2
水产学报39卷
究了影响集胞藻PCC6803光能利用效率的铁硫蛋白基因slr0351的性质和功能，为蓝藻基因功能的分子生物学研究提供基础，同时也为控制淡水水体中蓝藻的过度生长、防治蓝藻水华污染提供依据。
参考文献：
［1］Sato S，Shimoda Y，Muraki A，et al．A Large-scale protein-protein interaction analysis in Synechocystis
sp．PCC6803［J］．DNAＲesearch，2007，14（5）：
207－216．
［2］Imsande J．Iron-sulfur clusters：Formation，perturbation，and physiological functions［J］．Plant
Physiology and Biochemistry，1999，37（2）：87－97．［3］Gerber J，LillＲ．Biogenesis of iron-sulfur proteins in eukaryotes：components，mechanism and pathology
［J］．Mitochondrion，2002，2（1－2）：71－86．
［4］Garland S A，Hoff K，Vickery L E，et al．Saccharomyces cerevisiae ISU1and ISU2：members
of a well-conserved gene Family for iron-sulfur
cluster assembly［J］．Journal of Molecular Biology，
1999，294（4）：897－907．
［5］Le'on S，Touraine B，Briat J F，et al．Mitochondrial localization of Arabidopsis thaliana Isu Fe－S
scaffold proteins［J］．FEBS Letters，2005，579（9）：
1930－1934．
［6］Duschene K S，Broderick J B．The antiviral protein viperin is a radical SAM enzyme［J］．FEBS Letters，
2010，584（6）：1263－1267．
［7］Zhang J，Sun Y F，Zhao K H，et al．Identification of amino acid residues essential to the activity of lyase
CpcT1from Nostoc sp．PCC7120［J］．Gene，2012，
511（1）：88－95．
［8］Zhang J，Wu X J，Wang Z B，et al．Fused-gene approach to photoswitchable and fluorescent
biliproteins［J］．Angewandte Chemie International
Edition，2010，49（32）：5456－5458．
［9］Wang X，Dong L L，Zhang C X，et al．Sll1466，a glycosyl transferase homolog involved in global
cellular regulation and high-light tolerance of
Synechocystis PCC6803［J］．Biochemical and
BiophysicalＲesearch Communications，2011，408
（4）：674－679．
［10］Brindley A A，ZajicekＲ，Warren M J，et al．NirJ，a radical SAM family member of the d1heme
biogenesis cluster［J］．FEBS Letters，2010，584（11）：
2461－2466．［11］LillＲ，DutkiewiczＲ，Els sser H P，et al．Mechanisms of iron-sulfur protein maturation in
mitochondria，cytosol and nucleus of eukaryotes［J］．
Biochimica et Biophysica Acta，2006，1763（7）：
652－667．
［12］Hewitson K S，Baldwin J E，Shaw N M，et al．Mutagenesis of the proposed iron-sulfur cluster
binding ligands in Escherichia coli biotin synthase
［J］．FEBS Letters，2000，466（2－3）：372－376．［13］Kurihara T，Mihara H，Kato S，et al．Assembly of iron-sulfur clusters mediated by cysteine
desulfurases，IscS，CsdB and CSD，from Escherichia
coli［J］．Biochimica et Biophysica Acta，2003，1647
（1－2）：303－309．
［14］Ｒichaud C，Zabulon G，Joder A，et al．Nitrogen or sulfur starvation differentially affects phycobilisome
degradation and expression of the nblA gene in
Synechocystis strain PCC6803．Journal of
Bacteriology［J］，2011，183（10）：2989－2994．［15］Pietsch D，Staiger D，Pistorius E K，et al．Characterization of the putative iron sulfur protein
IdiC（OＲF5）in Synechococcus elongatus PCC7942
［J］．PhotosynthesisＲesearch，2007，94（1）：
91－108．
［16］Laudenbach D E，Grossman AＲ．Characterization and mutagenesis of sulfur-regulated genes in a
Cyanobacterium：Evidence for function in sulfate
transport［J］．Journal of Bacteriology，1991，173（9）：
2739－2750．
［17］Wang T，Shen G，BalasubramanianＲ，et al．The sufＲgene（sll0088in Synechocystis sp．strain PCC6803）
functions as a repressor of the sufBCDS operon in
iron-sulfur cluster biogenesis in cyanobacteria［J］．
Journal of Bacteriology，2004，186（4）：956－67．［18］Tu C J，Shrage J，BurnapＲL，et al．Consequences of
a deletion in dspA on transcript accumulation in
Synechocystis sp．Strain PCC6803［J］．Journal of
Bacteriology，2004，186（12）：3889－3902．
［19］Seki A，Nakano T，Takahashi H，et al．Light-responsive transcriptional regulation of the suf
promoters involved in cyanobacterium Synechocystis
sp．PCC6803Fe－S cluster biogenesis［J］．FEBS
Letters，2006，580（21）：5044－5048．
［20］Tang K，Zeng X L，Yang Y，et al．A minimal phycobilisome：Fusion and chromophorylation of the
truncated core-membrane linker and phycocyanin
［J］．Biochimica et Biophysica Acta，2012，1817（7）：
1030－1036．
22
32
1期马琼，等：Slr0351的表达及其在Synechocystis sp．PCC6803中功能的初步研究
Expression and preliminary function analysis of Slr0351in
Synechocystis sp．PCC6803
MA Qiong1，2*，ZHENG Xiaojiang1，2，ZHAO Kaihong3，ZHOU Ming3，WANG Shengpeng4（1．Key Laboratory of BiologicＲesources Protection and Utilization of Hubei Province，
Hubei University for Nationalities，Enshi445000，China；
2．Biological Scientific and Technical College，Hubei University for Nationalities，Enshi445000，China；
3．State Key Laboratory of Agricultural Microbiology，Huazhong Agricultural University，Wuhan430070，China；
4．Institute of Fruit＆Tea，Hubei Academy of Agricultural Science，Wuhan430071，China）
Abstract：Slr0351is an unknown protein and its homologs exist widely in many cyanobacteria and iron-sulfur bacteria．We constructed pET-slr0351and expressed Slr0351successfully in E．coli BL21．Using affinity chromatography purification，we obtained purified Slr0351．Under anaerobic conditions，Slr0351was brown and had absorption peak at460nm，which was the characteristic absorption peak of2Fe－2S cluster．The brown Slr0351is sensitive to oxygen and could be reduced with sodium dithionite，showing that Slr0351 was iron-sulfur protein．By homologous double-crossover，slr0351was replaced by Kana，resulting in the knockout mutant of Synechocystis sp．PCC6803，Δslr0351．Via scanning the absorption spectra ofΔslr0351 and WT with ultraviolet-visible spectrometer，we found that chlorophyll a content ofΔslr0351is only68．8% that of WT under the medium light condition．The depletion of slr0351reducing the content of chlorophyll a in Synechocystis cells．Compared the growth rate of cyanobacteria under different culture conditions，Δslr0351showed the following changes compared to the wild type：（1）more sensitive to sulfur and iron starvation；（2）lower efficiency of light utilization and lower growth rate under LL conditions，which is related to the lower content of chlorophyll a inΔslr0351．This paper is beneficial to gene function research of Cyanobacteria，and provides a certain reference value for the treatment of Cyanobacteria bloom and pollution in freshwater．
Key words：cyanobacteria；Synechocystis sp．PCC6803；Slr0351；iron-sulfur protein
Corresponding author：MA Qiong．E-mail：maqiong110@126．com
双引号、省略号、破折号的作用
双引号、省略号、破折号的作用省略号的作用:①表引文或引述的话有所省略；②表重复词语的省略；③表列举同类事物和序数词语的省略；④表静默或思考；⑤表说话断断续续；⑥表语言的中断；⑦表话未说完，语意未尽。 破折号的作用：1.表示解释说明 2.表示语音的延长3.表示意思的转换,跳跃或转折 4.表示插说 5.电脑应用 6.加强重点7.分行举例8.用在副标题前9.标明作者10.补充说明11.表示总结上文12.表示语言的延续 引号的作用：a．表示引语b．表示特定称谓c．表示特殊含义需要强调d．表示否定和讽刺 引号最基本的用法是引用,引用包括直接引用和间接引用.直接引用是把人所说的话完整地记录下来；间接引用是把某人的原话非正式地、不完整地、随语意拈来放在自己的话中的引用.这类引述如果不作明白交代,就很难发现它是引用。引号除了引用外,还具有强调的作用。
省略号作用（……） 1.表示引文或引述的话里有所省略.例如： ①就在那样不平凡的时刻,在那个可纪念的地方,我第一次听见唱：二月里来,好风光,家家户户种田忙.…… ②听筒里传来十分响亮而焦灼的声音：“时间来不及了,请马上设法空运……空运!” 2.表示重复词语的省略.例如： 孔乙己低声说道："跌断,跌、跌……,他的脸色,很象恳求掌柜,不要再提. 3.表示列举同类事物和序数词语的省略.例如： （场长）介绍给我们看董昆他们打的野物皮子：狐狸、貉子、獾、水獭、野猫……种类实在不少. 4.表示静默或思考.例如： 何为：不行!梅伯母的身体已经经不起路上的颠簸了! 欧阳平：…… 5.表示说话断断续续.例如： 他……直指着正北方向,“好,好同志……你……你把它带给……” 6.表示语言的中断.例如： ①“我并没有阔哩,我须卖了这些,再去……” ②“啊呀呀,你放了道台了,还说不阔?你现在有三房姨太太；
特殊的表达方式
特殊的表达方式 扬中市八桥中心幼儿园庄金红 有一篇文章叫《呼唤爱》，文章的大体意思是父母、教师的关爱就像小树苗需要阳光一样，是孩子心灵成长必需的养分。当必要的养分缺乏时，处于本能，孩子会开始呼唤、寻找。在这期间，有些孩子会表现得很乖巧，期待得到你的关注以及肯定。但如果成人没有感觉到这种爱的呼唤，孩子就会尝试其他方法，比如捣乱、不听话。此时如果成人只是一味的训斥、说教，孩子呼唤爱的声音得不到回应，那么孩子便会变本加厉地进行捣乱。如果成人能读懂孩子的心声，积极地给予爱的回应，孩子就会更加积极向上。像这样的孩子所表现出来的就是特殊的表达方式。 我想起了我们班的小明，他是一个活泼好动、调皮的小男孩，经常惹老师生气。不是把自己弄得满身是水。就是在做游戏时欺负小朋友……现在想来那正是他呼唤爱的表现。明白了这个道理后，以后再小明出现捣乱行为时，我不在训斥他，而是经常和他聊天，做游戏，满足他的内心需要。当他有进步时，我及时给予表扬，让他知道老师很喜欢他，每天都在关心他，渐渐地，他有了很大的变化。 还有一个小朋友-小翔，他喜欢欺负小朋友，有时候还会和老师说谎，他妈妈为他出现的这种情况也表示很着急。他之所以会发生这么大的变化，是因为他是在向老师发出爱的呼唤，他希望得到老师的更多关注。但是可惜的是我们没有正面的接收到他发出的信息，一味的指责批评他，导致了他变本加厉的进行捣乱。当我明白了着一道理后，在他再捣乱、欺负小朋友的时候，我没有直接的批评他，而是经常找他聊天，经常鼓励他，在他进步时，我会及时的表扬他，还经常让他当班长、组长之类的，他也很乐意的接受老师的安排给他的任务。在做小任务的时候，他的表现很认真。 每个孩子的个性是不一样的，表达方式也是不一样的，他们会用自己的表达方式去体验生活，尤其是一些特殊的表达方式，在幼儿园的一日的十六个环节就需要我们用心感受并积极回应，让孩子在关爱中健康快乐成长。
谈英汉翻译技巧中的增补与省略
谈英汉翻译技巧中的增补与省略 【摘要】增补法是英汉翻译中常用的方法之一。所谓增补，就是为了使译文准确和符合汉语习惯，译者应该添加必要的词句。所谓省略法，就是将不必译的冠词、物主代词、连系动词等省略不译。 【关键词】翻译技巧增补法省略法 英汉翻译是英语学习中最基本的技能之一，在今天的飞速发展的世界中越来越显示出它的重要性。一篇好的译文应该是既忠实于原文，又符合汉语的用法习惯，并且在内容与形式上与原文达到辩证的统一。忠实于原文是翻译中最重要的一点。但由于英汉两种语言的巨大差异，“忠实”的涵义并不是逐字逐句地照搬原文，而是“忠实地表达”原作者的思想，准确地理解和恰当地表现原文。因此，译者必须在理解原文的基础上，运用恰当的翻译技巧，将原文译出。 英汉翻译技巧一般来说有8种，即“分清主从”，“选词用字”，“增补法”，“省略法”，“词性转换”，“词序调整”，“正说反译和反说正译”以及“长句拆译”。本文侧重谈谈英汉翻译技巧中的增补与省略这两种方法。 1.增补法 增补法是英汉翻译中常用的方法之一。增补不是给原文增加某些内容，而只是翻译中的一个必要的规则。它实际上主张，为了使译文准确和符合汉语习惯，译者应该添加必要的词句。增补法在下面几种情况下经常使用： A.当某些词在英语的句子中被省略时 例如：We can get rid of a bad style and keep the good. 虽然，在good 一词后省略了style. 这句可译成：我们能够去掉不良作风，保持优良作风。 He majors in English and l in French. 在I 后面省略了动词major. 这句应译成：他主修英语，我主修法语。 在这类句子中，原文省略的部分应在译文中写出来。 B. 当英文中用代词来避免重复时
英语语法省略句
英语语法省略句 省略句 1)不定式在love, mean, want, like, wish, expect, try, intend, plan, refuse, prefer, seem等动词后面 2)在happy，glad，eager，ready，willing等形容词后面。 1.---will you join us? --- I should love to(join you). 2.I asked him to see the film, but he didn’t want to(s ee the film). 3.--- Would you like to go with us? --- Yes, I’m glad to(go with you) 4.He doesn’t get up early as he used to. (get up) 注意: 如果不定式中含有be, have(助动词), have been, 通常保留be, have(助动词), have been. 1.--- Are you a sailor? --- No, but I used to be. 2.---He hasn’t finished yet. ---well, he ought to have. 1. —I'll be away on a business trip. Would you mind looking after my cat? —Not at all, ________ . (NMET 1995) A. I have no time B. I'd rather not C. I‘d like it D. I'd be happy to 2. —Does your brother intend to study German? —Yes, he intends ________ . (NMET 1998上海卷)
语句表达文言文句式之省略句
书接上回，我们今天来学一学语句表达文言文句式之省略句 古今汉语都有成分省略，但在古汉语中，省略现象更为普遍，而且按照现代汉语习惯，一些不能省略的成分也都省略了。 【省略句式】 一、主语的省略，就是把主语省略掉。 1、承前省 例： 永州之野产异蛇，（蛇）黑质而白章；（蛇）触草木，（草木）尽死；（蛇）以啮人，（人）无御之者。 ——柳宗元《捕蛇者说》 2、蒙后省 例： 沛公谓张良曰：“从此道至吾军，不过二十里耳。（公）度我至军中，公乃入。”（司马迁 ——《鸿门宴》 3、自述省 例： （予）爱是溪，入二三里，得其尤绝者家焉。 ——柳宗元《愚溪诗自序》 4、对话省 例： （孟子）曰：“独乐乐，与人乐乐，孰乐？” （王）曰：“不若与人。” ——《孟子·梁惠王下》二、谓语的省略，就是把谓语省略掉。 例： 夫战，勇气也。一鼓作气，再（鼓）而衰，三（鼓）而竭…… ——《曹刿论战》三、修饰语和中心词的省略 例： 吾妻之美我者，私我也；（吾）妾之美我者，畏我也；（吾）客之美我者，欲有求于我也。[修饰语的省略] ——《邹忌讽齐王纳谏》四、宾语与兼语的省略，文言文不但常省略动词宾语，也常省略兼语结构中的兼语。 例： ①杞子自郑使（人）告于秦。 ——《左传.肴之战》
②屠惧，投（之）以骨。 ——蒲松龄《狼》5、介词和介词宾语的省略 例如： ①臣与将军戮力而攻秦，将军战（于）河南，臣战（于）河北。 ——司马迁《鸿门宴》 ②此人一一为（之）具言所闻 ——陶渊明《桃花源记》 6、分句的省略 例： ①然力足以至焉，（而未至，）于人为可讥，而在己为有悔。 ——王安石《游褒禅山记》 ②骐骥一跃，不能十步；驽马十驾，（亦可至远），功在不舍 ——荀子《劝学》选出不属于省略句的一项( ) A、今以钟磬置水中 B、吾从而师之 C、沛公居山东时 D、百姓之不见保 答案：选D。 如有疑问，详细解析请扫二维码（可放置二维码）
小学语文五年级引号、省略号、破折号用途专项练习汇总
标点符号练习：引号的用法练习 学习运用引号的练习（一） 1“说”字在前面，“说”字后面用冒号，所说的话用引号，引号里的话，一句话意思没有说完时，就用逗号，意思说完了，就用句 号（问号、感叹号）。 例：大树说：“来吧，孩子你会很快活的！” 练习： 大树高兴地摇晃着肢体，对孩子说来吧，孩子，爬到我的树干上，在树枝上荡秋千，你会很快活的！ 2“说”字在中间时，前面的话用引号，“说”字后面用逗号，后面的话还用引号，引号里的话中标点用法同第一种情况。 例：“我已经大了，不爱爬树玩了，”孩子说，“我想买些好玩儿的东西。 我需要钱。你能给我一点儿钱吗？” 练习： 很抱歉大树说我没有钱。我只有树叶和苹果，把它们拿去 吧，孩子 3“说”字在句尾时，“说”后用句号。前面的话用引号引起来，引 号里的话中标点用法同第一种情况。 例：“我太老了，不能再荡秋千了。”孩子说。 练习： 我很疲倦，爬也爬不动了孩子说
综合练习题： 1.[“] 非常抱歉，孩子 [，][ ”]大树说 [ ，][ “] 我没有什么可以给你的了 [！][ ”] 2.[“]我没有苹果了 [！][”] [ “] 我的牙齿已经老化，吃不动苹果了[。][ ”]孩子说 [。] 3.[“] 我没有枝条了 [ ，][ ”] 大树说 [，][“ ]你没法儿在上面荡秋千了[！][ ”] [ “] 我太老了，不能再荡秋千了[ ！][ ”]孩子说 [。] 4.[“] 我现在需要的实在不多 [ ，][ ”]孩子说 [，][“]只想找个安静的地方坐坐，好好休息。我太累了[！][ ”] [“]那好吧 [，][ ”]大树说 [，]它尽量把身子挺高。 [“]你看，我 这个老树墩，正好叫你坐在上面休息。来吧，孩子，坐下吧，坐在我身上休息吧 [！][ ”] 学习运用引号的练习（二） 引号的作用有 : ①表示直接引用：②表示突出强调：③表示否定或者讽刺：④表示特定称谓： ⑤用来引用俗语、谚语、歇后语、古语等： 1、这样的“聪明人”还是少一点好。（） 2、这是我们组办的“热爱大自然”的手抄报。（）
高考英语语法-省略
高考英语语法——省略 无论在口语中还是在书面语中,有时为了讲话简洁或行文方便,常常在不影响文意的情况下将句子中的某些成分略去,这种现象称为省略。纵观历年高考试题,"省略"在单项填空中频频出现。 简单句中的省略 1、省略主语祈使句中主语通常省略；其它省略主语多限于少数现成的说法。 (1) (I) Thank you for your help. (2) (I) See you tomorrow. (3) (It) Doesn’t matter. (4) (I) Beg your pardon. 2、省略主谓或主谓语的一部分 (1) (There is) No smoking . (2) (Is there) Anything wrong ? (3) (Will you) Have a smoke ? (4) What/How (do you think) about a cup of tea ? (5) Why (do you) not say hello to him ? 3、省略作宾语的不定式短语，只保留to，但如果该宾语是动词be或完成时态，则须在之后加上be或have: (1) –Are you going there? --Yes, I’d like to (go there). (2) He didn’t give me the chance, though he had promised to (give me the chance). (3) –Are you an engineer? --No, but I want to be. (4) –He hasn’t finished the task yet. --Well, he ought to have. 4、省略表语 (1) –Are you thirsty? --Yes, I am (thirsty). (2) His brother isn’t lazy, nor is his sister (lazy). 5、同时省略几个成分 (1) Let’s meet at the same place as (we met) yesterday. (2) –-Have you finished your work ? ---(I have) Not (finished my work) yet. 1、主句中有一些成分被省略 (1) ( I’m ) Sorry to hear you are ill. (2) ( It’s a ) Pity that he missed such a good chance. 2、主句中有一些成分被省略 (1) –Is he coming back tonight? --I think so. (2) –She must be busy now? --If so, she can’t go with us. (3) –Is she feeling better today? --I’m afraid not. (4) –Do you think he will attend the meeting? --I guess not. 这种用法常见的有：How so? Why so? Is that so? I hope so. He said so.及I suppose/believe/hope not. 两个并列句中，后一个分句常省略与前一分句中相同的部分。 (1) My father is a doctor and my mother (is) a nurse. (2) I study at college and my sister (studies) at high school. (3) When summer comes, the day is getting longer and longer, and the night (is getting) shorter and shorter. 1、连词的that省略 (1) 宾语从句中常省略连词that，但也有不能省略的情况。
①表引文或引述的话有所省略
①表引文或引述的话有所省略；②表重复词语的省略；③表列举同类事物和序数词语的省略；④表静默或思考；⑤表说话断断续续；⑥表语言的中断；⑦表话未说完，语意未尽。 一、用于引文的省略 引用别人的话、文章的语句，根据作者的需要，保留必要的，省略不必要的。例如：1．周恩来同志用命令的口吻说：“不要管我，大家要沉着，不要慌张……” 二、省略同类词句 在叙述中，有时需要列举一些同类的东西，比如花儿、颜色、数字、动作行为等等，许多时候，并不需要把这些同类的东西全部列出，只需要一部分就可以说明问题了，余下部分就可以用省略号标志。如：3．有的像蜜蜂一样嗡嗡，有的像小鸟一样啾啾，有的像小狗一样汪汪，有的还好像在打鼾…… 三、用于重复的词句的省略 例如：6．我扑到指导员身上大喊：“指导员，指导员……” 四、表示话没有说完 （有时又作语意未尽）在叙述中，作者故意终止叙述，给读者留下一个含蓄的空白；有人在说话中欲言而又不言；有人在说话中被迫中断；有的暂时搁下正在进行的语言而转叙别的事物等等。这些都属于“话没有说完”，都可用省略号标志。例如：8．想着想着，我的心里，好像有一颗种子在生根、发芽…… 五、双用省略号 (用四个三连点，即十二个圆点)，标志整段文字或大片语言的省略。这种用法在小学课本上没有出现，现在我们引用并节选《瀑布》和《参观人民大会堂》两篇课文让同学们明白该怎样使用双省略号。13．瀑布…………山路忽然一转，啊！望见了瀑布的全身！这般景象没法比喻，千丈青山衬着一道白银。………… 六、表示不语 这是一种极为少见的用法。当事态发展到该某个人讲话而这个人却没讲时，就可以用省略号来表示。 渔夫催桑娜去抱西蒙的孩子，桑娜既没有说话也没有行动。我们改写一下，渔夫讲的话不变，桑娜的表现：“……”桑娜坐着一动不动。引号标志桑娜讲话的内容，可是引号内是省略号，它表示桑娜没有讲话。 七、表示声音的延长 例如：15．嗒嗒嗒……从一座桥上，突然喷出六条火舌，封锁了我军前进的道路。 八、表示语言的断断续续 例如：16．他轻轻地摇了摇头，两眼望着那捆书，用微弱的声音说：“你们要……好好学习……将来……” 1、表示破折号后面是解释说明的部分。 （1）各国政府——无论专制政府或共和政府都驱逐他。 （2）带工老板或者打杂的拿着一叠叠的名册，懒散地站在正门口——好像火车站剪票处一般的木栅子前面 2、表示意思的递进。 每年——特别是水灾、旱灾的时候，这些在日本厂里有门路的带工…… 3、表示意思的转换、跳跃或转折。
省略号和破折号的作用和例句
省略号的作用和例句 省略的内容主要有四：一是引文；二是重复性词语；三是类似语句；四是列举。 除省略外，省略号还有以下几种用法： 1、表示沉默： 例：何为：梅伯母的身体已经经不起路上的颠簸了！欧阳平：…… 2、表语言中断： 例：穿长袍的问："这位是……""我的兄弟。"戴礼帽的回答。 破折号也可表语言中断，但两者有不同：破折号表语言戛然而止，省略号表余音未尽。3、表语言断断续续。 例：上级……派我……到这儿……工作，我没……有……完成……上级……交给我的……任务。 4、表含糊其辞，欲言又止 例：我即刻胆怯了起来，便想全翻过先前的话来，"那是……实在，……我说不清……。其实，究竟有没有魂灵，我也说不清。" 5、表明语意未尽。 例："可恶！然而……。"四叔说。 使用省略号时应注意以下问题： （1）不可滥用省略号。一是省略号后语境不明的不能用省略号，而是没有上述特殊语意不能用省略号。 （2）、用了"等"、"等等"就不能再用省略号。（省略号和"等"、"等等"有不同，省略号表示的可以是各种需要省略的，而后者只能是类似的词语或意思。） （3）要正确处理省略号前后的点号问题：一是省略号前是个完整的句子的，省略号前应使用句末标点，表示省略的是句子；二是省略号前不是完整句子的，省略号前一般不用点号，表示省略的是词语、短语；三是省略号后一般不用标点。 （4）、如果省略的是一大段或几段文字，就用十二个圆点表示，单独成行，不顶格。 破折号的作用和例句 破折号是一个用途比较广的标号。它的主要用法可以归纳如下。 1. 用以表示对上文的解释说明或补充。例如：“亚洲大陆有世界上最高的山系——喜玛拉雅山，有目前地球上最高的山峰——珠穆朗玛峰。” 括号也表示解释说明，但是破折号引出的解释说明是正文的一部分，是较重要的信息，要读出来的。而括号里的解释说明不是正文，只是注释，没有它不影响句子的完整性，读时也不必连着正文念出来。 解释说明或补充的语句如果是插在句子中间的，可以前后各用一个破折号。例如：“太阳系除了九个大行星——水星、金星、地球、火星、木星、土星、天王星、海王星和冥王星——以外，还有40个卫星以及为数众多的小行星、彗星和流星体等。”“直觉——尽管它并不总是可靠的——告诉我，这事可能出了什么问题。” 2. 表示话题的转变。例如：“我在珠海的公司干得挺顺心。老板对我不错，工资也挺高，每月三千多呢!——我能抽支烟吗？”破折号前是讲述自己情况, 后面突然转而询问对方别的事。 3. 表示话语的中断。例如：“…班长他牺——?小马话没说完就大哭起来。”“他很大了，——(顿)并且他以为他母亲早就死了的。”前一例的破折号表示下面的话没说出来。后一例表示说了半句暂时中断，停顿了一下又接着说下去。 4. 表示声音的延长。例如：“…顺——山——倒——?林子里传出我们伐木连小伙子的喊声。” 5. 表示引出下文。例如：“在一篇题为《论气节》的文章里，他对…五四?以来中国知识分子
汉语特殊表达方式的翻译
2013年第03期 吉林省教育学院学报 No.03，2013 第29卷JOURNAL OF EDUCATIONAL INSTITUTE OF JILIN PROVINCE Vol .29（总339期） Total No .339 收稿日期：2012—12—15 作者简介：涂文莉（1971—），女，湖北武汉人。暨南大学外国语学院硕士研究生，中级翻译，研究方向：外国语言学及应用语言学。 汉语特殊表达方式的翻译 涂文莉 (暨南大学外国语学院，广东广州510632) 摘要：汉语与日语是截然不同的两种语言，有着各自不同的表达方式。此外，汉日语言中还存在着词汇涵盖范围不对应的现象，本文就汉语中的特殊表达方式“一+量词”的翻译以及词汇含义不对应的典型代表“让”的翻译做了详细的分析和阐述。 关键词：“一+量词”;“让”;翻译;表达方式中图分类号：H109．4 文献标识码：A 文章编号：1671—1580(2013)03—0144—02 汉日两种语言中有许多特殊的表达方式以及大 量含义不对应的现象。有的日语含义比汉语广泛，如「どうも」，有的汉语含义比日语广泛，如“怕”的含义有害怕，担心，估计等，可以分别对应日语「恐れる」「心配する」「おそらく」等。这里就汉语“一+量词”的翻译，以及一个汉语词汇对应多种日语表达方式的典型代表“让”的翻译进行分析和阐述。 一、“一+量词”的翻译（一）汉语“一+量词”表达方式中的数词在句中不是说明和强调数量，而只是表示单数的意思时，译成日语时通常省略不译。 1．从这条路向前走五分钟左右，有一条大河。/この道を5分ぐらい行くと、大きな川があります。2．一个身穿美丽和服的少女，由穿着华丽和服的母亲领着，正在走廊等候。/廊下に美しい和服を 着た少女が、きれいに和服を着た母親に連れられて控えていた。 （二）“一+量词”的数词表示强调时，必须翻译 出来。 1．在一片悲观气氛之中，出现了一个人，他主张一定要坚持下去。/悲観ムードの中で、ぜひ頑張って行きたいと主張する男が一人現れた。 2．我总觉得案子背后有一个谜一般的女人。/事件の裏には謎めいた女が一人いるような気がしてならない。 （三）“一+量词”修饰动词时，有时要译成拟态词。 1．一头栽倒在床上。/バッタリとベットに倒れる。 2．一下子捏住喉咙。/ギュウッと咽喉を締める。 3．汗水一滴一滴地掉下。/汗がタラタラ落ちた。 4．一跳一跳地疼。/ズキンズキンと痛む。二、“让”的翻译汉语“让”的含义十分广泛，应根据不同的语境灵活翻译。下面总结常见的翻译方法。 （一）下面三种情况可以直接用句中的动词翻译 1．“让”表示把有利的条件给他人，或把所有权、使用权给他人，或腾出空间等意思。（1）上次下棋，我让过你两个马。 この前君と将棋をさした時に「馬」を二枚おろしてあげた。 （2）你能不能把这间屋子让给我。 この部屋を私に譲ってもらえませんか。2．“让”字译成日语动词时，这个动词本身就带有使役的含义，可以直接用该动词翻译。 （1）打开窗户让空气流通。/窓を開けて空気を通す。 4 41
公示语翻译中的“情景省略”
公示语翻译中的“情景省略” 摘要：每个公示语都是一个完整的语篇，意义很大程度上依靠特定情景语境来传达。公示语的翻译应该追求情景语境的对等，而非形式的对等，而情景语境的对等主要是通过不同形式的“情景省略”来实现的。 关键词：公示语；翻译；情景语境 一、前言 公示语是在公共场合给特定人群观看，以达到某种特定交际目的的特殊应用文体。社会公示语的范围很广，包括公共场所的宣传标语、指示牌、告示语和旅游景点的介绍等，在对外宣传中发挥着不容忽视的作用。和普通文本相比，公示语有一个明显的特点是每个公示语虽然简短，但都是一个完整的语篇，而语篇的实现意义很大程度上依赖于情景语境，信息主要依靠特定情境或场合来传达，语篇功能也主要依靠情景语境来实现，不一定要体现在字面上。这种基于情景语境的省略简称为“情景省略”，在公示语翻译中非常普遍，也是公示语翻译的一大特色，但却没有专文探讨。而语篇语言学中的情景语境理论，对解释公示语翻译中的“情景省略”有参考价值。 二、情景语境理论 “情景语境”最早是马林诺夫斯基（malinowski）提出来的。马林诺夫斯基的语境包括文化语境和情景语境两大类。马氏所说的
“文化语境”是指说话者生活的社会文化环境；而“情景语境”是指说话时实际发生的事情，即语言发生的具体情境。弗斯（firth）对语境因素进行了总结，将“语境”分成由语言内因素构成的语境和由语言外因素（即参加者、事物、事件、言语效果）构成的语境。这种理论主张直接影响了韩礼德（halliday），成为系统功能语法的理论基石。韩礼德将情景因素归纳为三种：语场、语旨和语式，也即语域的三个变项，这三个变项决定了具体的语言形式。语场包括了谈话的话题和场地等情境因素；语旨指参与讲话者之间的角色关系，包括他们的社会地位，以及说话者的态度和想要实施的意图；语式指的是语言活动的媒介或渠道，分为口头语和书面语。语域的这三个变量可以用来预测在特定情景语境中所使用的具体词汇和 语法类型，即什么样的情景语境因素决定什么样的语言形式。情景语境因素，即语域，不仅影响着语言的使用，也制约着翻译策略的选择和译文的质量。和普通文本相比，公示语也有三个层次的语境，但公示语有一个明显的特点，那就是对情景语境的依赖性，信息很大程度上依靠交际的参与者、时间、地点、话题、参与者的身份等特定情境因素来传达，不一定体现在字面上，因此公示语有清晰明确、通俗易懂的效果。翻译过程中译者应恰当再现原文赖以产生的语场、语式、语旨，使译文与原文在情景语境的层次上趋于一致。在这一过程中，经常需要根据情景语境进行适当省略，即“情景省略”。
英语语法中的省略现象
外教一对一https://www.wendangku.net/doc/4916619518.html, 英语语法中的省略现象 并列复合句中的省略 在并列句中后边的分句可以省略与前边分句中相同的成分。如： a) The boy picked up a coin in the road and (the boy ) handed it to a policeman. 这个男孩在马路上拾起一枚硬币并把他交给了警察。 b) Your advice made me happy but(your advice made) Tom angry .你的建议使我高兴但使汤姆生气。 c) Tom must have been playing basketball and Mary (must have been)doing her homework. 汤姆肯定一直在打篮球，玛丽一直在写作业。 d) Gao Xiumin was born in 1959 and Fu Biao (was born) in 1963.高秀敏出生于 1959 年，傅彪出生于 1963 年。 其他一些省略结构 1.名词所有格修饰的名词，若表示住宅、店铺、教堂或上下文已暗示或明确指出过的事物时，常常可以省略。如： We spent the weekend at the Mary's. 我们在玛丽家过的周末。 2.What 和 how 引导的感叹句中，常可省略主语 it 和 be 动词如： a) What a wonderful victory (it is ) for Tom ! 这对 Tom 来说是个多么大的胜利呀! b) How beautiful (it is ) to be treated like a normal child. 被当作一个正常孩子对待对他而言是多么美妙的一件事呀。
英语中常见的省略
英语中常见的省略 省略是为了避免重复，突出新信息并使上下文紧密连接的一种语法修辞手段。省略在语言中，尤其在对话中，是一种十分普遍的现象。【词的省略】 一.省略介词 I spent two hours ( in ) playing basketball . 二.省略连接词that 在know , think , consider , suppose , find , believe ,say , decide ,等动词后的宾语从句中that可以省略；若带有多个宾语从句，只有第一个that可以省略，其余的不可以省略。 I believe ( that ) you will succeed . I’m sure（that）Mr. Smith will help you . 注意：在宾语从句中，当有两个以上并列从句时，第一个that可以省略，以后的均不可省略。 He said ( that ) the text was very important and that we should learn it by heart . 三.省略关系代词 在限制性定语从句中，作宾语的关系代词that , which , who , whom可省略，非限制性定语从句中的关系词不能省略。 I will give you all ( that ) I have. Mike read the book ( which ) I bought yesterday . The girl ( who / whom / that ) the teacher spoke to is Lily .
【句子成分的省略】 一.省略主语。如： Beg your pardon. ( Beg前省略了主语I ) Take care ! ( Take前省略了主语you ) Looks as if it is going to rain . ( Looks前省略了主语it ) 二.省略谓语。如： Who next? ( Who后面省略了谓语comes ) The lake was deep and the ice thin .( ice后面省略了was ) We will do the best we can . ( can后面省略了动词do ) 三.省略表语。如： -Are you ready? -Yes ,I am . ( am后省略了ready ) 四.省略宾语。如： Let’s do the dishes . I’ll wash and you’ll dry . ( wash 和dry后面省略了宾语dishes ) 五.省略状语。如： Tom was not hurt . Strange ! ( Strange前面省略了状语how ) 六.在由and和but连接的句子中，为了避免重复，常省略一些重复的词或词组。 1.省略共同的主语或状语。 Mr. Smith picked up a coin in the road and ( Mr. Smith )
破折号和省略号用法练习
一、破折号主要用法 1.表示解释说明例如：“亚洲大陆有世界上最高的山系——喜马拉雅山，有目前地球上最高的山峰——珠穆朗玛峰。” 解释说明或补充的语句如果是插在句子中间的，可以前后各用一个破折号。 例如：（1）“太阳系除了九个大行星——水星、金星、地球、火星、木星、土星、天王星、海王星——以外，还有40个卫星以及为数众多的小行星、彗星和流星体等。” （2）“直觉——尽管它并不总是可靠的——告诉我，这事可能出了什么问题。” 2.表示话题转换 例如：“我在珠海的公司干得挺顺心，工资也挺高，每月三千多呢!——我能抽支烟吗？”3．表示插说 例如（1）“这种分配法可以算——在我的经验中——天下第一了”（选自老舍《想北平》）（2）“就拿他做个例子吧，——其实，这事每人都会碰到——有一次他……” 4.表示语言中断例如：“‘班长他牺——’小马话没说完就大哭起来。” 5.表示声音延长例如：“‘顺——山——倒——’林子里传出伐木连小伙子的喊声。” 6.表示意思的递进。例如：自然是读着，读着，强记着——而且要背出来。 二、破折号用法练习 1.选出下列句中破折号用法与例句相同的一项。（） 例句：就从这我才明白，在一个比黄连还苦的青蛋蛋里藏着的，才是核桃——我想念的朋友。 A.“今天好热啊！——你什么时候去上海？” B.“将军家的厨师来了，问他好了——喂，普洛诃尔！过来吧……” C“哟，祥子？怎——”她刚要往下问，一看祥子垂头丧气的样子，车上拉着铺盖卷，把话咽了回去。 D.三只五只的白鸥轻轻地掠过，翅膀扑着波浪，——一点一点躁怒起来的波浪。 2.选出下列句中破折号用法与例句相同的一项。（） 例句：陈二奶奶带着“童儿”——四十来岁的一位黄脸大汉----快到掌灯的时候才来到。A．她说得非常大方，自然。那件粉红色的卫生衣忽然——在祥子眼中——仿佛肃静了许多。B．一进屋门，两个儿子——一个十三，一个十一岁——就想往外躲。 C．我们曾经把解决人民内部矛盾的方法具体化为一个公式，叫做“团结——批评——团结”。D．于是她使劲地张了张嘴：“浩——波——” 3.在下列句子中，与例句破折号作用相同的一项是（） 例句：精简机构以后，南京宏远制衣有限公司改变了“四多一少”——临时机构多、管理人员多、服务人员多、辅助人员多、第一线生产人员少——的状况。 A．“股市行情发生了很大变化——请把湿毛巾递给我——马上开会修改方案。”罗经理气喘吁吁地对我说。 B．“直觉——尽管它并不总是可靠的——告诉我，这事可能出了什么问题。” C．“这种分配法可以算——在我的经验中——天下第一了” D．在这个时候，专卖手脚的哥儿们的手与脚就一律贵起来：“前门，东车站！”“哪儿？”“东----车----站！”“呕，干脆就给一块四毛钱！不用驳回，兵荒马乱的！” 4.在下列句子中，与例句破折号作用相同的一项是 例句：祥子把钱——一打儿钞票----接过来，愣了一会儿，找不到话说。 A．我国的四大发明——火药、印刷、指南针、造纸术——对世界历史的发展有伟大的贡献。
五种常见表达方式
表达方式应当为在用语言、艺术、音乐、行动把思想感情表示出来时所采取的方法和形式。文章的表达方式有多种：记叙、说明、议论、抒情、描写。其中，记叙，说明，议论也是文学的三大文体。今天，语文网小编通过以下的分享——五种常见表达方式，希望能让大家对语文知识的概念更加清晰，运用起来更加自如! 五种常见表达方式 1、记叙 2、描写 3、抒情 4、议论 5、说明 (1)记叙：记叙是写作中最基本、最常见的一种表达方式，它是作者对人物的经历和事件的发展变化过程以及场景、空间的转换所作的叙说和交代，在写事文章中应用较为广泛，作用也比较多。 (2)描写：描写是把描写对象的状貌、情态描绘出来(包括心理描写、语言描写、动作描写、神态描写、外貌描写、环境描写等)，再现给读者的一种表达方式。用生动形象的语言把人物的形态、动作或景物的状态等具体特征描绘出来。一般分为人物描写或景物描写。它是记叙文，特别是文学创作中的主要表达方式之一。在一般的抒情、议论、说明文中，有时也把它作为一种辅助手段。描写的手法运用得好，能逼真传神、生动形象，使读者如见其人、如闻其声、如临其境，从中受到强烈的艺术感染。 (3)抒情：抒情就是抒发和表现作者的感情。具体指以形式化的话语组织，象征性地表现个人内心情感的一类文学活动，它与叙事相对，具有主观性、个性化和诗意化等特征。作为一种特殊的文学反映方式，抒情主要反映社会生活的精神方面，并通过在意识中对现实的审美改造，达到心灵的自由。抒情是个性与社会性的辩证统一，也是情感释放与情感构造、审美创造的辩证统一。它是抒情文体中的主要表达方式，在一般的文学作品和记叙文中，也常常把它作为重要的辅助表达手段。 (4)议论：议论就是作者对某个议论对象发表见解，以表明自己的观点和态度。通过讲事实、说道理等方法对人物或事情发表自己的观点、看法，通常带有较强的主观色彩.它的作用在于使文章鲜明、深刻，具有较强的哲理性和理论深度。在议论文中，它是主要表达方式;在一般记叙文、说明文或文学作品中，也常被当作辅助表达手段。 (5)说明：说明是用简明扼要的文字，把事物的形状、性质、特征、成因、关系、功用等解说清楚的表达方式。这种被解说的对象，有的是实体的事物，如山川、江河、植物、文具、建筑、器物等;有的是抽象的道理，如思想、意识、修养、观点、概念、原理、技术等。 五种常见表达方式有哪些由查字典语文网小编整理，仅供参考。
中考文言文翻译实用方法经典讲解(带试题实例!)
一.增就是增补，在翻译时增补文言文省略句中的省略成分。 注意：补出省略的成分或语句，要加括号。 1、增补原文省略的主语、谓语或宾语 例1：“一鼓作气，再而衰，三而竭。”“再”“三”后省略了谓语“鼓”，翻译时要补上。 例2：“见渔人，乃大惊，问所从来。”译句：“（桃源中人）一见渔人，大为惊奇，问他是从哪里来的。” 例3：“君与具来。”“与”后省略了宾语“之”。 2、增补使语义明了的关联词 例：“不治将益深”是一个假设句，译句：“（如果）不治疗就会更加深入”。 二 .删就是删除，凡是古汉语中的发语词、在句子结构上起标志作用的助词和凑足音节的助词等虚词，因在现代汉语中是没有词能代替，故翻译时无须译出，可删去。 例1：“师道之不传也久矣。”译句：“从师学习的风尚已经很久不存在 了。”“也”为句中语气助词，起到舒缓语气的作用，没有实在意义。在翻译时，完全可以去掉。 例2：“孔子云：何陋之有？”译句：“孔子说：有什么简陋的呢？”“之”为宾语前置的标志，删去不译。 例3：“夫战，勇气也。”译句：“战斗，靠的是勇气”。“夫”为发语词，删去不译。 三.调就是调整，在翻译文言文倒装句时，应把古汉语倒装句式调整为现代汉语句式，使之符合现代汉语的表达习惯、译句通顺。这就需要调整语句语序， 大体有三种情况：
1、后置定语前移例：“群臣吏民，能面刺寡人之过者，受上赏。”可调成“能面刺寡人之过群臣吏民，受上赏。” 2、前置谓语后移例：“甚矣！汝之不惠。”可调成“汝之不惠甚矣。” 3、介宾短语前移。例：“还自扬州”可调成“自扬州还”。 4、前置宾语后移例：“何以战？”可调成“以何战？” 四.留就是保留，凡是古今意义相同的词、专有名词、国号、年号、人名、物名、人名、官职、地名等，在翻译时可保留不变。 例：“庆历四年春，滕子京谪守巴陵郡。”译句：“庆历四年的春天，滕子京被贬到巴陵郡做太守。”“庆历四年”为年号，“巴陵郡”是地名，可直接保留。 五.扩就是扩展。 1、言简义丰的句子，根据句义扩展其内容。 例：“怀敌附远，何招而不至？”译句：“使敌人降服，让远方的人归附，招抚谁，谁会不来呢？” 2、单音节词扩为同义的双音节词或多音节词。 例：“更若役，复若赋，则如何？”译句：“变更你的差役，恢复你的赋税，那么怎么样呢？”“役”“赋”扩展为双音节词。 六.缩就是凝缩，文言文中的有些句子，为了增强气势，故意实用繁笔，在翻译时应将其意思凝缩。 例：“有席卷天下，包举宇内，囊括四海之意，并吞八荒之心。”译句：“（秦）有吞并天下，统一四海的雄心。” 七.直即直译，就是指紧扣原文，按原文的词句进行对等翻译的今译方法。对于文言文的实词、大部分虚词、活用词和通假字，一般是要直接翻译的，否则， 在考查过程中是不能算作准取得翻译。 例：“清荣峻茂，良多趣味。”译句：“水清，树茂，山高，草盛，实在是趣味无穷。”
省略号的用法
省略号的用法 最主要的是以下几种： 1、表示引文的省略： 例：她轻轻地哼起了《摇篮曲》：“月儿明，风儿静，树叶儿遮窗棂啊……” 2、表示列举的省略： 例：在广州有花市上，牡丹、吊钟、菊花、山茶、墨兰……春秋冬三季的鲜花都在这里聚齐了。 省略的是各种花的品种。 3、表示说话断断续续的省略： 例：“我……对不起……大家，我……没有……完成……任务。” 4、表示重复语句的省略： 例：我扑到指导员身上大喊：“指导员，指导员……” 省略了我对指导员的呼喊。 5、表示意在言外的省略： 例：想着想着，我的心里，好像有一颗种子在生根、发芽…… (小学《语文》第七册《高大的皂荚树》) 什么种子在生根发芽呢?这个省略号让我们去想象，去推断，要让我们在想象中去接受皂荚树那种舍己为人的品格。 6、表示语意难尽的省略： 例：他坐在那里捧着搪瓷碗，嚼着几根草根和我们吃剩的鱼骨头，嚼了一会儿，就皱紧眉头硬咽下去。我觉得好像有万根钢针扎着喉管，失声喊起来：“老班长，你怎么……” 这个例子中的省略号表示欲言又止。面对艰难的处境——草地茫茫，又没有干粮，老班长把他千辛万苦做成的饭都给我们伤员吃了，而他自己却偷偷地吃草根和我们吃剩下的鱼骨头。“我”的心里是多么痛苦啊。用什么语言能表达“我”的情感呢，欲说而又没法说。 7、表示语言中断的省略： 例：凤凰接着说：“要搭窝，先要选好根基，比如大树干上的三个杈……”老鹰一听，想：“啊！原来就是找个树杈，挺简单，我会了。” 这里的省略号，标志凤凰的话还没讲完，因转向叙述老鹰的想法，只得暂时中断。 8、表示含糊其辞的省略： 例：我立刻胆怯起来，我想全翻过先前的话来。”那是......实在......我就不清，......其实有没有灵魂，我也说不清。” 9、表示沉默的省略： 例：何为：梅伯母的身体已经经不起路上的颠簸了！欧阳平：…… 10、表示思维语义的跳跃： 例：“对呀对呀！……会字有四样写法，你知道吗？” 11、话还未说完被别人前去说了。 例：孔乙己睁大眼睛说，“你怎么这样凭空污人清白……”“什么清白？我前天亲眼看见你偷了何家的书，吊着打。” 应注意的问题： 1、用了"等"、"等等"就不能再用省略号。（省略号和"等"、"等等"有不同，省略号表示的可以是各种需要省略的，而后者只能是类似的词语或意思。） 2、要正确处理省略号前后的点号问题： 一是省略号前是个完整的句子的，省略号前应使用句末标点，表示省略的是句子；（如“对呀对呀！……会字有四样写法，你知道吗？”） 二是省略号前不是完整句子的，省略号前一般不用点号，表示省略的是词语、短语； 三是省略号后一般不用标点，但是也有特例，在疑问句和感叹句的句末词语有省略，省略号后的问号或叹号也可保留。（如老二！你敢说李中堂是……！算了，算了，我不跟你扳死杠！）（老舍《正红旗下》）这里句末有了省略，保留叹号以表示感叹语气。 3、省略号在书写中占两个字的位置，一行或一段文字的开头和结尾都可以书写。但不能上行末尾写一半下行开头写一半。