GUS染液配方

GUS染液配方

100mM sodium phosphate buffer (pH7.0) 磷酸钠缓冲液

0.1% Triton X-100

0.1% N-laurylsarcosine（十二烷基肌氨酸纳）

10 mM Na2EDTA

1 mM K3Fe(CN)6铁氰化钾

1 mMK4Fe(CN)6亚铁氰化钾

0.5 mg/mL X-Gluc

100mM sodium phosphate buffer (pH7.0) 磷酸钠缓冲液的配制方法：

计算方法：

pH7.0时，Na2HPO4.12H2O占61%，NaH2PO4.2H2O占39%

配制100ml时，所需Na2HPO4.12H2O的量为：100*10-3*0.1*358.14*0.61=2.18 g 所需NaH2PO4.2H2O的量为：100*10-3*0.1*156.01*0.39=0.61 g

GUS染液配制方法（500ml）：

1. 分别称取10.92 g Na2HPO4.12H2O和3.04 g NaH2PO4.2H2O溶于400ml蒸馏水中；

2. 依次将0.5g十二烷基肌氨酸纳、1.86 g Na2EDTA、0.16 g铁氰化钾、0.21 g亚铁氰化钾和500ul Triton X-100加入磷酸缓冲液中，完全溶解后，定容至500 ml;

3. 根据实验需要取一定量的上述溶液，如100ml，称取0.05 g X-Gluc溶于溶液中，遮光保存。若准备长时间之后用，将其分装后保存与-20度。

各种试剂分子量：Na2EDTA

K3Fe(CN)6

K4Fe(CN)6

一种改良苏木素染液的配制方法

一种改良苏木素染液的配制方法 目的准确控制苏木素染液配制过程中所需试剂的量，提高染色能力，节约成本。方法准确称取苏木素2g，量取无水酒精150ml，用无水酒精彻底溶解苏木素，再依次加入碘酸钠240mg、硫酸铝钾20g、柠檬酸1g。结果新配苏木素染液着色能力明显提高且无氧化膜产生，使用时间周期长，无需过滤。结论染液配制简单，细胞核染色鲜艳，苏木素用量少，减少浪费。 标签：苏木精；氧化；方法苏木素-伊红染色法，也就是我们常说的HE染色技术。是各个医院实验室最常用的染色方法，也是各病理科最经典的染色技术。然而苏木精染液的配制是HE染色技术的核心，它决定染色质量的优劣。一般Harris苏木精染液的配制[1]时所需苏木素多，配制较为繁琐，也具有一定的危险。为了节约成本，减少浪费，我们摸索一套自己的配制方法。 1 资料与方法 1.1一般资料苏木素2g，无水酒精150ml，碘酸钠240mg，硫酸铝钾20g，柠檬酸1g，蒸馏水800ml。 1.2方法取一只2000ml烧杯，苏木素2g，无水酒精150ml，将酒精和苏木素倒入烧杯中，将烧杯置于磁力搅拌器进行搅拌10min，苏木素完全溶解后，加入800ml蒸馏水，搅拌5min后，加入碘酸钠240mg搅拌5min，再加入20g硫酸铝钾，搅拌40min。待苏木红也硫酸铝钾完全结合后，最后加入1g柠檬酸终止氧化，搅拌5min后加入甘油120ml，搅拌2h。棕色瓶盛装，放入阴暗地方室温保存2w后直接使用。 2 结果 苏木素染液无需过滤，无沉渣和氧化膜形成。染液着色能力强，切片染色蓝化后，细胞核着色清晰，細胞质清晰可见，呈鲜艳的蓝色。大大减少了试剂的消耗。 3 讨论 苏木精为一种无色或谈灰黄色粉末，分子式为C16H14O6，分子量302.288。它是一种天然染料，是由中南美洲等地产的一种称”洋苏木素树”（hematoxylon campechianum）的树芯中提取出来的。苏木素的配方很多，其原理是一样的，都是先氧化，使苏木素的分子结构失去两个氢原子，并使其中的一个苯环转化成具有醌型结构的苯环而成为苏木红（hematein）[2],并在媒染剂的作用下，与细胞核染色质结合。常用的氧化苏木素的方法有两种：一是自然氧化。但是氧化时间周期过长，而氧化的程度也难以掌握；所以现在实验室一般采用的是第二种方法，即人工氧化的方法，人工氧化就是在染液中加入氧化剂，达到快速氧化苏木素的目的。氧化剂的种类很多，如高锰酸钾、过氧化氢、氧化汞、碘酸钠等，现在大

伊红染色液溶液的配制方法

伊红染色液配制方法 溶液的配制方法如下： 华越洋伊红染色液：100ml 伊红染料配方较多在常规配方中，有的染色效果好，但操作较繁琐，且消耗较多试剂。有的操作简单，但染色时间长，染液有效期短，常需加入冰醋酸，但加入剂量不易掌握，量少达不到促染作用，加入过多染液易沉淀，且引起色调不正，特别是容易褪色，染色结果不能长期保存。为此，对伊红Y染色液配制进行了改进。改进后的方法具有操作简便、经济、染色性质稳定、着色力强且持久颜色鲜艳等优点； 制备方法：伊红Y1G，蒸馏水90ML，苦味酸饱和水溶液10ML。将蒸馏水加入伊红，待其全部溶解后，加入苦味酸饱和水溶液。 染色结果观察：染色时间0.5-1分钟。伊红所着的颜色鲜艳，层次分明，与蓝色的细胞核对比突出。 伊红Y（四嗅荧光素二钠盐，分子式：C20-H6O5Br4NO2）是一种酸性红色胞浆性染料，室温下，在水中的溶解度度远大于在酒精中的溶解度。它在溶液反应中，由于钠离子的存在而呈碱性状态。苦味酸[分子式：（NO2）3C6HOH]是一种较强的酸性染料，它的颜色是由硝基发色团所致，染色性能是由羟基助色团产生的。苦味酸具有三种作用：1本身是一种胞浆染料，具有染色作用。2又是一种酸，加入伊红Y染色液中，使染色造成比胞浆等电点略为酸性的环境，抑制了部分氨基酸中羟基官能团，从而使氨基酸中氨基官能团和酸性染料结合，增加了染液与组织间的亲和力，起到促染作用。3苦味酸又是一种氧化剂，在染色体中经过氧化物作用后，使染色剂与组织成份结合的更牢固。组织着色鲜艳，染色后不易褪色，因而切片可长期保存。 华越洋伊红染色液操作简单，不使用汞、甲醇等有毒试剂，可以用于组织切片或培养细胞的染色。 本伊红染色液染色后细胞浆呈粉红色或红色。 本染色液可以和免疫荧光染色或免疫组化染色配合使用。一方面可以在本伊红染色液染色后进行免疫荧光染色或其它染料的染色，另一方面也可以在免疫组化染色后再进行伊红复染。 本染色液可以重复使用，直至认为效果不佳时再换用新的染色液。一个包装的本染色液至少可以染色200个样品。

常用溶液配制方法

一.常用贮液与溶液 1mol/L亚精胺（Spermidine）: 溶解2.55g亚精胺于足量的水中，使终体积为10ml。分装成小份贮存于-20℃。 1mol/L精胺（Spermine）：溶解3.48g精胺于足量的水中，使终体积为10ml。分装成小份贮存于-20℃。 10mol/L乙酸胺（ammonium acetate）：将77.1g乙酸胺溶解于水中，加水定容至1L后，用0.22um孔径的滤膜过滤除菌。 10mg/ml牛血清蛋白(BSA）：加100mg的牛血清蛋白（组分V或分子生物学试剂级，无DNA酶）于9.5ml水中（为减少变性， 须将蛋白加入水中，而不是将水加入蛋白），盖好盖后，轻轻摇动，直至牛血清蛋白完全溶解为止。不要涡旋混合。加水定容到10ml，然后分装成小份贮存于-20℃。 1mol/L二硫苏糖醇（DTT）：在二硫苏糖醇5g的原装瓶中加32.4ml水，分成小份贮存于-20℃。或转移100mg的二硫苏糖醇 至微量离心管，加0.65ml的水配制成1mol/L二硫苏糖醇溶液。 8mol/L乙酸钾（potassium acetate）：溶解78.5g乙酸钾于足量的水中，加水定容到100ml。 1mol/L氯化钾（KCl）：溶解7.46g氯化钾于足量的水中，加水定容到100ml。 3mol/L乙酸钠（sodium acetate）：溶解40.8g的三水乙酸钠于约90ml 水中，用冰乙酸调溶液的pH至5.2，再加水定容到100ml。 0.5mol/L EDTA:配制等摩尔的Na2EDTA和NaOH溶液（0.5mol/L），混合后形成EDTA的三钠盐。或称取186.1g的Na2EDTA·2H2O和20g的NaOH，并溶于水中，定容至1L。 1mol/L HEPES：将23.8gHEPES溶于约90ml的水中，用NaOH调pH （6.8-8.2），然后用水定容至100ml。 1mol/L HCl：加8.6ml的浓盐酸至91.4ml的水中。 25mg/ml IPGT：溶解250mg的IPGT（异丙基硫代-β-D-半乳糖苷）于10ml 水中，分成小份贮存于-20℃。 1mol/LMgCl2:溶解20.3g MgCl2·6H2O于足量的水中，定容到100ml。

常用染色液配方

实验室常用染色液配方 1、吕氏(Loeffler)美蓝染色液 A液：美蓝(Methylene blue) 0.3 克95%酒精毫升 B液：氢氧化钾(KOH) 0.01 克蒸馏水100 毫升分别配制A液和B液，然后混合即成。 2、齐氏(Ziehl)石炭酸复红染色液 A液：碱性复红(Basic fuchsin) 0.3 克95%酒精10.O 毫升 B液：石炭酸(苯酚) 5.0 克蒸馏水95 毫升 将碱性复红溶于95%酒精中，配成A液。将石炭酸溶于蒸馏水中，配成B液。将两者混合即成。 3、结晶紫染色液(Huclker改订)A液：结晶紫(Crystai violet) 2.5 克95%酒精25.0 毫升 B液：草酸铵(NH4)2C2O4H2O 1.0 克蒸馏水100 毫升 将结晶紫研细后，加入95%酒精，使之溶解，配成A液。将草酸铵溶于蒸馏水，配成B液。两液混合即成。 4、路戈氏(LugoI)碘液(革氏鉴别染色用)碘1.0克碘化钾2.0克蒸馏水300毫升 先将碘化钾溶于少量蒸馏水中，再将碘溶于碘化钾溶液中，溶时可稍加热，最后加足蒸馏水量。 5、番红染色液(革氏鉴别染色用)番红O(Safranin O) 2.0克蒸馏水100毫升 6、孔雀绿染色液(芽孢染色用)孔雀绿(Malachite green) 5.0克蒸馏水100毫升先将孔雀绿研细，加少许95%酒精溶解，再加蒸馏水。 7、Dorner黑素液(英膜染色用)黑素(Nigrosin) 10.0克蒸馏水100毫升福尔马林(40%甲醛) 0.5毫升将黑素在蒸馏水中煮沸5分钟，加入福尔马林作为防腐剂，用玻璃棉过滤。 8、刚果红染色液刚果红(Congo red) 2.0克蒸馏水100毫升 9、稀释结晶紫染液(放线菌染色用)结晶紫染色液(同3) 5.0毫升蒸馏水95.0 10、乳酸石碳酸棉蓝染色液（真菌制片，短期保存）石炭酸10.0克甘油20.0毫升乳酸(比重l.21) 10.0毫升棉蓝0.02克蒸馏水10.0毫升将碳酸加在蒸溜水中加热溶化，加入乳酸和甘油，最后加入棉蓝，溶解即成。 11动物组织石蜡切片染色方法 苏木精-伊红(HE)染色：二甲苯Ⅰ, Ⅱ各10 min，依次进入无水乙醇、950 mL/L, 900 mL/L, 800 mL/L及700 mL/L的酒精各5 min，蒸馏水洗；入苏木精染液10 min，盐酸酒精分色4 s，自来水洗10 min；依次入700 mL/L, 800 mL/L及900 mL/L酒精各5 min，入伊红染液染色 10 min；入950 mL/L及无水乙醇Ⅰ, Ⅱ各5 min, 以二甲苯透明，中性树脂封片. 一、常用染色液的配制 ⒈碘-碘化钾（I2-KI）溶液能将淀粉染成蓝紫色，蛋白质染成黄色，也是植物组织化学测定的重要试剂。 配方：碘化钾2g ；蒸馏水300ml ；碘1g 先将碘化钾溶于少量蒸馏水中，待全溶解后再加碘，振荡溶解后稀释至300mL，保存在棕色玻璃瓶内。用时可将其稀释2-10倍，这样染色不致过深，效果更佳。 ⒉苏丹Ⅲ（sudanⅢ或Ⅳ）能使木栓化、角质化的细胞壁及脂肪、挥发油、树脂等染成红色或淡红色，是著名的脂肪染色剂。 配方：（1）苏丹III或苏丹Ⅳ干粉0.1g ；95％酒精10ml ；过滤后再加入10ml甘油（2）先将0.1g苏丹III或IV溶解在50ml丙酮中，再加入70%酒精50ml。 （3）苏丹III 70%乙醇的饱和溶液。 ⒊1％醋酸洋红（aceto carmine）酸性染料，适用于压碎涂抹制片，能使染色体染成深红色，细胞质成浅红色。

常用染色液的配制

常用染色液的配制 1.吕氏（Loefflev）美蓝染色液 A液：2%美蓝（Methylene blue）95%酒精溶液 B液：10%KOH溶液 取A液30ml、B液0.1ml与100ml蒸馏水混合。 2.石炭酸复红染色液 A液：4%碱性复红（basic fuchsin）95%酒精溶液 将碱性复红在研钵中研磨后，逐渐加入95%酒精，继续研磨使其溶解、 配成A液。 B液：5%石炭酸溶液 取A液10ml、B液90ml混合即可。一般可将此溶液稀释5-10倍使用。 但稀释液易变质失效，一次不宜多配。 3.革兰氏（gram）染色液 （1）草酸铵结晶紫染液： A液：1%结晶紫（Crystal violet）95%酒精溶液 B液：1%草酸铵（Ammonium oxalate）溶液 取A液20mlB液80ml，静置48/小时后使用。 （2）路哥氏（Lugol）碘液： 碘片1.0g、碘化钾2.0g、蒸馏水300ml 先将碘化钾溶解在少量水中，再将碘片溶解在碘化钾溶液另，待碘全部 溶解后，加够水即成。 （3）95%酒精溶液 （4）蕃红（沙黄）复染液： 2.5%蕃红（Safranlne O）95%酒精溶液。 取此液10ml与90ml蒸馏水混匀即成。 4.芽孢染色液 （1）5%孔雀绿(Malachite green)溶液。 （2）0.5%蕃红溶液。 （3）苯酚品红溶液 称取11g碱性品红溶于100ml无水酒精中。 再取上述溶液10ml与100ml 5%的苯酚溶液混合，过滤备用。 （4）黑色素(nigrosin)溶液 10%黑色素溶液，置沸水浴中30min后，滤纸过滤二次，补加水到100ml，

溶液配制步骤

一．用容量瓶配制溶液所用仪器： 1、烧杯、容量瓶、玻璃棒、胶头滴管、托盘天平、分析天平、药匙（固体溶质使用）、移液管（液体溶质使用） 2、容量瓶 1.构造： 磨口、细颈、梨形平底 2.特点： ① 容量瓶上注明温度和容积。② 容量瓶颈部有刻度线。 3.使用范围：专门用来配制一定体积、一定物质的量浓度的溶液。 4.注意事项：① 使用前先检漏。 ② 不可装热或冷的液体。③ 不能用来溶解固体物质或存放液体或进行化学反应。 3、使用容量瓶六忌：一忌用容量瓶进行溶解（体积不准确），二忌直接往容量瓶倒液（会洒到外面）；三忌加水超过刻度线（浓度偏低）；四忌读数仰视或俯视（仰视浓度偏低，俯视浓度偏高）；五忌不洗涤玻璃棒和烧杯（浓度偏低）；六忌标准溶液存放于容量瓶（容量瓶是量器，不是容器）。 二．用容量瓶配制溶液的步骤： 全过程有计算，称量，溶解，冷却，转移，洗涤，定容，摇匀/装瓶八个步骤 八字方针：计，量，溶，冷，转，洗，定，摇 以LNaCO 3溶液500ml 为例说明溶液的配制过程 1.计算：NaCO 3物质的量＝L ×＝，由NaCO 3摩尔质量106g/mol, 则NaCO 3质量＝×106g/mol= 2.称量：用分析天平称量，注意托盘天平、分析天平的使用。 3.溶解：在烧杯中用100ml 蒸馏水使之完全溶解，并用玻璃棒搅拌（注意：应冷却，不可在容量瓶中溶解） 4.转移，洗涤：把溶解好的溶液移入500ml 容量瓶，，由于容量瓶瓶口较细，为避免溶液洒出，同时不要让溶液在刻度线上面沿瓶壁流下，用玻璃棒引流。为保证溶质尽可能全部转移到容量瓶中，应该用蒸馏水洗涤烧杯和玻璃棒二、三次，并将每次洗涤后的溶液都注入到容量瓶中。轻轻振荡容量瓶，使溶液充分混合。（用玻璃棒引流） 5.定容：加水到接近刻度2-3厘米时，改用胶头滴管加蒸馏水到刻度，这个操作叫定容。。定容时要注意溶液凹液面的最低处和刻度线相切，眼睛视线与刻度线呈水平，不能俯视或仰视，否则都会造成误差 6.摇匀：定容后的溶液浓度不均匀，要把容量瓶瓶塞塞紧，用食指顶住瓶塞，用另一只手的手指托住瓶底，把容量瓶倒转和摇动多次，使溶液混合均匀。这个操作叫做摇匀。 7.贴上标签：把定容后的Na 2CO 3溶液摇匀。把配制好的溶液倒入试剂瓶中，盖上瓶塞，贴上标签。 问题：在配制溶液的过程中哪些操作可能引起溶液浓度的误差 三．过程分析： 根据 ，引起误差的原因就在“溶质n B ”和“溶液体积V ”是否准确，所以引起误差的可能有： 一. 固体药品的称量与液体药品的量取是否准确。 二. 溶于水放热或吸热的试剂，溶解后未冷却会引起溶液体积偏差，使所配溶液浓度出现误差。 三. 溶液移入容量瓶时有少量溅出，所配溶液浓度偏低。 c B == n B ￣ V

常用染色液的配制

附录二：常用固定液和染色液的配制 常用染色液的配制 1. 番红水液 番红0.1g溶入蒸馏水,定溶至100ml。 2. 番红酒液 番红0.5g或1g溶入50%酒精,定溶至100ml。 3. 固绿染液 固绿0.1g溶入95%酒精，定溶至100ml。 4. 碘-碘化钾染液 碘化钾溶入100ml蒸馏水，再加入1g碘，溶解后即可使用。 5. 苏丹Ⅲ（或Ⅳ）染液 将0.1g苏丹Ⅲ或Ⅳ溶解在50ml丙酮中，再加入70%酒精50ml。6.改良苯酚品红染液 原液A：将3g碱性品红溶入100ml 70%酒精，此液可长期保存。原液B：将10mlA液加入到90ml 5%苯酚水溶液中。 原液C：将55mlB液加入到6ml的冰醋酸和6ml的38%的甲醛中。染色液：取C液20ml，加45%冰醋酸80ml，充分混匀，再加入1g 山梨醇，放置14天后使用，可保存3年。 7. 间苯三酚染液 将5g间苯三酚溶入100ml 95%酒精（若溶液呈黄色，即为失效）。 8. 中性红染液

将0.1g中性红溶入100ml蒸馏水，用时稀释10倍。 9. 钌红染液 将5~10mg钌红溶入25~50ml蒸馏水，现用现配。 10.龙胆紫染液 将0.2g龙胆紫溶入100ml蒸馏水。现常用结晶紫代替。必要时可将医用紫药水稀释5倍后代用。 11.铁醋酸洋红染液 先将100ml 45%醋酸水溶液置入200ml的锥形瓶中煮沸，移去火苗，然后慢慢地分多次加入1g洋红粉末（切记不可一次倒入）。待全部倒入后，再煮沸1~2min，并悬入一生锈的小铁钉于染液中，过1min 后取出，使染色剂略含铁质，以增加染色性能。静置12h后过滤于棕色瓶中备用（置于避光处）。 12.苏木精染液 苏木精的配方很多，常用的有如下3种： 配方Ⅰ：苏木精水溶液 0.5g苏木精溶入100ml煮沸的蒸馏水中，静置24h后可使用。 配方Ⅱ：代氏苏木精（Delarfield’s haematoxylin） 甲液：苏木精1g + 无水酒精6ml 乙液：硫酸铝铵（铵矾）10g + 蒸馏水100ml 丙液：甘油25ml + 甲醇25ml 分别配制甲、乙两液，将甲液一滴滴地加入乙液中，充分搅拌后，放入广口瓶中用纱布蒙住瓶口，置于温暖和光线充足处7~10天，再加

常用溶液的配制方法

常用溶剂的配制方法 1.磷酸缓冲液： 0.15M，pH=7.4磷酸缓冲液： KH2PO4：2.041g+100ml水K2HPO4·3H2O：10.3g+300mL水 两液混合即成400mL，0.15M，pH=7.4的磷酸缓冲液 0.2mol/L 不同pH的磷酸缓冲液：先配制0.2 mol/L的磷酸二氢钾溶液和0.2 mol/L的磷酸二氢钾溶液，然后按下表配制：

2.硼酸缓冲液 0.15M，pH=8.2硼酸缓冲液： 四硼酸钠溶液：2g+35 mL水硼酸溶液：3.246g硼酸+350 mL水 两液混合即成700 mL，0.15M，pH=8.2的硼酸缓冲液 0.2 mol/L（硼酸根），不同pH的硼酸缓冲液：先配制0.2 mol/L的硼酸溶液和0.05 mol/L的四硼酸钠溶液，然后按下表配制： 3.甘氨酸-盐酸缓冲液：0.2 mol/L 0.2 mol/L甘氨酸溶液（15.01g/L）

4.柠檬酸缓冲液：0.1mol/L C6H8O7·H2O:0.1mol/L 溶液为21.01g/L Na3C6H5O7·2H2O：0.1mol/L溶液为29.41g/L

5.Tris-HCl缓冲液：0.1mol/L 100mL0.1mol/L三羟甲基氨基甲烷（Tris）溶液与一定量的0.1mol/L盐酸混匀，可得0.1mol/L，不同pH的缓冲液。 200mL 0.1M Tris（2.42g）加入0.1M HCl 24mL→pH=9，0.1M Tris-HCl buffer 6.醋酸缓冲液：0.2mol/L 0.2mol/L醋酸钠：27.22g三水醋酸钠（无水的为16.4g）+1L水 0.2mol/L醋酸：11.55mL冰醋酸+1L水

染色液配制方法

常用染色液的配制 1．骆氏美蓝染色液 甲液：美蓝0.3g 95％酒精溶液 30ml 乙液：0.01％氢氧化钠溶液 100ml 甲液与乙液相混合即成。 2．1％美蓝酒精溶液美蓝1g 95%酒精溶液 100ml，充分混合溶解即可。 3．革兰氏染色液 （1）草酸铵结晶紫染液 甲液：结晶紫2.0g 95％酒精20ml 乙液：草酸铵0.8g 蒸馏水80ml 用时先以蒸馏水将甲液稀释5倍，然后加20ml于80ml乙液中，混合即成。 （2）革兰氏碘溶液碘片 1g 碘化钾 2g 蒸馏水 300ml 先将碘化钾置于干净的乳钵中，加入蒸馏水少许（约5ml），待碘化钾完全溶解后，再加入碘片，略作研磨，使碘片完全溶解，然后徐徐加水，充分混合，直至足量。切忌将碘片与碘化钾一起直接加入瓶中，一次加水配制。否则，碘片往往不能完全溶解而影响碘的浓度。（3）95％酒精 （4）复染色液可用碱性复红或沙黄液及稀释的石炭酸复红液。 碱性复红液：碱性复红0.1g 蒸馏水100ml，混合即成。 沙黄液：3.41％沙黄酒精溶液10ml、蒸馏水90ml。 稀释石炭酸复红液：石炭酸复红液10ml、蒸馏水90ml，混合即成。4．抗酸染色液 （1）石炭酸复红液 3％碱性复红酒精溶液10ml、5％石炭酸水溶液90ml，二液混合即成。 （2）盐酸酒精溶液浓盐酸3ml、95％酒精溶液97ml，二液混合即成。

5．瑞氏染色液瑞氏染料粉0.1g、纯甘油1.0ml、中性甲醇60ml。置染料粉于乳钵中，加入甘油，充分研磨，再徐徐加入甲醇，边研磨边搅拌，促其溶解，然后盛于棕色瓶中，置暗处过夜，次日以滤纸滤过后，仍盛于棕色瓶中，保存于暗处备用。 磷酸盐缓冲液： 溶液一：Na2HPO4.12H2O（磷酸二氢钠）23.864g、蒸馏水1000ml。溶液二：KH2PO4（磷酸二氢钾）9.078g、蒸馏水1000ml。 用时以溶液一4份与溶液二1份混合即成。 6．姬姆萨氏染色液取姬姆萨氏染料粉0.6g，加入甘油50ml，置于55—60度温度中1.5—2h，再加入甲醇50ml，静置一日以上，滤过后即可作染料原液用。 或者取姬姆萨氏染料粉0.75g、纯甲醇65ml、纯甘油35ml，盛于有玻璃珠的玻璃瓶内，充分摇匀；滤过后，贮存于有色玻璃瓶中，盖紧，备作原液用。 7．乳酸石炭酸液石炭酸20g、乳酸20ml、甘油40ml、蒸馏水20ml。按量将上述各成分依次放入玻璃瓶内，于水浴中加热溶解。 8．乳酸石炭酸棉蓝染色液在乳酸石炭酸溶液中加入棉蓝0.05％混合即成。 9．纽曼氏染色液美蓝粉1.12g、乙醇54ml、四氯乙烷40ml、冰醋酸6ml。 将乙醇及四氯乙烷先混合于一大玻璃瓶内（注意温度不可高于70度），加入美蓝，并充分溶化，再徐徐加入冰醋酸，滤过，保存备用。10．方吞那氏染色液 （1）媒染料鞣酸5g 石炭酸1g 蒸馏水100ml。 （2）染色液浓硝酸盐5g于蒸馏水100ml中，取出3—5ml，徐徐滴入浓氨水，至其生成黑色沉淀摇匀后又消失为止，再徐徐滴入5％硝酸盐溶液，至液体略呈混浊振后仍不消失为度。

苏木精、苏木素染色液溶液配制方法

华越洋苏木素(苏木精) 染色液的配制 各类溶液的配制方法如下： 华越洋苏木素染色液：500ml 1) Harry`s苏木素苏木素 1g 无水酒精 10ml 硫酸铝钾 20g蒸馏水 200ml氧化汞 0.5g冰醋酸 8ml分别用无水酒精溶解苏木素，蒸馏水加热溶解硫酸铝钾，然后两液混合并煮沸，加入氧化汞，继续加热和搅拌至溶液为深紫色，立即冷却，恢复至室温后过滤备用。 (2) 改良Lillie-Mayer`s苏木素苏木素 2.5g无水酒精 20ml硫酸铝钾 5g蒸 馏水330ml碘酸钠250mg甘油150ml冰醋酸 10ml 分别用无水酒精溶解苏木素，蒸馏水溶解硫酸铝钾，然后两液混合后，依次加入碘酸钠、甘油和冰醋酸。 (3) Mayer`s苏木素苏木素100mg 蒸馏水100ml碘酸钠 20mg硫酸铝铵 5g柠檬酸100ml水合氯醛 5g 用蒸馏水溶解苏木素后，依次加入碘酸钠、硫酸铝铵和水合氯醛，过滤后备 （4）Ehrlich氏苏木素（1886） 苏木素 1g 无水酒精 50ml 甘油50ml 硫酸铝钾 7.5g 蒸馏水 50ml 冰醋酸 5ml 将苏木素溶于无水酒精里，硫酸铝钾溶于蒸馏水中，然后所有的试剂都加在一起，充分搅拌均匀后，放于窗台上阳光充足的地，让其慢慢氧化成熟，大约需四个星期，才可使用。该液量种很好的细胞核染色液，用它染后，细胞核染色清晰，不易过染。对于用酸脱钙组织细胞核的染色，该试剂优于其它各种苏木素。这种自然氧化成熟的苏木素，可长期使用，不会变质。但染色时间较长，需要20分钟以上。 如需急用而苏木素又未成熟时，该液可加入20-30mg的碘酸钠，以促使其迅速氧化成熟，但这试剂配成后，就不是原来的苏木素，不能长期使用，但起码可用半年左右。 （5）Weigert氏铁苏木素 A液：苏木素 1g 无水酒精100ml 将苏木素溶于酒精，让其慢慢氧化成熟，约四周以后，便可以使用，或者用成熟的10%

染色液的配制

染色液的配制 一、吕氏(Loeffler)碱性美蓝染液 A液：美蓝(methylene blue) 0．6g 95%酒精 30ml B液：KOH 0．01g 蒸馏水 100ml 分别配制A液和B液，配好后混合即可。 二、齐氏(Ziehl)石炭酸复红染色液 A液：碱性复红(basic fuchsin) 0．3g 95%酒精 10ml B液：石炭酸 5．0g 蒸馏水 95ml 将碱性复红在研钵中研磨后，逐渐加入95%酒精，继续研磨使其溶解，配成A 液。 将石炭酸溶解于水中，配成B液。 混合A液及B液即成。通常可将此混合液稀释5—10倍使用，稀释液易变质失效，一次不宜多配。 三、革兰氏(Gram)染色液 1．草酸铵结晶紫染液 A液：结晶紫(crystal violet) 2g 95%酒精 20ml B液：草酸铵(ammonium oxalate) 0．8g 蒸馏水 80ml 混合A、B二液，静置48小时后使用。 2．卢戈氏(Lugol)碘液

碘片 1．0g 碘化钾 2．0g 蒸馏水 300ml 先将碘化钾溶解在少量水中，再将碘片溶解在碘化钾溶液中，待碘全溶后，加足水分即成。 3．95%的酒精溶液。 4．番红复染液 番红(safranine O) 2．5g 95%酒精 100ml 取上述配好的番红酒精溶液10ml与80ml蒸馏水混匀即成。 四、芽孢染色液 1．孔雀绿染液 孔雀绿(malachite green) 5g 蒸馏水 100ml 2．番红水溶液 番红 0．5g 蒸馏水 100ml 3．苯酚品红溶液 碱性品红 11g 无水酒精 100ml 制法取上述溶液10ml与100ml5%的苯酚溶液混合，过滤备用。 4．黑色素(nigrosin)溶液 水溶性黑色素 10g 蒸馏水 100ml 称取10g黑色素溶于100ml蒸馏水中，置沸水浴中30分钟后，滤纸过滤

配制溶液的一般实验步骤

配制溶液的一般实验步骤 配制溶液步骤因配置的溶液不同而有所不同，现举两个例子： 举例1：配置0.05mol/L，400mL NaOH溶液的步骤： 要准确配置氢氧化钠的浓度，则要用容量瓶定容，实验室没有400毫升的容量瓶，则选用500毫升的容量瓶。 1.计算需要氢氧化钠的质量： 0.5L*0.05mol/L*40.01=1.000克 2.称1.000克氢氧化钠于烧杯中，加少量水溶解，然后倒入500毫升容量瓶里，分3次洗烧杯，将溶液全部倒入容量瓶里，最后用水稀释至刻度线，摇匀，即，得到0.05mol/L的氢氧化钠溶液。 如果不需要很准确的话，可以直接用量筒量400毫升，称的时候只要称0.8克就可以了。举例2：配置1.5mol/L的稀硫酸200mL步骤： 第1步：计算：根据C1V1=C2V2，计算需要浓硫酸的体积；第2步：量取，利用刻度吸管吸取需要浓硫酸的体积； 第3步：稀释，将浓硫酸转移到小烧杯中，加少量水稀释；第4步：转移,待溶液温度降低后，将烧杯中的硫酸转移到200mL容量瓶中； 第5步：洗涤，洗涤小烧杯，和转移的时候用到的玻璃棒，

至少三次，将洗涤的水一并转移到容量瓶中； 第6步：定容，加水定容到刻度线，在距离刻度线一厘米左右改用胶头滴管定容； 第7步：摇匀,将溶液摇匀,如果液面下降也不可再加水定容；第8步：将配得的溶液转移至试剂瓶中，贴好标签；举例3：配制500mL，0.1mol/L碳酸钠溶液步骤及注意事项所需的仪器：烧杯、容量瓶、玻璃棒、胶头滴管、分析天平、药匙、量筒步骤：第一步：计算：所需碳酸钠的质量 =0.5*0.1*106=5.3克；第二步：称量：在天平上称量5.3克碳酸钠固体，并将它倒入小烧杯中；第三步：溶解：在盛有碳酸钠固体的小烧杯中加入适量蒸馏水，用玻璃棒搅拌，使其溶解；第四步：移液：将溶液沿玻璃棒注入500mL容量瓶中；第五步：洗涤：用蒸馏水洗烧杯2～3次，并倒入容量瓶中；第六步：定容：倒水至刻度线1～2cm处改用胶头滴管滴到与凹液面平直；第七步：摇匀：盖好瓶塞，上下颠倒、摇匀；第八步：装瓶、贴签；误差分析：固体药品的称量与液体药品的量取是否准确；把溶液向容量瓶中转移，溶液洒了；未洗涤烧杯和玻璃棒；用待配液润洗了容量瓶；定容时水加多了或加少了；定容时未平视刻度线。仰视、俯视对溶液浓度有何影响？★俯视刻度线，实际加水量未到刻度线，使溶液的物质的量浓度增大；★仰视刻度线，实际加水量超过刻度线，使溶液的物质的量浓度

标准溶液配制方法

中华人民共和国国家标准 UDC 543.06:54 —41 GB 601—88 化学试剂 滴定分析（容量分析）用标准溶液的制备 Chemical reagent Preparations of standard volumetrie solutions 1主题内容与适用范围 本标准规定了滴定分析（容量分析）用标准溶液的配制和标定方法。 本标准适用于制备准确浓度之溶液，应用于滴定法测定化学试剂的主体含量及杂质含量，也可供其他的化学产品标准选用。 2引用标准 GB 603 化学试剂试验方法中所用制剂及制品的制备 GB 6682 实验室用水规格 GB 9725 化学试剂电位滴定法通则 3一般规定 本标准中所用的水，在没有注明其他要求时，应符合GB6682中三级水的标准。 本标准中所用试剂的纯度应在分析纯以上。 工作中所用的分析天平的砝码、滴定管、容量瓶及移液管均需定期校正。 本标准中标定时所用的基准试剂为容量分析工作基准试剂；制备标准溶液是所用的试剂为分析纯以上试剂。 本标准中所制备的标准溶液的浓度均指20c时的浓度。在标定和使用时，如温度有差异，应只能附录A（补充件）补正。 “标定”或“比较”标准溶液浓度时，平行试验不得少于8次，两人各作4平行，每人4平行测定结果的极差与平均值之比不得大于0.1%。两人测定结果的差值与平均值之比不得大于0.1%，最终取两人测定结果的平均值。浓度值取四位有效数字。 本标准中凡规定用“标定”和“比较”两种方法测定浓度时，不得略去其中的任何一种，且两种方法测得的浓度值之差值与平均值之比不得大于0.2%，最终以标定结果为准。 制备的标准溶液与规定浓度之差不得超出规定浓度的+—5%。。 配制浓度等于或低于0.02mol/L 标准溶液时乙二胺四乙酸二钠标准滴定溶液除外，应于临用前将浓度高的标准溶液用煮沸并冷却的水稀释，必要时重新标定。 碘量法反应时，溶液的温度不能过高，一般在15~20c之间进行滴定。 滴定分析（容量分析）用标准溶液在常温（15~25）下，保存时间一般不得超过两个月。4标准溶液的制备和标定 4.1 氢氧化钠标准溶液 c(NaOH) = 1 mol/L (1N)

瑞氏染液配制、使用方法及注意事项

瑞氏染液配制、使用方法及注意事项 南宁市二医院检验科马升俊 1.瑞氏染色的原理： 瑞氏染色法使细胞着色既有化学亲和反应，又有物理吸附作用。瑞氏染料由酸性染料伊红和碱性染料美蓝的氧化物（天青）组成,其深于甲醇后,解离为带正电的美蓝和带负电的伊红离子。各种细胞由于其所含化学成分不同，对染料的亲和力也不一样，因此，染色后各种细胞呈现出各自的染色特点。 2.试剂的配制： 2.1 瑞氏染液的配制： 2.1.1 自配染液:瑞氏染粉0.1g，甲醇（AR）60ml。 将瑞氏染粉放入清洁干燥研钵中，先加少量甲醇，充分研磨使染料溶解，将巳溶解的染料倒入棕色试剂瓶中，未溶解的再加少量甲醇研磨，直至染料完全溶解，甲醇全部用完为止。染液配好后放于室温下，一周后即可使用。新配制染液效果较差，放置时间延长，染色效果越好。久置应密封，以免甲醇挥发或氧化成甲酸。染液中也可加中性甘油2～3ml，除可防止甲醇过早挥发外，也可使细胞着色清晰。 2.1.2 成品瑞氏染液: 现巳有成品瑞氏染液，如四川迈克科技公司出的快速瑞氏染色试剂（500ml/瓶）其只需室温密闭储存，可长期稳定，染色效果好。2.2 缓冲液的配制: 称取磷酸二氢钾（无水）0.3 g，磷酸氢二钠（无水）0.2 g；加蒸馏水至1000 ml使其溶解。配好后磷酸盐缓冲溶液应校正PH值，其范围在PH6.4～6.8即可，后塞紧瓶口备用。 3. 瑞氏染色的使用方法： （以血涂片为例）： 3.1把制好的血涂片编好号，然后将血片平放在染色架上； 3.2加瑞氏染液数滴，使其覆盖整个血膜，固定细胞约1分钟； 3.3滴加等量或稍多的缓冲液（可按1：2滴加），使染液充分混匀，染色5～10分钟；

常用染色液的配制

常用染色液的配制 1.吕氏(Loefflev)美蓝染色液 A液:2%美蓝(Methylene blue)95%酒精溶液 B液:10%KOH溶液 取A液30ml、B液0.1ml与100ml蒸馏水混合。 2.石炭酸复红染色液 A液:4%碱性复红(basic fuchsin)95%酒精溶液 将碱性复红在研钵中研磨后,逐渐加入95%酒精,继续研磨使其溶解、 配成A液。 B液:5%石炭酸溶液 取A液10ml、B液90ml混合即可。一般可将此溶液稀释5-10倍使用。但稀释液易变质失效,一次不宜多配。 3.革兰氏(gram)染色液 (1)草酸铵结晶紫染液: A液:1%结晶紫(Crystal violet)95%酒精溶液 B液:1%草酸铵(Ammonium oxalate)溶液 取A液20mlB液80ml,静置48/小时后使用。

(2)路哥氏(Lugol)碘液: 碘片1.0g、碘化钾2.0g、蒸馏水300ml 先将碘化钾溶解在少量水中,再将碘片溶解在碘化钾溶液另,待碘全部溶解后,加够水即成。 (3)95%酒精溶液 (4)蕃红(沙黄)复染液: 2.5%蕃红(Safranlne O)95%酒精溶液。 取此液10ml与90ml蒸馏水混匀即成。 4.芽孢染色液 (1)5%孔雀绿(Malachite green)溶液。 (2)0.5%蕃红溶液。 (3)苯酚品红溶液 称取11g碱性品红溶于100ml无水酒精中。 再取上述溶液10ml与100ml 5%的苯酚溶液混合,过滤备用。 (4)黑色素(nigrosin)溶液 10%黑色素溶液,置沸水浴中30min后,滤纸过滤二次,补加水到100ml, 然后加入40%甲醛0.5%(v/v)作防腐剂。

常用染色液配制

A液：结晶紫2.5g，95%乙醇25mL。 B液：草酸铵1.0g，蒸馏水1000mL。 制备时，将结晶紫研细，加入95%乙醇溶解，配成A液。将草酸铵溶于蒸馏水，配成B液。两液混合静止48h后，过滤后使用。 2．鲁格尔氏（路戈氏）碘液 碘1.0g，KI 2.0g，蒸馏水300mL。先用3~5 mL蒸馏水溶解KI，再加入碘片，稍加热溶解，加足水过滤后使用。 3．脱色液：95%乙醇；或丙酮乙醇溶液：95％乙醇70mL，丙酮30mL 4．沙黄（番红）染色液 2.5％沙黄（番红）乙醇溶液：沙黄（番红）2.5g，95%乙醇100mL。 此母液存放于不透气的棕色瓶中，使用时取20mL母液加80mL蒸馏水使用。 5．0.1％美兰染色液 0.1g溶解于100mL蒸馏水中。 6．吕氏碱性美蓝色染色液 A液：美蓝0.3g，95%乙醇30mL。 B液：KOH 0.01g，蒸馏水100mL，分别配制A液和B液，混合即可。 7．瑞氏染色液 瑞氏染料粉未0.3g,甘油3mL，甲醇97mL。将染料放乳钵内研磨，先加甘油，后加甲醇，过夜后过滤即可。 8．5％孔雀绿水溶液（芽孢染色用） 孔雀绿5.0g,蒸馏水100mL。先将孔雀绿放乳钵内研磨，加少许95％乙醇溶解，再加蒸馏水。 9．黑色素水溶液（荚膜负染色用） 黑色素10g，蒸馏水100mL，40％甲醛（福尔马林）0.5mL。将黑色素溶于蒸馏水中，煮沸5min，再加福尔马林作防腐剂，用玻璃棉过滤。

A液：单宁酸5.0g，FeCL3 1.5g，福尔马林(15%) 2.0mL，1%NaOH 1.0mL，蒸馏水100mL。 B液：AgNO3 2.0g,蒸馏水100mL。 将AgNO3溶解后，取出10mL备用，向其它的90mL硝酸银液中加浓氢氧化铵，则形成很厚的沉淀，再继续滴加氢氧化铵到刚刚溶解沉淀成为澄清溶液为之。再将备用的硝酸银慢慢滴入，则出现薄雾，但轻轻摇动后，薄雾状的沉淀又消失，再滴入硝酸银，直到摇动后，仍呈现轻微而稳定的薄雾状沉淀为之。如雾重，则银盐沉淀出，不宜使用。 11．改良利夫森（Leifson’s）鞭毛染色液 A：20％单宁（鞣酸）2.0mL；B：饱和钾明矾液(20%) 2.0mL；C：5％石炭酸2.0mL；D：碱性复红酒精（95％）饱和液1.5mL。 将以上各液于染色前1~3d，按B加到A中，C加到A、B混合液中，D加到A、B、C混合液中的顺序，混合均匀，马上过滤15~20次，2~3d内使用效果较好。 12．石炭酸复红染色液 A液:碱性复红0.3g，95%乙醇10mL；B液：石炭酸（苯酚）5g，蒸馏水95mL。 先将染料溶解于乙醇，将苯酚溶于水，AB两液混合即可。 13．乳酸石炭酸棉蓝染色液 石炭酸（苯酚）10g，乳酸（比重1.21）10mL，甘油20mL，棉蓝（苯胺蓝）0.21g，蒸馏水10mL。 将石炭酸加入蒸馏水中，加热溶解，再加入乳酸和甘油，最后加棉蓝。 附录Ⅴ：常用缓冲液的配制 1．pH7.0磷酸盐缓冲液（PBS）（20℃ pH值7.0~7.1） 甲液：KH2PO4 34.0g，蒸馏水1000mL；乙液：K2HPO4 43.6g，蒸馏水1000mL。 甲液二份和乙液三份混合即可。 2．0.2mol/l醋酸缓冲液（pH7.0） 甲液：醋酸34.0mL，蒸馏水1000mL；乙液：醋酸钠43.6g，蒸馏水1000mL。

实验用染色液的配制

实验用染色液的配制 1．黑色素液水溶性黑素10g，蒸馏水100mL, 甲醛（福尔马林）0.5mL。可用作荚膜的背景染色。 2．墨汁染色液国产绘图墨汁40mL，甘油2mL，液体石炭酸2mL。先将墨汁用多层纱布过滤，加甘油混匀后，水浴加热，再加石炭酸搅匀，冷却后备用。用作荚膜的背景染色。 3．吕氏(Loeffier)美蓝染色液 A液：美蓝(methylene blue, 又名甲烯蓝)0.3g, 95%乙醇30mL; B液：0.0l% KOH l00mL。 混合A液和B液即成，用于细菌单染色，可长期保存。根据需要可配制成稀释美蓝液，按1：10或1：100稀释均可。 4．革兰氏染色液 (1)结晶紫(crystal violet)液：结晶紫乙醇饱和液(结晶紫2g溶于20mL95%乙醇中)20mL，1%草酸铵水溶液80mL 将两液混匀置24h后过滤即成。此液不易保存，如有沉淀出现，需重新配制。 (2)卢戈(Lugol)氏碘液：碘1g，碘化钾2g，蒸馏水300mL。先将碘化钾溶于少量蒸馏水中，然后加入碘使之完全溶解，再加蒸馏水至300mL即成。配成后贮于棕色瓶内备用，如变为浅黄色即不能使用。 (3)95%乙醇：用于脱色，脱色后可选用以下(4)或(5)的其中一项复染即可。 (4)稀释石炭酸复红溶液：碱性复红乙醇饱和液(碱性复红1g, 95%乙醇l0mL, 5%石炭酸 90mL混合溶解即成碱性复红乙醇饱和液)，取石炭酸复红饱和液l0mL加蒸馏水90mL即成。

(5)番红溶液：番红O(safranine，又称沙黄O)2.5g, 95%乙醇100mL，溶解后可贮存于密闭的棕色瓶中，用时取20mL与80mL蒸馏水混匀即可。 以上染液配合使用，可区分出革兰氏染色阳性(G+)或阴性(G-)细菌，G-被染成蓝紫色，G+被染成淡红色 5. 鞭毛染色液 A液：丹宁酸5.0g, FeCl3 1.5g，15%甲醛(福尔马林)2.0mL，l%NaOH 1.0mL，蒸馏水l00mL; B液：AgNO3 2.0g, 蒸馏水100mL。 待AgNO3溶解后，取出l0mL备用，向其余的90mLAgNO3中滴加NH4OH，即可形成很厚的沉淀，继续滴加NH4OH至沉淀刚刚溶解成为澄清溶液为止，再将备用的AgNO3慢慢滴入，则溶液出现薄雾，但轻轻摇动后，薄雾状的沉淀又消失，继续滴入AgNO3，直到摇动后仍呈现轻微而稳定的薄雾状沉淀为止，如雾重，说明银盐沉淀出，不宜再用。通常在配制当天便用，次日效果欠佳，第3天则不能使用。 6. 0.5%沙黄(Safranine)液：2.5%沙黄乙醇液20mL，蒸馏水80mL。将2.5%沙黄乙醇液作为母液保存于不透气的棕色瓶中，使用时再稀释。 7. 5%孔雀绿水溶液：孔雀绿5.0g，蒸馏水100mL。 8. 0.05%碱性复红：碱性复红0.05g，95%乙醇100mL。 9．齐氏(Ziehl)石炭酸复红液：碱性复红0.3g溶于95%乙醇l0mL中为A液：0.01%KOH 溶液l00mL为B液。混合A、B液即成。 10．姬姆萨(Giemsa)染液 (1)贮存液：称取姬姆萨粉0.5g，甘油33mL，甲醇33mL。先将姬姆萨粉研细，再逐滴加入甘油，继续研磨，最后加入甲醇，在56℃放置1～24h后即可使用。

染色液的配制

染色液得配制 一、吕氏(Loeffler)碱性美蓝染液 A液:美蓝(methylene blue) 0.6g 95%酒精 30ml B液:KOH 0.01g 蒸馏水 100ml 分别配制A液与B液,配好后混合即可。 二、齐氏(Ziehl)石炭酸复红染色液 A液:碱性复红(basic fuchsin) 0.3g 95%酒精 10ml B液:石炭酸 5.0g 蒸馏水 95ml 将碱性复红在研钵中研磨后,逐渐加入95%酒精,继续研磨使其溶解,配成A液。 将石炭酸溶解于水中,配成B液。 混合A液及B液即成。通常可将此混合液稀释5—10倍使用,稀释液易变质失效,一次不宜多配。 三、革兰氏(Gram)染色液 1.草酸铵结晶紫染液 A液:结晶紫(crystal violet) 2g 95%酒精 20ml B液:草酸铵(ammonium oxalate) 0.8g 蒸馏水 80ml 混合A、B二液,静置48小时后使用。 2.卢戈氏(Lugol)碘液 碘片 1.0g

碘化钾 2.0g 蒸馏水 300ml 先将碘化钾溶解在少量水中,再将碘片溶解在碘化钾溶液中,待碘全溶后,加足水分即成。 3.95%得酒精溶液。 4.番红复染液 番红(safranine O) 2.5g 95%酒精 100ml 取上述配好得番红酒精溶液10ml与80ml蒸馏水混匀即成。 四、芽孢染色液 1.孔雀绿染液 孔雀绿(malachite green) 5g 蒸馏水 100ml 2.番红水溶液 番红 0.5g 蒸馏水 100ml 3.苯酚品红溶液 碱性品红 11g 无水酒精 100ml 制法取上述溶液10ml与100ml5%得苯酚溶液混合,过滤备用。 4.黑色素(nigrosin)溶液 水溶性黑色素 10g 蒸馏水 100ml 称取10g黑色素溶于100ml蒸馏水中,置沸水浴中30分钟后,滤纸过滤 二次,补加水到100ml,加0.5ml甲醛,备用。

常用染色液的配制

一、常用染色液的配制 ⒈碘-碘化钾（I2-KI）溶液能将淀粉染成蓝紫色，蛋白质染成黄色，也是植物组织化学测定的重要试剂。 配方：碘化钾2g ；蒸馏水300ml ；碘1g 先将碘化钾溶于少量蒸馏水中，待全溶解后再加碘，振荡溶解后稀释至300mL，保存在棕色玻璃瓶内。用时可将其稀释2-10倍，这样染色不致过深，效果更佳。 ⒉苏丹Ⅲ（sudanⅢ或Ⅳ）能使木栓化、角质化的细胞壁及脂肪、挥发油、树脂等染成红色或淡红色，是著名的脂肪染色剂。 配方：（1）苏丹III或苏丹Ⅳ干粉；95％酒精10ml ；过滤后再加入10ml甘油 （2）先将苏丹III或IV溶解在50ml丙酮中，再加入70%酒精50ml。 （3）苏丹III 70%乙醇的饱和溶液。 ⒊1％醋酸洋红（aceto carmine）酸性染料，适用于压碎涂抹制片，能使染色体染成深红色，细胞质成浅红色。 配方：洋红1g ；45％醋酸100ml 煮沸2h左右，并随时注意补充加入蒸馏水到原含量，然后冷却过滤，加入4％铁明矾溶液1～2滴（不能多加，否则会发生沉淀），放入棕色瓶中备用。 ⒋改良苯芬品红染色液（Carbol fuchsine）核染色剂。 配制步骤：先配成三种原液，再配成染色液。 原液A：3g碱性品红溶于100ml 70％酒精中。 原液B：取原液A10ml加入到90ml 5％石炭酸水溶液中。 原液C：取原液B 55ml，加入6ml冰醋酸和6ml福尔马林（38％的甲醛）。 （原液A和原液C可长期保存，原液B限两周内使用） 染色液：取C液10～20ml，加45％冰醋酸80～90ml，再加山梨醇1~，配成10％～20％浓度的石炭酸品红液，放置两周后使用，效果显著（若立即用，则着色能力差）。 适用范围：适用于植物组织压片法和涂片法，染色体着色深，保存性好，使用2～3年不变质。山梨醇为助渗剂，兼有稳定染色液的作用，假如没有山梨醇也能染色，但效果较差。 ⒌中性红（neutral red）溶液用于染细胞中的液泡，可鉴定细胞死活。 配方：中性红；蒸馏水100ml 使用时再稀释10倍左右。 ⒍曙红Y（伊红，eosin Y）酒精溶液常与苏木精对染，能使细胞质染成浅红色，起衬染