动物细胞转染基础知识大全

转染

转染(transfection)指真核细胞由于外源DNA掺入而获得新的遗传标志的过程。

转染方法的分类

对外源基因转染方法的要求包括：转移效率高，不影响细胞正常生理活动，低毒性，容易使用，重复性好，易获得稳定转化子.

根据转染的机制不同可划分为化学转染法和物理转染法两大类.

一、化学转染法

1.DEAE-葡聚糖法

DEAE葡聚是最早应用哺乳动物细胞转染试剂之一，DEAE-葡聚糖是阳离子多聚物，它与带负电的核酸结合后接近细胞膜而被摄取，用DEAE-葡聚糖转染成功地用用于瞬时表达的研究，但用于稳定转染却不是十分可靠。

2.磷酸钙法

磷酸钙法是磷酸钙共沉淀转染法，因为试剂易取得，价格便宜而被广泛用于瞬时转染和稳定转染的研究，先将DNA 和氯化钙混合，然后加入到PBS中慢慢形成DNA磷酸钙沉淀，最后把含有沉淀的混悬液加到培养的细胞上，通过细胞

胞膜的内吞作用摄入DNA。磷酸钙似乎还通过抑制血清中和细胞内的核酸酶活性而保护外源DNA 免受降解.

3.人工脂质体法

人工脂质体法采用阳离子脂质体，具有较高的转染效率，不但可以转染其他化学方法不易转染的细胞系，而且还能转染从寡核苷酸到人工酵母染色体不同长度的DNA，以及RNA和蛋白质。此外，脂质体体外转染同时适用于瞬时表达和稳定表达，与以往不同的是脂质体还可以介导DNA 和RNA 转入动物和人的体内用于基因治疗。人工合成的阳离子脂质体和带负电荷的核酸结合后形成复合物，当复合物接近细胞膜时被内吞成为内体进入细胞质，随后DNA 复合物被释放进入细胞核内，至于DNA 是如何穿过核膜的，其机理目前还不十分清楚。

二、物理方法

1.显微注射显微注射虽然费力，但是非常有效的将核酸导入细胞或细胞核的方法。

2.电穿孔

这种方法常用来制备转基因动物，但却不适用于需要大量转染细胞的研究。电穿孔法常用来转染如植物园生智体这样的常规方法不容易转染的细胞。电穿孔靠脉冲电流在细胞膜上打孔而将核酸导入细胞内。导入的效率与脉冲的强度和持续时间有关系。

3.基因枪法

基因枪依靠携带了核酸的高速粒子而将核酸导入细胞内，这种方法适用于培养的细胞核在体内的细胞。

如何提高转染实验成功率

【组织培养试剂】

一般提示：优化您的细胞生长条件。只使用新鲜配制的培养基和添加剂，并经可能减少所用试剂的变更。

基础培养基—目前所使用的各种市售培养基（如，RPMI 1640和DMEM）。培养基的成分包括营养物质（氨基酸，葡萄糖），维生素，无机盐和缓冲物质。有些成分非常不稳定，因此如果不在使用时新鲜加入就可能会产生问题。务必要使培养基避光保存。因为已知有一些组分和缓冲物质，如HEPES，当暴露于光照下就会分解产生细胞毒性物质。

酚红试剂可保护细胞免受一些HEPES降解所产生的毒性效应，但在使用未加酚红试剂的培养基的应用场合下，如荧光素酶的测定，细胞毒性则仍然是一个问题。

胎牛血清—血清是一种含有白蛋白、球蛋白、生长促进因子和生长抑制因子的极为复杂的混和物。采集血清所用动物的年龄、营养水平、和健康状况可影响到血清中这些成分的数量和质量。因此血清易受显著生物学变异的影响。

添加剂—某些细胞的生长依赖于一些对生命力或细胞分裂必不可少的物质（如，生长因子，微量元素，必需代谢物和蛋白等）。

CO2培养箱—细胞生长所需环境为37℃、相对湿度为95％的CO2培养箱。用CO2是为了控制pH值。细胞生理对pH的变化非常敏感，因此多数细胞培养基都含有碳酸氢盐缓冲体系。有些培养基需要CO2浓度为5％来有效控制pH 值，而另一些则需要10％的CO2。需要向您的培养基供应者核对一下适当的CO2浓度。如果培养箱内培养条件与所需条件不一致（温度、湿度和CO2）则会导致实验结果的板间变异性。来自于培养箱内的污染物、化学物质，或真菌／细胞的污染也都可能影响到细胞生理。

【细胞】

一般提示：密切观察您的细胞；确保它们状态良好。在开始转染细胞之前，先制定一个适当的种板方案，使细胞密度从转染开始到结束都保持最佳状态。

增加成功几率—细胞是转染过程中的一个关键元素，它可以是影响结果的一致性和质量的最重要的变量。

分裂细胞相比较非分裂细胞—分裂细胞往往要比静止细胞更易于摄取并表达外源DNA。因此对大多数转染操作而言，细胞都在转染当天或前一天种板。同样重要的是细胞

在种板进行转染时不应处于生长过度的状态。由于FuGENE? 6和HD转染试剂对于细胞作用温和，可同时进行贴壁细胞的种板和转染。此外，还常用促有丝分裂刺激物（如，病毒转化，生长因子，条件培养基，以及滋养细胞）来活化原代培养细胞。

贴壁细胞相比较悬浮细胞—在转染效率方面贴壁细胞和悬浮细胞之间的差异显著。天生趋于悬浮的细胞（如HL 60，Jurkat）非常难以转染；相反，天生为贴壁的细胞（如HEK，CHO）则可适应悬浮生长的条件。那些天然悬浮的和那些适应悬浮的细胞的浆膜是不一样的。据推测转染过程中的一个限制步骤就是通过内吞作用摄取转染分子（DNA 或RNA与转染试剂的复合物）；然而，目前对此尚未有分子水平上的合理机制的解释。细胞间膜结构的差异可能是某些细胞类型天生难以转染的部分原因。所以，寻找更有效转染试剂的工作目前还主要是经验性的，尤其对于那些天生为悬浮的细胞而言更是如此。这常常是在不含血清而含有抑制转染的特殊添加剂的培养基中发生。经小心处理后，这些细胞可适应于在没有添加剂的环境中悬浮生长。如果这些适应于悬浮生长的贴壁细胞在没有这些添加剂的环境中生长，那么它们就可以被转染。

分批方案—在对培养细胞进行分批传代培养之前，必须把贴壁细胞用胰蛋白酶消化使之脱离培养基质。这个常规操

作可导致正常细胞功能受到严重损害。因此分批方案的不同（如，胰蛋白酶消化时间的延长，胰蛋白酶的失活，以及消化后直到转染开始的时间）都可能对转染实验有所影响。如果在转染时细胞过于密集，那么种到培养板上的就会是细胞团块而非单个细胞。对于某些细胞／试剂组合而言，浆膜状态被改变后有可能会影响到所用试剂和DNA的最佳配用量和配比。

传代次数—传代次数是指对一个细胞系进行分批传代的频度（通常在一个实验室范围内）。在某些情况下，自建立细胞系起的确切传代次数无法得知。某些细胞系相比较其他细胞系而言较不稳定，可能会随着培养时间的延长而改变，视不同的细胞系和培养条件而定。培养条件的不同可引起克隆选择。因此名称相同的同一细胞系有关其生理学和形态学（以及转染能力）性质可能会有很大的差异。一般而言，细胞在冻存复苏后的一两代之内或直到它们完全复苏之前都很难转染。在不同细胞系之间转染效率的变化很大。某些细胞系在传代很大次后仍能保持稳定的转染效率，而其他一些则传代很少次数就表现出转染效率的差异。

细胞数量（汇聚度）—只要培养基质（组织培养皿）尚有空间，细胞就会按指数规律分裂。对于正常细胞而言，细胞生长的速度受细胞密度大小的抑制（接触抑制），但癌细胞则不受此限制而会继续生长并可互相叠加。营养物质的耗

竭以及代谢废物的积聚会影响所有的细胞生长。细胞会因受到营养物质匮乏的压力而不适于转染。报告基因的表达率与转染开始时的细胞数量和细胞健康以及它们随后直到细胞溶解之前的生长情况相关。

培养物污染—培养物可被细菌、酵母、真菌、病毒、支原体、甚至其他细胞种类所污染。各种污染都会导致产生错误的结果。

支原体污染—支原体污染在所有培养细胞中的比例为5-35％，它可改变细胞生长特性，酶的作用途径，细胞膜的组成，染色体结构，以及转染效率。特别是，支原体对采用脂质、DEAE-右旋糖酐、磷酸钙或腺病毒介导的转染技术有所干扰，其结果致使转染效率偏低或非典型。这些效应会导致实验结果的不可靠以及时间和珍贵细胞系的损失。和细菌及真菌不同，支原体污染无法通过视觉检查发现。它们非常小甚至能够通过大多数的无菌滤膜；它们还对常用抗生素有抗药性。所以必需进行支原体污染的常规筛查。

交叉污染—如果同一个实验室同时培养不同种类的细胞，那就有可能发生交叉污染，即使遵循最严格的分离操作规程这种情况也有可能发生。和其他细胞系之间的交叉污染不总是能通过镜检发现。如果有少量某种生长快速的细胞掺入到培养细胞种，几个月过后它们就会完全取代目标培养物。这种变化是逐渐发生的；而您可能甚至还未发现。建立

细胞系鉴定的检测标准。例如，对于人类细胞系而言，STR （短串联重复序列）图谱就是一种可靠的鉴定方法。或者更简单的解决方案就是，当怀疑有交叉污染时，如果有可能，就换用新鲜的，传代次数少的细胞源。

【载体DNA】

一般提示：对您纯化所得的载体进行质量检查。确定支持其正常功能的基因序列是否适合于您的细胞体系。在对您细胞体系的参数进行测定时，一定要选用一种您已知具有功能的对照载体。

载体的完整性—种载体是否具有功能取决于它结构的完整性。转染效率受到质粒制备物的超螺旋结构和舒展结构之间比例、双螺旋中断、核酸酶的降解，以及来自于储存和处理过程中的物理压力的影响。

载体制备物－各种载体是按照不同的方案在细菌体系中制备并纯化。制备产物中残余的污染物（如CsCl，内毒素）可能会影响转染效率。

载体构造（启动子／增强子／ORI）—转染体系通常用带有强病毒调节元件（如，RSV，CMV，和SV40）的对照载体进行优化和比较。然而，病毒启动子／增强子体系的相对有效性在不同细胞系间的差异可大到两个数量级。例如，在某些细胞系中，由于自发的质粒扩增，SV40体系可高效

表达large T抗原（如，COS）；而在其他许多细胞系中，则是CMV启动子更为有效。除此之外，各种CMV载体的表达率也会有超过一个数量级的差异，这部分是由于载体中其他调节元件所引起的。

【转染方案】

一般提示：建立一套适当的转染方案；首先从一种标准方案开始，然后通过改变试剂／DNA的配比和形成复合物的数量进行优化。

转染复合物的制备—诸如转染试剂／DNA配比，离子强度，缓冲液pH值，以及温度等变量都会影响到转染复合物的组成和功能。质粒既可在无菌水又可在TE缓冲液中稀释。如果您要使用一种市售的转染试剂，就应当仔细阅读该试剂所提供的使用说明。需要对试剂提供方给予一定的信赖；除非您有很好的理由支持您做出改变，否则就应当严格按照他们所推荐的转染方案。在不含血清或其他蛋白的培养基中制备转染复合物；如果制备复合物所使用的培养基含有血清，它就会对转染产生抑制。制备转染复合物的最佳孵育时间是一个非常关键的环节，对于不同的转染试剂而言可能差别很大。

转染试剂／DNA配比（负载比）—所有的转染试剂都会在某一个试剂／DNA配比时最为有效。有时候这种最佳

配比的所在范围非常狭窄；而且对于每种实验体系都必须进行优化才能得到最佳配比。为了寻找这种最佳配比往往会花费大量的时间和金钱。除了配比的重要性之外，所加入转染复合物量的多少也非常关键。

形成转染复合物所用的稀释剂—对于多数试剂而言，很关键的一点是要使转染复合物能在普通基础培养基和盐溶液中形成。

复合物数量—对转染细胞所用的转染试剂／DNA复合物的量也应当进行优化。如果用量太少，那么转染DNA的表达就太弱；如果用量太多，则可能由于细胞毒性或其他作用反而降低蛋白的表达。最佳用量通常都必须进行实验来确定。所需要的转染复合物用量与所用细胞的数量相关。转染细胞越少，所需复合物就越少。

转染复合物的加入—有两种替换方法可用来浆转染复合物加入转染细胞：1. 将复合物浓缩液逐滴加入培养基，或者 2. 将转染复合物先用培养基稀释，然后进行培养基更换操作。第一种方法更简便，而第二种方法则更因为避免了试剂在局部浓聚而产生毒性，所以会使结果的一致性更好。

转染培养基—转染过程中所使用的培养基对转染效率可能会有正面或负面的影响。甚至对于基础培养基配方而言也是如此，尤其是在培养基中加入牛血清的情况下。胎牛血清的存在会使多种转染试剂的转染效率降低。某些公司还提

供可与转染试剂配合使用的优化无血清转染培养基。而由罗氏应用科学部所提供的转染试剂则无论是否存在血清都能有效转染。FuGENE? H D是独一无二的能够转染保存在100％血清中肿瘤细胞的转染试剂。如果有抗生素（如，青霉素、链霉素、或两性霉素B）存在的情况下培养细胞，则转染有效性会降低至25％。因此，对于瞬时转染，我们建议使用不加抗生素的培养基。

【时间进度】

一般提示：要确保最终结果的成功；建立一个合适的时间进度进行转染实验以保证您所需要的目标蛋白能得到最佳表达。

转染的开始—在转染前12小时，将细胞分种于培养板中。在转染开始时，培养物应当有约50-80％汇聚，这样就可以使它们在实验结束时达到接近100％的汇聚。如果在转染中去掉血清，细胞可能会暂时停止生长。细胞对转染复合物的摄取通常在0.5-6小时的时间内完成。在这段时间后，就不会再发现转染效率有所增长。

培养基更换—某些转染试剂在摄取阶段之后需要更换培养基。如果转染必须在没有胎牛血清存在的条件下进行，那么这一步骤就必不可少。至于可在血清存在的情况下使用的无毒性转染试剂（如，FuGENE? 6 转染试剂或FuGENE?

HD 转染试剂）时，如果有足够的培养基用于后续表达阶段，就可以省略这一步。如果将转染复合物留在细胞中直到进行检测，那么对有些细胞系而言转染效率会有所提高，而另外一些细胞在转染开始几个小时之后其转染效率就不会再有升高。虽然在转染步骤之后转染试剂／DNA复合物通常不一定要从培养体系中清除，但在此后的长期生长阶段换用新鲜的培养基却是必须的。如果转染细胞需要生长3-7天，换培养基就尤其重要，这样一来就使它们有时间达到最高的蛋白表达量。

时间测定—通常在转染开始后的24-48小时间分析报告基因的表达。在这一时间段内，报告基因产物的浓度逐渐增加；而这种增加取决于增强子的强度、在表达外源蛋白中所涉及的细胞反应，存活细胞的健康状态，以及营养因素等。如果您要收集蛋白进行纯化，在转染后等待3-7天就更为常见了。在收集蛋白时，培养基中加入COMPLETE完全蛋白酶抑制剂（如，目录编号，11697498001；11836145001，可从罗氏应用科学部获得）用来防止蛋白降解是一个很好的措施。

【有血清时的转染】

血清一度曾被认为会降低转染效率，但只要在DNA-阳离子脂质体复合物形成时不含血清，在转染过程中是可以使

用血清的。转染过程在两步中需要使用培养基做为稀释液：在DNA-阳离子脂质体复合物准备过程以及复合物同细胞接触过程。在开始准备DNA和阳离子脂质体试剂稀释液时要使用无血清的培养基，因为血清会影响复合物的形成。但在复合物形成后，在加入细胞中前可以加入血清。阳离子脂质体和DNA的最佳量在使用血清时会有所不同，因此如果你想在转染培养基中加入血清需要对条件进行优化。大部分细胞可以在无血清培养基中几个小时内保持健康。对于对血清缺乏比较敏感的细胞，可以使用OPTI-MEMⅠ培养基，一种营养丰富的无血清培养基，或者在转染培养基中使用血清。对于对血清缺乏比较敏感的贴壁细胞，建议使用LIPOFECTAMINE 2000。

【培养基中的抗生素】

抗生素，比如青霉素和链霉素，是影响转染的培养基添加物。这些抗生素一般对于真核细胞无毒，但阳离子脂质体试剂增加了细胞的通透性，使抗生素可以进入细胞。这降低了细胞的活性，导致转染效率低。所以，在转染培养基中不能使用抗生素，甚至在准备转染前进行细胞铺板时也要避免使用抗生素。这样，在转染前也不必润洗细胞。对于稳定转染，不要在选择性培养基中使用青霉素和链霉素，因为这些抗生素是GENETICIN选择性抗生素的竞争性抑制剂。另

外，为了保证无血清培养基中细胞的健康生长，使用比含血清培养基更少的抗生素量。

【细胞维护和培养的演变】

可以通过常规的次培养步骤保持转染铺板前的细胞健康。每周传代一到两次，稀释程度使得下次传代前细胞几乎融合。不要使细胞保持融合超过24小时。

大多数已建立的细胞系都是非整倍体，原代培养包括了表达不同基因组合的细胞的混合物。细胞培养在实验室中保存数月和数年后会经历突变，总染色体重组或基因调控变化等而演化。这会导致和转染相关的细胞行为的变化。如果随时间发现这种变化，融化一管新鲜的细胞可能会恢复原先的转染活性。比如，新鲜融化的NIH 3T3细胞比传代8次的细胞表现出更高的转染效率。融化细胞的进一步传代并没有降低转染效率。因此，如果观察到转染效率降低，可以试着转染新鲜培养的细胞以恢复最佳结果。或者，几种来源于经筛选，转染效率较高细胞亚系的细胞系现在有售。

【细胞铺板密度】

用于转染的最佳细胞密度根据不同的细胞类型或应用而异。一般转染时，贴壁细胞密度为70%-90%，悬浮细胞密度为2×106-4×106细胞/ml时效果较好。确保转染时细胞

没有长满或处于静止期。因为转染效率对细胞密度很敏感，所以在不同实验间保持一个基本的传代步骤很重要。铺板细胞数目的增加可以增加转染活性和细胞产量。在三种不同密度进行细胞铺板的比较表明铺板密度最高的，CAT活性也最高。得到最高活性所需的LIPOFECTAMINE试剂的量也相应增加了。这些结果说明，对于转染相同量的DNA所需的最佳阳离子脂质体试剂的量会因细胞密度而异。

【启动子的选择】

获得高转染活性所需选择的启动子依赖于选用的细胞系和要表达的蛋白。CMV启动子在大多数细胞类型中可以获得高表达活性。同其他启动子，如SV40和RSV（劳斯肉瘤病毒）相比，在BHK-21中其活性最高。这三种病毒启动子在T细胞来源的细胞系，如Jurkat中组成表达水平较低。转染后在培养基中加入PHA-L和PMA可以激活Jurkat细胞中CMV启动子，而单PMA就足以激活KG1和K562（人骨髓瘤白细胞）中的CMV启动子。SV40启动子的表达在含有大T抗原（存在于COS-1和COS-7）时会提高，因为大T抗原可以刺激染色体外的合成。

【DNA量】

高质量的DNA对于进行高效的转染至关重要。以前研

究者使用CsCl梯度离心得到的DNA进行转染，但是这种方法费时费力。其他的质粒纯化技术如Marligen的High Purity Plasmid Purification System使用独特的阴离子交换树脂纯化DNA，可以得到用于转染的高质量DNA。另外，Marligen的纯化系统实验步骤很简单，可以在2小时内完成。【瞬时和稳定表达】

DNA转染后，转入基因的表达可以在1－4天内检测到。仅有一部分转入细胞的DNA被转运到细胞核内进行转录并最终输出mRNA到细胞质进行蛋白合成。几天内，大部分外源DNA会被核酸酶降解或随细胞分裂而稀释；一周后就检测不到其存在了。瞬时表达分析检测未重组质粒DNA上基因的表达。因此，表达水平与位置无关，不会受到周围染色体元件的影响。瞬时表达分析所需的人力和时间比稳定表达少，但因为DNA摄入效率和表达水平在不同实验中差异较大，实验必须很小心。为了进行稳定表达，转入的基因必须能和细胞同步复制。在转染的质粒自发整合到宿主基因组上时就会如此。在一小部分转染的细胞中，加入的DNA通过重组整合到基因组上。包含整合DNA的细胞很少，必须通过对药物的抗性筛选进行扩增或通过表型变化进行鉴定。稳定基因表达实验需要数周，如果需要验证蛋白产量，所需的时间更长。但得到的细胞系可以做为蛋白生产的稳定来源

或用于得到转基因动物。

【瞬时转染和转染效率的监测】

基因的瞬时表达在24-72小时内就结束了。这种快速的瞬时表达非常适用于验证质粒表达和监测转染步骤的效率。可以使用报告基因来确定优化条件，其表达蛋白易检测，在目的细胞中不含此蛋白或水平很低。常用的报告基因包括氯霉素乙酰转移酶（CAT），绿色荧光蛋白（GFP），荧光素酶（Lux或Luc）以及b- 半乳糖苷酶（b-gal）。可以使用简单的非同位素方法检测b-gal的表达以测定转染效率和活性。pCMV-SPORT- bgal质粒包含CMV启动子调控下的LacZ 基因，转染入真核细胞内后可以直接表达bgal。结合简单的检测步骤，可以做为监测转染条件的一种方便灵敏的方法。【稳定转染细胞系的筛选】

连同带有药物抗性的筛选标记基因一起转染目的基因是建立稳定转染细胞系最常用的方法。氨基糖苷磷酸转移酶基因（APH或neor）可以合成APH酶，通过磷酸化使药物失活，从而提供对GENETCIN选择性抗生素（G418 Sulfate）的抗性。抗生素抗性基因可以与目的基因在同一个质粒上，也可以在不同的质粒上。如果两个不同的质粒同时转染，两个质粒都可能整合形成稳定转化子。对于两种不同质粒的共

转染，带有目的基因的质粒和带有筛选标记的质粒间的比例为3:1或更高以保证抗性克隆带有转染的目的基因。阳离子脂质体试剂提供了一种建立稳定转染株的高效方法。瞬时转染效率的改进一般也会提高稳定转染效率。比如，使用LIPOFECTAMINE PLUS试剂得到的NIH 3T3细胞GENETICIN抗生素抗性克隆的数目比单独使用LIPOFECTAMINE增加了大约3倍。要进行稳定的表达分析，在转染后次培养细胞，低密度铺板，给予生长空间，在几天或数周内保持筛选压力。生长的细胞比不分裂的细胞更快的受到GENETICIN抗生素的影响。转染后，在开始筛选前等待48-72小时，使细胞表达足够量的抗性酶，保证在开始筛选时可以自我保护。转染后48-72小时倒掉培养基，加入含有GENETICIN抗生素的培养基，抗生素的浓度根据剂量反应曲线确定，足够杀死未转染细胞。因为许多因子影响到筛选所需的GENETICIN抗生素的最佳浓度，包括细胞类型，培养基和血清浓度等，所以有必要对每种细胞作一个剂量反应曲线，确定最佳浓度（参见第7章实验步骤）。筛选最多可能需要一周时间，因为在致死剂量的GENETICIN抗生素存在条件下，细胞会分裂1-2次。在次培养细胞时使用较低剂量的抗生素，一般是筛选剂量的一半。筛选后的细胞一般是离散的克隆，根据实验目的不同，可以分别纯化（克隆），收集进行大量培养或染色并进行抗性克隆的计数。

【蛋白表达和培养基的选择】

哺乳动物细胞系合成可溶的，翻译后修饰的蛋白，比细菌，真菌或昆虫细胞中表达的蛋白更有可能有生物活性。稳定转染的细胞可以合成大量的重组蛋白，而瞬时转染细胞可以快速表达，迅速地合成小量蛋白。常用的细胞系包括CHO，293和COS-7。Invitrogen提供克隆的293-F，293-H，COS-7和CHO-S细胞，来源于经筛选转染效率更高的亚细胞系。这些细胞也可用于无血清和限定化学成分培养基。重组蛋白的大规模生产一般在稳定转染的悬浮细胞中进行。这些细胞易于生长到高密度并合成更多蛋白。使用基质珠做为固相支持可以使贴壁细胞悬浮生长。用于蛋白生产的细胞的转染可以在添加有血清或无血清培养基中进行。但更倾向于使用无血清培养基表达蛋白，因为血清蛋白会干扰下游表达蛋白的纯化。无血清培养基一般针对某一特定细胞类型优化并有几类无血清培养基不需要添加血清，一般含有不均一的或大量的蛋白（但比添加血清的培养基低得多）。无蛋白培养基不含蛋白但可能含有不明成分的抽提物。限定化学成分的培养基不含有蛋白或未知组成的成分。多种多样的配方使您可以选择最适合您应用的一种。在含血清时转染的细胞可以适应无血清培养基，无蛋白培养基或限定化学成分的培养基。在部分情况下（如293-F，293-H，COS-7和CHO-S），对于已适应无血清或无蛋白培养基的细胞，可以使用其培养

基进行转染。其他一些无血清培养基包含抑制阴离子脂质体介导转染的成分。在这些情况下，有必要在诸如D-MEM或OPTI-MEMⅠ等培养基中进行培养和转染。

脂质体介导DNA转染法

脂质体(lipofectin regeant,LR)试剂是阳离子脂质体N-[1-2，3-Dioleyoxy, Propyl]-n, n,n-Trimethylammonium Chloride(DOTMA)和Dioleoyl photidye-thanolamine(DOPE)的混合物[1:1(w/w)]。它适用于把DNA转染入悬浮或贴壁培养细胞中，是目前条件下最方便的转染方法之一。转染率高，优于磷酸钙法，比它高5～100倍，能把DNA和RNA转染到各种细胞。

用LR进行转染时，首先需优化转染条件，应找出该批LR对转染某一特定细胞适合的用量、作用时间等，对每批LR都要做：第一，先要固定一个DNA的量和DNA/LR混合物与细胞相互作用的时间，DNA可从1～5μg和孵育时间6小时开始，按这两个参数绘出相应LR需用量的曲线，再选用LR和DNA两者最佳的剂量，确定出转染时间(2～24小时)。因LR对细胞有一定的毒性，转染时间以不超过24小时为宜。

细胞种类：COS-7、BHK、NIH3T3、Hela和Jurkat 等任何一种细胞均可作为受体细胞。

动物学基础知识

一、名词解释 双重调节：双重调节：鸟类的视觉调节不仅能改变晶状体的屈度（后巩膜角膜肌），还能改变角膜屈度（前巩膜角膜肌，为鸟类所特有），故称为双重调节 1、次生腭——由前颌骨、上颌骨、腭骨、翼骨愈合而成 2、羊膜卵——羊膜卵为端黄卵，外有卵黄膜、蛋白、内外壳膜和卵壳，内有大的卵黄囊，是适应干燥环境的必要条件 3、逆行变态——由结构复杂的幼体变为结构简单的成体的变态称为逆行变态。 4、变温动物——体温随外界环境温度的变化而改变的动物称为外温动物，也称为变温动物 5、双重呼吸——鸟类由于有气囊，在吸气和呼气的过程中，在肺内均能进行气体交换的现象，叫双重呼吸 5、胸腹式呼吸：羊膜动物所特有的呼吸方式，借助于肋间肌使胸腔有节律地扩张和缩小来完成气体交换1、胎生——哺乳类为羊膜动物，受精卵在入母体子宫内后，植入母体子宫壁内，并形成胎盘，通过胎盘从母体吸取营养，受精卵发育致胎儿成熟后由母体娩出。 2、洄游——某些鱼类在生活史的不同阶段，有规律地沿固定路线作长短距离不等的迁移，以转移生活环境满足对生殖、索饵、越冬等的条件，并经一段时间后又重返原地的习性叫洄游。 3、咽式呼吸——两栖类还没有形成胸廓，呼吸是借助口腔底部的上下运动来完成的，称为咽式呼吸 4、内温动物——鸟类和哺乳类等的体温不随外界环境温度的变化而改变，体温能够保护相对恒定，这样的动物称为内温动物或内温动物 二、填空题 8、鸟类和哺乳动物的血液循环均为完全的双循环，但二者的动脉系统有区别，鸟类的由右体动脉弓将左心室发出的血液输送到全身；而哺乳动物的则为左体动脉弓 13、鸟类颈椎的椎体类型为异凹型。 10、两栖动物的呼吸动作主要靠下颌的颤动升降来完成，故称为 咽式呼吸。 3、两栖动物具1枚颈椎，1枚荐椎。 4、两栖动物的膀胱为泄殖腔膀胱。 4、爬行动物的膀胱为尿囊膀胱，爬行动物的代谢废物以尿酸形式排出。 10、鸟类的羽毛可分为正羽，绒羽，纤羽三种。 13、鸟类颈椎的椎体类型为异凹型。 17、鱼类的尾鳍可分为原尾，歪尾，正尾三种。 7、爬行动物具有多枚颈椎，第一枚为寰椎，第二枚为枢椎,具2枚荐椎。 5、鸟类的肩带由肩胛骨、乌喙骨和锁骨构成，三骨联结处构成肩臼与翼的肱骨相关节 9、爬行类心脏_4__腔，心室内具有不完全的分隔，为__不完全的双循环 15、哺乳类皮肤腺的类型有皮脂腺，汗腺，乳腺，气味腺四种。 16、哺乳动物具三对唾液腺：耳下腺，颌下腺，舌下腺。 18、胸大肌起于胸骨，止于肱骨腹面，使翼下扇；胸小肌起于胸骨，止于肱骨近端背面，使翼上扬。20、食草类的反刍胃是由瘤胃，网胃，瓣胃和皱胃组成，其中皱胃是真正的胃，可分泌胃液。 10、两栖动物的呼吸动作主要靠口腔底部的颤动升降来完成，故称为 口咽式呼吸 11、多数鱼类的呼吸器官是鳃，鱼类一般有5对鳃弓，鳃弓内缘着生有鳃耙，外凸面上有2个薄片状的由无数鳃丝构成的鳃片，是气体交换的场所 髂骨、坐骨、耻骨 15、两栖类的腰带由髂骨、坐骨和耻骨共同构成骨盆 1、鸟类的腰带由髂骨、坐骨、耻骨愈合成薄而完整的骨架，但与其他陆生脊椎动物不同的是左右坐骨与耻骨不在腹中线汇合，因而构成所谓关闭式骨盆。

动物防疫知识.

动物防疫知识 一、动物疫病的发生和流行 （一）动物传染病、寄生虫病的概念 1、动物疫病是指动物的传染病和寄生虫病。 2、动物传染病，由病原微生物引起，具有一定的潜伏期和临床症状，且具有传染性的疾病，叫做动物传染病。 3、寄生虫病，由寄生虫寄生在动物体一定的部位而引起的疾病，叫做寄生虫病。 4、动物防疫，把动物疫病的预防、控制、扑灭以及动物及动物产品的检疫等综合性技术措施称动物防疫。 （二）动物疫病的发生条件 1、具有一定数量和毒力的病原微生物 没有病原微生物，传染病就不可能发生。 2、适宜的传染途径 病原微生物通过适宜的途径侵入到动物适宜的部位使动物感染。如果病原微生物侵入动物体的部位不适宜，也不能引起传染病。如破伤风必须是破伤风梭菌经外伤侵入动物体，并在缺氧的环境中生长繁殖才能引起动物发病。 3、动物对某种疫病具有易感性 动物对某一病原微生物没有免疫力（即没有抵抗力）叫易感性。因此，病原微生物只有侵入到对其有易感性的动物体内时才能引起疫病的发生。 动物的易感性受诸多因素影响。不同种类的动物对同一种病原微生物的易感性不同，如炭疽杆菌羊最易感染，感染后表现最急性死亡；牛马次之；而猪则表现慢性经过，临床很难发现；狗、猫易感性更低。同一种动物,不同年龄对病原微生物的易感性不同，同年龄的不同个体易感性也不一致，个体营养状况差的动物，易遭受病原微生物的侵袭。

4、适宜的外界环境因素 ①对动物抗病能力的影响：如每年早春季节，青黄不接，饲料缺乏，动物消瘦，抗病能力下降，寄生在牛羊胆管内的双腔吸虫迅速发育繁殖，对牛羊危害增强，易引起死亡。 ②对病原微生物生命力、毒力的影响：如冬季气温低，利于病毒的生存，易发生病毒性传染病。 ③对生物媒介和中间宿主生命力、分布的影响：蚊子能传播多种疫病，如流行性乙型脑炎受季节的影响，炎热的夏季传播的机会增多。 （三）动物疫病流行的特点 ①散发性：在一个较长的时间内只有零星病例以散发在形式发生，如破伤风。 ②地方性流行病：发病数量较多，范围不广，常限于一个地区（如县、乡内），如巴氏杆菌病。 ③流行性：发病数量多，在较短时间内可传播到几个乡、县甚至几个省，如猪瘟。 ④大流行性：发病数量很多，范围非常广泛，可传播到一个国家或几个国家，如口蹄疫。 ⑤爆发：是指在某一局部地区，短时间内突然出现大批同类动物发病，如口蹄疫、高致病性禽流感等。 二、消毒技术 （一）、消毒的概念 消毒是指用物理、化学或生物学的方法杀灭或清除外环境中各种病原微生物，使之达到不至于引起疾病的数量，一般以杀灭或清除率达到90%为合格。

动物实验操作的基本知识

动物实验操作的基本知识 一、实验动物抓拿固定 （一）小白鼠(mouse) 右手抓住其尾，放在鼠笼铁纱网上，然后用左手拇指及食指沿其背向前抓住其颈部，并以左手的小拇指和掌部夹住其尾固定在手上(图3-1)。取尾血及尾静脉注射时，可将mouse固定在金属或木制的固定器上。 （二）大白鼠(rat) 实验者应戴帆布手套，用右手将鼠尾抓住提起，放在粗糙的台面或鼠笼上，抓住鼠尾向后轻拉，左手抓紧两耳和头颈部皮肤，余下三指紧捏鼠背部皮肤，如果rat后肢挣扎厉害，可将鼠尾放在小指和无名指之间夹住，将整个鼠固定在左手中，右手进行操作（图3-2）。若进行手术或解剖，则应事先麻醉或处死，然后用棉线活结缚四肢，用棉线固定门齿，背卧位固定在大鼠固定板上。需取尾血及尾静脉注射时，可将其固定在大鼠固定盒里，将鼠尾留在外面供实验操作。 （三）豚鼠(cavy) Cavy具有胆小易惊的特性，因此抓取时要求快、稳、准。一般方法是：以右手拇指和食指夹住两前肢及头部，使整个颈胸部皆在手掌中（不要抓得太紧以免窒息），左手抓住两后肢，使腹部向上，而后进行操作（图3-3）。 （四）蛙或蟾蜍(frog or toad) 捉拿方法宜用左手将动物背部贴紧手掌固定，以中指、无名指、小拇指压住其左腹侧和后肢，拇指和食指分别压住左，右前肢，右手进行操作（图3-4）。 在捉拿toad时，注意勿挤压其两侧耳部突起之毒腺，以免毒液射到眼中。 实验如需长时间观察，可破坏其脑和脊髓以后放在蛙板上固定进行操作。 （五）家兔(rabbit) 用右手抓住其颈背部皮毛，轻提动物，再以左手托住其臀部，使家兔的体重主要落在左手掌心，然后按实验要求固定（图3-5）。作兔耳血管注射或取血时，可用兔盒固定。作各种手术时，可将家兔麻醉后固定在手术台上。固定方法常采用仰卧位固定，四肢用粗棉线固定，头用兔头固定夹固定或用棉线钩住家兔门齿再固定在兔台头端铁柱上。 （六）狗(dog)

动物检疫的基本知识

动物检疫的基本知识 （一）检疫的定义及意义 检疫（Quarantine）：源自拉丁文Quarantum，原义是40天的意思。它起源于14世纪中叶，当时在欧洲大陆鼠疫、霍乱、疟疾、黄热病盛行，严重威胁人类的生命安全，当时在欧洲的威尼斯共和国，政府当局为了阻止传染病传入本国，规定凡入境的外来传船只和人员，一律采取在到岸之前，在锚地滞留（隔离）45天。在此期间，如果发现船上人员患有传染病，即不准船只进港和人员上岸；如果未发人员患有传染病，方允许船只进港和人员上岸。这种原始的带有强制性的隔离措施，在当时医疗系条件倘不发达的情况下，对阻止疫病的传播起到了很大的作用。 此后在国际上被广泛采用，并发展成为现在“检疫”的概念，即根据国家法律法规规定，对有关生物体（包括人类、动物和植物等）及其产品和其他相关物品，实施科学的检验鉴定与处理，以防止有害生物（包括人类和动物致病菌、病毒、寄生虫及植物性病、虫、杂草等）传入国境或在国内蔓延及在国际间传播的一项强制性行政措施。 由此可知：检疫有两种基本属性：（1）强制性。即检疫是国家采取的强制性行政措施，任何单位和个人不得干扰或阻止。它受法律保护。因此，许多国家，包括我们国家都制定了相关的法律法规；（2）预防性。即检疫可以防止疫病传入。而不是等疫病传入后再去控制。否则，不仅效果差，而且难度大，且代价高。

各国政府都非常重视检疫工作，尤其是出入境检疫工作。在世贸组织（WTO）谈判中，动植物检疫也始终是谈判的焦点，因为它是设置非关税技术性贸易性壁垒（TBT）的有效手段。为了消除由此引发的技术性贸易性壁垒，在WTO规则中有一个专门的规则----SPS协定（实施卫生与植物卫生措施协定）。 我国《进出境动植物检疫法》第一条即明确规定：为了防止动物传染病、寄生虫病和植物危险性病、虫、杂草以及其他有害生物传入、传出国境，保护农、林牧渔业生产和人体健康，促进对外经济贸易的发展，制定本法。 （二）动物检疫 动物检疫是遵照国家法律，运用强制性手段和科学技术方法，预防或阻断动物疫病的发生以及从一个地区到另一个地区间的传播。 1、动物检疫的目的和任务： （1）保护农、林、牧、渔业生产。众所周知，农、林、牧、渔业生产在世界各国国民经济中占有非常重要的地位。采取一切有效的措施免受国内外重大疫情的灾害，是每个国家动物检疫部门的重大任务。 （2）促进经济贸易的发展。当前国际间动物及动物产品贸易的成交与否，具有优质、健康的动物和产品是关键。动物检疫工作不可缺少、事关重要。 （3）保护人民身体健康。动物及其产品与人的生活密切相关。许多疫病是人畜共患的传染病，据有关方面不完全统计，目前动物疫

动物防疫知识宣传

动物防疫知识宣传资料（一） 一、强制免疫法律依据根据《中华人民共和国动物防疫法》的规定，国家对严重危害养殖业生产和人体健康的重大动物疫病，如牲畜五号病、猪瘟、猪蓝耳病、禽流感、新城疫等疫病实施强制免疫。 二、强制免疫病种国家对严重危害养殖业和人体健康的动物疫病实行计划免疫制度并实施强制免疫。生猪必须强制免疫注射猪五号病疫苗、蓝耳病疫苗、猪瘟疫苗；牛、羊必须强制免疫注射五号病疫苗；鸡、鸭、鹅等禽类必须强制免疫注射禽流感疫苗；鸡还要注射新城疫疫苗。 三、免疫后果动物接受免疫后，少数动物可能出现减食、减蛋、甚至死亡的免疫副反应，属正常现象，短期内出现减蛋、停食、减产、影响生长，这些免疫副反应所造成的损失均养殖户自行承担。个别动物接受免疫后出现死亡的，要及时上报乡镇兽医站，由县主管部门第一时间核实、拍照上报市、区主管部门，责成疫苗生产厂家进行补偿。 实施动物免疫标识管理制度 1、动物免疫标识包括免疫耳标、免疫档案，免疫耳标必须一次性使用，任何单位、个人不得非法生产、伪造和倒卖，动物凭免疫耳标和动物检疫合格证明上市、买卖和运输。根据农业部《动物免疫标识管理办法》，对按照规定程序（第二条）实施了强制免疫注射的猪、牛、羊按一畜一标一证要求，填发《动物免疫证明》，佩戴耳标，建立免疫档案。对实施强制免疫的家禽，发放免疫证明，建立免疫档案。 2、必须凭有效免疫证明、耳标并经临床检查健康等条件，出具《动物产地检疫合格证明》。对免疫证明上填写的耳标号与生猪耳标号不一致或免疫证明失效的，一律不得出具《动物产地检疫合格证明》。 3、防疫员必须对仔猪实行阉割、注射猪五号病疫苗和猪瘟疫苗后，才能发放免疫标识。 四、生猪新免疫程序即仔猪在25-40日龄时对其进行阉割，同时注射猪五号病和猪瘟疫苗,15天后再注射猪蓝耳病疫苗；然后在春秋两季普防时，再次注射猪五号病和猪瘟疫苗，确保免疫效果，防止重大动物疫病发生。 五、仔猪阉割首免好处实施阉割首免的仔猪，由于阉割日龄早，刺激小，有利于仔猪快速生长，同时减少了免疫空白期，提高了仔猪防疫水平，能降低发病数和死亡率。 六、动物检疫执法有关规定凡在境内交易、运输活畜及其产品的货（畜）主必须持有效的《动物产地检疫合格证明》、《动物产品检验合格证明》以及《动物及动物产品运载工具消毒证明》。对自养自宰自用生猪，必须实行年宰检疫，并按规定回收《动物免疫证明》和耳标。 七、仔猪检疫执法规定根据《动物防疫法》、《动物免疫标识管理办法》及《动物检疫管理办法》等法律、法规的规定，贩运户或畜主必须凭耳标、《产地检疫合格证明》在凤山县境内销售、调运仔猪等。 八、实行动物防疫申报制对未免疫的畜禽，养殖户（场）应积极主动地向所在地的兽医站报告，以便兽医站及时掌握有关情况。兽医站在接到申报后，必须及时按排人员进行防疫，不得拖延或拒绝等。 九、拒不接受免疫的责任按照广西壮族自治区人民政府令第61号《广西壮族自治区无规定动物疫病区管理试行办法》第十四条：在无规定动物疫病区内，对饲养经营的动物不按规定接受免疫的，由县级动物防疫监督机构责令限期免疫，拒不接受免疫的，实施强制免疫，所需费用由违法行为人承担；阻碍强制免疫的，按规定一次性处500元以下的罚款，请各养殖户自觉主动接受免疫。 动物防疫知识宣传资料（二） 一、动物传染病的一般特征 ①其特定的致致病性微生物存在，寄生虫、细菌、病毒和一些传染隆蛋白因子（如疯牛病）都可能引起传染病的发生。 ②具有传染性和流行性。 ③通过血清学和病源学等检测方法，可以了解感染和免疫状况。 ④耐过动物多数情况下可以产生特异性免疫力，在一定时期内不再感染本病。

动物学教学大纲完整

《动物学》教学大纲 一、说明 （一）《动物学》的课程性质： 动物学是生物科学中的一门基础学科，是高等学校生物专业的主要基础课。本课程以动物的演化为线索，主要介绍无脊椎动物（原生、多孔、半索、扁形、原腔、环节、软体、节肢、棘皮、腔肠动物门）及脊椎动物（脊索动物门、圆口纲、鱼纲、两栖纲、爬行纲、鸟纲、哺乳纲等）的结构和演化。为后续的动物生理学、遗传学、生物进化论、生态学和发育生物学等课程学习奠定基础，获得从事动物学教学和动物学研究工作的基本技能。（三）《动物学》的课程目标： 通过本课教学，以动物的演化系统为线索，要使学生系统掌握各门及主要纲的主要特征；重要代表动物的形态结构、生理机能和个体发育的特点；基本掌握门（亚门）、纲（亚纲）及目（昆虫、鱼类、两栖类、鸟类、兽类）的分类，生态及经济地位；了解动物界发生发展的基本规律及各门与纲（脊椎动物各纲）的演化关系以及动物地理分布和生态的基本知识；了解国内外动物学发展的新成就。 （四）《动物学》课程授课计划（包括学时分配）：

（五）教学建议： 本课程以课堂讲授为主,教学紧紧结合各类微生物结构功能、生命活动及应用等问题加以分析讨论，对抽象理论过程并采用多媒体教学方式辅助进行,加深学生的理解。由于专业需要对于动物形态解剖部分应详细讲解。 （六）考核要求： 采用期中、期末考核与平时成绩相结合的方式进行考核。按平时占10%（包括学习态度和平时作业等）；期中成绩占20％；期终成绩占70%。试卷按照教学大纲的要求，利用试题库对学生进行考试。 二、教学内容 Chapter1绪论 教学目的和要求： 1、明确动物学的概念 2、掌握动物学的目的与任务、研究方法和分类知识 教学重点： 动物学的目的与任务、研究方法和分类知识 教学难点：

动物细胞培养总结!!!!

动物细胞培养总结 一．实验准备 1.实验器械、器皿的清洗和消毒 （1）清洗和包装 离心管，2ml,15ml)若干，冻存管若干放进铝饭盒，用牛皮纸包裹，系紧棉绳，用笔在饭盒上和牛皮纸上标记盒内所装物品名称、数量、日期和所属人名称。 蓝枪头两盒，黄枪头白枪头各一盒用牛皮纸包裹，用棉绳扎紧。 取适量蒸馏水于4L玻璃瓶，瓶盖拧松半圈。 过滤器，250ml玻璃瓶，500ml玻璃瓶用自来水毛刷洗涤剂刷洗，蒸馏水润洗，烘干。 过滤器两部分分别包裹，先将瓶口部位用锡纸包裹后，再罩以牛皮纸，再用棉布密包起来，用棉绳扎紧。 玻璃瓶拧下瓶盖，瓶身浸酸。浸酸时应注意安全，须穿戴耐酸手套和白大褂，注意保护好面部和身体裸露部分，提前备好一盆水在旁以便浸酸结束后清洗耐酸手套，防止走动时酸液滴到地板上不好清洗。瓶口慢慢沉入液面下，注意缓慢降低瓶身，使液体慢慢浸入瓶内，以免产生气泡溅出酸液，发生危险。浸酸时器皿要充满酸液，勿留气泡，浸泡过夜。取出瓶身时，须穿戴耐酸手套和白大褂，注意保护好面部和身体裸露部分，提前备好一盆水在旁，取出后将瓶身放入盆内水中在转移至水池边清洗，以免酸液滴落地板不好清洗。换水洗几次，待水澄清后开始冲洗，每瓶都用自来水灌满，倒掉，重复15次，再用

蒸馏水漂洗5次，去离子水漂洗3次，烘干备用。 （2）消毒灭菌 1>全自动高压灭菌锅：插电源，打开开关，检查水位，若水位不足加蒸馏水补足，放入物品，瓶类物体须拧松盖子后放最上面一筐，盖上灭菌锅盖，拧紧盖子至温度显示栏的左上角有一红点亮灯，按start开始升温。若灭有无菌水或玻璃瓶待降温至常温再打开，打开后立即拧紧，无菌水瓶口封上封口膜。若没灭瓶类物品，降温至80度左右即可打开灭菌锅，须戴上线手套取出。 2>手提式高压灭菌锅：插电源，打开开关，检查水位，若水位不足加蒸馏水补足，检查设定是否为121度20分钟，放入物品，盖上灭菌锅盖，注意导气管一定插到锅底并不能堵塞，用手对称地拧紧锅盖螺栓，再用扳手继续拧紧。加温升压之前，先打开排气阀门，加温约半小时后见排气阀处开始排残留在锅内的冷空气，排气五分钟，关闭排气阀，继而开始升压。灭菌后不要立即打开气阀放气以免水汽喷出。待自然降温至常压才能打开气阀。 玻璃瓶须拧紧，饭盒，枪头灭菌后放入烘箱烘干备用。 2.无菌间消毒及设备检查 用84消毒液拖地，用原液按照1：29的比例兑水，抹布、拖把擦洗。配400ml 75%酒精于盆中，用酒精棉仔细擦拭CO2培养箱，超净台，超净台内物品，显微镜，桌面，若培养箱内未培养细胞可以再打开高温灭菌模式将培养箱灭菌一次。 用蒸馏水擦拭清洗水浴锅内壁，注意底座不要沾水。

《普通动物学》学习方法

《普通动物学》学习方法 一﹑课堂学习 大学《普通动物学》课堂教学面临的一个突出问题是教材越来越厚，而教学计划所安排的学时却越来越少，针对这种情况，课堂教学方法必需要有所改变。 由于生物学本身的规律，在教材中不少内容不可避免是重复的，如脊椎动物的形态结构部分内容与人体解剖学是重复的；生理机能方面的部分内容与动物生理学是重复的；大学教材中的这些内容，许多与中学生物教学是重复的；不同纲动物身体各系统的形态结构和生理机能不少也是重复的。这些内容又恰恰在《普通动物学》教材中占的篇幅较大。 这些在中学和大学的不同课程以及在同一教材中不同纲的重复内容，系统的结构和生理机能，学生在一定程度上是比较了解的。这一部分内容，要突出重点、特点，对最先讲述的代表动物，可以作较细致的讲解；对以后出现的代表动物，应主要讲述其特点。而常规的结构和生理机能可以不讲或少讲。在讲述这部分内容时，要应用比较解剖学和比较生理学的方法。通过比较，不但可以了解不同类群的共同特征，还便于了解它们的不同特征；既知道了一个新类群的特征，又复习了已讲过的类群特征。 在动物学教材中另外一个比较重要的内容是动物的分类。这一部分内容在课堂教学中可以讲门、纲、目及重要科的鉴别特征，而种的鉴别最好放在实验课中对照实物标本学习，如果在理论课中讲解，不但花时间，而且效果也不好。 只要学生在课堂上注意力集中，思维跟着老师转，主要内容一般是能听懂的，但要将老师讲的全部内容在大脑中记下来，是比较困难的。帮助记忆的主要方法是做好课堂笔记。课堂笔记主要记录老师的板书内容，老师的板书是文字非常简捷的各级标题以及重要的图表和示意图。学生还可以记下一些自己认为比较重要的内容。所以课堂笔记是重要的学习提纲，它能给学生在课后复习阅读教材时提供重要的线索，便于抓住重点，节约时间。记笔记还能促使学生在课堂上集中注意力，组织思维，避免思想开小差。在笔记中还能记下未搞清楚的问题，留待课后向老师请教或查阅资料。学生通过课堂笔记，可以模仿老师在板书中概括问题的方式，提高在阅读中概括问题的能力，提高自学效果。 对于课堂教学中的板书和做笔记应该有正确的看法，老师讲课时不能只顾在黑板上不停地写，写满了就擦，擦完了又写，学生难以跟上，没有时间思考；学生不能只是埋头做笔记，而对所记的内容不求甚解。老师应该注意板书的质量，学生应该把做笔记当作学习的一种方法，在理解的基础上记忆，不断提高记笔记的能力。 做好课堂笔记应注意以下几点：大学老师课堂讲授内容多，板书也多，学生要提高记笔记的速度，记笔记的速度要跟上老师板书的速度。要培养边看边写、边听边思考的课堂学习能力；课堂笔记不同于会议记录，不必记录过多的细节，更不必将老师讲的话都记录下来，要是这样，学生就仅是记录员，没有思考的时间。除了记下老师的板书以外，再记下一些自己认为重要的或弄不清楚的内容；大学教师在课堂上讲授的内容，许多是自己补充进来的，特别是对某些问题的新见解、新发现，可以多记；而教材上有的内容可以少记；老师讲授的内容容易为自己接受的可以少记，而较难懂的内容，可适当多记，有助于课后复习时突破难点；部分学生除了在课堂上记好笔记外，在课后复习中还补充进许多内容，将笔记重新整理抄写，使自己的笔记成为一份很漂亮的听课和读书的综述资料，不但丰富了知识，而且培养和提高了学习兴趣和效率；课堂笔记应以老师的板书为主，因为动物学老师在这一专业领域中，教学研究和科学研究的经验丰富，所讲授的许多专业术语、定义和内容可能是学生没有接触过的，学生不可能随意改变。但学生并不见得就一定要机械地照抄板书，他们可适当地对板书加以改变，搞出特色；现在的课堂教学由于信息量大而课时少，在有限的时间里，老师不可能很详细、很连贯的讲解。即使是教学时间够，也不能像对待中、小学生那样进行讲

生物基础知识

1．诱变育种的意义：提高变异的频率，创造人类需要的变异类型，从中选择、培育出优良的生物品种。 2．原核细胞与真核细胞相比最主要特点：没有核膜包围的典型细胞核。 3．细胞分裂间期最主要变化：DNA的复制和有关蛋白质的合成。 4．构成蛋白质的氨基酸的主要特点是： （ -氨基酸）都至少含一个氨基和一个羧基，并且都有一氨基酸和一个羧基连在同一碳原子上。 5．核酸的主要功能：一切生物的遗传物质，对生物的遗传性，变异性及蛋白质的生物合成有重要意义。 6．细胞膜的主要成分是：蛋白质分子和磷脂分子。 7．选择透过性膜主要特点是： 水分子可自由通过，被选择吸收的小分子、离子可以通过，而其他小分子、离子、大分子却不能通过。 8．线粒体功能：细胞进行有氧呼吸的主要场所。 9．叶绿体色素的功能：吸收、传递和转化光能。 10．细胞核的主要功能：遗传物质的储存和复制场所，是细胞遗传性和代谢活动的控制中心。 新陈代谢主要场所：细胞质基质。 11．细胞有丝分裂的意义：使亲代和子代保持遗传性状的稳定性。 12．ATP的功能：生物体生命活动所需能量的直接来源。 13．与分泌蛋白形成有关的细胞器：核糖体、内质网、高尔基体、线粒体。14．能产生ATP的细胞器（结构）：线粒体、叶绿体、（细胞质基质（结构））能产生水的细胞器*（结构）：线粒体、叶绿体、核糖体、（细胞核（结构））能碱基互补配对的细胞器（结构）：线粒体、叶绿体、核糖体、（细胞核（结构））14．确切地说，光合作用产物是：有机物(一般是葡萄糖，也可以是氨基酸等物质)和氧 15．渗透作用必备的条件是：一是半透膜；二是半透膜两侧要有浓度差。16．矿质元素是指：除C、H、O外，主要由根系从土壤中吸收的元素。 17．内环境稳态的生理意义：机体进行正常生命活动的必要条件。

常用的五种动物细胞培养方式

?一、半连续式培养 1.半连续式培养又称为重复分批式培养或换液培养。采用机械搅拌式生物反应器系 统，悬浮培养形式。在细胞增长和产物形成过程中，每间隔一段时间，从中取出部分培养物，再用新的培养液补足到原有体积，使反应器内的总体积不变。这种类型的操作是将细胞接种一定体积的培养基，让其生长至一定的密度，在细胞生长至最大密度之前，用新鲜的培养基稀释培养物，每次稀释反应器培养体积的1/2~3/4，以维持细胞的指数生长状态，随着稀释率的增加培养体积逐步增加。或者在细胞增长和产物形成过程中，每隔一定时间，定期取出部分培养物，或是条件培养基，或是连同细胞、载体一起取出，然后补加细胞或载体，或是新鲜的培养基继续进行培养的一种操作模式。剩余的培养物可作为种子，继续培养，从而可维持反复培养，而无需反应器的清洗、消毒等一系列复杂的操作。在半连续式操作中由于细胞适应了生物反应器的培养环境和相当高的接种量，经过几次的稀释、换液培养过程，细胞密度常常会提高。 2.半连续式特点： ·培养物的体积逐步增加； ·可进行多次收获； ·细胞可持续指数生长，并可保持产物和细胞在一较高的浓度水平，培养过程可延续到很长时间。该操作方式的优点是操作简便，生产效率高，可长时期进行生产，反复收获产品，可使细胞密度和产品产量一直保持在较高的水平。在动物细胞培养和药品生产中被广泛应用。 二、连续式培养 1.连续式培养是一种常见的悬浮培养模式，采用机械搅拌式生物反应器系统。该模 式是将细胞接种与一定体积的培养基后，为了防止衰退期的出现，在细胞达最大密度之前，以一定速度向生物反应器连续添加新鲜培养基；同时，含有细胞的培养物以相同的速度连续从反应器流出，以保持培养体积的恒定。理论上讲，该过程可无限延续下去。

实验动物学基本概念

基本概念： 实验动物：指经人工培育，对其携带的微生物实行控制，遗传背景明确，来源清楚，用于科学研究、教学、生产、检定及其他科学实验的动物。 实验用动物：指一切用于科学实验的动物。 动物实验：为科研、教学、药物检定等目的，对实验动物进行物理、化学、生物等因素处理，观察其反应，获得实验数据，解决科研中问题的过程。 实验动物学：研究动物实验和实验动物的科学。 近交系及特点；经至少连续20代的全同胞兄妹交配或亲代与子代交配培育而成，品系内所有个体都可追溯到起源于第20代或以后代数的一对共同祖先。 比较医学：对实验动物与人类基本生命现象的异同，进行比较研究。通过研究实验动物与人类的共性探讨人类相应疾病的发生、发展规律。通过研究实验动物与人类的差异寻找治病的方法和手段。 动物福利：就是让动物在康乐的状态下生存,在无痛苦的状态下死亡。即动物无任何疾病、无行为异常、无心理紧张压抑和痛苦等。基本原则包括:让动物享有不受饥渴的自由、生活舒适的自由、不受痛苦伤害的自由、生活无恐惧感和悲伤感的自由以及表达天性的自由。实验动物学在生物医学研究中的意义：AEIR——实验动物、设备、信息、试剂。 实验动物的营养需要包括：维持需要（即维持动物正常体温、呼吸、心跳、基础代谢等各项基本生命活动及满足动物随意活动的需要）；生产需要（就是供给动物生长、妊娠、泌乳、产肉、产蛋等生产活动的需要。） 封闭群及特点；以非近亲交配方式繁殖生产的一个实验动物种群，在不从其外部引入新个体的条件下，至少连续繁殖4代以上，称为一个封闭群，或叫远交群。 品种与品系；指具有相似的外貌特征，独特的生物学特性以及稳定的遗传性能，共同遗传来源和一定遗传结构的动物群体。 近交系数；指群体中某个个体通过遗传携带两个同源等位基因的概率。Fn=〔1-(1-△F)n 〕×100%（越亲越高） 全同胞△F=19.1% 同父异母△F=11.0% 堂兄妹△F=8% 亲子交配△F=19.1% 近交衰退；指在近交过程中动物群体由于基因分离和纯合而产生的不利于个体和群体发育的现象。包括： 1.由于有害隐性基因的纯合，出现遗传缺陷或某种疾病发生率的提高。 2.影响繁育如产子数下降、母性不良。 3.个体发育不良，对环境的适应性差。

兽医学基础知识试题

兽医学基础知识试题 一、单项选择题（共20题，每题2分） 1、对病死畜禽尸体（）处理。C A、杀来食用 B、丢到野外 C、无害化处理（埋、焚烧） D、拿到集市去卖 2、免疫后，对散养户猪、牛、羊免疫证的填写应做到（）。B 3、A、一户一证B、一畜一证C、一栏一证D、一群一证 4、 3、在口蹄疫疫区内要严格实行（）消毒免疫的综合防治措施。A A．封锁、隔离、扑杀B．封锁、隔离、治疗 C．封锁、治疗、扑杀D. 封锁、隔离、屠宰出售 4、国家把动物疫病病种分为（）类。 B A.二类 B.三类 C.四类 D.五类 5、口蹄疫疫苗和禽流感疫苗的保存温度为（）。 B A．-15℃至0℃B．2℃至8℃ C．10℃至20℃ D.常温保 6、疫苗瓶标签上“有效期至050702”的含义是指（）。C A．疫苗是7 月2 日生产的 B．疫苗有效期至07年2 月. C．疫苗有效期至05年7 月 D．疫苗有效期至02年7 月5 日 7、动物免疫注射后要观察一段时间的原因是：（）。B A、有利于提高疫苗免疫效果，提高免疫抗体水平 B、防止发生严重的免疫副反应，及时采取急救措施 C、有利于产生较长的免疫保护时间 D、查看疫苗吸收情况，防止注射部位形成大的结节，影响肉品质 8、前腔静脉采血主要适用于以下哪种动物？（）B A、牛 B、猪 C、兔 D、马 9、炭疽是（）。C A、人的传染病 B、动物的传染病 C、人畜共患病 D、单蹄兽疫病 10、灭活疫苗（油乳剂疫苗和铝胶剂疫苗等）要保存于（）条件中，不应冻结。A A、2—8℃ B、0℃ C、-4℃ D、-15℃ 11、口蹄疫灭活疫苗，免疫接种方法（）。D A、滴鼻点眼 B、饮水 C、喷雾 D、注射 12、属于传染源的是（）。A A、病畜 B、污染有细菌、病毒的圈舍 C、用具 D、污染的饲料饮水 13、当生猪发生猪瘟时，眼结膜颜色多见什么病理变化：（）D A、苍白 B、黄染

动物细胞培养常用方法

一.细胞增殖周期（cell proliferatinal cycle）概念 细胞周期是描述细胞增殖和分化交替发生变化的概念。而细胞增殖周期主要是从细胞增殖角度赋予细胞活动的概念，两者不应混为一谈。细胞增殖周期是指细胞从一次分裂结束开始生长，到下一次分裂结束所经历的过程。根据细胞增殖周期不同时期的生化特点，划分为四个连续的时期，即G1期（DNA合成前期），S期（DNA合成期），G2期（DNA合成后期），M期（有丝分裂期）。如以G1期为起点，那么细胞增殖周期的各时期应循着G1-S-G2-M的顺序进行，G1、S、G2三期合称为细胞间期，此期完成细胞生长过程。M期完成遗传物质的分配。 因此，细胞增殖周期=间期（G1期+S期+G2期）+分裂期（M期）。 二.培养细胞生命期（life span of culture cells） 很多细胞特别是正常细胞，在体外的生存不是无限的，而是具有一个生命期。索维培养细胞生命期，是指细胞在培养中持续增殖和生长的时间。培养细胞的生命期与细胞的种类、性状和原供体的年龄、健康等情况有关。人胚二倍体成纤维细胞，在不冻存和反复传代条件下，科传30~50代，相当于150~300个细胞

增殖周期，能维持1年左右的生存时间，最后衰老凋亡。如供体为成体或衰老个体，则生存时间较短；其他细胞如肝细胞或肾细胞，生存时间更短，仅能传几代或十几代。只有当细胞发生遗传性改变，如获永生性或恶性转化时，细胞的生存期才可能发生改变。正常细胞培养时，不论细胞的种类和供体的年龄如何，在细胞生命的全过程中，大致都经历以下三个阶段：原代培养期、传代期、衰退期。 三.培养细胞一代生存期 培养细胞的生存空间和营养是有限的，当细胞增殖达到一定密度后，则需要分离出一部分细胞和更新营养液，否则将影响细胞的继续生存，这一过程叫传代（Passage或Subculture）。每次传代以后，细胞的生长和增殖过程都会受一定的影响。传代的频率或间隔与培养液的性质、接种细胞的数量和细胞增殖的速度等有关。接种细胞数量大，细胞基数大。相同增殖速度条件下，细胞数量增加与饱和速度相对要快（实际上细胞接种数量大时细胞增殖速度比稀少时要快）；连续细胞系和肿瘤细胞系比初代培养细胞增值快；；培养液中血清含量多时细胞增殖比少时快。以上情况都会缩短传代时间。 所谓细胞“一代”一词，仅指从细胞接种到分离培养时的一段时间，这已成

《普通动物学》完整课后答案(刘凌云版)

第一章动物体的基本结构与机能 1. 细胞的共同特征是什么？ 答：细胞的共同特征：在形态结构方面，一般细胞都具有细胞膜、细胞质（包括各种细胞器）和细胞核的结构。少数单细胞有机体不具核膜（核物质存在于细胞质一定区域），称为原核细胞，如细菌、蓝藻。具核膜的细胞就是细胞有真正的细胞核，称为真核细胞。在机能方面：①细胞能够利用能量和转变能量。例如细胞能将化学键能转变为热能和机械能等，以维持细胞各种生命活动；②具有生物合成的能力，能把小分子的简单物质合成大分子的复杂物质，如合成蛋白质、核酸等；③具有自我复制和分裂繁殖的能力，如遗传物质的复制，通过细胞分裂将细胞的特性遗传给下一代细胞。此外，还具有协调细胞机体整体生命的能力等。 2. 组成细胞的重要化学成分有哪些？各有何重要作用？从蛋白质、核酸的基本结构特点，初步了解生物多样化的原因。 答：组成细胞的化学成分有24种。其中：C、H、O、N、P、S对生命起着重要的作用，Ca、K、Na、Cl、Mg、Fe常量元素虽然较少，但也是必需的，Mn、I、Mo、Co、Zn、Se、Cu、Cr、Sn、V、Si、F，12种微量元素也是生命所不可缺少的。由上述元素形成各种化合物。细胞中的化合物可分为无机物（水、无机盐）及有机物（蛋白质、核酸、脂类、糖类）。水是无机离子和其他物质的自然溶剂，同时是细胞代谢不可缺少的。这些物质在细胞内各有其独特的生理机能，其中蛋白质、核酸、脂类、糖类在细胞内常常彼此结合，组成更复杂的大分子，如核蛋白、糖蛋白等。蛋白质与核酸在细胞内占有突出的重要地位。蛋白质是细胞的基本物质，也是细胞各种生命活动的基础。蛋白质由氨基酸组成，组成蛋白质的氨基酸已知有20多种。氨基酸借肽键联成肽链。总之，蛋白质是由几十、几百甚至成千上万的氨基酸分子通过肽键按一定次序相连而成长链，又按一定的方式盘曲折叠形成极其复杂的生物大分子。核酸可分为核糖核酸(RNA)和脱氧核糖核酸(DNA)。细胞质与细胞核都含有核糖核酸。脱氧核糖核酸是细胞核的主要成分。核酸由几十到几万甚至几百万个核苷酸聚合而成的大分子。一个核苷酸是由一个五碳糖、一个含氮碱基和磷酸结合而成的。由于蛋白质的分子结构极为复杂多样化。而且几乎所有这20多种氨基酸通常存在于每一种蛋白质中，随着这些氨基酸在数量和排列上的千变万化，蛋白质的特性也随之多种多样。另一方面，核苷酸的种类虽不多，但可因核苷酸的数目、比例和排列次序而构成各种不同的核酸。DNA分子是由两条多核苷酸链平行围绕着同一轴盘旋成一双链螺旋(像螺旋软梯)，在DNA分子中，含这四种碱基的核苷酸有各种的排列方式，如果一个DNA 分子有100个核苷酸，就可能有4100种的排列方式。实际上一个DNA分子不只有100个核苷酸，而是几万甚至几百万个核苷酸。由此看出，DNA作为遗传物质基础，对生物的多样性和传递遗传信息具有很大的优越性。可以看出，由于蛋白质、核酸的多样性，所以生物也有多样性。

动物防疫免疫基础知识

动物防疫免疫基础知识 1、免疫、免疫接种的概念 ①免疫：指动物机体识别和消除非已大分子物质，用以维持机体内外环境平衡的生理性、保护性反应。 ②免疫接种：是给动物接种抗原(疫苗、菌苗)或免疫血清等生物制品.激发机体产生对相应病原体的特异性抵抗力，使易感动物转化为非易感动物，从而达到保护个体乃至群体预防和控制传染病的目的。在预防传染病中，免疫预防接种是最经济、最有效、最方便的手段。 2、免疫接种的分类 ①预防免疫接种：为预防传染病的发生流行，平时有计划地给健康畜禽群进行免疫接种。 ②紧急免疫接种：发生和流行传染病时，为迅速控制和扑灭疫病的流行，而对疫区和受威胁区内尚未发病的畜禽进行免疫接种。 ③临时性免疫接种：临时为避免发生某些传染病而进行的免疫接种。如引进、外调、运输畜禽时，为避免途中或到达目的地后爆发某些传染病，而临时进行的免疫接种。 3、疫苗的种类 ①菌苗、②疫苗、③类毒素。习惯上。把以上3种生物制品简称为疫苗。目前常用的疫苗有弱毒疫苗和灭活疫苗 a、弱毒疫苗：是利用毒力减弱的细菌或病毒等微生物经大量繁殖后制成的活苗，如：猪瘟、兔化弱毒苗NDIII系.IV系苗。

弱毒苗需低温冷藏，通常制成冻干苗可大大延长保存期。 b、灭活苗：将病源微生物(强毒或弱毒)大量繁殖后，采用物理或化学的(如甲醛)方法使其失活，但仍保留免疫原性制作的苗。 如：w、Q疫苗，不需低温保存(只要保鲜)，接种途径只能注射(皮下或肌肉)，常加入免疫增强剂(佐剂)，能提高免疫应答和免疫期。 4、疫苗使用中应注意的问题 ①疫苗选择：要充分了解当地传染病发生的种类和流行状况。常发病、常见病及危害严重的疫病必须列入常年免疫计划，如猪瘟、ND、W、Q等疫病。 ②接种途径和使用方法：接种的途径有滴鼻、点眼、刺种、注射(皮下、肌肉)、饮水、气雾，每种疫苗均有最佳的接种途径。 总的原则：弱毒苗应尽量模仿自然感染途径接种，如：NDIV系弱毒苗以滴鼻、点眼方式进行。灭活苗均应注射(皮下、肌肉)如：w、Q疫苗(HC疫苗注射) a、肌肉注射操作要点 部位：选择肌肉发达的部位，如颈侧、臀部等， 方法：左手固定注射部位.右手拿注射器，针头垂直刺肌肉内，左手固定注射器，右手将针芯回抽一下。如无回血，将药慢慢注入，若发现回血，应变更位置。 若动物不安或皮厚不易刺，可将注射针头取下，右手拇指、食指和中指紧针尾对注射部位迅速刺入肌肉 然后接上注射器，注入药液。 b、皮下注射

动物学知识点总结(全)

《普通动物学》基本内容复习纲要
（2009 年 12 月修改稿，尚不完善，仅供参考！ ）
本课程的基本内容是以进化为主要线索，着重系统地介绍动物各主要类群的基本结构与功能的特征，并介绍动物 系统的分类知识及进化等。 I、动物主要门类及代表动物 Ⅲ、各门类的主要特征 Ⅴ、各大类动物的分类 VII、动物的进化 Ⅱ、各门类在动物界的进化地位 Ⅳ、基本概念 Ⅵ、各门类主要构造的比较
I、动物主要门类及代表动物
1、原生动物门 2、多孔动物门 3、腔肠动物门 4、扁形动物门 5、原腔动物门 6、环节动物门 7、软体动物门 8、节肢动物门 9、棘皮动物门 10、半索动物门 利什曼原虫 痢疾变形虫 疟原虫 草履虫 海绵 水螅 水母 珊瑚 涡虫 吸虫 绦虫 蛔虫 沙蚕 蚯蚓 蚂蝗 河蚌 田螺 乌贼 螯虾 鲎 蜘蛛 马陆 蝗虫 海百合 海星 海蛇尾 海胆 海参 柱头虫 11、脊索动物门 （1）尾索动物亚门 （2）头索动物亚门 （3）脊椎动物亚门 ①圆口纲 ②鱼 纲 ③两栖纲 ④爬行纲 ⑤鸟 纲 ⑥哺乳纲 盲鳗 七鳃鳗 鲨 鳐 鲫 鲈 鱼螈 大鲵 蛙 蜥蜴 蛇 龟鳖 鳄 鸵鸟 企鹅 麻雀 鸭咀兽 袋鼠 家鼠 海鞘 文昌鱼
Ⅱ、各门类在动物界的进化地位
1、原生动物门 2、海绵动物门 3、腔肠动物门 4、扁形动物门 5、原腔动物门 6、环节动物门 7、软体动物门 8、节肢动物门 9、棘皮动物门 10、半索动物门 11、脊索动物门 最原始、最低等、最简单的真核单细胞动物。 极为低等的多细胞侧生动物。 真正后生、最原始的多细胞、二胚层的原口动物。 两侧对称、三胚层、体内受精，达器官系统水平的实质动物。 七大类、形态构造各异、亲缘关系不清、充满体液的假体腔动物。 原始分节、真体腔，最早登陆，高等无脊椎动物的开始。 不分节、不发达真体腔、出现所有器官系统，最早登陆，动物界第二大门。 分节、节肢、高等原口动物，高度适应陆生生活，动物界第一大门。 最高等无脊索，后口、内骨骼动物。 介于棘皮和脊索动物之间的过渡类群。 具脊索、背神经管和咽鳃裂的最高等的动物门类。 终生具三大基本特征。脊索纵贯全身，伸达最前端。
（1） 尾索动物亚门（被囊动物） （2） 头索动物亚门 （3） 脊椎动物亚门 ① 圆口纲 ② 鱼 类 ③ 两栖纲 ④ 爬行纲 ⑤ 鸟 纲 ⑥ 哺乳纲 低等、无颌。 低等、有颌、变温，完全适应水生生活。 水生向陆生转变的过渡类群，初步适应陆地生活，但还不完善。 陆地繁殖的变温羊膜动物，真正陆栖脊椎动物的开始。 适应飞翔的恒温动物。 被毛、快速、恒温、胎生、哺乳，最复杂、最高等的脊椎动物。 1

电大《动物学营养基础》期末复习资料.doc

电大《动物学营养基础》期末复习资料 : 复习资料（1620） 一、名解1、必需氨基酸：在动物体内不能合成或合成数量少、合成速度慢，不能满足动物营养需要，必需有饲料提供的氨基酸。2、常量矿物质元素：动物体内含量在0.01%的矿物质元素。3、动物的营养需要：每头（只）动物每天对能量、蛋口质、矿物质和维牛素等营养的需要量。 4、代谢能：可被动物利用的养分中所含有的能量成为代谢能。极饲料总能减去粪能、尿能、消化道气体能后剩余的能量。 5、维持：健康动物体垂不增不减不进行生产，体内各种养分处于收支平衡，化解代谢和合成代谢过程处于平衡状态。 6、过瘤胃蛋白质：未被瘤胃微生物将降解的饲料蛋口进入雏胃和小肠，这部分饲料蛋口质称为过瘤胃蛋口质。 7、必需脂肪酸：在动物体内不能合成，必须由饲料提供的不饱和脂肪酸称为必需脂肪酸。 8、饲养标准：格局大量的实验结果和动物世纪生产的总结，对各种待定动物所需的各种营养物质的额定做出规定，这种系统的营养定额称为饲料标准。 9、消化能：动物采食饲料的总能减去动物排出粪便所含能量即为消化能。10、内源尿氮：动物在维持状态牛存过程屮，必要的最低限度的体蛋口质净分解代谢经尿中排岀的氮称为内源尿氮。1 1、代谢粪氮：动物采食无氮日粮是经粪排出的氮。12、维生素；维持动物正常生理所必需的低分了有机化合物。13、净能：饲料中用于动物维持生命和生产的能最。14、营养物质（营养素）：饲料中能被动物利用，用于维持生命、生产产品的有效成分。15、基础代谢：体况良好的动物在理想条件下维持自身生存所必需的最低限度的能量代谢。16、理想蛋口质：可消化蛋白质中所含可利用氨基酸的比例与动物生长、生产所需氨基酸比例相一致的蛋白质称为理想蛋白质。17、粗纤维：并非一种纯净化合物，它是由纤维素、半纤维素、木质素和果胶所组成的混合物。18、饮料能量净效率：产品中所含能最与用于形成产品的饲料有效能的比值。19、限制性氨基酸：饲料中某种氨基酸的含量低于动物的需要量，同时由于该种氨基酸的缺乏限制了动物对氨基酸的利用，这种缺乏的氨基酸称为限制氨基酸。

七年级上册生物学基础知识

七年级上册生物学基础知识 第一单元生物和生物圈 第一章认识生物 、、、、得出结论、表达和交流。 4、生物因素对生物的影响：自然界中的每一种生物都受到其他生物的影响。 5、生物之间的关系：、、 三、生物对环境的适应和影响

1、生物对环境的适应：每一种生物都具有与其生活的环境相适应的 和、生物的适应性是普遍存在的。 四、生物对环境的影响：生物影响环境，蚯蚓使土壤更加疏松和肥沃。生物与环境是 一个统一的整体，应和谐发展。 五、生态系统 生物部分 3 （ （ （ 4 5 6 1、显微镜的构造（P36） 2、显微镜的使用方法： （1）取镜和安放;右握左托（右手握镜臂，左手托镜座） （2）对光：升、转、看、调 （3）观察：放、压、降、看、升、看、调

（3）整理 取镜和安放：手握住镜臂，手托住镜座。把显微镜放在实验台距边缘7cm左右处，略偏。安装好目镜和物镜。 对光：转动转换器，使倍物镜对准通光孔（物镜前端与载物台要保持2cm 距离）。把一个较大的光圈对准通光孔。左眼注视目镜内，右眼睁开。转动， 入到人的眼睛。 （8）低倍镜下观察到的物像清晰，换上高倍物镜后物像模糊不清，应用螺旋进行调节。 （9）转换物镜时，应转动转换器的边缘，而不能直接用手扳动物镜。 （10）镜头脏了，只能用擦拭。

二．模仿制作临时装片 1．重要的注意事项：材料要；盖盖玻片时要一边先接触水滴，再缓慢放下，避免出现。 2．制作植物细胞临时装片的步骤 观察洋葱表皮细胞： 细胞核：含有物质 2．动物细胞的结构

细胞膜：保护细胞，控制物质出入细胞 细胞质：能流动，可以加速与外界的物质交流 细胞核：含有遗传物质 3．细胞通过产生细胞 （1）分裂的过程：一个细胞分成两个细胞，使细胞数目增多。分裂时，先分 息储存在分子中，而DNA主要存在于中。 5、细胞是物质、能量和遗传信息的统一体 第二章细胞是怎样构成生物体 一、生物体的各种组织是由细胞分裂、分化形成的 1．细胞分裂产生新细胞，这些细胞在形态、结构和功能上逐渐发生了变化，