基因工程基本原理每日一练(2015.2.4)
基因工程基本原理每日一练(2015.2.4)
一、单项选择题（每小题均有1个正确答案，请从每小题的备选答案中选出你认为正确的答案，在答题卡相应位置上用2B铅笔填涂相应答案代码。每小题所有答案选择正确的得分；不答、错答、漏答均不得分。答案写在试题卷上无效。）
1、下述哪项不正确( )
A.Ⅰ度冻伤，伤及表皮
B.浅Ⅱ度冻伤，伤及真皮浅层
C.Ⅱ度冻伤，伤及真皮
D.Ⅲ度冻伤，伤及皮肤全层或皮下组织
E.Ⅳ度冻伤，伤及肌肉骨骼
2、男性，18岁，头部被菜刀砍伤已2天余，伤口6cm，裂开，脓性分泌物较多。处理方法是
A.彻底清创并缝合
B.清创处理伤口不缝合
C.控制感染，定期更换敷料
D.清创、缝合并放置引流
E.清创、湿敷、包扎
3、为了防止交叉感染应安排下列哪一位病人首先换药( )
A.压疮创面
B.下肢慢性溃疡
C.脓肿切开引流
D.清创缝合后拆线
E.下肢开放性损伤
4、吸人性烧伤的最危险并发症是( )
A.感染
B.窒息
C.心衰
D.败血症
E.肺炎
5、损伤后最常见的并发症是( )
A.感染
B.休克
C.急性肾功能衰竭
D.应激性溃疡
E.压疮
6、创伤急救中，首先应( )
A.解除窒息
B.抗休克
C.控制软组织渗血
D.固定骨折
E.包扎伤口
7、9%氯化钠溶液
B.5%葡萄糖生理盐水
C.5%碳酸氢钠溶液
D.平衡盐溶液
E.低低分子右旋糖酐
8、大面积烧伤病人使用电解质溶液扩充血容量，应首选( )
A.
9、成年男性,矿井瓦斯燃烧,烧伤头、面部、双下肢和双手,估计烧伤面积时,下列那些不确切( )
A.头、面、颈部各位3%
B.双前臂为6%
C.躯干为27%
D.双手为5%
E.双大腿、双小腿为32%
10、浅部软组织挫伤，何时可改用热敷( )
A.6小时
B.12小时
C.18 小时
D.24 小时
E.32小时
11、损伤后最常见的并发症是( )
A.感染
B.休克
C.急性肾功能衰竭
D.应激性溃疡
E.压疮
12、创伤急救中，首先应( )
A.解除窒息
B.抗休克
C.控制软组织渗血
D.固定骨折
E.包扎伤口
13、男性，42岁，前臂外伤手术缝合后5天，局部伤口红肿、疼痛,触之有波动感,T39℃，伤口换药时哪项不妥
A.及时拆除缝线，充分引流
B.伤口应每天换药一次
C.正确应用抗菌药及引流物
D.清洁伤口、清除坏死组织
E.伤口应每2—3天换药一次
14、重度烧伤后补液，晶、胶液体的比例正确的是( )
A.一般为l：l
B.一般为l：
15、缝合伤口，下列哪种情况应提前拆线( )
A.伤口缝线有反应
B.伤口红肿、化脓
C.伤口疼痛
D.体温升高
E.以上都不是
16、换药用过的器械处理应( )
A.先清洗后浸泡再灭菌
B.先清洗后灭菌
C.先浸泡后清洗再灭菌
D.先浸泡后清洗
E.先灭菌再清洗
17、小儿Ⅱ度特重度烧伤( )
A.<5%
B.6%～15%
C.16%～25%
D.<25%
E.>25%
18、浅Ⅱ度烧伤的深度是
A.深至皮肤角质层
B.达真皮深层
C.深至皮肤生发层
D.皮下组织浅层
E.达真皮浅层，部分生发层健在
19、金环蛇所含的毒性蛋白质属于( )
A.神经毒
B.血液毒
C.混合毒
D.无毒
E.皮肤毒
20、某农民，男性，46岁，右下肢因房屋倒塌被砖墙压住，4小时后被救出，6小时后人院，主诉尿少，呈暗红色。体检：脉搏58次/分钟，血压86/66mmHg卧右肢体明显肿胀，有瘀血斑;化验血钾
21、足外伤后8小时，伤口污染，处理方法为( )
A.清创后Ⅰ期缝合
B.只清创不缝合
C.单纯清洗伤口
D.伤口药物湿敷
E.单纯换药
22、伤口边缘不整齐，周围组织损伤广泛，出血少，应为( )
A.刺伤
B.割伤
C.擦伤
D.撕脱伤
E.裂伤
23、冻伤病程中下述哪项记述不准确( )
A.局部受冷冻作用时，血管收缩组织缺氧
B.进入冻结阶段细胞可以破裂
C.冻结时细胞内渗透压升高
D.冻结时伤处微血管扩张
E.冻伤可引起组织坏死
24、毒蛇咬伤后为降解伤口内蛇毒，可用于伤口外周作封闭的是( )
A.糜蛋白酶
B.胰蛋白酶
C.淀粉酶
D.脂肪酶
E.蛋白酶
25、创伤急救中，首先应( )
A.解除窒息
B.抗休克
C.控制软组织渗血
D.固定骨折
E.包扎伤口
26、男性，34岁，头面部发生爆炸伤，急需行清创缝合术，清创过程中以下哪项有错( )
A.去除异物及坏死组织
B.伤后6—8小时内清创
C.若伤口污染重清创后可延期缝合
D.若受伤超过12小时，不宜清创缝合
E.伤后12小时内，经彻底清创可Ⅰ期缝
27、毒蛇咬伤与无毒蛇咬伤的主要区别是伤处皮肤( )
A.留下两排对称细小齿痕
B.不留齿痕
C.可留一对大而深的齿痕
D.引起小水疱
E.局部麻木感
28、伤口边缘整齐，周围组织损伤轻，而致血管、神经损伤的是( )
A.刺伤
B.擦伤
C.切割伤
D.撕脱伤
E.火器伤
29、严重烧伤病人死亡的主要原因是( )
A.低血容量休克
B.感染
C.肾衰
D.呼衰
E.高钾血症
30、烧伤抗休克补液时，第一份额24小时输液量从何时计算( )
A.来院时
B.烧伤后第一次输液时
C.口服补液时
D.发生休克时
E.烧伤时
31、在下列急诊患者中首先应处理( )
A.休克
B.尿道断裂
C.开放性气胸
D.头皮撕脱伤
E.开放性骨折
32、损伤的护理诊断，下述哪项不正确( )
A.疼痛
B.体液不足
C.潜在并发症
D.低钾
E.恐惧
33、开放性损伤的主要特点
A.疼痛
B.肿胀
C.伤口
D.出血
E.功能障碍
34、开放性损伤早期处理最重要的是( )
A.清创术
B.应用抗菌药
C.换药
D.止痛
E.补液
35、吸人性烧伤的最危险并发症是( )
A.感染
B.窒息
C.心衰
D.败血症
E.肺炎
36、烧伤病人“体液不足”护理诊断的依据是( )
A.创面有焦痂
B.创面有感染
C.创面渗出过多
D.创面组织坏死较多
E.皮肤屏障作用受到破坏
37、不属于化学性损伤的是( )
A.强酸
B.强碱
C.毒气
D.昆虫咬伤
E.磷烧伤
38、5
C.一般为2：
39、不属于化学性损伤的是( )
A.强酸
B.强碱
C.毒气
D.昆虫咬伤
E.磷烧伤
40、损伤的护理诊断，下述哪项不正确( )
A.疼痛
B.体液不足
C.潜在并发症
D.低钾
E.恐惧
41、下列哪项不属于机械性损伤( )
A.切割伤
B.擦伤
C.挫伤
D.刺伤
E.放射线
42、严重挤压伤病人应用下列何药可防止发生急性肾功能衰竭( )
A.碳酸氢钠及利尿剂
B.稀盐酸及利尿剂
C.氯化胺及利尿剂
D.低分子右旋糖酐
E.白蛋白溶液
43、毒蛇咬伤与无毒蛇咬伤的主要区别是伤处皮肤( )
A.留下两排对称细小齿痕
B.不留齿痕
C.可留一对大而深的齿痕
D.引起小水疱
E.局部麻木感
44、男性，野外工作者，在树丛中被蛇咬伤后,局部皮肤留下一对大而深的齿痕,且伤口出血，周围皮肤迅速出现瘀斑、血疱。应优先采取下列何种急救措施( )
A.伤口排毒
B.首先呼救
C.早期绑扎伤处近心端的肢体
D.立即送医院
E.反复挤压伤口
45、男性，49岁，患有糖尿病，不慎发生前臂切割伤，急诊清创缝合术后5天，切口疼痛，肿胀，T
46、小儿Ⅱ度中度烧伤
A.<5%
B.6%～15%
C.16%～25%
D.<25%
47、下列不属于物理性损伤的是
A.高温
B.低温
C.毒气
D.电流
E.激光
48、女性，5岁小儿，头、面、颈及双上臂烧伤，烧伤面积为( )
A.17%
B.19%
C.2l%
D.23%
E.25%
49、伤口放置预防性橡皮片引流条，拔除时间为( )
A.术后72h
B.术后24～48h
C.术后12～24h
D.术后12h
E.术后3～5d
50、男性，4岁小儿，两下肢烧伤，其烧伤面积为( )
A.38%
B.34%
C.30%
D.41%
E.40%
51、开放性损伤早期处理最重要的是( )
A.清创术
B.应用抗菌药
C.换药
D.止痛
E.补液
52、25%
C.
53、男性，42岁，前臂外伤手术缝合后5天，局部伤口红肿、疼痛,触之有波动感,T39℃，伤口换药时哪项不妥
A.及时拆除缝线，充分引流
B.伤口应每天换药一次
C.正确应用抗菌药及引流物
D.清洁伤口、清除坏死组织
E.伤口应每2—3天换药一次
54、小而深的伤口多见于
A.刺伤
B.切割伤
C.擦伤
E.裂伤
55、对感染伤口的处理下列哪些不妥( )
A.充分引流
B.清创术
C.换药
D.应用抗菌药
E.去除坏死组织
56、按急救顺序对机械性损伤患者最先采取的措施是( )
A.重点检查
B.抢救生命
C.包扎伤口
D.输血、止血
E.固定和搬运
57、有关损伤的急救和转运，下列哪项是错误的( )
A.外露骨折断端应及时复位
B.开放性伤口用无菌纱布覆盖，缠上绷带
C.四肢动脉大出血时可上止血药
D.脊柱骨折的伤员必须卧板床
E.已明确无颅脑及腹部内脏损伤而剧痛的患者，可注射止痛剂
58、伤口边缘不整齐，周围组织损伤广泛，出血少，应为( )
A.刺伤
B.割伤
C.擦伤
D.撕脱伤
E.裂伤
59、挤压综合征主要合并
A.呼吸困难
B.休克
C.心力衰竭
D.肾功能衰竭
E.昏迷
60、成人体重50kg，头、颈部、胸、腹、会阴及双上肢均为Ⅱ°烧伤，伤后第1个24小时补胶体液的量为
A.1225ml
B.1425ml
C.1625ml
D.1825ml
E.2025ml
61、容易引起急性肾衰的损伤是
A.严重挤压伤
B.广泛擦伤
C.严重撕裂伤
D.多处刺伤
62、有关损伤的急救和转运，下列哪项是错误的( )
A.外露骨折断端应及时复位
B.开放性伤口用无菌纱布覆盖，缠上绷带
C.四肢动脉大出血时可上止血药
D.脊柱骨折的伤员必须卧板床
E.已明确无颅脑及腹部内脏损伤而剧痛的患者，可注射止痛剂
63、损伤的护理诊断，下述哪项不正确( )
A.疼痛
B.体液不足
C.潜在并发症
D.低钾
E.恐惧
64、止血带止血应每隔1h放松( )
A.1-2min
B.3-4min
C.5-6min
D.7-8min
E.10min
65、女性，双手、双前臂、右上臂和前胸有3手掌面积的烫伤，创面可见较大水疱疱壁较薄，疼痛较剧。此病人的烧伤深度为( )
A.浅Ⅱo及深Ⅱo
B.Ⅲo
C.浅Ⅱo
D.Ⅱo
E.深Ⅱo及Ⅲo
66、上肢出血应用止血带时不应捆扎在( )
A.上臂上1/3
B.上臂中上1/3
C.上臂中1/3
D.上臂中下1/3
E.上臂下1/3
67、Ⅰ期缝合的伤口术后换药时间为( )
A.2～3天换药1次
B.2～3小时换药1次
C.每日或隔日换药1次
D.每日换药1次或数次
E.每周换药1次
68、烧伤病人输液时，判断有效循环血量的最简便的观察指标是( )
A.尿量
B.血压
C.脉搏
D.呼吸
E.神志
69、对感染伤口的处理下列哪些不妥( )
A.充分引流
B.清创术
C.换药
D.应用抗菌药
E.去除坏死组织
70、下列哪项不是急救时的注意事项( )
A.抢救积极
B.防治抢救中再次受伤
C.立即进行影象学检查
D.防止医源性损伤
E.不可忽视沉默的患者
71、女性，35岁，双上肢烧伤后急诊人院。主诉：患处疼痛较为迟钝，但拔毛时有疼痛感。体检：双上肢布满小水疱，疱皮较厚。估计烧伤深度和预后时下列哪项有错( )
A.Ⅰo烧伤愈后无瘢痕
B.Ⅲo烧伤愈合后有挛缩
C.浅Ⅱo烧伤如无感染不留
D.深Ⅱo烧伤可产生瘢痕
E.深Ⅱo烧伤仅有色素痕迹
72、缝合伤口，下列哪种情况应提前拆线( )
A.伤口缝线有反应
B.伤口红肿、化脓
C.伤口疼痛
D.体温升高
E.以上都不是
73、缝合伤口，下列哪种情况应提前拆线( )
A.伤口缝线有反应
B.伤口红肿、化脓
C.伤口疼痛
D.体温升高
E.以上都不是
74、狂犬病病人的护理诊断“有窒息的危险”的相关因素是( )
A.气道黏膜坏死
B.咽喉肌痉挛
C.口腔黏膜水肿
D.咽肌软瘫
E.喉肌软瘫
75、小儿Ⅱ度特重度烧伤( )
A.<5%
B.6%～15%
C.16%～25%
D.<25%
E.>25%
76、体重50kg的成人，烧伤面积：Ⅰ°10%，Ⅱ°30%，Ⅲ°20% ，伤后第一天的前8小时应
补晶体和胶体液的总量为( )
A.1775m1
B.1975m1
C.1875ml
D.2975ml
E.3175ml
77、小儿Ⅱ度特重度烧伤( )
A.<5%
B.6%～15%
C.16%～25%
D.<25%
E.>25%
78、吸人性烧伤的最危险并发症是( )
A.感染
B.窒息
C.心衰
D.败血症
E.肺炎
79、某男孩，10岁，清晨上学路上，被犬咬伤小腿，伤口流血。应急处理时以下哪项做法有错( )
A.清水彻底冲洗伤口
B.伤口加压包扎止血
C.伤口暂开放引流
D.伤口及时清创
E.挤压伤口周围软组织
80、挤压综合征主要合并
A.呼吸困难
B.休克
C.心力衰竭
D.肾功能衰竭
E.昏迷
81、成人躯干占体表面积的比例( )
A.20%
B.22%
C.23%
D.25%
E.27%
82、大面积烧伤病人使用电解质溶液扩充血容量，应首选( )
A.
83、上肢出血应用止血带时不应捆扎在( )
A.上臂上1/3
B.上臂中上1/3
C.上臂中1/3
D.上臂中下1/3
E.上臂下1/3
84、下列不属于物理性损伤的是
A.高温
B.低温
C.毒气
D.电流
E.激光
85、严重烧伤病人死亡的主要原因是( )
A.低血容量休克
B.感染
C.肾衰
D.呼衰
E.高钾血症
86、下列哪项不属于闭合性损伤( )
A.挫伤
B.扭伤
C.裂伤
D.挤压伤
E.爆震性
87、不属于化学性损伤的是( )
A.强酸
B.强碱
C.毒气
D.昆虫咬伤
E.磷烧伤
88、体重50kg的成人，烧伤面积：Ⅰ°10%，Ⅱ°30%，Ⅲ°20% ，伤后第一天的前8小时应补晶体和胶体液的总量为( )
A.1775m1
B.1975m1
C.1875ml
D.2975ml
E.3175ml
89、9%氯化钠溶液
B.5%葡萄糖生理盐水
C.5%碳酸氢钠溶液
D.平衡盐溶液
E.低低分子右旋糖酐
90、创伤急救中，首先应( )
A.解除窒息
B.抗休克
C.控制软组织渗血
D.固定骨折
E.包扎伤口
91、烧伤后创面感觉迟钝，疼痛轻，多见于( )
A.轻度烧伤
B.Ⅰ度烧伤
C.浅Ⅱ度烧伤
D.深Ⅱ度烧伤
E.Ⅲ度烧伤
92、伤口清创的最佳时机( )
A.伤后12h内
B.伤后12～24h内
C.伤后6～8h内
D.伤后10h内
E.伤后18h内
93、浅Ⅱ度烧伤的深度是
A.深至皮肤角质层
B.达真皮深层
C.深至皮肤生发层
D.皮下组织浅层
E.达真皮浅层，部分生发层健在
94、男性，18岁，头部被菜刀砍伤已2天余，伤口6cm，裂开，脓性分泌物较多。处理方法是
A.彻底清创并缝合
B.清创处理伤口不缝合
C.控制感染，定期更换敷料
D.清创、缝合并放置引流
E.清创、湿敷、包扎
95、5
C.一般为2：
96、Ⅰ期缝合的伤口术后换药时间为( )
A.2～3天换药1次
B.2～3小时换药1次
C.每日或隔日换药1次
D.每日换药1次或数次
E.每周换药1次
97、某男孩上学途中不慎被犬咬伤小腿，伤口出血少许。应该就地采取何种措施( )
A.包扎伤口
B.立即去医院
C.创面涂红汞
D.抬高患肢并限动
E.用大量清水反复冲洗伤口
98、伤口边缘不整齐，周围组织损伤广泛，出血少，应为( )
A.刺伤
B.割伤
C.擦伤
D.撕脱伤
E.裂伤
99、5%
D.3%
E.5%
100、某农民，男性，46岁，右下肢因房屋倒塌被砖墙压住，4小时后被救出，6小时后人院，主诉尿少，呈暗红色。体检：脉搏58次/分钟，血压86/66mmHg卧右肢体明显肿胀，有瘀血斑;化验血钾
101、毒蛇咬伤后为减慢毒素吸收应
A.立即取坐位或卧位
B.立即甩动肢体
C.立即跑步到医院
D.原地走动
E.患肢抬高
102、5
C.一般为2：
103、Ⅲ度烧伤，烧伤深度达( )
A.表皮层
B.表皮与真皮交界处
C.真皮浅层
D.真皮浅层
E.皮肤全层及皮下组织
104、中国九分法计算烧伤面积，哪项是正确的( )
A.头、颈、面各4%
B.躯干为26%
C.双臂为5%
D.双下肢为46%
E.成年女性双足为9%
105、成年男性,矿井瓦斯燃烧,烧伤头、面部、双下肢和双手,估计烧伤面积时,下列那些不确切( )
A.头、面、颈部各位3%
B.双前臂为6%
C.躯干为27%
D.双手为5%
E.双大腿、双小腿为32%
106、男性，38岁，头面部烧伤人院。主诉：患处剧烈疼痛，烧灼感，体检: 有大小不一的水疱形成,疱壁较薄.考虑为浅Ⅱo烧伤时,下列有哪些错( )
A.去疱皮后创伤面潮红
B.愈合后有轻度瘢痕
C.伤及表皮的发生层
D.伤及真皮乳头层
E.伤及真皮深层
107、9%氯化钠溶液
B.5%葡萄糖生理盐水
C.5%碳酸氢钠溶液
D.平衡盐溶液
E.低低分子右旋糖酐
108、上肢出血应用止血带时不应捆扎在( )
A.上臂上1/3
B.上臂中上1/3
C.上臂中1/3
D.上臂中下1/3
E.上臂下1/3
109、某男孩，10岁，清晨上学路上，被犬咬伤小腿，伤口流血。应急处理时以下哪项做法有错( )
A.清水彻底冲洗伤口
B.伤口加压包扎止血
C.伤口暂开放引流
D.伤口及时清创
E.挤压伤口周围软组织
110、伤后12～24h的污染伤口应( )
A.清创后一期缝合
B.清创后湿敷
C.清创后暴露
D.清创后一期缝合加橡皮片引流
E.按感染伤口处理
111、开放性损伤早期处理最重要的是( )
A.清创术
B.应用抗菌药
C.换药
D.止痛
E.补液
112、伤口边缘不整齐，周围组织损伤广泛，出血少，应为( )
A.刺伤
B.割伤
C.擦伤
D.撕脱伤
E.裂伤
113、9mmol/L. 应考虑为( )
A.创伤性休克
B.右下肢挫伤
C.挤压综合征
D.右下肢闭合性损伤
E.右下肢血栓形成
114、烧伤病人输液时，判断有效循环血量的最简便的观察指标是( )
A.尿量
B.血压
C.脉搏
D.呼吸
E.神志
115、浅部软组织挫伤，何时可改用热敷( )
A.6小时
B.12小时
C.18 小时
D.24 小时
E.32小时
116、冻伤病程中下述哪项记述不准确( )
A.局部受冷冻作用时，血管收缩组织缺氧
B.进入冻结阶段细胞可以破裂
C.冻结时细胞内渗透压升高
D.冻结时伤处微血管扩张
E.冻伤可引起组织坏死
117、冻伤病程中下述哪项记述不准确( )
A.局部受冷冻作用时，血管收缩组织缺氧
B.进入冻结阶段细胞可以破裂
C.冻结时细胞内渗透压升高
D.冻结时伤处微血管扩张
E.冻伤可引起组织坏死
118、一手掌五指并拢为体表面积的( )
A.1%
B.
119、严重烧伤病人死亡的主要原因是( )
A.低血容量休克
B.感染
C.肾衰
D.呼衰
E.高钾血症
120、某农民，男性，46岁，右下肢因房屋倒塌被砖墙压住，4小时后被救出，6小时后人院，主诉尿少，呈暗红色。体检：脉搏58次/分钟，血压86/66mmHg卧右肢体明显肿胀，有瘀血斑;化验血钾
121、对严重挤压伤患者，护理时除严密观察生命体征外，还应特别注意( )
A.伤口肿胀程度
B.精神状态
C.肢端温度
D.损伤部位疼痛情况
E.尿量和尿色
122、烧伤抗休克补液时，第一份额24小时输液量从何时计算( )
A.来院时
B.烧伤后第一次输液时
C.口服补液时
D.发生休克时
E.烧伤时
123、大面积烧伤病人使用电解质溶液扩充血容量，应首选( )
A.
基因工程和细胞工程
第一讲基因工程和细胞工程 1．(2014·广东卷，25)(双选)利用基因工程技术生产羧酸酯酶(CarE)制剂的流程如图所示，下列叙述正确的是( ) A．过程①需使用逆转录酶 B．过程②需使用解旋酶和PCR获取目的基因 C．过程③使用的感受态细胞可用NaCl溶液制备 D．过程④可利用DNA分子杂交鉴定目的基因是否已导入受体细胞 解析：过程①是以mRNA为模板合成DNA的过程，即逆转录过程，需要逆转录酶的催化，A正确；过程②表示利用PCR扩增目的基因，在PCR过程中，不需要解旋酶，是通过控制温度来达到解旋的目的，B错误；利用氯化钙处理大肠杆菌，使之成为感受态细胞。C错误；检测目的基因是否成功导入受体细胞的染色体DNA中，可以采用DNA分子杂交技术，D正确。 答案：AD 2．(2014·浙江卷，3)下列关于动物细胞培养的叙述，正确的是( ) A．连续细胞系的细胞大多具有二倍体核型 B．某些癌细胞在合适条件下能逆转为正常细胞 C．由多个祖细胞培养形成的细胞群为一个克隆 D．未经克隆化培养的细胞系细胞具有相同的性状 解析：连续细胞系的细胞其核型已发生改变；一个祖细胞培养形成的细胞群才为一个克隆；未经克隆化培养的细胞系细胞可能是不同细胞分裂形成的，其性状可能不同。 答案：B
3．(2014·重庆卷，4)如图是利用基因工程培育抗虫植物的示意图。以下相关叙述，正确的是( ) A．②的构建需要限制性核酸内切酶和DNA聚合酶参与 B．③侵染植物细胞后，重组Ti质粒整合到④的染色体上 C．④的染色体上若含抗虫基因，则⑤就表现出抗虫性状 D．⑤只要表现出抗虫性状就表明植株发生了可遗传变异 解析：构建载体需要限制酶和DNA连接酶，A错误；③侵染植物细胞后，重组Ti质粒上的T－DNA整合到④的染色体上，B错误；染色体上含有目的基因，但目的基因也可能不能转录或者不能翻译，或者表达的蛋白质不具有生物活性，C错误；植株表现出抗虫性状，说明含有目的基因，属于基因重组，为可遗传变异，D正确。 答案：D 4．(2014·江苏卷，23改编)下列关于基因工程技术的叙述，正确的是( ) A．切割质粒的限制性核酸内切酶均特异性地识别6个核苷酸序列 B．PCR反应中温度的周期性改变是为了DNA聚合酶催化不同的反应 C．载体质粒通常采用抗生素合成基因作为筛选标记基因 D．抗虫基因即使成功地插入到植物细胞染色体上也未必能正常表达 解析：限制性核酸内切酶大多是特异性识别6个核苷酸序列，但也有识别序列由4、5或8个核苷酸组成的，A错误；PCR中耐高温的DNA聚合酶只是在延伸阶段发挥催化作用，B 项错误；载体质粒上抗生素抗性基因可作为标记基因，供重组DNA的鉴定和选择，不是抗生素合成基因，C错误；目的基因导入了受体细胞不一定就都能正常表达，D正确。 答案：D 5．(2014·广东卷，29)铁皮石斛是我国名贵中药，生物碱是其有效成分之一，应用组
高考生物大二轮复习 专题突破练18 基因工程和细胞工程(含解析)
专题突破练18 基因工程和细胞工程 1.胰岛素是人体内唯一一种能降低血糖的激素,对于糖尿病的治疗具有重要的意义,胰岛素基因在人体细胞内经转录、翻译形成的胰岛素原需要经过内质网、高尔基体的加工才能形成胰岛素。如图是运用基因工程技术制备胰岛素的部分流程图,据图回答下列有关问题。 (1)①过程表示从(填“胰岛A细胞”“胰岛B细胞”或“胰岛A细胞和胰岛B细胞”)中获取胰岛素基因相应mRNA,原因 是。 (2)②过程需要的酶是,得到的胰岛素基因可以通过 (填技术的中文名称)进行扩增,该技术除可以将目的基因大量扩增外,还可以用于从DNA分子上获取目的基因,至少需要循环次,才能得到目的基因。 (3)③过程需要用到的酶是,A除含有胰岛素基因外,还应 有,以便进行目的基因的鉴定与选择。 (4)④过程需用处理大肠杆菌,使其成为,以便从周围环境中吸收DNA分子。为了检测胰岛素基因是否在受体大肠杆菌中成功表达,可采用 技术。 (5)通过图示过程得到的是(填“胰岛素”或“胰岛素原”),原因 是 。 2.研究人员将乙肝病毒的表面抗原(HBsAg)基因转入番茄幼叶细胞中,获得能产生乙肝疫苗的番茄植株。回答下列问题。 (1)利用PCR技术扩增HBsAg基因时,目的基因DNA受热变性后的单链与引物互补序列结合,在 酶的作用下进行延伸。设计的引物含有ClaⅠ酶切位点和SacⅠ酶切位点,用作载体的DNA分子(填“含有”或“不含有”)ClaⅠ酶切位点和SacⅠ酶切位点,理由 是。
(2)将HBsAg基因导入番茄幼叶细胞最常用的方法是,该方法可以使目的基因插入到细胞中的DNA上。 (3)可利用植物组织培养技术获得转基因番茄植株,该技术利用的原理 是。 (4)通过电镜对番茄果实提取物进行观察,发现了HBsAg颗粒,说明目的基因导入受体细胞 后。用获得的转基因番茄果实饲喂小鼠,如果在小鼠血清中检测到,说明转基因植物疫苗可口服。3.利用雄性不育系生产杂种一代较为经济、有效,该方法在水稻、玉米、油菜等作物中应用广泛。芥菜是我国著名的蔬菜之一,育种工作者运用基因工程将烟草TA29花药绒毡层特异启动子驱动下的核糖核酸酶Barnase基因导入芥菜细胞中,获得彻底败育的雄性不育植株。请回答下列问题。(1)基因工程中获取Barnase基因的方法有、利用PCR技术扩增和人工合成。利用PCR扩增目的基因时,一般要经历三十多次循环,每次循环可以分为变性、 和三步。 (2)将获取的Barnase基因转入芥菜细胞的常用方法为,Barnase基因需插入到Ti质粒的上,该重组质粒还必须含有,用于鉴别受体细胞中是否含有目的基因。 (3)检测Barnase基因在转基因芥菜植株中是否转录出mRNA的方法 是,请简要写出该方法的实验思 路: 。 4.转基因抗虫棉的培育过程如图所示。苏云金芽孢杆菌中的抗虫基因(阴影表示)与质粒上有 PstⅠ、SmaⅠ、Eco RⅠ、ApaⅠ等限制酶的切割位点(箭头所示),质粒上还有唯一标记基因——抗卡那霉素基因(阴影表示)。有人通过实验,获得的农杆菌细胞有的未被转化,有的被转化。被转化的农杆菌细胞有三种,分别是含有环状目的基因、含有质粒载体、含有插入了目的基因的重组质粒的农杆菌。请据此回答下列问题。 (1)构建含抗虫基因的重组质粒A时,应选用的限制酶是,对进行切割。
基因工程基本原理
一、 A 型题 1. F因子从一个细胞转移至另一个细胞的基因转移过程称为 (A) 转导 (B) 转化 (C) 转座 (D) 转染 (E) 接合 2. 通过自动获取或人为地供给外源DNA使受体细胞获得新的遗传表型，称为 (A) 转化 (B) 转座 (C) 接合 (D) 转导 (E) 转染 3. 由插人序列和转座子介导的基因移位或重排称为 (A) 接合 (B) 转染 (C) 转导 (D) 转座 (E) 转化 4. 由整合酶催化、在两个DNA序列的特异位点间发生的整合称
(A) 位点特异的重组 (B) 同源重组 (C) 随机重组 (D) 基本重组 (E) 人工重组 5. 发生在同源序列间的重组称为 (A) 非位点特异的重组 (B) 位点特异的重组 (C) 基本重组 (D) 人工重组 (E) 随机重组 6. 限制性核酸内切酶切割DNA后产生 (A) 5’磷酸基和3’羟基基团的末端 (B) 5’磷酸基和3’磷酸基团的末端 (C) 5’羟基和3’羟基基团的末端 (D) 3’磷酸基和5’羟基基团的末端 (E) 以上都不是 7. 可识别并切割特异DNA序列的称 (A) 非限制性核酸外切酶 (B) 限制性核酸内切酶 (C) 限制性核酸外切酶 (D) 非限制性核酸内切酶
(E) DNA酶（DNase） 8. 在重组DNA技术中催化形成重组DNA分子的是DNA (A) 解链酶 (B) 聚合酶 (C) 连接酶 (D) 内切酶 (E) 拓扑酶 9. 在重组DNA技术领域所说的分子克隆是指 (A) 建立多克隆抗体 (B) 建立单克隆抗体 (C) 有性繁殖DNA (D) 无性繁殖DNA (E) 构建重组DNA分子 10. 在下述双链DNA序列（仅列出其中一条链序列）中不属于完全回纹结构的是 (A) GGAATTCC (B) TGAATTCA (C) AGAATTCT (D) CGTTAAGC (E) AGATATCT 11. 无性繁殖依赖DNA载体的最基本性质是 (A) 卡那霉素抗性 (B) 青霉素抗性
植物基因工程实验技术
植物基因工程实验技术
编者: 赵 燕
主审: 张学文
湖南农业大学植物科学实验教学中心
2007 年 4 月
前
言
基因工程是现代生物技术的核心, 也是现代分子生物学研究的重 要手段. 掌握基因工程技术对于生物技术专业及其它生物学相关专业 学生都很重要. 基因工程本身是由一系列分子生物学操作技术组成的系统性技 术体系,本实验指导侧重于 DNA 重组操作,将基因工程操作的常用 和核心技术组织起来, 以为我校生物技术本科生及有关专业研究生基 因工程实验提供简单而明确的指导. 为适应基因工程的飞速发展,一些生物技术公司匠心独运,开发 出专门的试剂盒,使一些复杂的实验操作简单化了.这对于实验者来 说自然是好事,但也使实验者动手胜于用脑.对于实验人员来说,一 定应知其然并知其所以然, 才会在实验中运用自己的知识予以创新性 的发展.期望本实验指导不成为实验中的教条.
编
者
2007 年 4 月
1
目
实验一 实验二 实验三 实验四 实验五 实验六 实验七 实验八 实验九 实验十 附录:
录
大肠杆菌的对照培养,单菌落的分离及菌种保存 ...............3 强碱法小量制备质粒 DNA.....................................................5 琼脂糖凝胶电泳......................................................................7 植物总 DNA 的提取,纯化和检测 ........................................9 DNA 的 PCR 扩增................................................................. 11 植物总 RNA 的分离 .............................................................15 RT-PCR..................................................................................17 体外重组分子的构建,筛选及检测.....................................21 植物表达载体的构建,筛选及检测.....................................22 植物遗传转化技术 ................................................................23 实验中常用的仪器与器皿 .....................................................24
2
基因工程和细胞工程
基因工程和细胞工程 一、单选题 1．如图是基因工程主要技术环节的一个基本步骤，这一步骤需要用到的工具是 A. DNA连接酶和解旋酶 B. DNA聚合酶和限制酶 C. 限制酶和DNA连接酶 D. DNA聚合酶和RNA聚合酶 【答案】C 【解析】图示表示基因表达载体的构建过程，该过程首先需要用限制酶切割含有目的基因的外源DNA分子和质粒，其次还需要用DNA连接酶将目的基因和质粒连接形成重组质粒，故选C。 2．下面关于植物细胞工程的叙述,正确的是（） A．叶肉细胞已经高度分化,无法表现出全能性 B．叶肉细胞经再分化过程可形成愈伤组织 C．融合植物叶肉细胞时,应先去掉细胞膜 D．叶肉细胞离体培养时,可以表现出全能性 【答案】D 【解析】 试题分析：叶肉细胞已经高度分化，但在体外培养的条件下也能表现出全能性，A错误；叶肉细胞经脱分化过程可形成愈伤组织，B错误；融合植物叶肉细胞时，应先去掉细胞壁，C错误；叶肉细胞离体培养时，可以表现出全能性，形成完整植株，D正确 考点：本题考查植物组织培养的相关知识，要求考生识记植物组织培养的原理、过程、条件等基础知识，掌握植物细胞具有全能性的原因，能结合所学的知识准确判断各选项。 3．如图为白菜一甘蓝杂种植株的培育过程。下列说法正确的是（） A．图示白菜一甘蓝植株不能结籽 B．愈伤组织的代谢类型是自养需氧型 C．上述过程中包含着有丝分裂、细胞分化和减数分裂
D．白菜一甘蓝杂种植株具有的性状是基因选择性表达的结果 【答案】D 【解析】白菜和甘蓝都是二倍体，它们的体细胞杂交后培育的“白菜-甘蓝”杂种植株中2个染色体组来自白菜，2个染色体组来自甘蓝，因为“白菜-甘蓝”属于异源四倍体，是可育的，能产籽，故A错误；愈伤组织是一种高度液泡化的呈无定型状态的薄壁细胞，不能进行光合作用产生有机物，因此愈伤组织的代谢类型是异养需氧型，故B错误；上述过程包括去壁、原生质体融合、植物组织培养等过程，其结果是形成“白菜-甘蓝”幼苗，并未发育到性成熟个体，因此整个过程中有有丝分裂和细胞分化，没有减数分裂过程，故C错误；任何性状都是基因选择性表达的结果，故D正确． 【考点定位】植物体细胞杂交的应用 【名师点睛】据图分析，植物细胞壁的成分是纤维素和果胶，去壁所用的是纤维素酶和果胶酶；原生质体融合所用的方法有物理法和化学法．物理法包括离心、振动、电激等，化学法一般是用聚乙二醇；再生细胞壁形成杂种细胞；脱分化形成愈伤组织，再分化形成“白菜一甘蓝”幼苗． 4．下列有关细胞工程的叙述中正确的一项是（） A．克隆不是无性繁殖 B．用体细胞克隆动物是通过核移植实现的 C．灭活病毒通过溶解磷脂双分子层诱导动物细胞融合 D．动物细胞培养与植物组织培养所用的培养基成分一样 【答案】B 【解析】 试题分析：克隆属于无性繁殖，故A错误。用体细胞克隆动物必须通过核移植才能实现，故B正确。灭活病毒诱导动物细胞融合不是溶解磷脂双分子层而是通过改变膜脂分子排列实现的，故C错误。动物细胞培养液通常需要加入血清，植物组织培养通常需要加入植物激素，故D错误。 考点：本题考查细胞工程相关知识，意在考察考生对知识点的识记理解掌握程度。5．以下哪种物质不可以用于植物细胞的诱导融合剂（） A．PEG B．灭活的病毒 C．离心 D．振动电激 【答案】B 【解析】 试题分析：灭活的病毒是动物细胞工程的诱导剂，不能用于植物细胞工程，故选B。 考点：本题考查植物细胞工程等相关知识，意在考察考生对知识点的识记理解掌握程度。6．下列有关植物细胞工程的叙述，正确的是（） A．在植物组织培养过程中，细胞的遗传物质一般都发生改变 B．植物细胞只要在离体状态下即可表现出全能性 C．植物组织培养过程中始终要保持适宜的光照 D．植物耐盐突变体可通过添加适量NaCl 的培养基培养筛选而获得 【答案】D 【解析】 试题分析：在植物组织培养过程中，细胞的遗传物质一般不发生改变，A错误；植物细胞的全能性指离体的组织器官的经过培养，发育成完整个体的潜能，B错误；植物组织培养过程中开始是要避光，C错误；植物耐盐突变体可通过添加适量NaCl 的培养基培养筛选而获得，D正确；答案是D。 考点：本题考查植物细胞工程的相关知识，意在考查考生理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力。 7．植物组织培养的过程可以归纳为：①? ?再分化③→④；对此叙述有错误的 ?→ ?→ ?脱分化②? 是( ) A．②→③的再分化过程中，培养基中需要添加细胞分裂素与生长素
农杆菌介导的植物转基因技术实验指导
农杆菌介导的植物转基因技术 一、实验目的 1 了解低温离心机、恒温振荡培养箱、超净工作台等仪器的使用。 2 学习真核生物的转基因技术及农杆菌介导的转化原理；掌握农杆菌介导转化植物的实验方法，了解转基因技术的操作流程。 二、实验原理 农杆菌是普遍存在于土壤中的一种革兰氏阴性细菌，它能在自然条件下趋化性地感染大多数双子叶植物的受伤部位，并诱导产生冠瘿瘤。农杆菌通过侵染植物伤口进入细胞后，可将 T-DNA插入到植物基因组中。因此，农杆菌是一种天然的植物遗传转化体系。人们将目的基因插入到经过改造的T-DNA区，借助农杆菌的感染实现外源基因向植物细胞的转移与整合，然后通过细胞和组织培养技术，再生出转基因植株。 实验一培养基配制 一、仪器和试剂 1、仪器：高压灭菌锅，超净工作台 2、药品：Beef extract （牛肉浸膏） 5g/L ，Yeast extract （酵母提取物） 1g/L ，Peptone （蛋白胨） 5g/L ，Sucrose （蔗糖） 5g/L ，MgSO4.7H2O 0.4g/100ml ，Agar （琼脂）1.5g/100ml，MS粉，有机溶液，肌醇，Fe盐，NAA（萘乙酸），6-BA （6-苄氨基腺嘌呤），卡那霉素（kan），利福平（rif ），链霉素（str ）。 二、实验方法 第一组配制YEB固体培养基 1、配制250mlYEB固体培养基：先称取1.25g Beef extract （牛肉浸膏）； 1.25g Peptone （蛋白胨）；0.25g Yeast extract （酵母提取物）；1.25g Sucrose
（蔗糖）;1g MgS04.7H2O琼脂粉3.75g ;将上述药品置于250ml三角瓶中，用量筒称取 200ml蒸馏水将其溶解混匀，然后再定容至250ml,用NaOH调pH=7.4。 2、灭菌：将盛有250ml 培养基的三角瓶封口，在三角瓶表面写清培养基名称，用高压灭菌锅进行灭菌。 3、抗生素的加入：高压灭菌后，待培养基温度降到50-60 C时（手可触摸）加入已经过滤好的抗生素（100用/ml kan+50⑷/ml Str+ 50旧/ml rif ）,以免温度过高导致抗生素失效。 4 、倒板：将抗生素与培养基混匀，每个平皿倒15ml 培养基，可以倒16个平皿，倒完后打开平皿盖，在紫外灯下照10min,等待培养基凝固，盖上平皿盖，封口备用。 第二组配制YEB液体培养基 1、配制500mlYEB液体培养基：先称取2.5g Beef extract （牛肉浸膏）;2.5g Peptone （蛋白胨）; 0.5g Yeast extract （酵母提取物）; 2.5g Sucrose （蔗糖）; 2g MgSO4.7H2O将上述药品置于500ml三角瓶中，用量筒称取450ml蒸馏水将其溶解混匀，然后再定容至500ml，用NaOH调pH=7.4。 2、灭菌：将盛有500ml 培养基的三角瓶封口，在三角瓶表面写清培养基名称，用高压灭菌锅进行灭菌。 3、抗生素的加入：高压灭菌后，待培养基温度降到50-60 C时（手可触摸）加入已经过滤好的抗生素（100用/ml kan+50⑷/ml Str+ 50旧/ml rif ），以免温度过高导致抗生素失效。 4 、分装：将培养基分别分装到试管和三角瓶中，每个试管中分装5ml，分 装12个试管。每个三角瓶中倒入35ml，共12个三角瓶。 5、分装好后，封口备用。 第三组配制MS液体培养基 1、配制500mlMS液体培养基：先在500ml三角瓶中加入400ml蒸馏水，称取2.15gMS 粉置于蒸馏水中，搅拌均匀；再向其中加入5ml 100倍Fe盐浓缩液；5ml100倍肌醇浓缩液；5ml有机溶液的混合液，然后混匀定容至500ml,用NaOH 调pH=5.8。
2018年高考生物二轮复习专题突破训练15基因工程与细胞工程有答案
专题突破练15 基因工程与细胞工程 1.(2017东北三省三校一联,38)马铃薯是重要的经济作物,人类在(马铃薯的)基因育种方面取得丰硕成果。 (1)马铃薯是双子叶植物,常用法将目的基因导入马铃薯体细胞中。构建好的基因表达载体包括目的基因、、、、复制原点五部分。 (2)马铃薯得病会导致产量下降。基因工程中常用的抗病基因为(写一种即可)。 (3)科学家还培育出抗除草剂的转基因马铃薯,主要从两个方面进行设计: ①修饰除草剂作用的靶蛋白,使其对除草剂,或使靶蛋白过量表达,植物吸收除草剂后仍能正常代谢。 ②引入酶或酶系统,在除草剂发生作用前。 (4)将目的基因导入受体细胞后,还需对转基因植物进行。 答案 (1)土壤农杆菌转化启动子终止子标记基因(2)病毒外壳蛋白基因、病毒的复制酶基因、几丁质酶基因和抗毒素合成基因(3)①不敏感②被分解(4)目的基因的检测与鉴定 解析 (1)将目的基因导入植物细胞的常用方法是土壤农杆菌转化法。构建好的基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子、标记基因、复制原点等。(2)基因工程中常用的抗病基因有病毒外壳蛋白基因、病毒的复制酶基因、几丁质酶基因和抗毒素合成基因(写一种即可)。(3)①为了避免马铃薯对除草剂敏感,可以修饰除草剂作用的靶蛋白;或者增加马铃薯中靶蛋白的表达量,这样植物吸收除草剂后仍能正常代谢。②还可以通过基因工程引入能够快速分解除草剂的酶或酶系统,从而将除草剂在发生作用前分解。(4)将目的基因导入受体细胞后,需检测目的基因是否导入受体细胞。即使目的基因导入了受体细胞,也不一定能够表达,故一定要在受体生物中检测出目的基因的产物——相关蛋白质,即要进行目的基因的鉴定。 2.(2017湖北武汉一模,38)基因敲除是应用DNA重组原理发展起来的一门新兴技术。“基因敲除细胞”的构建过程如下: 第一步,从小鼠囊胚中分离出胚胎干细胞(ES),在培养基中扩增。这些细胞中需要改造的基因称为“靶基因”; 第二步,构建基因表达载体。取与靶基因序列同源的目的基因(同源臂),在同源臂上接入neo R(新霉素抵抗基因)等。由于同源臂与靶基因的DNA正好配对,所以能像“准星”一样,将表达载体准确地带到靶基因的位置; 第三步,将表达载体导入胚胎干细胞,并与其内靶基因同源重组,完成胚胎干细胞的基因改造; 第四步,基因改造后的胚胎干细胞增殖、筛选。基本原理如图所示。 请根据上述资料,回答下列问题。 (1)实施基因工程的核心步骤是,基因表达载体中的是位于基因首端的有特殊结构的DNA片段;在构建的过程中所需要的工具酶是。 (2)如果要获得一只含目的基因的小鼠,则选择的受体细胞通常是,原因是。 (3)上述资料中neo R基因的作用最可能是。为了鉴定目的基因是否成功表达,
基因工程和细胞工程测试题(附答案,可用于考试)
5 高二生物《基因工程和细胞工程》测试题姓名班级 （时间：90分钟分数：100分） 一．选择题（本大题包括25题，每题2分，共50分。每题只有一个选项符合题意。） 1．以下说法正确的是（） A.所有的限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列 B．质粒是基因工程中惟一的运载体 C．运载体必须具备的条件之一是：具有多个限制酶切点，以便与外源基因连接D．质粒是广泛存在于细菌细胞中的一种颗粒状细胞器 2．植物体细胞杂交与动物细胞工程中所用技术与原理不．相符的是（） A．纤维素酶、果胶酶处理和胰蛋白酶处理——酶的专一性 B．植物组织培养和动物细胞培养——细胞的全能性 C．植物体细胞杂交和动物细胞融合——生物膜的流动性 D．紫草细胞培养和杂交瘤细胞的培养——细胞分裂 3．有关基因工程的叙述正确的是（） A.限制性内切酶只在获得目的基因时才用 B.重组质粒的形成在细胞内完成 C.质粒都可作运载体 D.蛋白质的结构可为合成目的基因提供资料 4．能克服远缘杂交障碍培育农作物新品种的技术是（） A.基因工程 B.组织培养 C.诱变育种 D.杂交育种 5．下列关于动物细胞培养的叙述，正确的是( ) A．培养人的效应T细胞能产生单克隆抗体 B．培养人的B细胞能够无限地增殖 C．人的成熟红细胞经过培养能形成细胞株 D．用胰蛋白酶处理肝组织可获得单个肝细胞 6．PCR技术扩增DNA,需要的条件是( ) ①目的基因②引物③四种脱氧核苷酸 ④DNA聚合酶等⑤mRNA⑥核糖体 A、①②③④ B、②③④⑤ C、①③④⑤ D、①②③⑥ 7．以下对DNA的描述，错误的是（） A.人的正常T淋巴细胞中含有人体全部遗传信息 B.同种生物个体间DNA完全相同 C.DNA的基本功能是遗传信息的复制与表达 D.一个DNA分子可以控制多个性状 8. 蛋白质工程中直接需要进行操作的对象是（） A.氨基酸结构 B.蛋白质空间结构 C.肽链结构 D.基因结构 9．细胞工程的发展所依赖的理论基础是（） A.DNA双螺旋结构模型的建立 B.遗传密码的确立及其通用性的发现 C.生物体细胞全能性的证明 D.遗传信息传递的“中心法则”的发现 10．下列不是基因工程中的目的基因的检测手段的是：（） A.分子杂交技术 B.抗原—抗体杂交 C.抗虫或抗病的接种 D.基因枪法 11．在以下4种细胞工程技术中，培育出的新个体中，体内遗传物质均来自一个亲本的是（） A.植物组织培养 B. 单克隆抗体 C. 植物体细胞杂交 D.细胞核移植 12．动物细胞融合与植物细胞融合相比特有的是（） A.基本原理相同 B.诱导融合的方法类 C.原生质体融合 D.可用灭活的病毒作诱导剂 13．下列哪一项属于克隆（） A．将鸡的某个DNA片段整合到小鼠的DNA分子中 B．将抗药菌的某基因引入草履虫的细胞内 C．将鼠骨髓细胞与经过免疫的脾细胞融合成杂交瘤细胞
基因工程和细胞工程
专题八现代生物科技专题 第一讲基因工程和细胞工程 1.(2012·浙江卷，1)用动、植物成体的体细胞进行离体培养，下列叙述正确的是() A．都需要用CO2培养箱 B．都需要用液体培养基 C．都要在无菌条件下进行 D．都可体现细胞的全能性 2．下列关于运用植物组织培养技术产生新个体的叙述，错误的是() A．属于无性生殖 B．主要理论依据是植物细胞具有全能性 C．培养过程中由于人工培养基含大量营养，不需光照就能发育成完整植株 D．人工培养基中含植物生长发育所需的全部营养物质，包括矿质元素、糖、维生素等3．(2012·安徽卷，4)2008年诺贝尔化学奖授予了“发现和发展了水母绿色荧光蛋白”的三位科学家。将绿色荧光蛋白基因的片段与目的基因连接起来组成一个融合基因，再将该融合基因转入真核生物细胞内，表达出的蛋白质就会带有绿色荧光。绿色荧光蛋白在该研究中的主要作用是() A．追踪目的基因在细胞内的复制过程 B．追踪目的基因插入到染色体上的位置 C．追踪目的基因编码的蛋白质在细胞内的分布 D．追踪目的基因编码的蛋白质的空间结构 4．限制酶是一种核酸内切酶，可识别并切割DNA分子上特定的核苷酸序列。下图为四种限制酶Bam HⅠ、EcoRⅠ、HindⅢ和BglⅡ的识别序列和切割位点： 切割出来的DNA黏性末端可以互补配对的是() A．Bam HⅠ和EcoRⅠ B．Bam HⅠ和HindⅢ C．Bam HⅠ和BglⅡ D．EcoRⅠ和HindⅢ 5．对于不同的生物，将重组基因导入受体细胞的方法有差异，下列方法不合适的是 () A．以质粒为运载体，利用大肠杆菌生产人的胰岛素时，可用氯化钙处理大肠杆菌B．以噬菌体为运载体，利用大肠杆菌生产人的凝血因子时，可使其直接侵染大肠杆菌C．以质粒为运载体，利用转基因羊生产人的乳铁蛋白时，可用显微注射技术将重组基因导入受精卵
2019高考生物大二轮复习专题十六基因工程和细胞工程练案
专题十六基因工程和细胞工程 ．(·深圳调研)叶绿体转基因技术是将外源基因整合到叶绿体基因组中，该技术能有效改良 植物的品质。请回答：转基因技术的核心步骤是 基因表达载体的构建 () 限制酶和连接 ，完成该步骤所需要的酶有 酶 。 将植物体细胞处理得到原生质体，再通过 () 农杆菌转化法 基因枪 或 法，将目的基因导入原生 植物组织培养 质体，使原生质体再生出细胞壁之后，通过 技术培养可得到相应的转基因幼苗。()来自原核生物中有重要价值的外源基因，无需改造和修饰就可在叶绿体中高效表达，就此 分析，原因是 叶绿体与原核生物结构类似 由 ( 于叶绿体大多数基因的结构、转录与翻译系统均与原 ) 核生物类似 。()对大多数高等植物而言，与传统的细胞核转基因相比，叶绿体转基因更稳定，其遗传方式 “ 或 不遵循 ” “ 不遵循 答 ”) 遵循 ( 卵细胞 ”) 传给后代，从 分离定律，不会随 或 “ 花粉 花粉 (“ ” (“ 母本 而保持了 父本 ” ”) 的遗传特性。 母本 “ 或 [解析] ()基因工程的核心步骤是基因表达载体的构建，所需要的酶有限制酶和连接酶；() 植物细胞导入受体细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法。原生质体再生细胞壁之后，通过植物组织培养获取幼苗；()叶绿体与原核生物结构类似。()分离定律适用于有性生殖 过程中细胞核遗传，故叶绿体转基因不遵循分离定律，为母系遗传。．(·天津市和平区生物一模)已知某传染性疾病的病原体为病毒，该病毒表面的蛋白为主要 抗原。疫苗的生产和抗体的制备流程如图所示。请回答下列问题： ① 过程 代表的是 () ③ 逆转录 构建基因重组载体时，启动子和终止子是重新构建的，它 ，过程 聚合酶 们应该能被受体细胞的 所识别，以便于其催化转录过程。()如图为基因的结构示意图，已知Ⅱ区的碱基数是个，其中阴影区域碱基数是个，空白区域中和的总数共有个，则由该区域能指导蛋白质合成的片段转录产生的中和总数是个。() 在给小鼠皮下注射蛋白时，要重复注射几次的目的是通过二次免疫，增加小鼠体内的 浆细 胞 数目。() 在将进行扩大培养前，至少需要经过次筛选，第一次是将 杂交瘤细胞 筛选出来，第二次是 将 能分泌所需抗体的杂交瘤细胞 筛选出来。() 对健康人进行该传染病免疫预防时，可选用图中基因工程生产的 蛋白 来制备疫苗。对该传 染病疑似患者确诊时，可以从疑似患者体内分离出病毒与已知病毒进行核酸序列比较，或用图中
植物基因工程的重要意义
植物基因工程的重要意义 关键词：植物基因工程技术，转基因 正文： 作为21世纪科技的重要发展项目，基因工程技术在植物方面应用的意义主要体现在以下五个方面。 1．植物基因工程技术可以实现超远缘育种,克服不亲和障碍 我们知道，在作物育种中最早应用的是植物组织培养技术，这种技术已在花卉、药材、森林和农作物育苗得到广泛的应用，我国已在甘蔗、人参和马铃薯等方面收到显著经济效益。此外，还可从培养细胞或再生植株选择所需要的突变体。如Shepard(1983)从马铃薯培养物中选出一种能抗腹疫病(Phytophthorainfectans)的抗性植株以及利用培养细胞生产诸如喜树碱等化合物。但以上方法只是同类植株的基因改变。此外人们还对植物原生质体融合进行了研究。但是植物细胞融合后性状的表达，取决于它在以后有丝分裂时染色体是否发生交换或丢失情况。[1]但到目前为止，由融合的细胞而能培养成植株者容寥寥无几，这可以说是克服远缘杂交不亲和障碍的最早例子。如果说细胞融合可以克服种属之间不亲和性，而基因重组则可在更大范围内进行了。动物基因如萤火虫的发光蛋白基因,寒带鱼的抗冻蛋白基因,蛇、蝎的毒液基因等也已转移给作物,分别获得能发光的转基因烟草,抗寒的转基因甜菜、转基因番茄和抗虫的转基因棉花等。[2]由此可见，外源基因导入植物细胞后引发的改变是巨大的。 2．植物基因工程技术可以增强作物改良力度,促进品种更新换代 作物改良基本有两方面，其中提高作物品种的光合与养分效率、病害与虫害抗性正在成为植物基因工程的研究重点,促使作物品种适应低温、干旱、雨涝、土壤瘠薄和盐碱以及温室效应等新旧灾害从而提高作物产量，也已成为基因工程育种的主要内容。 农业生产中，增加粮食产量无非依靠两种途径:一是提高作物品种的生产能力;二是减轻环境因素对作物生长的不利影响。据报道，全世界每年因虫害、病害、草害以及寒冷、干旱、盐碱等灾害对粮食生产所造成的损失令人惊叹：全球每年因虫害与病害所造成的作物减产达30%以上，因杂草所损失的粮食至少在10%以上，再加上低温、干旱和盐碱等各种因素，全世界每年至少要损失粮食产量的一半以上。[3～5] 同时，为了防治病虫害及杂草等，还要施用大量的化学农药，这不仅消耗大量的能源，更严重的是对生态环境造成了极大的甚至是不可逆的破坏。为了摆脱上述困境，从20世纪80年代起，人们开始研究和利用转基因抗性植物来预防病虫害和杂草等，并收到了良好的效果。与传统作物育种技术相比，利用基因工程技术进行遗传育种有其自身的优势，一方面由于它可以将特定的抗性基因定向转移，因而成功率较高，可大大提高选择效率，在很大程度上避免了传统育种工作的盲目性；另一方面是其基因来源打破了种属的界限，除了植物基因以外，动物和微生物的抗性基因都可以作为外源基因转人植物基因组中，并获得表达。[6] 3．植物基因工程技术可以拓宽应用研究,扩大生产领域 随着转基因植物技术日益成熟,利用植物的生物反应器作用,进行贵重药品、人畜疫苗和精细化工等的生产,因具有成本低,竞争力强的吸引力,正在成为高技术及其产业化的新兴热门领域。现已成功地将干扰素、胰岛素、多肽抗体、人血清白蛋白等基因转给植物进行这些药物的生产。美国现已得到多肽抗体转基因烟草,美国还在通过转基因植物研制麻疹、乙肝、艾滋病等疫苗,甚至成功地获得了口服植物疫苗。现国际上正在出现研制营养药物的新思路。此外,现还大量进行用于塑料、染料、涂料、洗涤、香料、润滑剂等的转基因植物研究。据
基因工程原理与技术思考题
Chapter I Introduction 1)什么是基因？基因有哪些主要特点？ 基因是一段可以编码具有某种生物学功能物质的核苷酸序列。 ①不同基因具有相同的物质基础.②基因是可以切割的。③基因是可以转移的。④多肽与基因之间存在 对应关系。⑤遗传密码是通用的。⑥基因可以通过复制把遗传信息传递给下一代。 2)翻译并解释下列名词 genetic engineering遗传工程 gene engineering基因工程：通过基因操作，将目的基因或DNA片段与合适的载体连接转入目标生物获得新的遗传性状的操作。 gene manipulation基因操作：对基因进行分离、分析、改造、检测、表达、重组和转移等操作的总称。 recombinant DNA technique重组DNA技术 gene cloning基因克隆：是指对基因进行分离和扩大繁殖等操作过程，其目的在于获得大量的基因拷贝，在技术上主要包括载体构建、大肠杆菌遗传转化、重组子筛选和扩大繁殖等环节。 molecular cloning分子克隆 3)什么是基因工程？简述基因工程的基本过程？p2 p4 4)简述基因工程研究的主要内容？p5 5)简述基因工程诞生理论基础p2和技术准备有哪些p3？ 6)基因表达的产物中，氨基酸序列相同时，基因密码子是否一定相同？为什么？ 否，密码子简并性 7)举例说明基因工程技术在医学、农业、工业等领域的应用。 医学:人胰岛素和疫苗 农业:抗虫BT农药 工业:工程酿酒酵母
Chapter ⅡThe tools of trade 1)什么是限制性核酸内切酶？简述其主要类型和特点？ 是一种核酸水解酶，主要从细菌中分离得到。类型特点p11 2)II型核酸内切酶的基本特点有哪些p12-14？简述影响核酸内切酶活性的因素有哪些 p14？ 3)解释限制酶的信号活性？抑制星号活性的方法有哪些？ 4)什么是DNA连接酶p15？有哪几类p16？有何不同p16？ 5)什么叫同尾酶、同裂酶p12？在基因工程中有何应用价值？ 同裂酶：识别位点、切割位点均相同，来源不同。在载体构建方面往往可以取得巧妙的应用。应用较多的同裂酶比如Sma1和Xma1，它们均识别CCCGGG，但前者切后产生钝末 同尾酶：来源各异，识别序列各不相同，但切割后产生相同的粘性末端。由同尾酶(isocaudomer)产生的DNA片段，是能够通过其粘性末端之间的互补作用彼此连接起来的。 6)什么是DNA聚合酶？根据DNA聚合酶使用的模板不同，可将其分为哪两类？各有什么活 性？p17-18 聚合酶：在引物和模板的存在下，把脱氧核苷酸连续地加到双链DNA分子引物链的3‘-OH 末端，催化核苷酸的聚合作用。 ①依赖于DNA的DNA聚合酶 ②依赖于RNA的DNA聚合酶 7)Taq DNA聚合酶：是一种从水生嗜热菌中分离得到的一种耐热的dna聚合酶，具有5-3聚 合酶活性和3-5外切酶活性，在分子中主要用于PCR。 逆转录酶：RNA指导的DNA聚合酶， 8)Klenow片段的特性和用途有哪些？举例说明。p17 9)名词解释：S1核酸酶、核酸外切酶、磷酸化酶激酶、 甲基化酶
高中生物专题复习：基因工程和细胞工程
基因工程和细胞工程 1．为增加油菜种子的含油量,科研人员将酶D基因与位于叶绿体膜上的转运肽基因相连,导入油菜细胞并获得了转基因油菜品种。 (1)研究人员采用PCR技术获取酶D基因和转运肽基因,该技术是利用________的原理,使相应基因呈指数增加。所含三种限制酶(XbaⅠ、ClaⅠ、SacⅠ)的切点如图所示,则用________和________处理两个基因后,可得到酶D基因和转运肽基因的融合基因。 (2)将上述融合基因插入上图所示Ti质粒的________中,构建基因表达载体并导入农杆菌中。为了获得含融合基因的单菌落,应进行的操作是______________________________。 随后再利用液体培养基将该单菌落菌株振荡培养,可以得到用于转化的侵染液。 (3)剪取油菜的叶片放入侵染液中一段时间的目的是_____________________________, 进一步筛选后获得转基因油菜细胞,提取上述转基因油菜的mRNA,在逆转录酶的作用下获得cDNA,再依据________的DNA片段设计引物进行扩增,对扩增结果进行检测,可判断融合基因是否完成________。最后采用抗原—抗体杂交法可检测转基因油菜植株中的融合基因是否成功表达。 答案：(1)DNA双链复制ClaⅠDNA连接酶 (2)T-DNA将获得的农杆菌接种在含四环素的固体培养基上培养 (3)利用农杆菌将融合基因导入油菜细胞融合基因转录 2．人外周血单核细胞能合成白细胞介素2(IL?2)。该蛋白可增强机体免疫功能,但在体内易被降解。研究人员将IL?2基因与人血清白蛋白(HSA)基因拼接成一个融合基因,在酵母菌中表达出具有IL?2生理功能且不易降解的IL?2?HSA融合蛋白,技术流程如图。请回答： (1)图中③过程的模板是________,表达载体1中的位点________应为限制酶BglⅡ的识别位点,才能成功构建表达载体2。 (2)表达载体2导入酵母菌后,融合基因转录出的mRNA中,与IL?2蛋白对应的碱基序列不能含有
基因工程与细胞工程
基因工程的概念 基因工程是指按照人们的愿望，进行严格的设计，通过体外DNA重组和转基因技术，赋予生物以新的遗传特性，创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的，又叫做DNA 重组技术。 （一）基因工程的基本工具 1.“分子手术刀”——限制性核酸内切酶（限制酶） （1）来源：主要是从原核生物中分离纯化出来的。 （2）功能：能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，因此具有专一性。 （3）结果：经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式：黏性末端和平末端。 2.“分子缝合针”——DNA连接酶 (1)两种DNA连接酶（E·coliDNA连接酶和T4-DNA连接酶）的比较： ①相同点：都缝合磷酸二酯键。 ②区别：E·coliDNA连接酶来源于大肠杆菌，只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来； 而T4DNA连接酶能缝合两种末端，但连接平末端的之间的效率较低。 (2)与DNA聚合酶作用的异同: DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯键。DNA连接酶是连接两个DNA片段的末端，形成磷酸二酯键。 DNA连接酶DNA聚合酶 不同点连接的DNA 双链单链 模板不要模板要模板 连接的对象2个DNA片段单个脱氧核苷酸加到已存在的单链DNA片段上相同点作用实质形成磷酸二酯键 化学本质蛋白质 3.“分子运输车”——载体 （1）载体具备的条件：①能在受体细胞中复制并稳定保存。 ②具有一至多个限制酶切点，供外源DNA片段插入。 ③具有标记基因，供重组DNA的鉴定和选择。 （2）最常用的载体是质粒,它是一种裸露的、结构简单的、独立于细菌染色体之外，并具有自我复制能力的双链环状DNA分子。 （3）其它载体：λ噬菌体的衍生物、动植物病毒 (二)基因工程的基本操作程序 第一步：目的基因的获取 1.目的基因是指：编码蛋白质的结构基因。 2.原核基因采取直接分离获得，真核基因是人工合成。人工合成目的基因的常用方法有反转录法_和化学合成法_。 3.PCR技术扩增目的基因 （1）PCR的含义：是一项在生物体外复制特定DNA片段的核酸合成技术。 （2）目的：获取大量的目的基因 （3）原理：DNA双链复制 （4）过程：第一步：加热至90～95℃DNA解链为单链； 第二步：冷却到55～60℃，引物与两条单链DNA结合； 第三步：加热至70～75℃，热稳定DNA聚合酶从引物起始进行互补链的合成。 （5）特点：指数(2n)形式扩增 第二步：基因表达载体的构建(核心) 1.目的：使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传至下一代，使目的基因能够表达和发挥作用。 2.组成：目的基因＋启动子＋终止子＋标记基因 （1）启动子：是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的首端，是RNA聚合酶识别和结合的部位，能驱动基因转录出mRNA，最终获得所需的蛋白质。 （2）终止子：也是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的尾端。
基因工程和植物细胞工程习题
1．碱基互补配对发生在下列哪些生理过程或生物技术中： ①种子的萌发 ②病毒的增殖过程 ③细菌的二分裂过程 ④目的基因与运载体的结合 ⑤DNA 探针的使用⑥分泌蛋白的加工和运输 A. ①②③④⑤ B .①②③④⑤⑥ C .②④⑤ D .②③⑤⑥ 2．下列关于基因工程的叙述，正确的是 （ ） A. 基因工程经常以抗菌素抗性基因为目的基因 B. 细菌质粒是基因工程常用的运载体 C. 通常用一种限制性内切酶处理含目的基因的 DNA ，用另一种处理运载体 DNA D. 为育成抗除草剂的作物新品种，导入抗除草剂基因时只能以受精卵为受体 3. 20世纪 70年代创立了一种新兴生物技术——基因工程，其最主要的目的是（ ） A.定向提取生物 DNA B.定向地对DNA 分子进行人工剪切 C.在生物体外对DNA 分子进行改造 D.定向地改造生物的遗传性状 4. 为了培育节水高产品种，科学家将大麦中与抗旱节水有关的基因导入小麦，得到转基因 小麦，其水分利用率提高了 20% 。这项技术的遗传学原理是（ ） A. 基因突变 B.基因重组 C.基因复制 D. 基因分离 5. 运用现代生物技术，将苏云金芽孢杆菌的抗虫基因整合到棉花细胞中，为检测实验是否 成功，最简便的方法是检测棉花植株是否有（ ） A. 抗虫基因 B.抗虫基因的产物 C.新的细胞核 D.相 应的性状 6. 基因工程中，科学家常用细菌、酵母菌等微生物作为受体细胞，主要原因是这些微生物 （） A. 结构简单，操作方便 B.繁殖速度快 C.遗传物质含量少、简单 D.性状稳定，变异少 7. 如果科学家通过转基因工程，成功地对一女性血友病患者的造血干细胞进行改造，使其 凝血功能恢复正常。那么，她后来所生的儿子中（ ） A. 全部正常 B.一半正常 C.全部有病 D.不能确 定 8. 我国科学家运用基因工程技术， 将苏云金芽孢杆菌的抗虫基 因导入棉花细胞并成功表达， 培育出了抗虫棉。下列叙述不正确的是 （ ） A. 重组DNA 分子中增加一个碱基对，不一定导致毒蛋白的毒性丧失 B. 抗虫棉的抗虫基因可通过花粉传给近缘作物，从而造成基因污染 高二生物周练 习 2013.3.20