C3702 红细胞裂解液(碧云天)

红细胞裂解液

产品简介：

碧云天生产的红细胞裂解液(Red Blood Cell Lysis Buffer)，也称ACK Lysis Buffer，是一种用于从人或鼠等的血液或组织样品中裂解并去除无细胞核红细胞的溶液。

本裂解液经过优化配方，在裂解红细胞的同时几乎不损伤淋巴细胞(lymphocyte)或其它有细胞核的细胞。

本裂解液的主要有效成分为氯化铵。

本裂解液不适用于有细胞核红细胞的裂解，例如鸟或禽类的红细胞。

本裂解液经过无菌处理，处理过的血液或组织细胞样品可以用于后续的原代培养、细胞融合以及核酸或蛋白的提取及各种常规的分析和检测。

保存条件：

4℃保存，一年有效。室温保存， 3个月有效。

注意事项：

本裂解液为无菌产品，请注意保持无菌，使用本产品时宜在超净工作台内进行。

如果经过红细胞裂解液处理后的样品后续用于总RNA的提取，在处理细胞时不必使用经过DEPC处理过的溶液。

为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明：

对于组织细胞样品：

1.新鲜组织经过胶原酶或胰酶等消化处理，通过适当方法分散成细胞悬液，离心弃上清。

2.加入3-5倍细胞体积的红细胞裂解液，轻轻吹打混匀，裂解1-2分钟。例如细胞沉淀的体积为1ml，则加入3-5ml的红细胞裂

解液。本步骤在室温或4度操作均可。

3.400-500g离心5分钟，弃红色上清。4℃离心效果更佳。

4.如果发现红细胞裂解不完全，可以重复上述步骤2和步骤3一次。通常极微量的红细胞不会影响后续的一些检测。

5.洗涤1-2次：加入适量PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液，重悬沉淀，400-500g离心2-3分钟，弃上清。可再重复1

次，共洗涤1-2次。洗涤液的用量通常应至少为细胞沉淀体积的5倍。4℃离心效果更佳。

6.根据实验需要用适当溶液重悬细胞沉淀后即可进行计数等后续实验。

对于组织细胞样品无需洗涤的快速操作步骤：

1.新鲜组织经过胶原酶或胰酶等消化处理，通过适当方法分散成细胞悬液，离心弃上清。

2.对于0.2ml细胞沉淀加入1ml红细胞裂解液，轻轻吹打混匀，裂解1-2分钟。本步骤在室温或4度操作均可。

3.加入15-20ml PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液，混匀。

4.400-500g离心5分钟，弃红色上清。4℃离心效果更佳。

5.如果发现红细胞裂解不完全，可以重复上述步骤2和步骤3一次。通常极微量的红细胞不会影响后续的一些检测。

6.根据实验需要用适当溶液重悬细胞沉淀后即可进行计数等后续实验。

说明：对于常规步骤，多一步洗涤过程中的离心，但可以节省洗涤液的用量，并且洗涤效果也更好一些，同时不需要大体积的离心管。快速步骤少了一次离心，但洗涤效果略差一些，同时需要大体积的离心管。

对于血液样品：

1.取新鲜抗凝血，400-500g离心5分钟，离心弃上清。

2.加入6-10倍细胞体积的红细胞裂解液，轻轻吹打混匀，裂解1-2分钟。例如细胞沉淀的体积为1ml，则加入6-10ml的红细胞

裂解液。本步骤在室温或4度操作均可。注意：对于鼠的血液，裂解1-2分钟已经足够，对于人的外周血，宜延长裂解时间至4-5分钟，并且裂解过程中宜适当偶尔摇动以促进红细胞裂解。

3.400-500g离心5分钟，弃红色上清。4℃离心效果更佳。

4.如果发现红细胞裂解不完全，可以重复上述步骤2和步骤3一次。通常极微量的红细胞不会影响后续的一些检测。

5.洗涤1-2次：加入适量PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液，重悬沉淀，400-500g离心2-3分钟，弃上清。可再重复1

次，共洗涤1-2次。洗涤液的用量通常应至少为细胞沉淀体积的5倍。4℃离心效果更佳。

6.根据实验需要用适当溶液重悬细胞沉淀后即可进行计数等后续实验。

注意：对于微量或少量的血液样品，可以在第一步中不进行离心弃上清的操作，直接在第二步中加入10倍血液体积的红细胞裂解液，并在室温或4℃裂解4-5分钟。对于鼠的血液，裂解4-5分钟已经足够，对于人的外周血，宜延长裂解时间至10分钟，但通常不宜超过15分钟，并且裂解过程中宜适当偶尔摇动以促进红细胞裂解。后续步骤相同。

对于血液样品无需洗涤的快速操作步骤：

1.每1ml新鲜抗凝血中加入10ml红细胞裂解液，轻轻吹打混匀，裂解4-5分钟。本步骤在室温或4度操作均可。注意：对于鼠

的血液，裂解4-5分钟已经足够，对于人的外周血，宜延长裂解时间至10分钟，但通常不宜超过15分钟，并且裂解过程中宜适当偶尔摇动以促进红细胞裂解。

2.加入20-30ml PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液，混匀。

3.400-500g离心5分钟，弃红色上清。4℃离心效果更佳。

4.如果发现红细胞裂解不完全，可以重复上述步骤2和步骤3一次。通常极微量的红细胞不会影响后续的一些检测。

5.根据实验需要用适当溶液重悬细胞沉淀后即可进行计数等后续实验。

说明：对于常规步骤，多一步洗涤过程的离心，但可以节省洗涤液的用量，并且洗涤效果也更好一些，同时不需要大体积的离心管。快速步骤少了一次离心，但洗涤效果略差一些，同时需要大体积的离心管。

使用本产品的文献：

1. Guo M, Huang T, Cui Y, Pan B, Shen A, Sun Y, Yi Y, Wang Y, Xiao G, Sun G.

PrPC interacts with tetraspanin-7 through bovine PrP154-182 containing alpha-helix 1.

Biochem Biophys Res Commun. 2008 Jan 4;365(1):154-7.

2. Xu TF, Wang XL, Yang JZ, Hu XY, Wu WF, Guo L, Kang LD, Zhang L Y.

Overexpression of Zip-2 mRNA in the leukocytes of asthmatic infants.

Pediatr Pulmonol. 2009 Aug;44(8):763-7

3. Chen H, Wang W, Mo Y, Ma Y, Ouyang N, Li R, Mai M, He Y, Bodombossou-Djobo MM, Yang D

Women with high telomerase activity in luteinised granulosa cells have a higher pregnancy rateduring in vitro fertilisation treatment.

J Assist Reprod Genet. 2011 Sep;28(9):797-807.

4. Zhao W, Zhang L, Yin Z, Su W, Ren G, Zhou C, You J, Fan J, Wang X.

Activated hepatic stellate cells promote hepatocellular carcinoma development inimmunocompetent mice.

Int J Cancer. 2011 Dec 1;129(11):2651-61.

5. Zhou CS, Yin ZY, Zhao WX, Zhang L, You JY, Su WX, Fan J, Wang XM

Bear bile inhibits the immunosuppression activity of hepatic stellate cells in vivo

Hepatogastroenterology. 2012 Jul;59(117):1529-36.

裂解液配制方法

1、红细胞裂解液（去除红细胞） 配制试剂所需材料： 1. Ammonium Chloride x10 Lysing Concentrate Solution a) NH4Cl (1.5 M) 80 g b) KHCO3 (100 nM) 10 g c) Na4EDTA (10 nM) 3.7 g d) Distilled H2O 1000 mL 2. 1N HCl or 1N NaOH（调节pH值用） 配制步骤： 1. 将以上a、b、c试剂溶于900ml 去离子水中； 2.调节溶液pH值到7.2-7.4，加去离子水定容到1000ml； 3.在制备工作液时，将此储存液稀释10倍后使用。 保存： 1.10x 储存液储存于2-8°C不能超过半年（六个月）； 2.在使用前，工作液每天都应该新鲜配制放置于室温，当日用不完的弃掉。 2、ripa裂解液 NP-40 or Triton-100 1% TrisHCl (pH 8.0) 50mmol/L NaCl 150mmol/L PMSF（苯甲基磺酰氟）0.1mmol/L(100μg/ml) Pepstatin(胃蛋白酶抑制剂) 1 μmol/L(0.7μg/ml) Leupeptin（亮抑制肽）0.5mg/ml Aprotinin（抑蛋白酶肽）0.3μmol/L(1μg/ml) （注：PMSF 贮存液：100mmol/L即17.4mg/ml于异丙醇中； Aprotinin 贮存液：10mg/ml溶于0.01mol/LHEPES(pH8.0)； Leupeptin 贮存液：10mg/ml溶于水中； Pepstatin 贮存液10mg/ml于甲醇液中.均于-20℃保存） 3、细胞裂解液（Tris－HCL） 1．1M Tris 溶液的配置 取Tris242.2g，加ddH2O至1600ml，加热溶解。 2．1M Tris－HCL Ph=8.0溶液的配置 取1M Tris 溶液160ml用分析纯盐酸调至Ph=8.0（需浓盐酸约8.5ml），加ddH2O 定容至200ml，高压灭菌备用。 3. 0.5M EDTA溶液的配置 称EDTA－Na2 37.2g 先用140ml ddH2O溶解，加入14ml NaOH（10M）使EDTA －Na2溶解，再用NaOH（10M）溶液调至Ph=8.0，加ddH2O定容至200ml，高压灭菌备用。 4. 细胞裂解液的配制 称15gCTAB（Hexadecyltrimethylammonium bromide）（先用约600ml ddH2O加热溶解）放入烧杯中，加入75ml 1M Tris－HCL（Ph=8.0），58.5g NaCL（先用少量ddH2O溶解），30ml 0.5M EDTA，定容至1000ml，混合均匀备用。

红细胞裂解液使用说明

红细胞裂解液使用说明 货号：R1010 规格：100ml/500ml 保存：2-8℃保存，保质期2年。常温运输。 产品简介： 红细胞裂解液是利用细胞内外存在盐离子浓度差而导致细胞膜胀破的原理来裂解无核红细胞的。 红细胞裂解液经无菌处理，主要用于经酶消化分散的组织细胞的分离纯化，淋巴细胞的分离纯化以及组织细胞蛋白与核酸提取等实验中红细胞的去除。 使用说明： 1.1倍体积的新鲜全血，加入3倍体积的红细胞裂解液。如1ml新鲜全血加入3ml红细胞裂解液，轻轻涡旋或颠倒混匀。 2.冰上放置15分钟，其间轻轻涡旋混匀两次，红细胞裂解后，溶液应该是清亮透明的。 3.收集细胞：4℃，450×g离心10分钟以沉淀白细胞，小心吸弃上清液。 4.向白细胞沉淀中加入两倍体积的红细胞裂解液，轻轻涡旋充分重悬白细胞。如起始血液为1ml，则加入2ml的红细胞裂解液。 5.4℃，450×g离心10分钟沉淀白细胞，小心并彻底吸去上清液。 6.重悬细胞，用于后续实验；如提取RNA，最好于此步开始使用DEPC水配制的溶液进行操作。 （组织细胞处理：新鲜组织经胰酶或胶原酶等消化分散成单个细胞悬液，离心弃去上清液，其余同上。） 注意事项：

本裂解液为无菌产品，分离细胞用于细胞培养时请注意无菌操作。为了您的安全与健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 相关产品： D8210DEPC P10201×PBS，PH7.2-7.4，0.01M H1020Hanks，含钙镁，含酚红 31800RPMI Medium1640 T1300胰蛋白酶－EDTA消化液(0.25%)不含酚红 P1400青链霉素混合液(100×) D1800全血基因组DNA提取试剂盒 G1010姬姆萨染色液（工作液）

通用细胞裂解液

通用细胞裂解液 产品简介： 多种成分均可以从细胞中提取总蛋白，例如去Triton、SDS、NP-40等。通用细胞裂解液(Common Lysis Buffer )，是采用一种非变性裂解方法来裂解细胞，并获得总蛋白的裂解液。所获得的蛋白质可以用于PAGE电泳，Western，免疫沉淀(Immunol Precipitation，IP)和免疫共沉淀(co-IP)等，主要由Tris、Triton X-100等组成，并含有多种蛋白酶抑制剂成分，可以有效抑制蛋白的降解，并维持原有的蛋白间相互作用。 用Common Lysis Buffer得到的蛋白，可以用leagene BCA蛋白浓度测定试剂盒(PT0001)测定蛋白浓度。由于含有较高浓度的Triton X-100等干扰物质，不宜用Bradford 法测定由通用细胞裂解液获得样本的蛋白浓度。 主要成分：主要由Tris-HCl、NaCl、低浓度Triton X-100，低浓度sodium pyrophosphate，β-glycerophosphate，EDTA等多种蛋白酶抑制剂组成。 自备材料： 1、高速离心机 2、微量移液器 3、PMSF，亦可采购Leagene的苯甲基磺酰氟溶液(PMSF,100mmol/L)(PI0011) 操作步骤（仅供参考）： (一)贴壁培养细胞 1、取Leagene Common Lysis Buffer 置于室温溶解混匀后，使用前取适当量的裂解液 加入PMSF，使其最终浓度为1mM。 2、去除贴壁细胞的培养液，用PBS、NS或无血清培养液清洗1次，低速离心，弃上清， 留取沉淀。 3、按照6孔板每1孔加入100～200μl含有PMSF的裂解液的比例，加入Common Lysis Buffer。移液器轻轻吹打，使裂解液和细胞充分接触。冰上或4℃裂解30～60min。 4、10000～12000g，4℃离心10～15min(如无低温离心机，室温下离心亦可)，取上清。

红细胞裂解液的配制

红细胞裂解液的配制 我在一个公司的网站上看到的红细胞裂解液的说明书上说操作要点是：1.在37度预热；2.充分混匀细胞我就是这样做的，效果还可以。不过我只做流式细胞仪的检测，活性没测。我的裂解液是0.16M NH4Cl，0.13mM EDTA，12mM NaHCO3 我用的方法： 全血：裂解液=1：3，如2ml的全血加上6ml的红细胞裂解液，充分混匀后，室温静置5mim，1000rpm离心6~10min。红细胞裂解得非常充分。 0.15 M NH4CL, 0.01 M NaHCO3 and 1 mM EDTA (Sigma) Ammonium chloride (NH4Cl) 8.29 g 0.155 M Potassium bicarbonate (KHCO3) 1 g 10mM EDTA 0.37 g 1mM H2O 1l. Filter with 0.45μm filter aliquot in 100 ml aliquots filter the solution to be used with 0.2μm filter. 我们用的是Tris-NH4Cl, 具体配方如下: NH4Cl:4.15克加双蒸水500ml,取450ml; Tris:1.0297克加双蒸水50ml,再加上上面的450ml,共计500ml,高压灭菌, 用时加10-20ml,静置5min,效果蛮好. 9月29日我用的配方

氯化铵3.735g，tris 1.3g，加在500ml水中，ph约7.2。 将全血约5ml加入配好的加入30ml裂解液的50ml试管中5分钟或15分钟，发现5分钟组细胞要多些，15分钟组细胞要少些，而且红细胞仍然有。

裂解液配制方法

裂解液配制方法 The manuscript was revised on the evening of 2021

1、红细胞裂解液（去除红细胞） 配制试剂所需材料： 1. Ammonium Chloride x10 Lysing Concentrate Solution a) NH4Cl (1.5 M) 80 g b) KHCO3 (100 nM) 10 g c) Na4EDTA (10 nM) 3.7 g d) Distilled H2O 1000 mL 2. 1N HCl or 1N NaOH（调节pH值用） 配制步骤： 1. 将以上a、b、c试剂溶于900ml 去离子水中； 2.调节溶液pH值到，加去离子水定容到1000ml； 3.在制备工作液时，将此储存液稀释10倍后使用。 保存： 储存液储存于2-8°C不能超过半年（六个月）； 2.在使用前，工作液每天都应该新鲜配制放置于室温，当日用不完的弃掉。 2、ripa裂解液 NP-40 or Triton-100 1% TrisHCl (pH 50mmol/L NaCl 150mmol/L PMSF（苯甲基磺酰氟） L(100μg/ml) Pepstatin(胃蛋白酶抑制剂) 1 μmol/Lμg/ml) Leupeptin（亮抑制肽） ml Aprotinin（抑蛋白酶肽）μmol/L(1μg/ml) （注：PMSF 贮存液：100mmol/L即ml于异丙醇中； Aprotinin 贮存液：10mg/ml溶于LHEPES； Leupeptin 贮存液：10mg/ml溶于水中；

Pepstatin 贮存液 10mg/ml于甲醇液中.均于-20℃保存） 3、细胞裂解液（Tris－HCL） 1．1M Tris 溶液的配置 取Tris242.2g，加ddH2O至1600ml，加热溶解。 2．1M Tris－HCL Ph=溶液的配置 取 1M Tris 溶液160ml用分析纯盐酸调至Ph=（需浓盐酸约），加ddH2O定容至200ml，高压灭菌备用。 3. 0.5M EDTA溶液的配置 称EDTA－Na2 37.2g 先用140ml ddH2O溶解，加入14ml NaOH（10M）使EDTA－Na2溶解，再用NaOH（10M）溶液调至Ph=，加ddH2O定容至 200ml，高压灭菌备用。 4. 细胞裂解液的配制 称15gCTAB（Hexadecyltrimethylammonium bromide）（先用约600ml ddH2O 加热溶解）放入烧杯中，加入75ml 1M Tris－HCL（Ph=），58.5g NaCL（先用少量ddH2O溶解），30ml 0.5M EDTA，定容至1000ml，混合均匀备用。 4、组织裂解液配方：` 7M Urea(60. 06) 4.2042 g 2M thiourea g 100mM DTT? g 4% CHAPS g 0.5mM EDTA? 0.00146 g 40Mm Tris? g 2%(v/v) NP-40 ml

Tris-氯化铵红细胞裂解液说明书

北京索莱宝科技有限公司 Tris-氯化铵红细胞裂解液说明书 货号：R1012 规格：500mL 保存：4℃保存，12个月有效。 产品说明： 在生物科研领域，经常需要去除红细胞，去除红细胞的方法有多种，如ACK Lysis Buffer、Tris-氯化铵红细胞裂解液、Gey's Lysis Buffer。Tris-氯化铵红细胞裂解液(Tris-NH4Cl Red Blood Cell Lysis Buffer)，也称为Tris-NH4Cl Lysis Buffer，是一种从人、鼠或其他哺乳动物等体内的组织样品或血液中裂解并去除无核红细胞的溶液，其主要有效成分为NH4Cl。 Tris-NH4Cl Lysis Buffer经过优化配方，在裂解无核红细胞的同时几乎不损伤淋巴细胞或其它有细胞核的细胞。本裂解液经过滤除菌，经过Tris-NH4Cl Lysis Buffer处理过的血液或组织细胞样品可以用于后续的细胞培养、细胞融合以及核酸或蛋白的提取及各种常规的分析和检测。 自备材料： 胰蛋白酶、离心机、PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液、胎牛血清 注意事项： 1、制备细胞悬液时应根据实验需要，不一定要制备成单细胞悬液。 2、后续试验如果是用于细胞培养，操作过程中应注意无菌操作，尽量在超净工作台内操作。 3、离心步骤尽量在4℃离心机上操作。 4、常规步骤与快速步骤的区别在于：常规步骤多了一步洗涤过程的离心，可以节省洗涤液的用量，并且洗涤效果也更好，不需要大体积的离心管；快速步骤少了一次离心过程，洗涤效果略差一些，同时需要大体积的离心管。 5、离心洗涤后，通常极微量的红细胞不会影响后续的检测。 6、如果经过ACK Lysis Buffer处理后的样品后续用于总RNA的提取，在处理细胞时不必使用DEPC处理的溶液，即无需在该操作中特意去除RNase。 7、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 第1页共1页

红细胞裂解

对于组织细胞样品： 1. 新鲜组织经过胶原酶或胰酶等消化处理，通过适当方法分散成细胞悬液，离心弃上清。 2. 加入3-5倍细胞体积的红细胞裂解液，轻轻吹打混匀，裂解1-2分钟。例如细胞沉淀的体积为1ml，则加入3-5ml的红细胞裂解液。本步骤在室温或4度操作均可。 3. 400-500g离心5分钟，弃红色上清。4℃离心效果更佳。 4. 如果发现红细胞裂解不完全，可以重复上述步骤2和步骤3一次。通常极微量的红细胞不会影响后续的一些检测。 5. 洗涤1-2次：加入适量PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液，重悬沉淀，400-500g离心2-3分钟，弃上清。可再重复1次，共洗涤1-2次。洗涤液的用量通常应至少为细胞沉淀体积的5倍。4℃离心效果更佳。 6. 根据实验需要用适当溶液重悬细胞沉淀后即可进行计数等后续实验。对于组织细胞样品无需洗涤的快速操作步骤： 1. 新鲜组织经过胶原酶或胰酶等消化处理，通过适当方法分散成细胞悬液，离心弃上清。 2. 对于0.2ml细胞沉淀加入1ml红细胞裂解液，轻轻吹打混匀，裂解1-2分钟。本步骤在室温或4度操作均可。 3. 加入15-20ml PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液，混匀。 4. 400-500g离心5分钟，弃红色上清。4℃离心效果更佳。 5. 如果发现红细胞裂解不完全，可以重复上述步骤2和步骤3一次。通常极微量的红细胞不会影响后续的一些检测。 6. 根据实验需要用适当溶液重悬细胞沉淀后即可进行计数等后续实验。 说明：对于常规步骤，多一步洗涤过程中的离心，但可以节省洗涤液的用量，并且洗涤效果也更好一些，同时不需要大体积的离心管。快速步骤少了一次离心，但洗涤效果略差一些，同时需要大体积的离心管。 对于血液样品： 1. 取新鲜抗凝血，400-500g离心5分钟，离心弃上清。 2. 加入6-10倍细胞体积的红细胞裂解液，轻轻吹打混匀，裂解1-2分钟。例如细胞沉淀的体积为1ml，则加入6-10ml的红细胞 裂解液。本步骤在室温或4度操作均可。注意：对于鼠的血液，裂解1-2分钟已经足够，对于人的外周血，宜延长裂解时 间至4-5分钟，并且裂解过程中宜适当偶尔摇动以促进红细胞裂解。 3. 400-500g离心5分钟，弃红色上清。4℃离心效果更佳。 4. 如果发现红细胞裂解不完全，可以重复上述步骤2和步骤3一次。通常极微量的红细胞不会影响后续的一些检测。 5. 洗涤1-2次：加入适量PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液，重悬沉淀，400-500g离心2-3分钟，弃上清。可再重复1 次，共洗涤1-2次。洗涤液的用量通常应至少为细胞沉淀体积的5倍。4℃离心效果更佳。 6. 根据实验需要用适当溶液重悬细胞沉淀后即可进行计数等后续实验。 注意：对于微量或少量的血液样品，可以在第一步中不进行离心弃上清的操作，直接在第二步中加入10倍血液体积的红细胞裂 解液，并在室温或4℃裂解4-5分钟。对于鼠的血液，裂解4-5分钟已经足够，对于人的外周血，宜延长裂解时间至10分钟，但 通常不宜超过15分钟，并且裂解过程中宜适当偶尔摇动以促进红细胞裂解。后续步骤相同。对于血液样品无需洗涤的快速操作步骤： 1. 每1ml新鲜抗凝血中加入10ml红细胞裂解液，轻轻吹打混匀，裂解4-5分钟。本步骤在

Tris-氯化铵红细胞裂解液使用说明

Tris-氯化铵红细胞裂解液使用说明 Tris-NH4Cl Lysis Buffer 货号：R1012 规格：100ml/500ml 保存：4℃保存，有效期至少6个月。 产品简介： Tris-氯化铵红细胞裂解液(Tris-NH4Cl Red Blood Cell Lysis Buffer)，也称为Tris-NH4Cl Lysis Buffer，是一种从人、鼠或其他哺乳动物等体内的组织样品或血液中裂解并去除无核红细胞的溶液，其主要有效成分为氯化铵。Tris-NH4Cl Lysis Buffer经过优化配方，在裂解无核红细胞的同时几乎不损伤淋巴细胞(lymphocyte)或其它有细胞核的细胞。对于裂解、去除有细胞核红细胞，例如鸟或禽类的红细胞，效果不佳，裂解类似细胞时，不建议采用。本裂解液经过滤除菌，经过Tris-NH4Cl Lysis Buffer处理过的血液或组织细胞样品可以用于后续的细胞培养、细胞融合以及核酸或蛋白的提取及各种常规的分析和检测。 自备材料： 胰蛋白酶、胎牛血清(FCS)、离心机、PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液 操作步骤（仅供参考）： （一）组织细胞样本的常规操作 1、制备细胞悬液:新鲜组织经过胰蛋白酶或胶原酶等消化处理，通过适当方法制备成细胞悬液，离心弃上清。 2、裂解:加入3～5倍细胞沉淀体积的Tris-NH4Cl Lysis Buffer，轻柔吹打混匀，裂解1～2min。本操作步骤在4℃条件下操作更佳，亦可在室温下操作。 3、离心:4℃，400～500g离心5min，弃红色上清。如无低温离心机，本步骤亦可在室温

下操作。 4、如果发现红细胞裂解不完全，可以重复上述步骤2和步骤3各一次。 5、洗涤：根据具体实验要求加入适量PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液，轻柔混匀重悬沉淀。4℃，400～500g离心2～3min，弃上清，离心步骤亦可在室温下操作。所加入的PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液的量一般应大于细胞沉淀体积的5倍以上。 6、如有必要，重复上述步骤5一次，共洗涤1～2次。 7、根据实验需要用适当溶液重悬细胞沉淀，进行计数、培养等后续实验。 （二）组织细胞样本的快速操作(无需洗涤) 1、制备细胞悬液：新鲜组织经过胰蛋白酶或胶原酶等消化处理，通过适当方法制备成细胞悬液，离心弃上清。 2、裂解：加入细胞5倍细胞沉淀体积的Tris-NH4Cl Lysis Buffer，轻柔吹打混匀，裂解1～2min。本操作步骤在4℃条件下操作更佳，亦可在室温下操作。 3、加入15～20ml的PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液，轻柔混匀。 4、离心：4℃，400～500g离心5min，弃红色上清，本步骤亦可在室温下操作。 5、如果发现红细胞裂解不完全，可以重复上述步骤2～4各一次。 6、根据实验需要用适当溶液重悬细胞沉淀，进行计数、培养等后续实验。 （三）血液样本的常规操作 1、取新鲜抗凝血，400～500g离心5min，离心弃上清。 2、裂解:加入6～10倍细胞沉淀体积的Tris-NH4Cl Lysis Buffer，轻柔吹打混匀，裂解1～5min。本操作步骤在4℃条件下操作更佳，亦可在室温下操作。（特别提醒：对于鼠的血液，裂解1～2min已经足够，对于人的外周血，宜延长裂解时间至4～5min，并且裂解过程中轻轻摇动以促进红细胞裂解。）

C3702 红细胞裂解液(碧云天)

红细胞裂解液 产品简介： 碧云天生产的红细胞裂解液(Red Blood Cell Lysis Buffer)，也称ACK Lysis Buffer，是一种用于从人或鼠等的血液或组织样品中裂解并去除无细胞核红细胞的溶液。 本裂解液经过优化配方，在裂解红细胞的同时几乎不损伤淋巴细胞(lymphocyte)或其它有细胞核的细胞。 本裂解液的主要有效成分为氯化铵。 本裂解液不适用于有细胞核红细胞的裂解，例如鸟或禽类的红细胞。 本裂解液经过无菌处理，处理过的血液或组织细胞样品可以用于后续的原代培养、细胞融合以及核酸或蛋白的提取及各种常规的分析和检测。 保存条件： 4℃保存，一年有效。室温保存， 3个月有效。 注意事项： 本裂解液为无菌产品，请注意保持无菌，使用本产品时宜在超净工作台内进行。 如果经过红细胞裂解液处理后的样品后续用于总RNA的提取，在处理细胞时不必使用经过DEPC处理过的溶液。 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 使用说明： 对于组织细胞样品： 1.新鲜组织经过胶原酶或胰酶等消化处理，通过适当方法分散成细胞悬液，离心弃上清。 2.加入3-5倍细胞体积的红细胞裂解液，轻轻吹打混匀，裂解1-2分钟。例如细胞沉淀的体积为1ml，则加入3-5ml的红细胞裂 解液。本步骤在室温或4度操作均可。 3.400-500g离心5分钟，弃红色上清。4℃离心效果更佳。 4.如果发现红细胞裂解不完全，可以重复上述步骤2和步骤3一次。通常极微量的红细胞不会影响后续的一些检测。 5.洗涤1-2次：加入适量PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液，重悬沉淀，400-500g离心2-3分钟，弃上清。可再重复1 次，共洗涤1-2次。洗涤液的用量通常应至少为细胞沉淀体积的5倍。4℃离心效果更佳。 6.根据实验需要用适当溶液重悬细胞沉淀后即可进行计数等后续实验。 对于组织细胞样品无需洗涤的快速操作步骤： 1.新鲜组织经过胶原酶或胰酶等消化处理，通过适当方法分散成细胞悬液，离心弃上清。 2.对于0.2ml细胞沉淀加入1ml红细胞裂解液，轻轻吹打混匀，裂解1-2分钟。本步骤在室温或4度操作均可。 3.加入15-20ml PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液，混匀。 4.400-500g离心5分钟，弃红色上清。4℃离心效果更佳。 5.如果发现红细胞裂解不完全，可以重复上述步骤2和步骤3一次。通常极微量的红细胞不会影响后续的一些检测。 6.根据实验需要用适当溶液重悬细胞沉淀后即可进行计数等后续实验。 说明：对于常规步骤，多一步洗涤过程中的离心，但可以节省洗涤液的用量，并且洗涤效果也更好一些，同时不需要大体积的离心管。快速步骤少了一次离心，但洗涤效果略差一些，同时需要大体积的离心管。 对于血液样品： 1.取新鲜抗凝血，400-500g离心5分钟，离心弃上清。 2.加入6-10倍细胞体积的红细胞裂解液，轻轻吹打混匀，裂解1-2分钟。例如细胞沉淀的体积为1ml，则加入6-10ml的红细胞 裂解液。本步骤在室温或4度操作均可。注意：对于鼠的血液，裂解1-2分钟已经足够，对于人的外周血，宜延长裂解时间至4-5分钟，并且裂解过程中宜适当偶尔摇动以促进红细胞裂解。

红细胞渗透脆性检测试剂盒(过筛法)

红细胞渗透脆性检测试剂盒(过筛法) 简介： 红细胞(Red blood cell ，RBC)也称红血球，是血液中数量最多的一种血细胞，脊椎动物体内通过RBC 运送氧气，RBC 同时还具有免疫功能。在贫血检查中，可通过红细胞渗透脆性试验来检测红细胞膜的缺陷。 Leagene 红细胞渗透脆性检测试剂盒(过筛法)(Erythrocyte Osmotic Fragility Assay Kit)其检测原理是红细胞悬浮于等渗盐水中，能够保持双面凹盘状态，如果渗透压增高，红细胞水分会渗出细胞外而呈现皱缩，如果渗透压降低，则水分会渗入细胞内，使红细胞膨胀以致破裂、溶血。利用这一原理，将红细胞加至一系列的不同浓度的低渗盐水中，检查溶血程度，以便判断红细胞抵抗低渗溶液的能力，该实验被称为红细胞渗透脆性试验。该试剂盒主要用于检测人、动物新鲜血液的红细胞渗透脆性。该试剂盒仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。 组成： 自备材料： 1、 小试管 2、 滴管 操作步骤(仅供参考)： 1、 取小试管或恰当容器，依次编号,用同一口径滴管以相同角度依次滴加NaCl solution(5g/L)和ddH 2O 。每次检查应设正常对照。 2、 取新鲜静脉血，不加抗凝剂立即滴入上述1～14号各管中，每管滴加。 3、 轻轻混匀，室温静置。 编号 名称 TC0221 Storage 试剂(A): NaCl solution(5g/L) 100ml RT 试剂(B): ddH 2O 100ml RT 使用说明书 1份 试管号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 试剂(A) (滴) 25 24 23 22 21 20 19 18 17 16 15 14 13 12 试剂(B) (滴) 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 NaCl 浓度(g/L) 5.0 4.8 4.6 4.2 4.0 4.2 3.8 3.6 3.4 3.2 3.0 2.8 2.6 2.4

人外周血白细胞分离液使用说明

人外周血白细胞分离液使用说明 货号:P8670 规格：200ml/kit 保存：18℃-25℃避光保存，有效期两年。启封后置4℃保存，有效期一周。 一、分离方法说明及图例 A．取1ml新鲜抗凝血，与全血及组织稀释液1:1混匀后小心加于1份本分离液之液面上； B.以500g（约1800转/分）离心25分钟(半径15cm水平转子)。此时离心管中由上至下细胞分四层。第一层；为血浆层。第二层；为环状乳白色的白细胞层。第三层；为略带混浊的分离液层（富集一定量的白细胞）。第四层；为红细胞层。弃去第一层血浆层，收集第二层细胞、第三层分离液层和第四层红细胞层，放入含细胞洗涤液10ml的试管中，充分混匀后，以500g 约（1800转/分）离心30分钟。沉淀经1次洗涤后用红细胞裂解液裂解红细胞，再经3次洗涤去除红细胞内溶物和碎片后取沉淀细胞即为所需白细胞。 注：提取率约为80%。 二、红细胞裂解液使用说明 红细胞裂解液用于从血液或组织细胞样品中裂解并去除无细胞核红细胞的溶液。不适用于禽类等有细胞核红细胞的裂解。本裂解液经过无菌处理，分离的细胞可以用于后续的原代培养、

细胞融合以及核酸或蛋白的提取及各种常规的分析和检测。 使用说明： A.对于组织细胞样品： a.新鲜组织经过胶原酶或胰酶等消化处理，通过适当方法分散成细胞悬液，离心弃上清。 b.加入3-5倍细胞体积的红细胞裂解液，轻轻吹打混匀，裂解1-2分钟。如细胞沉淀的体积为1ml，则加入3-5ml的红细胞裂解液。 c.400-500g离心5分钟，弃红色上清。4℃离心效果更佳。 d.如果发现红细胞裂解不完全，可以重复上述步骤2和步骤3一次。通常极微量的红细胞不会影响后续的一些检测。 e.洗涤1-2次：加入适量PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液，重悬沉淀，400-500g离心2-3分钟，弃上清。可再重复1次，共洗涤1-2次。洗涤液的用量通常应至少为细胞沉淀体积的5倍。4℃离心效果更佳。 f.根据实验需要用适当溶液重悬细胞沉淀后即可进行计数等后续实验。 注：对于常规步骤，多一步洗涤过程中的离心，但可以节省洗涤液的用量，并且洗涤效果也更好一些，同时不需要大体积的离心管。快速步骤少了一次离心，但洗涤效果略差一些，同时需要大体积的离心管。 B.对于血液样品： a.取新鲜抗凝血，400-500g离心5分钟，离心弃上清。 b.加入6-10倍细胞体积的红细胞裂解液，轻轻吹打混匀，裂解1-2分钟。例如细胞沉淀的体积为1ml，则加入6-10ml的红细胞裂解液。本步骤在室温或4度操作均可。注意：对于鼠的血液，裂解1-2分钟已经足够，对于人的外周血，宜延长裂解时间至4-5分钟，并且裂解过程中宜适当偶尔摇动以促进红细胞裂解。

ACK红细胞裂解液(ACK Lysis Buffer)

ACK红细胞裂解液(ACK Lysis Buffer) 产品简介： 去除红细胞的方法有多种，Leagene生产的ACK红细胞裂解液(Red Blood Cell Lysis Buffer)，也称为ACK Lysis Buffer，是一种从人、鼠或其他哺乳动物等体内的组织样品或血液中裂解并去除无核红细胞的溶液，其主要有效成分为氯化铵，ACK Lysis Buffer经过优化配方，在裂解无核红细胞的同时几乎不损伤淋巴细胞(lymphocyte)或其它有细胞核的细胞。 Leagene ACK Lysis Buffer对于裂解、去除有细胞核红细胞，例如鸟或禽类的红细胞，效果不佳，裂解类似细胞时，不建议采用。本裂解液经过滤除菌，经过ACK Lysis Buffer 处理过的血液或组织细胞样品可以用于后续的细胞培养、细胞融合以及核酸或蛋白的提取及各种常规的分析和检测。 产品组成： 主要成分：主要由NH4Cl组成，pH7.2。 自备材料： 1、胰蛋白酶，亦可采购Leagene的胰蛋白酶-EDTA溶液(0.25%:0.02%)(CC0130) 2、离心机 3、PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液 操作步骤（仅供参考）： （一）组织细胞样本的常规操作 1、制备细胞悬液: 新鲜组织经过胰蛋白酶或胶原酶等消化处理，通过适当方法制备成细胞悬液，离心弃上清。 2、裂解: 加入3～5倍细胞沉淀体积的ACK Lysis Buffer，轻柔吹打混匀，裂解1～2min。本操作步骤在4℃条件下操作更佳，亦可在室温下操作。 3、离心: 4℃，400～500g离心5min，弃红色上清。如无低温离心机本步骤亦可在室温下操作。 4、如果发现红细胞裂解不完全，可以重复上述步骤2和步骤3各一次。

RNAblood 超纯全血总RNA快速提取试剂盒操作方法及步骤说明书

RNAblood 超纯全血总RNA快速提取试剂盒目录号：RN25 RN2502 50次 适用范围： 适用于快速提取全血高纯度总RNA 试剂盒组成、储存、稳定性：﹢ 10X红细胞裂解液RLB 裂解液RL 室温 4℃避光 25 ml 50 ml 去蛋白液RE 室温25 ml 漂洗液RW 室温 10 ml 第一次使用前按说明加指定量乙醇 RNase-free H2O 室温10 ml 70%乙醇室温 9ml RNase-free H2O 第一次使用前按说明加指定量乙醇 RNase-free吸附柱RA 室温50个 收集管（2ml）室温50个 本试剂盒在室温储存12个月不影响使用效果。 储存事项： 1.所有的溶液应该是澄清的，如果环境温度低时溶液可能形成沉淀，此时不应该直 接使用，可在37℃水浴加热几分钟，即可恢复澄清。

2.不合适的储存于低温（4℃或者－20℃）会造成溶液沉淀，影响使用效果，因此 运输和储存均在室温下（15℃－25℃）进行。裂解液RL可以常温运输，收到后4℃避光保存。 3.避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、PH值变化，各溶液使用后应及 时盖紧盖子。 产品介绍： 1.第一次使用前请先在漂洗液RW瓶和70%乙醇瓶中加入指定量乙醇，加入后请及 时打钩标记已加入乙醇，以免多次加入! 2.所有离心步骤如未加说明，均在室温进行。使用转速可以达到13，000 rpm的传统 台式离心机，如Eppendorf 5415C 或者类似离心机。 3.裂解液RL和去蛋白液RE中含有刺激性有害化合物，操作时要戴乳胶手套，避免 沾染皮肤、眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时，要用大量清水或者生理盐水冲洗。 4.考虑到环保问题，本试剂盒不含有实验室常用试剂氯仿，用户使用前需要自备氯 仿。 5.常规的琼脂糖凝胶电泳和变性胶电泳均可以用来分析RNA的质量。好的RNA产物 在电泳后应该可以看到明显的二条优势核糖体RNA带，分别为~5Kb（28S），~2Kb （18S），条带亮度比值约为2：1。有时候也可以看到~0.1kb和0.3Kb(5S，tRNA)带。但有时候根据不同的物种如某些植物组织可以看到4，5条带也属于正常现象，如果RNA未成熟的前体或者不均一核RNA、小核RNA提取出来也可能看到介于7Kb和15Kb之间的不连续的高分子量条带。 6.检测OD260/OD280吸光度比值时，RNA样品应该溶于TE后检测，如果用水稀释后 检测，由于一般水离子强度和PH值低，会使OD280升高，从而使比值降低。 7.加入裂解液RL匀浆后，加氯仿前，样品可在–60℃-70℃保存一个月以上。 8.关于DNA 的微量残留：

PH0411 红细胞裂解液 ACK Lysis Buffer操作手册

PH0411|红细胞裂解液（ACK Lysis Buffer） Catalog No：PH0411Size：?100mL|500mL Storage：Store@4℃ ◆简介 红细胞裂解液(Red Blood Cell Lysis Buffer)，也称ACK Lysis Buffer，是一种用于从人或鼠等的血液或组织样品中裂解并去除无细胞核红细胞的溶液。本裂解液经过优化配方，在裂解红细胞的同时几乎不损伤淋巴细胞(lymphocyte)或其它有细胞核的细胞。它主要有效成分为氯化铵。不适用于有细胞核红细胞的裂解，例如鸟或禽类的红细胞。该解液经过无菌处理，处理过的血液或组织细胞样品可以用于后续的原代培养、细胞融合以及核酸或蛋白的提取及各种常规的分析和检测。 ◆保存 4℃保存，一年有效。室温保存，3个月有效。 ◆使用参考 对于组织细胞样品： 1.新鲜组织经过胶原酶或胰酶等消化处理，通过适当方法分散成细胞悬液，离心弃上清。 2.加入3-5倍细胞体积的红细胞裂解液，轻轻吹打混匀，裂解1-2分钟。例如细胞沉淀的体积为1ml，则加入3-5ml的红细胞裂解液。本步骤在室温或4度操作均可。 3.400-500g离心5分钟，弃红色上清。4℃离心效果更佳。 4.如果发现红细胞裂解不完全，可以重复上述步骤2和步骤3一次。通常极微量的红细胞不会影响后续的一些检测。 5.洗涤1-2次：加入适量PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液，重悬沉淀，400-500g离心2-3分钟，弃上清。可再重复1次，共洗涤1-2次。洗涤液的用量通常应至少为细胞沉淀体积的5倍。4℃离心效果更佳。 6.根据实验需要用适当溶液重悬细胞沉淀后即可进行计数等后续实验。 对于组织细胞样品无需洗涤的快速操作步骤： 1.新鲜组织经过胶原酶或胰酶等消化处理，通过适当方法分散成细胞悬液，离心弃上清。 2.对于0.2ml细胞沉淀加入1ml红细胞裂解液，轻轻吹打混匀，裂解1-2分钟。本步骤在室温或4度操作均可。 3.加入15-20ml PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液，混匀。 4.400-500g离心5分钟，弃红色上清。4℃离心效果更佳。 5.如果发现红细胞裂解不完全，可以重复上述步骤2和步骤3一次。通常极微量的红细胞不会影响后续的一些检测。 6.根据实验需要用适当溶液重悬细胞沉淀后即可进行计数等后续实验。 说明：对于常规步骤，多一步洗涤过程中的离心，但可以节省洗涤液的用量，并且洗涤效果也更好一些，同时不需要大体积的离心管。快速步骤少了一次离心，但洗涤效果略差一些，同时需要大体积的离心管。 对于血液样品： 1.取新鲜抗凝血，400-500g离心5分钟，离心弃上清。 2.加入6-10倍细胞体积的红细胞裂解液，轻轻吹打混匀，裂解1-2分钟。例如细胞沉淀的体积为1ml，则加入6-10ml的红细胞裂解液。本步骤在室温或4度操作均可。注意：对于鼠的血液，裂解1-2分钟已经足够，对于人的外周血，宜延长裂解时间至4-5分钟，并且裂解过程中宜适当偶尔摇动以促进红细胞裂解。 3.400-500g离心5分钟，弃红色上清。4℃离心效果更佳。

全血基因组DNA提取试剂盒使用说明

全血基因组DNA提取试剂盒使用说明 货号：D1800 规格：50T/100T 保存：室温(15℃-25℃)干燥保存，复检期12个月，2℃-8℃保存时间更长。 试剂盒内容：50T100T RNase A1ml1ml×2 蛋白酶K1ml1ml×2 红细胞裂解液120ml120ml×2 溶液A15ml25ml 溶液B15ml30ml 漂洗液15ml15ml×2 洗脱液10ml20ml 吸附柱50个100个 收集管50个100个 说明书1份1份 产品简介: 本试剂盒采用可以特异性结合DNA的离心吸附柱和独特的缓冲液系统，提取全血基因组DNA。离心吸附柱中采用的硅基质材料为本公司特有新型材料，能够高效、专一吸附DNA，可最大限度去除杂质蛋白及细胞中其他有机化合物。提取的基因组DNA片段大，纯度高，质量稳定可靠。使用本试剂

盒提取的基因组DNA可用于各种常规操作，包括酶切、PCR、文库构建、Southern杂交等实验。 操作步骤： 使用前请先在漂洗液和溶液B中加入无水乙醇，加入体积请参照瓶体上的标签。所有离心步骤均为使用台式离心机在室温下离心。 1、样品的处理(本产品适用于处理新鲜的或已经添加抗凝剂的0.lml-1ml血液样品)： a、在血液样品中加入2-3倍体积的红细胞裂解液，充分颠倒混匀，12000rpm离心1min，小心吸去上清，沉淀应为白色或淡红色，如果裂解不彻底，可重复以上述步骤一次。向沉淀中加200ul溶液A，振荡至彻底混匀。 b、如果处理的血样为禽类、鸟类、两栖类或更低级生物的血液，其红细胞为有核细胞，因此处理量为5-20u1，不需要再用红细胞裂解液处理，直接加200ul溶液A，振荡至彻底混匀。 2、向悬浮液中加入20ul(10mg/ml)的RNase A，充分颠倒混匀，室温放置10min。 3、加入20ul(10mg/ml)的蛋白酶K，充分颠倒混匀，65℃水浴消化30-60min，消化期间可颠倒离心管混匀数次，直至样品消化完全为止。 4、加入2倍体积溶液B(使用前请先检查是否己加入无水乙醇)，充分颠倒混匀，此时可能会出现絮状沉淀，不影响DNA的提取，可将溶液和絮状沉淀都加入吸附柱中，室温放置2min。 5、12000rpm离心2min，弃废液，将吸附柱放入收集管中。

1.血液标本采集处理标准操作规程

血液标本采集及处理标准操作规程 目的：血清(ELISA或化学发光法检测蛋白表达检测)；血浆(游离核酸的检测)；有核细胞(循环肿瘤细胞的检测)。 适用范围：肿瘤病人血液标本采集及处理。 责任人： 操作流程： 1.仪器设备： 高速低温离心机、－80℃冰箱。 2.材料与试剂： 试剂：10×红细胞裂解液（Cat NO:420301；试剂公司：Biolegend） 胎牛血清（100ml；试剂公司：天津康源生物技术有限公司） DMEM(500ml；试剂公司:Thermo Cat NO:SH30033.01B) DMSO(100ml；试剂公司: 材料：4ml血清真空采血管(黄盖无抗凝剂) 4ml血浆真空采血管(紫盖含抗凝剂) 移液器、50ml离心管、1ml冻存管、吸头等 3.样本采集： 3.1分离血清 3.1.1血清管(黄盖无抗凝剂)，标本于4℃，3300rpm离心10分钟。 3.1.2吸取血清分装于1.5ml 冻存管内，每管300 μl，分装4管，若 血清量较多，则将剩余血清全部加入最后一个冻存管中。 3.1.3贴条形码标签，-80℃储存。 3.2分离血浆 3.2.1血浆管(紫盖含抗凝剂)，标本于4℃，3300rpm离心10分钟。 3.2.2吸取血浆分装于1.0ml 冻存管内，每管300 μl，分装4管，若血浆量较多，则将剩余血清全部加入最后一个冻存管中。 3.2.3贴条形码标签， -80℃储存。 3.2.4采血管扣紧管盖，放存旁边，准备下一步分离有核细胞的操作。 3.3分离有核细胞 按每4ml全血需要配制40ml用量稀释红细胞裂解液。 3.3.1取50ml离心管, 加36ml去离子水，加4ml红细胞裂解液混匀。

Tris-氯化铵红细胞裂解液

Tris-氯化铵红细胞裂解液 产品简介： 去除红细胞的方法有多种，Leagene的Tris-氯化铵红细胞裂解液(Tris-NH4Cl Red Blood Cell Lysis Buffer)，也称为Tris-NH4Cl Lysis Buffer，是一种从人、鼠或其他哺乳动物等体内的组织样品或血液中裂解并去除无核红细胞的溶液，其主要有效成分为氯化铵，Tris-NH4Cl Lysis Buffer经过优化配方，在裂解无核红细胞的同时几乎不损伤淋巴细胞(lymphocyte)或其它有细胞核的细胞。 Leagene Tris-NH4Cl Lysis Buffer对于裂解、去除有细胞核红细胞，例如鸟或禽类的红细胞，效果不佳，裂解类似细胞时，不建议采用。本裂解液经过滤除菌，经过Tris-NH4Cl Lysis Buffer处理过的血液或组织细胞样品可以用于后续的细胞培养、细胞融合以及核酸或蛋白的提取及各种常规的分析和检测。 产品组成： 主要成分：主要由Tris、NH4Cl等组成，pH7.2。 自备材料： 1、胰蛋白酶，亦可采购Leagene的胰蛋白酶-EDTA溶液(0.25%:0.02%)(CC0130) 2、胎牛血清(FCS) 3、离心机 4、PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液 操作步骤(仅供参考)： （一）组织细胞样本的常规操作 1、制备细胞悬液: 新鲜组织经过胰蛋白酶或胶原酶等消化处理，通过适当方法制备成细胞悬液，离心弃上清。 2、裂解: 加入3～5倍细胞沉淀体积的Tris-NH4Cl Lysis Buffer，轻柔吹打混匀，裂解2～3min。本操作步骤在4℃条件下操作更佳，亦可在室温下操作。 3、离心: 将细胞置于100%的胎牛血清中，4℃，300～400g离心10min，弃红色上清。如无低温离心机本步骤亦可在室温下操作。

Triton-NH4OH细胞裂解液

Triton-NH 4OH 细胞裂解液 简介： 在生物科研领域，经常需要去除红细胞，去除红细胞的方法有多种，如ACK Lysis Buffer 、Tris-氯化铵红细胞裂解液、Gey's Lysis Buffer 。Leagene Triton-NH 4OH 细胞裂解液(Triton-NH 4OH Lysis Buffer)经过优化配方，在裂解无核红细胞的同时几乎不损伤淋巴细胞(Lymphocyte)或其它有细胞核的细胞。本裂解液经过滤除菌，经过Triton-NH 4OH Lysis Buffer 处理过的血液或组织细胞样品可以用于后续的细胞培养、细胞融合以及核酸或蛋白的提取及各种常规的分析和检测。 组成： 操作步骤(仅供参考)： (一)组织细胞样本的常规操作 1、制备细胞悬液: 新鲜组织经过胰蛋白酶或胶原酶等消化处理，通过适当方法制备成细胞悬液，离心弃上清。 2、裂解: 加入细胞沉淀体积的Triton-NH 4OH Lysis Buffer ，轻柔吹打混匀，裂解。本操作步骤在4℃条件下操作更佳，亦可在室温下操作。 3、离心: 4℃离心，弃红色上清。如无低温离心机，本步骤亦可在室温下操作。 5、洗涤：根据实验要求加入适量PBS 、HBSS 、生理盐水或无血清培养液，轻柔混匀重悬沉淀。 6、如有必要，重复上述步骤5一次，共洗涤1～2次。 7、根据实验需要用适当溶液重悬细胞沉淀，进行计数、培养等后续实验。 (二)组织细胞样本的快速操作(无需洗涤) 1、制备细胞悬液：新鲜组织经过胰蛋白酶或胶原酶等消化处理，通过适当方法制备成细胞悬液，离心弃上清。 2、裂解：加入细胞沉淀体积的Triton-NH 4OH Lysis Buffer ，轻柔吹打混匀，裂解。本操作步骤在4℃条件下操作更佳，亦可在室温下操作。 3、加入 PBS 、HBSS 、生理盐水或无血清培养液，轻柔混匀。 4、离心：4℃离心，弃红色上清，本离心步骤亦可在室温下操作。 5、如果发现红细胞裂解不完全，可以重复上述步骤2～4各一次。 编号 名称 CS0005 Storage Triton-NH 4OH Lysis Buffer 100ml 4℃ 使用说明书 1份