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蓖麻毒素的分离与提纯

蓖麻毒素的分离与提纯
蓖麻毒素的分离与提纯

蓖麻毒素的分离与提纯

近年来,从蓖麻中提取分离蓖麻毒素又是一个新的研究热点。首先,是因为蓖麻毒素有很好的药用价值,如用于医药、农药,特别是用于抗肿瘤的靶向药物。其次,在检测中制备标准样品是必备的。

前人在研究蓖麻毒素的分离与提纯方法时,提出了不同的分离与提纯方法。

温燕梅等在“蓖麻不同部位杀虫活性成分蓖麻碱的提取及含量”一文中提出了用微波辅助提取蓖麻不同部位的蓖麻碱。蓖麻的提取:蓖麻不同部位在鼓风干燥箱50 ℃下烘至恒重,粉碎,用乙醚回流提取2 h,去除其中的油脂和色素,自然晾干备用。按照参考文献[5]方法,称取30 g,以料液质量比1∶20加入水,在微波炉以中高火作用15 min,趁热过滤,将滤渣重复上述步骤再提取1次。将两次的粗提取液合并,搅拌均匀,用旋转蒸发仪浓缩,然后用鼓风干燥箱于70 ℃下烘干成膏状,用索氏提取器加入乙醇回流提取2 h并浓缩至30 mL 左右,让其缓慢冷却析出结晶。

郑成在“蓖麻碱的提取、纯化、改性及其杀虫活性研究”一文中也是用微波辅助的方法进行提取蓖麻碱。

赵丹在“蓖麻毒蛋白的提纯及杀虫效果研究”一文中提出用Nicolson等的方法提纯毒蛋白。称取40.0g脱壳蓖麻籽,120ml0.lmol/L pH7.2磷酸缓冲液匀浆,4℃冰箱中抽提24小时,4000rm/min离心20min,小心去除表面脂肪层取上

清液,上清液中加入固体(NH

4)

2

SO

4

至30%饱和度,4o C冰箱过夜。4O00rm/min离

心20min,取上清。上清液中加入固体(NH

4)

2

SO

4

饱和度50%,4o C冰箱保存8h,

4000rm/min离心20min,弃上清液。将沉淀用适量001mol/L pH.72磷酸缓冲液溶解,在001mol/L pH.72磷酸缓冲液中透析去盐。用PEG10000覆盖透析袋至于4℃冰箱中过夜,浓缩得粗提取液。选用2*25cm层析柱,将Sepharose 4B缓慢装入层析柱中,避免产生气泡和断层,以0.01mol/LpH7.2磷酸缓冲液平衡12h,用核酸蛋白检测仪检测28Onm波长的吸收峰。将浓缩的粗毒液缓慢加入层析柱中,动作轻柔避免破坏胶面。使蓖麻毒素充分吸附在柱上。用0.01mol/LpH7.2磷酸缓冲液洗脱,核酸蛋白检测仪检测280nm波长下吸收峰,直至吸光值下降至0.1以下。用0.01mol/LpH7.2磷酸缓冲液透析收集液除去半乳糖,EPG10000适当浓缩后,备用。用0.01mol/LpH7.2磷酸缓冲液平衡并洗脱,蛋白检测仪检测28Omn 吸光值,收集吸收峰。

高宝岩在“蓖麻毒蛋白的提取及分析”一文中也是此方法提纯收集毒蛋白的。

而他在“蓖麻碱的提取及光谱研究”一文中是用,取上面所得蓖麻饼粕干粉20g, 装入索氏提取器回流料斗, 烧瓶中加入200mL 乙醇, 水浴加热提取8-10h, 提取液采用减压低温蒸馏可回收大部分乙醇, 剩下少许样品溶液进行真空干燥4h, 干燥后所剩物质溶于20mL 热水中, 冷却后用4℃乙醚进一步萃取以除去少量残余的油脂, 连续萃取3- 4 次, 所得水溶液采用低温真空干燥箱干燥, 所得产物为①。用乙腈反复洗涤①, 洗涤液合并, 真空干燥得蓖麻碱②, 进一步精制可将②溶于乙醇, 在乙醇中重结晶。

赵青余等在“蓖麻碱的分离鉴定及其含量测定方法的研究”一文中用蓖麻饼500 g, 加水2 000 mL, 加热煮沸并保持微沸, 提取3 次, 每次2 h, 合并水提液, 减压浓缩至粘稠膏状, 加入氯仿回流提取 3 次, 合并氯仿提取液, 减压浓缩至干, 用乙醚冲洗多次除去油脂后, 用无水乙醇重结晶, 得无色棱柱状结晶I。此结晶就是蓖麻碱。

张海悦在“蓖麻碱的提取纯化及结构分析”一文用的方法与上述相同,就是溶剂的顺序和选择及温度有一点点区别。

王春龙在“蓖麻碱的化学提取及其在黑大豆上的应用”一文中用氯仿、乙醇、甲醇三种不同化学溶剂分别从蓖麻籽壳和干燥的子叶中提取蓖麻碱。

(1)从蓖麻籽壳中提取蓖麻碱的化学提取方法

用氯仿作为溶剂进行提取将经过通风干燥过的蓖麻籽壳分别称取30克、40克、50克,用食品粉碎机粉碎,粉碎效果达到能够通过100目双层筛布程度。加入乙醚和石油醚混合液(1:2),固液比(l:4),放入超声波仪中超声20分钟,并不断用玻璃棒搅拌,取出后静止停放,待上层混合液澄清时将其倾出。反复上述操作3次后,通过低温干燥器进行干燥,得到松散的蓖麻籽壳。配置浓度为3%0稀盐酸水溶液,将称取的蓖麻籽壳按固液比1:20分别置于所配置的稀酸溶液中进行煎煮,煎煮时间为2h、4h、6h,煎煮次数为3次。经过2h煎煮后,将上述的稀酸溶液分别收集,用中速滤纸进行过滤,然后将滤液置于分液漏斗中,倒入石油醚进一步去除油脂、蹂质等物质,滤液与石油醚混合比例为1:2,反复操作3次,去除杂质后将滤液回收,用浓氨水将溶液调为中性后,将滤液通过浓缩得到粘稠的膏状物后称取质量。然后进行第二次煎煮,煎煮时间仍为2h,收集稀酸溶液,用中速滤纸进行过滤,去除杂质,滤液浓缩后称取质量,再进行第三次煎煮,操作方法同上。煎煮时间4h、6h的方法同上。

经过上述方法即可得到蓖麻碱的粗提物,称取从蓖麻籽壳中提取的蓖麻碱粗

提物5g,经硅胶展拌后包于滤纸包内,分别放入500ml装有200ml氯仿的索式提取器内进行回流提取,回流时间设为2h、4h、6h、8h、12h,回流提取后将溶液收集,通过旋转蒸发仪回收大部分氯仿,附着在旋转瓶内的淡黄色物质为蓖麻碱生物总碱,将其转移至容量瓶中,再次通过乙醇在超声波仪中进行脱色洗涤,蒸去乙醇,既得无色针状结晶蓖麻碱生物总碱。称取其质量,进行比较。

用乙醇作为溶剂进行提取经过上述方法即可得到蓖麻碱的粗提物,称取蓖麻籽壳中提取的蓖麻碱粗提物5g,经硅胶展拌后包于滤纸包内,分别放入50Oml装有 20Oml75%乙醇的索式提取器内进行回流提取,回流时间设为2h、4h、6h、8h、12h,回流提取后将溶液收集,通过旋转蒸发仪回收大部分乙醇,附着在旋转瓶内的褐色物质为蓖麻碱生物总碱,将其转移至容量瓶中,再次通过乙醇在超声波仪中进行脱色洗涤,蒸去乙醇,既得无色针状结晶蓖麻碱生物总碱。称取其质量,进行比较。

用甲醇作为溶剂进行提取经过上述方法即可得到蓖麻碱的粗提物,称取从蓖麻籽壳中提取的蓖麻碱粗提物5g,经硅胶展拌后包于滤纸包内,分别放入500ml装有20Oml甲醇的索式提取器内进行回流提取,回流时间设为2h、4h、6h、8h、12h,回流提取后将溶液收集,通过旋转蒸发仪回收大部分甲醇,附着在旋转瓶内的褐色物质为蓖麻碱生物总碱,将其转移至容量瓶中,再次通过乙醇在超声波仪中进行脱色洗涤,蒸去乙醇,既得无色针状结晶蓖麻碱生物总碱。称取其质量,进行比较。

在蓖麻籽壳中,其结果是蓖麻总碱的提取乙醇为提取溶剂效果最佳,其次是甲醇,再次是氯仿。蓖麻子叶中也是用上述三种方法提取蓖麻碱,其结果是从蓖麻子叶粗提物中提取蓖麻总碱以乙醇为提取溶剂效果最佳,其次是甲醇,再次是氯仿。

有毒植物的种类及毒性分析

有毒植物的种类及毒性分析 有毒植物 植物广泛分布在自然界,是自然不可缺少的一部分,提供给人类食物,同时是重要的工业原料。它们与人们的生活息息相关。但是植物自身的化学成分复杂,其中有很多是有毒的物质,不慎接触到,可能会引起很多疾病甚至死亡。在小说中也经常能看到植物的身影,这里我想按照植物中主要致毒成分来进行分类对有毒的植物进行一个比较详细的概括。其中有很多是大家非常熟悉的,此前可能也没有了解到它们的毒性。 有毒植物的种类 一、含甙类的植物 1、夹竹桃:常绿灌木,开桃红色或白色花,分布广泛,其叶、花及树皮均有毒。(我 亲见过,小时候喜欢采它的花玩,现在学习的地方有好多夹竹桃,只能欣赏再不敢动手了) 2、洋地黄:亦称紫花毛地黄,草本植物,各地均有栽培。全柱覆盖短毛,叶卵形,初夏开花,朝向一侧,其叶有毒。 3、铃兰:草本植物,东北及北部山林中野生,花为钟状,白色有香气,全草有毒。 4、毒毛旋花:亦称箭毒羊角拗,灌木,我国云南、广东有栽培,花为黄色,有紫色斑点,白色乳汁,全株有毒。 5、毒箭木:亦称“见血封喉”,落叶乔木,分布于广西、海南等地,高20~25米,叶卵状椭圆形,果实肉质呈紫红色,其液汁有毒。 6、其他:高粱苗、木薯、杏桃李梅的仁、远志、桔梗、皂荚等。 二、含生物碱类的植物 1、曼陀罗:草本植物,高1~2米,茎直立,叶卵圆形,夏季开花,花筒状,花冠漏斗 状,白色,全株有毒,种子毒性最强。 2、颠茄:多年生草本植物,叶子互生,一大一小,夏季开花,钟状,淡紫色,果实为浆果球形,成熟时黑紫色,其叶和根有毒。

3、天仙子:草本植物,我国东北、河北、甘肃等地有野生,全株有毛,味臭,夏季开花,漏斗状呈黄色,全株有毒。 4、乌头:草本植物,分布于我国中部及东部山地丘陵,茎直立,秋季开花,其根有毒。 5、毒芹:草本植物,分布于东北、华北、西北及内蒙一带,根状茎肥大有香气和甜味,秋季茎中空,花为白色,全草有毒。 6、钩吻:亦称断肠草,常绿灌木,夏季开花,我国云南、广东、广西、福建有分布,其根、茎、叶均有毒,民间用来杀虫。 7、藏红花:多年生草本,花期11月上旬至中旬,毒素为秋水仙碱,中毒症状为恶心、呕吐及腹泻,大量使用可致命。 8、荷包牡丹:罂粟科多年生草本,株高30~60cm,具肉质根状茎。全株有毒,能引起抽搐等神经症状。(包括所有罂粟花都有毒性) 9、贝母:多年生草本植物,常作室内植物,全株有毒,含有贝母碱,会引起喉部过敏,大量摄入可引起喉咙肿胀窒息。 10、蓖麻:大戟科蓖麻属一年生或多年生草本,全株有毒,含有蓖麻碱和蓖麻毒素,可灼伤口喉,引起抽搐并可致死。 11、水仙:石蒜科多年生草本,为中国著名花卉之一,但却有毒,误食后有呕吐、腹痛、脉搏频微、出冷汗、下痢、呼吸不规律、体温上升、昏睡、虚脱等,严重者发生痉挛、麻痹而死。 12、夺命草:高约30~60厘米,茎基部着生长条形叶.花茎顶端稀疏着生绿白色六瓣花.分布于北美草地及多岩多林地区.,误食可引起消化系统障碍,中毒症状与百合相似,严重时可致死。 13、飞燕草:毛莨科一、二年生草本植物,株高50-90厘米,全草有毒,其中以种子的毒性最大,主要含有生物碱,误食后会引起神经系统中毒,中毒后呼吸困难,血液循环障碍,肌肉、神经麻痹或产生痉挛现象。 14、风信子:风信子科多年生草本植物,球茎有毒性,如果误食,会引起头晕、胃痉挛、拉肚子等症状,严重时可导致瘫痪并可致命。

(整理)常见的有毒植物

1.名字:红花石蒜(彼岸花,忽地笑,蟑螂花、龙爪花) 学名:Lycoris radiata 科目:石蒜科 地点:湖南郴州 作者:桐壶更衣 鳞茎可制酒精,可提取石蒜碱,也可做农药。 其毒性为全株有毒,鳞茎毒性较大。食后有流涎、呕吐、下泻、舌硬直、惊厥、四肢发冷、休克,以至呼吸麻痹而死 2.名字:海芒果(别名: 牛心荔、黄金茄)

学名: Cerbera manghas 科: 夹竹桃科 拍摄时间:2008.05 地点:深圳 作者:桐壶更衣 生长在印度西南部地区,含有一种被称作“海芒果毒素”的剧毒物质,其分子结构与异羟洋地黄毒苷(一种强心剂)非常相似。海芒果毒素会阻断钙离子在心肌中的传输通道,一般在食用后的3~6小时内便会毒性发作,致人死亡。 3.名字:羊角拗(别名: 羊角扭、断肠草、打破碗花) 学名: Semen Strophanthi Divaricati

科: 夹竹桃科 原产非洲热带。我国云南、广东有栽培。 含毒苷类植物中毒目前因毒苷引起中毒的有三类:强心苷类、氰苷类、皂苷类。全株植物剧毒,尤其以种子毒性最强,误食能致死。

4.名字:曼陀罗(醉心花、狗核桃、洋金花) 学名:Dature Stramonium 科目:茄科 原产热带及亚热带,我国各省均有分布。喜温暖、向阳及排水良好的砂质壤土。 全草有毒,以果实特别是种子毒性最大,嫩叶次之。干叶的毒性比鲜叶小。有毒成分:主要含东莨菪碱、莨菪碱,其次有阿托品、阿朴阿托品、降阿托品、曼陀罗素. 在临床上可被用作催吐剂、催泻剂、麻醉剂和致幻剂. 临床应用: 治疗破伤风,治疗癌症,慢性支气管炎,消化性溃疡,帕金森症,精神分裂症,麻醉,风湿性关节炎,强直性脊柱炎,银屑病. 不良反应:出现于服后30分钟到一小时,早期可见口干,咽喉灼热,吞咽困难,皮肤潮红,结膜充血,偶有斑疹,头晕头痛,视力模糊,瞳孔散大,心动过速,狂躁,幻觉,胡话,体温上升,大小便失禁,严重者24小时候昏迷,血压下降,最后因呼吸中枢麻痹,缺氧而死. 救治措施: 1.先用碘酒10-30滴,加温开水口服,使生物碱沉淀,然后用高锰酸钾洗胃,继二给硫酸镁导泻,或用生理盐水高位灌肠. 2.运用毛果云香碱,麽次1-3MG,皮下注射,15分钟一次. 3.对症处理,对烦躁不安,抽搐者用镇静剂,但禁止用吗啡和杜冷丁,高热者物理降温,酌情补液,吸氧. 4.绿豆120G,银花60G,连翘30G,甘草15G.水煎服用,或者用茶叶30G,煎浓汁调豆腐250G,1次服下. 5.名字:大茶药(胡蔓藤、钩吻、山砒霜、烂肠草,断肠草) 学名:Gelsemium elegans Benth 科目:马钱科葫蔓藤属 深圳各地灌丛中或次森林常见。常绿木质藤本,花多而芳香,花瓣黄色,艳丽夺目。 全草有剧毒,误吃很少也能致命。尤其根、叶毒性最大。这种学名“钩吻”的断肠草是剧毒草药,在中医学里只限外用,不可内服,千万小心。 已发生多起误当成金银花吃用的中毒事件。

混合物的分离和提纯知识点

第一节化学实验基本方法 混合物的分离和提纯 一、分离和提纯 分离:把混合物中的几种物质分开,分别得到纯净的物质 提纯:将混合物中的杂质通过物理或化学方法除去而得到所需物质的过程 二、混合物分离和提纯的常用方法:过滤、蒸发、结晶、蒸馏、萃取 不溶性杂质的除去:溶解、过滤、蒸发结晶 1、过滤:是分离固液混合物的最常用方法之一,主要是除去液体中的不溶性固体 实例:除去食盐中不溶性泥沙 (1)主要仪器:烧杯、漏斗、滤纸、铁架台(铁圈)、玻璃棒 (2)过滤操作注意要点:一帖(滤纸紧贴漏斗内壁),二低(滤纸边缘低于漏斗边缘,液体的液面略低于滤纸边缘),三靠(漏斗颈的末端紧靠紧靠烧杯内壁,玻璃棒的低端紧靠三层滤纸处,烧杯尖嘴紧靠玻璃棒,) 2、结晶:利用溶剂对被提纯物质及杂质的溶解度不同,可以使被提纯的物质从过饱和溶液中析出,而让杂质全部或大部分仍留在溶液中,从而达到被提纯的目的。 (1)实验仪器:蒸发皿,酒精灯,玻璃棒,铁架台(铁圈),烧杯 (2)结晶方法:蒸发结晶、冷却结晶 蒸发结晶:通过蒸发或气化,减少一部分溶剂使溶液达到饱和而析出晶体。 此法主要用于溶解度随温度改变而变化不大的物质。(氯化钠) 冷却结晶:通过降低温度,使溶液冷却达到饱和而析出晶体。重结晶指的是重复冷却结晶。此法主要用于溶解度随温度下降而明显减小的物质。(硝酸钾) 蒸发结晶操作注意:①蒸发过程中要不断用玻璃棒搅拌(搅拌防止局部温度过高造成液体飞溅)②蒸发皿内溶液不能超过其容量的2/3 ③当溶液中出现较多固体时停止加热靠余热蒸发剩余的水分 3、粗盐的提纯 (1)粗盐提纯中用到几次玻璃棒?作用分别是什么?共4次,①溶解:搅拌,加速溶解 ②过滤:引流③蒸发:搅拌,使受热均匀,防止液体飞溅④转移固体 (2)粗盐中含有较多杂质(不溶性的泥沙、可溶性的CaCl2、MgCl2、硫酸盐Na2SO4) 可溶性杂质的除去:除杂原则:不增、不减、易分、易复原 不增:提纯过程中不增加新的杂质不减:不减少欲被提纯的物质 易分:被提纯物与杂质容易分离易复原:被提纯物质容易复原 (3)SO42-的检验方法:取少量待测溶液,先加入稀盐酸酸化(排除CO32-、Ag+干扰),若无沉淀生成,再加入BaCl2溶液,若出现不溶于稀酸的白色沉淀,则存在SO42-离子 (4)粗盐提纯中可溶性杂质(CaCl2、MgCl2、硫酸盐Na2SO4)的除去 除杂试剂选择:Na2CO3、NaOH、BaCl2(除杂试剂必过量,过量试剂必除去)还需要适量盐酸除杂顺序:Na2CO3要在BaCl2之后,NaOH只需在盐酸之前 其中涉及方程式:Na2SO4+BaCl2=BaSO4↓+2NaCl CaCl2+Na2CO3=CaCO3↓+2NaCl BaCl2+Na2CO3=BaCO3↓+2NaCl MgCl2+2NaOH=Mg(OH)2↓+2NaCl HCl+NaOH=NaCl+H2O HCl+Na2CO3=NaCl+H2O+ CO2↑ 4、蒸馏:利用液态混合物(互溶)中各组分沸点的不同,加热使其某一组分变成蒸气,经过冷凝后再变成液体,从而跟其他组分分开,目的是将易挥发、难挥发或不挥发的杂质除去

蛋白质毒素

蛋白质毒素 在自然界中,许多动物、植物、细菌和真菌都能产生大分子的蛋白毒素。蛋白质毒素是指生物体所生产出来的毒物,这些物质通常是一些会干扰生物体中其他大分子作用的蛋白质,由生物体产生的、极少量即可引起动物中毒的物质。包括植物毒素、细菌毒素、动物毒素和真菌毒素四类微量毒素,侵入机体后即可引起生物机能破坏,致使人畜中毒或死亡。在生物进化的漫长旅程中,毒蛋白的存在赋予了这些生物品系的独特的选择优势:一方面毒蛋白可防御外界病原体对生物的侵害,同时又可抵御物种之间的同化。 一、蛋白毒素种类 毒素的分类方法很多,根据其来源可分为动物、植物、细菌和真菌等毒素;根据其化学结构,可分为小分子有机化合物、肽类和蛋白类毒素等;目前一般将上述两种方法结合进行分类,以缩小范围。天然蛋白类毒素主要包括植物蛋白毒素、细菌蛋白毒素和真菌蛋白毒素等家族。 1 植物蛋白毒素 包括植物毒素和植物单链核糖体失活蛋白(简称RIP)。典型的植物毒素有蓖麻毒素(ricin)、相思子毒素(abrin)、蒴莲毒素(volkensin)、欧寄生毒素(viscumin)和药莲毒素(modeccin)等。这些毒素均为糖蛋白,分子量在60~65kD之间,其分子由A、B两链组成,通过二硫键连接。典型的RIP家族成员包括丝瓜子蛋白(luffin)、天花粉蛋白(trichosanthin)、美洲商陆抗病毒蛋白(简称PAP)、皂草蛋白(saporin)、康乃馨蛋白(dianthin)和多花白树素(gelonin)等。 1.1 相思子毒素 相思子毒素是从豆科藤本植物相思子(Abrus precatorius)的种子中提取的一种剧毒性高分子蛋白毒素,其含量约占种子2.8%~3.0%。相对分子质量介于60000-65000之间,分子由A 、B两条多肽链通过1个二硫键连接而成。完整毒素在SDS- PAGE分析时呈一条蛋白带,经二巯基乙醇处理后,A、B两条链分离开,其中A链呈酸性,分子质量约为30000,与蓖麻毒素A 链存在102个相同的氨基酸残基;B链呈中性,分子质量约35000。有关试验表明,相思子毒素两条链经二巯基乙醇还原分离开后,其活性并不丧失。相思子毒素所含的糖基主要存在于B链上,糖的类型为甘露糖和N-乙酰葡萄糖胺,毒素经糖基修饰后,可以增加其自身结构的稳定性,防止降解,增强对极端条件的适应性。 纯化后的相思子毒素为微黄白色无定形粉末,无味,易溶于水、氯化钠和甘油溶液,不耐热。60 ℃经30分钟部分失活,80 ℃经30分钟则大部分失活,100 ℃经30分钟毒性及抗肿瘤活性完全消失。印度安达曼岛上居民将相思子种子煮熟后作为食物食用。完整的相思子毒素经反复冰冻和融化对其毒性影响很小。在0.1 mol/L半乳糖溶液中,毒素可在冰箱中储存数月而不会失活。分离开的链要比完整毒素更不稳定。 1.2 蓖麻毒素 蓖麻毒素是一种具有两条肽链的高毒性的植物蛋白。它主要存在于蓖麻籽中。蓖麻毒素的一、二级结构已清楚,由A、B两条链组成。A链比B链稍短,两链之间以一个二硫键相连接。它含有共价键结合的糖分子,糖的主要组成是甘露糖、葡萄糖和半乳糖。分子量为66000。毒素为白色粉末状或结晶形固体,无味。不溶于乙醇、乙醚、三氯甲烷、甲苯等有机溶剂,溶于酸性稀释液或盐类水溶液,在饱和硫酸铁溶液中,能沉淀析出。在0.1克分子半乳糖溶液中,毒素可在冰箱中贮存数月而不失活性,但煮沸易失去活性。 蓖麻毒素是一种细胞毒。当毒素进入体内,A、B链分开。A链通过渗透经细胞膜进入细胞浆,主要使真核细胞的核糖体抑制失活,从而抑制蛋白质的合成。B链与细胞表面结合,

土壤中的微生物

1.土壤是微生物生长和栖息的良好基地 土壤具有绝大多数微生物生活所需的各种条件,是自然界微生物生长繁殖的良好基地:其原因在于土壤舍有丰富的动植物和微生物残体,可供微生物作为碳源、氮源和能源。土壤台有大量而全面的矿质元素,供微生物生命活动所需。土壤中的水分都可满足微生物对水分的需求。不论通气条件如何,都可适宜某些微生物类群的生长。通气条件好可为好氧性微生物创造生活条件;通气条件差,处于厌氧状态时又成了厌氧性微生物发育的理想环境。土壤中的通气状况变化时,生活其问的微生物各类群之间的相对数量也起变化。土壤的pH值范围。3.5~10.0之间,多数在5.5~8.5之间,而大多数微生物的适宜生长pH也在这一范围。即使在较酸或较碱性的土壤中.也有较耐酸、喜酸或较耐碱、喜碱的微生物发育繁殖,各得其所地生活着。土壤温度变化幅度小而缓慢.夏季比空气温度低,而冬季又比空气温度高,这一特性极有利于微生物的生长。土壤的温度范围恰是中温性和低温性微生物生长的适宜范围。 因此,土壤是微生物资源的巨大宝库。事实上,许多对人类有重大影响的微生物种大多是从土壤中分离获得的,如大多数产生抗生素的放线菌就是分离自土壤。 2.土壤中的微生物数量与分布 土壤中微生物的类群、数量与分布,由于土壤质地发育母质、发育历史、肥力、季节、作物种埴状况、土壤深度和层次等等不同而有很大差异。lg肥沃的菜园土中常可含有108个甚至更多的微生物,而在贫瘠土壤如生荒土中仅有103~107个微生物,甚至更低。土壤微生物中细菌最多,作用强度和影响最大,放线菌和真菌类次之,藻类和原生动物等数量较少,影响也小。 (1)细菌 土壤中细菌可占土壤微生物总量的70%~90%,其生物量可占土壤重量的 1/10000左右。但它们数量大,个体小,与土壤接触的表面积特别大,是土壤中最大的生命活动面,也是土壤中最活跃的生物因素.推动着土壤中的各种物质循环。细菌占土壤有机质的1%左右。土壤中的细菌大多为异养型细菌,少数为自养型细菌。土壤细菌有许多不同的生理类群,如固氮细菌、氨化细菌、纤维分解细菌、硝化细菌、反硝化细菌、硫酸盐还原细菌、产甲烷细菌等在土壤中都有存在。细茼在土壤中的分布方式一般是黏附于土壤团粒表面,形成菌落或菌团,也有一部分散布于土壤溶液中,且大多处于代谢活动活跃的营养体状态。但由于它们本身的特点和土壤状况不一样.其分布也很不一样。 细菌积极参与着有机物的分解、腐殖质的合成和各种矿质元素的转化; (2)放线菌 土壤中放线菌的数量仅次于细菌.它们以分枝丝状营养体缠绕于有机物或土粒表面,并伸是于土壤孔隙中。1g土壤中的放线菌孢子可达107~108个.占土壤微生物总数的5%~30%.在有机物含量丰富和偏碱性土壤中这个比例更高。

有机物分离和提纯的常用方法(实用)

有机物分离和提纯的常用方法 分离和提纯有机物的一般原则是:根据混合物中各成分的化学性质和物理性质的差异进行化学和物理处理,以达到处理和提纯的目的,其中化学处理往往是为物理处理作准备,最后均要用物理方法进行分离和提纯。 方法和操作简述如下: 1. 分液法��常用于两种均不溶于水或一种溶于水,而另一种不溶于水的有机物的分离和提纯。步骤如下: 分液前所加试剂必须与其中一种有机物反应生成溶于水的物质或溶解其中一种有机物,使其分层。如分离溴乙烷与乙醇(一种溶于水,另一种不溶于水): 又如分离苯和苯酚: 2. 蒸馏法��适用于均溶于水或均不溶于水的几种液态有机混合物的分离和提纯。步骤为: 蒸馏前所加化学试剂必须与其中部分有机物反应生成难挥发的化合物,且本身也难挥发。如分离乙酸和乙醇(均溶于水):

3. 洗气法��适用于气体混合物的分离提纯。步骤为: 例如: 此外,蛋白质的提纯和分离,用渗析法;肥皂与甘油的分离,用盐析法。 有机物分离和提纯的常用方法 1,洗气 2,萃取分液溴苯(Br2),硝基苯(NO2),苯(苯酚),乙酸乙酯(乙酸) 3, a,制无水酒精:加新制生石灰蒸馏 b,酒精(羧酸)加新制生石灰(或NaOH固体)蒸馏c,乙醚中混有乙醇:加Na,蒸馏 d,液态烃:分馏 4,渗析 a,蛋白质中含有Na2SO4 b,淀粉中KI 5,升华奈(NaCl) 鉴别有机物的常用试剂 所谓鉴别,就是根据给定的两种或两种以上的被检物质的性质,用物理方法或化学方法,通过必要的化学实验,根据产生的不同现象,把它们一一区别开来.有机物的鉴别主要是利用官能团的特征反应进行鉴别.鉴别有机物常用的试剂及特征反应有以下几种: 1. 水 适用于不溶于水,且密度不同的有机物的鉴别.例如:苯与硝基苯. 2. 溴水 (1)与分子结构中含有C=C键或键的有机物发生加成反应而褪色.例如:烯烃,炔烃和二烯烃等. (2)与含有醛基的物质发生氧化还原反应而褪色.例如:醛类,甲酸. (3)与苯酚发生取代反应而褪色,且生成白色沉淀. 3. 酸性溶液 (1)与分子结构中含有C=C键或键的不饱和有机物发生氧化还原反应而褪色.例如:烯烃,炔烃和二烯烃等. (2)苯的同系物的侧链被氧化而褪色.例如:甲苯,二甲苯等. (3)与含有羟基,醛基的物质发生氧化还原反应而使褪色.例如:醇类,醛类,单糖等. 4. 银氨溶液(托伦试剂) 与含有醛基的物质水浴加热发生银镜反应.例如:醛类,甲酸,甲酸酯和葡萄糖等. 5. 新制悬浊液(费林试剂) (1)与较强酸性的有机酸反应,混合液澄清.例如:甲酸,乙酸等. (2)与多元醇生成绛蓝色溶液.如丙三醇. (3)与含有醛基的物质混合加热,产生砖红色沉淀.例如:醛类,甲酸,甲酸酯和葡萄糖等. 6. 金属钠 与含有羟基的物质发生置换反应产生无色气体.例如:醇类,酸类等. 7. 溶液 与苯酚反应生成紫色溶液. 8. 碘水 遇到淀粉生成蓝色溶液. 9. 溶液 与酸性较强的羧酸反应产生气体.如:乙酸和苯甲酸等.

有毒植物大全 资料共享

有毒植物大全资料共享 1. 名字:红花石蒜(彼岸花,忽地笑,蟑螂花、龙爪花) 学名:Lycoris radiata 科目:石蒜科 地点:湖南郴州 作者:桐壶更衣 鳞茎可制酒精,可提取石蒜碱,也可做农药。 其毒性为全株有毒,鳞茎毒性较大。食后有流涎、呕吐、下泻、舌硬直、惊厥、四肢发冷、休克,以至呼吸麻痹而死 660)this.width=660;" border=0> 2. 名字:海芒果(别名: 牛心荔、黄金茄) 学名: Cerbera manghas 科: 夹竹桃科 拍摄时间:2008.05 地点:深圳 作者:桐壶更衣 生长在印度西南部地区,含有一种被称作“海芒果毒素”的剧毒物质,其分子结构与异羟洋地黄毒苷(一种强心剂)非常相似。海芒果毒素会阻断钙离子在心肌中的传输通道,一般在食用后的3~6小时内便会毒性发作,致人死亡。 660)this.width=660;" border=0>

3. 名字:羊角拗(别名: 羊角扭、断肠草、打破碗花) 学名: Semen Strophanthi Divaricati 科: 夹竹桃科 原产非洲热带。我国云南、广东有栽培。 含毒苷类植物中毒目前因毒苷引起中毒的有三类:强心苷类、氰苷类、皂苷类。 全株植物剧毒,尤其以种子毒性最强,误食能致死。 660)this.width=660;" border=0>4. 名字:曼陀罗(醉心花、狗核桃、洋金花) 学名:Dature Stramonium 科目:茄科 原产热带及亚热带,我国各省均有分布。喜温暖、向阳及排水良好的砂质壤土。 全草有毒,以果实特别是种子毒性最大,嫩叶次之。干叶的毒 性比鲜叶小。有毒成分:主要含东莨菪碱、莨菪碱,其次有阿托品、阿朴阿托品、降阿托品、曼陀罗素. 在临床上可被用作催吐剂、催泻剂、麻醉剂和致幻剂. 临床应用: 治疗破伤风,治疗癌症,慢性支气管炎,消化性溃疡,帕金森症,精神分裂症,麻醉,风湿性关节炎,强直性脊柱炎,银屑病. 不良反应:出现于服后30分钟到一小时,早期可见口干,咽喉灼热,吞咽困难,皮肤潮红,结膜充血,偶有斑疹,头

大学土壤微生物分离实验报告

从土壤中分离纯培养微生物并作初步观察鉴定 实验报告 生物科学与技术系 09食品(2)班 姓名:xxx 学号:xxx

从土壤中分离纯培养微生物并作初步观察鉴定 【摘要】利用分离纯化微生物的基本操作技术对土壤中的微生物进行分离与纯化,根据菌落形态观察及一系列的生理生化试验的结果,对照种属特征初步鉴定分离纯化的微生物所属的类群。 【关键词】细菌放线菌霉菌划线分离培养基的配制高压蒸汽灭菌 前言: 在自然条件下,微生物常常在各种生态系统中群居杂聚。群落是不同种类微物的混和体。为了生产和科研的需要,人们往往需要从自然界混杂的微生物群体中分离出 具有特殊功能的纯种微生物;或重新分离被其他微生物污染或因自发突变而丧失原 有优良性状的菌株;或通过诱变及遗传改造后选出优良性状的突变株及重组株。这种获得单一菌株纯培养的方法称为微生物的分离纯化技术。纯培养是指一株菌种或一个培养物中所有的细胞或孢子都是由一个细胞分裂、繁殖而产生的后代。 分离纯化技术主要由采集样品、富集培养、纯种分离和性能测定等几个基本环节组成。 实验目的: 1、学习从土壤中分离、纯化微生物的原理与方法。 2、学习、掌握微生物的鉴定方法。 3、对提取的土样进行微生物分离、纯化培养,根据菌落的形态特征判断未知菌的类别。实验原理: 从混杂的微生物群体中获得只含有某一种或某一株微生物的过程称为微生物的分离与纯化。通过如下几种方法可以分离纯化微生物:稀释倒平板法(pour plate method)、涂布平板法(spread plate method)、稀释摇管法(dilution shake culture method)、平板划线分离法(stesak plate method)。 此次实验采取的是平板分离法,该方法操作简便,普遍用于微生物的分离与纯化,其基本原理主要包括两个方面:(一)选择适合于待分离微生物的生长条件或加入某种抑制剂造成只利于待分离微生物生长,而抑制其它微生物生长的环境,从而淘汰大部分不需要的微生物。(二)微生物在固体培养基上生长形成的单个菌落可以是由一个细

混合物的分离和提纯教案

混合物的分离和提纯(关键词导学模式教学案例) 一、教材分析 本节教材着重要让学生初步明确实验是研究化学物质的重要方法之一。化学家们要研究某种物质,首先要考虑的就是怎样从混合物中把这种物质分离提取出来,再进行分析、检测、研究它的结构、组成。本节课以研究化学物质的实验方法为主题,以研究物质的一般思路为主线,引导学生了解物质的分离与提纯的方法及其基本操作。 二、学情分析 刚进入高一的新生来自不同层次的初中学校,他们的化学实验基本技能水平参差不齐,学生间比较陌生,这些因素制约了学生自主学习活动的开展。因此我的教案中以初中化学中已学过的过滤、结晶等物质分离的方法为切入点,教师积极引导、创设合作学习的氛围。在合作学习的氛围中以讨论、交流、合作实验等学生活动为主,来完成教学任务。这种做法符合这个年龄段学生的学习心理,并能培养学生的团队意识。 三、教学设计思路 首先以浪里淘沙的故事吸引学生的兴趣, 四、教学目标 知识与技能 初步学会蒸馏和萃取、过滤、蒸发等分离与提纯的实验技能。 过程与方法 1、初步了解根据混合物的性质选择不同的方法。 2、独立或与同学合作完成一些简单的物质分离提纯操作。 3、通过动手实验,练习量取、溶解、过滤、蒸发、蒸馏、萃取、分液等基本操作,注意基本操作的规范训练。 情感态度与价值观 1、初步学习用实验设计在化学学习和科学研究中的应用等隐性目标。 2、了解化学实验为主的学科特点,加深对科学本质的认识,提高创新精神和实践能力。 五、教学重点和难点 重点 1、掌握研究物质的实验方法和分离提纯的原理和方法。

2、初步认识怎样设计实验方案,在动手实验中体验科学探究的过程,学习运用以实验为基础的实证研究方法。 难点 物质分离和提纯实验方案的设计。 六、教学方法 本节课教师根据学生特点,教材内容要求,寻求一种体现师生互动、生生互动、学生自主学习的新模式。在课堂教学过程中,采用关键词导学法、实验法、讲授法、探究法和小组合作讨论法,让学生亲自动手实验去发现问题的同时,分析问题,解决问题。 七、教学手段 教材,教辅,实验器材和药品 八、教学过程

园林景观设计师必知常见的有毒植物54种

园林景观设计师必知常见的有毒植物54种 1.名字:红花石蒜(彼岸花,忽地笑,蟑螂花、龙爪花) 学名:Lycoris radiata 科目:石蒜科 地点:湖南郴州 作者:桐壶更衣 鳞茎可制酒精,可提取石蒜碱,也可做农药。 其毒性为全株有毒,鳞茎毒性较大。食后有流涎、呕吐、下泻、舌硬直、惊厥、四肢发冷、休克,以至呼吸麻痹而死

2.名字:海芒果(别名: 牛心荔、黄金茄) 学名: Cerbera manghas 科: 夹竹桃科 拍摄时间:2008.05 地点:深圳 作者:桐壶更衣 生长在印度西南部地区,含有一种被称作“海芒果毒素”的剧毒物质,其分子结构与异羟洋地黄毒苷(一种强心剂)非常相似。海芒果毒素会阻断钙离子在心肌中的传输通道,一般在食用后的3~6小时内便会毒性发作,致人死亡。

3.名字:羊角拗(别名: 羊角扭、断肠草、打破碗花) 学名: Semen Strophanthi Divaricati 科: 夹竹桃科 原产非洲热带。我国云南、广东有栽培。 含毒苷类植物中毒目前因毒苷引起中毒的有三类:强心苷类、氰苷类、皂苷类。全株植物剧毒,尤其以种子毒性最强,误食能致死。

4.名字:曼陀罗(醉心花、狗核桃、洋金花) 学名:Dature Stramonium 科目:茄科 原产热带及亚热带,我国各省均有分布。喜温暖、向阳及排水良好的砂质壤土。 全草有毒,以果实特别是种子毒性最大,嫩叶次之。干叶的毒性比鲜叶小。有毒成分:主要含东莨菪碱、莨菪碱,其次有阿托品、阿朴阿托品、降阿托品、曼陀罗素. 在临床上可被用作催吐剂、催泻剂、麻醉剂和致幻剂. 临床应用: 治疗破伤风,治疗癌症,慢性支气管炎,消化性溃疡,帕金森症,精神分裂症,麻醉,风湿性关节炎,强直性脊柱炎,银屑病. 不良反应:出现于服后30分钟到一小时,早期可见口干,咽喉灼热,吞咽困难,皮肤潮红,结膜充血,偶有斑疹,头晕头痛,视力模糊,瞳孔散大,心动过速,狂躁,幻觉,胡话,体温上升,大小便失禁,严重者24小时候昏迷,血压下降,最后因呼吸中枢麻痹,缺氧而死. 救治措施: 1.先用碘酒10-30滴,加温开水口服,使生物碱沉淀,然后用高锰酸钾洗胃,继二给硫酸镁导泻,或用生理盐水高位灌肠. 2.运用毛果云香碱,麽次1-3MG,皮下注射,15分钟一次. 3.对症处理,对烦躁不安,抽搐者用镇静剂,但禁止用吗啡和杜冷丁,高热者物理降温,酌情补液,吸氧. 4.绿豆120G,银花60G,连翘30G,甘草15G.水煎服用,或者用茶叶30G,煎浓汁调豆腐250G,1次服下. 5.名字:大茶药(胡蔓藤、钩吻、山砒霜、烂肠草,断肠草) 学名:Gelsemium elegans Benth 科目:马钱科葫蔓藤属 深圳各地灌丛中或次森林常见。常绿木质藤本,花多而芳香,花瓣黄色,艳丽夺目。 全草有剧毒,误吃很少也能致命。尤其根、叶毒性最大。这种学名“钩吻”的断肠草是剧毒草药,在中医学里

化学分离与提纯的常用方法

化学分离与提纯的常用方法 提纯是指将混合物净化除去其杂质,得到混合物中的主体物质,提纯后的杂质不必考虑其化学成分和物理状态。混合物的分离方法有许多种,但根据其分离本质可分为两大类,一类:化学分离法,另一类:物理法,下面就混合物化学分离及提纯方法归纳如下: 分离与提纯的原则 1.引入的试剂一般只跟杂质反应。 2.后续的试剂应除去过量的前加的试剂。 3.不能引进新物质。 4.杂质与试剂反应生成的物质易与被提纯物质分离。 5.过程简单,现象明显,纯度要高。 6.尽可能将杂质转化为所需物质。 7.除去多种杂质时要考虑加入试剂的合理顺序。 8.如遇到极易溶于水的气体时,要防止倒吸现象的发生。 概念区分 清洗:从液体中分离密度较大且不溶的固体,分离沙和水; 过滤:从液体中分离不溶的固体,净化食用水; 溶解和过滤:分离两种固体,一种能溶于某溶剂,另一种则不溶,分离盐和沙; 离心分离法:从液体中分离不溶的固体,分离泥和水; 结晶法:从溶液中分离已溶解的溶质,从海水中提取食盐; 分液:分离两种不互溶的液体,分离油和水; 萃取:入适当溶剂把混合物中某成分溶解及分离,庚烷,取水溶液中的碘; 蒸馏:溶液中分离溶剂和非挥发性溶质,海水中取得纯水;

分馏:离两种互溶而沸点差别较大的液体,液态空气中分离氧和氮;石油的精炼; 升华:离两种固体,其中只有一种可以升华,离碘和沙; 吸附:去混合物中的气态或固态杂质,活性炭除去黄糖中的有色杂质; 分离和提纯常用的化学方法 1.加热法: 当混合物中混有热稳定性差的物质时,可直接加热,使热稳定性差的物质分解而分离出去。如,NaCl中混有NH4Cl,Na2CO3中混有NaHCO3等均可直接加热除去杂质。 2.沉淀法: 在混合物中加入某种试剂,使其中一种以沉淀的形式分离出去的方法。使用该方法一定要注意不能引入新的杂质。若使用多种试剂将溶液中不同微粒逐步沉淀时,应注意后加试剂的过量部分除去,最后加的试剂不引入新的杂质。如,加适量的BaCl2溶液可除去NaCl中混有的Na2SO4。

蓖麻毒素的分离、提取及活性研究

蓖麻毒素的分离、提取及活性研究 本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得四川大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文作了明确的说明并表示谢意。本学位论文成果是本人在四川I大学读书期间在侯太平教授指导下取得的,论文成果归四川I大学所有,特此声明。警2007@z衙4户j/杉四川大学硕}。学位论文蓖麻毒素的分离、提取及活性研究农药学专业研究生:高杉指导教师:侯太平本研究以蓖麻毒素灭鼠为目的,以小白鼠活性实验为筛选指标,研究了从蓖麻种子中分离蓖麻毒蛋白的方法,实现了对蓖麻毒素的最优提取,并利用得到的蓖麻籽粗提物对小白鼠进行灭鼠试验,来模拟高原鼠兔的灭鼠效果评价。最终在野外大面积应用实验中,取得了比较满意的效果。以蓖麻籽为原料,通过选用不同物质做浸提剂,单独研究了各种浸提剂对蓖麻毒素的最佳提取方法,在综合对各浸提剂在其最佳提取条件下的提取蓖麻毒素的效果后,最终确定,0.2mol/L的磷酸缓冲液在对去皮蓖麻籽的质量体积比为l:3(g/m1)时,浸提24小时后,所得混合物4000rpm离心30min,小心除去油

脂,以及离心所剩的渣滓,保留清液,在清液中加入(NH4)zS04盐析剂到80%饱和度,盐析24小时,10000rpm离心30min,再经透析,真空干燥后所得蓖麻毒素(粗毒)产率最高,同时该提取方法还兼顾到蛋白的稳定性及整个提取流程的经济性,正是要寻找的最佳工艺路线。应用提取出的蓖麻毒素(粗毒)对小白鼠做活性实验,’结果表明,蓖麻毒素对小鼠腹腔注射的LD∞为7.971ug/kg,其主要药效成分为蓖麻毒素。蓖麻毒素使小白鼠中毒后无明显异常反应,不容易造成拒食现象,能够提高灭鼠效率。而小白鼠从腹腔注射后30h开始出现死亡,直到96h后均有死亡,说明本毒饵是高效、慢性灭鼠刻。针对JlI西北高原的主要害鼠一高原鼠兔,应用蓖麻毒素灭鼠剂进行了野外四川r大学硕上学位论文防治实验,在大面积实验中,该粗毒以1%浓度配制毒饵对高原鼠兔的校正灭效为85%以上。小区实验的灭效在90%左右。通过连续半个月的观察,未发现鹰等天敌出现二次中毒现象,对受试绵羊也无明显影响,禁牧期后,未发现对牲畜造成危害。这些都充分说明,蓖麻毒素灭鼠剂在应用中是具有安全保障的。,上述研究结果说明,蓖麻毒素灭鼠剂作为一种新型的灭鼠剂,无二次中毒,对牛、羊等对非靶标生物未见明显危害,比较安全、无残毒,不造成环境污染。不失为一种优良的安全无公害灭鼠剂。关键词:蓖麻毒素;提

物质分离提纯方法总结

物质分离提纯方法总结 导读:分离提纯是指将混合物中的杂质分离出来以此提高其纯度。分离提纯作为一种重要的化学方法,为大家分享了物质分离提纯方法,一起来看看吧! 一、结晶和重结晶 溶质从溶液中析出的过程(即晶体在溶液中形成的过程)称为结晶。而重结晶是指将晶体溶于溶剂(或熔融)以后,又重新从溶液(或熔体)中结晶的过程,又称再结晶。 重结晶主要针对固态晶体物质的分离提纯,效果与溶剂选择大有关系。溶剂最好满足以下任一条件: (1)、对主要化合物是可溶性的,对杂质是微溶或不溶的溶剂。滤去杂质后,将溶液浓缩、冷却结晶,即得较纯的物质。 (2)、物质的溶解度在该溶剂中受温度影响较为显著。 中学阶段最常见的实例是KNO3和NaCl的混合物。对于该混合物的分离,主要是利用它们在同一种溶剂中的溶解度随温度的变化差别很大。则可在较高温度下将混合物溶液蒸发、浓缩,首先析出的是溶解度升高不大的NaCl晶体,除去NaCl以后的母液再浓缩和冷却后,可得较纯KNO3。另一个实际例子就是选修5第一章提到的苯甲酸的重结晶实验。重结晶往往需要进行多次,才能获得较好的纯化效果。 二、蒸馏法 蒸馏是利用混合液体或液-固体系中各组分沸点不同,使低沸点

组分蒸发,再冷凝以分离整个组分的操作过程,是蒸发和冷凝两种单元操作的联合。与其它的分离手段,它的优点在于不需使用系统组分以外的其它溶剂,从而保证不会引入新的杂质。蒸馏是分离和提纯液态化合物常用的方法之一,是重要的基本操作。但蒸馏主要针对组分沸点相差大于30℃以上时,才有理想的分离效果。对于组分沸点相差不大的混合体系则采用分馏。而分馏装置由于要使用分馏柱,高中并不常见,故高中实际教学中很少提及。一个变通的思路,是“固定组分蒸馏法”。比如,乙醇-水混合物,单纯用蒸馏分离效果很不理想,可以先加入生石灰与水反应,将水“固定”住,然后蒸馏,可以得到较纯的乙醇。 三、萃取法 萃取是利用溶质在互不相溶的溶剂里溶解度的不同,用一种溶剂把溶质从另一溶剂所组成的溶液里提取出来的操作方法。萃取分离物质时,必须用分液漏斗。萃取的`关键是找到一个合适的萃取剂,被萃取的物质在两个溶剂中的溶解度差距越大,则萃取的效果就越好。萃取法在化工制药等领域属于常用手段,但高中阶段常见的是利用有机溶剂萃取水溶液中的物质,比如利用CCl4萃取碘水中的碘。萃取完得到的CCl4-I2混合体系,可以采用蒸馏的方法进行分离,从而得到较纯的碘单质。 四、升华法 某些物质固态时就有较高的蒸气压,因此受热后不经熔化就可直

抗蓖麻毒素药物的筛选与评价

抗蓖麻毒素药物的筛选与评价 蓖麻毒素(ricin)是从蓖麻籽中提取的一种植物糖蛋白,属于RIPs家族,由两条通过二硫键连接的多糖肽链RTA与RTB构成。Ricin具有毒性强、化学性质稳定、易获取等特点,严重威胁公众生命安全。 Ricin可以快速抑制蛋白质合成,在数小时内即可造成细胞和组织损伤,却 无明显的中毒症状,而目前缺乏特异性对抗药物,因此其中毒救治非常困难。目前,对于ricin中毒患者临床上多采用催吐、透析等对症支持疗法,但对大剂量中毒或未及时送医患者疗效不佳。 研究目的:Ricin抗毒药物筛选及抗毒活性评价。研究内容:⑴在细胞及动物水平筛选和评价单克隆抗体、Rivax疫苗等大分子抗ricin药物的抗毒效果;⑵在细胞及动物水平筛选和评价小分子抗ricin药物的抗毒效果,并采用联合用药的方式评价抗ricin药物的抗毒效果。 研究方法:⑴杂交瘤技术制备单克隆抗体,ELISA法检测抗体亚类以及抗体 与ricin结合特点,无细胞系蛋白合成抑制实验评价抗体对ricin抑制蛋白合成作用的影响,通过细胞实验与动物实验评价抗体的抗毒活性;⑵采用动物实验评价Rivax配伍铝佐剂和多糖佐剂免疫小鼠后对高剂量ricin中毒的抗毒效果;⑶CCK-8法评价小分子抑制剂与ricin处理后MDCK细胞的存活率,对小分子抑制剂的抗毒活性进行体外评价;研究小分子抑制剂和ricin处理后的小鼠存活率,对小分子抑制剂抗毒活性进行体内评价。研究结果:⑴成功制备了五株单克隆抗体(13-4,13-2-4,8-1-1-8,AB6与S11)。 除13-4外,其他单克隆抗体均通过识别ricin不同表位与其结合,其中 8-1-1-8与13-2-4识别RTB链,S11识别RTA;无细胞系蛋白合成实验表明单克隆

专题:混合物的分离和提纯

专题:混合物的分离和提纯 一.混合物分离提纯(除杂)的基本原理 混合物的分离就是通过物理或化学的方法,将混合物中的各组分一一分开,并且恢复到各种物质的原来存在状态,分别得到纯净物。而混合物的提纯是通过适当的方法把混合物中的杂质除去得到纯净物,只要求被提纯的物质最终复原,不要求将除去的杂质复原。 除杂(提纯)的原则:“不减、不增、易分、简单、环保” (1)加入试剂只与杂质反应,不能与所需要提纯的物质反应,简记为不能“玉石俱焚”。 (2)除杂过程中不能引进新的杂质。 (3)生成的物质与被提纯物质易分离,杂质应转化为沉淀、气体或水等易分离的物质。 (4)步骤简单、操作简便。 (5)注意环保,要求所选世纪和方法,不能产生对环境有污染的物质,简记为“绿色环保”。 (6)保持原状,即除杂结束前,要恢复所需物质原有状态,可简记为不能“改头换面” 二.混合物分离和提纯的主要方法 1.物理方法 (1)过滤法:一般适用于不溶于液体的固体和液体混合物的分离或提纯,或可溶性固体与不溶性固体混合物之间的分离或提纯。如粗盐的提纯,分离KCl和MnO 2 混合物。 (2)蒸馏法:利用物质沸点不同来分离混合物。如工业上制取氧气、石油分馏。 (3)结晶法:一般适用于两种或多种可溶性固体混合物的分离或提纯。 a.蒸发结晶法:适用于溶解度受温度变化影响不大的物质分离或提纯, 如除去NaCl固体中混有少量KNO 3 杂质,可采用蒸发结晶法 b.降温结晶法:适用于几种固态物质的溶解度受温度较大的混合物的分离或提纯, 如除去KNO 3 固体中混有少量NaCl杂质,可采用降温结晶法 (4)磁铁法:利用磁铁能把铁吸引,可以把铁从其他不能被铁吸引的杂质中分离出来或从不能被铁吸引的物质中把铁杂质除去。? 2.化学方法 (1)化气法:在溶液中加入适量的试剂(酸),使所含杂质转化为气体除去,主要指碳酸盐,所选的酸主要由主要成分的酸根决定,加入酸要适量。 如除NaCl中Na 2CO 3 ,可加适量稀HCl:Na 2 CO 3 + 2HCl=2NaCl+ CO 2 ↑+ H 2 O (2)沉淀法:在溶液中加入试剂,将杂质转化为沉淀过滤除去。 如除去NaCl中的Na 2CO 3 ,可加适量的CaCl 2 :Na 2 CO 3 + CaCl 2 ==CaCO 3 ↓+2NaCl (3)置换法:利用金属活动性顺序除去某些盐溶液中所含杂质(盐),将杂质通过置换反应而 除去,如除FeSO 4中的CuSO 4 ,可加过量的铁粉,再过滤:CuSO 4 +Fe==Cu+FeSO 4 (4) 加热法:杂质受热易分解,通过加热将杂质除去, 如除CaO中的CaCO 3可加热:CaCO 3  高温  CaO+ CO 2 ↑ (5)溶解法:将杂质溶于某种试剂而除去,

蓖麻毒素最简单的提取

蓖麻毒素: 蓖麻毒素为具有两条肽链的高毒性的植物蛋白。它主要存在于蓖麻籽中。该毒素易损伤肝、肾等实质器官,发生出血、变性、坏死病变。并能凝集和溶解红细胞,抑制麻痹心血管和呼吸中枢,是致死的主要原因之一。 小鼠静脉注射LD50值为2.7μg/kg,腹腔注射为7~10μg/kg;对狗LD50值为0.6μg/kg;人致死量约为7mg。 蓖麻毒素除染毒水源和食物经消化道中毒外,还可作为国际间谍情报人员和恐怖分子进行暗害和破坏活动的毒素战剂武器。1978年在伦敦的国际间谍人员曾用装有蓖麻毒素的伞尖在公开场所行刺,一名被刺人员中毒身亡。同时在法国巴黎也有类似事件和发生。 结构特点: 蓖麻毒素(约占蓖麻蛋白的5%,分子量约为66 kD)是一种Ⅱ型异二聚体核糖体失活蛋白,由核糖体失活酶(蓖麻毒素A 链)及与半乳糖/N-乙酰半乳糖胺特异结合的凝集素(蓖麻毒素B 链)组成,二者之间连接一个二硫键。对蓖麻毒素的一级结构进行分析发现,A 链含有267 个氨基酸残基,分子量约为32 kD,具有催化活性,是蓖麻毒素蛋白的效应链。A 链中N 端第4 位及C 端附近分别含有1 个赖氨酸(Lys)残基,是蓖麻毒素A 链毒性作用的关键中心。B链具有2 个结构域,这2 个结构域具有同源性,由基因复制产生。结构域1 中含有氨基末端,而结构域2 中含有羧基末端。蓖麻毒

素B 链由267 个氨基酸残基组成,具有结合活性,是蓖麻毒素的结合链。 理化性质: 蓖麻毒素的一、二级结构已清楚,由A、B两条链组成。A链比B链稍短,两链之间以一个二硫键相连接。它含有共价键结合的糖分子,糖的主要组成是甘露糖、葡萄糖和半乳糖。分子量为66,000。在0.1克分子半乳糖溶液中,毒素可在冰箱中贮存数月而不失活性,但煮沸易失去活性。 蓖麻毒素是从蓖麻籽中提取的植物糖蛋白,分子量64000。毒素由A和B两条多肽链组成,两链间由一个二硫键连接。目前,A 链和B链的氨基酸序列以及二级结构已基本清楚。毒素B链上含有两个半乳糖或半乳糖残基结合位点,可和细胞表面的含半乳糖残基的受体结合,通过内陷作用进入细胞质,发挥毒性作用。蓖麻毒素A、B链上还分别含有1和2个糖支链,链末端均为甘露糖残基,可以和网状内皮细胞特别是巨噬细胞结合。后者细胞表面富含甘露糖受体,可优先摄取蓖麻毒素,这对于毒素发挥生物功能有重要的作用。

土壤微生物的分离和纯化

土壤微生物的分离和纯化 一、实验目的 1、掌握从土壤中分离、纯化微生物的原理与方法。 2、学会根据微生物培养特征初步判断未知菌的类别。 3、练习微生物接种、移植和培养的基本技术,掌握无菌操作技术。 二、实验原理 土壤是微生物生长和栖息的良好基地。土壤具有绝大多数微生物生活所需的各种条件,是自然界微生物生长繁殖的良好基地。因此,土壤是微生物资源的巨大宝库。 牛肉膏蛋白胨培养基是一种应用最广泛和最普通的细菌基础培养基,可用于培养细菌。链霉素可以抑制细菌和放线菌的生长,对酵母菌和霉菌不起作用。加入一定量链霉素的培养基可以从混杂的微生物群体中分离出酵母菌和霉菌。重铬酸钾或苯酚对土壤真菌、细菌有明显的抑制作用,可用于选择分离放线菌。 三、实验器材 1、材料:10cm左右深层土壤。 2、培养基:牛肉膏蛋白胨琼脂培养基、马丁氏培养基、高氏Ⅰ号培养基 3、其他物品:试管、三角瓶、烧杯、量筒、电子天平、精密pH试纸、培养皿、高压蒸汽灭菌锅、移液枪、枪头、接种环、酒精灯、链霉素(1万单位/ml) 、10%苯酚、无菌水。 四、实验步骤 1、土样采集:取10cm左右深层土壤10g备用。 2、制备土壤稀释液:称取土壤1g,放入有99mL无菌水的三角瓶中,振荡均匀,即为稀释10-2的土壤悬液。然后进行十倍梯度稀释,依次制备10- 3、10- 4、10- 5、10- 6、10-7 稀释度的土壤稀释液。 3、培养基平板制备:按培养基配方各配置牛肉膏蛋白胨琼脂培养基、马丁氏培养基、高氏Ⅰ号培养基各100ml。灭菌后分别倒3个平板。(高氏Ⅰ号培养基灭菌前加入10滴10%苯酚;马丁氏培养基倒平板前加入2ml去氧胆酸钠(2%)和0.4ml 1万单位/ml链霉素) 4、接种:用无菌吸管吸取0.1ml相应浓度土壤稀释液,以无菌操作技术接种在平板上,涂布均匀。细菌选用10-4、10- 5、10-6 三个稀释度接种于牛肉膏蛋白胨琼脂培养基,放线菌与霉菌选用10-2 、10-3、10-4三个稀释度,分别接种于高氏Ⅰ号培养基、马丁氏培养基。(一个稀释度一个平板) 5、培养:细菌平板于37℃恒温培养1~2d,放线菌于30℃培养2~3d,霉菌于30℃培养3~5d ,观察。 6、计数:用稀释水样检测平板的菌落计数方法进行计数,报告细菌总数/(CFU·ml-1) 7、纯化:挑取典型菌落接种于相应平板,培养条件同上,培养纯化。 五、思考题

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