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刘氏染色液(Liu Stain)

刘氏染色液(Liu Stain)
刘氏染色液(Liu Stain)

刘氏染色液(Liu Stain)

简介:

刘氏染色液是在Wright 染色基础上改良而来的一种快速染色方法,是细胞学检查中常用的染色方法之一。该染色液是根据台湾大学刘祯辉教授所研究的一种新的染色技术所配制,它与瑞氏染色(Wright Stain)一样,都是利用Romanowsky Stain 技术原理改良而来的,染色结果与瑞氏染色和迪夫快速染色也极其相似,但所需的时间比瑞氏染色要短,一般2min 以内即可完成染色刘氏染色液含1份刘氏A 液、2份刘氏B 液,分别用酸性染料(伊红)和碱性染料(亚甲蓝)等配制而成,主要用于血细胞涂片、骨髓涂片、阴道分泌物涂片、脱落细胞涂片等染色。

组成:

操作步骤(仅供参考):

(一)标准染色

1、 常规方法制备血液或骨髓等涂片,自然干燥。加入Liu A Stain 染色。

2、 滴加Liu B Stain 于Liu A Stain 上面(滴加的量为Liu A Stain 的两倍),轻吹使其充分混匀染色。

3、 水洗、干燥、镜检。

(二)快速染色

1、 常规方法制备血液或骨髓等涂片,自然干燥。加入Liu A Stain ,立即滴加Liu B Stain 于Liu A Stain 上面(滴加的量为Liu A Stain 的两倍),轻吹使其充分混匀染色。

2、 水洗、干燥、镜检。

染色结果:

细菌、细胞核

蓝色 淋巴细胞、嗜碱性粒细胞胞质 紫蓝色或蓝色

嗜酸性颗粒、成熟红细胞

粉红或橘红色 编号 名称 DM0110 3×100ml DM0110 3×500ml Storage 试剂(A): Liu A Stain 100ml 500ml RT 避光 试剂(B): Liu B Stain 2×100ml 2×500ml RT 避光 使用说明书 1份

注意事项:

1、血液涂片或骨髓涂片应厚薄均匀,以免影响染色效果。

2、血细胞涂片染色要求新鲜全血或EDTA抗凝血。

6、pH值对染色有一定影响,载玻片应清洁、无酸碱污染,以免影响染色效果。

7、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

尼氏Nissl染色

尼氏(Nissl)染色液 产品简介: 碧云天生产的尼氏(Nissl)染色液(Nissl Staining Solution)是神经生物学家广泛使用的一种Nissl染色液,用于石蜡或冰冻切片神经元细胞浆中的尼氏小体(Nissl body)染色。 Nissl染色是以德国的精神病学家和神经病理学家Franz Nissl的名字命名的。 Nissl染色液染色后呈蓝紫色,常用于显示脑或脊髓的基本神经结构。Nissl小体大而数量多,说明神经细胞合成蛋白质的功能较强;相反在神经细胞受到损伤时,Nissl小体的数量会减少甚至消失。 本Nissl染色液染色的有效成分是Cresyl violet。Cresyl violet可以和RNA或DNA结合,可以染色粗面型内质网上的核糖体,也可以染色细胞核。染色后使细胞体呈现斑驳的(mottled)蓝紫色染色。 一个包装的本染色液至少可以染色200个样品。 保存条件: 室温避光保存,至少一年有效。 注意事项: 特别注意:Nissl染色液的染色能力很强,并且染色后很难去除,请注意勿使染色液沾染皮肤和衣物等。 需自备4%多聚甲醛、70%乙醇和95%乙醇。如果需要脱水、透明和封片处理,还需自备二甲苯,中性树胶或其它封片剂。如果样品是石蜡切片,需自备90%乙醇,无水乙醇以及二甲苯。 样品数量较多时,可以使用碧云天生产的染色架和染色缸,便于操作。 第一次使用本试剂盒时建议先取1-2个样品做预实验。 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。 使用说明: 1. 样品处理 a) 对于石蜡切片: 二甲苯中脱蜡5-10分钟,共三次。注:脱蜡不充分会导致染色不均匀。 无水乙醇5分钟。 90%乙醇2分钟。 70%乙醇2分钟。 蒸馏水2分钟。 b) 对于冰冻切片: 蒸馏水2分钟。 c) 对于培养细胞: 用4%多聚甲醛固定10分钟以上。 蒸馏水洗涤2分钟。 换用新鲜的蒸馏水,再洗涤2分钟。 2. 尼氏(Nissl)染色 对于上述处理好的样品: 尼氏(Nissl)染色液染色染色3-10分钟(可以根据染色结果和要求调整时间,染色时温度提高到37-50℃对于25-50微米等较厚的切片可以使染色更均匀)。 蒸馏水洗涤2次(每次数秒钟即可)。 95%乙醇约5秒。 此时,如果需要直接观察,可以用70%乙醇洗涤2次。如需脱水、透明后封片按后续步骤进行,70%乙醇洗涤后仍可按照

瑞氏-姬姆萨染液使用说明

瑞氏-姬姆萨染液使用说明 货号:G1020 规格:100ml/500ml 保存:室温避光保存,有效期至少2年。 产品说明: 瑞氏-姬姆萨染液是一种复合染液,兼有瑞氏和姬姆萨染液二者优点,主要应用于血液和骨髓涂片染色。各种细胞及细胞的各种成分由于其化学性质不同,对瑞氏-姬姆萨染色液中的酸性染料和碱性染料的亲和力也不同,因此,标本涂片经瑞氏-姬姆萨染色液染色后,相应各类细胞呈现不同的着色,从而达到辨别其形态特征的目的。姬姆萨染色液对胞浆着色力较强,能较好的显示胞浆的嗜碱性程度,着色清晰,色泽纯正,但是对胞核着色偏深,核结构显示较差。瑞氏染色对细胞核着色程度适中,细胞核结构和色泽清晰艳丽,对核结构的识别较佳,但对胞浆着色较差,故采用瑞氏姬姆萨混合染色,具有染色效果好,对比清晰,操作简便等特点。 使用方法: 本产品可作为多种组织或细胞的染色使用,不同组织、细胞,不同的用途可以有不同的使用方法。具体方法请根据自己需求参考既有文献,本产品以涂片为例,举例说明,仅供参考。 1、取涂片、自然干燥。 2、滴加瑞氏-姬姆萨染液2-3滴覆盖整个标本涂片,染1-2分钟。 3、滴加等量PH6.4的磷酸盐缓冲液(或等量超纯水),轻轻晃动玻片,

与瑞氏-姬姆萨染色液充分混匀,染色3-5分钟。 4、水洗、吸干、镜检。 5、染色后胞浆和胞核的染色清晰分明,细胞核着色呈深浅不同的紫红色,胞浆呈浅红色,胞浆中颗粒区分明显。 注意事项: 1、涂片厚薄适宜,涂片干透后固定,否则细胞在染色过程中容易脱落。 2、所加染液不能过少,以免蒸发而使染料沉淀。冲洗时间不能过久,以防脱色。 3、染色对pH十分敏感,稀释染液必须用缓冲液,冲洗用水应接近中性,否则可能会导致细胞染色异常,形态难以识别,甚至错误。 4、染色过淡可以复染,复染时应先加缓冲液,然后加染液。染色过深可用流水冲洗或浸泡,也可用甲醇脱色。 相关试剂: P210010×多聚赖氨酸 G1010姬姆萨染色液 G1040瑞氏染液 G1100伊红染色液 G1140苏木素染色液(常规染色

HE染色和尼氏染色

HE染色 .HE染色简介: 苏木精一伊红染色法(hematoxylin-eosin staining ),简称HE染色法,石 蜡切片技术里常用的染色法之一。苏木精染液为碱性,主要使细胞核内的染色质与胞质内的核糖体着紫蓝色;伊红为酸性染料,主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色。 由于组织或细胞的不同成分对苏木精的亲和力不同及染色性质不一样。经苏木精染色后,细胞核及钙盐粘液等呈蓝色,可用盐酸酒精分化和弱碱性溶液显蓝, 如处理适宜,可使细胞核着清楚的深蓝色,胞浆等其它成分脱色。再利用胞浆染料伊红染胞浆,使胞浆的各种不同成分又呈现出深浅不同的粉红色。故各种组织或细胞成分与病变的一般形态结构特点均可显示出来。 .实验步骤: 1.脱蜡: 将石蜡切片在65C烘箱中烘烤40-60分钟,后用二甲苯(I)、(n)浸泡,各 15min ;2.水化: 无水酒精(100%乙醇)2min,下行至90%、80%、70%酒精各2min,蒸馏水(I)、 (U)各2min; 3.染色: 石蜡画圈,用滴管滴加苏木素在脑片上,放湿盒40s;(苏木素需要回收) 4.流水浸洗: 把玻片装入玻片铁架子里,在1L烧杯里用自来水对玻片进行流水浸洗;(脑片 不要对着水流直接冲) 5.1%盐酸酒精分化: 快速提拉2-3下,用时3-5s左右; 6.流水浸洗: 自来水洗3次,每次20min ; 7.伊红染色: 时间15min ; 8.流水浸洗; 9.脱水:

先在通风橱外的70%酒精浸没,时长2-3S,以颜色适宜为准,再放入通风橱中脱水,70%、80%、90%2-3s, 100%酉精I、n 1min,二甲苯I、n 2min; 10.封片: 上述处理好的玻片,取中性树胶滴入载玻片的组织上,取盖玻片从一端逐步盖下去,避免发生气泡 三.结果的判断: 3.1实验结果: 细胞核被苏木精染成鲜明的蓝色,软骨基质、钙盐颗粒呈深蓝色,粘液呈灰蓝色。细胞浆被伊红染成深浅不同的粉红色至桃红色,胞浆内嗜酸性颗粒呈反光强的鲜红色。胶原纤维呈淡粉红色,弹力纤维呈亮粉红色,红血球呈橘红色,蛋白性液体呈粉红色。 着色情况与组织或细胞的种类有关,也随其生活周期及病理变化而改变。例 如,细胞在新生时期胞浆对伊红着色较淡或轻度嗜碱,当其衰老时或发生退行性变则呈现嗜伊红浓染。胶原纤维在老化和出现透明变性时,伊红着色由浅变深。 3.2 HE染色评定标准: (1)切片完整,厚度4-6微米,厚薄均匀,无皱褶无刀痕; (2)染色核浆分明,红蓝适度,透明洁净,封裱美观。 四?注意事项: 1?染色之前一定要了解清楚所用的染色液的配制方法,不同的染色液染色后的 处理是不一样的。 2?染色过程中所用的时间以及酒精梯度脱水的选择要根据染色时的室内温度、染液的新鲜程度及实验室的实际情况等灵活掌握。在室温高、切片、染色液又是新配制的,染色时间就要短,反之时间就长。

姬姆萨染色液(10×Giemsa stain)

姬姆萨染色液(10×Giemsa Stain) 简介: 姬姆萨色素(又称吉姆萨色素)是由天青Ⅱ与伊红混合而成,Giemsa 染色原理和结果与瑞氏染色基本相同,姬姆萨染色液对胞浆着色力较强,能较好的显示胞浆的嗜碱性程度,特别是对血液和骨髓细胞中的嗜天青、嗜酸性、嗜碱性颗粒,着色清晰,但是对胞核着色偏深,核结构显色不佳,故姬姆萨染液常与瑞氏染液联合使用。Leagene Giemsa Stain 以进口的姬姆萨色素、甲醇为主要原料,含Leagene 特有衬染剂,经研磨配制而成,能呈现出清晰的细胞染色效果,经常用于组织切片、血液和细胞涂片、细菌、染色体显带、原生动物寄生虫等染色。嗜酸性颗粒为碱性蛋白质,与酸性染料伊红结合,染粉红色,称为嗜酸性物质;细胞核蛋白和淋巴细胞胞浆为酸性,与碱性染料美蓝或天青结合,染紫蓝色,称为嗜碱性物质;中性颗粒呈等电状态与伊红和美蓝均可结合,染淡紫色,称为中性物质。 Leagene Giemsa Stain(10×)由10×储存液和10×磷酸盐缓冲液组成,混合成工作液后使用;亦可以分开使用,即先用Giemsa Stain 染色液染色,再经磷酸盐缓冲液处理,亦可以得到满意的染色效果。 组成: 自备材料: 1、 载玻片 2、 蒸馏水 3、 甲醇 4、 显微镜 5、 0.1~0.5%乙酸 操作步骤(仅供参考): (一)一步法涂片染色 1、 Giemsa 工作液的配制: 按试剂(A):试剂(B):蒸馏水=1:1:8混合,即取1份Giemsa Stain(10×)、1份磷酸盐缓冲液(10×)、8份蒸馏水,充分混匀,即为Giemsa 工作液。Giemsa 工作液为即用型 编号 名称 DM0003 2×100ml DM0003 2×500ml Storage 试剂(A): Giemsa Stain (10×) 100ml 500ml RT 避光 试剂(B): 磷酸盐缓冲液(10×) 100ml 500ml RT 使用说明书 1份

瑞氏染色

1.检验目的 指导瑞氏染色的操作,进行各种涂片的分类。 2.方法原理 瑞氏染色法使细胞着色既有化学亲和反应,又有物理吸附作用。各种细胞成分化学性质 不同,对刘氏染液(改良的瑞氏染液)中酸性染料曙红和碱性染料亚甲蓝的亲和力也不 一样,标本涂片经过刘氏染液染色后,各类细胞呈现不同的着色,从而达到辨别其形态、特征的目的。 3.方法性能参数(如线性、检出限、测量区间、不确定度、准确性、精密度、灵敏度和特异性) 3.1染色速度快,效果好。 3.2仅供形态学初学者初检观察染色使用。 3.3是临床最常用的染色技术之一,用于细胞分类、寄生虫检出及分类。 4.标本类型(如血浆、血清、尿液等) 4.1血细胞涂片、脱落细胞学标本(脑脊液、胸腹水等)。 4.2标本采集后要及时制片,以免时间久细胞形态发生退化改变。 5.要求的容器、防腐剂或添加物、仪器、试剂或分析系统 5.1试剂组分: 5.2试剂存储和有效期: 6.校准程序(计量学溯源性)

7.质量控制,控制品使用水平和频率,允许限的纠正措施 8.程序步骤 8.1标准方法: 8.1.1加刘A(0.5-0.8ml)染色30S。 8.1.2再将刘B滴加于A液上面(滴量为A液的两倍)。以洗耳球轻吹,让两液充分 混合,染色1min。 8.1.3水洗(不能先倒染色液,以流水轻轻冲去),待干后镜检。 8.2快速染色,适用于脱落细胞学标本: 8.2.1加刘A(0.5-0.8ml)后,立即将刘B滴加于A液上面(滴量为A液的两倍)。以 洗耳球轻吹,让两液充分混合,染色10-20S。 8.2.2水洗(不能先倒染色液,以流水轻轻冲去),待干后镜检。 9.计算结果原理 10.生物参考区间 11.警告值、危急值(适用时) 12.检验结果可报告区间 12.1红细胞呈淡红色,白细胞浆中颗粒清楚,并显示出各种细胞特有的色彩,细胞核染 紫红色,核染色质结构清楚。 12.2脱落细胞学标本如脑脊液、胸腹水沉渣涂片,因其细胞通透性较高,应行快速染色 如染色偏深,无法辨识核结构,应适当缩短染色时间,以免误判。 13.对超出可报告范围的结果的处理 14.实验室解释 15.安全防护措施 所有标本按具有潜在传染性的标本处理。 16.最常见的误差源。 17.方法的局限性(如乳糜血、溶血、高胆红素血等干扰影响、交叉反应等) 18.参考文献 18.1全国临床检验操作规程-第三版 18.2《刘氏染液厂家说明书》 19.有关引用程序与文件 20.SOP涉及的记录与表格

吉姆萨染色液

吉姆萨染色液 【产品名称】 吉姆萨染色液 【包装规格】 货号:DM0002 单瓶包装规格分别为: A液吉姆萨染液:20ml、100ml、250ml、500ml;B液磷酸盐缓冲液:250ml、500ml、5000ml; 每套/盒包装规格分别为: A液20ml+B液250ml/盒、A液100ml+B液4×250ml/盒、 A液250ml+B液5×500ml/盒、A液500ml+B液5000ml/盒。 【预期用途】 用于组织细胞学染色从而鉴别骨髓和其他造血组织(淋巴结)中的白细胞,还可用于鉴定某些微生物。 【检验原理】 吉姆萨染色原理及结果与瑞氏染色基本相同,吉姆萨染色液(Giemsa stain,又称姬姆萨染色液)对胞浆着色力较强,能较好的显示胞浆的嗜碱性程度,特别是对血液和骨髓细胞中的嗜天青、嗜酸性、嗜碱性颗粒,着色清晰,但是对胞核着色偏深,核结构显色不佳,故吉姆萨染色常与瑞氏染色联合使用。嗜酸性颗粒为碱性蛋白质,与酸性染料伊红结合,染粉红色,称为嗜酸性物质;细胞核蛋白和淋巴细胞胞浆为酸性,与碱性染料美蓝或天青结合,染紫蓝色,称为嗜碱性物质;中性颗粒呈等电状态与伊红和美蓝均可结合,染淡紫色,称为中性物质。血细胞染色:吉姆萨染料中含有美蓝和伊红两种染料,前者为碱性,后者为酸性,它们与细胞内的各种物质具有不同的亲和力,从而使其呈现出不同的色调,以便于辨认。染色体染色:也称G显带,染色体上富舍A-T碱基对的DNA和组蛋白结合紧密,胰酶处理时不易高度抽提,和染料亲和力较强,呈深带;而富含G-C碱基对的区段结合的蛋白质被胰酶抽提,和染料亲和力降低,呈浅带。 【主要组成成分】 试剂组成主要成分 1、A液吉姆萨染液吉姆萨染料 2、B液磷酸盐缓冲液磷酸盐 【储存条件及有效期】 5℃~35℃环境保存,原包装未开封染色液的有效期为24个月,在有效期内的已开封染色液应在开封后6个月内使用完,每次用后应及时拧紧瓶盖,以免挥发或变质。 【样本要求】 血细胞:要求新鲜全血或EDTA.2K抗凝血。 染色体:中期染色体。 疟原虫:耳垂或指尖采血作薄血膜或厚血膜涂片。 【检验方法】 (一)疟原虫、血细咆染色: 1、血涂片晾干后用甲醇固定; 2、配制吉姆萨染色液:取适量的A1吉姆萨染液和A2磷酸盐缓冲液,按一定比例混合,即为吉姆萨染色液,即配即用; 3、将固定的血涂片置于吉姆萨染色液浸染;

瑞氏-姬姆萨复合染色液使用说明

瑞氏-姬姆萨复合染色液使用说明 货号:G3990 保存:室温避光保存,有效期至少2年。 产品内容: 2×100ml2×500ml Storage 试剂(A):Wright-Giemsa Stain100ml500ml RT避光试剂(B):磷酸盐缓冲液100ml500ml RT 产品说明: 瑞氏色素是酸性染料伊红(Eosin)和碱性染料亚甲蓝(Methylene Blue)组成的复合染料,对原生质的染色有很好的区别作用。吉姆萨染液由天青Ⅱ与伊红混合而成,染色原理和结果与瑞氏染色法基本相同,姬姆萨染色液对胞浆着色力较强,能较好的显示胞浆的嗜碱性程度,特别对血液和骨髓细胞中的嗜天青、嗜酸性、嗜碱性颗粒,着色清晰,但是对胞核着色偏深,核结构显色不佳,常与故姬姆萨染液常与瑞氏染液联合使用。 Wright-Giemsa Stain以进口瑞氏色素和姬姆萨色素为主要原料,通过研磨配制而成,能呈现出清晰的细胞染色效果。经常用于血液和细胞涂片、骨髓细胞涂片、细菌染色。细胞质呈红色,细胞核及细菌呈蓝色,嗜酸性颗粒呈橘红色。染液中加中性甘油,防止甲醇挥发或氧化,同时也可使血细胞染色较清晰。该染液的特点:由瑞氏-姆姆萨复合染色液和磷酸盐缓冲液组成,等量混合使用或分别处理标本使用。 使用方法(仅供参考): 1、常规方法制备血液涂片或骨髓涂片或细菌涂片,待涂片自然干燥。 2、将血液涂片或骨髓涂片置于染色架上。

3、滴加适量Wright-Giemsa Stain覆盖涂片,室温染色1~2min。 4、涂片滴加等量磷酸盐缓冲液,轻轻晃动玻片或采用其他方式混合,使磷 酸盐缓冲液不Wright-Giemsa Stain混匀,室温静置3~10min。 5、步骤3、4亦可以采用如下方法:取Wright-Giemsa Stain和磷酸盐缓冲 液等量混合,即为Wright-Giemsa工作液,滴加该工作液于血液涂片或骨髓涂片上,室温静置3~10min。 6、用自来水或蒸馏水从玻片一端轻轻冲洗。(注:也可用磷酸盐缓冲液等量 稀释后,冲洗玻片,时间控制在30s左右。) 7、干燥。镜检:先用低倍镜观察血涂片,再用油镜。 染色结果: 细菌、细胞核蓝色 组织细胞的细胞质、血红蛋白、嗜酸性颗粒粉红或橘红色 注意事项: 1、血液涂片或骨髓涂片应厚薄均匀,以免影响染色效果。 2、涂片染色中,请勿先去除染液或直接对涂片用力冲洗。不能先倒掉染液,以免染料 沉着于涂片上。 3、染色液可重复使用,但不能多次重复,若有沉淀物应过滤后使用。 4、染色过深可用甲醇或乙醇适当脱色,最好不复染。 5、如果染色过深或过浅,应调整染色时间或工作液浓度。 6、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

尼氏染色步骤

小鼠脑冰冻切片后,想做尼氏染色,用焦油紫,具体步骤是什么?焦油紫的溶液该如何配制? 焦油紫染液的配制: 焦油紫/0.1g 蒸馏水/99ml 1%冰醋酸1ml 冰冻切片氯仿中1分钟; 无水酒精中1分钟; 95%酒精、70%酒精各1分钟,蒸馏水洗片刻; 进入焦油紫染液染色30分钟(37度温箱中染色10分钟),蒸馏水洗涤; 95%酒精分色; 常规脱水、透明、封片。 尼氏体呈紫色,细胞核呈淡紫色,胶质细胞呈淡紫色。 mickeyzq wrote: 焦油紫染液的配制: 焦油紫/0.1g 蒸馏水/99ml 1%冰醋酸1ml 冰冻切片氯仿中1分钟; 无水酒精中1分钟; 95%酒精、70%酒精各1分钟,蒸馏水洗片刻; 进入焦油紫染液染色30分钟(37度温箱中染色10分钟),蒸馏水洗涤; 95%酒精分色; 常规脱水、透明、封片。

尼氏体呈紫色,细胞核呈淡紫色,胶质细胞呈淡紫色。 你的没有经过复染,对比也可以这么鲜明啊 我用的是1%的甲苯胺蓝,具体步骤是: 常规石蜡切片,二甲苯透明,酒精梯度复水,入1%甲苯胺蓝室温下染3min,自来水冲洗,95%酒精分化,0.5%伊红复染1s,水洗,透明封片,但是结果不好,伊红复染后颜色很深,原来的蓝色被覆盖的很严重,不知道该怎么改进 换焦油紫看看,焦油紫着色比较深. (二)神经细胞尼氏体染色 正常的神经细胞都含有一定数量的尼氏化,它们主要分布于神经细胞的浆中,形状有大有小,如三角形,有的为椭圆形。这些物质能被大部分的蓝色染料所染色,这些染料如焦油坚牢紫(Cresyl fast violet)亚甲蓝(methylene blue)甲苯胺蓝(toluidine blue)硫董(thionin)等钭其染为蓝色。但是,当神经细胞受伤后,胞质内的尼氏体更可发生变化,严重的可消失。 焦油坚牢紫显示尼氏体 焦油坚牢紫1g 蒸馏水100ml *作方法: 1、切片脱蜡至水 2、用焦油坚牢紫水溶液浸染20-30分钟 3、水洗 4、用95%酒精分化 5、无水酒精脱水,二甲苯透明,中性树胶 结果:神经细胞单位:紫-蓝色 细胞核:紫-蓝色 尼氏体:紫-深蓝色 注意:1、应用酒精分化切片,要迅速,防止过度分化,将切片上的颜色全部脱掉。 神经纤维染色 使用说明: 1. 样品处理 a) 对于石蜡切片: 二甲苯中脱蜡5-10分钟,共三次。注:脱蜡不充分会导致染色不均匀。 无水乙醇5分钟。 90%乙醇2分钟。 70%乙醇2分钟。 蒸馏水2分钟 2. 尼氏(Nissl)染色 对于上述处理好的样品:

吉姆萨染色液Giemsa stain

吉姆萨/姬姆萨染色液(Giemsa stain,1:9) 产品简介: 吉姆萨染液由天青2与伊红混合而成。染色原理和结果与瑞氏染色法基本相同,姬姆萨染色液对胞浆着色力较强,能较好的显示胞浆的嗜碱性程度,特别是对血液和骨髓细胞中的嗜天青、嗜酸性、嗜碱性颗粒,着色清晰,但是对胞核着色偏深,核结构显色不佳,常与故姬姆萨染液常与瑞氏染液联合使用。 嗜酸性颗粒为碱性蛋白质,与酸性染料伊红结果,染粉红色,称为嗜酸性物质;细胞核蛋白和淋巴细胞胞浆为酸性,与碱性染料美蓝或天青结合,染紫蓝色,称为嗜碱性物质;中性颗粒呈等电状态与伊红和美蓝均可结合,染淡紫色,称为中性物质。 Leagene Giemsa stain以进口的吉姆萨/姬姆萨色素为主要原料,通过研磨配制而成,能呈现出清晰的细胞染色效果。经常用于组织切片、血液和细胞涂片、细菌、染色体显带、原生动物寄生虫等染色。 Giemsa stain(1:9)的特点在于,由Giemsa stain储存液(10×)和磷酸盐缓冲液组成,1:9混合成工作液后使用;亦可以分开使用,即先用Giemsa stain染色液染色,再经磷酸盐缓冲液处理,亦可以得到满意的染色效果。 产品组成: 主要成分: 试剂(A): 主要由吉姆萨色素、甲醇等组成。 试剂(B): 主要由磷酸盐等组成。 自备材料: 1、载玻片 2、蒸馏水或去离子水 3、甲醇 4、染色架 5、显微镜 6、0.1~0.5%的乙酸

操作步骤(仅供参考): (一)一步法涂片染色 1、Giemsa stain工作液的配制: 按试剂(A):试剂(B)=1:9混合,即取1份的Giemsa stain储存液(10×)加入到9份的磷酸盐缓冲液中充分混匀,即为Giemsa stain工作液。配制后Giemsastain的工作液为即用型试剂,不易保存,即用即配。 2、常规方法制备血液涂片或骨髓涂片,待涂片自然干燥后,用甲醇固定1~3min。 3、将血液涂片或骨髓涂片放置染色架上,滴加Giemsa stain工作液覆盖涂片,室温滴染 15~30min。 4、用自来水或蒸馏水缓慢从玻片一端冲洗。 5、干燥、镜检。 染色结果: 嗜酸性颗粒粉红色 嗜碱性颗粒紫蓝色 中性颗粒淡紫色 (二)两步法涂片染色 1、Giemsa stain工作液的配制: 按试剂(A):蒸馏水或去离子水=1:4配制Giemsa stain工作液,即取1份的Giemsa stain储存液(10×)加入到4份的蒸馏水或去离子水中充分混匀,即为Giemsa stain工作液。配制后Giemsa stain的工作液为即用型试剂,不易保存,即用即配。 2、常规方法制备血液涂片或骨髓涂片,待涂片自然干燥后,用甲醇固定1~3min。 3、将血液涂片或骨髓涂片放置染色架上,滴加Giemsa stain工作液覆盖涂片,室温滴染 10~15min。 4、加入等量磷酸盐缓冲液,轻轻晃动载玻片,室温静置5~10min。 5、用自来水或蒸馏水缓慢从玻片一端冲洗。 6、干燥、镜检。 染色结果: 嗜酸性颗粒粉红色 嗜碱性颗粒紫蓝色 中性颗粒淡紫色 (三)组织切片染色

瑞氏染色的步骤

瑞氏染色液说明书 【产品名称】 瑞氏染色液 【包装规格】 货号:DM0005 单瓶包装规格分别为:100ml、250ml、500ml、5000ml; 每套/盒包装规格分别为:2×20ml/盒、2×100ml/盒、2×250ml/盒、2×500ml/盒、2×5000ml/盒。 【预期用途】 主要用于对血细胞进行染色。 【检验原理】 瑞氏色素是酸性染料伊红(Eosin)和碱性染料亚甲蓝(MethyleneBlue)组成的复合染料,各种细胞成分化学性质不同对各种染料的亲和力也不一样,如血红蛋白、嗜酸性颗粒为碱性蛋白质,与酸性染料伊红结合,染粉红色,称为嗜酸性物质;细胞核蛋白、淋巴细胞、嗜碱性粒细胞胞质为酸性,与碱性染料结合后,染紫蓝色或蓝色,称为嗜碱性物质;中性颗粒呈等电状态与伊红和亚甲蓝均可结合,染淡紫红色,称为嗜中性物质;原始红细胞、早幼红细胞胞质、核仁含较多酸性物质,染成较浓厚的蓝色;中幼红细胞既含酸性物质,又含碱性物质,染成红蓝色或灰红色;完全成熟红细胞,酸性物质彻底消失后,染成粉红色。本染色液经常用于血液和细胞涂片、骨髓细胞涂片、细菌染色,细胞质呈红色,细胞核及细菌呈蓝色,嗜酸性颗粒呈橘红色。 【主要组成成分】 试剂组成主要成分 1、瑞氏染液瑞氏染料、甲醇 2、磷酸盐缓冲液磷酸盐

【储存条件及有效期】 5℃~35℃环境保存,原包装未开封染色液的有效期为24个月,在有效期内的已开封染色液应在开封后6个月内使用完,每次用后应及时拧紧瓶盖,以免挥发或变质。 【样本要求】 1、血细胞涂片染色:要求新鲜全血或EDTA.2K抗凝血。 2、阴道分泌物(妇科白带)涂片染色:新鲜标本离开人体涂片后,需尽快以火焰或酒精固定,以避免细胞变形。 3、骨髓涂片染色:涂片制成后,应在空气中快速摇动或扇干,防止细胞皱缩变形或固空气潮湿而溶血,不能用高温或火烤干燥。 4、脱落细胞涂片:取样本并涂片,待检涂片固定可采用自然干燥法或湿片固定法(具体操作可根据不同检体及所采用的固定液所对应的规范操作要求进行);若采用湿片固定法,标本浸泡时间稍长些,效果会更佳;若采用湿片固定液固定标本,固定液用后需经常过滤,更换,防止细胞交叉污染。 【检验方法】 1、滴加瑞氏染液于涂片上,并让染液覆盖整个标本涂片,染色; 2、将等量的磷酸盐缓冲液滴加于瑞氏染液上面,以嘴或洗耳球使两液充分混合,染色; 3、水洗,冲洗时不能先倒掉染色液,可缓慢从玻片一端冲洗,以防有沉渣沉淀在标本上; 4、干燥、镜检。 【检验方法的局限性】 仅供形态学初检观察染色使用。 【注意事项】

瑞氏染液使用说明

瑞氏染液使用说明 货号:G1040 规格:50ml/100ml 保存:室温避光保存,有效期至少2年。 产品说明: 瑞氏染料是由碱性染料美蓝(Methvlem blue)和酸性染料伊红(Eostm Y)组成的复合染料,溶于甲醇。伊红通常为钠盐,有色部分为阴离子。美蓝通常为氯盐,有色部分为阳离子。甲醇的作用:一是溶解美蓝和伊红,使其解离为有色美蓝正离子的和伊红负离子。后两者可以选择性地吸附于血细胞内的不同成分而使其着色;二是固定细胞形态,加速染色反应,增强染色效果。 使用方法: 本产品可作为多种组织或细胞的染色使用,不同组织、细胞,不同的用途可以有不同的使用方法。具体方法请根据自己需求参考既有文献,本产品以涂片为例,举例说明,仅供参考。 1、取涂片、自然干燥。 2、滴加瑞氏染液染3分钟,使标本被其中甲醇所固定。 3、加等量PH6.4的磷酸盐缓冲液(或等量超纯水)轻轻晃动玻片,与瑞氏染色液混匀,静置5分钟。 4、水洗、吸干、镜检。 5、细菌染成蓝色,组织细胞胞浆红色,细胞核蓝色。

注意事项: 1、涂片厚薄适宜,涂片干透后固定,否则细胞在染色过程中容易脱落。 2、所加染液不能过少,以免蒸发而使染料沉淀。冲洗时间不能过久,以防脱色。 3、染色对pH十分敏感,稀释染液必须用缓冲液,冲洗用水应接近中性,否则可能会导致细胞染色异常,形态难以识别,甚至错误。 4、染色过淡可以复染,复染时应先加缓冲液,然后加染液。染色过深可用流水冲洗或浸泡,也可用甲醇脱色。 相关试剂: P210010×多聚赖氨酸 G1010姬姆萨染色液 G1100伊红染色液 G1140苏木素染色液(常规染色) G1120H-E染色试剂盒

尼氏染色液(亚甲蓝法)操作步骤及注意事项

尼氏染色液(亚甲蓝法)操作步骤及注意事项 货号:G1434 规格:3×50ml 保存:室温,避光,6个月。 产品内容: 规格 3×50ml Storage 名称 试剂(A):Methylene Blue Stain50ml RT避光 试剂(B):Nissl Differentiation50ml RT 试剂(C):Ammonium Molybdate Solution50ml RT 产品简介: 尼氏体(Nissl body)或称尼氏小体是分布于神经细胞胞质内的三角形或椭圆形小块状物质,能被碱性染料如硫堇、亚甲蓝、甲苯胺蓝和焦油紫等染料染成紫蓝色。 尼氏染色液(Nissl Stain,亚甲蓝法)主要优点是操作简便、染色稳定、适用范围广,可以用于石蜡组织切片的尼氏物质、神经元等的染色,尼氏体的存在和消失是神经细胞是否受损的重要指标,当发生脑炎、脑缺血、轴突反应等情况时,尼氏体会发生溶解甚至消失。 操作步骤(仅供参考): 1、新鲜组织固定于20%甲醛液中,常规脱水包埋。 2、切片厚5μm,常规脱蜡至水。 3、Methylene Blue Stain滴染10min。 4、入Nissl Differentiation分化,在显微镜下观察至尼氏体清晰为止。

5、入Ammonium Molybdate Solution处理切片数分钟。 6、蒸馏水冲洗。 7、常规脱水透明,中性树胶封固。 染色结果: 尼氏小体蓝色 背景红色或粉红色 注意事项: 1、尼氏体离体后容易溶解,所以组织取出后应立即固定,否则难以着色。 2、组织固定起着非常重要的作用,固定可采用乙醇、Carnoy固定液或中性福尔马林 溶液。 3、本染色试剂盒对石蜡组织切片的尼氏染色效果较好。 4、石蜡切片厚度7~10μm或25μm(皮质神经元密度的评估要用25μm厚的切片)。

姬姆萨染色液

姬姆萨染色液 【产品名称】 吉姆萨染色液 【包装规格】 货号:DM0002 单瓶包装规格分别为: A液吉姆萨染液:20ml、100ml、250ml、500ml;B液磷酸盐缓冲液:250ml、500ml、5000ml; 每套/盒包装规格分别为: A液20ml+B液250ml/盒、A液100ml+B液4×250ml/盒、 A液250ml+B液5×500ml/盒、A液500ml+B液5000ml/盒。 【预期用途】 用于组织细胞学染色从而鉴别骨髓和其他造血组织(淋巴结)中的白细胞,还可用于鉴定某些微生物。 【检验原理】 吉姆萨染色原理及结果与瑞氏染色基本相同,吉姆萨染色液(Giemsa stain,又称姬姆萨染色液)对胞浆着色力较强,能较好的显示胞浆的嗜碱性程度,特别是对血液和骨髓细胞中的嗜天青、嗜酸性、嗜碱性颗粒,着色清晰,但是对胞核着色偏深,核结构显色不佳,故吉姆萨染色常与瑞氏染色联合使用。嗜酸性颗粒为碱性蛋白质,与酸性染料伊红结合,染粉红色,称为嗜酸性物质;细胞核蛋白和淋巴细胞胞浆为酸性,与碱性染料美蓝或天青结合,染紫蓝色,称为嗜碱性物质;中性颗粒呈等电状态与伊红和美蓝均可结合,染淡紫色,称为中性物质。血细胞染色:吉姆萨染料中含有美蓝和伊红两种染料,前者为碱性,后者为酸性,它们与细胞内的各种物质具有不同的亲和力,从而使其呈现出不同的色调,以便于辨认。染色体染色:也称G显带,染色体上富舍A-T碱基对的DNA和组蛋白结合紧密,胰酶处理时不易高度抽提,和染料亲和力较强,呈深带;而富含G-C碱基对的区段结合的蛋白质被胰酶抽提,和染料亲和力降低,呈浅带。 【主要组成成分】 试剂组成主要成分 1、A液吉姆萨染液吉姆萨染料 2、B液磷酸盐缓冲液磷酸盐 【储存条件及有效期】 5℃~35℃环境保存,原包装未开封染色液的有效期为24个月,在有效期内的已开封染色液应在开封后6个月内使用完,每次用后应及时拧紧瓶盖,以免挥发或变质。 【样本要求】 血细胞:要求新鲜全血或EDTA.2K抗凝血。 染色体:中期染色体。 疟原虫:耳垂或指尖采血作薄血膜或厚血膜涂片。 【检验方法】 (一)疟原虫、血细咆染色: 1、血涂片晾干后用甲醇固定; 2、配制吉姆萨染色液:取适量的A1吉姆萨染液和A2磷酸盐缓冲液,按一定比例混合,即为吉姆萨染色液,即配即用; 3、将固定的血涂片置于吉姆萨染色液浸染;

Cole氏苏木素染色液(常规染色)使用介绍

Cole氏苏木素染色液(常规染色) 产品说明: 苏木素是组织化学和免疫组织化学中最常用的染料之一,可以广泛用于组织切片或培养细胞的染色。本染色液可以和免疫荧光染色或免疫组化染色等配合使用。可以在苏木素染色液染色后进行免疫荧光染色或其它染料的染色,也可以在免疫组化染色后再进行苏木素复染。染色步骤简单,操作时间短。苏木素染色后细胞核呈现蓝色。 使?说明: 1、样品处理 a)对于石蜡切片:二甲苯中脱蜡5-10 分钟。换用新鲜的二甲苯,再脱蜡5-10 分钟。无水乙醇5 分钟。90% 乙醇2 分钟。70%乙醇 2 分钟,蒸馏水2 分钟, b)对于冰冻切片:蒸馏水2 分钟, c)对于培养细胞:用4%多聚甲醛固定10 分钟以上,蒸馏水洗涤2 分钟,换用新鲜的蒸馏水,再洗涤 2 分钟。 2、苏木素(HE)染色对于上述处理好的样品,用苏木素染色5-10 分钟(可以根据染色结果和要求调整时间),用自来水洗去残留的染色液,约10 分钟。蒸馏水再洗涤一遍(数秒钟)。 3、脱水、透明、封片或进行其它染色 a)脱水、透明、封片:95%乙醇脱水2 分钟,换用新鲜的95%乙醇再脱水2 分钟;二甲苯透明 5 分钟,换用新鲜的二甲苯,再透明 5 分钟,用中性树胶或其它封片剂封片。显微镜下观察,细胞核呈蓝色。 b)进行其它染色:如果进行免疫荧光染色或荧光染料染色,在苏木素染色后,70%乙醇洗涤2 次,每次 2 分钟。再用PBS 或生理盐水或TBS 或TBST 等用

于荧光染色的溶液浸泡 5 分钟。然后就可以进行免疫荧光染色或其它荧光染料的染色了。 注意事项: 1、第一次使用本试剂时建议先取1-2 个样品做预实验。样品数量很多时,可使用染色架和染色缸,以便于操作。 2、本产品亦可反复使用多次,但染色效果会逐渐降低。 3、染色过程推荐浅染,通常只需能够分辨细胞核即可,颜色过深有可能影响细胞质颜色。 4、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。 产地:国产 提示:本品仅用于科研实验,不能用作医疗及临床诊断。 保存:室温避光储存,有效期至少12 个月。 关键词:Mayer'苏木素染液(免疫组化) Mayer'苏木素染液(免疫组化)相关染色产品:

染色液配方

实验室常用染色液配方 1、吕氏(Loeffler)美蓝染色液 A液:美蓝(Methylene blue) 0.3 克95%酒精毫升 B液:氢氧化钾(KOH) 0.01 克蒸馏水100 毫升分别配制A液和B液,然后混合即成。 2、齐氏(Ziehl)石炭酸复红染色液 A液:碱性复红(Basic fuchsin) 0.3 克95%酒精10.O 毫升 B液:石炭酸(苯酚) 5.0 克蒸馏水95 毫升 将碱性复红溶于95%酒精中,配成A液。将石炭酸溶于蒸馏水中,配成B液。将两者混合即成。 3、结晶紫染色液(Huclker改订)A液:结晶紫(Crystai violet) 2.5 克95%酒精25.0 毫 升 B液:草酸铵(NH4)2C2O4H2O 1.0 克蒸馏水100 毫升 将结晶紫研细后,加入95%酒精,使之溶解,配成A液。将草酸铵溶于蒸馏水,配成B液。 两液混合即成。 4、路戈氏(LugoI)碘液(革氏鉴别染色用)碘1.0克碘化钾2.0克蒸馏水300毫升 先将碘化钾溶于少量蒸馏水中,再将碘溶于碘化钾溶液中,溶时可稍加热,最后加足蒸馏水量。 5、番红染色液(革氏鉴别染色用)番红O(Safranin O) 2.0克蒸馏水100毫升 6、孔雀绿染色液(芽孢染色用)孔雀绿(Malachite green) 5.0克蒸馏水100毫升先将孔 雀绿研细,加少许95%酒精溶解,再加蒸馏水。 7、Dorner黑素液(英膜染色用)黑素(Nigrosin) 10.0克蒸馏水100毫升福尔马林(40% 甲醛) 0.5毫升将黑素在蒸馏水中煮沸5分钟,加入福尔马林作为防腐剂,用玻璃棉过滤。 8、刚果红染色液刚果红(Congo red) 2.0克蒸馏水100毫升 9、稀释结晶紫染液(放线菌染色用)结晶紫染色液(同3) 5.0毫升蒸馏水95.0 10、乳酸石碳酸棉蓝染色液(真菌制片,短期保存)石炭酸10.0克甘油20.0毫升乳酸 (比重l.21) 10.0毫升棉蓝0.02克蒸馏水10.0毫升将碳酸加在蒸溜水中加热溶化,加入乳酸和甘油,最后加入棉蓝,溶解即成。 11动物组织石蜡切片染色方法 苏木精-伊红(HE)染色:二甲苯Ⅰ, Ⅱ各10 min,依次进入无水乙醇、950 mL/L, 900 mL/L, 800 mL/L及700 mL/L的酒精各5 min,蒸馏水洗;入苏木精染液10 min,盐酸酒精分色4 s,自来水洗10 min;依次入700 mL/L, 800 mL/L及900 mL/L酒精各5 min,入伊红染液染色10 min;入950 mL/L及无水乙醇Ⅰ, Ⅱ各5 min, 以二甲苯透明,中性树脂封片. 一、常用染色液的配制 ⒈碘-碘化钾(I2-KI)溶液能将淀粉染成蓝紫色,蛋白质染成黄色,也是植物组织化学测 定的重要试剂。 配方:碘化钾2g ;蒸馏水300ml ;碘1g 先将碘化钾溶于少量蒸馏水中,待全溶解后再加碘,振荡溶解后稀释至300mL,保存在棕色玻璃瓶内。用时可将其稀释2-10倍,这样染色不致过深,效果更佳。 ⒉苏丹Ⅲ(sudanⅢ或Ⅳ)能使木栓化、角质化的细胞壁及脂肪、挥发油、树脂等染成红 色或淡红色,是著名的脂肪染色剂。 配方:(1)苏丹III或苏丹Ⅳ干粉0.1g ;95%酒精10ml ;过滤后再加入10ml甘油

瑞氏-吉姆萨染色法

瑞氏-吉姆萨染色液说明书 【产品名称】 瑞氏-吉姆萨染色液 【包装规格】 货号:DM0007 单瓶包装规格分别为:100ml、250ml、500ml、5000ml; 每套/盒包装规格分别为:2×20ml/盒、 2×100ml/盒、2×250ml/盒、2×500ml/盒、2×5000ml/盒。【预期用途】 主要用于对血细胞进行染色 【检验原理】 瑞氏染料是酸性染料伊红(Eosin)和碱性染料亚甲蓝(Methylene Blue)组成的复合染料, 对原生质的染色有很好的区别作用;吉姆萨染料由天青Ⅱ与伊红混合而成,染色原理和结果与瑞氏染色基本相同,吉姆萨染色对胞浆着色力较强,能较好的显示胞浆的嗜碱性程度,特别对血液和骨髓细胞中的嗜天青、嗜酸性、嗜碱性颗粒,着色清晰,但是对胞核着色偏深,核结构显色不佳,常与瑞氏染色联合使用。 瑞氏-吉姆萨染色液是利用Romanowsky Stain技术原理改良而成的,细胞的着色过程是染料透入被染物并存留其内部的一种过程,此过程既有物理吸附作用,又有化学亲和作用,各种细胞及相关成分由于其化学性质不同,对瑞氏-吉姆萨染色液中的酸性染料(伊红)和碱性染料(亚甲蓝)的亲和力也不一样,标本涂片经瑞氏-吉姆萨染色后,相应各类细胞呈现不同的着色,从而达到辨别其形态特征的目的。 【主要组成成分】 试剂组成主要成分 1、瑞氏-吉姆萨染液瑞氏染料、吉姆萨染料、甲醇 2、磷酸盐缓冲液磷酸盐 【储存条件及有效期】 5℃~35℃环境保存,原包装未开封染色液的有效期为24个月,在有效期内的已开封染色液应在开封后6个月内使用完,每次用后应及时拧紧瓶盖,以免挥发或变质。 【样本要求】 1、血细胞涂片染色:要求新鲜全血或EDTA.2K抗凝血。 2、阴道分泌物(妇科白带)涂片染色:新鲜标本离开人体涂片后,需尽快以火焰或酒精固定,以避免细胞变形。 3、骨髓涂片染色:涂片制成后,应在空气中快速摇动或扇干,防止细胞皱缩变形或固空气潮湿而溶血,不能用高温或火烤干燥。 4、脱落细胞涂片:取样本并涂片,待检涂片固定可采用自然干燥法或湿片固定法(具体操作可根据不同检体及所采用的固定液所对应的规范操作要求进行);若采用湿片固定法,标本浸泡时间稍长些,效果会更佳;若采用湿片固定液固定标本,固定液用后需经常过滤,更换,防止细胞交叉污染。 【检验方法】 1、滴加瑞氏-吉姆萨染液于涂片上,并让染液覆盖整个标本涂片,染色; 2、将等量的磷酸盐缓冲液滴加于瑞氏-吉姆萨染液上面,以嘴或洗耳球使两液充分混合,染色; 3、水洗,冲洗时不能先倒掉染色液,可缓慢从玻片一端冲洗,以防有沉渣沉淀在标本上; 4、干燥、镜检。 【检验方法的局限性】 仅供形态学初检观察染色使用。 【注意事项】

瑞氏染液

由酸性染料伊红和碱性染料美蓝组成的复合染料。 目录 简介 使用方法 染液配制 缓冲液配制 染色步骤 染液鉴定 混合染色 简介 英文拼写Wright's stain 是由酸性染料伊红和碱性染料美蓝组成的复合染料,溶于甲醇。后解离为带正电的美蓝和带负电的伊红离子。 使用方法 瑞氏(Wright's staim;美蓝-伊红Y)染色: 1.瑞氏染料是由碱性染料美蓝(Methvlem blue)和酸性染料黄色伊红(Eostm Y)合称伊红美蓝染料即瑞氏(美蓝-伊红Y)染料。 2.用甲醇作瑞氏染料溶剂,即成瑞氏染液。甲醇是瑞氏染料良好溶剂,有两种作用: (1)甲醇使瑞氏染料中美蓝(M)与伊红(E)在溶液中离解,可使细胞成分选择性吸附其中的有色物质而着色。 甲醇 ME(瑞氏染料)----→M+ + E- 在配制的瑞氏染液中美蓝如放置过久即可氧化而含有天青,美蓝天青与伊红化合物能使核染成紫红色,但不能使胞浆染为蓝色,多余美蓝就可以使胞浆染成蓝色,染色主要是化学作用,是离子彼此结合的反应。 (2)甲醇具有强大的脱水力,可将细胞固定在一定形态及增加细胞结构的表面积,提高细胞对染料吸收作用,同时由于甲醇吸附染色液中的水,使染色液升温,加速染色反应。 编辑本段染液配制 (1) 瑞氏染液配制: 瑞氏染料830gm或1g 甲醇(AR)500ml或600ml ○先称干燥(事先放入温箱干燥过夜)瑞氏染料放置乳钵内,用乳棒轻轻敲碎染料成粉末,再行研磨至听不到研芝麻声即呈细粉末,加少许甘油或甲醇溶解研磨,使染料在乳缸内显“一面镜”光泽,而无染料粉粒沉着。 ○再加较多量甲醇研磨呈一面镜光亮,静置片刻,将上层液体倒入一清洁储存瓶内(最好用甲醇空瓶),再加甲醇研磨,重复数次,至乳钵内染料及甲醇用完为止,摇匀,密封瓶口。 ○存室温暗处,储存愈久,则染料溶解、分解就越好,一般储存3个月以上为佳。 (2) 缓冲液: ●缓冲液作用: ○染色对氢离子浓度是十分敏感的,据观察pH值的改变,可使蛋白质与染料形成的化合物重

瑞氏染液配制、使用方法及注意事项

瑞氏染液配制、使用方法及注意事项 南宁市二医院检验科马升俊 1.瑞氏染色的原理: 瑞氏染色法使细胞着色既有化学亲和反应,又有物理吸附作用。瑞氏染料由酸性染料伊红和碱性染料美蓝的氧化物(天青)组成,其深于甲醇后,解离为带正电的美蓝和带负电的伊红离子。各种细胞由于其所含化学成分不同,对染料的亲和力也不一样,因此,染色后各种细胞呈现出各自的染色特点。 2.试剂的配制: 2.1 瑞氏染液的配制: 2.1.1 自配染液:瑞氏染粉0.1g,甲醇(AR)60ml。 将瑞氏染粉放入清洁干燥研钵中,先加少量甲醇,充分研磨使染料溶解,将巳溶解的染料倒入棕色试剂瓶中,未溶解的再加少量甲醇研磨,直至染料完全溶解,甲醇全部用完为止。染液配好后放于室温下,一周后即可使用。新配制染液效果较差,放置时间延长,染色效果越好。久置应密封,以免甲醇挥发或氧化成甲酸。染液中也可加中性甘油2~3ml,除可防止甲醇过早挥发外,也可使细胞着色清晰。 2.1.2 成品瑞氏染液: 现巳有成品瑞氏染液,如四川迈克科技公司出的快速瑞氏染色试剂(500ml/瓶)其只需室温密闭储存,可长期稳定,染色效果好。2.2 缓冲液的配制: 称取磷酸二氢钾(无水)0.3 g,磷酸氢二钠(无水)0.2 g;加蒸馏水至1000 ml使其溶解。配好后磷酸盐缓冲溶液应校正PH值,其范围在PH6.4~6.8即可,后塞紧瓶口备用。 3. 瑞氏染色的使用方法: (以血涂片为例): 3.1把制好的血涂片编好号,然后将血片平放在染色架上; 3.2加瑞氏染液数滴,使其覆盖整个血膜,固定细胞约1分钟; 3.3滴加等量或稍多的缓冲液(可按1:2滴加),使染液充分混匀,染色5~10分钟;

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