荧光淬灭
如果这种能量传递不有效的话，可能荧光就强。另外金的plasmon也会增强荧光材料的光吸收，可能会增强荧光总强度。这两个竞争过程除了与波长有关外，朱要与距离有关，一般
5纳米是界限，距离短被淬灭
荧光淬灭有以下几种说法:
1. 动态淬灭(碰撞淬灭,淬灭剂与发光物质的激发态分子之间的相互作用)
2. 静态淬灭(发光分子基态和淬灭剂形成不发光的基态络合物)
3. 转入三重态淬灭
4. 自吸淬灭(浓度高时，自淬灭)
首先确定荧光物质是否有电性，就是说荧光物质是否带有电荷，而且贵金属，例如纳米金，在
制作过程中，表面由于有柠檬酸根而带有负电荷，可以和带正电荷的荧光物质，如带正电荷水
溶性荧光共轭聚合物，通过静电作用，而使荧光猝灭；如果带相同电荷或者一方不带电荷，猝
灭是不怎么明显的。可以这样说，这种猝灭，是通过电荷作用相互吸附在一起，你可以让两者
相互作用后，做一个TEM，就可以判断了。
荧光淬灭有动态淬灭和静态淬灭两种，稳态的荧光强度都显示出荧光强度的衰减，无法分辨，
而动态淬灭至少分裂为2个荧光寿命，意味着能量转移的发生，而静态淬灭只是淬灭剂与荧光
物结合生成非荧光物质，荧光寿命并不发生变化。
Acrylamide和碘离子分别用于疏水淬灭或亲水淬灭，测量蛋白质中Trp残基荧光淬灭的寿命，能够轻易的得知Trp残基是位于蛋白质表面还是内部。
荧光淬灭多用于分析大分子或胶体的结构或构象，用淬灭的方法研究荧光基团在分子内还是分
子表面，有个淬灭的方程，一时写不出来，大概是淬灭剂浓度和荧光变化的关系，有个K常数，和淬灭效率和荧光寿命有关，如果分子构型改变，K会变化，这样就可以用来研究某些化合物
对大分子构型或构象的影响。
荧光漂白，就是用强光把荧光素的激发态全部给消除了，有可逆和不可逆两种，可逆的漂白相
当于清理出一个没有荧光的区域，相当于荧光清零，然后再观察测量某种特定的荧光的扩散、
产生或恢复。漂白是否可以恢复依赖于荧光素的种类和漂白光强，作为副作用，荧光素的漂白
常会发生。
磁性纳米粒子猝灭量子点的荧光很早就有人研究过。
具体原因：
处于导带的电子在回到价带的过程中，由于磁性纳米粒子的存在，发生了电子转移，量子点导带的电子转移到磁性纳米粒子上，结果荧光发生猝灭。因此，通常制备的磁性-荧光双功能纳
米材料都会在量子点表面修饰一层无机壳、聚合物等材料，降低这种电子转移。
貌似这也与纳米粒子的距离也有关吧。06年的一篇JACS就讲了一个Au@SiO2@Fe3O4核
壳结构对荧光淬灭的影响
量子点的荧光量资产率很高，而且发射光谱与金纳米的吸收光谱有效重叠，这种情况下，将两者的溶液混在一起，会发生淬灭吗？
看到很多文献将量子点用DNA修饰，然后用互补DNA修饰金纳米，DNA杂交之后（两者距离<10 nm）发生荧光淬灭，如果没有DNA杂交过程,混合液就没有淬灭发生吗？
此外，弱问一句，淬灭（quenching）和荧光共振能量转移（FRET）是一回事吗？
直接混在一起应该不会造成荧光淬灭，荧光淬灭一般需要两个分子距离较近从而产生能量转移；而一般未修饰的无机粒子表面都有稳定剂，其斥力不允许两粒子间有较近的接触。
荧光淬灭指的是：荧光物质分子与溶剂分子或其他溶质分子相互作用引起荧光强度降低的现象；荧光共振能量转移：供体荧光分子的激发能诱发受体分子发出荧光，同时供体荧光分子自身
的荧光强度衰减。
也就是说：对于FRET中的供体分子来说是发生了淬灭
直接混合的话要看电荷的，要是相反电荷的话是可以静电吸引结合在一起的，这样的话就可以被猝灭，关于这个有很多机理，什么电子转移和纳米颗粒表面能量转移的，都有，但是这种猝灭很不稳定。这也就是DNA连接的必要性（也有研究量子点的激发偶极子与金纳米颗粒的等
离子体场的相互作用的）
FRET是一个供体的发射峰与一个受体的激发有较大的重叠，同时两者之间的距离满足FRET
要求，就可以发生FRET，这个时候供体的荧光强度是下降的。
猝灭的原因就会有很多，溶剂效应，自猝灭，能量转移等都可以。
如果量子点（供体）的发射光谱和纳米颗粒（受体）的吸收光谱重合有重叠，当两者距离（范围在3nm-8nm）之间，会发生FRET。量子点发射的光通过能量转移到纳米颗粒，纳米颗粒被激发后发射光子。能量传递的效率E=1/(1+(R/R0)^6), 其中R是两者的距离。从光谱上看，
如果两者距离达到FRET的范围，供体受到激发后，发射光谱呈现的是受体的发射波段，而非
供体的发射波段。
要精确控制量子点和纳米颗粒的距离以达到FRET是一个难点。楼主所说的文献当中将量子点
用DNA修饰，然后用互补DNA修饰纳米颗粒，然后DNA杂交，就是用来实现FRET所需的距
离。如果没有这种杂交（或者其他方法），直接将量子点与纳米颗粒混合，理论上有一定几率，量子点和纳米颗粒靠得足够近，会发生FRET。但是这种几率是很小的，可以说是一个小概率
时间，非常难找。如果加大量子点和纳米颗粒的浓度，这种几率可能会增大，又不能保证单个量子点和单个纳米颗粒的FRET，与实验无益。
置于queching和FRET的区别，楼主尽可以理解为供体的荧光被quenching，但是一般不这样说。quenching一般指单量子体系受到周围环境的影响或者人为的操控使得量子体系的发光产
率降低，引起淬灭的机制既有能量的转移，也有量子体系向周围环境的电荷转移（电子转移或者空穴注入）。FRET可以认为是将供体荧光淬灭的手段之一，具体的研究内容还是有区别的。供楼主参考。
氧化石墨烯荧光淬灭
1我报告的题目是基于碌酸化多肽降解受阻的石墨稀/多肽复合焚光探针用于蛋白激酶活性及抑制作用分析 2蛋白激酶催化作用下的蛋白质憐酸化是生物体内翻译后修饰的重要方式之一。蛋白质的憐酸化和去磷酸化这一可逆过程几调节着细胞的发育、增殖、分化、信号转导、神经活动、肌肉收缩、细胞凋亡及肿瘤发生等过程在内的大部分生命活动。非正常的磷酸化会导致人体产生各种疾病,例如癌症或老年痴呆症等。因此,准确灵敏地检测过度磷酸化、分析蛋白激酶活性和高通量蹄选高效抑制剂对于人类一些重大疾病的早期诊断和治疗极为重要。 传统用于蛋白激酶活性分析的方法依赖于放射性元素标记伽马-32P-ATP法,由于放射性物质对环境及其人体的危害而随之被取代,基于憐酸特异性识别抗体的免疫技术[146]、突光分析方法表面等离子共振技术[184,185]以及质谱等都能有效用于蛋白激酶的活性分析。 石墨稀(Graphene),是从石墨材料中剥离出来的由碳原子组成的二维晶体, 是目前己知世界上强度最高的材料。石墨稀具有独特的电子、机械、热力学特性 在化学、质量、压力等传感应用中独具优势,。与碳纳米管相似,石墨烯对有机 荧光分子表现了有效的突光淬灭效果,这一过程中同时发生了激发态突光分子与 石墨烯表面之间的能量转移和电子转移。2010年诺贝尔物理学奖 氧化石墨烯薄片是石墨粉末经化学氧化及剥离后的产物，氧化石墨烯是单一的原子层，仍然具有淬灭荧光的效果 3本文首次提出了一种基于多肽/石墨烯突光浮灭机制和接肽酶降解作用的激 酶活性分析方法。酪蛋白激酶CKII是一种重要的丝氨酸/苏氨酸选择性蛋白激酶, 能磷酸化160种不同的蛋白质,我们以CKII为蛋白激酶模型。FITC 标记的CKII底物多 肽,FITC-peptide(FITC-RRRADDSDDDDD),能与GO发生有效的突光浮灭。幾肽酶CPY是一类 肽链端解酶,作用于任何一个C-末端残基,从肽链的C端开始逐个降解,释放出 游离氨基酸。FITC-peptide在CPY的消化作用下释放出游离的FITC分子,在 高离子强度环境下,游离FITC分子与GO之间的吸附较小而保持相当强的焚光。 而当FITC-peptide在CKII/ATP催化发生磷酸化,有效地阻碍CPY在憐酸化丝氨 酸位点的降解,使得FITC-多肽更容易与GO结合导致焚光淬灭。 1羧肽酶CPY 作用于任何一个C-末端残基逐个降解释放游离氨基酸，并释放出游离的FITC分子，在高离子强度环境下(猜想，故而加了氯化镁和钾)，与GO之间吸附较小保持相当强的荧光 4. 梭肽酶(carboxypeptidase Y, CPY)、Staurosporine、弗斯可林(Fskorlin)和3-异丁基-1-甲基黄嘿呤(IBMX) 购买于西格玛公司(中国上海)。cAMP-依赖型蛋白激酶(PKA,催化亚基)购买 于Promega公司,酷蛋白激酶II (CKII)购买于New England Biolabs公司(美国)。 突光素标记底物多肽:FITC-RRRADDSDDDDD ( FITC-pep )、 FITC-RRRADDpSDDDDD (FITC-Ppep)和FITC-LRRASLG (FITC-kemptide) ATP、蛋白酶抑制剂和改良型Bradford蛋白总浓度检测试剂盒 牛血清蛋白(BSA)、三轻甲基氨基甲焼(Tris)、甘油、DTT、 EDTASynergy Mx酶标仪(BioTek仪器有限公司)进行突光光谱分析,所有样 品用480 nm作为激发波长,从500 nm到700 nm (25 °C)扫描焚光发射谱图。 5氧化石墨稀与多肽FITC-pep之间的劳光淬灭（氧化石墨烯对荧光强度的影响）FlTC-peptide+ TBS+ Tris-HCl+ MgCb+ KCl+氧化石墨稀 在96孔酶标板中加入60 nL浓度为的多肽(FlTC-peptide)溶液(溶 于TBS,即20 mM Tris-HCl,10 mM MgCb, 50 mM KCl, pH 7.5),每孔中加入
荧光淬灭
如果这种能量传递不有效的话，可能荧光就强。另外金的plasmon也会增强荧光材料的光吸收，可能会增强荧光总强度。这两个竞争过程除了与波长有关外，朱要与距离有关，一般 5纳米是界限，距离短被淬灭 荧光淬灭有以下几种说法: 1. 动态淬灭(碰撞淬灭,淬灭剂与发光物质的激发态分子之间的相互作用) 2. 静态淬灭(发光分子基态和淬灭剂形成不发光的基态络合物) 3. 转入三重态淬灭 4. 自吸淬灭(浓度高时，自淬灭) 首先确定荧光物质是否有电性，就是说荧光物质是否带有电荷，而且贵金属，例如纳米金，在 制作过程中，表面由于有柠檬酸根而带有负电荷，可以和带正电荷的荧光物质，如带正电荷水 溶性荧光共轭聚合物，通过静电作用，而使荧光猝灭；如果带相同电荷或者一方不带电荷，猝 灭是不怎么明显的。可以这样说，这种猝灭，是通过电荷作用相互吸附在一起，你可以让两者 相互作用后，做一个TEM，就可以判断了。 荧光淬灭有动态淬灭和静态淬灭两种，稳态的荧光强度都显示出荧光强度的衰减，无法分辨， 而动态淬灭至少分裂为2个荧光寿命，意味着能量转移的发生，而静态淬灭只是淬灭剂与荧光 物结合生成非荧光物质，荧光寿命并不发生变化。 Acrylamide和碘离子分别用于疏水淬灭或亲水淬灭，测量蛋白质中Trp残基荧光淬灭的寿命，能够轻易的得知Trp残基是位于蛋白质表面还是内部。 荧光淬灭多用于分析大分子或胶体的结构或构象，用淬灭的方法研究荧光基团在分子内还是分 子表面，有个淬灭的方程，一时写不出来，大概是淬灭剂浓度和荧光变化的关系，有个K常数，和淬灭效率和荧光寿命有关，如果分子构型改变，K会变化，这样就可以用来研究某些化合物 对大分子构型或构象的影响。 荧光漂白，就是用强光把荧光素的激发态全部给消除了，有可逆和不可逆两种，可逆的漂白相 当于清理出一个没有荧光的区域，相当于荧光清零，然后再观察测量某种特定的荧光的扩散、 产生或恢复。漂白是否可以恢复依赖于荧光素的种类和漂白光强，作为副作用，荧光素的漂白 常会发生。 磁性纳米粒子猝灭量子点的荧光很早就有人研究过。 具体原因： 处于导带的电子在回到价带的过程中，由于磁性纳米粒子的存在，发生了电子转移，量子点导带的电子转移到磁性纳米粒子上，结果荧光发生猝灭。因此，通常制备的磁性-荧光双功能纳 米材料都会在量子点表面修饰一层无机壳、聚合物等材料，降低这种电子转移。
荧光素_GOD_HRP荧光淬灭法测定植物果实组织中的葡萄糖含量
第22卷第1期海南大学学报自然科学版V ol.22N o.1 2004年3月NATURA L SCIENCE JOURNA L OF H AINAN UNIVERSIT Y M ar.2004 文章编号:1004-1729(2004)01-0057-04 荧光素-GOD-HRP荧光淬灭法测定 植物果实组织中的葡萄糖含量 占达东1,王周平2,吕家根3 (1.琼州大学化学系,海南五指山572200;2.西南师范大学化学系,重庆400715; 3.陕西师范大学化学系,西安710062) 摘 要:植物组织中的葡萄糖在葡萄糖氧化酶的作用下产生的过氧化氢可在辣根过氧化物酶的 催化作用下使荧光素褪色并使荧光淬灭,基于这一现象,笔者建立了一种选择性测定植物果实 组织中葡萄糖含量的荧光分析方法,同时利用这种方法对苹果、鸭梨和酥梨组织液中的葡萄糖含 量进行了测定,并与分光光度法检测的结果及文献值进行了比较,结果表明:该方法具有安全、 方便、准确的优点,适合检测复杂样品尤其是植物中的葡萄糖含量. 关键词:G OD;HRP;植物果实组织;荧光素;荧光淬灭法;葡萄糖 中图分类号:Q554 文献标识码:A 葡萄糖在生物体内具有极其重要的生理意义,有关各种动植物体内的葡萄糖含量的测定已有大量的报道[1～8].由于检测的对象多为血液、组织液和细胞液,这些分析对象的组成往往十分复杂,尤其是植物组织液中的果糖和其他还原性物质常常对葡萄糖的分析产生严重的干扰,因此大多数的检测方法都是基于酶反应的高度选择性来消除各种共存物的干扰的.植物组织液中葡萄糖检测的经典方法是利用G OD催化氧化葡萄糖,使其生成过氧化氢,进而利用HRP催化过氧化氢氧化邻连茴香胺或高香草酸,使其生成有色产物,然后再以分光光度法或荧光法进行检测[8].该方法的主要缺点是邻连茴香胺和高香草酸不仅价格较高,而且都是致癌物质,这不仅会危害操作者的身体健康,同时也会对环境造成污染.本文所介绍的方法是在保留经典方法的高度选择性的同时,用廉价、安全的荧光素取代了连苯胺类物质,使过氧化氢在HRP的作用下氧化荧光素并使其褪色,因此以荧光法来检测剩余荧光素的含量便可间接地测定出葡萄糖的含量.由于荧光素在490nm处有很强的吸收,并在514nm处产生很强的荧光,因而对提高分析方法的灵敏度十分有利.为了使这一方法得到广泛的应用,笔者采用该方法分别测定了苹果、鸭梨和酥梨组织中的葡萄糖含量,并与分光光度法[9]的分析结果和文献报道的数值进行了比较,认为三者之间显示了较好的一致性. 1 实 验 1.1 试剂、材料及仪器 配制0、5、20、50、100、200、300、400mg?L-1的葡萄糖(分析纯)标准溶 收稿日期:2003-04-07 作者简介:占达东(1963-),男,海南琼山人,琼州大学化学系副教授.
荧光淬灭法测定Ni(2)
荧光淬灭法测定Ni(II) 摘要： 目的运用荧光淬灭法检测工业废水①中的Ni(II)是否达标。 方法镍对邻二氮菲的荧光具有淬灭的特性，本文采取标准曲线法，首先测定一系列邻二氮菲的标准溶液的荧光强度，得到以荧光强度（F）与邻二氮菲浓度（c）的曲线，再测定用过量的邻二氮菲处理的Ni(II)试样的荧光强度，最后间接计算出Ni(II)试样的浓度。 通过标准曲线法课以有效地扣除背景，减小误差，结果相对准确，标准曲线的r2约为0.99925②，通过与环境监测部门给出的数据对比，相对误差较小，结果值得信赖。 关键词：镍邻二氮菲荧光淬灭法 Abstract: Purpose use the fluorescence quenching method to detect Ni (II) in the natural lake. Method this method is based on the quenching of fluorescence of phenanthroline due to the formation of complex Ni (II)-phen. Firstly, determine the fluorescence intensity of a series of o-phenanthroline standard solution, so we obtain a standard curve about fluorescence intensity(F) and o-phenanthroline concentration (c) . Then determine the fluorescence intensity of Ni (II) sample with excess o-phenanthroline treatment, and finally indirectly calculate the Ni (II) sample concentration. Through the standard curve method we can effectively deduct the background, reduce errors, the result is relatively accurate, the standard curve r2 is about 0.99925, and by the comparison of the data given by the environmental monitoring department, the relative error is small, the results reliable. Key words: nickel phenanthroline fluorescence quenching 引言：镍是人体必需的微量元素之一, 对体内某些酶有激活作用及刺激造血机能和促进红细胞再生的作用。但过量亦会中毒③。环境中镍的主要污染来源为：镍矿的开采和冶炼；合金钢的生产和加工过程；煤、石油燃烧时排放烟尘中；电镀、镀镍的生产过程④。测定镍的方法有原子吸收法和ICP-AES法、丁二酮肟分光光度法、极谱催化波等⑤。本文基于镍对邻菲罗啉自身荧光淬灭的作用，进行了痕量镍的测定。该方法具有操作简便，测定快速，重现性好，灵敏度高等特点。应用该方法测定了工业废水中的痕量镍，得到了满意的结果。 ①以某冶金厂的废水为测定样本； ②本文中的测定数据均属由在实验中的分子荧光法测定奎宁含量的实际数据类比之后虚拟而得； ③孙成均. 生物材料检验[M] . 北京: 人民卫生出版社, 2006. 49； ④镍有何毒性与危害?南宁环保局网络课堂2005-06-10； ⑤《PAN- Rh6G 能量转移荧光猝灭法测定痕量镍》，宁玲, 吕昌银, 陈云生, 范翔, 贺元文，2008.05
荧光猝灭类型
荧光猝灭一般有静态猝灭和动态猝灭。可以通过测定猝灭常数与温度的关系来区分。静态猝灭是由于猝灭剂与荧光基团发生了结合生成不发荧光的物质，因而当温度升高的时候，体系紊流程度增加，导致猝灭常数减小；而动态猝灭是由于猝灭剂与荧光基团发生碰撞导致荧光强度减少，因而当温度升高，进而体系紊流增大是碰撞加剧，从而猝灭常数增大。你可以查找相关文献比如Y.-Q. Wang, H.-M. Zhang, G.-C. Zhang, W.-H. Tao, S.-H. Tang, Interaction of the flavonoid hesperidin with bovine serum albumin: A fluorescence quenching study, Journal of Luminescence, 126 (2007) 211-218. 无论是动态猝灭还是静态猝灭，F0/F与之间均存在着线性关系，单独通过测量荧光强度所得到的荧光猝灭数据而没有提供其他信息的情况下，是很难判断所发生的猝灭现象究竟属于动态猝灭还是静态猝灭。通常需要提供猝灭现象与寿命、温度和粘度的关系及吸收光谱的变化情况等信息。 (1) 变温实验动态猝灭由于与扩散有关，而温度升高时溶液的粘度下降，同时分子的运动加速，其结果将使分子的扩散系数增大，从而增大双分子猝灭常数。反之，温度升高可能引起配合物的稳定度下降，从而减小静态猝灭的程度。根据Stern-V olmer方程作图，如果高温的斜率大于低温的斜率，则为动态猝灭；反之，则为静态猝灭。 (2) 测量吸收光谱动态猝灭只影响到荧光分子的激发态，因而并不改变荧光物质的吸收光谱；而在静态猝灭中，基态配合物的生成往往
组织自发荧光淬灭剂 AutoFluo Quencher
组织自发荧光淬灭剂AutoFluo Quencher H1014-20ML 描述：许多组织会产生可透过各种波长滤光片的组织内源性自发荧光，显著干扰抗体标记荧光观察甚至导致荧光组化染色失败。自发荧光淬灭试剂中的离子可用碰撞方式捕获自发荧光光源分子发出的电子，阻止该电子从激发态回归基态并阻止能量释放，从而淬灭自发荧光。采用优化的孵育时间，可以最大限度地消除自发荧光而不明显影响抗体标记的荧光。 适用：各种组织、细胞免疫荧光染色的自发荧光消除。特别适用神经组织自发荧光淬灭。 储存：4oC避光。 用法： 以下步骤在免疫荧光组化染色完毕之后(而非在荧光染色完毕之前)执行。对特定的组织和细胞类型，必需优化孵育时间以便最大限度淬灭自发荧光而不明显影响抗体标记的荧光(步骤2)。仔细阅读后面说明。 1. 吸去PBS或相应洗涤缓冲液，用蒸馏水短暂冲洗组织切片或细胞培养板中的细胞。 2. 加入适量但充足的自发荧光淬灭剂覆盖组织切片或瓶皿中的细胞。室温10-90min。 3. 吸去自发荧光淬灭剂，用蒸馏水短暂冲洗。 4. 吸去蒸馏水，用PBS覆盖组织切片或位于细胞培养板中的细胞。 5. 封片。建议使用抗荧光衰减封片剂(Cat#: C1210)。该封片剂可防止抗体标记荧光衰退。 6. 荧光显微镜观察。科达宏伟 说明： 1. 不同物种不同类型的组织的自发荧光具有不同的特征，使用组织自发荧光淬灭剂的效 果可能会有差别。另外，任何针对自发荧光的淬灭，将会在一定程度上降低抗体荧光强度。所幸的是该试剂对自发荧光的淬灭程度远远超出抗体荧光强度的降低，因而能在二者之间获得较好的平衡。由于不很清楚的原因，本试剂消除脑脊髓神经组织的自发荧光具有更好的效果。 2. 为获得最佳效果，必需优化孵育时间以便最大限度淬灭对某一特定组织的自发荧光而 不明显影响抗体标记的荧光(步骤2)。重要的标本应在确定最佳孵育时间之后使用本试剂。进行优化时，可取数张组织切片或位于培养皿中的细胞，在免疫荧光组化染色完毕之后加入组织自发荧光淬灭剂，孵育5、10、30、60、90分钟等不同时间，冲洗后观察荧光。如果组织自发荧光仍然很强，可延长孵育时间；如果孵育时间小于10分钟而荧光消退十分明显，可将孵育时间减少为1-5分钟，或者可取出少量的组织自发荧光淬灭剂加等份的双蒸水稀释，然后孵育10-90分钟优化。 3. 组织自发荧光淬灭剂必须在完成免疫荧光组化染色后使用，否则将严重降低抗体荧光。
抗荧光淬灭封片液(强) - 产品简介：
抗荧光淬灭封片液(强) 产品简介： 碧云天生产的抗荧光淬灭封片液(Antifade Mounting Medium)是一种用于减缓荧光淬灭的封片试剂。可以用于减缓各种常 见荧光染料的荧光淬灭。 本抗荧光淬灭封片液在使用前需把抗荧光淬灭试剂加入到抗荧光淬灭试剂溶剂中，充分溶解并混匀后即可使用。配制好的 抗荧光淬灭封片液可-20℃避光保存至少3个月。 操作简单，在封片时用移液器滴一滴配制好的抗荧光淬灭封片液在样品上，盖上盖玻片即可完成操作。 关于碧云天生产的各种封片液的主要特点和差异可参考我们的相关网页：https://www.wendangku.net/doc/6512866154.html,/mounting-medium.htm 。 按照每个样品封片需要50微升计算，足够用于100个样品的封片。 保存条件： -20℃保存，一年有效。抗荧光淬灭试剂需避光保存。 注意事项： 需自备盖玻片与载玻片。盖玻片与载玻片可以向碧云天订购。 荧光物质均易发生淬灭，染色后的样品宜避光保存。可以向碧云天选购各种型号的载玻片存储盒。 在使用抗淬灭封片液的情况下可以减缓淬灭，但仍宜尽量避光。 需把抗荧光淬灭试剂一次性全部加入到抗荧光淬灭试剂溶剂中，充分溶解并混匀后方可使用。 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 使用说明： 1． 抗荧光淬灭封片液的配制： 取出抗荧光淬灭试剂溶剂后置于30-40℃水浴中温育片刻，随后将抗荧光淬灭试剂一次性全部加入到抗荧光淬灭试剂溶剂中，充分溶解并混匀后使用。每次用完后需-20℃避光保存。配制后-20℃避光保存，至少可以使用3个月。 2. 贴壁细胞样品： A. 染色完毕后，吸尽液体。 B. 滴一滴抗荧光淬灭封片液于载玻片上，盖上贴有细胞的盖玻片，让细胞接触封片液，尽量避免气泡。 C. 随后即可在荧光显微镜下观察细胞样品。 3. 组织切片： A. 染色完毕后，吸尽液体。 B. 滴一滴抗荧光淬灭封片液于组织切片上，盖上盖玻片，让切片接触封片液，尽量避免气泡。 C. 随后即可在荧光显微镜下观察组织切片。 4. 其它样品： 其它样品参考细胞样品或组织切片进行操作。
聚乙烯醇抗荧光淬灭封片剂
北京雷根生物技术有限公司 https://www.wendangku.net/doc/6512866154.html, 聚乙烯醇抗荧光淬灭封片剂 简介： 聚乙烯醇抗荧光淬灭封片剂又称聚乙烯醇荧光封片剂(Elvanol Fluorescence Mounting Medium)，是一种用于减缓荧光淬灭的封固剂，又称荧光信号增强封片剂，类似于SIGMA 的含DABCO 的聚乙烯醇封片剂(防褪色)。可以用于减缓各种常见荧光染料的荧光淬灭，较普通抗荧光淬灭封片剂的抗淬灭效果大大增强，该封片剂还有增强罗丹明荧光信号的作用。 组成： 操作步骤(仅供参考)： 1、贴壁细胞样本 ①染色完成后，吸去染色液。 ②完全溶解Elvanol Fluorescence Mounting Medium ，滴一滴于载玻片上，盖上贴有细胞的盖玻片，让细胞接触封片液，尽量避免气泡。 ③在荧光显微镜下观察或4℃避光保存。 2、组织切片 ①染色完成后，吸去染色液。 ②完全溶解Elvanol Fluorescence Mounting Medium ，滴一滴于组织切片上，盖上盖玻片，让切片接触封片液，尽量避免气泡。 ③在荧光显微镜下观察或4℃避光保存。 3、其它样品 其它样品参考细胞样品或组织切片进行操作。 注意事项： 1、 抗荧光淬灭的概念是相对的，样本染色后最好立即观察，如果没有条件，最好应在当天观察。 2、 荧光物质均易发生淬灭，染色后的样品宜4℃避光保存。 3、 虽然可减缓淬灭，仍需尽量避光。 4、 用罗丹明标记的抗体不能用聚乙烯醇甘油封片剂封片，可以采用聚乙烯醇荧光封片剂。 编号 名称 IH0258 IH0258 Storage Elvanol Fluorescence Mounting Medium 5ml 10ml -20℃ 避光 使用说明书 1份
荧光猝灭
荧光猝灭分为静态猝灭和动态猝灭。基态荧光分子与猝灭剂之间通过弱的结合生成复合物，且该复合物使荧光完全猝灭的现象称为静态猝灭。激发态荧光分子与猝灭剂碰撞使其荧光猝灭则称为动态猝灭。 荧光分子本身浓度增大使其荧光猝灭的现象称为浓度猝灭或自猝灭。 由于荧光的再吸收、荧光物质发生化学变化而观察不到荧光的现象一般不称为荧光猝灭。在利用荧光进行定量、液体闪击计数等包含荧光过程的测定方法中，一定要注意溶剂、共存杂质、氧气等猝灭剂的影响。 利用某种物质对某一种荧光物质的荧光猝灭作用而建立的对该猝灭剂的荧光测定方法，即为荧光猝灭法。一般而言，荧光猝灭法比直接荧光测定法更为灵敏，具有更高的选择性。分子结构和化学环境是影响物质发射荧光和荧光强度的重要因素. 至少具有一个芳环或具有多个共轭双键的有机化合物容易产生荧光,稠环化合物也会产生荧光.饱和的或只有一个双键的化合物,不呈现显著的荧光.最简单的杂环化合物,如吡啶,呋喃,噻吩和吡咯等,不产生荧光。 取代基的性质对荧光体的荧光特性和强度均有强烈影响.苯环上的取代基会引起最大吸收波长的位移及相应荧光峰的改变.通常给电子基团,如-NH2-,-OH,-OCH3,-NHCH3和-N(CH3)2等,使荧光增强;吸电子基团,如-CL,-Br,-I,-NHCOCH3,-NO2和-COOH,使荧光减弱.具有刚性结构的分子容易产生荧光。 大多数无机盐类金属离子不产生荧光,而某些情况下,金属螯合物却能产生很强的荧光. 溶剂的性质,体系的PH值和温度,都会影响荧光的强度. 荧光分子与溶剂或其他分子之间相互作用,使荧光强度减弱的现象称为荧光猝灭.引起荧光强度降低的物质称为猝灭剂.当荧光物质浓度过大时,会产生自猝灭现象。