端粒酶激活与细胞永生化

端粒酶激活与细胞永生化

作者：杨静， 曹亚

作者单位：中南大学湘雅医学院肿瘤研究所,湖南,长沙,410078

刊名：

国外医学（生理、病理科学与临床分册）

英文刊名：FOREIGN MEDICAL SCIENCES(SECTION OF PATHOPHYSIOLOGY AND CLINICAL MEDICINE)

年，卷(期)：2001，21(6)

被引用次数：3次

参考文献(25条)

1.Klingelhutz AJ查看详情 1999(6A)

2.Cemi C查看详情 2000(01)

3.Yasui W.Yokozaki H.Fujimoto J查看详情 2000(ZK)

4.Nijjiar T.Wigington D.Garbe JC查看详情 1999(20)

5.Chang JT.Liao CT.Jung SM.Wang TC查看详情 2000(12)

6.Harada K.Arita K.Kurisu K查看详情 2000(03)

7.Jong HS.Park YI.KimS.Sohn JH查看详情 1999(04)

8.Bodnar AG.Ouelelle M.Frolkis SE查看详情 1998

9.Halvorsen JL.Leibowitz G.Levine F查看详情 1999(03)

10.Dickson MA.Hahn WC.Ino Y查看详情 2000(04)

11.Ouellette MM.McDaniel LD.Wright WE查看详情 2000(03)

12.Sugimoto M.Ide T.Goto M查看详情 1999(01)

13.Montalto MC.Phillips JS.Ray FA查看详情 1999(01)

14.Kllngelhutz AJ.Foster SA.McDougall JK查看详情 1996(07)

15.Veldman T.Horikawa I.Barrett JC查看详情 2001(09)

16.Wang J.Xie LY.Allan S查看详情 1998(12)

17.Takakura M.KyoS.KanayaT查看详情 1999(03)

18.Wu KJ.Grandori C.Amacker M查看详情 1999(02)

19.OhS.Song YH.YimJ查看详情 2000(11)

20.Oh ST.Kyo https://www.wendangku.net/doc/6b18908809.html,imins LA查看详情 2001(12)

21.Elenbaas B.SpirioL.Koerer F查看详情 2001(01)

22.Kiyone T.Foster SA.Koop JI查看详情 1998

23.Balasubramanian S.Kim Kh.Ahmad N查看详情 1999(06)

24.Li H.CaoY.Berndt MC查看详情 1999(48)

25.Akeshima R.Kigawa J.Takahashi M查看详情 2001(11)

相似文献(10条)

1.期刊论文赵晓辉.尹扬光.黄岚端粒和端粒酶与冠心病-中国动脉硬化杂志2006,14(10)

端粒长度和端粒酶活性的变化与细胞增殖、衰老密切相关,同时冠状动脉粥样硬化性心脏病及相关危险因素也伴随相应的端粒和端粒酶变化.提示端粒和端粒酶在冠状动脉粥样硬化性心脏病的发生、发展中可能发挥一定的作用.

2.期刊论文刘剑仑.葛莲英.黎丹戎.张贵年端粒、端粒酶及端粒酶催化亚基在大肠癌中的作用-中国癌症杂志

2005,15(4)

目的:探讨端粒、端粒酶活性及端粒酶催化亚基蛋白(hTERT)在大肠癌发生发展、侵袭转移中的作用.方法:应用Southern blot、端粒重复序列扩增

肠癌Dukes分期的进展进一步缩短;端粒酶活性及hTERT在大肠癌组织中的阳性表达率分别为83.33%及76.67%,显著高于其他组织(P<0.05);大肠癌组织端粒酶与淋巴结转移关系密切,伴淋巴结转移大肠癌组织中的端粒酶活性及hTERT阳性表达率为80%和70%,显著高于无淋巴结转移者的0%和5%(P<0.05);相关分析显示端粒酶活性与hTERT蛋白表达存在显著相关性(P<0.05).结论:端粒的短缩及端粒酶的活化与大肠癌的发生发展密切相关, hTERT的表达对端粒酶的激活可能起着重要作用.

3.学位论文杨仕明一、不同病变胃粘膜端料酶活性、端粒长度及端粒酶亚单位的检测及其临床意义;二、人端粒

酶蛋白催化亚单位反义基因治疗对胃癌细胞生物学行为的影响2000

全文共分两部分:第一部分、不同病分胃粘膜端粒酶活性、端粒长度及端粒酶亚单位的检测及其临床意义.该研究拟从不同病变胃粘膜端粒长度、端粒酶活性及其亚单位的变化来初步阐明端粒酶及其亚单位在胃癌的诊断及治疗中的作用.结果表明端粒酶不仅在胃癌组织中有表达,而且在部分癌前病变或疾病中就有表达,提示端粒酶在胃粘膜癌变的早期诊断及预测方面可能具有重要作用.TRF长度在正常胃粘膜中随年龄的增加而逐渐递减,提示TRF长度可以作为衡量正常胃粘膜衰老的一种生物学标志.虽然TRF在胃粘膜癌变过程中有逐渐 缩短的趋势,但易受多咱因素的影响,因此TRF长度不宜作为衡量肿瘤生物学为的指标. 由于hTRT亚单位与端粒酶活性有很好的一致性,hTRT亚单位不仅可以作为胃癌诊断的指标,而且有可能成为胃癌基因治疗的靶点.第二部分、人端粒酶蛋白催化亚单位反义基因治疗对胃癌细胞生物学行为的影响.研究人员成功构建了hTRT正、反义真核载体,采用脂质体法导入SGC-7901胃癌细胞株,通过G418筛选出一株7901正义细胞(7901-S)及两株7901反义细胞(7901-AS1、7901-AS2).结果提示,hTRT反义基因可以抑制SGC-7901胃癌细胞的生长,部分逆转其恶性表型,其机制强能主要还是通过诱导分化而非诱导凋亡途径实现的;hTRT基因与凋亡相关基因bcl-2和c-myc之间可能存在相互调节的作用.

4.期刊论文赵擎.辛绍杰.貌盼勇.Zhao Qing.Xin Shao-jie.Mao Pan-yong端粒和端粒酶与肝细胞的永生化-中国

临床康复2006,10(41)

目的:端粒是位于真核细胞染色体末端的蛋白-DNA复合体,保护染色体完整性和稳定性.端粒酶是一种特殊的细胞核蛋白反转录酶,能以自身的RNA为模板,反转录合成端粒DNA序列,添加到染色体末端.端粒酶介导的端粒延长作为细胞中端粒缩短的主要补偿机制,对正常细胞以及肿瘤细胞延长分裂代数起着重要作用.分化良好并具有肝脏正常合成代谢功能的永生化肝细胞在生物医学研究,尤其是肝细胞移植、生物人工肝支持治疗以及药理学和毒理学研究方面具有广泛的应用前景.资料来源:应用计算机检索Pubmed数据库1990-01/2005-12有关端粒、端粒酶和肝细胞永生化的文章,检索词

"telomere,telomerase,hepatocyte,immortalization",限定文章语言种类为English.同时计算机检索中国期刊全文数据库、万方数据库1994-01/2005-12期间的相关文章,检索词"端粒、端粒酶、永生化、肝细胞",限定文章语言种类为中文.资料选择:纳入标准:①有关端粒和端粒酶结构和功能的研究文献.②有关端粒、端粒酶与肝细胞永生化相关性的文献.排除标准:重复研究.资料提炼:共收集到32篇有关端粒、端粒酶与肝细胞永生化相关性的文献,查找全文,从中选取14篇作为主要参考文献.资料综合:将所选文献资料按照以下顺序归纳总结:①端粒的结构和功能:端粒是指位于真核细胞染色体末端的一种特殊结构,由富含G的DNA重复序列与端粒结合蛋白所构成的一种蛋白-DNA复合体,它既可保护染色体不受核酸酶的破坏,又避免了因DNA粘性末端的裸露而发生的染色体融合.②端粒酶的结构和功能:端粒酶是一种RNA依赖的DNA聚合酶,能以自身的RNA为模板,反转录合成端粒DNA序列,添加到染色体末端,以补偿细胞分裂时端粒DNA缩短,使细胞克服危机期,成为永生化细胞.③端粒、端粒酶在肝细胞永生化:将端粒酶基因转染正常的人体细胞能使一部分细胞的寿命延长,这一技术目前已成功用于延缓组织工程细胞的衰老.结论:端粒酶的活化和端粒长度的维持与肝细胞永生化密切相关,端粒酶介导的永生化肝细胞为生物人工肝脏、肝细胞移植等临床治疗提供了细胞学基础.

5.期刊论文杨平勋.黄君健.YANG Ping-xun.HUANG Jun-jian端粒及端粒酶的研究进展-生物技术通讯2007,18(4) 端粒是真核细胞染色体末端的特有结构,是由端粒结合蛋白和一段重复序列的端粒DNA组成的一个高度精密的复合体,在维持染色体末端稳定性,避免染色体被核酸酶降解等方面起着重要的作用.端粒的长度、结构及组织形式受多种端粒结合因子的调控.由于端粒的重要性,在哺乳动物细胞里,端粒的长度或端粒结构变化与癌症发生及细胞衰老有密切的关系.由于末端复制问题的存在,随着细胞分裂次数的增加,端粒不断缩短,细胞不可避免的走向衰老或凋亡.由于在细胞分裂过程中端粒长度的不断缩短与细胞分裂代数增加具有相关性,即端粒长度反应了细胞的分裂次数,因此有人将端粒形象的比喻为生物时钟.在90%的癌细胞中,端粒酶被重新激活,以此来维持端粒的长度,使细胞走向永生化.简要综述了端粒、端粒酶及端粒酶结合蛋白的最新研究进展.

6.期刊论文文忠.肖健云.田勇泉.赵素萍.郭梦和端粒、端粒酶及其亚单位在鼻咽癌中相互作用的研究-肿瘤防治

研究2002,29(4)

目的探讨端粒、端粒酶及其亚单位在鼻咽癌发病中的作用.方法采用Southern杂交等分子生物学方法对鼻咽癌端粒、端粒酶及其亚单位进行检测.结果鼻咽癌平均端粒长度(MTL)为4.5±2.3kb,端粒酶阳性表达为88.0%～100%.对照组MTL分别为14.6±2.8Kb和15.8±3.8Kb,癌旁组织端粒酶阳性表达为64.7%, 对照组为0～8.7%.此外,端粒酶活性增高与晚期鼻咽癌及其颈淋巴结转移也有密切关系.结论端粒及端粒酶与鼻咽癌的发生、发展及转移可能有密切关系.

7.学位论文刘博中国北方骨髓衰竭综合征端粒酶基因突变和端粒长度变化的研究2008

背景：骨髓衰竭综合征(Bone marrow failure syndrome)包括一组疾病，可以是先天的或获得的。先天性骨髓衰竭综合征包括Fanconi贫血、先天性角化不良(DKC)、Shwachman-Diamond综合征等。最常见的获得性骨髓衰竭综合征是再生障碍性贫血、阵发性睡眠血红蛋白尿症(PNH)和骨髓增生异常综合征(MDS)。以获得性再生障碍贫血(以下简称再障)为例，东方人群该病的发病率是西方的2到3倍。造成这种东西方发病率差异的原因目前还不明确，推测可能与种族间的再障相关基因背景不同有关。关于骨髓衰竭综合征可能与端粒酶缺陷有关的想法，最早始于对先天性角化不良(Dyskeratosis Congenita，DKC)的研究。在部分常染色体显性遗传的DKC患者中，发现端粒酶RNA模版TERC基因3'端存在缺失突变，提示这些病人骨髓衰竭的原因可能与端粒酶基因缺陷有关。进而在部分获得性再障的病人中也发现了TERC基因突变，但是这部分患者并没有典型的DKC的皮肤表现。以此为出发点，近几年国外学者在获得性再障、MDS以及PNH患者中对端粒酶复合体基因突变做了相关的筛查，发现获得性再障患者中的一小部分存在端粒酶复合体基因的突变

，包括TERC(telomerase RNA component)和TERT(telomerase reversetranscriptase)基因突变。但是亚洲人群中，目前只有日本在96例儿童再障患者中筛查了上述两个基因突变。为了进一步研究亚洲人群骨髓衰竭高发是否与端粒酶基因突变有关，本研究收集了中国北方获得性骨髓衰竭综合征患者90例(包括获得性再障、MDS和PNH)，对端粒酶基因突变进行了筛查。并用Southern杂交和流式一原位杂交两种方法测定了患者端粒长度，研究端粒酶基因突变对端粒长度造成的影响，以及骨髓衰竭患者不同白细胞亚群间端粒缩短的差异。研究的意义在于，通过这种筛查，可以使我们发现一些临床表现与获得性骨髓衰竭难以区分的病人，他们治疗上宜早期进行骨髓移植而非免疫抑制。

目的：1.研究中国北方人群骨髓衰竭综合征患者端粒酶复合体基因突变发生的频率，以及突变与端粒长短的关系。

2.Southern blot方法测量患者端粒长度，研究端粒酶基因突变与端粒长度变化间的关系。

3.建立流式杂交方法检测不同有核细胞端粒长度的变化。

方法：

1.收集北京协和医院、河北廊坊市中医院、北京市朝阳医院，以及北京市东直门医院部分诊断明确的骨髓衰竭综合征患者90人(包括再生障碍性贫血、骨髓增生异常综合征、阵发性血红蛋白尿)。疾病诊断标准参见张之南等人主编的《血液病学》2。

2.提取患者外周血DNA。PCR方法扩增TERC基因及TERT基因第一、二外显子，双脱氧核酸终止法测序。

3.Southern杂交方法测定患者端粒长度。

4.流式-原位杂交方法测定外周血不同白细胞亚群端粒长度。

结果：90例患者中发现两例TERC基因突变和两例TERT突变。TERC突变：(1)n37 A→G；(2)n66G→C。TERT基因突变(1)n1870G→T，造成氨基酸缺失：E/*；(2)n1780G→T，造成氨基酸替换S/I。其中一例TERT突变患者最终诊断为先天性角化不良(DKC)，而非获得性骨髓衰竭综合征。则最终确诊获得性骨髓衰竭综合征患者共89人，发现3例突变。中国北方人群中端粒酶基因突变发生率为3.4％。用Southern杂交表明，上述两例携带端粒酶基因突变的病人端粒严重缩短，小于正常对照长度的50％。Southern杂交显示部分无突变的骨髓衰竭患者端粒也有缩短，位于正常对照长度的50-80％，与部分恶性血液病如MDS-RAEB患者的端粒长度重叠，提示恶性转化可能。Flow-FISH也证实，部分获得性骨髓衰竭患者外周血单个核细胞端粒长度较正常人缩短，并且单个核细胞与粒细胞端粒缩短程度间存在差异。

结论：

1.在中国北方人群中，获得性骨髓衰竭综合征患者端粒酶复合体基因突变发生率约为3.4％，与西方人群发生率相似，说明中国人群该病高发的原因与端粒酶基因关系不大。

2.Southern杂交显示，端粒酶基因突变患者端粒长度较同龄正常对照严重缩短(<正常对照长度50％)，提示可能为基因突变的结果。

3.部分无突变患者也存在端粒缩短，Southern杂交提示其长度与部分恶性血液病如MDS-RAEB端粒长度重叠，Flow-FISH方法显示其外周血单个核细胞端粒较正常人缩短，并且单个核细胞与粒细胞端粒缩短程度不同。

8.期刊论文巩艳.房殿春.罗元辉.张汝钢.GONG Yan.FANG Dian-chun.LUO Yuan-hui.ZHANG Ru-gang端粒植入胃癌

7901细胞对细胞生长、端粒和端粒酶的影响-生命科学研究2008,12(1)

研究外源端粒片段植入胃癌7901细胞后对细胞生长、端粒长度和端粒酶活性的影响.采用lipofectTM2000介导的转染方式,将含有端粒片段质粒pSXneo-1.6-T2AG3转染胃癌细胞SGC7901,PCR在基因水平上鉴定外源性端粒片段的植入后,采用TRAP法检测转染细胞端粒酶活性变化,TRF法检测转染细胞端粒长度变化,MTT法检测细胞生长曲线,RT-PCR测定转染细胞hTERT表达变化.染色体核型分析细胞染色体变化.结果显示端粒片段成功导入SGC7901细胞后获得稳定的细胞株,端粒片段植入后细胞生长变慢,端粒长度延长不明显,端粒酶活性明显降低,hTERT mRNA表达水平下降,核型分析显示转染前后细胞染色体数目无明显变化.实验成功将携带了1600 bp端粒TTAGGG重复序列的真核表达载体pSX-T2AG3-neo稳定转染至人胃癌7901细胞中,端粒植入降低细胞端粒酶的活性和下调端粒酶活性亚单位hTERT的表达,但对端粒长度无明显影响.

9.会议论文胡丽娟.周福生.廖荣鑫.许仕杰端粒、端粒酶与大肠癌研究进展2006

端粒(telomere)是真核生物染色体线性DNA分子末端的特殊结构,对维持染色体稳定性和DNA完整复制具有重要作用.随着细胞分化和发育过程的进行,端粒DNA越来越短以至消失,造成染色体不稳定性,从而使细胞死亡.端粒酶是维持端粒长度的逆转录酶,以自身RNA为模板合成端粒重复序列.端粒酶由端粒酶RNA成分、催化亚单位和端粒酶相关蛋白三部分组成,是一种核糖核蛋白.端粒酶RNA提供逆转录合成DNA的模板.人端粒酶逆转录酶(human telomerase reverse transciptaes,hTERT)被认为是端粒酶催化亚单位,是端粒酶激活的限速因素.端粒酶通过合成新的端粒,从而保证端粒DNA不会随着细胞分裂而缩短.目前检测端粒长度(mean of telomere restrictiont fragment,TRF)的变化及端粒酶活性已成为人们研究细胞癌变衰老和死亡的重要指标之一,大肠癌是消化道常见恶性肿瘤,本文拟介绍端粒、端粒酶与大肠癌的最新研究进展,并对其在大肠癌的检测及其应用做综述。

10.期刊论文邹跃.李志韧.周湘艳.杜维霞.胡海兰RNA干扰抑制端粒酶对受照后端粒长度的影响-中华放射医学与

防护杂志2006,26(5)

目的 探索RNA干扰体内表达质粒抑制端粒酶表达的作用,以及端粒酶抑制后射线对端粒长度的影响.方法 构建RNA干扰体内表达质粒,脂质体介导转染A549细胞系,TRAPELISA法检测端粒酶活性,RT-PCR法检测hTERTmRNA表达,端粒限制性片段平均长度分析法检测端粒长度.结果 pPUR/hTERT质粒在A549转染株内表达可下调hTERT mRNA表达,抑制端粒酶活性;A549照射后端粒明显延长,而pPUR/hTERT表达株照射后未见端粒延长,抑制了射线诱导端粒延长作用.结论 RNA干扰体内表达质粒可抑制端粒酶表达及照射后端粒延长,表明射线诱导端粒延长可能是端粒酶在端粒断裂端合成端粒序列的结果.

引证文献(3条)

1.何小兵.王卫政胃息肉组织中端粒酶活性的检测及其临床意义[期刊论文]-临床荟萃 2009(2)

2.毕聪明.张仕强.彭树英.吕宁.张涌pEGFP-hTERT载体的构建及其在牛A型精原细胞中的表达[期刊论文]-西北农林科技大学学报（自然科学版） 2007(8)

3.冯雪萍.肖健云.赵素萍.王承龙.张彬.刘静雷公藤对鼻咽癌细胞株HNE1作用的研究[期刊论文]-中华实用医学2003(4)

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