脲酶Km值测定

(7)0.005 mol/L硫酸铵标准液准确称取0.6610g硫酸铵,水溶后定客至1000ml。

(8)30%乙醇60ml 95%乙醇,加水130ml,摇匀。

(9)奈氏试剂

①甲8.75g KI溶于50ml水中。

②乙8.75g KI溶于50ml水中。

③丙7.5g HgC12溶于150ml水中。

④丁 2.5g HgC12溶于50ml水中。

⑤甲与丙混合,生成朱红色沉淀。用蒸馏水以倾泻法洗沉淀几次,洗好

后将乙液倒入,令沉淀溶解。然后将丁液逐滴加入,至红色沉淀出现摇动也不消失为止。定容至250ml。

⑤称NaOH 52.5g,溶于200ml蒸馏水中,放冷。

①混合(5)、(6),并定容至500ml。上清液转入棕色瓶中。存暗处备用。

3.材料

大豆粉

四、操作步骤

(1)脲酶提取称大豆粉1g,加30%乙醇25ml,振荡提取lh。4000r/min 离心10min,取上清液备用。

(2

脲酶Km值测定

在旋涡振荡器上混匀各管,静置5min后过滤。

(3

脲酶Km值测定

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