蝴蝶兰组培快繁技术的研究进展

蝴蝶兰的养殖方法和注意事项

蝴蝶兰的养殖方法和注意事项 蝴蝶兰喜高温、高湿度、通风透气的环境;不耐涝,耐半阴环境,忌烈日直射,忌积水,畏寒冷,生长适温为22~28℃,越冬温度不低于15℃。蝴蝶兰为热带型植物,栽培温度应该维持于15~34℃之间。在不同的生长阶段,所需温度也有所不同。 生长阶段为26~27℃,开花阶段为19~21℃,为了得到更多的花梗,温度可维持于18~20℃,共计4~8周。在光线不足或日温过高时,要维持于18℃以加强催花(诱生花芽)。因为开花时期也要维持叶片生长,低温时期不要太久。在光线不足时,如果气温大于23℃的时间超过24小时,会导致过多的营养生长而损失花苞。 蝴蝶兰的养殖方法: 1、温度 家庭养蝴蝶兰首先要保证温度。蝴蝶兰喜欢高温高湿的环境,生长时期最低温度应保持在15℃以上,蝴蝶兰适宜生长温度为16~30℃。秋冬和冬春之交以及冬季气温低时应注意增温,一般冬季有供暖设备的房间,这个温度不难达到,但要注意,不要将花直接放在暖气片上或离之过近。 夏季温度偏高时需要降温,并注意通风,若温度高于32℃,蝴蝶兰通常会进入半休眠状态,要避免持续高温。春节前后为盛花期,适当降温可延长观赏时间,开花时夜间温度最好控制在13~16℃之间,但不能低于13℃。 2.湿度 蝴蝶兰原产于原始森林中,雾气较多,温度较高。蝴蝶兰没有粗大的假球茎储存养分,如果空气中湿度不足,则叶面发皱且软弱无力。因此,蝴蝶兰宜在通风、湿度高的环境中栽培养护。

蝴蝶兰适宜生长空气湿度为60%~80%。蝴蝶兰新根伸长旺盛期要多浇水,花后休眠期少浇水。春秋两季每天下午五时前后浇水一次,夏季植株生长旺盛,每天上午九时和下午五时各浇一次水,冬季光照弱,温度低,隔周浇水一次已足够,宜在上午十时前进行。如遇寒潮来袭,不宜浇水,保持干燥,待寒潮过后再恢复浇水。 浇水的原则是见干见湿,当栽培基质表面变干时再浇一次透水,水温应与室温接近。当室内空气干燥时,可用喷雾器直接向叶面喷雾,见叶面潮湿即可,但注意,花期喷水不可将水雾喷到花朵上。自来水应贮存72小时以上方可浇灌。 3.光照 尽管蝴蝶兰较喜阴,但仍需要使兰株能接受部分光照,尤其花期前后,适当的光可促使蝴蝶兰开花,使开出的花艳丽持久,一般应放在室内有散射光处,勿让阳光直射。 4.通风 蝴蝶兰的正常生长需要流动的新鲜空气,故家养蝴蝶兰通风一定要良好,尤其是在夏季高湿期,一定要以良好的通风来防暑,同时也能避免病虫害的感染。 5、施肥 蝴蝶兰要全年施肥,除非低温持续很久,否则不应停肥。冬天为蝴蝶兰的花芽分化期,停肥很容易导致无花或花少。春夏期间为生长期,可每隔7~10天施用一次稀薄液肥,宜用有机肥,也可施用蝴蝶兰专用营养液,但有花蕾时勿施,否则容易提早落蕾。夏天长叶(即花期过后),可以追施氮肥和钾肥。秋冬花茎生长期则可用磷肥,但要稀薄,约每隔2~3周施用一次。 施肥的时间在下午浇水以后,施肥数次后,要用大量水冲洗兰盆及兰株,以免残留的无机盐类危害根部。

草莓组织培养

草莓的组织培养 一、茎尖 1．概述通过对草莓茎尖离体培养的试验研究表明：取草莓茎尖为外植体，以0．35 mm大小为宜；用MS+0.5 mg/L 6-BA+O.2 mg/L NAA培养基． 不定芽再生率高；以1/2 MS+O.1 mg/L IBA 生根效果最好。 2.结论（1）再生途径：草莓刚抽出的匍匐茎的茎尖 （2）灭菌方法：洗去泥土、灰尘，再用自来水冲淋2～3h，置超净工作台上进行75 ﹪乙醇和0．1 升汞不同时间的灭菌处理，最后用无菌水冲洗5～8次，接种于诱导培养基中。诱导培养基为MS+0．5 mg／L6一BA+0．2mg／L NAA+3 蔗糖(w／v)+0．5﹪卡拉胶，pH值为5.6～5.8。每个灭菌处理接种2O枚外植体，l5d后观察记录外植体的污染、死亡、无菌成活生长等情况。 （3）培养基： ①芽诱导试验，于MS培养基附加0．2 mg／L NAA、IAA、IBA不同种类生长素的培养基中，20d后调查记录幼芽分化情况。 ②继代培养与扩大繁殖，MS培养基附加0.5 mg/L6-BA、0.01 mg/L NAA。 ③根诱导试验, 用1/2 MS附加不同浓度(mg/I )IBA 有0．05、0．1、0．2、0．5及不加IBA的5个处理. （3）条件：培养基均在1～ 1.1大气压下热压灭菌20min。培养温度(25± 2)℃。每日光照12h，光强2 000Lux。 （1）再生途径：用其花药、花蕾、叶、叶柄、子叶、下胚轴等作外植体进行离体培养。 （2）灭菌方法：洗去泥土、灰尘，再用自来水冲淋2～3h，置超净工作台上进行75 ﹪乙醇和0．1 升汞不同时间的灭菌处理. （3）培养基：①MS+BA 1.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L(浓度单位,下同)；②MS+6一BA0.5+KT 0.5；③MS+BA2.0+IAA 1.0；④MS+BA2.0+NAA0.5+2,4-D0.1；⑤MS+BA2.0+IBA0.1。以上培养基各加CH 100 mg/L，蔗糖20g/ L(①为30g/ L)。 ①用于花药诱导培养基； ②用于花药幺伤组织分化培养； ③、④用于其余5种外植体(叶盘、叶柄、下胚轴、子叶、花蕾)诱导培养；⑤仅用于花蕾培养。 （4）条件：培养条件均为12 h光照12 h黑暗。光强度1200-1500lx、温度(25 ±2)℃。 三、叶片以红颊、章姬、丰香草莓叶片为试材，对影响草莓叶片不定芽再生的主要因素进行了试验研究，建立了草莓离体叶片的再生体系。试验结果表明，基因型、不同激素种类和配比直接影响了草莓叶片再生芽的发生。基因型是影响草莓叶片再生能力的决定因素，不同激素配比是不定芽产生的关键因素。 叶片愈伤组织的诱导培养基以MS+TDZ 2~3mg／1较理想， 芽伸长的理想培养基为MS+6一BA 0．3～O．5mg／l， 生根培养基以1／2MS+IBA0．3mg／1较适宜，移栽成活率可达90％以上。 2.结论（1）再生途径：先采取当年生匍匐茎茎尖培养繁殖，建立起三个品种的无性繁殖系；再从继代3周的无菌苗上剪取叶片作为外植体，进行不同的处理，每瓶接10片叶盘，每处理重复5瓶。 （2）灭菌方法：于121℃下高温高压蒸汽灭菌20min。

蝴蝶兰组织培养及诱变育种的研究进展

蝴蝶兰组织培养及诱变育种的研究进展 刘亮,易自力3,蒋建雄,彭筱娜,黄丽芳　(湖南农业大学细胞工程实验室,湖南长沙410128) 摘要　从蝴蝶兰(phalaenopsis)的组织培养及诱变育种两个方面进行了探讨。就当前蝴蝶兰外植体的选择、培养基的选择、原球茎增殖、生根壮苗、炼苗移栽化学诱变几个方面作了详细的讨论。 关键词　蝴蝶兰;组织培养;诱变育种 中图分类号　Q943.1 文献标识码　A 文章编号　0517-6611(2007)27-08451-02 R esearch P rogress in the Tissue Culture and Mutation B reeding of Phalaenopsis spp. LIU Liang et al　(Cell Engineer Lab of Hunan Agriculture University,Changsha,Hunan410128) Abstract　T he research progress in the tissue culture and mutation breeding of Phalaenopsis,including the effect of ex plants,m edium,multiplication of protocorm2like b ody,m eth od of rooting and seedling strengthening,transplantation and chem om orph osis and s o on,was discussed,in order to provide in for2 m ation for this field. K ey w ords　Phalaenopsis spp.;T issue culture;Mutation breeding 蝴蝶兰(phalaenop sis)为兰科蝴蝶兰属兰花,原产于我国台湾、菲律宾、印度尼西亚、泰国、马来西亚等地[1]。蝴蝶兰花型奇特,色彩艳丽,花期长久,素有“洋兰皇后”的美誉。笔者就近年来蝴蝶兰组织培养技术及育种的研究现状进行综述,以便为该领域今后的研究提供参考。 1　蝴蝶兰的组织培养 兰花的传统繁殖方式为分株繁殖,但蝴蝶兰为单茎气生兰,很少有侧芽萌发,很难进行无性繁殖;蝴蝶兰也可通过种子繁殖,但发芽率低。因此,一般采用组织培养的方式:一是利用种子无菌发芽;二是从离体器官诱导产生原球茎,通过原球茎增殖,得到大量蝴蝶兰幼苗。为了减少变异,自20世纪80年代以来,陆续有不通过原球茎途径而直接诱导“丛生芽”繁殖蝴蝶兰的研究报道。 1.1　利用原球茎快速繁殖蝴蝶兰的研究概况 1.1.1　外植体的选择。蝴蝶兰组织培养诱导原球茎的外植体有茎尖、茎段、叶片、根尖、根段、花梗腋芽、花梗节间切段、幼胚、种子等。茎尖是较容易诱导培养、成功率较高的部位,它是最早用于兰花快速繁殖的外植体。早在1974年,Intu2 w ong等[2]就利用蝴蝶兰茎尖诱导产生了原球茎状体,再由原球茎分化成植株,为实现蝴蝶兰工厂化生产奠定了基础。袁全国等[3-6]用蝴蝶兰的茎尖诱导出了原球茎。但蝴蝶兰是单茎气生性兰,采用茎尖作为外植体会散失母株,因此在蝴蝶兰组培中用茎尖诱导原球茎不太合适。 叶片作为外植体既可减少对母株的伤害,且取材不受季节限制。叶片诱导原球茎的因素很多,除了培养基、激素、天然复合物等,还与叶龄、叶片接种方式和接种部位等有关。田中道男(1975)和张秀清等[6]指出幼叶比成熟叶片诱导率高,且以整片直接插入培养基中较好;成熟叶片则叶基部诱导率较高。总之,叶片成功诱导出原球茎的报道较少。 根尖、根段培养成功的报道都很少,古川仁郎、长谷川等曾报道根尖诱导率低,不适宜蝴蝶兰快繁。中国台湾的林瑞松(1981)、曾宋君(2000)等报道了蝴蝶兰根尖培养的实验结果。 1.1.2　培养基的选择。不同品种的蝴蝶兰组培采用的培养 作者简介　刘亮(1982-),女,湖南长沙人,硕士研究生,研究方向:花卉组织培养。3通讯作者,E2m ail:yizili889@https://www.wendangku.net/doc/7610683686.html,。 收稿日期　2007204229基不同。周俊辉等[7]以红花品种为试材,添加了不同浓度的62BA和1mg/L NAA到3种基本培养基中,发现改良K C的效果最好,1/3MS次之,MS最差。李向英等[8]以日本国旗红蝴蝶兰为试材,采用改良VW培养基并加入活性炭和土豆汁,取得了较好的效果。邹金环等[9]以大红袍和红唇美人为材料,结论是MS+花宝(N2P2K=6.526219)效果最好。张元国等[10]用试管苗茎尖在附加5.0mg/L62BA和0.5mg/L NAA 的MS培养基上诱导原球茎状体,诱导率可达100%。 不同外植体对最适培养基的选择也不同。曾宋君等[4]取杂交胚、花梗、幼叶、茎尖、根尖等不同外植体接入到添加了不同浓度的62BA、NAA和2,42D的几种培养基中进行培养,发现其4个月的杂交胚选用G3培养基附加0.2mg/L 62BA和0.5mg/LNAA的最好;花梗、茎尖和根尖则在MS附加5.0～10.0mg/L的62BA培养基上效果最好;而叶片以B5附加3.0～5.0mg/L62BA的效果最佳。 1.1.3　原球茎继代增殖。在蝴蝶兰继代增殖中最常用的激素仍然是BA和NAA,偶尔使用K T和2,42D。周俊辉等[7]的试验中随着BA浓度增加,原球茎增殖倍数均有下降趋势,且低浓度的NAA对原球茎增殖和出苗均有促进作用。王静等[11]研究表明,适宜浓度的62BA配合较低浓度的NAA,更有利于原球茎的增殖。 1.2　用丛生芽途径快速繁殖蝴蝶兰的进展　为了进一步减少蝴蝶兰组培中产生的变异,王怀宇(1989)、刘荣维等[12]人提出了利用丛生芽途径来实现蝴蝶兰的快速繁殖。潘学峰等[13]采用满天红品种为试材,研究了利用丛生芽途径快速繁殖蝴蝶兰取得了好的成果。 1.3　生根壮苗培养　生根阶段以较低无机盐浓度有利于根的发生和生长,激素比例以较低分裂素和生长素为宜,同时添加一些天然提取物,如香蕉汁、椰乳等也可促进生根。另外适宜浓度的活性炭有利于蝴蝶兰生根培养。张启香等[14]研究表明,低盐培养基1/4MS较适合生根培养,且当62BA与NAA的比值适宜时,根长势较好,土豆汁作为复合添加物对生根较为有利。陈之林等[15]将芽接种到附加香蕉汁的H y2 ponex1号培养基上壮苗生根,植株可迅速生长。曾宋君等[4]发现K y oto和G3培养基均具有较好的生根效果,激素浓度以0.1mg/L62BA和0.5mg/L NAA组合效果最佳,且在培养基 安徽农业科学,Journal of Anhui Agri.Sci.2007,35(27):8451-8452 责任编辑　罗芸　责任校对　 李洪

草莓组培

1、取材。每年的6-8月，选择植株生长健壮，匍匐茎充实，尖端生长良好，无病虫害的优良植株取其茎尖或花药，作为组织培养的外植体。 2、消毒。材料取来修整后用纱布包好放在自来水龙头下冲洗2-4小时（以茎尖为例），然后进行表面消毒。先用70%酒精漂洗半分钟，然后用0.1%的新洁尔灭浸泡15-20分钟，再用0.1%的升汞（氯化汞）消毒5-8分钟，最后用1-2%的过氧乙酸消毒1分钟。每次都要用无菌水冲洗3-4次后再进行下一次消毒。整个消毒过程都应在超净工作台内完成。 3、接种。接种在超净工作台内进行，接种前要先用酒精灯对接种用具（镊子、接种针、接种架等）消毒自然放凉。先用镊子一层层的剥去茎尖外的幼叶和鳞片，然后在解剖镜下找到生长点（可带1-2个叶原基）用接种针挑出生长点（小于0.5毫米），放入事先准备好的盛有培养基的培养瓶内，封好瓶口，置于培养室内培养成小植株。 4、室内培养。培养室要求干净清洁，室内装有紫外线杀菌灯，每天要对室内进行消毒，以防污染。培养温度20-28℃，最适温度25℃，相对湿度70%，光照强度1000-2000勒克斯，每日光照10小时左右。 5、继代培养。每培养25-30天，培养瓶内的小植株就会分出3-5个小植株，把这些小植株分出放于继代培养基内培养；过20-30天后又会长出小植株，如此反复进行继代培养，增加繁殖系数。 6、诱导生根。根据生产需要可在1-2月份集中一批苗子生根。草莓试管苗生根很容易，有的在继代培养基上便可生根。或者在培养基中加入0.5毫克/升的LBA，经30天左右便可长出6-10条长约2-3厘米的小根。 7、温室驯化。把生好根的小苗经光照锻炼7-10天，从试管内取出，洗净根部培养基，移栽入事先准备好的营养土内，使其逐渐长大发出5-6片新叶的过程称为驯化。驯化用的营养土要求土质以疏松的沙土掺入少量有机质。移栽后要浇透水，支小拱棚覆盖塑料薄膜保湿。驯化温度以15-20℃，前两周空气相对湿度80-100%，第三周开始短时间放风，放风强度逐渐加大，至移栽后第四周可去掉覆盖物。根据情况每天或隔天喷水一次，保持土壤湿润而不积水为宜。驯化一般需2-3个月即可移出。经病毒鉴定，确认无毒后放入网纱大棚内繁殖。 8、病毒鉴定和检验。草莓无病毒苗的鉴定检验手段是采用小叶嫁接法、蚜虫接种鉴定法和电子显微镜检测法。利用电子显微镜检测草莓病毒比前两种更直观，而且速度快。其方法是利用负染色法及超薄切片法处理待测叶片，然后在电子显微镜下观察，如果被测叶片中含有较多病毒颗粒子，可被直接观察到。经检验确认无毒的草莓苗移入网纱大棚进行繁殖。 9、网纱大棚内繁殖。草莓病毒的传播主要靠蚜虫、飞虱等虫媒传播。把无

蓝莓组培快繁技术实例 · 附配方

蓝莓（Vaccinium corymbosum）属杜鹃花科，越橘属植物。起源于北美，多年生灌木小浆果果树。因果实呈蓝色，故称为蓝莓国际粮农组织将其列为人类五大健康食品之一。 本试验以蓝莓半木质化茎段为外植体，并通过瓶外生根技术，建立起植株再生体系。 1 材料与方法 1.1 外植体材料及培养条件 1.1.1 外植体选择 高灌蓝莓半木质化茎段。 1.1.2 外植体预处理及灭菌 剪取蓝莓半木质化枝条，立即去掉上部叶片带回室内，剪成带有一个叶芽2-3厘米长茎段，在流动自来水中冲洗20-30分钟，在超净工作台上用75%酒精消毒2-3分钟，用无菌水冲洗3次，吸干水后在0.1%升汞中消毒5-8分钟，用无菌水冲洗3次，吸干水分，剪去茎段两端约 0.5-1厘米，立即接种到初代培养基中。 1.1.3 培养条件 诱导培养基：改良WPM + ZT 1.0mg/L 增殖培养基：改良WPM + IAA 0.1mg/L + ZT 2.0mg/L 复壮培养基：改良WPM + IBA 0.1mg/L WPM具体改良为：以硝酸钙 684mg/L、硝酸钾 190mg/L、EDTA铁钠 73.4mg/L和盐酸硫胺素0.1mg/L代替原WPM培养基中的硫酸钾、氯化钙、硫酸亚铁和乙二胺四乙酸钠。 以上培养基均加蔗糖3%，琼脂0.7%，pH值5.2。 培养温度为25℃，光照强度为2000lx，光照时长为12-16时/天。

2 结果与分析 2.1 初代诱导培养 将处理好的外植体立即接种到诱导培养基中，5-6天叶芽开始萌动，10天开始展叶，20天腋芽长到1厘米长，30天腋芽长到1.5-2.5厘米长。 2.2 继代增殖培养 将初代培养长出的茎剪成1.5-2厘米长茎段转接到增殖培养基中。30-35天增殖5-7倍，增殖苗生长健壮。 2.3 复壮培养 将继代苗剪成1-1.5厘米茎段，转接到壮苗培养基，复壮培养30-40天，复壮苗高5-6厘米且粗壮。 2.4 瓶外生根培养

蝴蝶兰怎么养

1．栽培介质：蝴蝶兰常见的栽培介质主要以水草、苔藓为主。 2．温度：家庭养蝴蝶兰首先要保证温度。蝴蝶兰喜欢高温高湿的环境，生长时期最低温度应保持在15℃以上，蝴蝶兰适宜生长温度为1 6℃至30℃。秋冬和冬春之交以及冬季气温低时应注意增温，一般冬季有供暖设备的房间，这个温度不难达到，但要注意，不要将花直接放在暖气片上或离之过近。夏季温度偏高时需要降温，并注意通风，若温度高于32℃，蝴蝶兰通常会进入半休眠状态，要避免持续高温。春节前后为盛花期，适当降温可延长观赏时间，开花时夜间温度最好控制在13℃至16℃之间，但不能低于13℃。蝴蝶兰对低温十分敏感，长时间处于15℃时则停止生长，温度在15℃以下时根部停止吸收水分，叶片出现坏死黑斑，时间过长叶片开始变黄而脱落。每年在冬前和翌年初春(即采暖期前后)是北方气候多变时期，室内温度均达不到15℃，这是一年当中最难养护时期，应将兰株放在室内朝阳处，少浇水，必要时给地面洒水，晚上给兰株套袋进行保温。 3、换盆 选盆：一般选用素烧陶盆或塑料盆，以多孔盆为好，为便于透气宜用浅盆，盆高最好小于盆直径。．培养基质选用：蝴蝶兰为典型的附生兰，它的根系发达，栽培基质必须具备疏松、通风、透气性好、耐腐烂的特点，根据笔者的栽培经验，北方养蝴蝶兰宜就地选用松针叶、花生壳、树皮丝等作为基质。每年必须换盆，如果不及时换盆，盆栽基质腐烂造成紧缩、透气性差。兰株长势严重衰退，甚至死亡。．换盆时间及方法：蝴蝶兰换盆的最佳时期是春末夏初，温度最好在20℃以上，此时花期刚过，新根开始生长。换盆时，先剪去花茎，将原用的营养钵轻轻去掉，用手指将下部的旧基质挖出，将干枯的老根，有锈斑的根，断根剪去，盆底用碎瓦片垫起。用消毒过的湿松针叶给盆底先放入一层，把蝴蝶兰的根均匀散开放入盆内，再继续将松针叶放在兰株根系处，轻轻压实，使兰株站稳。栽植时应注意兰株的根茎部要与盆沿高一致，然后喷水放置室内通风处，这期间不宜施肥，在管理上只需喷水和适当浇水，一个月后就能长 出叶芽，再进行正常管理。 4．浇水：蝴蝶兰原产于原始森林中，雾气较多，温度较高。蝴蝶兰没有粗大的假球茎储存养分，如果空气中温度不足，则叶面发皱且软弱无力。因此，蝴蝶兰宜在通风、湿度高

苹果树组培快繁技术实例 · 含配方

苹果的组织培养是采用无菌培养技术，将来自优良植物的茎尖、腋芽、叶片、鳞片、块根和球茎等器官以及它们的组织切片进行离体培养，使之在短期内获得大量遗传性一致的个体的方法。由于离体技术处理严格，所以很容易脱除一些细菌病原及病毒，是复壮品种的有效措施。已成功脱除的病毒和病害有苹果褪绿叶斑病毒、花叶病病毒、轮纹病等。苹果矮化砧、抗寒砧的组织培养也已成功。苹果脱毒组培技术流程具体如下。

一 外植体材料选择与处理 早春，将上年芽接或切接的盆栽长富2号苹果苗移人温室，待新梢长出3～5片新叶时，放入热处理箱中，37℃恒温热处理30d或32℃与37℃每8h变换一次，变温热处理60d。脱毒率可达80％以上。热处理结束后，从盆栽苗嫩梢上采集生长旺盛、长约2～3cm顶梢，流水冲洗10min，去掉小叶。70％乙醇浸泡30s，蒸馏水冲洗后放入0.1％HgCI。中消毒10min，无菌水冲洗3～5次，解剖镜下迅速剥取1.0mm的茎尖进行分离培养，接种于起始培养基上。

二 培养基制备 1.1 芽诱导 适宜苹果芽诱导培养基为：MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L。诱导的芽生长正常可发育成新梢。 1.2 继代培养 选择诱导的芽丛切割成单芽茎段，转接于设计的继代培养基上。适宜的苹果继代培养基为：MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.05mg/L+蔗糖4％+琼脂0.36mg/L。培养条件：光照强度2000～ 2500lx，光照时间14～16h/d，适宜温度为25℃±2.0℃。40d后增殖6.1倍。 1.3 生根培养 选择生长正常的继代培养苗，剪成单芽茎段，插入生根培养基中，苹果适宜的生根培养基为：1／2MS+IAA1.5mg/L+蔗糖25％+琼脂0.36％。培养30d后，平均4～6条根／苗，长达0.5～1.0cm。根白且粗，多直接生于茎基部。

蝴蝶兰组织培养研究进展_综述_

2006,35(1):71-74. Subtropical Plant Science 蝴蝶兰组织培养研究进展(综述) 郑玉忠，张振霞，陈泽华 (韩山师范学院生物系, 广东潮州 521041) 摘要：本文从蝴蝶兰外植体的选择、不同基本培养基、激素及添加物对其增殖与分化的影响，外植体褐变的防治以及生根壮苗方法等，概述蝴蝶兰组培快繁方面的研究进展，为其组培技术研究提供参考。 关键词：蝴蝶兰；组织培养；原球茎 中图分类号：Q943.1；S682.31 文献标识码：A 文章编号：1009-7791(2006)01-0071-04 Progress in Tissue Culture of Phalaenopsis spp. ZHENG Yu-zhong, ZHANG Zhen-xia, CHEN Ze-hua （Department of Biology, Hanshan Teachers College, Chaozhou 521041, Guangdong China） Abstract: The research progress of tissue culture of Phalaenopsis, including the effects of explants sources, culture mediums, hormones and nutrition compositions on multiplication and differentiation of protocorm-like body, the inhibition on browning of explants and methods of rooting and seedling strengthening before transplanting, are reviewed. Some reference materials are also provided for further study in tissue culture of phalaenopsis. Key words:Phalaenopsis spp.; tissue culture; protocorm-like body 蝴蝶兰（Phalaenopsis spp.）属热带或亚热带的兰科植物，其花形奇特，姿态优雅，色彩鲜艳，花期长久，素有“兰花皇后”之美誉，观赏价值极高，深受人们的喜爱，国内外市场的需求量越来越大。蝴蝶兰的传统繁殖方式为分株繁殖，繁殖系数低，速度慢，不能满足日益增长的市场需求。因此，研究和开发蝴蝶兰具有重要的意义。 组织培养是蝴蝶兰快速繁殖的有效途径，主要通过两条途径：一是利用种子无菌发芽，二是从离体器官诱导产生原球茎，通过原球茎的增殖培养，得到大量幼苗[1]。早在1949年，Potor[2]利用无菌培养技术成功地促使蝴蝶兰花梗上的休眠芽发育成完整植株，该方法经过其他研究人员改进后，曾一度成为蝴蝶兰的主要无性繁殖方式。1974年，Intuwong等[3]利用蝴蝶兰茎尖诱导产生了原球茎状体，再由原球茎分化成植株，为实现蝴蝶兰工厂化生产奠定了基础。原球茎是一类呈珠粒状的幼嫩器官，在兰科植物中多以这种器官发育、增殖和分化。 蝴蝶兰的组织培养中有几个关键的时期：原球茎的诱导、原球茎的继代增殖、壮苗的培育。根据这几个重要的时期及其组织培养的外界条件，国内外研究人员对蝴蝶兰组织培养进行了广泛的研究，并取得了一定的成效。本文就近年来蝴蝶兰组培快繁技术的研究现状进行综述，包括外植体的选择，不同基本培养基、激素、添加物对其增殖与分化的影响，外植体褐变的防治，以及生根壮苗的方法等。同时展望未来的发展趋势，为该研究领域今后的发展提供有益的信息。 1 外植体的选择 诱导蝴蝶兰原球茎采用的外植体主要有根段[4]、花梗苗根尖[5]、花梗腋芽[6]、茎尖[7]、叶片[8-10]、胚 收稿日期：2005-08-03 基金项目：韩山师范学院青年基金项目（QN200503）资助 作者简介：郑玉忠(1977-), 男, 广东潮阳人, 硕士, 从事植物生物技术研究。 注：张振霞为通讯作者。

蝴蝶兰各阶段生长标准

要培育出植株健 壮、花朵硕大、花数多、 排列良好及瓶插寿命长 的蝴蝶兰，除选优良品 种外，必须使叶片充实、 肥厚，植株挺硬。健全 的植株需有健全的根来 支持，并供给充足的水 分和营养。若植株遭到 病虫害，或温度不适、 光线过度或不足，以及 养分不平衡时，较易出 现不良症状。而当不良症状尚未达到某种程度时，不易被发觉；待植株呈现异常时，其根部大都已到了无法挽救的地步。 1、瓶苗：进行严格的分级筛选，叶片3-5公分以上，根长3-4公分，生长势旺盛的无菌无毒苗。 2、小苗：栽培3.5-4.5月，双叶展开12公分以上，根系良好，生长健康，适应能力强的无病害兰苗。 3、中苗：栽培8个月以上，双叶展开距达18-20公分，叶片数达4片，根系密集，叶片厚实坚挺的无病害兰苗。 4、抽梗苗：栽培14个月以上的大苗，叶腋有一支花梗抽出，花梗10公分以上，梗径粗长、长势良好，叶片挺拔健康，假球茎饱满，无病虫害的优秀苗株。 5、成花：栽培18个月以上的大苗开花株，植株健壮，叶片肥大，根系发达，花梗粗壮，花瓣厚实，花形硕大园润，着色均匀密致，花序大，排列整齐，花期持久，向光性良好的兰株。 简易温室投资少，但温室管理复杂而风险大。玻璃或PC板温室投资高，但温室环境管理简易而风险小。蝴蝶兰自瓶内移出后，一般需在设施里养18个月以上才会开花。过去简易的遮光设施不易调控蝴蝶兰生长的环境条件，蝴蝶兰在此种环境下生长，总是生长发育不良，品质不一。高温的夏天，叶片易受光灼伤，导致软腐病及其他病害的发生。遇上寒流若我加温设施花蕾黄化掉落，兰苗失去商品价值。因此，大量栽培蝴蝶兰，应投资建设玻璃或PC板温室，建立可调控的栽培环境，使兰苗正常生长。 瓶苗的健壮与否，直接影响其出瓶移植后的成活率、生长势，甚至抗病力。同一瓶内各植株生长整齐均一、叶片不徒长、下叶不黄化，这是健壮的瓶苗应该具备的条件。兰苗从瓶中移出后，大致分成大、小两级，苗株以水苔包根至

满天星组培快繁技术实例 · 含配方

满天星 Gypsophila elegans 满天星，又名为霞草、重瓣丝石竹，原产地中海沿岸，属石竹科多年生宿根草本花卉。为常绿矮生小灌木，其株高约为65～70cm，茎细皮滑，分枝甚多，叶片窄长，无柄，对生，叶色粉绿。由于它花型小、浅色、花姿蓬松具立体感，气质高雅清秀，给人以朦胧感，花序群体效果极佳，是重要的陪衬花，为当今最流行的切花之一，十分畅销。

满天星种苗多采用边生产切花，边利用植株下部发生的腋芽进行插扦获得。用这种方法，满 天星繁殖系数较低，种苗品质参差不齐，较难获得大批量的优质种苗。一些单瓣种可用种子 繁殖。商品化切花生产的，种苗繁殖以组培为主，采用茎尖培养，繁殖系数高，根系生长状 况好，花枝挺拔，色泽纯正，切花质量高。满天星组织培养繁殖速度快，生根率高，无畸形 变异，过渡苗驯化成活率高，与其他花卉组培相比，易获得成功，但普遍存在玻璃化现象。 1、初代培养 诱导培养基为1/2MS+0.3mg/L 6-BA+0.1mg/L KT+0.3mg/L NAA，或MS+1.0mg/L 6- BA+2.0mg/L KT+0.3mg/L NAA+0.2mg/L IAA，各培养基加3％～4％蔗糖0.6％～0.7％琼脂。培养温度25～27℃，光照强度2000～2200lx，光照时间每天12～16h。 剪取满天星母株上生长较粗壮的嫩梢，剪去展开叶片，留下生长较嫩的叶片，将外植体放在 烧杯中，用自来水冲洗10～20min，然后加入少量家用洗衣粉或洗洁精少许，加入少量的水，用小毛刷搅拌2～5min。用此方法重复数次，再用自来水冲洗干净满天星茎尖上的洗涤液。 把冲洗净的满天星茎尖外植体放入75％的酒精中约3～5min，再用0.1％的升汞浸泡外植体 5～7min，或在10％的漂白粉清洗液中浸泡10～15min，再用无菌蒸馏水冲洗5～7次，即得 无菌外植体，置于无菌操作台中的培养皿中待用。然后将嫩茎切成lcm左右的带芽茎段，腋 芽切取0.5～1.0cm长的茎尖，接种到诱导培养基上。

蝴蝶兰的组织培养研究

蝴蝶兰的组织培养研究 本试验以蝴蝶兰原优良品种满天红花梗为外植体，对休眠芽萌发诱导、叶片原球茎诱导、原球茎增殖、根诱导和组培苗的移栽等方面进行初步研究，得出以下结果： 1、花梗休眠芽的诱导在夏季、秋季、春季三个季节选取含休眠芽的花梗节段进行培养，对污染率、休眠芽萌发诱导率和芽生长状况进行了比较。试验表明秋季选取的花梗外植体灭菌效果最好，休眠芽萌发诱导率最高。 MS+BA 5.0培养基较适合休眠芽的诱导。 2、无菌苗叶片的原球茎诱导本试验以无菌苗叶片为外植体诱导原球茎产生，结果表明，BA浓度 5.0mg·L^-1最适合叶片原球茎诱导，添加15％（V／V）椰乳（CW）能提高原球茎的诱导率，并有利于原球茎的生长。 MS+BA 5.0+CW 15％培养基较适合诱导叶片产生原球茎，诱导率最高达到38％。 3、原球茎的增殖在MS培养基中添加一定浓度的BA和果汁能提高原球茎的增殖率。 另外，添加聚乙烯吡咯烷酮（PVP）100～200mg·L^-1能有效控制培养基的酚污染、提高原球茎的增殖率。MS+BA 5.0+CW 15％培养基较适合原球茎的增殖。 J‘西大学祝眨d卜学位论文4、根的诱导在1/2 Ms培养基中附加一定浓度NAA（0 .1一0.5mg’L一’）和多效哇MET（0 .1⁰.5mg’L一‘）与BA配合，能诱导小苗生根。用多效哇诱导生根，幼苗矮壮，叶片较绿，有利提高幼苗的移栽成活率。 添加0.39一’活性炭（AC）能大大提高生根苗的平均根数和平均根长。对根诱导较适合的培养基是:1/2 MS+B A 2.0+NAA 0.卜AC或1/ZMS+BA 2.0+MET 0.3。

樱桃组培快繁技术研究

樱桃组培快繁技术研究 摘要：以甜樱桃品种高砂、顽童和中国樱桃品种莱阳矮樱为试材，以MS与F14为基本培养基进行组织培养试验。对增殖率和成苗率等指标进行研究。结果表明，用F14做培养基3个樱桃品种茎尖组培苗的增殖系数比MS高，F14上高砂、顽童和莱阳矮樱的增殖系数分别是4．17、3．78和5．0，MS上则分别是3．33、3．22和4．17；在F14上，樱桃茎尖组培成苗率莱阳矮樱为83．3％，高砂23．3％，顽童16．7％；在F14添加植物生长调节剂的增殖培养基中，以F14+6-BA 1．0mg／L+IBA 0．5mg／L+GA32．0mg／L对高砂和顽童的茎尖组培苗增殖系数大，以F14+6-BA 1．Omg／L+IBA 0．1mg／L+GA 2．0mg／L对高砂组培苗的增殖系数大，促进节间伸长的效果好：在一步生根法培养基F14+IBA 1．0mg／L上，平均生根率高砂较顽童高；在F14+IBA 1．0mg／L上添加活性炭500～1000mg／L时，可有效提高顽童的生根率。 关键词：樱桃；茎尖；组织培养；快速繁殖 组织培养技术的发展为果树的育种工作带来许多方便，也为长期保存果树种质资源提供了新的手段?。研究表明，通过茎尖外植体进行樱桃组培繁殖，可达到快速繁殖苗木和脱去病毒病的效果。 1 材料和方法 试材为甜樱桃品种高砂、顽童．中国樱桃品种莱阳矮樱，均来自辽阳市农林科学院果树基地。试验采用F14和Ms 为基本培养基；F14+蔗糖30 L+琼脂7 L为分化培养基；F14+植物生 长调节剂为增殖培养基，添加的植物生长调节剂有6一苄基氨基嘌呤(6．BA)、赤霉素(GA )和吲哚丁酸(IBA)，具体配方见表3；F14+IBA和MS+IBA为生根培养基。F14+IBA 1．0mg／L为一步生根法培养基。F14+IBA 1．0mg／L+活性炭为试验活性炭作用的培养基。培养基的pH值为5．6～5．8，分装在lO0ml三角瓶中，在121℃下灭菌20分钟，在黑暗条件下保存备用。 1．1 试材的预处理 取樱桃芽露绿的一年生成熟枝条，剪成带一个芽、长约2cm的枝段，用刀将芽从枝段上削下来(带些木质部)，剥除芽鳞片，去除茎表皮，用洗洁精浸泡3分钟，在流水中冲洗60～90分钟，在超净工作台上用70％酒精消毒30秒钟，用无菌水冲洗3次(每次1～2分钟)，再用0．1％氯化汞消毒15分钟，置无菌水中浸泡20分钟，用无菌水冲洗4次，待接种。 1．2 试材的接种培养 在超净工作台上将经预处理的试材用镊子剥除芽外部的叶原基，去除木质部，切下1mm大小的茎尖，接种于分化培养基F14+蔗糖3O L+琼脂7 L上培养。培养温度25±2cC，光强2000～2500K．每天光照l6小时。 1．3 评价指标 微茎尖成苗数=萌发后能正常增殖继代、具有成苗能力的微茎尖数。 成苗率(％)=成苗微茎尖数／接种微茎尖数×100 增殖芽数=接种1个芽25天后增殖的所有芽数 增殖系数=转接后芽数／转接前芽数 生根率(％)=生根嫩梢数／接种嫩梢数×100 2 结果与分析 2．1 不同樱桃品种间茎尖组培成苗率的差异 在F14基本培养基上，接种甜樱桃品种高砂、顽童和中国樱桃莱阳矮樱的茎尖，高砂的成苗率为23．3％，顽童16．7％，莱阳矮樱83．3％(表1)。在组培中发现，甜樱桃萌发率较低，接种后的第2天伤口处及茎尖边缘褐变，之后有的茎尖周围发生大量愈伤组织，延缓了茎尖的萌发及成苗时间，甚至导致死亡。而中国樱桃莱阳矮樱则萌发率和成苗率均高，组培容易。

蝴蝶兰常用的五种繁殖方法

蝴蝶兰常用的五种繁殖方法 蝴蝶兰为附生兰，在蝴蝶兰开花的时候，好似蝴蝶飞舞的样子，非常漂亮，所以又有“洋兰皇后”的美名。不过蝴蝶兰的栽种要求比较严格，所以人工栽培蝴蝶兰的时候需要注意栽培方法，如果你有兴趣自己繁殖蝴蝶兰的话可以参考小编为你整理的蝴蝶兰常用的五种繁殖方法。 蝴蝶兰 一、播种繁殖法 有一种自然播种法，就是将已开裂蒴果散发出来的种子播于亲本植株的花盆中，这种方法简单易行，无需复杂的无菌程序和操作工具，适用于一般家庭蝴蝶兰种植者，但此法成功的机会甚微，极少应用。还有一种是无菌播种法，这种方法是先将未裂开的成熟蒴果洗净，然后置于75％～90％乙醇或氯仿中浸2～3秒，再用5％～10％的漂白粉溶液或3％的双氧水浸5～20分钟。取出种子在同样的消毒水中浸泡5～20分钟，然后用过滤的方法除去溶液，取出种子，再用细针将种子均匀地平铺于已制备好的瓶中培养基表面。培养条件为光照强度2000～3000勒克斯，每天10～18小时，温度保持在20～26℃。9～10个月后，小苗长出2～3片叶子便可出瓶上盆栽植。 二、花梗催芽繁殖法 方法是先将花梗中已开完花的部分剪去，然后用刀片或利刃仔细地将花梗上部第一至第三节节间的苞片切除，露出节间中的

芽点；用棉签将催芽剂或吲哚丁酸等激素均匀地涂抹在裸露的节间节点上；处理后将兰株置于半阴处，温度保持在25～28℃，2～3周后可见芽体长出叶片，3个月后长成具有3～4片叶并带有气生根的蝴蝶兰小苗；切下小苗上盆，便可成为一棵新的兰株。 三、断心催芽繁殖法 兰株因一些因素而致使其生长点遭到破坏后，经过一段时间，会从兰株近基部的茎节上长出1～2个新芽。可以利用这一特点来繁殖蝴蝶兰。 四、切茎繁殖法 切茎繁殖法的原理是破坏茎尖生长点，以诱发潜伏芽生长。蝴蝶兰植株的叶腋处虽有潜伏芽1～3个，但多不能萌芽成株。可待植株不断向上生长、茎节较长后，再将植株带有根的上部用消毒过的利刃或剪刀切断，植入新盆使其继续生长，下部留有根茎的部分给予适当的水分管理，不久就可萌生新芽。 五、组织培养法 采用组织培养法来繁殖蝴蝶兰，可以获得与母株完全相同的优良的遗传特性。通过这种方法产生的蝴蝶兰苗通过称为分生苗或组织苗。用于进行分生培养的植物组织（外植体）可以是顶芽（茎尖）、茎段（休眠芽），也可以是幼嫩的叶片或根尖，但目前最常见的是采用蝴蝶兰的花梗。

草莓组织培养研究进展

[摘要] 从草莓组织培养类型（草莓茎尖组织培养、草莓花药培养、草莓叶片、叶柄组织培养）开始，介绍了近几十年国内外草莓组培的研究现状和进展。 [关键词]草莓;组织培养; 草莓是蔷薇科草莓属多年生草本植物，是世界上七大水果之一，素有“水果皇后”的美称。草莓果实色泽艳丽，芳香多汁，酸甜适度，鲜美可口，营养丰富，每百克果实内含有蛋白质1g，脂肪，糖4～12g，酸～2g，无机盐，粗纤维，Vc45～120mg，比苹果和葡萄高10多倍，并含有丰富的磷、钙、铁、锌等矿物质，其中锌的含量是香蕉的4倍以上，比柑橘高6倍以上，比苹果高40倍以上。另外食用草莓对肠胃病和贫血病有一定的疗效，对促进智力发育有重要作用。深受国内外消费者的喜爱。草莓作为一种栽培周期短、结果早、见效快的经济作物，近15年来在我国发展迅猛，中国园艺学会草莓分会统计2003年底，我国草莓总面积和总产量均跃居世界第一位。在浆果中，草莓的总产量和总面积仅次于葡萄，成为我国发展农村经济，促进农民增收的重要经济作物。 随着草莓在国内栽培面积的扩大和种植年限的延长，草莓的病毒病严重影响草莓的生产。作为高级浆果的草莓，在我国目前的生产栽培上多沿用无性繁殖种苗：主要方法是匍匐茎繁殖和分株繁殖，但这两种方法效率低、种苗易退化、易造成病毒蔓延。王国平（1988）等调查，我国栽培草莓带病毒植株率过80%以上，戴子林（1995）等调查，我国长江流域感染大面积植株感染率在50%以上；感染了病毒病的草莓果子一年比一年小、畸形、品质差、生长缓慢，一般减产30%-80%，并逐年加重；严重影响草莓的长势、品质和产量，对病毒病目前还没有药剂可以防治。 通过草莓组织培养扩繁草莓脱毒苗，可以解决上述问题。近年来在草莓种苗生产中，有关草莓组培快繁技术的研究备受人们的重视，本文就草莓组织培养研究与应用作一综述。 一、常见草莓组织培养类型 目前，国内外在草莓品种快速繁殖上已有不少报道：常用的外植体主要有：茎尖（Adam，1972；庆子孝，1972；谭兰英等，1981）、腋芽（Boxus，1974、1977；杨乃博，1981）、叶片、叶柄、茎段，花药（Quak,1977；大泽，1972）。常见的草莓组织培养主要的类型：草莓茎尖组织培养、草莓叶片和叶柄组织培养、

蝴蝶兰的组织培养[1]

下列培养基中________无机盐的浓度最低。 A MS培养基； B B5培养基； C White培养基； N6培养基 下列不属于大量元素的盐是____ A NH4NO3； B KNO3； C ZnSO4.7H2O； D MgSO4.7H2O 愈伤组织诱导、增殖及（）是一个连续的过程。 A．根的形成 B．分裂 C．分化 愈伤组织诱导、增殖及（）是一个连续的过程。 A．根的形成 B．分裂 C．分化 对生根培养不起作用的激素是:___________. A GA B IAA; C NAA; D IBA 植物离体培养中培养基的pH范围应该控制在( ).

A,5.5-6.0 B,4.0-7.0 C,7.0 高温灭菌后。培养基的pH会_________。 A 降低 B 升高 C 不变 D 不能确定 培养室里的湿度一般保持在_________ A 30～40%； B 50～60%； C 70～80%； D 80～90% 下列（）不是细胞分裂素。 A、2，4—D B、6—BA C、ZT D、KT 在原生质体的培养中，渗透稳定剂的作用是 A 稳定原生质体的形态而不使其被破坏 B 支持作用 C 提供营养 D 调节PH值 用植物组织培养技术可以培养或生产出（）。

A、次生代谢产物 B、无病毒植物 C、人工种子 D、A，B，C均可 脱落酸（ABA）需要用_________法灭菌。 A 灼烧灭菌； B 干热灭菌； C 过滤灭菌 D高压湿热灭菌 同一植株下列__ _____部位病毒的含量最低。 A 叶肉细胞； B 茎尖生长点细胞 C 茎节细胞； 表皮细胞 ,配制( )溶液时应先用10%的HCl溶解,再加蒸馏水定容. A 2,4-D B 6-BA C,GA3 D,IAA 合适的外植体可诱导产生（）愈伤组织，对以后建立悬浮细胞系可以起到事半功倍的效果。 A．褐化 B．坚硬

草莓组织培养研究进展

草莓组织培养 [摘要] 从草莓组织培养类型（草莓茎尖组织培养、草莓花药培养、草莓叶片、叶柄组织培养）开始，介绍了近几十年国内外草莓组培的研究现状和进展。 [关键词]草莓;组织培养; 草莓是蔷薇科草莓属多年生草本植物，是世界上七大水果之一，素有“水果皇后”的美称。草莓果实色泽艳丽，芳香多汁，酸甜适度，鲜美可口，营养丰富，每百克果实内含有蛋白质1g，脂肪0.6g，糖4～12g，酸0.8～2g，无机盐0.6g，粗纤维1.5g，Vc45～120mg，比苹果和葡萄高10多倍，并含有丰富的磷、钙、铁、锌等矿物质，其中锌的含量是香蕉的4倍以上，比柑橘高6倍以上，比苹果高40倍以上。另外食用草莓对肠胃病和贫血病有一定的疗效，对促进智力发育有重要作用。深受国内外消费者的喜爱。草莓作为一种栽培周期短、结果早、见效快的经济作物，近15年来在我国发展迅猛，中国园艺学会草莓分会统计2003年底，我国草莓总面积和总产量均跃居世界第一位。在浆果中，草莓的总产量和总面积仅次于葡萄，成为我国发展农村经济，促进农民增收的重要经济作物。 随着草莓在国内栽培面积的扩大和种植年限的延长，草莓的病毒病严重影响草莓的生产。作为高级浆果的草莓，在我国目前的生产栽培上多沿用无性繁殖种苗：主要方法是匍匐茎繁殖和分株繁殖，但这两种方法效率低、种苗易退化、易造成病毒蔓延。王国平（1988）等调查，我国栽培草莓带病毒植株率过80%以上，戴子林（1995）等调查，我国长江流域感染大面积植株感染率在50%以上；感染了病毒病的草莓果子一年比一年小、畸形、品质差、生长缓慢，一般减产30%-80%，并逐年加重；严重影响草莓的长势、品质和产量，对病毒病目前还没有药剂可以防治。 通过草莓组织培养扩繁草莓脱毒苗，可以解决上述问题。近年来在草莓种苗生产中，有关草莓组培快繁技术的研究备受人们的重视，本文就草莓组织培养研究与应用作一综述。 一、常见草莓组织培养类型 目前，国内外在草莓品种快速繁殖上已有不少报道：常用的外植体主要有：茎尖（Adam，1972；庆子孝，1972；谭兰英等，1981）、腋芽（Boxus，1974、1977；杨乃博，1981）、叶片、叶柄、茎段，花药（Quak,1977；大泽，1972）。常见的草莓组织培养主要的类型：草莓茎尖组织培养、草莓叶片和叶柄组织培养、