猪瘟_口蹄疫正向间接血凝试验应注意事项
检测项目
顺序号 检测项目检测依据的标准（方法）名称及编号（含年号）限制范围 1 猪瘟《猪瘟诊断技术规程》NY/SY156-2000 只做正向间接血凝试验、 酶联免疫吸附试验 2猪伪狂犬病《伪狂犬病诊断技术》GB/T18641-2002 只做酶联免疫吸附试验、 聚合酶链式反应、乳胶凝 集试验 3蓝耳病《猪繁殖与呼吸综合症诊断方法》GB/T18090-2000 只做间接酶联免疫吸附试验《猪繁殖与呼吸综合症诊断规程》NY/SY168-2000 只做聚合酶链反应 4猪细小病毒病猪细小病毒病诊断技术规程NY/SY152-2000 只做乳胶凝集试验 5 猪乙型脑炎《流行性乙型脑炎诊断技术》GB/T18638-2002 只做血凝抑制试验 6 猪巴氏杆菌病《猪巴氏杆菌病诊断技术》NY/T564-2002 只做间接血凝试验、 琼脂扩散试验 7猪传染性萎缩性鼻炎《猪萎缩性鼻炎诊断技术》NY/T546-2002 8猪放线杆菌胸膜肺炎《猪放线杆菌胸膜肺炎诊断技术》NY/T 537-2002 只做酶联免疫吸 附实验 9猪气喘病（支原体肺炎）《猪喘气病诊断技术规程》NY/SY183-2000只做间接血凝试验 10猪痢疾《猪痢疾诊断技术》NY/T545-2002 只做显微镜检查法11新城疫《新城疫检疫技术规范》GB16550-1996 只做血凝抑制试验 12禽流感《高致病性禽流感诊断技术》GB/T18936-2003 只做血凝抑制试验、琼脂扩 散试验、间接ELISA 13禽巴氏杆菌病《禽霍乱（禽巴氏杆菌病）诊断技术》NY/T563-2002 只做琼脂扩散试验 14鸡马立克氏病《鸡马立克氏病诊断技术》GB/T18643-2002 － 15减蛋综合症《产蛋下降综合症诊断技术》NY/T551-2002 只做血凝抑制试验
猪瘟间接血凝抗体检测试验
猪瘟间接血凝抗体检测试验 一、原理： 用已知血凝抗原检测未知血清抗体的试验，称为正向间接血凝试验（IHA）。 抗原与其对应的抗体相遇，在一条件下形成抗原—抗体复合物。但这种复合物的分子团很小，肉眼看不见。将抗原吸附（致敏）在红细胞表面，制成猪瘟血凝抗原，用于检测免疫动物血清中的猪瘟抗体水平。这种经过猪瘟抗原致敏的红细胞与猪瘟抗体相遇，红细胞便出现清晰的凝集现象。 二、主要组分： 1．猪瘟血凝抗原5ml/瓶，5瓶/盒； 2．猪瘟阳性对照血清0.5ml/管，1管/盒； 3．猪瘟阴性对照血清0.5ml/管，1管/盒； 4．稀释液50ml/瓶，2瓶/盒； 5．封板膜10张/盒。 三、试验器材： 1．96孔110°V型医用血凝板； 2．8道或12道移液器； 3．微量振荡器。 四、物理性状： 1．抗原摇匀呈棕红色（或咖啡色），静置后，血球逐渐沉入瓶底； 2．阴性对照血清淡黄色清亮稍带粘性的液体； 3．阳性对照血清微红或淡黄色稍浑浊带粘性的液体； 4．稀释液淡黄或无色透明液体，低温下放置，瓶底易析出少量结晶，在水浴中加温后即可全溶，不影响使用。 五、作用与用途： 用于检测猪瘟疫苗免疫动物血清抗体效价。 六、用法与判定： 1、用法 1.1加稀释液 在血凝板上1～7排的1～10孔、第8排的1～4孔和第5～7孔；加稀释液50μl/孔。 1.2稀释待检血清 待检血清使用前，需经过56℃水浴灭活30分钟，取待检灭活血清样品50μl，分别加入反应板1～6排的第1孔中，与稀释液混匀后，吸取50μl，加于第2孔中，依次作2倍系列稀释至第10孔，第10孔混匀后取出50μl弃去。 1.3稀释阳性对照血清 在血凝板的第7排第1孔加阳性血清50μl，2倍系列稀释至第10孔，混匀后从该孔取出
口蹄疫O型间接血凝抗体检测试验
口蹄疫O型间接血凝抗体检测试验 一、原理： 用已知血凝抗原检测未知血清抗体的试验，称为正向间接血凝试验（IHA）。 抗原与其对应的抗体相遇，在一条件下形成抗原—抗体复合物。但这种复合物的分子团很小，肉眼看不见。将抗原吸附（致敏）在红细胞表面，制成口蹄疫血凝抗原，用于检测免疫动物血清中的口蹄疫抗体水平。这种经过口蹄疫抗原致敏的红细胞与口蹄疫抗体相遇，红细胞便出现清晰的凝集现象。 二、主要组分： 1．口蹄疫O型血凝抗原5ml/瓶，5瓶/盒； 2．口蹄疫O型阳性对照血清0.5ml/管，1管/盒，阳性血清已1:4稀释； 3．口蹄疫O型阴性对照血清0.5ml/管，1管/盒； 4．稀释液50ml/瓶，2瓶/盒； 5．封板膜10张/盒。 三、试验器材： 1．96孔110°V型医用血凝板； 2．8道或12道移液器； 3．微量振荡器。 四、物理性状： 1．抗原摇匀呈棕红色（或咖啡色），静置后，血球逐渐沉入瓶底； 2．阴性对照血清淡黄色清亮稍带粘性的液体； 3．阳性对照血清微红或淡黄色稍浑浊带粘性的液体； 4．稀释液淡黄或无色透明液体，低温下放置，瓶底易析出少量结晶，在水浴中加温后即可全溶，不影响使用。 五、作用与用途： 用于检测口蹄疫O型疫苗免疫动物血清抗体效价。 六、用法与判定： 1、用法 1.1加稀释液 在血凝板上1～7排的1～10孔、第8排的1～4孔和第5～7孔；加稀释液50μl/孔。 1.2稀释待检血清 待检血清使用前，需经过56℃水浴灭活30分钟，取待检灭活血清样品50μl，分别加入反应板1～6排的第1孔中，与稀释液混匀后，吸取50μl，加于第2孔中，依次作2倍系列稀释至第10孔，第10孔混匀后取出50μl弃去。 1.3稀释阳性对照血清 在血凝板的第7排第1孔加阳性血清50μl，2倍系列稀释至第10孔，混匀后从该孔取出50μl丢弃。此时被检血清和阳性血清的稀释倍数依次为1:2～1:1024。
猪瘟检测方法
猪瘟检测方法 猪瘟间接血凝试验操作方法 （一）试验材料 1．96孔110~120°V型医用血凝板 2．10~100微升可调微量移液器 3．塑料咀 4．猪瘟间接血凝抗原（猪瘟正向血凝诊断液），每瓶5毫升，可检测血清25~30头份 5．阳性对照血清，每瓶2毫升；阴性对照血清，每瓶2毫升6．稀释液每瓶10毫升 7．待检血清每份0.2~0.5毫升（56℃水浴灭活30分钟） （二）操作步骤 1．检测前，应将冻干诊断液，每瓶加稀释液5毫升浸泡7~10天后方可应用。 2．稀释待检血清：在血凝板上的第1孔~第6孔各加稀释液50微升。吸取待检血清50微升加入第1孔，混匀后从中取出50微升加入第2孔，依此类推直至第6孔混匀后丢弃50微升，从第1孔——第6孔的血清稀释度依次为1：2、1：4、1：8、1：16、1：32、1：64。 3．稀释阴性和阳性对照血清：在血凝板上的第11排第1孔加稀释液60微升，取阴性血清20微升混匀取出30微升丢弃。此孔即为阴性血清对照孔。 在血凝板上的第12排第1孔加稀释液70微升，第2——7孔各加稀释液50微升，取阳性血清10微升加入第1孔混匀，并从中取出50微升加入第2孔混匀后取出50微升加入第3孔……直到第7孔混匀后弃50微升，该孔的阳性血清稀释度为1：512。 4．在血凝板上的第1排第8孔加稀释液50微升，作为稀释液对照孔。 5．判定方法和标准：先观察阴性血清对照孔和稀释液对照孔，红血球应全部沉入孔底，无凝集现象（—）或呈（+）的轻度凝集为合格；阳性血清对照应呈（+++）凝集为合格。 在以上3孔对照合格的前提下，观察待检血清各孔的凝集程度，以呈“++”凝集的待检血清最大稀释度为其血凝效价（血凝价）。血清的血凝价达到1：16为免疫合格。 “-”表示红细胞100%沉于孔底，完全不凝集 “+”表示约有25%的红细胞发生凝集 “++”表示50%红细胞出现凝集 “+++”表示75%红细胞凝集 “++++“表示90—100%红细胞凝集 6．注意事项 （1）勿用90°或130°血凝板，以免误判。 （2）污染严重或溶血严重的血清样品不宜检测。 （3）冻干血凝抗原，必须加稀释液浸泡7~10天，方可使用，否则易发生自凝现象。
生物制品学实验指导
生物制品技术实验指导 生物工程系
目录 实验规则 (2) 实验一、猪瘟、口蹄疫抗体间接血凝实验 (3) 实验二、鸡新城疫灭活疫苗的制备—照蛋及接毒 (4) 实验三、鸡新城疫灭活疫苗的制备—鸡胚收毒及测效价 (5) 实验四、鸡新城疫灭活疫苗的制备—油乳苗的制备 (6) 实验五、氢氧化铝和蜂胶的制备 (7) 实验六、法氏囊炎病高免卵黄抗体的制备 (8) 实验七、法氏囊炎病高免卵黄抗体效价的测定 (9) 实验八、兔瘟灭活苗的制备 (10) 实验九、大肠杆菌自家灭活疫苗的制备 (11) 实验十、动物实验 (12) 实验十一、鸡白痢平板抗原的制备及使用 (15) 实验十二、免疫血清的制备 (16) 实验十二、细菌冷冻真空干燥实验 (18) 1
实验规则 实验中所用材料，多具有传染性（如病原微生物、含病原微生物的血、尿、便、痰、脓汁及感染动物等），在实验过程中，必须严肃认真地进行无菌操作，以保证结果准确，防止实验室感染，防止病原微生物污染环境。必须遵守以下各项。 1、实验前必须预习实验指导书。若经提问发现没有预习者，须在教师指定的时间内预习完毕，方得参加实验。、进实验室不得将书包、衣物等放在实验台上，不必需的物品勿携入室内。 2、实验室内严禁饮食、吸烟及用嘴舔湿铅笔及瓶签，、如发生感染或污染等意外时，应立即报告指导老师，进行紧急处理。 5、保持实验室安静，不得谈笑喧哗，不许搞其他动作，以免影响他人实验。实验进行时不准随意进出。实验室中物品未经许可不准带出室外。 6、清洗仪器、用具、材料时，须将固形物倒入指定容器内，不得直接倒入水槽，以免造成水管堵塞。 7、实验过程中，须按操作规程仔细操作，注意观察试验结果，应及时记录。不得抄写他人的实验实习记录，否则，须重做。如有疑问，应向指导教师询问清楚后方可进行。 8、实验完毕后，须将玻璃仪器、用具等清洗干净，按原来的位置摆设放置，如有破损须报告指导教师，并填写仪器损坏登记簿。关好门窗水电，用消毒液洗手后离去。 10、实验结束后，由值日生负责打扫实验室，保持室内整洁，注意关上水、电、窗、门。 2
猪瘟正向间接血凝试验
猪瘟、口蹄疫间接血凝操作方法 猪瘟、口蹄疫间接血凝操作方法 猪瘟间接血凝操作方法 一、试验材料 1、 6孔110°-120°微量血凝板。 2、 10-100微升可调微量移液器 3、塑料咀 4、猪瘟间接血凝抗原（猪瘟正向血凝诊断液），每瓶5毫升，可检测血清25-30头份。 5、阳性对照血清，每瓶2毫升；阴性对照血清每瓶2毫升 6、稀释液每瓶10毫升 7、待检血清每份0.2-0.5毫升（56℃水浴灭活30分钟） 二、操作步骤 1、检测前，应将冻干诊断液每瓶加稀释液5毫升浸泡7-10天后方可应用。 2、稀释待检血清：在血凝板上的第一孔――第六孔各加稀释液50ul加入第一孔，混匀后从中取出5 0ul加入第二孔，依此类推直至第六孔混匀后丢弃50ul，从第一孔――第六孔的血清稀释度依次为1：2、1： 4、1：8、1：16、1：32、1：64。 3、稀释阴性血清和阳性血清：在血凝板上的第11排第1孔加稀释液60ul，取阴性血清20ul混匀 后取出30ul丢弃。此孔即为阴性血清对照孔。 在血凝板上的第12排第1孔加稀释液70ul，第2孔――第7孔各加稀释液50ul 。吸取阳性血清1 0ul，加入第1孔混匀并从中取出50ul加入第2孔……直到第7孔混匀并丢弃50ul。该孔的阳性血清稀释 度则为1：512。 4、在血凝板上的第1排第8孔加稀释液50ul即为稀释液对照孔。 5、滴加抗原：第1排1－8孔和对照孔各加血凝抗原25ul立即置微量震荡器上震荡1分钟，或用手 摇匀。室温下静置1.5-2小时。 6、判定方法和标准：先观察阴性血清对照好和稀释液对照孔，红血球应全部沉入孔底，无凝集现象 （－）或呈阳性（+）的轻度凝集为合格；阳性血清对照应呈(+++)凝集为合格。
实训十六 间接血凝试验
实训十六间接血凝试验 目的要求初步学会间接血凝的操作及结果判定。 仪器及材料96孔110°～120°V型医用血凝板、10～100μl可调微量移液器、加样头、微型振荡器、猪瘟间接血凝抗原（猪瘟正向血凝诊断液）、猪瘟标准阳性血清和阴性血清、被检血清（56℃水浴灭活30min）、2%兔血清PBS液（取pH7.6、0.01mol/LPBS98ml，灭能兔血清2ml，于4℃冰箱保存即成2%NRS液）。 方法与步骤（以猪瘟的间接血凝为例） 1.按实表8进行操作。 振荡1min 室温下（15℃以上）静置1.5～2h。 2．阴性和阳性对照在血凝板上的第11排第1孔加2%NRS60μl，取阴性血清20μl加入后混匀，取出30μl弃去，然后加入抗原25μl，此孔即为阴性血清对照孔。 在血凝板的第12排第1孔加2%NRS70μl，第2至第7孔各加2%NRS50μl，取阳性血清10μl，加第1孔混匀，并从中取出50μl加入第2孔混匀后取出50μl加入第3孔……直到第7孔混匀后弃去50μl，该孔的阳性血清稀释度为1:512，然后每孔各加抗原25μl，此即为阳性血清对照。 3．判断方法和标准先观察阴性血清对照孔和2%NRS对照孔，红细胞应全部沉入孔底，无凝集现象（—）或呈（＋）的轻度凝集为合格；阳性血清对照应呈（＋＋＋）凝集为合格。 在以上3孔对照合格的前提下，观察待检血清各孔的凝集程度，以呈“＋＋”凝集的被检血清最大稀释度为其血凝效价（血凝价）。血清的血凝价达到1:16为免疫合格。 “++++”表示100%红细胞凝集 “+++”表示75%红细胞凝集 “++”表示50%红细胞凝集 “+”表示25%红细胞凝集 “-”表示红细胞100%沉于孔底，完全不凝集。 1
化验室题
化验室-题
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一、单选题 1. 用瑞氏染色法染色后呈现两极浓染的球杆菌是_。 A．鼻疽杆菌 B.绿脓杆菌 C.巴氏杆菌 D. 炭疽杆菌 答案： C ２．实验室检验马传染性贫血不使用下列＿方法。 A. 病毒中和试验 B．琼脂扩散试验 C. 免疫荧光试验 D.血凝试验 答案: D 3．用结核菌素做变态反应实验检查机体是否感染或带菌的免疫学机理是_。 A. 传染性免疫 Ｂ. 传染性变态反应 Ｃ.传染性免疫与传染性变态反应同时存在 D.传染性带菌 答案： C 4．下列属于凝集试验的是＿。 A．口蹄疫正向间接血凝试验(IHＡ) B. 马传染性贫血琼脂免疫扩散试验（AGIＤ） C.猪瘟荧光抗体试验（FA） D．酶联免疫吸附试验（ＥLIＳＡ） 答案： A ５. 细菌革兰氏染色不同染色特性的原因决定于_。 A．细胞壁 B．细胞膜 Ｃ．细胞质 D.内含物 答案: A 6．病原微生物刺激机体产生抗体可以用_方法检查出来。 A. 血清学 B. 病原学 C. 细菌学 D．寄生虫学 答案： A 7. 利用补体能与＿结合的性质可建立一系列有补体参与的试验。 A. 抗原-抗体复合物 Ｂ. 抗原 C. 抗体 D. 红细胞 答案: A 8. 抗原抗体反应最适温度为＿。
A. 20℃ B． 28℃ C． 37℃ Ｄ. 46℃ 答案: Ｃ 9．参与机体变态反应的免疫球蛋白是_。 A．IｇG Ｂ． IgM C． IgA D．IｇE 答案：Ｄ １0. 鸡新城疫病毒囊膜表面具有红细胞凝集特性的成份是_。 A．血凝素 B. 神经氨酸酶 C. F蛋白 D. M蛋白 答案: A 11. 细菌形体微小,通常借助于_进行观察。 Ａ．放大镜 Ｂ．肉眼 C. 电子显微镜 D．生物光学显微镜 答案: D 12．在无生命培养基上不能生长的微生物是_。 A．细菌 Ｂ. 真菌 Ｃ．病毒 Ｄ．霉形体 答案: Ｃ 1３. 高致病性禽流感样品采集时，咽拭子的保存液为以下_。 Ａ. 每毫升含青霉素和链霉素各2000国际单位的ＰH值为6.8的ＰＢS液 B．每毫升含青霉素和链霉素各200０国际单位的PH值为8.6的P ＢS液 C. 每毫升含青霉素和链霉素各２00０国际单位的PH值为7.0-7．4的PＢＳ液 Ｄ. 每毫升含青霉素和链霉素各2000国际单位的PＨ值为6.８-7.０的PＢＳ液 答案: C 14. 实验室检验左右横膈肌角主要针对_。 A. 囊尾蚴 B. 猪瘟 C. 猪肺疫 Ｄ．旋毛虫
间接血凝试验
间接血凝试验 血凝试验(hemagglutinationtest)是红细胞凝集试验的简称。间接血凝试验是以红细胞作为载体的间接凝集试验，在临床检验中应用广泛，下面简述其操作过程。 间接血凝试验示意图 (一)载体 红细胞是大小均一的载体颗粒，最常用的为绵羊、家兔、鸡的红细胞及O型人红细胞。新鲜红细胞能吸附多糖类抗原，但吸附蛋白质抗原或抗体的能力较差。致敏的新鲜红细胞保存时间短，且易变脆、溶血和污染，只能使用2～3天。为此一般在致敏前先将红细胞醛化，可长期保存而不溶血。常用的醛类有甲醛、戊二醛、丙酮醛等。红细胞经醛化后体积略有增大，两面突起呈圆盘状。 醛化红细胞具有较强的吸附蛋白质抗原或抗体的能力，血凝反应的效果基本上与新鲜红细胞相似。如用两种不同醛类处理效果更佳。也可先用戊二醛，再用鞣酸处理。醛化红细胞能耐60℃加热，并可反复冻融不破碎，在4~C可保存3～6个月，在—20℃可保存1年以上。 (二)致敏 致敏用的抗原或抗体要求纯度高，并保持良好的免疫活性。用蛋白质致敏红细胞的方法有直接法和间接法。直接法只需在低pH，低离子浓度下，用醛化红
细胞直接吸附即可。间接法则需用偶联剂将蛋白质结合到红细胞上。常用偶联剂为双偶氮联苯胺(bidiazotizedbenzidine，BDB)和氯化铬。前者通过共价键，后者通过金属阳离子静电作用使蛋白质与红细胞表面结合而达到致敏的目的。 (三)血凝试验 血凝试验可在微量滴定板或试管中进行，将标本倍比稀释，一般为1：64，同时设不含标本的稀释液为对照孔。在含稀释标本1滴的板孔(或试管)中，加入0．5％致敏红细胞悬液l滴，充分混匀，置室温1～2h，即可观察结果。凡红细胞沉积于孔底，集中呈一圆点的为不凝集(一)。如红细胞凝集，则分布于孔底周围。根据红细胞凝集的程度判断阳性反应的强弱，以+十凝集的孔为滴度终点。 血凝反应强度示意图 间接凝集反应的类型 将可溶性抗原(或抗体)先吸附于适当大小的颗粒性载体的表面，然后与相应抗体(或抗原)作用，在适宜的电解质存在的条件下，出现特异性凝集现象，称间接凝集反应(indirectagglutination)或被动凝集反应(passiveagglutination)。这种反应适用于各种抗体和可溶性抗原的检测，其敏感度高于沉淀反应，因此被广泛应用于临床检验。 根据致敏载体用的是抗原或抗体以及凝集反应的方式，间接凝集反应可分为 (一)正向间接凝集反应
最全的动物疫病实验室检测方法
最全常见疫病实验室检测方法 目录 常见疫病实验室检测方法 (1) 目录 (1) 常见ELISA操作方法 (2) 亚洲1型口蹄疫抗体液相阻断ELISA检测试剂盒 (2) 猪瘟抗原检测试剂盒 (4) 猪瘟病毒抗体阻断ELISA试验 (10) 猪瘟单抗酶联免疫吸附试验 (11) 口蹄疫结构蛋白检测方法（3ABC-I-ELISA） (12) 口蹄疫抗体液相阻断-酶联免疫吸附试验 (14) PRRS抗体间接酶联免疫吸附试验 (17) 犬细小病毒抗体酶免测定试剂盒说明书 (19) 犬瘟热病毒抗体酶免测定试剂盒说明书 (20) 常见PCR操作方法 (22) 猪伪狂犬病毒PCR诊断试剂剂盒 (22) 猪圆环病毒PCR诊断试剂盒 (24) 常见RT-PCR操作方法 (26) 口蹄疫病毒分子检测诊断试剂盒 (26) H5亚型禽流感病毒RT-PCR^测试剂盒说明书（20次） (28) 新城疫病毒RT-PCR检测试剂盒 (30) 猪瘟病毒RT-PCR诊断试剂盒 (32) 凝集、血凝实验操作方法 (34) 弓形虫间接血凝试验（IHA）试剂使用说明书 (34) 伪狂犬病乳胶凝集试验试剂盒 (35) 猪细小病毒病乳胶凝集试验〈1人7〉诊断试剂盒使用说明书 (36) 猪传染性萎缩性鼻炎乳胶凝集试验〈LAT〉操作程序 (37) 猪瘟正向间接血凝试验试剂使用说明书及实验操作程序 (38) 口蹄疫正向间接血凝试验 (40) 高致病性禽流感血凝（HA和血凝抑制（HI）试验程序 (41) 琼脂扩散试验 (43) 鸡马立克氏病 (43) 禽流感琼脂凝胶免疫扩散试验 (45) 荧光抗体检测 (46) 猪瘟荧光抗体试验操作程序 (46) 对狂犬病疑似动物脑组织的直接免疫荧光（dFA）检测 (47) 血清学诊断检测常用试剂配方 (48)
猪瘟
是猪的一种急性接触性传染病，又称猪霍乱。1885年首先在美国发现，以后传播到世界各大洲。中国大部分省都有发生。1903年美国兽医学家德希尼兹和多赛特鉴定本病的病原是披盖病毒科的瘟病毒属(Pestivirus)中的猪瘟病毒。主要通过直接接触，或由于接触污染的媒介物而发病。消化道、鼻腔粘膜和破裂的皮肤均是感染途径。一年四季都可发生，以春夏多雨季节为多。 中文名：猪瘟英文名：swine fever；hog cholera 别名：猪霍乱病原学：猪瘟病毒 季节分布：春秋传染病：是 传播途径：直接接触传播为主要方式潜伏期：5~7天，短的2天，长的21天 临床表现：发病急，高热稽留，细小血管壁变性， 全身广泛性出血点，脾梗死 并发症：非洲猪瘟，猪丹毒 疫苗预防：是预防措施：坚持自繁自养，必须引进种猪时严格做好检疫发病时，严格隔离疫苗防治 猪瘟病猪 是猪的一种急性接触性传染病，又称猪霍乱。1885年首先在美国发现，以后传播到世界各大洲。中国大部分省都有发生。1903年美国兽医学家德希尼兹和多赛特鉴定本病的病原是披盖病毒科的瘟病毒属(Pestivirus)中的猪瘟病毒。主要通过直接接触，或由于接触污染的媒介物而发病。消化道、鼻腔粘膜和破裂的皮肤均是感染途径。一年四季都可发生，以春夏多雨季节为多。 人工接种的猪，一般在36～48小时后体温升高。而自然感染的潜伏期常为3～6天，间有延长到24天的。典型病例表现为最急性、亚急性或慢性病程，死亡率高。最急性型较少见，
病猪体温升高，常无其他症状，1～2天内死亡。急性型最常见，体温可上升到41℃以上，食欲减退或消失，可发生眼结膜炎并有脓性分泌物，鼻腔也常流出脓性粘液，间有呕吐,有时排泄物中带血液,甚至便血。初期耳根、腹部、股内侧的皮肤常有许多点状出血或较大红点。病程一般为1～2周，最后绝大多数死亡。亚急性型常见于本病流行地区，病程可延至2～3周；有的转为慢性，常拖延1～2个月。表现粘膜苍白，眼睑有出血点。皮肤出现紫斑，病猪极度消瘦。死亡以仔猪为多，成年猪有的可以耐过。非典型病猪临诊症状不明显，呈慢性，常见于“架子猪”。 剖检时急性型以出血性病变为主，常见肾皮质和膀胱粘膜中有小点出血；肠系膜淋巴结肿胀，常出现出血性肠炎，以大肠粘膜中的钮扣状溃疡为典型。 根据流行病学、临诊症状和病理变化可作出初诊。实验室诊断手段多采用免疫萤光技术、酶联免疫吸附测定法、血清中和试验、琼脂凝胶沉淀试验等，比较灵敏迅速，且特异性高。中国现推广应用免疫萤光技术和酶联免疫吸附测定法。采用抗猪瘟血清在病初可有一定疗效，此外尚无其他特效药物。中国的猪瘟兔化弱毒疫苗免疫期可达一年以上，已被公认为一种安全性良好、免疫原性优越、遗传性稳定的弱毒疫苗。 本病与非洲猪瘟不同。非洲猪瘟在中国迄今尚未发现潜伏期。 一般为5—7天，根据临床症状可分为最急性、急性、慢性和温和型四种类型。 最急性型 最急性型：病猪常无明显症状，突然死亡，一般出现在初发病地区和流行初期。 急性型 急性型：病猪精神差，发热，体温在40—42℃之间，呈现稽留热，喜卧、弓背、寒颤及行走摇晃。食欲减退或废绝，喜欢饮水，有的发生呕吐。结膜发炎，流脓性分泌物，将上下眼睑粘住，不能张开，鼻流脓性鼻液。初期便秘，干硬的粪球表面附有大量白色的肠粘液，后期腹泻，粪便恶臭，带有粘液或血液，病猪的鼻端、耳后根、腹部及四肢内侧的皮肤及齿龈、唇内、肛门等处粘膜出现针尖状出血点，指压不退色，腹股沟淋巴结肿大。公猪包皮发炎，阴鞘积尿，用手挤压时有恶臭浑浊液体射出。小猪可出现神经症状，表现磨牙、后退、转圈、强直、侧卧及游泳状，甚至昏迷等。
反向间接血凝试验
1、用反向间接血凝试验进行仔猪大肠埃希氏菌病三价（k88,k99,987P）灭活苗的效力检验1.1抗体致敏绵羊红血球：由中国兽医药品监察所提供 1.2方法 将疫苗放－20℃中反复冻融8次。每次融化后充分振荡，使三种纤毛抗原释放于液体中，最后一次融化后经2000r/min离心20分钟，除去菌体和铝胶，得到含有三种抗原的上清液。测定上清液中三种纤毛抗原的RIHA效价。取0.2ml上清液加到装有0.8ml稀释液即1%健康兔血清生理盐水（1%NRS）的小试管中，然后作倍比稀释，既5×、10×、20×……1280×,每批上清液占3排管，分别加等量的0.75%三种纤毛抗原致敏血球。同时设对照管，（1）抗体致敏血球对照：0.1ml 0.75%抗体致敏绵阳红血球+0.1ml 1%健康兔血清生理盐水； （2）血球对照：0.1ml 0.75%健康兔血清致敏红血球+0.1ml 1%健康兔血清生理盐水；（3）抗原对照：0.1ml 1﹕5稀释的上清液+0.1ml 0.75%健康兔血清致敏红血球。 试验术如下表。 各种成分加完后，充分摇匀，置室温90分钟，结果判定：按照红血球在管底的凝集程度，分别计为“++++”、“+++”、“++”、“+”、“±”、“－”。对照管无凝集现象。 “++++”――红血球凝集成坚实的凝块。 “+++”――红血球凝集成平铺管底，边缘卷边或锯齿状。 “++”――红血球凝集成平铺管底，面积比上者大。 “+”――红血球大部分沉于管底，周边有少量凝集。 “±”――红细胞凝集于管底，中间出现空心。 “－”――红细胞沉于管底，周边光滑。 以出现“++”的样品最大稀释度数作为样品的RIHA效价。