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猪伪狂犬病滴鼻免疫的优势

猪伪狂犬病滴鼻免疫的优势
猪伪狂犬病滴鼻免疫的优势

猪伪狂犬病滴鼻免疫的优势

滴鼻免疫有几点独特的优势:

1、滴鼻与不受母源抗体干扰。滴鼻免疫走的是粘膜免疫的路子,母源抗体游离于组织液血浆淋巴液中,粘膜表面不存在抗体,这抗体就中和不掉滴进去的病毒,不会影响疫苗发挥作用。

2、滴鼻可以封锁猪猪感染通路。伪狂犬病毒遵守“病毒占位规则”,即先到病毒入侵的细胞,其他病毒“无权入侵”,出生当天滴鼻,基因缺失苗中的病毒,抢占了仔猪的呼吸道上皮细胞,隔绝了日后的野毒感染。

3、伪狂犬病毒属于疱疹病毒科,众所周知,这类病毒属于双链DNA病毒,不易变异,免疫原性好(非常容易产生抗体)。

4、gE基因缺失苗中的病毒去掉了伪狂犬野毒携带的一把“钥匙(gE)”,一把入侵神经系统细胞的钥匙,不携带这把钥匙的伪狂犬病毒,就不会导致猪猪发病,是“无公害病毒”。

滴鼻免疫在猪场净化伪狂犬野毒方面有着重要的作用。根据《猪病学》上的描述,母源抗体和一般的免疫(肌注)并不能制止野毒的入侵,只能在一定程度上限制野毒的复制。可见,净化野毒的第一步,也是最重要的一步就是制止入侵,而滴鼻免疫是制止入侵的最佳手段。

伪狂犬病主要是通过鼻鼻接触的呼吸道传播的,伪狂犬野毒首先在上呼吸道的上皮细胞内复制增殖,接着入侵扁桃体和肺以及三叉神经,进而散布全身及神经中枢,造成各种病理症状。我在上面提到过,我们滴鼻滴进去的基因缺失病毒可以首先在上皮细胞内“占位”,当野毒入侵时,只能望“伪军”而叹,进不去了。其次,粘膜上皮中的基因缺失病毒被提呈细胞捕获、处理和呈递给T、B细胞,引发免疫应答,产生抗体,抵御野毒。被滴鼻免疫过的仔猪相当于被上了双重保险,第一方面军是妈妈给的母源抗体,第二方面军是畜主给派去的“伪军”,这两个方面军是互相补充,互相增强的,所以,不存在所谓的取谁舍谁,孰优孰劣。

在母源抗体存在的情况下,再实施滴鼻免疫,不仅是预防仔猪典型伪狂犬的问题,更重要的是净化伪狂犬的问题,减少伪狂犬野毒所引起的各种损失。各位朋友,伪狂犬的危害不仅是书上所说的典型症状,除非是在技术极其落后的小养殖户那里能见到典型症状,现在在大多数养殖场内,由于母猪的伪狂犬预防很普遍,典型的伪狂犬神经症状很少见,大部分是由于抗体水平低下及野毒数量多所表现出的非典型症状----母猪返情增多(非流产)、新生仔猪腹泻(非黄白痢及胃肠炎)、肥猪呼吸道症状增多,这些症状往往令养殖户摸不着头脑。而实施滴鼻免疫,可以从根本上解决这些非典型症状,从一定程度上减少所谓的“混合感染”。

曾经有一个200头母猪规模的猪场,一段时间内新生仔猪,甚至从一日龄开始就不停地拉稀,自己按黄白痢治疗怎么也不见成效,脱水死亡了几十头,我去诊断时,蹲在产床边,看小猪的走路姿势,只有个别的有很轻微很轻微的走路异常,问其伪狂犬预防史,畜主说是母猪普防的活苗,我就让其马上给所有仔猪肌注伪狂犬基因缺失苗两头份,第二天就开始好转,第三天大部分就已经痊愈了。以后让这个猪场母猪配种前打一次灭活苗,产前30天打一次灭活苗,仔猪出生当天基因缺失苗滴鼻一头份,2年了,这个猪场不管是仔猪成活率还是母猪繁殖率都很平稳。

由于中国当前引种混乱,检疫、疫病防控形同虚设,养殖户病死猪随意抛售,养殖场隔离措施薄弱等等共同导致了伪狂犬野毒全国横行,所以在政治体制,养殖模式未达到一定水平的当下,遑论举国净化伪狂犬是不合时宜的。我们能做的就是自保,每个有能力的养殖

场先把自己猪场的伪狂犬净化了,不管是对于提高自身的生产效能,还是对于中国这混乱的猪病,都是很有利的。

猪伪狂犬病的症状及治疗方案

详解某猪场猪伪狂犬的病例治疗过程及其预防措施 近几年来,伪狂犬发病已无明显季节性,发病率升高,已成为除蓝耳病以外危害母猪繁殖性能的第二大传染病。该病引起母猪繁殖障碍易被临床诊断忽略,延误治疗,严重影响猪场的经济效益。因此,做好伪狂犬病的诊断与防治对提高猪场母猪生产性能和仔猪成活率来说意义重大。现兽医师根据其临床病例和查阅诸多资料后整理出以下关于猪伪狂犬病的诊断要点和防治措施,希望能为广大养殖户提供参考。 1. 临床诊断要点: 母猪:临床症状不明显。主要引起引起母猪顽固性不发情,母猪流产。伪狂犬病引起的流产在母猪妊娠各期均会发生,但以妊娠前期和妊娠中期最易发,且多为木乃伊胎和死胎。 仔猪:主要危害3-7日龄新生仔猪,可谓“九死一生”。病猪多呈现出体温升高,出现神经症状,如头后仰、口吐沫、四肢泳动。四肢软而无力,多见于后肢,眼睑肿大,拉黄色稀粪(用抗生素类药物无效)。 保育猪:少数发生,死亡率低。主要表现的神经症状,猪歪头。 2. 剖检病变: 发病仔猪的解剖病理变化有:肝、脾出现黄白色针尖大小的坏死点;脑膜出血;肾脏点状出血;扁桃体出血坏死。注意和猪瘟的鉴别诊断:猪瘟表现为新生仔猪肾脏不仅有点状出血,且肾脏凹凸不平;扁桃体大面积的出血坏死。 3 治疗与预防: 根据新联大实施的猪场伪狂犬净化系统方案,结合临床实际应用效果开出以下治疗和预防方案: (1) 2000斤饲料添加: 倍能佳或食达旺 1袋 氟奇康泰 2袋 替妙 6袋连用7天 清热散 1袋 <联毒克 3袋如果采食量下降请酌情添加,如有病毒感染请添加> (2) 使用疫苗对伪狂犬病进行防控: 免疫接种:

●后备猪应在配种前实施至少2次伪狂犬疫苗的免疫接种,2次均可使用基因 缺失弱毒苗。 ●经产母猪应根据本场感染程度在怀孕后期(产前20-40天或配种后75-95天) 实行1-2次免疫。母猪免疫使用灭活苗或基因缺失弱毒苗均可,2次免疫中至少有1次使用基因缺失弱毒苗,产前20-40天实行2次免疫的妊娠母猪,第一次使用基因缺失弱毒苗,第二次使用蜂胶灭活苗较为稳妥。 ●哺乳仔猪免疫根据本场猪群感染情况而定。本场未发生过或周围也未发生过 伪狂犬疫情的猪群,可在30天以后免疫1头份灭活苗;若本场或周围发生过疫情的猪群应在19日龄或23-25日龄接种基因缺失弱毒苗1头份;频繁发生的猪群应在仔猪3日龄用基因缺失弱毒苗滴鼻。 ●疫区或疫情严重的猪场:保育和育肥猪群应在首免3周后加强免疫1次。

猪伪狂犬病的预防与用药

猪伪狂犬病的预防与用药 -----本文由深圳安多福整理 最近,河南的一养殖户,使用成都天邦的疫苗,却死了3000多头母猪。是成都天邦的伪狂犬疫苗有问题,还是母猪已经感染了强毒或是母猪在注射后被蓝耳病和其他病致死的?相信不久,真相就会揭晓。 那么猪伪狂犬是怎么样的一种病,发病有哪些症状,怎么样去预防和治疗呢? (一)综述 猪伪狂犬病是由伪狂犬病毒引起家畜和野生动物的一种急性传染病。特征为成年猪呈隐性感染或有上呼吸道卡他性症状;妊娠母猪发生流产死胎;哺乳仔猪出现脑脊髓炎(神经症状)和败血症状(发热),最后死亡。没有明显的季节性,但以寒冷的冬季发病较多。 本病主要通过与病猪和带毒猪接触,经呼吸道、消化道、损伤的皮肤感染,也可通过配种、哺乳感染,妊娠母猪感染后,可感染胎儿。(二)症状 本病潜伏期3~11天。临床症状随猪年龄不同而有很大差异。妊娠母猪常发生流产,产出的弱胎通常在3~4天死亡,流产率可达50%;适龄母猪表现为不育症,返情率高,但屡配不孕。成年猪一般为隐性感染,即使有症状也是轻微的,只表现为一般性发热,精神沉郁,有的有呕吐、咳嗽、一般4~8天恢复;可引起新生仔猪大量死

亡,主要表现为刚生下的仔猪第一天无异常,常从第二天开始发病,3~5天内达到死亡高峰,表现明显的神经症状,病猪昏睡、鸣叫、呕吐、拉稀、流涎、发抖、痉挛,有时不自主地前冲、后退或转圈运动;随着病情的发展,发现四肢麻痹,倒地侧卧,头向后仰,四肢乱动或划水样运动,最后昏迷死亡;可引起断奶仔猪发病死亡,发病率在20%~40%,死亡率在40%~60%,主要症状表现为神经症状,拉稀,呕吐等。 (三)病理变化 剖检主要表现为脑膜充血,水肿、出血,脑脊液增多,淋巴结肿大,胃肠黏膜可见卡他性炎症,胃底部有明显出血区,上呼吸道黏膜及扁桃体出血,水肿,并有纤维素性坏死性伪膜覆盖。有的肾脏布满针尖样出血点,有的出现肺水肿。肝肾有特征性坏死灶,中央灰白色,外周有红色晕圈,具有诊断意义。流产胎儿的肝、脾及胎盘绒毛膜有凝固性坏死。 (四)防治 1、种猪每6个月背颈皮下注射伪狂犬病基因缺失油佐剂苗3毫升,母猪在产前1个月左右加强免疫一次;种用仔猪28~35日龄注射一次1.5毫升,4~6周重复注射一次,育肥仔猪30日龄注射1.5毫升。 2、严格执行消毒措施。猪舍地面、墙壁、设施及用具等每周定期消毒1次,粪便放发酵地或沼气池处理。发生疫情时则2~3天消毒1次,消毒液可用安多福万金水按1:500稀释。

详解猪伪狂犬的病理过程及其防治

详解猪伪狂犬的病理过程及其防治 核心提示:本文详细阐述猪伪狂犬病的临床表现、发病过程及诊断要点。 猪伪狂犬病病(PPV)是由疱疹病毒属的伪狂犬病毒引起的疾病。在猪群中该病毒能够通过妊娠从上一代传递到下一代的垂直传播,还能够通过猪只之间互相接吻以及蚊蝇叮咬而水平传播,属于乙型传播疫病。主要经呼吸道传播,病毒感染后首先在鼻咽部、扁桃体中增殖,再经神经侵袭脑、脊髓的同时,也可由鼻腔粘膜经呼吸道侵入肺泡。这是临床初生仔猪无其他明显症状,但若发生抽搐后迅速死亡的主要原因。 一、临床表现 感染早期体重25kg以上的商品猪,病毒侵袭导致猪的肝脏的胆汁分泌机能亢进,突然增多的大量胆汁刺激十二指肠和幽门壶腹部,病猪表现胃肠痉挛和粪便发黑,阵发性腹痛,频频排粪,采食量下降;体温39-41℃。进入4-10天的感染中期,由于十二指肠和幽门壶腹的持续痉挛,幽门突红肿,溃疡,形成胆汁排泄障碍和向胃部的逆流;同时,由于持续增值的病毒对外周淋巴的侵袭引起的全身发热,水排泄的增强,继发胆汁粘稠,胆囊内壁充血、出血和胆囊壁增厚等炎症变化。与此同时,大量胆汁进入胃部,打破胃内容物的酸碱平衡,使pH值上升,直接引发病猪发生呕吐。pH值偏高的胃液长时间的浸润,一方面使得胃神经反射机能麻痹,呕吐很快停止,病猪出现采食量下降,这是饲养密度过大或观察不及时,个体发病后不易被发现的主要原因;另一方面,贴近胃壁的高pH值胃液直接损伤胃底粘膜,引起胃底充血、出血和穿孔、胃痛,形成病猪有食欲,但采食量下降或呈间断性采食(即添加饲料时猪反映明显,但采食数口后停顿下来,稍后继续采食,并再次发生采食停顿)、粪便发黑的现象。到了10-15天(部分单一性病例可达20天)的感染中后期,由于胃底损伤严重,病猪采食量下降至正常采食量的1/5-1/8,甚至

猪伪狂犬病的流行现状及防控措施

猪伪狂犬病的流行现状及防控措施 伪狂犬病(pseudorabies,pr又名aujeszky's disease,ad)是当前我国猪场最常见的传染病之一,给养猪业造成严重的经济损失。伪狂犬病是由猪疱疹病毒i型所引起的猪、牛、羊等多种家畜、家禽和野生动物的一种以发热、奇痒(猪外除)及脑脊髓炎为主症的一种急性传染病。本病是典型的自然免疫性疾病,猪是该病最主要的储存宿主和传染源。据报道,全世界已有40多个国家和地区发生过该病的流行。 由于伪狂犬病疫苗成熟及其病原本省的特点,曾经许多养猪企业都将猪伪狂犬病的净化列入了短期目标,并实现了这个目标。但2011年以来,猪群的无序流动以及疫苗等多方面的原因,猪场伪狂犬病野毒感染率逐年升高。全国相当部分的阴性猪场一夜之间转阳,严重的甚至出现母猪流产、仔猪神经症状并死亡等典型伪狂犬症状,持续数月不能恢复。本文就伪狂犬病在猪场中的流行现状及防控措施进行简要论述。 1 伪狂犬病的流行情况 1.1 2011年前的流行情况 2011年之前全国不同区域都有伪狂犬病的发生,但是主要以散养户和小型养殖场发病为主,主要原因可能是发病猪场伪狂犬免疫不规范、引种来源复杂等。 1.2 2011年至今的流行发病情况 2011年至今伪狂犬的流行区域不断扩大,暴发不再局限于散养户和小型养殖场,大型养殖场也有发生,且表现典型的临床病症。 1.3临床表现 一是母猪流产,母猪群因为狂犬病流产的比例大约为5%。 二是10日龄内死哺乳仔猪淘率高,达15%或更高,主要表现毛松打堆,高烧,部分猪死亡前有神经症状。而初生3~4 d的仔猪,有时整窝死亡,损失很大。 三是中大猪呼吸道问题严重,临床表现为咳嗽、喘气等。常见并发传染性胸膜肺炎,导致急性死亡。 1.4 共同的病变特征 通过剖检发现,他们共同的病变特征就是扁桃体的白色坏死点。伪狂犬是疱疹病毒,疱疹病毒的特点就是对组织细胞的致死性,它引起的病变主要是脏器(扁桃体、肝、脾、肾等)的白色坏死点为主。 2 伪狂犬流行原因的探讨 2.1 毒力变异 首先免疫原性基因和独立基因的变化,使原有疫苗免疫保护力下降,其次疫苗保护时间缩短,长期超剂量免疫,免疫频繁,免疫压力造成毒株变异。 2.2 腹泻可能是伪狂犬病重新流行的原因之一 首先,腹泻导致整个猪群的免疫抑制,影响了伪狂犬疫苗的正常免疫效果,使其免疫保护周期变短,容易出现免疫空白期。其次,很多猪场因为腹泻做返饲或自家苗,如果过程处理不当,极易导致伪狂犬病毒扩散。 2.3 免疫不合理及疫病关注点下降 有两种常见的情况:一是不停的更换不同毒株的疫苗;二是不免疫仔猪和肉猪,只免疫母猪。这都是免疫不科学、免疫意识松懈、免疫程序不合理所导致的。 2.4猪场中猪群带毒 种猪带毒率偏高是伪狂犬病持续流行的重要原因。引用公猪精液、相互引种,都会传播本病。 3 伪狂犬病的总体防控措施 3.1坚持自繁自养

猪伪狂犬病的防治

猪伪狂犬病的防治 猪伪狂犬病是由伪狂犬病病毒引起的一种以发热、脑脊髓炎为主要症状的急性、热性传染病。该病一旦在猪群中出现,会很快经呼吸道、消化道传染给其它猪只和临近猪场,特别是在集约化养猪场。本病主要引起种猪不育、妊娠母猪流产,产死胎或胎儿干尸化,初生仔猪和断奶仔猪大量死亡,育肥猪增重缓慢,该病已成为危害养猪业最严重的传染病之一。 一、病原 伪狂犬病病毒属于疱疹病毒科疱疹病毒亚科的猪疱疹病毒I型,可感染家畜和多种野生动物,除猪以外的其它动物发病后通常呈现发热、奇痒及脑脊髓炎等典型症状,致死率极高。二、传播途径和流行特点 传染源猪是伪狂犬病病毒的贮存宿主和传染源,病猪和带毒猪是本病的传染源。带毒鼠类、猫、狗也是重要传播媒介。病毒主要随病猪的分泌物(鼻汁、唾液、尿和乳汁等)排出,污染饲料、饮水、垫草及栅栏等周围环境,或通过精液而传给健康猪。另外,病毒常存在于胴体中,易通过肉食动物传播。 传播途径健康猪与病猪或带毒猪,均能通过直接或间接接触发生感染,引起带毒种猪疫情扩散蔓延是传播本病的主要原因。空气传播是病毒扩散的最主要途径。其他易感动物主要由吃食病畜尸体及病畜污染的饲料经消化道感染。本病还可以经呼吸道黏膜、皮肤伤口以及配种等而发生感染。 易感动物除猪外,牛、羊、马、犬、猫等多种动物以及许多野生动物外,肉食动物和野生啮齿类动物也易感 流行特点本病无明显季节性,一年四季均可以发病,多发生在寒冷季节。2周龄内仔猪发病率和死亡率几乎达到100%,成年猪和母猪常常继发细菌或病毒感染,加重病程,增加死亡率。 三、症状 本病潜伏期3~11天。临床症状随猪年龄不同而有很大差异。妊娠母猪常发生流产,产出的弱胎通常在3~4天死亡,流产率可达50%;适龄母猪表现为不育症,返情率高,但屡配不孕。成年猪一般为隐性感染,即使有症状也是轻微的,只表现为一般性发热,精神沉郁,有的有呕吐、咳嗽、一般4~8天恢复;可引起新生仔猪大量死亡,主要表现为刚生下的仔猪第一天无异常,常从第二天开始发病,3~5天内达到死亡高峰,表现明显的神经症状,

猪伪狂犬病病毒基因序列分析

猪伪狂犬病病毒主要功能蛋白基因序列分析 摘要:根据Genbank中已发表的猪伪狂犬病病毒(PRV)gE、TK基因的序列各设计了1对引物,对分离得到的PRV毒株的gE、gG、TK基因进行了PCR扩增、回收、克隆、测序,测序结果与预期的PRV gE、gG、TK基因片段相符。遗传进化树分析和氨基酸序列比对结果发现PRV毒株的gE、gG、TK氨基酸序列发生变化的位点与2012年国内分离到的PRV 流行株相同,从而推测该毒株为PRV变异毒株。 关键词:伪狂犬病毒;gE基因;TK基因;序列分析 猪伪狂犬(Pseudorabies,PR)是由伪狂犬病毒(Peudorabies virus,PRV)引起的以家畜和多种野生动物发热、奇痒及脑脊髓炎为特征的急性传染病[1]。该病在我国发生较为严重,是严重危害我国养猪业的疫病之一。我国目前广泛应用的是自然缺失弱毒活疫苗Bartha-k61株,使猪伪狂犬病得到了很好的控制。但是,2011年底至2012年该病在中国东北部分省份流行,甚至在许多使用基因缺失活疫苗免疫的规模化猪场出现了猪伪狂犬病疫情,给中国的养猪业造成了巨大的经济损失[2-6]。 伪狂犬病病毒(猪疱疹病毒1型)属于双股线性DNA病毒,大小约150kb,DNA基因组中G+C的含量高达73%,可编码100种蛋白质。基因组由独特的长节段(UL)、独特的短节段(US)、内部倒转重复序列(IRs)和末端倒转重复序列(TRs)组成。在病毒的结构蛋白中,gE糖蛋白是主要毒力因子之一,并作为标志基因用来区分疫苗免疫和野毒感染。TK基因不仅是最主要的毒力基因,而且也是决定病毒持续感染的重要因素[7]。一旦TK基因缺失,PRV变异株对宿主的毒力将丧失或明显降低。 2013年至2014年上海市农业科学院畜牧兽医研究所繁殖障碍研究室从山西某免疫猪伪狂犬病(Bartha)疫苗的规模化猪场成功分离并鉴定出四株PRV,命名为SX1,SX2,SX3,SX4株,为明确该四株分离株是否属于PRV抗原变异毒株,本研究对PRV SX株的gE、gG、TK全基因进行克隆和测序,通过与国内外其他已公布PRV分离株的gE、gG、TK推导的氨基酸序列进行比对,构建核苷酸序列遗传进化树,以期为丰富PRV分子流行病学和开发科学有效的新型猪伪狂犬病疫苗提供重要科学依据。

猪伪狂犬病的治疗方法与防治要点

猪伪狂犬病的治疗方法与防治要点 猪是本病毒最重要的贮存宿主和传染来源,猪感染后的症状因日龄而异,种猪主要表现为繁殖障碍,并且对养猪业的损失最大。下面我们了解一下猪伪狂犬病的治疗方法与诊断要点。 猪伪狂犬病的诊断 (1)初步诊断:新生仔猪及4周龄内仔猪常突然发病,高烧达41℃以上,间有呕吐、腹泻及神经症状,出现运动失调,兴奋不安,身体各部分肌肉痉挛,随后麻痹死亡,病程1-2天,死亡率很高。4周龄左右的猪发病后只有轻微症状,有轻热、呼吸困难,时有出现腹泻和呕吐,几天内可完全康复,但也有部分猪出现神经症状后死亡。妊娠母猪常发生流产、死胎或木乃伊胎,流产发生率约占50%。成年猪一般隐性感染,有时有轻度呼吸系统症状,不吃、呕吐、委顿等。由于猪的病症复杂,若出现以上症状怀疑是伪狂犬病时,应进一步进行实验室诊断。 (2)实验室诊断:采用猪扁桃体、咽喉黏膜、脑、延脑、小脑和海马角等,检查细胞中有无核内包涵体。将病料接种家兔,2-3天后注射的局部出现奇痒及全身症状,常在奇痒出现后1-2天转为麻痹而死亡。 (3)血清学诊断:可用直接免疫荧光法检查脑、扁桃体的压片或冰冻切片,发现核内包涵体出现荧光,有诊断价值。检查血清抗体可采用中和试验、间接血凝抑制试验、琼脂扩散试验、补体结合试验、酶联免疫吸附试验等,其中血清中和试验较为敏感、准确。

猪伪狂犬病的治疗方法 本病目前无特效治疗药物,对感染发病猪可注射猪伪狂犬病高免血清,对断奶仔猪有明显效果,同时应用黄芪多糖中药制剂配合治疗。发病后对猪舍立即采取封锁、隔离、严格消毒等措施,同时对受威胁猪进行紧急免疫接种。 猪伪狂犬病的预防要点 (1)主要采取综合性防治措施,鉴于猪是本病毒的重要保存者,引进种猪时应注意在当地做好认真的检疫工作,进入猪场前要隔离观察,防止带人病源。 (2)消火饲养场的鼠类对本病的预防有重要意义。 (3)发生本病的猪场,应将病猪隔离扑杀,对场内的易感猪进行紧急预防接种,畜舍及用具每隔5-6天消毒一次,做好粪便的发酵处理工作。 (4)免疫预防是防治本病的主要手段,目前可用于猪伪狂犬病预防的疫苗有3种,灭活苗效果好一些。 (5)在母猪临产前20-30天,免疫母猪后可提高小猪母源抗体水平,使小猪母源抗体持续时间较长,但也可干扰小猪对直接免疫产生免疫抗体。免疫本病的重点加强对小猪的免疫。 (6)免疫程序,使用弱毒苗或灭活苗免疫,一般小猪6-14周龄首免,4-6周后二免,免疫力期可达5-6个月。 (7)对发病严重的猪,因本病没有特效药,只能采取针对性对症治疗,防止继发感染的治疗方法。

猪伪狂犬病的诊治(一)

猪伪狂犬病的诊治(一) 作者:陈太义张振军王洪金 摘要介绍了猪伪狂犬病的病原、流行病学、临床症状、剖解症状及鉴别诊断等,提出了预防与治疗措施,以期为猪伪狂犬病的防治提供参考。 关键词猪伪狂犬病;病原;流行病学;临床症状;治疗措施 伪狂犬病又名狂痒病,是由伪狂犬病毒引起的猪和其他动物共患的一种急性传染病1]。其特征为发热,脑脊髓炎的症状,但是成年猪常为隐性感染,有流产、死胎和呼吸症状;新生仔猪除有神经症状外还可侵害消化系统。 1病原 伪狂犬病病毒属于疱疹病毒科,疱疹病毒亚科。病毒完整粒子呈圆形,直径为150~180nm,核衣壳直径为105~110nm,有囊膜和纤突。基因组为线状双股DNA。病毒能在鸡胚及多种动物细胞培养上生长繁殖,当它适应鸡胚后容易连续继代。病毒常存在于脑脊髓组织中。病猪发病期间,其鼻液、唾液、奶液、阴道分泌物以及血液、实质器官中都含有病毒。病毒对外界抵抗力较强,在污染的猪舍能存活30d以上,在肉中可存活35d以上。一般常用的消毒药都有效,如2%氢氧化钠溶液或0.1%升汞能立即杀死病毒。 2流行病学 本病自然发生于猪、牛、绵羊等各种动物。一年四季均可发生,但以春季和产仔旺季多发。病猪和带毒猪及鼠类是本病的重要传染源。健康猪与病猪、带毒猪直接接触可感染本病。病毒由鼻分泌物、唾液、乳汁、尿中排出。马有较强的抵抗力,人也偶尔感染。易感动物可经呼吸道、破溃的皮肤和配种及病畜污染的饲料而感染。 3临床症状 潜伏期一般为3~6d,短者36h,长达10d。猪的临诊表现随着年龄不同而有很大差异,但是均无明显的局部瘙痒现象。新生仔猪及4周龄内仔猪感染后可出现大批死亡,特别是1周龄内仔猪的发病率、死亡率几乎可达100%。发病突然,高热、不食沉郁、呕吐或腹泻、鸣叫、兴奋不安,共济失调呈癫痫样抽搐,后躯麻痹,转圈,角弓反张等神经症状。4周龄至4月龄仔猪多表现为咳嗽、流鼻液、呼吸困难,有时出现腹泻,部分有神经症状。育肥猪主要症状为高热、厌食和呼吸困难,偶尔有中枢神经症状。呼吸道可持续28d左右。成年猪一般呈隐性感染。妊娠母猪表现为流产、产死胎和木乃伊胎,以死胎为主,产出的弱胎多在2~5d内死亡。流产的胎儿体形大小一致。新疫区可以造成60%~90%的怀孕母猪流产和死胎,且主要发生于流产前的母猪。 4剖解症状 鼻腔出血性或化脓性炎症,扁桃体、喉头水肿,咽炎,勺状软骨和会厌软骨皱壁呈浆液浸润,并常有纤维素性坏死膜覆盖2]。肺水肿,上呼吸道有大量泡沫性液,喉黏膜点状或斑状出血。肾点状出血性炎症。胃底大面积出血,小肠黏膜充血,水肿,大肠有斑块状出血。淋巴结特别是肠系膜淋巴结和下颌淋巴结充血肿大,间有出血。脑膜充血、水肿。病程较长者,心包液、胸腹液、脑脊髓液均明显增多。肝表面有大量纤维素渗出。母猪流产,产死胎和木乃伊胎。新生仔猪神经症状,转圈。仔猪死亡前游泳状,尖叫,口吐白沫。

怎么治疗猪伪狂犬病

怎么治疗猪伪狂犬病 病猪的年龄不同,其临床症状也有差异。一般呈地方流行性发生,多发生于冬、春两季。临床症状: 新生仔猪感染伪狂犬病毒会引起大量死亡,临诊上新生仔猪第1天表现正常,从第2 天开始发病,3~5天内是死亡高峰期,有的整窝整窝死光。同时,发病仔猪表现出明显的神经症状、昏睡、呜叫、呕吐、拉稀,一旦发病,1~2日内死亡。仔猪突然发病,体温上升达41℃以上,精神极度委顿,发抖,运动不协调,痉挛,呕吐,腹泻,极少康复。 断奶仔猪感染伪狂犬病毒,发病率在20%~40%左右,死亡率在10%~20%左右,主要表现为神经症状、拉稀、呕吐等。成年猪一般为隐性感染,若有症状也很轻微,易于恢复。主要表现为发热、精神沉郁,有些病猪呕吐、咳嗽,一般于4~8天内完全恢复。 怀孕母猪可发生流产、产木乃伊胎儿或死胎,其中以死胎为主无论是头胎母猪还是经产母猪都发病,而且没有严格的季节性,但以寒冷季节即冬末春初多发。据近年来的报道,奇痒症状以往在猪罕见,但目前则常可见到。 伪狂犬病的另一发病特点是表现为种猪不育症。母猪配不上种,返情率高达90%,有反复配种数次都屡配不上的。此外,公猪感染伪狂犬病毒后,表现出睾丸肿胀、萎缩,丧失种用能力。 防治措施: 紧急情况下,用高免血清治疗,可降低死亡率。消灭牧场中的鼠类,对预防本病有重要意义。同时,还要严格控制犬、猫、鸟类和其他禽类进入猪场,严格控制人员来往,并做好消毒工作及血清学监测等,这样对本病的防制也可起到积极的推动作用。此外,对猪群采血做血清中和试验,阳性者隔离,以后淘汰。以3~4周为间隔反复进行,一直到两次试验全部阴性为止。另外一种方式是培育健康猪,母猪产仔断乳后,尽快分开,隔离饲养,每窝小猪均须与其他窝小猪隔离饲养。 治疗方案: 蓝圆风暴+刀豆素一针见效,两针治愈,三针巩固。每套用于治疗200斤体重,预防剂量减半。

猪伪狂犬病的防控措施

猪伪狂犬病的防控措施 从卫生防疫、PR检疫、PR免疫、生产管理、猪场建设、药物使用等方面制定了“PR 防控措施”。提出:建立健全猪场的生物安全性体系;对不同类型的猪场、不同类型猪定期按比例检疫,引种实行PR检疫隔离;规范PR的免疫制度。当PR阳性率高于10%时,实行密集免疫策略;当PR阳性率少于10%时,实行检疫掏汰策略。落实各项生产管理制度,科学用药,采取综合防控措施。 1 PR的防控措施 1.1 PR防控的总则 1.1.1建立健全猪场的生物安全性体系。做好猪只、人员、栏舍、车辆、环境的卫生消毒工作,建立健康的种群,加强兽医管理,改善猪只生长环境,保证营养充足。 1.1.2强化PR检疫隔离制度。不同类型的猪场根据不同类型的猪,定期按比例抽血检测PR 野毒抗体。引种必须经过隔离检疫。 1.1.3规范PR的免疫制度。当PR阳性率高于10%时,实行密集免疫策略;当PR阳性率少于10%时,实行检疫一淘汰策略。 1.1.4落实各项生产管理制度,采取综合防控措施。 1.1.5科学用药,减少猪群的混合感染、继发感染,降低并发症。 1.2 PR防控的具体措施 1.2.1卫生防疫制度 要求猪场所有工作人员在思想上树立起卫生防疫的观念,把卫生防疫工作放在首要位置,自觉地在生产各个环节认真贯彻执行该制度的各项条例。此项工作由猪场兽医负责执行并检查监督,实施绩效与相关工作人员的酬劳挂钩。 1.2.1.1车辆、人员进出场的消毒制度。猪场大门消毒池、更衣室设消毒池、各猪舍出入门口消毒池,要经常保持有消毒液,每个星期更换一次,换药要有记录,并有专人检查。所有进出车辆一律清洗消毒,进出人员脚踏消毒。 1.2.1.2猪场人员净化制度。在猪场生产区工作的人员,凡休假后上班的前3天为净化期,不能进入猪场生产区,安排在非生产区从事其它工作,满3天后才能消毒进入生产区。 1.2.1.3进入猪场生产区的消毒更衣制度。饲养员、饲料运送员、管理人员,进入生产区前一律要在更衣室淋浴、更换消毒过的衣帽、胶鞋,清洗消毒双手,任何人不得违反,被批准进入生产区的外来人员需要在非生产区净化3天,才能消毒进入生产区。 1.2.1.4猪舍猪体的卫生消毒制度。猪舍地面及渠道每天清扫冲洗2次,天花板不能有蜘蛛网,猪舍周围环境每周清理一次,饲料间每用完一批饲料清理一次。夏天每天冲洗猪身1~2次,每月用复合酚消毒猪身一次(哺乳及妊娠后期的母猪除外)。栏舍每周消毒1~2次,栏舍周围环境每月用生石灰消毒1次。每次消毒都要有记录。 1.2.1.5母猪分娩的卫生及护理制度。密切注意观察母猪的分娩时间,做好接产前的准备工作,接产的工具和器械要经消毒,整个分娩过程要有专人护理。仔猪产后24个小时内一律剪脐、剪牙,并用碘酒消毒。仔猪产后3天内注射含铁补血剂,并编耳号。分娩过程中的胎衣及排泄物及时清理,作无害化外理。 1.2.1.6引种隔离制度。从非疫区引进的种猪实行隔离饲养,观察45天,经检疫合格才准进入生产区,隔离期间负责的专人不准进入生产区。 1.2.1.7疫情紧急应对制度。发现疫情要按“早、快、严、小”的原则、及时扑杀发病猪,对死猪进行无害化处理;在场内建立隔离区,暂时封锁,严格消毒,积极治疗,并有专人负责;对易感猪群紧预防接种;确认最后一头病猪痊愈或不存在后,经14天观察不再出现新病猪时,经彻底消毒,才能解除封锁,隔离区三个月内不准猪只出场。

猪伪狂犬病的诊断鉴别

猪伪狂犬病的诊断鉴别 根据疾病的临诊症状,结合流行病学,可做出初步诊断,确诊必须进行实验室检查。同时要注意与猪细小病毒、流行性乙型脑炎病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪瘟病毒、弓形虫及布鲁氏菌等引起的母猪繁殖障碍相区别。 分离 病毒分离鉴定病毒的分离是诊断伪狂犬病的可靠方法。患病动物的多种病料组织如脑、心、肝、脾、肺、肾、扁桃体等均可用于病毒的分离,但以脑组织和扁桃体最为理想,另外,鼻咽分泌物也可用于病毒的分离。病料处理后可直接接种敏感细胞,如猪肾传代细胞(pk一l5和ibrs一2)、仓鼠肾传代细胞(bhk一2l)或鸡胚成纤维细胞(cef),在接种后24~72小时内可出现典型的细胞病变。若初次接种无细胞病变,可盲传3代。不具备细胞培养条件时,可将处理的病料接种家兔或小鼠,根据家兔或小鼠的临诊表现做出判定,但小鼠不如家兔敏感。分离到病毒后再用标准阳性血清做中和试验以确诊本病。 切片 组织切片荧光抗体检测取患病动物的病料如脑或扁桃体的压片或冰冻切片,用直接免疫荧光检查。其优点是快速,在几小时内即可获得可靠结果,对于新生仔猪,其敏感性与病毒分离相当,但对于育肥猪与成年猪,该法则不如病毒分离敏感。 pcr

pcr检测猪伪狂犬病病毒利用pcr可从患病动物的分泌物如鼻咽拭子或组织病料中扩增猪伪狂犬病病毒的基因,从而对患病动物进行确诊。pcr与病毒分离鉴定相比,具有快速、敏感、特异性强等优点,能同时检测大批量的样品,并且能进行活体检测,适合于临诊诊断。 血清学 血清学诊断多种血清学方法可用于伪狂犬病的诊断,应用最广泛的有中和试验、酶联免疫吸附试验、乳胶凝集试验、补体结合试验及间接免疫荧光等。其中血清中和试验的特异性、敏感性都是最好的,并且被世界动物卫生组织(oie)列为法定的诊断方法。但由于中和试验的技术条件要求高、时间长,所以主要是用于实验室研究。酶联免疫吸附试验同样具有特异性强、敏感性高的特点,3~4h内可得出试验结果,并可同时检测大批量样品,广泛用于伪狂犬病的临诊诊断。另外,近几年来,乳胶凝集试验以其独特的优点也在临诊上广泛应用,操作极其简便,几分钟之内便可得出试验结果。 鉴别 鉴别诊断猪伪狂犬病病毒鉴别诊断方法是在使用基因标志疫苗的基础上应用的-类诊断方法。由于prv中存在多个非必需糖蛋白基因,缺失这些基因的病毒突变株不能产生被缺失基因所编码的糖蛋白,但又不影响病毒在细胞上的增殖与免疫原性。将这种基因缺失标志疫苗注射动物后,动物不能产生针对缺失蛋白的抗体。因此,可通过血清学方法将自然感染野毒的血清学阳性猪与注苗猪区分开来。目前,缺失疫苗缺失的糖蛋白基因主要为ge和gg基因,也有缺失gc、gb基

猪伪狂犬病的防制

猪伪狂犬病的防制 摘要:介绍了几例猪伪狂犬病防制的病例,以 供参 考。 关键词:猪伪狂犬病;防制 中图分类号: S858.3 文献标识码: B 文章编 1007-273X (2014)02-0049-02 猪伪狂犬病是由猪伪狂犬病毒(PRV )引起仔猪 脑脊膜 炎、败血症、母猪流产、产死胎和木乃伊胎等 症状的一种传 染病。近年来,有效的疫苗免疫极大地 减少了典型的伪狂犬 病临床症状,但是国内猪群的野 毒阳性率仍然很高,在免疫 失败(如疫苗质量差、免 疫程序不合理、操作不规范及其它 免疫抑制因素等) 、 饲养管理不好,带毒猪会排毒引起新的 传染,导致伪 狂犬病流行。笔者 2013年接诊了 2例猪伪狂 犬病,现 将情况报告如下。 1 病例 1 1.1 基本情况 该户饲养有母猪 80 余头,从事养猪 8 年,场地建 在远离村庄、 进行伪狂犬疫苗免疫。 1.2 临床 症状 口, 号: 面环山的山坡上,防疫条件较好。

2013年7月初,部分母猪在配种后65?75 d发生流产,产死胎、木乃伊胎,半月内先后出现10来头,且母猪配种返情率高;之后产房小猪出现精神倦怠,发烧(41?42 C),庆食,不吃奶,口吐白沫,呼吸困难,共济失调,四肢抽搐,出生15 内仔猪死亡率100%,一月内损失哺乳期仔猪180余头。 1.3现场剖检见扁桃体有白色坏死点,肝脏和脾脏有疱 疹样黄 白色坏死点;肺表面有坏死点,脑膜充血。 1.4诊断结合免疫情况、临床症状、病理剖检变化,初 步 诊断为猪伪狂犬病。用病料研磨成混悬液皮下接种兔子,注射部位出现“奇痒”致死现象。 1.5治疗 全部母猪用伪狂犬疫苗紧急免疫注射2 头份/头,间隔一个月相同剂量加强一次,之后每隔3个月一次;初生仔猪伪狂犬疫苗滴鼻一头份/头,同时肌肉注射一头份/头,2 h后再让仔猪吃奶;母猪紧急免疫20 d后, 初生小猪不进行超免,所生仔猪已全部成活。 2 病例2 2.1 基本情况

猪伪狂犬病净化方案

猪伪狂犬病净化方案 (见农业部《伪狂犬病防治技术规范》) 我国种猪场伪狂犬病净化方案内容由6个不同阶段组成,即:调查阶段、强化免疫控制、检疫淘汰、全部或部分清群、监测认证阶段和维持阶段。种猪场根据本场实际情况,分阶段逐步实施。 一、材料准备 疫苗:使用国家批准的基因缺失疫苗。 抗体检测试剂盒:检测伪狂犬病全病毒抗体或gB抗体试剂盒、区分免疫猪和感染猪的抗体鉴别检测试剂盒。试剂盒必须获得国家相关批准文号。 待净化猪群的确定:应选择健康、生产成绩稳定的种猪群开展伪狂犬病的净化。在初次开展本病净化的大型种猪场中,可先选定500-1000头母猪群开展净化,逐步推进。 二、净化方案 1、调查阶段 如果种猪群母猪大于500头,按照种母猪群数量的10%、种公猪全群采血。分离血清,用gE-ELISA检测,根据野毒抗体阳性率高低,确定种猪群(种母猪和种公猪)伪狂犬病野毒感染状态。如果母猪数量小于500头,可一次采集全部种猪的样品,检测gE抗体,根据检测结果,确定进入何种净化阶段。 1.1如果所抽检样品全部为gE抗体阴性,则种猪群全群逐头检测,如所有血清样品均为阴性,可确认种猪群为伪狂犬病野毒抗体阴性,直接进入“监测与认证”阶段; 1.2如果血清样品的gE抗体阳性率低于10%,可进入“检测淘汰”—“监测与认证维持”的净化方案; 1.3如果gE抗体阳性率在10%-20%,可实行“强化免疫控制”—“检测淘汰”—“监测与认证维持”的净化方案; 1.4如果gE抗体阳性率大于30%,则实行“全群或部分清群”措施,暂不考

虑实施净化; 1.5在全部种猪群gE抗体阴性时,可直接进入“监测与认证维持”阶段。 2.强化免疫控制阶段 使用伪狂犬病gE基因缺失疫苗免疫该猪群,同时采取生物安全和灭鼠等综合措施,达到控制的目的。 2.1免疫程序的制定 2.1.1种母猪(种公猪) 每年普免3-4次。或者母猪配种前和产前4周分别免疫一次。普免时,避免在分娩前7天内接种疫苗,以减少接种应激对分娩的影响,但可于母猪分娩后补免。 公猪每年3次免疫,采用集中普免的方式。 2.1.2仔猪 分别测定仔猪在50日龄、60日龄和70日龄时的伪狂犬病抗体(gB抗体或全病毒抗体),每个阶段抽样30份,样品来自10窝猪,每窝3头,确保采样的均衡性。根据抗体水平确定仔猪的免疫日龄。猪场可根据产房小猪和保育猪是否出现伪狂犬病(如腹泻、神经症状等),使用出生猪滴鼻免疫的方式,克服母源抗体干扰,并以提高局部的黏膜免疫力。 2.2实验室评估 仔猪免疫后3周,检测30份血清gB或全病毒抗体和gE抗体。当gE抗体阴性时,如果85%的样品为gB抗体或全病毒抗体阳性,即可认为群体免疫合格。 2.3 临床评估 主要考察猪群的生长成绩。母猪无繁殖障碍,哺乳仔猪无尖叫、腹泻和转圈,最后死亡等现象;保育猪无神经症状,育肥猪无伪狂犬病病毒引起的呼吸道症状。 2.4配套的生物安全措施 2.4.1如需引种,只能引进伪狂犬病gE抗体阴性的后备种猪; 2.4.2对进出猪场的车辆和外来人员进行消毒; 2.4.3无害化处理病死猪和流产死胎等; 2.4.4定期灭鼠。 3、检测淘汰阶段

一例育肥猪伪狂犬病的诊治

一例育肥猪伪狂犬病的诊治 高纪振 伪狂犬病(Pseudorabies)是目前对我国养猪业危害非常严重的病毒性疾病之一,它是由伪狂犬病毒引起的包括猪、牛、羊等家畜和多种野生动物均可感染的一种急性传染病。在猪方面,我们众所周知的伪狂犬病的特征是:妊娠母猪发生流产,死胎,产出带有神经症状的弱仔以及空怀母猪的发情异常等;仔猪表现为神经症状,呼吸道症状和顽固性腹泻,如果伪狂犬病爆发时,哺乳仔猪的死亡率甚至会超过90%等。伪狂犬病对一个养猪场造成的上述危害是非常严重的,同时也引起了养猪人的警惕和重视,通过疫苗接种加上合适的药物治疗病情可以很快的得到控制。由于伪狂犬病在育肥猪一般多为隐性感染,症状表现不明显,只表现一过性发热,精神沉郁,采食量少下降或下降不明显,呕吐、咳嗽等轻微症状,往往容易造成人们的疏忽大意。但是值得关注的是,育肥猪感染伪狂犬病通常导致与其他病原混合感染,引起呼吸系统疾病综合征(PRDC),主要表现为生长迟缓和日增重下降,往往给养殖场造成十分严重的经济损失。笔者现将最近一例育肥猪伪狂犬病的诊治过程整理如下,敬请广大同仁参考指正。 1 发病基本情况 2012年11月16日,河南省辉县市百泉镇百泉村养殖户张XX求诊。主诉:2012年9月份从外场购得15-20Kg的小肉猪150头,现猪场有还剩139头肉猪,平均体重75Kg左右,已接种过猪瘟、支原体、圆环病疫苗,伪狂犬病疫苗未免疫。从2012年11月初开始,猪只陆续出现咳嗽、眼睛发红、眼角下泪斑、采食量下降等症状,发病一星期左右,偶尔有猪表现出短暂的神经症状。病初疑为猪流感症状,后来怀疑为支原体病,自己用氟苯尼考、泰乐菌素等抗生素治疗后,采食量有所恢复,但呼吸道症状未见明显好转。今下午死亡1头,体重60Kg左右,生前有站立不稳、抽搐,鼻腔流出泡沫等症状,现送来诊治。 2 剖检病理变化 心冠脂肪有小出血点;肺肿胀,呈间质性肺炎,有肉变区;肝肿大,表面有黄白色坏死灶;胆囊充盈,胆汁浓稠;脾脏上有灰白色坏死小点;肾肿胀;肠系膜淋巴结和腹股沟淋巴结肿大,出血坏死;胃底黏膜大面积出血;气管及会厌软骨内有泡沫状液体,鼻腔卡他性炎症;脑膜水肿,充血明显,脑实质点状出血。 3 实验室诊断结果 应用美国IDXX 公司生产的HERDCHEK 猪伪狂犬抗体普查型酶联免疫(ELISA ) 诊断试剂盒进行血清学诊断,结果显示为强阳性,判定为育肥猪伪狂犬病。 4 治疗方法及结果 首先对疑似健康猪紧急接种三基因缺失伪狂犬活疫苗,每头接种2头份,同时对患病猪也用三基因缺失伪狂犬活疫苗按每头猪2头份的剂量进行免疫接种;全群猪用替米考星和黄芪多糖拌料;病猪用恩诺沙星加鱼腥草肌肉注射,一天两

猪伪狂犬野毒检测(PRV-gE)

猪伪狂犬病病毒gpI抗体检测 自备材料 1. 50、100μl 精确微量移液器或连续移液器。 2. 一次性移液器吸头。 3. 配制洗涤液的500ml 量筒。 4. 96 孔板酶标仪。 5. 稀释样品的玻璃或塑料管。 6. 蒸馏水或去离子水。 7. 滴加和吸去洗涤液的装置。 使用注意事项 1. 处理所有的PRV 材料以免PRV 的传播。抗原包被微孔板虽然经过化学处理,仍可能成为PRV 的传染源。 2. 勿用口移液。 3. 使用样品和试剂盒的场所不要吸烟、喝水和吃东西。 4. TMB 底物和终止液对皮肤有刺激性。 5. 试剂盒的某些成分含有防腐剂叠氮钠。处理时需要用大量的水冲洗以免形成叠氮化铜或叠氮化铅,它们在受压时可以爆炸。注意防止该成分对酶标抗PRV gpI 抗体的污染。 6. TMB 不要暴露于强光和任何氧化剂。使用洁净的玻璃或塑料容器盛装TMB 底物液。 7. 所有的试剂应在2-7℃储存。使用前恢复到室温,使用后放回2-7℃。 8. 所有的废弃液应在丢弃前合理处理以免污染环境。 9. 注意防止试剂盒成分的污染。 10.不要使用超过有效期限的试剂,不同批次试剂盒的成分不要混用。 11.严格遵守这些条款可以获得理想的结果。操作过程中的移液、时间和洗涤必须精确。 样品的制备 用样品稀释液将被检样品稀释2 倍 (1:2)。 取每个样品后都要更换吸头,准确记录每个样品在板上的位置。每个样品应在滴加到PRV 包被板前应混匀。 洗涤液的制备 浓缩洗涤液应在使用前恢复至室温并使沉淀的盐溶解。使用前浓缩洗涤液应用蒸馏水或去离子水10 倍稀释(例如:每块板用30ml 浓缩液加上270ml水)。 操作步骤 使用前所有试剂应恢复至室温。试剂应轻轻旋转或震荡予以混合。 1.取出抗原包被板,在记录表上记录样品的位置。 2.在A1,A2 和A3 孔内加入100μl 两倍稀释(1:2)的阴性对照。 3.在A4,A5 孔内加入100μl 两倍稀释(1:2)的阳性对照。 4.在其余的孔内分别加入100μl 已稀释好的被检样品。 5.室温下孵育1 小时或2-8℃孵育过夜(可以将微量反应板用封条封闭)。 6.用大约300μl 洗涤液洗涤板孔,重复3-5 次。每次洗涤时洗涤液都应吸出丢弃。在洗板和加入标记物之间应避免包被板变干。在最后一次洗涤液吸出后,将板中残留洗涤液扣拍到吸水材料上。 7.每孔加入100μl 辣根过氧化物酶标记抗PRV gpI 抗体。 8.室温下孵育20 分钟。

猪伪狂犬病毒的分子生物学研究进展

猪伪狂犬病毒的分子生物学研究进展 【摘要】猪伪狂犬病是由伪狂犬病毒引起的家畜和野生动物的一种急性传染病。该文介绍了伪狂犬病病毒的特征、病毒的基因组学和疫苗研究的分子生物学进展,为进一步认识和控制猪伪狂犬病奠定基础。 【关键词】猪伪狂犬病;基因;分子生物学 伪狂犬病(Pseudorabies,PR),是由疱疹病毒科、α疱疹病毒亚科中的伪狂犬病毒(PRV)所致的一种急性传染病。PRV可引起多种家畜、实验动物和野生动物发病,已证实有35种动物可被感染,包括猪、牛、绵羊、兔、狗、水貂、雪貂、狐狸、猫和大鼠等。猪是PRV的主要宿主,成年猪一般为隐性感染,但终身带毒和排毒,成为本病的主要传染源,在本病的传播过程中具有重要意义。 目前本病在世界范围内普遍发生,已有50多个国家和地区报道发生PR。随着规模化养猪的不断发展和强毒株的出现,PR的发生和流行日趋严重,现在已成为对全球养猪业危害最大的传染病之一,每年给养猪业造成了巨大的经济损失。 1.伪狂犬病毒的特征 PRV属于疱疹病毒科甲型疱疹病毒亚科,猪疱疹病毒Ⅰ型。其完整病毒粒子为圆形,直径150nm~180nm,核衣壳直径为105nm~110nm。有囊膜,囊膜表面有长约8nm~10nm呈放射状排列的纤突。 PRV对外界环境的抵抗力较强,55℃50min、80℃3min或100℃瞬间才能将病毒杀灭。在低温潮湿环境下,pH 6~8时病毒能稳定存活;在干燥条件下,特别是在阳光直射下,病毒很快失活。 PRV基因组为线状双链DNA,大小约180kb,G+C含量高达74%。病毒基因组由长独特区、短独特区以及位于US两侧的末端重复序列与内部重复序列组成。对PRV基因组序列测定发现其由72个阅读框组成,可编码70种蛋白,目前已发现和命名的有gB、gC、gD、gE、gG、gH、gI、gK、gL、gM、gN,11种糖蛋白。编码gC、gE、gG、gI、gM和gN的基因为病毒复制非必需的,gB、gC、gD、gE和gI与病毒的毒力有关。此外,胸苷激酶、核苷酸还原酶、蛋白激酶等几种酶也与病毒的毒力密切相关,其中胸苷激酶是PRV最主要的毒力基因。糖蛋白gB、gC、gD在免疫诱导方面最为重要。 2.伪狂犬病毒基因组学研究进展 2.1猪伪狂犬病毒miRNAs 小分子RNA (miRNAs)是参与基因表达的转录后调节的小分子,长度为21-24个核苷酸。结合互补的非编码区序列(39 UTR),它们能抑制特定的信使RNA的表达。miRNA在所有的植物和动物表达,也包括DNA病毒。已发现疱疹病毒家族的许多成员,在病毒感染的细胞中有miRNA表达。miRNA一旦从病毒基因组转录作为前体,就被病毒和宿主信使RNA加工。 miRNA对病毒特别有用:miRNA片段是小的,与调节蛋白相比,更易进化成与靶基因互补的序列。另外,它们不是抗原,能够下调宿主基因,建立一个适宜病毒生存的环境,弱化和逃避宿主的免疫防御监视。疱疹病毒一个典型的特点是为建立潜伏感染,可作为基因组的传递体和游离基因。在这种状态下,只有有限的特定基因组区域被转录,这样的区域易被控制。 几个疱疹病毒,如疱疹病毒,单纯病毒(单纯疱疹病毒),单纯疱疹病毒

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