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NADH氧化酶(NADH oxidase,NOX)试剂盒使用说明

NADH氧化酶(NADH oxidase,NOX)试剂盒使用说明
NADH氧化酶(NADH oxidase,NOX)试剂盒使用说明

NADH氧化酶(NADH oxidase,NOX)试剂盒使用说明

分光光度法货号:BC0630

规格:50管/48样

产品说明:

试剂一:液体50mL×1瓶,-20℃保存。

试剂二:液体10mL×1瓶,-20℃保存。

试剂三:液体1mL×1瓶,-20℃保存。

试剂四:液体50mL×1瓶,4℃保存。

试剂五:液体6mL×1瓶,4℃保存。

试剂六:粉剂×2瓶,-20℃保存;临用前每瓶加入5mL蒸馏水,用不完的试剂仍-20℃保存。产品简介:

NOX(EC1.6.99.3)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,可在氧气存在下,直接将NADH氧化为NAD。该酶不仅参与NAD的再生,而且与免疫反应密切相关。

NOX能够将NADH氧化为NAD,NADH的氧化与2,6二氯酚靛蓝(DCPIP)的还原相偶联,蓝色的DCPIP被还原为无色的DCPIP,在600nm下测定蓝色DCPIP的还原速率计算出NADH氧化酶活性的大小。

试验中所需的仪器和试剂:

可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵、冰、蒸馏水

操作步骤:

一、样品测定的准备:

组织、细菌或细胞中胞浆蛋白与线粒体蛋白的分离:

1准确称取0.1g组织或收集500万细胞,加入1mL试剂一和10uL试剂三,用冰浴匀浆器或研钵匀浆。

2将匀浆600g,4℃离心5min。

3弃沉淀,将上清液移至另一离心管中,11100g,4℃离心10min。

4上清液即为除去线粒体的胞浆蛋白,可用于测定从线粒体泄漏的NOX(此步可选做)。

5步骤④中的沉淀即为线粒体,加入200uL试剂二和2uL试剂三,超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10秒,重复30次),用于NOX活性测定。

二、测定操作:

1、分光光度计预热30min以上,调节波长至600nm,蒸馏水调零。

2、样本测定

(1)试剂四、试剂五和试剂六于37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)孵育5min。

(2)在1mL石英比色皿中加入40μL样本、700μL试剂四、100μL试剂五和160

μL试剂六,混匀,记录600nm处20s时吸光值A1和1min20s后的吸光值A2,计

算ΔA=A1-A2。

NOX活力单位的计算:

1.血清(浆)NOX活力的计算

单位的定义:每mL血清(浆)在每mL反应体系中每分钟A600变化0.01定义为一个酶活力单位。

NOX(U/mL)=ΔA×V反总÷V样÷0.01÷T=2500×ΔA

2.组织、细菌或细胞中NOX活力的计算

(1)按样本蛋白浓度计算:

单位的定义:每mg组织在每mL反应体系中每分钟A600变化0.01定义为一个酶活力单位。NOX(U/mg prot)=ΔA×V反总÷(V样×Cpr)÷0.01÷T=2500×ΔA÷Cpr

此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2)按样本鲜重计算:

单位的定义:每g组织在每mL反应体系中每分钟A600变化0.01定义为一个酶活力单位。NOX(U/g鲜重)=ΔA×V反总÷(W×V样÷V样总)÷0.01÷T=505×ΔA÷W

(3)按细菌或细胞密度计算:

单位的定义:每1万个细菌或细胞在每mL反应体系中每分钟A600变化0.01定义为一个酶活力单位。

NOX(U/104cell)=ΔA×V反总÷(500×V样÷V样总)÷0.01÷T=1.01×ΔA

V反总:反应体系总体积,1mL;V样:加入样本体积,0.04mL;V样总:加入提取液体积,0.202mL;T:反应时间,1min;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样本质量;500:细胞或细菌总数,500万。

动物组织细胞RNA提取试剂盒使用说明

动物组织/细胞RNA提取试剂盒 编号名称规格单位 北京华越洋生物T2654 动物组织/细胞RNA提取试剂盒50T 盒 动物组织/细胞RNA提取试剂盒简介: 华越洋动物组织/细胞RNA提取试剂盒将高效的异硫氰酸胍裂解技术与硅基质膜纯化技术相结合,可从动物细胞及组织中高效提取总RNA。起始样本一般最多30 mg组织或1×107细胞。动物组织/细胞RNA提取试剂盒还可回收未完全纯化的RNA、体外转录和酶促反应后得到的RNA。用本试剂盒可提取纯化分子量大于200碱基的高品质RNA,几乎无DNA 残留。如果要进行对微量DNA非常敏感的RNA实验,残留的DNA可利用无RNase的DNase 在柱上进行消化去除。提取的RNA可用于RT-PCR、Nothern Blot、Dot Blot等下游实验。 动物组织/细胞RNA提取试剂盒构成: C omponent 50 preps D Nase I 1000 U 10×Reaction Buffer 1000 μl B uffer RL 35 ml B uffer RW1 30 ml B uffer RW2(concentrate)11 ml R Nase-Free Water 10 ml S pin Columns RMwith Collection Tubes 50 R Nase-Free Centrifuge Tubes1.5 ml 50 自备试剂:β-巯基乙醇、无水乙醇(新开封或提取RNA专用)。 动物组织/细胞RNA提取试剂盒实验前准备及重要注意事项: 1.预防RNase污染,应注意以下几方面: 1)使用无RNase的塑料制品和枪头,避免交叉污染。 2)配制溶液应使用无RNase的水。 3)操作人员戴一次性口罩和手套,实验过程中要勤换手套。 2.提取的样品避免反复冻融,否则影响RNA提取的量和质量。

自己翻译的罗氏tunel检测细胞凋亡试剂盒说明书

罗氏tunel检测细胞凋亡试剂盒说明书 注意:Label溶液含有甲次砷酸盐和二氯化钴,严禁吸入和食入。 反应悬浮物收集于密闭、不易碎、有明确标识的容器中,按有毒废物处理。 需要自己配置的其他物品: 除上表所列试剂外,还需准备以下溶液。下表列出每步所需物品概览:

产品概述: 特异性:TUNEL 反应优先标记凋亡产生的DNA 链断裂,从而辨别凋亡与坏死、以及由抑 制细胞生长的药物或放射线产生的primary DNA 链断裂 实验干扰:假阴性:在某些型式的凋亡细胞中DNA 链断裂可能缺失或不完全。空间位阻, 如细胞外元件可能阻止TdT 到达DNA 断裂处。两种情况均能产生假阴性。 假阳性:在坏死晚期,可能产生大量的DNA 片段 DNA 链断裂也可能在具有高增殖和代谢活动的细胞中出现。两种情况均能产生 假阳性。为确认细胞死亡的凋亡型式,应认真进行每种细胞的形态学检查 凋亡过程中产生的形态学改变尤其特征形式,因此,对于可以结果进行解释时, 细胞形态评估是一项重要的参数 样本:细胞离心涂片和细胞涂片 在chamber slides 上培养的黏附细胞 冰冻或福尔马林固定、石蜡包埋样本 分析时间:2-3小时,除外培养、固定和渗透 检测次数:一个试剂盒50T

步骤和所需材料: 1 流程图: 2 样品准备 黏附细胞、细胞涂片和细胞离心涂片 需准备的其他试剂:Washing buffer:磷酸盐缓冲液(PBS) Blocking buffer封闭溶液:甲醇稀释的3% H2O2 Fixation solution固定溶液:PBS配制的4%多聚甲醛,ph ,新鲜配制 Permeabilisation solution 渗透液:%Triton1)X-100溶于%柠檬酸钠溶液 中,新鲜配制 步骤:下表描述了细胞固定、内源性过氧化物酶封闭和细胞渗透过程。 组织部分 福尔马林-包埋组织 福尔马林包埋组织的预处理:可按4种不同的方式预处理。如用蛋白酶K,不含核酸酶,浓 度、孵育时间和温度应按组织类型优化 注意:只用罗氏应用科学的蛋白酶K,因其经检测不含核酸酶, 核酸酶可导致假阳性。 另外3中替代方法在下表中描述(step 2) 需准备的其他试剂:二甲苯和乙醇(浓度:95%,90%,80%,70%,溶于双蒸水中)

ADP含量试剂盒使用说明

ADP含量试剂盒使用说明 产品简介: ADP广泛存在于动物、植物、、微生物和培养细胞中,是描述细胞能量代谢状态的主要参数。测定ADP含量并且计算能荷,能够反映能量代谢状态。 ADP在254nm下有吸收峰,可以利用高效液相色谱法测定其含量。 试验中所需的仪器和试剂: 高效液相色谱仪、低速离心机、溶剂抽滤装置、针头式过滤器(水系,50个,0.22μm)、滤膜(水系和有机系各1个,0.45μm)、C18柱(4.6×150mm)、可调式移液器、样品瓶(50个,2mL)、甲醇(色谱级,300mL)、甲醇(色谱级,300mL)、蒸馏水 产品内容: 试剂一:液体60mL×1瓶,4℃保存; 试剂二:液体60mL×1瓶,4℃保存; 试剂三:粉剂1×1瓶,粉剂2×1瓶,4℃保存;临用前用少量蒸馏水将粉剂1和粉剂2溶解后倒入1000mL容量瓶中,用蒸馏水定容至1000mL,形成流动相缓冲液基质(注:试剂瓶中的粉剂要冲洗干净),4℃可保存1周; 试剂四:ADP标准品5mg×1支,-20℃保存。临用前加入1mL双蒸水,配成5mg/mL溶液,配好后-20℃可保存1周; 操作步骤: 一、实验前的准备工作: 1、将双蒸水1000mL、流动相缓冲液基质1000mL和甲醇300mL用0.45μm的滤膜抽滤,以除去溶剂中的杂质,防止堵塞色谱柱。(注:双蒸水和缓冲液基质用水系滤膜抽滤,甲醇用有机系滤膜抽滤)。 2、流动相的配制:将抽滤完毕的流动相缓冲液基质1000mL与甲醇配比为99.9:0.1(v/v),即取999mL缓冲液基质与1mL甲醇混合。

3、将抽滤完毕的甲醇和双蒸水配比成100%的甲醇,10%的甲醇,双蒸水各250mL。将2和3中的溶剂超声30分钟,以脱去溶剂中的气泡,防止堵塞色谱柱。 二、ADP的提取: 1、组织的处理:准确称取组织重量0.1g,加入1mL试剂一,提取ADP,4000g常温离心15min,取上清液,加入等体积的试剂二,混匀,4000g常温离心15min,取上清,0.22μm水系微孔滤膜过滤后冰上放置,待测。 2、细胞处理:收集约30mL细胞,离心菌体经干燥后,加入1mL试剂一,超声破壁细胞(950 W,30%,15min,工作1s间隔2s),4000g常温离心15min,取上清液,加入等体积的试剂二,混匀,4000g常温离心15min,取上清,0.22μm水系微孔滤膜过滤后冰上放置,待测。 三、ADP含量测定操作步骤: 1.开启电脑、检测器和泵,安装上色谱柱,打开empower软件,在方法组中设置进样量20μL,流速1mL/min,保留时间10min,检测波长254nm,设置完毕保存方法组。 2.用100%的甲醇、10%的甲醇、双蒸水按甲醇浓度从大到小的顺序洗色谱柱30min。 3.用流动相洗柱子,待基线稳定后开始加样。 4.加入标准品20μL,在10min内可分离ADP,ADP的保留时间在4min左右(柱子不同,保留时间有差异),计算不同浓度的ADP标准品的峰面积。 5.加入样品20μL,在相应保留时间处检测ADP的峰面积。 ADP含量的计算: 将5mg/ml的ADP标准品用双蒸水分别稀释成100μg/ml、80μg/ml、60μg/ml、40μg/ml和20μg/ml的ADP标准品溶液,以标准品浓度(μg/ml)为横坐标,峰面积为纵坐标分别计算ADP标准曲线。 注:标准品的稀释倍数要根据样品中ADP浓度确定,样品中ADP的峰面积必须落在不同浓度的ADP标准品的峰面积之内,该标准品稀释倍数只是一个参考。

Annexin V-FITC PI细胞凋亡检测试剂盒

Annexin V-FITC/PI 细胞凋亡检测试剂盒 Annexin V-FITC Apoptosis Detection Kit 一、试剂盒说明 在正常细胞中,磷脂酰丝氨酸(PS )只分布在细胞膜脂质双层的内侧,而在细胞凋亡早期,细胞膜中的磷脂酰丝氨酸(PS )由脂膜内侧翻向外侧。Annexin V 是一种分子量为35~36kD 的Ca 2+依赖性磷脂结合蛋白,与磷脂酰丝氨酸有高度亲和力,故可通过细胞外侧暴露的磷脂酰丝氨酸与凋亡早期细胞的胞膜结合。因此Annexin V 被作为检测细胞早期凋亡的灵敏指标之一。将Annexin V 进行荧光素FITC 标记,以标记了的Annexin V 作为荧光探针,利用荧光显微镜或流式细胞仪可检测细胞凋亡的发生。 碘化丙啶(Propidium Iodide, PI )是一种核酸染料,它不能透过完整的细胞膜,但对凋亡中晚期的细胞和死细胞,PI 能够透过细胞膜而使细胞核染红。因此将Annexin V 与PI 匹配使用,就可以将处于不同凋亡时期的细胞区分开来。 本试剂盒可应用于培养细胞凋亡检测(不推荐用于检测组织样本)。 二、试剂盒组份 组份 (20 assays) (50 assays) (100 assays) 储存条件 AnnexinV-FITC 100 μL 250μL 500 μL Propidium Iodide 100 μL 250μL 500 μL Binding Buffer 10.0 mL 25 mL 50 mL 注:1、Annexin V-FITC 组份建议按需分装小份冻存于-20 ℃,避免反复冻融; 2、Propidium Iodide 和Binding Buffer 组份不用时可放置于4℃保存,Propidium Iodide 需要避光。 3、Store at -20℃ for 12 months 三、试剂盒以外自备仪器和试剂 流式细胞仪或荧光显微镜、低速离心机、微量移液器 1.5m L Microtube 、载玻片、盖玻片(荧光显微镜观察需用)、PBS 、不含EDTA 的胰酶消化液 四、使用注意事项 1. 微量试剂取用前请离心集液。 2. Annexin V-FITC ,Propidium Iodide (PI )避光保存及使用。对于Annexin V-FITC 这个组份,建议您在收到产品之后,分装为小份避光保存于-20℃,即用即取。 3. Propidium Iodide (PI )有毒,操作时要戴手套。 4. 本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不以应低于1×105,不推荐用于检测组织样本。 5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞,需用不含EDTA 的胰酶消化,如消化不当,可能引起假阳性,而 用细胞刮子会造成细胞粘连成团,而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA 的PBS 中,防止进一步的损伤。 6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭,请不要固定样品。 7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同,因而流式检测的荧光补偿也不同,因此建议每 次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照,进行荧光补偿的调节。 五、 操作方法 1. 悬浮细胞离心(2000rpm 离心5min )收集;贴壁细胞用不含EDTA 的胰酶消化收集(注:胰酶消化时间不 易过长,否则容易引起假阳性); -20℃避光 4℃避光 4℃

体外转录试剂盒说明书

使用试剂盒时所有的试剂要放置在冰上 转录反应步骤和孵育 1.解冻冷冻的试剂 把RNA聚合酶混合物放置在冰上,它在甘油中保存,没有被保存在-20。 vortex10×reaction buffer和2×NTP/CAP至完全溶解,一旦解冻,反应过程中把 2×NTP/CAP放在冰上,10×reaction buffer保存在室温, 所有的试剂在打开之前都应该短暂的微微离心,以防丢失或污染到离心管边缘的物质。 2.室温下转录反应 如果反应在冰上进行,10×reaction buffer中的亚精胺可以与模板中的DNA共沉淀,离心管中加入水和核苷酸后再加入10×reaction buffer。

以下是一个20ul的反应体系,可按需要放大或缩小。 当RNA长度为300base-5kb时采用以下反应体系 (用0.1-0.2ug PCR产物模板或0-1ug线性质粒模板) 对于更长或更短的转录,参考20页的“Optimizing yield of long transcripts’’和“Optimizing yield of short transcripts”部分。 当合成转录的长度大于5或6KB时,限制GTP生成率,会导致产量降低、过早终止转录。 为了避免这种情况,可能需要补充额外的GTP支持反应。下面是添加特定体积的GTP对普通转录反应的影响。 (对于T7和T3试剂盒,提供的GTP为30mM。对于SP6,为20mM.) 应该添加多少额外的GTP? 对于5-8KB的长度,我们建议最初测试加入1ul的GTP,对于更长的模板应该试试滴定额

外的GTP确定所需的最小值。添加GTP将减少转录合成加帽的比例,但将引起产量升高。 加帽转录的比例与反应中GTP中CAP的模拟物的比率成正比。 RNA产量与良好的加帽效率之间的平衡 在网织红细胞溶解物中,我们测试了GTP不同比例的CAP模拟物对转录反应的RNA产量和产生RNA的翻译效率的影响。(表1) 网织红细胞球蛋白的RNA的翻译依赖于CAP。随着GTP的CAP模拟物增加,RNA的产量减少。相反,合成的RNA的翻译效率随着模拟物的比率增加而增加,这反映了5’端加帽的转录的增加。注意GTP的CAP模拟物为4:1时提供了一个很好的RNA产量和加帽效率的平衡。没有加帽的转录在爪蟾卵母细胞的显微注射实验中不会出现问题。这些未加帽的转录很可能迅速的被卵母细胞降解。 除了加入不同比率的m7G(5')ppp(5')G,T7-mMESSAGE mMACHINE 反应在标准条件下 25ul的进行。使用1ug的T7球蛋白模板DNA 37度孵育1h。球蛋白RNA (6 μg/mL)在Retic Lysate IVT?进行翻译,加入12.5 μCi of [35S]蛋氨酸 (1200 Ci/mmol),30°C反应60 min 。测量TCA-可沉淀cpm 的量。

翻译好的罗氏公司Tunel试剂盒操作说明书

罗氏(R o c h e)公司T u n e l试剂盒操作说明书(In situ cell death detection kit-POD法) 一、原理: TUNEL(TdT-mediated dUTP nick end labeling)细胞凋亡检测试剂盒是用来检测组织细胞在凋亡早期过程中细胞核DNA的断裂情况。其原理是荧光素(fluorescein)标记的dUTP在脱氧核糖核苷酸末端转移酶(TdT Enzyme)的作用下,可以连接到凋亡细胞中断裂DNA的3’-OH末端,并与连接辣根过氧化酶(HRP,horse-radish peroxidase)的荧光素抗体特异性结合,后者又与HRP底物二氨基联苯胺(DAB)反应产生很强的颜色反应(呈深棕色),特异准确地定位正在凋亡的细胞,因而在光学显微镜下即可观察凋亡细胞;由于正常的或正在增殖的细胞几乎没有DNA断裂,因而没有3‘-OH形成,很少能够被染色。本试剂盒适用于组织样本(石蜡包埋、冰冻和超薄切片)和细胞样本(细胞涂片)在单细胞水平上的凋亡原位检测。还可应用于抗肿瘤药的药效评价,以及通过双色法确定细胞死亡类型和分化阶段。 二、器材与试剂 器材:光学显微镜及其成像系统、小型染色缸、湿盒(塑料饭盒与纱布)、塑料盖玻片或封口膜、吸管、各种规格的加样器及枪头等; 试剂:试剂盒含: 1号(蓝盖)Enzyme Solution 酶溶液:TdT 10×、 2号(紫盖)Label Solution标记液:荧光素标记的dUTP 1×、 3号(棕瓶)Converter-POD:标记荧光素抗体的HRP;

自备试剂:PBS、双蒸水、二甲苯、梯度乙醇(100、95、90、80、70%)、DAB工作液(临用前配制,5 μl 20×DAB+1μL 30%H2O2+94 μl PBS)、 Proteinase K工作液(10-20 μg/ml in 10 mM Tris/HCl,pH )或细胞通透液(% Triton X-100 溶于% 柠檬酸钠,临用前配制)、 苏木素或甲基绿、DNase 1(3000 U/ml–3 U/ml in 50 mM Tris-HCl, pH ,10 mM MgCl2,1 mg/ml BSA)等。 三、实验步骤 操作流程图:制作石蜡切片→脱蜡、水合→细胞通透→加TUNEL反应液→加converter-POD→与底物DAB反应显色→光学显微镜计数并拍照。 具体操作步骤(石蜡包埋切片的检测): 1. 用二甲苯浸洗2次,每次5min; 2. 用梯度乙醇(100、95、90、80、70%)各浸洗1次,每次3min; 注:上面两步是针对石蜡切片样本的处理 4. 用Proteinase K工作液处理组织15-30 min 在21–37°C(温度、时间、浓度均需摸索)如果凋亡细胞染色较弱时,可用高浓度的 Proteinase K(400μg/mL)处理5 分钟。其它替代方法:石蜡切片的预处理也可根椐实际情况可采用下述三种替代方法之一,即 蛋白酶K 处理的步聚改用下述方法,其余步聚均相同: 替代方法1: 将脱蜡及水合好的切片浸入通透液中8-10 min(通透 液:%TritonX-100 溶于%柠檬酸钠,需新鲜配制) 替代方法2:将脱蜡及水合好的切片浸入胃蛋白酶或胰蛋白酶中8-10 min (胃蛋白酶:%%溶于HCl PH2,胰蛋白酶%%溶于HCl )

一步法TUNEL细胞凋亡检测试剂盒说明书

一步法TUNEL细胞凋亡检测试剂盒说明书 货号:T2190 规格:20次 保存:-20oC保存,荧光标记液需避光保存。 产品简介: 细胞在发生凋亡时,会激活一些DNA内切酶,这些内切酶会切断核小体间的基因组DNA。细胞凋亡时抽提DNA进行电泳检测,可以发现180-200bp的DNA ladder。基因组DNA断裂时,暴露的3’-OH可以在末端脱氧核苷酸转移酶(Terminal Deoxynucleotidyl Transferase,TdT)的催化下加上绿色荧光探针荧光素(FITC)标记的dUTP(fluorescein-dUTP),从而可以通过荧光显微镜或流式细胞仪进行检测,这就是TUNEL(TdT-mediated dUTP Nick-End Labeling)法检测细胞凋亡的原理。 一步法TUNEL细胞凋亡检测试剂盒(One Step TUNEL Apoptosis Assay Kit)为您提供了一种高灵敏度又快速简便的细胞凋亡检测方法。对于经过固定和洗涤的细胞或组织,只要经过一步染色反应,洗涤后就可以通过荧光显微镜或流式细胞仪检测到呈现绿色荧光的凋亡细胞。 TUNEL法特异性检测细胞凋亡时产生的DNA断裂,但不会检测出射线等诱导的DNA断裂(和细胞凋亡时的断裂方式不同)。这样一方面可以把凋亡和坏死区分开,另一方面也不会把射线等诱导发生DNA断裂的非凋亡细胞判断为凋亡细胞。极少数细胞凋亡时没有DNA断裂,此时不适用TUNEL法检测。在个别类型的坏死细胞中也发现TUNEL检测呈阳性。在需要严格判断细胞凋亡的情况下,最好同时检测多个凋亡指标。产品内容: 1.TdT酶100μl 2.荧光标记液900μl 3.TdT酶稀释液(选用)500μl

无内毒素质粒小量快速提取试剂盒操作方法及步骤说明书

杭州昊鑫生物科技股份有限公司 htpp://https://www.wendangku.net/doc/858341164.html, EndoFree Plasmid Mini Kit 无内毒素质粒小量快速提取试剂盒 目录号:PL04 试剂盒组成、储存、稳定性: 试剂盒组成保存20次(PL0401)50次(PL0402) 平衡液室温5ml 5ml RNaseA(10mg/ml)-20℃150μl 150μl 溶液P1 4℃15 ml 15 ml 溶液P2 室温15 ml 15 ml 溶液N3 室温8ml 15 ml 内毒素清除剂-20℃5ml 5ml 漂洗液WB 室温15 ml 第一次使用前按说明加指定量乙醇 洗脱缓冲液EB 室温10ml 15ml 吸附柱AC 室温20个50个 收集管(2ml)室温20个50个 本试剂盒在室温储存12个月不影响使用效果。 内毒素清除剂常温运输,4度可以保存一个月,长期保存放-20℃。 储存事项: 1.第一次使用时,将试剂盒所带的全部RNase A加入溶液P1后(终浓度100ug/ml) 置于2-8℃保存。如果溶液P1中RNase A失活,提取的质粒可能会有微量RNA 残留,在溶液P1中补加RNase A即可。 2.环境温度低时溶液P2中SDS可能会析出浑浊或者沉淀,可在37℃水浴加热几分 钟,即可恢复澄清,不要剧烈摇晃,以免形成过量的泡沫。 3.避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化,各溶液使用后应及时 盖紧盖子。 产品介绍:

本试剂盒采用改进SDS-碱裂解法裂解细胞,通过独特的内毒素清除剂选择性结合离心除去内毒素,然后离心吸附柱内的硅基质膜在高盐、低pH值状态下选择性地结合溶液中的质粒DNA,再通过去蛋白液和漂洗液将杂质和其它细菌成分去除,最后低盐、高pH值的洗脱缓冲液将纯净质粒DNA从硅基质膜上洗脱。 产品特点: 1.离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口世界著名公司特制吸附膜,柱与柱之间吸附 量差异极小,可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。 2.独特工艺配方清除内毒素,内毒素含量极低(<0.1 EU/μg DNA),细胞转染效果 极佳。也可直接用于酶切、转化、PCR、体外转录、测序、等各种分子生物学实验。 注意事项 1. 所有的离心步骤均在室温完成,使用转速可以达到13,000rpm的传统台式离心机, 如Eppendorf 5415C 或者类似离心机。 2. 提取质粒的量与细菌培养浓度、质粒拷贝数等因素有关。一般高拷贝质粒,建议 接种单菌落于1.5-4.5 ml加合适抗生素的LB培养基,过夜培养14-16个小时,可提取出多达20μg的纯净质粒。如果所提质粒为低拷贝质粒或大于10kb的大质粒,应适当加大菌体使用量,使用5-10 ml过夜培养物,同时按比例增加P1、P2、N3的用量,其它步骤相同。 3. 得到的质粒DNA可用琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计检测浓度与纯度。OD260 值为1相当于大约50μg/ml DNA。电泳可能为单一条带,也可能为2条或者多条DNA条带,这主要是不同程度的超螺旋构象质粒泳动位置不一造成,与提取物培养时间长短、提取时操作剧烈程度等有关。本公司产品正常操作情况下基本超螺旋可以超过90%。 4. 质粒DNA确切分子大小,必须酶切线性化后,对比DNA分子量Marker才可以知 道。处于环状或者超螺旋状态的的质粒,泳动位置不确定,无法通过电泳知道其确切大小。 5. 洗脱液EB不含有螯合剂EDTA,不影响下游酶切、连接等反应。也可以使用水洗 脱,但应该确保pH大于7.5,pH过低影响洗脱效率。用水洗脱质粒应该保存在-20℃。质粒DNA如果需要长期保存,可以用TE缓冲液洗脱(10mM Tris-HCl,1mM

β-葡萄糖苷酶测定试剂盒使用说明

β-葡萄糖苷酶测定试剂盒使用说明 分光光度法50管/24样货号:BC2560 产品简介: β-GC(EC3.2.1.21)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,催化β-糖苷键水解,具有多方面生理作用:在纤维素的糖化作用中,β-GC负责进一步水解纤维素二糖和纤维素寡糖生成葡萄糖;β-GC水解萜烯类香气前驱体,使糖苷键合态变成游离态。从而产生香味;β-GC能够水解植物体内野黑樱苷,释放HCN,从而防止昆虫取食。 β-GC分解对-硝基苯-β-D-吡喃葡萄糖苷生成对-硝基苯酚,后者在400nm有最大吸收峰,通过测定吸光值升高速率来计算β-GC活性。 试验中所需的仪器和试剂: 可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1ml玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。 产品内容: 提取液:液体50ml×1瓶,4℃保存。 试剂一:粉剂×2瓶,-20℃保存;临用前每瓶加入10ml双蒸水,充分溶解备用;用不完的试剂仍-20℃保存。 试剂二:液体25ml×1瓶,4℃保存。 试剂三:液体80ml×1瓶,4℃保存。 标准品:液体×1支,取1.5ml EP管加入1ml,5mol/ml的对硝基苯酚溶液。 操作步骤: 一、样品的前处理:

1.细菌或培养细胞: 先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量(104个):提取液体积(ml)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1ml提取液),超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次);15000g4℃离心10min,取上清,置冰上待测。 2.组织: 按照组织质量(g):提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1ml 提取液),进行冰浴匀浆。15000g4℃离心10min,取上清,置冰上待测。 3、标准样品的准备:取100μL标准液,加入到400μL试剂三中,得到1mol/ml标准液,十倍稀释到100nmol/ml,倍比稀释:50、25、12.5、6.25nmol/ml,稀释液用试剂二。100、 50、25、12.5、6.25nmol/ml做标准液。 二、测定步骤: 1.分光光度计预热30min以上,调节波长至400nm,蒸馏水调零。 2.加样表 试剂名称(μl)对照管测定管标准管试剂一400 试剂二500500 样本100100 迅速混匀,放入37℃准确水浴30min后,立即放入沸水浴中煮沸5min(盖紧,以防止 水分散失),流水冷却后充分混匀(以保证浓度不变) 试剂一400 充分混匀,8000g,4℃,离心5min,取上清液

凯基TUNEL细胞凋亡原位检测试剂盒

凯基TUNEL细胞凋亡原位检测试剂盒(通用)(BIOTIN标记POD法,适用于细胞、组织样本) 使用说明书 一、TUNEL制品说明 凯基TUNEL细胞凋亡检测试剂盒是用来检测细胞在凋亡过程中细胞核DNA 的断裂情况,其原理是生物素(biotin)标记的dUTP在脱氧核糖核苷酸末端转移酶(TdT Enzyme)的作用下,可以连接到凋亡细胞中断裂的DNA的3‘-OH末端,并可与连接了的辣根过氧化酶的链霉亲和素(Streptavidin-HRP)特异结合,在辣根过氧化酶底物二氨基联苯胺(DAB)的存在下,产生很强的颜色反应(呈深棕色),特异准确地定位正在凋亡的细胞,因而在普通显微镜下即可观察和计数凋亡细胞;由于正常的或正在增殖的细胞几乎没有DNA的断裂,因而没有3'-OH 形成,很少能够被染色。 本试剂盒适用于组织样本(石蜡包埋、冰冻和超薄切片)和细胞样本(细胞涂片)的凋亡原位检测。 本试剂盒特点 ●操作简便:使用Ready-to-Use型试剂,并配有Proteinase K 和DAB。 ●高灵敏度:可以单一检出初期的凋亡细胞。 ●高特异性:能特异性染色凋亡细胞。 ●快速操作:整体操作约需3小时。 ●用途广泛:可应用于组织切片、细胞样本等。 ●方便观察:使用光学显微镜观察实验结果。 ●高正确性:有阳性对照片的制备方法,可以确认试剂盒的有效性

使用注意事项 1.使用前请认真阅读本说明书,提前准备好相关试剂。 2.因本试剂盒中组分均为微量,使用前请离心集液。 3.为避免试验误差、降低试剂的损耗,建议使用精密度高的进口微量移液枪及枪头。 4. TdT 酶反应液最好在使用前根椐样本数量集中配制,再分别滴加于各样本片上,避免每个样本单独配制而产生的试剂损耗。 5. 为防止样本脱落,请使用硅烷(Silane)处理的载玻片或采用多聚赖氨酸铺片。 6. 固定好的样本可以在-20℃的70%乙醇中放置30分钟或至过夜,以改善细胞的渗透性。 7. 使用PBS清洗细胞样本时,不要直接加在细胞样本上,以防止细胞样本的脱落。 8. 进行PBS清洗时,以5分钟清洗3次为标准。 9. DAB为固体粉末,使用前加入PBS配制成20×DAB(10 mg/ml)后,按说明书显色使用。 二、TUNEL试剂盒组分 试剂盒以外自备仪器和试剂

invitrogen AnnexinV PI双染试剂盒说明书中文

流式细胞仪 1,使用特定的方法诱导细胞凋亡,设置一个没有处理的control组 2,在一定孵育期后收获细胞,用冰冷的PBS清洗 3,准备1X的annexin结合液,例如,对于10个实验来说,加1ml 5X annexin 结合液(组分C)到4ml 去离子水中 4,准备一个100ug/ml的PI工作液,例如,通过稀释5ul 1mg/ml的PI储存液(组分B)到45ul 1X annexin 结合液中。没有使用的这部分工作液用于以后的实验。 5,再次离心2步骤中洗过的细胞,弃上清用1X annexin 结合液重悬。调整细胞密度,用1X的annexin 结合液稀释到大约1x106/ml,为每个实验准备100ul 足够的体积。 6,加5ul Alexa Fluor 488 annexin V(组分A)和1ul 100ug/ml PI工作液(4步骤中准备的)到每100ul的细胞悬液中。 7,室温孵育细胞15min. 显微镜观察 1,使用特定的方法诱导细胞凋亡,设置一个没有处理的control组 2,在一定孵育期后收获细胞,用冰冷的PBS清洗 3,准备1X的annexin结合液,例如,配置1ml,加200ul 5X annexin 结合液(组分C)到800ul去离子水中 4,准备一个100ug/ml的PI工作液,例如,通过稀释5ul 1mg/ml的PI储存液(组分B)到45ul 1X annexin 结合液中。没有使用的这部分工作液用于以后的实验。 5,再次离心2步骤中洗过的细胞,弃上清用1X annexin 结合液重悬。调整细胞密度,用1X的annexin 结合液稀释到大约1x106/ml,为每个实验准备足够的体积。 6,加5-25ul的annexin V缀合物(组分A)和1-2ul(100ug/ml)PI工作液到100ul 的细胞悬液中。高浓度的annexinV缀合物会产生较好的结果;最佳染色浓度需要凭借经验 7,室温孵育细胞15min 8,1X annexin 结合液清洗细胞 9,用一个合适方法使细胞固定在载玻片上,用一个适当的滤镜观察荧光效果。 细胞应该被分成3组:活细胞,凋亡细胞和死细胞。活细胞在细胞膜上有微弱的annexin V染色,而凋亡细胞在膜上有一个显著亮度,死亡细胞在膜上有annexin染色和核上的PI染色。

小鼠cfos试剂盒使用方法

小鼠c-fos试剂盒使用方法 检测范围:96T 20pg/ml-480pg/ml 使用目的: 本试剂盒用于测定小鼠血清、血浆及相关液体样本中c-fos含量。 实验原理 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠c-fos水平。用纯化的小鼠c-fos抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入c-fos,再与HRP标记的c-fos抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的c-fos呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中小鼠c-fos 浓度。 试剂盒组成 1 30倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7 终止液6ml×1瓶 2 酶标试剂6ml×1瓶8 标准品(960pg/ml)0.5ml×1瓶 3 酶标包被板12孔×8条9 标准品稀释液 1.5ml×1瓶 4 样品稀释液6ml×1瓶10 说明书1份 5 显色剂A液6ml×1瓶11 封板膜2张 6 显色剂B液6ml×1/瓶12 密封袋1个 标本要求 1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融 2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。 操作步骤 1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀 释。 480pg/ml 5号标准品150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液 240pg/ml 4号标准品150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液 120pg/ml 3号标准品150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液 60pg/ml 2号标准品150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液 30pg/ml 1号标准品150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液 2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、 待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。 3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。 4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用 5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此 重复5次,拍干。 6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。 7.温育:操作同3。

碧云天 细胞凋亡-一步法TUNEL检测试剂盒

一步法TUNEL细胞凋亡检测试剂盒 产品简介: 碧云天生产的一步法TUNEL细胞凋亡检测试剂盒(One Step TUNEL Apoptosis Assay Kit)为您提供了一种高灵敏度又快速简便的细胞凋亡检测方法。对于经过固定和洗涤的细胞或组织,只要经过一步染色反应,洗涤后就可以通过荧光显微镜或流式细胞仪检测到呈现绿色荧光的凋亡细胞。 细胞在发生凋亡时,会激活一些DNA内切酶,这些内切酶会切断核小体间的基因组DNA。细胞凋亡时抽提DNA进行电泳检测,可以发现180-200bp的DNA ladder。基因组DNA断裂时,暴露的3’-OH可以在末端脱氧核苷酸转移酶(Terminal Deoxynucleotidyl Transferase, TdT)的催化下加上绿色荧光探针荧光素(FITC)标记的dUTP(fluorescein-dUTP),从而可以通过荧光显微镜或流式细胞仪进行检测,这就是TUNEL(T dT-mediated d U TP N ick-E nd L abeling)法检测细胞凋亡的原理。 注:FITC是fluorescein isothiocyanate的缩写,实际上大多数情况下所谓的FITC即为fluorescein。 本试剂盒有如下优点。(1) 高灵敏度:可以在单细胞水平检测到细胞凋亡,同时由于凋亡早期就有DNA断裂,可以检测到早期的细胞凋亡。(2) 特异性:TUNEL检测时通常更容易标记凋亡细胞,而不容易标记坏死细胞。(3) 快速:仅需约1-2个小时即可完成。(4) 方便:只需一步染色反应,洗涤后即可观察,不必使用二抗等进行多步操作。(5) 应用范围广:可以用于检测冷冻或石蜡切片中的细胞凋亡情况,也可以检测培养的贴壁细胞或悬浮细胞的凋亡情况。 TUNEL法特异性检测细胞凋亡时产生的DNA断裂,但不会检测出射线等诱导的DNA断裂(和细胞凋亡时的断裂方式不同)。这样一方面可以把凋亡和坏死区分开,另一方面也不会把射线等诱导发生DNA断裂的非凋亡细胞判断为凋亡细胞。 极少数细胞凋亡时没有DNA断裂,此时不适用TUNEL法检测。在个别类型的坏死细胞中也发现TUNEL检测呈阳性。在需要严格判断细胞凋亡的情况下,最好同时检测多个凋亡指标。 本试剂盒足够检测20个样品。 保存条件: -20℃保存,荧光标记液需避光保存。 注意事项: 需自备用于洗涤细胞的PBS或HBSS,用于封片的抗荧光淬灭封片液(P0126),用于固定的4%多聚甲醛或向碧云天订购免疫染色固定液(P0098),同时需自备含0.1% Triton X-100的PBS或向碧云天订购免疫染色洗涤液(P0106)。 如果用于石蜡切片的检测,需自备蛋白酶K,二甲苯。蛋白酶K(ST533)可以向碧云天订购。 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。 使用说明: 1.对于贴壁细胞或细胞涂片: a.PBS或HBSS洗涤一次。 b.如果细胞贴得不牢,可以干燥样品使细胞贴得更牢。 c.用4%多聚甲醛或碧云天生产的免疫染色固定液(P0098)固定细胞30-60分钟。 d.用PBS或HBSS洗涤一次。 e.加入含0.1% Triton X-100的PBS或碧云天生产的免疫染色洗涤液(P0106),冰浴孵育2分钟。 f.转步骤5。 2.对于悬浮细胞或细胞悬液: a.收集细胞(不超过200万细胞),PBS或HBSS洗涤一次。 b.用4%多聚甲醛或碧云天生产的免疫染色固定液(P0098)固定细胞30-60分钟。为防止细胞聚集成团,宜在侧摆摇床或 水平摇床上缓慢摇动的同时进行固定。 c.用PBS或HBSS洗涤一次。

翻译好罗氏公司Tel试剂盒操作说明书

罗氏(Roche)公司Tunel试剂盒操作说明书 (In situ cell death detection kit-POD法) 一、原理: TUNEL(TdT-mediated dUTP nick end labeling)细胞凋亡检测试剂盒是用来检测组织细胞在凋亡早期过程中细胞核DNA的断裂情况。其原理是荧光素(fluorescein)标记的dUTP在脱氧核糖核苷酸末端转移酶(TdT Enzyme)的作用下,可以连接到凋亡细胞中断裂DNA的3’-OH末端,并与连接辣根过氧化酶(HRP,horse-radish peroxidase)的荧光素抗体特异性结合,后者又与HRP底物二氨基联苯胺(DAB)反应产生很强的颜色反应(呈深棕色),特异准确地定位正在凋亡的细胞,因而在光学显微镜下即可观察凋亡细胞;由于正常的或正在增殖的细胞几乎没有DNA断裂,因而没有3‘-OH形成,很少能够被染色。本试剂盒适用于组织样本(石蜡包埋、冰冻和超薄切片)和细胞样本(细胞涂片)在单细胞水平上的凋亡原位检测。还可应用于抗肿瘤药的药效评价,以及通过双色法确定细胞死亡类型和分化阶段。 二、器材与试剂 器材:光学显微镜及其成像系统、小型染色缸、湿盒(塑料饭盒与纱布)、塑料盖玻片或封口膜、吸管、各种规格的加样器及枪头等; 试剂:试剂盒含: 1号(蓝盖)Enzyme Solution 酶溶液:TdT 10×、 2号(紫盖)Label Solution标记液:荧光素标记的dUTP 1×、 3号(棕瓶)Converter-POD:标记荧光素抗体的HRP; 自备试剂:PBS、双蒸水、二甲苯、梯度乙醇(100、95、90、80、70%)、

细胞凋亡试剂盒(FITC)

凯基Annexin V-FITC细胞凋亡检测试剂盒 (Annexin V-FITC Apoptosis Detection Kit) Cat number:KGA For Research Use Only Store at4℃for one year Expire date: 一、试剂盒说明 在正常细胞中,磷脂酰丝氨酸(PS)只分布在细胞膜脂质双层的内侧,而在细胞凋亡早期,细胞膜中的磷脂酰丝氨酸(PS)由脂膜内侧翻向外侧。Annexin V是一种分子量为35~36kD的Ca2+依赖性磷脂结合蛋白,与磷脂酰丝氨酸有高度亲和力,故可通过细胞外侧暴露的磷脂酰丝氨酸与凋亡早期细胞的胞膜结合。因此Annexin V 被作为检测细胞早期凋亡的灵敏指标之一。将Annexin V进行荧光素(EGFP、FITC)标记,以标记了的Annexin V作为荧光探针,利用荧光显微镜或流式细胞仪可检测细胞凋亡的发生。 碘化丙啶(Propidium Iodide, PI)是一种核酸染料,它不能透过完整的细胞膜,但对凋亡中晚期的细胞和死细胞,PI能够透过细胞膜而使细胞核染红。因此将Annexin V与PI匹配使用,就可以将处于不同凋亡时期的细胞区分开来。 本试剂盒可应用于培养细胞凋亡检测(不推荐用于检测组织样本)。 二、试剂盒组份 组份Cat: KGA105 (10 assays) Cat: KGA106 (20 assays) Cat: KGA107 (50 assays) Cat: KGA108 (100 assays) 储存条件 AnnexinV-FITC 50μL 100μL 250μL 500μL 4℃避光 Propidium Iodide 50μL 100μL 250μL 500μL 4℃避光 Binding Buffer 5 mL 10.0 mL 25 mL 50 mL 4℃ 三、试剂盒以外自备仪器和试剂 流式细胞仪或荧光显微镜、低速离心机、微量移液器 1.5m L Microtube、载玻片、盖玻片(荧光显微镜观察需用)、PBS、不含EDTA的胰酶消化液 四、使用注意事项 1.微量试剂取用前请离心集液。 2.Annexin V-FITC,Propidium Iodide (PI)避光保存及使用。 3.Propidium Iodide (PI)有毒,操作时要戴手套。 4.本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不以应低于1×105,,不推荐用于检测组织样本。 5.推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞,需用不含EDTA的胰酶消化,如消化不当,可能引起假阳性,而用细胞刮子会造成细胞粘连成团,而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA 的PBS中,防止进一步的损伤。 6.细胞固定后可能导致荧光的淬灭,请不要固定样品。 7.因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同,因而流式检测的荧光补偿也不同,因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照,进行荧光补偿的调节。 五、操作方法 1.悬浮细胞离心(2000rpm离心5min)收集;贴壁细胞用不含EDTA的胰酶消化收集(注:胰酶消化时间不易过长,否则容易引起假阳性); 2.用PBS洗涤细胞二次(2000rpm离心5min)收集1~5×105细胞;

人MyoDELISA试剂盒使用说明书

人Myo-DELISA试剂盒使用说明书 本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中人Myo-D含量。 实验原理: 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人Myo-D水平。用纯化的人Myo-D抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入Myo-D,再与HRP标记的Myo-D抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP 酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的Myo-D 呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人Myo-D浓度。 样本处理及要求: 1.血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上 清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。 2.血浆:应根据标本的要求选择EDTA、者柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合10-20分钟后, 离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。 3.尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中 如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。 4.细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。

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