维生素对裂殖壶菌发酵产DHA的影响
一种海洋真菌_裂殖壶菌的营养成分分析_朱路英
一种海洋真菌——裂殖壶菌的营养成分分析 朱路英1,2，张学成2,*，王淑芳1，常林瑞1 (1.鲁东大学生命科学学院，山东 烟台 264025；2.中国海洋大学海洋生命学院，山东 青岛 266003)摘 要：为评价海洋真菌裂殖壶菌的营养价值，测定该菌的基本营养成分、氨基酸组成及脂肪酸组成。结果显示，在两种不同的氮源条件下，裂殖壶菌的总蛋白、总脂、总糖及灰分分别为9.35%、42.83%、5.27%、4.85%(豆粕水解物为氮源)和42.51%、18.98%、6.38%、5.72%(酵母提取物为氮源)。以轮虫蛋白的必需氨基酸(EAA)为标准，裂殖壶菌的必需氨基酸指数EAAI ＞0.9，为轮虫的优质蛋白源，但精氨酸或异亮氨酸不能完全满足轮虫需要。而以牡蛎蛋白的EAA 为标准，该菌的EAAI 为0.78～0.79，为牡蛎的可用蛋白源。该菌中含有高水平的DHA ，含量可达14.29%，是一种优质的DHA 强化饵料。另外，培养基中氮源种类的不同直接影响该菌的基本营养成分、氨基酸及脂肪酸组成。 关键词：裂殖壶菌；氨基酸组成；脂肪酸组成；营养价值 Analysis of Nutritional Components of a Marine Fungus: Schizochytrium limanium ZHU Lu-ying 1,2，ZHANG Xue-cheng 2,*，WANG Shu-fang 1，CHANG Lin-rui 1 (1. College of Life Sciences, Ludong University, Yantai 264025, China ；2. College of Marine Life Sciences, Ocean University of China, Qingdao 266003, China) Abstract ：In order to evaluate nutritional values of a marine fungus, Schizochytrium limanium , its basic nutritional components,amino acid and fatty acid compositions were analyzed. Results indicated that the contents of proteins, lipids, carbohydrates and ash in Schizochytrium limanium were 9.35%, 42.83%, 5.27% and 4.85% using soybean hydrolysates as nitrogen resource and 42.51%,18.98%, 6.38% and 5.72% using yeast as nitrogen resource, respectively. Using rotifer protein as the reference, essential amino acid index (EAAI) in Schizochytrium limanium were more than 0.90; using oyster protein as the reference, EAAI in Schizochytrium limanium were 0.78－0.79, which suggested that Schizochytrium limanium was the best quality protein material for rotifer and oyster. However, Schizochytrium limanium had limited amino acids such as Arg and Ile for rotifer. Totally 14.29% DHA was determined in Schizochytrium limanium , which also suggested it was a good DHA source. Moreover, nitrogen sources exhibited a direct effect on contents of nutritional components, amino acid and fatty acid compositions. Key words ：Schizochytrium limanium ；amino acid composition ；fatty acid composition ；nutritional value 中图分类号：S963.2 文献标识码：A 文章编号：1002-6630(2009)24-0272-04 收稿日期：2009-06-28 基金项目：鲁东大学学科建设经费资助项目 作者简介：朱路英(1974－)，女，讲师，博士，研究方向为生物化学。E-mail ：ly zh u @123.co m *通讯作者：张学成(1939－)，男，教授，研究方向为海洋生物学。E-mail ：xczhang@https://www.wendangku.net/doc/8e15580893.html, 在水产养殖业中，饵料所含的营养对水产动物种苗的成活率、生长速率及抗逆、抗病能力有很大影响[1-2]。目前，轮虫和卤虫无节幼体是广泛使用的海洋仔稚鱼的重要天然饵料。但是，常用的几种轮虫和卤虫体内普遍缺乏海洋仔稚鱼必需的n-3多不饱和脂肪酸(PUFA)，因此，生物饵料营养强化技术在海洋鱼类育苗生产中受到关注，以轮虫和卤虫无节幼体为载体，增加仔稚鱼对 n-3 PUFA 的摄入量[3]。目前，大量培养轮虫的常用饵料有微藻，如小球藻、酵母类、乳化鱼油微粒或微 囊等。小球藻含有高水平的二十碳五烯酸(EPA)和二十碳四烯酸(AA)但缺乏二十二碳六烯酸(DHA)[3]；一些酵母类所含的n-3 PUFA 由于含量的限制仍然满足不了仔稚鱼的需要[3]。因此，寻找天然的更有效的生物饵料添加剂已成为人们研究热点之一。 日本研究者从西太平洋红树林地区分离到了一株富含D H A 的海洋真菌—裂殖壶菌(S c h i z o c h y t r i u m l i m a n i u m )。该菌属于真菌中的卵囊菌纲、破囊壶菌属，营养体为单细胞，球形，直径7～15μm [4]。目前
格瓦斯——麸皮混合菌发酵
格瓦斯——麸皮混合菌发酵 此法由于工艺简单可行，易于掌握，一次投产成功。产品清沏微黄透明，营养丰富，色香味及各项技术指标基本上达到了格瓦斯的质量要求，为乡镇企业机械化生产格瓦斯提供了可行的方法。 制作方法 1.菌种制备：生产用的菌株、酵母菌：通化葡萄酒酵母；乳酸菌：1.151乳酸菌。酵母菌培养温度28～30℃，培养时间20～24小时；乳酸菌培养温度28～30℃。培养时间39～48小时；混生菌：接种酵母菌约10%，乳酸菌约5%，常温培养20～24小时。 2.发酵： （1）发酵液配料比为蔗糖4%，蜂蜜2%，糖精0.004%，焦糖1%，麸皮1%，酒花0.1%，柠檬酸0.0801%。 （2）混合糖液的制备：将蔗糖、蜂蜜和糖精，用砂棒过滤水常温溶解，上清液流至配料池中，少量混浊液用白布过滤，滤液一并放入配料池。 （3）焦糖液的制备：将蔗糖倾入铁锅中，加热，不断用锅铲翻铲，待蔗糖溶化后，不停搅拌，温度升至130℃左右时，糖液呈深棕黄色，并略带焦香味，立即停止加热，稍冷，加入砂棒过滤水，使全部溶化为止，即为焦糖液。 （4）麸皮双酶酶解液的制备：将麸皮倒入酶解桶中，按麸皮：水=1∶4的比例加入砂棒过滤水拌匀后，调整pH至5左右，随即加入淀粉酶5单位/克原料和糖化酶60单位/克原料，混合均匀，用直接蒸汽加热至40～50℃，保温30分钟后，再打开蒸汽闸门加热至60～65℃，保温糖化3小时（碘液检查基本完全），用白布过滤。麸渣再加少量砂棒水加热至80～90℃，30分钟，过滤，两次滤洗液即为麸皮双酶酶解液。 （5）酒花的浸出：将酒花倒入铁锅中，加8～10倍水，待酒花全部浸湿后加热至微沸30分钟，白布过滤。根据酒花浸出情况，反复2～3次，使酒花中苦味物质，色素及芳香物充分溶解于水中。 （6）柠檬酸与其它物质的溶解：将柠檬酸与其它物质，分别加入砂棒过滤水，加热溶解备用。 （7）发酵液配制：配料池为内空长2米×高1米×宽1米长方形水池，内镶瓷砖，并事先作好记量标记。池底有排液闸直通发酵罐和排污管，以便消毒清洗之用。按上述发酵液的制备顺序，分别流放在配料池中。根据实际配料计算，补加砂棒过滤水至标记，搅拌均匀后，测定Be′约6.5左右，即为所需发酵液。 （8）发酵罐的构造：2米?3发酵罐是重庆药机厂生产的定型产品，根据格瓦斯发酵的要求，经部分修改而成。该罐为圆锥体，壳体内为碳钢罐内碳钢搪瓷，夹套换热，浆叶式搅拌设备，石墨密封，承受工作压力为3千克/厘米?2，以及进出料液管道、排污、入孔、视镜、测温测压等部件组成。 （9）发酵：发酵罐的准备工作完善后，立即将种子（混生菌）流加到配料池的料液中，边接种，边搅拌，边放料，以减少杂菌的感染。发酵罐在进料前，事先必须进行彻底的消毒杀菌处理，保证罐体和管道无菌，检查所有的闸门是否关闭，密封设备是否完好。然后打开进料闸门，边进料、边搅拌、边加热，进料完毕后，关闭进料闸门。待料液温度升至28℃时，开始进行热交换和停止搅拌。在开始4小时，每隔1小时打开出气闸门搅拌10分钟，以利微生物的繁殖。以后静置密闭发酵，并经常观察料液的发酵情况，保持发酵温度在29～30℃之间，待压
裂殖壶菌油脂提取方法的研究
第30卷第6期温州大学学报·自 然 科 学 版2009年12月V ol 30, No 6 Journal of Wenzhou University · Natural Sciences Dec, 2009 裂殖壶菌油脂提取方法的研究 马建设1，韩方方1，叶海仁2，周茂洪2，黄可新1，赵肖为2,? (1．温州医学院药学院；2．温州大学生命与环境科学学院，浙江温州 325035) 摘要：比较了有机溶剂提取法、酸热法和超声波提取法对于裂殖壶菌油脂的提取能力．酸热法和超 声波提取法的提取得率高于有机溶剂提取法．当氯仿和甲醇以1∶1的体积比混合时，油脂提取得率最 高．当氯仿和甲醇以2∶1的体积比混合时，提取所得油脂中的DHA含量最高．但总提取得率还是以 氯仿和甲醇的体积混合比为1∶1时为最佳． 关键词：裂殖壶菌；油脂；酸热法；有机溶剂提取法；超声波提取法 中图分类号：TS224 文献标志码：A 文章编号：1674-3563(2009)06-0021-04 DOI：10.3875/j.issn.1674-3563.2009.06.004 本文的PDF文件可以从https://www.wendangku.net/doc/8e15580893.html,获得 裂殖壶菌（Schizochytrium）正在成为工业化生产DHA（二十二碳六烯酸，Docosahexaenoic Acid）或者富含DHA的油脂的重要菌种[1]．国内外已有许多关于提取微生物油脂的研究报道，李植峰等人[2]比较了索氏法、超临界CO2萃取法、酸热法和有机溶剂法从雅致枝霉（Thamnidium elegans）、拉曼被孢霉（Mortierella ramanninace）、少根根霉（Rhizopus arrhizus）和畸雌腐霉（Pythium irregulare）等微生物中提取油脂的效果，认为酸热法快速、简便、有效，但对二十碳以上的长链脂肪酸的提取能力有待进一步考察．本文研究从裂殖壶菌提取油脂（特别是二十碳以上的长链脂肪酸）的方法． 1 材料与方法 1.1 材料 1.1.1 菌体 菌体由裂殖壶菌（Schizochytrium）WZU4771[3]经发酵、冷冻干燥而得． 1.1.2 试剂 DHA甲酯、花生酸甲酯和花生酸购自美国SIGMA公司；正己烷、甲醇、氯仿和三氟化硼-乙醚等试剂均为市售国产分析纯． 1.2 油脂提取方法 1.2.1 有机溶剂提取法[4] 称取一定量的菌体至圆底烧瓶中，加入一定比例的氯仿-甲醇混合溶剂，65℃水浴回流2 h， 收稿日期：2009-05-20 基金项目：浙江省科技计划项目(2007C22G2250004) 作者简介：马建设(1982- )，男，河南武陟人，硕士研究生，研究方向：生物化工．? 通讯作者，sherwood@wzu. https://www.wendangku.net/doc/8e15580893.html,
生物信息学上机指南2
《生物信息学》上机指南2 实验二、BLAST 1学时 教学要求： 了解什么是BLAST，它有哪些应用，几种常用的BLAST程序包。 理解为什么会有BLAST程序包。掌握如何在NCBI网站上进行BLAST搜索、如何获取BLAST 帮助。 掌握如何下载并使用单机版的BLAST+程序 重点： 分析、理解BLAST的输出结果和评分标准，如Bit Scores, E-values。 难点： 理解BLAST不同参数的含义，以及如何调整和适用情况。 实验步骤： 一、在线Blast的使用 1、打开NCBI主页：https://www.wendangku.net/doc/8e15580893.html,/，点击Blast进入比对页面。 2、在Basic BLAST选项中，选择protein blast子程序。在Enter Query Sequence框中输入CAO79269， Database选择非冗余蛋白数据库，其它参数默认。 3、稍待片刻，出现Blast结果，分析结果(来自什么物种，具有什么功能) 4、回到protein blast主页面(后退或重新打开protein blast)。将下面这条序列粘帖到Enter Query
Sequence框中，，其它参数默认。运行Blast，并分析结果。结果与第3步相比，说明什么？ 1 MSARAPVAAN QGVTRGQQSQ QGDYTLALLA KDVYSTGSQG VGGFTRLNDS ALLGAGIDPA 61 SLHDSASGFQ AGIYSDNQQY VLAFAGTNDM RDWLSNVRQA TGYDDVQYNQ AVAVAKSAKA 121 AFGEALVIAG HSLGGGLAAT AALATGTVAV TFRRRRFRLH AEPYGDRSGG EERCPSGGIR 181 RYSEQYDMLT GTQESTSLIP DAIGHKITLA NNDTLSGIDD WRPSKHVDRS LTAHGIDKVI 241 SSMAEQKPWE TRANA 5、回到Basic BLAST主页面，选择nucleotide blast子程序，在Enter Query Sequence框中输入： CTTCTTCGCCAGAGGTTT ，Database中选择Nucleotide collection(nr/nt) 6、确认Automatically adjust parameters for short input sequences已经选择，运行Blast，分析结果， 判断这段序列是什么序列。如果不选Automatically adjust parameters for short input sequences，结果会出现什么？
混菌厌氧发酵代谢产物的调控及其机理研究
混菌厌氧发酵代谢产物的调控及其机理研究复杂有机物在厌氧消化过程中,除了有一部分用于微生物生长和产生一些难降解的有机物,大部分有机物会转化为甲烷。当产甲烷过程受到抑制后,混菌厌氧发酵同样会产生一些其他的有价值的产物(如醇类,挥发性脂肪酸等生物燃料)。 但是,所产生的生物燃料浓度和纯度都不能达到生产的直接要求,需要进一步的分离纯化才能够被后续的工艺所利用。所以,本论文对混菌厌氧发酵(MCF)代谢产物的调控进行了一系列研究,即通过调控温度,pH,氨根离子浓度等一系列相关参数,可定向调控混菌厌氧发酵的代谢产物,以提高其浓度和纯度,为MCF体系产脂肪酸和甲烷应用于实际提供技术指导和理论依据。 主要内容和结果包括:1.将污泥厌氧消化体系的温度从高温上升到超高温,开发出一段式原位污泥厌氧消化的工艺,实现了污泥水解和产甲烷过程在同一体系中连续进行。研究结果表明,在55℃-65℃的温度范围内获得了稳定的产甲烷性能,在温度为65℃的条件下,获得了208.51±13.66 mL/g VS的最大甲烷产量,并且得到最大水解率(33%)和酸化率(27.1%)。 然而,进一步升温至70℃并未相应地改善产甲烷的性能。微生物群落分析表明,与乙酸氧化过程高度相关的菌群Coprothermobacter在较高温度下占据着主要地位,且随着温度的升高,产甲烷古菌的优势种群从嗜乙酸产甲烷菌Methanosarcina转变为嗜氢产甲烷菌Methanothermobacter。 该研究结果表明,一段式污泥厌氧消化可以实现在高温条件(65℃)下稳定产甲烷,从而可以减少常规的高温预处理环节,有效降低处理成本。2.研究了污泥停留时间(SRT)对高温条件下(65℃)一段式污泥厌氧消化的影响。 结果表明,最佳SRT为6天,此时甲烷产量达到最大值(186.16 mL/g VS)。同
常明-江南大学-吐温对裂殖壶菌发酵生产DHA的影响
本论文不同意在《中国食品学报》上发表 吐温对裂殖壶菌发酵生产DHA的影响 常明，李婧 ，李翔宇，刘睿杰，金青哲，王兴国* （食品科学与技术国家重点实验室食品，安全与营养协同创新中心，江南大学食品学院，无锡214122） 摘要裂殖壶菌作为好氧型产油微生物，是目前工业化生产DHA的主要菌株之一。吐温是一种表面活性剂，作为培养基添加物，可起到改变细胞膜渗透性、增强底物与氧气传质、促进生长、提高脂质积累的效果。实验探究了吐温系列（tween-20、tween-40、tween-60和tween-80）对裂殖壶菌生长、脂质积累和脂肪酸组成的影响。结果表明，在1%（v/v）添加量下，吐温20与40促进菌体生长；4种吐温均显著增强了菌体总脂积累能力，DHA产量分别比对照组提高了28.68%、29.33%、16.29%和20.67%；吐温20和40将最终总脂产量由22.68 g/L提升至29 g/L以上，DHA产量由10.74 g/L提升至约13.8 g/L。 关键词裂殖壶菌；吐温；发酵；DHA Effect of Tween on DHA production by Schizochytrium sp. SR21 LI Jing, Chang Ming*, Li Xiangyu, Liu Ruijie, Jin Qingzhe, Wang Xingguo (State Key Laboratory of Food Science and Technology, Synergetic Innovation Center Of Food Safety and Nutrition, School of Food Science and Technology, Jiangnan University, Wuxi 214122) Abstract Schizochytrium, one of the main sources of DHA, is aerobic oleaginous microorganism. Tween series, as non-ionic surfactants, added to the medium were known to interfere with the permeability of cell membranes, enhance the nutritional input and oxygen transfer, as well as improve growth and oil production of microorganisms. This research works were focus on the effect of Tween series (Tween-20, Tween-40, Tween-60 and Tween-80) on the growth, lipid accumulation and fatty acid composition in Schizochytrium sp. The results showed that total lipid content was significantly higher with Tween series (1%) and DHA yield were increased by 28.68%, 29.33%, 16.29% and 20.67% with Tween-20, Tween-40, Tween-60 and Tween-80 respectively. In addition, accompanying with the increasing of biomass, the total lipid and DHA production of Schizochytrium sp. were improved to 29 g/L and 13.8 g/L from 22.68 g/L and 10.74 g/L with 1% Tween 20 or Tween 40 respectively. Key words Schizochytrium; Tween; fermentation; DHA 二十二碳六烯酸（22:6 n-3）（DHA）是一种重要的ω-3系列多不饱和脂肪酸（ω-3 polyunsaturated fatty acids），具有促进婴幼儿智力和视力发育、预防心血管疾病、抗癌、抗炎、增强免疫力等功效[1]， 近年来受到广泛关注。微生物发酵法生产出的DHA避免了传统来源——深海鱼油存在的诸多问题， 例如品质不稳定、外源性污染、气味不良、纯化成本高、含有EPA和胆固醇等[2]，具有广阔的应用前 景。裂殖壶菌（Schizochytrium）属于破囊壶菌科的一类海洋微藻，是目前工业化生产DHA的热点菌 株。Schizochytrium藻油的安全性已得到美国FDA认可，2012年3月我国卫生部出台了《食品营养强 基金项目：中国国家自然科学基金（31401619）；江苏省自然科学基金（BK20140156） 作者简介：李婧（1990-），女，硕士研究生，研究方向为微生物油脂 *通讯作者：常明（1979-），男，副教授，研究方向为油脂生物技术
粟酒裂殖酵母
索取号：密级：加密 tRNA（transfer ribonucleic acid）3′端加工成熟过程，是指剪切掉tRNA前体3′端的多余碱基序列以及在其末端添加CCA的过程。只有加工成熟后的并带有3′CCA末端的tRNA才能进行氨基酰化，执行其在蛋白合成过程中的功能。真核生物、古生菌和一些细菌的tRNA基因不编码3′末端CCA，其CCA需要在tRNA3′末端加工成熟后再添加上去，这类tRNA的3′末端的加工成熟需要核酸内切酶tRNase Z参与。 粟酒裂殖酵母Schizosaccharomyce spombe中含有两种tRNase Z基因：sptrz1+ (SPAC1D4.10) 和sptrz2+(SPBC3D6.03c)，它们编码的蛋白分别定位于细胞核和线粒体中。本实验组已经证实两种tRNase Z都是必需基因。我们已经完成了对sptrz1+的功能的相关研究，本实验的主要内容是得到一株sptrz2+的温度敏感型突变菌株，并利用该菌株进行SpTrz2p功能的相关研究。 在我们实验进行的过程中,冷泉港实验室Danielle V.报道sptrz2-A623V的突变会使菌株产生温度敏感的表型。本实验中，我们把sptrz2-A623V突变引入到遗传背景比较清楚的菌株S. pombe yAS56中的，得到具有温度敏感型的菌株tsD。根据对tsD中sptrz2-A623V的基因型进行测序鉴定以及带有sptrz2+的外源质粒限制性温度下救活实验的结果，我们确认tsD即为sptrz2+的温度敏感型菌株，可以用于对SpTrz2p相关功能的进一步研究。 我们也对温敏菌株sptrz2+加标签实验，选择了三种标签：HA、3HA、GFP，从而可以利用western技术跟踪细胞内SpTrrz2蛋白的表达量。得出温度敏感型菌株产生的原因，但是在实验过程中发现标签对Sptrz2p蛋白功能有影响：HA、3HA对蛋白功能的影响较GFP严重。我们成功的给野生型s.pombe Yas56 加上了GFP标签，但无法给温度敏感型菌株加上标签，我们进而采用重组蛋白的方法制备Sptrz2p的抗体。 关键词：S. pombe，tRNase Z，温敏菌株，GFP
裂殖壶藻在水产养殖中的作用及其开发
裂殖壶藻在水产养殖中的作用及其开发 裂殖壶藻（Schizochytrium），又名裂殖壶菌、裂壶藻，属于真菌门、卵菌纲、水霉目、破囊壶菌科的一类海洋真菌，单细胞、球形（Nakahara 和Yokochi,1996）。裂殖壶藻细胞富含大量对人体有用的活性物质，如油脂、色素、角鲨烯等。对裂殖壶藻营养成分研究分析表明，其生化组分主要为脂类、蛋白和总糖，其中脂肪含量可占细胞干重50%以上，而ω-3 不饱和脂肪酸DHA 就高达20%以上（李美玉等，2012;朱路英等，2007）。 裂壶藻能够在异养条件下培养，易于大规模商业化生产，还可通过培养基及发酵工艺的调整来控制细胞内的DHA 含量，是一种富含DHA的重要资源。 1 裂殖壶藻在水产养殖中的应用途径 研究表明，保证饲料中充足的DHA,可显着提高鱼、虾、蟹等水产动物对环境变化的忍耐力，降低白化病发病率，从而提高存活率，并促进生长发育。国内一些裂殖壶藻产品的生产企业也相继开展了一系列裂殖壶藻DHA 的应用试验，主要是在水产饲料中的添加效果方面，表明裂殖壶藻DHA 对改善虹鳟、鲟鱼、石斑鱼的鱼卵孵化率，以及鱼苗成活率、肉质、肉色、饵料系数、鱼肉DHA含量等均具有良好的效果。 1.1 直接投喂新鲜藻液裂殖壶藻体型微小（4 ~13 μm），可作为水产动物苗种的直接开口饵料，其富含DHA 且易于培养、产量高。直接投喂，相当于婴儿母乳，可作为一种高DHA 含量的优良强化饵料，提高苗种生长性能和成活率。大量研究表明，多数虾蟹贝及部分鱼类的幼体阶段大多以植物性饵料为食，单细胞藻类的种类、数量与质量直接决定其人工育苗的成败（王维娜等，2000）。孙杰等（2008）通过微藻与西施舌混养不仅降低了水体中氨氮质量浓度，而且提高了幼贝的成活率及生长量。朱路英等（2009）研究表明，裂殖壶藻可作为海水仔稚鱼、牡蛎等贝类的一种高DHA 含量的优良强化饵料。 1.2 作为配合饲料的营养添加剂规模化培养富含DHA 的裂殖壶藻，经过处理可作为仔鱼等基础饲料的营养强化添加剂，即微藻DHA 饲料。焦建刚等（2014）研究表明，在对虾基础饲料中0.5%的裂殖壶藻发酵粉可明显促进其生长，降低饲料系数（FCR）3.4%, 同时提高了肌肉中蛋白（约2%）及DHA（约1%）的含量,从而改善对虾品质。Matthew 等（2007）研究表明，在大西洋鲑鱼的饮食中用裂殖壶藻油替代鱼油可显着提高鱼肉组织中的DHA 含量。Ganuza 等（2008）也指出了裂殖壶藻作为鱼油DHA 替代资源在金头海鲷养殖上的巨大潜力。Li 等（2009）通过在斑点叉尾鮰饲料中添加裂殖壶藻粉的研究表明，其可增加鱼的体重及饲料转化率（FCR），2%的添加量可显着提高肌肉中的DHA 和总ω-3 长链多不饱和脂肪酸（LC-PUFAs）水平。黄亮华等（2014）研究发现，饲料中添加裂殖壶藻粉能提高刺参的生长性能，并可明显提高其体腔液中超氧化物歧化酶（SOD）、酸性磷酸酶（ACP）、碱性磷酸酶（AKP）、溶菌酶（LZM）等的活性;1.25%的添加量可显着提高肠道蛋白酶、淀粉酶的活性，刺激其生长。 1.3 对动物性水产饵料进行营养强化一些用于投喂鱼虾等幼体的动物性饵料如轮虫、卤虫、桡足类和枝角类等水产养殖次级饵料生物，相当于婴儿食品，其本身缺乏足量的DHA,但在投喂之前，可先用富含PUFA 的裂殖壶藻进行营养强化，提高次级饵料的营养值，从而达到促进鱼虾生长、提高存活率等效果（Takashi Yamasaki 等，2007）。 以经过裂殖壶藻强化的卤虫喂养半滑舌鳎稚鱼的研究发现，其体长、体重、碱性磷酸酶和类胰蛋白酶活力以及T3和T4水平等都显着优于对照组（马静等，2012）。通过采用裂殖壶藻对褶皱臂尾轮虫进行营养强化研究也表明，添加量为80 mg/L时，12 h 后轮虫体内的DHA/FA 值为13.44%,干燥轮虫粉中DHA 含量为8.14 mg/g, 与对照组相比轮虫密度增长
酵母菌的繁殖
★根据能否进行有性繁殖，可将酵母菌分为： ●假酵母：只有无性繁殖过程。 ●真酵母：既有无性繁殖，又有有性繁殖过程。 1、芽殖 是yeast无性繁殖的主要方式。 一个酵母能形成的芽数是有限的，（平均24个） 出芽方式： 多边出芽、两端出芽、三边出芽、单边出芽。 环境适宜时，可出现假菌丝 芽殖过程： 母细胞形成小突起（A—D） 核裂（E—G） 原生质分配（H—I） 新膜形成（J—K） 形成新细胞壁（L） 出芽痕和诞生痕： 酵母出芽繁殖时，子细胞与母细胞分离，在子、母细胞壁上都会留下痕迹。在母细胞的细胞壁上出芽并与子细胞分开的位点称出芽痕，子细胞细胞壁上的位点称诞生痕。由于多重出芽，致使酵母细胞表面有多个小突起。 ◆芽痕 ◆假菌丝: Saccharomyces cerevisiae的芽殖过程 有的酵母菌进行芽殖后，长大的子细胞不与母细胞立即分离，并继续除芽，细胞成串排列，这种菌丝状的细胞串就称为假菌丝。假菌丝的各细胞间仅以狭小的面积相连，呈藕节状。而霉菌的菌丝为真菌丝，即相连细胞间的横隔面积与细胞直径一致，呈竹节状的细胞串，称为真菌丝。 借细胞横分裂法繁殖,与细菌类似.如Schizosaccharomyces octosporus（八孢裂殖酵母）。进行裂殖的酵母菌种类较少. 2、裂殖； 掷孢子（ballistospore）是掷孢酵母属等少数酵母菌产生的无性孢子，外形呈肾状。这种孢子是在卵圆形的营养细胞上生出的小梗上形成的。孢子成熟后通过一种特有的喷射机制将孢子射出。因此，如果用倒置培养皿培养掷孢酵母并使其形成菌落，则常因其射出掷孢子而可在皿盖上见到由掷孢子组成的菌落模糊镜像。 此外，有的酵母如Candida albicans等还能在假菌丝的顶端产生厚垣孢子。产生掷孢子等无性孢子 适宜的条件下，二倍体细胞减数分裂形成子囊孢子殖。 1、有性繁殖的过程：一般通过邻近的两个性亲和性不同的细胞各自伸出一根管状的原生质突起，随即相互接触、局部融合并形成一个通道，再经过质配、核配形成双倍体细胞——接合子。接合子进行减数分裂，形成4个或8个子核，每一个子核和周围的细胞质一起，在其表面形成孢子壁后就形成子囊孢子，形成子囊孢子的细胞称为子囊。一般一个子囊可产生4-8个子囊孢子。孢子数目、大小、形状因种而异。 酵母的二倍体营养体细胞
植物病原真菌概述
第三章植物病原真菌—概述 真菌（Fungi）是一类真正具有细胞核的异养生物。营养体通常是丝状分支的菌丝体，细胞壁的主要成分是几丁质或纤维素，无根、茎、叶的分化，通过产生各种类型的孢子进行有性生殖或无性繁殖。 与人类的关系：有机物分解利用；食用、药用；食品工业；医学工业：青霉素；动植物产品霉变和腐败；人的疾病，植物病害。 五界分类系统：原核生物界（Monera）、原生生物界（Protista）、植物界（Plantae）、真菌界（Fungi）和动物界（Animalia）。 第二节真菌的一般性状 （一）、真菌主要特征 1、真核生物 2、营养体多为分支的丝状体，细胞壁主要成分几丁质，没有根、茎、叶分化。 3、繁殖产生有性孢子和无性孢子 4、营养方式异养 （二）真菌营养体 真菌典型的营养体是很细小而且分支的丝状体，单根菌丝成为菌丝（hypha），相互交织成的菌丝集合体称为菌丝体（mycelium）。 （三）菌丝的变态 1、吸器（haustorium）短小分支，从寄主细胞内吸收养分的菌丝变态结构，不穿破寄主原生质膜，主要功能是增加寄生真菌吸收营养的面积，提高自寄主细胞吸收养分的效率。 2、附着胞（appressorium）是植物病原真菌孢子萌发形成的芽管或菌丝顶端的膨大部分，常分泌黏液而牢固地附着在寄主表面，同时其下方产生侵入钉穿透寄主角质层和细胞壁。 3、假根（rhizoid）真菌菌体的特定部位长出多根有分支的根状菌丝称作假根，可以伸入基质内吸取养分，并固着菌体。如根霉属（Rhizopus）。 4、附着枝（Hyphopodium）菌丝两侧长出1-2各细胞的耳状结构，吸收营养和固定菌体的功能。 5、菌环和菌网 捕食性真菌常由菌丝分支特化成菌丝或菌网组织来捕捉线虫等小动物，然后再由菌丝侵入线虫体内吸取营养。
酵母菌的生活史
酵母菌的生活史 上代个体经一系列生长、发育阶段而产生下一代个体的全部过程，称为该生物的生活史或生命周期。 各种酵母的生活史可分为三种类型： 1. 单倍体型 2. 双倍体型 3. 单双倍体型 1、单双倍体型 单双倍体型 以啤酒酵母为代表 特点：单倍体营养细胞和双倍体营养细胞均可进行芽殖。营养体既可以单倍体形式也可以双倍体形式存在；在特定条件下进行有性生殖。 单倍体和双倍体两个阶段同等重要,形成世代交替 2、单倍体型 单倍体型 以八孢裂殖酵母为代表 特点:营养细胞是单倍体；无性繁殖以裂殖方式进行；双倍体细胞不能独立生活，因为双倍体阶段短，一经生成立即减数分裂。 3、双倍体型 以路德类酵母为代表 特点：营养体为双倍体，不断进行芽殖，双倍体营养阶段长，单倍体的子囊孢子在子囊内发生接合。单倍体阶段仅以子囊孢子形式存在，故不能独立生活。 （六）上面酵母与下面酵母 并非分类学上的名称，而是在啤酒酿造业中根据酵母菌在容器内的情况而对酵母菌株进行的分类： 上面酵母——在发酵过程中细胞浮游在液体上层，是较活跃的发酵剂； 下面酵母——在发酵过程中细胞沉于容器底层，是较缓慢的发酵剂。 （七）噬杀酵母 噬杀酵母——是指某些在其生长繁殖过程生长能向菌体外分泌一种称作噬杀毒素的毒性蛋白的酵母菌株。噬杀酵母对噬杀毒素具有免疫力。噬杀酵母能杀死同族及亲缘酵母，这种特性为一般物质抗生物质所没有。 中性菌株——既不能杀死别的酵母，也不能被噬杀酵母杀死的酵母菌株。 敏感酵母——可以被噬杀酵母杀死的酵母菌株。 酵母菌的代表属 1、酵母菌属 例：啤酒酵母（Saccharomyces cerevisiae) 2、裂殖酵母属(Schizosaccharomyces spp.) 3、假丝酵母属(Candida spp.) 例：热带假丝酵母(Candida tropicalis)、解脂假丝酵母和产朊假丝酵母 4、球拟酵母属 5、红酵母属
酵母菌生殖方式要点
资料14-1酵母菌的生殖方式 (1) 资料14-2几种促进插枝生根的生长调节物质及其使用方法 (2) 资料14-3果树为什么要用嫁接方法生殖而不用种子生殖 (3) 资料14-4植物组织培养在生产实践上的应用 (3) 资料14-5仙人掌类的嫁接 (5) 资料14-6无性生殖的种类 (6) 资料14-7削取不带木质部的芽接接穗的方法 (6) 资料14-8水螅的生殖 (7) 资料14-1酵母菌的生殖方式 酵母菌多数为单细胞，呈卵圆形或圆柱形，比细菌大得多，直径大约为5～6μm。酵母菌具有细胞壁、细胞膜、细胞核、液泡、线粒体及各种贮藏物质。酵母菌的生殖方式有多种类型，下面介绍几种有代表性的生殖方式： 1.无性生殖 芽殖酵母菌主要是通过出芽的方式进行无性生殖。在良好的营养和生长条件下，酵母菌生长迅速。这时可以看到所有细胞都长有芽体，而且在芽体上还可形成新的芽体，所以经常可以见到呈簇状的细胞团。芽体的形成过程是这样的：在母细胞形成芽体的部位，由于水解酶对细胞壁多糖的分解，使细胞壁变薄。大量新细胞物质--核质（染色体）和细胞质等在芽体起始部位上堆积，使芽体逐步长大。当芽体达到最大体积时，它与母细胞相连部位形成了一块隔壁。隔壁的成分是由葡聚糖、甘露聚糖和几丁质构成的复合物。最后，母细胞与子细胞在隔壁处分离。于是，在母细胞上就留下一个芽痕，而在子细胞上就相应地留下了一个蒂痕。根据酿酒酵母细胞表面留下芽痕的数目，就可确定细胞曾产生过的芽体数，因而也可用于测定该细胞的年龄。裂殖酵母菌的裂殖与细菌的裂殖相似。其过程是细胞伸长，核分裂为二，然后细胞中央出现隔膜，将细胞横分为两个大小相等的、各具有一个核的子细胞。进行裂殖的酵母菌种类很少。 2.有性生殖 有性生殖的方式是指一般通过邻近的两个性别不同的细胞各自伸出一根管状的原生质突起，随即相互接触、局部融合并形成一个通道，再通过质配、核配和减数分裂，形成4个或8个子核，每一个子核与其附近的原生质一起，在其表
Nat Genet：真菌群体重测序解析裂殖酵母进化
1 2 4 Location unknown (59)816 25 14 47 13 3 15 105P C 2 –5 首页 科技服务 医学检测 科学与技术 市场与支持 加入我们 关于我们 提供领先的基因组学解决方案 Providing Advanced Genomic Solutions 2015年3月的Nature Genetics报道了对裂殖酵母基因型及表型的多样性研究； 珍贵的取材，深入的数据解析， 给我们提供了真菌群体重测序数据挖掘的范本。 研究背景 裂殖酵母（Schizosaccharomyces pombe）是真核生物研究中的重要模式生物，但是对于这个菌株的进化历史，还没有系统的研究。作者汇集了100年内收集到的161株野生裂殖酵母，通过重测序的手段，多角度深入挖掘了酵母的进化相关信息，特别 是在地理分布、驯化起源、及表型关联方面获得了突破性的进展。 讨 论 依托大规模真菌样本的重测序和进化研究，是了解真菌进化史、传播规律，区分真菌的致病机制，解读真菌基因型与表型间关联的有效手段。这篇裂殖酵母群体研究的文章，作为优秀的真菌 群体研究范本，对于真菌大规模测序数据挖掘，有着重要的指导意义。 研究方法 取 材建 库测 序信息分析 100年时间内收集到的161株野生裂殖酵母菌株小片段文库 PE54/PE100测序 ≥30X SNP及InDel检测，基因型多样性分析、重组及连锁不平衡分析、群体结构分析、进化及起源节点估计、全基因组关联分析。 R P 4.85 D i s t a n c e f r o m r o o t 4.75 4.65 4.55 1920 1940 1960 1980 Collection date 2000 6 P o s t e r i o r p r o b a b i l i t y d e n s i t y 5 4 32 1 080 00 B C E 60 00 B C E 40 00 B C E 20 00 B C E Estimated tree root date Neolithic EGY HAN ECP GRE 0 E 2000 E 010M i x e d -m o d e l –l o g 10 (P v a l u e ) R e g r e s s i o n –l o g 10 (m e t a P v a l u e )N u m b e r o f s i g n i f i c a n t v a r i a n t s 98765 6 42080 400 123 40120SNP AA Indel 12 345 1 23401 20 1 2 34 5 1 234Chr. 3 Chr. 1 Chr. 2 Chromosome position (Mb) 01 20 12345LIQ/M1LIQ/M2SHAPE/M SHAPE/A 阅读原文>>
啤酒酵母菌介绍(附图)
酵母菌(Yeast) 1.偏酸性含糖环境 一、酵母菌的形态 P384 大多数为单细胞，一般呈卵圆形、圆形、圆柱形或柠檬形。大小约1～5×5～30μm 。最长的可达100 μm 。 ● 假菌丝：有些酵母菌进行一连串的芽殖后，长大的子细胞与母细胞并不立即分离，其间仅以极狭小的接触面相连，这种藕节状的细胞串称为“假菌丝”。 ● 假丝酵母：有些酵母菌细胞与其子代细胞连在一起成为链状，称为假丝酵母。 2、酵母菌的大小 ● 酵母菌细胞直径一般约为细菌的10倍。 二、酵母菌的细胞结构 细胞核线粒体光滑内质网 糙面内质网 高尔基体 溶酶体液泡 线粒体 液泡 中心体 中心粒 表面突起 核糖体 微管 胞饮作用细胞质微丝溶酶体 胞饮作用 1、细胞壁P66 机械强度 网状结构 酶 ? 细胞壁组成说明： ? 不同种、属酵母菌的细胞壁成分差异很大，且并非各种酵母菌都含有甘露聚糖。 点滴酵母（Saccharomyces )、荚膜内孢霉（Endomyces capsulata )的细胞壁成分以葡聚糖为主，只含少量甘露聚糖；一些裂殖酵母（Schizosaccharomyces spp.）则仅含葡聚糖而不含甘露聚糖，取代甘露聚糖的是含有较多的几
3、细胞核P70 真核。遗传信息的主要贮存库。 4、细胞器P71 （1）、线粒体（2）、液泡（3）、微体（4）、内质网 三、酵母菌的群体特征 1、固体培养基培养特征（菌落） 形状:圆形，大而厚 表面:光滑有突起或皱缩 质地:粘稠、湿润、透明或较透明、易挑取、质地均匀 颜色: 颜色一致,多为乳白色，少数红色 边缘:整齐 2、液体培养特征 有的长在培养基底部并产生沉淀；有的在培养基中均匀生长；有的在培养基表面生长并形成菌膜或菌醭，其厚薄因种而异，有的甚至干而变皱。 四、酵母菌的繁殖方式和生活史
裂殖酵母的比较功能基因组学
裂殖酵母的比较功能基因组学 裂殖酵母菌属包括粟酒裂殖酵母(S.pombe)，八胞裂殖酵母(S. octosporus)，嗜冷裂殖酵母(S. cryophilus)和刺参裂殖酵母(S. japonicus)。它们占了子囊菌纲的基本分支并且是真核细胞生物学的一个重要模型。比较这些基因组的注释，我们发现了濒临灭绝的转座子并展开了自由转座子着丝粒方面的创新。表达分析确定了减数分裂基因在营养生长期服从反义转录，这表明了它们严格的调控机制。此外，反式作用调节因子可控制扩展功能模块范围内的减数分裂和应激反应的新基因。基因的内容和调控的差异可以解释为什么不同于酵母菌亚门的芽殖酵母，裂殖酵母不能使用乙醇作为主要的碳源。这些分析阐明了裂殖酵母的基因组结构和基因调控并为整个裂殖酵母菌属的研究提供了工具。 裂殖酵母菌种裂殖酵母在具有与众不同的生活史的子囊菌（图1A）里形成了一个广泛而古老的群体(1)。裂殖酵母作为单倍体优先生长，以二分裂而不是不对称出芽的方式增殖，并且已形成了一种独立于芽殖酵母（酵母菌亚门）的单细胞生物生活方式。裂殖酵母与后生动物拥有许多相同的重要生物过程，包括染色体的结构和代谢——染色体相对较大，多重复性的着丝粒，低复杂度的复制起点，异染色质组蛋白甲基化修饰，染色质异染色质蛋白，小分子干扰RNA(siRNA)调控的异染色质，和TRF家族端粒结合蛋白——G2/ M细胞周期调控，细胞分裂，线粒体的翻译密码子，RNA干扰(RNAi)途径，信号传导体途径以及剪接体的组成。这些特点在芽殖酵母中缺失或高度分化。一般情况下，比起其它的子囊菌纲，裂殖酵母的核心同源基因更接近于后生动物(2)。裂殖酵母也在碳源代谢进化上产生创新，包括葡萄糖有氧发酵成乙醇(3)。这种趋同进化的芽殖酵母酿酒酵母为复杂表型的进化提供了深入了解。 粟酒裂殖酵母被广泛使用作为研究细胞中基本生物过程和与人类疾病相关基因的模型。为了更好地了解它的进化和自然历史，我们比较了所有已知的裂殖酵母——粟酒裂殖酵母，八胞裂殖酵母，嗜冷裂殖酵母和刺参裂殖酵母——的基因组和转录。 基因组序列和系统发育。通过使用clone-based和clone-free全基因组鸟枪法(WGS)（表S1），我们测序和组装了八胞裂殖酵母，嗜冷裂殖酵母和刺参裂殖酵母的基因组。每个基因组约11.5 Mb大小。八胞裂殖酵母和嗜冷裂殖酵母是38%GC，刺参裂殖酵母是44%。通过比较，粟酒裂殖酵母的基因组是12.5 Mb的大小和36% GC。我们组装八胞裂殖酵母和刺参裂殖酵母支架成三个全长的染色体，其质量类似于已形成的粟酒裂殖酵母的基因组（图1B和图S1、S2，以及表S2和S3），并使用WGS数据鉴定了端粒序列(4)。在刺参裂殖酵母(GTCTTA)，八胞裂殖酵母(GGGTTACTT)，和嗜冷裂殖酵母(GGGTTACTT)中假定的端粒酶RNA位点，端粒重复符合一个半的重复单元的序列，类似于粟酒裂殖酵母(GGTTAC)中的结构(5)。通过使用这些基序，我们扩展刺参裂殖酵母和八胞裂殖酵母染色体到亚端粒和端粒序列(4)。 从440个单拷贝核心同源基因中，我们构建了子囊菌门裂殖酵母纲的系统发育（图1A和图S3），将单系类群的裂殖酵母物种作为一个基础的姐妹群分化支，其中包括丝状真菌（盘菌亚门）和芽殖酵母（酵母菌亚门）。当我们比较粟酒裂殖酵母和刺参裂殖酵母时，发现了在所有的1:1同源基因间，氨基酸序列同源性平均为55%，类似于人与头索动物文昌鱼（表S4）。对于最密切相关的物种，嗜冷裂殖酵母和八胞裂殖酵母，1:1的同源基因拥有85%的同源性，类似于人类和狗。粟酒裂殖酵母的遗传多样性低。通过全基因组鸟枪法分析，将粟酒裂殖酵母972菌株与两个表型不同的菌株粟酒裂殖酵母NCYC132菌株和粟酒裂殖酵母变