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细胞工程复习提纲(附答案)

0 细胞培养与单克隆抗体技术

（1）细胞培养定义：细胞培养（cell culture）是指在人工提供的条件下细胞在生物体外进行的生长。

（2）原代培养，原代细胞，传代细胞：

在正常细胞培养中，从体内取出组织细胞接种培养到再一次转接重新培养的一段时间，称为原代培养（primary culture），原代培养的细胞称原代细胞。原代细胞生长分裂并不旺盛，形状与体内细胞相似。转接后的细胞称为传代细胞，传代细胞分裂增殖旺盛，能保持一致的二倍体核型。

（3）细胞群体生长的四个阶段：潜伏期、对数生长期、稳定期、衰亡期。

（4）无最高分裂次数限制的细胞包括哪些：转化细胞，肿瘤细胞。

（5）动物细胞培养对环境的要求包括哪些条件：

1)培养温度

适宜的培养温度是细胞在体外生长繁殖的必要条件，不同种类的细胞对温度的要求并不一致。

(例如哺乳类细胞的最适温度37℃，鸟类细胞39-42℃，昆虫类细胞25-28℃，冷水鱼细胞20℃，温水鱼26℃。相对而言恒温动物的细胞对温度要求更为严格)

2) pH值

大多数细胞都适于在pH7.2-7.4 的范围内生长，pH高于7.6或低于6.8都不利于细胞生长。

3)培养液渗透压

一般动物细胞适宜的渗透压范围适260-320mOsm/L。

4)溶氧水平(DO)

（6）用于细胞解离的消化液种类：胰蛋白酶（trypsin）乙二胺四乙酸二钠（EDTA）、链霉蛋白酶、骨胶原酶、透明质酸酶。

（7）台盼蓝染色检测细胞活力的原理：细胞损伤或死亡时，台盼蓝可穿透变性的细胞膜，与解体的DNA 结合，使其着色。而活细胞能阻止染料进入细胞内。故可以鉴别死细胞与活细胞。

（8）贴壁细胞的一般生长过程：

游离期一般细胞都可在24小时内贴壁，如果细胞状态不好或者是濒死细胞，培养基pH 值不当或培养瓶不清洁等都不利于细胞贴壁。

繁殖期球型悬浮细胞贴壁后延展成极性细胞，经过一段停滞期开始生长分裂。

退化期细胞长满培养瓶壁达一定密度后，随着营养物质的消耗和代谢物的积累，细胞开始退化。镜检时轮廓变的粗糙，胞内有膨胀的线粒体颗粒堆积。如不及时传代，细胞会从瓶壁上脱落。这是因为状态良好的细胞，轮廓形态不十分清晰，较透明；而生长不良的细胞轮廓变清晰，细胞间隙增大，胞内有空泡、脂滴、颗粒等出现。

（9）细胞培养中常见污染：

1）霉菌污染较易发现，镜检发现菌丝;

2）细菌污染时培养基变混浊，镜检可发现细菌;

3）PPLO（支原体类胸膜炎生物体）污染不易发现:PPLO直径0.25-1um，能通过除菌滤膜。PPLO污染的细胞一般仍能生长，但对某些实验会造成影响。

4）其他种类细胞、病毒以及原生动物也是细胞培养中主要的污染因素。

（10）冷冻保护剂的作用原理：

冷冻保护剂的作用是结合细胞中的水分子，减少细胞内冰晶分子的形成，以免对细胞造成伤害，细胞内冰晶形成越少，伤害越轻，细胞活性就越好。

（11）冷冻及复苏细胞的“要领”：慢冻快融

（13）“HAT培养基”筛选融合细胞的原理：

原理：正常细胞合成DNA有两条途径：主要途径与应急途径。氨基喋呤（A）可阻断主要途径中二氢叶酸到四氢叶酸的反应，野生型细胞可通过应急途径，利用次黄嘌呤（H）和胸腺嘧啶脱氧核苷（T）合成DNA而不至于死亡。

应急途径需要两种酶——次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶（HGRPT）与胸腺嘧啶核苷激酶（TK），可将次黄嘌呤转换成嘌呤，胸腺嘧啶脱氧核苷转换成胸腺嘧啶核苷酸。

因此，在添加了次黄嘌呤（H）、氨基喋呤（A）及胸腺嘧啶脱氧核苷（T）的选择性培养基中，只有HGRPT+/TK+的野生型细胞才可能生存。

融合细胞的亲本细胞可选择HGPRT-或TK-的突变型细胞，在融合其他种类的野生型细胞后，通过互补回复HGPRT与TK的功能，因此仅融合细胞能够生存，而未融合的缺陷型亲本细胞死亡。

（14）现代免疫学的基础---“克隆选择理论”

该理论假定一种浆细胞只产生一种类型的免疫球蛋白分子，那么，从一个单克隆细胞产生的抗体分子就是单克隆的，并且这种单克隆抗体具有独特的均一结构。

（15）杂交瘤技术流程（综合）：从“免疫动物到”到“克隆化培养”的大概流程，注意淋巴细胞的取材来源。

1) 免疫动物

一般选纯系健康的8周龄BALB/C小白鼠作为免疫动物，少数用Lou系大鼠（除了啮齿类外，特殊情况下也有用人细胞的）。免疫抗原一般是各种病毒﹑细菌﹑癌细胞等。粗制的或者纯化的病毒抗原（1mg/mLPBS）可与福氏完全佐剂（Freund）等量混合制成乳剂。常规免疫方法有腹腔注射和皮下注射两种，每隔3-4天注射1次，连续3-4周后，检查抗体滴度效价。符合要求时，可通过尾静脉做最后一次加强注射以促进淋巴细胞的转化，提高其分泌抗体的能力。4-5天后。取脾脏分离淋巴细胞用于融合。

如果用其它抗原，如细菌或癌细胞等免疫，可将这些颗粒型抗原制成PBS悬液，腹腔注射。达到符合效价时，取出脾脏，用梳理脾脏法收集单个淋巴细胞以备融合。

一般情况下不能用人体进行免疫，但在某些特殊情况下可用发生过自然免疫的人的外周血﹑淋巴结﹑切除的脾脏制备淋巴样细胞。

2) 融合亲本细胞的准备

脾淋巴细胞：消毒动物表皮，无菌条件下取出脾脏，金属筛网过滤分离脾淋巴细胞，收集。骨髓瘤细胞：细胞生长状态检测。

3) 细胞杂交融合

4）分装培养

杂交融合的细胞一般5-6天后有新的细胞克隆出现，未融合的脾细胞和骨髓瘤细胞在培养5-7天后逐渐死亡。

5）抗体检测

两种细胞融合成功，杂交瘤细胞就会有抗体产生。及早检测新生抗体的特异性，进而分离并克隆符合要求的杂交瘤细胞十分重要。抗体的检测方法应该灵敏准确﹑简单快速。主要有抗原结合法和第二抗体法。

6）杂交瘤细胞的克隆

由于一种抗原具有多个抗原决定簇(EC)，因此融合的杂交瘤细胞可能会产生多种不同的单克隆抗体。必须及早检测﹑分离杂交瘤细胞，以便形成单克隆细胞扩大培养。克隆方法有有限稀释法和软琼脂法。

（16）单克隆抗体的用途

通过杂交瘤技术制备的各种单克隆抗体，目前已经广泛应用于生物及医学领域的各个学科中。

1）临床诊断及治疗

细胞毒素、抗生素、放射性同位素等结合制成细胞毒药物选择性的杀伤癌细胞。

2）免疫学研究

单抗在免疫学上有很大的用途，可以用来区分鉴定各种抗原及抗原分子上的不同抗原决定簇，鉴定各种组织之间的相容性等。另外在免疫遗传学中可用于免疫球蛋白基因的定位及表达研究工作。单克隆抗体纯度高，特异性强而反应快，准确性好，已有商品化的单抗试剂盒出售，可对一些过敏性疾病查找过敏原（抗原检测），对癌症等一些疾病进行早期诊断。近年来，抗个体基因型抗原的抗体已被用于研究B细胞个体基因型与T细胞类个体基因型之间的相互作用。

3）生物学研究

应用于蛋白质表达的亚细胞定位、蛋白质大分子的纯化及荧光发光检测等研究。

杂交瘤技术的新发展：人杂交瘤单克隆抗体、基因工程抗体、T淋巴细胞杂交瘤

（14、15、16可能合为一道综合题）

干细胞技术

（1）胚胎干细胞概念，组织干细胞概念：

胚胎干细胞：是一类来自早期胚胎、原始生殖细胞或畸胎瘤组织等源于胚胎的干细胞。具有：在体外自我更新的能力；体外培养能稳定维持正常核型和发育全能性（或多能性）；可分化为外胚层、内胚层、中胚层来源的各种分化细胞，甚至参与个体发育。

组织干细胞指分布在成年个体内，具有构建或补充特定组织的功能的干细胞，如骨髓的造血干细胞等。

（2）胚胎干细胞研究的意义：

1）ES细胞是动物转基因的有效载体，是生命科学研究的重要材料。利用ES细胞作为基因改造的材料，更易于在细胞水平对转基因过程进行调控，再经过动物克隆途径，获得转基因动物。ES细胞作为一种特殊的细胞，在研究基因定位、基因表达及调控机制方面具有重要作用。

2）ES细胞在组织器官移植方面具有极大的医学前景，细胞来源于患者自身，因此不会存在免疫排斥反应。

（3）ES细胞体外培养的关键：

ES细胞体外培养的关键：早期胚胎细胞离体后极易分化，体外培养系统必须阻止其分化，维系其全能性或多能性。常用措施：饲养层细胞；特殊细胞的条件培养基；分化抑制因子（如白血病抑制因子）

（4）ES与EG细胞不同的细胞来源：

胚胎干细胞（Embryo stem cell, ES cell）一般指从早期胚胎的内细胞团（ICM）或原始生殖细胞(EG)培养得到的多能干细胞系。

以胚胎的原始生殖细胞为材料，体外培养建成了另一ES细胞系，称为EG细胞（embryonic germ cells）。

转基因动物

（1）转基因动物概念

转基因动物——指染色体稳定整合有外源基因的动物。

（2）胚胎干细胞转基因途径“正---负筛选”方案中，载体基因元件的排列原则（选择）

（3）转基因动物3大途径：受精卵显微注射途径；胚胎干细胞—嵌合体途径；细胞核移植—克隆动物途径

胚胎工程

（2）试管胚胎技术主要技术环节

卵母细胞的获取和体外成熟

精子体外获能

成熟卵母细胞与获能精子体外受精

受精卵体外培养和移植

细胞重组与动物克隆

（1）细胞重组概念：

所谓细胞重组就是把细胞内不同的组成部分（通常指细胞质与细胞核）加以分离，并在体外重新组合，以研究其在细胞生命活动中的功能。

（2）细胞可拆分为细胞核与细胞质两部分

（3）哺乳动物细胞核移植技术必须注意的两个关键因素：应选择卵母细胞而不是卵细胞作为受体、细胞周期的重要性

（4）哺乳动物细胞核移植根据核供体材料发育程度不同可分为哪四类

胚胎细胞核移植、胚胎干细胞核移植、胎儿成纤维细胞核移植、体细胞核移植

（5）“克隆动物”的概念

动物克隆是一种通过核移植过程进行无性繁殖的技术。不经过有性生殖过程，而是通过核移植生产遗传结构与细胞核供体相同动物个体的技术，就叫做动物克隆。动物克隆包括细胞核移植产生的“克隆”与通过胚胎分裂形成的“克隆”。

（6）了解卵裂、桑葚胚、囊胚、原肠胚的发育次序

卵裂→桑葚胚→囊胚→原肠胚

（7）G0期细胞的来源

1）细胞于低血清水平中培养，促使其进入G0或G1期。

2）采用支柱细胞、神经细胞、颗粒细胞作为供体，成体支柱细胞、神经细胞不分裂而处于G0期，卵母细胞周围的颗粒细胞有90%以上处于G0/G1期，由于它们的形态很容易区别，因此无须体外培养就可从新鲜的动物组织中分离。

蛋白质表达系统

（1）真核细胞表达系统包括：酵母表达系统、昆虫细胞表达系统、哺乳动物细胞表达系统。

（2）真核表达系统的意义（优点及用途）：

优点：可对蛋白质进行一定程度的正确折叠与修饰，适用于一些结构复杂且高度糖基化、磷酸化修饰的蛋白质。用途：蛋白质真核细胞表达技术也可用于真核细胞生命活动的分子机理研究，如: 蛋白质在细胞内的功能; 信号传导; 细胞代谢; 基因表达调控.

（3）甲醇可诱导巴氏毕节酵母表达外源蛋白的原理（选择）：

甲醇作为诱导物激活AOX1（甲醇氧化酶）启动子，使AOX1启动子下游的外源蛋白基因表达。

（4）外源DNA 通过非病毒途径转染动物细胞的方法包括哪些：

常用的包括磷酸钙共沉淀法、DEAE-葡聚糖法、阳离子聚合物法、阳离子脂质体法、显微注射法、电转法、基因枪等。

（5）阳离子脂质体法的原理：

阳离子脂质体具有一阳离子头部与长的脂性尾部。阳离子部分可吸附核酸，并使电性趋于正电性或中性，利于电负性的细胞膜接近。脂性部分促进与细胞膜的融合或细胞内吞。关键在于确定适宜的脂质体/DNA配比。

植物细胞工程

（1）植物基因转化的主要途径：农杆菌质粒介导基因转化、植物病毒载体介导基因、DNA 直接导入法、种质系统介导基因转化。

（2）农杆菌侵染植物并转移DNA 的特点：（菌体本身并不进入植物细胞*）农杆菌侵染时，细菌通过伤口进入植物组织，但菌体本身并不进入植物细胞，只是把Ti质粒的DNA片段导入植物细胞的基因组中。

（3）农杆菌转化单子叶植物难度主要在于：（1）不是农杆菌天然宿主；（2）生理生长特点的差异

（4）烟草最主要转化方法：叶盘法；拟南芥最主要转化方法：花浸法。

（5）基因枪种类：

根据基因枪的动力系统可分为三种类型：

第一类以火药爆炸力为加速动力，也是出现最早的一种类型；第二类以高压气体为动力；第三类在高压电场中加速。

（6）瞬时表达与稳定表达：（综合）

1）瞬时表达：转化的外源基因通常在数小时后就能检测到表达产物，并在1-2天内达到高峰，随后又逐渐降低，这种短时间内的外源基因表达称为“瞬时表达”。瞬时表达是未整合的外源基因在游离状态下的表达形式。

瞬时表达的应用：（1）快速判断农杆菌的侵染能力，优化转基因条件；（2）研究启动子、增强子、内含子对表达调控的作用，并可做精细结构的分析。（3）快速检测基因的体内功能，如双分子互作技术，快速鉴定两种蛋白质的互作情况。

瞬时表达方法相对简单、时间快，但受转染效率、DNA质量等因素影响，实验结果的重复性、稳定性需要考虑。

2）稳定表达：是指外源基因整合到核基因组DNA分子上并能稳定的遗传。稳定表达的特点：（1）表达时间长；（2）分子遗传检测可证明外源DNA已整合到植物基因组中；（3）能够遗传给子代，并符合分离规律。（4）某些外源基因的表达产物可导致宿主细胞裂解而无法进行永久表达。

（7）农杆菌转化法的优点：百度一下，你就知道。

农杆菌Ti质粒转化系统与其他基因转化体系相比，具有许多突出的优点：①该转化体系是模仿或称之为利用天然的转化载体系统，成功率高，效果好；②农杆菌Ti质粒转化系统的机理研究得最清楚，方法最成熟，应用也最广泛；③农杆菌Ti质粒转化系统转化的外源基因以单拷贝为多数，遗传稳定性好，并且多数符合孟德尔遗传规律，因此转基因植株能较好

地为育种提供了中间选育材料；④农杆菌Ti质粒转化系统操作比较容易，需要的仪器设备简单，易于推广。

（8）转基因材料的一般培养过程：筛选、预分化、分化、壮苗

（9）植物基因沉默现象在自然界中的意义。

生物体在长期的进化发展中，可通过RNA沉默这一机制来维持自身的基因组稳定。

抵制病毒感染：自然界中，病毒外源核酸进入植物细胞后，会产生dsRNA复制中间体，这种dsRNA就可以诱导植物产生特异性的RNA沉默机制,抵抗病毒感染。

抑制外源基因表达：转基因如果反向插入到某一启动子的下游，产生的转录本就可以和内源转录本一起，形成dsRNA,从而引发RNA沉默，抑制相应基因的表达。

染色体工程

（1）人工诱导动物多倍体通常包括三倍体和四倍体。（已问过老师，就这样填）（2）是否雌核发育的后代都是雌性个体？

在同型雌性配子的物种中，雌核发育的所有后代，都应该是雌性个体（XX）；而在异型雌性配子（X或Y）的物种中，雌核发育的后代，可能是雄性个体，也可能是雌性个体。

（3）人工诱导植物雄核发育其实就是花粉培养。

（4）染色体工程的用途？（综合）

（包括多倍体几个例子；雄核雌核发育的意义等等。）

1）由于多倍体动物具有生长速度快、成活率高及抗病能力强等特点，所以人工诱导多倍体、改善动物经济性状的研究极具应用价值。现代人工诱导多倍体技术已经成为低等经济动物育种的主要技术之一，其成果已应用于生产实践，取得了显著的经济效益。许多人工诱导的多倍体动物如两栖类、鱼类、贝类等都具有良好的生存能力和生长力。如草团、锦鱼、兰罗非鱼、斑点叉尾鲴及合浦珍珠母贝等的三倍体均比二倍体生长快。

2）人们对多倍体动物肉质、含氧量、抗病性和感觉特性等性状进行了研究。结果表明，三倍体虹鳟的肉质确实优于二倍体且抵抗传染性造血器官坏死病病毒的能力较强；三倍体大西洋鲑鱼耐受低氧环境。总之，就某些经济品种来说，多倍体较二倍体具有较好的经济价值。

3）雌核发育具有产生单性种群的能力，还能迅速的产生同源型二倍体克隆，为基础生物学研究提供了一种优越的研究品系，因为采用异源型二倍体真核细胞做遗传学研究有许多不便。

4）高等植物单倍体化易于发现隐性突变，可快速建立等基因系，可用于进行染色体组分析，制备单体、缺体和其他非整倍体。

5）植物多倍体一般具有营养器官及花朵、果实的巨型性，抗逆性强以及合成代谢成分含量高等特点。因此在观赏植物、经济作物以及珍贵药用植物的育种中占有重要地位。

6）在一些情况下，无籽是人们的目标。例如若干品种的苹果、香蕉、桑树、甜菜和西瓜等。而种子败育是三倍体植株的主要特征，所以三倍体对这些植物是有益的。三倍体可产生更好的性状，例如三倍体颤杨的木材能制造出质量更好的纸浆，而且这种植物很容易进行营养繁殖，也不存在种子败育的严重问题。此外，通过三倍体获得的三体，是基因进行染色体定位的重要材料。

控制工程基础应掌握的重要知识点资料讲解

控制工程基础应掌握的重要知识点

控制工程基础应掌握的重要知识点控制以测量反馈为基础，控制的本质是检测偏差，纠正偏差。自动控制系统的重要信号有输入信号、输出信号、反馈信号、偏差信号等。输入信号又称为输入量、给定量、控制量等。自动控制按有无反馈作用分为开环控制与闭环控制。自动控制系统按给定量的运动规律分为恒值调节系统、程序控制系统与随动控制系统。自动控制系统按系统线性特性分为线性系统与非线性系统。自动控制系统按系统信号类型分为连续控制系统与离散控制系统。对控制系统的基本要求是稳定性、准确性、快速性。求机械系统与电路的微分方程与传递函数拉普拉斯变换：拉普拉斯反变换拉普拉斯变换解微分方程传递函数是在零初始条件下将微分方程作拉普拉斯变换，进而运算而来, 传递函数与微分方程是等价的, 传递函数适合线性定常系统。 ) a s (F )t (f e at +→- ) s (F e )T t (f TS -→-

典型环节传递函数：比例环节K 惯性环节一阶微分环节振荡环节二阶微分环节传递函数框图的化简闭环传递函数开环传递函数误差传递函数闭环传递函数是输出信号与输入信号间的传递函数。误差传递函数又称偏差传递函数，是偏差信号与输入信号间的传递函数。系统输出信号称为响应，时间响应由瞬态响应与稳态响应组成。系统的特征方程是令系统闭环传递函数分母等于零而得。特征方程的根就是系统的极点。 1S +τ 1S 2S 22+ζτ+τ

一阶惯性系统特征方程为：系统进入稳定状态指响应c(t)进入并永远保持在稳态值c(∞)的允许误差范围内，允许误差常取2%或5% 调整时间特征方程为：特征方程的根（即极点）为： ????? ±=?±=?=% 2,T 4%5, T 3t s n ω无阻尼自由振荡频率ζ 阻尼比0 S 2S 2n n 2=ω+ζω+一对虚极点无阻尼,j S ),(0n 2,1ω±==ζ不能用系统振荡会越来越大,,0<ζ0 1T S =+

新课标高中生物选修三2.1植物细胞工程导学案

2.1 植物细胞工程一、知识与技能目标 1、简述植物组织培养和体细胞杂交技术，掌握它们的原理、过程及关键环节。 2、了解植物繁殖的新途径及作物新品种的培育的具体方法。二、过程与方法目标 1、尝试进行植物组织培养，运用细胞的基础知识，分析植物细胞工程的理论基础；收集植物细胞工程的相关资料并进行整理、分析、交流。 2、以植物细胞工程的基本技术为基础，弄清楚其在生产实践中的实际应用。三、情感与价值观目标 1、体验植物组织培养技术，讨论植物细胞工程的社会意义及细胞学基础理论与技术开发之间的关系。 2、搜集相关的实际技术应用，积极参加各种技术应用的讨论，体验现代生物科技的新进展带来的社会效益，激发学习生物学的兴趣。四、教学过程 1、植物细胞的基本结构包括、、。 2、植物细胞主要的增殖方式是，细胞分化是指，_______________________________________________________________________________ _________________________________________________________________________。原因是。 3、全能性是指，已分化的细胞表现为全能性的原因是。 4、织物组织培养就是在和条件下，将培养在上，给予条件，诱导其产生形成完整的植株。 5、植物体细胞杂交就是将细胞在一定条件下融合成，并把它培养成的技术，优点是。 6、生物体可遗传变异类型包括、、。

根据变异类型育种的方法有、、、等。 7、植物的微型繁殖技术指，_____________举例_________________________________________________________。 8、获得脱病毒的植株的方法。 9、神奇的人工种子指。 10、生物育种技术比较技术原理优点缺点诱变育种基因突变提高生物变异的频率，使后代变异频率较快稳定；可大幅度改良某些性状，缩短育种进程盲目性大，需大量处理供试材料杂交育种基因重组使位于不同个体的优良性状，集中于一个个体周期长，难以克服远缘杂交的障碍单倍体育种染色体变异获得个体均为纯种，明显缩短育种年限技术复杂，须与杂交育种配合多倍体育种染色体变异器官大，提高产量和营养成分适用于植物，动物方面难以开展基因工程育种分子遗传学原理打破物种界限，定向地改造生物遗传性状细胞工程育种细胞生物学和分子生物学原理克服远缘杂交不亲和的障碍；扩大了用于杂交的亲本组合范围；定向改变生物遗传性状不能按人们的需要表现出亲代的优良性状

细胞工程复习资料1

细胞工程知识点第一章细胞工程 1、细胞工程：是指应用细胞生物学和分子生物学的原理和方法，通过某种工程学手段，在细胞整体水平或细胞器水平，按照人们的意愿来改变细胞内的遗传物质以获得新型生物或获得细胞产品的一门综合科学技术。操作水平：细胞整体水平或细胞器水平。目的：定向改变遗传物质或获得细胞产品。理论基础：细胞全能性发酵工程目的：定向地改造菌种,大量生产微生物菌体或代谢产物。 2、重要应用：快速繁殖；种苗脱毒；动物胚胎工程快速繁殖优良/濒危品种；利用动植物细胞培养生产活性产物/药品（动物细胞融合---单克隆抗体；植物细胞大量培养----次生代谢产物）；新型动植物品种的培育；供医学器官修复或移植的组织工程；珍稀动植物资源的保存与保护 3、生物技术包括：基因工程、细胞工程、酶工程、发酵工程四个方面。动物细胞工程包括：细胞培养技术（组织培养、器官培养）；细胞融合技术；胚胎工程技术（核移植、胚胎分割等）；克隆技术（单细胞系克隆、器官克隆、个体克隆）。植物细胞工程：植物组织/器官培养技术；细胞培养技术；原生质体融合与培养技术；亚细胞水平的操作技术等。 4、细胞工程与基因工程相比：前者是细胞水平或细胞器水平上生物技术，后者是分子水平上的生物技术。（如克隆多莉羊技术是细胞水平上的技术，培育抗虫棉是分子水平上的技术。）细胞工程是基因工程的基础第三章细胞工程实验室及实验基本操作 1、实验室包括：基本操作室、无菌操作室、培养室、鉴定分析室、温室等。实验室应满足清洗、无菌操作、培养基制备、贮藏和培养鉴定等多方面工作的要求。基本操作室包括：洗涤间、灭菌间、贮藏间、培养基配制间。无菌操作室分为：缓冲准备区、接种区。 2、消毒灭菌的方法：物理方法：干热(烘箱)、湿热、过滤（0.25微米）、紫外灯、超声波等。化学方法：使用灭菌剂或抗菌素，如酒精、次氯酸钠、升汞、漂白粉、高锰酸钾、双氧水、福尔马林等（1）干热灭菌：适用于玻璃器皿和金属器械的灭菌。（3）过滤除菌法：适用于一些培养基、酶液、血清等。（2）湿热灭菌：适用于各种器皿、培养基、器皿、蒸馏水、棉塞、纸等。121℃ 维持20~30min （4）射线灭菌：主要是利用紫外灯进行照射，适合实验室空气、操作台等，灭菌时间20-30min。（5）火焰灼烧灭菌：用火焰灼烧达到灭菌目的，适用于接种器皿的灭菌。（6）消毒剂：适用外植体、实验器皿、操作表面、皮肤等。第二章(植物)细胞工程的理论基础 **1、生命特征属性包括：新陈代谢、应激性、自我复制。离体培养细胞可展现该物种的生命特性。 2、植物组织培养的类型按材料的类别分：愈伤组织培养（最为常见的组织培养）；细胞培养（分为悬浮细胞培养和单细胞培养）；器官培养（胚、胚乳、珠心、子房、根、茎、叶、花和幼果的部分组织的培养）；原生质体培养按培养方法分为：固体培养；液体培养；看护培养；微室培养；包埋培养。按培养过程分：初代培养；继代培养。 3、植物细胞全能性表现强弱：营养生长中心> 形成层> 薄壁细胞> 厚壁细胞(木质化细胞) > 特化细胞(筛管、导管细胞)；

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细胞生物学复习-简答题第三章真核细胞的基本结构膜的流动性和不对称性极其生理意义流动性：膜蛋白和膜脂处于不断运动的状态。主要由膜脂双层的动态变化引起，质膜的流动性由膜脂和蛋白质的分子运动两个方面组成。膜质分子的运动：侧向移动、旋转、翻转运动、左右摆动膜蛋白的运动：侧向移动、旋转生理意义： 1、质膜的流动性是保证其正常功能的必要条件。如物质跨膜运输、细胞信息传递、细胞识别、细胞免疫、细胞分化以及激素的作用等等都与膜的流动性密切相关。 2、当膜的流动性低于一定的阈值时，许多酶的活动和跨膜运输将停止。不对称性：质膜的内外两层的组分和功能有明显的差异，称为膜的不对称性。膜脂、膜蛋白和糖在膜上均呈不对称分布，导致膜功能的不对称性和方向性，即膜内外两层的流动性不同，使物质传递有一定方向，信号的接受和传递也有一定方向生理意义： 1、保证了生命活动有序进行 2、保证了膜功能的方向性影响膜流动性的因素 1、胆固醇：相变温度以上，会降低膜的流动性；相变温度以下，则阻碍晶态形成。 2、脂肪酸链的饱和度：不饱和脂肪酸链越多，膜流动性越强。 3、脂肪酸链的长度：长链脂肪酸使膜流动性降低。 4 、卵磷脂 / 鞘磷脂：比例越高则膜流动性越增加（鞘磷脂粘度高于卵磷脂）。 5、膜蛋白：镶嵌蛋白越多流动性越小 6、其他因素：温度、酸碱度、离子强度等细胞外被作用 1、保护、润滑作用：如消化道、呼吸道和生殖道的上皮细胞的糖萼 2、决定抗原 3、许多膜受体是糖蛋白或糖脂蛋白，参与细胞识别、应答、信号传递 RER和 SER的区别存在细胞形状结构功能 RER在蛋白质合成囊状或扁平膜上含有特殊的参与蛋白质合成和修旺盛的细胞中囊状，核糖核糖体连接蛋饰加工（糖基化，酰发达。体和 ER 无白，可与核糖体基化，二硫键形成，论在结构上60S 大亚基上的氨基酸的羟化，以及还是功能上糖蛋白连接新生多肽链折叠成三都不可分割级结构） SER在特化的细胞泡样网状结脂类和类固醇激素合中发达构，无核糖成场所。体附着肝细胞 SER解毒

机械控制工程基础第三章复习题及答案教学提纲

题目：时间响应由_____________ 和___________ 两部分组成。分析与提示：时间响应由瞬态响应和稳态响应两部分组成。答案：瞬态响应、稳态响应题目：系统的输出量从初始状态到稳定状态的响应过程，称为____________________ 。分析与提示：瞬态响应，指系统在某一输入信号作用下，系统的输出量从初始状态到稳定状态的响应过程。答案：瞬态响应题目：系统的时间响应可从两方面分类，按振动性质可分为___________________ 与__________ 。分析与提示：系统的时间响应可从两方面分类，按振动性质可分为自由响应与强迫响应。答案：自由响应、强迫响应题目：系统的时间响应可从两方面分类，按振动来源可分为___________________ 与__________ 。分析与提示：系统的时间响应可从两方面分类，按振动性质可分为自由响应与强迫响应；按振动来源可分为零输入响应（即由“无输入时系统的初态” 引起的自由响应）与零状态响应（即仅由输入引起的响应）。答案：零输入响应、零状态响应题目：系统微分方程的特解就是系统由输入引起的输出（响应），工程上称为____________ 。分析与提示：初始条件及输入信号产生的时间响应就是微分方程的全解。包含通解和特解两个部分。通解完全由初始条件引起的，它是一个瞬态过程，工程上称为自然响应（如机械振动中的自由振动）。特解只由输入决定，特解就是系统由输入引起的输出（响应），工程上称为强迫响应（如机械振动中的强迫振动）。答案：强迫响应题目：系统的瞬态响应不仅取决于系统本身的特性，还与外加____________________ 的形式有关。分析与提示：系统的瞬态响应不仅取决于系统本身的特性，还与外加输入信号的形式有关。答案：输入信号题目：单位阶跃信号 1 U(t) ° t 0 的拉氏变换为【】0t 0 11 A、- B、右 C、1 D、S s s 分析与提示：熟练掌握典型信号的拉氏变换。B为单位斜坡信号的拉氏变换，C为单位冲击信号的拉是变换。答案：A 题目：选取输入信号应当考虑以下几个方面，输入信号应当具有__________________ ，能够反映系统工作的大部分实际情况。分析与提示：选取输入信号应当考虑以下几个方面，输入信号应当具有典型性，能够反映系统工作的大部分实际情况。答案：典型性题目：选取输入信号时，输入信号的形式应当尽可能________________ 。分析与提示：选取输入信号时，输入信号的形式应当尽可能简单。答案：简单题目： _______________ 是使用得最为广泛的常用输入信号。分析与提示：单位脉冲函数、单位阶跃函数、单位斜坡函数、单位抛物线函数都为常用输入信号时，单位脉冲函数是使用得最为广泛的常用输入信号。答案：单位脉冲函数 3 题目：设一阶系统的传递函数为，则其时间常数和增益分别是【】 2s 5

高中生物选修3基础知识复习提纲(最新详细)

高中生物选修3基础知识复习提纲(最新详细) 专题1 基因工程基因工程的概念基因工程是指按照人们的愿望，进行严格的设计，通过体外DNA重组和转基因技术，赋予生物以新的遗传特性，创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的，又叫做DNA重组技术。（一）基因工程的基本工具 1.“分子手术刀”——限制性核酸内切酶（限制酶）（1）来源：主要是从原核生物中分离纯化出来的。（2）功能：能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，因此具有专一性。（3）结果：经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式：黏性末端和平末端。 2.“分子缝合针”——DNA连接酶 (1)两种DNA连接酶（E·coliDNA连接酶和T4-DNA连接酶）的比较： ①相同点：都缝合磷酸二酯键。 ②区别：E·coliDNA连接酶来源于T4噬菌体，只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来；而T4DNA连接酶能缝合两种末端，但连接平末端的之间的效率较低。 (2)与DNA聚合酶作用的异同:DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯键。DNA连接酶是连接两个DNA片段的末端，形成磷酸二酯键。 3.“分子运输车”——载体（1）载体具备的条件：①能在受体细胞中复制并稳定保存。 ②具有一至多个限制酶切点，供外源DNA片段插入。 ③具有标记基因，供重组DNA的鉴定和选择。（2）最常用的载体是质粒,它是一种裸露的、结构简单的、独立于细菌染色体之外，并具有自我复制能力的双链环状DNA分子。（3）其它载体：噬菌体的衍生物、动植物病毒 (二)基因工程的基本操作程序第一步：目的基因的获取 1.目的基因是指：编码蛋白质的结构基因。 2.原核基因采取直接分离获得，真核基因是人工合成。人工合成目的基因的常用方法有反转录法_和化学合成法_。 3.PCR技术扩增目的基因（1）原理：DNA双链复制（2）过程：第一步：加热至90～95℃DNA解链；第二步：冷却到55～60℃，引物结合到互补DNA链；第三步：加热至70～75℃，热稳定DNA聚合酶从引物起始互补链的合成。第二步：基因表达载体的构建 1.目的：使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传至下一代，使目的基因能够表达和发挥作用。 2.组成：目的基因＋启动子＋终止子＋标记基因（1）启动子：是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的首端，是RNA聚合酶识别和结合的部位，能驱动基因转录出mRNA，最终获得所需的蛋白质。（2）终止子：也是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的尾端。（3）标记基因的作用：是为了鉴定受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来。常用的标记基因是抗生素基因。第三步：将目的基因导入受体细胞_ 1.转化的概念：是目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程。 2.常用的转化方法：将目的基因导入植物细胞：采用最多的方法是农杆菌转化法，其次还有基因枪法和花粉管通道法等。将目的基因导入动物细胞：最常用的方法是显微注射技术。此方法的受体细胞多是受精卵。将目的基因导入微生物细胞：原核生物作为受体细胞的原因是繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少，最常用的原核细胞是大肠杆菌，其转化方法是：先用 Ca2+ 处理细胞，使其成为感受态细胞，再将重组表达载体DNA分子溶于缓冲液中与感受态细胞混合，在一定的温度下促进感受态细胞吸收DNA分子，完成转化过程。 3.重组细胞导入受体细胞后，筛选含有基因表达载体受体细胞的依据是标记基因是否表达。第四步：目的基因的检测和表达 1.首先要检测转基因生物的染色体DNA上是否插入了目的基因，方法是采用 DNA分子杂交技术。 2.其次还要检测目的基因是否转录出了mRNA，方法是采用用标记的目的基因作探针与 mRNA杂交。 3.最后检测目的基因是否翻译成蛋白质，方法是从转基因生物中提取蛋白质，用相应的抗体进行抗原－抗体杂交。 4.有时还需进行个体生物学水平的鉴定。如转基因抗虫植物是否出现抗虫性状。（三）基因工程的应用 1.植物基因工程：抗虫、抗病、抗逆转基因植物，利用转基因改良植物的品质。 2.动物基因工程：提高动物生长速度、改善畜产品品质、用转基因动物生产药物。 3.基因治疗：把正常的外源基因导入病人体内，使该基因表达产物发挥作用。（四）蛋白质工程的概念蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需求。（基因工程在原则上只能生产自然界已存在的蛋白质）转录翻译专题2 细胞工程（一）植物细胞工程 1.理论基础（原理）：细胞全能性全能性表达的难易程度：受精卵＞生殖细胞＞干细胞＞体细胞；植物细胞＞动物细胞 2.植物组织培养技术（1）过程：离体的植物器官、组织或细胞―→愈伤组织―→试管苗―→植物体（2）用途：微型繁殖、作物脱毒、制造人工种子、单倍体育种、细胞产物的工厂化生产。

医学细胞生物学试题及答案(六)

细胞生物学试题题库第五部分简答题 1. 根据光镜与电镜的特点，观察下列结构采用那种显微镜最好？如果用光镜（暗视野、相差、免疫荧显微镜）那种最有效？为什么？ 2. 细胞是生命活动的基本单位，而病毒是非细胞形态的生命体，如何理解二者之间的关系？ 3. 为什么说支原体是最小、最简单的细胞？ 4. 原核细胞与真核细胞差别是后者有细胞器，细胞器结构的出现有什么优点？（至少2点） 5. 简述动物细胞与植物细胞之间的主要区别。 6. 简述动物细胞、植物细胞、原生动物应付低渗膨胀的主要方式？ 7. 简述单克隆抗体的主要技术路线。 8. 简述钠钾泵的工作原理及其生物学意义。 9. 受体的主要类型。 10. 细胞的信号传递是高度复杂的可调控过程，请简述其基本特征。 11. 简述胞饮作用和吞噬作用的主要区别。 12. 细胞通过分泌化学信号进行通讯主要有哪几种方式？ 13. 简要说明G蛋白偶联受体介导的信号通路的主要特点。 14. 信号肽假说的主要内容。 15. 简述含信号肽的蛋白在细胞质合成后到内质网的主要过程。 16. 简述蛋白质糖基化修饰中N－连接与O－连接之间的主要区别。 17. 溶酶体膜有何特点与其自身相适应？ 18. 简述A.TP合成酶的作用机制。 19. 化学渗透假说的主要内容。 20. 内共生学说的主要内容。 21. 线粒体与叶绿体基本结构上的异同点。 22. 细胞周期中核被膜的崩解和装配过程。 23. 核孔复合体的结构模型。 24. 染色质的多级螺线管模型。 25. 染色体的放射环模型。 26. 细胞内以多聚核糖体的形式合成蛋白质，其生物学意义是什么？ 27. 肌肉收缩的机制。 28. 纤毛的运动机制。 29. 中心体周期。 30. 简述C.D.K1（MPF）激酶的活化过程。 31. 泛素化途径对周期蛋白的降解过程。 32. 人基因组大约能编码5万个基因，而淋巴细胞却能产生约107－109个不同抗体分子，为什么？ 33. 细胞学说的主要内容。 34. 溶酶体膜有何与其自身功能相适应的特点？ 35. 何为信号肽假说的？ 36. 核孔复合体的结构模型。 37. 胞饮作用和吞噬作用的区别。 38. 为什么说线粒体和叶绿体是半自主性细胞器？ 39. 简述核被膜的主要功能 40. 简述减数分裂的意义

自动控制工程基础复习题及答案资料

《自动控制工程基础》一、单项选择题： 1．线性系统和非线性系统的根本区别在于 ( C ) A ．线性系统有外加输入，非线性系统无外加输入。 B ．线性系统无外加输入，非线性系统有外加输入。 C ．线性系统满足迭加原理，非线性系统不满足迭加原理。 D ．线性系统不满足迭加原理，非线性系统满足迭加原理。 2．令线性定常系统传递函数的分母多项式为零，则可得到系统的 ( B ) A ．代数方程 B ．特征方程 C ．差分方程 D ．状态方程 3．时域分析法研究自动控制系统时最常用的典型输入信号是（ D ） A ．脉冲函数 B ．斜坡函数 C ．抛物线函数 D ．阶跃函数 4．设控制系统的开环传递函数为G(s)= ) 2s )(1s (s 10 ++，该系统为（ B ） A ．0型系统 B ．I 型系统 C ．II 型系统 D ．III 型系统 5．二阶振荡环节的相频特性)(ωθ，当∞→ω时，其相位移)(∞θ为 ( B ) A ．-270° B ．-180° C ．-90° D ．0° 6. 根据输入量变化的规律分类，控制系统可分为 ( A ) A.恒值控制系统、随动控制系统和程序控制系统 B.反馈控制系统、前馈控制系统前馈—反馈复合控制系统 C.最优控制系统和模糊控制系统 D.连续控制系统和离散控制系统 7．采用负反馈连接时，如前向通道的传递函数为G(s)，反馈通道的传递函数为H(s)，则其等效传递函数为 ( C ) A ．)s (G 1) s (G + B ．) s (H )s (G 11+ C ． ) s (H )s (G 1) s (G + D ． ) s (H )s (G 1) s (G - 8．一阶系统G(s)= 1 +Ts K 的时间常数T 越大，则系统的输出响应达到稳态值的时间 ( A ) A ．越长 B ．越短 C ．不变 D ．不定 9．拉氏变换将时间函数变换成（ D ） A ．正弦函数 B ．单位阶跃函数

细胞工程学教学大纲

《细胞工程学》教学大纲课程名称：细胞工程学课程类别：专业必修课学时：32 学时学分：2学分考核方式：考试适用专业：生物技术开课学期：第5学期一、课程性质、目的任务《细胞工程》是通过对细胞及其组分的人工操作，研究生命活动规律；实现对动植物的遗传改造,用于农业、林业、园艺等生产实践；结合非生物材料等手段，生产用于治疗人类疾病或缺陷的人工器官，组织, 细胞及其代谢产物或用于深入研究的材料等为主要研究内容的一门新兴学科。通过本课程的学习，使学生系统掌握该门学科形成与发展，理论与原理，技术与方法等基础知识，结合科研实际以及最新研究动态，使学生对本课程有一个全面的了解；以适应后基因组学时代在教学、科研和生产开发各方面对当代生命科学人才知识结构的需求。二、课程基本要求通过对细胞工程学的特性和内容，细胞工程的主要类型和技术操作，细胞工程学研究的基本方法等进行阐述，使学生能够掌握如何将细胞工程学知识应用于生产实践。三、学时分配

四、教学方法与考核 1．教学方法：讲授法、案例分析法 2．课程考核方法：考试 1）平时成绩占20%，期末考试成绩占80% 2）平时成绩评分标准平时成绩（100分），包括学生课堂出勤情况（20分）、课堂发言及积极参与情况（20分）、课后作业完成情况及质量（60分）。此项成绩需由教师提供评分依据及记录。 3）期末成绩评分标准以评分标准为依据，所得卷面成绩为准，以考试试卷形式考查，考试形式为笔试，满分100分，试题包括基本知识概念，知识的理解和应用，综合应用等能力等教学内容的考查。全面涵盖本课程知识重点和难点，渗透学科前沿及进展，能够真实反映学生对本课程的知识和能力的学习情况。五、大纲正文绪论（2学时）【目的要求】 1. 了解细胞工程的发展历史。 2. 了解生物工程学的组成内容 3. 了解细胞工程的应用。 4. 理解生物工程学与其它学科之间的学科交叉。 5. 理解细胞工程学与生物工程的其他技术之间的联系。 6. 掌握细胞工程学的主要组成。 7. 培养严谨、认真的科学观。

新乡医学院医学细胞生物学简答题

新乡医学院医学细胞生物学简答题 The following text is amended on 12 November 2020.

供基础医学院临床17、20班参考使用医学细胞生物学简答题集锦第一章绪论 1.简述细胞生物学形成与发展经历的阶段（1）细胞的发现与细胞学说的建立：最早发现细胞并命名为cell，施莱登和施旺建立细胞学说。 (2)细胞学的经典时期：细胞学说的建立掀起了对多种细胞广泛的观察和描述的热潮，主要的细胞器和细胞分裂活动相继被发现。 (3)实验细胞学时期：人们广泛的应用实验的手段研究细胞的特性、形态结构和功能。 (4)分子生物学的兴起和细胞生物学的诞生：各个学科相互渗透，人们对细胞结构与功能的研究达到了新的高度。第二章细胞的统一性与多样性 1.比较原核细胞和真核细胞的差别第三章细胞膜与细胞表面 1.细胞膜的流动性有什么特点，膜脂有哪些运动方式，影响膜脂流动性的因素有哪些（1）膜脂既具有分子排列的有序性，又有液体的流动性；温度对膜的流动性有明显的影响，温度过低，膜脂转变为晶态，膜脂分子运动受到影响，温度升高，膜恢复到液晶态，此过程称为相变。（2）膜脂的运动方式有：侧向扩散、旋转运动、摆动运动、翻转运动，其中翻转运动很少发生，侧向扩散是主要运动方式。（3）影响流动性的因素：脂肪酸链的长短和饱和程度，胆固醇的双重调节作用，卵磷脂/鞘磷脂比值越大膜脂流动性越大，膜蛋白与周围脂质分子作用也会降低膜流动性。此为环境因素（如温度）也会影响膜的流动性，温度在一定范围内升高，流动性增强。 2.简述膜蛋白的种类及其各自特点，并叙述膜的不对称性有哪些体现 (1)膜蛋白分为膜外在蛋白、膜内在蛋白、脂锚定蛋白。膜外在蛋白属于水溶性蛋白，分布在膜的两侧，与膜的结合松散，一般占20%-30%；膜内在蛋白属于双亲性分子，嵌入、穿膜，是膜功能的主要承担者，与膜结合紧密，占70%-80%。脂锚定蛋白通过共价键与脂分子结合，分布在膜两侧，含量较低。

《控制工程基础》考试大纲

《控制工程基础》考试大纲科目名称：控制工程基础适用专业：机械电子工程参考书目：《控制理论基础》，王显正，科学出版社， 2009 考试时间：3小时考试方式：笔试总分：150分考试范围：（一）绪论 1．控制系统的定义 2．控制系统的工作原理和组成（1）掌握反馈控制原理，解释方块图（2）理解开环系统和闭环系统的性能特点（3）理解控制系统的各个组成环节。 3. 控制系统的分类：按控制信号的连续性、按给定量的运动规律等进行分类 4. 典型信号：掌握各典型信号的函数表达和物理意义（二）物理系统的数学模型 1. 数学方法（1）理解拉普拉斯变换定义和常用函数的拉氏变换；（2）掌握利用拉氏变化求取系统的传递函数。 2. 数学模型（1）了解建立数学模型的步骤，环节的划分、输入输出信号的建立。（2）掌握根据系统的输入输出信号分析，建立机械系统的数学模型。 3. 典型环节及其传递函数：理解各典型环节的传递函数 4. 方块图及其简化（1）掌握开环传递函数和闭环传递函数。（2）掌握利用方块图得出系统的传递函数（三）频率特性 1. 频率特性概念（1）了解频率特性的定义和物理意义（2）了解频率特性的求取方法 2. 对数频率特性（1）掌握伯德图的坐标的对数划分以及频程、斜率的描述。（2）掌握典型环节的对数频率特性。（四）控制系统的稳定性分析 1. 稳定性的概念：理解稳定的定义和系统稳定的充要条件。

2. 掌握利用代数判据判断系统的稳定性。 3. 了解稳定裕量的概念和表达方法。（五）控制系统的误差分析 1. 稳态误差概念（1）理解系统的误差和偏差的概念和相互间的关系。（2）了解稳态误差的基本计算公式。 2. 稳态误差的求取（1）掌握系统的稳态误差的求取。（2）了解减小系统稳态误差的方法。（六）控制系统的瞬态响应分析 1. 一阶系统的瞬态响应了解一阶系统在典型信号作用下地瞬态响应及其物理意义。 2.二阶系统的瞬态响应（1）掌握二阶系统传递函数的标准形式。（2）掌握二阶系统在不同阻尼比条件下的阶跃信号响应。 4.瞬态响应指标及其与系统参数的关系（1）掌握系统的瞬态响应指标的定义。（2）掌握欠阻尼二阶系统的瞬态响应的求取方法。

细胞工程学复习题

细胞工程学习题 1．诱导试管苗生根时，培养基的调整应 A．加大盐的浓度B．加活性炭 C．加大分裂素的浓度D．加大生长素的浓度 2．下列实验中可能获得三倍体植株的是 A．小麦的茎尖培养B．番茄花药培养 C．玉米胚乳培养D．玉米花粉培养 3．动物体内各种类型的细胞中，具有最高全能性的细胞是 A．体细胞B．生殖细胞C．受精卵D．干细胞 4．下列哪个是植物离体培养常用的主要糖类 A．葡萄糖B．果糖C．麦芽糖D．蔗糖 5．农杆菌介导的转化方法主要适用于 A．草本植物B．木本植物C．单子叶植物D．双子叶植物 6．原生质体纯化步骤大致有如下几步： ①将收集到的滤液离心，转速以将原生质体沉淀而碎片等仍悬浮在上清液中为准，一般以500r／min离心15min。用吸管谨慎地吸去上清液。

②将离心下来的原生质体重新悬浮在洗液中(除不含酶外，其他成分和酶液相同)，再次离心，去上清液，如此重复三次。 ③将原生质体混合液经筛孔大小为40～100um的滤网过滤，以除去未消化的细胞团块和筛管、导管等杂质，收集滤液。 ④用培养基清洗一次，最后用培养基将原生质调到一定密度进行培养。一般原生质体的培养密度为104～106／ml。正确的操作步骤是：（） A ①②③④B②③①④C③①②④D③②①④ 7．常用的细胞融合剂是 A．刀豆球蛋白B．聚乙二醇（PEG）C．细胞松弛素B D．脂质体 8．利用细胞杂交瘤技术制备单克隆抗体过程中，HAT培养基用来进行 A．细胞融合B．杂交瘤选择C．检测抗体D．动物免疫 9．下列过程中，没有发生膜融合的是 A．植物体细胞杂交B．受精过程 C．氧进入细胞中的线粒体D．单克隆抗体的产生 10．科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合，得到杂交细胞，经培养可产生大量的单克隆抗体。与骨髓瘤细胞融合的是 A．经过免疫的B细胞B．没经过免疫的T细胞

新乡医学院医学细胞生物学简答题

供基础医学院临床17、20 班参考使用医学细胞生物学简答题集锦第一章绪论 1.简述细胞生物学形成与发展经历的阶段（1）细胞的发现与细胞学说的建立：R.Hook最早发现细胞并命名为cell，施莱登和施旺建立细胞学说。 (2)细胞学的经典时期：细胞学说的建立掀起了对多种细胞广泛的观察和描述的热潮，主要的细胞器和细胞分裂活动相继被发现。 (3)实验细胞学时期：人们广泛的应用实验的手段研究细胞的特性、形态结构和功能。 (4)分子生物学的兴起和细胞生物学的诞生：各个学科相互渗透，人们对细胞结构与功能的研究达到了新的高度。第二章细胞的统一性与多样性 1.比较原核细胞和细胞表面 1.细胞膜的流动性有什么特点，膜脂有哪些运动方式，影响膜脂流动性的因素有哪些？（1）膜脂既具有分子排列的有序性，又有液体的流动性；温度对膜的流动性有明显的影响，温度过低，膜脂转变为晶态，膜脂分子运动受到影响，温度升高，膜恢复到液晶态，此过程称为相变。（2）膜脂的运动方式有：侧向扩散、旋转运动、摆动运动、翻转运动，其中翻转运动很少发生，侧向扩散是主要运动方式。（3）影响流动性的因素：脂肪酸链的长短和饱和程度，胆固醇的双重调节作用，卵磷脂/鞘磷脂比值越大膜脂流动性越大，膜蛋白与周围脂质分子作用也会降低膜流动性。此为环境因素（如温度）也会影响膜的流动性，温度在一定范围内升高，流动性增强。 2.简述膜蛋白的种类及其各自特点，并叙述膜的不对称性有哪些体现 (1)膜蛋白分为膜外在蛋白、膜内在蛋白、脂锚定蛋白。膜外在蛋白属于水溶性蛋白，分布在膜的两侧，与膜的结合松散，一般占20%-30%；膜内在蛋白属于双亲性分子，嵌入、穿膜，是膜功能的主要承担者，与膜结合紧密，占 70%-80%。脂锚定蛋白通过共价键与脂分子结合，分布在膜两侧，含量较低。 (2)膜的内外两侧结构和功能有很大差异，称为膜的不对称性，这种不对称决定了膜功能的方向性。膜脂：磷脂和胆固醇数目分布不均匀，糖脂仅分布于脂双层的非胞质面。膜蛋白：各种膜蛋白在质膜中都有一定的位置。膜糖类：糖链只分布于质膜外表面。 3.比较说明单位膜模型与液态镶嵌模型有哪些不同点单位膜是细胞膜和胞内膜等生物膜在电镜下呈现的三夹板式结构，内外两层为电子密度较高的暗层，中间是电子密度低的明层， “两暗夹一明”的

(完整版)机械控制工程基础习题及答案考试要点

1-3 题1-3图为工业炉温自动控制系统的工作原理图。分析系统的工作原理，指出被控对象、被控量和给定量，画出系统方框图。题1-3图炉温自动控制系统原理图解加热炉采用电加热方式运行，加热器所产生的热量与调压器电压c u 的平方成正比， c u 增高，炉温就上升，c u 的高低由调压器滑动触点的位置所控制，该触点由可逆转的直流电动机驱动。炉子的实际温度用热电偶测量，输出电压f u 。f u 作为系统的反馈电压与给定电压r u 进行比较，得出偏差电压e u ，经电压放大器、功率放大器放大成a u 后，作为控制电动机的电枢电压。在正常情况下，炉温等于某个期望值T °C ，热电偶的输出电压f u 正好等于给定电压 r u 。此时，0=-=f r e u u u ，故01==a u u ，可逆电动机不转动，调压器的滑动触点停留在某个合适的位置上，使c u 保持一定的数值。这时，炉子散失的热量正好等于从加热器吸取的热量，形成稳定的热平衡状态，温度保持恒定。当炉膛温度T °C 由于某种原因突然下降(例如炉门打开造成的热量流失)，则出现以下的控制过程：控制的结果是使炉膛温度回升，直至T °C 的实际值等于期望值为止。 ?→T C ?→↑→↑→↑→↑→↑→↓→↓T u u u u u c a e f θ1C ↑ 系统中，加热炉是被控对象，炉温是被控量，给定量是由给定电位器设定的电压r u （表征炉温的希望值）。系统方框图见图解1-3。

1-5采用离心调速器的蒸汽机转速控制系统如题1-5图所示。其工作原理是：当蒸汽机带动负载转动的同时，通过圆锥齿轮带动一对飞锤作水平旋转。飞锤通过铰链可带动套筒上下滑动，套筒内装有平衡弹簧，套筒上下滑动时可拨动杠杆，杠杆另一端通过连杆调节供汽阀门的开度。在蒸汽机正常运行时，飞锤旋转所产生的离心力与弹簧的反弹力相平衡，套筒保持某个高度，使阀门处于一个平衡位置。如果由于负载增大使蒸汽机转速ω下降，则飞锤因离心力减小而使套筒向下滑动，并通过杠杆增大供汽阀门的开度，从而使蒸汽机的转速回升。同理，如果由于负载减小使蒸汽机的转速ω增加，则飞锤因离心力增加而使套筒上滑，并通过杠杆减小供汽阀门的开度，迫使蒸汽机转速回落。这样，离心调速器就能自动地抵制负载变化对转速的影响，使蒸汽机的转速ω保持在某个期望值附近。指出系统中的被控对象、被控量和给定量，画出系统的方框图。题1-5图蒸汽机转速自动控制系统解在本系统中，蒸汽机是被控对象，蒸汽机的转速ω是被控量，给定量是设定的蒸汽机希望转速。离心调速器感受转速大小并转换成套筒的位移量，经杠杆传调节供汽阀门，控制蒸汽机的转速，从而构成闭环控制系统。系统方框图如图解1-5所示。

细胞工程复习提纲

《细胞工程》复习提纲一、名词解释细胞工程（第1讲）；细胞分化，细胞全能性，无性生殖，有性生殖，脱分化，植物组织培养，愈伤组织，外植体，胚状体（体细胞胚），人工种子（第2讲）；体外受精，试管动物，胚胎分割，性别控制，细胞核移植（第3讲）；细胞融合，非对称细胞融合，原生质体（第4讲）；染色体组，染色体工程，单倍体，同源多倍体，异源多倍体，雌核发育（第5讲）；植物细胞培养（第6讲）；次级代谢产物（第7讲）；毛状根，冠瘿组织（第8讲）；接触性抑制（第9讲）；微载体培养（第10讲）；多克隆抗体，单克隆抗体，灭活病毒疫苗，减毒活疫苗（（第11讲））；转基因生物反应器（第12讲）；微藻（第13讲）；干细胞，胚胎干细胞，成体干细胞（第14讲）；组织工程（第15讲）二、简答题 1、细胞工程的主要研究内容（研究范畴）有哪些？（第1讲） 2、简述细胞工程技术的应用（第1讲） 3、植物组织培养的应用（第2讲） 4、植物组织（细胞）培养中要用到哪些激素？在细胞分化中的调节作用如何？（第2讲） 5、植物组织培养再生植株有哪些途径？（第2讲）

6、简述人工种子制备的基本过程（第2讲） 7、简述胚胎移植的技术路线（第3讲） 8、简述多莉羊技术路线（第3讲） 9、你认为英雄、伟人可以通过克隆再生吗？（第3讲） 10、克隆动物存在哪些问题？（第3讲） 11、怎样制备、分离和鉴定原生质体？（第4讲） 12、为什么要对融合细胞进行筛选？（第4讲） 13、举几个单倍体和多倍体的例子（第5讲） 14、为什么动物的多倍体比植物少？（第5讲） 15、单倍体产生原理（第5讲） 16、怎样制备植物的单细胞？（第6讲） 17、常见的植物细胞培养生物反应器有哪些？（第7讲） 18、体外培养动物细胞的形态有哪几种（第9讲） 19、植物体细胞杂交技术与动物细胞融合技术有什么不同？（第11讲） 20、转基因动物反应器主要有哪些？（第12讲） 21、简述转基因动物制备中目的基因导入的方法（第12讲） 22、三大经济微藻指哪三类？（第13讲） 23、怎样利用微藻培养生产生物柴油？（第13讲） 24、干细胞具有哪些特征？（第14讲） 25、组织工程三要素（第15讲）

新乡医学院医学细胞生物学简答题

供基础医学院临床17、20班参考使用医学细胞生物学简答题集锦第一章绪论 1.简述细胞生物学形成与发展经历的阶段 (1)细胞的发现与细胞学说的建立:R、Hook最早发现细胞并命名为cell,施莱登与施旺建立细胞学说。 (2)细胞学的经典时期:细胞学说的建立掀起了对多种细胞广泛的观察与描述的热潮,主要的细胞器与细胞分裂活动相继被发现。 (3)实验细胞学时期:人们广泛的应用实验的手段研究细胞的特性、形态结构与功能。 (4)分子生物学的兴起与细胞生物学的诞生:各个学科相互渗透,人们对细胞结构与功能的研究达到了新的高度。第二章细胞的统一性与多样性 1、比较原核细胞与真核细胞的差别 1、细胞膜的流动性有什么特点,膜脂有哪些运动方式,影响膜脂流动性的因素有哪些？ (1)膜脂既具有分子排列的有序性,又有液体的流动性;温度对膜的流动性有明显的影响,温度过低,膜脂转变为晶态,膜脂分子运动受到影响,温度升高,膜恢复到液晶态,此过程称为相变。(2)膜脂的运动方式有:侧向扩散、旋转运动、摆动运动、翻转运动,其中翻转运动很少发生,侧向扩散就是主要运动方式。(3)影响流动性的因素:脂肪酸链的长短与饱与程度,胆固醇的双重调节作用,卵磷脂/鞘磷脂比值越大膜脂流动性越大,膜蛋白与周围脂质分子作用也会降低膜流动性。此为环境因素(如温度)也会影响膜的流动性,温度在一定范围内升高,流动性增强。 2、简述膜蛋白的种类及其各自特点,并叙述膜的不对称性有哪些体现 (1)膜蛋白分为膜外在蛋白、膜内在蛋白、脂锚定蛋白。膜外在蛋白属于水溶性蛋白,分布在膜的两侧,与膜的结合松散,一般占20%-30%; 膜内在蛋白属于双亲性分子,嵌入、穿膜,就是膜功能的主要承担者,与膜结合紧密,占70%-80%。脂锚定蛋白通过共价键与脂分子结合,分布在膜两侧,含量较低。 (2)膜的内外两侧结构与功能有很大差异,称为膜的不对称性,这种不对称决定了膜功能的方向性。膜脂:磷脂与胆固醇数目分布不均匀,糖脂仅分布于脂双层的非胞质面。膜蛋白:各种膜蛋白在质膜中都有一定的位置。膜糖类:糖链只分布于质膜外表面。 3、比较说明单位膜模型与液态镶嵌模型有哪些不同点单位膜就是细胞膜与胞内膜等生物膜在电镜下呈现的三夹板式结构,内外两层为电子密度较高的暗层,中间就是电子密度低的明层,“两暗夹一明”的结构叫做单位膜,单位膜仅能部分反映生物膜的结构特点。流动镶嵌模型强调膜的流动性与膜蛋白分布的不对称性以及蛋白质与脂双层的镶嵌关系。认为膜蛋白与膜脂均能产生侧向运动,膜蛋白有的在膜表面、有的嵌入或横跨脂双分子层。该模型能解释膜的多种性质,但不能说明具有流动性的细胞膜在变化过程中如何维持膜的相对完整。第四章细胞连接、细胞黏附与细胞外基质 1、什么就是细胞连接,细胞连接有哪些类型细胞表面可与其它细胞或细胞外基质结合的特化区称为细胞连接。分为紧密连接、黏着链接与通讯连接。紧密连接的特点就是细胞膜之间连接紧密无空隙,一般位于上皮细胞间。黏着链接中,与肌动蛋白纤维相关的有黏着带:分布于上皮细胞,黏着斑:分布于上皮细胞基部;与中间丝有关的有桥粒:分布于心肌与上皮,半桥粒:分布于上皮细胞基底部。通讯连接分为缝隙连接与突触,缝隙连接几乎存在于所有类型的细胞之间,突触仅存在于可兴奋细胞之间用来传到兴奋。 2.什么就是细胞外基质,叙述细胞外基质的组成细胞外基质就是指由细胞分泌到细胞外间充质中的蛋白质与多糖类大分子所构成的网络结构。 (1)纤维成分:如胶原、弹性蛋白。胶原就是细胞外基质最基本成分之一,就是动物体内含量最丰富的蛋白,刚性及抗张力强度最大。 (2)糖胺聚糖与蛋白聚糖:透明质酸就是唯一不发生硫酸化的糖胺聚糖,就是增殖细胞与迁移细胞的细胞外基质的主要成分,透明质酸向外膨胀产生压力,使结缔组织具有抗压的能力;蛋白聚糖见于所有结缔组织与细胞外基质及许多细胞的表面,可与多种生长因子结合,可视为细胞外的激素富集与储存库,有利于激素分子进一步与细胞表面受体结合,完成信号转导。 (3)层粘连蛋白与纤连蛋白:层粘连蛋白就是个体细胞外基质中出现最早的蛋白,对基膜的组装起到关键作用。纤连蛋白主要介导细胞黏着,也能促进巨噬细胞与其它免疫细胞迁移到受损部位。 3、叙述黏着带与黏着斑的区别粘着带就是细胞与细胞间的粘着连接,而粘着斑就是细胞与细胞外基质相连。 ①参与粘着带连接的膜整合蛋白就是钙粘着蛋白,而参与粘着斑连接的就是整联蛋白,即细胞外基质受体蛋白; ②粘着带连接实际上就是两个相邻细胞膜上的钙粘着蛋白与钙粘着蛋白的连接,而粘着斑连接就是整联蛋白与细胞外基质中的粘连蛋白的连接,因整联蛋白就是纤粘连蛋白的受体,所以粘着斑连接就是通过受体与配体的结合; 第五章小分子物质的跨膜运输 1、以Na+-K+泵为例说明细胞膜的主动转运过程 Na+-K+泵又称Na+-K+ATP酶,由α与β两个亚基组成,均为穿膜蛋白。在α亚基的外侧(朝向胞外)有两个K+的结合位点,内测有3个Na+的结合位点与一个催化ATP水解的位点。工作中,细胞内的Na+与大亚基上的Na+位点相结合,同时 ATP分子被催化水解,大亚基改变空间构象,使3个Na+排除胞外,同时K+与α亚基外侧面相应位点结合,α亚基空间结构恢复原状,将2个K+输入细胞,完成循环,每次循环消耗一个ATP分子,3个Na+出胞,2个K+入胞。第六章胞质溶胶、蛋白酶体与核糖体 1、核糖体有几种,合成的蛋白质在功能上有什么不同核糖体分为游离核糖体与附着核糖体。分布于细胞质基质中的核糖体就是游离核糖体,主要合成细胞本身所需的结构蛋白。附着在内质网膜与核膜表面的就是附着核糖体,主要合成外输性蛋白质。第七章内膜系统与囊泡运输 1、内质网有哪些类型,在细胞中的作用就是什么内质网主要由脂类与蛋白质组成,就是单层膜结构,分为粗面内质网与光面内质网。粗面内质网主要呈囊状,表面有核糖体附着,主要功能就是合成、加工修饰、分选转运一些蛋白质,提供核糖体附着的支架。光面内质网不合成蛋白质,就是脂类合成与转运的场所, 并参与糖原的代谢,就是细胞解毒的场所(肝细胞),SER特化成肌质网可作为肌细胞储存钙离子的场所。 2、叙述高尔基体的组成,及主要功能高尔基体就是一种膜性囊泡复合体,由扁平囊泡、小囊泡、大囊泡组成。高尔基体就是细胞内蛋白质运输分泌的中转站,就是胞内物质加工合成的主要场所,参与糖蛋白的加工合成、蛋白质的水解加工、胞内蛋白质分选与膜泡定向运输的枢纽。 3、简述分泌蛋白的运输过程 ①核糖体阶段:合成并转运分泌蛋白;②内质网阶段:运输并粗加工分泌蛋白;③细胞质基质运输阶段:分泌蛋白以小泡的形式脱离粗面内质网并移向高尔基复合体与其结合; ④高尔基体加工修饰:分泌蛋白进一步在高尔基复合体内进行加工,并以囊泡的形式释放到细胞质基质;⑤储存与释放:释放时,囊泡浓缩发育为分泌泡,与质膜融合,释放到体外。 4、以肝细胞吸收LDL为例,说明受体介导的胞吞作用的过程肝细胞需要利用胆固醇合成生物膜时,细胞合成LDL受体并分散嵌入细胞膜,当LDL与受体结合后,细胞膜向内凹陷形成有被小窝。LDL受体集中在有被小窝内不断内陷,进入细胞,脱离细胞膜形成有被小泡。有被小泡脱去网格蛋白被摸与其它囊泡融合形成内体, 内体内LDL与受体分离,受体返回细胞膜,LDL被溶酶体酶降解。如果游离胆固醇过多,LDL受体与胆固醇就会暂停合成,这就是一个反馈调节的过程。 5、叙述信号肽假说的内容新合成的蛋白质分子N端含有一段信号肽,该信号肽一经合成可被胞质中的信号识别颗粒(SRP)识别并结合,通过信号肽的疏水性引导新生肽跨脂双分子层进入内质网腔或直接整合在内质网膜中。信号肽具有决定蛋白质在胞内去向或定位的作用。第八章线粒体 1、为什么说线粒体就是一个半自主性的细胞器? 线粒体有自己的DNA(即mtDNA),存在线粒体核糖体,通过自己的蛋白质合成系统可以进行mtDNA的复制转录翻译。然而mtDNA的信息量少,只能合成近10%的线粒体蛋白, 绝大多数线粒体蛋白质仍依靠核基因组进行编码,再转运进线粒体中;构成线粒体的蛋白质合成系统的许多酶仍依靠核基因编码合成。故线粒体就是一种半自主性细胞器。 2、线粒体的半自主性有哪些体现线粒体有自己的mtDNA,就是动物细胞质中唯一含有DNA 的细胞器。有自己的核糖体与蛋白质合成系统,供mtDNA 复制转录翻译。遗传密码相较其它细胞有差异。有自己的物质转运系统,指导线粒体蛋白运输进线粒体,不与细胞质交换DNA与RNA,也不输出蛋白质。 3、画图显示线粒体的结构,并表明各部分名称(答案略) 4、说明线粒体基粒的结构组成与功能基粒又称ATP酶复合体,由头部、柄部、基部组成; 头部又称偶联因子F1,具有酶的活性,能催化ADP磷酸化生成ATP;柄部就是一种对寡霉素敏感的蛋白质,能抑制 ATP的合成;基部又称偶联因子F0,起到连接F1与内膜的作用。 5、叙述化学渗透假说的内容线粒体内膜就是完整的、封闭的,内膜中的电子传递链就是一个主动转移氢离子的体系,电子传递过程像一个质子泵,将氢离子从内膜基质泵至膜间隙,由于膜对氢离子不通透,形成膜两侧的浓度差,质子顺浓度梯度回流并释放出能量,驱动结合在内膜上的ATP合酶,催化ADP磷酸化合成 ATP。第九章细胞骨架 1、何谓细胞骨架?细胞骨架有哪些类型与功能? 细胞骨架就是指真核细胞质中的蛋白质纤维网架体系, 细胞骨架的多功能性依赖于三种蛋白质纤维,分别为微管、

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