卵巢上皮癌细胞株OVCAR—3培养相关影响因素分析
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卵巢上皮癌细胞株OVCAR—3培养相关影响因素分析
作者：洪澜朱根海王圣坦蔡俊宏
来源：《中国医药科学》2013年第05期
[摘要]目的探讨卵巢上皮癌细胞OVCAR-3培养的影响因素，提高培养的成功率。方法
按培养条件分为：未滤菌加抗菌素组、滤菌加抗菌素组、滤菌不加抗菌素组及改良复苏组，取对数生长期的细胞裸鼠皮下种植，观察成瘤率并行组织学检查。结果未滤菌加抗菌素组，复苏培养5次，全部失败；滤菌加抗菌素组，复苏培养10次，全部成功；滤菌不加抗菌素组，复苏培养10次，失败4次，成功率60%；改良复苏组：复苏培养10次，全部成功。种植后2周出现瘤体，各组成瘤率100%，各组肿瘤组织学检查未见明显差异。结论无菌操作是OVCAR-3最重要的影响因素，滤菌及加用抗菌素是关键步骤。
[关键词] 细胞培养；卵巢上皮癌细胞株
[中图分类号] R737.31 [文献标识码] A [文章编号] 2095-0616（2013）05-28-03
卵巢上皮癌细胞培养是卵巢癌临床与基础研究的基本技术，其成功与否直接影响到卵巢癌研究的进程和质量。卵巢上皮癌细胞株种类较多，OVCAR-3是近年来使用比较多的卵巢上皮癌细胞株[1]，本研究通过对其培养成功和失败的总结，分析其影响因素，以期达到提高培养
成功率的目的。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 细胞株和实验试剂人卵巢上皮癌OVCAR3细胞株（American type culture Collection，ATCC）（Manassas， VA），胎牛血清、RPMI-1640培养液（Invitrogen，CA）。胰酶、二甲基亚砜（DMSO），青霉素和链霉素溶液。
1.1.2 实验仪器二氧化碳培养箱（BB16UV，德国Heraeus公司），超净工作台（VS-
1300L型，苏州安泰空气技术有限责任公司），倒置相差光学显微镜（IX71型，Olympus），恒温水浴锅（DZW-4型，金坛市恒丰仪器厂）。
1.1.3 雌性BALB/c裸鼠购自广东省实验动物中心；鼠龄4～6周，体重15 ～ 17 g；SPF （special pathogen free）级屏障系统内饲养，饲料及铺垫物均经过灭菌处理，所有进入实验室的人及各种用品均经过严格的微生物控制。
1.2 方法