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干扰素的制备及检定

干扰素的制备及检定
干扰素的制备及检定

干扰素的制备及检定

优尔生门户网站https://www.wendangku.net/doc/9d9442570.html, 2009-10-25 7:37:52 作者:优尔生

干扰素的制备及检定

(一) 原理干抗素是干扰素诱生剂作用于有关生物细胞所产生的一类高活性、多功能蛋白质。它从细胞产生和释放出来以后,又作用于相应的其它同种细胞,使其获得抗病毒及抗肿瘤等多方面的免疫力。

所谓干扰素诱生剂,是指能诱导有关生物细胞产生干扰素的一类物质。能诱导有关生物细胞产生α和β干扰素者称甲类干扰素诱生剂,如各种动物病毒、细胞内寄生的微生物等;可诱导T细胞产生γ干扰素的称为乙类干扰素诱生剂,如脂多糖、链球菌毒素、肠毒素A等。

在实际工作中,制备干扰素多采用两种方法。一是用干扰素诱生剂诱导某些生物细胞产生干扰素,经提取纯化并检定合格后即可使用。该法所用的细胞多为外周血白细胞。二是采用基因工程法进行生产,即将干扰素基因导入大肠杆菌内,通过培养大肠杆菌来生产干扰素。目前,大规模生产干扰素主要采用基因工程法。下面仅以用干扰素诱生剂制备人白细胞干扰素为例介绍干扰素的制备方法。

(二) 材料和方法

1 材料细胞培养设备(如培养瓶、多孔培养板、温箱、显微镜、旋转培养器等)、水浴箱等。

2 方法

(1) 制备诱生剂:采用NDVF系弱毒株,以鸡胚尿囊液形式保存于-20℃,

其血凝滴度稳定在1∶640~1∶1 280之间。大量繁殖时,用05%水解乳蛋白稀释100~1 000倍,接种于9日龄鸡胚尿囊腔,置37℃培养72h后,收获尿囊液,效价测定应大于1∶640,无菌检查应合格。

(2) 制备诱生细胞:无菌采取人外周血(多用人脐带血,或血库贮藏血),置于含肝素(抗凝血)的无菌瓶内,于4℃保存不超过24h,诱生细胞(白细胞)不单独提取,以全血代替。

(3) 制备粗制干扰素:

①加诱生剂,按1ml抗凝全血加0.2ml诱生剂(即NDVF系尿囊液,其血凝滴度不低于1∶640);

②加温吸附,将加有诱生剂的抗凝全血置37℃水浴中1h,每隔15min晃动一次,使NDVF吸附于白细胞上。然后以1000r/min离心20min,弃上清,留沉淀物;

③加营养液孵育诱生,按抗凝全血的1~2倍量加Eagle营养液于上述沉淀物中,混匀,置35~36℃温箱内旋转培养18~20h;

④离心及酸处理,将上述培养物以2000r/min离心30min,取上清,以6mol/L

盐酸将其pH值调至20,置4℃冰箱5天灭活NDV;

⑤中性化,经5天酸化后,再用6mol/L氢氧化钠将pH值调至72~74,即为粗制干扰素。

(4) 制备精品干扰素:

①KCNS沉淀,取上述粗制干扰素,加KCNS并用2mol/L HCl调pH值为35,然后以2 000r/min离心30min取沉淀;

②酒精提取,将沉淀溶于95%酒精(预冷至-20℃),用2mol/L NaOH调pH值为42,以2 000r/min离心30min取上清;用2mol/L HCl调pH值至35,离心后取上清,再将pH值调至5.6,离心后取上清,最后将pH值调至71,离心后取沉淀;

③过碘酸钠沉淀,将沉淀溶于PBS中,加过碘酸钠,并调pH值为4.5,用50%

乙醇10倍稀释,离心后取上清,将上清液对03mol/L (NH4)2CO3(pH值76)在4℃下透析过夜。

sephacryl S200柱层析:将sephacryl S200按要求处理后装柱(4~5×100cm 柱),用PBS平衡后,加样(即上述上清液),用洗液洗脱。洗脱期间用核酸蛋白

仪连续检测,收集相应峰即为精制干扰素。取样进行效价测定,按结果进行稀释,分装并冻干。

(三) 检定

1 效价测定

(1) 制备攻击病毒:将水泡性口炎病毒(VSV)在鸡胚成纤维母细胞上传代后,

再在猪细胞(IBRS)上传3~5代,使其对IBRS有良好致病效应,其TCID50应稳定(一般在10-6~10-7之间)。

(2) 准备测定细胞:生长良好的幼龄IBRS单层细胞。

(3) 测定:取上述单层细胞分为若干组,每组加不同稀释度的干扰素,置37℃孵育20~24h

,然后每管均用100个TCID50的VSV攻击,置37℃ 48~72h孵育后,观察结果。同时设细胞对照组和病毒对照组。病毒对照组CPE>75%,正常细胞对照组CPE=0,即认为该测定系统有效。干扰素判定标准是以能保护半数细胞免受攻击病毒损害的干扰素最高稀释度的倒数作为干扰素的单位。

2 酸碱度测定取本品10支,加水溶解,精密测量pH值应为6~75。

3 水分测定按磺硫溶液法测定,不得超过3%。

4 安全试验取本品加水溶解,小鼠尾静脉注射,48h内不得有死亡。

5 热原检查取本品1支,加水溶解,依法检查,应符合规定。

6 菌检取本品3支,无菌水溶解,分别接种到检查需氧菌、厌氧菌及霉菌用培养基上,37℃培养1周,应无菌生长。

7 超敏反应取健康豚鼠6只,每只腹腔注射本品适量,连续3次,于20天后再于耳静泳注入本品适量,应无过敏反应现象发生。

(四) 注意事项

1 制备NDVF系弱毒诱生剂时,种毒应无菌检查合格,且滴度在1∶640以上。收毒时,应将污染的鸡胚弃去。

2 不必从血液中将白细胞提取出来,因红细胞对白细胞产生干扰素有营养作用。纯化的白细胞产生干扰素效价不一定高。

3 酸化的目的是杀死其中的诱生剂NDV,而在pH值20时,干扰素是稳定的。

4 在常温下干扰素半衰期很短。故各种操作要在低温环境下进行,动作要迅速,纯化所用试剂要作预冷处理。干扰素粗品及精品要及时置低温下存放。效价测定时,干扰素应于临用时现溶解。

白细胞介素2的制备及检定

优尔生门户网站https://www.wendangku.net/doc/9d9442570.html, 2009-10-25 7:38:09 作者:优尔生

白细胞介素2的制备及检定

(一) 原理白细胞介素2(IL2)是Th细胞受有丝分裂原或特异性抗原刺激后,并在白细胞介素1的辅助下,产生的一种可溶性糖蛋白。IL2是体内重要的广谱免疫增强因子,临床上常用于治疗免疫缺陷病及肿瘤等。

(二) 材料和方法

1 制备粗制IL2无菌采血,肝素抗凝,用RPMI1640按1∶1将血液稀释,然后重层于菲可液面上,以1 500r/min离心30min,取白细胞层,用RPMI1640洗2次,按1~3×106细胞/ml浓度加入10%胎牛血清RPMI1640,注入一装有磁棒的大瓶中,置37℃搅拌培养4天,取出,分装于50ml离心管中,1 500r/min离心20min,弃上清液,将细胞悬浮于1%胎牛血清RPMI1640培养液中,使细胞浓度为106细胞/ml。同时加入纯质PHA1~2μg/ml以及多种B淋巴母细胞株,使其浓度为106细胞/ml,37℃搅拌培养18~24h后,取出以1 500r/min离心30min,取上清,用045μg滤膜过滤除菌,滤液即为粗制IL2。

2 制备精品IL2

(1) 硫酸铵沉淀与真空浓缩透析:在4℃下将硫酸铵粉末按50%饱和量加入上述粗制IL2中,搅拌2h,12 000g离心30min,取上清液,再加入80%饱和硫酸铵,4℃过夜,次日以12 000g离心30min,弃上清液,将沉淀溶于01% PEG 6 000

的1∶2 PBS溶液(pH值73)中,置真空负压浓缩透析器中透析浓缩至所需容量。

(2) Sephadex G100凝胶过滤:用2×180cm的过滤柱及PBS(同上),以80ml/h 流速过滤。将各管洗脱液用紫外分光光度计280nm检测其OD值。同时将几种不同分子量的标准蛋白也用相同条件过滤及检测其OD值,绘出IL2及标准蛋白OD 值的曲线。将各管洗脱液过滤除菌后,作白细胞生物活性试验,按试验结果绘出曲线,找出具有最高IL2活性的几管洗脱液,混合后,作下一步精制。

(3) BlueSepharose层析:将上述混合后的洗脱液加入BlueSepharose柱中,流速约15ml/h,按每管10ml收集流出液,当样品全部流出柱中以后,用上述PBS 洗涤样品柱,再用梯度NaCl溶液(从0075mol/L至06mol/L NaCl的PBS溶液)

洗脱,按2ml/管收集洗脱液。NaCl 溶液梯度及流速均由梯度混合器调节控制。洗脱完毕后,作各管OD值及NaCl浓度的测定。各管洗脱液过滤除菌后,作出生物活性测定。将峰值前后的数管洗脱液混合,即为精制的IL2。置-20℃冰箱保存。

(三) 检定

1 活性测定用10%胎牛血清RPMI1640将上述IL2稀释为50%、25%、125%、625%,而后再将每个百分浓度以及100%浓度的IL2倍比稀释,自1∶2至1∶128,将每个稀释度分别加入多孔板的孔中,每孔01ml。然后取CT6细胞株(小鼠的IL2依赖性T细胞株),调整浓度为106细胞/ml,每孔加入01ml,同时用培养基代替IL2作对照。将多孔板培养24h后,取出按每孔1μci的浓度加H3标记胸腺嘧

啶核苷继续培养4h。取出后用MESHⅡ细胞收集器过滤洗涤细胞,用β计数器测定各孔细胞的cpm。必要时按此结果绘出曲线,确定活性单位。

2 蛋白含量测定采用分光光度计,分别测得OD280及OD260,然后按下式计算:蛋白含量(mg/ml)=(144×OD280-075×OD260)×稀释倍数

3 毒性试验及细菌检查参考胸腺肽制备部分。

(四) 注意事项

IL2的制备过程类似细胞培养的过程,因此,其注意事项也类似细胞培养。IL2活性测定采用的是同位素掺入法,因此须按要求操作,防止同位素扩散和污染。

注射用重组人干扰素2b说明书

注射用重组人干扰素α 2b 说明书请仔细阅读说明书并在医师指导下使用警示语:1.对重组人干扰素α 2b 或该制剂的任何成份有过敏史者禁用。2.患有严重心脏疾病者禁用\。3.严重的肝、肾或骨髓功能不正常者禁用。4.癫痫及中枢神经系统功能损伤者禁用。5.有其他严重疾病不能耐受本品者,不宜使用。[药品名称]通用名称:注射用重组人干扰素α 2b 商品名称:利分能英文名称:Recombinant Human Interferon α 2b for Injection 汉语拼音:Zhusheyong Chongzu Ren Ganraosu α 2b [成份]主要成份为重组人干扰素α 2b,由高效表达人干扰素α 2b 基因的腐生型假单孢菌,经发酵、分离和高度纯化制成。辅料为人血白蛋白、甘露醇、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠。[性状]应为白色薄壳状疏松体,加入标示量注射用水后应迅速复溶为澄明液体。[适应症]1.用于治疗某些病毒性疾病,如急慢性病毒性肝炎、带状疱疹、尖锐湿疣。 2.用于治疗某些肿瘤,如毛细胞性白血病、慢性髓细胞性白血病、多发性骨髓瘤、非何杰金氏淋巴瘤、恶性黑色素瘤、肾细胞癌、喉乳头状瘤、卡波氏肉瘤、卵巢癌、基底细胞癌、表面膀胱癌等。[规格]3×106IU/支,复溶后体积1.0 毫升。[用法用量]本品可以肌肉注射、皮下注射和病灶注射。 1.慢性乙型肝炎:皮下或肌肉注射,3—6×106IU/日,连用四周后改为3 次/周,连用16 周以上。2.急慢性丙型肝炎:皮下或肌肉注射,3—6×106IU/日,连用四周后改为 3 次/周,连用16 周以上。 3.丁型肝炎:皮下或肌肉注射,4—5×106IU/日,连用四周后改为3 次/周,连用16 周以上。4.带状疱疹:肌肉注射,1×106IU/日,连用6 天,同时口服无环鸟苷。5.尖锐湿疣:可单独应用,肌肉注射,1—3×106IU/日,连用四周。也可与激光或电灼等合用,一般采用疣体基底部注射,1×106IU/次。6.毛细胞白血病:2—8×106IU/m2/天,连用至少3 个月。7.慢性粒细胞白血病:3—5×106IU/m2/天,肌肉注射。可与化疗药物羟基脲、Ara—c 等合用。8.多发性骨髓瘤:作为诱导或维持治疗,3—5×106IU/m2,肌肉注射,3 次/周,并与VMCP 等化疗方案合用。9.非何杰金氏淋巴瘤:作为诱导或维持治疗,3—5×106IU/m2,肌肉注射,3 次/周,并与CHVP 等化疗方案合用。10.恶性黑色素瘤:6×106IU,肌肉注射,3 次/周,与化疗药物合用。11.肾细胞癌:6×106IU,肌肉注射,3 次/周,与化疗药物合用。12.喉乳头状瘤:3×106IU/m2,肌肉注射或皮下注射,每周3 次(隔日1 次)。13.卡波氏肉瘤:50×106IU/m2/天,连续5 天,每次静脉滴注30 分钟。至少间隔9 天再进行下一个5 天的治疗期。14.基底细胞癌:5×106IU,瘤灶内注射,3 次/周,3 周。15.卵巢癌:5—8×106IU,肌肉注射,3 次/周,与化疗药物合用。[不良反应]使用本品常见有发烧、头痛、寒战、乏力、肌痛、关节痛等症状,常出现在用药的第一周,不良反应多在注射48 小时后消失。如遇严重不良反应,须修改治疗方案或停止用药。一旦发生过敏反应,应立即停止用药。少数病人还可出现白细胞减少、血小板减少等血象异常,停药后即可恢复正常。偶见有厌食、恶心、腹泻、呕吐、脱发、高(或低)血压、神经系统紊乱等不良反应。[禁忌]1.对重组人干扰素α 2b 或该制剂的任何成份有过敏史者。2.患有严重心脏疾病者。3.严重的肝、肾或骨髓功能不正常者。4.癫痫及中枢神经系统功能损伤者。5.有其他严重疾病不能耐受本品者,不宜使用。[注意事项]1.本品冻干制剂为白色疏松体,溶解后为无色透明液体,如遇有浑浊、沉淀等异常现象,则不得使用。包装瓶有损坏、过期失效不能使用。2.以注射用水溶解时应沿瓶壁注入,以免产生气泡,溶解后宜于当日用完,不得放置保存。[孕妇及哺乳期妇女用药]孕妇用药经验有限,孕期内安全使用本品的方法尚未建立,因此,给孕妇注射,须在病情十分需要,并由临床医生仔细斟酌后确定。[儿童用药]儿童用药经验仍有限,对此类病例应小心权衡利弊后遵医嘱用药。[老年用药]对有心脏病的老年患者,老年癌症晚期患者,在接受本剂治疗前及治疗期中都应做心电图检查,遵医嘱做剂量调整或停止用本品。[药物相互作用]干扰素可能会改变某些酶的活性,尤其可减低细胞色素酶P450 的活性,因此西咪替丁、华法令、茶碱、安定、心得安等药物代谢受到影响。在与具有中枢作用的药物合并使用时,会产生相互作用。[药物过量]尚未有药物过量的报告,但大剂量应用时,

乙肝的干扰素种类及其用法

干扰素:干扰素(IFN)是一种广谱抗病毒剂,并不直接杀伤或抑制病毒,而主要是通过细胞表面受体作用使细胞产生抗病毒蛋白,从而抑制乙肝病毒的复制;同时还可增强自然杀伤细胞(NK细胞)、巨噬细胞和T淋巴细胞的活力,从而起到免疫调节作用,并增强抗病毒能力。人体内的干扰素由于氨基酸组成的不同,可分为α、β、γ三种,分别由白细胞、成纤维细胞和免疫淋巴细胞产生。α干扰素是目前国内外公认有效的抗乙型肝炎病毒药物。α干扰素有20多个亚型,α1、α2、α3等;每一亚型又因个别氨基酸不同,可分为α1a、α1b、α2a、α2b等。目前用于乙肝治疗的α干扰素主要是基因工程技术产生的,单一亚型的α干扰素。常用的有α1b、α2a、α2b。目前看,各亚型的α干扰素,在疗效上并没有十分显著的差别,有研究认为,中国人在受到病毒攻击所产生的干扰素多为α1b型,所以通常认为α1b 效果更好、副作用更小,但是在实际应用中,差别并不大。 市场主要干扰素品牌: 干扰素α2a:罗荛愫(罗扰素)因特芬贝尔芬万复洛迪恩安 干扰素α1b:赛若金运德素 干扰素α2b:甘乐能(干扰能)安达芬英特龙隆化诺远策素万复因利芬能来福隆安福隆 长效干扰素:即聚乙二醇干扰素,商品名,派罗欣。 普通干扰素的缺点是显而易见的,由于吸收快,注射几个小时后,血药浓度达到最高,这时副作用的反应强烈,抑制病毒的作用也达到最高,但是由于排泄比较快,造成在下次注射前,血药浓度的偏低,病毒可能会恢复复制,造成峰谷差。而聚乙二醇干扰素,由于大分子的化合,很好的解决了这个问题,血药浓度基本可以保持恒定,不会存在病毒重新复制的机会,作用时间延长,降低了在体内的清除率、抗原性下降不易产生干扰抗体等等。因此,相对普通干扰素,长效干扰素的优点是避免了频繁的注射,效果也较普通干扰素为好,但是价格相当昂贵,性价比不高。

基因工程重组人干扰素概述(

根据来源、基因序列和氨基酸组成分类 I 型干扰素: IFNα、IFNβ、IFN τ、IFN ω 来源:白细胞、成纤维细胞、病毒感染的组织细胞等 功能:抗病毒感染、抗肿瘤生长 免疫调节(较弱) 其中IFN-α为多基因产物,有23种以上的亚型。 II 型干扰素:干扰素γ(IFN ) 来源:活化的T细胞和NK细胞产生 功能:免疫调节 提高单核巨噬细胞、树突状细胞的抗原提呈能力 增强Tc细胞和NK细胞的杀伤活性 抑制TH2细胞形成,下调体液免疫应答 趋化作用 抗病毒和抗肿瘤作用(次要)

2. 根据动物来源确定分类,例如人干扰素(HuIFN),小鼠干扰素(MuIFN)。 免疫调节作用表现在对宿主免疫细胞活性的影响,如对巨噬细胞、T细胞、B细胞和NK细胞等均有一定作用。 ●对巨噬细胞的作用:IFNγ可使巨噬细胞表面MHCⅡ类分子的表达 增加,增强其抗原递呈能力;此外还能增强巨噬细胞表面表达Fc 受体,促进巨噬细胞吞噬免疫复合物、抗体包被的病原体和肿瘤细胞。 ●对淋巴细胞的作用:干扰素对淋巴细胞的作用较为复杂,可受剂 量和时间等因素的影响而产生不同的效应。在抗原致敏之前使用大剂量干扰素或将干扰素与抗原同时投入会产生明显的免疫抑制作用;而低剂量干扰素或在抗原致敏之后加入干扰素则能产生免疫增强的效果。在适宜的条件下,IFNγ对B细胞和CD8+T细胞的分化有促进作用,但不能促进其增殖。IFNγ能增强TH1细胞的活性,增强细胞免疫功能;但对TH2细胞的增殖有抑制作用,因此抑制体液免疫功能。IFNγ不仅抑制TH2细胞产生IL-4,而且抑制IL-4对B细胞的作用,特别是抑制B细胞生成IgE。 ●对其它细胞的作用:IFNγ对其他细胞也有广泛影响:①刺激中性 粒细胞,增强其吞噬能力;②活化NK细胞,增强其细胞毒作用;

干扰素基础知识

干扰素基础知识

干扰素 干扰素(IFN)是一种广谱抗病毒剂,并不直接杀伤或抑制病毒,而主要是通过细胞表面受体作用使细胞产生抗病毒蛋白,从而抑制乙肝病毒的复制;同时还可增强自然杀伤细胞(NK细胞)、巨噬细胞和T淋巴细胞的活力,从而起到免疫调节作用,并增强抗病毒能力。干扰素是一组具有多种功能的活性蛋白质(主要是糖蛋白),是一种由单核细胞和淋巴细胞产生的细胞因子。它们在同种细胞上具有广谱的抗病毒、影响细胞生长,以及分化、调节免疫功能等多种生物活性。 目录: 一、干扰素 二、干扰素简介 三、干扰素多少钱 四、发现 五、什么叫干扰素(IFN) 六、品种及价位 七、作用机制 ①间接性 ②广谱性 ③种属特异性 ④发挥作用迅速 八、分类 九、干扰素制剂如何分类 十、临床上常用的干扰素有哪些制剂

1自然干扰素 2人体白细胞重组干扰素 3复合干扰素 十一、干扰素适应症 十二、干扰素有哪些不良反应 十三、如何应对干扰素的不良反应 十四、干扰素研究、应用历程 十五、病毒的克星——干扰素 十六、哪些人不宜使用干扰素治疗 十七、什么是长效干扰素 十八、普通干扰素和长效干扰素的区别 十九、干扰素治疗的禁忌证 二十、用途及用法 二十一、干扰素治疗乙肝效果 一、干扰素 药物类别:抗肿瘤药,抗病毒药;所属类别:生物反应调节剂药物名称:干扰素英文名称:Interferon 药物别名:序号中文别名英文别名 一.α干扰素 制剂/规格:序号制剂规格 1.注射剂5×10。单位(1 ml);1×106。单位(1 ml); 2.冻干剂l×10。单位

成份/化学结构:序号成份化学结构 药理作用:1.抗病毒作用:其抗病毒活性不是杀灭而是抑制病毒,它一般为广谱病毒抑制剂,对RNA和DNA病毒都有抑制作用。当病毒感染的恢复期可见干扰素的存在,另一方面用外源性干扰素亦可缓解感染。 2.抑制细胞增殖干扰素抑制细胞分裂的活性有明显的选择性,对肿瘤细胞的活性比正常细胞大500~1000倍。干扰素抗肿瘤效果可以是直接抑制肿瘤细胞增殖,或通过宿主机体的免疫防御机制限制肿瘤的生长。 3.诱导细胞凋亡:干扰素可以诱导肿瘤细胞凋亡,从而杀灭肿瘤细胞。 4.干扰素对体液免疫、细胞免疫均有免疫调节作用,对巨噬细胞及NK细胞也有一定的免疫增强作用。 药动学:干扰素在肌内注射或皮下注射后入血的速度较慢,需较长时间才能在血中测到。肌内注射后Tmax为5~8小时。一次肌注:106单位,血清浓度为100单位/ml,这比在病毒感染时自然产生的干扰素量为高。循环中的干扰素半衰期为2~4小时。只有少量干扰素能进入血脑屏障,脑脊液内的浓度约为血内浓度的l/30,只有在兔身上研究过排泄,排出量只有0.2%~2.0%。 适应症:1.用于多种恶性肿瘤,包括毛细胞白血病、慢性白血病、非何淋巴瘤、骨髓瘤、膀胱癌、卵巢癌、晚期转移性肾癌及胰腺恶性内分泌肿瘤、黑色素瘤和Kaposi 肉瘤等。 2.与其他抗肿瘤药物并用。 3.作为放疗、化疗及手术的辅助治疗剂。 4.病毒性疾病的防治。 用法用量:

重组人干扰素a2a栓

重组人干扰素 【批准文号】国药准字S1******* 【中文名称】重组人干扰素a2a栓

【产品英文名称】Recombinant Human Interferonα2a In Suppository Form 【功效主治】重组人干扰素用于治疗阴道病毒性感染引起的慢性宫颈炎、宫颈糜烂、阴道炎,预防宫颈癌。 【化学成分】重组人干扰素α 2a 【药理作用】药理:重组人干扰素α2a具有广谱抗病毒作用,其抗病毒机制主要通过干扰素同靶细胞表面干扰素受体结合,诱导靶细胞内2-5(A)合成酶、蛋白激酶PKR、MX蛋白等多种抗病毒蛋白,阻止病毒蛋白质的合成、抑制病毒核酸的复制和转录而实现。干扰素还具有多重免疫调节作用,可提高巨噬细胞的吞噬活性和增强淋巴细胞对靶细胞的特异性细胞毒等,促进和维护机体的免疫监视、免疫防护和免疫自稳功能。毒理:1、急性毒性试验:最

大剂量静脉或肌内注射小鼠,全部健存,无死亡,未测出LD50。2、长期毒性试验:大白鼠连续给药一个月,全部动物健存,未见异常反应。 【药物相互作用】重组人干扰素α 2a与其他药物同时使用,对药效无影响。 【不良反应】极少数病人初次用药后出现轻微腰腹酸痛,偶见一过性低热,外阴、阴道不适,可自行消失,不影响治疗。 【禁忌症】重组人干扰素α 2a儿童、孕妇禁用。 【产品规格】6万单位 【用法用量】将栓剂置于阴道后窟窿,每次一枚,隔日一次,睡前使用,6-10次为一个疗程或遵医嘱。

【贮藏方法】重组人干扰素α 2a应于避光、光燥、于2-8度保存。有效期18个月。 【注意事项】用药期间禁止坐浴和性生活,经期停止用药。如使用时环境温度过高,栓体变软(不影响疗效),请先置于4℃冰箱或冷水中3~5分钟,撕开塑料取出使用。

干扰素的功能、制备方法和工艺的研究

干扰素的制备工艺的研究 姓名:刘海燕班级:11生工1 学号:20110801105 摘要:干扰素(IFN)是一种广谱抗病毒剂,并不直接杀伤或抑制病毒,而主要是通过细胞表面受体作用使细胞产生抗病毒蛋白,从而抑制乙肝病毒的复制,其类型分为三类,α-(白细胞)型、β-(成纤维细胞)型,γ-(淋巴细胞)型;同时还可增强自然杀伤细胞(NK细胞)、巨噬细胞和T淋巴细胞的活力,从而起到免疫调节作用,并增强抗病毒能力。干扰素是一组具有多种功能的活性蛋白质(主要是糖蛋白),是一种由单核细胞和淋巴细胞产生的细胞因子。它们在同种细胞上具有广谱的抗病毒、影响细胞生长,以及分化、调节免疫功能等多种生物活性。本文在查询大量文献,由作者归纳整理得出了关于干扰素的功能、制备方法和工艺的一些新的理论和实际应用。更好的了解了干扰素的作用机制以及对人类社会的重要用途。 关键词:干扰素,功能,生产过程,制备工艺 1 干扰素简介 干扰素是一种细胞因子。它是机体感染病毒时,宿主细胞通过抗病毒应答反应而产生的一组结构相似、功能相近的低分子糖蛋白。干扰素干扰病毒复制,它是机体抗病毒感染的防御系统干扰素的种类很多,有人体干扰素、动物干扰素、昆虫干扰素、植物干扰素和细胞干扰素。目前所知道的人体干扰素按细胞结构和来源分α、β、γ干扰素三个型别,α干扰素又称人白细胞干扰素,它是由B淋巴细胞和单核细胞产生的,它可以分为23种亚型,分别称为干扰素α1、α2a、α2b、α3等,它们相互之间有较高的同源性。人β-干扰素又称人纤维母细胞产生的,有一个亚型。γ一干扰素又称免疫干扰素,它是由淋巴细胞的辅助诱导细胞产生的,与α、β干扰素之间没有明显的同源性。三种干扰素都有抗病毒、抗肿瘤及免疫调节活性。基因工程干扰素是指从人细胞中克隆出干扰素基因,将此基因与大肠杆菌表达载体连接物构成重组表达质粒,然后转化到大肠杆菌中,从而获得高效表达人干扰素蛋白的工程菌, 工程菌经发酵后可收集到大量菌体,将菌体破

干扰素的研究进展及应用前景

干扰素的研究进展及应用前景高等生物化学中期答辩 作者:ZJJ 学院:化学化工学院 专业:药物化学 学号:

干扰素的研究进展及应用前景 作者: 摘要:干扰素是人体受到病毒或双股RNA刺激物的刺激产生免疫应答,由细胞合成及分泌的一族蛋白质类,具有调节机体免疫功能、抗病毒、抗肿瘤等多种作用,是机体防御系统的重要组成部分。它通过干扰病毒基因转录或病毒蛋白组分的翻译,从而阻止或限制病毒感染,是目前最主要的抗病毒感染和抗肿瘤生物制品。本文就干扰素的分类、分子结构、作用机理、生物学活性、体外重组技术以及临床应用等方面的研究进展进行了综述,并对其应用前景做出预测展望。 关键词:干扰素研究进展应用前景 Research progress and application prospect of interferon Author: ( Tianjin University of Technology, Tianjin 300072,China) Interferon (IFN) is human body gets virus or double stranded the exciting generation immunity of RNA exciter is respondent, by the cell synthesis reaches excretive gens protein kind ,has the function of regulating the immune function, antiviral and antitumor, is an important part of the body's defense system. It can prevent or limit viral infection by interfering with viral gene transcription or translation of the viral proteins,so it is the main antiviral and antitumor biological products.The research of interferon classification, molecular structure,

最新-中学生《普通心理学》知觉的种类 精品

《普通心理学》:知觉的种类 根据不同的标准,可以对知觉进行不同的分类。根据知觉是更正确,可将知觉分为正确的知觉和错误的知觉。根据知觉活动中占主导地位的感受器的不同,可将知觉分为视知觉、听知觉、嗅知觉、味知觉等。根据知觉对象的不同,可将知觉分为物体知觉和社会知觉。 一、物体知觉 物体知觉就是对物的知觉,对自然界中机械、物理、化学、生物种种现象的知觉。任何事物都具有空间、时间和运动的特性,因而物体知觉又分为空间知觉、时间知觉、运动知觉。 1.空间知觉 空间知觉是对客观世界三维特性的知觉,具体指物体大小、距离、形状和方位等在头脑中的反映。空间知觉是一种较复杂的知觉,需要人的视觉、听觉、运动觉等多种分析器的联合活动来实现。在我们的生活、学习中,空间知觉具有重要的作用。例如,学习汉语拼音、汉字时,需要正确辨别上下、左右,否则难以顺利地掌握汉字的结构和识别汉语拼音;下楼梯时,如果我们不知道有几个台阶、每个台阶有多高,就容易摔倒。 空间知觉包括形状知觉、大小知觉、深度与距离知觉、方位知觉等。 形状知觉指对物体的轮廓和边界的整体知觉。形状知觉是人类和动物共同具有的知觉能力,但人类的形状知觉能力比动物的更高级,因为人类能识别文字。形状知觉是靠视觉、触觉、运动觉来实现的。我们可以通过物体在视网膜上的投影、视线沿物体轮廓移动时的眼球运动、手指触摸物体边沿等,产生形状知觉。 大小知觉指对物体长短、面积和体积大小的知觉。依靠视觉获得的大小知觉,决定于物体在视网膜上投影的大小和观察者与物体之间的距离。在距离相等的条件下,投影越大,则物体越大;投影越小,则物体越小。在投影不变的情况下,距离越远,则物体越大;距离越近,则物体越小。大小知觉还受个体对物体的熟悉程度、周围物体的参照的影响。对熟悉物体的大小知觉不随观察距离、视网膜投影的改变而改变。对某个物体的大小知觉也会因该周围参照物的不同而改变。 对物体深度和距离的判断可以依据的线索很多,如小的物体似乎远些,大的物体似乎近些;被遮挡的物体远些;远处的物体看起来模糊,能看到的细节少;远的物体显得灰暗,近的物体色彩鲜明;看近物时,双眼视线向正中聚合,看远物时,双眼视线近似平行等。我们还可以通过立体镜来了解深度知觉。 人依靠视觉、听觉、运动觉等来判断方位,这种能力是后天形成的。依靠视觉进行方位判断必须借助参照物。参照物可以是自己的身体、太阳的位置、地球的磁场、天地等。不同方位辨别由易到难的次序分别是上、下、后、前、左与右。由于人的两只耳朵分别在头部的左右两侧,因此同一声源到达两耳的距离不同,两耳所感知的声音在时间上、强度上存在差别。正因如此,我们也能依靠听觉进行方向定位。 2.时间知觉 时间知觉是对事物发展的延续性、顺序性的知觉,具体表现为对时间的分辨、对时间的确认、对持续时间的估量、对时间的预测。时间,既没有开始也没有结束。生活中,我们

干扰素的作用机理以及干扰素的分类和产生的细胞

干扰素的作用机理以及干扰素的分类和产生的细胞 2014.9.29 详细介绍: 干扰素是人体受到病毒感染时产生的一种多功能蛋白质(生物学上叫细胞因子)。我们都得过流行性感冒,当你发热、全身肌肉、关节酸痛、全身无力时,你就感受到了干扰素的存在。当然也还有其它细胞因子的参与,但干扰素是病毒感染时产生的最主要的细胞因子之一。如果您曾经注射过干扰素,医生会告诉你打干扰素后会出现“流感样症状”,这是因为流感时的症状其实也是干扰素引起的。 干扰素是个多功能的蛋白质,属于人体天然免疫的重要组成部分。总的来说,干扰素具有以下几个重要作用: 1、抗病毒作用。当我们的机体感染病毒时,体内会产生大量的干扰素。 2、抗增生作用。这是干扰素能用于治疗多种肿瘤的原因。 3、免疫调节作用。干扰素是天然免疫的一部分,但干扰素也参与多种特异性的细胞免疫,如增强感染的肝细胞表达被T淋巴细胞识别的蛋白质,帮助T细胞识别病毒感染的细胞等。 4、抗纤维化作用。这是为什么干扰素治疗的病人肝纤维化会明显好转。 此外,干扰素还有抗新血管增生、促进细胞凋亡等多种功能。

但在治疗慢性乙肝方面,抗病毒作用和免疫调节作用,以及抗纤维化作用可能是主要的。 干扰素(IFN)是病毒或其他干扰素诱生剂刺激细胞所产生的一类分泌性蛋白,具有抗病毒、抗肿瘤和免疫调节等多种生物学活性。α干扰素主要由人白细胞产生,β干扰素主要由人成纤维细胞产生,α和β干扰素属于Ⅰ型干扰素,抗病毒作用较强。γ干扰素由T细胞产生,为Ⅱ型干扰素(免疫干扰素),其免疫调节作用较抗病毒作用强。 根据干扰素蛋白质的氨基酸结构、抗原性和细胞来源,可将其分为:IFN-α、IFN-β、IFN-γ。 IFN-ω属于IFN-α家族,其结构和大小与其它IFN-α稍有差异,但抗原性有较大的不同。 现在公认IFN-β和IFN-γ只有一个亚型,而IFN-α有约二十余个亚型。 自80年代以来,许多研究显示,干扰素(尤其是α-干扰素及γ-干扰素)除具有抗病毒、免疫调节的作用外,还具有明显的抗细胞增殖作用。因此,目前干扰素已被用于治疗多种白血病

重组人干扰素α2b喷雾剂(假单胞菌) (新增)

重组人干扰素α2b喷雾剂(假单胞菌) Chongzu Ren Ganraosu α2b Penwuji (Jiadanbaojun) Recombinant Human Interferon α2b Spray(P.putida) 本品系由高效表达人干扰素α2b基因的腐生型假单胞菌,经发酵、分离和高度纯化后制成。含适宜稳定剂、防腐剂。 1.基本要求 生产和检定用设施、原料及辅料、水、器具、动物等应符合“凡例”的有关要求。 2.制造 2.1 工程菌菌种 2.1.1 名称及来源 重组人干扰素α2b工程菌系由带有人干扰素α2b基因的重组质粒转化的腐生型假单胞菌菌株(Pseudomonas putida VG-4)。 2.1.2 种子批的建立 应符合“生物制品生产检定用菌毒种管理规程”的规定。 2.1.3 菌种检定 主种子批和工作种子批菌种应进行以下各项全面检定。 2.1. 3.1 划种LB琼脂平板 应呈典型的腐生型假单胞菌集落形态,无其他杂菌生长。 2.1. 3.2 染色镜检 应呈棒状,可运动,有荚膜,无芽孢。涂片染色应呈典型的革兰阴性。 2.1. 3.3 对抗生素的抗性 应与原始菌种相符。 2.1. 3.4 电镜检查(工作种子批可免做) 应为典型的腐生型假单胞菌形态,无支原体、病毒样颗粒及其他微生物污染。 2.1. 3.5 生化反应 不液化明胶、不水解淀粉和聚β-羟基丁酸酯(附录ⅪⅤ),不能利用反硝化作用进行厌氧 2.1. 3.6 干扰素表达量 在摇床中培养,应不低于原始菌种的表达量。 2.1. 3.7 表达的干扰素型别 应用抗α2b型干扰素参考血清做中和试验,证明型别无误。 2.1. 3.8 质粒检查 该质粒的酶切图谱应与原始重组质粒相符。 2.1. 3.9 目的基因核苷酸序列检查(工作种子批可免做) 目的基因核苷酸序列应与批准序列相符。 2.2原液制备

知觉

一、知觉概念 1.知觉的定义 (1)知觉是客观事物直接作用于感官而在头脑中产生的对事物整体的认识。知觉是在感觉的基础上产生的,是对感觉信息整合的反应。 (2)知觉与感觉的关系: ①两者都是事物直接作用于感观产生的。同属于对现实的感性认知形式。离开了事物对感官的直接作用,即没有感觉,也没有知觉。 ②知觉以感觉作为基础,但它不是个别感觉信息的简单总和,知觉比感觉复杂。知觉是按一定方式来整合个别的感觉信息,形成一定的结构,并根据个体的经验来解释由感觉提供的信息。 (3)知觉受人的主观因素的影响,包括:需要和动机、价值与态度、情绪。 2.知觉过程的作用 知觉作为一种活动、过程,包含了相互联系的几种作用:觉察、分辨和确认。 觉察是指发现事物的存在,而不知道它是什么。分辨是把一个事物或其属性与另一个事物或属性区别开来。确认是指人们利用已有的知识经验和当前获得的信息,确定知觉的对象是什么,给它命名,并把他纳入一定的范畴。

3.知觉的分类 (1)根据知觉时起主导作用的感官的特性,可以把知觉分成视知觉、听知觉、触知觉、嗅知觉、味知觉等等。 (2)根据人脑所认识的事物特性,可以把知觉分成空间知觉、时间知觉和运动知觉。 4.几个概念 (1)自下而上的加工:知觉依赖于直接作用于感官的刺激物的特性,对这些特性的加工叫自下而上的加工或数据驱动加工。如:颜色和明度知觉依赖于光的波长与振幅。 (2)自上而下的加工:知觉依赖于感知的主体。人的知觉系统要加工在头脑中已经存储的信息。叫自上而下的加工或概念驱动加工。例如:在阅读课文时,由于个人的知识经验不同,我们从课文中提取的信息也是不一样的。 二、知觉的特性 知觉具有选择性、整体性、恒常性。 1.知觉的选择性 人的知觉选择性是在实践中产生并为人的实践活动所需要的。 (1)知觉的选择性是指对外来的刺激进行有选择的加工的过程。被选择的是对象,未被选择的其他刺激成为背景。人对知觉对象与背景的反映效果是有所区别的。知觉对象的形象较为鲜明,轮廓较为清楚,结构也较为完整;作为知觉背

基因工程制备干扰素

第I 页共11 页 毕业论文(设计) 题目浅谈基因工程生产人干扰素 姓名乔雪姣学号11111807 专业微生物技术及应用 指导教师鞠守勇职称讲师 中国·武汉 二○一二年十一月

目录 摘要 .............................................................................................................. 错误!未定义书签。关键词 ............................................................................................................ 错误!未定义书签。Abstract (3) Key words ....................................................................................................... 错误!未定义书签。前言 .. (4) 1、干扰素作用及其机理详述 (4) 1.1干扰素的种类 (5) 1.2干扰素的性质 (5) 1.3干扰素的作用.................................................................................. 错误!未定义书签。 1.3.1 干扰素的作用........................................................................... 错误!未定义书签。 1.3.2 干扰素的作用示意图................................................................. 错误!未定义书签。 1.4 干扰素的作用机理......................................................................... 错误!未定义书签。 2、基因工程 (6) 2.1 基因工程的概论 (6) 2.2 基因扩增基本过程 (6) 2.2.1基因的体内扩增 (6) 2.2.2基因的体外扩增——PCR技术 (6) 2.3 基因操作中的载体......................................................................... 错误!未定义书签。 2.3.1对载体的认识.............................................................................. 错误!未定义书签。 2.3.2大肠杆菌载体 (6) 2.3.3pBR322质粒载体的特点 (7) 2.4基因的导入 (7) 2.4.1 基因导入的概念 (8) 2.4.2基因导入的方法 (8) 2.5基因的导入后的筛选与鉴定 (8) 2.5.1筛选与鉴定的原因 (8) 2.5.2筛选与鉴定的方法 (8) 2.6目的基因的表达与鉴定 (8) 2.6.1目的基因表达与鉴定的原因 (8) 2.6.2目的基因的表达系统与鉴定方法 (8) 3.基因工程生产干扰素 (8) 3.1干扰素目的基因的分离与扩增 (10) 3.2目的基因与克隆载体进行体外重组.............................................. 错误!未定义书签。 3.3重组质粒转入大肠杆菌宿主细胞 (9) 3.4受体菌的筛选 (9) 3.5构建工程菌 (9) 3.6干扰素的提取与纯化 (10) 4.基因工程生产干扰素总结 (10) 参考文献 (10) 致谢 (11)

干扰素基础知识

干扰素 干扰素(IFN)是一种广谱抗病毒剂,并不直接杀伤或抑制病毒,而主要是通过细胞表面受体作用使细胞产生抗病毒蛋白,从而抑制乙肝病毒的复制;同时还可增强自然杀伤细胞(NK细胞)、巨噬细胞和T淋巴细胞的活力,从而起到免疫调节作用,并增强抗病毒能力。干扰素是一组具有多种功能的活性蛋白质(主要是糖蛋白),是一种由单核细胞和淋巴细胞产生的细胞因子。它们在同种细胞上具有广谱的抗病毒、影响细胞生长,以及分化、调节免疫功能等多种生物活性。 目录: 一、干扰素 二、干扰素简介 三、干扰素多少钱 四、发现 五、什么叫干扰素(IFN) 六、品种及价位 七、作用机制 ①间接性 ②广谱性 ③种属特异性 ④发挥作用迅速 八、分类 九、干扰素制剂如何分类 十、临床上常用的干扰素有哪些制剂

1自然干扰素 2人体白细胞重组干扰素 3复合干扰素 十一、干扰素适应症 十二、干扰素有哪些不良反应 十三、如何应对干扰素的不良反应 十四、干扰素研究、应用历程 十五、病毒的克星——干扰素 十六、哪些人不宜使用干扰素治疗 十七、什么是长效干扰素 十八、普通干扰素和长效干扰素的区别 十九、干扰素治疗的禁忌证 二十、用途及用法 二十一、干扰素治疗乙肝效果 一、干扰素 药物类别:抗肿瘤药,抗病毒药;所属类别:生物反应调节剂药物名称:干扰素英文名称:Interferon 药物别名:序号中文别名英文别名 一.α干扰素 制剂/规格:序号制剂规格 1.注射剂5×10。单位(1 ml);1×106。单位(1 ml); 2.冻干剂l×10。单位

成份/化学结构:序号成份化学结构 药理作用:1.抗病毒作用:其抗病毒活性不是杀灭而是抑制病毒,它一般为广谱病毒抑制剂,对RNA和DNA病毒都有抑制作用。当病毒感染的恢复期可见干扰素的存在,另一方面用外源性干扰素亦可缓解感染。 2.抑制细胞增殖干扰素抑制细胞分裂的活性有明显的选择性,对肿瘤细胞的活性比正常细胞大500~1000倍。干扰素抗肿瘤效果可以是直接抑制肿瘤细胞增殖,或通过宿主机体的免疫防御机制限制肿瘤的生长。 3.诱导细胞凋亡:干扰素可以诱导肿瘤细胞凋亡,从而杀灭肿瘤细胞。 4.干扰素对体液免疫、细胞免疫均有免疫调节作用,对巨噬细胞及NK细胞也有一定的免疫增强作用。 药动学:干扰素在肌内注射或皮下注射后入血的速度较慢,需较长时间才能在血中测到。肌内注射后Tmax为5~8小时。一次肌注:106单位,血清浓度为100单位/ml,这比在病毒感染时自然产生的干扰素量为高。循环中的干扰素半衰期为2~4小时。只有少量干扰素能进入血脑屏障,脑脊液内的浓度约为血内浓度的l/30,只有在兔身上研究过排泄,排出量只有0.2%~2.0%。 适应症:1.用于多种恶性肿瘤,包括毛细胞白血病、慢性白血病、非何淋巴瘤、骨髓瘤、膀胱癌、卵巢癌、晚期转移性肾癌及胰腺恶性内分泌肿瘤、黑色素瘤和Kaposi 肉瘤等。 2.与其他抗肿瘤药物并用。 3.作为放疗、化疗及手术的辅助治疗剂。 4.病毒性疾病的防治。 用法用量:

基因工程重组人干扰素

基因工程重组人干扰素 来源:白细胞、成纤维细胞、病毒感染的组织细胞等 功能:抗病毒感染、抗肿瘤生长 免疫调剂(较弱) 其中IFN-α为多基因产物,有23种以上的亚型。 II 型干扰素:干扰素γ(IFN) 来源:活化的T细胞和NK细胞产生 功能:免疫调剂 提升单核巨噬细胞、树突状细胞的抗原提呈能力 增强Tc细胞和NK细胞的杀伤活性 抑制TH2细胞形成,下调体液免疫应答 趋化作用 抗病毒和抗肿瘤作用(次要) 2. 按照动物来源确定分类,例如人干扰素(HuIFN),小鼠干扰素(M uIFN)。 免疫调剂作用表现在对宿主免疫细胞活性的阻碍,如对巨噬细胞、T 细胞、B细胞和NK细胞等均有一定作用。 对巨噬细胞的作用:IFNγ可使巨噬细胞表面MHCⅡ类分子的表达增加,增强其抗原递呈能力;此外还能增强巨噬细胞表面表达Fc受体,促进巨噬细胞吞噬免疫复合物、抗体包被的病原体和肿瘤细胞。 对淋巴细胞的作用:干扰素对淋巴细胞的作用较为复杂,可受剂量和时刻等因素的阻碍而产生不同的效应。在抗原致敏之前使用大剂量干扰素或将干扰素与抗原同时投入会产生明显的免疫抑制作用;而低剂量干扰素或在抗原致敏之后加入干扰素则能产生免疫增强的成效。在适宜的条件下,IFNγ对B细胞和CD8+T细胞的分化有促进作用,但不能促进其增殖。IF Nγ能增强TH1细胞的活性,增强细胞免疫功能;但对TH2细胞的增殖有

抑制作用,因此抑制体液免疫功能。IFNγ不仅抑制TH2细胞产生IL-4,而且抑制IL-4对B细胞的作用,专门是抑制B细胞生成IgE。 对其它细胞的作用:IFNγ对其他细胞也有广泛阻碍:①刺激中性粒细胞,增强其吞噬能力;②活化NK细胞,增强其细胞毒作用;③使某些正常不表达MHCⅡ类分子的细胞(如血管内皮细胞、某些上皮细胞和结缔组织细胞)表达MHCⅡ类分子,发挥抗原递呈作用;④使静脉内皮细胞对中性粒细胞的粘附能力更强,且可分化为高内皮静脉,吸引循环的淋巴细胞。 二重组干扰素的临床应用 广谱抗病毒活性(rhuIFNα) 慢性乙型、丙型、丁型肝炎;疱疹、病毒性角膜炎。 直截了当抗肿瘤活性(rhuIFNα) 毛细胞和慢性髓样白血病、Kaposi肉瘤、非霍奇金淋巴瘤。 免疫调剂活性——治疗慢性肉芽肿瘤(rhuIFNγ) 多发性硬化症rhuIFNβ 对已知基因序列的干扰素, 基因文库的调用能够用其序列3' 端和5'端部分事先用同位素 标记过的序列作为探针, 通过杂交的方法进行调用。由于干扰素基因的种属特异性不是专门大,| 能够用人的干扰素基因为同源探针, 从鼠基因文 库中调出相应的干扰素基因, 其方法将在下文1 中提到。| 关于扰素基因的取用, 不仅能够使用构建基因文库的方法, 对已了解其 氨基酸或核昔酸割 成的干扰素也能够用化学合成的方法先合成其编码的DNA 序列, 再对其进行表达。化学合| 成方法包括固相合成法及液相合成法两大类。与利用基因文库的方法相比, 化学合成法比较| 复杂, 由于每加入一个核昔酸 就会有一定比例的错误掺入、基因重叠、基因缺失等情形, 同时在l 整个合成过程中这种错误持续积存, 因此该方法适合比较短的基因, 而对长 的基因则有目的产| 物含量低、产物纯化困难的缺点。但它也有优点, 如

干扰素常识

一、什么是干扰素 1、是通过基因工程技术生产的高科技、绿色抗病毒生物兽药。 2、是一类蛋白多肽,具有多功能的细胞因子、具有广泛的抗病毒、抗肿瘤和免疫调 节作用的可溶性糖蛋白。 3、能诱导动物细胞产生多种广谱抗病毒蛋白。 4、抑制病毒增殖,增强机体免疫应答。 5、在动物抵抗病毒感染过程中起着重要作用。 6、是目前所知发挥作用最快的病毒防御体系,几分钟内使机体处于病毒状态。 7、使机体在1-3周时间内对病毒的重复感染有抵抗作用。 二、干扰素的分类 根据产生干扰素细胞种类不同分为︱型和‖型 ︱型干扰素包括α、β 、δ、τ、ω 等亚型,最具有典型代表的是a亚型,具有强烈的抗病毒功能,因此又称抗病毒干扰素(IFN-α) ‖型干扰素目前只发现y亚型,具有强烈的免疫调节功能,因此又称免疫干扰素(IFN-y) ︱型和‖型均具有抗病毒、调节免疫、抗肿瘤的作用 区别:抗病毒方面IFN-a﹥IFN-y 免疫调节方面IFN-y﹥IFN-a 三、干扰素的药理 GTPase 阻断病毒穿入 2?,5?-Aase 阻断病毒脱壳 抗病毒蛋白表达———Pkas ——细胞呈现抗病毒状态——阻断病毒复制 2?-PDEas 阻断病毒合成 活化NK细胞 MO吞噬功能亢进 激活免疫细胞——加强KT细胞功能——杀伤病毒感染细胞 ADCC活性增强 四、干扰素作用 1、抗病毒、抗肿瘤作用 干扰素进入机体后产生多种广谱抗病毒蛋白分解病毒RNA阻断病毒蛋白合成导致tRNA与氨基酸不能结合消除病毒感染。 2、免疫调理、免疫增强作用:激活T淋巴细胞,活化巨噬细胞,吸引淋巴细胞向 炎性组织移动。 五、吉莱德系列干扰素具有的显著特点和优势: 1、高浓缩型 ①每毫升的活性单位高达100多万,无须加量使用。

干扰素药理及分类

干扰素药理及分类 干扰素是一种细胞因子,它是机体感染病毒时,宿主细胞通过抗病毒应答反应,而产生的一组结构类似、功能相近的低分子糖蛋白。英文名称为Interferon,简称IFN。 干扰素是1957年英国科学家发现的。他们把灭活的流感病毒作用于小鸡细胞,结果发现这些细胞产生了一种可溶性物质,这种物质能抑制流感病毒,并且能干扰其它病毒的繁殖,因此,他们将这种物质称为“干扰素”。以后科学家们进一步发现,机体对入侵的异种核酸(包括病毒)都产生干扰素以进行防御。当机体细胞受到病毒感染时,机体细胞产生干扰素,干扰病毒复制,它是机体抗病毒感染的防御系统。 根据干扰素蛋白质的氨基酸结构、抗原性和细胞来源,可将其分为:IFN-α、IFN-β、IFN-γ三大类(IFN-ω属于IFN-α家族,其结构和大小与其它IFN-α稍有差异,但抗原性有较大的不同)。现在公认IFN-β和IFN-γ只有一个亚型,而IFN-α有约二十余个亚型。 由人体白细胞产生的干扰素为IFN-α,又称人白细胞干扰素。由于其蛋白分子的变异和肽类氨基酸序列第23位和第34位的不同,又可分为:α-2a(23位为赖氨酸,34位为组氨酸)、α-2b(23位为精氨酸,34位为组氨酸)、α-2c(23位和34位都为精氨酸)三种。α-干扰素作用最强。其作用机理在于阻断病毒繁殖和复制,但不能进入宿主细胞直接杀灭病毒,而是与细胞膜接触并在细胞内产生一种特殊蛋白质即抗病毒蛋白(AVP),后者可抑制病毒mRNA信息的传递,从而阻止病毒在宿主细胞内繁殖。干扰素在病毒感染的细胞中还能诱导蛋白激酶及2'5'寡腺苷合成酶(2'5'AS)的产生,然后2'5'AS激活一个内源性核酸内切酶降解病毒RNA,同时蛋白激酶能灭活核糖体合成2所必需的酶,从而使蛋白合成减少,病毒生长受到阻抑。干扰素对β细胞的功能,在一定条件下起抑制或增进作用,如干扰素浓度高时有明显抑制抗体反应,临床应用大剂量IFN-α治疗慢性病毒性肝炎,可使血清IgG、IgM异常升高者得到改善或恢复,其作用亦系干扰素抑制β细胞的作用,使浆细胞制造免疫球蛋白抗体过多现象得到缓解所致。干扰素对效应细胞

注射用重组人干扰素α2b(假单胞菌)

注射用重组人干扰素α2b(假单胞菌)Zhusheyong Chongzu Ren Ganraosu α2b (Jiadanbaojun) Recombinant Human Interferon α2b for Injection (P.putida) 本品系由高效表达人干扰素α2b基因的腐生型假单胞菌,经发酵、分离和高度纯化后冻干制成。含适宜稳定剂,不含防腐剂和抗生素。 1基本要求 生产和检定用设施、原料及辅料水、器具、动物等应符合“凡例”的有关要求。 2制造 2.1工程菌菌种 2.1.1名称及来源 重组人干扰素α2b工程菌株系由带有人干扰素α2b基因的重组质粒转化的腐生型假单胞菌菌株(Pseudomonas putida VG-4)。 2.1.2种子批的建立 应符合“生物制品生产检定用菌毒种管理规程”的规定。 2.1.3菌种检定 主种子批和工作种子批的菌种应进行以下各项全面检定。 2.1.3.1划种LB琼脂平板 应呈典型腐生型假单胞菌集落形态,无其他杂菌生长。 2.1.3.2染色镜检 棒状,可运动,有荚膜,无芽孢。涂片染色后应呈典型的革兰阴性。 2.1.3.3对抗生素的抗性 应与原始菌种相符:硫酸链霉素150μg/ml,盐酸四环素50μg/ml和氨苄西林100μg/ml。 2.1.3.4电镜检查(工作种子批可免做) 应为典型腐生型假单胞菌形态,无支原体、病毒样颗粒及其他微生物污染。 2.1.3.5生化反应 不液化明胶,不水解淀粉和聚β-羟基丁酸酯(附录ⅪⅤ),不能利用反硝化作用进行厌氧呼吸,能够合成荧光色素。 2.1.3.6干扰素表达量 在摇床中培养,应不低于原始菌种的表达量(1.0×109IU/L)。 2.1.3.7表达的干扰素型别 应用抗α2b型干扰素参考血清做中和试验,证明型别无误。 2.1.3.8质粒检查 该质粒的酶切图谱应与原始重组质粒相符。 2.1. 3.9 目的基因核苷酸序列检查 目的基因核苷酸序列应与理论值相符。 2.2原液 2.2.1种子液制备

心理学分类模拟题感觉与知觉(四)

心理学分类模拟题感觉与知觉(四) 一、简答题 1. 简述感觉的分类。 答案:人类感觉根据它获取信息的来源不同,可以分为三类:远距离感觉、近距离感觉和内部感觉。远距离感觉包括视觉和听觉,它们提供位于身体以外具有一定距离处的事物的信息。近距离感觉提供位于身体表面或接近身体的有关信息,包括味觉、嗅觉和皮肤觉。内部感觉的信息来自身体内部,机体觉告诉我们内部各器官所处状态;肌动觉感受身体运动与肌肉和关节的位置;平衡觉由位于内耳的感受器传达关于身体平衡和旋转的信息。 2. 简述感觉产生的基本过程。 答案:(1)收集信息;(2)转换,即把进入的能量转换为神经冲动,这是产生感觉的关键环节,其机构称感受器;(3)将感受器传出的神经冲动经过传入神经的传导,将信息传到大脑皮层,并在复杂的神经网络的传递过程中,对传入的信息进行有选择的加工;(4)在大脑皮层的感觉中枢区域,被加工为人们所体验到的具有各种不同性质和强度的感觉。 3. 简述感受性与刺激强度的关系。 答案:(1)感受性是指人对刺激物的感受能力; (2)为了产生感觉,刺激的强度必须达到一定数量;随着刺激的强度增大,感觉也在加强,即感受性也在加强; (3)刺激强度超过某种限度时会破坏感受系统的正常活动,太强或太弱的刺激量,并不能被人觉察。 4. 简述韦伯定律。 答案:描述觉察刺激的微弱变化所需变化量与原有刺激之间的关系的规律,由19世纪德国生理学家韦伯发现,称韦伯定律。韦伯定律指出,在一个刺激能量上发现一个最小可觉察的感觉差异所需要的刺激变化量与原有刺激量的大小有固定的比例关系。 5. 简述视觉产生的机制。 答案:(1)眼睛。①眼睛的构造。②网膜上的感光细胞。(2)色觉理论。①三原色说。②拮抗理论。 6. 简述色觉理论的两种学说。 答案:三原色说与拮抗理论为色觉理论的两种学说。三原色说是由杨和黑尔姆兹二人提出的,也称杨一黑理论。他们提出任何颜色都能由三种波长的纯光混合而产生。人具有三种不同形态的锥体细胞,它们分别对红、绿、蓝三种原色最敏感。以不同比例混合这三种原色,可以产生各种不同颜色。拮抗理论也称四色说。黑林提出人眼对光反应的视觉基本单元是成对组织的,有红、绿、黄、蓝四种原色,

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