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微生物研究技术习题

微生物研究技术习题
微生物研究技术习题

第一章绪论

1. 微生物的应用

(1)直接利用微生物营养菌体

单细胞蛋白(Single Cell Protein, SCP )、酸奶、微生态制剂、疫苗,酵母片、蘑菇和受体菌等.

(2)利用微生物代谢产物如:包括初级代谢产物和次生代谢产物,各种氨基酸、有机酸、抗生素、酶类等.

(3)利用微生物的基因

主要是不可培养微生物

采样→提取总的DNA →基因克隆→目的基因表达

(4)利用微生物的新陈代谢如:微生物的分解、转化、修饰作用

(5)利用微生物的拮抗作用如:生物防治、生物农药等

2微生物的应用领域

(1)在环境污染物治理与修复中的应用

(2)在发酵工业中的应用

有机酸:柠檬酸、乳酸、乙酸等

氨基酸:各种氨基酸,如谷氨酸等

抗生素:青霉素、链霉素

酶制剂等:工业用酶:如蛋白酶、淀粉酶、纤维素酶,科研用酶:如限制性内切酶等

(3)在农业中的应用

肥料:固氮菌肥,磷细菌肥,钾细菌肥料

杀虫剂:病毒杀虫剂,真菌杀虫剂(白僵菌),农用抗生素:5406,植物生长促进剂等

(4)在医学中的应用:

疫苗的制备和大规模生产;抗生素治疗;针对病原菌开展的以预防、治疗疾病为目的的各项研究;

(5)技术应用

PCR(从嗜热菌中分离的DNA聚合酶),利用质粒、病毒为载体进行基因工程研究;利用细菌细胞固定化技术进行发酵生产;基因工程技术。

(6)特殊应用

降解疯牛病蛋白的酶;能―挤出‖石油的细菌;能制氢的细菌;能治理污水的细菌;能清洁土壤中毒素的细菌;能协助排雷的细菌;

第三章菌株的分离与筛选

1.什么是富集培养?

答:富集培养:指在目的微生物含量较少时,根据微生物的生理特点,设计一种选择性培养基,创造有利的生长条件,使目的微生物在最适的环境下迅速地生长繁殖,数量增加,由原来自然条件下的劣势种变成人工环境中的优势种,以利于分离到所需要的菌株。

2.哪些分离方法能达到―菌落纯‖?哪些分离方法能达到―细胞纯(菌株纯)‖?答:菌落纯:稀释分离法、划线法、组织法

细胞纯:单细胞或单孢子的分离法

3.分离好氧微生物常用的方法有哪些?

答:(1)稀释涂布法

(2)划线分离法

(3)平皿生化反应分离法

4.平皿生化反应分离法有哪些?分别用来筛选哪些菌?各自原理如何?

答:(1)透明圈法原理:在平板培养基中加入溶解性较差的底物,使培养基混浊,能分解底物的微生物便会在菌落周围产生透明圈,圈的大小可以放映该菌株利用底物的能力。

筛选:水解酶产生菌

(2)显色圈法原理:在底物平板中加入特定的指示剂或显色剂,根据颜色变化,将目的微生物快速分离出来。

筛选:果胶酶产生菌、分离谷氨酸产生菌、分离解脂微生物、分离内肽酶产生菌

(3)生长圈法原理:将待测菌涂布于含高浓度的工程菌并缺少所需营养物的平板上进行培养,若某菌株能合成平板所需的营养物,在该菌株的菌落周围便会形成一个混浊的生长圈。

筛选:氨基酸、核苷酸和维生素产生菌

(4)抑菌圈法原理:待筛选的菌株能分泌产生某些能抑制工具菌生长的物质,或能分泌某种酶并将无毒的物质水解成对工具菌有毒的物质,从而在该菌落周围形成工具菌不能生长的抑菌圈。

筛选:抗生素产生菌

5.常用的平板初筛的方法有哪些?

答:方法:(1)形态变异筛选法(2)平皿生化反应筛选法

(3)浓度梯度法(4)染色技术快速筛选法(5)琼脂块大通量筛选法

6. 初筛和复筛的要求有何不同?

答:初筛是指从大量的菌落中随机挑取进行摇瓶试验并通过检测得到一些较优菌株。

复筛是指将初筛得到的较优菌株再进行多次摇瓶实验验证其效价和传代稳定性,并从中得到一两个或少数几个最优的菌株。

初筛要求:筛选的菌株尽可能多,筛选的菌株越多,就越有希望筛选到所需要的菌株。筛去明确不符合要求的大部分菌株,把具有生产性状的菌株尽量保存下来。

复筛要求:做到精确,测得的数据要能够反映将来的生产水平。

7.菌株的分离和筛选一般可分为如下几个步骤:采样,富集培养,分离纯化,产物鉴别,菌种鉴定,菌种保藏

8. .CM、MM、SM、LM分别表示什么培养基?

答:CM-----完全培养基FM-----发酵培养基MM-----基本培养基SM------补充培养基LM------有限培养基

9.什么是菌种退化?菌种退化的原因是什么?如何防止菌种退化?

答:菌种退化:指生产菌株或选育过程中筛选出来的较优良菌种在生产繁殖中,群体中某些生理特征和形态特征逐渐减退或完全丧失的现象,集中表现在菌种目的代谢产物合成能力降低,产量下降有的是发酵力和糖化力降低。

原因:(1)基因变异(2)分离现象(3)不适宜的环境条件(4)传代次数的增加

防止措施:1.采用合理的育种方法,减少分离现象 2.选择适合菌种生长的培养条件和外界环境 3.采用有效的菌种保藏方法,控制传代次数 4.防止病毒感染 5.定期进行纯种分离

10.常用的菌种保藏方法有哪些?

答:(1)斜面低温保藏法(2)普通冷冻保藏法(3)超低温冷冻保藏法(4)液氮超低温保藏法(5)沙土管保藏法(6)冷冻真空干燥保藏法(7)液体石蜡保藏法

第三章目的基因克隆

1 T-RFLP技术分析微生物生态原理:

T-RFLP是末端限制性片段长度多态性,它是根据16S rRNA的保守区设计通用引物。提取待分析样品的总DNA,以它为摸板进行PCR扩增,然后,将PCR产物用合适的限制性内切酶消化,一般选用酶切位点为4bp的限制性内切酶。

由于在不同细菌的扩增片段内存在核苷酸序列的差异,酶切位点就会存在差异,酶切后就会产生许多不同长度的限制性片段。

这些不同长度的片段就可以反映微生物群落组成情况,因为不同长度的末端限制性片段必然代表不同的细菌,也就是说一种末端限制性片段至少代表一种细菌。

2 T-RFLP技术步骤

3 菌种鉴定

包括:形态鉴定,生理生化鉴定,16Sr DNA测序,ITS测序

16Sr DNA鉴定:

根据16Sr DNA序列通用引物(27F/1492R)对目标菌株16Sr DNA进行PCR扩增,可以提取总DNA,菌落PCR,菌液PCR等。

将PCR产物直接送测(易出现双峰,测序不成功)

将PCR产物酶连至pMD19-T,转化至大肠杆菌,挑取阳性单克隆培养,提取质粒电泳检测后送测(不易双峰,但可能有错配)

4 高通量筛选(High throughput screening,HTS)

HTS技术是指以分子水平和细胞水平的实验方法为基础,以微板形式作为实验工具载体,以自动化操作系统执行试验过程,以灵敏快速的检测仪器采集实验结果数据,以计算机对实验数据进行分析处理,同一时间对数以千万样品检测,并以相应的数据库支持整体系运转的技术体系。

5基因组文库的构建过程?如何确定文库的大小?

基因组文库的构建过程:

1)从生物体提取大片断的基因组DNA;

2)用适当的限制性内切酶(常为4碱基识别位点)进行部分酶切或超声波打断基因组DNA ;

3)在琼脂凝胶电泳上或蔗糖梯度离心筛选适当长度的DNA片断(根据载体的要求);

4)载体的酶切、回收;

5)将处理好的基因组DNA片断与载体连接;

6)将重组子导入宿主细胞

7)文库的鉴定、收集、保存;

确定文库大小的方法:

以在构建的基因组文库中任一基因存在的概率来衡量文库的质量或完备性,它与基因文库最低所含克隆数N(即文库大小)之间的关系可用下式表示:N = ln ( 1 – P ) / ln ( 1 – f )

其中:

N:文库所需的总克隆数;

P:任一基因被克隆(或存在于基因文库中)的概率;

f:克隆片段的平均大小/ 生物基因组的大小。

6一般质粒DNA的构型有哪几种?在琼脂糖凝胶电泳中的有何特点?

超螺旋质粒DNA、开环质粒DNA、线状质粒DNA

在琼脂糖凝胶电泳的特点是:电泳的泳动速度由大到小分别是:

超螺旋质粒DNA>线状质粒DNA>开环质粒DNA

7 电泳缓冲液使用一定时间后出现DNA在凝胶中跑不动现象的原因,有何解决办法?

原因:电泳缓冲液的离子的富集作用;

解决方法:1.更换成新配置的电泳缓冲液;

2.把电泳槽中的缓冲液倒出混匀后再重新使用

8电泳的指示剂和染色剂有何区别,各自的作用是什么?

指示剂一定要在电泳前加入,指示剂一般与蔗糖、甘油或聚蔗糖400组成载样缓冲液;(一般为:溴酚兰,二甲苯青)

作用:①预知电泳的速率及方向;②使样品呈现颜色,便于加样;

③一些高浓度蔗糖或其它物质增加DNA的密度,可以防止DNA的扩散染色剂即可以在电泳前加入样液,又可以电泳后再对凝胶染色;(溴化已锭[EB]、硝酸银、Goldview染料)

作用:呈现出核酸电泳后的带型。

9 大肠杆菌表达外源基因的优势:

?全基因组测序,共有4405个开放型阅读框架;

?基因克隆表达系统成熟、完善;

?繁殖迅速、培养简单、操作方便、遗传稳定;

?被FDA批准为安全的基因工程受体生物。

大肠杆菌表达外源基因的劣势:

?缺乏对真核生物蛋白质的复性功能;

?缺乏对真核生物蛋白质的修饰加工系统;

?内源性蛋白酶降解空间构象不正确的异源蛋白;

?周质内含有种类繁多的内毒素。

10如何提高克隆基因的表达水平?

1)、表达载体的优化设计;

2)、提高目标基因mRNA和目标基因产物的稳定性;

3)、密码子偏爱性;

4)、表达环境条件的优化。

11根据表达蛋白用途的不同,设计选择基因的表达策略。

(1)表达蛋白用于生物化学和分子生物学研究——主要考虑保持蛋白质原有的功能不变;表达策略:融合表达和直接表达

(2)表达蛋白用作抗原——主要考虑表达蛋白的快速提纯;表达策略:以包涵体形式合成目的蛋白和融合表达目标蛋白(不用去除标签蛋白)

(3)表达蛋白用作结构研究——表达蛋白以天然可溶形式产生;表达时考虑因素:表达温度(高温促进包涵体的形成);表达水平(高表达促成包涵体的形成);表达载体受体菌。

12质粒转化原理,影响转化率的因素有哪些?

A、化学法(CaCl2法)转化原理:是Ca2+与细菌外膜磷脂在低温下形成液晶结

构,后者经热脉冲发生收缩作用,使细胞膜出现空隙,质粒或DNA重组分子便可进入细胞内(感受态细胞)。

B、电穿孔转化转化原理:将待转化的质粒或DNA重组连接液加在电穿孔转化

仪的样品池中,两极施加高压电场,在强大电场的作用下,细菌细胞壁和细胞膜产生缝隙,质粒或DNA重组分子便可进入细胞内。

影响转化率的主要影响因素:

1)载体本身的性质及其空间构象:超螺旋构象转化率最高;

2)插入片段的大小:插入片段越大,转化效率越低;

3)受体细胞的类型及预处理;

4)转化方法:电击法高于化学法。

第四章蛋白质工程与现代生物技术

1.生物技术

2.抗生素

3.内源性感染

4.高通量筛选

5.基因药物

6.朊粒

7.活性污泥法

8.固体废弃物

9.生物制浆10.生物漂白11细胞工程12原始菌株13基因工程疫苗14抗生素超敏菌株15废水处理的微生物技术16单细胞蛋白17生物能源18农用抗生素

二,选择题

1.抗生素的基本特性(C)

A.分子结构的多样性

B.选择性

C.不溶解性

D.稳定性

2.微生物的新陈代谢包括微生物的(B)

A.修饰

B.固定

C.分解

D.转化

3.广谱抗生素不包括(C)

A.抗菌B,抗立克次氏体C,抗支原体 D.抗衣原体

4.下面哪项不是内源性感染的原因(D)

C、正常菌群突破上皮屏障 B.外源性生物体干扰了宿主的正常功能

C.正常菌群向不构成正常微生物区系的部位转移

D.由于外源性病原体感染所导致的宿主免疫功能丧失

5.非微生物代谢产物的是(D)

A初级代谢产物B次级代谢产物C转化产物D中间代谢产物

6.下列哪一个是新一代病毒疫苗(A)

A基因工程疫苗B灭活疫苗C减毒活疫苗D亚单位疫苗

7.用腺病毒介导基因转移的原因(A)

A感染效率高B结构简单C 稳定性高D性价比较高

8.在煤炭中的硫占的比重最大的是以什么形式存在(B)

A硫B黄铁硫矿C有机硫D易脱洗的硫酸盐

9.下列微生物中不可用于生产单细胞蛋白的是(A)

A大肠杆菌B酵母菌C霉菌D担子菌

10.下列因素中不能影响生物制浆的是(A)

A温度B通气C灭菌D营养物

11.利用酶联免疫吸附法原理可测定(A)

A.次级代谢产物

B.初级代谢产物 c.还原糖D.氨基氮

12.基因工程在抗生素研发中的优点(C)

A.、定向B、稳定C、高成本D、高质量

13. 目前已发现的可用于生物漂白的主要的微生物不包括(D)

A. 白腐菌

B. 黄孢原毛平革菌

C. 杂色云芝

D. 大肠杆菌

14. 煤炭中含量最高的有机硫是(D)

A. 含巯基有机物

B. 硫醚

C. 含多硫链有机物

D. 二苯噻吩

15. 在生物漂白中,产生木聚糖酶的主要微生物不包括(A)

A. 酵母菌

B. 出芽短梗霉

C. 木霉

D. 黑曲霉

16.抗生素抗菌作用常用的检测不包括(D)

A.试管稀释法

B.扩散法

C.血清杀菌活性

D.分离法

17.PCR技术的特点不包括(C)

A、特异性强

B、灵敏度高C,时间长D、操作简便

18.处理重金属污染的方法(化学沉淀法、离子交换法、吸附法、膜分离法、电解法、微生物吸附沉淀作用)P341

19.降解微生物的关键技术(生物工程技术)第一步(去除微生物的毒性基因)P337

20.细菌通过(络合作用)途径吸附重金属P342

21.发展单细胞蛋白注意问题(核酸含量高首先要去除)(有重金属类的有毒物要进行严格的质量检测)(尽可能降低其生产成本)P353

22.杀虫农用抗生素目前使用方法(阿维菌素)(多奈菌素)(橘霉素)(多杀菌素)P376

23.荧光假单胞杆菌作用(可使巨噬细胞功能增强并产生特异性抗体还可以诱导机体产生干扰素及肿瘤坏死因子,是一种免疫佐剂)(P268)

24.下列不属于蛋白质结构测定的技术是( D )

A X射线晶体衍射技术

B 核磁共振波谱技术

C 生物信息学预测蛋白质结构

D 缺失突变技术

25. 下列不属于蛋白质结晶技术的是(D )

A 悬滴法

B 坐滴法

C 微量扩散小室法

D 插入突变法

26. 增加蛋白质分子的热稳定性的常用方法是( A )

A 提高脯氨酸的含量

B 在蛋白质分子中引入二硫键

C 增加蛋白质分子的α螺旋

D 增加β折叠

27. 蛋白质工程的最终目的是( C )

A 开发新产品

B 创造新理论

C 制造具有新性能的新蛋白质结构

D 研究蛋白质的氨基酸组成

28. 抗体属于(B )

A 基因

B 蛋白质

C DNA

D RNA

1.抗虫棉目前分为:转基因单价抗虫棉、转基因双价抗虫棉。

2,枯草杆菌分泌的一种角蛋白酶能够分解致疯牛病的毒蛋白

3.抗生素的不良反应包括毒性反应,菌群失调引发继发感染,过敏反应

4.最理想的基因工程疫苗的条件:无致癌性安全无毒性遗传性状稳无致畸变或流产性。

5固体有机废物处理的的三大技术指卫生填埋、堆肥和焚烧。

6.细胞工程的核心技术是细胞培养与繁殖

7.抗生素的传统改良方法自然选育、人工诱变选育

8.按菌苗所含的成分,目前人群使用的菌苗有减毒的活菌苗,灭活的死菌苗,纯化的多糖或蛋白成分苗三类。

9.反转录病毒是RNA 病毒,含有两条相同的RNA分子,病毒进入宿主细胞后,病毒RNA即反转录为双链DNA ,可整合到细胞基因组中。10.目前煤炭脱硫有燃前脱硫、燃中固硫、燃后烟气脱硫等3种方法。

11.微生物修复方法(原位微生物修复)、(异位微生物修复)P321

12.主要微生物种类(真细菌)(非真细菌原核微生物)(古菌)(真核微生物)(病毒类)。P8

1.只有微生物的天然产物才能称为抗生素。(/)

2.经过批准上市的转基因产品是安全的。(/)

3.初级代谢产物是与菌体生长密切相关的产物。(/)

4.细菌的耐药性的发生和发展是抗生素广泛使用,特别是滥用的结果。(/)

5.研究发现一些具有极强杀伤肿瘤细胞活性的可抗肿瘤抗生素可制备单克隆抗体导向药物生物导弹的弹头(/)

6.由于病毒复制突变率很高,在病毒复制酶错误倾向性及抗病毒药物的选择压力下,不易出现病毒耐药毒株(/)

7.传统活性污泥法是活性污泥最早的应用形式,并一直沿用至今。\

8.堆肥法可分为好氧堆肥法、厌氧堆肥法和兼性厌氧堆肥法三种。/

9.用于脱除煤炭中黄铁矿的细菌都属于化能自养型微生物,而异养型微生物只能脱除煤炭中的有机硫。(\)

10.在单细胞蛋白的生产工艺中,若是作为动物饲料的单细胞蛋白,收集离心后的菌体进行洗涤后干燥即可。(/)

11.基因工程优越性:它能从极其错综复杂的各种生物细胞内获得所需基因,并将此目的基因在体内进行剪切拼接、重组,并转入到受体细胞中,从而增产出数百数千倍的新型蛋白质。(\)

12.腺联病毒只有在辅助病毒存在的条件下,才能在感染的宿主细胞中复制,产生新的病毒颗粒(/)

4.一般的反转率病毒只感染分裂细胞,有利于选择性杀伤分裂的肿瘤细胞,但不利于遗传病的的基因治疗(/)

13.试管稀释法和扩散法是测定药敏试验的两种常用方法。(/)

14.大多数抗生素生物合成石在产生菌的生长后期开始的。(/)

15.SBR法的最大优点是处理效果好,并具有脱氮除磷的功能。/

16.单细胞蛋白对人体无影响,可直接放心食用。(\)

思考

1.简述蛋白质工程研究的基本途径。

2.欲使目的蛋白在大肠杆菌中表达,则表达载体的一般特点是什么?

3、简述X射线晶体衍射技术测定蛋白质晶体结构的具体步骤。

4、简述目的蛋白原核表达的基本步骤。

5、简述蛋白质在生物体内的形成的过程.

6、蛋白质分子设计的步骤是什么?

7. 一个蛋白质由300个氨基酸组成,请简述用搭桥PCR的方法在该蛋白的150个氨基酸处插入GAATCT这 6 个碱基的基本步骤。

8、一个蛋白质分子由300个氨基酸编码,欲将第102个氨基酸(由TAC编码)突变成GCT, 简述用搭桥PCR的方法完成突变的步骤。

9、怎样用PCR的方法将一个由300的氨基酸编码的蛋白质的200-250个氨基酸之间的序列删除。

蛋白质工程:基于对蛋白质结构和功能关系的认识进行分子设计,通过基因工程途径定向地改造蛋白质或创造呵护人类需要的新的突变蛋白质的理论及实践。

蛋白质分子设计

要改造的蛋白质的性能及其相应的结构基础之后

质改造的设计方案。

PDB(Protein Data Bank)Brookhaven国家实验室于1971年创建。该数据库主要收集了通过X射线衍射和核磁共振NMR

维结构数据糖类、蛋白质与核酸复合物的三维结构。

2、请列表总结基因工程和蛋白质工程的相同点、不同之处

程等方面及其联系。

基因工程蛋白质工程

相同点操作环境—生物体外——分子

结果天然存在的蛋白自然不存在的蛋白

实质基因重组基因修饰或基因合成

流程中心法则中心法则逆推

联系蛋白质工程是在基因工程基础上的延伸

3、蛋白质工程的基本目标、基本途径是什么

基本目标DNA重组技术生物细胞中分离出编码蛋白质的基因

定的受体

们需要的新型蛋白质。

基本途径

1

2X射线衍射分析或蛋白质溶液核磁共振分析等一系列测试获得更多的蛋白质的结构与功能的知识信息。

3cDNA文库或基因组文库中获取编码该蛋白质的基因序列

4造方案

5

6

7

4、目前有哪些蛋白质工程分子改造的常用方法

1 即通过在DNA 水平上进行碱基的取代、插入或缺失

白质的结构的技术。 2 将编码某蛋白的部分基因移植到另种蛋白基因上

3 合成DNA

时实现多处突变。

5、蛋白质工程中增加蛋白质稳定性的基本途径有哪些

稳定蛋白质空间构象的主要因素是蛋白质分子众多基团间的相互作用

和侧链间的氢键、带有不同电荷的侧链间的静电作用、极性氨基酸残基侧链间的偶极作用、疏水残基间的疏水作用以及分子内的二硫键等。 蛋白质结构与功能研究表明

结构中某一个或某一段氨基酸序列决定的

有可能增加蛋白质的稳定性

目前一般是通过定点突变方法

目 标 可采取措施

提高对热稳定性 ①增加分子内二硫键②增加分子表面盐键③调整分子内疏水基团 ④增加分子内含键数量

相互作用 增加对pH 稳定性 ①置换分子内部分氨基酸 ②调整分子内带电荷基团

增强抗氧化能力 ①将Cyc 置换为Ala 或Ser ②将Trp 置换为Phe 或Tyr 增强抗重金属离子的能力 ①将Cyc 置换为Ala 或Ser ②改变分子表面的羧基

6、请简述PCR 介导的定点突变技术原理及优缺点。

原理4种引物、进行3次PCR 反应。头两次PCR 反应中

补的并在相同部位具有相同碱基突变的内测引物

重叠的双链DNA 片段渗入的多余引物之后

3’凹末端的异源双链分子TaqDNA 酶的作用下

DNA 分子。在用两个外侧寡核苷酸引物进行第三次PCR 扩增

DNA 。 优点100%。

缺点①、后续工作较复杂PCR 扩增产物通常需要连接到载体分子上

才能对突变的基因进行转录、翻译等方面的研究 。

②、不论是用普通的TaqDNA 聚合酶还是高保真的Pfu 酶PCR 方法产生的DNA 片段都要进过核苷酸序列测定

7、举例说明蛋白质工程在医药等领域的应用成果。

a) 酶的改造

有效阻断DNA合成

b) 蛋白质或肽类药物的改造β-干扰素改造等过蛋白质结构改造

c) 重组药物的生产有重组胰岛素、在大肠杆菌中合成人生长素、重组凝血因子Ⅷ、其他人类蛋白质的合成、重组疫苗等。

d) 提高重组蛋白的活性

降低制品的免疫原性等

e) 在单抗人源化合制造融合蛋白方面起着重大作用。

食品微生物检验技术复习题培训资料

名词解释 样品(sample)是指从某一总体中抽出的一部分。 食品采样(sampling)是指从较大批量食品中抽取能较好地代表其总体样品的方法。 接种:将微生物接到适于它生长繁殖的人工培养基上或活的生物体内的过程叫做接种。 菌落总数:指一定数量或面积的食品样品,在一定条件下进行细菌培养,使每一个活菌只能形成一个肉眼可见的菌落,然后进行菌落计数所得的菌落数量。 V-P试验:某些细菌在葡萄糖蛋白胨水培养基中能分解葡萄糖产生丙酮酸,丙酮酸缩合,脱羧成乙酰甲基甲醇,后者在强碱环境下,被空气中氧氧化为二乙酰,二乙酰与蛋白胨中的胍基生成红色化合物,称V-P(+)反应。 生理生化试验:微生物生化反应是指用化学反应来测定微生物的代谢产物,生化反应常用来鉴别一些在形态和其它方面不易区别的微生物。因此微生物生化反应是微生物分类鉴定中的重要依据之一。 硫化氢(H2S)试验:有些细菌可分解培养基中含硫氨基酸或含硫化合物,而产生硫化氢气体,硫化氢遇铅盐或低铁盐可生成黑色沉淀物。 增殖培养基: 在普通培养基中加入一些某种微生物特别喜欢的营养物质,以增加这种微生物的繁殖速度,逐渐淘汰其它微生物,这种培养基称为增殖培养基。 外源性污染:食品在生产加工、运输、贮藏、销售食品过程中不遵守操作规程或不按卫生要求使食品发生污染称为外源性污染,也称为第二次污染. 环状沉淀反应:是一种定性试验方法,可用已知抗体检测未知抗原。将已知抗体注入特制小试管中,然后沿管壁徐徐加入等量抗原,如抗原与抗体对应,则在两液界面出现白色的沉淀圆环。 微生物性食物中毒:食用被微生物或微生物毒素污染的食品而引起的中毒称为微生物性食物中毒。 无菌接种操作:培养基经高压灭菌后,用经过灭菌的工具在无菌条件下接种含菌材料于培养基上,这过程叫做无菌接种操作。菌落:指细菌在固体培养基上生长繁殖而形成的能被肉眼识别的生长物,它是由数以万计相同的细菌集合而成。 细菌总数:指一定数量或面积的食品样品.经过适当的处理后,在显微镜下对细菌进行直接计数。其中包括各种活菌数和尚未消失的死菌数。 大肠菌群:系指一群在37度能发酵乳糖、产酸、产气、需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性的无芽胞杆菌。 淀粉水解试验:某些细菌可以产生分解淀粉的酶,把淀粉水解为麦芽糖或葡萄糖。淀粉水解后,遇碘不再变蓝色。 糖酵解试验:不同微生物分解利用糖类的能力有很大差异,或能利用或不能利用,能利用者,或产气或不产气。可用指示剂及发酵管检验。甲基红(Methyl Red)试验:肠杆菌科各菌属都能发酵葡萄糖,在分解葡萄糖过程中产生丙酮酸,进一步分解中,由于糖代谢的途径不同,可产生乳酸,琥珀酸、醋酸和甲酸等大量酸性产物,可使培养基PH值下降至pH4.5以下,使甲基红指示剂变红。 靛基质(Imdole)试验:某些细菌能分解蛋白胨中的色氨酸,生成吲哚。吲哚的存在可用显色反应表现出来。吲哚与对二甲基氨基苯醛结合,形成玫瑰吲哚,为红色化合物。尿素酶(Urease)试验:有些细菌能产生尿素酶,将尿素分解、产生2个分子的氨,使培养基变为碱性,酚红呈粉红色。氧化酶(Oxidase)试验:氧化酶亦即细胞色素氧化酶,为细胞色素呼吸酶系统的终末呼吸酶,氧化酶先使细胞色素C氧化,然后此氧化型细胞色素C再使对苯二胺氧化,产生颜色反应。硫化氢-靛基质-动力(SIM)琼脂试验:试验方法:以接种针挑取菌落或纯养物穿刺接种约1/2深度,置36±1℃培养18~24h,观察结果。培养物呈现黑色为硫化氢阳性,混浊或沿穿刺线向外生长为有动力,然后加Kovacs氏试剂数滴于培养表面,静置10min,若试剂呈红色为靛基质阳性。培养基未接种的下部,可作为对照。选择培养基:在培养基中加入某种物质以杀死或抑制不需要的菌种生长的培养基,称之为选择培养基。鉴别培养基: 在培养基中加入某种试剂或化学药品,使难以区分的微生物经培养后呈现出明显差别,因而有助开快速鉴别某种微生物。这样的培养基称之为鉴别培养基。 无菌技术:指在微生物实验工作中,控制或防止各类微生物的污染及其干扰的一系列操作方法和有关措施。 粪大肠菌群:系一群需氧及兼性厌氧,在44.5℃培养24h内能发酵乳糖产酸产气和分解色氨酸产生靛基质的革兰氏阴性无芽胞杆菌。玻片凝集法:是一种常规的定性试验方法。原理是用已知抗体来检测未知抗原。常用于鉴定菌种、血型。试管凝集法:是一种定量试验方法。多用已知抗原来检测血清中有无相应抗体及其含量。常用于协助诊断某些传染病及进行流行病学调查。 沉淀反应:可溶性抗原与相应抗体结合,在有适量电解质存在下,经过一定时间,形成肉眼可见的沉淀物,称为沉淀反应(Precipitation)。絮状沉淀反应:将已知抗原与抗体在试管(如凹玻片)内混匀,如抗原抗体对应,而又二者比例适当时,会出现肉眼可见的絮状沉淀,此为阳性反应。琼脂扩散试验:利用可溶性抗原抗体在半固体琼脂内扩散,若抗原抗体对应,且二者比例合适,在其扩散的某一部分就会出现白色的沉淀线。每对抗原抗体可形成一条沉淀线。有几对抗原抗体,就可分别形成几条沉淀线。大肠菌群MPN:大肠菌群MPN是采用一定的方法,应用统计学的原理所测定和计算出的一种最近似数值。 大肠菌群值:大肠菌群值是指在食品中检出一个大肠菌群细菌时所需要的最少样品量。内源性污染:凡由动物体在生活过程中,由于本身带染的微生物而造成食品的污染者,称为内源性污染,也称第一次污染.食品腐败变质:是指食品受到各种内外因素的影响,造成其原有化学性质或物理性质发生变化,降低或失去其营养价值和商品价值的过程. 食源性疾病:指通过摄食进入人体内的各种治病因子引起的、通常具有感染性质或中毒性质的一类疾病。食物中毒:是指健康人经口摄人正常数量食品后,所引起的以急性病理过程为主的疾病。 问答题 1、金葡球菌传播途径和控制 传播途径:一般来说,金黄色葡萄球菌可通过以下途径污染食品:食品加工人员、炊事员或销售人员带菌,造成食品污染;食品在加工前本身带菌,或在加工过程中受到了污染,产生了肠毒素,引起食物中毒;熟食制品包装不严,运输过程受到污染;奶牛患化脓性乳腺炎或禽畜局部化脓时,对肉体其他部位的污染。控制:防止带菌人群对各种食物的污染:定期对生产

大学微生物学试题及答案

第一章绪论 一、名词解释 1、微生物 2、微生物学 二、填空题 1、微生物学的先驱者是____,微生物学的奠基人是_____,细菌学的奠基人是_____ 。 2、微生物都是些个体微小、构造简单的低等生物,包括属于原核类的细菌(____和古生菌)、放线菌、蓝细菌、____、立克次氏体、____;属于真核类的真菌(____、____和蕈菌)、原生藻类和显微藻类;以及属于非细胞类的病毒和____(____、拟病毒和____)。 3、微生物由于其体形都极其微小,因而导致了一系列与之密切相关的五个重要共性,即体积小,____;____,____;生长旺,繁殖快;____,____;____,____。 4、微生物的种类多主要体现在________、生理代谢类型的多样性、代谢产物的多样性、________、________等五个方面。 5、微生物学是一门在细胞、分子或群体水平上研究微生物的形态构造、生理代谢、________、________和分类进化等生命活动基本规律,并将其应用于工业发酵、医药卫生、生物工程和环境保护等实践领域的科学。 6、按是否具有细胞结构,微生物可分为________型微生物和________型微生物。 7、细胞型微生物根据其细胞结构特征又可分为________微生物和________微生物。 8、按照Carl Woese 的三界论,微生物可分为________、________和________。 9、原核微生物主要包括________、________、________、________、________、________和________。 10、微生物的主要特点有:________、________、________、________和________。 三、选择题 1、适合所有微生物的特殊特征是( )。 A.它们是多细胞的 B.细胞有明显的核 C.只有用显微镜才能观察到 D.可进行光合作用 2、第一位观察到微生物的科学家是( )。 A. Robert Hooke B. Louis Pasteur C. Joseph Lister D. James T.Watson 3、细菌学的奠基人是( )。 A. Louis Pasteur B. Robert Koch C. van Dyck D. van Leeuwenhoek 4、Louis Pasteur对微生物学的贡献在于他( )。 A. 发现了病毒 B. 提出了自然发生说理论 C. 抨击了进化论 D. 号召人们关注微生物在日常生活中的重要性 5、Louis Pasteur采用曲颈瓶试验来( )。 A. 驳斥自然发生说 B. 证明微生物致病 C. 认识到微生物的化学结构 D. 提出细菌和原生动物分类系统 6、微生物学中铭记Robert Koch是由于( )。 A. 证实病原菌学说 B. 在实验室中成功地培养了病毒 C. 发展了广泛采纳的分类系统 D. 提出了原核生物术语 7、微生物学的奠基人是( )。 A. Louis Pasteur B. Robert Koch C. van Dyck D. van Leeuwenhoek 四、是非题

微生物检验技术试题

《微生物检验技术》期末考试试题(A 卷) 一、名词解释(每小题3分,共15分) 1、菌落 2、正常菌群 3、消毒 4、噬菌体 5、最小抑菌浓度(MIC ) 二、填空题(每空1分,共25分) 1.细菌的特殊结构 有 、 、 、 。 2.细菌生长繁殖的条件是 、 、 和气体。 3.病原菌的致病作用与 、 及 有密切关系。 4.诊断血清是用 免疫家兔等动物后取其 而制成的。一般置于 保存,使用时应避免 , 降低效价。

5.K—B法中抑菌圈直径的大小与药物的最低抑菌浓度呈关系,即抑菌圈愈大,MIC值、细菌对药物的敏感程度。 6.、和可作为甲型溶血性链球菌与肺炎链球菌的鉴别试验。 7.淋病奈瑟菌主要以方式传播,引起。 8.细菌对待测药物的敏感程度可分为、、 三级。 三、选择题(每小题1.5分,共30分): 1、属于非细胞型微生物的是() A、真菌 B、细菌 C、放线菌 D、病毒 E、螺旋体 2、革兰染色所用染液的顺序是() A、稀释复红—碘液—95%乙醇—结晶紫 B、稀释复红—95%乙醇—碘液—结晶紫 C、结晶紫—碘液—95%乙醇—稀释复红 D、结晶紫—95%乙醇—碘液—稀释复红 E、稀释复红—结晶紫—碘液—95%乙醇 3、靛基质试验又称() A、甲基红试验 B、尿素分解试验 C、硫化氢生成试验 D、吲哚试验 E、糖发酵试验 4、对人体无害的细菌代谢物是()

A、热原质 B维生素 C、外毒素 D、内毒素 E、侵袭性酶 5、正常人体不存在细菌的部位是() A、体表 B、口腔 C、大肠 D、尿道口 E、血液 6、实验室对接种针(环)、试管口的灭菌方法是() A干烤法 B、流通蒸汽法 C、烧灼 D、焚烧 E、煮沸法 7、卡介苗是由何种变异而产生的() A、形态变异 B、结构变异 C、毒力变异 D、耐药变异 E、酶活性变异 8、病原菌侵入血流并在其中大量繁殖,产生毒性代谢产物,引起严 重的全身症状,称为() A、毒血症 B、菌血症 C、败血症 D、脓毒血症 E、 病毒血症 9、哪种动物不是微生物学检验中常用的实验动物() A、小白鼠 B、豚鼠 C、裸鼠 D、家兔 E、马 10、下列哪项不是金黄色葡萄球菌的特点() A、凝固酶试验阳性 B、产生溶血素 C、分解 甘露醇 D、产生耐热核酸酶 E、胆汁溶菌试验阳性 11、在普通琼脂平板上生长的化脓性细菌是() A、金黄色葡萄球菌 B、乙型链球菌 C、肺炎

临床微生物学检验技术复习练习试题(四)

临床微生物学检验技术复习练习试题 厌氧性细菌及检验 选择题 A 型题 1.下列产生外毒素的细菌中哪种细菌产生的毒素引起食物中毒 A 霍乱弧菌 B 肉毒杆菌 C 白喉杆菌 D 链球菌 E 破伤风杆菌 2.预防和治疗破伤风的方法是: A 清创处理 B 有效抗生素治疗 C 注射破伤风抗毒素血清 D A+B E A+B+C 3.当一民工因铁钉深刺足底造成外伤送医院急诊时,医生应首先考虑给予注射 A.破伤风类毒素 B.破伤风抗毒素 C.白百破三联疫苗 D.丙种球蛋白 E.破伤风菌苗 4.王某,48岁,建筑工人;因牙关紧闭、四肢痉孪而入院。8天前,右脚被铁钉扎伤,伤口深,但几日后自愈。5日后右腿有些麻木和疼痛,且咀嚼不便,吞咽困难,最后全身抽搐,四肢痉挛。入院诊断为破伤风,请问下述哪项是最佳治疗原则 A 注射青霉素 B 注射破伤风抗毒素和白百破疫苗 C 注射破伤风抗毒素和青霉素 D 注射破伤风抗毒素 E 注射青霉素和白百破疫苗 5.鉴定破伤风杆菌有无致病性的最重要的根据是 A G+细长杆菌 B 顶端圆形芽孢 C 有周身鞭毛 D 专性厌氧生长 E 产生特异性外毒素 6.破伤风梭菌除致破伤风病外,还能引起何种疾病E A.菌血症 B.食物中毒

C.组织坏死 D.坏死性肠炎 E.以上均不是 7.下列搭配哪项不恰当: A 大肠杆菌EHEC组——出血性肠炎 B 炭疽杆菌——气性坏疽 C 破伤风杆菌——脐带风 D 淋球菌——尿道炎 E 脑膜炎球菌——流行性脑脊髓膜炎 8.不是肉毒梭菌特点的是 A 芽胞位于菌体次极端,菌体呈网球拍状 B 严格厌氧 C 致病物质主要是肉毒毒素 D 引起疾病主要是细菌性食物中毒 E 肉毒毒素作用机制是阻止神经组织释放乙酰胆碱 B型题 A 常因滥用抗生素所致的疾病 B 常经呼吸道所致的疾病 C 常经消化道所致的疾病 D 常经产道所致的疾病 E 常因战伤所致的疾病 1.假膜性肠炎 2.气性坏疽 3.肉毒中毒 X型题 1.可能引起食物中毒较常见的细菌有 A 金葡菌 B 伤寒杆菌 C 产气荚膜杆菌 D 破伤风杆菌 E 副溶血性弧菌 2.产气荚膜芽孢梭菌引起的疾病有 A 气性坏疽 B 坏死性肠炎 C 产褥热 D 食物中毒 E 伪膜性肠炎 3.有迁徙性生长现象的是 A 链球菌 B 变形杆菌

2019-2020年内蒙古自治区资格从业考试《预防疾控微生物检验技术》习题精选资料[十四]

2019-2020年内蒙古自治区资格从业考试《预防疾控微生物检 验技术》习题精选资料[十四] 一、单选题-1/知识点:章节测试 具有完整细胞壁的微生物是 A.支原体 B.衣原体 C.细菌L型 D.噬菌体 E.人体细胞 二、单选题-2/知识点:试题 下述哪种培养基不是用于大肠菌群计数检验的 A.月桂基硫酸盐胰蛋白胨(LST)肉汤 B.煌绿乳糖胆盐(BGLB)肉汤 C.含酵母浸膏的胰酪胨大豆(TSB-YE)肉汤 D.结晶紫中性红胆盐(VRBA)琼脂 E.磷酸盐缓冲液 三、单选题-3/知识点:试题 炭疽芽孢杆菌的毒力因素中不包括 A.荚膜抗原 B.菌体抗原 C.保护性抗原

D.水肿因子 E.致死因子 四、单选题-4/知识点:细菌及细菌检验综合题 需用电子显微镜才能观察到的结构是 A.荚膜 B.异染颗粒 C.鞭毛 D.菌毛 E.芽胞 五、单选题-5/知识点:章节测试 ESBLs的主要产生菌株,同时也是人类泌尿系感染主要病原菌的是 A.大肠埃希菌 B.肺炎克雷伯菌 C.阴沟肠杆菌 D.铜绿假单胞菌 E.伤寒沙门菌 六、单选题-6/知识点:试题 在培养基中加入某种化学成分或抗生素以抑制某些细菌的生长而有助于需要的细菌生长,此培养基称为 A.基础培养基 B.选择培养基

C.鉴别培养基 D.营养培养基 E.特殊培养基 七、单选题-7/知识点:试题 在碱性培养基中生长良好的细菌是 A.葡萄球菌 B.霍乱弧菌 C.大肠埃希菌 D.结核分枝杆菌 E.厌氧菌 八、单选题-8/知识点:章节测试 可引起中枢神经系统感染的真核细胞型微生物是 A.狂犬病病毒 B.新型隐球菌 C.乙型脑炎病毒 D.脑膜炎奈瑟菌 E.脊髓灰质炎病毒 九、单选题-9/知识点:试题 细菌分离培养主要用于 A.细菌所致疾病的病原学诊断和流行病学调查 B.药物敏感试验

微生物学课后习题及答案

第一章 一.微生物有哪些主要类群?有哪些特点? 答:类群:1.真核细胞型;2.原核细胞型:细菌,放线菌,衣原体,支原体,立克次式体; 3.非细胞型:病毒。 特点:1.体小,面积大 2.吸收多,转化快3.生长旺,繁殖快4.分布广,种类多 5.适应强,易变异二.你认为现代微生物学的发展有哪些趋势? 答:研究领域有制药、治理环境污染等,微生物的基因科学,微生物病毒学,现代微生物学已发展出很多的分支学科,如病毒学,微生物基因组学,应用微生物(生物农药,浸矿微生物等),病源微生物(主要指细菌),海洋微生物,古细菌等,现代微生物学的研究主要集中在菌种的遗传背景,市场化应用等,食品微生物快速检测技术、食用菌的生产、功能性成分的提取等。 三.简述微生物与制药工程的关系。 答:1.人类除机械损伤外的疾病都是由微生物造成的 2.微生物又是人用来防治疾病的常用方法 3.微生物在自然环境中分布广泛来源很多 4.微生物的代谢产物相当多样,可用于生物制药 5.微生物和人之间的关系,涉及人、微生物、植物的协同进化 6.遗传学与生态学 名词对照: 古菌域:Archaea 三域学说分为古菌域、细菌域、真核生物域,古菌域为其中一大类别。(不确定)细菌域:bacteria 三域学说分为古菌域、细菌域、真核生物域,细菌域为其中一大类别。(不确定)真核生物域:Eukarya 三域学说分为古菌域、细菌域、真核生物域,真核生物域为其中一大类别。(不确定) 微生物:microorganism 是所有形态体积微小的单细胞或者个体结构简单的多细胞以及没有细胞结构的低等生物的通称。 第二章 一.比较下列各队名词 ①.原核微生物与真核微生物:原核微生物没有明显的细胞核,无核膜,核仁,无染色体,其细胞核为拟核,细胞内么有恒定的内膜系统,核糖体为70S型,大多为单细胞微生物。真核微生物有明显细胞核,有各种细胞器,核糖体为80S型。 ②.真细菌与古菌:相同点:以甲硫氨酸起始蛋白质的合成,核糖体对氯霉素不敏感,RNA聚合酶和真核细胞的相似,DNA具有内含子并结合组蛋白。 不同点:细胞膜中的脂质是不可皂化的,细胞壁不含肽聚糖等。 ③.原生质体与球形体:原生质体是脱去细胞壁的细胞,是由原生质分化而来,具体包括细胞膜和细胞质以及细胞器;球形体:指在螯合剂等存在的条件下用溶菌酶部分除去革兰氏阴性菌的细胞壁而形成的缺损型细胞。 ④.鞭毛、菌毛和性菌毛:鞭毛是一端连于细胞膜,一端游离的、细长的波形纤丝状物。菌毛为一些菌体表面的非鞭毛的细毛状物,菌毛是许多革兰氏阴性菌菌体表面遍布的比鞭毛更为细、短、直、硬、多的丝状蛋白附属器。其化学组成是菌毛蛋白,菌毛与运动无关;性菌毛在少数革兰阴性菌,比普通菌毛略微稍粗,一个菌体只有1~4根,通常由质粒编码。带有性菌毛的细菌具有致育能力。 ⑤.芽孢与孢子:芽孢是有些细菌(多为杆菌)在一定条件下,细胞质高度浓缩脱水所形成的一种抗逆性很强的球形或椭圆形的休眠体。孢子是细菌、原生动物、真菌和植物等产生的一种有繁殖或休眠作用的生殖细胞。能直接发育成新个体。 二.比较革兰氏阳性菌与革兰氏阴性菌细胞壁结构,并说明革兰氏染色的原理。

化妆品微生物检验培训考试试卷A

微生物室上岗人员操作技术基础测试卷A(化妆品) 说明:1.本试卷命题范围为化妆品微生物检测标准汇编·操作规程及相关专业基础知识 2.本测试为闭卷考试,满分为120分,时间为120分钟 3.本测试在人员入职后进行,以检验人员对工作的掌握程度。 姓名:测试时间:年月日 阅卷:成绩: 一、填空题(44*1) 1. 化妆品微生物检验项目包括:、、 、、。 液体供检样品前处理时,水溶性样品用溶解,油溶性样品用溶解。 4.在测定霉菌和酵母菌时,虎红培养基中含有,以抑制其他细菌的生长。 5. 化妆品粪大肠菌群检测时,报告被检样品中检出粪大肠菌群应符合的条件:、、 、。 6.金黄色葡萄球菌革兰氏染色镜检结果为:革兰氏,排列成 状,芽孢,荚膜,致病性葡萄球菌。 7.在电压220V时,普通30W直管型紫外线灯,在室温为20~25℃的使用情况下,紫外线辐射强度(垂直1m处)应≥ 8.卵磷脂吐温80培养基灭菌条件为℃高压灭菌分钟. 9.金黄色葡萄球菌在 Baird-Parker 平板上, 菌落直径为 ,颜色呈 ,边缘为色 ,周围为一带 ,在其外层有一 .圈。一般认为阳性的金黄色葡萄球菌菌株有致病力. 10.检测粪大肠菌群时,所用的双料乳糖胆盐培养基中,溴甲酚紫的作用是 培养基原理是:蛋白胨提供源和源;糖是大肠菌群可发酵的糖类;磷酸氢二钾是;琼脂是培养基凝固剂; 伊红和美蓝是剂和剂,可抑制革兰氏阳性菌,在酸性条件下产生沉淀,形成色菌落或具黑色中心的外围的菌落。 12.高压灭菌锅必须每个月进行一次灭菌效果评价,用菌进行评价检验,而平时也要用进行检测。 13. 10-1 和10-2两个稀释度每ml的菌落数分别是260,28,则菌落总数报告值为

食品微生物检验技术复习题完整版

食品微生物检验技术复 习题 HEN system office room 【HEN16H-HENS2AHENS8Q8-HENH1688】

名词解释 样品(sample)是指从某一总体中抽出的一部分。 食品采样(sampling)是指从较大批量食品中抽取能较好地代表其总体样品的方法。 接种:将微生物接到适于它生长繁殖的人工培养基上或活的生物体内的过程叫做接种。 菌落总数:指一定数量或面积的食品样品,在一定条件下进行细菌培养,使每一个活菌只能形成一个肉眼可见的菌落,然后进行菌落计数所得的菌落数量。 V-P试验:某些细菌在葡萄糖蛋白胨水培养基中能分解葡萄糖产生丙酮酸,丙酮酸缩合,脱羧成乙酰甲基甲醇,后者在强碱环境下,被空气中氧氧化为二乙酰,二乙酰与蛋白胨中的胍基生成红色化合物,称V-P(+)反应。 生理生化试验:微生物生化反应是指用化学反应来测定微生物的代谢产物,生化反应常用来鉴别一些在形态和其它方面不易区别的微生物。因此微生物生化反应是微生物分类鉴定中的重要依据之一。 硫化氢(H2S)试验:有些细菌可分解培养基中含硫氨基酸或含硫化合物,而产生硫化氢气体,硫化氢遇铅盐或低铁盐可生成黑色沉淀物。 增殖培养基: 在普通培养基中加入一些某种微生物特别喜欢的营养物质,以增加这种微生物的繁殖速度,逐渐淘汰其它微生物,这种培养基称为增殖培养基。 外源性污染:食品在生产加工、运输、贮藏、销售食品过程中不遵守操作规程或不按卫生要求使食品发生污染称为外源性污染,也称为第二次污染. 环状沉淀反应:是一种定性试验方法,可用已知抗体检测未知抗原。将已知抗体注入特制小试管中,然后沿管壁徐徐加入等量抗原,如抗原与抗体对应,则在两液界面出现白色的沉淀圆环。 微生物性食物中毒:食用被微生物或微生物毒素污染的食品而引起的中毒称为微生物性食物中毒。 无菌接种操作:培养基经高压灭菌后,用经过灭菌的工具在无菌条件下接种含菌材料于培养基上,这过程叫做无菌接种操作。 菌落:指细菌在固体培养基上生长繁殖而形成的能被肉眼识别的生长物,它是由数以万计相同的细菌集合而成。 细菌总数:指一定数量或面积的食品样品.经过适当的处理后,在显微镜下对细菌进行直接计数。其中包括各种活菌数和尚未消失的死菌数。 大肠菌群:系指一群在37度能发酵乳糖、产酸、产气、需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性的无芽胞杆菌。 淀粉水解试验:某些细菌可以产生分解淀粉的酶,把淀粉水解为麦芽糖或葡萄糖。淀粉水解后,遇碘不再变蓝色。 糖酵解试验:不同微生物分解利用糖类的能力有很大差异,或能利用或不能利用,能利用者,或产气或不产气。可用指示剂及发酵管检验。甲基红(Methyl Red)试验:肠杆菌科各菌属都能发酵葡萄糖,在分解葡萄糖过程中产生丙酮酸,进一步分解中,由于糖代谢的途径不同,可产生乳酸,琥珀酸、醋酸和甲酸等大量酸性产物,可使培养基PH值下降至以下,使甲基红指示剂变红。 靛基质(Imdole)试验:某些细菌能分解蛋白胨中的色氨酸,生成吲哚。吲哚的存在可用显色反应表现出来。吲哚与对二甲基氨基苯醛结合,形成玫瑰吲哚,为红色化合物。尿素酶(Urease)试验:有些细菌能产生尿素酶,将尿素分解、产生2个分子的氨,使培养基变为碱性,酚红呈粉红色。氧化酶(Oxidase)试验:氧化酶亦即细胞色素氧化酶,为细胞色素呼吸酶系统的终末呼吸酶,氧化酶先使细胞色素C氧化,然后此氧化型细胞色素C再使对苯二胺氧化,产生颜色反应。硫化氢-靛基质-动力(SIM)琼脂试验:试验方法:以接种针挑取菌落或纯养物穿刺接种约1/2深度,置36±1℃培养18~24h,观察结果。培养物呈现黑色为硫化氢阳性,混浊或沿穿刺线向外生长为有动力,然后加Kovacs氏试剂数滴于培养表面,静置10min,若试剂呈红色为靛基质阳性。培养基未接种的下部,可作为对照。选择培养基:在培养基中加入某种物质以杀死或抑制不需要的菌种生长的培养基,称之为选择培养基。鉴别培养基: 在培养基中加入某种试剂或化学药品,使难以区分的微生物经培养后呈现出明显差别,因而有助开快速鉴别某种微生物。这样的培养基称之为鉴别培养基。 无菌技术:指在微生物实验工作中,控制或防止各类微生物的污染及其干扰的一系列操作方法和有关措施。 粪大肠菌群:系一群需氧及兼性厌氧,在℃培养24h内能发酵乳糖产酸产气和分解色氨酸产生靛基质的革兰氏阴性无芽胞杆菌。玻片凝集法:是一种常规的定性试验方法。原理是用已知抗体来检测未知抗原。常用于鉴定菌种、血型。试管凝集法:是一种定量试验方法。多用已知抗原来检测血清中有无相应抗体及其含量。常用于协助诊断某些传染病及进行流行病学调查。 沉淀反应:可溶性抗原与相应抗体结合,在有适量电解质存在下,经过一定时间,形成肉眼可见的沉淀物,称为沉淀反应(Precipitation)。絮状沉淀反应:将已知抗原与抗体在试管(如凹玻片)内混匀,如抗原抗体对应,而又二者比例适当时,会出现肉眼可见的絮状沉淀,此为阳性反应。琼脂扩散试验:利用可溶性抗原抗体在半固体琼脂内扩散,若抗原抗体对应,且二者比例合适,在其扩散的某一部分就会出现白色的沉淀线。每对抗原抗体可形成一条沉淀线。有几对抗原抗体,就可分别形成几条沉淀线。大肠菌群MPN:大肠菌群MPN是采用一定的方法,应用统计学的原理所测定和计算出的一种最近似数值。 大肠菌群值:大肠菌群值是指在食品中检出一个大肠菌群细菌时所需要的最少样品量。内源性污染:凡由动物体在生活过程中,由于本身带染的微生物而造成食品的污染者,称为内源性污染,也称第一次污染.食品腐败变质:是指食品受到各种内外因素的影响,造成其原有化学性质或物理性质发生变化,降低或失去其营养价值和商品价值的过程.

食品微生物学检验技术

食品微生物学检验技术(专科)作业题 一、简答题(每题15分,共4题,共60分) 1. 请简述革兰氏染色的原理及操作中应注意的问题。 G﹢菌:细胞壁厚,肽聚糖网状分子形成一种透性屏障,当乙醇脱色时,肽聚糖脱水而孔隙缩小,故保留结晶紫-碘复合物在细胞膜上。呈紫色。 Gˉ菌:肽聚糖层薄,交联松散,乙醇脱色不能使其结构收缩,其脂含量高,乙醇将脂溶解,缝隙加大,结晶紫-碘复合物溶出细胞壁,番红染液复染后呈红色。 应注意的问题。 2.请简述细菌培养中所用的培养基的种类及各自的用途。 常用的细菌培养基有营养肉汤和营养琼脂培养基。 营养肉汤用于一般细菌培养、复壮、增菌等,也可用于消毒剂定性消毒效果测定营养琼脂培养基是一种无选择性的较低营养成分的固体培养基,主要用于细菌菌落计数,也可以用于细菌的传代和增菌,但一般不用于细菌的鉴定(除非该细菌菌落有比较特殊的形态特征).只适合营养要求不高的细菌生长. 3.平板菌落计数原理。 平板菌落计数法是将待测样品经适当稀释之后,其中的微生物充分分散成单个细胞,取一定量的稀释样液接种到平板上,经过培养,由每个单细胞生长繁殖而形成肉眼可见的菌落,即一个单菌落应代表原样品中的一个单细胞。统计菌落数,

根据其稀释倍数和取样接种量即可换算出样品中的含菌数。但是,由于待测样品往往不易完全分散成单个细胞,所以,长成的一个单菌落也可来自样品中的2~3或更多个细胞。因此平板菌落计数的结果往往偏低。为了清楚地阐述平板菌落计数的结果,现在已倾向使用菌落形成单位(colony-forming units,cfu)而不以绝对菌落数来表示样品的活菌含量 4.食品中大肠菌群检测的意义。 食品的微生物学指标主要包括菌落总数、大肠菌群和致病菌等三个项目。其中菌落总数和大肠菌群是最重要、最常检的检验项目。 检测食品中的菌落总数,可以了解食品在生产中,从原料加工到成品包装受外界污染的情况.从而反映食品的卫生质量。一般来说、菌落总数越多,说明食品的卫生质量越差,遭受病原菌污染的可能性越大。而菌落总数仅少量存在时,病原菌污染的可能性就会降低或者几乎不存在。但上述规则也有例外,有些食品成品的菌落总数并不高,但由于已有细菌繁殖并已产生了毒素,且毒素性状稳定,仍存留于食品中;再有一些食品如酸泡菜和酸乳等,本身就是通过微生物的作用而制成的,且是活菌制品。因此,菌落总数的测定对评价食品的新鲜度和卫生质量有着一定的卫生指标的作用,但本能单凭此一项指标来判定食品的卫生质量,还必须配合大肠菌群和致病菌等检验,才能作出比较全面、准确的评价。大肠菌群是水源污染的指示菌,当饮用水中检查出大肠菌群时,即证实水已被粪便污染,对人是有害的,是不卫生的。同样,食品中若有大肠菌群存在,也会影响人的健康 二、论述题(每题20分,共2题,共40分) 1. 纯净水样品中的菌落总数的检测方法。 国家饮用水标准GB 5749-85规定,菌落总数不得超过100 cfu/g(ml),所用 的方法是稀释平板计数法。平板菌落计数法是将等测样品经适当稀释后,其中的微生物充分分散为单个细胞,取一定量的稀释液接种到平板上,经过培养,由每个单细胞生长繁殖而形成的肉眼可见的菌落,即一个单菌落应代表原样品中的一个单细胞。统计菌落数,根据其稀释倍数和取样接种量即可换算出样品中的含菌

微生物检验试题

微生物检验试题 1.下列对微生物概念表述正确的是 A.仅存在于人体 B.结构复杂,形体微小 C.可用肉眼进行观察 D.原虫不属于微生物 E.卡氏肺孢子虫属于微生物 2.下列不属于原核细胞型微生物的是 A.大肠埃希菌B新型隐球菌 C肺炎衣原体D厌氧性放线菌 E解脲脲原体 3.属于非细胞型微生物的是 A.朊粒 B.细菌 C.真菌 D.衣原体 E.支原体 4.医院感染是指 A.患者在住院前三天发生的感染 B.患者在住院前一天发生的感染 C.患者在住院期间发生的感染 D.患者出院后一天发生的感染 E.患者在住院后三天发生的感染 5.下列对临床微生物检验的工作原则表述错误的是 A.确保临床标本可靠 B.微生物学定性分析 C.全面了解机体病原微生物 D.快速准确提供信息 E.加强与临床联系 6.革兰阳性细菌细胞壁具有很强抗原性的成分是 A.外膜 B.肽聚糖 C.磷壁酸 D.聚糖骨架 E.五肽交联桥 7.下列菌有细胞壁外膜层的是 A.粪肠球菌 B.溶血葡萄球菌 C.新型隐球菌 D.产酸克雷伯菌 E.克柔假丝酵母菌 8.具有脱硫氢基作用的细菌是 A.金黄色葡萄球菌 B.肺炎链球菌 C.脑膜炎奈瑟菌

D.奇异变形杆菌 E.流感嗜血杆菌 9.能使菌体蛋白变性或沉淀的消毒剂是 A.高锰酸钾 B.过氧乙酸 C.过氧化氢 D.低浓度苯酚 E.高浓度苯酚 10.监测高压灭菌器灭菌效果应选用 A.嗜热脂肪芽胞杆菌ATCC7953 B.金黄色葡萄球菌A TCC25923 C.大肠埃希菌ATCC25922 D.枯草芽胞杆菌黑色变种ATCC9372 E.铜绿假单胞菌ATCC27853 11.不属于口腔中常见正常菌群的是 A.卡他布兰汉菌 B.大肠埃希菌 C.甲型和丙型链球菌 D.表皮葡萄球菌 E.白假丝酵母菌 12.淘米水样粪便、有腥臭味,符合的疾病是 A.细菌性痢疾 B.重症霍乱 C.病毒性腹泻 D.阿米巴痢疾 E.肠伤寒 13.鉴定致病性金黄色葡萄球菌最常用的试验是 A.耐热DNA酶试验 B.血浆凝固酶试验 C.甘露醇分解试验 D.KIA E.MIU 14.抗酸染色检查的是 A.大叶性肺炎 B.细菌性脑膜炎 C.细菌血流感染 D.结核病、麻风 E.淋病 15.具有嗜冷性的菌为 A.奇异变形杆菌 B.产酸克雷伯菌 C.小肠结肠炎耶尔森菌 D.黏质沙雷菌 E.摩氏摩根菌

微生物学检验题库及答案

《微生物学与检验》题库及答案 一.名词解释 1.医院感染 2.肥达反应 3.内基小体 4. 噬菌体: 5.血浆凝固酶 6.败血症 7.灭菌 8.药物敏感试验 9.外 - 斐氏试验 10.L 型细菌 11.菌群失调:12.微生物 13.细菌 14.最小抑菌浓度 15.菌落 16.汹涌发酵 17.无菌操作18.流感杆菌“卫星现象” 19.培养基 20.包涵体 21.正常菌群 22. 内毒素 23. 干扰现象: 24.菌血症 25菌丝: 二.填空题 1 L 型细菌是指()。 2 杀灭物体上所有微生物的方法称为()。 3 细菌 H-O 变异是指()。 4 药敏试验所用标准培养基是,所用菌液相当于()个细菌/ ml ,细菌接种采用()划线接种法。 5 细菌致病因素包括()、()和()。 6 细菌引起的全身感染包括()、()、()和()四种类型。 7 不染色标本检查主要用于观察细菌的()。 8 影响革兰染色结果的关键步骤是()。 9 有动力细菌在半固体培养基中的生长现象是穿刺接种线(),无动力细菌穿刺接种线()。 10 糖发酵试验用于观察细菌分解糖是否产()和()。 11 靛基质试验的原理为,细菌产生的色氨酸酶分解蛋白胨中的色氨酸而生成(),此代谢产物与加入的试剂反应,生成()。 12 链球菌根据溶血现象分为()、()和()三种类型。 13 葡萄球菌触酶试验结果为()性,链球菌触酶试验结果为()性。 14 呈现脐窝状菌落的球菌是()。 15 抗 O 试验是测定病人血清中()抗体效价的试验,用于风湿热等疾病的辅助诊断。 16 血平板上呈现草绿色溶血环的病原性球菌是()和()。 17 IMViC 试验包括()、()、()和()四项试验。 18 分解乳糖的细菌在肠道选择平板上呈现()菌落,不分解乳糖则为()菌落。 19 KIA 斜面红色表明,底层黄色、有气泡表明()、(),有黑色沉淀表明()试验阳性 20 霍乱弧菌生物型包括()和()。 21 AIDS 的传染源是()和(),传播途径主要有(),()和()。 22 真菌菌落有()、()和()三种。 23 病毒培养方法有()、()和()。 24 病毒的基本结构由()和()组成,有些病毒还具有()。 25 流感病毒根据抗原结构不同分()、()、()三型,其中容易引起流感大流行的是其中的()型。 26 防止微生物进入机体和物品的操作方法称为()。 27 含菌量较多的标本(如粪便)的接种通常采用()接种法。

微生物检验技术习题集

1.测定和表示细菌大小的单位是() A.pm B. mm C. cm D. nm 2.芽胞对理化因素有较强的抵抗力与下列何种成分有关() A.脂肪酸 B. 粘肽 C. 双层磷壁酸 D.吡啶而羧酸 E.二氨基二酸 3.革兰阴性菌内毒素的有效成分是() A. 胞壁酸 B. 脂质A C. 脂蛋白 D. 肽聚糖 E. 磷壁酸 4.与鉴别细菌有关的细菌特殊结构有() A.鞭毛 B.荚膜 C.芽胞 D.菌毛 E.A+B+C 5.青霉素的杀菌机制是() A.抑制细胞壁肽聚糖的合成 B.抑制荚膜的合成 C.破坏胞浆内核蛋白 D.抑制细胞膜蛋白质的合成 E.以上均不是 6.有关荚膜的描述,下列哪项有误() A.具有抗吞噬作用 B.长期体外人工培养易层厚 C.常用特殊染色法观察 D.与细菌的毒力有关 E.可用于细菌鉴定和血清学分型 7.关于菌毛的描述,下列哪项有误() A.多见于革兰阴性菌 B.有普通菌毛和性菌毛两种 C.不能用普通显微镜观察 D.是细菌的运动器官 8.L型细菌是() A.细胞壁缺陷的细菌 B.细胞膜缺陷的细菌 C.缺乏质粒的细菌 D.缺乏核质的细菌 E.缺乏菌毛的细菌 9.革兰阳性菌细胞膜特有的成分是() A. 肽聚糖 B. 脂蛋白 C.外模 D.脂多糖 E.磷壁酸 10.有关芽胞的描述,不正确的是() A.是细菌的特殊结构 B.是细菌的繁殖体 C.是细菌的休眠体 D.对外界环境抵抗力强 E.芽胞的大小、位置、形状因菌而异 11.革兰染色所用染液的顺序是() A.稀释复红—碘液—95%乙醇—结晶紫 B.稀释复红—95%乙醇—碘液—结晶紫 C.结晶紫—碘液—95%乙醇—稀释复红 D.结晶紫—95%乙醇—碘液—稀释复红 E.稀释复红—结晶紫—碘液—95%乙醇 12.不染色标本检验法主要用于观察细菌的() A.大小 B.形态 C.结构 D.动力 E.繁殖方式 13.关于细菌的描述,不正确的是() A.一般具有细胞壁 B.细胞微小,结构简单 C.有成形的细胞核 D.无核膜、无核仁 E.分类上属于原核生物 14.革兰阳性菌和革兰阳性菌细胞壁的共同成分或结构是() A.脂多糖 B.磷壁酸 C.外模 D.肽聚糖 E.脂蛋白

《卫生微生物学试题及答案》

卫生微生物(一) 一、名词解释 1.指示微生物:就是在常规卫生监测中,用以指示样品卫生状况及安全性的(非致病)微生物(或细菌)。 2.消毒:就是指杀灭或清除传播媒介上病原微生物,使其达到无害化的处理。 3.生物战剂:在战争中用来伤害人、畜与毁坏农作物、植被等的致病微生物及其毒素称为生物战剂。 4.土著微生物:就是指一个给定的生境中能生存、生长繁殖、代谢活跃的微生物,并能与来自她群落的微生物进行有效的竞争。它们已经适应了这个生境。 5.高效消毒剂:可杀灭所有种类微生物(包括细菌芽胞),达到消毒合格要求的消毒剂,如戊二醛、过氧乙酸等。 6.微生物气溶胶:以固体或液体微小颗粒分散于空气中的分散体系称为气溶胶。其中的气体就是分散介质。固体或液体微小颗粒如尘埃、飞沫、飞沫核及其中的微生物称为分散相,分散悬浮于分散介质(空气)中,形成所谓微生物气溶胶。 7.水分活性值:就是指食品在密闭容器内的水蒸气压与相同温度下的纯水蒸气压的比值。 二、填空 1.微生物与环境相互作用的基本规律有限制因子定律、耐受性定律、综合作用定律。P12 2.菌落总数包括细菌菌落总数、霉菌菌落总数与酵母菌菌落总数。P43 3.紫外线消毒的影响因素有照射剂量、照射距离、环境温度。P68 4.生物战剂的生物学特性就是繁殖能力、可传染性、防治困难、稳定性较差。P86 5.生物战剂所致传染病的特点就是流行过程异常、流行特征异常。P90 6.用于食品霉菌、酵母菌计数的培养基为马铃薯-葡萄糖琼脂、孟加拉红与高盐察氏培养基P289 7.按微生物要求,将药品分为规定灭菌药品与非规定灭菌药品两大类。P233 8.我国评价化妆品细菌安全性指标包括、、与特定菌的检验 三、简答题 1、简述水微生物的生态功能。P101 答:水微生物的生态学功能大体可概括为以下几个方面:1)能进行光能与化能自养;2)能降解有机物为无机物,这些无机物可作为生产者的原料;3)能同化可溶性有机物并把它们重新引入食物网;4)能进行无机元素的循环;5)细菌可以作为原生动物的食物;6)土著微生物能攻击外来微生物,使后者很难生存。 2.鲜蛋的抑菌物质及其抑菌作用P181 答:禽蛋含有丰富的营养物质,就是微生物生长繁殖的良好环境。但就是禽蛋又具有良好的防御微生物侵入的结构及各种天然抑菌条菌物质。蛋壳有保护作用,蛋壳表面有壳胶膜,可保护鲜蛋不受微生物侵入。蛋白内含有许多溶菌、杀菌等作用的因子,如溶菌酶,这就是一种碱性蛋白,作用于革兰阳性菌的胞壁肽聚糖,使之裂解而溶菌。此外,在蛋白中还有一种伴清蛋白,它能螯合重金属离子,特别就是铁、铜、锌等离子,结果使这些离子不能被细菌利用,就是一种重要的抑菌物质。 四、问答

临床微生物学检验技术试题及答案(5)

临床微生物学检验技术试题及答案A1题型 1、人类ABO血型抗原包括 A、A抗原 B、B抗原 C、O抗原 D、AB抗原 E、A抗原和B抗原 答案:E 2、ABO血型物质在人体中可引起哪几种Ab产生 A、抗B抗体 B、抗AB抗体 C、抗A抗体 D、抗O抗体 E、抗A和抗B抗体 答案:E 3、免疫耐受就是 A、非特异性无反应性 B、特异性无反应性 C、机体无反应性 D、免疫抑制性 E、对任何抗原都不反应 答案:B 4、迟发型皮肤过敏反应与下列哪种物质有关 A、IgE B、IgA C、活化B细胞 D、活化T细胞 E、活化NK细胞

答案:D 5、佐剂作用是 A、将Ag送入机体各部位 B、将Ag固定在局部 C、增强Ag免疫原性 D、赋予Ag免疫原性 E、增强机体对Ag的免疫应答 答案:E 6、下列哪种物质既有非特异性免疫也参与特异性免疫反应 A、IgG B、干扰素 C、IgA D、前列腺素 E、补体 答案:E 7、TDH 细胞是 A、产生Ab细胞 B、天然杀伤细胞 C、细胞毒细胞 D、迟发变态反应T细胞 E、依Ab杀伤T细胞 答案:D 8、关于霍乱弧菌是否侵入上皮细胞,下列说法正确的是 A、不侵入 B、侵入 C、在特定条件下侵入 D、具有侵袭基因的霍乱弧菌侵入 E、侵入后局限于上皮细胞内 答案:A 9、葡萄球菌能产生多种溶血素,其中最主要的是

A、α、β溶血素 B、α、γ溶血素 C、β、γ溶血素 D、δ、ε溶血素 E、α、γ溶血素 答案:A 10、与其他肺部感染病原菌相比较,铜绿假单胞菌的毒力特点是 A、产生外毒素 B、具有内毒素 C、产生溶血素 D、产生绿脓素 E、具有菌毛 答案:D 11、有荚膜的流感嗜血杆菌含有荚膜多糖抗原称作: A、V抗原 B、M抗原 C、A抗原 D、X抗原 E、S抗原 答案:B 12、下列关于铜绿假单胞菌叙述中,正确的是 A、革兰氏阳性球菌 B、革兰氏阳性杆菌 C、无芽孢 D、具有荚膜 E、无鞭毛 答案:C 13、下列何种微生物具有荚膜结构 A、军团菌 B、支原体

微生物检验技术有关的习题.

习题七 一、填空 1.我国卫生部颁布的食品微生物指标有、和三项。 2.凡乳糖发酵管产气,革兰氏染色为阴性无芽胞杆菌,即报告为大肠杆菌性;凡乳糖发酵管不产气或革兰氏染色为阳性,则报告为大肠杆菌为性。 二、选择 1.乳糖初发酵试验通常在()检测中用到。 A 乳酸菌 B. 酵母菌 C. 细菌总数 D. 大肠杆菌 2.大肠杆菌指数测定时,37℃培养24小时,能发酵乳糖()为阳性 A产酸 B 产酸产气 C 产酸不产气D产气不产酸 E 以上都不产生 3.在饮用水中检出(),不能推定为粪便污染 A 埃希氏大肠杆菌 B 沙门氏菌C志贺菌D产气肠杆菌E弧菌属 4.在检验肠道细菌时应将培养物置()培养。 A 28 ℃ B 25℃ C 36±1℃ D 45℃ 5.微生物的检验中,大肠菌群的测定单位用()表示。 A g/ml (g) B g/100ml (g) C MPN/100ml (g) D cfu/ml (g) 6.大肠菌群的生物学特性是() A发酵乳糖、产酸、不产气 B不发酵乳糖、产酸、产气 C发酵乳糖、产酸、产气 D发酵乳糖、不产酸、不产气 7.大肠菌群的生物学特征是() A革兰氏阳性、需氧和兼性厌氧 B革兰氏阴性、需氧和兼性厌氧 C革兰氏阳性、厌氧 D革兰氏阳性、需氧 8.大肠菌群在EMB平板上的菌落特征是() A白色针尖状 B金黄色葡萄球菌 C黑色 D红色 9.MPN是指() A 100g样品中大肠菌群确切数 B 1g样品中大肠菌群确切数 C 1g样品中大肠菌群近似数 D 100g样品中大肠菌群近似数 10.测定大肠菌群时,经EMB平板分离后要确定是否为大肠菌群,还要经过() A 三糖铁试验 B V-P试验 C复发酵和革兰氏染色 D硫化氢试验 12.大肠菌群测定的一般步骤是() A初发酵-分离-染色-复发酵 B初发酵-分离-复发酵-染色 C初发酵-复发酵-分离 D初发酵-复发酵 13.大肠菌群初发酵的培养条件是() A 36℃,24h B 25℃,一周 C 36℃,48h D 36℃,4h 14.大肠菌群复发酵的培养条件是() A 36℃,24h B 36℃,4h C 36℃,48h D 36℃,12h 15.下列有关大肠杆菌的描述中,错误的是( ) A革兰氏反应呈阴性 B菌体形态是短杆菌 C菌体排列为一个或二个 D会形成孢子 16.检测大肠菌群时,待检样品接种乳糖胆盐发酵管,经培养如不产气,则大肠菌群( )。A阳性 B阴性 C需进一步试验 D需接种伊红美兰平板 17.我国的卫生标准中,每升饮用水中不得超过()个大肠杆菌 A1 B3 C5 D 7 E 8 18.大肠杆菌指数测定时,37℃培养24小时,能发酵乳糖()为阳性 A产酸B产酸产气C产酸不产气D产气不产酸E以上都不产生

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