当前位置：文档库 › 5生物学全同胞关系鉴定实施规范

5生物学全同胞关系鉴定实施规范

(完整版)农药生物测定复习题

农药生物测定复习题名词解释农药生物测定：是指运用特定的试验设计，利用生物的整体或离体的组织、细胞对农药（或某些化合物）的反应，并以生物统计为工具，分析供试对象在一定条件下的效应，来度量（判断或鉴别）某种农药的生物活性。负温度系数的杀虫剂：在一定温度范围内，杀虫剂的毒效随温度的降低而升高，称为负温度系数的杀虫剂。如溴氰菊酯对伊蚊幼虫的毒力在10℃时比30℃时大7倍。正温度系数的杀虫剂：在一定温度范围内，杀虫活性随温度升高而增强。如敌百虫。标准目标昆虫：指被普遍采用的、具有一定代表性和经济意义以及抗药力稳定均匀的农药杀虫毒力和毒效指示试虫群体。杀虫剂内吸毒力：药剂可通过植物根、茎、叶等部位吸收到植株内部，随着植物体液输导，当害虫取食植物或刺吸汁液时，药剂进入虫体并将之杀死。熏蒸毒力：在适当气温下，利用有毒气体、液体或固体挥发产生的蒸气来毒杀害虫（或病菌）。熏蒸毒力测定：测定杀虫剂从昆虫气孔或气门进入呼吸系统而引起试虫中毒致死的熏杀毒力。化学保护：用药剂处理植物和植物环境，在病菌侵入寄主植物前发挥药效，保护植物不受病菌侵染的措施。化学治疗：在病原菌侵入植物之后使用杀菌剂消灭病菌，使植物不再发病。将药剂内吸到植物内部起作用。化学免疫：植物通过药剂的作用，使植物具有对病菌的抵抗能力，避免或减轻病菌的侵害。杀菌剂的离体活性测定：只包括病原菌和药剂而不包括寄主或寄主植物的培养皿内测定方法，通常根据病菌与药剂接触后的反应，如孢子不萌发、不长菌丝等来作为毒力评判的标准。杀菌剂的活体活性测定：包括病原菌、药剂和寄主植物在内的活性测定，通常以寄主植物的发病情况（普遍程度、严重程度）来评判药剂的毒力。致死中量(LD50)(medium lethal dosage)：指杀死供试昆虫群体内50%的个体所需要的药剂剂量。指一定条件下，可致供试生物半数死亡机会的药剂剂量，表示单位：mg/kg、μg/g或μg/头。致死中浓度(LC50)(medium lathal concentration)：指杀死供试昆虫群体内50%的个体所需要的药剂浓度。校正死亡率：采用Abbort(1975)校正死亡率公式，以去除自然死亡对结果的影响。校正死亡率（%）=（处理组死亡率—对照组死亡率）/（1—对照组死亡率）

微生物常规鉴定技术

微生物常规鉴定技术一、形态结构和培养特性观察１、微生物的形态结构观察主要是通过染色，在显微镜下对其形状、大小、排列方式、细胞结构（包括细胞壁、细胞膜、细胞核、鞭毛、芽孢等）及染色特性进行观察，直观地了解细菌在形态结构上特性，根据不同微生物在形态结构上的不同达到区别、鉴定微生物的目的。２、细菌细胞在固体培养基表面形成的细胞群体叫菌落（colony）。不同微生物在某种培养基中生长繁殖，所形成的菌落特征有很大差异，而同一种的细菌在一定条件下，培养特征却有一定稳定性。，以此可以对不同微生物加以区别鉴定。因此，微生物培养特性的观察也是微生物检验鉴别中的一项重要内容。１）细菌的培养特征包括以下内容：在固体培养基上，观察菌落大小、形态、颜色（色素是水溶性还是脂溶性）、光泽度、透明度、质地、隆起形状、边缘特征及迁移性等。在液体培养中的表面生长情况（菌膜、环）混浊度及沉淀等。半固体培养基穿刺接种观察运动、扩散情况。２）霉菌酵母菌的培养特征：大多数酵母菌没有丝状体，在固体培养基上形成的菌落和细菌的很相似，只是比细菌菌落大且厚。液体培养也和细菌相似，有均匀生长、沉淀或在液面形成菌膜。霉菌有分支的丝状体，菌丝粗长，在条件适宜的培养基里，菌丝无限伸长沿培养基表面蔓延。霉菌的基内菌丝、气生菌丝和孢子丝都常带有不同颜色，因而菌落边缘和中心，正面和背面颜色常常不同，如青霉菌：孢子青绿色，气生菌丝无色，基内菌丝褐色。霉菌在固体培养表面形成絮状、绒毛状和蜘蛛网状菌落。

革兰氏染色: 革兰氏染色法是1884年由丹麦病理学家C.Gram所创立的。革兰氏染色法可将所有的细菌区分为革兰氏阳性菌（G+）和革兰氏阴性菌（G—）两大类，是细菌学上最常用的鉴别染色法。该染色法所以能将细菌分为G+菌和G—菌，是由这两类菌的细胞壁结构和成分的不同所决定的。G—菌的细胞壁中含有较多易被乙醇溶解的类脂质，而且肽聚糖层较薄、交联度低，故用乙醇或丙酮脱色时溶解了类脂质，增加了细胞壁的通透性，使初染的结晶紫和碘的复合物易于渗出，结果细菌就被脱色，再经蕃红复染后就成红色。G+菌细胞壁中肽聚糖层厚且交联度高，类脂质含量少，经脱色剂处理后反而使肽聚糖层的孔径缩小，通透性降低，因此细菌仍保留初染时的颜色步骤：（1）涂片：涂片方法与简单染色涂片相同。（2）晾干：与简单染色法相同。（3）固定，与简单染色法相同（4）结晶紫色染色：将玻片置于废液缸玻片搁架上，加适量（以盖满细菌涂面）的结晶紫染色液染色1分钟。（5）水洗：倾去染色液，用水小心地冲洗。（6）媒染：滴加卢哥氏碘液，媒染1min。（7）水洗：用水洗去碘液。（8）脱色：将玻片倾斜，连续滴加95%乙醇脱色20—25s至流出液无色，立即水洗。（9）复染：滴加蕃红复染5min。（10）水洗：用水洗去涂片上的蕃红染色液。（11）晾干：将染好的涂片放空气中晾干或者用吸水纸吸干。（12）镜检：镜检时先用低倍，再用高倍，最后用油镜观察，并判断菌体的革兰氏染色反应性。（13）实验完毕后的处理： ①将浸过油的镜头按下述方法擦拭干净，a.先用擦镜纸将油镜头上的油擦去。b.用擦镜纸沾少许二甲苯将镜头擦2—3次。c.再用干净的擦镜纸将镜头擦2—3次。注意擦镜头时向一个方向擦拭。 ②看后的染色玻片用废纸将香柏油擦干

生物效应检定法中药

生物效应测定法的研究进展及展望【摘要】生物效应测定法是一类应用广泛、结果真实有效的一类定量、半定量检测方法。生物效应测定法也逐渐被各个研究领域接受，成为一个比较热门的研究技术和方法。本文作者通过阅读大量的国内外文献资料，对生物效应测定法的内容作一简单综述，包括方法建立、分类、特点等方面，并提出展望以期待能为其他学者的研究提供一些借鉴。关键词：生物效应测定法；方法建立；分类；特点 1 前言生物效应评价法，又称生物效应检测或生物效应鉴定法。它是以药理学为基础，生物统计为方法，运用特定的实验设计，通过药物对于生物整体、离体器官、细胞、酶或分子等所起的作用，严格控制的实验条件，通过比较对照品和供试品的生物体或离体器官与组织的特定生物效应，从而控制和评价供试品质量、活性或作用强度[1-3]。生物效应检测法主要用于有效物质不明确、含量较低、化学结构多样的天然药物和生物制剂等，特别适用于成分复杂、结构复杂、理化方法不能测定其含量、不能反映其临床生物活性且具有多种功能相似的已知和未知活性成分药品定量或半定量测定[4]。生物活性测定法主要包括生物效价测定法( 定量反应法) 和生物活性限值测定法( 半定量法或质反应法) ，前者在一定剂量范围内，量效关系较明显，易于量化评价。后者多用于达到某一特定给药量的条件下，才出现某效应的评价( 如出现死亡、惊厥、凝集等) ，属于半定量或定性的范畴[5]。一般地，优先选用生物效价测定法，不能建立生物效价测定的品种可考虑采用生物活性限值测定法，待条件成熟后可进一步研究采用生物效价测定法。在《中国药典》2010年版“中药生物活性测定指导原则”(征求意见稿)中提到：中药的生物活性检测应优先选用生物效价测定法，不能建立生物效价测定的品种可考虑采用生物活性限值测定法。生物效应测定法技术近年来发展的很快，在各个领域都得到了很好的应用，尤其是中药的研究领域，生物效应测定法的诞生为中药的研究者们带来了福音，本文作者主要以生物效测定法在中药研究领域的应用为例对生物效应测定法的

微生物检验常规鉴定技术

第一章微生物检验常规鉴定技术课堂教学计划（1学时）第一章微生物检验基本知识包括显微镜、染色技术、培养基制备技术、接种、分离纯化和培养技术等。接种、分离纯化和培养技术

一、接种将微生物接到适于它生长繁殖的人工培养基上或活的生物体内的过程叫做接种。１、接种工具和方法接种和分离工具 1．接种针 2.接种环 3.接种钩 4.5.玻璃涂棒 6.接种圈 7.接种锄 8.小解剖刀常用的接种方法有以下几种：１）划线接种这是最常用的接种方法。即在固体培养基表面作来回直线形的移动，就可达到接种的作用。常用的接种工具有接种环，接种针等。在斜面接种和平板划线中就常用此法。２）三点接种在研究霉菌形态时常用此法。此法即把少量的微生物接种在平板表面上，成等边三角形的三点，让它各自独立形成菌落后，来观察、研究它们的形态。除三点外，也有一点或多点进行接种的。３）穿刺接种在保藏厌氧菌种或研究微生物的动力时常采用此法。做穿刺接种时，用的接种工具是接种针。用的培养基一般是半固体培养基。它的做法是：用接种针蘸取少量的菌种，沿半固体培养基中心向管底作直线穿刺，如某细菌具有鞭毛而能运动，则在穿刺线周围能够生长。４）浇混接种该法是将待接的微生物先放入培养皿中，然后再倒入冷却至45°C 左右的固体培养基，迅速轻轻摇匀，这样菌液就达到稀释的目的。待平板凝固之后，置合适温度下培养，就可长出单个的微生物菌落。５）涂布接种与浇混接种略有不同，就是先倒好平板，让其凝固，然后再将菌液倒入平板上面，迅速用涂布棒在表面作来回左右的涂布，让菌液均匀分布，就可长出单个的微生物的菌落。６）液体接种从固体培养基中将菌洗下，倒入液体培养基中，或者从液体培养物中，用移液管将菌液接至液体培养基中，或从液体培养物中将菌液移至

生物效应检定法

生物效应法在中药方面的应用摘要：质量稳定可控是保证中药有效性和安全性的重要前提。生物效应法用于中药质量控制和评价具有明显优势，目前已尝试用于连翘、穿心莲、益母草、黄连、枳实、水蛭、大蒜、板蓝根等单味药材和牛黄复方制剂冻干粉、归元口服液、黄金菊粉针剂、利咽丹、鼻康喷雾剂等复方中药制剂的质量控制和评价，显示了良好的应用前景。生物效应法必将逐步发展成为一种符合中医药传统理论、体现中药临床应用特点、切实保证中药安全有效的质量控制评价体系。关键词：生物效应；中药；质量控制；应用前言中药的药效究其本质，就是中药有效成分对机体生物分子(受体、酶等）的作用[1~2]。受体现已被证实为是许多特异性药物的关键作用机制[3]，通过高效液相、液质联用、气质联用等现代分离分析手段和放射性配体受体结合分析法研究中药活性成分对机体生物分子的作用，在此基础上建立国际承认的中药质量评价、控制方法。中药生物效应鉴定法的目的是搞清中药的组成成分，结构性质、体内活性、药效，阐明有效中药的作用机制和药效物质基础，实现中药质量和疗效的科学化、规范化评价。生物效应测定法又称生物效应检测或生物活性鉴定法，是利用药物对于生物的整体，离体器官，细胞，酶或分子等所起的作用，在严

格控制的实验条件下，通过比较对照物和供试品对生物或离体器官与组织的特定生物效应，从而控制和评价供试品质量，活性或作用强度。是以药理为基础的，使用与结构复杂，理化方法不能测定其含量，不能反映其临床生物学活性的药物，在中药鉴定，质量控制和安全评价中具有独到的优势。 1、生物效应测定法在中药制药行业的应用从中药的生物效应看，有效成分和毒性成分是中药复方成分的主要部分，可针对性地分别进行实验，推算其药动学参数。80年代初期产生了以药效为指标进行药代动力学研究的理论方法，该实验方法发展到今天主要有药理效应法，药物累积法和微生物指标法，分别在中药各方面鉴定具有突出作用。 1.1生物效应测定法在方剂配伍规律的应用方剂的关键科学问题主要是配伍相关理论的研究[4~5]。君臣佐使是方剂的组成原则，是方剂整体功效的结构基础。药对是相对固定的中药配伍形式，是方剂中最小的配伍单位，是研究方剂配伍重要的切入点之一。因此，围绕方剂关键科学问题，以建立方剂物质分离分析、生物效应综合评价的关键方法与创新技术为先导，以方剂药效物质基础及作用原理为突破口，以方剂的配伍配比为研究重点，构建创新中药的理论基础和关键技术体系。 1.2方剂活性物质的基础研究方剂的研究包含3个层次的化学成分研究，复方、药材、有效部位和有效成分，用生物效应指标追踪筛选。主要过程为：选择目标方

2020年(生物科技行业)微生物常规鉴定技术

（生物科技行业）微生物常规鉴定技术

微生物常规鉴定技术壹、形态结构和培养特性观察１、微生物的形态结构观察主要是通过染色，在显微镜下对其形状、大小、排列方式、细胞结构（包括细胞壁、细胞膜、细胞核、鞭毛、芽孢等）及染色特性进行观察，直观地了解细菌在形态结构上特性，根据不同微生物在形态结构上的不同达到区别、鉴定微生物的目的。２、细菌细胞在固体培养基表面形成的细胞群体叫菌落（colony）。不同微生物在某种培养基中生长繁殖，所形成的菌落特征有很大差异，而同壹种的细菌在壹定条件下，培养特征却有壹定稳定性。，以此能够对不同微生物加以区别鉴定。因此，微生物培养特性的观察也是微生物检验鉴别中的壹项重要内容。１）细菌的培养特征包括以下内容：在固体培养基上，观察菌落大小、形态、颜色（色素是水溶性仍是脂溶性）、光泽度、透明度、质地、隆起形状、边缘特征及迁移性等。在液体培养中的表面生长情况（菌膜、环）混浊度及沉淀等。半固体培养基穿刺接种观察运动、扩散情况。２）霉菌酵母菌的培养特征：大多数酵母菌没有丝状体，在固体培养基上形成的菌落和细菌的很相似，只是比细菌菌落大且厚。液体培养也和细菌相似，有均匀生长、沉淀或在液面形成菌膜。霉菌有分支的丝状体，菌丝粗长，在条件适宜的培养基里，菌丝无限伸长沿培养基表面蔓延。霉菌的基内菌丝、气生菌丝和孢子丝都常带有不同颜色，因而菌落边缘和中心，正面和背面颜色常常不同，如

青霉菌：孢子青绿色，气生菌丝无色，基内菌丝褐色。霉菌在固体培养表面形成絮状、绒毛状和蜘蛛网状菌落。革兰氏染色: 革兰氏染色法是1884年由丹麦病理学家C.Gram所创立的。革兰氏染色法可将所有的细菌区分为革兰氏阳性菌（G+）和革兰氏阴性菌（G—）俩大类，是细菌学上最常用的鉴别染色法。该染色法所以能将细菌分为G+菌和G—菌，是由这俩类菌的细胞壁结构和成分的不同所决定的。G—菌的细胞壁中含有较多易被乙醇溶解的类脂质，而且肽聚糖层较薄、交联度低，故用乙醇或丙酮脱色时溶解了类脂质，增加了细胞壁的通透性，使初染的结晶紫和碘的复合物易于渗出，结果细菌就被脱色，再经蕃红复染后就成红色。G+菌细胞壁中肽聚糖层厚且交联度高，类脂质含量少，经脱色剂处理后反而使肽聚糖层的孔径缩小，通透性降低，因此细菌仍保留初染时的颜色步骤：（1）涂片：涂片方法和简单染色涂片相同。（2）晾干：和简单染色法相同。（3）固定，和简单染色法相同（4）结晶紫色染色：将玻片置于废液缸玻片搁架上，加适量（以盖满细菌涂面）的结晶紫染色液染色1分钟。（5）水洗：倾去染色液，用水小心地冲洗。（6）媒染：滴加卢哥氏碘液，媒染1min。（7）水洗：用水洗去碘液。

生物量测定方法

生物量测定方法 1树木生物量测定方法 1.1树木生物量的组成一木树的生物量可以分为地下及地上两部分，地下部分是指树根系的生物量（WR）；地上部分主要包括树干生物量（WS）、枝生物量（WB）和叶生物量（WL）。在生物量的测定中，除称量各部分生物量的干重量外，有时还要计算它们占全树总生物量干重的百分数，此百分数称为分配比。树干占地上部分的分配比最大（一般为65～70%），而枝叶部分的分配比约各占15%左右。与材积测定相比，生物量测定的对象更为复杂，测定的部分也多，因而使得生物量的测定工作即复杂又困难。但是树木生物量与树木胸径、树高等测树因子之间也有着密切的关系，这些关系也为树木生物量测定提供了依据。在树木生物量测定中，树冠量的大小与形状对枝、叶量的多少有着显着的影响，因此，在实际工作中，要研究反映冠形和冠量的因子，常用的因子有冠长率、树冠圆满度、树冠投影比等因子，这些因子的意义如下： ⑴冠长率是冠长与树高之比 ⑵树冠圆满度是冠幅与冠长之比。用以表明树冠的圆满程度，此值愈大愈圆满，反之而树冠狭长。 ⑶树冠投影比是冠幅与胸径之比。用以表明树木营养面积的相对大小，此值愈大则树木占有的相对空间愈大。上述这些因子在枝叶生物量测定、估计及分析比较中起着较大的辅助作用。而且，这些因子与胸径、树高等测树因子之间有着密切的相关关系，这为利用测树因子直接估测树木生物量提供了依据。 1.2树木生物量鲜重和干重的测定树体在自然状态下含水时的重量称为鲜重，它是砍伐后立即称量的重量。干燥后去掉结晶水的重量称为干重。在外业中只能测得树木的鲜重，然后采用各种方法将鲜重换算为干重，最常用的换算方法是计算树木的干重比（），即，而（11-8）式中可用取样测定获得。（1）树干干重的测定方法 ①木材密度法所谓木材密度是指单位体积的质量,即物质的质量与体积之比值（单位：g/cm3或kg/m3），习惯上以单位体积木材的重量表示木材密度。严格的说,质量与重量有着本质不同，质量指物体所含物质的多少,为物体惯性的尺度,系一恒量,单位为克；重量为地球对物体的引力,等于物体质量与重力加速度的乘积,单位为克。仅纬度45海平面处物体的质量与重量数值相等,若物体所处空间或地理位置变化,则重量也随着变化,但变化极少,在应用上一般可以忽略,而将质量和重量的数值视为相等。因此单位体积的质量和重量也视为相等(成俊卿,1985,木材学)。根据含水状况不同,木材密度通常分为四种： a.基本密度=绝干材质量/生材(或饱和水)体积 b.生材密度= 生材质量/生材(或饱和水)体积 c.气干密度= 气干材质量/气干材体积 d.绝干密度= 绝干材重/绝干材体积以上四种木材密度以基本密度和气干密度两种最为常用。基本密度常常用于树干干重的计算，气干密度常泛指气干木材任意含水率时的计算，因所处地区木材平衡含水率或气干程度不同，并有一个范围,如通常含水率在8-20%时试验的木材密度,均称为气干密度。在我国常将木材气干密度作为材性比较和生产应用的基本依据。木材密度测定方法通常有：直接量测法、水银测容器法、排水法、快速测定方和饱和含水率法，具体测定方法详见木材学(成俊卿,1985,木材学)。在木材密度已知的条件下,计算

微生物的分类鉴定方法

微生物的分类鉴定方法 1. 内容微生物分类鉴定：经典方法、现代方法。 2. 练习一、填空题 1.不论鉴定哪一累微生物，其工作步骤都离不开一下3项________，________，________。答案：获得该微生物的纯培养，测定一系列必要的鉴定指标，查找权威性的菌种鉴定手册。 2.DNA碱基比是指________值，简称GC值。答案：（G+C）mol% 3. 测验一、填空题 1.按碱基的互补配对原理，用人工方法对两条不同来源的单链核酸进行________，以重新构建一条新的________技术，称为核酸杂交。一、简答题 1.现代微生物鉴定的经典指标有哪些？ 2.核酸分子杂交在微生物的分类鉴别中有何应用？ 4. 案例 5. 资源下载课程讲义资源（Word文档）、教学课件资源（PPT）、视频录像资源（视频录像）。6. 扩展学习使用教材：微生物学教程第3版周德庆主编高等教育出版社2011 参考书目：

1.沈萍主编，《微生物学》，高等教育出版社，2000； 2.沈萍、范秀容、李广武编，《微生物学实验》第3版，高等教育出版社，1999； 3.Prescott LM, Harley JP, and Klein DA. Microbiology (5th ed.), Higher education press and McGraw-Hill Companies, 2002. 4. 闵航（2005）：微生物学. 浙江大学出版社参考期刊：微生物学报中国科学院微生物研究所；中国微生物学会主办微生物学通报中国微生物学会；中国科学院微生物研究所主办参考网址：中国微生物信息网络hppt://159.226.80.1/chinese.html 中国微生物资源信息共享https://www.wendangku.net/doc/aa602550.html,/sdinfo 中国微生物信息网络https://www.wendangku.net/doc/aa602550.html,/

9204 微生物鉴定指导原则

9204
微生物鉴定指导原则
本指导原则为非无菌产品微生物限度控制菌检查中疑似菌的鉴定，以及药物原料、辅料、制药用水、生产环境、中间体和终产品中检出微生物的鉴定提供指导。当微生物的鉴定结果有争议时，以《伯杰氏系统细菌学手册》 (《Bergey， s Manual of Systematic Bacteriology》)现行版的鉴定结果为准。微生物鉴定是指借助现有的分类系统，通过对未知微生物的特征测定，对其进行细菌、酵母菌和霉菌大类的区分，或属、种及菌株水平确定的过程，它是药品微生物检验中的重要环节，药典附录相应章节中对检出微生物的鉴定做了明确规定，如“非无菌产品的微生物检查:控制菌检查” （通则 1106）中选择培养基或指示培养基上发现的疑似菌落需进行鉴定；对“无菌检查法” （通则 1101）的阳性实验结果中分离的微生物进行鉴定，以判定试验是否重试；药品洁净实验室微生物监测和控制指导原则（通则 9203）建议对洁净室和其他受控环境分离到的微生物进行鉴定，以掌握环境微生物污染情况，有助于污染调查。此外，在药品生产中，有时亦需对药物原料、辅料、制药用水、生产环境、中间产物和终产品中检出的微生物进行适当水平的鉴定。微生物鉴定需达到的水平视情况而定，包括种、属鉴定和菌株分型。大多数非无菌药品生产过程和部分无菌生产环境的风险评估中，对所检出微生物的常规特征包括菌落形态学、细胞形态学(杆状、球状、细胞群、孢子形成模式等)、革兰染色或其它染色法，某些能够给出鉴定结论的关键生化反应(如氧化酶、过氧化氢酶和凝固酶反应)进行分析，一般即可满足需要；非无菌药品产品的控制菌检查应达到种的水平；无菌试验结果阳性和无菌生产模拟工艺（如培养基灌装）失败时，对检出的微生物鉴定一般需达到菌株水平。一、微生物的鉴定程序微生物鉴定的基本程序包括分离纯化和鉴定，鉴定时，一般先将待检菌进行初步的分类。鉴定的方法有表型微生物鉴定和基因型微生物鉴定，根据所需达到的鉴定水平选择鉴定方法。微生物鉴定系统是基于不同的分析方法，其局限性与方法和数据库的局限性息息相关，未知菌鉴定时通过与微生物鉴定系统中的标准微生物（模式菌株）的特征(基因型和/或表型)相匹配来完成。如果数据库中没有此模式菌株，就无法获得正确的鉴定结果。在日常的微生物鉴定试验中，用户
1

微生物的分类与鉴定

第十章微生物的分类与鉴定一、选择题 1.真菌的分类单元-门的词尾为（A ） 2.A、–mycota B、–mycetes C、–mycotina D、-mycetidae 3.下列传统分类指标中始终被用作微生物分类和鉴定的重要依据的是（A ） 4.A、形态学特征 B、生理特征 C、生态学特征 D、分子生物学特征 5.下列拉丁文哪个书写格式正确（ C ） 6.A、Fusarium oxysporium B、Aspergillus japonicus Saito 7. C、Bacillus amyloliquefaciens D、Clostridium Kluyveri 8.1978年，根据16S rRNA和18S rRNA的碱基序列将生物分为“三域”的科学家是（D ） 9.A、Ainsworth B、Bergey C、Leedale D、Woese 10.1995年，Ainsworth分类系统把菌物列入真核生物域，将其分为3个界，下面哪项不属于其中（ D ） 11.A、原生动物界 B、假菌界 C、真菌界 D、菌物界 12.有关菌株的说法，下列哪项说法不对（ B ） 13.A、菌株强调的是遗传型纯的谱系 B、菌株的名称不可随意确定 14.C、菌株与克隆相同，为一个物种内遗传多态性的客观反映 15.D、菌株实际上是某一微生物达到遗传型纯的标志，二、是非题 1．微生物的种是微生物分类的基本单元，但是目前还没有一个公认的、明确的定义。（√） 2．两个微生物菌株具有相同G+C含量表明它们之间的亲缘关系一定很相近。（×）

3．亚种是进一步细分种时所用的单元，一般指除某一明显而稳定的特征外，其余鉴定特征都与模式种相同的种，其命名方法按“三名法”处理。（√） 4．变种是亚种的同义词，在《国际细菌命名法规》中不主张使用。（√）5．在微生物分类中，DNA（G+C）mol%的比较只能做否定判断。（√）6．微生物DNA之间的同源性越高，说明它们之间亲缘关系就越近，反之亦然。（×） 7．菌株是一个物种内遗传多态性的客观反应，是遗传型纯的谱系，其名称可以随意确定。（√） 8．模式菌株是一个种的具体活标本。（√） 9．据科学家1992年估计，地球上生存的菌物约有150万种。（√）10．微生物自动化鉴定技术一般都是利用微生物的生理生化反应特性而设计的。（√） 11．细菌分子鉴定常用16S rRNA序列分析，而真菌分子鉴定常用ITS序列分析。（√） 12．所谓“模式菌株”通常是指一个细菌的种内最具代表性的菌株。（×）13．对微生物生理生化特征的比较也是对微生物基因组的间接比较，加上测定生理生化特征比直接分析基因组要容易得多，因此生理生化特征对于微生物的系统分类仍然是有意义的。（√） 14．现代微生物分类中，任何能稳定地反映微生物种类特征的资料，都有分类学意义，都可以作为分类鉴定的依据。（×） 15．DNA-DNA杂交主要用于种、属水平上的分类研究，而进行亲缘关系更远(属以上等级)分类单元的比较，则需进行DNA-rRNA杂交。（√）

生物测定方法

生长量测定法体积测量法：又称测菌丝浓度法。通过测定一定体积培养液中所含菌丝的量来反映微生物的生长状况。方法是，取一定量的待测培养液（如10毫升）放在有刻度的离心管中，设定一定的离心时间（如5分钟）和转速（如5000 rpm），离心后，倒出上清夜，测出上清夜体积为v，则菌丝浓度为（10-v）/10。菌丝浓度测定法是大规模工业发酵生产上微生物生长的一个重要监测指标。这种方法比较粗放，简便，快速，但需要设定一致的处理条件，否则偏差很大，由于离心沉淀物中夹杂有一些固体营养物，结果会有一定偏差。称干重法：可用离心或过滤法测定。一般干重为湿重的10-20%。在离心法中，将一定体积待测培养液倒入离心管中，设定一定的离心时间和转速，进行离心，并用清水离心洗涤1-5次，进行干燥。干燥可用烘箱在105℃或100℃下烘干，或采用红外线烘干，也可在80℃或40℃下真空干燥，干燥后称重。如用过滤法，丝状真菌可用滤纸过滤，细菌可用醋酸纤维膜等滤膜过滤，过滤后用少量水洗涤，在40℃下进行真空干燥。称干重发法较为烦琐，通常获取的微生物产品为菌体时，常采用这种方法，如活性干酵母（activity dry yeast, ADY）,一些以微生物菌体为活性物质的饲

料和肥料。比浊法：微生物的生长引起培养物混浊度的增高。通过紫外分光光度计测定一定波长下的吸光值，判断微生物的生长状况。对某一培养物内的菌体生长作定时跟踪时，可采用一种特制的有侧臂的三角烧瓶。将侧臂插入光电比色计的比色座孔中，即可随时测定其生长情况，而不必取菌液。该法主要用于发酵工业菌体生长监测。如我所使用UNICO公司的紫外-可见分光光度计，在波长600nm 处用比色管定时测定发酵液的吸光光度值OD600，以此监控E.Coli的生长及诱导时间。菌丝长度测量法：对于丝状真菌和一些放线菌，可以在培养基上测定一定时间内菌丝生长的长度，或是利用一只一端开口并带有刻度的细玻璃管，到入合适的培养基，卧放，在开口的一端接种微生物，一段时间后记录其菌丝生长长度，借此衡量丝状微生物的生长。微生物计数法血球计数板法:

生物测定法

生物测定法一．卵泡刺激素（FSH）生物检定法——幼大鼠卵巢增重法 1.实验材料及用具 1.1天平精度0.01mg 供试品称量用精度0.1 mg 卵巢称重用精度0. 1g 大鼠称重用 1.2实验用具注射器（1ml，精度0.01ml），吸管、移液管、烧杯、有塞玻璃瓶、玻璃棒、量筒、滤纸。 1.3手术用器械手术板、手术剪、直镊、眼科剪、眼科直镊、眼科弯镊。 1.4试剂氯化钠、牛血清白蛋白、氢氧化钠、绒促性素（HCG）。 2.溶液配制 2.1生理盐水称取氯化钠适量，加水配成0.9%的溶液。 2.2氢氧化钠溶液称取氢氧化钠适量，加水配成1mol/L氢氧化钠溶液。 2.3牛血清白蛋白生理盐水称取牛血清白蛋白适量，加入到生理盐水中，配成1mg/ml的牛血清白蛋白溶液，并用1mol/L氢氧化钠溶液调节值至7.2±0.2。 2.4溶媒称取已知效价的HCG（粉末原料或粉针均可）加入到牛血请白蛋白生理盐水种，混匀，配成20u/ml的溶液。 2.5标准品溶液 2.5.1取尿促性素标准品，放置至室温。割开安瓿（注意勿使内容物损失）立即用溶媒将内容物洗出按FSH的标示效价配成10u/ml或20u/ml标准品溶液，亦可直接配成相当于高剂量d s3浓度的溶液。 2.6标准品溶液的稀释 2.6.1根均动物品系、来源、季节按中国药典附录卵泡刺激素生物鉴定法的要求，选择标准品高、中、低3组剂量。一般高剂量为2～4u/ml，剂距r不得大于1：0.5。 2.6.2分别精密量取10u/ml或20u/ml标准品溶液适量，各精密加入一定量溶媒，配制成高、中、低三组标准品稀释液。 2.6.3稀释液至4～8℃保存，供3日内使用。 2.7供试品溶液 2.7.1按供试品FSH的标示效价或估计效价，同标准品溶液的配制。 2.7.1.1粉末放置至室温，迅速精密称取适量。将称得的毫克数，乘以标示单位数或估计效价，得总单位数。用溶媒配成10u/ml 或20u/ml的供试品溶液，亦可直接配成相当于高剂量d T3浓度的溶液。

生物检定法

天津农学院课程论文中文题目:生物检定法及其应用英文题目:Biometric Method and Its Application 学生姓名王娟娟系别基础科学系专业班级 2008 级应用化学专业 3班成绩评定 2011 年11月

摘要本文阐述了生物检定法的意义，通过效价检定，生物检定常用方法，和实验设计，来说明生物检定法。还通过举肝素的分析和检测的例子，对生物检定法进行了解读。本文围绕生物检定法的基本概念，应用范围，常用方法，试验设计,对生物检定法进行了一个详细的介绍，使人们能够系统的了解生物检定法，这些介绍从不同方面给使用者提供参考。关键词：生物检定法；效价检定；试验设计；应用范围；常用方法

Abstract This paper expounds the significance of biometric method，through verification titer, biometric method in common use, and experimental design, to illustrate biometric method. Through an analysis of the heparin and detection of example, biometric method of understanding to read. This paper focus on the basic concept of biometric method, The scope of application, the commonly used method, experimental design, biometric method for a detailed introduction, to enable people to understand biological verification method of the system, these introduced from the different aspect provide user reference. Key words:Biometric method; Titer verification; Test design; Application scope; Commonly used method

微生物的分类与鉴定答案

一、填空： 1．微生物菌种的命名采用"双名法",即由属名和种名加词构成。 2．来源于一个细胞在固体平板培养基上形成的群体称菌株。 3．1969年将生物界分成了五界，分别是动物界、植物界、原生生物界、真菌界、原核生物界。4．细菌的分类单元分为七个基本的分类等级，由上而下依次为_界、_门__、纲、目、科、属、种。 5．生物分类的传统指标为形态特征、生理生化反应、和生态特性。 6．形态学特征始终被用作微生物分类和鉴定的重要依据之一，其主要原因为具有相对稳定性_和易观察。 7．分类学的内容包括_细菌分类_、放线菌分类和真菌分类_三部分，目前进行细菌分类和鉴定的重要参考书目是_《伯杰氏细菌鉴定手册》。 8．微生物分类和鉴定的特征包括_形态特征_和_生理生化反应_，其中__形态特征_对鉴定微生物的系统发育有决定性作用，而_生理生化反应_可作为判断亲缘关系的参考而且对以实用为目的的分类鉴定仍有重要价值。 9．核酸分子杂交_和_rRNA寡核苷酸编目分析__是目前通过直接比较基因组进行生物分类最常用的两种方法。 10．1978年，Woese等提出新的生物分类概念，根据16SrRNA的碱基序列将生物清晰地划分为三原界，即细菌域、古生菌域和真核生物域。 11．对微生物命定学名的表示方法分双名与三名两种。 12．在生物的界级分类学说研究中,1978年由R．H．whittake和“提出了一个崭新的三域学说。13．填写以下10个数据：(1) 对牛奶等进行巴氏消毒时常用 63 ℃的温度；(2)用液氮保藏微生物的温度为 -196 ℃；(3)通常细菌的最适培养温度为 37 ℃：(4)用烘箱进行的干热灭菌温度一般为 150～170 ℃；(5)的代时一般为 17 min；(6)典型的酵母菌S．cerevisiae的代时一般为 120 min，其大小一般为～10 X ～21um 。（7）至今已记载的微生物约 20万种（1995）；(8)我国卫生部门规定自来水中所含的大肠菌群数不得超过 3个/L ；(9)细菌总数不得超过 100个/ml 。 14．血清学反应是抗原和抗体之间发生的反应。 15.在鉴定菌种的一些现代方法中，有核酸分子杂交，rRNA寡核苷酸编目分析，全基因组测定，数值分类等方法。二、选择题： 1．同种菌不同来源的纯培养称为（ C ）（A）种 (B)变种 (C)菌株 (D)群 2．试排出生物分类等级的正确顺序（D） (A)目→纲→界→门 (B)界→纲→目→门 (C)目→纲→门→界 (D)界→门→纲→目三、判断题 1．目前种是生物分类中最小的分类单元和分类等级。√ 2．具有相同G+C含量的生物表明它们之间一定具有相近的亲缘关系。× 四、名词解释 1.种：是一个基本分类单位,它是一大群表型特征高度相似、亲缘关系极其接近、与同属内其他种有着明显差异的菌株的总称。 2.新种：从自然界中分离得到的某一微生物的纯种，如果与文献上记载的典型种的特征有明显差异，即为新种。 3．培养物：根据一定的目的，在培养基上培养的微生物称为培养物。

微生物的分类和鉴定

第十章微生物的分类和鉴定一、名词解释： 01.系统学（systematics）：是研究生物多样性及其分类和演化关系的科学。分子系统学是检测、描述并揭示生物在分子水平上的多样性及其演化规律的科学。研究内容包括了群体遗传结构、分类学、系统发育和分子进化等领域。 02.系统树：在研究生物进化和系统分类中，常用一种树状分支的图型来概括各种（类）生物之间的亲缘关系，这种树状分支的图型也称为发育树（phylogenetic tree）。 03.分子系统树：通过比较生物大分子序列差异的数值构建的系统树称为分子系统树。 04.微生物分类学（microbial taxonomy）：是一门按微生物的亲缘关系把它们安排成条例清楚的各种分类单元或分类群的科学，其具体任务有三，即分类、鉴定和命名。 05.分类（classification）：根据文献资料，经过科学的归纳和理性的思考，整理成一个科学的分类系统。即解决从个别到一般或从具体到抽象的问题。06.鉴定（identification）：通过详细观察和描述一个未知名称纯种微生物的各种性状特征，然后查找现成的分类系统，以达到对其知类、辨名的目的。即解决从一般到特殊或从抽象到具体的问题 07.命名（nomenclature）：为一个新发现的微生物确定一个新学名的过程。

08.培养物（culture）：是指一定时间一定空间内微生物的细胞群或生长物。如微生物的斜面培养物、摇瓶培养物等。如果某一培养物是由单一微生物细胞繁殖产生的，就称之为该微生物的纯培养物（pure culture)。 09.菌株（strain）：从自然界分离得到的任何一种微生物的纯培养物，都可以称为微生物的一个菌株；用实验方法（如通过诱变）所获得的某一菌株的变异型，也可以称为一个新的菌株，以便与原来的菌株相区别。菌株是微生物分类和研究工作中最基础的操作实体。 10.标准菌株：指能代表这个种的各典型性状的一个被指定的菌株。 11.种群（population）：也有人译为群体、居群或群丛等，是指一定空间中同种个体的组合。每一个物种在自然界中的存在，都有一定的空间结构，在其分散的、不连续的居住场所或分布区域内，形成不同的群体单元，这些群体单元就称为居群。 12.种（species）：是生物分类中基本的分类单元和分类等级。它是一大群表型特征高度相似、亲缘关系极其接近、与同属的其他物种有明显差异的一大群菌株的总称。 13.型（form / type）：常指亚种以下的细分，当同种或同亚种不同菌株之间的性状差异，不足以分为心的亚种时，可以细分为不同的型。例如，按抗原特征的差异分为不同的血清型；按对噬菌体裂解反应的不同分为不同的噬菌型等等。

生物测定

————————————————————————————————作者: ————————————————————————————————日期:

农药生物测定课程论文姓名：万宝荣学号：2０1０210318

玉米象对4种杀虫剂的生物测定方法研究摘要:通过对杀铃脲、阿维菌素、印楝种子提取物、水菖蒲粗提物对玉米象胃毒、熏蒸、忌避、触杀室内毒力测定试验的设计的叙述,在实际中通过试验验证，这4种杀虫剂是否对玉米象起到防治效果，为其具体的防治提供依据。关键词:玉米象；杀铃脲；阿维菌素；印楝种子提取物；水菖蒲粗提物;生物测定玉米象（SiｔophiｌuｓzeaｍaiｓＭotschｕlsky)属鞘翅目,象甲科。别名米牛、铁嘴。它在我国及世界各地均有分布,寄主为玉米、豆类、荞麦、干果[1]。幼虫只在禾谷类种子内蛀食，成虫还可为害养麦、豆类、干果等[2]。玉米象是我国头号储粮害虫,在粮食仓储期间危害范围最广、危害速度最快，造成损失最大,而且全国各地均有分布[3]。此虫食性极其复杂，一般含淀粉植物的果实或种子均受其危害。在我国主要为害玉米、麦类、稻谷类、高粱等粮食作物,也对中草药材，各种干鲜水果和水果造成损失。其整个幼虫期都在粮粒内蛀食为害，隐蔽性很强，不易防治,成虫则啃食为害谷粒。被危害的粮粒，几乎蛀成空壳或碎屑。大量发生时，虫体自身代谢活动会导致储粮水分增加，粮温升高，引起储粮发热、霉变与结块,造成储粮严重损失，其以玉米、小麦为原料生产的饲料质量较差，也易引起饲料霉变,尤以阴暗潮湿的仓库中危害较重[4]。由于磷化氢、马拉硫磷等药剂的长期单一使用,使玉米象等储粮害虫对这些药剂产生了严重的抗药性[5]。因此,寻找其他杀虫剂或者植物源杀虫活性物质已成为储粮害虫控制中一个新的研究热点。目前有报道印楝、黑胡椒粉、金桔油、桉叶油、除虫菊等植物提取物对玉米象及其它仓害虫的防治表现出一定的活性［6]。本文通过对2种杀虫剂和2种植物源杀虫活性物质对玉米象的不同毒力测定方法进行初步叙述，为以后仓库害虫有玉米象的防治提供理论依据。 1.玉米象的饲养 ①小麦为饲料，饲料使用前置入8Ｏ℃烘箱内消毒2h后,调整含水量为１6％~18％,接入试虫约100头,置于(27±1)℃温箱里饲养,15d后将接人的成虫筛去,约３0d后玉米象成虫大量发生,挑选其中大小基本一致的成虫进行生物测定[７]。 ②在(２7±１)℃,相对湿度(75±5)％条件下,以整粒小麦饲养。小麦使用前放人烘箱(６０％）中消毒２h，含水量调至（13±1)％,分装于罐头瓶中［8]。接