细胞工程(01)

天津轻工业学院食品工程系生物化工专业

2000~2001年第二学期细胞工程概论试卷（一）

班级姓名分数

一．填空（每小题3分，共30分）

1．细胞工程的主要内容包括___________________和_________________两部分。

2．生物工程的五个技术体系是、、、、。

3．遗传操作的三个层次为____________、___________、___________。

4．根据产品与微生物的关系，微生物发酵可分为_____________、___________、____________、______________和______________五大类。

5．微生物细胞的常用固定化方法有______________、____________、___________、____________、_____________等五种。

6．植物细胞培养基由、、、、、等组成。

7．根据，动物细胞可分成和

两大类。

8．在动物细胞培养中，血清的主要作用是和

。

9．动物细胞培养的操作方式有、、、，其中最常用的是和。

10．原生质体（植物）常用的培养方法有_____________、___________ 和_____________等。

二．选择题（每小题2分，共20分）

1．动植物细胞培养过程特别容易污染微生物的主要原因是：

①对环境条件特别敏感；②营养要求特别严格；③生长速率比微生物低得多

2．动物细胞对营养要求特别严格的主要原因是：

①生长速率慢；②机体内动物细胞的分工性；③不具细胞壁

3．动物细胞培养与组织培养的主要区别在于：

①细胞不再形成组织；②细胞培养是离体培养技术；③细胞可悬浮培养

4．微生物培养所需的溶氧系数一般为，植物细胞培养所需的溶氧系数一般为，动物细胞培养所需的溶氧系数一般为。

①1～25 1/h；②100～1000 1/h；③5～30 1/h

5．微生物培养的温度大多为，植物细胞培养的温度大多为，动物细胞培养的温度大多为。

36～37℃；②28～32℃③26～28℃ 6．在动物细胞固定化方法中，最常用的两种方法是：

①吸附法与微囊法；②吸附法与包埋法③微囊法与包埋法

7．某固定化细胞系统，已知载体在纯水中的自然pH值为5.8，细胞的最适生长pH为6.3。试问固定化后主体溶液的最适pH：

①pH=6.3 ②pH＜6.3 ③pH＞6.3

8. 已知某植物细胞的倍增时间为1.5day，则其比生长速率：

①μ=1.5 1/day ②μ>1.5 1/day ③μ<1.5 1/day

9. 植物细胞不宜固定化的主要原因是：

①产物为次生代谢产物；②产物大多为胞内产物；③扩散限制

10.下列发酵生产哪些比较适合于采用固定化细胞（适合的划“√”）？

①由酵母菌发酵生产乙醇；②由细菌生产α-淀粉酶；

③在醋酸菌作用下将乙醇转化成乙酸；④由金色链霉菌生产金霉素

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2000~2001年第二学期细胞工程概论试卷（二）

三、回答问题或作图（每小题5分，共40分）

1．指出下列发酵生产（微生物）的类型及其控制特点。

①糖化酶（胞外）生产：

②有机酸生产：

③蛋白酶（胞内）生产：

④青霉素生产：

⑤SCP生产：

2．在植物细胞原生质体培养中，何为液体/固体双层培养法和固体小块培养法？

3．与微生物反应器比较，动物细胞用空气提升式反应器有何不同点，并绘示意图。

4．目前植物细胞培养存在哪些问题？

5．在动物细胞培养中，血清的使用存在哪些问题？开发无血清培养基的主要困难是什么？

6．为什么说一般分批式操作和连续式操作不适合于动物细胞的培养？

7．灌注式操作的特点及适应性？

8．试绘出分批操作、流加操作和灌注式操作细胞浓度（x）、营养物浓度(s)和代谢物浓度（P）的时间曲线图。

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2000~2001年第二学期细胞工程概论试卷（三）

四、某动物细胞，采用灌注式培养。培养过程中底物浓度维持不变，且已知细胞的比生长速率为μ＝0.231 day–1，底物谷氨酰胺对细胞的得率为Y X／S＝0.1g细胞／g底物，初始细胞浓度为x0＝0.5g/L，试求培养9day后，培养液中的细胞浓度x、细胞生长速率d x/d t和谷氨酰胺的流加速率F／V。（10分）

上海交大细胞工程期末试题2008b

一、选择题（每题1分，共计12分） 1、体外培养in vitro包括那三个层次（ABD）。 A细胞培养B组织培养 C大规模培养D器官培养 2、现在一般皆公认（B）为“组织培养之父”动物细胞培养的奠基人，因为他的实 验表明，为细菌学家早已应用的凹玻片悬滴制备细胞培养技术，不仅可以维持组织上体外生长数周，而且是一种能对生物学知识做出十分重要贡献的研究方法。 A Wilhelm Roux B Ross Granville Harrison C M.T.Burrows D Alexis Carrel E W.H.Lewis 3、培养的哺乳动物细胞一定要防止污染，特别是生物学污染，常见的生物学污染主要 是（ABC）。 A真菌B细菌C支原体 D炭疽菌E放线菌F病毒 4、在每一次传代培养过程中，培养物将首先被蛋白酶消化而被制备成细胞悬液，再用 于种植。种植后的细胞都要经历相似的恢复和生长过程。根据每一次传代培养的细胞生长变化的过程，习惯上把每一代细胞的生长过程分为（ABC）三个阶段。 A潜伏期B指数生长期C停滞期 D衰退期E贴壁黏附期F铺展期 5、“生物导弹”是指（D）。 A单克隆抗体 B杂交瘤细胞 C产生特定抗体的B淋巴细胞 D在单抗上连接抗癌药物

6、用于动物细胞培养的组织和细胞大都取自胚胎或出生不久的幼龄动物的器官或组织，其主要原因是这样的组织细胞（D）。 A容易产生各种变异B具有更强的全能性 C取材十分方便D分裂增殖的能力强 7、对细胞全能性的表述正确的是（D）。 A非离体植物细胞能够表现全能性 B动物细胞融合标志着动物细胞全能性的实现 C单克隆抗体的制备原理依据是细胞的全能性 D花粉可培育成单倍体，是细胞全能性的体现 E受精卵发育到囊胚阶段的内细胞团具有完全的细胞全能性 8、科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合，得到杂交细胞，经培养可产生大量的单克隆抗体，与骨髓瘤细胞融合的是（A）。 A经过免疫的B淋巴细胞 B没经过免疫的T淋巴细胞 C经过免疫的T淋巴细胞 D没经过免疫的Ｂ淋巴细胞 9、引起大规模细胞培养过程中的细胞凋亡的主要直接因素有哪些？（ABC） A有毒物质或抑制因子产生B营养成分耗尽 C其他物理因素D细胞遗传物质突变 10、大规模细胞培养方法比较多，大致可分为（ABC）。 A悬浮培养 B固定化培养 C载体培养法 D培养瓶培养 E96孔板培养

干细胞与组织工程

干细胞与组织工程 随着生命科学的飞速发展，目前组织工程、干细胞研究已经成为21世纪生命科学研究的焦点和前沿领域。组织工程研究涉及种子细胞、生物支架材料以及组织构建等众多研究方向．干细胞研究则有望解决组织工程研究中的种子细胞来源问题，可能成为组织工程研究中的理想种子细胞。 一“组织工程”的概念 1 “组织工程”的产生和发展 组织、器官的损伤或功能障碍是人类健康所面临的主要危害之一，也是人类疾病和死亡的最主要原因。据美国的一份资料显示，每年有数以百万计的美国人患有各种组织、器官的损伤或功能障碍，每年需进行800万次手术进行修复，年住院日在4000万～9000万之间，年耗资超过400亿美元。 随看现代外科学的发展，人类对组织、器官缺损的治疗有了很大的进步，但仍然存在许多问题。目前临床常用的治疗方法有三种： 1.自体组织移植、 2.异体组织移植、 3.人工合成组织代用品 组织工程是近年来正在兴起的一门新兴学科,1984年， Wolter首先提出“组织工程”（Tissue Engineering）一词。1987年，美国国家科学基金会于正式提出和确定“组织工程”一词，开辟了组织工程学研究的新纪元。它是应用生命科学和工程学的原理与技术，在正确认识哺乳动物的正常及病理两种状态下结构与功能关系的基础上，研究、开发用于修复、维护、促进人体各种组织或器官损伤后的功能和形态生物替代物的科学。 从事组织工程研究的科学家们利用细胞生物学、分予生物学以及材料科学等学科的最新技术，像工厂生产零部件一样，针对患音组织或器官缺失情况，利用构成组织或器官的基本单位——细胞以及为细胞生存提供空间的支架材料，在体内外培育出所需的人体组织或器官．需要多少就培育多少．量体裁衣制备完成后再给患者安装上去。 组织工程研究的核心是建立由细胞和生物材料构成的三维空间复合体。这一三维的空间结构为细胞提供了获取营养、气体交换、排泄废物和生长代谢的场所，

细胞生物学期末复习附带答案及作业题目

细胞生物学期末复习附带答案及作业题目 一选择 1 最早发现细胞的是：胡克 2 观察无色透明细胞：相差显微镜；观察运动细胞：暗视野显微镜。 3 信号传递中，重要的脂类是：磷酸酰基醇。 4 多药性蛋白属于ABC转运器。 5 植物细胞与细菌的协助运输借助于质子浓度梯度。动物则借助钠离子浓度梯度。 6 鞭毛基体和中心粒属于三联微管。 7 叶绿体质子动力势产生是因为类囊体腔的PH值低于叶绿体基质的PH值。 8 Hela细胞属于宫颈癌上皮细胞。 9 电子显微镜的分辨力：0.2nm。光镜：0.2um。人眼： 0.2mm。 10 鞭毛轴丝由9+2微管组成。 11 矽肺与溶酶体有关。 12 纺锤体的微管包括：星体微管，动粒微管，极微管。 13 具有细胞内消化作用的细胞器是：溶酶体。 14 细胞生命活动所需能量均来自线粒体。 15 信号识别颗粒是一种核糖核蛋白，包括RNA和蛋白质。 16 抑制脂质分裂的是：松弛素。 17 钙离子浓度上升时，PKC转移到质膜内表面。 18 类囊体膜上电子传递方向：PSII---PSI---NADP+。 19 由膜围成的细胞器是胞内体。 20 氚标记的尿嘧啶核苷用于检测细胞中RNA转录。

21 膜脂不具有的分子运动是跳跃运动。 （具有的是：侧向，旋转，翻转） 22 膜流的正确方向：内质网——高尔基体——质膜。 23 初级溶酶体来自粗面内质网和高尔基体。 24 线粒体合成ATP。 25 微丝重要的化学成分是肌动蛋白。 26 不消耗能量的运输方式是：电位门通道。 27 肌质网可贮存钙离子。 28 高尔基体功能功能：分泌颗粒形成。 29 微丝在非肌细胞中功能：变形运动，支架作用，吞噬运动。 30 中心粒：9组3联。 31 胞内信使有：C,CGMP,DG。生长因子：EGFR。、 32 流式细胞术可快速测定细胞中DNA含量。 33 完成细胞膜特定功能的组分为膜蛋白。 34 细胞质外层的一个复合结构体系和多功能体系成为：细胞膜。 35 酪氨酸蛋白激酶受体是血小板衍生生长因子受体。 36 肝细胞解毒作用发生在滑面内质网。 37 衰老细胞器被膜包裹形成自噬体。 38 线粒体中ADP---ATP在基粒中。 39 组成微丝的主要化学成分是：纤维状肌动蛋白。 40含不溶性脂蛋白颗粒的细胞内小体为脂褐质。 41 微管形态一般是中空圆柱状。 42 细胞氧化过程中，乙酰辅酶A生成在线粒体基质中。 43 粗面内质网作为核糖体附着支架。

[小学]南京师范大学生命科学学院2012年《细胞工程》期末重点总结

[ 小学] 南京师范大学生命科学学院2012 年《细胞工 程》期末重点总结 南京师范大学生命科学学院细胞工程期末重点一( 名词解释 发育阻滞: 体外受精的早期胚胎在体外发育过程中，往往会停滞在某一阶段不再发育，此现象称为发育阻滞。 胚胎移植: 也称受精卵移植、借腹怀胎，是指将良种母畜配种后，从其生殖道内取出受精卵后早期胚胎，移植到同种的、生理状态相同的母畜体内，使之继续发育称为新个体的技术。 组织工程: 指应用工程学和生命科学的原理和方法来研究开发用于修复或改善人体病损组织或器官的结构、功能的生物活性替代物的一门科学。人- 鼠嵌合抗体:就是用人源性抗体的一部分代替鼠源性抗体的一部分，使之保留对抗原的特异性，又具备与补体和细胞结合的功能，并减少异源性蛋白的抗原性。细胞融合: 在离体条件下，用人工方法将不同基因型的单细胞通过无性方式融合成一个杂合细胞的过程。 ES细胞： 即胚胎干细胞，将细胞团的细胞分离出来进行培养，在一定条件下这些细胞可在体外“无限期”地增值传代，同时还保留其全能性的细胞。乳腺生物反应器： 利用哺乳动物乳腺特异性表达的启动子元件构建转基因动物，指导外源基因在乳腺中表达，并从转基因动物的乳液中获得重组蛋白。 细胞全能性： 指细胞分裂分化后，仍具有形成完整有机体的潜能或特性。Ips（诱导性多能干细胞）:

利用病毒载体将四个转录因子（Oct4,Sox2,Klf4,c-Myc）的组合转入分化的体细胞中，使其重编程而得到的类似胚胎干细胞的一种细胞类型。胚胎分割: 将一枚胚胎用显微手术的方法分割为二分、四分甚至八分胚，经体内或体外培养，然后移植入受体中，以得到同卵双生或同卵多生后代的技术。核移植: 利用显微操作技术，将某一特定细胞的核转移和嵌入另一细胞中的过程。 细胞系、细胞株: 细胞系是由原代培养经初步纯化。获得的以一种细胞为主的、能在体外长期生存的不均一的细胞群体。细胞系经过进一步的克隆化，便得到由单一细胞组成的细胞株。 二、问答题 1. 如何鉴定转基因动物, 1. 分子杂交 Southern 印迹杂交技术是通过探针和已结合于硝酸纤维素膜（或尼龙膜）上的经酶切、电泳分离的变性DNA链杂交，检测样品中是否存在目的DNA序列的方 法。该法不 仅灵敏而且准确, 因而广泛用于转基因阳性鼠的筛选和鉴定。当转入基因与内源基因组 DNA有较高同源性时，仍可用此法。，此法对样品的质量和纯度要求较高，操作烦琐, 费用 也较高。 2. 斑点杂交 通过直接将变性的待测DNA样品点在尼龙膜(或硝酸纤维素膜)等固体支持物上, 然后 和探针杂交，从而检测样品中是否存在目的DNA序列。根据点样方式一和样品点的形状不同可分为斑点杂交、狭缝杂交( slot blot hybridization) 、打点杂交(spot blot

细胞工程 期末考试复习题目

细胞工程期末考试复习题目 细胞工程填空：20个ⅹ分=10分选择：10个ⅹ2分=20分名词：10个ⅹ6分=30分简答：5个ⅹ6分=30分论述: 1个ⅹ10分=10分第一章绪论1、细胞工程的定义及特点？细胞工程：是指主要以细胞为对象，应用生命科学的理论，借助工程学原理与技术，有目的地利用或改造生物遗传性状，以获得特定的细胞，组织产品或新型物种的一门综合性科学技术。细胞工程的特点：前沿性：现代生物技术的热点争议性：新技术给伦理道德带来的冲击综合性：多学科交叉应用性：工程类课程，重在产品与技术第二章细胞培养的设施与基本条件：1、什么是细胞及组织培养？组织工程：习惯上繁殖所有的体外培养，即器官培养，组织培养和细胞培养的总称。其本

意是指从活的机体中去取出器官、组织或细胞，模拟机体内生理条件，在体外建立无菌、室温和一定营养条件等，使之生长和生存，并维持其结构和功能能的技术称为组织培养。细胞培养：将组织块用机械方法或酶解法分离成单个细胞，做成细胞悬液，再培养于固体基质上，成单层细胞生长，活在培养液中呈悬浮转肽培养的技术称为细胞培养。2、了解细胞培养实验室的基本规划及相关注意事项？实验室规划：⑴准备室：培养用具清洗、消毒和做实验准备的场所，一般建在通风和光线充足的地方。⑵缓冲间：保护操作室的无菌环境，避免空气对流。 ⑶操作间：要求无菌。最好设在阴面，防止室温过高；天花板高度不超过2米，保证紫外线有效杀菌效应；门用拉门，避免空气流动。室内天花板、地板和四周墙壁要光滑无死角，要镶瓷砖或涂油漆，便于清洗与消毒，不易在墙角推挤灰尘。3、细胞培养的设备有

哪些？有何基本作用⑴超净工作台①最好安装在无尘室内，最好在无菌间，避免过多灰尘使滤器阻塞，降低净化效果，缩短使用寿命。②新安装的或长期未使用的工作台，工作前必须对工作台和其周围环境用真空吸尘器或不产生纤维的工具进行清洁工作，在采用药物灭菌法或紫外线灭菌法进行灭菌处理。③每次使用时，应先用75%酒精擦洗台面，并进行30~50min紫外线灭菌灯处理净化工作区内累积的微生物，在关闭紫外灯后，应启动送风机使之转运2min后在进行培养操作。④净化工作区内不应存放不必要的物品，以保持洁净气流不受干扰⑤高效过滤器3年更换一次。请专业人员操作，以保持密封良好。定期将粗过滤器中的过布拆下清洗。⑥每次使用净化台要即使清楚工作台面上的物品，并用酒精擦洗台面使之始终保持洁净。⑵CO2培养箱：①一定浓度的CO2生长，尤其是原代培养和单

细胞生物学期末考试资料

细胞生物学期末考试资料 一、名词解释（8题/3分，英文，写出中文再解释） 1、蛋白质分选（protein sorting）：指依靠蛋白质自身信号序列，从蛋白质起始合成部位转运到其功能发挥部位的过程。P115 2、信号肽（signal peptide）：是位于蛋白质上的一段连续的氨基酸序列，一般有15~60个氨基酸残基，具有分选信号的功能。P116 信号斑（signal patach）：是溶酶体酶蛋白多肽形成的一个特殊的三维结构，是位于蛋白质不同部位的几个氨基酸序列在多肽链折叠后形成的一个斑块区，具有分选信号的功能。 前肽（prepeptide）：指一些分泌蛋白质的新生肽链N末端，有一段长度不等的肽段，通常由20~30个氨基酸残基组成。 导肽（leading peptide)：它是游离核糖体上合成的蛋白质的N-端信号。 3、分子伴侣（molecular chaperones）：将细胞核内能与组蛋白结合并能介导核小体有序组装的核质素。P123 4、细胞骨架（cytoskeleton）：由微丝、微管和中间纤维组成的蛋白纤维网络结构，具有为细胞提供结构支架、维持细胞形态、负责细胞内物质和细胞器转运和细胞运动等功能。 P166 5、微管组织中心（microtubule organizing centers,MTOCs）：是细胞质中决定微管在生理状态或实验处理解聚后重新组装的结构。P177 6、细胞通讯（cell communication）：指一个细胞发出的信息通过介质传递到另一个靶细胞并与其特异的受体相互作用，通过细胞信号转导引起靶细胞内一系列生理生化变化等生物学效应的过程。P200 7、受体（receptor）：是细胞表面或细胞内的一类大分子，可识别并特异性地与有生物活性的化学信号分子结合，从而激活或启动一系列生物化学反应，最后导致该信号物质特定的生物效应。P204 8、第二信使（second messenger）：指胞内产生的非蛋白类小分子，通过其浓度的增加或减少，应答胞外信号与细胞表面受体的结合，调节细胞内酶和非酶的活性，从而在细胞信号转导途径中行使信号放大、分化、整合并传递的功能。P206 9、生物的基因组（genome）：在真核细胞中，每条DNA分子都被包装在染色体中，一个生物储存在单倍染色体组中的总遗传信息。P254 10、核型（karyotype）：一个体细胞有丝分裂中期的全部染色体，按其数目、大小和形态特征顺序排列所构成的图像。P272 11、灯刷染色体（lampbrush chromoome）：是卵母细胞进行第一次减数分裂时，停留在双线期的染色体。P277 12、Hayflick 界限(Hayflick limit)：细胞，至少是培养的细胞，不是不死的，而是有一定的寿命；它们的增殖能力不是无限的，而是有一定的界限。P369 细胞周期（cell cycle）：指细胞从上一次分裂结束到下一次分裂结束的全过程。 13、表观遗传（epigenetics）：指DNA序列不发生变化，但基因表达却发生了可遗传的改变。 14、干细胞（Stem cell）：是存在于个体发育过程中，具有长期(或无限)自我更新能力、并可分化产生某种(或多种)特化细胞的原始细胞。是个体的生长发育、组织器官的结构和功能

细胞工程期末试题库

一、名词解释 1.细胞工程：应用细胞生物学和分子生物学方法，借助工程学的实验方法或技术，在细胞水平上研究、改造生物遗传特性和生物学特性，获得特定的细胞、细胞产品或新生物体的有关理论和技术方法的科学。 2.动物组织工程：将干细胞与材料科学相结合，将自体或异体的干细胞经体外扩增后种植在预先构建好的聚合物骨架上，在适宜的生长条件下干细胞沿聚合物骨架迁移、铺展、生长和分化，最终发育成具有特定形态及功能的工程组织。 3.细胞全能性：一个细胞所具有的产生完整生物个体的固有能力。 4.干细胞：动物体内具有分化潜能，并能自我更新的细胞，分为胚胎干细胞和组织干细胞。 5.全能干细胞：从早期胚胎的内细胞团分离出来的一种高度未分化的细胞系，可以无限增殖，可分化成为多种细胞类型，从而可形成任何组织、器官，具有形成完整个体的潜能。 6.多能干细胞：具有分化成多种细胞组织的潜能，但失去了发育成完整个体的能力，发育潜能受到一定限制。 7.植物细胞培养：指在离体条件下，对植物的单个细胞或小的细胞团进行培养使其增值的技术。 8.植物组织培养：在无菌和人工控制的条件下，将离体的植物器官、组织、细胞培养在人工配制的培养基上，给予适宜的条件，诱导其产生愈伤组织、丛芽，最终形成完整的植株。 9./ 10.细胞脱分化：一个已分化的细胞回复到未分化的状态或分生细胞的过程。 11.细胞再分化：指在离体的培养条件下，当细胞脱分化以后形成的无序生长的细胞或愈伤组织重新进入有序生长的过程。只有再分化才能再生个体。 12.体细胞杂交（融合）：指两个离体细胞通过一定的诱导技术使质膜接触而融合在一起，随后导致两个细胞核物质融合的技术。 13.细胞核移植：利用显微操作技术将细胞核与细胞质分离，然后再将不同来源的核与质重组，形成杂种细胞。 14.接触抑制：当两个细胞由于生长而相互靠近发生接触时，细胞不再移动，在接触区域的细胞膜褶皱样活动停止，这种由细胞接触而抑制细胞运动的现象称为接触抑制。 15.密度抑制：细胞接触汇合成片后，仍能进行增值分裂，但当细胞密度进一步增大，培养液营养成分减少，代谢产物增多时，细胞因营养的枯竭和代谢物的影响，而发生密度抑制，导致细胞分裂停止的现象。 16.抗原：进入动物体内并对机体的免疫系统产生刺激作用的外源物质。 17.抗体：由抗原刺激B淋巴细胞转化为浆细胞后产生的，并能与相应的抗原特异性结合、具有免疫功能的球蛋白。 18.单克隆抗体：通过小鼠B细胞杂交瘤技术制备的高度均一、单一特异性，仅针对抗原上的某一个抗原决定簇产生的抗体。 19.多克隆抗体：用天然的抗原物质免疫动物，刺激多个B细胞克隆所获得的免疫血清，含有多种特异性抗体。 20.# 21.二倍体细胞培养法：始终维持培养细胞染色体倍数恒定为二倍体的细胞培养方法。 22.克隆培养法：又叫单细胞分离培养法，把从细胞悬液中获得的单个细胞用于培养，使之分裂增殖而产生一个细胞群的方法。 二、填空 1.广义的细胞工程包括所有的生物组织、器官培养及细胞离体操作和培养技术。

(完整版)2.1.1植物细胞工程的基本技术知识点汇总

2.1.1植物细胞工程的基本技术知识点 一、细胞工程的含义及分类： 1、含义：应用细胞生物学和分子生物学的原理和方法，通过细胞水平或细胞器水平的操作，按照人的意愿来改变细胞内的遗传物质或获得细胞产品的一门综合性科学技术。 （1）原理和方法： 。 （2）操作水平： 水平或 水平 （3）目的：改变细胞内的 或 。 2、种类： 根据操作对象分： 细胞工程和 细胞工程 植物细胞工程包括：植物组织培养、植物体细胞杂交。 动物细胞工程包括：动物细胞培养、动物细胞融合、动物细胞核移植、单克隆抗体技术 二、细胞的全能性： 1、概念：已经分化的细胞，仍具有发育成完整个体的潜能。 2、细胞全能性的原因：一般生物体的每一个细胞都包含该种生物的 。 3、现实表现：在生物的生长发育的过程中，细胞 全能性，而是 。 原因：在特定时间和空间条件下，细胞中的基因会 表达出各种 ，分化形成不同的细胞，从而构成生物体的不同组织和器官。 4、全能性的高低： ①受精卵＞配子＞体细胞 ②植物细胞＞动物细胞（动物细胞核具有全能性） ③具有分裂能力的细胞＞不分裂的细胞 ④分化程度低的细胞＞分化程度高的细胞。 三、植物组织培养技术 （一）过程： 1、原理： 的原理 2、条件：①离体的植物细胞、组织、器官（外植体）。②无菌。③人工配置的培养基（固体培养基，含有琼脂）。④适宜的条件：水、矿物质、有机物。⑤植物激素：生长素（诱导细胞分裂和根的分化）和细胞分裂素（促进细胞分裂和不定芽的分化）。⑥早期避光，后期光照。 3、愈伤组织：由排列疏松、无一定形态、高度液泡化的薄壁细胞组成。 4、脱分化：让 的细胞，经过诱导后，失去其 而转变成 细胞的过程。 5、再分化：愈伤组织在一定的培养条件下，分化出 ，形成完整的小植株。 一定的营养、激素 （ ） 离 体的植物细胞、 组织、器官 愈伤 组 织 完整 植 新植株

细胞生物学期末考试试题

细胞生物学期末考试试题 1. 一氧化氮 (NO)是不是第二信使,请简述你的观点和证据。一氧化氮是第二信使 资料表明，细胞中存在一种NO合成酶，NO合成酶分解L-精氨酸，生成NO和 L-瓜氨酸。 NO的作用决定其释放部位，生成细胞是血管内皮。如乙酞胆碱，缓激肤或动脉流等刺激内皮细胞,使之释放NO，它激活邻近平滑肌的鸟核昔酸环化酶, 引起血管舒张。在血小板，则抑制聚集和粘附; 在大鼠小脑，由于激活了兴奋性NMDA(N-甲基-D-天冬氨酸)受体，神经元释放 畜NO,使邻近的突触前神经末梢及星形细胞的可溶性鸟核昔酸释化酶激活。FMLP或LTB刺激大鼠腹腔中4性粒细胞和刺激巨噬细胞产生NO,NO可以激活血管平滑肌及血小板的鸟核昔酸环化酶: 由此看啦NO确实是一种第二信使。 参考文献:NO-神经系统和免疫系统的第二信使，Coller j&Vallance P 国外医学分子生物学分册第13卷第1期，1991 2. 简述你对干细胞的理解和干细胞的应用前景。 干细胞(stem cells, SC)是一类具有自我复制能力(self-renewing)的多潜能 细胞，在一定条件下，它可以分化成多种功能细胞。根据干细胞所处的发育阶段分为胚胎干细胞(embryonic stem cell，ES细胞)和成体干细胞(somatic stem cell)。根据干细胞的发育潜能分为三类:全能干细胞(totipotent stem cell,TSC)、多能干细胞(pluripotent stem cell)和单能干细胞(unipotent stem cell)。干细胞(Stem Cell)是一种未充分分化，尚不成熟的细胞，具有再生各种组织器官和人体的潜在功能，医学界称为“万用细胞”。

细胞生物学期末复习简答题及答案

细胞生物学期末复习简答题及答案 五、简答题 1、细胞学说的主要内容是什么？有何重要意义？答：细胞学说的主要内容包括：一切生物都是由细胞构成的，细胞是组成生物体的基本结构单位；细胞通过细胞分裂繁殖后代。细胞学说的创立参当时生物学的发展起了巨大的促进和指导作用。 其意义在于：明确了整个自然界在结构上的统一性，即动、植物的各种细胞具有共同的基本构造、基本特性，按共同规律发育，有共同的生命过程；推进了人类对整个自然界的认识；有力地促进了自然科学与哲学的进步。 2、细胞生物学的发展可分为哪几个阶段？答：细胞生物学的发展大致可分为五个时期：细胞质的发现、细胞学说的建立、细胞学的经典时期、实验细胞学时期、细胞生物学时期。 3、为什么说19 世纪最后25 年是细胞学发展的经典时期？答：因为在19 世纪的最后25 年主要完成了如下的工作： ⑴原生质理论的提出；⑵细胞分裂的研究；⑶重要细胞器的发现。这些工作大大地推动了细胞生物学的发展。 1、病毒的基本特征是什么？ 答：⑴病毒是“不完全” 的生命体。病毒不具备细胞的形态结构，但却具备生命的基本特征（复制与遗传），其主要的生命活动必需在细胞内才能表现。⑵病毒是彻底的寄生物。病毒没有独立的代谢和能量系统，必需利用宿主的生物合成机构进行病毒蛋白质和病毒核酸的合成。⑶病毒只含有一种核酸。⑷病毒的繁殖方式特殊称为复制。 2、为什么说支原体是目前发现的最小、最简单的能独立生活的细胞生物？ 答：支原体的的结构和机能极为简单：细胞膜、遗传信息载体DNA与RNA进行蛋白质合成的一定数量的 核糖体以及催化主要酶促反应所需要的酶。这些结构及其功能活动所需空间不可能小于100nm因此作为 比支原体更小、更简单的细胞，又要维持细胞生命活动的基本要求，似乎是不可能存在的，所以说支原体是最小、最简单的细胞。 1、超薄切片的样品制片过程包括哪些步骤？答案要点：固定，包埋，切片，染色。 2、荧光显微镜在细胞生物学研究中有什么应用？答案要点：荧光显微镜是以紫外线为光源，照射被检物体发出荧光，在显微镜下观察形状及所在位置，图像清晰，色彩逼真。 荧光显微镜可以观察细胞内天然物质经紫外线照射后发荧光的物质（如叶绿体中的叶绿素能发出血红色荧 光）；也可观察诱发荧光物质（如用丫啶橙染色后，细胞中RNA发红色荧光，DNA发绿色荧光），根据发光 部位，可以定位研究某些物质在细胞内的变化情况。 3、比较差速离心与密度梯度离心的异同。答案要点：二者都是依靠离心力对细胞匀浆悬浮液中的颗粒进行分离的技术。差速离心是一种较为简便的分离法，常用于细胞核和细胞器的分离。因为在密度均一的介质中，颗粒越大沉降越快，反之则沉降较慢。这种离心方法只能将那些大小有显著差异的组分分开，而且所获得的分离组分往往不很纯；而密度梯度离心则是较为精细的分离手段，这种方法的关键是先在离心管中制备出蔗糖或氯化铯等介质的浓度梯度并将细胞匀浆装在最上层，密度梯度的介质可以稳定沉淀成分，防止对流混合，在此条件下离心，细胞不同组分将以不同速率沉降并形成不同沉降带。 4、为什么电子显微镜不能完全替代光学显微镜？ 答案要点：电子显微镜用电子束代替了光束，大大提高了分辨率，电子显微镜相对光学显微镜是个飞跃。但是电子显微镜：样品制备更加复杂；镜筒需要真空，成本更高；只能观察“死”的样品，不能观察活细胞。光学显微镜技术性能要求不高，使用容易；可以观察活细胞，观察视野范围广，可在组织内观察细胞间的联系；而且一些新发展起来的光学显微镜能够观察特殊的细胞或细胞结构组分。因此，电子显微镜不能完全代替光学显微镜。 5、相差显微镜在细胞生物学研究中有什么应用？ 答案要点：相差显微镜通过安装特殊装置（如相差板等）将光波通过样品的光程差或相差位转换为振幅差，由于相差板上部分区域有吸光物质，使两组光线之间增添了新的光程差，从而对样品不同同造成的相位差起“夸大作用”，样品表现出肉眼可见的明暗区别。相差显微镜的样品不需染色，可以观察活细胞，甚至研究细胞核、线粒体等到细胞器的形态。6、比较放大率与分辨率的含义。

细胞工程学相关考试题及答案

细胞工程学名词解释及问答题 一、名词解释 1、细胞工程（cytotechnology或cell engineering）：它是以生物细胞、组织或器官为研究对象，运用工程学原理，按照预定目标，改变生物性状，生产生物产品，为人类生产或生活服务的科学。 或应用细胞生物学和分子生物学和分子生物学的理论和方法，按照人们的设计蓝图，在细胞水平上的遗传操作及进行大规模的细胞和组织培养。通过细胞工程可以生产有用的生物产品或培养有价值的植株，并可以产生新的物种或品系。 2、看护培养（nursing culture）：用一块活跃生长的愈伤组织来促进培养细胞持续分裂增殖的方法。 3、细胞杂交（cell hybridization）：指用人工方法把不同类型的两个或两个以上细胞合并成一个细胞的技术。 4、外植体〔explant〕：从植物体上分离下来的用于离体培养的植物组织、器官等材料。 5、人工种子：是指植物离体培养中产生的胚状体或不定芽包裹在含有养分和保护功能的人工胚乳和人工种皮中所形成的能发芽出苗的颗粒体。 6、花药培养（anther culture）：将成熟或未成熟的花药从母体植株上取下，放在无菌的条件下，使其进一步生长、发育成单倍体细胞或植株的技术。（指离体培养花粉和花药，使小孢子改变原有的配子体发育途径，转向孢子体发育途径，形成花粉胚或花粉愈伤组织，最后形成花粉植株，并从中鉴定出单倍体植株，使之二倍化的细胞工程技术。 7、条件培养基(conditioned medium)：培养过程中，有些细胞可能会分泌活性物质到培养液中，这种培养过某种细胞以后，含有细胞分泌物的培养液称为条件培养基。 8、植物脱毒：由人工用物理、化学和生物方法将植物体组织器官病原体消除，以使这些组织器官生成完整植株。 9、原代细胞系：指从机体中取出而直接培养的细胞，从一代到十代的细胞培养是原代培养，形成的整个系统叫原代细胞系。 10、体细胞杂交：指在人工控制条件下，不经过有性过程，两种体细胞原生质体相互融合产生杂种的方法。 11、胚胎培养：是指胚或具胚器官（如子房、胚珠等）在离体无菌条件下发育成幼苗的技术。 12、互补选择：是指利用两个亲本具有不同的遗传和生理特征，在特定培养条件下，具有发生互补作用的杂种细胞才能生长的选择方法。 13、悬浮培养(suspension culture):是细胞培养的基本方法，是将单个游离细胞或小细胞团在液体培养基中进行培养增殖的技术。 14、植板率:植板率是能长出细胞团的单细胞在接种单细胞中所占的比例。 15、玻璃化冻存：是指液体转变为非晶态（玻璃态）的固化过程。 16、接触抑制(contact inhibition)：当细胞在基质上分裂增殖，逐渐汇合成片即每个细胞与其周围的细胞相互接触时，细胞就停止增殖，即细胞密度不再增加，这一现象称之为接触抑制或密度依赖抑制现象。 17、非对称融合（aymmetric fusion）：利用物理或化学方法使某亲本的核或细胞质失活后再进行融合。 18、对称融合（symmetric fusion）：两个完整的细胞原生质体融合。 19、胞质体：不含细胞核而仅含有部分细胞质的原生质体。 20、体细胞胚：离体培养下没有经过受精过程，但经过了胚胎发育过程所形成的胚的类似物（不管培养的细胞是体细胞还是生殖细胞）。 21、永久细胞系：大多数细胞系在有限的代数内以不变的形式增殖，当超过有限世代后，在体外永久存活下来发育成永久细胞系或称连续细胞系。

2003年《细胞生物学》期末试卷参考答案

01级生物科学与生物技术专业《细胞生物学》期末试题 标准答案及评分要点——2003年7月 一、名词解释（每个名词2分，共计30分）： 1.主动运输（active transport）：逆物质浓度梯度（0.5分）；需要载体蛋白（0.5分）；消耗细胞代谢能（0.5 分）；一种穿膜运输（0.5分）。 2.细胞凋亡（apoptosis）：体内健康细胞（0.5分）；受到特定死亡信号的诱发（0.5分）；激活了细胞内的自 杀程序（0.5分）；在有关基因的调控下而发生的程序化细胞死亡（0.5分）。 3.细胞外被（cell coat）：动物细胞质膜表面（0.5分）；由质膜中糖蛋白和糖脂伸出的寡糖链所形成的一层 结构（1分）；在细胞识别等方面具有许多重要的生理功能（0.5分）。 4.接触抑制（contact inhibition）：多细胞生物的正常细胞（0.5分）；在体外培养时（0.5分）；分散贴壁生 长的细胞一旦相互汇合接触（0.5分）；即停止移动和生长的现象（0.5分）。 5.胚胎干细胞（embryonic stem cells）：来自于囊胚期内细胞团中的正常二倍体胚胎细胞（0.5分）；具有完 整的核型（0.5分）；可在体外长期培养（0.5分）；多能性干细胞系（0.5分）。 6.通用转录因子（general transcription factors）：真核生物中（0.5分）；结合到启动子上的DNA序列结合蛋 白（0.5分）；与RNA聚合酶一起组装成转录起始复合物（0.5分）；与起始基因转录有关（0.5分）。7.自噬溶酶体（autophagic lysosome）：初级溶酶体融入自身衰老或多余的细胞器（0.5分）；正在进行消化 作用的（0.5分）；一类次级溶酶体（0.5分）；在真核细胞中的成分更新和转化中具有重要作用（0.5分）。 8.整联蛋白（integrin）：动物细胞质膜中（0.5分）；由α和β亚基组成的一大类跨膜糖蛋白（0.5分）；是 大多数细胞外基质蛋白（如胶原、纤连蛋白、层粘连蛋白等）的受体（0.5分）；在细胞外基质（或细胞）与细胞质骨架之间的跨膜连结中具有重要作用（0.5分）。 9.动粒（kinetochore）：真核细胞中（0.5分）；连接在染色体着丝粒一侧的一个盘状蛋白质性结构（0.5分）； 内连着丝粒、外连纺锤丝微管（0.5分）；与染色体连到纺锤体上及染色单体向两极移动有关（0.5分）。 10.奢侈基因（luxury genes）：在特定组织或细胞中选择性表达的基因（1分）；其特异性表达产物的产生将 使该组织或细胞向特定的方向分化（1分）。 11.分子伴侣（molecular chaperone）：一个蛋白质家族（0.5分）；能协助蛋白质的跨膜转运（0.5分）；或帮 助多肽链进行正确折叠和组装（0.5分）；但其自身并不参加最终产物的组成（0.5分）。 12.原癌基因（proto-oncogenes）：正常细胞基因组中本来就有的（0.5分）；其编码产物可促进细胞增殖的 一类基因（0.5分）；其突变激活可是细胞发生恶性增殖（1分）。 13.信号斑（signal patch）：由分散于多肽链不同部位的多个信号序列组成（1分），依赖于蛋白质（如溶酶 体酶）的三级结构所形成的斑状信号域（1分）。 14.联会复合体（synaptonemal complex）：在减数分裂的偶线期（0.5分）；于两对同源染色体之间（0.5分）； 由核蛋白质组成的包括2个边侧成分和1个中央成分的扁平发卡状复合结构（0.5分）；是同源染色体进行配对和联会的结构基础（0.5分）。 15.反式剪接（trans splicing）：来源于不同前体mRNA中的外显子（0.5分）；经过剪切和拼接（0.5分）； 形成一个成熟mRNA分子（0.5分）；分子间的特殊剪接方式（0.5分）。

《细胞生物学》期末试卷试卷

一．名词解释：（每小题２分，共２０分） 1. 抑癌基因： 2. 膜骨架： 3. NLS (nuclear localization sequence)： 4. MPF： 5. 克隆： 6. 细胞内膜系统：7. G蛋白： 8. 细胞全能性： 9. RER： 10. PCD：得分评卷人二．填空（每空0.5分，共20分） 1. 磷脂酰肌醇途径产生两个第二信使，IP3导致的释放，DG能激活蛋白激酶 一．名词解释：（每小题２分，共２０分） 1. 抑癌基因： 2. 膜骨架： 3. NLS (nuclear localization sequence)： 4. MPF： 5. 克隆： 6. 细胞内膜系统： 7. G蛋白： 8. 细胞全能性： 9. RER： 10. PCD： 得分 评卷人 二．填空（每空0.5分，共20分） 1. 磷脂酰肌醇途径产生两个第二信使，IP3导致的释放，DG能激活蛋白激酶。 2. 秋水仙素是的特异性药物，而细胞松弛素是的特异性药物 3. 细胞生物学的研究分为、、和等三个层次。

4. 细胞表面由细胞外被或糖萼、和构成。 5. 膜脂主要包括、和三种类型。 6. 叶绿体的功能区隔主要有：外膜、内膜、膜间 隙、、和基质。 7. Ｇ１期的PCC呈状，S期呈状，Ｇ２期的呈状。 8. 细胞周期中四个主要的检验点 是：、、、和。 9. 高尔基体呈弓形或半球形，凸出的一面对着称为形成面（forming face）或顺面（cis face）。凹进的一面对着称为成熟面或反面（trans face）。顺面和反面都有一些或大或小的。 10. 细胞周期的两个主要调控点是：和。 11. 膜蛋白是膜功能的主要体现者。根据膜蛋白与脂分子的结合方式，分 为和。 12. 与微管结合而起运输作用的蛋白有两种，一种是驱动蛋白kinesin，能向着微管极运输小泡，另一种是动力蛋白dyenin能将物质向微管极运输，两者均需ATP提供能量。 13. 除微管、微丝、中间纤维及其构成的胞质骨架外，广义细胞骨架还包括 、、及，它们一起构成了高等动物的纤维网络结构。 14. 植物细胞没有和星体，其纺锤体称为无星纺锤体，后期纺锤体中央出现。 15. 和有丝分裂S期不同的是，减数分裂的S期时间较长，而且S期合成全部染色体DNA的99.7%，其余0.3%是在合成的。 16. 胶原前体中脯氨酸残基的羟化反应是在与膜结合的脯氨酰4羟化酶及脯氨酰3羟化酶的催化下进行的。是这两种酶所必需的辅助因子。 17. 与c-onc相比v-onc是连续的，没有，所以基因跨度较小 三．判断正误（你认为正确的打√，错误的打Ｘ，不必改正，每小题１分，共10分） 1. 无论在任何情况下，细胞膜上的糖脂和糖蛋白只分布于膜的外表面。□

细胞工程期末复习

细胞工程期末复习（必考） 细胞工程：研究真核细胞的核—质关系以及细胞器、细胞质基因转移的技术。 组织工程：研究开发用于修复或改善人体病损组织或器官的结构、功能的生物活性替代物的一门科学。 染色体工程：是按照一定的设计，有计划的消减添加或替换同种或异种染色体从而达到定向改变遗传特性和选育新品种的一种技术。 细胞连接：使细胞间的联系结构。细胞表面的特化结构或特化区域，是细胞间建立长期组织上联系的结构基础。涉及细胞外基质蛋白、跨膜蛋白、胞质溶胶蛋白、细胞骨架蛋白等。细胞全能性：指分化细胞保留着全部的核基因组，具有生物个体成长、发育所需要的全部遗传信息，具有发育成完整个体的潜能。 细胞分化：指细胞在形态、结构和功能上发生差异的过程。包括时间和空间上的分化。 脱分化：又称去分化，指分化细胞失去特有的结构和功能变为具有未分化细胞特性的过程。即分化的细胞在适当条件下转变为胚性状态而重新获得分裂能力的过程。 再分化：是指在离体条件下，无序生长的脱分化细胞在适当条件下重新进入有序生长和分化状态的过程。 细胞培养：指从体内组织分离细胞，模拟体内环境，在无菌适当的条件使其生长繁殖的技术。人工种子：又称合成种子或体细胞种子，指将植物离体培养中产生的胚状体或芽包裹在含有养分和保护功能的人工胚乳和人工种皮中形成的类似种子的颗粒。 植物胚胎培养：指对植物的胚及胚器官进行人工离体无菌培养，使其发育成幼苗的技术。试管受精：指在无菌条件下离体培养未受精子房或胚珠和花粉萌发产生的花粉管进入胚珠从而完成受精过程。 细胞核移植：一种利用显微操作技术将一种动物的细胞核移入同种或异种动物的去核成熟卵细胞内的技术。 体外受精：指使哺乳动物的精子和卵子在体外人工控制的环境中完成受精过程的技术。 胚胎移植:指将受精卵或发育到一定阶段的胚胎移植到与供体同时发情排卵但为配种的受体母畜输卵管或子宫的技术。 人工受精：指将采集的精子注入人发情处理的母体内完成受精过程。 试管婴儿：指将卵子与精子取出在体外受精，培养发育成早期胚胎，再植回母体子宫内发育出生的婴儿，也就是采用体外受惊联合胚胎移植技术培育的婴儿。 胚胎核移植：一种利用显微操作技术将一种动物的细胞核移入同种或异种动物的去核成熟卵细胞内的技术。 愈伤组织：脱分化后的细胞经过细胞分裂，产生无组织结构、无明显极性的松散的细胞团。胚状体：由外植体或愈伤组织产生的与正常受精卵发育成的胚相类似的胚状结构。 胞质体：除去细胞核后由质膜包裹的无核细胞。 细胞融合：指使用人工的方法使2个或2个以上的细胞合并形成1个细胞的技术。 对称融合：两个完整的细胞间的融合。 异核体：来自不同基因型的融合细胞。 不对称融合：用物理或化学方法使某亲本的核或细胞质失活再与另一完整的细胞进行融合。体细胞杂交：指将不同来源的体细胞融合并使之分化再生、形成新品种的技术。 花药和花粉培养：指离体培养花药和花粉，使小孢子改变原有的配子体发育途径，转向孢子体发育途径，形成花粉胚或花粉愈伤组织，最后形成花粉植株，从中鉴定出单倍体植株并使之二倍化的技术。 植物细胞培养：在离体条件下，将分离的植物细胞继代培养增殖，获得大量细胞群体的技术。动物细胞培养：模拟体内生理环境使分离的动物细胞在体外生存、增殖的技术。 细胞悬浮培养：将细胞接种于液体培养基中并保持良好的分散状态的培养方式。 细胞固定化培养：将游离的细胞包埋在支持物内部或表面进行培养的技术。 贴壁培养：指细胞贴附在一定的固相表面进行的培养。 原代培养：接种组织块直接长出单层细胞或将组织分散成单个细胞再进行培养，在首次传代前的培养成为原代培养。 传代培养：指将原代培养的细胞继续转接培养的过程。 原代细胞：有分裂但不旺盛，且多呈二倍体核型的细胞。

细胞工程知识点填空(附答案)

专题2 细胞工程 （一）植物细胞工程 1.理论基础（原理）： 全能性表达的难易程度： 2.植物组织培养技术 （1）过程：离体的植物器官、组织或细胞―→愈伤组织―→试管苗―→植物体 （2）用途：。（3）地位：是培育、培育植物新品种的最后一道工序。 3.植物体细胞杂交技术 （1）过程： （2）诱导融合的方法：物理法包括等。化学法一般是用 作为诱导剂。（3）意义： （二）动物细胞工程 1. 动物细胞培养 （1）概念：动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的，将它分散成，然后放在适宜的中，让这些细胞。 （2）动物细胞培养的流程：取动物组织块（动物胚胎或幼龄动物的器官或组织）→剪碎→用 处理分散成→制成→转入培养瓶中进行培养→贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续培养。（3）细胞贴壁和接触抑制：悬液中分散的细胞很快就，称为。细胞数目不断增多，当贴壁细胞分裂生长到表面时，细胞就会，这种现象称为。 （4）动物细胞培养需要满足以下条件 ①：培养液应进行处理。通常还要在培养液中添加一 定量的，以防培养过程中的污染。此外，应定期更换培养液，防 止。 ②：合成培养基成分：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等。通常需加入 等天然成分。 ③：适宜温度：哺乳动物多是；pH：。 ④：95%＋5%。O2是所必需的，CO2的主要作用 是。 （5）动物细胞培养技术的应用： 2.动物体细胞核移植技术和克隆动物 （1）哺乳动物核移植可以分为核移植（比较容易）和核移植（比较难）。

（2）选用去核卵(母)细胞的原因：卵(母)细胞； 卵(母)细胞。 （3）体细胞核移植的大致过程是：（下图） （4）体细胞核移植技术的应用： ①② ③④ ⑤ （5）体细胞核移植技术存在的问题： 克隆动物存在着问题、表现出缺陷等。 3.动物细胞融合 （1）动物细胞融合也称，是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。融合后形成的具有原来细胞遗传信息的单核细胞，称为。（2）动物细胞融合与植物原生质体融合的原理基本相同，诱导动物细胞融合的方法与植物原生质体融合的方法类似，常用的诱导因素有等。 （3）动物细胞融合的意义：克服了，成为研究 的重要手段。 （4）动物细胞融合与植物体细胞杂交的比较： 比较项目细胞融合的原理细胞融合的方法诱导手段用法 植物体细 胞杂交 细胞膜的流动性去除细胞壁后诱 导原生质体融合 离心、电刺激、 振动，聚乙二醇 等试剂诱导 克服了远缘杂交 的不亲和性，获得 杂种植株 动物细胞 融合 细胞膜的流动性使细胞分散后诱 导细胞融合 除应用植物细胞 杂交手段外，再加 灭活的病毒诱导 制备单克隆抗体 的技术之一 4.单克隆抗体 （1）抗体：一个B淋巴细胞只分泌一种。从血清中分离出的抗体 。 （2）单克隆抗体的制备过程： 注入小鼠 细胞融合 分离 抗原注入小鼠体内 B淋巴细胞骨髓瘤细胞 杂交瘤细胞 细胞培养 选择培养细胞 培养基 体内培养体外培养 从腹水提取从培养液提取 单克隆抗体 核移植 胚胎移植

组织工程试题解答

D fd 1、组织工程的三要素是什么？基本原理是什么？ 三要素：a)种子细胞; b)支架材料; c)生长因子 基本原理：a) 由人体取出细胞；b) 在体外将细胞培养到足够的数量；c) 将这些细胞填入、养在人工支架里；d) 有时需要再加一些化学物或生长因子促进细胞的分化；e) 将此人工组织移植到患者身上。 2、组织工程的生长因子有哪些分泌方式？为什么生长因子需要控制性释放？根据生长因子产生细胞与接受生长因子作用的细胞相互之间的关系，可概括为以下三种模式：（1）内分泌（endocrine），生长因子从细胞分泌出来后，通过血液运输作用于远隔靶细胞。如：血小板源生长因子（PDGF）源于血小板，作用于结缔组织细胞。（2）旁分泌（paracrine），细胞分泌的生长因子作用于邻近的其他类型细胞，对合成、分泌该生长因子的自身细胞不发生作用，因为它缺乏相应受体。（3）自分泌（autocrine），生长因子作用于合成及分泌该生长因子的细胞本身。生长因子以后两种作用方式为主。 生长因子优点诸多，但是也存在很多问题，主要是高扩散性和半衰期短，生物学活性难以长期保存。局部直接应用生长因子可在较短的时间内发挥作用，但在生理环境下很容易使之迅速失活，不产生预期的生理效应。因此，采用控制性释放技术，对生长因子进行保护，使之在有水环境下即能保持活性，又能持续释放或控制释放，是使生长因子得到有效应用的关键。 3、组织工程用支架材料的基本要求是什么？为什么需要多孔结构？ ?良好的生物相容性 ?良好的生物降解性 ?具有三维多孔立体结构 ?可加工性和有一定的机械强度 ?良好的材料-细胞界面 ?良好的消毒性能 合适的孔尺寸、高的孔隙率和相连通的孔形态，以利于大量细胞的种植、细胞和组织的生长、细胞外基质的形成、氧气和营养的传输、代谢物的排泄以及血管和神经的内长入。A 4、组织工程种子细胞的基本要求是什么？ 5、组织工程皮肤和骨骼等器官构建路线是什么？所构建的人工器官优缺点各是什么？采用动物实验检测所构建的器官的大概步骤是什么？ 6、与组织工程密切相关的两项医学生理学奖的获得者的姓名，时间，发现内容是什么呢？ 1986年美国生物化学家斯坦利·科恩(Stanley Co-hen) 和意大利生物学家丽塔·莱维-蒙塔尔奇尼(Rita Levi-Mont.alcini)共同获得诺贝尔生理学或医学奖。他们发现了两种调节细胞发育的生长因子——神经生长因子（NGF）和表皮生长因子（EGF）。 2012年英国的约翰·戈登和日本的山中伸弥共同获得诺贝尔生理学或医学奖。这两位科学家的发现：成熟的、专门的细胞可以重新编程成为未成熟的细胞，并能够发育成人体的所有组织。 1、什么是组织工程学组织工程学是应用生命科学和工程学的原理与方法，研究、开发用于修复、增进或改善人体各种组织或器官损伤后的功能和形态的一门学科。 2、组织工程学的研究最基本思路组织工程研究最基本的思路是在体外分离、培养细胞，将一定量的细胞接种到具有一定空间结构的支架上，通过细胞之间的相互粘附、生长繁殖，形成具有一定结构和功能的组织或器官。 3、与传统修复方式相比，组织工程方法的优势是什么？a) 通过构建结构完整、功能完全、具有生命力的健康活体组织，对病损组织进行形态、结构和功能的全面重建。b) 所形成的组织在体内与机体正常组织整合良好，可对体内各种生物学刺激产生应答，并可永久性替代。c) 以最少量的组织细胞经体外培养扩增后，修复体积较大的组织缺损，达到无损伤和真正意义上的功能重建。d) 可根据组织器官缺损情况，构建相应形态与结构的组织，达到完美的形态修复。 4、可降解组织工程材料分为哪几类？分别列举4种。组织工程材料分为天然生物可降解材料和人工合成生物可降解高分子材料两类。 天然生物可降解材料如：胶原、明胶、糖氨聚糖、壳聚糖、甲壳素、海藻酸盐等。人工合成生物可降解高分子材料如聚乳酸、聚羟基乙酸、聚α-羟基酸、聚酸酐、聚碳酸酯、聚乙二醇等 5、什么是种子细胞？研究种子细胞的目的是什么？种子细胞：应用组织工程的方法再造组织和器官所用的各类细胞统称为种子细胞。研究种子细胞的目的：获取足够数量的接种细胞，同时保持细胞增殖、合成基质等生物功能并防止细胞老化. 6、种子细胞的来源 ?与缺损组织细胞同源的自体细胞。 ?组织特异干细胞（成体干细胞）：专能干细胞、多能干细胞 ?胚胎干细胞 7、干细胞干细胞(stem cell)是指具有无限或较长期的自我更新能力，并能产生至少一种高度分化子代细胞的细胞。 8、成体干细胞 ?成体干细胞是存在于分化组织中的未分化细胞，并能分化成该细胞来源组织中的细胞成分。 ?成体干细胞大多数时候处于静息状态。 ?在特定条件下，成体干细胞或者产生新的干细胞，或者按一定的程序分化，形成新的功能细胞，从而使组织和器官保持生长和衰退的动态 平衡。 ?部分成体干细胞在特定条件下可以转化为其它细胞，如肌肉干细胞在特定条件下可以分化为各种血细胞系，骨髓间充质干细胞可以分化为 软骨细胞等。 9、成体干细胞的优点与不足优点： ?成体干细胞则可从患者自身获得，不存在组织相容性的问题。 ?成体干细胞不会诱发畸胎瘤的发生。 ?成体干细胞也不存在伦理学争执。 不足： ?尚未从人体的全部组织中分离出成体干细胞 . ?成体干细胞含量极微，很难分离和纯化，且数量随年龄增长而降低 ?在一些遗传缺陷疾病中，遗传错误很可能也会出现于病人的干细胞中，这样的干细胞不适于移植 ?成人身上获得的干细胞可能没有年轻人的干细胞那样的增殖能力 ?由于日常生活中人是暴露在各种环境之下的，日光和毒素等都有可 能造成基因突变，成体干细胞可能包含更多的DNA异常等等。 10、生长因子(growth factor，GF)是通过细胞间信号传递影响细胞活动的一类多肽因子。它对细胞具有促进或抑制其分裂增殖、迁移和基因表达的作用。生长因子优点诸多，但是也存在很多问题，主要是高扩散性和半衰期短，生物学活性难以长期保存。所以需要对其进行控制性释放。根据生长因子产生细胞与接受生长因子作用的细胞相互之间的关系，可概括为以下三种模式：（1）内分泌，（2）旁分泌（paracrine），（3）自分泌（autocrine）。根据产生生物学效应的范围大小分类分为广谱生长因子和窄谱生长因子。 11、各组织工程器官的构建路线，所构建的产品的优缺点（见PPT） 骨组织工程的构建路线 1）种子细胞的培养成骨细胞是骨组织工程的关键细胞，成骨细胞增殖能力强。有很强的成骨能力，植入体内能较快形成新骨代替支架材料。成骨细胞的组织来源有骨髓、骨膜、颅顶骨、髂骨等松质骨。不同来源成骨细胞的培养方法：骨髓基质干细胞的培养采用穿刺抽吸骨髓或去除骨端冲洗出骨髓，离心后去细胞进行培养。骨膜和松质骨的来源的城固细胞：组织块培养法、酶消化培养法。 2）骨组织工程的支架材料选择 理想的骨组织工程材料： 良好的生物相容性 良好的生物降解性，材料最终为受区的骨组织完全替代 易加工成形，并具有一定的强度，移植后能保持原状 材料表面易于细胞粘附且不影响其增殖分化 3）骨修复中多种生长因子 1. 血管内皮细胞生长因子 2. 肿瘤坏死因子 3. 白细胞介素-1, 4.骨形态发生蛋白BMP 5.转移生长因子TGF 6.碱性成纤维细胞生长因子bFGF 7.血小板源性生长因子PDGF 8.类胰岛素生长因子 9.表皮生长因子 构建组织功臣化人工骨时，如何实现人工骨的体内血管化得关键技术之一。 4）理想的组织工程化人工骨特点 包括无机和有机成分，力学性能类似于自然骨，同时可为成骨细胞提供最佳的胞外基质； 含有成骨细胞、血管内皮细胞的复合细胞成分，植入体内时成骨和血管化能够同步、快速完成； 通过合理使用生长因子和构建三维力学环境，对成骨和破骨进行正负调控。 软骨组织工程的构建路线 软骨组织工程细胞培养 1）软骨组织工程所用的种子细胞的来源： 软骨细胞（自体软骨细胞移植：提取健康细胞，培养，植入缺损处） 骨膜或软骨膜细胞 骨髓来源基质干细胞 肌肉来源干细胞 脂肪来源干细胞 脐带来源干细胞 基因修饰的组织工程软骨种子细胞 胚胎干细胞 软骨组织工程细胞培养方法： 软骨细胞体外培养 软骨细胞的三维培养与微载体培养 负荷对软骨细胞的影响 软骨细胞的离心管培养 2）软骨组织工程支架材料的选择： 天然生物材料——纤维蛋白、胶原蛋白等加工而成的凝胶或海绵三维支架，细胞生长，代谢良好，能产生足够的基质，形成软骨组织。但性能不稳定。 合成生物材料——聚酯类PGA和PLA，及PGA及PLA的聚合物。含可水解的脂键，可以通过水解降解吸收。降解率可控制。 凝胶、多孔海绵、纤维织物是目前广泛使用的支架材料 软骨组织工程支架采用多孔三维支架结构，孔隙率和孔径是三维多孔结构重要参数。 软骨细胞与支架材料的优化组合培养—— 软骨细胞接种数量与三维支架的不同比例对组织工程化软骨形成的质量极为重要。 3）软骨修复中多种生长因子 诱导软骨细胞分化的生长因子： TGF-β、 BMP-2、成骨素， 促进软骨细胞增殖的生长因子：IGF、 TGF-β、PDGF、bFGF和EGF，IL-1和TNF-α， 生长因子对软骨基质代谢的调节： IL-1、TNF-α、IGF-1、 PDGF、bFGF与IGF-1，4)软骨组织工程的特点： 恢复了表型 细胞不易流失 操作简单 减少自体骨膜的手术创伤 防止骨膜移植引起的过度增生和分层 血管组织工程的构建路线 1）种子细胞的来源：内皮细胞平滑肌细胞胚胎干细胞内皮祖细胞骨髓间充质干细胞2）血管组织工程的支架材料： 天然材料人工合成材料复合材料天然生物降解材料是指来源于动植物或人体内天然存在的可生物降解的大分子。应用于组织工程血管研究的天然生物材料包括甲壳素，葡聚糖明胶，胶原蛋白，弹性蛋白，多聚氨基酸，多肽，透明质酸及复合物，某些组织的脱细胞基质等。。脱细胞基质支架材料动物体内多种纤维组织，内脏平滑肌器官，小肠粘膜下层。血管组织工程应用的人工合成可降解材料有聚羟基乙酸PGA，聚乳酸PLA，聚L乳酸PLLA及上述材料的共聚物PLGA，聚羟基烷酸酯PHA，聚4羟基丁酸P2HB等。其中作为血管支架材料应用最多的是PGA和PLGA