抗血清的制备

抗血清的制备

原理：

抗血清为含有某一类具有特异免疫功能的抗体分子的血清，一般为动物被人工注射某类抗原后制备的动物血清。高效价的抗血清用于研究工作以及疾病的诊断和治疗。一般完全抗原免疫动物需加用佐剂，使用佐剂后可增加抗原的免疫原性和延长抗原在机体内存留的时间，从而改变了抗原原有的免疫原性。

材料：

1、苦味酸染料；

2、1毫升注射器；

3、EP管、刀片；

4、福氏完全佐剂（Freund’s complete adjuvant）；福氏不完全佐剂（Freund’s discomplete adjuvant）

5、抗原（本课题组所用抗原为重组蛋白Eg-TPX(his)/rGST(his)/EPC1(his)）；

6、无菌PBS，消毒用酒精、无菌棉球；

7、实验动物（昆明白小鼠）。

步骤

1、动物的选择

课题组选用18g-20g昆明白小鼠进行免疫。

2、抗原制备

1）抗原剂量:首次抗原剂量为20～25μg/次，与等量的福氏完全佐剂混合，抗原乳剂200ul。加强免疫抗原与不完全福氏佐剂混合，剂量为首次计量的1/2。

2）抗原乳剂的配制

将等量的佐剂和抗原溶液倒入容积内，经过蛋白搅拌器反复碾磨，可形成油包水乳剂。制成的乳剂是否形成油包水乳剂直接影响免疫效果，检查方法是将制成的乳剂滴一滴在自来水表面，质量合格的乳剂滴入水面保持滴珠完整基本不分散，不合格的则立即扩散，水面油亦逐渐扩大，须继续操作至质量合格为止。检查合格后，离心，2500r,5min.

3、免疫途径，剂量和免疫周期

免疫方案为抗原皮下多点注射进行基础免疫；再以免疫原作多次加强免疫，一般间隔2周，皮下或腹腔注射加强免疫。具体时间如下表所示：

免疫时间免疫次数免疫途径抗原免疫剂量第一周第一次背部皮下多点注射重组蛋白+福氏完全佐剂20~25ug 第三周第二次腹部皮下多点注射重组蛋白+福氏不完全佐剂10~12.5ug 第五周第三次腹腔注射重组蛋白+福氏不完全佐剂10~12.5ug 第七周第四次腹腔注射重组蛋白+福氏不完全佐剂10~12.5ug 第九周第五次腹腔注射重组蛋白+福氏不完全佐剂10~12.5ug ……腹腔注射重组蛋白+福氏不完全佐剂10~12.5ug 第N周第N次腹腔注射重组蛋白+福氏不完全佐剂10~12.5ug

4、试血测定抗体效价

一般在第三次免疫后3天即可小鼠尾尖取少量血，分离血清后通过间接法测定抗体

效价。若抗体效价较高，即可获取静脉血。若抗体效价反应不明显，则需加强免疫

一次，再进行从测定。本课题组对昆明白小鼠采取割尾静脉法获得抗血清。每次加

强免疫，采血4-6次后，需进行效价检测，若血清中的抗体效价下降明显，需进行

加强免疫。

5、分离血清，做好标记，冻存于-200C.

注意事项

1、动物的免疫反应存在着个体差异，制备抗血清时不能只免疫一只动物，一般最好免疫3～4只，因为有的动物可能产生抗体效价很低或不产生抗体，免疫反应好的动物所能提供的抗体往往高于一般动物3～4倍。

2、制成的抗原乳剂是否为油包水乳剂应进行检查，否则会影响免疫效果，如不是油包水乳剂，应重新制备。

3、要制备高效价的抗体，必须要加佐剂（一般采用完全福氏佐剂），加佐剂后免疫动物，抗体效价至少可增加5倍。但也应考虑到，如果抗原中有微量的杂蛋白存在，即使0.005mg，亦可因有佐剂而产生非特异性的抗体，所以要根据实验需要和抗原的纯度适当地使用佐剂。

4、分装保存的抗血清应注明抗血清的名称，制备日期。

5、抗血清效价一般以抗血清稀释倍数表示。

免疫原和抗血清制备题库2-1-8

免疫原和抗血清制备 题库2-1-8

问题： [单选,A2型题,A1A2型题]制备抗血清时，抗体产生不包括以下哪一个阶段（） A.静止期 B.指数期 C.稳定期 D.下降期 E.活跃期 抗血清产生阶段分为静止期（约2天，血中尚无抗体）；指数期（4天左右，抗体迅速上升）；稳定期（2~4周，抗体保持一个稳定的水平）；下降期（约几个月后，抗体缓慢下降）4个阶段。

问题： [单选,A2型题,A1A2型题]属于颗粒性抗原的是（） A.白蛋白 B.球蛋白 C.脂多糖 D.DNA E.血小板 血小板为颗粒状的物质，属于颗粒性抗原，其余四种均为可溶性抗原。

问题： [单选,A2型题,A1A2型题]首次与第二次免疫接种的时间间隔最好为（） A.1周内 B.10~20天 C.7~10天 D.20~30天 E.30天以上 初次免疫与第二次免疫的间隔时间多为2~4周，再次免疫后两周内进行。(私人电影 https://www.wendangku.net/doc/aa923860.html,/)

问题： [单选,A2型题,A1A2型题]佐剂的生物学作用不包括（） A.增加抗体的滴度 B.增强免疫原性 C.引起迟发型超敏反应 D.改变抗原的特异性 E.增强迟发型超敏反应 免疫佐剂是指与抗原一起或先于抗原加入机体后，能增强机体对该抗原的免疫应答能力，或改变免疫应答类型的辅助物质，不能改变抗原特异性。

问题： [单选,A2型题,A1A2型题]纯化抗原的鉴定，不包括（） A.免疫活性鉴定 B.效价鉴定 C.纯度鉴定 D.含量鉴定 E.理化性质鉴定 纯化抗原的鉴定主要对纯化抗原的含量、理化性质、纯度及免疫活性进行鉴定。

抗血清制备教案

大连医科大学检验医学院 教案 教研室：临床微生物与免疫 学科：免疫检验 授课题目： 抗血清的制备 授课对象：医学检验 授课时间：年月日时至年月日时止 授课教师： 大连医科大学检验学院制

也称课时计划。教师经过备课，以课时为单位设计的具体教学方案。教案是上课 的重要依据。通常包括:班级、学科、课题、上课时间、课的类型、教学方法、教学目的、教学内容、课的进程和时间分配等。有的教案还列有教具和现代教学手段(如电影、投 影、录像、录音等)的使用、作业题、板书设计和课后自我分析等项目。由于学科和教材 的性质、教学目的和课的类型不同，教案不必有固定的形式。 编写教案要依据教学大纲和教学书，从学生实际情况出发，精心设计。一般要符合 以下要求：①明确地制订教学目的，具体规定传授基础知识、培养基本技能、发展能力以及思想政治教育的任务。②合理地组织教材，突出重点，解决难点，便于学生理解并掌 握系统的知识。②恰当地选择和运用教学方法，调动学生学习的积极性，面向大多数学生，同时注意培养优秀学生和提高后进生，使全体学生都得到发展。 编写教案的繁简，一般是有经验的教师写得简略些，而新教师写得详细些。平行班 用的同一课题的教案设计，根据上课班级学生的实际差异宜有所区别。原定教案，在上 课进程中可根据具体情况做适当的必要的调整，课后随时记录教学效果，进行简要的自 我分析，有助于积累教学经验，不断提高教学质量。 (摘自《中国大百科全书》（教育）分册143 ~ 144页，1985年10月版，供教师在书写教案时参考) 说明 本教案以讲授一个单元（2 ~ 4学时）或一次实验(实习)为单位填写。填写时要用

免疫原和抗血清的制备

第三章免疫原和抗血清的制备 第一节免疫原的制备 免疫原指能诱导机体产生抗体或致敏淋巴细胞，并能在体内外与抗体或致敏淋巴细胞发生特异性反应的物质。 一、颗粒性抗原的制备 细胞、细菌、寄生虫等皆为颗粒性抗原。 细胞抗原（如绵羊红细胞）一般情况下经生理盐水或其他溶液洗净，配制一定浓度即可。 细菌抗原多用液体或固体培养物，经集菌后处理。 颗粒性抗原大多用静脉内注射免疫法。 二、可溶性抗原的制备和纯化 （一）组织和可溶性抗原的粗提 蛋白质、糖蛋白、脂蛋白、酶、补体、细菌毒素、免疫球蛋白片段、核酸等皆为良好的可溶性抗原。 1.组织匀浆的制备通常需要先将来源于人和动物的组织和细胞破碎，再经一定的方法纯化，才能获得所需的抗原。细胞破碎方法有： （1）高速组织捣碎机法； （2）研磨法：组织匀浆液要离心沉淀，沉淀物为组织和细胞碎片，上清液为提取可溶性抗原的材料。 2.细胞的破碎除上述机械捣碎获取外，尚有酶处理法，常用胃蛋白酶或胰酶，可获得游离的单个细胞。 细胞抗原分膜蛋白抗原、细胞质抗原（主要为细胞器）、细胞核与核膜抗原，制备这些抗原前均需将细胞破碎，方法有： （1）反复冻融法：-20℃冷冻，30～37℃融化 （2）超声破碎法 （3）自溶法 （4）酶处理法：胃蛋白酶或胰酶 （5）表面活性剂处理法：十二烷基硫酸钠 3.免疫球蛋白片段的制备五种免疫球蛋白都具抗原性，皆可提取及纯化，但如分解成片段（如Fab 片段、Fc片段、轻链片段等）作为免疫原可制备出分辨力更高的特异性抗血清。制备方法有：（1）非共价键解离法：改变pH环境或用变性剂 （2）共价键解离法 （3）溴化氰裂解法 （4）酶解法：木瓜蛋白酶、胃蛋白酶或胰蛋白酶.木瓜酶可将IgG裂解成2个Fab片段及1个Fc片段；

NDV抗血清制备及抗体效价测定

NDV抗血清制备及抗体效价测定 【实验目的】 1. 学习抗血清制备的基本原理，掌握兔和小鼠免疫注射方法、兔颈动脉放血、小鼠眼球采 血技术。 2. 学习双向琼脂扩散实验的基本原理，掌握的基本程序和结果判读方法。 3. 学习酶联免疫吸附实验（ELISA）的基本原理，掌握间接ELISA的基本程序和结果判读 方法。 4. 学习免疫印迹实验的基本原理，掌握免疫印迹记实验的的基本程序和结果判读方法。 PartⅠ. NDV抗血清制备 一、实验原理 将具有免疫原性的物质注入健康动物体内后，抗原可刺激机体相应B细胞增殖、分化形成浆细胞并分泌特异性抗体。待动物血清中存在大量抗体时，采集动物血液，分离析出血清，便得到所需的抗血清（免疫血清或抗体）。由于抗原性物质通常具有多个抗原决定簇，可以刺激机体产生多种抗体形成细胞克隆，合成和分泌各种抗原决定簇的抗体，免疫血清中实际上是含有多种抗体的混合物，所以这种免疫法获得的免疫血清又称为多克隆抗体（Polyclonal antibody，PcAb）。多克隆抗体的制备是一个复杂的过程，为了获得特异性强，效价高的抗血清，除了抗原的因素外，还需注意动物品系的选择、抗原注射的浓度、剂量、次数、间隔时间及注射途径等。对于免疫原性较弱的可溶性抗原(如蛋白质类抗原)要加入佐剂，以增强免疫性。 本实验介绍新城疫病毒（Newcastle disease virus，NDV）抗血清的制备过程。新城疫病毒（Newcastle disease virus，NDV）又称亚洲鸡瘟病毒、伪鸡瘟病毒或禽肺脑炎病毒。在病毒分类学中的位置属于副黏病毒科（Paramyxoviridae）、副黏病毒属（Paramyxovirus）中的一个种。该病毒主要危害鸡、珠鸡和火鸡，在被侵袭的鸡群中迅速传播，强毒株可使鸡群全群毁灭。以新城疫病毒灭活疫苗（Ulster 2C株）灭活油剂苗多种途径免疫兔和小白鼠，制备新城疫病毒抗血清。 二、实验仪器、材料和试剂 1. 仪器

临床医学检验技术(士)-免疫原和抗血清制备(精选试题)

临床医学检验技术（士）-免疫原和抗血清制备 1、根据抗原分子大小进行纯化分离的方法为 A.盐析沉淀法 B.有机溶剂沉淀法 C.凝胶过滤 D.离子交换层析 E.亲和层析 2、根据抗原分子所带电荷不同进行纯化分离的方法为 A.盐析沉淀法 B.有机溶剂沉淀法 C.凝胶过滤 D.离子交换层析 E.亲和层析 3、制备鞭毛抗原选择 A.100℃加温2～2.5小时 B.用0.3%～0.5%甲醛处理 C.56℃加热30分钟 D.-20℃反复冻融 E.灭菌后加入0.5%～1.0%氯化钙溶液

4、去除菌体鞭毛抗原选择 A.100℃加温2～2.5小时 B.用0.3%～0.5%甲醛处理 C.56℃加热30分钟 D.-20℃反复冻融 E.灭菌后加入0.5%～1.0%氯化钙溶液 5、制备毒素抗原选择 A.100℃加温2～2.5小时 B.用0.3%～0.5%甲醛处理 C.56℃加热30分钟 D.-20℃反复冻融 E.灭菌后加入0.5%～1.0%氯化钙溶液 6、制备可溶性抗原选择 A.100℃加温2～2.5小时 B.用0.3%～0.5%甲醛处理 C.56℃加热30分钟 D.-20℃反复冻融 E.灭菌后加入0.5%～1.0%氯化钙溶液

7、可将IgG裂解成一个Fc和两个Fab片段的酶是 A.木瓜蛋白酶 B.胃蛋白酶 C.胰蛋白酶 D.限制性核酸内切酶 E.β-内酰胺酶 8、可将IgG裂解成F(ab”)2和数个小片段的酶是 A.木瓜蛋白酶 B.胃蛋白酶 C.胰蛋白酶 D.限制性核酸内切酶 E.β-内酰胺酶 9、可将IgG裂解成不规则肽链的酶是 A.木瓜蛋白酶 B.胃蛋白酶 C.胰蛋白酶 D.限制性核酸内切酶 E.β-内酰胺酶 10、免疫小鼠的采血方法常为

抗血清的制备

植物病毒抗血清的制备 一、目的 制备植物病毒抗血清是用提纯病毒作为抗原，注射兔子后刺激产生免疫反应，形成抗体的过程。分为抗原准备、免疫注射和抗血清的采集三部分。本实验介绍常用方法，要求能基本掌握并获得抗血清。 二、材料和用具 提纯病毒悬浮液、3kg公兔、高压灭菌锅、磁力搅拌器； 医用羊毛脂、石蜡油、70%乙醇、二甲苯、NaN3、凡士林； 用具：注射器、注射针头、小烧杯、三角瓶、透析袋、刀片、脱脂棉、青霉素小瓶、转子。 三、操作程序和方法 1. 处理提纯病毒悬浮液：如用精提纯病毒，浓度为1mg/ml，如保存病毒时所用缓冲液浓度高或含有其他高渗透压物质如尿素等，则可用pH7.2的0.01M磷酸缓冲液透析三次（其中－次必须过夜），如病毒悬浮液中加过NaN3，则必须延长透析时间和增加次数。 2. 制备Freund's不完全佐剂：在小烧杯中放入1.5g羊毛脂和8ml石蜡油，在温水浴中化开，磁力搅拌器上混匀后经高压灭菌后4℃下保存备用。 3. 将佐剂倒入小烧杯中，在磁力搅拌下按1：1量逐滴加入病毒悬浮液，充分搅拌至乳化完全，病毒液1mg/ml含量每次用2－5mg。(将病毒悬浮液和佐剂在小烧杯中１：１等量混合，用注射器和针头反复推吸以使乳化完全也可)。检测乳化程度时可滴一滴乳化液至水面，如很快散开则乳化不完全，须继续乳化；如能持续片刻不散开则为乳化完全。 4. 兔子以个大(2－3kg)、健康、未经免疫的白兔为好，选用公兔或未交配过的母兔均可。 5. 免疫：根据不同病毒的稳定性和免疫原性，可有多种注射方法与不同间隔的方案，本实验采用肌肉注射。 在兔子后腿外或内侧肌肉上选肥厚处，剪毛后，用70%乙醇消毒、以9号针头注入病毒-佐剂乳化液，进针约深2cm。注射剂量视其具体情况而定。本实验免疫具体设计如下： 第一周：(1).耳静脉取血，制备少量正常血清； (2) 肌肉注射乳化病毒2/3量，皮下三点注射1/3量。 第二周：肌肉、皮下注射，用量如上。 第三周：肌肉、皮下注射，用量如上。 第二次注射后：取血，测效价，效价最高时放血，制备抗血清。 6. 采血：采血方法主要有静脉采血、颈动脉采血、心脏采血等。采血所用器具要经严格消毒。采血前免疫兔要给水、停食12－24h。本实验耳静脉采血，步骤如下： (1)将免疫兔装入固定箱中，使头和耳全部露出。人工固定亦可。 (2)耳背外缘静脉处刮毛、用酒精将采血耳边缘里、外两面消毒。 (3)耳中部用蘸有二甲苯的脱脂棉涂擦，使耳血管充血，血流加速，其上涂一层凡士林。 (4)在耳缘已扩张血管端部，用刀片尖顺血管方向纵向划破1－2mm的切口(此后再采血时，切口位置自端部向耳基部移动)。适度时，血液随即流出，血液收集在灭菌小烧杯中，每次取血20－40ml。不要让血液接触酒精，以免发生溶血现象。 (5)切口部位用干药棉压迫止血，并擦净兔耳上残留血迹，防止兔子抓挠造成流血或感染。

免疫原和抗血清制备题库9-0-8

免疫原和抗血清制备 题库9-0-8

问题： [单选]关于免疫程序的说法正确的是（） A.在一定剂量范围内，免疫原剂量越大，产生的抗体效价越高 B.初次免疫一般选择皮下接种 C.加强免疫一般选择皮内接种 D.首次免疫后应该很快进行第2次抗原注入 E.第1次与第2次免疫间隔时间以7～10天为好 初次免疫一般选择皮内接种，加强免疫一般选择静脉接种，首次免疫后因机体正处于识别抗原和进行B细胞活化增殖阶段，如果很快进行第2次注入抗原，极易造成免疫抑制。第1次与第2次免疫间隔时间以10～20天为好，第3次及以后的间隔一般为7～10天。

问题： [单选]抗血清的鉴定包括（） A.抗体特异性鉴定 B.抗体效价的鉴定 C.抗体纯度的鉴定 D.抗体亲和力的鉴定 E.以上均是 抗血清的鉴定包括抗体特异性鉴定、抗体效价的鉴定、抗体纯度的鉴定、抗体亲和力的鉴定四个方面。

问题： [单选]免疫动物常用的完全福氏佐剂是（） A.石蜡油，羊毛脂，卡介苗 B.石蜡油，羊毛脂 C.石蜡油，羊毛脂，抗原 D.羊毛脂，卡介苗，抗原 E.石蜡油，卡介苗 最常用于免疫动物的佐剂是福氏佐剂，分为福氏完全佐剂和福氏不完全佐剂两种。福氏完全佐剂可提高佐剂的性能，是在不完全福氏佐剂（石蜡油+羊毛脂）的基础上加入卡介苗而制成。 https://www.wendangku.net/doc/aa923860.html,/ 电脑游戏排行榜

问题： [单选]制备可溶性抗原选择（） A.100℃加温2～2.5小时 B.用0.3%～0.5%甲醛处理 C.56℃加热30分钟 D.-20℃反复冻融 E.灭菌后加入0.5%～1.0%氯化钙溶液

抗体的制备方法与原理

抗体的制备方法与原理 一、抗血清的制备 有了质量好的抗原，还必须选择适当的免疫途径，才能产生质量好（特异性强和效价高）的抗体。 （一）用于免疫的动物 作免疫用的动物有哺乳类和禽类，主要为羊、马、家兔、猴、猪、豚鼠、鸡等，实验室常用者为家兔、山羊和豚鼠等。动物种类的选择主要根据抗原的生物学特性和所要获得抗血清数量，如一般制备抗r-免疫球蛋白抗血清，多用家兔和山羊，因动物反应良好，而且能够提供足够数量的血清，用于免疫的动物应适龄，健壮，无感染性疾患，最好为///雄性，此外还需十分注意动物的饲养，以消除动物的个体差异以及在免疫过程中死亡的影响。若用兔，最好用纯种新西兰兔，一组三只，兔的体重以2～3kg为宜。 （二）免疫途径 免疫途径有多种多样，如静脉内、腹腔内、肌肉内、皮内、皮下、淋巴结内注射等，一般常用皮下或背部多点皮内注射，每点注射0.1ml左右。途径的选择决定于抗原的生物学特性和理化特性，如激素、酶、毒素等生物学活性抗原，一般不宜采用静脉注射。 （三）佐剂 由于不同个体对同一抗原的反应性不同，而且不同抗原产生免疫反应的能力也有强有弱，因此常常在注射抗原的同时，加入能增强抗原的抗原性物质，以刺激机体产生较强的免疫反应，这种物质称为免疫佐剂。 佐剂除了延长抗原在体内的存留时间，增加抗原刺激作用外，更主要的是，它能刺激网状内皮系统，使参与免疫反应的免疫活性细胞增多，促进T细胞与B细胞的相互作用，从而增强机体对抗原的细胞免疫和抗体的产生。 常用的佐剂是福氏佐剂（Freund adjuvant）,其成分通常是羊毛脂1份、石腊油5份，羊毛脂与石腊油的比例，视需要可调整为1：2～9（V/V），这是不完全福氏佐剂，在每毫升不完全佐剂加入1～20mg 卡介苗就成为完全佐剂。 配制方法：按比例将羊毛脂与石蜡油置容器内，用超声波使之混匀，高压灭菌，置4℃下保存备用。免疫前取等容积完全或不完全佐剂与免疫原溶液混合，用振荡器混匀成乳状，也可以在免疫前取需要量佐剂置乳钵中研磨，均匀后再边磨边滴加入等容积抗原液（其中加卡介苗3～4mg/ml或不加），加完后再继续研磨成乳剂，滴于冰水上5～10min内完全不扩散为止。为避免损失抗原，亦可用一注射器装抗原液，另

抗血清制备

抗血清制备 定义： 抗血清（antiserum）是一种含有多克隆抗体的血清。通过注射抗血清可以传递被动免疫（passive immunity）治疗许多疾病。目前唯一能够治疗埃博拉病毒患者的方法就是通过注射前一个患者的抗血清到体内。 原理： 抗血清为含有某一类具有特异免疫功能的抗体分子的血清，一般为动物被人工注射某类抗原后制备的动物血清。高效价的抗血清用于研究工作以及疾病的诊断和治疗。 一种抗原能否引起抗体生成反应，一方面取决于抗原分子表面有无抗原决定簇（Antigenic determinant），另一方面取决于机体的免疫状态，当具备以上两个条件后，抗体生成将遵循抗体生成的一般规律——初次反应和再次反应。 抗原的种类繁多，包括天然的蛋白质抗原和细胞性抗原、合成性抗原以及基因工程抗原等，不同的抗原免疫动物具有不同的特殊性。一般完全抗原免疫动物需加用佐剂，尤其在使用可溶性抗原时，以期得到高效价的抗血清；合成性抗原和基因工程抗原等半抗原物质需先通过人工的方法与蛋白质载体连接后再与佐剂混合免疫动物，方可获得理想的免疫效果。使用佐剂后可增加抗原的免疫原性和延长抗原在机体内存留的时间，从而改变了抗原原有的免疫原性。 材料： 1、金属编号牌（对动物作标记录）或染料； 2、1毫升，5毫升、20毫升注射器； 3、采血针头（9#，12#），卡价苗针头（41/2 # — 51/2 #）； 4、灭菌平皿，疫苗瓶，青霉素瓶，皮塞以及吸管，脱脂棉； 5、卡介苗（75mg/ml）； 6、抗原（小鼠血清）； 7、青霉素溶液，链霉素溶液和5%葡萄糖溶液； 8、液体石腊（医用），羊毛腊（配制佐剂用）； 9、灭菌生理盐水，消毒用酒精，2.5%碘酒； 10、1.5%琼脂，玻板，饭盒（保湿、保湿作用）； 11、实验动物（家兔）。 步骤 1、动物的选择 羊、马、鸡、猴、豚鼠、兔都是常用的免疫动物，在实验中，选择动物时应考虑抗原与动物的种属关系、抗原性质与动物种类、免疫血清的需要量、免疫血清的要求以及动物个体等因素。免疫用动物应选适龄、健壮．最好为雄性。最常用的实验动物是家兔，一般选择选择年龄在6个月以上当年繁殖的♂性，体重2 ～3公斤，健康家兔三只，免疫前用金属编号牌固定兔耳，或用染料涂沫在动物的背部，作出明确的标记。 2、抗原制备 1）抗原稀释：用灭菌生理盐水将抗原稀释为2mg/ml，于免疫前一天加入青霉素溶液，使每毫升抗原

项目一 免疫血清的制备与提纯

项目一免疫血清的制备与提纯 一、免疫血清的制备 (Preparation of antiserum) 【实验原理】 将适当的免疫原物质注入动物体内，经一段时间动物血清中可出现大量特异性抗体，这种含抗体的血清称为抗血清(或免疫血清)。它在血清学检测中有广泛应用。理想的抗血清的产生主要取决于抗原的纯度和免疫原性，以及动物的应签性。同时免疫接种时的免疫途径、抗原剂量、有无佐剂、注射次数及间隔时间等因素均可影响抗血清的质量。制备的抗血清可直接用于某些实验，也可从中提取特异性抗体或某一组分。 下面介绍几种常用的免疫血清制备方法，免疫动物均选用家兔，这是因为：(1)其产生的血清量足够实验应用并容易驯养；(2)为采血、注射用耳血管很容易找到；(3)用兔子作免疫接种的资料较多，可方便利用；(4)能产生高效价抗体，并且可用常用的沉淀反应、凝集反应或溶血、溶菌反应等试验方法进行鉴定。 【试剂和器材】 1．免疫动物2～3kg健康雄性家兔。 2．免疫原绵羊红细胞(SRBC)、OX19变形杆菌、人IgG(SPA菌体吸附)、正常人混合血清、牛血清白蛋白(BSA)、聚丙烯酰胺凝胶分离的蛋白质抗原。 3．佐剂完全和不完全福氏(Freund)佐剂。 4．其它试剂生理盐水、70%酒精等。 5．器材注射器及针头、棉球、三角烧瓶、玻璃珠、试管、吸管、柯氏瓶(扁瓶)、Luer-lock(双联)注射器、止血钳、手术剪、手术刀等，以上器材均应高压灭菌或消毒后使用；离心机、液体旋转混合器、温箱、水浴箱、冰箱等。 【步骤和方法】 (一)溶血素的制备 1．制备抗原取脱纤维羊血或用阿氏(Alsever)液保存的绵羊红细胞(采血方法见附录常用实验动物采血方法)，用生理盐水洗３次，每次加2～3倍生理盐水，离心2000r/min 10min，弃上清。最后一次按压积用生理盐水配成10%SRBC悬液，放４℃保存备用。 2．免疫动物家兔耳缘静脉注射10%SRBC悬液1ml，间隔3天，连续7次，末次免疫后2周，由耳静脉取血1ml(取血方法见附录常用实验动物采血方法)，分离血清，测定溶血素效价(见补体结合试验)，当效价≥1:2000则可放血收集血清，此法效价可达1:6000~1:10000。 3．分离血清颈动脉放血(见附录常用实验动物采血方法)，用无菌三角瓶收集血液，等血液凝固后立即轻轻剥离(这是获得大量血清的关键步骤)，放室温2~4h，离心2500r/min 10min，收集血清。放4℃过夜虽可获得更多血清，但通常更容易溶血。加入等量甘油，分装，置-20℃保存。 (二)细菌抗血清的制备 1．抗原制备将OX19变形杆菌接种柯氏瓶普通琼脂培养基，37℃培养18~24h，用无菌生理盐水将菌苔洗下，吸到有玻璃珠的无菌三角烧瓶中，加入甲醛使终浓度为0.5%，充分振荡使细菌均匀分散。置4℃24h(或3～5天)杀菌固定，通过无菌试验证实无活菌存在。应用时同麦氏(Mcfarland) 细菌标准比浊管比浊，将菌液用无菌生理盐水稀释到10亿/ml，置4℃备用。

抗血清的制备

抗血清的制备 有了质量好的抗原，还必须选择适当的免疫途径，才能产生质量好（特异性强和效价高）的抗体。 用于免疫的动物 作免疫用的动物有哺乳类和禽类，主要为羊、马、家兔、猴、猪、豚鼠、鸡等，实验室常用者为家兔、山羊和豚鼠等。动物种类的选择主要根据抗原的生物学特性和所要获得抗血清数量，如一般制备抗r-免疫球蛋白抗血清，多用家兔和山羊，因动物反应良好，而且能够提供足够数量的血清，用于免疫的动物应适龄，健壮，无感染性疾患，最好为///雄性，此外还需十分注意动物的饲养，以消除动物的个体差异以及在免疫过程中死亡的影响。若用兔，最好用纯种新西兰兔，一组三只，兔的体重以2～3kg为宜。 免疫途径 免疫途径有多种多样，如静脉内、腹腔内、肌肉内、皮内、皮下、淋巴结内注射等，一般常用皮下或背部多点皮内注射，每点注射0.1ml左右。途径的选择决定于抗原的生物学特性和理化特性，如激素、酶、毒素等生物学活性抗原，一般不宜采用静脉注射。 佐剂 由于不同个体对同一抗原的反应性不同，而且不同抗原产生免疫反应的能力也有强有弱，因此常常在注射抗原的同时，加入能增强抗原的抗原性物质，以刺激机体产生较强的免疫反应，这种物质称为免疫佐剂。 佐剂除了延长抗原在体内的存留时间，增加抗原刺激作用外，更主要的是，它能刺激网状内皮系统，使参与免疫反应的免疫活性细胞增多，促进T细胞与B细胞的相互作用，从而增强机体对抗原的细胞免疫和抗体的产生。 常用的佐剂是福氏佐剂（Freund adjuvant）,其成分通常是羊毛脂1份、石腊油5份，羊毛脂与石腊油的比例，视需要可调整为1：2～9（V/V），这是不完全福氏佐剂，在每毫升不完全佐剂加入1～20mg卡介苗就成为完全佐剂。 配制方法：按比例将羊毛脂与石蜡油置容器内，用超声波使之混匀，高压灭菌，置4℃下保存备用。免疫前取等容积完全或不完全佐剂与免疫原溶液混合，用振荡器混匀成乳状，也可以在免疫前取需要量佐剂置乳钵中研磨，均匀后再边磨边滴加入等容积抗原液（其中加卡介苗3～4mg/ml或不加），加完后再继续研磨成乳剂，滴于冰水上5～10min内完全不扩散为止。为避免损失抗原，亦可用一注射器装抗原液，另一注射器装佐剂，二者以聚乙烯塑料管连接，然后二者来回反复抽吸，约数十分钟后即能完全乳化。检查合格后即以其中一注射器作注射用。 免疫方法

免疫原和抗血清制备题库1-1-8

免疫原和抗血清制备 题库1-1-8

问题： [单选,A2型题,A1A2型题]纯化抗原的鉴定方法一般不用（） A.凝集反应 B.SDS-Page电泳 C.酚试剂法 D.免疫电泳法 E.免疫扩散法 纯化抗原的鉴定方法包括SDS-Page电泳、酚试剂法、免疫电泳法和免疫扩散法，但是通常纯化抗原是可溶性抗原，通常不用凝集反应进行鉴定。

问题： [单选,A2型题,A1A2型题]以下哪一个是对半抗原的正确描述（） A.只有和载体结合后才能和抗体分子结合 B.是大分子 C.是多肽 D.没有免疫原性 E.只能诱生体液免疫应答 半抗原是只有抗原性而无免疫原性的物质。其可与抗体或致敏淋巴细胞特异性结合，但不能单独诱发免疫应答，在体内单独存在时不引起抗体产生，当其与蛋白质或胶体颗粒结合后，则可引起抗体形成。半抗原可与其特异性抗体结合。如细菌的多糖和类脂质等。在半抗原与蛋白质结合物中，一般是蛋白质使结合物具有抗原性，而半抗原则决定结合物的抗原特异性。

问题： [单选,A2型题,A1A2型题]颗粒性抗原的免疫方法大多为（） A.皮内注射免疫法 B.肌内注射免疫法 C.口服免疫法 D.静脉内注射免疫法 E.表皮涂抹免疫法 各种细胞、细菌、寄生虫等皆为颗粒性抗原。细胞抗原（如绵羊红细胞）一般情况下经生理盐水或其他溶液洗净，配制一定浓度即可。细菌抗原多用液体或固体培养物，经集菌后处理。颗粒性抗原大多用静脉内注射免疫法，较少加佐剂做皮内注射。 (英雄联盟段位 https://www.wendangku.net/doc/aa923860.html,/)

问题： [单选,A2型题,A1A2型题]粗提抗血清最简便的方法是（） A.超速离心 B.硫酸铵盐析法 C.亲和层析 D.离子交换层析 E.超声破碎法 粗提抗血清最简便的方法是硫酸铵盐析法。

免疫血清制备

免疫血清制备 ●实验目的 了解影响机体免疫应答强度的因素; 明确初次应答和再次应答抗体产生的规律； 制备牛血清白蛋白（BSA）的抗血清； 熟悉佐剂的制备和动物免疫的常用方法； 了解抗体检测的常用方法 ●实验原理 1.在免疫学实验中,为制备抗体通常以抗原性物质给动物注射,经一定时间后,动物血清中 可产生大量特异性抗体，这种含有特异性抗体的血清称免疫血清。它在血清学检测中有广泛应用。理想的抗血清的产生主要取决于抗原的纯度和免疫原性，以及动物的应签性。 同时免疫接种时的免疫途径、抗原剂量、有无佐剂、注射次数及间隔时间等因素均可影响抗血清的质量。制备的抗血清可直接用于某些实验，也可从中提取特异性抗体或某一组分。 2.抗原与抗体特异性结合，形成抗原抗体复合物。 物质基础: 1）抗原表位与抗体高变区间的互补结合 2）抗原表位与抗体高变区的沟槽分子表面的结合 3）抗原抗体之间的结合力 4）亲水胶体转化为疏水胶体 3.ELISA原理 ELISA测定的原理是利用标记技术将酶标记到抗体（抗原）上，使待检物中相应的抗

原（抗体）与酶标记抗体（抗原）发生特异性反应。在遇到相应的酶底物时，酶能高效、专一催化、分解底物，生成有颜色的产物。根据颜色的深、浅、可以判断待检物中有无特异的抗原（抗体）以及量的大小 实验步骤及注意事项 1免疫佐剂制备及动物初次免疫 1.1抗原制备 以1.5mlBSA和1.5ml完全福氏佐剂混合后搅拌10min至完全乳化 1.2动物免疫 用1ml注射器12＃大针头吸出完全乳化的抗原1ml； 换4＃小针头双后足垫和背部皮下接种，每处约10-20μl。(接种处先用碘酒、酒 精消毒) 将免疫后的小鼠放回鼠笼。 1ml注射器（内有乳化好的抗原）贴好标签，4℃保存下次用。 1.3采集阴性血清（每班2只） 用无菌小试管收集未免疫小鼠血（眼眶放血法），标记后送准备室； 室温静置30min, 2,000 rpm离心10分钟; 吸取血清置1.5ml塑料管，做好标记; 2再次免疫及血清采集 2.1血清制备： 取首次免疫后的小鼠2只，采集血清(方法同上),标记后冻存备用。 2.2再次免疫：

抗血清的制备

抗血清的制备 原理： 抗血清为含有某一类具有特异免疫功能的抗体分子的血清，一般为动物被人工注射某类抗原后制备的动物血清。高效价的抗血清用于研究工作以及疾病的诊断和治疗。一般完全抗原免疫动物需加用佐剂，使用佐剂后可增加抗原的免疫原性和延长抗原在机体内存留的时间，从而改变了抗原原有的免疫原性。 材料： 1、苦味酸染料； 2、1毫升注射器； 3、EP管、刀片； 4、福氏完全佐剂（Freund’s complete adjuvant）；福氏不完全佐剂（Freund’s discomplete adjuvant） 5、抗原（本课题组所用抗原为重组蛋白Eg-TPX(his)/rGST(his)/EPC1(his)）； 6、无菌PBS，消毒用酒精、无菌棉球； 7、实验动物（昆明白小鼠）。 步骤 1、动物的选择 课题组选用18g-20g昆明白小鼠进行免疫。 2、抗原制备 1）抗原剂量:首次抗原剂量为20～25μg/次，与等量的福氏完全佐剂混合，抗原乳剂200ul。加强免疫抗原与不完全福氏佐剂混合，剂量为首次计量的1/2。 2）抗原乳剂的配制 将等量的佐剂和抗原溶液倒入容积内，经过蛋白搅拌器反复碾磨，可形成油包水乳剂。制成的乳剂是否形成油包水乳剂直接影响免疫效果，检查方法是将制成的乳剂滴一滴在自来水表面，质量合格的乳剂滴入水面保持滴珠完整基本不分散，不合格的则立即扩散，水面油亦逐渐扩大，须继续操作至质量合格为止。检查合格后，离心，2500r,5min. 3、免疫途径，剂量和免疫周期 免疫方案为抗原皮下多点注射进行基础免疫；再以免疫原作多次加强免疫，一般间隔2周，皮下或腹腔注射加强免疫。具体时间如下表所示：

抗血清的制备

抗血清的制备 点击次数：2346 发布时间：2009-8-21 原理： 抗血清为含有某一类具有特异免疫功能的抗体分子的血清，一般为动物被人工注射某类抗原后制备的动物血清。高效价的抗血清用于研究工作以及疾病的诊断和治疗。一种抗原能否引起抗体生成反应，一方面取决于抗原分子表面有无抗原决定簇（Antigenic determinant），另一方面取决于机体的免疫状态，当具备以上两个条件后，抗体生成将遵循抗体生成的一般规律——初次反应和再次反应。 抗原的种类繁多，包括天然的蛋白质抗原和细胞性抗原、合成性抗原以及基因工程抗原等，不同的抗原免疫动物具有不同的特殊性。一般完全抗原免疫动物需加用佐剂，尤其在使用可溶性抗原时，以期得到高效价的抗血清；合成性抗原和基因工程抗原等半抗原物质需先通过人工的方法与蛋白质载体连接后再与佐剂混合免疫动物，方可获得理想的免疫效果。使用佐剂后可增加抗原的免疫原性和延长抗原在机体内存留的时间，从而改变了抗原原有的免疫原性。 材料： 1、金属编号牌（对动物作标记录）或染料； 2、1毫升，5毫升、20毫升注射器； 3、采血针头（9#，12#），卡价苗针头（41/2 # — 51/2 #）； 4、灭菌平皿，疫苗瓶，青霉素瓶，皮塞以及吸管，脱脂棉； 5、卡介苗（75mg/ml）； 6、抗原（小鼠血清）； 7、青霉素溶液，链霉素溶液和5%葡萄糖溶液； 8、液体石腊（医用），羊毛腊（配制佐剂用）； 9、灭菌生理盐水，消毒用酒精，2.5%碘酒； 10、1.5%琼脂，玻板，饭盒（保湿、保湿作用）； 11、实验动物（家兔）。 步骤 1、动物的选择 羊、马、鸡、猴、豚鼠、兔都是常用的免疫动物，在实验中，选择动物时应考虑抗原与动物的种属关系、抗原性质与动物种类、免疫血清的需要量、免疫血清的要求以及

抗血清的制备和评价

有了质量好的抗原，还必须选择适当的免疫途径，才能产生质量好（特异性强和效价高）的抗体。 一、用于免疫的动物 作免疫用的动物有哺乳类和禽类，主要为羊、马、家兔、猴、猪、豚鼠、鸡等，实验室常用者为家兔、山羊和豚鼠等。动物种类的选择主要根据抗原的生物学特性和所要获得抗血清数量，如一般制备抗r-免疫球蛋白抗血清，多用家兔和山羊，因动物反应良好，而且能够提供足够数量的血清，用于免疫的动物应适龄，健壮，无感染性疾患，最好为///雄性，此外还需十分注意动物的饲养，以消除动物的个体差异以及在免疫过程中死亡的影响。若用兔，最好用纯种新西兰兔，一组三只，兔的体重以2～3kg为宜。 二、免疫途径 免疫途径有多种多样，如静脉内、腹腔内、肌肉内、皮内、皮下、淋巴结内注射等，一般常用皮下或背部多点皮内注射，每点注射0.1ml左右。途径的选择决定于抗原的生物学特性和理化特性，如激素、酶、毒素等生物学活性抗原，一般不宜采用静脉注射。 三、佐剂 由于不同个体对同一抗原的反应性不同，而且不同抗原产生免疫反应的能力也有强有弱，因此常常在注射抗原的同时，加入能增强抗原的抗原性物质，以刺激机体产生较强的免疫反应，这种物质称为免疫佐剂。佐剂除了延长抗原在体内的存留时间，增加抗原刺激作用外，更主要的是，它能刺激网状内皮系统，使参与免疫反应的免疫活性细胞增多，促进T细胞与B细胞的相互作用，从而增强机体对抗原的细胞免疫和抗体的产生。 常用的佐剂是福氏佐剂（Freund adjuvant），其成分通常是羊毛脂1份、石腊油5份，羊毛脂与石腊油的比例，视需要可调整为1：2～9（V/V），这是不完全福氏佐剂，在每毫升不完全佐剂加入1～20mg卡介苗就成为完全佐剂。 配制方法：按比例将羊毛脂与石蜡油置容器内，用超声波使之混匀，高压灭菌，置4℃下保存备用。免疫前取等容积完全或不完全佐剂与免疫原溶液混合，用振荡器混匀成乳状，也可以在免疫前取需要量佐剂置乳钵中研磨，均匀后再边磨边滴加入等容积抗原液（其中加卡介苗3～4mg/ml或不加），加完后再继续研磨成乳剂，滴于冰水上5～10min内完全不扩散为止。为避免损失抗原，亦可用一注射器装抗原液，另一注

免疫原和抗血清制备题库3-0-8

免疫原和抗血清制备 题库3-0-8

问题： [单选,A2型题,A1A2型题]适用于诊断试剂的抗血清来源，其代表性的动物是（） A.豚鼠 B.马 C.狗 D.家兔 E.小鼠 抗血清分为R型和H型，R型抗血清是用家兔及其他动物免疫产生的抗体，抗原抗体反应比例合适范围较宽，适用于诊断试剂；H型抗血清是用马等大型动物免疫产生的抗体，抗原抗体反应比例合适范围较窄，一般作为免疫治疗。

问题： [单选,A2型题,A1A2型题]血清蛋白按分子大小进行凝胶过滤，下列结果正确的是（） A.第1组包括IgM和血清黏蛋白 B.第2组主要是IgG C.白蛋白主要存在于第2组 D.第3组包括脂蛋白和转铁蛋白 E.免疫球蛋白存在于同一组 血清蛋白的分级分离常用凝胶过滤法，按分子大小可分为3组：第1组包括IgM和一些脂蛋白；第2组主要是IgG和较少量的IgA、IgD、IgE等；第3组主要是白蛋白、血清黏蛋白、转铁蛋白等。

问题： [单选,A2型题,A1A2型题]细菌的菌体抗原常规的制备方法（） A.75%乙醇处理 B.100℃加温2h处理 C.0.85%氯化钠处理 D.1%氯化钙处理 E.2%氯仿处理 出处：安徽11选5 https://https://www.wendangku.net/doc/aa923860.html,;

问题： [单选,A2型题,A1A2型题]影响抗原抗体反应的因素有（） A.温度 B.电解质 C.pH D.适当振摇 E.以上全是

问题： [单选,A2型题,A1A2型题]蛋白质抗原首次免疫接种后，最好间隔多长时间进进行第二次免疫（） A.7～10d B.10～20d C.20～30d D.30～60d E.3个月

免疫血清的制备

免疫血清的制备 免疫血清的制备是一项常用的免疫学实验技术。高效价、高特异性的免疫血清可作为免疫学诊断的试剂(如用于制备免疫标记抗体等)，也可供特异性免疫治疗用。免疫血清的效价高低取决于实验动物的免疫反应性及抗原的免疫原性。如以免疫原性强的抗原刺激高应答性的机体，常可获得高效价的免疫血清。… 免疫血清的制备是常用的免疫学实验技术。高效价、高特异性的免疫血清可作为免疫学诊断的试剂(如用于制备免疫标记抗体等)，也可供特异性免疫治疗用。免疫血清的效价高低取决于实验动物的免疫反应性及抗原的免疫原性。如以免疫原性强的抗原刺激高应答性的机体，常可获得高效价的免疫血清。而使用免疫原性弱的抗原免疫时，则需同时加用佐剂以增强抗原的免疫原性。免疫血清的特异性主要取决于免疫用抗原的纯度。因此，如欲获得高特异性的免疫血清，必须予先纯化抗原。此外，抗原的剂量、免疫途径及注射抗原的时间间隔等，也是影响免疫血清效价的重要因素应予重视。 一、原理 具有免疫原性的抗原可刺激机体相应B细胞增殖、分化形成浆细胞并分泌特异性抗体。由于抗原分子表面的不同决

定簇为不同特异性的B细胞克隆所识别，因此由某一抗原刺激机体后产生的抗体，实际上为针对该抗原分子表面不同决定簇的抗体混合物(即多克隆抗体)。另外，抗体的产生具有回忆应答的规律性，牨m现为初次免疫注射与再次免疫注射后的抗体应答特点截然不同。是由于记忆性B细胞参与再次应答所致。 二、免疫方法 根据抗原的性质不同而异。下面以制备家兔抗人IgG免疫血清为例作具体说明。 1. 用剪刀剪去家兔两后脚掌的部分兔毛，以酒精及碘酒消毒皮肤； 2. 第一次免疫：用2ml注射器吸取弗氏完全佐剂(FCA)乳化的抗原(人IgG)下称FCA-IgG)液1ml，每侧脚掌皮下各注入0.5ml。 3. 第二次免疫：间隔10-14天后，于两侧窝及鼠蹊部肿大的淋巴结内注入FCA-IgG，每淋巴结注0.1ml，其余注入淋巴结附近皮下共1ml。如淋巴结未肿大或肿大不明显时，直接注入两侧窝及鼠蹊部皮下。 4. 间隔7-10天后，从耳静脉采血0.5～1.0ml，分离血清，以双相琼脂扩散试验测定免疫血清的抗体效价(即试血)。效价至少应达到1∶16以上时才能放血。 5. 若效价未达到要求，可用不加佐剂的抗原液(人IgG)

免疫原的制备

用为免疫动物产生抗体的抗原物质如果是人工合成的。质地比较纯，免疫动物后可获得质量好的抗血清。如果以从组织中提取的物质作为抗原，必须经过纯化，保证提取物的纯净，才能获得质量好的抗血清。某些物质的分子量比较小，抗原性弱，属于半抗原，不易使动物产生抗体，必须把这些半抗原连接到大分子物质（载体）上，形成较为理想的免疫原，既能减少免疫注射的次数，又可节约抗原，产生良好的免疫效应，获得高质量的抗体。 （一）载体 用为作为载体的物质较多，下列几类可供选择。 蛋白质类载体：人血清白蛋白（HSA）、牛血清白蛋白（BSA）、兔血清白蛋白（RSA）、牛甲状腺球蛋白（TG）、血蓝蛋白（Hemocyanin）以及人、牛和鸡γ-球蛋白等均可作为载体。这些载体免疫活性较强，有商品供应，容易获得，即使自选提取，操作也较方便。常用的有TG、BSA、HAS等，以TG为好。 多肽聚合物，人工合成的多聚赖氨酸、多聚谷氨酸、多聚混合氨基酸等，可与半抗原结合，所形成的免疫原可获高滴度、高亲合度的抗血清。 大分子有机化合物和某些粉末，如聚乙烯吡咯酮、羧甲基纤维素、聚甲基丙酸酯微粒、乳胶和炭末等，可吸附半抗原，也可用来作为载体，但用这类载体合成的免疫原免疫动物，所获抗血清的质量不稳定。 载体，尤其是大分子物质本身就是一种抗原，它们进行体内，可发挥致敏作用，激活免疫系统，从而使半抗原也可以使机体产生优质的抗体。因此，如果把半抗原与无免疫原性的载体结合，就不能使机体产生抗体。另外，半抗原与载体结合后，可适当延迟其降解和排出体外，从而可以发挥更久的作用。 （二）偶联剂 半抗原和载体联接，操作比较简单，在一般实验室中都可进行。但对反应条件有一定的要求：在反应过程中半抗原的免疫活性不发生改变，也不应引起载体变性到不溶解的程度。常用的方法是利用偶联剂把半抗原和载体联接起来。用作偶联剂的有碳化二亚胺类、戊二醛、二异氰酸化合物和二卤化二硝基苯等。这些偶联剂使半抗原与载体在-COOH、-NH2或-SH等基团部位发生结合。 碳化二亚胺偶联过程示意如下： 由反应过程可见，碳化二亚胺的偶联作用即可以在NH2部位发生，也可发生在羧基部位。 戊二醛所起的偶合作用与碳化二亚胺有所不同，戊二醛的两个醛基分别与载体和半抗原的-NH2结合。它起一种“桥梁”作用，而把载体与半抗原联接在一起，其反应过程为： 在免疫原的制备中，应根据不同的半抗原选用偶联剂。 （三）制备过程 以制备催产素（OT）免疫原为例： （1）1mgOT，溶解于1ml 双蒸馏水或0.25%醋酸溶液中。10mgTG溶解于1ml 0.1mol/LPBS(pH7.5)或蒸馏水内。 （2）把OT溶液与TG溶液振荡混匀。 （3）边搅拌边滴加入0.25%戊二醛1ml。加毕后再搅拌5～10min，在室温下继续反应2～3h，就可供免疫动物用。 免疫原以新制备的为好，如果一次制备了较多的免疫原，也可保存在-40℃的低温冰箱内备用。 抗原的制备 除完整的细胞可作为抗原外，各种不同的细胞内存在的各种分子量不同的物质，也都具有全抗原或半抗原的性质，某种抗原物质可能是某一类细胞所特有的，可作为这种细胞的一个标志。由于细胞存在着许多性质不同的抗原物质，有时要从这众多的物质中提取、纯化某种抗原物质，以供科学研究之用。 一、抗原的提取

初级检验技师临床免疫学和免疫检验2017年练习题第三章免疫原和抗血清的制备

第三章免疫原和抗血清的制备 一、A1 1、不能作为半抗原的载体是 A、牛血清清蛋白 B、牛甲状腺球蛋白 C、多聚赖氨酸 D、绵羊红细胞 E、羧甲基纤维素 2、载体至少连接多少数目以上的半抗原才能有效地产生抗体 A、10 B、20 C、30 D、40 E、50 3、制备人工抗原常用的载体是 A、类毒素 B、人血清白蛋白 C、甲状腺球蛋白 D、牛血清白蛋白 E、内毒素 4、完全弗氏佐剂的成分为 A、羊毛脂 B、液体石蜡 C、BCG D、羊毛脂+液体石蜡 E、羊毛脂+液体石蜡+卡介苗 5、以下具有免疫原性的佐剂是 A、石蜡油 B、羊毛脂 C、磷酸钙 D、卡介苗 E、表面活性剂 6、下列佐剂中具有免疫原性的是 A、脂多糖 B、氢氧化铝 C、石蜡油 D、羊毛脂 E、多聚核苷酸

7、以下哪项不是免疫佐剂的作用 A、增强免疫原性 B、增加抗体的滴度 C、引起迟发型超敏反应 D、增强迟发型超敏反应 E、引起速发型超敏反应 8、免疫接种后易引起局部持久溃疡和形成肉芽肿的佐剂为 A、福氏完全佐剂 B、福氏不完全佐剂 C、细胞因子佐剂 D、内毒素 E、多聚核苷酸 9、下列哪种物质免疫原性最弱 A、多糖 B、蛋白质 C、类脂 D、核酸 E、糖蛋白 10、实验室中需要制备大量免疫血清时，应选用哪种动物 A、马 B、家兔 C、豚鼠 D、鸡 E、小鼠 11、分离亚细胞成分或大分子蛋白质最常用的方法为 A、超速离心法 B、低速离心法 C、高速离心法 D、选择性沉淀法 E、凝胶过滤法 12、与蛋白质载体结合后才具有免疫原性的物质是（）。 A、完全抗原 B、TD抗原 C、TI抗原 D、半抗原 E、自身抗原 13、纯化抗原的鉴定方法一般不用 A、凝胶电泳 B、免疫电泳法

临床检验技师临床免疫学和免疫检验免疫原和抗血清的制备练习题

2019第三章免疫原和抗血清的制备 一、A1 1、不能作为半抗原的载体是 A、牛血清清蛋白 B、牛甲状腺球蛋白 C、多聚赖氨酸 D、绵羊红细胞 E、羧甲基纤维素 2、载体至少连接多少数目以上的半抗原才能有效地产生抗体 A、10 B、20 C、30 D、40 E、50 3、制备人工抗原常用的载体是 A、类毒素 B、人血清白蛋白 C、甲状腺球蛋白 D、牛血清白蛋白 E、内毒素 4、完全弗氏佐剂的成分为 A、羊毛脂 B、液体石蜡 C、BCG D、羊毛脂+液体石蜡 E、羊毛脂+液体石蜡+卡介苗 5、以下具有免疫原性的佐剂是 A、石蜡油 B、羊毛脂 C、磷酸钙 D、卡介苗 E、表面活性剂 6、下列佐剂中具有免疫原性的是 A、脂多糖 B、氢氧化铝 C、石蜡油 D、羊毛脂 E、多聚核苷酸

7、以下哪项不是免疫佐剂的作用 A、增强免疫原性 B、增加抗体的滴度 C、引起迟发型超敏反应 D、增强迟发型超敏反应 E、引起速发型超敏反应 8、免疫接种后易引起局部持久溃疡和形成肉芽肿的佐剂为 A、弗氏完全佐剂 B、弗氏不完全佐剂 C、细胞因子佐剂 D、内毒素 E、多聚核苷酸 9、下列哪种物质免疫原性最弱 A、多糖 B、蛋白质 C、类脂 D、核酸 E、糖蛋白 10、实验室中需要制备大量免疫血清时，应选用哪种动物 A、马 B、家兔 C、豚鼠 D、鸡 E、小鼠 11、分离亚细胞成分或大分子蛋白质最常用的方法为 A、超速离心法 B、低速离心法 C、高速离心法 D、选择性沉淀法 E、凝胶过滤法 12、与蛋白质载体结合后才具有免疫原性的物质是 A、完全抗原 B、TD抗原 C、TI抗原 D、半抗原 E、自身抗原 13、纯化抗原的鉴定方法一般不用 A、凝胶电泳 B、免疫电泳法 C、酚试剂法