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线虫的运动

线虫的运动
线虫的运动

11、线虫的运动,基本运动方式:波浪式蠕动

1.线虫体壁只有纵肌,无环肌;

2.假体腔充满体腔液,膨压大,形成一个支持和传送肌肉收

缩的流体静力学支架, 不能伸缩运动,只能做像蛇一样的波浪式运动;3.线虫在基质中摆动产生的体波沿身体向后传播时,对土壤颗粒、水膜等产生作用力, 而其反作用力就推动线虫向前移动。

12、(一)线虫生命活动中各种行为:取食、交配、产卵、出鞘、孵化、迁移、扩散、趋

向运动(对化学/物理刺激的反应)、侵入、静止、盘绕等。

(二)趋向运动的外界刺激因素:1、性外激素:两性吸引聚合交配;2、CO2和植物的渗

出物:吸引作用;3、离子或化合物:吸引或排斥作用;4、光、温度、电场--趋向或避离运动。

(三)感觉外源刺激的感受器官:头感器、乳突和尾感器。

13、呼吸:线虫没有专门的呼吸器官,体内外气体交换是以扩散作用通过体壁进行的。

线虫假体腔的体液,在气体交换和运输中起着呼吸和循环系统的作用。

14、休眠:线虫以休眠状态度过逆境。在休眠状态下,线虫以极低的代谢活性维持生命

延迟老化,避免死亡,待度过逆境后,又恢复正常活动, 完成生活循环。

(一)诱导线虫休眠的不良环境:低温[机理:较低的组织温度导致相应的代谢下降]、低湿、高渗透压、缺氧等

15、植物对线虫侵染的反应感病性、耐病性、抗病性。

16、1. 病理变化2. 过敏性坏死反应3. 产生植物保卫素4. 胶质物产生

17、线虫对植物的影响1. 机械损伤(寄生性线虫在植物组织细胞间移动引起机械刺激;

口针的刺穿作用)2. 线虫分泌物的化学作用(酶促作用)⑴细胞发育过度:根结线虫刺激形成的巨型细胞;⑵中胶层的分解:茎线虫果胶酶溶解中胶层引起软腐;⑶细胞壁的分解:柑桔穿孔线虫破坏根部皮层形成空洞⑷剌激或抑制细胞分裂:根结线虫导致畸形根端;⑸细胞变色坏死:菊花叶枯线虫分泌多酚类物质。

19、地上部分症状(1) 叶片:扭曲畸形、叶尖干枯、坏死或变色、叶瘿;(2) 茎:肿胀、扭曲、腐烂、红色坏死环;(3) 花:花序变短、不孕小花增多,花瓣变色腐烂;(4) 整株死亡:松材线虫引起松树萎蔫病。(5) 种子:种瘿

20、. 地下部分症状(1) 根结(:根结线虫为害植物根部。(2) 根坏死腐烂:根腐线虫造成根

皮层和中柱分离而呈腐烂状。(3) 根丛生:北方根结线虫侵染番茄根形成根结和侧根, 使根部成丛生状。

21、线虫与真菌的相互关系1、加重病害:如根结线虫与镰刀菌2、导致植物抗性丧失:豆科、胡芦科蔬菜3、使不致病真菌变为致病菌:曲、青霉,葡萄孢4、苗期立枯和猝倒22、线虫在与真菌复合侵染中的作用:1、伤口利于真菌侵入或线虫携带真菌;2、根渗出液

吸引真菌;3、巨型细胞提供真菌充足营养。

23、(一)植物线虫的寄生类型 1. 外寄生(1) 迁移性外寄生(2) 定居型外寄生

2. 内寄生(1) 转移型内寄生(2) 定居型内寄生

3. 半内寄生1) 定居型(2) 转移型

23、取食过程:寻找寄主→穿刺寄主细胞→食道腺分泌物质→吸收食物

(1) 寻找寄主:线虫受寄主植物吸引;

(2) 穿刺寄主细胞与侵入寄主组织:外寄生线虫用口针在寄主体表穿刺;内寄生线虫机械

摧毁、溶解细胞侵入或自然孔口侵入后取食;(3) 食道腺分泌:分泌各种酶进行体外消化;(4) 吸收:经口针腔吸收液态食物。

24. 取食部位

(1) 表面取食:在皮层或靠近表皮根毛细胞上取食,如毛刺线虫属、矮化线虫属等,线虫营

外寄生。另有一些是在皮层或靠近中柱的细胞上取食, 如长针线虫属、剑线虫属等。

25、防治植物线虫途径和方法:

按作用原理分:避病、杜绝、铲除、保护、抵抗和治疗。

按防治方法分:植物检疫、农业防治、抗病性利用、生物防治、物理防治和化学防治。

农业防治1、选留无病种子,培育无病苗木2、加强栽培管理3、轮作4、改良土壤

5、休闲

6、田间卫生

7、深种或深施肥

8、翻晒土壤

9、种植时间的选择

物理防治1 、热力处理2、种子汰选3、高频处理4、射线处理

化学防治:1.益舒宝2.米乐尔3.克线丹4.必速灭

26、发病条件①土壤温湿度②土质③耕作栽培制度④播种期

27、防治1、严格实行检疫2、加强田间卫生3、轮作4、加强栽培管理,增施有机肥5、

化学防治

28、松材线的危害:林木一旦感染松材线虫,针叶变为红褐色,30天全株迅速枯萎死亡。

29、症状:外部症状:针叶变为红褐色,以后全株枯萎死亡。

内部症状:受松材线虫危害致死的木材横切面有放射状蓝变症状。

30、滑刃目、滑刃科、伞滑刃属

植物线虫病害及防治

植物线虫病害及防治 1、什么是植物寄生线虫?它是什么样子? 线虫又称蠕虫,是一类较低等的动物,它们在自然界分布很广,种类繁多。在淡水、海水、池沼、沙漠和各种土壤中都有存在,而其中最大量是存活于土壤及水中;也有不少类群寄生在动物上,如常见的蛔虫、钩虫等,对人畜的健康带来很大的危害;还有一些类群寄生在植物上,引起植物发生病害,这些寄生在植物上的线虫、就称为植物寄生线虫。植物寄生线虫是植物侵染性的病原之一,它们广泛寄生在各种植物的根、茎、叶、花、芽和种实上,使植物发生各种线虫病。 植物寄生线虫绝大多数为雌雄同形,即雌雄虫均呈线状,细长透明,虫体很小。一般体长仅1毫米,体宽0.05毫米左右,要借助解剖显微镜才能看清。这类线虫的种类和数量都很多,分布又广泛,凡是有土壤和水的地方都有可能存在。还有少数植物线虫是雌雄不同形状的,雌虫呈梨形、球形或囊状,而雄虫仍呈线状。最常见的如根结线虫、胞囊线虫、肾状线虫等,它们都是最重要的病原线虫。 由于线虫是一种低等动物,虽然个体细小,但肝胆俱全。所以,线虫虫体内部构造既简单又全面,它有发达的消化系统和生殖系统,这样才能从植物体内吸取它所需要的营养,以使自己顺利生长发育和繁衍大量后代,才能生存于自然界中。但神经系统和排泄系统就很简单了,一般要在高倍显微镜下才能看清楚这些内部结构。 2、植物线虫怎样为害植物?有什么危害性? 植物线虫和其它植物的病原不同之处在于它有主动侵袭寄主和自行移动为害的特点,它们对植物为害,除吸取寄主的营养和对植物组织造成机械损伤外,主要在于植物线虫的食道腺可分泌有毒物质,这些物质是多种消化酶,诱发寄主组织发生各种病理变化,可使植物组织细胞发育过度,形成巨型细胞,或使细胞中胶层溶解引起细胞分解,细胞壁被破坏,造成根部和皮层形成空洞及细胞死亡。 最常见的是植物细胞体积膨大,最典型的就是根结线虫为害植物后所形成的巨型细胞,结果在根上可形成大小不等的瘤叫“根结”;又如穿孔线虫为害柑桔后,使细胞壁分解,结果被害根部的皮层形成典型的空洞,最后导致根腐烂;也有的线虫分泌物则表现强烈的抑制作用,使根停止生长,植物生长受到抑制而表现矮化。以上表现,说明植物线虫分泌物的化学作用能对植物细胞及组织产生的影响,最终使植物生长衰弱,产量降低,品质变劣,甚至死亡。 此外,有的线虫可以传播病毒,而使植物发生某种病毒病,这样,增加和扩大了病毒病的发生,这种危害性也是相当大的。同时,线虫还与其他病原如真菌、细菌互相作用,共同致病,造成复合病害,加重病害的发生。所以,线虫与农业生产关系密切,应引起人们的注意和重视。

植物线虫考试复习题

一、名词解释(15分,每个3分) 1、口针:植食性线虫口腔中常有一个中空的针,用于穿刺植物组织,吸取汁液。 2、会阴花纹:根结线虫雌虫阴门周围角质膜形成的特征性花纹,是根结线虫属下 “种”分类鉴定的重要依据。 3、线虫生活史:线虫从卵开始到又产生卵的过程,包括卵、幼虫、成虫三个虫态, 幼虫又分为4个龄期。 4、迁移性内寄生线虫:线虫虫体进入植物组织后不是固定不动,而是在组织内移 动,最后造成大范围根组织坏死,如短体线虫属。 5、连作障碍:同一作物或近缘作物连续多年种植后,即便在正常的管理条件下, 作物的生长发育缓慢或者病虫害发生越来越严重,最终导致产量降低、品质下降的状况。 6、交合伞:在线虫的雄虫尾部侧面常有透明的膜状结构,又称抱片,交配时起定 向和固定的作用。 7、泄殖腔:是雄虫的特殊结构,雄虫的消化管和生殖管共同开口在泄殖腔中。泄 殖腔内有一对交合刺,有的还有引带和交合伞等附属器官。 8、德曼(氏)公式:依据显微测定的线虫形态学特征,所制定的一套线虫分类鉴定的指标体系。 二、翻译拉丁学名成中文属名(十选五,10分,每个2分) Meloidogyne 根结线虫属Heterodera 孢囊(异皮)线虫属 Bursaphelenchus 伞滑刃线虫属Xiphinema 剑线虫属 Radopholus 穿孔线虫属Ditylenchus 茎线虫属 Aphelenchoides 滑刃线虫属Tylenchorhynchus 矮化线虫属 Anguina 粒线虫属Pratylenchus 短体线虫属

三、判断题(20分,每小题2分,正确划√,错误划×) 1、只有孢囊线虫是雌雄异型,其他线虫雌雄虫均为线形。(×) 2、只有极少部分的植物病原线虫生活在土壤中或寄生植物根部。(×) 3、根结线虫繁衍后代的方式既有两性生殖,又可进行孤雌生殖。(√) 4、阴门锥是鉴定根结线虫“种”的重要依据。(×) 5、植物病原线虫的侵染期虫态为3龄幼虫。(×) 6、茎线虫能够传播烟草环斑病毒,因为它是外寄生线虫。(×) 7、线虫头部的唇区能够感觉植物根系分泌物的化学刺激。(√) 8、甘薯茎线虫是在20世纪有日本传入我国的。(√) 9、我国是香蕉穿孔线虫病的主要疫区之一。(×) 10、甜菜孢囊线虫病在欧洲的爆发流行直接推动了植物线虫学的发展。(×) 11、顾名思义,所有植物“线虫”均为线形。(×) 12、植物根结线虫的侵染期虫态为2龄幼虫(J2)。(√) 13、植物线虫病害常常被称为“隐蔽性敌害”。(√) 14、植物线虫的长距离传播是主动移动的结果。(×) 15、水稻干尖线虫、柑橘根结线虫均为迁移性内寄生线虫。(×) 16、美洲剑线虫是内寄生线虫,能够传播烟草环斑病毒。(×) 17、水稻干尖线虫病在20世纪由日本传入我国,并首次在天津被发现。(√) 18、线虫头部的口针能直接分泌含有酶类的消化液,从而使植物致病。(×) 19、中国是香蕉穿孔线虫病非疫区,该病原被我国列为一类检疫对象。(√) 20、大豆胞囊线虫病在欧洲的爆发流行直接推动了植物线虫学的发展。(×) 四、填空题(20分,每空2分)

神奇的模式生物—秀丽隐杆线虫

神奇的模式生物—秀丽隐杆线虫 摘要:本文对秀丽隐杆线虫的模式生物一般特征入手,介绍了线虫形态学、生物学特征和繁殖、基因组和遗传学等方面的内容。 关键词:秀丽隐杆线虫模式生物基因组 最近,秀丽隐杆线虫用于生物实验材料倍受科学家们的关注。进入21世纪以来,已经有六位科学家利用秀丽隐杆线虫为实验材料揭开了生命科学领域的重大秘密而获得了诺贝尔奖。1974年英国科学家悉尼·布雷内(Sydney Brenner)第一次把秀丽隐杆线虫作为模式生物,成功地分离出线虫的各种突变体,发现了在器官发育过程中的基因规则而获得了2002年诺贝尔生理学或医学奖。与悉尼·布雷内共同分享诺贝尔奖的有两名科学家,其中一位科学家是英国约翰·苏尔斯顿(John E. Sulston),通过显微镜活体观察线虫的胚胎发育和细胞迁移途径,于1983年完成线虫从受精卵到成体的细胞谱系。另一位科学家是美国的罗伯特·霍维茨(H. Robert Horvitz),是利用秀丽隐杆线虫作为研究对象进行了“细胞程序性死亡”研究。 克雷格·梅洛(Craig C. Mello)和安德鲁·菲尔和(Andrew Z. Fire)利用秀丽隐杆线虫实验发现一种全新的基因调控方式—RNA干扰(RNAi)而获得2006年诺贝尔生理学或医学奖。 此外,Martin Chalfie证明了GFP(绿色荧光蛋白)作为多种生物学现象的发光遗传标记的价值。在最初的一项实验中,他用GFP使秀丽隐杆线虫的6个单独细胞有了颜色,由此获得了2008年化学奖。 究竟什么原因使秀丽隐杆线虫成为如此富有盛名的实验材料? 1.秀丽隐杆线虫一般特征 秀丽隐杆线虫是一种食细菌的线形动物,学名是Caenorhabditis elegans,通常缩写成C.elegans其成体长仅1mm,全身透明,以细菌为食,居住在土壤中,被称为“自由生活线虫”。 1.1分类地位 秀丽隐杆线虫属于线虫门(Phylum nematoda)、侧尾腺纲(Secernentea)、小杆线虫目(Rhabditida)小杆线虫科(Rhabditidae)小杆线虫属(Caenorhabditis)。线虫门包括自由生活和寄生两种类型,秀丽隐杆线虫属于自由生活线虫类,对人类没有危害。 1.2形态

秀丽隐杆线虫综述

秀丽隐杆线虫综述 摘要:随着生命科学研究的不断深入,模式生物的重要性也在不断的体现出来,秀丽隐杆线虫就是其中一种非常重要的生物。对秀丽隐杆线虫的特征、研究进展及未来发展方向进行简要的综述。 关键词:秀丽隐杆线虫;研究;前景 在20世纪60年代中期S.Brenner为了研究动物的发育和神经,领先选择了以秀丽隐杆线虫为研究的实验动物[1]。现今,秀丽隐杆线虫已经成为当今生物学家研究细胞代谢与细胞生长、分化、衰老、凋亡等生命活动的协同与调节机制的重要模式生物之一。 1.秀丽隐杆线虫的生物学特征 在1998年作为人类基因组测序的一个项目,秀丽隐杆线虫的全部序列完成测定,基因组序列全长9.7×104kb,大约编码19000个基因,其中约有40%的基因与人类的相似[2]。其成虫体长约为1mm,由959个体细胞组成。其胚胎发育过程中的细胞分裂分化以及细胞的的衰老凋亡都具有高度的程序性,便于对其进行遗传学的分析。由于上述原因,秀丽隐杆线虫已经成为现代发育遗传学、遗传学、细胞生物学研究的重要模式生物。为人类认识细胞打开了一扇新的大门。 秀丽隐杆线虫在性成熟之后能够产下三百到三百五十左右的各种各样表型的幼虫。从卵到成虫只有3.5d,寿命约2~3周,非常适合实验室进行生物学研究。在发育过程中,秀丽隐杆线虫共生成1090个细胞,其中131个将会死亡,所以,野生型秀丽隐杆线虫成虫有959个细胞,并且每个细胞的位置固定不变。秀丽隐杆线虫有5对常染色体和1 对性染色体。它有两种性别:雌雄同体和雄性。雌雄同体可以自我繁殖,也可以与雄性交配繁殖。自我繁殖的大多是雌雄同体,与雄性交配的后代,50%是雌雄同体,50%是雄性。可以人为控制繁殖方式,获得理想表型。秀丽隐杆线虫的突变体非常之多,很多突变体表现出的性状在显微镜下都是清晰易见的。秀丽隐杆线虫低温冷冻保存的技术,可以将大量野生型、突变型的秀丽隐杆线虫品系保存起来[3]。1988 年,人们对秀丽隐杆线虫每个细胞的起源已经完全清楚,使得在多细胞生命体内研究一个完整无缺的单个细胞的发育和形态成为现实,对确定基因如何影响细胞的发育提供了一个重要的研究工具[4]。这些生物学特征,都为生物学家研究提供了极大地方便,也让秀丽隐杆线虫发挥出了它极大的生物学意义。也为后续的许多研究和发现打下了夯实的基础。 2.秀丽隐杆线虫的相关研究与应用 2.1 教学中的应用 研究秀丽隐杆线虫基因功能时,可以将绿色荧光蛋白作为报告基因与目的基因融合,导入到线虫体内,通过在显微镜下观察绿色荧光蛋白发出的荧光,可以推断与之紧密相连的目的基因表达的时间、表达的部位和表达数量的多少,用在教学中,非常直观[5]。秀丽隐杆线

植物线虫的分泌蛋白质及其功能研究进展

长江大学学报(自科版)农学卷2007年9月第4卷第3期 JeernatofYangtzeUniversity(NatSolEdit)AgrtSolVSep.2007。VoL4No.3 植物线虫的分泌蛋白质及其功能研究进展 应喜娟,刘丽娟,柳宇琰。罗大民(厦门大学生命科学学院.福建厦门361005) 罗云(华中师范大学医学院。湖北武汉430070) [摘要]植物体内寄生的植物线虫必须寄生于宿主体内并获取充足的营养才能完成完整的生活史。植物线 虫的寄生过程主要是依靠线虫分泌蛋白质的作用来完成。近年来。对植物线虫分泌蛋白质的研究取得了重 大进展。分离出一系列由线虫表皮、侧器、食道腺等分泌的蛋白质.这些蛋白在线虫与植物相互作用的过程 中起重要的作用z破坏宿主细胞壁.影响宿主细胞周期.改变宿主细胞代谢过程和传导信号.选择性蛋白质 降解、抵抗宿主细胞对线虫的防御等。 [关键词]植物线虫I植物线虫一宿主互作,分泌蛋白 [中圈分类号]¥436.412.29;Q71[文献标识码]A[文章编号31673—1409(2007)03一.¥005一04 植物线虫危害遍布世界各地,每年造成的农业经济损失超过770亿美元Ⅱ].。植物线虫从植物获取营养的方式主要有非固定和固定性取食2种。非固定取食的线虫在一个取食位点仅停留一段时间,而固定取食的线虫,如根结线虫(Meloidogynespp.)和胞囊线虫(Heteroderaspp.andGloboderaspp.)等,它们侵入根部并诱导根部细胞分化形成特殊的取食结构——巨型细胞,作为线虫发育和繁殖的持续营养源[-2,3]。植物线虫分泌的蛋白质一直都是线虫研究的热点,这些从线虫表皮、侧器、食道腺分泌出来的蛋白质与线虫寄生生活密切相关,并具有不同的功能,在线虫的寄生过程中,扮演不同的角色。它们破坏宿主细胞的细胞壁结构,使线虫能够入侵宿主;重新启动宿主细胞的细胞周期和再次分化,最终诱导形成巨型细胞;改变宿主细胞新陈代谢过程,为线虫提供其所需的营养物质;结合植物细胞信号传导途径受体,改变宿主细胞的生理活动;抵抗宿主细胞的免疫反应,保护线虫不受侵害。这类与线虫寄生密切相关的蛋白质是植物线虫最为有利的进化特征H~8]。 植物寄生线虫所分泌的蛋白质是线虫得以完成寄生生活的关键因素,是研究植物线虫寄生机制并从中寻求防治线虫危害的重要环节。目前,对这类蛋白质的研究主要通过分离分泌蛋白质、克隆与寄生有关的cDNA来进行[g“03。此外,抗原抗体特异识别反应、HPLC及二维聚丙烯酰胺凝胶电泳在分泌蛋白质的研究也得到了广泛的应用。指纹图谱技术与基因芯片技术用于比较线虫不同生活时期及不同组织mR-NA的表达情况,并从中筛选与寄生相关的基因;鸯立线虫食道腺cDNA文库、EST—cDNA文库,通过对同源基因的筛选、核酸杂交技术、抗体识别表达cDNA文库来分离与线虫寄生相关的基因都是该领域常见的研究方法。RNAi技术也是研究基因功能的有力手段,已越来越多的应用到寄生相关基因的研究中[11~13J。 1表皮因子 线虫表皮具有复杂的细胞外结构,它对线虫形态维持、蜕皮及保护线虫不受体外环境侵害有重要作用。由真皮细胞表达并分泌至表皮的蛋白质不仅有构成线虫外骨骼的重要组分胶原蛋白,还具有能使线虫免受宿主防御系统伤害的蛋白埙。研究发现用单克隆抗体与线虫表皮蛋白质结合后,能抑制线虫在宿主组织中的迁移口‘1。在马铃薯金线虫(Globoderarostochiensis)表皮发现的过氧化物还原酶(glutathione [收稿日期]2007—06—01 [基金项目]围家基础科学人才培养基金项I三1(J0630649);t-海市科学技术委员会资助项目(06DZ22110) [笼一作者简介]应喜蝎(198307女,福建南平市人,硕士研究生,研究方向为植物线虫与植物间的互作. [通讯作者]罗大民(1962-),教授。主要从事动植物寄生线虫学研究,E-mail:dmluo@xmu.edu.cn.

秀丽隐杆线虫综述doc资料

秀丽隐杆线虫综述

秀丽隐杆线虫综述 摘要:随着生命科学研究的不断深入,模式生物的重要性也在不断的体现出来,秀丽隐杆线虫就是其中一种非常重要的生物。对秀丽隐杆线虫的特征、研究进展及未来发展方向进行简要的综述。 关键词:秀丽隐杆线虫;研究;前景 在20世纪60年代中期S.Brenner为了研究动物的发育和神经,领先选择了以秀丽隐杆线虫为研究的实验动物[1]。现今,秀丽隐杆线虫已经成为当今生物学家研究细胞代谢与细胞生长、分化、衰老、凋亡等生命活动的协同与调节机制的重要模式生物之一。 1.秀丽隐杆线虫的生物学特征 在1998年作为人类基因组测序的一个项目,秀丽隐杆线虫的全部序列完成测定,基因组序列全长9.7×104kb,大约编码19000个基因,其中约有40%的基因与人类的相似[2]。其成虫体长约为1mm,由959个体细胞组成。其胚胎发育过程中的细胞分裂分化以及细胞的的衰老凋亡都具有高度的程序性,便于对其进行遗传学的分析。由于上述原因,秀丽隐杆线虫已经成为现代发育遗传学、遗传学、细胞生物学研究的重要模式生物。为人类认识细胞打开了一扇新的大门。 秀丽隐杆线虫在性成熟之后能够产下三百到三百五十左右的各种各样表型的幼虫。从卵到成虫只有3.5d,寿命约2~3周,非常适合实验室进行生物学研究。在发育过程中,秀丽隐杆线虫共生成1090个细胞,其中131个将会死亡,

所以,野生型秀丽隐杆线虫成虫有959个细胞,并且每个细胞的位置固定不变。秀丽隐杆线虫有5对常染色体和1 对性染色体。它有两种性别:雌雄同体和雄性。雌雄同体可以自我繁殖,也可以与雄性交配繁殖。自我繁殖的大多是雌雄同体,与雄性交配的后代,50%是雌雄同体,50%是雄性。可以人为控制繁殖方式,获得理想表型。秀丽隐杆线虫的突变体非常之多,很多突变体表现出的性状在显微镜下都是清晰易见的。秀丽隐杆线虫低温冷冻保存的技术,可以将大量野生型、突变型的秀丽隐杆线虫品系保存起来[3]。1988 年,人们对秀丽隐杆线虫每个细胞的起源已经完全清楚,使得在多细胞生命体内研究一个完整无缺的单个细胞的发育和形态成为现实,对确定基因如何影响细胞的发育提供了一个重要的研究工具[4]。这些生物学特征,都为生物学家研究提供了极大地方便,也让秀丽隐杆线虫发挥出了它极大的生物学意义。也为后续的许多研究和发现打下了夯实的基础。 2.秀丽隐杆线虫的相关研究与应用 2.1 教学中的应用 研究秀丽隐杆线虫基因功能时,可以将绿色荧光蛋白作为报告基因与目的基因融合,导入到线虫体内,通过在显微镜下观察绿色荧光蛋白发出的荧光,可以推断与之紧密相连的目的基因表达的时间、表达的部位和表达数量的多少,用在教学中,非常直观[5]。秀丽隐杆线虫运动的多样性,可以培养学生对生物的观察能力。秀丽隐杆线虫的味觉、嗅觉、对光线和温度的反应,可以成为学生研究行为学优秀的实验有机体。在秀丽隐杆线虫身上,很容易获得理想的突变性状。如,运动缺陷的秀丽隐杆线虫,可以被用作肌肉生理学教学,或

线虫分类及其防治

植物寄生线虫的主要种类及防治研究进展 摘要: 关键词: 引言:植物寄生线虫是线虫(Nematodes)的一种,线虫又称蠕虫,是一类较低等的动物,体长仅毫米级大小,分类上属于无脊椎动物线性动物门(Nemothelminthes)线虫纲(Nematoda)。它们在自然界分布广泛,种类繁多,在淡水、海水、池沼、沙漠和各种土壤中都有存在,而以在水和土壤中存活量最大;也有不少类群寄生在动物上 ,如常见的蛔虫、钩虫等,给人、畜的健康带来危胁;有一些寄生在植物上,引起植物病害,这些寄生在植物上的线虫称为植物寄生线虫。植物寄生线虫是植物侵染性病原之一 ,它们广泛寄生在各种植物的根、茎、叶、花、芽和种子上,使植物发生各种线虫病,给农、林业的发展带来了严重的危害。现就近年植物线虫的生物学特性、危害及防治等3个方面作一简要综述。 1.植物线虫生物学特性 1.1形态 线虫是低等动物,一般体长在1毫米左右,细长如线,因此,叫它线虫或蠕虫。大多数线虫的雌虫和雄虫是蠕虫形,但有的雌虫是圆形或洋梨形,如根结线虫和胞囊线虫等。线虫的结构较简单,虫体由体壁和体腔组成。体壁是透明的,体腔内有发达的消化系统、生殖系统和神经系统。体腔内充满体腔液,起呼吸和循环作用。消化系统是从口到肛门的直通管道,有的口腔内有口针,后面是食道,中部有中食道球,球内有瓣门,通过收缩活动吸入植物汁液。食道的后部是食道腺,分泌唾液消化食物,食道腺后面是一条直通到肛门的肠子。线虫的中枢神经是中食道球后面的神经环,有神经通向各感觉器官。线虫的生殖系统很发达,雌虫有一个或二个卵巢,通过输卵管与子宫和阴门相连,阴门和肛门是分开的。雄虫有一个或二个精巢,通过输精管连到后面泄殖腔,泄殖腔内常有一对交合刺,有的雄虫还有交合伞生殖孔和肛门是一个孔,叫泄殖孔。1.2 生活史 线虫的生活史简单,包括卵、幼虫和成虫三个阶段。 幼虫是由4个龄期,先后发育成成虫,后由两性交配产卵,最后完成一个发育循环。垫刃目线虫的第1龄幼虫在卵内发育,孵化出来的已是第2龄幼虫,开始侵染寄主,称为侵染幼虫。经过最好1次蜕化变成了成虫。这时候雌和雄虫在表面形态上已明显不同,但生殖系统已充分发育。雌虫经过交配后产卵,雌虫交配后随即死去。有些线虫的雌虫可以进行孤雌生殖。在适宜的环境条件下,线虫完成一个世代一般只需3~4周,但也有少数线虫完成1代则需1年甚至1年以上。 线虫在一个生长过程中,季节大都可以发生若干代。发生的代数有线虫多种类、环境条件及为害方式而不同。植物寄生线虫还是保持水生习性,除了休眠状态的幼虫、卵和胞囊,线虫还是需要在适当的水中或者表面有水膜的土壤颗粒中正常活动和生存,或者在寄主植物的活细胞中和组织内寄生。 活动状态的线虫如果长时间暴露在干燥的空气当中,就会很快死亡,线虫发育最适合的温度有相对不同,一般都在15~30℃之间,45~50℃的热水中10min即可以杀死线虫的。 土壤是线虫最重要的生态环境,有些线虫它只是很短促的时间中从植物上取食,而大部分时间都生活在土壤当中,即使是一些固定的寄生在植物体内的线虫,它们的卵、侵入前的幼虫和雄虫都有一个相当长时期存活于土壤中。 土壤温度和湿度是影响线虫的重大因素,土壤中的温度、湿度高的话,线虫非常活跃,体内的养分就消耗快,当然就存活时间较短。线虫也有缺乏呼吸系统,但单位体重的耗氧量相比人还是较高,因此土壤长期淹水或者还通气也会影响它的存活。许多线虫它以休眠状态(卵)在植物体外长期存活。

秀丽隐杆线虫在抗衰老领域应用的研究进展

龙源期刊网 https://www.wendangku.net/doc/ab1698924.html, 秀丽隐杆线虫在抗衰老领域应用的研究进展作者:游牧胡云虎 来源:《中国美容医学》2016年第02期 [摘要]秀丽隐杆线虫(Caenorhabditis elegans)是抗衰老研究中重要的模式生物之一,被广泛应用于抗衰老物质的筛选和抗衰老分子机制的研究中。本文回顾了近年来秀丽隐杆线虫在抗衰老领域应用的研究进展,介绍了抗衰老物质的筛选情况,系统综述了作为抗衰老物质筛选评价的生理指标和反映抗衰老机制的生化指标包括寿命、生存率、生存时间、ROS含量、脂褐 质积累以及daf-16,sod-3,gst-4,hsps基因调控情况等,指出了研究中存在的问题,展望了秀丽隐杆线虫在抗衰老研究中的应用前景。 [关键词]抗衰老;秀丽隐杆线虫;生理指标;生化指标 [中图分类号]R339.3+8 [文献标志码]A [文章编号]1008-6455(2016)02-0104-04 衰老是生物体必然的生理趋势,是一种复杂多变的过程,它和老年病的发生密切相关。延缓衰老可以减少老年病的发生,如动脉粥样硬化、冠心病等,具有重要意义。抗衰老研究往往受困于实验对象选择困难、实验周期过长、样本数有限等问题,也影响抗衰老研究在分子领域的突破。秀丽隐杆线虫(下文简称“秀丽线虫”)是一种非寄生性低等无脊椎生物,因其发育周期明确、时间短;品系资源充足,信息交流便利;易于大规模培养进行大样本量实验消除个体差异;信号通路高度保守等优势被广泛应用于抗衰老药物筛选、环境毒理学等领域的研究。本文综述了以秀丽线虫为动物模型的抗衰老研究现状,为开展相关研究工作提供参考。 1 生理指标 1.1 自然寿命 自然寿命是进行抗衰老研究分析的首选指标。秀丽线虫寿命实验通常采取同步化培养的 L4期线虫,放置在涂有实验药物的NGM培养基上,铺板第1天记录为第0天寿命,此后每天显微镜镜检记录线虫的死亡数和存活数。药物中可以添加FUDR抑制线虫产卵,也可以每天更换NGM培养基。20世纪80年代开始使用秀丽线虫筛选抗衰老药物,很多物质如维生素E、黄酮、银杏提取物、白藜芦醇等效果明显。近年研究结果显示,大量人工合成物质或者天然植物提取物也有明显的抗衰老作用。Asthana等研究显示,5μM、25μM和50μM黄金树苷处理均能够延长生命周期,其中25μM效果最为明显,可以延长15.47%。郑善清等使用含有5μM、10μM、50μM、500μM和2000μM绿原酸的培养基处理,多次独立的实验结果表明自然寿命平均能够延长21.3%,50μM处理组效果最佳,平均寿命延长25.2%。王丽萍等利用自主设计合成的抗坏血酸过氧化物酶的新型模拟酶(DhHP-6)给药处理后发现,野生型线虫平均寿命从

秀丽隐杆线虫中的RNA干扰

材料和试剂 1.蠕虫RNAi 克隆/库( Open Biosystems 或者Source BioScience LifeSciences) 2.氨苄西林(IBI Scientific) 3. IPTG (Gold Biotechnology Inc.) 4.LB 琼脂培养基: 琼脂(BD Biosciences), 胰蛋白胨(BD Biosciences), 酵母提取物(BD Biosciences), NaCl (Research Organics Inc.) 5. NGM琼脂 步骤 1. 在含有ampicillin (50 ug/ml) 的LB培养基上(选择性加四环素(1 2.5 ug/ml))划线可以表达双链RNA的E coli.并培养过夜。 *注意:这里有两种RNA库. 一个是被Vidal和Heuvel 研究组构建并且可以从Open Biosystems公司订购; 另一个是被Julie Ahringer's 研究组构建可以从SourceBioScience LifeSciences公司订购。 2.将细菌转接到只含有ampicilin (100 ug/ml) 的3 ml LB液体培养基中37℃培养过夜。 3.将3 ml 培养液离心并且倒出上清直到剩下150 ul (浓缩到20x). 重悬沉淀. 4.将50 ul 重悬细胞转移到RNAi plate (NGM/IPTG/Ampicillin)的中心. 使它变干(用铝箔纸包好)在室温下诱导过夜(RNAi-接种板可以在用前在室温下保存2-3天。) 5.在每个板中放10-15个蠕虫卵. 在20 or 25℃条件下孵化2-6 h.吸干净培养液并且在想要的温度下孵化直到得到可以用于将来实验的时期为止。 注意:替代蠕虫卵,用漂白剂同步化蠕虫并且将饥饿的幼虫L1转移到RNAi平板上。 喂食配方 1. RNAi 平板(NGM/IPTG/Ampicillin) 用相同的配方来制做NGM 琼脂培养基但是用终浓度1mM的IPTG和100 ug/ml的氨苄来替代链霉素, 倒入小的培养皿中(35x10 MM).

植物病原线虫的分离方法及形态观察实验

植物病原线虫的分离 一、目的要求 了解从土壤和植物组织中分离线虫的基本原理,掌握从土壤和植物组织中分离线虫的常用方法。学习在解剖镜或扩大镜下用镊子、竹针、毛针、毛笔等工具从水中和滤纸上挑取线虫的方法。 二、基本原理 植物寄生线虫主要存在于土壤和植物组织中,分离线虫的方法有许多,要根据线虫的种类、研究目的等来选择适宜的方法。植物寄生线虫的个体很小,除极少数可从植物组织中直接挑出以外,绝大多数需借助特定的工具和方法才能完成。线虫的分离主要是利用它的趋水性、大小、比重以及与其他杂质的差异,采用过筛、离心、漂浮等措施,将线虫从植物组织、土壤中分离出来。 三、材料、试剂与仪器 1.实验材料感染根结线虫病的植物病根、病土、感染大豆孢囊线虫或其它孢囊线虫的病土、感染甘薯茎线虫的病薯块等。 2.仪器或实验用具解剖镜、漏斗分离装置、漂浮分离装置、浅盘分离装置、纱布或铜纱、记数皿或平皿、小烧杯、小玻管、旋盖玻璃瓶、40目和325目网筛、线虫滤纸、餐巾纸、挑针、竹针、毛针、毛笔等。 3.试剂线虫固定液。 四、实验操作 1.直接观察分离 对于个体较大的线虫如根结线虫、孢囊线虫、粒线虫的雌虫等,可直接用挑针从植物组织中挑取,也可在解剖镜或扩大镜观察下直接挑取,对于虫体稍小的线虫如茎线虫、粒线虫的雄虫和幼虫等,需在解剖镜下,用竹针或毛针直接挑取。 取感染根结线虫的植物病根材料(若是干材料需用水浸泡过夜),剥开皮层,观察里面是否有针头大小、乳白色发亮的颗粒状物。用挑针挑取,置凹玻片上水滴中,在解剖镜或显微镜下观察是否为根结线虫雌虫。 2.漏斗分离法 该方法操作简单,是目前从植物材料中分离线虫较好的方法。其装置是将直径10~ 15cm 的玻璃漏斗架在铁架上,下面接一段约10 cm 的橡皮管,橡皮管上装一个弹簧夹。

植物线虫的分离与计数方法

植物线虫的分离与计数方法 一实验目的 通过本实验,掌握从土壤和植物中分离植物线虫的基本原理,学会从土壤和植物中分离线虫的常用方法----漏斗分离法,并掌握线虫的计数方法。 二实验原理 将带有线虫的植物组织或土壤浸在水中,短时间内在水中检查不到线虫,但经过较长的时间,线虫由于趋水性,就会离开植物组织或土壤在水中游动,又由于自身的重量即比重大于水,最后都逐渐沉降到容器的底部,从而将植物线虫分离出来。 三实验器皿与试材 1主要器皿:漏斗(直径为10-15cm)、胶皮管、支架、夹子,线虫滤纸,纱布、计数皿,解剖镜,小烧杯等。 2 主要试材:感染根结线虫病的植物病根或病土。 四实验方法与步骤 该方法操作简单,是目前从植物材料中分离线虫较好的方法。具体方法如下: ①将玻璃漏斗架在铁架上,下面接一段橡皮管(长约10cm),橡皮管上装一个弹簧夹。 ②在漏斗内衬放一个用细铜纱制成的漏斗状网筛,将植物材料直接放在网筛中,分离土壤中的线虫时须在网筛上放一层纱布或滤纸,上面加一层土样。 ③沿壁缓慢的加入自来水,避免搅动土样,使下层的水浑浊。 ④打开弹簧夹,慢慢放出底部约5ml的水样于计数皿内。 ⑤在解剖镜下观察分离到的植物线虫并计数。若线虫数量太少,可将水样倒入离心管中,于1500r/min 离心机中离心3-5分钟,倒掉上层清水,将下层沉淀物悬浮后,倒入计数皿中,在解剖镜下观察计数。计数皿为以特制的小玻璃皿,有分割的刻度,四周边缘适当倾斜。计数时在解剖镜下数出每个小格中线虫数,然后相加即总线虫数。 五实验注意事项 1玻璃漏斗内加满水后,停几分钟后一定要观察橡皮管是否漏水,如果有漏水现象,一定要重新调整弹簧夹位置,确保弹簧夹夹牢橡皮管不漏水。 2用计数皿计数时,注意双刻线是起始位置,从这个位置开始,到这个位置结束,不容易重复计数。 六思考: 蔬菜根结线虫病的症状有什么特点? 植物根结线虫的分离方法还有哪些?

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