关于接种环灼烧灭菌操作步骤的解读
细菌接种技术
（一）平板划线接种法（又称分离培养法）平板划线接种法为最常用的分离培养细菌的方法，通过平板划线后，可使细菌分散生长，形成单个菌落，有利于从含有多种细菌的标本中分离出目的菌。平板分离划线的方法较多，其中以分区划线法与曲线划线法较为常用。其目的都要使细菌呈现单个菌落生长，便于同杂菌菌落鉴别。 现只介绍分区划线法。 1、右手持接种环，经火焰灭菌，待凉后，挑取大肠杆菌（或葡萄球菌）培养物少许。 2、左手斜持琼脂平板，皿盖留在桌上，于火焰近处将菌涂于琼脂平板上端，来回划线，涂成薄膜（约占平板总表面积的1/10），划线时接种环与平板表面成30~40o角，轻轻接触，以腕力在平板表面行轻快地滑移动作，接种环不应划破培养基表面。 3、烧灼接种环，杀灭环上残留细菌，待冷（是否冷却，可先在培养基边缘处试触，若琼脂溶化，表示未凉，稍等再试），从薄膜处取菌作连续平行划线，约占平板表面1/5左右，再次烧灼接种环，等三次平行划线……以同样方法作第四次，第五次划线，将平板表面划完。 4、划线完毕，盖上平皿盖，底面向上，用标签或腊笔注明菌名检验号码，接种者信息等，置37℃孵育培养24小时后观察结果。 （二）纯培养细菌接种法（斜面培养基接种法：用于培养，保存菌种及其它实验用） 1、取一支斜面培养基及一支纯菌种管，并排倾斜放在左手四指中拇指压住并以手掌支住两试管底部。右手将白金环于火焰上灭菌、冷却。并拔起两试管的棉塞。（勿放置桌上，如棉塞太紧时应预先松动）。 2、试管口部于火焰上往返通过2~3次灭菌，将灭菌白金环伸入有菌试管中，取少量细菌（一般应从斜面底部沾取），然后小心移至准备接种的试管中。 3、接种方法是自管底向上连续平划线，若以保存菌为目的时可自管底上划一粗直线即可。 4、取出接种环，将试管上部再经火焰灭菌，塞好棉塞，接种环灭菌后放回原处。 5、若自平皿培养物中取菌时，只应沾取一个单个菌落。 6、接种菌应作好标记，标明菌种名称，日期等，置37℃温箱中培养，次日观察结果。液体培养基接种法：用于增菌及鉴定细菌生长特点，如表面生长，沉淀生长，均匀混浊生长等。操作技术基本与上法相同，只是接种时应将沾菌之接种环沿接近液体表面之管内壁轻轻摩擦（勿用力振荡）使细菌混入培养基内，置37℃温箱中培养，次日观察结果。 （三）半固体培养基穿刺培养法用于保存菌种及间接观察细菌之动力（无动力之细菌仅沿穿刺线生长，清晰可见；有动力的细菌使培养基呈现混浊样，穿刺线甚至难以看出）。用无菌操作技术，灭菌穿刺针沾取细菌后，垂直刺入半固体培养基中央直达近管底处，再沿原穿刺线抽出即可，置37℃温箱培养，次日观察结果。
人民医院关于全自动微生物鉴定及药敏分析系统的采购文件招投标书范本
千里马招标网https://www.wendangku.net/doc/a03323117.html, 政府采购谈判 文件 采购编号：SZWK-XC-T-号 采购项目：全自动微生物鉴定及药敏分析系统采购单位：苏州市相城区第三人民医院 项目类别：医疗设备 苏州市卫康招投标咨询服务有限公司 二〇一八年八月
谈判邀请函 ： 受苏州市相城区第三人民医院的委托，苏州市卫康招投标咨询服务有限公司对其所需采购的全自动微生物鉴定及药敏分析系统在国内组织竞争性谈判采购。欢迎符合采购文件资格要求的供应商前来报名参加谈判。 一、采购编号：SZWK-XC-T-号 二、采购内容及数量：全自动微生物鉴定及药敏分析系统一套 三、采购预算：.元整 四、参加谈判的供应商资格要求： A、供应商的一般资格要求 、具有独立承担民事责任的能力； 、具有良好的商业信誉和健全的财务会计制度； 、具有履行合同所必需的设备和专业技术能力； 、有依法缴纳税收和社会保障资金的良好记录； 、参加招标活动前三年内，在经营活动中没有重大违法记录； 、法律、行政法规规定的其他条件。 B、供应商的特殊资格要求 、具有医疗器械生产（经营）企业许可证； 、具有所投产品的合法代理资格。 五、参加谈判报名及领取谈判采购文件时间：自公告发布之日起至月日每日：～：，：～：（节假日除外）； 参加谈判报名及领取谈判采购文件地点：苏州市干将西路号号楼四楼苏州市卫康招投标咨询服务有限公司； 领取谈判文件时请提供以下材料并加盖公章（复印件需提供原件现场核查）： 、企业法人营业执照副本复印件（三证合一）； 、法人授权委托书（报名经办人必须为投标单位正式员工，提供社保缴纳证明及劳动合同等材料）； 、医疗器械生产（经营）企业许可证复印件； 、所投产品的合法代理资格证明材料。 六、谈判时间、地点： 、递交谈判响应文件的时间：年月日：~：（北京时间） 地点：苏州市相城区庆元路号相城区市民服务中心三楼会议室 、递交谈判响应文件的截止时间：年月日：：（北京时间）
细菌鉴定及药敏分析系统产品技术要求珠海迪尔生物
2. 性能指标 2.1 外观与结构 a）外观应端正、清洁，表面涂、镀层应无明显剥落、擦伤、露底及污垢； b）铭牌及标志应清晰、准确、牢固，所有紧固件不得松动；控制器件操作应灵活、可靠。 2.2 功能要求 2.2.1 系统功能要求 a) 细菌鉴定及药敏分析系统（以下称：“系统”）可以自动读取试剂板细菌生化鉴定和抗菌药物MIC半定量测定的阴、阳性结果； b) 应用程序经分析应可得出被鉴定菌株的名称和抗菌药物MIC结果； c) 应能生成检验报告单； d) 应能打印检验报告单。 2.2.2 软件临床功能纲要 2.2.2.1 检测功能 2.2.2.1.1标本资料录入 提供输入或选择的方式录入标本的姓名、类型及来源等资料。 2.2.2.1.2 出具细菌检测报告 在软件的指引下，用户可选择出具无菌报告或者有菌报告，出具有菌报告时，软件支持自动对试剂板进行检测并生成相应的判读结果，也支持手工录入细菌检测结果，用户可根据实际情况选择。 2.2.2.2 查询功能 根据不同的查询条件，用户可对历史报告单及其相关信息进行查询。 2.2.2.3 设置功能 软件提供各种类型的参数设置，用户可根据实际情况进行预设。 2.2.2.4 统计功能 根据不同的统计条件，用户可对历史数据进行统计分析。 2.2.2.5 WHONET功能 根据不同的WHONET数据要求，用户可将历史数据按要求导出。 2.3细菌鉴定及药敏分析系统性能要求
2.3.1准确性 2.3.1.1 细菌鉴定及药敏分析系统对质控菌株鉴定准确性的符合率应≥95%；2.3.1.2 细菌鉴定及药敏分析系统对质控菌株抗菌药物MIC半定量测定准确性 的符合性应≥95%。 2.3.2重复性 2.3.2.1 细菌鉴定及药敏分析系统对质控菌株鉴定重复性的符合率应≥95%；2.3.2.2 细菌鉴定及药敏分析系统对质控菌株抗菌药物MIC半定量测定重复性 的符合率应≥95%。 2.4 温育系统性能要求（适用96A，不适用于D2Mini/D2Plus） 温度准确度及波动 a) 细菌鉴定及药敏分析系统温度稳定后，准确度偏差应不超过±1.5℃； b) 细菌鉴定及药敏分析系统温度波动应不超过3.0℃。 2.5 环境试验要求 细菌鉴定及药敏分析系统应符合GB/T14710-2009中气候环境试验I组，机械环境试验I组及表2的要求。系统的运输试验、电源电压适应能力试验应分别符合GB/T14710-2009中第4章、第5章的要求。 2.6 安全要求 应符合GB4793.1-2007、GB4793.9-2013和YY 0648-2008的要求。 2.7电磁兼容性要求 应符合GB/T 18268.1-2010和GB/T 18268.26-2010的要求 2.8网络安全要求 2.8.1数据接口：应有通用的标准有线网络接口，使用标准TCP/IP协议； 2.8.2用户访问控制：用户应输入与用户名相匹配的密码才能登录使用系统； 用户类型：分为管理员，普通用户两种； 用户身份鉴别方法及权限：系统根据登录的用户名匹配权限； 管理员有检验操作、数据查询、系统管理权限； 普通用户有检验操作、数据查询权限。
灭菌
一、灭菌（Sterilization） 是指用物理或化学的方法杀灭全部微生物，包括致病和非致病微生物以及芽孢，使之达到无菌保障水平。经过灭菌处理后，未被污染的物品，称无菌物品。经过灭菌处理后，未被污染的区域，称为无菌区域。 杀灭或者消除传播媒介上的一切微生物，包括致病微生物和非致病微生物，也包括细菌芽胞和真菌孢子。同时，灭菌可以看成是一个过程。 灭菌 sterilization 用来使产品无存活微生物的过程 二、微生物 微生抵抗力取物对灭菌剂的决于原始存在的群体密度、菌种或环境赋予菌种的抵抗力。灭菌是获得纯培养的必要条件，也是食品工业和医药领域中必需的技术。将培养基、发酵设备或其他目标物中所有微生物的营养细胞及其芽胞（或孢子）杀灭或去除，从而达到无菌的过程。 三、灭菌原则 1.基本要求 重复使用的诊疗器械、器具和物品，使用后应先清洁，再进行消毒或灭菌。 被朊病毒、气性坏疽及突发不明原因的传染病病原体污染的诊疗器械、器具和物品，应执行WS/T 367第11章的规定。 耐热、耐湿的手术器械，应首选压力蒸汽灭菌，不应采取化学消毒剂浸泡灭菌。环境与物体表面，一般情况下先清洁，再消毒；当受到患者血液、体液等污染时，先去除污染物，再清洁与消毒。 医疗机构消毒工作中使用的消毒产品应经卫生行政部门批准或符合相应标准技术规范，并应遵循批准使用的范围、方法和注意事项。 2.方法的选择 根据物品污染后导致感染的风险高低选择相应的消毒或灭菌方法： 1）高危险度物品，应采用灭菌的方法处理； 2）中危险度物品，应采用达到中水平消毒以上效果的消毒方法； 3）低危险度物品，宜采用低水平消毒方法，或做清洁处理；遇有病原微生物污染时，针对所污染的病原微生物种类选择有效的消毒方法 根据物品上污染微生物的种类、数量选择消毒或灭菌的方法： 1) 对收到致病菌芽孢、真菌孢子、分枝杆菌和经学传播病原体污染的物品，应采用高水平消毒或灭菌； 2）对受到真菌、亲水病毒、螺旋体、支原体、衣原体等病原微生物污染的物品，应采取中水平以上的消毒方法； 3）对受到一般细菌和亲脂病毒等污染的物品，应采用达到中水平或低水平的消毒方法； 4）杀灭被有机物保护的微生物时，应加大消毒剂的使用剂量和/或延长消毒时间；5）消毒物品上微生物污染特别严重时，应加大消毒剂的使用剂量和/或延长消毒时间；[2]
细菌培养、细菌鉴定药敏分析仪
全自动细菌培养鉴定药敏系统主要由两部分构成，即：血培养仪（BACTEC9050）和细菌鉴定/药敏仪。 全自动血培养仪是一种专门设计用于快速培养和检测血液中细菌和真菌的仪器，BACTEC9050血培养仪采用的培养瓶主要有需氧和厌氧标准瓶，加有树脂的需氧和厌氧Plus 瓶以及儿童瓶等。其树脂瓶经现场实验证明能较快地发现瓶中细菌并有较高的检出率。目前此系统在世界上特别是在欧美应用十分广泛。 BD PHOENIXTMM System凤凰全自动微生物鉴定/药敏系统是专业设计应用于临床微生物实验室进行快速细菌鉴定及药物敏感试验的全自动设备。仪器原理为先进的荧光增强与传统方法的结晶。系统连续监测，试验完成后可立即得出结果;革兰阳性菌和阴性菌准确度为95%；细菌的药敏时间较手工方法也大为缩短。从接收标本到出具报告时间仅为48h左右，准确度为95%。全自动细菌培养鉴定的投入使用，将在以下四个方面大大提高工作效率：一是提高培养基营养条件利于苛养菌生长。二是加强细菌耐药性监控。鉴于目前耐药性的问题日趋严重，该系统能较准确地做好常规的抗生素敏感试验，并保存有关的菌种和数据以便进一步分析，包括耐药趋势的统计分析、耐药机制的检测和研究，重点耐药菌株如MR-SA、VRE 和ESBL等的监测和耐药基因的检测等。三是帮助临床合理应用抗生素，检测病原微生物对抗生素的敏感性是临床微生物实验室最重要的工作之一。 抗生素敏感性检测的主要目的是预测抗生素的治疗效果，并帮助临床医生针对某一特定的临床感染问题选择最合适的药物，该系统不仅能正确、迅速检出病原体，而且给临床提供可能存在的耐药机制，帮助临床合理应用抗生素。四是提供临床（咨询）服务，目前备受人类重视的难治的耐药菌有：①耐青霉素肺炎链球菌（PRP）；②耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌（MRSA）；③耐万古霉素肠球菌（VRE）；④耐万古霉素葡萄球菌（VRSA）；⑤耐多种药物的结核分枝杆菌（MDR-TB）；⑥真菌感染日益增多；⑦产超广谱β-内酰胺酶的革兰阴性杆菌（ESBL）；⑧持续高产染色体I型β-内酰胺酶（AmpC）的阴沟肠杆菌、产气肠杆菌，弗劳地枸橼酸杆菌；⑨多重耐药的铜绿假单胞菌，不动杆菌和嗜麦芽窄食单胞菌。随着该系统的投入使用以及与临床的及时沟通，对协助临床医生解决治疗感染性疾病的困难也有一定的帮助。
进口全自动细菌鉴定药敏分析系统1套(允许原装进口产品 …
进口全自动细菌鉴定药敏分析系统1套（允许原装进口产品投标）参数要求： （一）主机技术参数 1.系统可同时处理≥30张卡片，系统具有扩容功能，至少可以两台联机。 2.分析组件可自动进行革兰阴性菌、革兰阳性球菌、革兰氏阳性杆菌、酵母样真菌、苛养菌、厌氧菌、嗜血杆菌及棒状杆菌等的鉴定，检测过程中无需额外添加试剂。 3.快速全自动进行临床病原菌的鉴定，平均鉴定时间不大于6小时。 4.分析组件可自动进行革兰阴性菌、革兰阳性菌、酵母样真菌、肺炎链球菌等药敏试验，以上所有药敏试验均得到美国FDA批准用于临床应用（提供FDA资料）。 5.快速全自动进行临床病原菌的药敏实验，平均药敏实验时间不大于6小时。 6.系统的自动化程度高，有条码识别系统，能自动填充悬浮液至试剂卡、自动密封拭卡，并自动将拭卡装载于光学读数系统/孵育系统；测试结束时可自动丢弃拭卡。 7.卡片为封闭式，两面都覆盖了塑料薄膜以避免底物的污染，加样时由仪器自动真空充填。不采用开放式卡片以避免污染和潜在的生物安全隐患。 8.采用分开的鉴定卡和药敏卡，不使用鉴定药敏复合板以避免成本上的浪费。（提供SFDA注册证）。
9.具有专家系统，药敏试验符合美国CLSI、欧洲CASFM两种检测标准。专家软件提供自动确认结果功能，并根据对MIC的结果分析提供治疗的解释和治疗的建议。可推导未检测抗生素的敏感性结果并提供2000种耐药表型分析。 10.能进行流行病学统计（不需另外配置）。 11.测试完成后，经分析软件分析后得出结果并可自动打印报告，并保存结果 12.具备中文报告软件系统。 13.双向联网软件，可传输报告结果。 14.具有三重售后服务保证体系（国内有分支机构、本地有生产厂家办事处、销售商有专职工程师），必须提供终身售后服务支持。15.售后服务时效：有仪器故障，厂方能在4小时作出响应。 （二）附件技术参数 培养箱技术参数 1.电子控制式APT.Line内腔预热技术。 2.温度范围：从环境温度以上5度到100度。 3.DS控制器，带0到99小时整体式计时器。 4.数字式温度设定，精度为0.1度。 5.独立的可调温度安全装置，3.1级（DIN12880）,带有可视温度报 警器。 6.通过背后带有通风瓣的排气管和前面的通风滑板，调节通风量。 7.用于通讯软件APT-COM数据控制系统RS422接口。
MicroScan○R AutoScan-4细菌鉴定及药敏分析系统临床应用
MicroScan○R AutoScan-4细菌鉴定及药敏分析系统临床应用 发表时间：2010-12-01T09:06:02.560Z 来源：《中外健康文摘》2010年第31期供稿作者：韩文静 [导读] 再将测试板放入35℃培养箱孵育16-24小时后，进行测试板判读，并将药敏结果输入，保存。 韩文静（新疆乌鲁木齐市米东区人民医院新疆乌鲁木齐 831400） 【中图分类号】R446 【文献标识码】A 【文章编号】1672-5085 (2010)31-0017-02 【关键词】细菌鉴定药敏分析临床检验简捷适用 MicroScan○R AutoScan-4（简称AS-4）细菌鉴定及药敏分析仪和DMS能够简单、高效地采集、储存、编辑和检索病人样品结果。通过革兰氏阳性/革兰氏阴性复合测试板，最快能在2天内报告微生物鉴定及药敏各种抗生素的最低抑菌浓度（MIC）。此外，根据操作员的实验判读，可以对多个报告进行比较并生成报告。 1 性能结构及组成 该仪器主要由主机(包括前面板和抽屉及测试板处理系统)、LabPro软件组成。 2 适用范围 该仪器用于鉴定微生物的种类及确定临床样本中分离出的微生物的体外抗生素敏感性测试的结果，并与包含连续稀释抗生素和选定生化试剂的MicroScan 测试板一起使用。 3 MicroScan○R AutoScan-4细菌鉴定及药敏分析仪特点 3.1 MicroScan为基层检验工作中提供专利的Prompt快速接种系统，极大提高临床微生物实验室处理微生物标本的能力。 3.2 鉴定菌种包括革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌、厌氧菌、酵母菌、嗜血杆菌、奈瑟氏菌——自动鉴定菌种达500种之多，是同类产品中最全的。 3.3 药敏测定每一种菌株至少可提供18~32种以上抗生素定量药敏（MIC）结果。 3.4 提供单独鉴定板条、单独药敏板条、药敏/鉴定复合板条，所以药敏测试可同时提供MIC和S.I.R报告。 3.5 AutoScan-4具有革兰氏阴性杆菌、尿道感染的肠杆菌科细菌、链球菌、葡萄球菌等确认的标准药敏板。 4 用于对临床标本分离细菌的鉴定和体外抗生素敏感性进行检测的诊断工具 4.1 可同时自动处理鉴定与药敏（MIC）的检查（革兰氏阳性/ 阴性复合板）比色法及比色浊法对鉴定及药敏（MIC）进行测定，仪器自动判读结果。使用测试板及快速接种系统，最快2天可同时报告鉴定及药敏结果。人工判读，将编码输入电脑，由电脑软件评定反应结果。 4.2 操作简单，菌液浓度精确，菌落必须要纯。 5 AS-4微生物实验室操作及临床应用 5.1 将培养皿上优势菌落进行革兰氏染色，按操作程序挑选1－3个菌落，去帽，放入接种瓶中，混匀，倒入接种槽中，用加样定量吸入菌液加至革兰氏阳性/ 阴性复合板中，在相应测试孔中加入专用液体石蜡3滴，盖上专用盖板，放入35℃培养箱中16-24小时，取出进行判断。符合要求，加入生化试剂后，放入AS-4仪器中，按要求进行测试，几秒钟即可判读鉴定及药敏结果，保存判读结果。同时进行触酶及氧化酶实验，记录结果。 5.2 我们应用AS－4参加了5次自治区室间质评，鉴定及┟艚峁 下蚀?00%。室内质控的标准菌株定期鉴定，结果完全一致。 5.3 按AS－4标准进行操作，鉴定率达86%以上为可信结果。低于86%应查找原因，重新操作，提高鉴定率。我们经过2年临床样本中分离出的微生物实验室操作，平均鉴定率达96%以上。科学可靠的实验结果，为临床合理使用抗生素提供依据。 6 AS-4微生物实验室操作注意事项 6.1 AS－4应该放置在清洁、平整的台面上，环境尽量无尘，温度低于28℃，避免震动或电磁干扰，保证仪器的性能。同时还要确保仪器电源、电压在规定标准范围内。电源打开时，不要打开AS－4的顶部。在关闭AS－4或者DMS以后打开它。关闭元件后等待10-15秒再打开元件。如果发生电源故障，应立即关闭所有元件并等待电源恢复后再打开元件。如果光源在操作中发生故障且需要更换，则先将其冷却约10分钟，然后再尝试更换。否则会导致严重燃烧。在更换灯泡以前确保关闭电源。为保证最优性能，更换灯以后，请联系售后服务，以安排调整仪器电气校准的时间。仪器打开时，抽屉自动打开。在打开AS－4之前确保抽屉的运动路径没有阻碍。 6.2 按下READ按钮使抽屉在判读测试板时自动关闭。按下READ按钮之前确保抽屉的运动路径没有阻碍。按下
HX-21AA细菌鉴定药敏分析系统
HX-21细菌分析仪 1、前言 一、概述 合肥恒星科技开发有限公司是安徽省规模较大、实力较强的高科技民营企业，立志于实现医疗器械的国产化，提高临床检验水平。已经成功开发了用于临床检验的电解质分析仪，性能达而且有的地方超过进口仪器的水平，产品销售遍布全国。我公司以高性能、高质量的产品和完善的售后服务赢得了用户的一致赞誉，树立了良好的公司形象。 HX-21细菌分析仪是一种操作方便、快捷、自动化、标准化程度高的微生物自动分析系统，用于临床上测定各种感染的病原体种类及其对各类抗生素的敏感性。 该仪器以安徽省临检中心编制的微生物编码鉴定手册及CLSI（临床和实验室标准协会）(原名：NCCLS（美国临床实验室标准）)中有关液体稀释法测定MIC（最低抑菌浓度）的执行标准为基础，由合肥恒星科技开发有限公司与安徽省临检中心、安徽医科大学附属医院等联合研制而成。安徽省临检中心编制的微生物编码鉴定手册获得了安徽省九五计划科技进步二等奖，用户遍布省内外，是一套准确、实用的鉴定体系。 二、工作原理简介 自临床标本分离的菌株，制备成一定浓度的菌悬液，加入到微孔反应板中后置于35℃温箱中孵育18-24小时。微孔板中组合有细菌鉴定板块及药敏试验板块。检测系统根据指令自动检测微孔板，并记录下每个微孔的色谱值及光密度值。分析系统自动处理接受到的信息，鉴定出细菌的种类及给出药敏试验结果，通过打印机输出报告单。见图2。 1、细菌鉴定的基本原理 1.1、细菌的分类与临床 医学领域中，临床细菌学工作者需要从各种临床标本中分离并识别出细菌是病原菌还是正常菌群或是条件致病菌，并将导致感染的病原菌按照分类学方法正确地鉴定到属或种。而由于细菌的结构和形态较为简单，仅仅依靠形态学特征无法准确区分。因此，需要结合细胞学、生理学、生物化学、免疫学等特征，同时以抗原结构特点、遗传物质（DNA）的分子结构来阐明各种细菌间的亲缘关系，从而在分类体系中准确地定位。因此，细菌鉴定是一项操作繁琐、技术难度较大的工作。 1.2、细菌鉴定的几种方法 双歧索引法：确定细菌的主要特性和次要特性，根据确定的反应次序按照“非此即彼”的原则依次往下区分，直至将细菌准确区分到最小鉴定单位即属或种的水平。该方法适于手工操作，但是较为繁琐，准确性不高。 数值分类法：该方法以细菌的各种特性同等重要为理论基础，根据每种生化反应特性在不同细菌中出现的概率进行全面分析。通过比较待测菌与分类体系中已知菌的生化特性的相似性，判断待测菌的归属。该方法适于计算机进行大量的数据运算，是自动化分析仪器普遍采用的方法 2、细菌药物敏感性试验的原理 2.1、基本概念 抗菌药物敏感性试验（AST，简称药敏试验）：用于测试抗菌药物在体外对病原微生物
微生物接种方法
常用的几种微生物接种方法 接种细菌应用接种针（环）来沾取细菌标本，进行接种。接种环与接种针为用白金丝或合金丝所制，亦可用电炉丝代替，因它能耐高热且散热快，便于接种前后通过火焰灭菌（整个接种环烧红即达到灭菌目的）。在使用接种环时一般用右手持笔式较为方便，左手可持培养基进行配合，其接种程序可分为：灭菌接种环→稍冷→沾取细菌样品→进行接种（包括：启盖或塞、接种划线、加盖或塞）→进行接种环灭菌等五个程序。不同培养基，接种方法也不同，分述如下： 一、平板划线接种法（分离培养法） 是将细菌分离培养的常用技术，其目的是将混有多种细菌的培养物，或标本中不同的细菌（病原菌与非病原菌）使其分散生长，形成单个菌落或分离出单一菌株，便于识别鉴定。平板划线接种方法较多，其中以分段划线法与曲线划线法较为常用。 （一）分段划线法 平板分段划线(左)及培养后菌落分布图 本法多用于含菌量较多的标本。方法是以接种环沾取少许样品先涂布于平板培养基表面一角作为第一段划线（划线时接种环与培养基表面呈45度角），然后将接种环置火焰上灭菌，俟冷（可接触平板试之，如不融化琼脂，即已冷却），于第二段处再作划线，且在开始划线时与第一段的划线相交接数次，以后划线不必再相接，待第二段划完时，再如上法灭菌，接种划线，依次划至最后一段，灭菌接种环。这样每一段划线内的细菌数逐渐减少，即以获得单个菌落，划线接种完毕，盖好平皿盖，倒置（平板底部向上）于37℃温箱中培养。 （二）连续划线法：此法多用于接种材料中含菌数量不太多的样品或培养物。方法是先将样品或培养物涂于平板表面的一角，然后用接种环自样品涂擦处开始，向左右两侧划开并逐渐向下移动，连续划成若干条分散的平等线。
ATB NEW微生物鉴定和药敏分析仪 (SOP)V1.0.0
ATB NEW微生物鉴定和药敏分析仪标准化操作流程(SOP) （版本2.2.0） V 1.0.0 2016年11月 梅里诊断产品（上海）有限公司 客户服务部
目录 一．系统概述 (3) 二．系统正常工作条件 (3) 安装环境 (3) 电气特征 (3) 三．开机关机程序 (4) 开机： (4) 关机： (5) 四. 鉴定/药敏试条及耗材 (6) 五．试条种类及培养要求 (7) 六．标准操作流程 (9) （一）菌悬液的制备、加样和孵育 (9) （二）试条的检测 (10) （三）结果处理 (13) 七．仪器的维护和保养 (20) 八．质量控制 (21) 重要提示 (23) 附录 (24)
一．系统概述 ATB NEW是集微生物鉴定、药敏分析于一体的半自动微生物系统。其优势在于：?全中文操作界面，易于理解 ?鉴定范围很广 ?独立包装的ATB试条+干燥剂，有效减少交叉污染 ?专家系统对结果进行分析，临床结果更为可靠 二．系统正常工作条件 安装环境 ●室内使用 ●避免日光直射 ●安装于平整，稳定的台面 ●预留足够的空间，确保读数仪的前面板打开后可以放置于平整的台面上 ●电脑主机后部离墙至少20cm，确保主机通风散气 ●运行温度：≤30℃ ●运输和储存温度：-10℃至+50℃ ●相对湿度：10%-70%，无冷凝水 ●安装的最高海拔高度：2000 m ●安装类别：II（符合IEC 61010.1标准） ●污染程度：2（符合IEC 61010.1标准） 电气特征 电压：100 ~240 V交流电，频率50~60 Hz 最大的输入电流：1.2 A I类设备
三．开机关机程序 开机： 1．打开电脑 2．双击桌面图标ATB NEW 3．输入用户名和密码，点击登录，进入ATB NEW 软件 默认操作者：100 密码：100 4．打开读数仪后面板上的开关（ON） 5．放下读数仪的前面板 6．打开打印机
梅里埃微生物药敏审定分析仪操作规程
第 1 页共5 页梅里埃ATB微生物药敏鉴定分析仪操作规程 1 主要技术指标 梅里埃ATB微生物鉴定／药敏分析系统融合了自动化、电脑化及微 生物微量生化反应测试方法，可同时进行微生物分析鉴定（ID）与 药敏（MIC）检测，使细菌鉴定／药敏分析规范化、标准化、现代化。 1.1完善的分析系统： 微生物鉴定分析系统，微生物药敏分析系统 统计分析／院内感染监测专家系统 联网功能 1.2药物种类： 呋喃类，磺胺类，喹诺酮类，青霉素类 大环内酯类，氨基糖甙类，头孢菌素类 1.2鉴定范围： 肠杆菌科，非发酵菌，葡萄球菌属，真菌， 微球菌属，链球菌属，肠球菌属，弧菌属 1.3院内感染检测 环境空气，物体表面，医疗用品， 消毒剂及保存液，血液透析 2 适用范围 梅里埃ATB微生物分析系统(包括微生物鉴定和药敏分析两大功能)；是对己分离培养出来的细菌、真菌等微生物进行种、属鉴定，并同时测 定该菌对各种抗菌药物敏感/耐药程度的专用设备。 3 工作原理 自1880年郭霍(Koch)发明固体培养基，对细菌的研究技术有了重大的
第 2 页共5 页突破之后，一个多世纪以来，人类对细菌的研究和认识已经得到了极大 的成就，对细菌分类的理论根据和方法已趋成熟，命名已经统一，对繁 浩的各种细菌众多的生物学、物理学特性己基本明确，从20世纪初 开始，形成了利用各种细菌之间生物学、物理学特性的差异或不同，来 区别和鉴定细菌种类的方法，不断丰富发展，沿用至今，成为细菌鉴定 的常规方法。 但由于细菌种类繁多，生物学性状错综复杂，实验操作繁琐、费时， 不仅初学者不易掌握，有经验者也常感困惑。20世纪70年代，由于 电子计算机的发展，有人首先利用信息编码来签定细菌，将复杂的各种 细菌的生物学性状建立数据库，被检菌的各种生物性状测出后，输入电 脑与贮存信息相比较即刻可判断未知菌的种属。八十年代初己设计出各 种多项生物学试验的套装组合，与电脑贮存的项目内容相对应，即细菌 的编码鉴定法，很快在全球得到了重视，迅速推广应用。随后，在上述 编码鉴定的基础上，又开发研究了各种类型的半自动和全自动的细菌鉴 定药敏分析仪器。 梅里埃ATB微生物鉴定/药敏分析系统，与国际上的其他同类仪 器一样，都是按照上述的原则和技术基础而设计和投产的，设计时，细 菌的分类、命名、各种细菌的生物学特性和鉴定依据，各项鉴定试验， 特别是“关键性试验”的方法和标准，抗生素药物与浓度的选择和敏感 度判断标准等，全部按卫生部印发的《全国临床检验操作规程第二版》、《NCCLS药敏试验法规(2001)》等权威性文献执行，这些文献己与 国际接轨，因此，它和国外同类产品的性质和功能基本上是一致的。 4 操作步骤与功能特点 梅里埃ATB微生物自动鉴定／药敏分析系统分为“半自动”和 “自动”两种，半自动系统由电脑软件和测试板两部分组成：自动系统 是在半自动的基础上再加自动判断装置。使用半自动系统时，先将被测 菌制成菌液加注到测试板微孔内，经孵育后，将板上的各项测试结果(阳性或阴性)输入电脑软件的相应界面，便可即刻判定被测菌的种、属名称
常用物品消毒灭菌方法
常用物品消毒灭菌方法 一、手术器械及其相关物品 1、手术器械 含口腔科 压力蒸汽灭菌 2%戊二醛溶液浸泡10小时 无菌水冲洗干净后使用。逐步取消在科室清洗 由供应室集中清洗。 2、锐利器械 含刀、刀片、穿刺针等 压力蒸汽灭菌 严禁戊二醛浸泡灭菌。 3、缝线压力蒸汽灭菌 严禁戊二醛浸泡灭菌。 4、弯盘、换药碗压力蒸汽灭菌 由供应室集中清洗。 二、器械类杯钳罐 压力蒸汽灭菌 有消毒液的每周更换2次 干式 保存每班更换、有污染时随时更换。 三、玻璃类 1、体温表含氯消毒液500mg/L盖盒浸泡30分钟 冷开水冲洗干净 纱布擦干。冷开水、消毒液每日更换。 2、盛消毒液的玻璃瓶压力蒸汽灭菌 每周灭菌2次。 3、吸引瓶流动水冲洗晾干 用含氯消毒液500mg/L浸泡30分钟 清水冲洗晾干 使用一次性引流袋 。 四、塑料类及橡胶类 1、超声雾化器、呼吸机、化瓶流动水清洗、干燥 含氯消毒液500mg/L浸泡10-15分钟后 流动水冲洗(一次性含嘴)。 2、橡皮气圈、橡皮中单流动水清洗、晾干 用含氯消毒液
250mg/L擦拭。 3、血压计、袖带、听诊器袖带清洗、晾干 必要时用75%乙醇或含氯消毒液250mg/L擦拭。 五、环境与物表 1、水龙头、水池保持清洁 必要时含氯消毒液250mg/L 擦拭 有污染时随时消毒。 2、地面清扫 必要时含氯消毒液250mg/L拖地 有污染时随时消毒拖地。 3、物体表面 床头柜、椅子等 每床单元一条毛巾擦拭 保持清洁 必要时含氯消毒液250mg/L擦拭 毛巾用后含氯消毒液500mg/L泡30分钟 有污染时随时消毒液擦拭 病人出院应消毒。 4、门窗、墙壁、桌椅、楼梯扶手保持清洁 必要时含氯消毒液250mg/L擦拭 有污染时随时消毒擦拭。 六、空气及空调 1、空气开窗通风 紫外线照射30分钟。 2、空调滤网定期清洗 七、布类 床单、被套及枕套定期更换清洗 枕芯、棉絮及床垫必要时使用床单元消毒器消毒30分钟。 八、车辆 各种推车保持清洁 必要时含氯消毒液250mg/L擦拭 有污
接种环灭菌器使用注意事项有哪些
实验室中常用到的红外接种环灭菌器火焰加热或灼烧灭菌装置有酒精灯、石英比色皿本生灯和接种环灭菌器，接下来我们重点来学习一下接种环灭菌器的使用注意事项，希望对大家有所帮助。 以下就是接种环灭菌器灭菌注意事项： 1.由被检验标本或培养物中取材观察细菌形态时，微型离心机必须使用接种环。接种环系采用一段长约5 ～8cm 漩涡混合器硬度适中的镍质电阻丝或特制铂丝，安置在一金属或玻璃棒上制成。微孔板振荡器无环者则称接种针。 2.接种环或接种针每次使用前后，移液管控制器均须用接种环灭菌器灭菌。即在接种环灭菌器内彻底烧灼1 次，在红外线灭菌器腔内金属棒或玻璃棒部分亦须转动着用进灭菌。 3.接种环(针)经接种环灭菌器灭菌后，需待冷却后再沾取标本或放置于工作台上，以防烫死微生物和烧损桌面。(冷却时间跟传统酒精灯时间一样)。 4.接种环灭菌器也可对玻璃材料的微生物培养管进么消毒，此时特别注意管中不能有任何液体和其它物体，以免里面的液体溅出或发生爆炸等危险事故。
5.不染色标本和染色标本观察后，应立即投入消毒液内灭菌。 6.使用过玻片，务须消除玻片上的染色细菌后再用，否则再次使用时可能做出错误诊断。 怎么来判断一台接种环灭菌器的好坏。主要的就是加热体，接种环灭菌器加热体它是接种环灭菌器的主要的组成部分，对灭菌效果的好坏影响极大。加热体故障是造成灭菌效果下降的主要原因之一，其主要表现为升温速度下降；影响热分布；产生尘埃物质。而造成加热器故障的原因，主要是加热体的长期使用或通过加热器的空气质量较差所致以及所购买的接种环灭菌器质量本身所致。 贝兰伯生物技术（杭州）有限公司是由教授级高工带队，博硕士及十几年生命科学领域的研发、销售团队构成，致力于研发、生产高品质实验室耗材、科研产品，为科研事业贡献力量。主要包括：如PCR管、离心管、无酶无热源诊断包装瓶，无酶无热源吸头、细胞培养类、酶标板、检测板、深孔板、磁套，用于疫苗、抗体药物、基因治疗药物、细胞治疗药物、蛋白质药物、核酸药物、药物研发与核酸提取（DNA和RNA）、基因测序、分子诊断、疫苗研究开发。细胞学，遗传学，免疫学，实验医学，生物分子学等学科研究。
梅里埃微生物药敏鉴定分析仪操作规程
梅里埃ATB微生物药敏鉴定分析仪操作规程 1 主要技术指标 梅里埃ATB微生物鉴定／药敏分析系统融合了自动化、电脑化及 微生物微量生化反应测试方法，可同时进行微生物分析鉴定（ID）与 药敏（MIC）检测，使细菌鉴定／药敏分析规范化、标准化、现代化。 1.1完善的分析系统： 微生物鉴定分析系统，微生物药敏分析系统 统计分析／院内感染监测专家系统 联网功能 1.2药物种类： 呋喃类，磺胺类，喹诺酮类，青霉素类 大环内酯类，氨基糖甙类，头孢菌素类 1.2鉴定范围： 肠杆菌科，非发酵菌，葡萄球菌属，真菌， 微球菌属，链球菌属，肠球菌属，弧菌属 1.3院内感染检测 环境空气，物体表面，医疗用品， 消毒剂及保存液，血液透析 2 适用范围 梅里埃ATB微生物分析系统(包括微生物鉴定和药敏分析两大功能)；是对己分离培养出来的细菌、真菌等微生物进行种、属鉴定， 并同时测定该菌对各种抗菌药物敏感/耐药程度的专用设备。 3 工作原理 自1880年郭霍(Koch)发明固体培养基，对细菌的研究技术有了重大
的突破之后，一个多世纪以来，人类对细菌的研究和认识已经得到了极大的成就，对细菌分类的理论根据和方法已趋成熟，命名已经统一，对繁浩的各种细菌众多的生物学、物理学特性己基本明确，从20世纪初开始，形成了利用各种细菌之间生物学、物理学特性的差异或不同，来区别和鉴定细菌种类的方法，不断丰富发展，沿用至今，成为细菌鉴定的常规方法。 但由于细菌种类繁多，生物学性状错综复杂，实验操作繁琐、费时，不仅初学者不易掌握，有经验者也常感困惑。20世纪70年代，由于电子计算机的发展，有人首先利用信息编码来签定细菌，将复杂的各种细菌的生物学性状建立数据库，被检菌的各种生物性状测出后，输入电脑与贮存信息相比较即刻可判断未知菌的种属。八十年代初己设计出各种多项生物学试验的套装组合，与电脑贮存的项目内容相对应，即细菌的编码鉴定法，很快在全球得到了重视，迅速推广应用。随后，在上述编码鉴定的基础上，又开发研究了各种类型的半自动和全自动的细菌鉴定药敏分析仪器。 梅里埃ATB微生物鉴定/药敏分析系统，与国际上的其他同类仪器一样，都是按照上述的原则和技术基础而设计和投产的，设计时，细菌的分类、命名、各种细菌的生物学特性和鉴定依据，各项鉴定试验，特别是“关键性试验”的方法和标准，抗生素药物与浓度的选择和敏感度判断标准等，全部按卫生部印发的《全国临床检验操作规程第二版》、《NCCLS药敏试验法规(2001)》等权威性文献执行，这些文献己与国际接轨，因此，它和国外同类产品的性质和功能基本上是一致的。 4 操作步骤与功能特点 梅里埃ATB微生物自动鉴定／药敏分析系统分为“半自动”和“自动”两种，半自动系统由电脑软件和测试板两部分组成：自动系统是在半自动的基础上再加自动判断装置。使用半自动系统时，先将被测菌制成菌液加注到测试板微孔内，经孵育后，将板上的各项测试结果
微生物鉴定药敏分析仪全自动比半自动的优势
微生物鉴定药敏分析仪全自动比半自动的优势 1、准确性更高 全自动鉴定的单一选择率＞93%，半自动由于单一选择率低，需要做附加实验，报告时间会延后一天。 全自动药敏覆盖7个MIC浓度，半自动一般只有3个MIC。 解释： “单一选择”意味着： 1）实验结束后仪器自动判定并给出唯一的鉴定结果，而非给出两三个结果，需要操作者进行额外的附加实验（注意！这些附加实验都是手工实验，结果的阴阳性全凭操作者的经验判断，不同操作者的判断会有差异）或凭经验判断准确的鉴定结果是哪一个。因此，“单一选择”进一步地避免了人为因素对实验结果的干扰，保障了结果的准确性2）上机细菌的实验结果与该种细菌的标准反应符合度达到99%以上，系统才会报告“单一选择”。因此，“单一选择”本身就是鉴定结果准确性的有力保障。 2、鉴定和药敏谱更全面 除一般革兰氏阴性、阳性菌外，涵盖了真菌、厌氧菌、苛养菌、阳性杆菌、芽胞杆菌。 解释： 全面覆盖的鉴定和药敏谱不仅能保证不遗漏任何临床致病菌的检测，更意味着在紧急公卫事件中，能快速、全面而准确地报道致病菌。 3、检测更快速 全自动一般5-6小时报告结果，半自动一般18-24小时报告结果。 解释： 全自动仪器可在检测当天报告鉴定和药敏结果，比半自动仪器提早一天，有利于临床医生及时修正用药。针对危重感染病人，提早一天修正用药意味着病人生存机率明显提高。 4、自动化程度更高 全自动化的操作能实现标准化，标准化的操作能确保结果的一致性。 解释： 标准化的操作有效避免工作疏漏，上机结果不受操作者经验、熟练程度影响，最大程度保障了结果的准确性。 全自动化的操作，可使工作效率显著提高。对标本批量处理，节省人力。
实验3 消毒与灭菌
实验三消毒与灭菌 一、实验目的： 掌握微生物消毒与灭菌的方法 二、实验原理 灭菌是用物理或化学的方法来杀死或除去物品上或环境中的所有微生物。消毒是用物理或化学的方法杀死物体上绝大部分微生物(主要是病原微生物和有害微生物)。消毒实际上是部分灭菌。 灭菌原理：高压蒸汽灭菌是将待灭菌的物品放在一个密闭的加压灭菌锅内，通过加热，使灭菌锅隔套间的水沸腾而产生蒸汽。待水蒸汽急剧地将锅内的冷空气从排气阀中驱尽，然后关闭排气阀，继续加热，此时由于蒸汽不能溢出，而增加了灭菌器内的压力，从而使沸点增高，得到高于100℃的温度。导致菌体蛋白质凝固变性而达到灭菌的目的。适用于一般培养基、玻璃器皿、无菌水、金属用具。一般培养基在121．3℃灭菌20分钟即可。干热灭菌是利用高温使微生物细胞内的蛋白质凝固变性而达到灭菌的目的。细胞内的蛋白质凝固性与其本身的含水量有关，在菌体受热时，当环境和细胞内含水量越大，则蛋白质凝固就越快，反之含水量越小，凝固缓慢。因此，与湿热灭菌相比，干热灭菌所需温度高（160—170℃），时间长（1—2小时）。但干热灭菌温度不能超过180℃，否则，包器皿的纸或棉塞就会烤焦，甚至引起燃烧，因而一般塑料制品不能用干热灭菌。 三、实验仪器 高压蒸汽灭菌锅、电热烘箱、 四、实验内容 消毒与灭菌的方法很多，一般可分为加热、过滤、照射和使用化学药品等方法。 （一）加热法 加热法又分干热灭菌和湿热灭菌两类。 1.干热灭菌 有火焰烧灼灭菌和热空气灭菌两种。火焰烧灼灭菌适用于接种环、接种针和金属用具如镊子等，无菌操作时的试管口和瓶口也在火焰上作短暂烧灼灭菌。通常所说的干热灭菌是在电烘箱内灭菌，此法适用于玻璃器皿如吸管和培养皿等的灭菌，在热空气160℃-170℃下保温2小时进行灭菌。 2.湿热灭菌 （1）高压蒸汽灭菌法 此法是将物品放在高压蒸汽灭菌锅内1.05kg／cm2(15磅/英寸2)，121.3℃保持15-30分钟进行灭菌。时间的长短可根据灭菌物品种类和数量的不同而有所变化、以达到彻底灭菌为准。这种灭菌适用于培养基、工作服、橡皮物品等的灭菌。
实验十 微生物鉴定药敏分析系统操作
实验十微生物鉴定药敏分析系统操作 一．开机： 打开读数仪背面的电源开关，并预热20分钟以上。面板上有3个信号灯，从上到下分别如下状态指示： 状态：当读数仪开机后经自检通过后，该信号灯应点亮。 读板：当读数仪正在工作读取板条时，该信号灯应点亮。 联机：读数仪与计算机通讯连接成功后，该信号灯应点亮。 二．进入主界面： 在桌面上打开FB450R1文件，输入用户名及密码。 三．切换至安装窗口： 在数据输入方式栏选择读数方式为“仪器判读”，点击“初始化读数仪”使“否”转为“是”，在“把数据写到数据文件”栏选择“是”，单击“输出数据文件名称”栏，则出现一对话框，在C：\ FB450R1\Datafiles目录下输入文件名，按保存键保存。在“自动写入到数据文件”栏选择“是”。四．切换至药敏窗口： 在左上方的蓝色区域内，单击鼠标右键，弹出对话框，点击“建立新的病人和测试记录”对话框或选择“调用该病历号建立新的测试记录”，输入基本病人资料（病历号必须是唯一的）、就诊资料、检验追踪资料（样本号必须是唯一的），按保存键保存。 五．鉴定结果的读取： 切换至鉴定窗口，输入板条号、板条格式，选择培养时间、板条类型、菌种类型，“板条类型”栏右方的L或R表示您要读取的是鉴定测试板的左边或与右边部分，（1）仪器在第一次开机运行时需要进行一次预读，点击“读取此条”,抽屉从仪器中弹出（2）将鉴定测试板条放入读数仪的抽屉中，板条左上方的A1标志对应抽屉左上方，确定板条已经正确放置后，点击“读取此条”，几秒后，鉴定窗口下方的表格栏将会出现结果。点击“打印”按钮，可打印鉴定结果报告单。按“保存到药敏”按钮，转入药敏窗口。 六．药敏结果的读取： 确定检验设置栏中的板条类型是否与检测所使用的药敏板条类型一致，在“输入模式”一栏中选择“仪器判读”。将药敏测试放入抽屉中，同样板条的A1标志对应抽屉得左上方，点击“读数”按钮，仪器开始读数，得出结果。击“打印预览”按钮，查看打印结果，按“打