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小麦籽粒淀粉合成酶基因表达_相应酶活性及淀粉积累三者的关系

小麦籽粒淀粉合成酶基因表达_相应酶活性及淀粉积累三者的关系
小麦籽粒淀粉合成酶基因表达_相应酶活性及淀粉积累三者的关系

小麦籽粒淀粉合成酶基因表达、相应酶活性及

淀粉积累三者的关系

谭彩霞1,2,封超年1,2,郭文善2,朱新开2,李春燕2,彭永欣2

(1.金陵科技学院,江苏 南京 211169;2.扬州大学江苏省作物遗传生理重点实验室,江苏 扬州 225009)

摘 要:为研究小麦籽粒淀粉形成的机制,以秦麦11为试验材料,对小麦籽粒灌浆期淀粉合成酶基因表达、相应

酶活性及淀粉积累变化进行了研究。结果表明,腺苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶基因(AGPase)、束缚态淀粉合成

酶基因(G B S SI)、可溶性淀粉合成酶基因(SSS)、淀粉分支酶基因(SBE)表达均呈单峰曲线变化,AGPase和

SS S基因于花后12d左右相对表达量最大,GBS SI和SBE基因于花后15d左右相对表达量最大。4种淀粉合成

酶活性变化趋势一致,花后25d或30d之前呈上升趋势,之后急剧下降。淀粉及其组分积累量随着灌浆的进行呈

不断上升趋势。直、支链淀粉及总淀粉积累速率峰值在花后25d或30d。相关分析表明,AGPase、SS S、SB E基因

在花后15d相对表达量与相应酶活性间呈极显著正相关,而GBS S基因的相对表达量与G B S S活性间未检测到

相关。暗示AGPase、S SS、SB E基因在籽粒淀粉合成过程中可能属于转录水平调控,而G B S SI基因可能属于转录

后调控。4种淀粉合成酶活性与直、支链淀粉及总淀粉积累速率均呈极显著正相关,说明这几种酶对淀粉合成共

同起作用。

关键词:淀粉;淀粉合成酶;淀粉合成酶基因;基因表达;荧光定量RT-PCR

中图分类号:S512.1;Q559;Q945.6+5 文献标识码:A 文章编号:1672-755X(2010)01-0047-07

The Relationship among Starch Synthase Gene Expression,the

Corresponding Synthase Activity and Starch Accumulation

T AN Cai-xia1,2,FEN G Chao-nia n1,2,GUO W en-shan2,

ZHU Xin-kai2,LI Chun-yan2,PEN G Yo ng-xin2

(1.J inling Institute o f Technolog y,Na njing211169,China;

2.Key La b o f Cro p Genetics and Phy siolog y o f J iangsu Province,Yang zhou Univ ersity,Ya ng zho u225009,China)

Abstract:To study the fo rmatio n mechanism of starch in stro ng gluten w hea t g rain,w ith Qin-mai11as the tested m aterial,starch synthase g ene ex pression,the cor respo nding sy nthase ac-tivity a nd starch accumula tion were studied during the g rain filling stage.The results show ed that the ADP-g lucose py ro phosphate enzym e g ene(AGPase),bound starch sy nthase g ene (GB SS I),so luble starch synthase g ene(SS S),sta rch branching enzyme g ene(SB E)all sho w ed a sing le-peak of curv e.The ex pressio n lev els of AGPase and SSS reached the maximum

a t DPA12.The ex pression lev els o f GB SS I and SB E reached a maximum at DPA15.The

收稿日期:2010-03-12

基金项目:江苏省“六大人才高峰”项目(07-G-008);国家自然科学基金资助项目(30370829);扬州大学自然科学基金项目(2007cx j015)

作者简介:谭彩霞(1977-),女,江苏泰兴人,讲师,博士,主要从事小麦栽培与生理方面的研究。

four sta rch synthesis activities chang ed in the trend line .They w ere all show ing a n upwa rd

trend befo re DPA 25o r 30and sha rply declined after the days.Accumulatio n of starch a nd its

com ponents co nstantly rose during the g rain filling stag e .The accumula tio n ra te peak o f am y-

lo se,am ylopectin and the total sta rch w ere at DPA 25o r 30.In additio n to GB SS I ,the rela-

tiv e ex pression lev els of AGPase ,SS S and SB E w ere highly sig nificantly co rrelated with the

activities o f AGPase,SSS and SBE at DPA 15.These hinted that A GPase ,S SS ,SBE may

control sta rch sy nthesis at the transcriptio nal lev el ,and GB SSI m ay co ntrol starch synthesis a t

the post-transcriptiona l lev el.The activities of AGPase,GBSS,SSS,SBE w ere positiv ely cor-

related to th e rates of am ylose ,am ylopectin and to tal starch accum ula ting ,w hich indicated

that these fo ur enzy mes play ed a role in promo ting the g rain starch accum ulation of w heat.

Key words :starch ;starch synthase ;starch sy ntha se g ene ;gene ex pressio n ;real -time fluores-

cence quantitativ e PCR

淀粉是葡萄糖的天然聚合体。根据葡萄糖分子间连接方式,淀粉可分为直链淀粉和支链淀粉。直、支链淀粉是由一系列淀粉合成酶催化而成的,这些酶主要包括ADP -葡萄糖焦磷酸化酶(ADP -g lucose py-ro phosphory lase poly petide ,AGPase )、可溶性淀粉合成酶(soluble starch synthase ,SSS )、颗粒结合型淀粉合成酶(g ranule-bound starch synthase,GBSS)、淀粉分支酶(sta rch branchingenzym e,SBE)以及淀粉去分支酶(starch debranching enzym e,DBE),这些淀粉合成酶又由相应的基因所编码。关于淀粉合成酶对籽粒淀粉合成的作用,前人已做了大量的研究,Nakamura 等认为AGPase 和SBE 酶是控制淀粉合成的关键酶[1]。杨建昌等认为AGPase 、GBSS 、SBE 酶在籽粒淀粉合成过程中均起重要作用。姜东等[3]

认为AG-

Pase

、GBSS 、SSS 是淀粉合成的关键酶[2]。但关于淀粉合成酶基因通过编码淀粉合成酶,从而控制籽粒淀粉合成方面的研究在国内甚少,本试验以强筋小麦秦麦11为材料,研究淀粉合成酶基因表达、淀粉合成酶活性及淀粉积累三者变化的对应关系。探索对小麦品种的淀粉组分和积累量进行遗传改造,为进一步深入了解小麦育种和栽培的调控机理提供先进的研究手段和理论依据。1 材料与方法

试验于2006-2008年在扬州大学农学院江苏省作物栽培与遗传生理重点实验室试验场进行,试验田前茬为水稻,试验田为轻壤土。2006年秋播时0—20cm 土层土壤肥力水平为:水解氮69.67mg /kg ,速效磷42.65mg /kg ,速效钾98.53mg /kg ,土壤有机质含量16.3g /kg 。2007年秋播时0—20cm 土层土壤肥力水平为:水解氮72.23mg /kg ,速效磷44.85mg /kg ,速效钾104.87mg /kg ,土壤有机质含量19.48g /kg 。供试品种为强筋小麦秦麦11。

1.1 试验设计

随机区组设计,基本苗为180万/hm 2。全生育期施纯氮总量为210kg /hm 2,氮肥运筹比例小麦基肥∶壮蘖肥∶拔节肥为5∶1∶4,基肥于播种前施用,壮蘖肥于越冬期施用,拔节肥于叶龄余数1.5时施用。磷(P 2O 5)、钾(K 2O)肥施用量90kg /hm 2,磷、钾肥运筹为基肥和拔节肥各占50%。10月27日播种,人工条播,行距为30cm,小区面积为21m 2

,重复3次,其他田间管理按小麦高产栽培技术规程进行。

1.2 项目测定与方法

1.2.1 小麦籽粒胚乳总RN A 的提取 小麦开花期用记号笔标记同一天开花的穗子中上部颖花,于花后第3、6、9、12、15、18、21d 取样。每个小区取10穗,剥取籽粒,在液氮中速冻30min 后,迅速转移到-70°C 超低温冰箱中。采用冷酚法提取小麦籽粒胚乳总RN A [4]。

1.2.2 小麦籽粒胚乳总RN A 的定量、变性检测及纯化 1)定量。测260、280nm 处的吸光值,计算A260/A280的值,估计总RN A 的纯度,通过A260的值分别对不同品种及不同生育期的总RN A 进行定量。2)48金 陵 科 技 学 院 学 报第26卷 

RN A 完整性检测。采用甲醛变性凝胶电泳对所提取的总RN A 的完整性进行分析,有明显的18S 和28S 两条带,且无拖尾现象,表明所提取的总RN A 完整。3)RN A 的纯化。用DN A 酶去除RN A 中的DN A 分子,以防止DN A 污染。

1.2.3 反转录合成cDN A 第一链 取各样本RN A 2ug 按Prime Script TM RT Reag ent Kit 试剂盒(Ta Ka Ra 公司)操作方法:在一个经DEPC 处理过的离心管中加入总RN A 2uL,Mix ×I 1u L,o lig dT 1

u L ,Ram dom 6mers 1u L ,加DEPC 处理的灭菌水至20uL 。混合后37°C 反转录反应20min ,85°C 10s 消

除转录酶的活性,反转录后的cDN A 贮存于-70°C 冰箱。

1.2.4 定量PCR 引物设计 利用primer premier 5.0引物设计软件,根据美国国立生物技术信息中心(NCBI)公布的A GPase 、GB SS 、SS S 、SB E m RN A 基因序列,设计引物(其引物序列见表1)。通过NCBI 中Blast 的同源比对功能,对设计的引物特异性进行评价。引物由上海生物工程有限公司合成。

1.2.5 反转录产物的PCR 扩增 各cDN A 样品分别以目标基因18S 引物进行定量PCR 反应。反应在96孔PC R 板中进行。采用TaKa Ra 公司SYBR Premix Ex Taq TM (Perfect Real Time)试剂盒。反应体系为25μL :SYBR Premix Ex Taq TM (2×)12.5uL;上游引物0.5u L,下游引物0.5uL;RT 反应液2u L;Ro x Ref-erence Dye Ⅱ(50×)0.5uL;灭菌dd H 2O 9uL 。配制混合物充分混匀后平均分配至96孔PCR 板中。反应于ABI 7000PCR 仪上PCR 扩增进行,每个样品做4次平行反应,采用两步法PCR 扩增标准程序。反应条件如下:95℃下预变性10s 、95℃下5s 、60℃下40s 、循环40次。结束后做50~95℃的熔解曲线分析,荧光波长为490nm 。

表1 目标基因表达的引物序列

Table 1

 Target genes f or analysis of expression prof ile and primer sequence of their cDNA 基因

N CBI 登录号引物序列(5’-3’)产物大小/bp A GPase

Z 21969[F ]T T CA GT T T CT A T GA CCGT T C [R ]A G T A T CC A T CT G T CT CCCT C 388GB SS I

AF 286320[F ]A T CG T CA ACG GCA T G G AT G T [R ]CCC T CACCT T GC TCG GG A A T 328S SS

AF 258608[F ]G GT T G T GG T ACCA AG G T A T GG [R ]GG CG T T G GA T G T G T A T AT G G 318SB E

AF 076679[F ]G GT GA T G A T T CCG ACA A T A GG [R ]A G T GCA T CG T CGG AG T C T A A 32418S A Y 626161[F ]T T CA T A T CA CGT G CT G CA T GG

[R ]A GA CG ACT T CGG T G AG ACG 242

1.2.6 荧光定量PC R 数据分析方法 1)标准曲线的制作。在样品扩增的同时,以试验中不同处理的cD-

N A 模板混合样进行系列稀释制作标准曲线。在本试验中把秦麦11花后3

、6、9、12、15、18、21d 的cDN A 模板混合按10的倍数进行稀释。以AGPase 、GB SSI 、SS S 、SB E 的特异引物和18S 的内参引物进行扩增来获得标准曲线,纵坐标为临界循环值Ct,横坐标为稀释浓度的对数值(Lo g 值)。2)相对定量的分析方法。PCR 完成后,用相对定量研究方法分析实验结果。根据扩增曲线,确定每个基因相应的Ct 值,在Microso ft Ex cel 软件上进行相对定量研究和统计处理。以18S 为对照基因,校正PCR 模板的拷贝数。相对量采用2-ΔΔCt 方法计算,即ΔCt 目标基因=Ct (目标基因)-Ct (同一样本18S );ΔΔCt (目标基因)=处理组(ΔCt 目标基因)-对照组(ΔCt 目标基因),而相对倍数(relativ e quantificatio n)=2-ΔΔCt (目标基因)。

1.2.7 AGPase 、GBSS 、SSS 和SBE 活性测定 小麦开花期用记号笔标记同一天开的花穗子中上部颖花,花后每5d 取一次样,总共取8次样。每个小区取10穗,剥取籽粒。在液氮中速冻30min 后放入-40℃冰箱保存。

酶活力单位定义为:吸光值每分钟增加0.01为酶的一个单位,最后根据样品籽粒数和稀释倍数计算酶的活性,单位为:nm ol /1000seeds.min 。AGPase 、GBSS 、SSS 、SBE 活性的测定主要参照程方名等的方49第1期谭彩霞,等:小麦籽粒淀粉合成酶基因表达、相应酶活性及淀粉积累三者的关系 

法[5]。

1.2.8 籽粒淀粉含量的测定 小麦开花期用记号笔标记同一天开花穗子的中上部颖花,花后每5d 取10穗,总共取8次样,剥取籽粒。测定各处理籽粒的鲜重和干重后,采用双波长法测定直链淀粉和支链淀粉含量,两者之和为总淀粉含量[12]。

图1 秦麦11淀粉合成酶基因花后表达情况Fig .1 Expression of starch synthase gene after an -thesis in Qinmai 11grains

2 结果与分析

2.1 小麦籽粒灌浆期间淀粉合成酶基因表达变化动态

前人研究表明,籽粒胚乳A GPase 、GB SS 、SSS 、SB E

淀粉合成酶基因表达主要贯穿在小麦灌浆的前中期,灌浆

中后期表达量很低或几乎不表达[6]。本试验在秦麦11灌浆

3~21d 期间,每隔3d 取样用于提取籽粒胚乳总RN A,利

用荧光定量PCR 方法分析这4种淀粉淀粉合成酶基因

m RN A 的表达变化动态。由图1可知:4种淀粉合成酶基

因m RN A 表达均呈单峰曲线,花后3d 不表达,花后4d 左右开始表达,花后6d 酶基因相对表达量达0.5左右,花后6~12d 表达量上升最快,其中AGPase 、S SS 基因m RN A 相对表达量在花后12d 左右达到最大值,GB S S 、SB E 基因的m RN A 相对表达量在花后15d 左右达到最大值,18d 后表达急剧下降,21d 达到最低值。

2.2 小麦籽粒灌浆期间淀粉合成酶活性变化动态

由图2可知,秦麦114种淀粉合成酶活性变化趋势一致,均呈单峰曲线。花后5~10d 酶活性上升幅度较缓慢,花后15~25d 或30d 酶活性呈线性上升趋势,之后又急剧下降,到花后40d 酶活性值很低,与花后5d 酶活性值相当。其中AGPase 、SSS 、SBE 酶活性在花后25d 达到最大值,GBSS 酶活性在花后30d 达到最大值,由此说明AGPase 、GBSS 、SSS 、SBE 酶在籽粒灌浆不同时期共同协调淀粉合成进程。

2.3 小麦籽粒灌浆期间淀粉积累动态

由图3可知:秦麦11直、支链淀粉及总淀粉积累量变化趋势一致,均呈“S ”型变化曲线,花后5~10d 淀粉积累量很低,增速很缓慢,花后15~25d 后淀粉积累量几乎呈线性增加趋势,25d 后增加速度又减缓,于成熟期达最大值。

2.4 小麦籽粒灌浆期间淀粉积累速率变化动态

由图4可以看出:秦麦11直、支链淀粉及总淀粉积累速率在整个灌浆期间均呈单峰曲线,花后5~10d 直、支链淀粉及总淀粉积累速率增加缓慢,花后15~25d 或30d 积累速率迅速增加,于25d 或30d 达最大值。其中,总淀粉、支链淀粉积累速率峰值在花后25d ,直链淀粉积累速率峰值在花后30d ,此结果与AG-Pase 、SSS 、SBE 酶活性在花后25d 达到最大值,GBSS 酶活性在花后30d 达到最大值结论相一致,说明,淀粉合成酶控制小麦籽粒中直、支链淀粉的合成。

2.5 淀粉合成酶基因表达、淀粉合成酶活性及淀粉积累速率相关性分析

A GPase 、G

B SS 、SS S 、SB E 4种淀粉合成酶基因表达高峰期在花后10~15d,分析花后15d 4种酶基因相对表达量与对应酶活性的相关性,结果表明,AGPase 、S SS 、SB E 基因相对表达量与对应酶活性呈极显著正相关,G B SSI 基因相对表达量与GBSS 酶活性相关性不显著(表2)。说明这几种基因共同对淀粉合成起作用。AGPase 、GBSS 、SSS 及SBE 酶活性与直、支链淀粉积累速率、总淀粉积累速率均呈极显著正相关(表3),说明这几种酶是共同对籽粒淀粉合成起作用。

50金 陵 科 技 学 院 学 报第26卷 

图2 秦麦11籽粒AGPase 、GBSS 、SSS 、SBE 酶活性变化

Fig .2 Changes of AGPase 、GBSS 、SSS 、SBE activity in Qinmai 11

grains

图3 秦麦11籽粒直、支链淀粉及总淀粉积累量变化

Fig .3 C hanges of amylose ,amylopectin and starch accumulation in Qinmai 11

grains

图4 秦麦11籽粒直、支链淀粉及总淀粉积累速率变化

Fig .4 C hanges of amylose ,amylopectin and starch accumulation rate in Qinmai 11grains

51第1期谭彩霞,等:小麦籽粒淀粉合成酶基因表达、相应酶活性及淀粉积累三者的关系 

表2 花后15d 淀粉合成酶基因与对应酶活性相关性分析

Table 2

 Correlation analysis of gene relative expression and enzymes activities at DPA 15

酶基因相对表达量

酶活性相关性A GPase

A GPase 0.8467**G

B SS I

G BSS 0.4586S SS

SSS 0.7798**SB E

SBE 0.9354**注**:相关性达到1%极显著水平。下同。表3 酶活性与淀粉积累速率的相关性分析

Table 3 Correlation analysis of starch accumulat ing rate and enzymes activities

酶活性

总淀粉积累速率直链淀粉积累速率支链淀粉积累速率AG Pase

0.6523**0.8726**0.7546**GBSS

0.7025**0.8556**0.7724**SSS

0.6879**0.8742**0.7685**SBE 0.6928**0.7954**0.7789**3 讨 论

关于淀粉合成酶基因在灌浆期的表达,Anderson 等认为A GPase 基因m RN A 量在开花后15d 达到最高水平,此后表达迅速下降[7];Zho ng yi Li 等认为SSS 基因在花后4d 开始表达,12d 达到最大值;15d 后迅速下降[8];KEN T F 等认为G B S S 和SS S 基因在花后5d 开始表达,15d 达到最大值,之后表达骤降[9]。包劲松等认为,SSS 基因表达量最早达到峰值,其次是A GPase 基因,再其次是SB E 基因,最迟达到峰值的是G B SS 基因[6]。本试验研究表明,4种淀粉合成酶基因m RN A 表达均呈单峰曲线,花后3d 不表达,花后4~5d 开始表达,花后6~12d 表达上升最快。AGPase 、S SS 基因m RN A 表达于花后12d 左右达到最大值。GB SS 、SB E 基因m RN A 表达于花后15d 左右达到最大值。18d 后4种淀粉合成酶基因m RN A 表达量均显著下降,此结果与前人结论基本一致。就具体表达时间而言,S SS 和A GPase 基因表达先到达峰值,其次是SB E 和G B S S 基因,说明4种淀粉合成酶基因在籽粒淀粉合成过程不同时期共同协调淀粉合成酶及淀粉的合成进程。

Reeves C D 等研究表明,小麦胚乳发育过程中,A GPase 基因的m RN A 量与AGPase 活性及淀粉积累速率呈正相关[10];吴洪恺等认为,G B SSI 基因主要属转录后调控[11];而孙业盈等认为,G B S SI 基因主要属转录水平和转录后水平调控[12]。本试验结果表明,在淀粉合成酶基因表达高峰期(即花后12~15d),对应酶活性几乎呈线性增加趋势。花后15d,A GPase 、SS S 、SB E 基因m RN A 相对表达量与对应酶活性呈极显著正相关,GB S SI 基因m RN A 相对表达量与GBSS 活性相关性不显著,且GBSS 酶活性到达峰值时间迟于

AGPase

、SSS 、SBE 酶。说明AGPase 、SS S 、SB E 基因可能主要通过转录水平来控制籽粒淀粉的合成,而GBSSI 基因可能主要通过转录后水平来控制籽粒淀粉的合成。

植物体内淀粉合成酶对淀粉合成的作用,国内外已有较多的研究,但对这几种酶对淀粉合成作用的大小存在较大的差异。Preiss 等认为,AGPase 是淀粉生物合成的限速酶,该酶活性的大小直接关系到淀粉合成的速率和最终淀粉合成量的多寡[13]。Nakamura 等认为AGPase 和SBE 酶是控制淀粉合成的关键酶[1]。杨建昌等认为AGPase 、GBSS 、SBE 酶在籽粒淀粉合成过程中均起重要作用[2]。姜东等认为AGPase 、

GBSS

、SSS 是淀粉合成的关键酶[3]。本试验结果表明,灌浆前中期AGPase 、SSS 、SBE 酶对淀粉合成起主要作用,灌浆中后期GBSS 酶起主要作用。说明4种淀粉合成酶在籽粒淀粉合成过程不同时期共同协调淀粉的合成进程。淀粉合成酶活性与直、支链淀粉及总淀粉积累速率均呈极显著正相关,说明淀粉合成酶基因通过编码淀粉合成酶,从而控制籽粒淀粉的合成。

52金 陵 科 技 学 院 学 报第26卷 

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-54753第1期谭彩霞,等:小麦籽粒淀粉合成酶基因表达、相应酶活性及淀粉积累三者的关系 

小麦萌发前后淀粉酶活力的比较2

实验七小麦萌发前后淀粉酶活力的比较 一、目的 1.学习分光光度计的原理和使用方法。 2.学习测定淀粉酶活力的方法。 3.了解小麦萌发前后淀粉酶活力的变化。 二、原理 种子中贮藏的碳水化合物主要以淀粉的形式存在。淀粉酶能使淀粉分解为麦芽糖。 2(C6H10O5)n+H2O-------nC12H22O11 麦芽糖有还原性,能使3,5-二硝基水杨酸还原成棕色的3-氨基5-硝基水扬酸。后者可用分光光度计法测定。 休眠种子的淀粉酶活力很弱,种子吸胀萌动后,酶活力逐渐增强,并随着发芽天数的增长而增加。 本实验观察小麦种子萌发前后淀粉酶活力的变化。 三、器材 1.25毫升刻度试管。 2.吸管。 3.试管 4.离心管。 5.分光光度计。 6.离心机。 7.恒温水浴。 8.研钵 四、试剂 1. 标准麦芽糖溶液(10umol/ml):精确称量360mg麦芽糖,pH 6.9磷酸钠0.02 摩尔/L磷酸钠(内含6.7mmol/LNaCl)缓冲液 2.pH 6.9磷酸钠0.02摩尔/L磷酸钠(内含6.7mmol/LNaCl)缓冲液 3.l%淀粉溶液:1克可溶性淀粉溶于100毫升0.02摩尔/L磷酸缓冲液,其中含有0.006摩尔/L氯化钠。 4.3,5-二硝基水杨酸试剂: 1g 3,5-二硝基水杨酸溶于20毫升2摩尔/L的氢氧化钠溶液和50毫升蒸馏水中;再加人30克酒石酸钾钠,用水定容至100毫升. 5.石英砂5克 五、操作步骤 1.种子发芽:

小麦种子浸泡2.5小时后,放人25℃恒温箱内或在室温下发芽。 2.酶液提取: 取发芽第三天或第四天的幼苗15株,放人研钵内,加石英砂 200毫克,加pH 6.9磷酸钠0.02摩尔/L 磷酸钠(内含6.7mmol/LNaCl )缓冲液10毫升,用力磨碎。在室温下放置 20分钟,搅拌几次。将提取液离心(3000转/min )6-7分钟。将上清液倒人量筒,测定酶提取液的总体积。进行酶活力测定时,将酶提取液稀释10倍。 取干燥种子或浸泡2.5小时后的种子15粒作为对照(提取步骤同上)。 3.酶活力测定: (1)取25毫升刻度试管4支。编号。按下表要求加人各试剂(各试剂须25℃预热10分钟)。 将各管混匀,放在25℃,水浴中保温3分钟后,立即向各管中加人10%3,5-二硝基水杨酸溶液2毫升。 (2)取出各试管,放人沸水浴中加热5分钟。冷至室温,加水稀释至25毫升。将各管充分混匀。 (3)用空白管作对照;在540nm 处测定各管的光吸收值,将读数填人上表。 4.计算 根据溶液的浓度与光吸收值成正比的关系,即:A 标准/A 未知=C 标准/C 未知 :则C 酶=A 酶×C 标准/A 标准 总酶活力=[C 酶 –Co ]* n * V 酶 C 酶:种子酶或是幼苗酶分解淀粉产生的麦芽糖的浓度(mg/ml ) Co:表示标准管中麦芽糖浓度 n:为酶溶液稀释的倍数 V :为提取酶液的总体积(ml )

制粉工艺对小麦粉粉质特性和糊化特性的影响

制粉工艺对小麦粉粉质特性和糊化特性的影响 在我国,小麦制粉工艺主要分传统工艺和脱皮工艺两种〔两者的区别在于后者先将小麦除麦沟以外的皮层通摩擦和切削去除,然后入磨。与传统工艺的直接入磨比较,脱皮工艺的粉路缩短,出粉率和生产率提高,但能耗增加。 改变制粉工艺会导致小麦粉的损伤淀粉含量和粒度分布等特性的变化,从而对小麦粉糊化特性也产生影响,而淀粉糊化特性是反映淀粉品质的重要指标之。研究显示,小麦粉的一些主要糊化特性,比如糊化温度、峰值粘度、保持强度、回生值等,均在一定程度上影响而包、面条、馒头等食品的外观品质和食用品质。峰值粘度表示的小麦粉粘度性状能够反映不同小麦品种的面条品质,并与不同类型面条的弹性、韧性和食用特性呈显著正相关。研究还显示,快速粘度分析仪的参数与馒头品质特性有明显的相关性,特别是用峰值粘度高的小麦粉制作的馒头感官评分高。 过去有关这两种制粉工艺的比较研究,是从不同的制粉工厂取样后分析或是通过实验磨制取样品。前者,小麦的品种、出粉率等无法控制,可比性较差;而后者虽然小麦的品种和出粉率有所保障,但与实际生产差距较大。本研究选用3种小麦(高、中、低筋各一种),利用不同工艺的制粉工厂制取样品,分析小麦粉粒度和损伤淀粉含量等粉质特性的变化情况,并使用快速枯度分析仪(Rapid Visco Analyser, RVA)研究不同制粉工艺对小麦粉糊化特性的影响。 1 材料与方法 1.1 试验材朴 小麦品种:8901(高筋)、南阳白麦(中筋)和澳大利亚白麦(低筋)。 小麦粉:由天津某面粉厂(传统工艺)和北京某面粉厂(脱皮工艺)提供,加工能力均为120 t/d。分别采用以上3种原料制取特一粉和特二粉,一共得12个小麦粉样品(控制特一粉出粉率46%,特二粉出粉率28%)。 1.2 实验方法 1.2.1 水分测定 按AACC 44-16 (AACC 1983)的方法进行测定。 1.2.2 蛋自质含虽测定 按GB/T 5511-85微量凯氏定氮法进行测定。 1.2.3 小麦粉粘度参数测定 根据AACC76-21的标准方法1,同时参考谷物粘度测定和快速粘度仪法(LS/T 6101-2002),测定小麦粉峰值粘

探索淀粉酶对淀粉和蔗糖的作用(知识资料)

Sy-5 探索淀粉酶对淀粉和蔗糖的作用 酶:是活细胞产生的一类具有生物催化作用的有机物。酶的作用具有专一性。 一、实验原理 淀粉和蔗糖都是非还原糖。它们在酶的催化作用下都能水解成还原糖。还原糖能够与斐林试剂发生氧化还原反应,生成砖红色的氧化亚铜沉淀。 用淀粉酶分别催化淀粉和蔗糖的水解反应,再用斐林试剂鉴定溶液中有无还原糖,就可以看出淀粉酶是否只能催化特定的化学反应。 证明酶的专一性。 二、目的要求 1.初步学会探索酶催化特定化学反应的方法。 2.探索淀粉酶是否只能催化特定的化学反应。 三、重点与难点 1.重点 ①初步学会探索酶催化特定化学反应的方法--探索酶的特性之一(酶的专一性)的方法。 ②探索淀粉酶是否只能催化淀粉的反应。 2.难点 ①学会探索实验的设计方法和探索方法。 ②让学生学会探索实验的方法,培养学生独立实验能力和创新思维能力。 四、材料用具 质量分数为2%的新鲜的淀粉酶溶液。 试管,大烧杯,量筒,滴管,温度计,试管夹,三脚架,石棉网,酒精灯,火柴。 质量分数为3%的可溶性淀粉溶液,质量分数为3%的蔗糖溶液,斐林试剂,热水。 五、方法步骤(录象观察) 1.取材 2.实验过程 3.结论 序号项目试管 1 2 1 注入可溶性淀粉溶液2mL \ 2 注入蔗糖溶液\ 2mL 3 注入新鲜的淀粉酶溶液2mL 2mL

结论: 1号试管中出现砖红色沉淀,2号管无颜色变化。淀粉酶只能把淀粉水解成麦芽糖,不能水解蔗糖。验证了酶的专一性。 (1)做好本实验的关键是蔗糖的纯度和新鲜程度。这是因为蔗糖是非还原性糖,如果其中混有少量的葡萄糖或果糖,或蔗糖放置久了受细菌作用部分分解成单糖,则与斐林试剂共热时能生成砖红色沉淀,使人产生错觉。为了确保实验的成功,实验之前应先检验一下蔗糖的纯度。普通的细粒蔗糖往往由于部分水解而具有一些还原糖。可用市售大块冰糖,水洗去其表面葡萄糖得到纯净的蔗糖。 (2)实验中要将试管的下半部浸到37℃的温水中,因为淀粉酶在适宜的温度条件下催化能力最强。 (3)在实验中,质量分数为3%的蔗糖溶液要现配现用(以免被细菌污染变质),取唾液时一定要用清水漱口,以免食物残渣进入唾液中。 (4)制备的可溶性淀粉溶液,一定要完全冷却后才能使用,因为温度过高会使酶活性降低,甚至失去催化能力。 (5)实验中如果2号试管也产生了砖红色沉淀,可能的原因是: 蔗糖溶液放置的时间过长,蔗糖溶液中的微生物分解成还原性糖,从而影响实验效果。这时应临时配制蔗糖溶液。 另一个可能的原因是试管不干净,所以实验之前应将试管用清水再清洗一次,试管编号要醒目。 (6)实验步骤一定要按要求的程序进行,不可随意改变。 (7)如果实验中,自己的实验结果与理论上的预期结果不一致,应再设计实验,进行进一步的验证或找出问题所在。 Ⅲ实验理论 本实验是探索类实验。主要目的是通过研究淀粉酶对淀粉和蔗糖的水解作用是否都具有催化作用,探索酶催化化学反应的特点。本实验给我们的重要启示是:设计实验时,首先要从已知人手,确定何为实验变量(自变量),何为因变量,何为控制变量。 本实验的已知条件为题目,即“探索淀粉酶对淀粉和蔗糖的作用”。 从题目可知: ①淀粉、蔗糖水解的产物,水解的速率等变化的结果,即因变量。从因变量入手我们将推知自变量(实验变量)对其的影响程度或它们之间的关系。 ②淀粉、蔗糖在实验过程中的浓度、用量、淀粉酶的浓度、用量、水解过程的温度等都为控制变量,需遵循同时等量原则,以排除控制变量对2个水解反应的影响。 ③淀粉酶本身是实验变量。通过研究确定其分别对淀粉水解作用和蔗糖水解作用的影响。 在以上分析的基础上,再安排淀粉、蔗糖、水、淀粉酶、温度、酸碱度等各变量的“出场”顺序,想必会容易许多。 Ⅳ随堂演练 1.下列关于酶的叙述,不正确的是() A.酶的催化效率很高 B.酶是具有催化功能的蛋白质

高直链淀粉玉米的应用前景及展望

高直链淀粉玉米的应用前景及展望 【摘要】高直链淀粉含有较高的直链淀粉比例,具有快速凝胶、高凝胶强度和硬度,以及高结构稳定性等特点。高直链玉米淀粉是制备抗性淀粉的最佳原料,并且具有特别优良的成膜特性。在我国,由于缺少高直链玉米品种,限制了对高直链玉米淀粉的研究。近年来,国内对高直链淀粉的育种工作取得了突破性进展,已选育出高直链玉米品种。抓住这个时机,开展对高直链淀粉的研究,具有十分深远的意义。 【关键词】高直链淀粉玉米;应用前景;展望 高直链淀粉玉米是指玉米淀粉中直链淀粉含量在50%以上的特用型玉米。直链淀粉是由葡萄糖通过a-1,4键连接在一起的聚合物,其它一些植物的直链淀粉通常都有很高的聚合物,而玉米的直链淀粉却不易凝结和形成结晶。它的悬浮液在加热时不产生糊精,而以胶体溶解,形成黏度较低的不稳定溶液,与碘有较高的亲和力。纯化的直链淀粉能被聚合成类似纤维素的纤维。 1.高直链淀粉玉米研究的兴起 世界上只有美国将含有ae基因的玉米杂交种商业化,含du,su2基因的杂交种也进入了示范阶段,目前已经培育出直链淀粉含量达100%的玉米。在我国,它的农业品种、工业加工利用都属空白。日前,我国所需的直链淀粉主要依赖进口,而且价格昂贵,是普通玉米的16倍,约2000-2500美元/t,每年花去大量外汇,因此非常有必要培育高直链淀粉玉米自交系和杂交种的工作。在分析鉴定了国家种质资源库长期保存的玉米种质资料材料后,发现我国的玉米种质材料中高淀粉资料非常稀少,特别是缺少高直链淀粉材料。但我国的一些育种单位已经引进了一些高直链淀粉玉米种质资源,并开展了前期的探索性研究,为我国高直链淀粉玉米育种及产业化开发奠定了一定基础。 普通玉米籽粒的淀粉一般含有27%左右的直链淀粉和73%的支链淀粉。高直链淀粉玉米是指籽粒直链淀粉含量在60%以上的玉米类型。自20世纪70年代以来,商业化的高直链淀粉玉米杂交种有两种类型,即直链淀粉含量在50%以上的V型和直链淀粉含量为70%-80%的VII型。 直链淀粉玉米受隐性ae基因(直链淀粉扩充者)的控制,可将籽粒中直链淀粉的含量提高到55%-60%。直链淀粉在轻工业(如薄膜、涂料、粘合剂等)、食品工业、制药业、工业上生产照相胶卷和电影胶片等方面起着重要作用。例如:直链淀粉具有近似纤维的性能,用直链淀粉制成的薄膜,具有良好的透明度、柔韧性、抗张强度和水不溶性,并且无毒、无污染,广泛应用于密封材料、包装材料和耐水耐压材料。此外,高直链淀粉还是生产光解地膜的重要原料。由于直链淀粉的特殊作用,高直接淀粉玉米在工业品市场上占有较稳定的地位。高直链淀粉玉米的研究和开发具有重要的意义。

直链淀粉含量检测试剂盒说明书 微量法

直链淀粉含量检测试剂盒说明书微量法 注意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。 货号:BC4265 规格:100T/96S 产品简介: 直链淀粉是D-葡萄糖基以α-(1,4)糖苷键链接的多糖链,直链淀粉含量影响着食品的食用品质和外观品质,与食品安全息息相关。 直链淀粉和碘形成蓝色络合物,利用乙醇分开样品中的可溶性糖和淀粉,再用碘与其反应得到直链淀粉含量。 试验中所需的仪器和试剂: 可见分光光度计/酶标仪、天平、台式离心机、微量玻璃比色皿/96孔板、可调式移液枪、研钵/匀浆器、乙醚、无水乙醇、EP管。 产品内容: 试剂一:液体110mL×1瓶,4℃保存; 试剂二:乙醚100mL×1瓶,自备; 试剂三:液体55mL×1瓶,4℃保存; O=9mL:91mL混匀,现用现配,4℃保存半年。 试剂四:将试剂三:H 2 试剂五:液体0.5mL×1支,4℃保存; 粉剂一:粉剂×1瓶,4℃保存; 粉剂二:粉剂×1瓶,4℃保存; 试剂六的配制:将粉剂一倒入粉剂二,用蒸馏水定容至10mL,4℃避光保存一个月。 标准品:10mg直链淀粉×1支,4℃避光保存。临用前加入0.1mL无水乙醇和0.9mL试剂三,混匀后封口膜封口,沸水浴至溶解,即10mg/mL的直链淀粉。吸取0.1mL加入0.9mL蒸馏水配制为1mg/mL的标准溶液待用。 操作步骤:

一、直链淀粉的提取: 称取0.005g烘干样本于研钵中研碎,加入1mL试剂一,充分匀浆后转移到EP管中,80℃水浴提取30min,3000g,25℃离心5min,弃上清,留沉淀,加入1mL试剂二(乙醚)振荡5min,3000g,25℃离心5min,弃上清,留沉淀,加入5mL试剂四充分溶解,90℃水浴10min,冷却后3000g,25℃离心5min,取上清待测。 二、测定步骤: 1、分光光度计/酶标仪预热30min以上,调节双波长至550nm和485nm,蒸馏水调零。 2、将1mg/mL标准液用试剂四稀释为0.4mg/mL的标准溶液备用。 3、操作表:(在1.5mL离心管或96孔板中依次加入下列试剂) 测定管标准管空白管样品(μL)20--标准溶液(μL)-20- 蒸馏水(μL)--20 试剂五(μL)444 试剂六(μL)444 蒸馏水(μL)172172172 充分混匀,测定550nm和485nm处的吸光值,550nm下的测定管、标准管、空白管分别记为A测定、A标准和A空白,485nm下的分别记为A’测定、A’标准和A’空白,计算△A测定=(A测定-A空白)-(A’测定-A’空白),△A标准=(A标准-A空白)-(A’标准-A’空白)。 直链淀粉含量计算: 直链淀粉含量(mg/g样本)=△A测定÷(△A标准÷C标准)×V样总÷W=2×△A测定÷△A标准÷W。 C标准:标准溶液浓度,0.4mg/mL;V样总:加入试剂四体积,5mL;W:样本质量,g。 注意事项 1、反应后建议在20min内检测完成防止褪色。 2、若A测定大于1,建议样本上清用试剂四稀释后再进行测定;若A测定低于0.05时,可以提取 时减少试剂四体积进行测定。

小麦中的淀粉酶及其研究进展

小麦中的淀粉酶及其研究进展 摘要:从各个方面来研究了小麦中淀粉酶的功能作用以及它的作用机理,通过研究可知,小麦中的а-淀粉酶和β-淀粉酶对食品的品质的影响起着重要的作用。并通过国内外的研究进展来进一步说明小麦中淀粉酶的研究是很有必要的。最后提到了淀粉酶的添加来弥补某些淀粉酶不足以满足食品加工的小麦。本文主要从小麦中的淀粉酶研究意义,国内外小麦中的淀粉酶的研究近况以及未来的发展方向进行了较为全面的综述。 关键词:小麦;淀粉酶;研究进展 在活细胞中进行着大量的化学反应的特点是速度很快,且能有秩序的进行,从而使得细胞同时能进行各种降解代谢及合成代谢,以满足生命活动的需要。生物细胞之所以能够在常温常压下以极高的速度和很大的专一性进行化学反应是由于其中存在一种称为“酶”的生物催化剂。而在小麦的生长,储存,加工等环节中,其中存在的酶就具有非常重要的作用,小麦中的酶会影响着小麦的储存,加工等品质。小麦粉中的淀粉酶主要有3类,即а-淀粉酶,β-淀粉酶和葡萄糖淀粉酶。其中与面包烘焙有关的主要是а-淀粉酶和β-淀粉酶,而且а-淀粉酶与小麦的储藏品质也有着极其密切的关系。所以对小麦中的淀粉酶进行研究是十分有必要的。 1.研究小麦中的淀粉酶的意义 小麦中的淀粉酶主要有а-淀粉酶,β-淀粉酶和葡萄糖淀粉酶这三类。面粉有很多用途,可以制成各种不同的成品食品。而面粉大多数都是小麦面粉,可见要研究面粉就的研究小麦,并且小麦中的а-淀粉酶,β-淀粉酶与面包烘焙有关,而且а-淀粉酶与小麦的储藏品质也有着极其密切的关系。所以研究小麦中的淀粉酶是非常有意义的。通过研究可以更好地把握不同小麦品种的淀粉酶的性质,来改善淀粉酶,从而来改进食品品质。 1.1小麦中的а-淀粉酶对面包品质的影响 大量的研究已证实,由于淀粉酶在发酵过程中对淀粉分子进行了有益的修饰,进而改善了面包的质地、体积、颜色、货架寿命等方面的性质,具体影响如下[1,2]: 1.1.1 а-淀粉酶对面包品质的影响 ○1а-淀粉酶能增大面包体积。а-淀粉酶是通过适当阻止面筋的形成来使面包体积增加的,

高直链淀粉和物理修饰淀粉的回生特性

高直链大米淀粉和物理改性淀粉的回生特性 摘要 一个新的物理改性应用于防止米粉和米淀粉的回生的影响。本实验研究水稻面粉或大米在多次搅拌和加热–搅拌时淀粉糊回生特性,或无。结果表明,高直链大米淀粉和米淀粉均不受多次搅拌的影响而修改实质。然而,多次搅拌加热处理对延缓高直链大米淀粉回生影响显著,但没有孤立的大米淀粉的影响。在差示扫描量热法(DSC)分析,多次搅拌加热表现出最低的回生焓值(3.04 J / g干重)相比,控制射频(5.93 J / g干物质)和多次搅拌(5.08J/克干物质)。同时,通过X射线衍射几乎不再重结晶(XRD)。它还通过扫描电子显微镜(SEM),发现这种改性糯米粉的颗粒结构有更多的蜂窝状结构,结晶度相比其他的是最低的。 1.绪论 水稻是世界主要粮食作物,超过50%的世界人口以稻米作为主要能量源(粮农组织,2001)。尤其是在东方国家大米是主食产品,还有大部分产品是由米粉做成的。在即时食品市场,由新鲜米饭做成的产品有饭粒,米粉,米饼和米饭等等,面食有深刻的商业潜力。近年来,水稻面粉已越来越多地用于新的食物如玉米饼,饮料,加工过的肉类,糕点,面包,沙拉酱和无麸质面包,由于其独特的功能特性,如低过敏性,无色乏味(Kadan & Ziegler, 1989; Kadan, Robinson, Thibodeux, & Pepperman, 2001; McCue, 1997)。 然而,米粉产品会变硬,而它们的质地和味道也会随时间下降。这种现象通常被称为“退化”,从而通过再结晶提高抗酶解淀粉的水平(Englyst, Kingman,& Cummings, 1992)。老化是糊化淀粉在冷却过程中的分子的重结晶,这意味着在这种情况下支链淀粉可以完全可逆的再结晶和部分不可逆的直链淀粉也可以再结晶(Bjo¨ ck, 1996)。因此,需要研究可以延长保质期或使用米粉有效需要有效的延缓淀粉回生的技术。 传统方法是通过化学改性来防止淀粉的回生。然而,经常使用的可疑的化学品将在我们的健康意识的期间禁止。此外,添加一个或多个酶在烹调或淀粉蒸煮后的产品,它可以通过酶的作用,防止老化(Martin &Hoseney,1991;Yao, Zhang,&Ding, 2003)。遗憾的是,这些产品最终失去他们的韧性和适当的咀嚼,和他们的味觉受损。由于分解反应是从表面先后向内部的,因此其表面变得过软。虽然淀粉产品在贮藏过程中的质量损失也可以通过添加剂如已知的海藻糖抵消,亲水胶体(Funami, Kataoka, Omoto, Goto, Asai, &Nishinari, 2005; Lee, Baek, Cha, Park, & Lim, 2002),乳化剂或表面活性剂(Ghiasi, Varriano-Marston,&Hoseney, 1982; Harbitz,1983; Krog, 1981; Rao, Nussinovitch, & Chinachoti, 1992),,和其他材料,这些材料比较昂贵或效果不理想。 淀粉的物理改性主要是用来改变其颗粒结构和转换为冷的水溶性淀粉或淀粉的小的微晶淀粉。这种方法没有任何化学物质或生物制剂,以满足这些要求。因此,需要开发一种新型的物理改性以防止在大米面粉淀粉回生。同时也要看到,米粉和米淀粉的不同系统。因此,本研究的目的是通过物理改性米粉(RF)和大米淀粉(RS)来比较其老化性能。利用差示扫描量热法(DSC),X射线衍射(XRD),扫描电子显微镜(SEM)来研究了这种改性效果。2.材料和方法 2.1米粉 刚收获的高直链淀粉 (Juliano, 1982)水稻在当地市场购买。水稻精米面粉使用机械研磨。面粉样本筛选通过100目筛,装在密封的塑料袋,并在室温下存储为进一步使用。米粉含有淀粉(75克/ 100克),蛋白质(8.1克/ 100克),脂肪(1.1克/ 100克),水(14.2克/ 100

实验九、小麦萌发前后淀粉酶活力的比较

实验九、小麦萌发前后淀粉酶活力的比较 一、目的 1.学习分光光度计的原理和使用方法。 2.学习测定淀粉酶活力的方法。 3.了解小麦萌发前后淀粉酶活力的变化。 二、原理 种子中贮藏的碳水化合物主要以淀粉的形式存在。淀粉酶能使淀粉分解为麦芽糖。 2(C6H10O5)n+H2O-------nC12H22O11 麦芽糖有还原性,能使3,5-二硝基水杨酸还原成棕色的3-氨基5-硝基水扬 酸。后者可用分光光度计法测定。 休眠种子的淀粉酶活力很弱,种子吸胀萌动后,酶活力逐渐增强,并随着发芽天数的增长而增加。 本实验观察小麦种子萌发前后淀粉酶活力的变化。 三、器材 1.25毫升刻度试管。 2.吸管。 3.乳体。 4.离心机和离心管。 5.分光光度计。 6.恒温水浴。 7、容量瓶50ml 8、电磁炉 四、试剂 1. 0.1%标准麦芽糖溶液20毫升:精确称量100毫克麦芽糖,用少量水溶解后,移入100ml 容量瓶中,加蒸馏水至刻度。 2.pH 6.9,0.02摩尔/L磷酸缓冲液100毫升 3.l%淀粉溶液100毫升:1克可溶性淀粉溶于100毫升0.02摩尔/L磷酸缓冲液,其中含有0.006摩尔/L氯化钠。 4.l%3,5-二硝基水杨酸试剂: 1g 3,5-二硝基水杨酸溶于20毫升2摩尔/L的氢氧化钠溶液和50毫升水中;再加人30克酒石酸钾钠,定客至100毫升。若溶液混浊,可过滤。 5.l%氯化钠溶液300毫升 6.海砂5克 五、操作步骤 1.种子发芽:(如果是绿豆芽,则只需要24就可以) 小麦种子浸泡2.5小时后,放人25℃恒温箱内或在室温下发芽。 2.酶液提取: 取发芽第三天或第四天的幼苗(芽长 约1cm)15株,放人乳钵内,加海砂200 毫克,加1%氯化钠溶液10毫升,用力 磨碎。将匀浆倒入离心管中,用5mL1%氯 化钠溶液分次将残渣洗入离心管。提取液 在室温下放置提取15~20min,每隔数分 钟搅1次,使其充分提取。然后在

面条淀粉含量高吗

面条淀粉含量高吗 面条是北方人的主食,各种各样的面条深受人们的喜爱。面条主要是有面粉组成的,而面粉中是含有淀粉的,给身体补充淀粉对健康非常有好处,能起到减肥瘦身、调节血糖、防止心脑血管疾病等作用,所以很多人愿意多吃淀粉。那么,面条淀粉含量高吗?下面咱们就来看看吧。 面条的淀粉含量比较高。 营养价值 面条的主要营养成分有蛋白质、脂肪、碳水化合物等;面条易于消化吸收,有改善贫血、增强免疫力、平衡营养吸收等功效。 适用人群 病湿热者忌食面条。 用法用量 1、新鲜切面不宜存放时间过长,以免营养成分受损; 2、买来的切面有时碱味很重,在面条快煮好的时候,加入几滴醋,可以使面条碱味全消,面条的颜色也会由黄变白。 3、就品种来说,常吃的有汤面条,捞面条、卤面条、炒面条、炯面条、蒸面条、烩面条、拉面条等。从形状上说,有一厘米宽的宽面、窄如韭叶的窄面、细如发丝的龙须面,也有菱形的面叶儿、绵长不规则的面片等。从味道上说,有淡味、咸味、辣味、酸味等。 食用功效

面条易于消化吸收,有改善贫血、增强免疫力、平衡营养吸收等功效。 贴士 1、新鲜面条有切面、揪面和拉面等。切面的主要营养成分是蛋白质、脂肪、碳水化合物、膳食纤维等。一般市售的新鲜切面都是机制的,其味道和口感比挂面要好,但很多人还是喜欢吃手擀面; 2、面条的制作方法,因季节的更替不断变化; 3、冬季天气寒冷,人们多吃汤面条、拉面条、烩面条,里面放些干菜、酸菜或新鲜青菜。有些地方的人爱吃清水面条,有些地方的人常在面条汤内搅入面糊,这种带糊的面条,人们俗称为“糊汤面条”; 4、夏季人们多吃捞面条,面条煮熟后捞出,放在凉水或阴阳水(开水掺凉水)中拔一下,拌以蒜汁、苋菜、荆芥和黄瓜丝,吃时清凉利口,防暑降温; 5、春秋季人们多吃卤面、炯面等。到了蒜苔和豆角收获的季节,家家户户都喜欢用蒜苔和豆角做卤面。因为这些菜是做卤面的固定菜,所以蒜苔和豆角上市的时候,也是人们吃面条最多的时候,平时三两天里最少要吃一顿卤面。

小麦粉国家实用标准GB

小麦粉国家标准(2006-11-08) 2006年11月08日 《小麦粉》 (国家标准讨论稿) 前言 本标准为强制性标准。 本标准是对GB 1355—1986《小麦粉》、GB/T 8607—1988《高筋小麦粉》、GB/T8608—1988《低筋小麦粉》、《专用小麦粉》LS/T3201~3208-1993的修订与合并。 本标准与GB 1355—1986的主要技术差异如下: 本标准的结构、编写规则及规性技术要素按GB/T 1.1—2000《标准化工作导则第1部分:标准的结构和编写规则》及GB/T 1.2—2002《标准化工作导则第2部分:标准中规性技术要素容的确定方法》进行修改; 根据小麦粉的加工工艺和用途,对其进行了分类和定等。 新增容: 增加了术语和定义; 增加了表示面筋质量的指标─面筋指数; 增加了检验规则、判定规则。 增加了对标志、标签的要求。 本标准参照国际食品法典委员会(CAC)的标准Codexstan 152—1985《小麦

粉》(修订版1—1995)和欧盟关于添加剂的有关规定,制定了添加剂限制条目,修改了小麦粉脂肪酸值指标。 本标准由国家粮食局提出并归口。 本标准起草单位:国家粮食局标准质量中心、国家粮油质量监督检验中心。 本标准主要起草人: 本标准所代替标准的历次版本发布情况为: GB 1355-1978、GB 1355-1986。 小麦粉 1.围 本标准规定了小麦粉的质量要求、实验方法、检验规则、标志标签、包装、运输及储存。 本标准适用于以各类小麦为原料加工的小麦粉。 2.规性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件,其随后所有的修改单(不包括勘误的容)或修订版均不适用于本标准,然而,鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件,其最新版本适用于本标准。 GB 2715 粮食卫生标准 GB 5491粮食、油料检验扦样、分样法 GB/T 5492粮食、油料检验色泽、气味、口味鉴定法 GB/T 5497粮食、油料检验水分测定法 GB/T 5504粮食、油料检验小麦粉加工精度检验法

直链淀粉含量分析仪测定绿豆中的直链淀粉含量

直链淀粉含量分析仪测定绿豆中的直链淀粉含量 绿豆淀粉具有热粘度高,凝胶强度弱,凝胶透明度大等优良性能,因此是制作粉丝、粉皮、绿豆馅等的良好原料。近年来,借助直链淀粉含量分析仪测定绿豆中的直链淀粉含量,结果发现绿豆淀粉中直链淀粉占粗淀粉近60%,可溶性直链淀粉占粗淀粉的36-37%。而不溶性直链淀粉、支链淀粉含量均低于豌豆、豇豆。 由于绿豆直链淀粉含量高,其淀粉结晶区多,淀粉粒难于糊化,而糊化的绿豆淀粉又易于老化,其老化主要由分子间羟基数量决定。糊化的直链淀粉在冷却过程中,无规则排列的分子能自动平行排列而形成溶解度低的聚集体,使淀粉糊的韧性增大。因此绿豆淀粉具有较强的成膜性及膜强度。 而粉丝作为我国的传统食品是一种淀粉凝胶产品,它是经过淀粉糊化、成型、凝沉、干燥而成。因此借助直链淀粉含量分析仪测定绿豆中的直链淀粉含量,可以帮助提高粉丝的食味品质。 直链淀粉含量分析仪简称粉含量测定仪、淀粉分析仪,又名直链链淀粉检测仪,DPCZ-II淀粉含量测定仪由直链淀粉测定仪、计算机检测系统组成,具有灵敏度高,稳定性好,自动化程度高,检测速度较快等优点。 托普云农DPCZ-I型稻谷品质快速检测装置的直链淀粉检测单元部分设计的高灵敏度和稳定性能,测定直链淀粉时,采用脱脂和不脱脂预处理,均能保证检测精度。美国ALPKEM公司的FS-IV化学自动分析仪是1996年ALPKEM公司推出

的世界上先进的第六代产品,该新型流动分析系统针对中国水稻行业分析测试的需要,可实现直链淀粉的测定,分析方法符合中国国家标准,但价格昂贵,到岸价4.9万美元。DPCZ-I型稻谷品质快速检测装置的直链淀粉检测单元和FS-IV 化学自动分析仪进行了对比试验,两种仪器均采用不脱脂的前处理工艺,测定大米直链淀粉含量的最大偏差为0.725%,满足了测定准确度的要求。该装置对国产优质大米和进口泰国香米均进行了测定,测定结果表明,DPCZ-I型稻谷品质快速检测装置不仅可以用来测试分析国产优质大米的品质,也可用来测试和评价进口大米的品质。 直链淀粉含量分析仪|淀粉含量测定仪|淀粉分析仪功能特性: 农业部谷物品质监督检验测试中心,国家分析仪器质量监督检验中心分别对DPCZ-I型稻谷品质快速检测装置直链淀粉单元进行了技术测试,测试结果均满足技术要求。 DPCZ-Ⅱ型直链淀粉测定仪在DPCZ-I型稻谷品质快速检测装置直链淀粉检测单元的基础上并且保留其优点和性能,吸取分析仪器专用化、微型化、接口通用化的思想设计研制,集计算机技术、分光光度技术于一体的快速、在线检测仪器,可用于大米,玉米,小麦等谷物的直链淀粉品质的快速、在线检测。灵敏度高,稳定性好,自动化程度高,检测速度较快,重复方便使用,性能价格比高等特点,是粮食部门和食品生产部门提高检测水平与效率,控制粮食质量与成本,减少浪费的先进技术手段 DPCZ-Ⅱ型直链淀粉测定仪由计算机(奔腾3以上配置)和直链淀粉测定仪组成。计算机通过RS-232通讯端口与备有专用接口的直链淀粉测定仪连接实现数据的自动采集和传输。整个系统由直链淀粉测定仪系统软件控制。 直链淀粉含量分析仪|淀粉含量测定仪|淀粉分析仪技术参数: 检测品种:大米、玉米、小麦等农作物 检测参数:直链淀粉含量 单位:% 操作系统:Windows 98/2000/ME/XP 测量时间:约1分钟 电源电压:220±1V 温度: 20℃~30℃ 其他作物品质仪器:凯氏定氮仪、消化炉、脂肪测定仪、粗脂肪测定仪、粗纤维测定仪、精米机、智能百度仪、降落值测定仪

萌发小麦种子中淀粉酶酶学性质研究解析

萌发小麦种子中淀粉酶酶学性质研究(东北农业大学,生命科学学院,黑龙江省哈尔滨市 150030) 摘要: 酶是酶是一种生物催化剂,它具有催化剂属性,同是也具有一些无机催化剂所不具有的特性。催化特定化学反应的蛋白质、RNA或其复合体。是生物催化剂,能通过降低反应的活化能加快反应速度,但不改变反应的平衡点。本实验通过利用淀粉酶水解还原糖,还原糖能使3,5-二硝基水杨酸还原,生成棕色的3-氨基-5硝基水杨酸。淀粉酶活力与还原糖的量成正比,用比色法测定淀粉酶作用于淀粉后生成的还原糖的量,以单位质量样品在一定时间内生成还原糖的量表示酶活力。以淀粉在碘液中显蓝色性质,探究酶活性影响因素,常见的影响因素有:温度 pH 活性剂和抑制剂等。 Abstract:Enzyme is a biological catalyst is an enzyme, the catalyst having the property, the same also has some inorganic catalysts do not have the characteristics. Proteins catalyze specific chemical reactions,RNA or a composite thereof. Are biological catalysts,by reducing the activation energy of the reaction to accelerate the reaction rate, but does not change the equilibrium reaction. In this study, the use of enzymatic hydrolysis of starch sugar, sugar makes 3,5-dinitrosalicylic acid reduction ,a brown 3-amino-nitro-salicylic acid.Proportional to the amount of amylase activity and reducing sugars,measuring the amount of amylase in starch sugar produced by colorimetry ,a unit mass of the sample at the certain time. 关键词: 淀粉酶活性温度 PH 激活剂和抑制剂 引言: 新陈代谢是生命活动的基础,是生命活动最重要的特征。而构成新陈代谢的许多复杂而有规律的物质变化与能量变化,都是在酶催化下进行的。生物的生长发育、繁殖、遗传、运动、神经传导等生命活动都与酶的催化过程紧密相关,可以说,没有酶的参与,生命活动一刻也不能进行。酶是细胞产生的,受多种因素调节控制的具有催化能力的生物催化剂,与一般催化剂比较有以下不同点:酶易失活、酶具有很高的催化效率、酶具有高度专一性、酶活性受到调节和控制。而调节和控制又包括调节酶浓度、抑制剂和激活剂的调节等。[1] 按照淀粉酶水解淀粉的作用方式,可以分为α-淀粉酶、β-淀粉酶、异淀粉酶和麦芽糖酶四种类型。实验证明,当谷类种子萌发时,两类淀粉酶(α,β型)都存在,淀粉酶总酶活性随种子萌发将升高,有利于淀粉被降解为植物生长发育所需的葡萄糖。许多微生物包括

生粉是面粉吗

生粉是面粉吗 生粉是面粉吗,对这个问题也是很多人不清楚的,面粉是很常见的,面粉可以制作饺子、面条、饼、馒头,面粉的应用也是比较多,所以在对面粉选择上,也是可以放心进行,那生粉呢,生粉的应用也是比较多,但是它不能直接的制作成食物,所以他们俩是不一样的,他们不能随意乱用。 那生粉是面粉吗,他们也是不同的,对它们选择也是要进行注意,下面就详细的介绍下它们之间区别,这样对使用的时候,也是可以放心使用,不会损害到自身健康。 生粉是面粉吗: 淀粉和面粉的区别: 1、性质, 面粉是小麦或者其他谷物脱皮后直接拈磨成的粉末;淀粉则是从面粉中分离蛋白质和其他物质后得到的一种多糖物质,它不溶于水,在热水中会吸水膨胀而变成具有粘性的半透明胶体溶液。 2、成分, 面粉富含蛋白质、脂肪、碳水化合物和膳食纤维,性味甘凉,有养心益肾、健脾厚肠、除热止渴的功效;淀粉是面粉中的一部分,主要成分是80%以上的碳水化合物和百分之十几的水分。 3、外观, 面粉相对于淀粉来看,偏微黄;淀粉非常的洁白,色泽上更纯。 4、手感,

用手指头蘸一点面粉,再揉搓的话,很光滑;而淀粉会有涩涩的感觉,手搓淀粉的感觉和搓代藕粉的手指感觉很相近。搓动的时候,有点儿筋斗的感觉。 5、烹饪, 面粉主要用来做馒头和做油炸(油条、里脊、肯得基炸翅膀等等);淀粉一般用来做汤,用淀粉作出的汤,如紫菜蛋花汤,清澈而有有粘滑,口感和视觉都很好。 6、作用, 淀粉有较强的胶化作用,在烹调时挂在食物表面,可以保护里面的食物的营养和味道;面粉中因为有蛋白质,起不到保护的作用。 7、用途, 面粉用途更广,除了可以勾芡之外,还可以用来做苗条、馒头、面包等多种食物;而淀粉相对来讲,用途比较局限。 通过以上介绍,对生粉是面粉吗,也是有着一些了解,对他们之间的用途和营养区别,以上也是有着详细介绍,所以在对它们选择的时候,也是要注意要适当进行选择,这样对身体各方面,才不会有任何损害,可以放心使用。

糊化和老化

简述淀粉老化的原因,如何控制淀粉的老化? 日常生活中凉的馒头、米饭放置一段时间后会变得硬和干缩;凉粉变得硬而不透明;年糕等糯米制品粘糯性变差,这些都是淀粉的老化所致。 含淀粉的粮食经加工成熟,是将淀粉糊化,而糊化了的淀粉在室温或低于室温的条件下慢慢地冷却,经过一段时间,变得不透明,甚至凝结沉淀,这种现象称为淀粉的老化,俗称"淀粉的返生"。文档来自于网络搜索 "老化"是"糊化"的逆过程,"老化"过程的实质是:在糊化过程中,已经溶解膨胀的淀粉分子重新排列组合,形成一种类似天然淀粉结构的物质。值得注意的是:淀粉老化的过程是不可逆的,比如生米煮成熟饭后,不可能再恢复成原来的生米。老化后的淀粉,不仅口感变差,消化吸收率也随之降低。米煮成熟饭后,不可能再恢复成原来的生米。老化后的淀粉,不仅口感变差,消化吸收率也随之降低。文档来自于网络搜索 淀粉的老化首先与淀粉的组成密切相关,含直链淀粉多的淀粉易老化,不易糊化;含支链淀粉多的淀粉易糊化不易老化。玉米淀粉、小麦淀粉易老化,糯米淀粉老化速度缓慢。文档来自于网络搜索 食物中淀粉含水量30%~60%时易老化;含水量小于10%时不易老化。面包含水30%~40%,馒头含水44%,米饭含水60%~70%,它们的含水量都在淀粉易发生老化反应的范围内,冷却后容易发生返生现象。食物的贮存温度也与淀粉老化的速度有关,一般淀粉变性老化最适宜的温度是2~10℃,贮存温度高于60℃或低于-20℃时都不会发生淀粉的老化现象。文档来自于网络搜索 烹调中还采用降低水分含量和低温贮藏淀粉制品的办法延缓和阻止淀粉的老化。需贮存的馒头、面包、凉粉、米饭等,不宜存放在冰箱保鲜室。因为保鲜室的温度恰好是淀粉变性老化最适宜的温度,最好把它们放入冷冻室速冻起来,就可以阻止这些食品中淀粉的老化,使之仍保持糊化后的α-型状态。加热后再食用口感如初、香馨松软。食品工业中将刚刚糊化的淀粉迅速骤冷脱水,或在80℃以上迅速脱水制作方便面、方便粥,这种食品吃时再复水贮存时不会发生老化现象。文档来自于网络搜索 利用淀粉加热糊化、冷却又老化的原理,可制作粉丝、粉皮、龙虾片等食品,选用含直链淀粉多的绿豆淀粉,糊化后使它在4℃左右冷却,促使老化发生。老化后随即干燥,可制得成品。文档来自于网络搜索 正常的食品生产和烹调,都不希望淀粉老化,因此人们研制出许多阻止和延缓老化的办法。例如向淀粉中添加糖、盐、蛋白质、脂肪、抗老化剂以及适应食品工业生需要,用各种工业方法制出的性能不同的多种改性淀粉,这些改性淀粉的出现也为烹调事业的发展提供了新型的原料。文档来自于网络搜索 烹调中利用加热的方法,能使食品中老化的淀粉发生一些逆转,这是由于热能加上水的润滑作用。使淀粉是加热绝不能使已老化的淀粉恢复成原来的型淀粉状态。文档来自于网络搜索 方便面是如何利用淀粉糊化与老化的温度与水份条件制作并保存的?

双波长法测淀粉含量

附录4 直链淀粉和支链淀粉的测定(双波长法) 1、目的 淀粉一般都是直链淀粉和支链淀粉的混合物。直链淀粉和支链淀粉含量和比例因植物种类而不同,决定着谷物种子的出粉率和食物品质,并影响着谷物的贮藏加工。通过本实验学习掌握双波长测定谷物中直链淀粉和支链淀粉的含量。 2、原理 根据双波长比色原理,如果溶液中某溶质在两个波长下均有吸收,则两个波长的吸收差值与溶质浓度成正比。 直链淀粉与碘作用产生纯蓝色,支链淀粉与碘作用产生紫红色。如果用两种淀粉的标准溶液与碘反应,然后在同一个坐标系里进行扫描或做吸收曲线,即可达到实验目的。 3、仪器、试剂和材料 1、仪器 (1)电子分析天平 (2)分光光度计1台 (3)ph计 (4)容量瓶100mlx2,50mlx16 (5)吸管0.5mlx1,2mlx1,5mlx1 2、试剂 (1)乙醚 (2)无水乙醇 (3)0.5mol/LKOH溶液 (4)0.1mol/LHCL溶液 (5)碘试剂:称取碘化钾2.0g,溶于少量蒸馏水,在加碘0.2g,待溶解后用蒸馏水稀释定容至100ml。 (6)直链淀粉标准溶液:称取直链淀粉纯品0.1000g,放在100ml容量瓶中,加入0.5mol/LKOH10ml,在热水中待溶解后,取出加蒸馏水定容至100ml,即为1mg/ml直链淀粉标准溶液。 (7)支链淀粉标准溶液:用0.1000 g 支链淀粉按(6)法制备成1mg支链淀粉标准溶液。 3、材料 小麦粉 4、操作步骤 1、选择支链、直链淀粉测定的波长参比波长。 直链淀粉:取1mg/ml直链淀粉标准溶液1ml,放入50ml容量瓶中,加蒸

馏水30ml,以0.1mol/LHCL溶液调至PH3.5左右,加入碘试剂0.5ml,并以蒸馏水定容。静置20min,以蒸馏水为空白,用光束分光光度计进行可见光全波段扫描或用普通比色法绘出直链淀粉吸收曲线。 支链淀粉:取1mg/ml支链淀粉标准溶液1ml,放入50ml容量瓶中,加蒸馏水30ml,以0.1mol/LHCL溶液调至PH3.5左右,加入碘试剂0.5ml,并以蒸馏水定容。静置20min,以蒸馏水为空白,用光束分光光度计进行可见光全波段扫描或用普通比色法绘出支链淀粉吸收曲线。 2、制作双波长直链淀粉标准曲线:吸取1mg/ml直链淀粉标准溶液0. 3、0.5、0.7、0.9、1.1、1.3ml分别放入6只不同的50ml容量瓶中,加蒸馏水30ml,以0.1mol/LHCL溶液调至PH3.5左右,加入碘试剂0.5ml,并以蒸馏水定容。静置20min,以蒸馏水为空白,比色,吸光差值为纵坐标,直链淀粉含量(mg)为横坐标制备双波长直链淀粉标准曲线。 3、制作双波长支链淀粉标准曲线:吸取1mg/ml支链淀粉标准溶液2.0、2.5、3.0、3.5、4.0、4.5ml分别放入6只不同的50ml容量瓶中,加蒸馏水30ml,以0.1mol/LHCL溶液调至PH3.5左右,加入碘试剂0.5ml,并以蒸馏水定容。静置20min,以蒸馏水为空白,比色,吸光差值为纵坐标,支链淀粉含量(mg)为横坐标制备双波长支链淀粉标准曲线。 4、样品中直链淀粉、支链淀粉及总淀粉的测定:样品粉碎过60目筛,用乙醚脱脂,称取脱脂样品0.1g左右(精确到1ml),置于50ml容量瓶中。加0.5mol/LKOH溶液10ml,在沸水浴中加热10min,取出,以蒸馏水定容至50ml,静置。吸取样品液2.5ml两份(即样品液和空白液),均加蒸馏水30ml,以0.1mol/LHCL溶液调至PH3.5左右,样品中加入碘试剂0.5ml,空白液不加碘试剂,然后定容至50ml。静置20min,以样品空白液为对照比色。 五、结果处理 直链淀粉(%)=(X1*50*100)/(2.5*m*1000) 支链淀粉(%)=(X2*50*100)/(2.5*m*1000) 式中, X1----查双波长直链淀粉标准曲线得样品中直链淀粉含量(mg) X2----查双波长支链淀粉标准曲线得样品中支链淀粉含量(mg) m-----样品质量(g) 总淀粉(%)=直链淀粉(%)+支链淀粉(%)

萌发小麦种子中淀粉酶酶学性质

萌发小麦种子中淀粉酶酶学性质 XXX A091100XX 生学1101 Enzymatic properties of amylases from germinant wheat 摘要:在小麦种子中提取淀粉酶,研究相关酶学性质,了解温度、PH值以及激活剂和抑制剂对淀粉酶活性的影响,并且对酶的活力进行测定。不同的温度、PH条件下和加激活剂或抑制剂情况下淀粉酶将淀粉水解的程度不同,产物遇碘呈现不同的颜色,由此可知道酶活性的最适温度和最适PH,也可知道激活剂能使酶的性增加,抑制剂能使酶的活性降低。对酶的活力进行测定时,是测定产物麦芽糖的量,来表示酶的活力。麦芽糖能将3、5—二硝基水杨酸还原成棕红色的氨基化合物(520nm处有最大吸收峰),其颜色深浅与麦芽糖浓度成正比,利用分光光度法测定棕红色的氨基化合物吸光值,从而得到产物麦芽糖的量,来表示酶的活力[1]。 关键词:淀粉酶、温度、PH值、激活剂、抑制剂、分光度计 研究背景:二十一世纪是生物信息时代,各种生物学领域研究层出不穷 ,对酶的研究是其中一个重要方面,目前对酶的研究已转入了后期,各种酶的生化性质也相继被研究出,酶是一种具有催化活性的蛋白质,由氨基酸通过肽链连接而成,只有在适当的温度、pH和离子强度下才具有生物活性,有些酶还需要辅酶或者辅因子[2]。通过此次实验研究,让我们进一步加深对淀粉酶的认识和学习,同时培养我们设计实验的基本思路,学会科学的实验组合,提出合理的实验方案,为以后研究其他种类的酶提供了研究方法和实验依据,也为我们以后更多的设计型实验作好铺垫。 原理:淀粉是植物最主要的储藏多糖,也是人和动物的重要食物和发酵工业的基本

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