甜菜碱保护细胞免受AAPH损伤的研究
甜菜碱保护细胞免受AAPH损伤的研究
张虹，张猛猛，赖富饶，闵甜，武文佳，王光，李晓凤，吴晖
（华南理工大学食品工程与科学学院，广东广州 510640）
摘要：为了评价甜菜碱的抗氧化活性，本文研究了甜菜碱对受AAPH诱导产生的自由基损伤的红细胞和肝细胞的影响。结果显示当甜菜碱的浓度达到200 mmol/L时，AAPH诱导的红细胞氧化溶血率降低了54.19%，MDA降低了4.32 nmol/mg；电镜下阳性损伤组红细胞胞膜皱缩明显、棘突较多、呈星状改变，而保护组胞膜只是略有皱缩，恢复至阴性组正常细胞形态；同时经甜菜碱处理，阳性损伤组红细胞胞内ROS含量降低了57.16 IU/mg，SOD、CA T、GPx酶活分别降低了9.84 mU/mg、13.91 mU/mg和43.59 mU/mg，并与阴性对照组无显著性差异；在正常肝细胞中，50 mmol/L甜菜碱使AAPH损伤的细胞内MDA下降了0.21 nmol/mg，SOD、CA T 酶活则分别下降了173.21 U/mg和53.9U/mg，与阴性组正常组肝细胞无显著性差异。综上分析，甜菜碱能很好的保护细胞免受AAPH 产生的自由基的损伤，说明甜菜碱具有良好的抗氧化作用。
关键词：甜菜碱；抗氧化活性；红细胞；肝细胞
文章篇号：1673-9078(2016)6-18-23 DOI: 10.13982/j.mfst.1673-9078.2016.6.004 Protective Effects of Betaine on 2,2-Azobis(2-amidinopropane)
Dihydrochloride (AAPH)-Ind uced Oxidative Stress in Cells
ZHANG Hong, ZHANG Meng-meng, LAI Fu-rao, MIN Tian, WU Wen-jia, W ANG Guang, LI Xiao-feng, WU Hui (School of Food Sciences and Technology, South China University of Technology, Guangzhou 510640, China) Abstract: To evaluate the antioxidant activities of betaine, its effect on erythrocytes and liver cells damaged by AAPH-generated free radicals were studied. The results revealed that betaine (200 mmol/L) treatment effectively reduced AAPH-induced erythrocyte hemolysis and MDA content by 54.19% and 4.32 nmol/mg, respectively. Under scanning electron microscope,the cell membranes of erythrocytes with AAPH-induced damage showed apparent shrinkage, a large number of thorny projections, and changes into a star shape; however, the cell membrane of the erythrocytes treated with betaine only exhibited slight shrinkage, and retained the normal cellular shape as seen in undamaged control cells. Moreover, after betaine treatment, the level of reactive oxygen species (ROS) in the erythrocytes with AAPH-induced damage declined by 57.16 IU/mg, and the activities of superoxide dismutase (SOD), catalase (CA T), and glutathione peroxidase (GPx) decreased by 9.84 mU/mg, 13.91 mU/mg, and 43.59 mU/mg, respectively, which were not significantly different from those of the control. After liver cells with AAPH-induced damage were treated with 50 mmol/L betaine, the MDA level dropped by 0.21 nmol/mg and the SOD and CA T activities decreased by 173.21 U/mg and 53.9 U/mg, respectively, which were not significantly different from the control. In conclusion, betaine can effectively protect cells from the damage caused by AAPH-generated free radicals, showing that betaine has notable antioxidant activity.
Key words: betaine; antioxidant activity; erythrocyte; liver cell
甜菜碱是一种广泛分布于动植物及微生物中的天然产物，是枸杞、黄芪和甜菜等的活性成分[1]。它具有多种生理活性，如作为渗透调节剂，保护细胞在高渗条件下免受损伤；作为甲基供体，为细胞内的信号通路提供甲基。此外，甜菜碱还具有多种药理活性，收稿日期：2016-02-13
基金项目：国家自然科学基金项目（31201330）；广州市科技攻关项目（201300000202）
作者简介：张虹（1982-），女，硕士，研究方向：天然产物开发
通讯作者：吴晖（1967-），男，博士，教授，研究方向：食品安全与天然产物化学如治疗血管类，脂肪肝类疾病，改善胆汁类肝病症状等[2]。在低温、高盐等条件下，甜菜碱可通过稳定细胞内抗氧化酶活力来提高植物对逆境的抵抗能力[3,4]。在给受酒精、CCL4等有害因子损伤的大鼠喂食甜菜碱后，大鼠所受损伤得到极大缓解，其机制可能与甜菜碱使机体抗氧化酶活力恢复至正常水平有关[5~7]。抗氧化酶是细胞抗氧化防御系统中的重要组成部分，因此从这些报道中可知，甜菜碱对机体的抗氧化能力有着重要影响。但是目前对于甜菜碱的抗氧化能力并未有研究报道。
在以往的有关抗氧化的研究报道中，大多数都是
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从清除自由基的能力、还原能力来评价抗氧化剂的抗氧化能力。但该类方法有着极大的局限性，如不能判断待测样品对机体的毒性及在机体内的抗氧化效果，不同的自由基反应体系会导致检测结果出现较大差异。以细胞为载体的体外生物学方法因具有完整的活性作用网络，其评价结果的认可度相对较高[8]。偶氮引发剂2,2’-偶氮二(2-脒基丙烷)二盐酸盐（AAPH）在水溶液中经热分解会生成相对稳定的过氧自由基，并且会引发自由基链式反应，产生更多种类的自由基，更接近于机体内的情况。因此，本文以红细胞和肝细胞为模型，研究在AAPH诱导产生的自由基的损伤下，甜菜碱的抗氧化作用，为进一步拓展甜菜碱的应用奠定科学基础。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 原料与试剂
甜菜碱、MTT试剂、AAPH购自阿拉丁试剂上海有限公司，抗凝羊血，广州鸿泉生物科技有限公司，羊血活性（ROS）酶联免疫分析试测试盒购自上海酶联生物科技有限公司，LO2细胞系，本实验室保存，DMEM培养基、胰蛋白酶购自GIBCO；胎牛血清（FBS），购自hyclone；抗氧化指标检测试剂盒（MDA、T-SOD、GSH-PX、CA T）以及BCA蛋白检测测试剂盒购自碧云天生物技术研究所。
1.1.2 主要仪器
SpectrumLab 752S紫外可见分光光度计，上海棱光技术公司；Infinite M1000 Pro酶标仪，瑞士Tecan 公司；电镜EM 3700。
1.2 方法
1.2.1 AAPH诱导红细胞溶血率的测定
以红细胞氧化溶血为模型[9]，通过甜菜碱对AAPH引发细胞氧化溶血的抑制情况评估其抗氧化活性。
4 ℃下，抗凝羊血2000 r/min离心10 min去血浆，pH 7.4的PBS缓冲液洗涤三次，每次1200 r/min离心10 min，确保红细胞密度一致，配成20%悬液。0.2 mL 红细胞悬液加入0.2 mL不同浓度样品溶液中，混合物于37 ℃下培养20 min，再加入0.4 mL 120 mM AAPH，同样条件下培养2.
5 h，最终反应体系用8 mL PBS缓冲液稀释，800 r/min离心10 min，上清在540纳米处测吸光值A1；阳性对照组以0.2 mL PBS缓冲液代替样品，测得吸光度为A2；阴性对照组以0.2 mL PBS缓冲液代替样品，0.4 mL PBS缓冲液代替AAPH，测得吸光度为A3；样品自身对红细胞损伤以0.4 mL PBS缓冲液代替AAPH，测得吸光度为A4；为获得完全溶血产物，反应终体系加入8 mL纯净水，测得吸光度为A0。
甜菜碱保护组溶血损伤率%=A1/A0×100
阳性对照组AAPH氧化溶血损伤率%=A2/A0×100 阴性对照组红细胞自身溶血损伤率%=A3/A0×100
甜菜碱毒性组对红细胞的损伤率%=A4/A0×100 1.2.2 红细胞内MDA的测定及电镜扫描
对1.2.1剩余未溶血红细胞进行收集，PBS缓冲液清洗后悬浮于600 μL超纯水中存于-80 ℃冰箱，按试剂盒标明方法测量MDA。
1.2.1处理后红细胞以1:100的浓度加入2.5%戊二醛(PBS缓冲液配制)，4 ℃固定2 h，PBS缓冲液清洗3次，50%、70%、80%、90%、95%、100%酒精逐级脱水各一次，每次10 min，取出标本低温干燥，喷金，电镜（EM-3700）下对阴性对照组、阳性对照组和甜菜碱保护组进行扫描，观察细胞形态结构变化[9]。1.2.3 红细胞胞内ROS含量及抗氧化酶酶活的测定：
1.2.2处理后样品按试剂盒标明方法测量细胞内ROS含量和CA T、SOD、GPx等酶酶活。
1.2.4 甜菜碱对LO2细胞的毒性作用
将LO2细胞放于含胎牛血清FBS（10%）、双抗（终浓度为各100 U/mL）的DMEM培养基中培养，细胞培养箱设置为饱和湿度、5% CO2、37 ℃。取对数生长期的LO2细胞，按105个/mL接种到96孔板中,每孔约100 μL。24 h后更换含有不同浓度药物的新鲜培养基，每个浓度三个重复，以不含药物的培养基为阴性对照，37 ℃孵育24 h后，每孔加入10 μL CCK8，继续孵育1 h后，于450 nm测定吸光值。
细胞存活率=加药组OD值/阴性对照组OD值×100%
1.2.5 LO2细胞内抗氧化指标的测定
将处于对数生长期的LO2细胞按105个/mL加入6 cm培养皿中，24 h后分别加入2 mM AAPH，50 mM BET，2 mM AAPH+50 mM BET。加药处理24 h后，收集细胞，反复冻融裂解，12000离心10 min，取上清，按照试剂盒说明书测定总蛋白，MDA，CA T和SOD酶活。
样品抗氧化酶活力=检测体系酶活力/样品中蛋白浓度。
1.2.6 体外抗氧化能力测定
甜菜碱清除二苯代苦味酰基（DPPH·）[10]能力的
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测定。2 mL 样品溶液，加入2 mL DPPH 乙醇溶液（0.005%，m/V ），混匀，避光静止30 min ，517 nm 波长下测定其吸光度，记样品吸光度A 1，空白对照吸光度A 0，样品本底吸光度为A 2，每组3个平行。
DPPH·清除率%=［1-(A 1-A 2)/A 0］×100 甜菜碱清除ABTS [11]能力的测定。配制ABTS +·储备液：用2.45 mmol/L 过硫酸钾溶解ABTS ，配成7 mmol/LABTS 储备液，室温下避光静置12~16 h 。配制ABTS +·测定液：将ABTS +·储备液以磷酸盐缓冲液（10 mmol/L ，pH 7.4）稀释，使其吸光度在734 nm 波长处达到0.700±0.020。测定时取2.5 mL ABTS +·测定液，加入50 μL 样品溶液，准确反应10 min ，测定734 nm 波长处的吸光度，记样品吸光度A 1，空白对照吸光度A 0，样品本底吸光度为A 2，每组3个平行。
ABTS +·清除率%=［1-(A 1-A 2)/A 0］×100
1.2.7 数据处理分析
每组数据平行测定3次取均值，Origin8.6、SPSS 软件作图。
2 结果与讨论
2.1 甜菜碱对AAPH 诱导的红细胞溶血的保护作用
红细胞氧化模型是通过添加抗氧化剂来抑制自由基诱发的红细胞损伤，测定反应终体系中溶血抑制率来评价保护剂细胞内抗氧化活性的一种方法，由于其氧化响应灵敏,代谢机制简单，是建立抗氧化评价方法
的理想模型[8]。
图1 不同浓度甜菜碱对于AAPH 引发的红细胞溶血的抑制作用 Fig.1 Inhibitory effects of various concentrations of betaine on
AAPH-induced erythrocyte hemolysis
注：a-f 不同字母表示各组间差异显著（p <0.05），相同字母表示各组间差异不显著（p >0.05），同图2，图4~7，图9~11。
图1中，阴性对照组红细胞损伤率为1.8%，甜菜碱毒性测定组细胞损伤率为1.5%，接近阴性对照组，
说明甜菜碱自身对实验结果不造成影响；阳性对照组
AAPH 氧化损伤率为66.32%；不同浓度甜菜碱保护下AAPH 引发的氧化溶血得到不同程度的抑制，样品浓度与抑制程度基本呈现正相关，当样品终浓度达到200 mmol/L 时，保护组损伤率降至12.13%，接近阴性正常细胞。在廖[9]的文章中，香叶木素具有较好的细胞内抗氧化活性，在AAPH 诱导自由基产生的氧化损伤中，可以显著提高红细胞的耐受力，将溶血率降到正常水平。这与本实验得到的结果非常相近，说明甜菜碱同样具有较高的细胞内抗氧化活性，能够很好的抑制由AAPH 诱导的红细胞溶血。
2.2 甜菜碱对红细胞细胞膜的影响
图2 不同浓度甜菜碱保护下AAPH 氧化损伤红细胞MDA 变化
Fig.2 Effect of betaine on changes in MDA content of
erythrocytes with AAPH-induced oxidative damage
A
B
C
图3 几种不同处理的羊血红细胞电镜图
Fig.3 Scanning electron micrographs of sheep erythrocytes with
different treatments
注：A-正常羊血红细胞；B-AAPH 损伤红细胞；C-甜菜碱保护后红细胞。
AAPH 引发的自由基链式反应开始后，迅速进攻胞膜中的不饱和脂肪酸（LH ），诱导磷脂层发生脂质过氧化反应，细胞内MDA 含量随之增加，并且与膜
蛋白游离氨基交联，逐步氧化改变细胞膜的结构[12]。
图2显示，相较阴性组4.23 nmol/mg，AAPH诱导损伤的阳性组MDA含量显著增高至9.12 nmol/mg；而甜菜碱保护下MDA的含量则不断下降至 4.8 nmol/mg，接近阴性正常细胞，说明甜菜碱可以阻止细胞膜的脂质过氧化反应，减少MDA堆积。图3-A 为阴性组正常羊血红细胞，呈圆形，表面光滑，边缘整齐。图3-B为阳性损伤组，细胞膜皱缩明显、棘突较多、呈星状改变。图3-C为保护组，细胞膜表面略有皱缩、基本结构得以保持。
MDA和电镜扫描的结果表明，甜菜碱的预处理保护了细胞膜免受自由基的氧化攻击，其机制可能是甜菜碱清除了AAPH所产生的自由基，同时，甜菜碱促进S腺苷甲硫氨酸的生成，S腺苷甲硫氨酸一方面促进细胞内谷胱甘肽的生成，而谷胱甘肽是细胞非酶促抗氧化体系的重要组成部分，因此增加了细胞的抗氧化能力，另一方面S腺苷甲硫氨酸能够调节细胞内磷脂酰胆碱和磷脂酰丝氨酸的比例，由此稳定细胞膜的磷脂双分子层结构，保护细胞膜，增强细胞对自由基的耐受能力，也有研究指出甜菜碱可通过大量累积在细胞膜表层形成大面积亲水胶体，产生一个可与蛋白质相互作用的疏水骨架，从而保护细胞膜[13]。
2.3 甜菜碱对红细胞内ROS和抗氧化酶的影响
图4 不同浓度甜菜碱保护下AAPH氧化损伤红细胞ROS变化Fig.4 Effect of betaine on changes in ROS content of
erythrocytes with AAPH-induced oxidative damage
超氧阴离子自由基、羟基自由基、单线态氧以及由这些自由基与细胞内分子反应所产生的、过氧化亚硝基等非自由基分子离子都被称为活性氧，严重的损害了人们的健康。人体内由SOD、CA T和GPx构成胞内酶防御系统，消除自由基活性氧，进行体内抗氧化物质的循环代谢，因此这些抗氧化酶活力变化与细胞内活性氧的含量、细胞内抗氧化反应均密切相关[14]。
图5 不同浓度甜菜碱保护下AAPH氧化损伤红细胞胞内SOD酶
的酶活变化
Fig.5 Effect of betaine on changes in SOD activity of
erythrocytes with AAPH-induced oxidative damage
图6 不同浓度甜菜碱保护下AAPH氧化损伤红细胞胞内CAT酶
的酶活变化
Fig.6
Effect of betaine on changes in CAT activity of erythrocytes with AAPH-induced oxidative damage
图7 不同浓度甜菜碱保护下AAPH氧化损伤红细胞胞内GPx酶
的酶活变化
Fig.7 Effect of betaine on changes in GPx activity of
erythrocytes with AAPH-induced oxidative damage
图4显示，相较阴性组16.82 IU/mg，AAPH诱导损伤阳性组ROS的含量显著增高至74.61 IU/mg；甜菜碱保护下ROS的含量不断下降，最终降至17.45 IU/mg，接近阴性正常细胞，说明甜菜碱可以抑制ROS 的生成。同时，甜菜碱保护下胞内抗氧化酶酶活变化
21
如图5~7所示，AAPH诱导损伤阳性组中，红细胞暴露在自由基攻击下，细胞膜发生脂质过氧化，结构改变，胞内各种抗氧化酶SOD、CA T、GPx分别呈46.63 mU/mg、31.98 mU/mg、77.84 mU/mg的较高表达；甜菜碱预处理增强了红细胞抗氧化能力，减少了细胞膜损伤，细胞内酶活随甜菜碱浓度的增高而越低，当终浓度达到200 mmol/L时，胞内抗氧化酶酶活降至36.79 mU/mg、18.07 mU/mg、34.25 mU/mg，均接近阴性组30.34 mU/mg、17.02 mU/mg、32.52 mU/mg的正常水平。
在之前的研究报道中，植物在逆境下或者小鼠在受到有毒物质的损伤下，其体内抗氧化酶酶活降低，补充甜菜碱可将其抗氧化酶酶活提高至正常水平[3-7,14]。而我们的结果与之不同，在受到AAPH产生的自由基攻击下，红细胞内的抗氧化酶酶活升高，经甜菜碱处理后使其抗氧化酶酶酶活减低至正常水平。这或许是因为植物或动物在受到有害因子的损伤时，有害因子同时抑制了其抗氧化酶酶活。而在本研究中，当细胞的细胞膜发生过氧化作用后，会引起细胞内的一系列生理反应，如细胞内ROS含量增高，ROS在一定的浓度范围内会激活相关的抗氧化酶，而甜菜碱可使细胞内的ROS含量降低，故而相关抗氧化酶的被激活程度有所减轻。
2.4 甜菜碱对LO2细胞的毒性作用
图8 不同浓度甜菜碱作用下LO2细胞的存活率
Fig.8 LO2 cell survival upon betaine treatment
图8显示，LO2细胞中加入甜菜碱的浓度在100 mmol/L内时，细胞存活率保持在98.45%~96.58%之间，对于LO2细胞几乎没有影响；当浓度升至200 mmol/L时，细胞存活率骤降至74.89%。而本实验加入甜菜碱的浓度为50 mmol/L，为安全剂量，不对实验造成影响。
2.5 甜菜碱对LO2细胞各项抗氧化指标的影响
图9 甜菜碱保护下AAPH氧化损伤的LO2细胞MDA的变化Fig.9 Effect of betaine on changes in MDA content of LO2 cells
with AAPH-induced oxidative damage
图10 甜菜碱保护下AAPH氧化损伤的LO2细胞SOD的变化Fig10 Effect of betaine on changes in SOD activity of LO2 cells
with AAPH-induced oxidative damage
图11 甜菜碱保护下AAPH氧化损伤的LO2细胞CAT的变化Fig.11 Effect of betaine on changes in CAT activity of LO2 cells with AAPH-induced oxidative damage
红细胞是高度分化的细胞，不含细胞核和细胞器，其细胞内含有细胞核和线粒体等细胞器，结构和代谢通路较红细胞更加完整，更加接近生物体真实情况，该模型结果能够进一步证实甜菜碱对于细胞膜的保护，进而维系胞内抗氧化酶酶活的稳定。
图9~11可见甜菜碱毒性试验中细胞各项抗氧化
22
指标的数值变化不大，说明其自身对实验不存在较大干扰。AAPH诱导损伤阳性组细胞的MDA含量，胞内SOD、CA T酶活均较阴性组显著增高，由0.60 nmol/mg、238.68 U/mg、73.72 U/mg升至1.55 nmol/mg、493.14 U/mg、167.09 U/mg，说明氧化损伤中，肝细胞胞膜结构遭到破坏，胞内抗氧化酶酶活应激性增高；而保护组较之损伤组各项指标分别回落至 1.34 nmol/mg、319.93 U/mg、113.24 U/mg，接近阴性正常细胞，进一步说明甜菜碱保护了细胞结构，进而维持胞内抗氧化酶酶活降至正常水平。
2.6 甜菜碱的自由基清除能力
图12 不同浓度甜菜碱、Vc对DPPH、ABTS的清除能力
Fig.12 DPPH· and ABTS radical scavenging activity upon
treatment with different concentrations of betaine and Vc
DPPH·，ABTS是两种测定样品抗氧化活性的方法，测量简单，结果稳定、准确，因此被广泛应用。
图12可知，甜菜碱对DPPH和ABTS自由基的清除率较低，随着浓度的升高，其清除率未有明显上升，终浓度200mmol/L甜菜碱对DPPH、ABTS清除率最高，分别是53.56%和15.96%。甜菜碱对这两种自由基的清除能力差别较大，也进一步说明了自由基清除实验结果的差异性。同时，这也说明了甜菜碱直接清除自由基的能力较弱，而甜菜碱对受AAPH诱导产生的自由基损伤的细胞有极强的保护作用，由此可推测，甜菜碱在机体内的抗氧化效果可能不仅仅依赖于其对自由基的直接清除能力，或许还存在其他间接清除自由基的方式。
3 结论
本文以AAPH诱导损伤的红细胞和肝细胞为模型评价了甜菜碱的抗氧化能力。结果显示：甜菜碱能够显著抑制AAPH诱导的红细胞溶血，并减轻了未溶血的细胞内对AAPH所产生的应激反应，使细胞恢复至正常状态，该结果进一步在肝细胞中得到验证。因此，甜菜碱具有良好的抗氧化能力。但是，我们同时还研究了甜菜碱对DPPH和ABTS自由基的清除作用，结果发现甜菜碱对这些自由基的清除能力较弱，这提示我们甜菜碱在以细胞为载体发挥其抗氧化功能时，其机制可能不仅是甜菜碱直接清除了自由基，还可能存在其他的间接方式，如促进S腺苷甲硫氨酸的生成，S腺苷甲硫氨酸一方面能够促进细胞内谷胱甘肽的生成，而谷胱甘肽是细胞非酶促抗氧化体系的重要组成部分，因此增加了细胞的抗氧化能力，另一方面S腺苷甲硫氨酸能够调节细胞内磷脂酰胆碱和磷脂酰丝氨酸的比例，由此稳定细胞膜的磷脂双分子层结构，增强细胞对自由基的耐受能力，以及对抗氧化酶的酶活的调节也有一定作用。但这些还需要进一步的研究验证。本研究一方面拓展了甜菜碱的功能活性，为甜菜碱在功能型食品等领域的应用奠定了科学基础，另一方面为抗氧化功能的评价提供了一个新的角度，即抗氧化剂在机体发挥抗氧化能力的方式，可能不只有直接清除自由基一种方式。因此，在未来的抗氧化研究中，使用以细胞或是其他有机生命体为载体的研究方式，才是较为全面的抗氧化效果评价方法。
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甜菜碱的营养作用和效果
甜菜碱的营养作用和效果 甜菜碱(Betaine)是首先在欧洲被发现的，它主要存在于甜菜糖的糖蜜中，故而得名，但其功效直到二十世纪七十年代才渐被认识。甜菜碱普遍存在于动植物体内，是动物代谢的中间产物，在营养物质的代谢中起着十分重要的作用，近年来，欧美一些国家相继在畜禽生产和水产养殖中进行了大量的研究，证实了甜菜碱是动物机体内重要的甲基供体，参与氨基酸和脂肪的代谢，调节动物体内渗透压，具有促进生长、改善胴体组成、提高肉质、提高水产饵料的诱食性等功效。 随着甜菜碱化学合成方法的进一步成熟，生产成本不断降低，已广泛应用于畜禽配合饲料中，在水产饲料和观赏动物饲料中使用也已十分普遍，大量试验研究表明，甜菜碱是一种无毒、害、无污染的新型多功能添加剂。 一、甜菜碱的理化特性。 (一)、甜菜碱的化学结构 甜菜碱是—种季铵型生物碱，又名甘氨酸甜菜碱、三甲基甘氨酸等，化学名称为N-N-N-三甲基甘氨酸内盐，分子式C5H11NO2,分子量117.15，其化学结构与氨基酸、胆碱相似 (二)、甜菜碱的理化特性 纯品天然甜菜碱为微棕色流动性结晶粉末，能耐高温，熔点293℃；合成纯品甜菜碱则为白色或淡黄色结晶粉末，熔点301℃～305℃；有较强的吸水性，极易潮解，并释放出三甲胺；在水中极易溶解(160g／100g水)，易溶于甲醇，微溶于乙醇，在氯仿或乙醚中不溶。 (三)、甜菜碱的安全性 甜菜碱本身是动物体内的代谢中间产物，经大量实验证明，甜菜碱及其盐类无毒、无害、无污染，其小鼠半数致死量(LD50)在11，000m9／kg，对动物无致畸、致癌、致突变作用，是公认的安全物质。 二、甜菜碱的生产工艺 (一)、天然提取法 甜菜糖蜜是提取天然甜菜碱的主要原料，提取工艺主要有两种，一是离子交换法，此方法是将稀释的糖蜜流经强阳离子交换树脂柱和其它成份分离而留在柱内，后用稀氨水洗脱甜菜碱，洗脱液再流经强阴出了交换树脂，洗出液经蒸发、脱色、结晶、过滤制得甜菜碱；另一种普遍使用的方法是离子排斥法，此方法是将糖蜜导入填充有聚乙烯-二乙烯树脂的色谱分离柱(树脂交联二乙烯苯5.5％，柱温80℃左右，料液流速接近色谱系统临界速度)，用水洗脱色谱分离树时，盐、糖及甜菜碱依次排出得以分离，再将收集液经蒸发、浓缩、三段结晶、过滤制得纯度约98％的无水或一水甜菜碱。 (二)、化学合成法
第一部分 组织和细胞的损伤与修复
第一部分组织和细胞的损伤与修复一、是非题` 1．湿性坏疽属液化性坏死，而干性坏疽属凝固性坏死。( ) 2．坏死细胞核的改变为核固缩，核碎裂，核溶解。( ) 3．不完全再生早期常以肉芽组织代替坏死组织。( ) 4．纤维素样变性实质上就是纤维素样坏死。( ) 5．肉芽组织及肉芽肿内均有较多的纤维母细胞。( ) 6．脂肪变性有时也可以见于细胞外。（） 7．气球样变性是脂肪变性的一种类型，制片过程中脂肪溶解，细胞呈气球样。( ) 8．脑组织坏死多属凝固性坏死。( ) 9．由于实质细胞数量增多而造成组织器官体积的增大称肥大。( ) 10．干酪样坏死的镜下特征是组织轮廓保持一段时间。（） 11．骨再生能力弱，因此骨折后须固定。( ) 12．坏疽是组织坏死后继发腐败菌感染而形成的特殊形态。（） 13．萎缩的器官其体积均缩小。( ) 14．变性是指细胞内出现了异常物质或正常物质数量增多。( ) 15．凡是组织器官的体积变小都称为萎缩。( ) 16．气球样变，水变性、脂肪变性和纤维素样变性均属可复性的病变。（）17．结缔组织玻变在镜下可见一片模糊的颗粒状无结构的红染物质。( ) 18．生理性再生属完全再生，而病理性再生属于不完全再生。（） 19．外周神经纤维损伤时，如其相连神经细胞未受损，可完全再生。( ) 20．骨和软骨的再生能力很强．故损伤后一般均能完全再生。( ) 21．机体组织细胞的死亡称坏死．是一种不可逆性的损伤。( ) 22．干酪样坏死及脂肪坏死均属凝固性坏死。( ) 23．骨折后骨组织可通过完全再生而修复。( ) 24．肺出血性梗死并腐败菌感染即为湿性坏疽。( ) 25．二期愈合见于组织缺损大，创缘不整，伴感染的伤口。( ) 26．支气管粘膜上皮出现鳞状上皮化生，属于适应性改变。( ) 二、填空题 1．骨折愈合的过程可分为、、、四个阶段。 2．鳞状上皮化生最常见于、。 3．Mallory小体是指。 4．坏死的结局有、、、。 5．常见的变性有、、、、。 6．常见病理性萎缩有、、、、五种。 7．机体的适应性改变有、、、四种类型。 8．形态学上可将坏死分为、、、四种类型。 9．玻璃样变性有、和三种。 10．按再生能力，可将人体组织或细胞分为、、三类。 11．苏丹Ⅲ染色可将。 12．水变性和脂变的原因常是、、。
细胞和组织的适应与损伤
细胞和组织的适应与损伤 ?病理学教研室龙捷 ?电话：37103237 （A1-637) ?主要教学内容 第一节细胞和组织的适应 第二节细胞和组织的损伤 重点掌握适应性反应、变性和坏死的病变特点。 ?第一节细胞和组织的适应 ?适应(adaptation)：细胞和由其构成的组织、器官对内、外环境中各种有害因子的刺激作用的非损伤应答反应，称为适应。 适应性反应包括： 1.萎缩 2.肥大 3.增生 4.化生 ?萎缩(atrophy) ?已发育正常的实质细胞、组织和器官体积缩小，可以伴发细胞数目的减少。 ?病理性萎缩的类型 营养不良性萎缩：全身性、局部性 压迫性萎缩：肾盂积水、脑积水； 失用性萎缩：长期卧床； 去神经性萎缩：ALS，脑卒中，神经离断； 内分泌性萎缩：绝经后子宫、卵巢萎缩 老化和损伤性萎缩：阿尔茨海默病、萎缩性胃炎
?萎缩的病理变化 ?大体：器官均匀性缩小，重量减轻，功能降低。质韧、色深、包膜皱缩。 ?光镜：细胞数目、体积、细胞器、残存体。 ?类型： 1 生理性：运动员的肌肉、妊娠期的子宫 2 病理性： ①代偿性肥大 如高血压早期的左心室、单侧肾切除后的对侧肾 ②内分泌性肥大 如甲亢时的甲状腺、垂体瘤时的肾上腺 ?病变： ?大体：体积增大、重量增加、功能增强。 ?光镜： ①细胞器体积大、数目多，核DNA含量↑； ②细胞体积增大。 ?肥大有一定的代偿功能 ?过度肥大会诱发器官组织的损害 ?假性肥大 实质细胞萎缩、间质细胞增生、器官体积不变或增加
? 2 病理性： ?(1)代偿性增生：肉芽组织、慢性炎症 ?(2)内分泌增生：子宫内膜增生过长 ?增生与肥大的关系 ?细胞分裂增殖能力活跃的器官，其体积增大是肥大和增生的共同结果 ?细胞分裂增殖能力低的器官，其体积增大仅仅是肥大所致?化生(metaplasia) 定义：一种分化成熟的细胞类型被另一种分化成熟的细胞类型所取代的过程称为化生。 ?类型 ①鳞状上皮化生：气管柱状上皮，胆囊粘膜上皮，宫颈粘膜柱状上皮。 ②肠上皮化生：胃粘膜转化成小肠或大肠粘膜。 ③结缔组织化生：软骨化生，骨化生，骨化性肌炎 ?化生的意义 ?化生可以是正常的生理现象 ?化生可以是一种防御反应 ?化生也可以是一种癌前病变(如食管癌、肺癌)
甜菜碱对皮肤的作用
甜菜碱对皮肤的作用 甜菜碱天然存在于很多植物中，例如菠菜、麦芽、蘑菇和水果等,也存在于部分动物体内,例如龙虾的螯、章鱼、鱿鱼以及水生甲壳类动物,甚至在人体肝脏中也含有此类物质。 甜菜碱在欧洲被发现，通常被人为是生命体新陈代谢的中间产物，甲基提供者参与合成蛋氨酸，同时又被称为三甲基甘氨酸，是一种天然的可食用的氨基酸，效果要优于市面上流行的氨基酸 医药级甜菜碱多用于化妆品医药，食品中。她是从甜菜根中的蜜糖中提取制得。是一种天然的氨基酸保湿剂。 甜菜碱是两性离子，具有盖度的生物兼容性，极易溶于水，性质稳定。 保湿作用： 在实验中，稀释的溶液中，一个水分子能暂时占据甜菜碱两性离子的中间，很容易的把自身携带的水分子释放到周边的液体中去，不同于保湿剂（甘油）一样固定水分子，甜菜碱是允许水分子完全被全活细胞利用吸收。水分子在甜菜碱附近停留的时间比其他保湿剂停留的时间短，所以说他是真正意义上的水分子携带者。 独特的保湿和保护细胞性能作用： 众所周知水是所有生物细胞的基本元素，所有细胞都含有85%~95%得水，水分可以依靠活跃的渗透质透过细胞进行渗透和扩散。 而甜菜碱就是一种最主要的有机渗透质，实验证明环境中演的含量越高同时干燥，生物细胞中甜菜碱的含量越高，用来平衡细胞体积和水分的平衡。 在外界高渗透压力如皮肤表层脱水和紫外线照射下，会引起皮肤细胞内渗透质的大量流失，从而造成细胞凋亡，而甜菜碱渗透质就能明显的抑制这一过程，在洗护用品中，就是因为这种有机渗透质，通过皮肤角质层渗透进来保护细胞的平衡，增加表层皮肤含水量的作用。 甜菜碱独特的保湿机理性能要优于其他的保湿剂透明质酸钠，氨基酸，甜菜碱在低浓度下依然可以达到持久保湿的效果。被称为“自来水”保湿（可以把皮肤深层的水分吸引到缺水的表层是的肌肤表层也含有充足的水分） 低刺激性和中和作用： 甜菜碱有抗过敏，降低皮肤刺激的作用，细化产品中添加了甜菜碱，可以明显降低表面活性剂对皮肤的刺激作用。 抗过敏和保湿作用： 在洗发水肿，添加甜菜碱可以明显降低表面活性成分对头皮的刺激作用，还可以改善洗发后头皮发痒和头发干枯的情况。由于优良的保湿报税效果，可以增加头发的保水性能，还可以赋予头发光泽，对于烫染的头发，可以保护不受外界因素的伤害。目前甜菜碱被用于洁面乳，沐浴露，等产品中特别适合用于婴幼儿的喜欢产品中。 中和酸碱度 甜菜碱在水溶液中呈弱酸性，在果酸护肤中可以显着地改善果酸护肤抗衰产品种果酸的PH 值过低对皮肤的刺激和减少过敏现象的发生 油包水乳化体系 一般的乳霜种会加入氯化钠和硫酸镁来改善产品的耐寒的稳定性，但是甜菜碱的水溶液凝固点要优于两者，完全可以替代，同时还可以改善乳霜涂抹后发干的缺点，富裕肌肤丝般感受。 目前来说甜菜碱适合婴幼儿洗护用品，对婴幼儿娇嫩肌肤具有很好的保湿补水效果，是天然的皮肤润肤剂，目前市场上有一些品牌的婴儿洗护用品中含有甜菜碱，像是国货中比较低调的伊儿咔婴儿洗护系列，面霜和洗发沐浴产品添加了甜菜碱成分。对于宝宝来说是最
甜菜碱的营养作用和应用效果
甜菜碱的营养作用和应 用效果 Revised as of 23 November 2020
甜菜碱的营养作用和应用效果 甜菜碱(Betaine)是首先在欧洲被发现的，它主要存在于甜菜糖的糖蜜中，故而得名，但其功效直到二十世纪七十年代才渐被认识。甜菜碱普遍存在于动植物体内，是动物代谢的中间产物，在营养物质的代谢中起着十分重要的作用，近年来，欧美一些国家相继在畜禽生产和水产养殖中进行了大量的研究，证实了甜菜碱是动物机体内重要的甲基供体，参与氨基酸和脂肪的代谢，调节动物体内渗透压，具有促进生长、改善胴体组成、提高肉质、提高水产饵料的诱食性等功效。 随着甜菜碱化学合成方法的进一步成熟，生产成本不断降低，已广泛应用于畜禽配合饲料中，在水产饲料和观赏动物饲料中使用也已十分普遍，大量试验研究表明，甜菜碱是一种无毒、无害、无污染的新型多功能添加剂。 一、甜菜碱的理化特性 (一)、甜菜碱的化学结构 甜菜碱是—种季铵型生物碱，又名甘氨酸甜菜碱、三甲基甘氨酸等，化学名称为 N-N-N-三甲基甘氨酸内盐，分子式C5H11NO2,分子量，其化学结构与氨基酸、胆碱相似。 (二)、甜菜碱的理化特性 纯品天然甜菜碱为微棕色流动性结晶粉末，能耐高温，熔点293℃；合成纯品甜菜碱则为白色或淡黄色结晶粉末，熔点301℃～305℃；有较强的吸水性，极易潮解，并释放出三甲胺；在水中极易溶解(160g／100g水)，易溶于甲醇，微溶于乙醇，在氯仿或乙醚中不溶。 (三)、甜菜碱的安全性 甜菜碱本身是动物体内的代谢中间产物，经大量实验证明，甜菜碱及其盐类无毒、无害、无污染，其小鼠半数致死量(LD50)在11，000m9／kg，对动物无致畸、致癌、致突变作用，是公认的安全物质。 二、甜菜碱的生产工艺
细胞和组织的损伤 (1)
第六章细胞和组织的损伤 教学目的 明确细胞和组织损伤的主要表现形式：萎缩、变性、坏死、病理性色素沉着、结石形成的概念、发生机理、病理变化和对机体的影响。 教学时间 4学时 教学重点、难点 1、概念 2、萎缩、变性、坏死的病理变化及时机体、影响 3、结石形成的条件及对机体的影响 概述： 1、进行性变化：即细胞进行性生长，指细胞增大、细胞器复制（细胞增生、肥大、再生、修复，创伤愈合）等，趋向适应，恢复方向进展。此时物质代谢同化大于异化。 2、退行性变化：即细胞的损伤（萎缩、变性、死亡），细胞功能↓，向死亡发展，此时物质代谢异化大于同化。 细胞组织的损伤机械性——直接作用于细胞的损伤。 其它各种致病因子——由细胞物质代谢障碍开始。 细胞损伤发展过程： 细胞代谢改变—→组织化学、超微结构变化—→光学显微镜下变化和肉眼可 见形态学变化（病变）—→病因除去后恢复常态（可逆性变化）。 ↘严重不可逆病变—→细胞死亡。 营养不良性变化——在致病因素作用下，细胞组织的物质代谢发生障碍，进而在形态结构上发生各种病变，最后引起功能障碍的变化。 萎缩、变性等——轻微可逆变化，细胞仍能维持不同水平生命活动。 坏死——不可复性损伤，死亡。 损伤——变性、坏死。 适应——萎缩、肥大、增生、化生。 细胞组织的损伤的补充资料 组织细胞的损伤——基础性病理变化。 一、原因 缺氧、化学物质、药物、物理（机械、高温、低温、高低气压、电流、辐射等）、生物因子（细菌、病毒、真格菌、寄生虫等）、营养失衡、社会-心理-精神因素和医源性因素等。 缺氧是细胞损伤的非常重要的基本环节。 老年动物的细胞处于生理性自然退化状态，对于长期积累的或即时受到各种致病因素的损伤作用会更为敏感—→衰老（aging）或老化（semility）。 在人类有心身疾病（psychosomatic disease），这是一种思想、情感障碍引发细胞损伤所形成的器质性疾病。 如原发性高血压、消化性溃疡、冠心病、植物性神经功能紊乱等。 医源性疾病（iatrogenic disease），由于诊断过程本身继发的伤害。 二、机制 发生机制复杂，如细胞膜的破坏、活性氧类物质（氧自由基）增多、胞浆内高游离Ca＋2、缺氧、化学毒作用、遗传物质变异等。
细胞和组织的适应
细胞和组织的适应、损伤与修复 1．细胞坏死主要表现在： A、细胞膜 B、细胞浆 C、细胞器 D、细胞核 E、细胞连接 2．细胞坏死后，核的变化之一可表现为： A、核分裂 B、核碎裂 C、核异型 D、核仁肥大 E、核膜增厚 3．坏死组织经腐败菌作用后，常可发生（） A、凝固 B、梗死 C、栓塞 D、坏疽 E、脂肪坏死 4．下列各项属病理性增生与肥大的是（） A、妊娠期子宫肥大 B、哺乳期乳腺肥大 C、高血压引起的心肌肥大 D、运动员肌肉肥大 E、长期体力劳动者的心室肥大 5．在萎缩的肌细胞可见（） A、含铁血黄素 B、脂褐素 C、黑色素 D、胆色素 E、纤维素 6．细胞水肿与脂肪变性最易发生在（） A、肺、脾、肾 B、心、肝、肾 C、肺、脾、心 D、心、肝、脾 E、肝、肾、脾 7．下列哪种变性性质上为组织坏死（） A、细胞水变性 B、玻璃样变性 C、纤维素样变性 D、黏液变性 E、淀粉样变性 8．下述哪项与液化性坏死无关（） A、脑组织坏死 B、化脓性菌感染 C、乳房的外伤性脂肪坏死 D、急性胰腺炎引起的脂肪坏死 E、肾梗死 9．下列各种细胞再生能力最强的是（） A、表皮细胞 B、平滑肌细胞 C、肾小管上皮细胞 D、血管皮细胞 E、软骨母细胞 10．一期愈合的手术切口，一般在术后多长时间可拆线（）A、第3天 B、第5~6天 C、2周 D、3周 E、以上都不是 11．有关肉芽组织的描述中，不恰当的提法是（） A、肉芽组织是不完全修复的必经之途 B、含大量新生的毛细血管和成纤维细胞 C、常伴有炎性水肿及数量不等的炎症细胞 D、当它老化时血管和胶原均见增多
E、最后被大量纤维组织反取代 12．肉芽组织与肉芽肿的光镜下区别在于（） A、局部是否有淋巴细胞浸润 B、病灶是否有单核细胞浸润 C、局部是否有单核巨噬细胞结节形成 D、是否有纤维细胞增生 E、是否含有毛细血管 13．最易通过完全性再生达到修复的组织是（） A、上皮组织 B、结缔组织 C、骨组织 D、神经组织 E、肌肉组织 14．易发生化生的组织为（） A、关节软骨 B、支气管粘膜 C、横纹肌 D、宫颈粘膜 E、胃粘膜 15．中枢神经系统的坏死常为（） A、脂肪坏死 B、坏疽 C、干酪样杯死 D、凝固性坏死 E、液化性坏死 16．关于脂肪变性，下列哪一项是正确的？ A、器官体积肿大，质地变硬 B、器官颜色灰白，切面有油腻感 C、镜下见胞浆出现大小不等的空泡（HE染色） D、镜下见胞浆充满淡红染微细颗粒（HE染色） E、为一种不可恢复性病变 17．营养不良性萎缩时，首先萎缩的组织是： A、肌肉 B、肝脏 C、心脏 D、脑 E、脂肪 18．创面一期愈合的条件是（） A、手术烧伤 B、刀伤 C、创面小面整齐，组织损伤少 D、不伴有继发感染的创面 E、已经扩创处理的大面积创伤 19．肉芽组织中一般不含有（） A、单核巨噬细胞 B、中性粒细胞 C、神经纤维 D、细菌 E、异物 20．细胞坏死过程中，核变小，染色质浓聚，被之为（） A、核包涵体 B、核溶解 C、核碎裂 D、核分裂相 E、核固缩 21．区别组织坏死与尸体组织自溶最无诊断价值的病理变化是（）A、中性粒细胞浸润 B、充血反应带 C、病灶呈楔形 D、核碎裂、溶解 E、间质纤维蛋白样坏死 22．不属于凝固性坏死的病变是（） A、肝阿米巴脓肿 B、心肌梗死 C、干酪样坏死 D、肾梗死 E、肝细胞嗜酸性小体
Unit1 组织和细胞损伤和修复
第一部分组织和细胞的损伤与修复 一、是非题` 1．湿性坏疽属液化性坏死，而干性坏疽属凝固性坏死。( ) 2．坏死细胞核的改变为核固缩，核碎裂，核溶解。( ) 3．不完全再生早期常以肉芽组织代替坏死组织。( ) 4．纤维素样变性实质上就是纤维素样坏死。( ) 5．肉芽组织及肉芽肿内均有较多的纤维母细胞。( ) 6．脂肪变性有时也可以见于细胞外。（） 7．气球样变性是脂肪变性的一种类型，制片过程中脂肪溶解，细胞呈气球样。 ( ) 8．脑组织坏死多属凝固性坏死。( ) 9．由于实质细胞数量增多而造成组织器官体积的增大称肥大。( ) 10．干酪样坏死的镜下特征是组织轮廓保持一段时间。（） 11．骨再生能力弱，因此骨折后须固定。( ) 12．坏疽是组织坏死后继发腐败菌感染而形成的特殊形态。（） 13．萎缩的器官其体积均缩小。( ) 14．变性是指细胞内出现了异常物质或正常物质数量增多。( ) 15．凡是组织器官的体积变小都称为萎缩。( ) 16．气球样变，水变性、脂肪变性和纤维素样变性均属可复性的病变。（）17．结缔组织玻变在镜下可见一片模糊的颗粒状无结构的红染物质。( ) 18．生理性再生属完全再生，而病理性再生属于不完全再生。（） 19．外周神经纤维损伤时，如其相连神经细胞未受损，可完全再生。( ) 20．骨和软骨的再生能力很强．故损伤后一般均能完全再生。( ) 21．机体组织细胞的死亡称坏死．是一种不可逆性的损伤。( ) 22．干酪样坏死及脂肪坏死均属凝固性坏死。( ) 23．骨折后骨组织可通过完全再生而修复。( ) 24．肺出血性梗死并腐败菌感染即为湿性坏疽。( ) 25．二期愈合见于组织缺损大，创缘不整，伴感染的伤口。( )
细胞组织的适应与损伤
第一章细胞和组织的适应、损伤与修复 一、教学大纲要求 1. 掌握适应及萎缩、肥大、增生、化生的概念、类型和病理变化。 2. 掌握变性、坏死的概念、类型、形态学变化及后果。 3. 掌握肉芽组织的概念、形态特征及其在创伤愈合中的作用。 4. 掌握创伤愈合的类型与骨折愈合过程。 5. 熟悉再生的概念、类型及各种细胞的再生能力与再生过程。 6. 熟悉适应、变性、坏死与修复的结局或转归。 7. 熟悉细胞凋亡与老化的概念及形态学表现。 8. 了解组织损伤的原因与发生机制。 9. 了解影响修复的因素。 二、理论内容提要 （一）细胞和组织的适应性反应 萎缩、肥大、增生、化生的概念、类型与病变特征，举例。 1、萎缩：病理性：营养不良性、压迫性、失用性、去神经性、内分泌性 2、肥大：代偿性，内分泌性 3、增生：内分泌性，代偿性，再生修复性，肿瘤性。 4、化生：（1）鳞状上皮化生：膀胱、肾盂移行上皮→鳞状上皮（鳞状化生可癌变） 支气管、胆囊、子宫颈柱状上皮→鳞状上皮（2）腺上皮化生：胃→肠上皮化生（大肠上皮化生可癌变）。 （3）结缔组织化生：成纤维细胞、间叶细胞→软骨细胞、骨细胞 （二）细胞和组织的损伤
1．细胞和组织损伤的原因与损伤过程、机制 各种损伤因素→生化代谢改变→组织化学和超微结构改变→光镜改变→肉眼改变。 机制：细胞膜的破坏，活性氧类物质的损伤，细胞质内高游离钙的损伤，缺氧，化学性损伤，遗传变异 2．细胞损伤的基本病理过程 细胞核：大小、形状、结构、核内包含物及核仁的改变。 细胞器：内质网、线粒体、高尔基体、溶酶体、细胞骨架的改变。 细胞膜：形态结构、通透性的改变。 3．各种可逆性损伤（变性）的概念，好发部位（组织、细胞）及其形态学变化，举例
第一章+细胞和组织的适应与损伤
第一章细胞和组织的适应与损伤 一、A型选择题 1 光镜下检见肯定的细胞损伤，在肝细胞缺血发生： A.5分钟后 B.15分钟后 C.30分钟后 D.60分钟后 E.120分钟后 2 HBsAg阳性肝炎时，电镜下可见肝细胞内： A.粗面内质网增生 B.光面内质网大量增生 C.基质型线粒体肿胀 D.高尔基体肥大 E.溶酶体增大、增多 3 对各种损伤最敏感的细胞器是： A.粗面内质网 B.光面内质网 C.线粒体 D.高尔基体 E.溶酶体 4 .关于干酪样坏死下列哪项是错误的 A.肉眼较松软 B.镜下组织结构遭破坏 C.容易液化 D.坏死灶中心结核菌少 E.发生机理为四型变态反应 5 Mallory小体的形成与下列哪种细胞成分有关： A.细胞膜 B.线粒体 C.核蛋白体 D.中间丝 E.光面内质网 6 下列各项属病理性增生与肥大的是： A.妊娠期子宫肥大 B.哺乳期乳腺肥大 C.高血压引起的心肌肥大 D.运动员的肌肉肥大 E.长期体力劳动者的心室肥大 7 组织损伤时，血中酶含量升高是由于： A.细胞内酶减少，使血中酶相对增高 B.细胞内酶增多，释放入血增多
C.细胞内酶减少，释放入血增多 D.细胞外酶减少，均存在于血液中 E.损伤周围代偿性释放增加 8 下列器官肥大时不伴细胞增生的是： A.乳腺 B.甲状腺 C.心脏 D.肝脏 E.肾脏 9 营养不良性萎缩多累及全身各种器官和组织，通常首先见于： A.骨骼肌 B.脑 C.肝脏 D.脂肪组织 E.心肌 10 在萎缩的肌细胞内可见： A.含铁血黄素 B.脂褐素 C.黑色素 D.胆色素 E.纤维素 11 支气管粘膜上皮鳞化属哪种改变： A.分化不良 B.异型增生 C.不完全再生 D.癌前病变 E.适应性改变 12 肠上皮化生的概念是： A.原来无上皮的部位出现肠上 B.肠上皮转变为其它上皮 C.肠上皮转变为胃粘膜上皮 D.胃粘膜上皮转变为肠上皮 E.呼吸道上皮转变为肠上皮 13 细胞水肿与脂肪变性最易发生在： A.肺、脾、肾 B.心、肝、肾 C.肺、脾、心 D.心、肝、脾 E.肝、肾、脾 14 发生脂肪变性的细胞，电镜下可见脂滴形成于： A.内质网 B.高尔基体 C.胞浆基质 D.自噬泡
生态毒理学题目整理
《生态毒理学》试题整理 一、名词解释： 生态毒理学： 毒物： 一次污染物： 二次污染物： 持久性有机污染物： 半数致死剂量： 毒物兴奋效应： 水体富营养化： 生物放大： 生物转化： 诱变剂： 生长余力： 环境内分泌干扰物： 代谢抗性： 靶标抗性： 多样性指数： 模拟微系统试验： PFU法： 生态风险： 生态风险评估： 生态受体： 风险商值： 二、判断题： 1.Ecotoxicology是由Rachel Carson于1969年首先提出并使用这个词.（） 2.二次污染物的危害程度一般比一次污染物轻。（） 3.进入动物体内的外源化合物在分布过程中主要与脂蛋白结合。（） 4.呼吸道是动物吸收污染物质最主要的途径。（） 5.易化扩散需要消耗代谢能量。（） 6.生物迁移是污染物在环境中迁移的最重要的形式。（） 7.排泄是生物转运的最后一个环节。（） 8.水溶性外源化合物可不经过生物转化直接排出体外。（） 9.进入机体的极性物质可以不经Ⅰ相反应而直接发生Ⅱ相反应。（） 10.在生物转化中，大多数外源化合物代谢产物的毒性低于母体化合物。( ) 11.所有外源化合物经过生物转化后，其生物活性都会减弱或消失。 ( ) 12.有机磷农药通过抑制乙酰胆碱脂酶而产生毒理学效应。（） 13.经酶催化而形成自由基是大多数外源化合物形成自由基的方式。（） 14.重金属镉离子可引起钙稳态失调。（） 15.缺失、重复与易位发生在同源染色体之间，倒位发生在两对非同源染色体之间。（） 16.由于排除毒物需要消耗能量，接触毒物总是引起生物呼吸率的降低。（） 17.在器官形成期易于发生胚胎致畸，也可导致胚胎死亡。（） 18.“反应停”事件是毒物胚胎致畸的一个典型事件。（）
试验一细胞和组织的适应损伤与修复
实验一 细胞和组织的适应、损伤与修复 一、实验目的 1. 掌握细胞水肿、脂肪变性、玻璃样变性的大体和镜下标本的病变特征 2．掌握不同类型坏死的大体表现 3. 掌握肉芽组织的形态、结构 二、实验内容 （一）大体标本观察 1．脑萎缩：脑体积缩小、重量减轻，脑回变窄，脑沟变宽。 2．心脏萎缩：心脏体积缩小，重量减轻，呈深褐色或棕褐色。心脏表面的冠状动脉呈蛇行状迂曲，切面心壁变薄。 3．心脏肥大：高血压性心脏病时，心脏重量增加，左心室心肌代偿性肥大，左心室壁增厚，可达2.0cm ，乳头肌、肉柱增粗。 4. 肾细胞水肿：肾脏肿胀，包膜紧张，重量增加；切面隆起，边缘外翻；灰白混浊，失去正常光泽，似沸水烫过。 5．肝脂肪变性：肝脏增大，边缘钝圆，包膜紧张；切面稍隆起，边缘外翻；色淡黄、质软、有油腻感。 6．脾凝固性坏死：脾的近表面区域见一个或多个边界清楚、锥体形的梗死区（凝固性坏死），锥体的底位于脾表面，稍凹陷，尖端指向脾门。切面见呈梗死灶呈楔形，土黄色或灰白色，均匀一致，质致密而干燥。 7. 淋巴结干酪样坏死：淋巴结体积增大，切面正常淋巴结结构消失。新鲜干酪样坏死为淡黄色，质地松软、细腻，状似干奶酪样或豆腐渣样（固定后及陈旧性干酪样坏死呈灰白色）。 脑回变窄 脑沟变宽
8．足干性坏疽：足自其远端起始发生凝固性坏死，坏死组织干固皱缩，呈黑褐色，与周围健康组织之间有明显的分界线。 9．足湿性坏疽：足明显肿胀，湿润。呈暗绿或污黑色，与正常组织间无明显分界线。 10．肺脓肿（液化性坏死）：肺切面可见单房之脓肿，脓液已流失，腔较大，边界清楚，有一较厚的脓肿壁，由灰白色的纤维结缔组织构成。 （二）病理切片观察 1. 肾细胞水肿：首先找到肾小体，区分肾小体周围的近曲小管和远曲小管。观察：近曲小管上皮细胞体积增大，细胞界限不清，凸出于腔内，以致管腔狭小而不规则；胞浆内有伊红染色的颗粒，颗粒细小，大小较一致。部分胞浆已崩解脱落入管腔，细胞核清晰。肾间质中毛细血管受挤压。 2．肝细胞水肿：此为急性普通型病毒性肝炎之切片。肝细胞因胞浆内水含量增多而明显变大，胞浆淡染，称胞浆疏松化；有的肝细胞胞浆透明，称气球样变。肝细胞核的形态大致正常。肝窦受压变狭窄。 3. 肝脂肪变性：肝小叶的结构尚存在（肝细胞以中央静脉为中心呈放射状排列）。肝细胞体积增大、变圆，胞浆内出现了大小不等、边界清楚的脂肪滴空泡（该空泡处原为脂滴，制作石蜡切片时被有机溶剂溶去）。有的空泡细小、量多，分布在核周围，有的融合成一个大脂滴空泡，将肝细胞核压向边缘，形似脂肪细胞。肝窦受压、变狭窄。 4．肉芽组织：肉芽组织内有大量新生的毛细血管，内皮细胞肿胀；毛细血管之间为纤维母细胞和各种炎细胞，纤维母细胞胞体呈圆形、椭圆形或星芒状，胞浆丰富，略显嗜碱性，胞核体积大，染色淡，可有1～2个核仁；炎细胞以巨噬细胞为主，也有多少不等的中性粒细胞及淋巴细胞。 5. 结缔组织玻璃样变：玻璃样变性的结缔组织，纤维细胞明显减少，胶原纤维变粗，彼此融合，形成均质的梁状或片状粉染、半透明的玻璃样物质。 6. 血管壁玻璃样变：常见于高血压病时的细动脉，如脾中央动脉、肾入球小动脉等。此为血浆蛋白渗入内膜，在内皮下凝固，形成均匀红染的无结构状物质，使血管壁增厚、变硬，管腔狭窄甚至闭塞，又称细动脉硬化， 7．宫颈腺体鳞状上皮化生：宫颈管粘膜部分粘液腺泡腺腔尚可辩认。部分宫颈管粘膜固有的柱状上皮被复层鳞状上皮取代，鳞状细胞分化成熟，腺泡腔消失，细胞团周围有完整基底膜。腺泡之间结缔组织内有慢性炎细胞浸润。
生态毒理学1 (1)
第一章绪论 第一节毒物与毒理学 第二节环境毒物与生态毒理效应 第三节生态毒理学的基本框架 第四节生态毒理学的研究意义与展望 第一节毒物与毒理学 一、毒物及其分类 毒物：一般是指与生命体或生命组织发生相互作用能引起生物受到严重伤害甚至导致死亡的物质；或者说，毒物是指那些以相对较小的剂量就能导致生物受害或严重的细胞功能损伤以及生态系统产生不良效应的物质。 可从衣食住行来举例说明 食盐和酒（量的问题） 毒物分类通常采用的一些方法 分类范畴 物理状态气体、液体、固体、尘 用途农药、溶剂、添加剂 化学结构芳香胺类、脂肪族类、乙二醇 一般作用大气污染物、慢性毒物、工业毒品 效应致癌物质、致突变物质、致畸物质 目标器官神经毒素、肝毒素、肾毒素 作用机制刺激剂、抑制剂、阻碍剂 毒作用潜力轻度、中度、超毒性物质 标签需要氧化剂、酸、爆炸物质 一般分类塑料、有机化学品、重金属 二毒理学及其发展 （一）古代毒理学 毒理学一词源于希腊文字“toxikon” 《淮南子》、《诸病源候论》、《外台秘要》等 公元前1500年，一个系列的8本埃及纸草文“书籍”（800多个医药和毒药处方） 一股来说，公元9~15世纪的中世纪．有关毒理学的研究，更多的是基于教条和经验，而不是实验证据 16世纪德国医生Paracelsus(1493—1541)，把毒理学的研究带到了—个新的高度，强调实验的作用。 二）现代毒理学的开端和发展 意大利内科医生Ramazzini(1633－1714) 《工人的疾病》 意大利内科医生Fontana(1720-1853)进一步发展了靶器官毒性概念。 西班牙医生Orfila（1787-1853）被认为是现代毒理学的奠基人，他是系统利用实验动物的第一个科学家，并发展了在组织和体液中鉴定毒物的化学分析方法。 1930年实验毒理学的第一本杂志<
第一章 细胞和组织的适应与损伤
细胞和组织的适应与损伤 组织和细胞适应反应：萎缩、肥大、增生、化生 细胞和组织的损伤：原因和发生机制、损伤的形式和形态学变化 损伤的修复：再生、创伤愈合、纤维性修复 在生活过程中，机体的细胞、组织经常不断地受到内外环境中各种刺激因子的影响，并通过自身的反应和调节机制对刺激作出应答反应，适应环境条件的改变、抵制刺激因子的损害并得以存活。细胞、组织或器官对内外环境中各种有害因子的刺激作用而产生的非损伤性应答反应，表现出相应的功能和形态改变称为适应（adaptation）。适应在形态上表现为萎缩、肥大、增生和化生。 机体的这种反应能力可保证细胞和组织的正常功能，维护机体正常生存，但这种反应能力是有限的，一旦刺激的性质、强度和持续时间超越了一定界限，细胞就有可能出现损伤（injury）。较轻的细胞损伤是可逆的，即消除刺激因子后，受损细胞可恢复常态，通常称之为变性或亚致死性细胞损伤。严重的细胞是不可逆的，最终将致细胞死亡。 正常细胞、适应细胞、可逆性损害细胞和不可逆性损害细胞呈现代谢、功能和形态的连续变化过程，这些变化之间往往无截然的界限。可复性改变和不可复性改变之间也常难以截然区分。一个刺激究竟会引起细胞的适应反应、损伤还是死亡，不仅由刺激的性质和强度决定，还与细胞的易感性、血供、营养等有关。适应与损伤是大多数疾病发生、发展过程中的基础性病理变化。 第一节组织和细胞的适应性反应 一、萎缩 萎缩(atrophy)是指已发育到正常状态后受致病因子作用下引起的器官、组织或实质细胞的体积缩小，可以伴发细胞数量的减少。组织器官的未曾发育或发育不全不属于萎缩范畴。实质细胞萎缩时，常继发其间质（主要是脂肪组织）的增生，有时使组织、器官的体积甚至比正常还大，称为假性肥大，见于萎缩的胸腺和肌肉等。 萎缩通常由于细胞的功能活动降低、血液及营养物资供应不足，以及神经或内分泌刺激减少等引起。 （一）分类萎缩可分为生理性萎缩和病理性萎缩两类 1.生理性萎缩机体的许多组织、器官，随着年龄的增长自然地发生生理性萎缩， 这种现象也称退化。如青春期后胸腺的萎缩、妊娠后子宫的复旧、高龄时期出现的老年性萎缩（不可恢复性）。 2.病理性萎缩按其发生的原因可分为 （1）营养不良性萎缩：有全身性和局部性营养不良性萎缩，前者常见于蛋白质等摄入不足或消耗过多，如消化道梗阻长期不能进食或一些慢性消耗性疾病（结
生态毒理学实验设计
姓名：刘金鑫学号：201428006037073 培养单位：地理所 生态毒理学实验设计 一.【实验题目】： 砷对两种淡水藻类的毒性作用。 二.【实验设计思想】： 砷在环境中是一种普遍存在的污染物，它来源于人为源和自然源的释放，通过一定的途径进入地表、土壤和饮用水体中。通过目前的研究已经发现进入水体的砷对水中的生物存在影响，我们有必要研究水体中砷对水生生物的毒性作用，在这些研究中要数藻类的研究较多。我准备通过使用72小时生长速率——一种抑制生物检测方法，来判定五价砷和三价砷对两种在无外来干扰的热带的淡水藻类（绿藻和单针藻）的毒性。这个实验的意义在于，看砷对藻类的毒害作用是否很强，如果藻类对于砷的耐性较强，可以指导后面的藻类用于砷污染水体修复的研究。 三.【实验目的】： 1、掌握藻类的室内无菌培养。 2、学会藻类生长速率测定的方法。 3、掌握72小时生长速率的检测方法。 4、判定砷对两种藻类的毒害作用。 四.【实验原理】： 1、藻类的选取：由于不同种类的藻对砷毒性的反应不同，有的藻对砷比较敏感，而有的对砷的耐性较好，所以我选择了一种敏感性的单
针藻和一种耐性较好的绿藻。 2、培养液的选择：为了排除自然水体和纯净水体的影响，我用人工合成的软水（内部成分以及含量都是已知的）来进行实验。 3、培养瓶的选择：为了防止砷在普通瓶体上的吸附，我选择250ml 的硼硅酸盐的锥形瓶。 4、检测前处理：将处于指数生长阶段（5-6天）的细胞通过离心（2500rpm，7min），超纯水洗涤三次确保培养液除去后，再用于生物检测。 5、培养条件：将培养瓶放在培养架上进行培养。培养架周围的环境条件：27±1℃、12：12h的光照和无光、每天用手摇晃两次锥形瓶使其进行充分的气体交换。 6、通过多功能计数仪测定结果。 7、数据分析：通过线性插值法计算72hIC50。 8、藻对砷和磷的吸收具有竞争性。 五.【实验材料】： 绿藻、单针藻、玻璃烧杯、天平、硼硅酸盐锥形瓶、镊子、酒精灯、量筒、真空过滤器、滤膜、试管、无菌操作台、吸管、多功能计数器、移液枪、PH试纸（PH5.4—9）、牛角匙、牛皮纸、棉花、纱绳、高压蒸汽灭菌锅、培养架、温度计、恒温室、冷光源、NaHCO3、CaSO4·2H2O、MgSO4、KCl、CaCO3、10%HNO3、超纯水、Na2AsO4·7H2O、NaAsO2、NaNO3、KH2PO4等。 六.【实验步骤】：
甜菜碱的营养作用和效果修订稿
甜菜碱的营养作用和效 果 WEIHUA system office room 【WEIHUA 16H-WEIHUA WEIHUA8Q8-
甜菜碱(Betaine)是首先在欧洲被发现的，它主要存在于甜菜糖的糖蜜中，故而得名，但其功效直到二十世纪七十年代才渐被认识。甜菜碱普遍存在于动植物体内，是动物代谢的中间产物，在营养物质的代谢中起着十分重要的作用，近年来，欧美一些国家相继在畜禽生产和水产养殖中进行了大量的研究，证实了甜菜碱是动物机体内重要的甲基供体，参与氨基酸和脂肪的代谢，调节动物体内渗透压，具有促进生长、改善胴体组成、提高肉质、提高水产饵料的诱食性等功效。 随着甜菜碱化学合成方法的进一步成熟，生产成本不断降低，已广泛应用于畜禽配合饲料中，在水产饲料和观赏动物饲料中使用也已十分普遍，大量试验研究表明，甜菜碱是一种无毒、害、无污染的新型多功能添加剂。 一、甜菜碱的理化特性。 (一)、甜菜碱的化学结构 甜菜碱是—种季铵型生物碱，又名甘氨酸甜菜碱、三甲基甘氨酸等，化学名称为N-N-N-三甲基甘氨酸内盐，分子式C5H11NO2,分子量，其化学结构与氨基酸、胆碱相似 (二)、甜菜碱的理化特性 纯品天然甜菜碱为微棕色流动性结晶粉末，能耐高温，熔点293℃；合成纯品甜菜碱则为白色或淡黄色结晶粉末，熔点301℃～305℃；有较强的吸水
性，极易潮解，并释放出三甲胺；在水中极易溶解(160g／100g水)，易溶于甲醇，微溶于乙醇，在氯仿或乙醚中不溶。 (三)、甜菜碱的安全性 甜菜碱本身是动物体内的代谢中间产物，经大量实验证明，甜菜碱及其盐类无毒、无害、无污染，其小鼠半数致死量(LD50)在11，000m9／kg，对动物无致畸、致癌、致突变作用，是公认的安全物质。 二、甜菜碱的生产工艺 (一)、天然提取法 甜菜糖蜜是提取天然甜菜碱的主要原料，提取工艺主要有两种，一是离子交换法，此方法是将稀释的糖蜜流经强阳离子交换树脂柱和其它成份分离而留在柱内，后用稀氨水洗脱甜菜碱，洗脱液再流经强阴出了交换树脂，洗出液经蒸发、脱色、结晶、过滤制得甜菜碱；另一种普遍使用的方法是离子排斥法，此方法是将糖蜜导入填充有聚乙烯-二乙烯树脂的色谱分离柱(树脂交联二乙烯苯％，柱温80℃左右，料液流速接近色谱系统临界速度)，用水洗脱色谱分离树时，盐、糖及甜菜碱依次排出得以分离，再将收集液经蒸发、浓缩、三段结晶、过滤制得纯度约98％的无水或一水甜菜碱。 (二)、化学合成法 一般采用氯乙酸和三甲胺为原料在液碱中进行常压反应，后经离子交换洗脱出甜菜碱母液，经蒸馏、盐酸酸化、浓缩、结晶、过滤成甜菜碱盐酸盐：或
蛋氨酸与甜菜碱之间的关系
甜菜碱与蛋氨酸 蛋氨酸即CH3-S-CH2-CH2-CH(NH2)COOH是疏水氨基酸,它的侧链上带有一个非极性的甲硫醚基。蛋氨酸是具有旋光性的化合物,分为L型和D型。在动物体内L型易被肠壁吸收,D 型要经酶转化成L型后才能参与蛋白质的合成。由于D型能够在动物体内转化成L型,所以饲料中可以使用DL混合型的蛋氨酸。 甜菜碱: 王德萍(2009)采用55周龄巴布考克蛋鸡进行甜菜碱对蛋鸡生产性能和蛋品质影响的研究。实验采用在其基础日粮中分别添加0、0. 5、1.0、1.5和2 g/kg的甜菜碱,观察其对蛋鸡生产性能的影响。与对照组相比,在蛋鸡日粮中加入1.5 g/kg的甜菜碱可极显著提高产蛋率8.13%,显著降低料蛋比8.10%，但是对蛋品质无显著影响。 孙龙生（2001）选用432只40周龄的罗曼蛋鸡进行实验，在基础日粮上添加0.4,0.8,1.2g/kg 甜菜碱，结果表明甜菜碱对蛋重显著影响，补充添加0.8个g/kg甜菜碱能够使蛋重增加3.57%，同时降低料蛋比8.44%，同时哈夫单位高于其他处理组。 郑长峰（1998）利用200日龄800羽罗曼蛋鸡研究分别饲喂含甜菜碱为0、500、1000、1500mg/kg的4种饲粮,研究甜菜碱对蛋鸡产蛋性能的影响及抗脂肪肝作用时发现,甜菜碱显著改进蛋鸡的产蛋性能,其中添加1000mg/kg产蛋率提高11.08%,料蛋比降低10.36%;蛋重随日粮中的甜菜碱递增呈上升趋势;甜菜碱具有降低破蛋和异常蛋的作用(P<0.05),可改进蛋品质,促进浓蛋白和蛋黄的合成(P<0.05),降低蛋黄中胆固醇的含量。甜菜碱影响脂肪代谢,降低腹脂率和肝脏中脂肪含量(P<0.01),防止脂肪肝的发生。 戴德渊（2010）设计蛋鸡日粮总蛋氨酸0.43%，选用308 日龄海兰褐商品代蛋鸡7 500 只，分为5 组，第1组为对照组，为全部添加蛋氨酸，不加甜菜碱，即替代0%；第2、3、4 组为甜菜碱替代日粮总蛋氨酸的10%、20%、30%；第5 组甜菜碱替代日粮总蛋氨酸的41.86%，全部替代外加的蛋氨酸。（98% 甜菜碱：99% 蛋氨酸＝1：1.25）。从产蛋率、日采食量和料蛋比总体看，效果顺序为20%组>0%组>10%组>30%组>41.86组。 张涛等（2004）研究发现，18-25周龄的海兰褐蛋鸡，使用甜菜碱替代蛋氨酸，蛋鸡产蛋性能、蛋品质和血液生化指标的分析结果都说明，在蛋鸡产蛋高峰前期.不添加胆碱时，甜菜碱以1:1比例，0.75:1比例替代50%的蛋氨酸有益于提高产蛋性能和饲料利用率，改善蛋品质，促进了体脂的降解和低密度脂蛋白的生成加强蛋白质的生物合成过程；在蛋鸡产蛋高峰前期，在不添加胆碱时，甜菜碱以0.5:1比例替代50%的蛋氨酸，与对照组各试验指标相比接近；蛋鸡产蛋高峰前期，在基础日粮含有一定量胆碱的情况下，用甜菜碱以1:1比例，0.75:1比例替代50%的蛋氨酸，可以为机体提供更多的甲基，起到节约蛋氨酸和提高生产性能和蛋品质的功能，甜菜碱以0.5:1比例替代50%的蛋氨酸的蛋氨酸，可以起到其相同的效果。 王兆山等（1999）在罗曼褐蛋鸡上利用甜菜碱替代部分氨基酸的研究中发现（其中l组为对照组日粮,其余各组料以甜菜碱替代部分蛋氨酸,所添加的甜菜碱纯度为98%。2组以1:2替代蛋氨酸添加量1/2,3组以l:2替代蛋氨酸添加量2/3,4组以l:2替代蛋氨酸添加量3/4。）1:2替代蛋氨酸添加量2/3和1:2替代蛋氨酸添加量1/2,其各项试验指标都有优于对照组的趋势;而以1:2替代蛋氨酸添加量3/4时,其各项试验指标均有劣于对照组的趋势。 王若军等（1999）对甜菜碱对海兰褐产蛋后期生产性能影响研究中发现，（对照日粮中所用氯化胆碱为0.6kg/T,单体合成蛋氨酸量为0.8kg/t，试验日粮是将对照日粮中添加的单体蛋氨酸分别用甜菜碱盐酸盐替代50%和100%,并根据1kg甜莱碱盐酸盐相当于2kg蛋氨酸方式进行替代）用甜菜碱盐酸盐替代日粮中50%或全部单体合成蛋氨酸均可显著提高海兰揭蛋鸡产蛋高峰后期产蛋率,但是用甜菜碱盐酸盐100%替代蛋氨酸破蛋率显著升高。实验周期内总产蛋重不论50%或100%替代蛋氨酸组均显著高于对照组。
细胞和组织的适应、损伤与修复
细胞和组织的适应、损伤与修复 第一节适应 在环境发生变化时，机体的细胞和组织为了避免损伤，可通过改变自身的代谢、功能和形态结构以适应变化的环境，与之协调的过程称为适应。在形态学上的改变表现为萎缩、肥大、增生和化生。 (一)萎缩 1．概念发育正常的器官、组织体积变小称为萎缩。通常是由于该器官的实质细胞体积缩小所致，有时也可因细胞数目减少引起，或二者兼有。萎缩有生理性和病理性之分。病理性萎缩有的表现为全身性萎缩，如消化道慢性梗阻；有的表现为局部组织器官萎缩，如动脉粥样硬化引起心、脑、肾等器官萎缩。此外，萎缩又可分为：①营养不良性萎缩；②废用性萎缩；③压迫性萎缩；④神经性萎缩；⑤内分泌性萎缩等。 2．病变萎缩的器官体积变小、重量减轻、颜色变深、质地变韧、包膜增厚。光镜下萎缩的细胞体积变小或数目减少，或两者兼有。胞浆常深染，核浓缩。心肌萎缩时，其胞浆内可出现脂褐素。 3．后果萎缩一般是可复性的，如原因持续存在，萎缩的实质细胞最后消失。 (二)肥大 概念：细胞体积增大，使该器官、组织体积增大，称为肥大。 一般可分为生理性肥大和病理性肥大两类。病理情况下，例如高血压病，左心负荷加重，心肌纤维体积增大，属代偿性肥大。肥大有时需与实质细胞萎缩、间质增生引起的假性肥大区别。 (三)增生 概念：细胞数量增多，使该组织、器官体积增大，称为增生。 增生也有生理性增生和病理性增生之分。肥大和增生常同时存在，也可单独存在。 (四)化生 1.概念化生是指一种已分化成熟的组织细胞，转化为另一种相似性质的、分化成熟的组织细胞的过程。化生是一种可复性病变，原因去除后大多可恢复。 2.类型 (1)鳞状上皮化生：气管及支气管的假复层柱状纤毛上皮、胆囊粘膜上皮、宫颈粘膜上皮、肾盂的移行上皮等在慢性炎症时转化为鳞状上皮。 (2)肠上皮化生：慢性胃炎时，部分胃粘膜上皮转化为肠粘膜上皮，出现杯状细胞、潘氏细胞及具有纹状缘的吸收上皮甚至形成小肠绒毛。如果一种腺上皮转化为另一种腺上皮，则称为腺性化生。 (3)结缔组织和支持组织化生：如间叶组织化生为脂肪组织或透明软骨。 3．意义化生对机体是有利的，但也有其局限性和不完善性。