厌氧性细菌

第11章厌氧性细菌

【A型题】

1.在正常人体肠道中厌氧菌与非厌氧菌的比例约为：

A.1000:1

B.100:1

C.1:1

D.1:100

E.1:1000

2.有关“厌氧芽胞梭菌”的叙述，哪一项是错误的：

A.革兰染色阳性

B.主要分布于土壤、人和动物肠道

C.都能通过伤口感染

D.特异性治疗需应用抗毒素

E.抵抗力强

3.破伤风痉挛毒素：

A.抑制多种细胞的蛋白质合成

B.阻断上下神经元之间的正常抑制性神经冲动传递

C.抑制胆碱能运动神经释放乙酰胆碱

D.激活肠粘膜腺苷环化酶，增高细胞内cAMP水平

E.作用于呕吐中枢

4.对未经破伤风类毒素免疫过的伤员，为预防破伤风，最好应立即注射：

A.破伤风类毒素

B.破伤风抗毒素

C.抗破伤风免疫球蛋白

D.抗生素

E.破伤风抗毒素和类毒素

5.破伤风抗毒素治疗破伤风的目的是：

A.抑制破伤风梭菌生长

B.阻止破伤风梭菌产生外毒素

C.中和与神经组织结合的外毒素

D.中和游离于神经组织外的外毒素

E.阻止破伤风梭菌进入神经细胞

6.注射破伤风抗毒素(马血清制品)进行人工脱敏的原理是：

A.该抗毒素对IgE产生有抑制作用

B.该抗毒素对产生IgE的细胞有抑制作用

C.少量多次注射该抗毒素，使机体对该制品的反应性下降

D.机体对该抗毒素天然无反应性

E.抑制IgE粘附肥大细胞上

7.一名接种史不明的外伤患者，需紧急预防破伤风最适的措施是：

A.抗生素

B.清创

C.破伤风抗毒素

D.破伤风抗毒素＋清创

E.清创＋破伤风抗毒素＋抗生素

8.培养时能产生汹涌发酵现象的细菌是：

A.脆弱类杆菌

B.产黑色素杆菌

C.产气荚膜梭菌

D.艰难梭菌

E.破伤风梭菌

9.产气荚膜梭菌区别于其他厌氧菌最有特点的生物学性状是：

A.革兰阳性粗大杆菌

B.远端芽胞

C.厌氧性

D.菌落光滑，有溶血

E.分解糖大量产气

10.引起术后气性坏疽的梭状芽胞杆菌通常来自：

A.空气

B.肠道

C.敷料

D.手术器械

E.输液

11.产气荚膜梭菌最重要的外毒素是：

A.卵磷脂酶

B.胶原酶

C.透明质酸酶

D.ε毒素

E.DNA酶

12.产气荚膜梭菌：

A.造成感染灶脓汁稀薄易扩散，与正常组织边界不明显

B.造成脓汁粘稠，脓肿易于局限化和形成血栓

C.造成脓汁呈灰黑色或乳白色、泡沫状、奇臭

D.造成组织呈高度肿胀坏死，水气夹杂，触摸有捻发感

E.造成泌尿道粘膜化脓性感染

13.有关“气性坏疽”的叙述，哪一项是错误的：

A.伤口及时处理、扩创

B.严密隔离病人

C.早期用多价抗毒素血清治疗

D.用大剂量青霉素杀死病原菌

E.可接种类毒素预防

14.哪种细菌所致食物中毒与食入罐头、香肠、发酵豆制品等有关。

A.金黄色葡萄球菌

B.副溶血性弧菌

C.肉毒梭菌

D.肠炎沙门菌

E.产气荚膜梭菌

15.哪种毒素能抑制神经元释放神经介质，引起神经传导功能异常:

A.肉毒毒素

B.白喉毒素

C.霍乱肠毒素

D.葡萄球菌肠毒素

E.致热外毒素

16.能引起食物中毒，但不以胃肠道症状为主的是：

A.金黄色葡萄球菌

B.鼠伤寒沙门菌

C.产气荚膜梭菌

D.肉毒梭菌

E.副溶血性弧菌

17.目前已知毒性最强的毒素是：

A.肉毒毒素

B.破伤风毒素

C.鼠疫毒素

D.白喉毒素

E.炭疽毒素

18.不能引起食物中毒的细菌是：

A.金黄色葡萄球菌

B.肉毒梭菌

C.鼠伤寒沙门菌

D.副溶血弧菌

E.伤寒沙门菌

19..关“艰难梭菌所致假膜性肠炎”的叙述，哪一项是错误的：

A.为二重感染

B.应停用原来抗生素

C.可注射抗毒素

D.可口服微生态制剂

E.首选甲硝唑，如无效换用万古霉素

20.关“无芽胞厌氧菌感染特征”的叙述中，哪一项是错误的：

A.内源性感染

B.主要靠内毒素致病

C.无特定病型，大多为化脓性感染

D.多呈慢性过程

E.普通培养法无细菌生长

21.无芽胞厌氧菌的致病条件通常不包括：

A.菌群失调

B.宿主免疫力降低

C.定位转移

D.局部形成厌氧微环境

E.外源性感染

22.病灶多在深部，造成脓汁呈灰黑色或乳白色、泡沫状、奇臭等特征的细菌是：

A.金黄色葡萄球菌

B.乙型溶血型链球菌

C.无芽胞厌氧菌

D.产气荚膜梭菌

E.淋球菌

23.分离培养无芽胞厌氧菌时，应注意的事项中不包括：

A.从感染中心处采取，并避免正常菌群的污染

B.标本采取后应立即放入厌氧标本瓶中

C.迅速送检

D.通常接种在牛心脑浸液为基础的血平板

E.厌氧培养24小时

24.脆弱类杆菌(无芽胞厌氧菌)感染的治疗可选用:

A.庆大霉素＋第三代头孢菌素

B.杀假单胞菌氨基糖甙类抗生素

C.甲硝唑或克林霉素

D.万古霉素＋利福平

E.青霉素

【X型题】

25.厌氧芽胞梭菌属致病菌:

A.革兰染色阳性

B.无荚膜

C.产生外毒素，致病性强

D.引起外源性感染

E.治疗需应用抗毒素和抗生素

26.无芽胞厌氧菌的共同特点中，不包括:

A.是人体的正常菌群

B.抵抗力强

C.需作细菌分离培养才能确诊

D.治疗需采用抗生素

E.革兰染色阳性

27.有关“破伤风”的叙述，哪几项是正确的:

A.由破伤风痉挛毒素引起

B.治疗时必须清创扩创

C.可接种破伤风类毒素预防

D.病愈后可获得牢固免疫力

E.可同时注射破伤风类毒素和抗毒素实施紧急预防

28.有关“产气荚膜梭菌”的叙述，哪几项是正确的:

A.革兰阳性粗大杆菌

B.重要生化特性之一是汹涌发酵

C.致病条件仅见于深而窄的伤口

D.具有强大的侵袭力

E.是气性坏疽的主要病原菌

29.有关“艰难梭菌”的叙述，哪几项是错误的：

A.对氧不敏感

B.通常对甲硝唑和万古霉素敏感

C.是条件致病菌

D.抵抗力不强

E.是引起假膜性肠炎的重要病原菌

[思考题]

30．厌氧菌在平时和战争感染中有何重要性？有哪些迹象可疑为厌氧菌感染？

31．破伤风梭菌感染致病所需条件是什么？如何防治破伤风？

32．肉毒梭菌和鼠伤寒沙门菌引起的食物中毒有何不同？

参考答案

【A型题】

1.A

2.C

3.B

4.E*

5.D

6.C

7.E

8.C

9.E 10.B

11.A 12.D* 13.E* 14.C 15.A

16.D 17.A 18.E 19.C 20.B

21.E 22.C 23.E* 24.C*

【X型题】

25.A C D E 26.B E 27.A B C E

28.A B D E 29.A D

疑难解析

【题4】当因铁钉深刺造成外伤时，伤口有可能污染破伤风梭菌的芽胞。在厌氧条件

下，芽胞发芽繁殖，分泌神经毒素致病。破伤风痉挛毒素毒性强，一旦与易感细胞结合，难以解脱，抗毒素亦不能中和其毒素作用，故紧急预防应注射破伤风抗毒素，以中和游离于神经组织外的毒素，从而起到保护作用。研究发现，同时给予破伤风类毒素作主动免疫，效果更好。丙种球蛋白来自健康人的血清，经提取纯化而得，一般不含破伤风抗毒素。破伤风梭菌主要致病物质是其代谢产物—外毒素（神经毒素），故用破伤风类毒素作一般性预防。

【题12】产气荚膜梭菌侵袭力强，在创伤部位繁殖，产生多种毒素和侵袭性酶损伤组织。由于卵磷脂酶和透明质酸酶对组织的分解破坏作用，使细菌及其致病物质易于穿过肌肉结缔组织间隙，侵入四周正常组织，发酵肌肉和组织中的糖类，产生大量气体，造成气肿，挤压软组织和血管，影响血液供应，造成组织坏死，病变局部水肿，水气夹杂，触摸有捻发音。

【题13】气性坏疽是一种严重的创伤性感染，预防特别重要。该病病原体种类多，所产生的毒素型别多，抗原复杂，故尚无特异性预防用的类毒素。预防措施主要是伤口及时处理、扩创，局部用H2O2冲洗、湿敷，破坏和消除厌氧微环境，可预防性服用抗生素。严格隔离病人，并对所用器械及敷料彻底灭菌，以防该菌在病室中传播。对病人治疗，除尽早正确处理感染伤口，切除并清除感染和坏死组织，尽早使用多价抗毒素血清外，还应使用大剂量青霉素等抗生素杀灭病原菌。

【题23】标本采集与送检是否正确，常直接关系到病原菌检出的成败。无芽胞厌氧菌大多是人体正常菌群，标本应从感染中心处采集并避免正常菌群的污染，注意无菌操作。厌氧菌对氧敏感，标本采取后宜立即放入特制的厌氧标本瓶中，迅速送检，接种于适宜的培养基中。接种后置于37℃厌氧培养2～3天。

【题24】氨基糖甙类抗生素对厌氧菌完全无效，因为在厌氧条件下，这类药物不能转运到菌体内。如果氨基糖甙类抗生素与其他抗菌药物联用，将杀死人体正常菌群大肠杆菌。万古霉素适用于所有革兰阳性厌氧菌感染，但越来越多抗性菌株的产生增加了治疗的难度。95%的菌株对青霉素有抗性，如脆弱类杆菌能产生β-内酰氨酶，可破坏青霉素和头孢菌素。但脆弱类杆菌对甲硝唑、氯霉素、克林霉素等敏感。

临床检验主管技师 微生物检验 第十七章 厌氧性细菌及检验

第十七章厌氧性细菌及检验 本章内容 一、概述 厌氧菌的分类 厌氧菌的临床意义 厌氧菌感染 厌氧菌标本的采集与送检 厌氧菌的分离与鉴定 厌氧环境的指示 二、常见厌氧菌 破伤风杆菌 产气荚膜梭菌 肉毒梭菌 艰难梭菌 厌氧球菌 无芽胞厌氧菌 厌氧菌概述 一大群专性厌氧，必须在无氧环境中才能生长的细菌。 G+有芽胞的梭菌：有芽胞，抵抗力强，广泛存在，可出芽繁殖，产生多种外毒素，引起严重疾病。 G+/G-无芽胞的球菌与杆菌：人体正常菌群，可存在于口腔、肠道、上呼吸道、泌尿生殖道等。致病性属条件致病性的内源性感染。 厌氧菌概述——分类 《伯杰系统细菌学手册》分类标准： 无芽胞厌氧菌有40多个菌属，300多个菌种和亚种；而有芽胞的厌氧菌只有梭菌属，包括130个种。 据耐氧性分类

（1）专性厌氧菌：是指在降低氧分压的条件下才能生长的细菌。又分为极度厌氧菌（氧分压＜0.5%，空气中暴露10min致死，如丁酸弧菌）和中度厌氧菌（氧分压为2%～8%，空气中暴露60～90min能生存，如大多数人类致病厌氧菌）。 （2）微需氧菌：能在含5%～10%CO2空气中的固体培养基表面生长的细菌，如弯曲菌属。 （3）耐氧菌：其耐氧程度刚好能在新鲜配制的固体培养基表面生长。一旦生长，暴露数小时仍不死亡，如第三梭菌、溶组织梭菌。 厌氧菌概述——临床意义及感染 感染类型 外源性感染：梭状芽胞杆菌属引起的感染。 内源性感染：无芽胞厌氧菌大多数是人体正常菌群，属于条件致病菌，在一定条件下可引起感染，一般不在人群中传播。 感染的危险因素： 组织缺氧缺血； 机体免疫功能下降； 某些手术及创伤易发生厌氧菌感染； 长期应用某些抗菌药物； 深部需氧菌感染。 感染的临床指征： 感染局部产生大量气体； 多发生在黏膜附近； 深部外伤后继发感染； 分泌物有恶臭或为暗红色； 常见于长期应用氨基糖苷类抗生素治疗无效的病例； 镜检有细菌，常规培养阴性。 厌氧菌概述——标本的采集与送检 重要原则：标本绝对不能被正常菌群所污染；应尽量避免接触空气。 适宜标 本 血液、骨髓、脑脊液、关节液、心包液、胸腔积液、腹腔液、胆汁、由活检或尸体解剖 获得的组织标本、深部脓肿抽取物、经环甲膜以下或肺穿刺抽取的肺渗出物、后穹窿穿 刺抽取的盆腔渗出液及无菌套管抽取的宫腔内容物、膀胱穿刺液及其它组织穿刺液等不宜标 本 鼻咽拭子、齿龈拭子、直肠拭子、喀出的痰液、自然排出的尿液和导出的尿液、流出的 脓液、接近皮肤或黏膜的分泌物、阴道分泌物、胃和小肠内容物、粪便（艰难梭菌除外） 等 厌氧菌概述——标本的采集与送检 采集 多采用针筒抽取、穿刺等，应严格无菌操作，严禁接触空气。 厌氧培养最理想的检查材料是组织标本，因厌氧菌在组织中比在渗出物中更易生长。

基层疾控中心细菌性食物中毒检验研究

基层疾控中心细菌性食物中毒检验研究 发表时间：2018-05-29T11:48:36.017Z 来源：《中国误诊学杂志》2018年第8期作者：周凌军[导读] 食物中毒为较为常见且多发的公共卫生突发事件，主要包括细菌性食物中毒、动植物毒素食物中毒。 临武县疾控中心检验科湖南郴州 424300 摘要：目的：研究基层疾控中心细菌性食物中毒检验。方法：选取食物中毒患者一共100例，患者收取时间在2015年1月8日至2016年3月10日，对100例食物中毒患者基本资料进行分析。结果：根据表1研究显示，在100例食物中毒患者中，以革兰阳性菌较为常见，构成比为30.00%，其次为革兰阴性菌、构成比为20.00%，而不动杆菌以及表皮葡萄球菌所占比例较小，在中毒患者中，采集样本为1200份，其中餐具涂抹物样本有350份、剩余食物样本300份、肛拭子以及呕吐物样本550份，肛拭子以及呕吐物样本检出率较高、为58.18%，餐具涂 抹物样本检出率较低、为5.71%。结论：细菌性食物中毒主要以真菌、革兰阴性菌以及革兰阳性菌为主，而表皮葡萄球菌以及不动杆菌较少，为了预防食物中毒情况，基层疾控中心应做好检验和采样工作，能显著减少食物中毒情况。关键词：基层疾控中心；细菌性食物中毒；检验 食物中毒为较为常见且多发的公共卫生突发事件，主要包括细菌性食物中毒、动植物毒素食物中毒、化学污染性食物中毒等，以细菌性食物中毒较为常见，近年来细菌性食物中毒发生率不断增加，基层疾控中心是负责单位，在检测过程中容易受到较多因素影响，同时检测时间较长，难以满足患者的需求[1]，因此，本次研究对基层疾控中心细菌性食物中毒检验进行分析，为预防以及控制细菌性食物中毒提供有利依据，见各项研究内容中的描述。1资料和方法 1.1资料 选取食物中毒患者一共100例，患者收取时间在2015年1月8日至2016年3月10日，对100例食物中毒患者临床资料进行分析。纳入标准-(1)100例患者均符合食物中毒诊断标准、(2)所有患者均签署知情同意书。食物中毒患者；年龄：患者年龄在15岁-60岁，平均年龄（37.21±1.02）岁，性别：50例女性患者、50例男性患者。 1.2方法 （1）基层疾控中心在发现食物中毒情况后（细菌性），应在中心建立食物中毒的检验计划，做好其材料以及样品收集工作，制定规章和制度，进行仪器设备检查以及质量控制或者人员培训等各项工作，（2）准备好食物中毒事件近年来的相关材料，（3）基层疾控中心应对检验人员实施培训，加强每位检验人员自身学习知识，要求每位检验人员对食物中毒情况（细菌性）各项基本资料完全掌握，提高检验人员的检验水平。 现场调查：在了解细菌性食物中毒各项情况后，每位检验人员应进行现场调查，充分了解患者的病原菌、自身临床症状以及可疑食物，对每位患者实施常规检查，例如血常规检验，判断导致细菌性食物中毒的样品以及病原菌。样品采集：检验人员应对中毒患者呕吐物、剩余食物进行收集，若在现场无剩余食物或者患者未发生呕吐情况，应将餐具进行收集，采集每位患者静脉血样，若患者的培养结果是阴性，应采集每位患者多个部位，在采样过程中进行无菌操作，预防感染情况。检验方式：1增菌是指培养细菌性食物中毒患者呕吐物以及剩余食物，将其涂抹在平板之上，2对液体样品实施图片处理，若样品是固体，应使用生理盐水实施处理，最后涂片，在显微镜下分析以及观察细菌，详细记录染色的反应、形态以及数量，3在进行分离培养过程中，应遵循我国相关规定，若其分离效果不显著，采用血浆凝固酶平板分离，4使用数码法实施细菌检验，其所涉及的内容包括肠杆菌科细菌生化编码鉴定系统和细菌鉴定系统。 1.3 观察指标 分析食物中毒患者致病菌种类。 2.结果

细菌性食物中毒的微生物检验及结果分析

细菌性食物中毒的微生物检验及结果分析 摘要】目的：通过对细菌性食物中毒的检验分析，探讨其病原性特征，评价微生物检验结果。方法：选取2016年1月至2017年12月期间60例被确诊的细菌性食物中毒事件作为研究对象，检测患者相关的粪便、肛拭子、呕吐物、厨师或食物售卖者手拭子以及食物操作间涂抹样。结果：全部60例食物中毒事件中，占比最大的致病菌为副溶血性弧菌，共16例，占比26.7%；占比第二位的致病菌是致泻性大肠杆菌，共8例，占比13.3%；占比第三位的致病菌是金黄色葡萄球菌，共7例，占比11.7%；其余依次为蜡样芽孢杆菌6例，占比10.0%；变形杆菌5例，占比8.3%；沙门菌4例，占比6.7%；志贺菌3例，占比5.0%；另有11例为其他致病原菌，占比18.3%。其中发生于春季的有12例，占比20.0%；发生在夏季的有20例，占比33.3%；发生在秋季的有24例，占比40.0%；发生在冬季的有4例，占比6.7%。结论：在导致患者细菌性食物中毒的所有致病菌中，副溶血性弧菌和致泻性大肠杆菌是比例最高的两种病菌；从发生时间上来看，夏秋两季发生细菌性食物的概率较大，在生活中应当提高警惕。此外，通过对细菌性食物中毒实施微生物检验，能够迅速找出致病菌类型，找到致病污染源，对于有效控制病情，科学治疗有重要意义。 【关键词】食物中毒；微生物检验 【中图分类号】R446 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2018）17-0-02 引言 食品安全对于人民群众的健康和生命有至关重要的意义，甚至对社会的稳定和谐有重要影响。然而，近年来，我国食品安全问题屡屡爆发，造成恶劣的社会影响，形势不容乐观，因此，食品安全问题也得到了世界的广泛重视。患者食用了携带有致病菌的食物，就会引发集体中毒[1]。食物中毒事件一方面涉及面广，往往是多人中毒甚至群体中毒，另一方面发病迅速，一旦发生食物中毒患者很快就会出现呕吐、恶心等症状，直接导致患者脱水、乏力，治疗不及时，会引发多种严重病症，严重食物中毒甚至对患者生命造成直接威胁。在食物中毒患者的急救和治疗过程中，迅速准确的找到致病菌具有至关重要的作用[2]。只有找到致病菌，才能够对症治疗。微生物检验是当前用来寻找致病菌的最有效的方法。本文将以2016年1月至2017年12月期间发生的60例细菌性食物中毒事件作为研究对象，对微生物检验的结果展开分析。 1.材料与方法 1.1 材料 选取2016年1月至2017年12月期间的60例确诊的细菌性食物中毒事件作为研究对象。对全部患者食用的剩余食物展开检验，包括：19例肉类食物，18例瓜果蔬菜类食物，11例饮料类食物以及其他12例其他类型食物。同时，还对全部患者的粪便、肛拭子、呕吐物实施检查；另外对31例与中毒事件相关的厨师、食品售卖者的手拭子实施检查。另外，在48例事件相关的操作间采集样本实施检查。 1.2 检查所用的仪器和试剂 所有检验使用的仪器包括如下：显微镜、电子天平、细菌生化鉴定仪分析系统、恒温水浴、菌落计数器、酶标仪以及荧光定量PCR仪。 使用的全部试剂如下：T-PCR检测试剂、3%双氧水溶液、各类检测所需的营

沉降菌检验标准操作规程

01.0 目的 01.1 阐述洁净室（区）空气中沉降菌检测操作规程，保证药品的质量，防止生产环境对 产品的污染，保证实验室的环境达到检测产品的要求。 02.0 适用范围 02.1 适用于本公司的洁净室（区）的沉降菌监测和洁净度等级的验证。 03.0 人员职责 测试人员对洁净室（区）沉降菌的测试。 04.0 内容 04.1 术语和定义 下列术语和定义适用于本规程。 04.1.1 菌落：细菌培养后，由一个或几个细菌繁殖而形成的细菌集落，简称CFU，通常用 个数来表示。 04.1.2 沉降菌：用GB/T16292-2010 提及的方法收集空气中的活性微生物粒子，通过专门 的培养基在适宜的生长条件下系繁殖到可见到的菌落数。 04.1.3 沉降菌菌落数：规定时间内每个平板培养皿收集到空气中沉降菌的数目，以cfu/ 皿表示。 04.2 测试原理：本测试方法利用沉降法，即通过自然沉降原理收集空气中的生物粒子于 培养基平皿，经若干时间，在适宜的条件下让其繁殖到可见的菌落数，以平板培 养中的菌落数来评定洁净环境内的活微生物数，并以此来评定洁净区的洁净度。 04.3 监测周期：A级洁每次室验做监控， B 级每周一次，C级每季度一次，D级每半年一 次监控。 04.4 测试方法： 04.4.1 使用设备与材料 高压灭菌锅：使用时应严格按照操作规程进行。 恒温恒湿培养箱：必须定期对培养箱进行校验。 培养皿：一般采用φ90mm×15mm培养皿。 培养基：胰酪大豆胨琼脂培养基（TSA）；已灭菌配制好的培养基平皿放入30-35 ℃ 恒温培养箱中培养72 小时，若培养基平皿上确无菌落生生即可供采样用，制备好 的培养基平皿应放在2- 8℃的环境中存放。 清洁剂：75%酒精 04.4.2 测试时间： （1）对单向流，如 A 级净化房间内及超净工作台，测试应在净化空调系统正常运行不 少于10 分钟后开始。

临床细菌学检验的质量控制流程

临床细菌学检验的质量控制流程 1、质量的概念和质量保证 影响检验结果质量的因素很多,实验过程中,仪器、试剂和操作等均会引起试验结果的误差,衡量检验结果的质量常用准确度和精确度,或特异性和灵敏度。具体采用哪一种指标应根据实验的性质决定,目前临床细菌学检验的工作内容大致有3类,衡量起质量的技术指标不完全相同。 第一类是检出细菌的实验,包括标本直接涂片检查和细菌分离培养。现代的细菌感染,混合菌较常见,一份标本中,会有2种以上细菌存在。无论标本直接涂片还是分离培养,检验结果必须如实反映感染病灶中细菌的真实情况。这类实验的质量,应该用细菌检出率或细菌分离率来衡量。 第二类是鉴定细菌的实验。通过一系列生理生化及形态学、血清学的手段来鉴定病原菌。对分离到的病原菌都做出准确的鉴定,是反映细菌事工作质量的一个重要方面。 第三类是药敏实验。有稀释法和纸片法,前者是半定量的实验,可以用准确度和精密度来衡量,后者以敏感或耐药的形式报告,

属于定性的实验,但实验过程中测量抑菌环是定量的指标。也应以准确度和精确度衡量。 所以实验室人员必须清楚认识到以上这一点,在实验室的设计和管理方面就应该主动设置误差检测系统,实验中一旦出现误差及时发出警报,查明原因及时纠正。 2、室内质量控制 2.1在职人员 2.1.1须受过细菌学检验的专门基础教育以及相关的生物交全防护知识,并以细菌检验为专业,及时终结并积累工作经验。 2.1.2作人员必须具有严谨的工作态度,技术操作须完全遵守操作规程,并直接参与质量控制工作。 2.1.3工作人员应不断加强自身的业务学习,及时了解本领域的新进展,将所掌握的新知识应用到实际工作中。 2.1.4实验室管理人员应注意利用一切机会培养技术人员,积极参加国际、国内学术会议、专业培训班,获取新信息。因为细菌学检验,投资人员培训远比投资与仪器设备更重要。 2.2操作手册及参考书

临床检验技师-微生物检验(2019)练习第十七章_厌氧性细菌及检验

2019 第十七章 厌氧性细菌及检验 一、 A1 1、破伤风杆菌血平板 37℃培养 48h A 、凸起、灰白、半透明、边缘不整齐 B 、凸起、灰白、不透明、边缘不整齐 C 、扁平、金黄色、半透明、边缘不整齐 D 、扁平、灰白、半透明、边缘不整齐 E 、扁平、灰白、半透明、边缘整齐 2、破伤风杆菌形态与染色叙述正确的是 A 、细长、周鞭毛（ +）、荚膜（ - ） B 、汤匙状、周鞭毛（ +）、荚膜（ - ） C 、细长、周鞭毛（ - ）、荚膜（ - ） D 、细长、周鞭毛（ +）、荚膜（ +） E 、细长、周鞭毛（ - ）、荚膜（ +） 3、对于厌氧菌叙述正确的是 A 、人体正常菌群的组成部分，主要聚居肠道，达到 1012 个粪便 B 、人体致病菌，主要集聚肠道，达到 1012 个粪便 C 、人体体表菌群的主要部分，达到 1012 个粪便 D 、人体体表菌群的主要组成部分，达到 1042 个粪便 E 、人体正常菌群的组成部分，主要聚居肠道，达到 1042 个粪便 4、厌氧菌中耐氧菌 A 、在新鲜固体培养基表面不生长、暴露数小时仍不死亡 B 、在新鲜固体培养基表面生长、暴露 1h 后死亡 C 、在新鲜固体培养基表面生长、暴露 2h 后不死亡 D 、在新鲜固体培养基表面生长、暴露数小时仍不死亡 E 、在新鲜固体培养基表面生长、暴露 3h 后不死亡 5、专性厌氧菌中极度厌氧菌 A 、氧分压＜ 5%，空气暴露 10min 死亡 B 、氧分压＜ 0.5%，空气暴露 10min 死亡 C 、氧分压＜ 3%，空气暴露 10min 死亡 D 、氧分压＜ 0.5%，空气暴露 1min 死亡 E 、氧分压＜ 5%，空气暴露 30min 死亡 6、可做厌氧菌培养的标本为 A 、气管抽取物 B 、前列腺分泌物 C 、阴道分泌物 D 、胸腔积液 E 、中段尿

第十四章 厌氧性细菌

第十四章厌氧性细菌 厌氧性细菌(Anaerobic bacteria)是一大群种类繁多、专性厌氧，必须在无氧环境中才能生长的细菌。 厌氧菌广泛分布于自然界和人及动物的体内。无芽胞厌氧菌主要存在于人体及动物体内，特别是肠道、口腔、止呼吸道和泌尿道等处，与需氧菌和兼性厌氧菌共同构成机体的正常菌群。在正常菌群中厌氧菌通常占有绝对的优势。正常情况下，菌群保护相对平衡，如长期应用广谱抗生素、激素、免疫抑制剂等，发生菌群失调，或机体抵抗力减退，则可导致内源性厌氧菌感染。 目前已知的重要厌氧菌见表。 表14-1 重要的厌氧菌 一、芽胞菌 梭状芽胞菌属（Clostridium） 二、无芽胞菌 （一）革兰氏阳性球菌 1 消化球菌属（Peptococcus） 2 消化链球菌属（Peptostreptococcus） （二）革兰氏阴性球菌 韦荣氏球菌属（Veillonella） （三）革兰氏阴性无芽胞杆菌 1 类杆菌属（Bacteroides） 2 梭形杆菌属（Fusobacterium） （四）革兰氏阳性无芽胞杆菌 1 双歧杆菌属（Bifidobacterium） 2 乳杆菌属（Lactobacillus） 3 真杆菌属（Eubacteriun） 4 丙酸杆菌属（Propionibacterium）

第一节厌氧芽胞杆菌 厌氧芽胞杆菌只有一个属，称梭状芽胞杆菌属（Clostridium），简称梭菌属，革兰氏染色阳性，都能产生芽胞，芽胞直径大多比菌体宽，使菌体膨大成梭形，故得名。芽胞的形状和位置在鉴别上有意义。 大多数须在严格厌氧条件下才能生长，少数可在微氧环境中繁殖。 一、破伤风梭菌 破伤风梭菌（Clostridium tetani）是引导起破伤风的病原菌，大量存在于人和动物肠道中，由粪便污染土壤，经伤口感染引起疾病。 （一）生物学性状 破伤风梭菌菌体细长，长4～8um ，宽0.3～ 0.5um ，周身鞭毛，芽胞呈圆形，位于菌体顶端，直径比菌体宽大，似鼓槌状，是本菌形态上的特征。繁殖体为革兰氏阳性，带上芽胞的菌体易转为革兰氏阴性。破伤风梭菌为专性厌氧菌，最适生长温度为37℃pH7.0～7.5，营养要求不高，在普通琼脂平板上培养24～48小时后，可形成直径1mm 以上不规则的菌落，中心紧密，周边疏松，似羽毛状菌落，易在培养基表面迁徒扩散。在血液琼脂平板上有明显溶血环，在疱肉培养基中培养，肉汤浑浊，肉渣部分被消化，微变黑，产生气体，生成甲基硫醇（有腐败臭味）及硫化氢。一般不发酵糖类，能液化明胶，产生硫化氢，形成吲哚，不能还原硝酸盐为亚硝酸盐。对蛋白质有微弱消化作用。本菌繁殖体抵抗力与其他细菌相似，但芽胞抵抗力强大。在土壤中可存活数十年，能耐煮沸40～50分钟。对青霉素敏感，磺胺类有抑菌作用。 （二）致病性 破伤风梭菌芽胞广泛分布于自然界中可由伤口侵入人体，发芽繁殖而致病，但破伤风梭菌是厌氧菌，在一般伤口中不能生长，伤口的厌氧环境是破伤风梭菌感染的重要条件。窄而深的伤口（如剌伤），有泥土或异物污染，或大面积创伤、烧伤、坏死组织多，局部组织缺血或同时有需氧菌或兼性厌氧菌混合感染，均易造成厌氧环境，局部氧化还原电势降低。有利于破伤风杆菌生长。破伤风梭菌能产生强烈的外毒素，即破伤风痉挛毒素（Tetanospasmin）或称神经毒素(Neurotoxin)。破伤风毒痉挛毒素是一种神经毒素，为蛋白质，由十余种氨基酸组成不耐热，可被肠道蛋白酶破坏，故口服毒素不起作用。在菌体内的痉挛毒素是单一和一条多肽链，分子量15万。破伤风毒素的毒性非常强烈，仅次于肉毒毒素。破伤风梭菌没有侵袭力，只在污染的局部组织中生长繁殖，一般不入血流。当局部产生破伤风痉挛毒素后，引起全身横纹肌痉挛。毒素在局部产生后，通过运动终板吸收，沿神经纤维间隙至脊髓前角神经细胞，上达脑干，也可经淋巴吸收，通过血流到达中枢神经。毒素能与神经组织中的神经节工苷脂结合，封闭了脊髓抑制性突触末端，阻止释放抑制冲动的传递介质甘氨酸和γ氨基丁酸，从而破坏上下神经原之间的正常抑制性冲动的传递，导致超反射反应（兴奋性异常增高）和横纹肌痉挛（图14-1）。

细菌性食物中毒的微生物学检验分析

细菌性食物中毒的微生物学检验分析 发表时间：2019-04-28T09:20:29.673Z 来源：《基层建设》2019年第6期作者：包睿媛[导读] 摘要：食物中毒发生后，采样是否及时和完整，是否有代表性，是影响食物中毒实验室诊断结果的重要因素，而实验室能力和效率是影响食物中毒实验室诊断结果的关键。 兴安盟食品药品检验检测中心内蒙古兴安盟乌兰浩特市 137400摘要：食物中毒发生后，采样是否及时和完整，是否有代表性，是影响食物中毒实验室诊断结果的重要因素，而实验室能力和效率是影响食物中毒实验室诊断结果的关键。为了提高食物中毒原因的查明率，控制食物中毒的发生，保证食品卫生质量，保障人民身体健康，必须加强食品卫生监督，采取有效控制措施。基于此，本文对细菌性食物中毒的微生物学检验进行分析。 关键词：细菌性食物中毒；微生物学检验；研究分析随着我国社会的快速发展，人们对于食品安全方面的问题已经越来越重视。但是在发展的过程中，依旧存在着许多食物中毒现象的出现，严重影响着普通大众的身体健康。食物中毒现象的出现，是由于人们食用了本身携带致病性病原菌的食物，从而引起的一种机体中毒事件。作为一种广泛性、迅速性的现象，如果人们在食用食物的过程中出现了食物中毒的情况，就会导致患者出现呕吐、恶心等不良反应的出现。如果患者出现食物中毒之后，没有进行及时有效的治疗，将会导致患者的身体出现脱水症状，并且随着中毒程度的逐渐深入，脱水症状将会变得越来越严重，直至威胁患者的生命安全。因此，为了帮助人们减少食物中毒对于身体健康的影响，必须做好微生物检验的工作，以帮助患者寻找出出现食物中毒的原因，从而对症下药，更好的帮助患者进行疾病的治疗。而进行的微生物检测工作，其最主要的关键因素，就是必须进行大量的检测工作，以保证取样的普遍性。简而言之，就是检测人员需要进行检测的相关物品要越多越好，只有这样，能够覆盖所有能引起食物中毒的病菌和因素，不能放过任何可能。 1研究资料与方法 1.1研究资料 选取2015年1月至2018年1月期间我中心参与处置的细菌性食物中毒（23例）患者为本次研究对象，学历分布：10例患者为本科及以上学历，18例患者为大专学历，13例患者为高中学历，21例患者为初中及以下学历。食物中毒的时间分布：12例患者于第一季度发病，16例患者于第二季度发病，24例患者于第三季度发病，10例患者于第四季度发病，其中男性患者以及女性患者的数量分别为35例和27例，年龄最大值以及最小值分别为67岁和15岁，均值是（31.52±2.15）岁。 1.2检验方法 1. 2.1建立应急预案，准备各项材料应预先对实验室的食物中毒检验员进行建立，准备采集样品所需的材料，对常用的培养基、生化管及常用的血清准备齐全。 1.2.2现场调查患者应该对《食物中毒个案调查登记表》里的各项内容进行填写，对于发病较早或较为严重的患者作为重点研究对象，观察其是否出现发热、恶心、呕吐等症状；对于同一时间就餐但未中毒的患者也进行调查，进而排除别的中毒原因；对患者的治疗方法进行详细询问，注意治疗结果是否出现异常。 1.2.3样品采集找到导致食物中毒的食物，对中毒现场进行检查，评价是否还有残余的中毒食物，并进行采样；其中液体样品进行涂片，固体样品用生理盐水稀释后涂片，进行染色；在镜下观察染色情况或动力情况，判断其属于哪种细菌。 1.2.4增菌增菌可将样品中菌量较少的病原菌检出，也可以使服药患者样品中被抗生素抑制的细菌获得复苏和达到增加菌量的作用。在处置细菌性食物中毒实际工作中，肛拭子稀释液可以略过增菌而直接涂抹平板，以缩短检验周期。呕吐物、剩余食品病原菌相对较少，其增菌后再检验对提高检出率是有必要的。 1.2.5优势菌的观察对采集的液体样品直接涂片、固体样品用生理盐水磨匀后涂片，进行革兰染色。镜下观察染色反应、形态一致的，数量上占优势的细菌；同时暗视野下观察动力。根据形态、染色反应、动力可初步判断属哪类细菌，对下一步确定检验思路具有很好的指导意义。粪便是细菌性食物中毒检验的理想样本，由于病原菌含量多，直接选用选择性培养基也可较易分离到病原菌，在次日的第一时间观察结果。呕吐物、剩余食品杂菌含量多，病原菌菌落在平板上相对较少，可结合流行病学调查结果和粪便培养结果，确定可疑典型菌落。 生化试验传统的生化鉴定采用双歧索引法，该法较烦琐、检测周期长，不能满足处置突发事件的“应急”需要。现多采用数码法，在细菌性食物中毒中常用的有肠杆菌科细菌生化编码鉴定系统、弧菌科细菌生化编码鉴定系统、API细菌鉴定系统和rRNA第Ⅰ超科细菌数值编码鉴定系统（Rr1-11）等。 1.2.6血清学凝集试验在血清学凝集实验中，确保血清的有效性十分关键，一旦效价不佳或者吸收不充分便会严重影响检验结果出错。如果血清不凝或是凝集的结果不符合判定的应符合某一细菌的形态、培养、生化时，这时不可轻易对结论进行否定，而是应通过其它批号或其它生物制品所的血清进行对照。值得一提的是，在鉴定副溶血弧菌及志贺氏菌的过程中应该对K抗原的阻断凝集予以特别关注，除了比较熟悉的K抗原与Vi抗原之外，M抗原和O5抗原在沙门氏菌的鉴定中具有阻断凝集作用。 1.3统计分析 对细菌性食物中毒发生的致病菌进行统计分析，分析其构成比，数据应用SPSS13.0处理分析。 1.4统计学方法 本次研究中产生的所有数据具有由专人收集并于SPSS18.00统计学软件中录入、统计和分析，计量资料借助均数加减平方差表述，并利用t值对其进行检验，计数资料借助率（%）表述，并利用值进行检验，最终检验结果显示p。 2结果 本次研究中的23例细菌性食物中毒患者中，由蜡样芽胞杆菌引起的患者有10例，所占比例为16.13%，由志贺菌引起的患者有3例，所占比例是4.84%，由变形杆菌引起的患者有5例，所占比例是8.06%，由金黄色葡萄球菌引起患者有6例，所占比例是9.68%，由沙门氏菌引起的患者有5例，所占比例是8.06%，由副溶血性弧菌引起的患者有15例，所占比例是24.19%，由致病性大肠杆菌引起的患者有7例，所占比例是11.29%，其他11例患者引起原因尚不明确。通过检验可知，副溶血性弧菌是导致食物中毒的首要因素。 3讨论

第十七章 厌氧性细菌

第十七章厌氧性细菌 一、名词解释 l、厌氧性细菌2、梭状芽胞杆菌属3、汹涌发酵4、肉毒毒素5、痉挛毒素6、TA T 二、填空题 l、无芽胞厌氧菌的数量在肠道内比需氧菌──。 2、厌氧芽胞杆菌只有一个属，即──。革兰染色为──菌。主要包括──、──、──。 3、破伤风梭菌主要存在于──、──，以──形式而长期存活。 4、破伤风梭菌的芽胞呈圆形，位于菌体──，其直径──菌体宽度。 5、破伤风梭菌主要经──感染，致病物质主要是──。 6、预防破伤风，可接种──进行人工主动免疫或接种──进行紧急预防。 7、破伤风的特异性治疗是应用──，注射前必须作──试验。 8、产气荚膜梭菌的芽胞呈──形，位于菌体的──。 9、在牛乳培养基中生长繁殖的是──菌，可以产生为该菌特点之一的──现象。 10、气性坏疽的主要病原菌是──，其产生的α毒素是一种──酶。 11、肉毒梭菌的致病物质是──，可导致肌肉──型麻痹。 12、目前已知毒性最强的生物毒素是──，其毒性比氰化钾还强──倍。 13、肉毒毒素引起──，主要是出现以──系统为主的症状。 14、无芽胞厌氧菌大多数是人体的──，多引起──感染。 15、临床无芽胞厌氧菌感染，多伴有──菌、──菌和──菌的混合感染。 16、类杆菌属细菌是一类──菌，革兰染色为──性。 17、与人类疾病有关的类杆菌主要有──和──。 18、无芽胞厌氧菌引起内源性感染的条件是──、──、──、──。 三、最佳选择题 l、培养时需厌氧环境的细菌是( ) A．绿脓杆菌B．鼠疫杆菌C．变形杆菌D．伤寒沙门菌E．脆弱类杆菌 2、下列各组中均属于专性厌氧菌的是< ) A．破伤风梭菌、肉毒梭菌、结核分枝杆菌B．产气荚膜梭菌、乳酸杆菌、流感杆菌C．肉毒梭菌、变形杆菌、消化链球菌D．破伤风梭菌、变形杆菌、消化链球菌 E．肉毒梭菌、破伤风梭菌、脆弱类肝菌 3、在无芽胞厌氧菌感染中，最常见的是( ) A．脆弱类杆菌B．消化链球菌C．丙酸杆菌D．梭状杆菌E．双歧杆菌 4、在人体肠道正常菌群中，占绝对优势的是( ) A．链球菌B．大肠杆菌C．变形杆菌D．白色念珠菌E．无芽胞厌氧菌 5、无芽胞厌氧菌引起的感染不包括( ) A．脓肿B．败血症C．组织坏死D．食物中毒E．局部炎症 6、无芽胞厌氧菌正常寄居的部位不包括( ) A．阴道B．尿道C．肠道D．腹腔E．上呼吸道 7、引起牙周脓肿常见的病原菌是( ) A．甲型溶血性链球菌B．表皮葡萄球菌C消化链球菌 D．白色念珠菌E．绿脓杆菌 8、关于破伤风梭菌的叙述，其正确的是( ) A．属于兼性厌氧菌B．为革兰阴性杆菌C．外毒素致病 D．可以引起败血症E．可以引起骨骼肌驰缓性麻痹

临床医学检验技术(中级)-微生物和微生物学检验(B1型题)_0

临床医学检验技术（中级)-微生物和微生物学检验 (B1型题) 1、不会通过母婴途径传播的RNA病毒是 A.HAV B.HSV C.HCMV D.HIV E.HPV 2、通过性接触传播的RNA病毒是 A.HAV B.HSV C.HCMV D.HIV E.HPV 3、接种左旋多巴-枸橼酸铁和咖啡酸培养基，新型隐球菌呈棕黑色菌落的是 A.芽管形成试验 B.厚壁孢子形成试验 C.酚氧化酶试验

D.尿素酶试验 E.毛发穿孔试验 4、假丝酵母菌属中仅白假丝酵母菌阳性的试验是 A.芽管形成试验 B.厚壁孢子形成试验 C.酚氧化酶试验 D.尿素酶试验 E.毛发穿孔试验 5、医院感染最重要的感染源为 A.患者 B.医院工作人员 C.探视者 D.陪同人员 E.未彻底消毒灭菌的血液制品 6、可作为共同传播媒介物引起医院感染的为 A.患者 B.医院工作人员 C.探视者 D.陪同人员

E.未彻底消毒灭菌的血液制品 7、不属于钝化酶的是 A.乙酰转移酶 B.核苷转移酶 C.磷酸转移酶 D.红霉素酶 E.CTX-M型酶 8、细菌对氯霉素的耐药机制为 A.乙酰转移酶 B.核苷转移酶 C.磷酸转移酶 D.红霉素酶 E.CTX-M型酶 9、具有高度变异性的肝炎病毒是 A.HAV B.HBV C.HCV D.HDV E.HEV

10、可形成包涵体的肝炎病毒是 A.HAV B.HBV C.HCV D.HDV E.HEV 11、耐碱不耐酸的细菌是 A.结核分枝杆菌 B.痢疾志贺菌 C.伤寒沙门菌 D.霍乱弧菌 E.脑膜炎奈瑟菌 12、细胞壁含脂类最高的细菌是 A.结核分枝杆菌 B.痢疾志贺菌 C.伤寒沙门菌 D.霍乱弧菌 E.脑膜炎奈瑟菌

医学检验-微生物-厌氧性细菌测试题

第11章厌氧性细菌测试题 一.名词解释 1.汹涌发酵:产气荚膜梭菌在牛乳培养基中生长时发酵乳糖产酸,使酪蛋白凝固,同时产生大量气体将凝固的酪蛋白冲碎,并将封闭的凡士林冲至试管口的现象. 2.破伤风抗毒素（TAT）:可中和破伤风痉挛毒素的抗血清.主要用于破伤风感染的治疗和紧急预防. 3.厌氧性细菌:是一类必须在无氧或氧化还原电势低的环境中才能生长的细菌. 主要包括:G+芽孢梭菌、G+无芽孢杆菌、G-无芽孢杆菌、G+球菌、G-球菌。 二.填空 1.破伤风杆菌是机体正常菌群中的一个组成部分，主要寄生在人体的 部位。 2.破伤风杆菌的芽胞位于菌体的 部位，使菌体呈状。3.破伤风类毒素是破伤风外毒素经 处理后，消失而 完整的人工主动免疫制剂。 4.破伤风的治疗应给予注射 中和游离的毒素以及大剂量 杀伤繁殖体的破伤风杆菌。 5.破伤风痉挛毒素作用部位 是，作用机理 是。 6.破伤风杆菌可产生 和两种毒素。 7.注射破伤风类毒素进行预防接种，主要对象是儿童、 和。 8.DPT三联疫苗是由、和三种成分组成。9.肉毒杆菌主要通过感染，引起以为主要症状的肉毒中毒。 10.肉毒杆菌的芽胞位于菌体的 部位，使菌体形成状。 11.产气荚膜杆菌在血平板上形成 溶血环，在牛乳培养基中出现 现象。 12.产气荚膜杆菌的芽胞位于菌体的部位，比菌体。1.肠道。 2.顶端，鼓槌。 3.3%甲醛，毒性，抗原性。 4. 破伤风抗毒素，青霉素。 5.脊髓前角，封闭抑制性神经介质释放。 6.α溶血素，破伤风痉挛毒素。 7.军人和极易受外伤人员。 8.白喉类毒素、百日咳死疫苗和破伤风类毒素。 9.消化道，肌肉麻痹。 10.次极端，网球拍。 11.双，汹涌发酵。 12.次极端，小。

基层疾控中心细菌性食物中毒检验探讨

基层疾控中心细菌性食物中毒检验探讨 目的对基层疾控中心细菌性食物中毒检验方法进行分析，为后期检验奠定理论基础。方法该次研究选择2016年2月—2017年1月收治的食物中毒100例患者作为研究对象，对其临床资料采取回顾性分析。结果经研究，100例食物中毒患者中，其致病菌以革兰阳性菌、革兰阴性菌、真菌感染为主所，占据的构成比分别是34.0%、22.0%、20.0%，而表皮葡萄菌、不动杆菌所占据的构成比比较小，检出率较低，分别是4.0%、2.0%。结论食物中毒对人们的身体健康造成重要影响，其中细菌性食物中毒的主要致病菌包括革兰阳性菌、革兰阴性菌与真菌，为缓解食物中毒现象，基层疾控中心需要在日常工作中积极做好采样与检验工作，提高检出率，减少食物中毒的发生与发展。 标签：基层疾控中心；细菌性；食物中毒 [Abstract] Objective To analyze the bacterial food poisoning in the primary disease control center and lay theoretical basis for the late test. Methods 100 cases of patients with food poisoning admitted and treated in our hospital from February 2016 to January 2017 were selected and the clinical data were retrospectively analyzed. Results After research，of 100 cases of food poisoning patients，the main pathogenic bacteria were gram positive bacteria，gram negative bacteria，fungal infections，respectively accounting for 34.0%，22.0%，20.0%，and the ratio of staphylococcus and Acinetobacter was lower，and the test rate was lower，respectively 4.0% and 2.0%. Conclusion The food poisoning has an important effect on the physical health of people，and the main pathogenic bacteria are gram positive bacteria，gram negative bacterial and fungal infections，in order to relieve the food poisoning，the primary disease control center needs to do a good job in the sampling and test work in the daily work thus improving the test rate and reducing the occurrence and development of food poisoning. [Key words] Primary disease control center；Bacterial；Food poisoning 食物中毒是在生活中比較常見的公共卫生突发事件，其种类丰富，包括化学污染性食物中毒、动植物毒素食物中毒、细菌性食物中毒，最为常见的便是细菌性食物中毒。根据不完全数据统计[1]，在近几年内发生食物中毒时间多达几百起，其中细菌性食物中毒的发生率最高，依据属地管理原则，食物中毒检验负责单位为基层疾控中心，但是因检测过程中受到诸多因素的影响，检测周期较长，无法满足居民对公共卫生服务的需求。鉴于此，该次研究选择100例中毒患者，对其加以检验，了解细菌性中毒的主要情况，为日后细菌性食物中毒预防与控制尊定基础与保障，现报道如下。 1 资料与方法 1.1 一般资料

疾控中心细菌性食物中毒检验探讨

疾控中心细菌性食物中毒检验探讨 发表时间：2018-07-17T15:56:32.107Z 来源：《健康世界》2018年10期作者：解恩斯古丽•阿汗 [导读] 食物中毒为公共卫生突发事件之一，通常食物中毒中多见细菌性食物中毒。 塔城地区疾病预防控制中心新疆塔城 834700 摘要：食物中毒为公共卫生突发事件之一，通常食物中毒中多见细菌性食物中毒。并有数据调查结果显示：我国10年间共发生食源性疾病爆发事件共5770件，其中超过38.5%的为微生物食源性疾病事件，而多种细菌性食物中毒事件中超过31.1%的为副溶血性弧菌。参照我国属地管理原则可提示，疾病中心需高度重视食物中毒检验工作，其为各项检验工作准备、实施等方面工作的主要机构，并承担着主要责任。故本文对疾控中心细菌性食物中毒检验相关工作作探讨，以期为疾控中心公共卫生服务工作提供参考。 关键词：疾控中心；细菌；食物中毒 既往疾控中心均以常规培养方法展开细菌性食物中毒检验，通常其检测周期会持续较长时间，故而对居民公共卫生起不到保护作用。随着现代化社会经济的飞速发展，人们日常生活非常丰富，细菌性食物中毒事件亦是屡见不鲜。故提示居民对公共卫生服务工作的需求大幅度提高，并提出了更高的质量要求。我疾控中心食物中毒检查结果提示大肠菌群及菌落总是阳性，多见沙门氏菌、志贺氏菌、金黄色葡萄球菌、副溶血性弧菌、诺若病毒等致病菌，但亦可见致泻大肠埃希氏菌、单核细胞增生李斯特菌、蜡样芽胞杆菌等致病菌，可见疾控中心细菌性食物中毒检验工作需全方位加强，故本文对疾控中心细菌性食物中毒检验情况作下述探讨。 1、建立预案实验室 疾控中心需依据实际情况建立完善的中心食物中毒检验制度，并配备充足的材料、采集多种样品。再制定严格的规定条例，促使仪器设备检查以及培养基配置与储备、质量控制、人员培训、生物安全防护等方面工作得以严格规范，并使相关工作人员责任明确。 2、物资、人员的准备 依据当地早期食物中毒病原菌出现频率准备适当的材料，但需注意各种不常用材料的准备。根据疾病中心工作人员的学历情况，组织其参与相关主题培训，比如食物中毒检验方面知识的学习，务必强调工作人员全面掌握科学规范的检验方法，对其进行思想教育，以提高其不断汲取知识的意识，促使其积极主动的学习各种新型食物中毒病原菌方面的知识，培养并提高其处理食源性爆发事件的能力[1]。 3、现场调查检验 现场调查检验时，疾控中心需依据实际情况，选择中毒病菌检验能力强、经验丰富的工作人员，并通过了各种新型检验方法、手段培训的工作人员进行现场调查检验工作。并在实验室中准备各种配套仪器以及培养基、检验试剂等，再根据实情作样本细菌检验方案，检验工作中严格落实方案中的各项内容，确保患者各项检验工作有序展开。流性病学调查人员及检验人员要注重于患者中毒所在位置深入调查，全方位掌握患者中毒的实际情况。密切观察并详细分析患者的中毒症状，并据此于现场做调查，再对相关范围内的食品加工环境质量做调查。 4、样品的采集 检查患者中毒症状时，需对剩余食品、呕吐物以及肛拭子等情况详细采集，如果现场未见剩余食物/呕吐物，于冰箱内壁与用具/餐具等器具上做样品采集。并采集患者的血液样本，检测结果提示为阴性时，便做多部位多次采样。需注意的是，采样时务必确保无菌操作，避免检测结果被杂菌影响[2]。 5、检验方法 检验方法需科学有效，其对患者致病菌确定尤为关键。疾控中心中的工作人员需全面掌握多种检验方法，比如微生物全自动生化鉴定系统和荧光定量PCR等检验方法的运用，要不断加强学习常见流行病致病机制以及相应的控制治疗方法，确保细菌性食物中毒事件能够得到及时有效的控制，并以所学的各种知识进行样本检验，保证检测结果的准确性。本次对疾控中心细菌性食物中毒检验作下述分析： 5.1增菌 将采集到的剩余食物或者呕吐物等样本置于培养基中培养，再将样品涂擦于平板上；肛拭子通常是以稀释液增菌后涂擦在平板上。 5.2优势菌观察 液体样本通常是直接涂擦在涂片上，而固体样本通常是用生理盐水膜匀之后再涂片，待准备好后行革兰染色，用培养基培养后以镜下观察细菌情况，参照涂片上的染色反应及数量、形态等方面情况做优势菌判断，再根据所获结果初步判断细菌的种类。 5.3分离培养 参照国家标准作细菌分离培养，比如常用GB/T4789-2017作参照，如果所获分离效果并不明显，则可选择血浆凝固酶平板作目标菌分离[3]。 5.4生化试验 通常生化试验选择数码法作细菌检验，一般是弧菌科细菌生化编码鉴定系统以及肠杆菌科细菌生化编码鉴定系统，或者是rRNA第I超科细菌数值编码鉴定系统与API细菌鉴定系统等，实际应用中需依据实际情况进行选择，保证各项试验科学有效。 5.5血清学凝集试验 样品常规血清凝集试验时，需高度重视生化反应以及培养特征、形态及相关细菌的相符度，如果血清凝集结果与相关细菌特征不符合时，则可选择使用不同生物制品/不同批号血清作对比[4]。 结论 目前我国对社会细菌性食物中毒标本检测并无统一标准，通常均是疾控中心依患者自身流行病学特征以及临床症状与表现等方面内容选择并确定检测项目。但细菌性食物中毒检测结果与实验室检测、现场检测、流行病学分析等方面内容息息相关，既往其检测速度慢、检出率低，所获结果对细菌性食物中毒事件防控工作并无较大意义，并会影响患者的临床诊疗。故此本文对建立预案实验室、物资与人员的准备、现场调查检验、样品的采集、检验方法等方面内容作上述探讨，以期为疾控中心细菌性食物中毒检验工作提供参考。

实验十二 厌氧性细菌(1稿)

实验十二厌氧性细菌（厌氧培养方法） 厌氧性细菌（Anaerobicbacteria）是一大群必须在无氧或低氧环境中才能生长繁殖的细菌；一般情况下，这类细菌在无氧条件下比在有氧环境中生长好，不能在空气（氧气浓度大于18%）和（或）二氧化碳浓度小于10%以下的固体培养基表面生长。这类细菌缺乏完整的代谢酶体系，其能量代谢多以无氧发酵的方式进行。它能引起人体不同部位的感染，包括阑尾炎、胆囊炎、中耳炎、口腔感染、心内膜炎、子宫内膜炎、脑脓肿、心肌坏死、骨髓炎、腹膜炎、脓胸、输卵管炎、脓毒性关节炎、肝脓肿、鼻窦炎、肠道手术或创伤后伤口感染、盆腔炎以及菌血症等。（一）无芽胞厌氧菌主要种类及生物学性状 无芽胞厌氧菌共有23个属，与人类疾病相关的主要有10个属。 1.革兰阴性厌氧杆菌有8个属，类杆菌属中的脆弱类杆菌最为重要。形态呈多形性，有荚膜。除类杆菌在培养基上生长迅速外，其余均生长缓慢。 2.革兰阴性厌氧菌有3个属，其中以韦荣菌属最重要。为咽喉部主要厌氧菌，但在临床厌氧菌分离标本中，分离率小于1%，且为混合感染菌之一。其他革兰阴性球菌极少分离到。 3.革兰阳性厌氧菌有5个属，其中有临床意义的是消化链球菌属，主要寄居在阴道。本菌属细菌生长缓慢，培养需5～7天。 4.革兰阳性厌氧杆菌有7个属，其中以下列3个属为主： （1）丙酸杆菌属：小杆菌，无鞭毛，能在普通培养基上生长，需要2～5天，与人类有关的有3个种，以痤疮丙酸杆菌最为常见。 （2）双歧杆菌：呈多形性，有分枝，无动力，严格厌氧，耐酸。29个种中有10个种与人类有关，其中只有齿双歧杆菌与龋齿和牙周炎有关。其他种极少从临床标本中分离到。 （3）优杆菌属：单一形态或多形态，动力不定，严格厌氧，生化反应活泼，生长缓慢，常需培养7天，最常见的是迟钝优杆菌。 （二）微生物学检查 要从感染灶深部采取标本。最好是切取感染灶组织或活检标本，立即送检医.学教育网搜集整理。 1.直接涂片镜检：将采集的标本直接涂片染色镜检，观察细菌形态、染色及菌量，为进一步培养以及初步诊断提供依据。 2.分离培养与鉴定：分离培养是鉴定无芽胞厌氧菌感染的关键步骤。标本应立即接种相应的培养基，最常用的培养基是以牛心脑浸液为基础的血平板。置37℃厌氧培养2～3天，如无菌生长，继续培养1周。如有菌生长则进一步利用有氧和无氧环境分别传代培养，证实为专性厌氧菌后，再经生化反应进行鉴定。 厌氧菌广泛分布于自然界以及人和动物的体内，具有以下特点： 1、种类繁多，分类方法多。 （1）按照形态厌氧性细菌分为芽胞厌氧菌和无芽胞厌氧菌两大类。芽胞厌氧菌只有一个菌属，即梭状芽胞杆菌属，共有100多个种；无芽胞厌氧菌有40多个菌属，300多个种和亚种。 （2）根据对O?的耐受程度，可将厌氧菌分为3大类：（1）对氧极端敏感的厌氧菌：代表菌种为月形单胞菌。这类细菌对厌氧条件要求很高，在空气中暴露10min即死亡，临床上很难分离出；（2）中度厌氧菌：代表菌种为脆弱拟杆菌、产气荚膜梭菌等临床分离常见的厌氧菌。它们在空气中暴露60～90min或在脓汁抽出72h后仍然能分离出来；（3）耐氧厌氧菌：代表菌种为溶组织梭菌。这类细菌不能利用氧，在无氧条件下生长好，而在有氧条件下生长不佳。也有按照其对氧的耐受的程度不同，可分为专性厌氧菌和兼性厌氧菌等。专性厌氧菌（Obligate anaerobe），是指在无氧的环境中才能生长繁殖的细菌。此类细菌缺乏完善的呼吸酶系统，只能进行无氧发酵，不但不能利用分子氧，而且游离氧对其还有毒性作用。如破伤风杆菌、肉毒杆菌、产生荚膜杆菌等。只能在没有游离氧存在的环境中生存的微生物。甲烷菌即属此类细菌。人们利用甲烷菌等产生沼气，利用厌氧菌处理各种有机废物和废水。